Фармакогностическое изучение полыни австрийской как источника фармакологически активных сесквитерпеновых лактонов

Коновалов, Юрий Борисович

Диссертации по фармакологии → Фармацевтическая химия и фармакогнозия

Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Фармакогностическое изучение полыни австрийской как источника фармакологически активных сесквитерпеновых лактонов

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Коновалов, Юрий Борисович 0 г.

Ученая степень: кандидата фармацевтических наук

ВАК РФ: 15.00.02

Автореферат диссертации по фармакологии на тему Фармакогностическое изучение полыни австрийской как источника фармакологически активных сесквитерпеновых лактонов

КОНОВАЛОВ ЮРИЙ БОРИСОВИЧ

ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПОЛЫНИ АВСТРИЙСКОЙ КАК ИСТОЧНИКА ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СЕСКВИТЕРПЕНОВЫХЛАКТОНОВ

15.00.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

003068524

КОНОВАЛОВ ЮРИЙ БОРИСОВИЧ

ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПОЛЫНИ АВСТРИЙСКОЙ КАК ИСТО ЧНИКА ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СЕСКВИТЕРПЕНОВЫХЛАКТОНОВ

15.00.02 — фармацевтическая химия, фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Пятигорская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Защита состоится « ^¿¿д^Р 2007 г. в ^-"часов на заседании

Диссертационного совета Д 208.069.01 при ГОУ ВПО «Пятигорская ГФА Росз-драва» (357532, Ставропольский край, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Пятигорская ГФА Росздрава».

Автореферат разослан «_»_2007 г.

Научный руководитель:

доктор фармацевтических наук, профессор Коновалов Дмитрий Алексеевич кандидат фармацевтических наук, доцент Кодониди Иван Панайотович доктор химических наук, профессор Маршалкин Михаил Федорович ГОУ ВПО Самарский государственный медицинский университет Росздрава

Официальные оппоненты:

Ведущая организация:

Ученый секретарь

и.о. 1\0МнаИцсв2

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Растительный мир является неиссякаемым источником высокоэффективных лекарственных веществ, сырья для фармацевтической, парфюмерно-косметической, пищевой промышленности. Применение лекарственных препаратов растительного происхождения в современной медицине не только остается стабильным, но и имеет тенденцию к росту номенклатуры Это связано с тем, что многие лекарственные препараты синтетического происхождения оказывают побочное действие на организм, которое возрастает не только по частоте, но и по тяжести проявления в виде аллергических реакций, идиосинкразии и т.п. Поэтому исключительное значение приобретает увеличение арсенала фитопрепаратов, поиск и исследование фармакологической активности биолопгчсски активных соединений малоизученных растений, а также расширение спектра действия лекарственных препаратов растительного происхождения, уже применяемых в медицине.

В последние голы в поисках новых лекарственных веществ исследователи все чаще обращаются к сесквитерпеновым лактонам - обширной группе природных соединений, выделенных из растений, грибов и представителей животного мира. Широкое распространение в растительном мире, высокая биологическая активность, разнообразие видов активности - определяют значимость исследований этого класса природных соединений. На сегодняшний день установлена химическая структура свыше 6000 лактонов. а наибольшее их количество выделено из представителей семейства Asteraceae. Одним из богатых источников этих веществ являются виды рода полынь Из его представителей выделено несколько сотен сесквитерпеновых лактонов. Однако, не все виды полыней исследованы на содержание лактонов, недостаточно изучены их фармакологические свойства.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы является фар-макогностическое изучение полыни австрийской (Artemisia austriaca Jacq.), выделение из ее надземной части, индивидуальных сесквитерпеновых лактонов и изучение их фармакологической активности.

Для реализации поставленных целей необходимо решить следующие задачи:

- провести морфолого-анатомическое изучение полыни австрийской и установить товароведческие показатели сырья;

- провести эколого-фитоценотические исследования, определить ресурсные возможности и запасы в отдельных ценопопуляциях;

- провести интродукционные исследования,

- изучить химический состав и динамику накопления эфирного масла;

- изучить химический состав, динамику накопления, токсичность, биологическую и фармакологическую активность сесквитерпеновых лактонов;

- изучить химический состав основных групп биологически активных соединений (фенольных соединений, аминокислот, витаминов, макро- и микроэлементов).

Научная новизна работы. В результате проведенных исследований описаны отличительные диагностические признаки полыни австрийской, установлены товароведческие показатели сырья. Определены урожайность и запасы полыни австрийской, произрастающей в отдельных ценопопуляциях Ставропольского края и особенности ее интродукции.

Изучен химический состав эфирного масла полыни австрийской. Методом газожидкостной хроматографии с последующим детектированием масс-спектров идентифицировано 22 компонента, ранее не описанных для этого вида. Изучена динамика накопления эфирного масла по основным фазам развития растения.

Из суммы сесквитерпеновых лактонов выделены индивидуальные соединения: аустрицин, гидроксиахиллин. ангидроаустрицин, арборесцин, а-сантонин, р-сантонин, артемин. Установлено их количественное содержание и изучена динамика накопления по фазам развития и органам растения. Артемии из полыни австрийской выделен впервые.

Изучен компонентный состав фенольных соединений полыни австрийской. Впервые методами бумажной и высокоэффективной жидкостной хрома-

тографии идентифицировано и установлено количественное содержание пяти флавоноидов и шести оксикоричных кислот. Впервые в сырье идентифицированы аминокислоты (пролин и кислота аспарагиновая), витамин Е, макро- и микроэлементы.

Осуществлен прогноз фармакологической активности сесквитерпеновых лактонов, кардиотропное действие, цитостатическая, ГАМК-ергическая, противовоспалительная активность подтверждены экспериментально Для эфирного масла установлена выраженная антимикробная (в т.ч противотуберкулезная) активность, для спиртоводных извлечений - антиоксидантная.

Практическая значимость В результате комплексных исследований доказана перспективность полыни австрийской как источника фармакологически активных сесквитерпеновых лактонов и эфирного масла

Установленные для сесквитерпеновых лактонов виды активности (кардиотропное действие, цитостатическая, ГАМК-ергическая. противовоспалительная) позволяют рекомендовать их для дальнейших фармакологических исследований. Широкий спектр антимикробной активности эфирного масла дает основание для его дальнейшего исследования в качестве потенциального антимикробного средства.

В результате проведенных ресурсных исследований определена урожайность конкретных зарослей и возможный ежегодный объем заготовки полыни австрийской в отдельных ценопопуляциях Предгорного и Минераловодского районов Ставропольского края.

Установленные диагностические признаки позволяют отличать полынь австрийскую от других представителей рода Artemisia.

Разработаны методики выделения и количественного определения сесквитерпеновых лактонов из надземной части полыни австрийской.

федры фармакогнозии с курсом ботаники ГОУ ВПО Курского государственного медицинского университета), «Изучение влияния сесквитерпенового лактона аустрицина Fia показатели работы сердца» (акт внедрения от 16.10.06 в НИР кафедры фармакологии ГОУ ВПО Пятигорской государственной фармацевтической академии), «Об изучении биологической активности сесквитерпенового лактона ангидроаустрицина» (акт внедрения от 12.05.06 в учебный процесс и НИР кафедры биохимии ГОУ ВПО Северо-Осетинской государственной медицинской академии).

Связь задач исследования с проблемами фармацевтических паук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследава гельских работ Пятигорской государственной фармацевтической академии (номер государственной регистрации 01200112164).

Апробация работы и публикации. Основные фра! менты диссертационной работы доложены на 61-ой и 62-ой региональных конференциях «Разра-GoiKa, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (11я1и-горск, 2006, 2007), Пятой конференции молодых ученых СОГМА «Молодые ученые - медицине» (Владикавказ, 2006).

По теме диссертации опубликовано 17 научных работ.

Основные положения, выносимые на защиту:

- результаты морфолого-анатомического изучения полыни австрийской и товароведческие характеристики сырья;

- результаты ресурсных и интродукционных исследований полыни австрийской в отдельных ценопоггуляциях,

- результаты изучения химического состава, констант и динамики накопления эфирного масла полыни австрийской;

- результаты изучения состава и изменчивости содержания сесквитерпе-новых лактонов полыни австрийской по органам и фазам развития растения;

- результаты изучения фенольного, аминокислотного, витаминного и элементного составов полыни австрийской;

- результаты прогнозирования фармакологической активности сескви-

терпеновых лактонов полыни австрийской и экспериментальное подтверждение некоторых из них: влияние на показатели работы сердца, цитостатическая, ГАМК-ергическая, противовоспалительная активности

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 170 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы (1 глава), экспериментальной части (3 главы), общих выводов, списка литературы (включающего 179 источников, в том числе 63 иностранных) и приложений, иллюстрирована 45 таблицами и 37 рисунками.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ 1 Морфолого-анатомическое изучение, ресурсные и пнтродукцнонныеисследованип Польши австрийской

Объектом исследования являлась надземная часть полыни австрийской -Artemisia austriaca Jacq., семейство Asteraceae.

При морфолого-анатомическом изучении надземной части полыни австрийской установлено, что для листьев характерны устьица аномоцитного типа. Они чаще встречаются на нижнем эпидермисе, клеточные стенки которого сильно извилисты. Эфирно-масличные железки по типу астровых, довольно крупные, удлиненные, окрашиваются Суданом III в красно-оранжевый цвет Волоски двух типов: одноклеточные и многочисленные Т-образные, состоящие из короткой одноклеточной ножки и извилистой лентовидной клетки с заостренными концами длиной 200-400 микрон. Верхний и нижний эпидермис трубчатого цветка представлен вытянутыми клетками со слегка извилистой клеточной стенкой.

Ближе к основанию цветка обнаружены клетки с липофильным содержимым, дающие положительную реакцию с Суданом III Эфирно-масличные железки обнаруживаются на всей поверхности цветка Проведенное нами исследование показало, что в качестве микроскопических диагностически значимых признаков можно использовав строение Т-образных волосков и клеток эпидермиса (Рисунки 1 и 2).

Рисунок 1 - Верхний эпидермис листа (1 - устьице, 2 - эфирномасличная железка, 3 - Т-образный волосок)

Рисунок 2 - Нижний эпидермис лисга (1 - устьице, 2 - эфирномасличная железка, 3 - Т-образный волосок, 4 — одноклеточный волосок)

Основные товароведческие характеристики надземной части полыни австрийской, определенные по общепринятым для растительного сырья методикам, в процентах, в пересчете на воздушно-сухое сырье, приведены в таблице 1.

Таблица 1 - Основные товароведческие характеристики полыни австрийской (фаза бутонизации)

Характеристика Содержание, %

Влажное I ь 7,8-8,6

Зола общая 8,62-8,74

Зола, нерастворимая в 10% к-те хлористоводородной 0,11-0,14

Экстрактивные вещества, извлекаемые 96% спиртом 18,70-18,85

Числовые показатели для травы полыни австрийской должны составлять' экстрактивных веществ, извлекаемых 96% спиртом этиловым - не менее 18%; влажности - не более 9%, золы общей - не более 9%, золы, нерасшоримой в 10% кислоте хлористоводородной - не более 0,2%.

Проведенные в течение 2002-2006 гг в отдельных ценопопуляциях на территории Предгорного и Минераловодского районов Ставропольского края эколого-фитоценотические исследования показали, что полынь австрийская имеет четкую приуроченность к степям, лесным полянам, каменистым склонам, иногда встречается в поймах и долинах рек Таким образом, для нее характерен широкий диапазон влагообеспечения — от сухих степных почв до заболоченной местности. Высота над уровнем моря обследованных ценопопуляций составляет около 500 м. Растение приурочено к фитоценозам злаково-полынного травостоя, образованного тысячелистником обыкновенным, полынью горькой, зверобоем продырявленным, ковылем Лессинга, ковылем волосатик, типчаком.

Исследования были продолжены в условиях интродукции. В год'посад-ки густота стеблестоя была незначительной: 15-17 стеблей на 1 м2, во второй и последующие годы она колебалась в пределах 87-125 стеблей на 1 м2. Результаты наблюдения за культивируемыми растениями и растениями в природе приведены в таблицах 2 и 3.

Таблица 2 - Морфометрические показатели, урожайность и накопление

биологически активных соединений полыни австрийской

Условия естественного фитоценоза Условия культуры

Высота растения, см 61,6±5,3 68,6±3,8

Диаметр «куста», см 23,7±2,5 26,0±2,1

Побегов вегетативных 2,1 ±1,3 2,1±1,4

Побегов генеративных 4,5±1,8 №1,5

Урожайность, г/м2, воздушно-сухое сырье 138,8±2,9 187,5±2,9

Накопление эфирного масла (в %, в пересчете на воздушно-сухое сырье)

Начало бутонизации 0,36-0,38 0,38-0,40

Окончание бутонизации 0,45-0,46 0,44-0,46

Цветение 0,41-0,42 0,41-0,43

Плодоношение 0.18-0,24 0,18-0,21

Накопление аустрицина (в %, в пересчете на воздушно-сухое сырье)

Стеблевание ! 0,10-0,12 0,09-0,12

11ачало бутонизации 0,46-0,49 0,50-0,52

Окончание бутонизации 0,54-0,56 0,53-0,54

Цветение 0,44-0,47 0,40-0,43

Таблица 3 — Длительность основных фаз полыни австрийской в процессе вегетации

Условия естественного фитоценоза (среднее за 5 лет) Условия культуры (среднее за 5 лет)

Появление всходов 22.06.-26 06. 16.05.-22.05.

Фаза семядолей 26.06.-10.07. 22.05.-06.06.

Ветвление 10.07.-23.07 06.06.-20.06.

Бутонизации 23.07-17.08 20.06-16.07

Цветения 17.08.-06.09. 16.07.-09.08.

Плодоношения 06.09.-29 09 09.08.-02.09

При сравнении результатов наблюдения за культивируемыми растениями и растениями в природе, нами установлено, что урожайность полыни австрийской в культуре выше и составляет около 187,5 г/м2, содержание аустрицина и эфирного масла остается практически неизменным, а фенофазы полыни австрийской в условиях культуры значительно сокращаются (почти на месяц).

2 Изучение биологически активных соединений полыни австрийской

Одной из наиболее значимых групп биологически активных соединений полыни австрийской являются сесквитерпеновые лактоны (CJ1). Для их выделения нами были опробованы различные экстрагенты. вода, спирт этиловый, хлороформ, петролейный эфир, ацетон, этилацетат Было установлено, что хлороформ является наилучшим экстрагентом, однако в процессе экстракции в извлечение переходило большое количество сопутствующих веществ. Поэтому для выделения и наработки суммы СЛ нами был применен метод водной экстракции Рыбалко. Полученную кристаллизующуюся смолку разделяли методом колоночной хроматографии, используя в качестве элюента гексан и петролейный эфир в различных соотношениях. Идентификацию выделенных веществ осуществляли хроматографией в топком слое сорбента (измеряя величины R< и Rs, учитывая окраску зоны адсорбции), методом ИК-спектроскопии, определением отического вращения, показателя преломления, температуры плавления, пробой смешения, сравнивая полученные значения с литературными. Выводы по идентификации веществ делали на основании сопоставления данных всех методов. Из надземной части полыни австрийской были выделены следующие CJ1 аустрицин, гидроксиахиллин. ангидроаустрицин, арборесцин, а-сантонин и р-сантонин. Помимо описанных в литературе CJI, нами было выделено неизвестное белое кристаллическое вещество. Сопоставление ИК-спектра и значений констант с литературными данными позволило идентифицировать его как CJ1 эвдесманового типа артемин. Проба смешения с PCO артемина депрессии температуры плавления не давала. Из полыни австрийской артемин выделен впервые.

Полученное но методу 2 ГФ XI издания эфирное масло представляло собой ароматную сине-зеленую маслянистую жидкость с выходом 0,18-0.46% в

пересчете на воздушно-сухое сырье. Нами определялись растворимость и значения констант эфирного масла (плотнос!ь, оптическое вращение, рефракция, кислотное число, эфирное число, эфирное число после ацетилирования) В составе эфирного масла методом хромато-часс-спектрометрии было идентифицировано 30 компонентов, 22 из которых - впервые (таблица 4).

Таблица 4 - Компонентный состав эфирного масла полыни австрийской

№ пика Вещество Время удерживания %

1* Бицикло(3 1 0) гексан, 4-метил-1-(1-метилэтил) 3.42 0,20

2 а-Пинен 3.54 0,44

Камфен 3.77 0,39

4* а-Туйен 4.09 0,69

5 р-Пинен 4.29 0,38

6* о-Цимен 4.93 1,72

7* Эвкалиптол 5.08 12,01

8* З-Карен 5.58 0,30

9* Цис-4-(изопропил)-1 -метилциклоге ь с-2-ен-1 -ол 5.75 0,31

10 Транс-сабиненгидрат С. Л(\ г\ л а

11 а-Туйон 6.58 55,26

12 Р-Туйон 6.82 7,21

13* Транс-4-(изопропил)-1-метил циклогекс-2-ен-1-ол 6.92 0,68

14* Цис-сабинол 7.33 1,25

15 Камфора 7.49 4,11

16* (5)-цис-Вербенол 7.82 2,68

17* 2,2-Диметил-З-винил-бицикло (2.2.1) гептан 7.90 0,51

18 Борнеол 7.96 1,94

19* Терпинеол-4 8 22 4,32

20* Миртеналь 8.40 0,26

21* 4-Карен 8.53 0,66

22* Додекан 8.67 0,60

23* 4,6,6-Триметилбицикло (3.1.1) гепт-З-ен-2-ил ацетат 10.25 0,89

24* Борнил ацетат 10.88 0,42

25* Мирте нил ацетат 11 02 0.49

26* Тетрадекан 13.64 0,41

27* а-Гимахален 15.89 0,20

28* Спатуленол 18.04 0,21

29* Гексадекан 18.43 0,26

30* а-Эвдесмол 19.69 0,50

Примечание: * - идентифицированы впервые.

Мажорными компонентами являются кислородные производные бицик-лических монотерпенов - кетоны (а-туйон, Р-туйон, камфора) и спирты (борне-ол, (5)-цис-вербенол, дис-сабинол). Также присутствуют моноциклические терпены (терпинеол-4, эвкалиптол) и ароматическое соединение (о-цимен).

По результатам бумажной хроматографии в 70% спиртовом извлечении полыни австрийской нами было обнаружено восемь контрастных зон адсорбции предположительно фенольной природы (таблица 5).

Таблица 5 - Результаты хроматографического разделения фенольных

соединений полыни австрийской на бумаге

Система Вещ ества-свидетели, извлечение Цвет зоны адсорбции

раство- Значение Я/ УФ-свет УФ-свет и

рителей конц Л/Яз

Рутин 0,56-0,57 желто-зел. желто-зел.

Квериетин 0,67-0,68 желто-кор желт.

Лютеолин 0,84-0,85 желто-кор. желто-зел

Лютеолин-7-гликозид 0,71-0,72 коричн. желто-зел.

Апигенин л щ г\ лл V,у 1-у),у г. зелен лимонн

К-та хлорогеновая 0.64-0.65 голуб. зелен

н-бутанол - К-та кофейная 0,83-0,84 св.-голуб. св.-голуб

кислота К-та изоферуловая 0,91-0,92 голуб. голуб.

уксусная К-та феруловая 0,94-0,95 фиол. фиол.

ледяная - 0,31-0,32 ярко-желт. лимонн.

вода (4:1:5) 0,53-0,54 желто-зел. желто-зел.

0,62-0,63 желто-кор. желт.

Извлечение 0,64-0,65 голуб. зелен

(70% спирт этиловый) 0,77-0,78 коричн. желто-зел.

0,82-0,83 св.-голуб. св.-голуб

0,89-0,90 зелен. лимонн

0,95-0,96 фиол. фиол.

Рутин 0,59-0,60 желто-зел. желто-зел

Кверцетин 0,11-0,12 желто-кор. желт.

15% рас- Лютеолин 0,08-0,09 желто-кор. желто-зел.

твор ки- Лютеолин-7-гликозид 0,29-0,30 коричн. желто-зел.

слоты ук- Апигенин 0,14-0,15 зелен. лимонн.

сусной К-та хлорогеновая 0,65-0,66 голуб. зелен.

К-та кофейная 0,51-0,52 св.-голуб. св.-голуб.

К-та изоферуловая 0,35-,036 голуб. голуб.

К-та феруловая 0,40-,041 фиол. фиол.

Извлечение 0,04-0,05 ярко-желт. лимонн.

Продолжение таблицы 5

(70% спирт этиловый) 0,11-0,12 желто-кор. желт

0,13-0,14 зелен. лимонн.

0,31-0,32 коричн. желто-зел

0,39-0,40 фиол. фиол.

0,51-0,52 св.-голуб. св.-голуб.

0,56-0,57 желто-зел желто-зел

0,66-,067 голуб. зелен.

Семь зон адсорбции сравнением с веществами-свидетелями идентифи-

цированы как флавоноиды и оксикоричные кислоты. Изучение фенольной фракции продолжили методом ВЭЖХ; содержание суммы идентифицированых флавоноидов составило 14,8% от всех обнаруженным данным методом соединений, оксикоричных кислот - 23,16%. Впервые в надземной части полыни австрийской идентифицировано 5 флавоноидов (рутин, кверцетин, дигидроквер-цстин, гесперидин, лютеолин-7-гликозид) и 6 оксикоричных кислот (кофейная, феруловая, цикориевая, коричная, хлорогеновая, галловая) Нами была разработана методика спектрофотометрического определения суммы флавоноидов Результаты в процентах, в пересчете на воздушно-сухое сырье, приведены в таблице 6.

Таблица 6 - Результаты определения суммы флавоноидов в надземной

части полыни австрийской (фаза бутонизации)

Образец сырья / X 5 г Ах е,%

Образец 9 6 1,04 0,0041 0,0017 0,0044 0,35

Образец 11 6 1,08 0,0032 0,0013 ь 0,0033 0,26

Образец 14 6 1,19 0,0050 0,0020 2,571 0,0051 0,43

Образец 18 6 1,17 0,0063 0,0026 0,0067 0,53

Образец 22 6 1,13 0,0058 0,0024 0,0062 0,50

Сумма флавоноидов, определенная методом дифференциальной УФ-

спектрофотометрии, составила 1,04-1,19%.

Для идентификации и количественного определения свободных аминокислот использовали метод планарной хроматографии. Для доминирующих компонентов по площади зоны адсорбции было определено их количественное содержание: для пролина оно составило 0,71-0,73 мг%, для аспарагиновой кислоты - 0,18-0,20 мг% По данным ВЭЖХ-анализа в сырье также присутствует

витамин Е (5,47-5,50 мкг/г в пересчете на воздушно-сухое сырье).

Элементный состав надземной части полыни австрийской, изученный на кварцевом спектрографе ДФС-8-1 полуколичественным спектральным методом, представлен 26 макро- и микроэлементами, содержание которых не выходит за пределы допустимых концентраций, установленных СанПиН. Среди микроэлементов в наибольших количествах накапливаются алюминий и железо.

С целью определения оптимальных параметров сырья и сроков его заго-ювки нами была изучена динамика накопления СЛ по органам и фазам развития полыни австрийской В предварительных опытах было установлено, что среди всех лактонов линейная зависимость между концентрацией вещества и площадью зоны адсорбции,'ее интенсивностью, в наибольшей степени соблюдается для лактона гвайанового типа аустрицина. Расчет концентрации аустри-цина проводили по градуировочной функции в координатах «площадь пика -масса вещества» (линейная аппроксимация) Относительная ошибка метода,

ппл/.|1ифпт1лп >,г<г<пп>м11>п>> ^гтт л О £*70А гттгттг, ТЧ

1иппил пи ииршш. ^гирол, / /о ^ 1 аилпца / у.

Таблица 7 - Результаты расчета относительной ошибки метода планар-ной хроматографии

А / ! 1 \ ДХ ё,%

3,75 3,85 6 0,12 ! 2,571 1 0,31 2,67

Результаты изучения динамики накопления аустрицина по органам и фазам развития полыни австрийской, в процентах, в пересчете на воздушно-сухое сырье, приведены на рисунке 3.

о -,---,

стеблевание начало бутонитяции гжпнчянир бутоничации цветение

фаза

стебли - листья - - 'бутоны (цветки) трава

Рисунок 3 — Динамика накопления аустрицина по органам и фазам развития

полыни австрийской Как следует из рисунка, наибольшее содержание аустрицина приходится на фазу бутонизации, а органы, содержащие максимальное его количество - бутоны и листья Для того, чтобы оценить количественное содержание всей суммы СЛ, был произведен перерасчет с использованием аустрицина в качестве внутреннего стандарта (рисунок 4)

24 000

22 000 30 ом - -- 1 ! Л 1 I \ / 1 а"

16 4Ю0 / , .. .

1С ООО ;

„ 14ООО & - А

И Л-2 бой т ' !

10000 : г

в ООО !

бооо 4С00 Л [ \ ' \

2 300 г / 'ч А 3 4 5 Б

ад 0.1 ол с; ол оь = 7 0» и

Рисунок 4 - Хроматограмма суммы СЛ полыни австрийской

Количественное содержание суммы СЛ в надземной части полыни австрийской в зависимости от фазы развития и места сбора колебалось от 0,04% (стеблевание) до 2,29% (начало бутонизации) в пересчете на воздушно-сухое сырье.

Динамика накопления по фазам развития была изучена и для эфирного масла (рисунок 5).

5 05л а. л и

о 0.45 ■ -о

6 0,4---- - - -

¡.0,35.---- -

о 0,3 ■

н о

& 0,25 ■ 0,20,15----

0 05 -0-

начало бутонизации окончание бутонизации цветение плодоношение

фаза

Рисунок 5 - Зависимость накопления эфирного масла от фазы развития

полыни австрийской Как следует из рисунка, наибольшее количество эфирного масла приходится на фазу окончания бутонизации. Следовательно, при заготовке сырья наиболее предпочтительна олиственная надземная часть растения, собранная в фазу бутонизации.

3 Результаты фармакологического скрининга Поскольку одна из целей работы состояла в проведении фармакологического скрининга СЛ, для повышения его эффективности (в т.ч. сокращения времени и затрат) нами была использована компьютерная программа прогноза спектра биологической активности химических соединений «PASS». Выполненный с ее помощью прогноз показал перспективность изучения фармаколо-

гической активности выделенных соединений; некоторые виды активности (кардиотропное действие, цитостатическая, ГАМК-ергическая активности) были доказаны экспериментально.

Результаты изучения влияния аустрииина на показатели работы сердца демонстрируют, что он вызывает снижение частоты сердечных сокращений на 27%, на 27% увеличивает продолжительность жизни при аноксии, и не проявляет активности при хлоркальциевой аритмии

Цитостатическая активность артемина, изученная на модели прорастания семян пшеницы, превышала иковую у ингибитора роста растений цинка сульфата.

Под влиянием ангидроаустрицина регистрировали значительное (на 3040%) снижение объемной скорости мозгового кровотока При введении блока-юра ГАМК-рецепторов гидрастина эффект вещества изменился, что позволяет сделать вывод о свойствах ГАМК-агониста у данного соединения.

Сумма СЛ полыни авслрийской, изученная методом онкометрии на модели каолинового отека, оказывала более выраженную противовоспалительную активность в сравнении с бутадионом.

Эфирное масло оказывало антимикробную активность, которая выразилась в ингибнровании зон роста патогенных бактерий и грибов рода Candida Кроме того, исследуемый образец проявил активность в отношении семи штаммов микобактерий туберкулеза, четыре из которых показали лекарственную устойчивость к препаратам основного ряда.

Антиоксидантная активность спирто-водных извлечений полыни австрийской, изученная потенциометрическим и хемилюминесцентным методами, достигла наибольших значений в 70% извлечении, что можно объяснить анти-оксидантным действием фенольных соединений.

Токсичность настоя и СЛ полыни австрийской составила более 5000 мг/кг, и по классификации К.К. Сидорова соответствует низшему, шестому классу токсичности - «относительно безвредные», эфирное масло - четверюму («малотоксичное»).

Полученные результаты позволяют рекомендовать сесквитерпеновые лактоны и эфирное масло полыни австрийской для углубленного изучения, с целью разработки малотоксичных лекарственных средств, востребованных современной медициной.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Для сырья (травы) полыни австрийской определены показатели подлинности и качества.

2. Определена урожайность полыни австрийской в культуре и отдельных ценопопуляциях на территории Предгорного и Минераловодского районов Ставропольского края. Урожайность в культуре выше и составляет 187,5±2,9 г/м2 воздушно-сухого сырья

3. Проведены интродукционные исследования полыни австрийской. Установлено, что содержание эфирного масла и сесквитерпеновых лактонов остается практически неизменным, а фенофазы растения в условиях кулыуры сокращаются на месяц.

4. Изучен компонентный состав эфирного масла полыни австрийской. Методом хромато-масс-спектрометрии в эфирном масле идентифицировано 30 компонентов, 22 из них - впервые. Основными компонентами являются кислородсодержащие производные бициклических монотерпенов - кетоны (а-туйон 55,26%, р-туйон 7,21%, камфора 4,11%) и спирты (борнеол 1,94%, (Б)-цис-вербенол 2,68%, цис-сабинол 1,25%), моноциклические терпены (терпинеол-4 4,32%, эвкалиптол 12,01%) и ароматическое соединение (о-цимен 1,72%). Содержание эфирного масла возрастает по мере развития растения и достигает максимума в конце бутонизации (до 0,46% в пересчете на воздушно-сухое сырье). Определены основные константы и растворимость эфирного масла.

5. Из надземной части полыни австрийской выделены сесквитерпеновые лактоны аустрицин, гидроксиахиллин, ангидроаустрицин, арборесцин, а-сантонин. р-сантонин, артемин. Установлено, что наибольшее содержание суммы лактонов приходится на фазу бутонизации (до 2,29%), а органы, накапливающие их максимальное количество - бутоны и листья. Эвдесманолид арте-

мин из полыни австрийской выделен впервые.

6. Для аустрипина, артемина, ангидроаустрицина спрогнозированы и экспериментально доказаны, влияние на показатели работы сердца, цитостати-ческая, ГАМК-ергическая активность. Для суммы лактонов установлена низкая токсичность, противовоспалительная активность и тонизирующее воздействие на центральную нервную систему. Для эфирного масла показана выраженная антимикробная (в т ч. противотуберкулезная) активность, для спиртоводных извлечений - антиоксидантная.

7. Изучен фенольный состав надземной части полыни австрийской. Впервые идентифицировано 5 флавоноидов (рутин, кверцетин, дигидрокверце-тин, гсспсридин, лютеолин-7-гликозид) и '6 окснкоричных кислот (кофейная, феруловая, цикориевая, коричная, хлорогеновая, гапгтовая) Количественное содержание флавоноидов в фазу бутонизации в пересчете на рутин составляет 1,04-1,19%.

8. Изучен аминокислотный состав надземной части полыни австрийской. Содержание пролина составляет 0,71-0,73 мг%, аспарагиновой кислоты 0,180,20 мг% Также обнаружен витамин Е с содержанием 5,47-5.50 мкг/г в пересчете на воздушно-сухое сырье.

9. Изучен элементный состав надземной части - содержание 26 макро- и микроэлементов не выходит за пределы допустимых концентраций; микроэлементы, накапливающиеся в наибольших количествах - алюминий и железо

Список опубликованных работ:

1. Микроэлементный состав полыни австрийской // Экология и здоровье: сб. науч тр. - Ессентуки. Ассоциация мед. центров Юнеско, 2004 - Вып.8. - С.206-210

2 Антимикробная активность эфирного масла полыни австрийской // Научное обозрение. -2005. -№3. - С. 11-12. (Соавт. Коновалов Д А.).

3. Противотуберкулезная активность эфирного масла нолыни австрийской // Научное обозрение. - 2005. - №3. - С 13-15. (Соавт. Коновалов Д.А.).

4. О выделении гвайанолида аустрицина из Artemisia austriaca // Современные проблемы фармакологии и фармации- материалы Всерос. науч.-практ. конф. 18-19 мая 2005 г. - Новосибирск, 2005. - С.290-291. (Соавт. Коновалов Д. А.).

5. О влиянии суммы сесквитерпеновых лактонов полыни австрийской на двигательную активность крыс // Дни науки: науч. тр. №29. - Пятигорск, 2005. - С.89-91. (Соавт. Коновалов Д.А., Чуракова ГВ, Корочинский AB., Струговщик Ю.С., Гончарова В.В.)

б Изучение аминокислотного состава полыни австрийской методом тонкослойной хроматографии // Дни науки' науч. тр. №29. - Пятигорск, 2005 -С.149-151 (Соавт Мезенова Т.Д., Коновалов Д А:).

7. Растительные терпеноиды, обладающие противотуберкулезной активностью // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения, материалы IX Междунар. съезда 22-25 июня 2005 г. - СПб., 2005. - С. 599-606. (Соавт. Коновалов Д.А., Водорезова Л А., Яковлева М.П., Винюков Д Д.).

8. Острая токсичность и антимикробные свойства биологически активных веществ полыни австрийской // Экология и здоровье: сб. науч. тр. - Ессентуки- Ассоциация мед. центров Юнеско, 2005 - Вып.9. - С. 147-151. (Соавт. Коновалов Д А , Арльт A.B.).

9. Изучение динамики накопления аустрицина в полыни австрийской // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация - 2006. - №2. - С.282-283. (Соавт. Мезенова Т.Д , Коновалов ДА.).

10. Влияние сесквитерпенового лактона аустрицина на некоторые показатели работы сердца // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. - 2006. - №2. - С.284-286. (Соавт. Коновалов Д.А., Назарова JI.E., Оганова М.А.).

11. Морфолого-анатомическое изучение полыни австрийской // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч

тр - Пятигорск, 2006. - Вып.61. - С.28-30

12. Сесквитерпеновые лактоны ресурсных видов как биологически активные вещества // Молодые ученые - медицине- тез докл. пятой науч. конф. молодых ученых. - Владикавказ, 2006. - С.57-59 (Соавт. Коновалов Д.А.).

13 Сесквитерпеновые лактоны как агонисты ГАМК-рецепторов // Человек и лекарство: тез. докл. 9 Рос. нац. конгр 8-12 апр. 2006 г - М„ 2006. -С.542. (Соавт. Коновалов Д.А., Ивашев М Н )

14. Выбор градуировочной функции для количественного определения аустрицина методом планарной хроматографии // Экоаналитика-2006: материалы Всерос. конф. по анализу объектов окруж среды 26-30 сент. 2006 г. - Самара, 2006. - С. 136. (Соавт Дмитриев А.Б., Мезенова Т.Д., Коновалов Д А.)

15. Компонентный состав эфирного масла полыни австрийской, произрастающей в Ставропольском крае // Кубанский научный медицинский вестник. - 2006. - №10 (91). - С 38-39. (Соавт. Коновалов Д.А.)

16. Динамика накопления сесквитерпеновых лактонов в траве полыни австрийской // Фармация - 2006. - №6 - С.9. (Соавт. Мезенова Т.Д., Коновалов Д А.).

17. Противовоспалительная активность сесквитерпеновых лактонов полыни австрийской Н Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции, сб науч. тр - Пятигорск, 2006. - Вып.62. - С.487-488. (Соавт. Коновалов Д А . Огурцов Ю.А.).

КОНОВАЛОВ ЮРИЙ БОРИСОВИЧ

ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПОЛЫНИ АВСТРИЙСКОЙ КАК ИСТО ЧНИКА ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СЕСКВИТЕРПЕНОВЫХЛАКТОНОВ

15.00.02 — фармацевтическая химия, фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Подписано к печати « г. Формат бумаги 60x84 1/16

Бумага книжно-журнальная. Печать ротапринтная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ № ш

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Пятигорская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (357532, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11)

Оглавление диссертации Коновалов, Юрий Борисович :: 0 ::

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ИЗУЧЕНИЯ РОДА ARTEMISIA L. И ПОЛЫНИ АВСТРИЙСКОЙ.

1.1. Ботаническая характеристика полыни австрийской.

1.2. Химический состав полыни австрийской.

1.2.1. Эфирные масла полыни австрийской и представителей секции Absinthium DC.

1.2.2. Сесквитерпеновые лактоны.

1.2.3. Фенольные соединения.

1.2.4. Полиацетиленовые соединения.

1.2.5. Другие соединения.

1.3. Лекарственные препараты на основе сесквитерпеновых лактонов рода Artemisia.

1.4. Использование полыни австрийской в народной и научной медицине.

ВЫВОДЫ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Объекты исследования, образцы сырья полыни австрийской и их ботаническая идентификация.

2.2. Методы выделения, разделения и идентификации, используемые при изучении биологически активных соединений полыни австрийской.

2.2.1. Выделение суммы сесквитерпеновых лактонов.

2.2.2. Тонкослойная хроматография.

2.2.3. Планарная хроматография.

2.2.4. Бумажная хроматография.

2.2.5. Колоночная хроматография.

2.2.6. Идентификация выделенных веществ.

2.2.7. Выделение эфирного масла.

2.2.8. Хромато-масс-спектрометрия.

2.2.9. Высокоэффею-ивная жидкостная хроматография.

2.3. Биологические методы исследования.

2.3.1. Морфолого-анатомическое изучение.

2.3.2. Определение числовых показателей сырья.

2.3.3. Ресурсные исследования.

2.3.4. Интродукционные исследования.

2.3.5. Метод фенологических наблюдений.

2.4. Фармакологические методы исследования.

2.4.1. Изучение острой токсичности.

2.4.2. Кардиотропное действие.

2.4.3. Цитостатическая активность.

2.4.4. ГАМК-ергическая активность.

2.4.5. Противовоспалительная активность.

2.4.6. Изучение влияния на центральную нервную систему.

2.4.7. Антимикробная активность.

2.4.8. Противотуберкулезная активность.

2.4.9. Антиоксидантная активность.

ГЛАВА 3. ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ НАДЗЕМНОЙ ЧАСТИ ПОЛЫНИ АВСТРИЙСКОЙ.

3.1. Морфолого-анатомическое изучение полыни австрийской

3.2. Товароведческие характеристики надземной части полыни австрийской.

3.3. Ресурсные исследования полыни австрийской.

3.4. Интродукционные исследования полыни австрийской.

3.5. Изучение химического состава, констант и динамики накопления эфирного масла полыни австрийской.

3.5.1. Изучение химического состава эфирного масла полыни австрийской методом хромато-масс-спектрометрии.

3.5.2. Изучение констант эфирного масла и изменчивости его содержания в течение вегетации полыни австрийской.

3.6. Изучение сесквитерпеновых лактонов и динамики их накопления в надземной части полыни австрийской.

3.6.1. Выделение сесквитерпеновых лактонов полыни австрийской.

3.6.2. Изучение сесквитерпеновых лактонов полыни австрийской.

3.6.3. Изучение динамики накопления сесквитерпеновых лактонов по органам и фазам развития полыни австрийской.

3.7. Изучение химического состава надземной части полыни австрийской.

3.7.1. Фенольный состав надземной части полыни австрийской.

3.7.2. Аминокислотный состав надземной части полыни австрийской

3.7.3. Изучение состава жирорастворимых витаминов надземной части полыни австрийской.

3.7.4. Элементный состав надземной части полыни австрийской.

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ.

ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ ТОКСИЧНОСТИ, БИОЛОГИЧЕСКОЙ И ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ СЕСКВИТЕРПЕНОВЫХ ЛАКТОНОВ И ЭФИРНОГО МАСЛА ПОЛЫНИ АВСТРИЙСКОЙ.

4.1. Токсичность настоя, сесквитерпеновых лактонов и эфирного масла полыни австрийской.

4.2. Прогнозирование биологической активности сесквитерпеновых лактонов полыни австрийской.

4.3. Влияние аустрицина на некоторые показатели работы сердца.

4.4. Ци тост этическая активность артемина.

4.5. ГАМК-ергическая активность ангидроаустрицина и аустрицина.

4.5.1. ГАМК-ергическая активность ангидроаустрицина.

4.5.2. ГАМК-ергическая активность аустрицина.

4.6. Противовоспалительная активность суммы сесквитерпеновых лактонов полыни австрийской.

4.7. Влияние сесквитерпеновых лактонов полыни австрийской на центральную нервную систему.

4.8. Антимикробная активность эфирного масла полыни австрийской.

4.9. Противотуберкулезная активность эфирного масла полыни австрийской.

4.10. Антиоксидантная активность спирто-водных извлечений полыни австрийской.

4.11. Перспектива создания новых лекарственных препаратов на основе сесквитерпеновых лактонов и эфирного масла полыни австрийской.

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ.

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия и фармакогнозия", Коновалов, Юрий Борисович, автореферат

Актуальность темы. Растительный мир является неиссякаемым источником высокоэффективных лекарственных веществ, сырья для фармацевтической, парфюмерно-косметической, пищевой промышленности. Применение лекарственных препаратов растительного происхождения в современной медицине не только остается стабильным, но и имеет тенденцию к росту номенклатуры. Это связано с тем, что многйе лекарственные препараты синтетического происхождения оказывают побочное действие на организм, которое возрастает не только по частоте, но и по тяжести проявления в виде аллергических реакций, идиосинкразии и т.п. Поэтому исключительное значение приобретает увеличение арсенала фитопрепаратов, поиск и исследование фармакологической активности биологически активных соединений малоизученных растений, а также расширение спектра действия лекарственных препаратов растительного происхождения, уже применяемых в медицине.

В последние годы в поисках новых лекарственных веществ исследователи все чаще обращаются к сесквитерпеновым лактонам - обширной группе природных соединений, выделенных из растений, грибов и представителей животного мира. Широкое распространение в растительном мире, высокая биологическая активность, разнообразие видов активности - определяют значимость исследований этого класса природных соединений. На сегодняшний день установлена химическая структура свыше 6000 лактонов, а наибольшее их количество выделено из представителей семейства Asteraceae. Одним из богатых источников этих веществ являются виды рода полынь. Из его представителей выделено несколько сотен се-сквитерпеновых лактонов. Однако, не все виды полыней исследованы на содержание лактонов, недостаточно изучены их фармакологические свойства.

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы является фарма-когностическое изучение полыни австрийской (Artemisia austriaca Jacq.), выделение из ее надземной части индивидуальных сесквитерпеновых лактонов и изучение их фармакологической активности.

Для реализации поставленных целей необходимо решить следующие задачи:

- провести интродукционные исследования;

- изучить химический состав и динамику накопления эфирного масла;

Из суммы сесквитерпеновых лактонов выделены индивидуальные соединения: аустрицин, гидроксиахиллин, ангидроаустрицин, арборесцин, а-сантонин, (З-сантонин, артемин. Установлено их количественное содержание и изучена динамика накопления по фазам развития и органам растения. Артемин из полыни австрийской выделен впервые.

Изучен компонентный состав фенольных соединений полыни австрийской. Впервые методами бумажной и высокоэффективной жидкостной хроматографии идентифицировано и установлено количественное содержание пяти флавоноидов и шести оксикоричных кислот. Впервые в сырье идентифицированы аминокислоты (пролин и кислота аспарагиновая), витамин Е, макро- и микроэлементы.

Осуществлен прогноз фармакологической активности сесквитерпеновых лактонов; кардиотропное действие, цитостатическая, ГАМК-ергическая, противовоспалительная активность подтверждены экспериментально. Для эфирного масла установлена выраженная антимикробная (в т.ч. противотуберкулезная) активность, для спиртоводных извлечений - антиоксидантная.

Практическая значимость. В результате комплексных исследований доказана перспективность полыни австрийской как источника фармакологически активных сесквитерпеновых лактонов и эфирного масла.

Установленные для сесквитерпеновых лактонов виды активности (кардиотропное действие, цитостатическая, ГАМК-ергическая, противовоспалительная) позволяют рекомендовать их для дальнейших фармакологических исследований. Широкий спектр антимикробной активности эфирного масла дает основание для его дальнейшего исследования в качестве потенциального антимикробного средства.

Внедрение результатов исследования. По материалам исследований составлены информационные письма: «Морфолого-анатомическое изучение полыни австрийской» и «Методика количественного определения аустрицина в траве полыни австрийской» (акты внедрения от 26.01.07 в учебный процесс кафедры фармакогнозии с курсом ботаники ГОУ ВПО Курского государственного медицинского университета), «Изучение влияния сесквитерпенового лактона аустрицина на показатели работы сердца» (акт внедрения от 16.10.06 в НИР кафедры фармакологии ГОУ ВПО Пятигорской государственной фармацевтической академии), «Об изучении биологической активности сесквитерпенового лактона ангидроаустрицина» (акт внедрения от 12.05.06 в учебный процесс и НИР кафедры биохимии ГОУ ВПО Северо-Осетинской государственной медицинской академии), «О проведении испытаний образца эфирного масла полыни австрийской на противотуберкулезную активность» и «О проведении испытаний образца эфирного масла полыни австрийской на антибактериальную активность» (акт внедрения от 08.02.06 в НИР кафедры биохимии и микробиологии ГОУ ВПО Пятигорской государственной фармацевтической академии).

Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Пятигорской государственной фармацевтической академии (номер государственной регистрации 01200112164).

Апробация работы и публикации. Основные фрагменты диссертационной работы доложены на 61-ой и 62-ой региональных конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2006, 2007), Пятой конференции молодых ученых СОГМА «Молодые ученые -медицине» (Владикавказ, 2006).

По теме диссертации опубликовано 17 научных работ.

Основные положения, выносимые на защиту:

- результаты морфолого-анатомического изучения полыни австрийской и товароведческие характеристики сырья;

- результаты ресурсных и интродукционных исследований полыни австрийской в отдельных ценопопуляциях;

- результаты изучения состава и изменчивости содержания сесквитерпеновых лактонов полыни австрийской по органам и фазам развития растения;

- результаты изучения фенольного, аминокислотного, витаминного и элементного составов полыни австрийской;

- результаты прогнозирования фармакологической активности сесквитер-пеновых лактонов полыни австрийской и экспериментальное подтверждение некоторых из них: влияние на показатели работы сердца, цитостатическая, ГАМК-ергическая, противовоспалительная активности.

Обьем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 170 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы (1 глава), экспериментальной части (3 главы), общих выводов, списка литературы (включающего 179 источников, в том числе 63 иностранных) и приложений, иллюстрирована 45 таблицами и 37 рисунками. 5

Заключение диссертационного исследования на тему "Фармакогностическое изучение полыни австрийской как источника фармакологически активных сесквитерпеновых лактонов"

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Для сырья (травы) полыни австрийской определены показатели подлинности и качества.

4. Изучен компонентный состав эфирного масла полыни австрийской. Методом хромато-масс-спектрометрии в эфирном масле идентифицировано 30 компонентов, 22 из них - впервые. Основными компонентами являются кислородсодержащие производные бициклических монотерпенов - кетоны (а-туйон 55,26%, (3-туйон 7,21%, камфора 4,11%) и спирты (борнеол 1,94%, (8)-цис-вербенол 2,68%, цис-сабинол 1,25%), моноциклические терпены (терпинеол-4 4,32%, эвка-липтол 12,01%) и ароматическое соединение (о-цимен 1,72%). Содержание эфирного масла возрастает по мере развития растения и достигает максимума в конце бутонизации (до 0,46% в пересчете на воздушно-сухое сырье). Определены основные константы и растворимость эфирного масла.

5. Из надземной части полыни австрийской выделены сесквитерпеновые лактоны аустрицин, гидроксиахиллин, ангидроаустрицин, арборесцин, а-сантонин, р-сантонин, артемин. Установлено, что наибольшее содержание суммы лактонов приходится на фазу бутонизации (до 2,29%), а органы, накапливающие их максимальное количество - бутоны и листья. Эвдесманолид артемин из полыни австрийской выделен впервые.

6. Для аустрицина, артемина, ангидроаустрицина спрогнозированы и экспериментально доказаны: влияние на показатели работы сердца, цитостатическая,

ГАМК-ергическая активность. Для суммы лактонов установлена низкая токсичность, противовоспалительная активность и тонизирующее воздействие на центральную нервную систему. Для эфирного масла показана выраженная антимикробная (в т.ч. противотуберкулезная) активность, для спиртоводных извлечений -антиоксидантная.

7. Изучен фенольный состав надземной части полыни австрийской. Впервые идентифицировано 5 флавоноидов (рутин, кверцетин, дигидрокверцетин, гес-перидин, лютеолин-7-гликозид) и 6 оксикоричных кислот (кофейная, феруловая, цикориевая, коричная, хлорогеновая, галловая). Количественное содержание флавоноидов в фазу бутонизации в пересчете на рутин составляет 1,04-1,19%.

8. Изучен аминокислотный состав надземной части полыни австрийской. Содержание пролина составляет 0,71-0,73 мг%, аспарагиновой кислоты 0,18-0,20 мг%. Также обнаружен витамин Е с содержанием 5,47-5,50 мкг/г в пересчете на воздушно-сухое сырье.

БЛАГОДАРНОСТИ

Автор искренне благодарит всех за помощь в фармакогностическом изучении полыни австрийской и исследовании спектра фармакологической активности сесквитерпеновых лактонов. В работе принимали участие: заведующий эколого-ботанической станцией БИН РАН, д.б.н., Анатолий Дмитриевич Михеев и старший преподаватель кафедры ботаники ПятГФА, к.ф.н., Сергей Феодосьевич Джумырко (ботаническая идентификация образцов сырья и введение полыни австрийской в культуру); старший преподаватель кафедры аналитической химии, к.ф.н., Татьяна Дмитриевна Мезенова (изучение аминокислотного состава и динамики накопления сесквитерпеновых лактонов); аспирант кафедры фармацевтической химии ПятГФА Олег Владимирович Лапочкин (идентификация выделенных веществ методом РЖ-спектроскопии); заместитель директора по научной работе НИИ биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича РАМН, д.б.н., к.ф-м.н., Владимир Васильевич Поройков и ведущий научный сотрудник лаборатории структурно-функционального конструирования лекарств НИИ биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича РАМН, к.ф-м.н., Дмитрий Алексеевич Филимонов (прогнозирование спектра активности сесквитерпеновых лактонов); профессор кафедры фармакологии ПятГФА, д.м.н., Михаил Николаевич Ивашев и старший преподаватель кафедры фармакологии ПятГФА, к.ф.н., Аркадий Вальтеро-вич Арльт (изучение острой токсичности и ГАМК-ергической активности сесквитерпеновых лактонов); зав. кафедрой биологии, физиологии и патологии ПятГФА, к.б.н., Любовь Ефимовна Назарова и ассистент кафедры биологии, физиологии и патологии ПятГФА Марина Альбертовна Оганова (изучение кар-диотропного действия сесквитерпеновых лактонов); ассистент кафедры биологии, физиологии и патологии ПятГФА, к.ф.н., Юрий Александрович Огурцов (изучение противовоспалительной активности сесквитерпеновых лактонов). Особую благодарность автор выражает своему научному руководителю - профессору Дмитрию Алексеевичу Коновалову.

Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 0 года, Коновалов, Юрий Борисович

1. 5|3(Н)-аустрицин, новый гвайанолид из Artemisia leucodes / Н.А. Тал-жанов и др. // Химия природ, соединений. 2004. - вып.40, №2. - С. 129-133.

2. Адекенов, С.М. Артаусин новый сесквитерпеновый лактон из Artemisia austriaca / С.М. Адекенов, К.А. Айтуганов, Н.И. Головцов // Химия природ, соединений. - 1987.-№ 1С. 148-149.

3. Адекенов С.М. Терпеноиды Achillea micrantha / С.М. Адекенов, Н.М. Гафуров, А.Ж. Турмухамбетов // Химия природ, соединений. 1987. - №2. -С.305.

4. Адекенов, С.М. Аустрицин из Artemisia juncea / С.М. Адекенов, А.Н. Куприянов, А.Ж. Турмухамбетов // Химия природ, соединений. 1992. - №6. -С.727-728.

5. Артемин новый сесквитерпеновый лактон из Artemisia taurica / JI.П. Толстых и др. // Химия природ, соединений. - 1968. - №6. - С.384-385.

6. А.с. 1709611 СССР, А61 КЗ5/78 Способ получения средства «Фриги-на», обладающего кардиотонической активностью / Коновалова О.А. и др. (СССР). №4804973/14; заявл. 23.03.90; опубл. 01.10.91, Бюл. №202468. - 8 с.

7. Бат, Н.М. Теоретические основы формирования системы управления на региональном уровне качеством лекарственной помощи больным туберкулезом: автореф. дис. д-ра фармац. наук: 15.00.01 / Бат Нафисет Масхудовна. Пятигорск, 2004. - 42 с.

8. Беленовская, Л.М. Сесквитерпеновые лактоны некоторых видов рода Artemisia L. / Л.М. Беленовская // Раст. ресурсы. 2000. - Т.36, вып.1. - С.43-45.

9. Беленовская, Л.М. Флавоноиды некоторых видов рода Artemisia (As-teraceae) в условиях интродукции в Ленинградскую область / Л.М. Беленовская, А.А. Коробков//Раст. ресурсы. 2005. - Т.41, вып.З. - С.100-105.

10. Белоусов, Ю.Б. Методология проведения клинических исследований / Ю.Б. Белоусов // Украшський медич. часопис. 2001. - №4, вып.24. - С.50-58.

11. Беляков, К.В. Определение сесквитерпеновых лактонов в корневищахи корнях девясила высокого (Inula helenium L.) / К.В. Беляков // Фармация. 2003. -№3. -С.10-12.

12. Березовская, Т.П. Хемотаксономия полыней Южной Сибири: автореф. дис. д-ра биол. наук: 03.00.05 / Березовская Тамара Павловна. Новосибирск, 1978.-33 с.

13. Визель, А.А. Туберкулез / А.А. Визель, М.Э. Гурылева; под ред. М.И. Перельмана. М.: Гэотар Медицина, 1999. - 208 с.

14. Винклер, Г.И. Цитогенетическая активность кумарина / Г.И. Винклер, А.Ф. Коломиец, В.К. Щербаков // Всесоюз. Симпоз. по фенольным соединениям (1; 1968; Москва): материалы. -М, 1968. С.393-399.

15. Вичканова, С.А. Антимикробная активность сесквитерпеновых лактонов из растений семейства сложноцветных / С.А. Вичканова, М.А. Рубинчик, В.В. Адыгина // Лекарственные растения. Т. 14. Фармакология и химиотерапия. М.: Колос, 1971. - С.230-238.

16. Вичканова, С.А. Антибактериальные и антифунгальные свойства природных лактонов / С.А.Вичканова, В.В. Адгина, С.Б. Изосимова // Раст. ресурсы. 1977. - Т.13, вып.З. - С.428-435.

17. Влияние сесквитерпенового лактона арглабина на синтез ДНК в клетках лейкоза Р388 in vivo / Н.С. Жангабылов и др. // Хим.-фармац. журн. 2004. -Т.38, №12. - С.8-10.

18. Возможности использования фотодинамической терапии для лечения и профилактики сердечно-сосудистых заболеваний / И.Н. Возовиков и др. // Кардиологический вестн. 2006. - Т. 1(13), №1. - С.52-55.

19. Гаммерман, А.Ф. Материалы к изучению анатомического строения Северокавказских видов полыни / А.Ф. Гаммерман // Ученые записки Пятигорского Фармацевтического Института. 1961. - Т.5. - С.83-93.

20. Гепатотропное действие сесквитерпеновых лактонов / В.Н. Сыров и др. // Хим.-фармац. журн. 1991. - Т.25, №2. - С.42-45.

21. Государственная фармакопея СССР: в 2 вып. 11 изд., доп. - М.: Медицина, 1987. - вып.1. - 334 е.; вып.2. - 398 с.

22. Демченко, И.Т. Непрерывная количественная регистрация локального мозгового кровотока с помощью водородного электрода и ЭПГ / И.Т. Демченко, С.В. Буров // Физиол. журн. СССР. 1971. -Т.57, №10. - С. 1553-1555.

23. Демченко, И.Т. Измерение органного кровотока с помощью водородного клиренса / И.Т. Демченко // Физиол. журн. СССР им. Сеченова. 1981. -Т.67, №1. - С.178-183.

24. Денситометр «Sorbfil» Электронный ресурс. Электрон, дан. — Краснодар, 2007. - Режим доступа: http://www.sorbfil.com/densindex.htm. - Загл. с экрана.

25. Джиргалова, Е.А. Подбор эфироносных видов полыни и особенности их возделывания в условиях северо-западного Прикаспия: автореф. дис. канд. сельхоз. наук: 06.01.09 / Екатерина Алексеевна Джиргалова. Астрахань, 2006. -23 с.

26. Дроздова, И.Л. Антиоксидантная активность полифенольных комплексов Viola Odorata L. и Fragaria Vesca L. / И.Л. Дроздова, P.A. Бубенчиков // Раст. ресурсы. 2004. - Т.40, вып.2. - С. 92-95.

27. Жидкостная колоночная хроматография: в 2-х т. / под. ред. 3. Дейла. -М.: Мир, 1978. -Т.1.-560 е.; Т.2. 472 с.

28. Запрометов, М.Н. Фенольные соединения и методы их исследования / М.Н. Запрометов // Биохимические методы в физиологии растений. М., 1971. -С. 185-207.

29. Зарубина, Л.А. Химический состав и антимикробные свойства эфирного масла из надземной части Artemisia glauca / Л.А. Зарубина, Г.И. Калинкина, А.Д. Дембицкий // Раст. ресурсы. 1993. - Т.29, вып.З. - С.70-73.

30. Ижик, Н.К. Полевая всхожесть семян: биология, экология, агротехника / Н.К. Ижик. Киев: Урожай, 1976. - 200 с.

31. Измеров, Н.Ф. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии / Н.Ф. Измеров, И.В. Саноцкий, К.К. Сидоров. М.: Медицина, 1977. - 197 с.

32. Исследование аминокислотного состава сфагнума болотного / Н.А.

33. Буркина и др. // Химия раст. сырья. 2000. - №1. - С.81-83.

34. Карагандинский институт фитохимии Электронный ресурс. Электрон, дан. - Караганда, 2007. - Режим доступа: http://karaganda.central.kz/orgs/ fitoinst. - Загл. с экрана.

35. Касымов, Ш.З. Успехи химии сесквитерпеновых лактонов / Ш.З. Ка-сымов // Химия природ, соединений. 1982. - №5. - С.551-569.

36. Киселев, А.В. Молекулярные основы адсорбционной хроматографии / А.В. Киселев, Д.П. Пошкус, Я.И. Яшин. М.: Химия, 1986. - 272 с.

37. Клиническая фармакология по Гудману и Гилману / под ред. А.Г. Гилмана, Дж. Хардман, JL Лимберд.; пер. с англ. М.: Практика, 2006. - 1648 с.

38. Колесников, М.П. Формы кремния в растениях / М.П. Колесников // Успехи биол. химии. 2001. - Т.41. - С.301-332.

39. Компьютерная программа прогноза спектра биологической активности химических соединений PASS INet Электронный ресурс. Электрон, дан. -М., 2007. - Режим доступа: http://www.ibmc.msk.ru/PASS. - Загл. с экрана.

40. Коновалов, Д.А., Природные азулены / Д.А. Коновалов // Раст. ресурсы. 1995. - Т.31, вып. 1. - С.101-125.

41. Коновалова, О.А. О химическом составе Artemisia frigida / О.А. Коновалова, В.И. Шейченко // Химия природ, соединений. 1991. - №1. - С.143-145.

42. Костюк, В.А. Биорадикалы и биоантиоксиданты / В.А. Костюк, А.И. Потапович. Минск: БГУ, 2004. - 179 с.

43. Красиков В.Д. Основы планарной хроматографии / В.Д. Красиков. -СПб.: Химиздат, 2005. 232 с.

44. Куркин, В.А. Фармакогнозия: учебник для студентов фармацевтических вузов / В.А. Куркин. Самара: Офорт, СамГМУ, 2004. - 1180 с.

45. Лагунин, А.А. Компьютерный поиск потенциальных антигипертензивных соединений комбинированного действия / А.А. Лагунин, Д.А. Филимонов, В.В. Поройков // Хим.-фармац. журн. 2001. - Т.35, вып.7. - С.28-34.

46. Лакин, Г.Ф. Биометрия: учеб. пособие для биол. спец. вузов / Г.Ф. Ла-кин. 4-е изд., перераб. и доп. - М.: Высш. шк., 1990. - 352 с.

47. Лакоза, Г.Н. К фармакологии тауремизина / Г.Н. Лакоза, А.И. Лесков // Фармакология и токсикология. 1966. - вып.29, №4. - С.444-447.

48. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия: учебное пособие / под ред. Г.П. Яковлева, К.Ф. Блиновой. СПб.: СпецЛит, 2004. - 765 с.

49. Лекарственное сырье растительного и животного происхождения. Фармакогнозия: учебное пособие / под ред. Г.П. Яковлева. СПб.: СпецЛит, 2006. -845 с.

50. Леонова, Т.Г. Конспект рода Artemisia L. (Asteraceae) флоры Европейской части СССР / Т.Г. Леонова // Новости систематики высших растений. 1987. -№1. - С.177-201.

51. Майборода, Д.А. Синтез и изучение спектральных и фармакологических свойств 1-амино-4-(5-арилозаксолил-2)-бутадиенов-1,3 / Д.А. Майборода, Е.В. Бабаев, Л.В. Гончаренко // Хим.-фармац. журн. 1998. - №32, вып.6. - С.24-28.

52. Масс-спектрометрическое изучение сесквитерпенового лактона гроссмизина и его производных / П.И. Захаров и др. // Химия природ, соединений. 1977. - №3. - С.344-349.

53. Методика исследования при интродукции лекарственных растений // Лекарственное растениеводство: обзор, информация. 1984. -№3. - 51с.

54. Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств // Ведомости Фармакол. Ком. 1998. - №1. -С.27-32.

55. Материалы к изучению полыней Северного Кавказа как противоглистных средств / Д.А. Муравьева и др. // Ученые записки Пятигорского Фармацевтического Института. 1961. - Т.5. - С.5-13.

56. Муравьева, Д.А. Фармакогнозия с основами биохимии лекарственныхвеществ / Д.А. Муравьева. М.: Медицина, 1981. - 656 с.

57. Назаренко, М.В. Новый сесквитерпеновый у-лактон, сиверсинин / М.В. Назаренко, Л.И. Леонтьева // Химия природ, соединений. 1968. - вып.2, №6. - С.327-330.

58. Определение аминокислотного состава микробных матов водных экосистем байкальского региона с помощью тонкослойной хроматографии / О.М. Калашникова и др. // Вестн. Моск. Ун-та. Сер.2. Химия. 2004. - Т.45, №6. -С.393-398.

59. Оптимизация синтеза и фармакологического исследования веществ на основе компьютерного прогнозирования их спектров биологической активности / В .В. Поройков и др. // Хим.-фармац. журн. 1996. - Т.30, №9. - С.20-23.

60. О сесквитерпеновых лактонах из Artemisia caucasica / О.А. Коновалова и др. // Химия природ, соединений. 1971. - №6. - С.741-744.

61. О структурных особенностях потенциальных противосудорожных веществ лигандов ГАМКА-рецепторов / В.А. Фроловский и др. // Хим.-фармац. журн. - 1999. -№11.- С.40-44.

62. Официальный сайт Всемирной Организации Здравоохранения. Какие лекарства от малярии наиболее эффективны? Электронный ресурс. Электрон, дан. - 2007. - Режим доступа: http://www.who.int/features/qa/26/ru/ index.html. -Загл. с экрана.

63. Оценка показателей антиоксидантной активности препаратов на основе лекарственного растительного сырья / А.П. Арзамасцев и др. // Хим.-фармац. журн. 1999. - № 11. - С. 17-20.

64. Оценка содержания суммы флавоноидов в настойке календулы / Е.К. Слуева и др. // Фармация. -2003. -№1. С. 13-15.

65. Пак, Р.Н. Ранозаживляющие свойства эфирного масла Artemisia glabella Kar. et Kir. / Р.Н. Пак, A.A. Бейсенбаева, Р.Б. Сейдахметова // Раст. ресурсы.- 2004. Т.40, вып.2. - С. 101-107.

66. Пат. 2257597 Российская Федерация, МПК G01 V9/00, G01 N 33/48. Способ оценки загрязнения окружающей среды тяжелыми металлами / Вельц Н.Ю. (РФ). -№2003130798/15; заявл. 20.10.03; опубл. 27.07.05, Бюл. №21. -4 с.

67. Перспективы использования в медицинской практике эфирномасличных растений флоры Сибири / Г.И. Калинкина и др. // Химия раст. сырья.- 2000.-№3.-С. 5-12.

68. Пластины Sorbfil Электронный ресурс. Электрон, дан. - Краснодар, 2007. - Режим доступа: http://www.sorbfll.com/platesindex.htm. - Загл. с экрана.

69. Поройков, В.В. Компьютерное предсказание биологической активности веществ: пределы возможного /В.В. Поройков // Химия в России. 1999. -№2. - С.8-12.

70. Poroikov, V.V. How to acquire new biological activities in old compounds by computer prediction / V.V. Poroikov, D.A. Filimonov // J. of Computer-Aided Molecular Design.-2002.-N16.-P.819-824.

71. Предварительная оценка растений семейства сложноцветных на содержание сесквитерпеновых лактонов / К.С. Рыбалко и др. // Аптеч. дело. -1965. №5. - С.37-41.

72. Противовоспалительные свойства арглабина и гидрохлорида 11, 13-дигидро-13-диметиламиноарглабина / А.Ж. Абильдаева и др. // Эксперим. и клинич. фармакология. 2004. - Т.67, № 1. - С.37-39.

73. Противовоспалительные свойства эфирного масла Artemisia glabella Kar. et Kir. / Р.Б. Сейдахметова и др. // Раст. ресурсы. 2002. - Т.38, вып.1. -С.102-107.

74. Раевский, К.С. Нейрохимические аспекты фармакологии ГАМК-ергических веществ / К.С. Раевский // Фармакология и токсикология 1981. - №5.- С.517-528.

75. Раевский, О.А. Дескрипторы молекулярной структуры в компьютерном дизайне биологически активных веществ / О.А. Раевский // Успехи химии. -1999. Т.68, вып.6. - С.555-576.

76. Растительные дубильные вещества / Ш.Ю. Исламбеков и др. // Химия природ, соединений. 1990. - №3. - С. 293-307.

77. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование: семейство Asteraceae (Compositae). СПб.: Наука, 1993 - 352 с.

78. Регистр Лекарственных Средств России Электронный ресурс. -Электрон, дан. М., 2007. - Режим доступа: http://www.rlsnet.ru/. - Загл. с экрана.

79. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под ред. В.П. Фисенко. М.: Ремедиум, 2000. -399 с.

80. Рыбалко, К.С. О сесквитерпеновых лактонах полыней беловатой и австрийской / К.С. Рыбалко // Журн. общей химии. 1963. - Т.ЗЗ, вып.8. - С.2734-2739.

81. Рыбалко, К.С. Природные сесквитерпеновые лактоны / К.С. Рыбалко, А.И. Баньковский, В.И. Шейченко // Лекарственные растения. М.: Колос, 1969. -Т.15. - С.168-175.

82. Рыбалко, К.С. Природные сесквитерпеновые лактоны / К.С. Рыбалко. -М.: Медицина, 1978.-319 с.

83. Саитбаева, И.М. Ангидроаустрицин из Artemisia leucodes / И.М. Саит-баева, А. Маллабаев, Г.П. Сидякин // Химия природ, соединений. 1983. - №3. -С.391-392.

84. Самойлова, Г.В. Особенности географии и экологии видов рода Artemisia L. в Омской области / Г.В. Самойлова, Н.В. Сорокина // Вестн. Омскогоун-та. 1997. - вып.З. - С.38-41.

85. СанПиН 2.3.2. 1078-01: Гигиенические требования безопасности пищевой ценности пищевых продуктов. М.: ИнтерСЭН, 2002. - 168 с.

86. Сезонная динамика кормовых ресурсов и питание сайгака на естественном пастбище в полупустыне / Б.Д. Абатуров и др. // Успехи современ. биологии. 1998. - Т.118, вып.5. - С. 561-582.

87. Семьянов, А.В. ГАМК-ергическое торможение в ЦНС: типы ГАМК-рецепторов и механизмы тонического ГАМК-опосредованного тормозного действия / А.В. Семьянов // Нейрофизиология. 2002. - Т.34, №1. - С. 82-92.

88. Середин, P.M. Краткий систематико-географический обзор полыней Ставропольского края / P.M. Середин // Ученые записки Пятигорского Фармацевтического Института. -.1961, Т.5. - С.115-122.

89. Серкеров, С.В. Терпеноиды Artemisia splendens / С.В. Серкеров, А.Н. Алескерова // Химия природ, соединений. 1991. - №2. - С.203-206.

90. Серкеров, С.В. Хемотаксономическое разнообразие представителей рода Artemisia (Asteraceae) флоры Азербайджана. Сообщение 1. Сесквитерпено-вые лактоны A. fragrans S. L. / С.В. Серкеров, А.Н. Алескерова // Раст. ресурсы. -2004. Т.40, вып.4. - С. 105-110.

91. Сернов, JI.H. Элементы экспериментальной фармакологии / JI.H. Сер-нов, В.В. Гацура. М.: Медицина, 2000. - 352 с.

92. Сесквитерпеновые лактоны высших растений как возможный источник новых антипротозойных препаратов / М.А. Рубинчик и др. // Раст. ресурсы. 1976.-Т.12, вып.2.-С. 170-171.

93. Сесквитерпеновые лактоны и флавоноиды Artemisia albida / Е.М. Су-лейменов и др. // Химия природ, соединений. 2005. - Т.41, №6. - С.689-691.

94. Синтез и изучение противоопухолевого действия макрогетероцикли-ческих соединений и их комплексов с металлами / М.К. Исляйкин и др. // Хим.-фармац. журн. 1997. - Т31, №8. - С. 19-22.

95. Синтез эфиров тритерпеноидов группы лупана и их гепатопротектор-ная активность / О.Б. Флехтер и др. // Биоорганич. химия. 2000. - Т.26, №3.1. С.215-223.

96. Скрипачева, JI. В добрый путь, Арглабин! / JI. Скрипачева // Казахстан. Фармац. Вестн. 2002. - Т. 14, №162. - С.9-11.

97. Скурихин, В.Н. Методы анализа витаминов А, Е, D и каротина в кормах, биологических объектах и продуктах животноводства: справ, изд. / В.Н. Скурихин, С.В. Шабаев. М.: Химия, 1996. - 96 с.

98. Слесарев, В.И. Основы химии живого: учебник для вузов / В.И. Сле-сарев. СПб: Химиздат, 2000. - 768 с.

99. Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков и др.. Воронеж: Водолей, 2004. - 528 с.

100. Сур, С.В. Методы выделения, идентификации и определения терпено-вых соединений (обзор) / С.В. Сур // Хим.-фармац. журн. 1990. - Т.24, №5. -С.42-50.

101. Тестирование компьютерной системы для предсказания биологической активности PASS на выборке новых химических соединений / Т.А. Глорио-зова и др. // Хим.-фармац. журн. 1998. - №32, вып. 12. - С32-39.

102. Трапков, В.А. Поиск новых противоязвенных препаратов с использованием компьютерной системы прогнозирования антиульцерогенной активности / В.А. Трапков, А.П. Будунова, О.А. Бурова // Вопросы мед. химии. 1997. - Т.43, №1. -С.41-57.

103. Тринус, Ф.П. Нестероидные противовоспалительные средства / Ф.П. Тринус, Н.А. Мохорт, Б.М. Клебанов. Киев: Здоров'я, 1975. - 240 с.

104. Фармакология / под ред. Р.Н. Аляутдина. М.: Гэотар-мед, 2004. - 592с.

105. Флора СССР / под ред. B.JI. Комарова. M.-JL: Изд-во АН СССР, 1961. -Т.26. - С.498-499.

106. Фруентов, Н.К. Лекарственные растения Дальнего Востока. Издание третье, расширенное и дополненное / Н.К. Фруентов. Хабаровск: Кн. изд-во, 1987.-352 с.

107. Ю9.Харкевич, Д.А. Фармакология: учебник, 8-е изд., перераб., доп. ииспр. / Д.А. Харкевич. М.: Гэотар-медиа, 2005. - 736 с.

108. Химическая характеристика тысячелистника обыкновенного, произрастающего в Узбекистане / К.С. Тилляев и др. // Раст. ресурсы. 1973. - Т.9, вып.1. - С.58-62.

109. Ш.Хмельницкий, Р.А. Хромато-масс-спектрометрия (Методы аналитической химии) / Р.А. Хмельницкий. М.: Химия, 1984. - 216 с.

110. Хроматография в тонких слоях / под ред. Э. Шталя. М.: Мир, 1965.508 с.

111. Цеденова, Л.П. Антимикробная активность эфирного масла Artemisia lerchiana, произрастающей в Калмыкии / Л.П. Цеденова, О.Е. Романов, Т.О. Романова // Раст. ресурсы. 1999. - Т.35, вып.4. - С.58-61.

112. Экспериментальная оценка антипаразитарных свойств эфирных масел некоторых видов Artemisia (Asteraceae) флоры Азербайджана / Р.Э. Чобанов и др. // Раст. ресурсы. 2004. - Т.40, вып.4. - С.94-98.

113. Элементный состав аира болотного (Acorus Calamus L.) / A.M. Гурьев и др. // Химия раст. сырья. 2003. - №2. - С.45-48.

114. Яковлева, Е.В. Изучение компонентного состава аминокислот в гомеопатических матричных настойках арники горной / Е.В. Яковлева, З.П. Костен-никова, Л.А. Баратова // Фармация. 2002. - №5. - С. 11-14.

115. A chemosystematic analysis of tribes of Asteraceae involving sesquiterpene lactones and flavonoids / V.P. Emerenciano et al. // Phytochemistry. 1987. -Vol.26,N12.-P.3103-3115.

116. A New Sesquiterpene Lactone of Notoseris henryi / Liao Zhi Xin et al. // Chinese Chemical Letters. 2002. - Vol. 13, N8. - P.736-737.

117. Anti-inflammatory activity of hydroxyachillin, a sesquiterpene lactone from Tanacetum microphyllum / M.J. Abad et al. // Planta Med. 1994. - Vol.60, N3. -P.228-231.

118. Anti-Inflammatory Compounds of Plant Origin. Part I. Action on Arachi-donic Acid Pathway, Nitric Oxide and Nuclear Factor кВ (NF-кВ) / Joao B. Calixto et al. // Planta Med. 2003. - Vol.69. - P.973-983.

119. Artemisinin versus Nonartemisinin Combination Therapy for Uncomplicated Malaria: Randomized Clinical Trials from Four Sites in Uganda / Adoke Yeka et al. // PLoS Medicine. 2005. - Vol.2, N7. - P.0654-0662.

120. Chemical constituents of Artemisia arborescens and the effect of the aqueous extract on rat isolated smooth muscle / M. Abu Zarga et al. // Planta Med. 1995. -Vol.61, N3.-P.242-5.

121. Chemical constituents of Notoseris rhombiformis / Z.X. Liao et al. // Yao Xue Xue Bao. 2002. - Vol.37, N1. - P.37-40.

122. Cheong, H. Desacetylmatricarin, an anti-allergic component from Taraxacum platycarpum / H. Cheong, E.J. Choi, G.S. Yoo // Planta Med. 1998. - Vol.64, N6. -P.577-578.

123. Combination of chromatographic and spectroscopic methods for the isolation and characterization of polar guaianolides from Achillea asiatica / Sabine Glasl et al. // J. of Chromatography A. 2001. - Vol.936. - P. 193-200.

124. Copp, B.R. Antimycobacterial natural products / Brent R. Copp // Nat. Prod. Rep. 2003. - Vol.20. - P.535-557.

125. Croteau, R. Monoterpene and Sesquiterpene Cyclases / R. Croteau, D.E. Cane // Methods of Enzymology. 1985. - Vol.110. - P.383-405.

126. Cubukcu, B. Flavonoids of Artemisia austriaca / Bayhan Cubukcu, Gulay Melikoglu // Planta Med. 1995. - Vol.61. - P.488.

127. Curcumin-Artemisinin Combination Therapy for Malaria / Dalavaikodi-halli Nanjaiah Nandakumar et al. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2006. - Vol.50, N5. - P. 1859-1860.

128. De Candolle, A.P. Prodromus Systematis Naturalis Regni Vegetabilis / A.P. De Candolle // Paris. 1837. - Vol.6. - P.93.

129. Evaluation of Tanacetum larvatum for an anti-inflammatory activity and for the protection against indomethacin-induced ulcerogenesis in rats / Silvana D. Pet-rovic et al. // J. of Ethnopharmacology. 2003. - Vol.87. - P.109-113.

130. Ferakova, V. Artemisia austriaca Jacq. a critical species from the karyo-taxonomical point of view / Viera Ferakova // Preslia, Praha. - 1997. - Vol.69. - P.95-113.

131. Flora Europaea Электронный ресурс. Электрон, дан. - Great Britain, 2007. - Режим доступа: http://rbg-web2.rbge. org.uk/FE/fe.html. - Загл. с экрана.

132. Floristic composition and plant biomass of the grasslands in the vicinity of Pavlodar, Kazakhstan / Ic'hiroku Hayashi et al. // Grassland Science. 2006. - Vol.52.- P.141-146.

133. Fraga, B.M. Natural sesquiterpenoids / Braulio M. Fraga // Nat. Prod. Rep.- 1999.-Vol.16.-P.21-38.

134. Fraga, B.M. Natural sesquiterpenoids / Braulio M. Fraga // Nat. Prod. Rep.- 2000. Vol. 17. - P.483-504.

135. Fraga, B.M. Natural sesquiterpenoids / Braulio M. Fraga // Nat. Prod. Rep.- 2001. Vol. 18. - P.650-673.

136. Fraga, B.M. Natural sesquiterpenoids / Braulio M. Fraga // Nat. Prod. Rep.- 2003. Vol.20. - P.392-413.

137. Fraga, B.M. Natural sesquiterpenoids / Braulio M. Fraga // Nat. Prod. Rep.- 2005. Vol.22. - P.465^86.

138. Hansch, С. р-а-л Analysis; method for the correlation of biological activity and chemical structure / C. Hansch, T. Fujita // J. Am. Chem. Soc. 1964. - Vol.86.1. Р.1616-1626.

139. Хэнч, К. Об использовании количественных соотношений структура-активность (КССА) при конструировании лекарств (обзор) / Хэнч Корвин // Хим.-фармац. журн. 1980. -№10. -С.15-30.

140. Huang, J.H. (+)-Hydrastine, a potent competitive antagonist at mammalian GABAa receptors / J.H. Huang, G.A. Johnston // Br. J. Pharmacol. 1990. - Vol.99, N4. -P.727-730.146.HyperChem 7.52

141. Individual and combined effects of berberine and santonin on spore germination of some fungi / B. Singh et al. // Folia Microbiol. 2001. - Vol.46, N2. -P. 137-42.

142. Inhibition by hydroxyachillin, sesquiterpene lactone from Tanacetum mi-crophyllum, of PMA-induced mouse ear oedema / A.M. Silvan et al. // Inflamm Res. -1996. Vol.45, N6. - P.289-292.

143. Jodynis-Liebert, J. Effect of Sesquiterpene Lactones on Antioxidant Enzymes and Some Drug-Metabolizing Enzymes in Rat Liver and Kidney / Jadwiga Jodynis-Liebert, Marek Murias, Elzbieta Bloszyk // Planta Med. 1999. - Vol.66. -P. 199-205.

144. Kelsey, R.G. The use of sesquiterpene lactones as taxonomic markers in the shrubby species of Artemisia (section Tridentatae) in Montana / R.G. Kelsey, M.S. Morris, F. Shafizadeh // J. of Range Management. 1976. - Vol.29. - P.502-505.

145. Li-Yan, W. Anti-inflammatory activity of new guaiane type sesquiterpene from Wikstroemia indica / Wang Li-Yan, Unehara Tomoko, Kitanaka Susumi // Chem. and Pharm. Bull. 2005. - Vol.53, N1 - P. 137-139.

146. Marco, J.A. Natural products from the genus Artemisia L. In: Studies in Natural Products Chemistry / J.A. Marco, O. Barbera // Atta ur Rahman eds. Amsterdam. 1990. - Vol.7. - P.201-264.

147. Margoob, M.A. Thin Layer Chromatography (TLC) in Detection of Current Nature of Drug Abuse in Kashmir / Mushtaq A. Margoob, Abdul B. Majid, M. Dhuha // JK-Practitioner. 2004. - Vol. 11, N4. - P.257-260.

148. Marin, G.H. Parthenolide has apoptotic and cytotoxic selective effect on B-chronic lymphocytic leukemia cells / Gustavo Horacio Marin, Eduardo Mansilla // J, Appl. Biomed. 2006. - N4. - P. 135-139.

149. Mazur, Y. The structure of arborescine, a new sesquiterpene from Artemisia arborescens L. / Y. Mazur, A. Meisels // Chem. and Ind. 1956. - N1. - P.492.

150. Melikoglu, G. A Sesquiterpene Lactone from Artemisia austriaca / G. Me-likoglu // J. Fac. Pharm. Istanbul. 1998. - Vol.32. - P.9-11.

151. Michalska, K. Sesquiterpene Lactones from Taraxacum obovatum / Klaudia Michalska, Wanda Kisiel // Planta Med. 2003. - Vol.69. - P. 181-183.

152. Michalska, K. Taxonomically significant guaianolides from Taraxacum obovatum / Klaudia Michalska, Wanda Kisiel // Biochemical Systematics and Ecology. 2004. - Vol.32. - P.765-768.

153. Neue Acetylenverbindungen aus Chrysantemum-Arten / F. Bohlmann et al. // Chem. Ber. 1964.'- Jg.97, Ht.4. - S.l 179-1192.

154. Qualitative TLC determination of some polycyclic aromatic hydrocarbons in sugar-beet / Eva S. Loncar et al. // J. Serb. Chem. Soc. 2005. - Vol.70, N10. -P.1237-1242.

155. Relaxant effects of Hydrastis canadensis L. and its major alkaloids on guinea pig isolated trachea / H. Abdel-Haq et al. // Pharmacol. Toxicol. 2000. -Vol.87, N5. -P.218-222.

156. Rios, J.L. Medicinal plants and antimicrobial activity / J.L. Rios, M.C. Redo // J. of Ethnopharmacology. 2005. - Vol. 100. - P.80-84.

157. Rodriguez, E. Biological Activities of Sesquiterpene Lactones. Review / Eloy Rodriguez, G.H.N. Towers, J.C. Mitchell // Phytochemistry. 1976. - Vol.15. -P.1573-1580.

158. Role of the betaine/GABA transporter (BGT-1/GAT2) for the control of epilepsy / Arne Schousboe et al. // European J. of Pharmacology. 2004. - Vol.500, N1-3. -P.281-287.

159. Seaman, F.C. Sesquiterpene lactones as taxonomic characters in the Asteraceae / F.C. Seaman // The Botanical Review. 1982. - Vol.48, N2. - P. 121-595.

160. Selassie, C.D. QSAR: Then and Now / C.D. Selassie, S.B. Mekapati, R.P. Verma // Current Topics in Medicinal Chemistry. 2002. - Vol.2, N12. - P.1357-1379.

161. Sesquiterpenes and Flavonoid Aglycones from a Hungarian Taxon of the Achillea millefolium Group / Sabine Glasl et al. // Z. Naturforsch. 2002. - Vol.57. -P.976-982.

162. Studies on the antiinflammatory, antipyretic and analgesic activities of santonin / M.M. al-Harbi et al. // Jpn. J. Pharmacol. 1994. - Vol.64, N3. - P. 135-139.

163. Suchy, M. Proof of structure of guaianolides artabsin and arborescin / M. Suchy, V. Herout, F. Sorm // Col. Czech. Chem. Com. 1964. - Vol.29. - P. 1829.

164. Susceptibility of Cholangiocarcinoma Cells to Parthenolide-Induced Apop-tosis / Jong-Hyun Kim et al. // Cancer Res. 2005. - Vol.65, N14. - P.6312-6320.

165. Synthesis of diacetoxy acetal derivatives of santonin and their enhancing effects on HL-60 leukemia cell differentiation / S.H. Kim et al. // Arch. Pharm. Res. -2006. Vol.29, N1. - P.40-45.

166. TLC and HPLC characteristics of desacetylmatricarin, leucodin, achillin and their 8a-angeloxy-derivatives / S. Glasl et al. // Pharmazie. 2003. - Vol.58, N7.- Р.487-490.

167. The Essential Oils of Artemisia austriaca Jacq. and Artemisia spicigera C.Koch, from Turkey / Zuhal Guvenalp et al. // Flavour and Fragrance J. 1998. — Vol.13. -P.26-28.

168. Wang, W.-M. On the origin and development of Artemisia (Asteraceae) in the geological past / Wei-Ming Wang // Botanical J. of the Linnean Society. 2004. -Vol. 145.-P.331-336.

169. Zielinska, K. Sesquiterpenoids from roots of Taraxacum laevigatum and Taraxacum disseminatum / K. Zielinska, W. Kisiel // Phytochemistry. 2000. - Vol.54.- P.791-794.it

Оглавление диссертации Коновалов, Юрий Борисович :: 0 ::

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия и фармакогнозия", Коновалов, Юрий Борисович, автореферат

Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 0 года, Коновалов, Юрий Борисович

Похожие научные работы

Каталог диссертаций