Фармакогностическое изучение медуницы неясной и медуницы узколистной

Казакова, Валентина Сергеевна

Диссертации по фармакологии → Фармацевтическая химия и фармакогнозия

Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Фармакогностическое изучение медуницы неясной и медуницы узколистной

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Казакова, Валентина Сергеевна Курск 2009 г.

Ученая степень: кандидата фармацевтических наук

ВАК РФ: 15.00.02

Автореферат диссертации по фармакологии на тему Фармакогностическое изучение медуницы неясной и медуницы узколистной

'На правах рукописи

КАЗАКОВА ВАЛЕНТИНА СЕРГЕЕВНА

ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ МЕДУНИЦЫ НЕЯСНОЙ И МЕДУНИЦЫ УЗКОЛИСТНОЙ

15.00.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

о \

Курск-2009

003473906

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении Высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научный руководитель: доктор фармацевтических наук, профессор Бубенчикова Валентина Николаевна

Официальные оппоненты:

доктор фармацевтических наук, профессор Челомбитько Вячеслав Александрович доктор фармацевтических наук, профессор Ермакова Валентина Алексеевна

Ведущая организация:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Защита состоится «_ _» ¿¿'ИР^у*' 2009 г. в хУ^ часов на заседании

диссертационного совета Д 208.039.03 при ГОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3).

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке ГОУ ВПО КГМУ Росздрава

Автореферат разослан « » «¿/£2*./ 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Лекарственные растения по-прежнему остаются одним из источников получения новых лекарственных средств. Поиск новых лекарственных растений с целью их дальнейшего использования в медицинской практике и создания на их основе эффективных фитопрепаратов для лечения и профилактики заболеваний является актуальной задачей. Для успешного решения данной задачи необходимо использовать опыт народной медицины, а также новейшие достижения фармацевтической науки и практики.

Среди большого разнообразия лекарственных растений отечественной флоры значительный интерес представляют растения рода медуница: медуница неясная (Pulmonaria obschura Dumort.) и медуница узколистная (Pulmonaria angustifolia L.), семейства Бурачниковые (Boraginaceae).

Медуница неясная и медуница узколистная широко распространены в областях Центральной России, имеют достаточную сырьевую базу и издавна используются в народной медицине для лечения заболеваний верхних дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта, кроветворной системы. Медуница лекарственная (Pulmonaria officinalis L.) включена в Британскую травяную фармакопею в качестве отхаркивающего средства. В последнее время при изучении химического состава растений рода медуница установлено в них наличие микроэлементов кроветворного комплекса, что свидетельствует о перспективности их изучения. Однако, в химическом отношении медуница неясная и медуница узколистная изучены не достаточно. Таким образом, всестороннее изучение медуницы неясной и медуницы узколистной является актуальной проблемой.

Цель и задачи исследования. Фармакогностическое изучение медуницы неясной и медуницы узколистной, выявления возможности использования их в качестве источника получения фитопрепаратов.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

- проведение общего фитохимического анализа медуницы неясной и медуницы узколистной;

- выделение полисахаридных комплексов и изучение их состава;

- разработка методик количественного определения основных групп биологически активных веществ;

- проведение морфолого-анатомических исследований и выявление диагностических признаков;

- установление товароведческих показателей сырья;

- проведение предварительных фармакологических исследований медуницы узколистной и медуницы неясной, комплексов биологически активных веществ, полученных из них.

Научпая новизна. Проведено фотохимическое изучение листьев медуницы неясной и медуницы узколистной. Установлено наличие углеводных производных, азотсодержащих соединений, органических кислот, тритерпеновых соединений, каротиноидов, фенольных соединений (дубильных веществ, кумаринов, фенолкарбоновых кислот, флавоноидов). Исследован аминокислотный и минеральный состав.

Различными методами хроматографии (бумажной, тонкослойной, ВЭЖХ) в изученных растениях идентифицировано 18 веществ фенольной природы. Новыми для них были кумарины: умбеллиферон, скополетин, эскулетин, дигидрокумарин; производные фенолкарбоновых кислот: галловая кислота, цикориевая кислота, о-кумаровая кислота, феруловая кислота, розмариновая кислота; флавоноиды: лютеолин-7-глюкозид, кемпферол, изорамнетин, лютеолин, кверцетин.

Впервые выделены и изучены полисахаридные комплексы медуницы неясной и медуницы узколистной. Полисахаридные комплексы представлены водорастворимыми полисахаридами, пектиновыми веществами, гемицеллюлозами А и Б. Изучен их качественный и количественный моносахаридный состав. Проведено определение функциональных групп пектиновых веществ.

Для объективной оценки качества листьев растений рода медуница впервые разработаны методики гравиметрического определения суммы полисахаридов и спектрофотометрического определения суммы флавоноидов.

Проведено морфолого-анатомическое изучение листьев медуницы неясной и медуницы узколистной; установлены диагностические признаки для определения подлинности сырья. Разработаны числовые показатели, регламентирующие качество сырья.

Проведенные фармакологические исследования показали наличие у изученных видов медуниц и полисахаридных комплексов, полученных из них, отхаркивающего, противовоспалительного действия, антимикробной активности.

Практическая значимость. Полученные результаты позволяют расширить сведения о химическом составе, биологической активности растений рода медуница. Результаты фармакологических исследований являются экспериментальным обоснованием для дальнейшего углубленного изучения растений рода медуница с целью внедрения их в научную медицину.

микродиагностический анализ сырья «Медуницы листья» (Акт внедрения в научно-исследовательскую работу кафедры фармакологии и биохимии ГОУ ВПО «Орловский государственный университет» от 16.01.2008 г.).

Положения, выносимые на защиту:

- результаты фитохимического исследования листьев медуницы неясной и медуницы узколистной;

- данные по изучению фенольных соединений и полисахаридов;

-результаты исследований по разработке методик количественного

определения суммы полисахаридов и суммы флавоноидов;

- результаты морфолого-анатомических исследований с установлением диагностических признаков сырья;

- результаты исследований по разработке числовых показателей качества сырья медуниц;

- результаты предварительных фармакологических исследований растений рода медуница.

Апробация работы. Основные положения диссертации апробированы и представлены на международной конференции молодых ученых-медиков (Курск, 2008); на межвузовских научных конференциях студентов и молодых ученых-медиков (Курск, 2008, 2009); на итоговых научных сессиях КГМУ и отделения медико-биологических наук Центрального Черноземного центра РАМН (Курск, 2008, 2009); на международной научной краеведческой конференции «Краеведение в Курском крае: прошлое и современность. Межрегиональные связи» (Курск, 2007, 2008); на XV, XVI Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2008, 2009); на I Российском фитотерапевтическом съезде (Москва, 2008); на международном форуме «Интегративная медицина, 2008» (Москва, 2008); на международной научно-практической конференции «Биологически активные соединения природного происхождения: Фитотерапия, фармацевтический маркетинг,

фармацевтическая технология, фармакология, ботаника» (Белгород, 2008); на международной научно-практической конференции «Лекарственные растения и биологически активные вещества: фитотерапия, фармация, фармакология» (Белгород, 2008); на научно-практической конференции с международным участием «Фармакогнозия XXI столетия» (Харьков, 2009); на международной научно-практической конференции «Ботанические сады в 21 веке: сохранение биоразнообразия, стратегия развития и инновационные решения» (Белгород, 2009).

Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Курского государственного медицинского университета, № государственной регистрации 01.200.953678.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 17 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 145 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы (1 глава), главы «Объекты и методы исследования», экспериментальной части (4 главы), общих выводов, списка литературы, приложения. В тексте содержится 27 таблиц, 34 рисунка. Список цитируемой литературы включает 150 источников, из них - 6 на иностранных языках.

Во введении обоснована актуальность выбранной темы, определены цель и задачи исследования, показана научная и практическая значимость работы, основные положения, выносимые на защиту.

В первой главе (обзор литературы) приведены сведения, отражающие современное состояние изучения медуницы неясной и медуницы узколистной, их применение в народной медицине, фармакологические исследования, обоснован выбор объектов исследования.

Во второй главе изложены объекты и методы исследований.

Материал третьей главы отражает результаты изучения качественного и количественного состава групп биологически активных веществ листьев медуницы неясной и медуницы узколистной.

В четвертой главе представлены материалы по выделению и исследованию полисахаридных комплексов из листьев изучаемых растений.

Пятая глава посвящена исследованию морфологических и микродиагностических признаков, товароведческих показателей сырья медуницы неясной и медуницы узколистной, разработке методик количественного определения полисахаридов, флавоноидов.

В шестой главе приведены результаты изучения фармакологической активности листьев медуницы неясной и медуницы узколистной.

В приложении содержатся материалы, подтверждающие практическую значимость проведенных исследований.

Основное содержание работы

Изучение качественного и количественного состава биологически активных веществ листьев медуницы неясной и медуницы узколистной

При проведении качественного анализа на различные группы природных соединений в листьях медуницы неясной и медуницы узколистной обнаружены углеводные производные, азотсодержащие соединения, органические кислоты, тритерпеновые соединения, каротиноиды, фенольные соединения (дубильные вещества, кумарины, производные фенолкарбоновых кислот, флавоноиды).

При количественном определении установлено, что содержание суммы азотистых оснований в листьях исследованных видов составляет от

0,51% (медуница узколистная) до 0,86% (медуница неясная) (в том числе холина 0,042%-0,065%), аскорбиновой кислоты 0,04% (медуница неясная) -0,19% (медуница узколистная), суммы свободных органических кислот 4,54% (медуница неясная) - 5,45% (медуница узколистная), тритерпеновых сапонинов 0,029% (медуница неясная) - 0,040% (медуница узколистная), дубильных веществ 21,72% (медуница неясная) - 31,52% (медуница узколистная), флавоноидов 0,52% (медуница неясная) - 2,17% (медуница узколистная), каротиноидов 1,04 мг% (медуница неясная) - 8,33мг% (медуница узколистная).

Исследован аминокислотный состав изучаемых растений и проведено его количественное определение с использованием аминокислотного анализатора. Аминокислоты представлены аспарагнновой кислотой, треонином, серином, глутаминовой кислотой, лизином, гистидином, аргинином. Установлено, что суммарное содержание свободных аминокислот колеблется от 2,40 мг% до 14,88 мг%. Наибольшее суммарное содержание свободных аминокислот обнаружено в листьях медуницы неясной (14,88 мг%). Доминирующими свободными аминокислотами являются треонин (1,041 мг%), аспарагиновая кислота (0,461 мг%).

Аминокислотный состав изученных растений исследован впервые.

Проведено изучение минерального состава методом рентгенофлюоресцентного анализа. Использованная нами методика позволила определить в золе изучаемых растений 47 макро- и микроэлементов. Результаты анализа показали, что преобладающими макроэлементами являются калий (1,33%), кальций (0,41%), фосфор (0,07%), из микроэлементов доминируют железо (0,01%), марганец (0,003%), медь (0,003%), цинк (0,004%), кремний (0,14%). Из тяжелых металлов определено содержание алюминия (0,005%), кадмия (0,000007%), свинца (0,0003%), что укладывается в нормы ПДК (для овощей и фруктов). Полученные результаты свидетельствуют, что листья медуницы неясной и медуницы узколистной накапливают существенные количества микроэлементов кроветворного

комплекса (железо, марганец, медь), что согласуется с литературными данными и исследуемые растения могут быть источниками этих элементов.

С использованием различных методов хроматографии (бумажной, тонкослойной, ВЭЖХ) и ряда диагноспгческих реактивов установлен качественный и количественный состав фенольных соединений. Всего идентифицировано 18 веществ фенольной природы, из них 4 кумарина, 6 флавоноидных соединений, 1 фенолокислота, 7 оксикоричных кислот (табл.1).

Таблица 1

Фенольпые соединения листьев медуницы неясной и медуницы узколистной,

идентифицированные методом ВЭЖХ

Растение Группа БАВ Идентифицированные вещества Содержание веществ в выделенной смеси, %

Флавоноиды Рутин Кемпферол Изорамнетин Кверцетин 6,15 . 1,19 2,37 0,72

Кумарины Умбеллиферон Дигидрокумарин 1,58 1,61

Медуница Фенолокислоты Галловая кислота 13,59

неясная Оксикоричные кислоты Хлорогеновая кислота Кофейная кислота Цикориевая кислота О-кумаровая кислота Феруловая кислота Розмариновая кислота Коричная кислота 5.19 0,89 1.20 1,91 0,42 5,27 1,22

Рутин Лютеолин-7-глюкозид 4,07 10,53

Флавоноиды Кемпферол Изорамнетин Лютеолин Кверцетин 1,09 3,63 0,51 0,01

Медуница узколистная Кумарины Умбеллиферон Скополетин Эскулетин 0,67 1,27 2,15

Фенолокислоты Галловая кислота 5,78

Оксикоричные кислоты Хлорогеновая кислота Кофейная кислота Цикориевая кислота Розмариновая кислота Коричная кислота 1,34 0,72 1,89 1,61 0,58

Преобладающими среди флавоноидов являются рутин у медуницы неясной и лютеолин-7-глюкозид у медуницы узколистной, среди кумаринов - эскулетин у медуницы узколистной; среди оксикоричных кислот -хлорогеновая кислота у медуницы неясной, цикориевая и розмариновая кислота у медуницы узколистной.

Такие фенольные соединения, как кемпферол, изорамнетин, кверцетин, лютеолин, лютеолин-7-глюкозид, умбеллиферон, дигидрокумарин, скополетин, эскулетин, галловая кислота, цикориевая кислота, розмариновая кислота, о-кумаровая кислота, феруловая кислота в исследуемых нами растениях идентифицированы впервые.

Получение и исследование полисахарндных комплексов листьев медуницы неясной и медуницы узколистной

Анализ литературных данных показал, что одной из групп действующих веществ растений рода медуница являются полисахариды.

Для выделения полисахарндных комплексов сырье предварительно обрабатывали 70% спиртом этиловым для удаления фенольных соединений, а далее шрот сырья использовали для выделения полисахарндных комплексов.

Полисахаридные комплексы получали последовательно фракционно: водорастворимые полисахариды (ВРПС), пектины (ПВ), гемицеллюлозы (ГЦ А и ГЦ Б) (рис.1).

Выход ВРПС колебался от 8,40% до 9,45%, ПВ - от 14,54% до 18,80%, ГЦ А - от 11,08% до 14,42%, ГЦ Б - от 2,76% до 3,31 % (табл. 2).

Максимальное количество ВРПС отмечено в листьях медуницы узколистной, пектиновых веществ - в листьях медуницы неясной. Преобладающими у всех видов являются пектиновые вещества.

Таблица 2

Выход фракций полисахаридных комплексов из листьев медуницы неясной __н медуницы узколистной_

Название растения Фракции полисахаридов, %

водорастворимый полисахаридный комплекс пектиновый комплекс гемицеллюлоза А гемицеллюлоза Б

Медуница неясная 8,40 18,80 11,08 2,76

Медуница узколистная 9,45 14,54 14,42 3,31

Для анализа полисахаридных комплексов их подвергали гидролизу раствором кислоты серной (1 моль/л). Хроматографией в гидролизатах ВРПС обнаружили 7 веществ моносахаридного характера: арабинозу, галактозу, глюкозу, ксилозу, рамнозу, глюкуроновую и галактуроновую кислоты; в гидролизатах пектиновых веществ 4 моносахарида: арабинозу, галактозу, глюкозу, галактуроновую кислоту; в гидролизатах ГЦ А и ГЦ Б 5 веществ: арабинозу, галактозу, глюкозу, ксилозу и рамнозу.

Содержание моносахаридов определяли денситометрически после хроматографии гидролизатов в тонком слое сорбента (система растворителей: н-бутанол-кислота уксусная-вода 3:1:1). Установлено, что в водорастворимых полисахаридных комплексах медуницы неясной и медуницы узколистной преобладающими являются арабиноза (13,8-16,1%), галактоза (11,2-12,7%). Основу пектиновых веществ составляет галактуроновая кислота (89,7-91,4%). В гемицеллюлозе А и Б преобладающим моносахаридом является ксилоза (7,8-8,6%), что указывает на наличие полисахаридов типа ксилана.

Титриметрическим методом определили некоторые аналитические характеристики пектиновых веществ: содержание свободных карбоксильных групп (13,95-19,88%), метоксилированных карбоксильных групп (0,630,67%), метоксильных групп (0,43-0,46%).

Таким образом, по степени этерификации карбоксильных групп (\=3,28; 4,30 < 50%) пектиновые вещества из листьев медуницы неясной и медуницы узколистной отнесены к низкоэтерифицированным, а высокое содержание

свободных карбоксильных групп (13,95%, 19,88%) говорит об их комплексообразующей способности и возможности использования в качестве детоксикантов.

Исследование подлинности и показателей качества сырья «Медуницы листья»

Возможность применения в медицинской практике листьев медуницы неясной и медуницы узколистной, делает необходимым разработку показателей качества и характеристик подлинности для данных видов сырья.

Изучение морфологических особенностей сырья медуниц позволило сформулировать раздел «Внешние признаки» сырья «Медуницы листья».

Медупица неясная - смесь цельных или частично измельченных листьев. Листья крупные, широкояйцевидные, цельнокрайние с сердцевидным основанием, суженные в длинный черешок. Длина листьев 815 см, ширина - 4-8 см. Листья с двух сторон жестко-щетинистые. Цвет листьев зеленый. Запах слабый. Вкус - сладковато-слизистый.

Медуница узколистная - смесь цельных или частично измельченных листьев. Листья узколанцетные, цельнокрайние, постепенно суживающиеся в черешок. Длина листьев 20-30 см, ширина 2-3 см. Листья бархатистые, густо покрыты мелкими, довольно мягкими волосками - щетинками; черешок жесткощетинисто-мохнатый. Цвет листьев зеленый. Запах слабый. Вкус -горьковато-вяжущий.

Проведенные анатомические исследования позволили выявить основные микродиагностические признаки для сырья «Медуницы листья».

Лист дорзовентрального строения. Клетки верхнего эпидермиса прямостенные или слегка извилистые, клетки нижнего эпидермиса более извилистостенные. У медуницы узколистной клетки эпидермиса с четковидными утолщениями.

Рис.2 Фрагмент нижнего эпидермиса листа медуницы неясной (Увед.х120)

1 - головчатый волосок

2 - простой одноклеточный толстостенный волосок, заострённый на верхушке

Рис, 4 Фрагмент края листа медуницы неясной (Увел.х120)

1 - простой одноклеточный толстостенный волосок с заостренной верхушкой

2 - простой одноклеточный волосок с вытянутым остроконечном

Рйс.6 Фрагмент края листа медушыы узколистной (Увея.хЗОО)

1 - простой одноклеточный толстостенный волосок с заострённой верхушкой

2 - головчатый, волосок

Рис.3 Фрагмент нижнего эпидермиса листа медуницы неясной (Увел.хЗОО)

1 - простой одноклеточный волосок с вытянутым остроконечкем (колпачковидные);

2 - простой многоклеточный тупоконечный шнуровидный волосок.

Рис.5 Поперечный срез черешка медуницы неясной (Увея.х52,5) ! -эпидермис

2 - проводящие пучки

3 - основная паренхима

4 - уголковая, колленхима

Рис.7 Поперечный срез черешка листа медушшы. узколистной (Увел.х24,5)

1 ~ эпидермис

2 — проводящие пучки

3 - основная паренхима

4 - уголковая колленхима

Устьица округлые, погруженные, аномоцитного типа, расположенные в основном на нижнем эпидермисе. Замыкающие клетки устьиц имеют почковидную форму. Волоски простые и головчатые.

У медуницы неясной: 1) простые одноклеточные колпачковидные волоски, часто с вытянутым остроконечием; 2) простые длинные одноклеточные толстостенные волоски, заостренные на верхушке; 3) простые тонкостенные 3-4-клеточные шнуровидные волоски с тупой верхушкой; 4) головчатые волоски с одноклеточной головкой и 1-3-клеточной ножкой. У медуницы узколистной: 1) простые одноклеточные толстостенные волоски с заостренной верхушкой; 2) головчатые волоски с одноклеточной головкой и одно-, трехклеточной ножкой.

Черешок листа медуницы неясной почковидной формы, у медуницы узколистной - треугольной формы с роговидными выростами по бокам. У медуницы неясной 3 проводящих пучка: в центре черешка крупный пучок и в боковых крыльях по одному мелкому пучку; у медуницы узколистной 5 проводящих пучков: в центре черешка крупный пучок и в боковых крыльях по два мелких пучка.

Для установления доброкачественности сырья определены числовые показатели: содержание общей золы не более 12%; золы, нерастворимой в 10% хлористоводородной кислоте не более 2%, влажность не более 14%. Экстрактивных веществ, извлекаемых водой для медуницы неясной и извлекаемых 30% спиртом этиловым для медуницы узколистной не менее 30%. (табл. 3).

Для объективной оценки качества сырья медуницы впервые разработаны методики количественного определения суммы полисахаридов и суммы флавоноидов.

Для количественного определения полисахаридов использовали гравиметрический метод, основанный на экстракции полисахаридов из сырья с последующим их осаждением 96% спиртом этиловым.

Таблица 3

Результаты определения общих числовых показателей листьев медуницы _неясной и медуницы узколистной _

Показатель Листья медуницы неясной Листья медуницы узколистной

Содержание суммы полисахаридов Не менее 9% Не менее 9%

Содержание суммы флавоноидов Не менее 0,5 % Не менее 0,5%

Влажность Не более 14% Не более 14%

Зола общая Не более 12% Не более 12%

Зола, не растворимая в 10% растворе кислоты хлористоводородной Не более 2% Не более 2%

Экстрактивных веществ, извлекаемых водой Не более 30%

Экстрактивных веществ, извлекаемых 30% спиртом этиловым Не более 30%

Определены оптимальные условия извлечения и осаждения полисахаридов: степень измельчения сырья - 1мм, экстрагент - вода, нагревание 30 минут, 4-х кратная экстракция, соотношение сырья и экстрагента 1:10, использование 4-х кратного объема 96% спирта этилового по отношению к извлечению для осаждения полисахаридов.

Установлено, что содержание суммы полисахаридов медуниц колеблется от 9,63% до 11,70% (табл.4).

Для количественного определения суммы флавоноидов была разработана методика их спектрофотометрического определения с применением реакции комплексообразования с алюминия хлоридом в среде 70% спирта этилового. Образующийся окрашенный комплекс имеет максимум поглощения при 405 нм. При изучении условий экстракции определено, что максимально флавоноиды извлекаются из сырья при степени измельчения 1мм, кипящим 70% спиртом этиловым через 30 минут при соотношении сырье-растворитель 1:100.

Учитывая, что флавоноиды в исследуемых растениях содержатся в форме монозидов, биозидов с преобладанием монозидов расчет суммы флавоноидов вели в пересчете на ГСО гиперозид.

Таблица 4

Содержание суммы полисахаридов в листьях медуницы (п=5, Р= 95%)_

№ Наименование Место сбора Метрологическая характеристика

п/п сырья сырья методики

X, % S2 S Ах Еотн,%

1 Медуница неясная Окрестности г.Курска, 2006 г. 10,98 0,0358 0,1870 0,5200 4,74

2 Медуница неясная Курск, Знаменская роща, 2008 г. 10,90 0,0130 0,1140 0,3200 2,94

3 Медуница неясная Курск, Знаменская роща, 2007 г. 9,63 0,0111 0,1054 0,2900 3,01

4 Медуница узколистная Центральночерноземный заповедник, им. проф. В.В. Алехина, 2006 г. 9,80 0,0030 0,0550 0,1520 1,55

5 Медуница узколистная Орловская обл., окрестности г. Орла, 2007 г. 11,70 0,0090 0,0950 0,2640 2,26

6 Медуница узколистная Центральночерноземный заповедник, им. проф. В.В. Алехина, 2008 г. 10,15 0,0260 0,1600 0,4470 4,40

По предложенной методике были проанализированы исследуемые образцы сырья медуницы неясной и медуницы узколистной. Анализ показал, что содержание суммы флавоноидов в них колеблется от 0,52% до 2,17%.

На основании полученных данных установлена норма содержания полисахаридов не менее 9%, суммы флавоноидов не менее 0,5%.

Изучение фармакологической активности медуницы неясной и медуницы узколистной

Исследование острой токсичности изучаемых настоев в дозах от 1 г/кг до 5 г/кг, полисахаридных комплексов в дозах от 100 мг/кг до 300 мг/кг

показало, что все они по классификации К.К. Сидорова относятся к классу практически нетоксичных.

Исследование фармакологической активности медуницы неясной и медуницы узколистной включало определение отхаркивающего, противовоспалительного, капилляроукрепляющего, антимикробного действия.

О наличии отхаркивающих свойств судили по величине коэффициента ускорения движения ресничек мерцательного эпителия пищевода лягушки. Эффективность отхаркивающего действия сравнивали с препаратом заводского изготовления «Мукалтин».

Установлено, что настои, полисахаридные комплексы из листьев исследуемых медуниц повышают двигательную активность мерцательного эпителия, следовательно, обладают отхаркивающими свойствами.

Наиболее выраженное отхаркивающее действие наблюдается у полисахаридных комплексов (увеличение двигательной активности на 42,94±1,73% у медуницы неясной и на 47,38+2,42% у медуницы узколистной). По силе отхаркивающего действия изученные полисахариды превышают действие препарата «Мукалтин» (увеличение двигательной активности на 38,33±1,35%).

Для оценки противовоспалительной активности определяли влияние фитопрепаратов из исследуемых растений на разные стадии процесса воспаления. Под действием фитопрепаратов происходило угнетение степени развития отека конечности мышей, вызванное введением формалина. Максимальное уменьшение величины отека отмечается при введении животным настоя из листьев медуницы узколистной (40,75%).

Исследование влияния на пролиферативный компонент воспаления показало, что под влиянием препаратов происходило достоверное снижение воспалительного процесса, замедляя развитие гранулемы, сопоставимое с препаратом сравнения «Индометацин».

При изучении влияния исследуемых фитопрепаратов на проницаемость капилляров установлено, что при их введении увеличивается латентный период появления пятен окрашивания с 7,30+0,17 мин (настой листьев медуницы неясной) до 7,73+0,15 мин (настой из листьев медуницы узколистной) и с 6,35+0,23 мин (полисахаридный комплекс медуницы узколистной) до 6,40+0,24 мин (полисахаридный комплекс медуницы неясной), а также уменьшается их диаметр с 1,01±0,04 см (настой из листьев медуницы неясной) до 1,05+0,04 см (настой из листьев медуницы узколистной) и с 1,15+0,04 см (полисахаридный комплекс медуницы узколистной) до 1,23+0,03 см (полисахаридный комплекс медуницы неясной).

При изучении антибактериальной активности исследуемых фитопрепаратов (настоев, пектиновых веществ) установлено, что все они обладают антибактериальной активностью. Наиболее выраженную антибактериальную активность проявили пектиновые вещества.

ВЫВОДЫ

1. Проведено фитохимическое изучение листьев медуницы неясной и медуницы узколистной. Установлено наличие углеводов, азотсодержащих соединений, органических кислот, тритерпеновых соединений, каротиноидов, фенольных соединений, аминокислот, микро- и макроэлементов.

2. С использованием различных методов хроматографии (бумажной, тонкослойной, ВЭЖХ) в изученных растениях идентифицировано 18 фенольных соединений. Фенольные соединения представлены кумаринами: скополетином, умбеллифероном, эскулетином, дигидрокумарином; производными фенолкарбоновых кислот: галловой, хлорогеновой, кофейной, цикориевой, о-кумаровой, феруловой, розмариновой, коричной;

флавоноидами: лютеолиаом, кверцетином, кемпфсролом, изорамнетином, цинарозидом, рутином. Большинство из них идентифицированы впервые.

3. Из исследуемых видов медуниц впервые выделены и изучены различные фракции полисахаридных комплексов (ВРПС, ПВ, ГЦ А, ГЦ Б). Выход их составил: ВРПС от 8,40 % до 9,45%, ПВ от 14,54 % до 18,80 %, ГЦ А от 11,08 % до 14,42 %, ГЦ Б от 2,76 % до 3,31%. Изучен их качественный и количественный моносахаридный состав. Проведено определение функциональных групп пектиновых веществ.

4. Впервые разработаны методики гравиметрического определения суммы полисахаридов и спектрофотометрического определения суммы флавоновдов для лекарственного сырья «Медуницы листья». Содержание суммы полисахаридов в изученных растениях колеблется от 9,63% до 11,70%, суммы флавопоидов от 0,52% до 2,17%

5. Проведено изучение морфологических и микродиагностических признаков листьев медуницы неясной и медуницы узколистной. Выявлены признаки: лист дорзовентрального строения с различными видами простых и головчатых волосков; форма клеток эпидермиса, форма черешка от треугольной до почковидной с одним центральным крупным проводящим пучком и 2-4 расположенных в боковых выростах, позволяющие проводить диагностику сырья медуниц.

6. Установлены числовые показатели, характеризующие качество сырья медуниц: общей золы не более 12%, золы нерастворимой в 10% растворе кислоты хлористоводородной не более 2%, влажность не более 14 %. Экстрактивных веществ, извлекаемых водой для медуницы неясной и 30 % спиртом этиловым для медуницы узколистной - не менее 30%.

7. Исследование острой токсичности настоев и полисахаридных комплексов показало, что данные препараты относятся к классу практически нетоксичных.

8. Изучено отхаркивающее действие настоев и полисахаридных комплексов исследуемых растений. Наиболее выраженным отхаркивающим

действием обладают иолисахаридные комплексы, полученные из листьев изученных растений (увеличение двигательной активности на 42,94% у медуницы неясной и 47,38% у медуницы узколистной). По силе отхаркивающего действия изученные полисахаридные комплексы превышают действие препарата заводского производства «Мукалтин».

9. Установлено противовоспалительное действие исследуемых растений, проявляющееся в угнетении стадий экссудации и пролиферации, влиянии на проницаемость капилляров, сочетающееся у них с наличием антимикробной активности.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Бубенчикова, В.Н. Фотохимическое изучение медуницы неясной / В.Н. Бубенчикова, B.C. Казакова // Университетская наука: теория, практика, инновации: сб. тр. 73-й науч. конф. КГМУ и сес. Центрально-Чернозем. науч. центра РАМН: в 3 т. - Курск: КГМУ, 2008. - Т.З. - С. 41-44.

2. Бубенчикова, В.Н. Изучение качественного и количественного состава флавоноидных соединений медуницы неясной / В.Н. Бубенчикова, B.C. Казакова // Тр. 2-Междунар. науч. краевед, конф. «Краеведение в Курском крае: прошлое и современность. Межрегиональные связи» (2 ноября 2007 г.; г. Курск). - Курск, 2007 - С. 42-44.

3. Бубенчикова, В.Н. Исследование водных извлечений из листьев медуницы неясной (Pulmonaria obscura Dumort.) / В.Н. Бубенчикова, B.C. Казакова // Тр. 2-Междунар. науч. краевед, конф. «Краеведение в Курском крае: прошлое и современность. Межрегиональные связи» (2 ноября 2007 г.; г. Курск). - Курск, 2007. - С. 44-46.

4. Бубенчикова, В.Н. Полисахаридный и аминокислотный состав растений рода медуница и подмаренник / В.Н. Бубенчикова, Ю.А. Понарьина, B.C. Казакова // XV Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство» (1418 апр. 2008 г.): тез. докл. - М, 2008. - С. 596.

5. Казакова, B.C. Аминокислотный состав медуницы неясной / B.C. Казакова// Сб. тр. II Междунар. науч. копф. молодых ученых-медиков: в 3 т.Курск: КГМУ, 2008. - Т. III. - С. 287-289.

6. Бубенчикова, В.Н. Определение показателей качества сырья ((Медуницы лист» / В.Н. Бубенчикова, B.C. Казакова // I Рос. фитотерапевт, съезд: сб. науч. тр. - М., 2008. -С. 234 -236.

7. Бубенчикова, B.II. Медуница неясная - новый источник полисахаридов / В.Н. Бубенчикова, B.C. Казакова // Фармация. - 2008. -№ 2. - С. 19-21.

8. Бубенчикова, В.Н. Изучение веществ первичного биосинтеза травы подмаренника цепкого и листьев медуницы неясной / В.Н. Бубенчикова, Ю.А. Старчак, B.C. Казакова // Материалы междунар. научно-практ. конф. «Лекарственные растения и биологически активные вещества: фитотерапия, фармация, фармакология» (8 февраля 2008 г.). - Белгород: БелГУ, 2008. - С. 92-96.

9. Изучение минерального состава травы подмаренника цепкого и листьев медуницы неясной / В.Н. Бубенчикова, Ю.А. Старчак, И.Л. Осетрова, B.C. Казакова // Материалы междунар. научно-практ. конф. «Биологически активные соединения природного происхождения: Фитотерапия, фармацевтический маркетинг, фармацевтическая технология, фармакология, ботаника» (30 июня -3 июля 2008 г.). -Белгород: БелГУ, 2008. - С. 51-54.

10. Изучение азотсодержащих соединений медуницы неясной и подмаренника настоящего / В.Н. Бубенчикова, Ю.А. Старчак, И.Л. Осетрова, B.C. Казакова // Междунар. форум «Интегративная медицина 2008» (6-8 июня 2008 г.): в 3 ч., ч. III: Лекарственные растительные средства. Фитотерапия. - М.,2008.- С. 93-98.

11. Бубенчикова, В.Н. Изучение полисахаридного состава листьев медуницы узколистной / В.Н. Бубенчикова, B.C. Казакова, В.Д. Собакинских // Тр. 3-междунар. науч. конф. «Актуальные проблемы регионоведения». -Курск, 2008. - 4.1. - С. 40-42 .

12. Бубенчикова, В.Н. Изучение анатомического строения листа медуницы узколистной / В.Н. Бубенчикова, B.C. Казакова // Университетская наука: теория, практика, инновации: сб. тр. 74-й науч. конф. КГМУ, сес. Центрально-Чернозем. науч. центра РАМН и отд. РАЕН: в 3 т. - Курск: КГМУ, 2009. - Т. II. - С. 202-204.

13. Бубенчикова, В.Н. Фотохимическое изучение листьев медуницы узколистной / В.Н. Бубенчикова, B.C. Казакова // Кластерные подходы в современной фармации и фармацевтическом образовании: сб. материалов Междунар. науч.-практ. конф. (г. Белгород, 20-21 ноября 2008 г.) / под ред. проф. И.В. Спичак. - Белгород: Изд-во БелГУ, 2008. - С. 332.

14. Бубенчикова, В.Н. Изучение отхаркивающей активности медуницы неясной / В.Н. Бубенчикова, B.C. Казакова // Фармакогнозия XXI столптя. Досягнення та перспективи: матер1али ювшейно1 науково-практично1 конференци з м1ждародною участю.- Харив, 2009.- С. 15.

15. Бубенчикова, В.Н. Флавоноиды растений рода медуница и подмаренник / В.Н. Бубенчикова, B.C. Казакова, Ю.А. Старчак // XVI Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство» (6-10 аир. 2009 г.): тез. докл.- М., 2009. -С. 625.

16. Казакова, B.C. Изучение отхаркивающей активности медуницы узколистной / B.C. Казакова // Материалы 74-й межвузовской итоговой научной конференции студентов и молодых ученых «Молодежная наука и современность» (21-22 апреля 2009 г.). - Курск, 2009. - 4.II. - С. 177-178.

17.Бубенчикова, В.Н. Состав и противовоспалительная активность водорастворимых полисахаридов медуницы узколистной / В.Н. Бубенчикова,

B.C. Казакова, О.С. Богатырева // Материалы междунар. научно-практ. конф. «Ботанические сады в 21 веке: сохранение биоразнообразия, стратегия развития и инновационные решения» (18-21 мая 2009 г.). - Белгород, 2009. -

C. 418-420. .

Подписано в печать 26.05.2009 г. Формат 60 х 84/16. Бумага офсетная. Усл.печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ № 2305

Отпечатано в ЗАО "ПолиграфРесурсы" Россия, 308002, г. Белгород, пр-т Б.Хмельницкого, 131, офис 100

Оглавление диссертации Казакова, Валентина Сергеевна :: 2009 :: Курск

Введение

Глава 1 РАСТЕНИЯ РОДА МЕДУНИЦА, ИХ ХИМИЧЕСКИЙ

СОСТАВ И ПРИМЕНЕНИЕ.

1.1 Ботаническая характеристика медуницы неясной и медуницы узколистной. 1.2, , Химический состав растений рода медуница.

1.3 Применение растений рода медуница в народной медицине и фармакологические исследования.

Глава 2 ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Характеристика объектов исследования.

2.2 Методы фитохимического исследования.

2.2.1 Приготовление водных экстрактов для проведения качественных реакций.

2.2.2 Углеводные производные.

2.2.2.1 Свободные сахара.

2.2.2.2 Связанные сахара.

2.2.3 Азотсодержащие соединения.

2.2.3.1 Азотистые основания.

2.2.3.1.1 Качественное обнаружение.

2.2.3.1.2 Количественное определение.

2.2.3.2 Аминокислоты.

2.2.3.2.1 Качественное обнаружение.

2.2.3.2.2. Количественное определение.

2.2.4 Дубильные вещества.

2.2.4.1 Качественное обнаружение.

2.2.4.2 Количественное определение.

2.2.5 Органические кислоты.

2.2.5.1 Качественное обнаружение.

2.2.5.2 Количественное определение свободных органических кислот.

2.2.5.3 Количественное определение аскорбиновой кислоты.

2.2.6 Приготовление спирто-водных извлечений и фракционирование природных соединений органическими растворителями.

2.2.7 Кумарины.

2.2.8 Фенолкарбоновые кислоты.

2.2.9 Флавоноиды.

2.2.9.1. Качественное определение.

2.2.9.2. Количественное определение.

2.2.10 Изучение фенольных соединений методом ВЭЖХ.

2.2.11 Тритерпеновые соединения.

2.2.11.1 Качественное обнаружение.

2.2.11.2 Количественное определение.

2.2.12 Приготовление гексановых экстрактов.

2.2.13 Каротиноиды.

2.2.13.1 Качественное обнаружение.

2.2.13.2 Количественное определение.

2.2.14 Минеральный состав растений.

2.3 Методы изучения углеводов.

2.3.1 Кислотный гидролиз.

2.3.2 Хроматографический анализ.

2.3.3 Количественное определение моносахаридного состава полисахаридных комплексов.

2.3.4 Количественное определение функциональных групп пектиновых веществ.

2.4 Определение числовых показателей сырья. 49'

2.4.1 Определение влажности.

2.4.2 Определение золы.

2.4.3 Определение экстрактивных веществ.

2.5 Морфолого-анатомические исследования.

2.6- Методы токсико-фармакологических исследований.

2.6.1 * Изучение острой токсичности.

2.6.2 Изучение отхаркивающего действия.

2.6.3 Изучение противовоспалительной активности.

2.6.3.1 Влияние на процессы экссудации.

2.6.3.2 Влияние на пролиферацию.

2.6.3.3 Влияние на проницаемость капилляров у кроликов.

2.6.4 Изучение антимикробной активности.

2.7. Статистическая обработка результатов эксперимента.

Глава 3 ИЗУЧЕНИЕ КАЧЕСТВЕННОГО И КОЛИЧЕСТВЕННОГО СОСТАВА ОСНОВНЫХ ГРУПП БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ЛИСТЬЕВ МЕДУНИЦЫ

НЕЯСНОЙ И МЕДУНИЦЫ УЗКОЛИСТНОЙ.

3.1 Углеводные производные.

3.1.1 Свободные сахара.

3.1.2 Связанные сахара.

3.2 Азотсодержащие соединения.

3.2.1 Азотистые основания.

3.2.1.1 Качественное обнаружение.

3.2.1.2 Количественное определение азотистых оснований.

3.2.2 Определение аминокислот.

3.3 Дубильные вещества.

3.3.1 Качественное обнаружение.

3.3.2 Количественное определение.

3.4 Органические кислоты.

3.4.1 Качественное обнаружение.

3.4.2 Количественное определение свободных органических кислот.

3.4.3 Количественное определение аскорбиновой кислоты.

3.5 Кумарины.

3.6 Фенолкарбоновые кислоты.

3.7 Флавоноиды.

3.7.1 Качественное определение.

3.8 Изучение фенольных соединений листьев медуницы неясной и медуницы узколистной методом ВЭЖХ.

3.9 Тритерпеновые соединения.

3.9.1 Качественное обнаружение.

3.9.2 Количественное определение тритерпеновых соединений.

3.10 Каротиноиды.

3.10.1 Качественное обнаружение.

3.10.2 Количественное определение каротиноидов.

3.11 Минеральный состав растений.

Глава 4 ПОЛУЧЕНИЕ И ИССЛЕДОВАНИЕ ПОЛИ С АХ АРИДНЫХ КОМПЛЕКСОВ ЛИСТЬЕВ МЕДУНИЦЫ НЕЯСНОЙ И МЕДУНИЦЫ УЗКОЛИСТНОЙ.

4.1 Выделение полисахаридов.

4.1.1 Выделение водорастворимых полисахаридных комплексов.

4.1.2 Выделение пектиновых веществ.

4.1.3 Выделение гемицеллюлозы А и Б.

4.2 Исследование углеводных производных.

4.2.1 Исследование продуктов кислотного гидролиза полисахаридных комплексов методом хроматографии на бумаге.

4.2.2 Количественное определение моносахаридного состава полисахаридных комплексов.

4.2.3. Количественное определение функциональных групп пектиновых веществ.

Глава 5 ИССЛЕДОВАНИЕ ПОДЛИННОСТИ, ПОКАЗАТЕЛЕЙ

КАЧЕСТВА СЫРЬЯ «МЕДУНИЦЫ ЛИСТЬЯ».

5.1 Разработка характеристик подлинности сырья «Медуницы листья».

5.1.1. Исследование морфологических признаков сырья

Медуницы листья».

5.1.2 Характеристика микродиагностических признаков сырья

Медуницы листья».

5.2. Числовые показатели.

5.2.1 Определение влажности.

5.2.2 Определение золы.

5.2.3 Определение экстрактивных веществ.

5.3 Разработка методики количественного определения действующих веществ растений рода Медуница. 100"

5.3.1 Количественное определение полисахаридов.

5.3.1.1 Изучение условий гравиметрического определения суммы полисахаридов.

5.3.1.2 Методика количественного определения суммы полисахаридов.

5.3.2 Количественное определение суммы флавоноидов.

5.3.3 Разработка методики количественного определения суммы флавоноидов.

5.3.3.1 Изучение условий спектрофотометрического определения суммы флавоноидов.

5.3.3.2 Методика количественного определения суммы флавоноидов.

5.3.3.3 Содержание суммы флавоноидов в листьях медуницы неясной и медуницы узколистной.

Глава 6 ИЗУЧЕНИЕ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ

АКТИВНОСТИ МЕДУНИЦЫ НЕЯСНОЙ И МЕДУНИЦЫ УЗКОЛИСТНОЙ.

6.1 Изучение острой токсичности.

6.2 Изучение отхаркивающего действия.

6.3 Изучение противовоспалительной активности.

6.3.1 Влияние на процессы экссудации.

6.3.2 Влияние на пролиферацию.

6.3.3 Влияние на проницаемость капилляров у кроликов.

6.4 Изучение антимикробной активности.

Выводы.

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия и фармакогнозия", Казакова, Валентина Сергеевна, автореферат

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

- проведение общего фитохимического анализа медуницы неясной и медуницы узколистной;

- выделение полисахаридных комплексов и изучение их состава;

- разработка методик количественного определения основных групп биологически активных веществ;

- проведение морфолого-анатомических исследований и выявление диагностических признаков;

- установление товароведческих показателей сырья;

Научная! новизна. Проведено фотохимическое1 изучение листьев медуницы неясной и медуницы узколистной. Установлено наличие углеводных производных, азотсодержащих соединений, органических кислот, тритерпеновых соединений, каротиноидов, фенольных соединений (дубильных веществ, кумаринов, фенолкарбоновых кислот, флавоноидов). Исследован аминокислотный и минеральный состав.

Различными методами хроматографии (бумажной, тонкослойной, ВЭЖХ) в изученных растениях идентифицировано 18 веществ фенольной природы. Новыми для них были кумарины: умбеллиферон, скополетин, эскулетин, дигидрокумарин; производные фенолкарбоновых кислот: галловая кислота,' цикориевая кислота, о-кумаровая кислота, феруловая кислота, розмариновая кислота; флавоноиды: лютеолин-7-глюкозид, кемпферол, изорамнетин, лютеолин, кверцетин.

На основании проведенных исследований разработаны и внедрены: методика количественного определения суммы полисахаридов в листьях медуницы неясной (Акт внедрения в научно-исследовательскую работу кафедры фармакологии и биохимии ГОУ ВПО «Орловский государственный университет» от 16.01.2008 г.; акт внедрения в работу ОКК ЗАО фирмы «Здоровье» от 19.01.2009 г.); микродиагностический анализ сырья «Медуницы листья» (Акт внедрения в научно-исследовательскую работу кафедры фармакологии и биохимии ГОУ ВПО «Орловский государственный университет» от 16.01.2008 г.).

Положения, выносимые на защиту:

- результаты фитохимического исследования листьев медуницы неясной и медуницы узколистной;

- данные по изучению фенольных соединений и полисахаридов;

- результаты исследований по разработке методик количественного определения суммы полисахаридов и суммы флавоноидов;

- результаты морфолого-анатомических исследований с установлением диагностических признаков сырья;

- результаты исследований по разработке числовых показателей качества сырья медуниц;

- результаты предварительных фармакологических исследований растений рода медуница.

Интегративная медицина, 2008» (Москва, 2008); на международной научно-практической конференции «Биологически активные соединения природного происхождения: Фитотерапия, фармацевтический маркетинг, фармацевтическая технология, фармакология, ботаника» (Белгород, 2008); на международной научно-практической конференции «Лекарственные растения и биологически активные вещества: фитотерапия, фармация, фармакология» (Белгород, 2008); на научно-практической конференции с международным участием «Фармакогнозия XXI столетия» (Харьков, 2009); на международной научно-практической конференции «Ботанические сады в 21 веке: сохранение биоразнообразия, стратегия развития и инновационные решения» (Белгород, 2009).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 17 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 145 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы (1 глава), главы «Объекты и методы исследования», ' экспериментальной части (4 главы), общих выводов, списка литературы, приложения. В тексте содержится 27 таблиц, 34 рисунка. Список цитируемой литературы включает 150 источников, из них - 6 на иностранных языках.

Заключение диссертационного исследования на тему "Фармакогностическое изучение медуницы неясной и медуницы узколистной"

126 ВЫВОДЫ

1. Проведено фитохнмическое изучение листьев медуницы неясной и медуницы узколистной. Установлено наличие: углеводов, азотсодержащих соединений, органических кислот, тритерпеновых соединений, каротиноидов, фенольных соединений, аминокислот, микро- и макроэлементов.

3. Из исследуемых видов медуниц впервые выделены и изучены различные фракции полисахаридных комплексов (ВРПС, ПВ, ГЦ А, ГЦ Б). Выход их составил: ВРПС от 8,40 % до 9,45%, ПВ от 14,54 % до 18,80 %, ГЦ А от 11,08 % до 14,42 %, ГЦ В от 2,76 % до 3,31%. Изучен их качественный и количественный моносахаридный состав. Проведено определение функциональных групп пектиновых веществ.

4. Впервые разработаны методики количественного определения действующих веществ: гравиметрического определения суммы полисахаридов и спектрофотометрического определения суммы флавоноидов для лекарственного сырья «Медуницы листья». Содержание суммы полисахаридов в изученных растениях колеблется от 9,63% до 11,70%, суммы флавоноидов от 0,52% до 2,17%

5. ' Проведено изучение морфологических и микродиагностических признаков листьев медуницы неясной и медуницы узколистной. Выявлены признаки: лист дорзовентрального строения с различными видами простых и головчатых волосков; форма клеток эпидермиса, форма черешка от треугольной до почковидной с одним центральным крупным проводящим пучком и 2-4 расположенных в боковых выростах, позволяющие проводить диагностику сырья медуниц.

6. Установлены числовые показатели, характеризующие качество сырья медуниц: общей золы не более 12%, золы нерастворимой в 10% хлористоводородной кислоте не более 2%, влажность - не более 14 %. Экстрактивных веществ для медуницы неясной извлекаемых водой и 30 % спиртом этиловым для медуницы узколистной - не менее 30%.

8. Изучено отхаркивающее действие настоев и полисахаридных комплексов исследуемых растений. Наиболее выраженным отхаркивающим действием обладают полисахаридные комплексы, полученные из листьев (42,94% у медуницы неясной и 47,38% у медуницы узколистной). По силе отхаркивающего действия изученные полисахаридные комплексы превышают действие препарата заводского производства «Мукалтин».

9. Установлено противовоспалительное действие исследуемых растений, проявляющееся в угнетении стадий экссудации и пролиферации, влиянии на проницаемость капилляров, сочетающееся с наличием антимикробной активности.

Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 2009 года, Казакова, Валентина Сергеевна

1. Акопов, И.Э. Кровоостанавливающие растения / И.Э. Акопов. -Ташкент, 1981.-С. 35.

2. Аминокислотный, жирнокислотный и углеводный состав сока некоторых видов рода Betula / Т.А. Шуляковская, JI.B. Ветчинникова, М.К. Ильинова и др. // Раст. ресурсы. 2006. — Т.42, вып.2. - С. 69-77.

3. Антибактериальная активность извлечений из некоторых видов цветковых растений / В.А. Бандюкова, О.А. Андреева, Н.И. Богаевская и др. // Раст. ресурсы. 1990. - Т.26, вып.2. - С. 169-178.

4. Антикоагулянты недиализирующей фракции аммиачного экстракта травы медуницы мягчайшей / А.Ш. Бышевский, И.А. Дементьева, П.И. Левен и др. // Укр. биохим. журн. 1991. - №6. - С. 35-42.

5. Антимикробная активность извлечений из травы донника лекарственного / Р.А. Бубенчиков, JI.M. Закарян, Г.И. Московцева и др. // Актуальные проблемы медицины и фармации: материалы конф. — Курск, 1996.-С. 123.

6. Бандюкова, В.А. Применение цветных реакций для обнаружения флавоноидов путем хроматографии на бумаге / В.А. Бандюкова // Раст. ресурсы. 1965. - Т. 1, вып. 4. - С. 391.

7. Бандюкова, В.А. Методы исследования природных флавоноидов / В.А. Бандюкова, A.JI. Шинкаренко, A.JI. Казаков. — Пятигорск: Бальнеолог, ин-т, 1977. 72 с.

8. Бандкжова, В.А. Тонкослойная хроматография флавоноидов / В.А. Бандюкова, А.А. Шинкаренко // Химия природ, соединений. — 1983. -№1.-С.20

9. Бандюкова, В.А. Фенолокислоты растений, их эфиры и гликозиды / В.А. Бандюкова // Химия природ, соединений. 1983. - №3. - С.263-273.

10. Барнаулов, О.Д. Фитотерапия в отделении реанимации / О.Д. Барнаулов, С.Ю. Коненков // Материалы Второго науч. конгр. «Традиционная медицина: теоретические и практические аспекты». — Чебоксары, 1996. С. 65-66.

11. Беликов, В.В. Методы анализа флавоноидных соединений / В.В. Беликов, М.С.Шрайбер // Фармация. 1970. - № 1. - С. 68-72.

12. Беликов, В.В. Реакции комплексообразования в анализе флавоноидов / В.В. Беликов, Т.В. Точкова // Фенольные соединения и их физиологические свойства. Алма-Ата, 1973. - С. 168-172.

13. Беликов, В.В. Спектрофотометрия комплексных соединений флавоноловых смесей / В.В. Беликов, Т.В. Точкова // Современные проблемы фармацевтической науки и практики: тез. докл. II съезда фармацевтов УССР. Киев,1972. - С. 572-575.

14. Белов, Н.В. Большая энциклопедия траволечения / Н.В. Белов. М.Минск: Изд-во Act Хорвест, 2005. - С. 172.

15. Беляков, К.В. Количественное определение полисахаридов в листьях мать-и-мачехи (Tussilago farfara L.) / К.В. Беляков, Д.М. Попов // Фармация. 1999. - №1. - С.23-24.

16. Биологическая активность водных экстрактов из Lithospermum officinalie L. И.Pulmonaria obscure Dum. / B.K. Збуржинский, A.H. Поскаленко, З.И. Алимова и др. // Раст. ресурсы. 1978. - Т. XIV, вып. 1 - С. 96-99.

17. Блинова, М.П. Углеводный состав подземной части Adenophora pereskiifolia (Campanulaceae) / М.П. Блинова, В.Г. Дударев, Н.И. Котова // Раст. ресурсы. 2007. - Т.43, вып.4. - С.95-101.

18. Большая Курская энциклопедия. Растительный мир. Грибы / под ред. В.Н. Бубенчиковой. Курск, 2006. - Т.З, кн.1. - С. 121.

19. Бубенчиков, Р.А. Фитохимическое и фармакологическое изучение растений рода фиалки: автореф. дис. . канд. мед. наук (14.00.25; 15.00.02) / Р.А. Бубенчиков; Всерос. науч. центр по безопасности биолог, активных веществ. Купавна, 2002. — 23 с.

20. Бубенчикова, В.Н. Азотистые основания донников лекарственного, белого и ароматного / В.Н. Бубенчикова, В.А. Королев // Актуальные вопросы экспериментальной и клинической медицины и фармации: материалы конф. Курск, 1995. - С.89-90.

21. Бубенчикова, В.Н. Аминокислотный состав медуницы неясной / В.Н. Бубенчикова, B.C. Казакова // Сб. тр. II Междунар. науч. конф. молодых ученых-медиков: в 3-х т.- Курск: КГМУ, 2008. — Т. III. — С. 287-289.

22. Бубенчикова, В.Н. Медуница неясная — новый источник полисахаридов / В.Н. Бубенчикова, B.C. Казакова // Фармация. М.: Русский врач, 2008. - С.19-21.

23. Бубенчикова, В.Н. Определение показателей качества сырья «Медуницы лист» / В.Н. Бубенчикова, B.C. Казакова // I Рос. Фитотерапевт. Съезд: сб. науч. тр. -М., 2008. С. 234 -236.

24. Бубенчикова, В.Н. Полисахаридный и аминокислотный состав растений рода медуница и подмаренник / В.Н. Бубенчикова, Ю.А. Понарьина, B.C. Казакова // XV Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство» (14-18 апр. 2008 г., г. Москва): тез. докл. М., 2008. -596 с.

25. Бузина, Г.В. Титрометрический метод количественной и качественнойхарактеристики пектиновых веществ / Г.В. Бузина, О.Ф. Иванова, Л.Б. Сосновский // Хлебопекар. и кондитер, пром-сть. 1965. - №4. - С.15-18.

26. Василенко, В.Е. Определение хлорхолинхлорида в объектах внешней среды методом тонкослойной хроматографии / В.Е. Василенко // Гигиена и санитария. 1980. - № 10. - С. 54-56.

27. Ващенко, Т.Н. Антимикробное действие пектинов и пектинсодержащих препаратов / Т.Н. Ващенко, В.П. Степанян, В.П. Анисимова // Науч. тр. / Курский мед. ун-т. Курск, 1997. - С. 185.

28. Виноградова, Р.П. Физико-химические методы в биохимии / Р.П. Виноградова, В.А. Цудзевич, С.Н. Храпунов. Киев: Высш.шк., 1983. -387 с.

29. Гаммерман, А.Ф. Лекарственные растения научной медицины СССР, не включенные в фармакопею / А.Ф. Гаммерман, И.А. Дамиров, М.О. Каррыев. Ашхабад, 1970. - С.95-96.

30. Гацура, В.В. Методы первичного фармакогностического исследования биологически активных веществ / В.В. Гацура. — М.: Медицина, 1974. -143 с.

31. Гейссман, Т. Цветные реакции на флавоноидные соединения / Т. Гейссман // Химические методы анализа растений: сб. ст. М.: Изд-во ИП, 1960.-С. 469

32. Герберт, И.Я. О механизме противосвертывающего эффекта экстракта из травы медуницы мягчайшей / И.Я. Герберт, П.И. Левен // Материалы V Всерос. съезда фармацевтов: тез. докл. — Ярославль, 1987. С.446-448.

33. Герберт, И.Я. Природа и свойства антикоагулянта прямого действия из травы медуницы мягчайшей: автореф. дис. . канд. биол. наук / И.Я. Герберт. Ленинград, 1990. - 24 с.

34. Герберт, И.Я. Противосвертывающее действие полифенолсодержащей фракции из надземной части Pulmonaria molissima. К. Kerner / И.Я.

35. Герберт, П.И. Левен, А.Ш. Бышевский // Раст. ресурсы. 1988. - Вып.З - С. 429-434.

36. Гиниатулин, Р.А. Механизм действия холина на тионевральную передачу: автореф. дис. д-ра мед. наук / Р.А. Гиниатулин. М., 1981. -37 с.

37. Гончаров, А.Г. Исследования растительного полисахаридного комплекса / А.Г. Гончаров, Т.И. Исакова, Л.Д. Халеева // Актуальные вопросы поиска и технологии лекарств: тез. докл. Республик, науч. конф. Харьков, 1981. - С. 139.

38. Горбунова, Т.А. Стандартизация сухого сока каланхое / Т.А. Горбунова, Т.Д. Даргаева // Ресурсоведческое и фотохимическое изучение лекарственной флоры СССР. 1991. - Т. 29. - С. 190-195.

39. Горин, А.Г. Получение и фитохимическое исследование полисахаридов из лекарственных растений / А.Г. Горин // Всерос. съезд фармацевтов: тез. докл. Свердловск, 1975. - С. 313-314.

40. Государственная фармакопея СССР. Вып.1: Общие методы анализа / МЗ СССР. 11-е изд. доп. - М.: Медицина, 1987. - 336 с.

41. Государственная фармакопея СССР. Вып.2: Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. 11-е изд. доп. - М.: Медицина, 1989. - 400 с.

42. Гребнева, Н.Ю. Некоторые фармакологические свойства водных извлечений растительного сбора "Полестелл" для лечения легочных заболеваний / Н.Ю. Гребнева, Е.Е. Лесиовская, Н.П. Харитонова // Раст. ресурсы. 1999. - Т. 35, вып. 3. - С. 25-34.

43. Деканосидзе, Г.Е. Биологическая роль, распространение и химическое строение тритерпеновых гликозидов / Г.Е. Деканосидзе, В.Я. Чирва, Т.В. Сергиенко. Тбилиси, 1984. - 348 с.

44. Дементьева, И. А. Природа и свойства антикоагулянтов из недиализирующей фракции аммиачного экстракта травы медуницы: автореф. дис. . канд. биол. наук/ И.А. Дементьева. -М., 1991. 16 с.

45. Джисман, Т. Биогенез фенолов растительного происхождения / Т. Джисман //Биогенез природ, соединений. 1965. - С. 482-527.

46. Егоров, В.А. Характеристика номенклатуры антимикробных и противовоспалительных средств для лечения заболеваний органов дыхания на Российском фармацевтическом рынке / В.А. Егоров, JI.B. Мошкова, В.А. Куркин // Фармация. 2003. - №1. - С. 16-20.

47. Еленевский, А.Г. Ботаника. Систематика высших или наземных растений / А.Г. Еленевский, М.П. Соловьева, В.Н. Тихомиров. М.: Academia; 2004 - 432 с.

48. Енгалычева, Е.И. Полисахариды из листьев мать-и-мачехи / Е.И. Енгалычева, Л.И. Линевич, Е.Я. Ладыгина // Фармация. 1984. - №3. — С.13-16.

49. Завражнов, В.И. Лекарственные растения / В.И. Завражнов. Воронеж: Изд-во Воронеж. Ун-та, 1993. - 478 с.

50. Запрометов, М.Н. Фенольные соединения и методы их исследования / М.Н. Запрометов // Биохимические методы в физиологии растений. -М.,1971. С. 185-207.

51. Зяблицева, Н.С. Изучение полисахаридов клубней топинамбура и создание на их основе лечебно-профилактических средств: дис. . канд. фармац. наук: (15.00.02) / Н.С. Зяблицева. Пятигорск, 1998. - 158 с.

52. Изучение пектинов диких яблок / М.Х Маликова, Д.А. Рахимов, Э.Л. Кристаллович и др. // Химия природ, соединений. 1993. - №3. - С. 355357.

53. Иллюстрированный определитель растений Средней России / И.А. Губанов, К.В. Кисилева, B.C. Новиков, В.Н. Тихомиров. М.: Изд-во: Товарищество научных изданий КМК, Институт технологических исследований, 2002. - Т.З. - С.104-105.

54. Исследование взаимодействия пектиновых веществ с солями меди, ртути, цинка и кадмия / Г.Н. Коцева, Е.П. Кухта, Э.П. Панова, В.Я. Чирва // Химия природ, соединений. 1988. - №2. - С. 171-179.

55. Исследования антимикробной активности посконника конопляного травы / А.И. Прозоровская, М.Р. Хочава, С.А. Бабичев и др. // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. Пятигорск, 2005. -Вып.60. - С.418-421.

56. Кайшева, Н.Ш. Исследование природных полиуронидов и получение лекарственных средств на их основе: автореф. дис. . д-ра фармацевт, наук (15.00.02) / Н.Ш. Кайшева. Пятигорск, 2004. - 46 с.

57. Кемертелидзе, Э.П. Физико-химические методы анализа некоторых биологически активных веществ растительного происхождения / Э.П. Кемертелидзе, В.П. Георгиевский. Тбилиси, 1976. - 224 с.

58. Клышев, JI.K. Флавоноиды растений / JI.K. Клышев, В.А. Бандюкова, JI.C. Алюкина. Алма-Ата: Наука, 1978. - 220 с.

59. Ковалев, В.Г. Нейроактивные аминокислоты и регуляция кровообращения / В.Г. Ковалев // Тр. ин-та / Волгоградский мед. ин-т. -1977. Т. 30, вып. 3. - С. 13-16.

60. Количественное определение тритерпеновых сапонинов в пя-тикомпонентной растительной композиции / Т.Г. Заркуа, Д.М. Попов, А.Д. Бакуридзе, Р.В. Махарадзе // Современные аспекты изучения лекарственных растений: науч. тр. М., 1995. - Т. 34. - С. 177.

61. Комиссаренко, С.Н. Пектины их свойства и применение / С.Н. Комиссаренко, В.Н. Спиридонов // Раст. ресурсы. - 1998. - Т. 34, вып. 1. -С. 111-119.

62. Корепанова, Н.С. Исследования по стандартизации и содержанию флавоноидов в траве пастушьей сумки / Н.С. Корепанова, Г.И. Олешко // Современные проблемы фармацевтической науки и практики: сб. науч. тр. НИИФ. М., 1999. - Т. 38, ч. 2. - С. 229-233.

63. Королев, В.А. Фармакогностическое изучение представителей рода Донник: автореф. дис. . канд. фармащ наук. (15.00.02) / В.А. Королев; Пермский ГФА. Пермь, 1996. - 26 с.

64. Косман, В.М. Информационное обеспечение для идентификации фенольных соединений в обращеннофазовой ВЭЖХ. Флавоны, флавонолы и их гликозидьГ/ В.М. Косман, И.Г. Зинкевич // Раст. ресурсы. 1997. -Т.ЗЗ, вып.2. - С. 14-16.

65. Косман, В.М. Информационное обеспечение для идентификации фенольных соединений растительного происхождения. Кумарины и фурокумарины / В.М. Косман, И. Г. Зинкевич, Н.Ф. Комисаренко // Раст. ресурсы. 1997. - Т.ЗЗ, вып.З. - С.32-36.

66. Кочетков, Н.К. Химия биологически активных природных соединений / Н.И. Кочетков. М.: Химия, 1970. - 378 с.

67. Кочеткова, А.А. Классификация и применение пектинов / А.А. Кочеткова, А.Ю. Колесов // Пищевая промышленность. 1995. - № 9. -С. 28-29.

68. Круглая, А.А. Полисахаридный состав растений рода зопник / А.А. Круглая, Д.А. Муравьева, И.А. Борисенко // Фармация. 2007. - №6. — С.10-11.

69. Круглов, Д.С. Возможность применения медуницы в фототерапии железо дефицитной анемии / Д.С. Круглов, М.А. Ханина, О.В. Третьякова // XV Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство»: тез. докл. — М., 2008.-С.646.

70. Круглов, Д.С. Изменчивость микроэлементного состава медуницы мягчайшей / Д.С. Круглов, М.А. Ханина // X Междунар. Съезд Фитофарм. 2006. «Актуальные проблемы создания новых лекарственных прапаратов природного происхождения». СПб., 2006. — С.190-193.

71. Круглов, Д.С. Определение элементного состава медуницы мягчайшей методами нейтронно-активационного и атомно-эмиссионного анализа /

72. Д.С. Круглов // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. / Пятигорская фармац. акад.- Пятигорск, 2008. С.46-47.

73. Кудрицкая, О.Е. Каротиноиды плодов и ягод / О.Е. Кудрицкая. Киев: Высш. шк., 1990.-212 с.

74. Кузьмин, Э.В. Макро- и микроэлементный состав некоторых видов Aconitum (Ranunculaceae) юго-восточного Казахстана / Э.В. Кузьмин, О.В. Чанкина, В.П. Гранкина // Раст. ресурсы. — 2006. — Т.42, вып.2. — С.78-81.

75. Лигай, Л.В. Изучение углеводов Malva neglecta / Л.В. Лигай, Д.А. Рахимов, В.А. Бандюкова // Химия природ, соединений. 1989. - № 2. -С. 280-281.

76. Литвиненко, В.И. Химия природных флавоноидов и создание препаратов при комплексной переработке растительного сырья: авто-реф. дис. . д-ра хим. наук: (02.00.10 15.00.02) / В.И. Литвиненко; Харьков ВНИИХ ТЛС. Харьков, 1990. - 80 с.

77. Лукманова, К. А. Аминокислотный и минеральный состав фитопрепарата люцерон / К.А. Лукманова, В.А. Рябчук, Н.Х. Салихова // Фармация. 2000. - №1.- С. 25-27.

78. Маевский, П.Ф. Флора Средней полосы Европейской части России / П.Ф. Маевский. М.: Товарищество науч. изд. КМК, 2006. - 600 с.

79. Мац, М.Н. Контрацептивные свойства галеновых препаратов из некоторых растений семейства Бурачниковых / М.Н. Мац, В.В. Корхов, В.Ф. Богаткина // Раст. ресурсы. 1982. - вып.1. - С. 87-91.

80. Машковский, М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский М.: Новая Волна, 2000. -Т.1.-540 е.; Т.2. - 608 с.

81. Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению нестероидных противовоспалительных фармакологических веществ. М., 1983. - 20 с.

82. Милых, А.А. Фармакогностическое изучение растений рода зопник Центрального Черноземья: автореф. дис. . канд. фармац. наук (15.00.02) / А.А. Милых: ММА им. И.М. Сеченова. -М., 1995. 22 с.

83. Муравьева, Д.А. Азотистые основания омелы белой и формианы простой / Д.А. Муравьева, О.И. Попова, К.О. Гаспарян // Фармация. -1991.-№ 1.-С. 16-17.

84. Николаева, В.Г. Растения, применяемые в СССР для лечения инфицированных ран / В.Г. Николаева // Фармация. 1979.- T.28v, №5. - С.46-49.

85. Носаль, М.А. Лекарственные растения и способы их применения в народе / М.А. Носаль, И.М. Носаль. Киев: Медгиз, I960! - 256 с.

86. Ойвин, И.А. О роли фибрина в механизме сосудистой проницаемости / И.А. Ойвин, В.И. Ойвин, В.П. Балуда // Бюл. эксперим. биологии. -1962.-Т. 54, №10. -С. 45-47.

87. Парфенов, А.А. Аминокислоты травы пустырника, пятилопастного /

88. A.А. Парфенов // Фармация. 2007. - №7. - С.6-7.

89. Пектин. Производство и применение / Н.С. Карпович, Л.В. Донченко,

90. B.В. Нелина и др. Киев, 1988. - 125 с.

91. Повыдыш, М.Н: Анальгезирующая и противовоспалительная активность извлечений из надземной части Galeobdolon Luteum (Lamiaceae) / М.Н. Повыдыш, А.А. Кашина, Л.С. Теслов // Раст. ресурсы. 2006. - Т.42, вып.4. - С.56-61.

92. Погорелый, В.Е. Препараты аминокислот как нейропротекторы / В.Е. Погорелый, Н.Е. Слюнькова, Л.М. Макарова // «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения»: материалы 7 Междунар. Съезда «Фитофарм 2003» (г.

93. C.-Петербург Пушкин, 3-5 июля 2003 г.) - СПб., 2003. - С.244-250.

94. Пономарев, В.Д. Экстрагирование лекарственного растительного сырья / В.Д.,Пономарев. М.: Медицина, 1978. - 204 с.

95. Почему растения лечат / М.Я. Ловкова, A.M. Рабинович, С.М. Пономарева и др. М.: Наука, 1989. - 256 с.

96. Прокопенко, А.Г. Влияние холина на синтез антител печенью / А.Г. Прокопенко // Тр. ин-та / Курский мед. ин-т. 1983. - Вып. 28. - С. 167-190.

97. Раст. ресурсы СССР: цветковые растения, их химический состав, испоьзование. Семейства Caprifoliaceae Plantaginaceae / отв. ред. П.Д. Соколов; Акад. наук СССР. Ботанический ин-т им. B.JI. Комарова. - JL: Наука; Ленинград, отделение, 1990.-С. 126-128.

98. Ратникова, Г.В. Метод количественного определения суммы флавоноидов в сухом экстракте горца птичьего / Г.В. Ратникова, Даргаева Т.Д., Глызин В.И. // Актуальные проблемы фармацевтической химии: науч. тр. / ВНИИФ. М., 1996. - Т. 35. - С. 194-198.

99. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М.: Изд-во ЗАО «ИИА Ремедиум», 2000.- 398 с.

100. Свободные фенолкарбоновые кислоты видов семейства Ericaceae флоры Сибири и Дальнего Востока России / М.В. Белоусов, В.П. Грахов, Т.П. Березовская и др. // Раст. ресурсы. 1999. - Вып.З. — С. 74-81.

101. Сернов, Л.Н., Элементы экспериментальной фармакологии / Л.Н. Сернов, В.В. Гацура-М., 2000. -352 с.

102. Смирнова, Л.П. Количественное определение суммы флавоноидов в цветках бессмертника песчаного / Л.П. Смирнова, Л.Н. Первых // Хим. фармацевт, журн. - 1998. - №6. - С. 35-38.

103. Смирнова, Н.И. Галактоманнаны некоторых видов сем. Fabaceae / Н.И. Смирнова, И.Е. Лобанова, О.В. Анулов // Раст. ресурсы. 1998. - Т.34, вып.4. — С.68-71.

104. Степаненко, Б.Н. Химия и биохимия углеводов. Моносахариды / Б.Н. Степаненко М.: Высш. шк., 1977. - 222 с.

105. Степаненко, Б.Н. Химия и биохимия углеводов. Полисахариды / Б.Н. Степаненко М.: Высш. шк., 1978. - 256 с.

106. Травянистые растения СССР / под ред. Т.А. Работнова. М.: Мысль, 1971.-Т.2.-312 с.

107. Тринус, Ф.П. Фармакологическая регуляция воспаления / Ф.П. Тринус, В.К. Клебанов, И.М. Ганжа. Киев: Здоровье, 1987. - С. 144.

108. Тулайкин, А.И. Углеводы из надземной части Ononis arvensis (Fabaceae): выделение и анализ / А.И. Тулайкин, B.C. Березина, М.Ю. Гончаров // Раст. ресурсы. 2004. - Т.40, вып.4. - С.73-79.

109. Туроходжаев, М.Т. Растительные пектиновые вещества. Способ выделения пектиновых веществ / М.Т. Туроходжаев, М.А. Ходжаев // Химия природ, соединений. 1993. - №5. - С. 635-643.

110. Удельнова, Т.Н. Микроэлемент, экология и здоровье человека / Т.Н. Удельнова, С.Г. Торгин, В.А. Ягодин // Успехи современ. биологии. -1990.-Вып. 2.-С. 279.

111. Физико-химические свойства пектинов / Е.Н. Губенкова, В.К. Сомов, В.А. Шеенсон, А.И. Сомова // Пищ. промышленность. 1988. - №5. - С. 13-16.

112. Филиппов, М.П. Колориметрическое определение уронидной части в пектиновых веществах / М.П. Филиппов // Изв. АН МССР: Сер. биол. и хим. наук. 1973. - №3. - С. 76-79.

113. Флора СССР: в 30 т. М.: Акад. наук СССР, 1953. - Т.19. - С.344-353.

114. Харборн, Д. Биохимия фенольных соединений / Д. Харборн М.: Мир, 1969.-572 с.

115. Химический анализ лекарственных растений / под ред. Н.И. Гринкевич, JI.H. Сафронич. М.: Высш. шк., 1984. - 176 с.

116. Химия и биохимия бобовых растений / под ред. Н.М. Запрометова. -М.: Агропромиздат, 1986. С. 21-22.

117. Хроматография на бумаге / под ред. И.М. Хайца, К. Мацека. М.: Изд-во иностр. лит-ры, 1962. - 851 с.

118. Чушенко, В.Н. Исследование в области полисахаридных препаратов: автореф. дис. . канд. фармацевт, наук: (15.00.02) / В.Н. Чушенко; Харьков. ХНИХФИ. Харьков, 1980. - 24 с.

119. Штабский, Б.М. К методике определения средне смертельных доз и концентраций химических веществ / Б.М. Штабский // Гигиена и санитария. 1980. - №10. - С. 49-61.

120. Щепин, О.П. Современное состояние и тенденции заболеваемости населения Российской Федерации / О.П. Щепин, Е.А. Тишук // Здравоохранение РФ. 2001. - №6. - С. 3-8.

121. Benson, J.R. Some recend advances in amino acid analisis / J.R. Benson // Instrumentation in amino acid seguence analisis. London, N. Y., San-Francisco, 1975.-P. 1-40.

122. Briant, E.T. A note of the differentiation between flavonoid glicosides and their aglicones / E.T. Briant// J. Amer. Pharm. Assoc. 1950. - Vol. 39, №8. -P. 480-488.

123. Geissman, T.A. Chemistry of flavonoid compounds / T.A. Geissman.-Oxford: Pergamon Press, 1962. 666 p.

124. Harborne, J.B. The flavonoids / J.B. Harborne, T.J. Mabry, H. Mabry. N. Y.: Charman and Hall, 1975. - 1200 p.

125. Mabry, T.J. The systematic identification of flavonoids / T.J. Mabry, M. R. Markham, M.B. Thomas -N. Y.: Springer, 1970. 354 p.

126. Pyrrolizidine alkaloids in Pulmonaria obscura / W. Haberer, L. Witte, T. Hartmann, S. Dobler // Planta Med. 2002. - №5. - P.480-482.1. ПАТЕНТЫ

127. Пат. 2004103222 Российской Федерации, МПК7 А61К35/78. Фитосбор для лечения мастопатии / Базлова, Л.М. № 2004103222; заявл. 20.01.2004; опубл. 20.06.2005.

128. Пат. 2005134806 Российской Федерации, МПК А61К36/30,А61Р7/00. Средство, обладающее кроветворным действием / Ханина, М.А., Поспелова, Т.И., Круглов, Д.С., Третьякова, О.В., Мичурина, С.В. -№2005134806; заявл. 09.11.2005; опубл. 27.05.2007.

129. Пат. 2171284 Российской Федерации, МПК7 C12G3/06, А61К35/78. Композиция ингридиентов для приготовления лечебно-профилактического бальзама / Киров, Е.И., Шило В.А., Кучумова, Л.Я. -№ 2171984; заяв. 11.03.1999; опубл. 27.07.2001.

130. Пат. 2218928 Российской Федерации, МПК7 А61К5/78, А61Р5/00. Способ заготовки лекарственного сырья медуницы мягенькой / Худоногова, Е.Г., Илли, И.Э., Корзинников, Ю.С., Лившиц, И.А., Худоногов, A.M. №2218928; заявл. 17.09.2001; опубл. 20.05.2003.

131. Пат. 2270689 Российской Федерации, МПК А 61К36/68, А61К36/31, А61К36/30, А61К36/66, А61К36/28, А61К36/73, А61К36/70, А61К36/53, А61Р43/00.Фитосбор для лечения мастопатии / Базлова, Л.М. -№2970689; заявл. 20.01.2004; опубл. 27.02.2006.

132. Пат. 2305552 Российской Федерации, МПК А61К36/30, А61Р7/00. Средство, обладающее кровотворным действием / Ханина, М.А., Поспелова, Т.И., Круглов, Д.С., Третьякова, О.В., Мичурина, С.В. -№2305552; заявл. 09.11.2005; опубл. 10.09.2007. :