Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Фармакогностическое исследование растений родов горицвет и тысячелистник - как источников биологически активных веществ

гч — г\ л п

НО и ¿5

1 1 НОЛ 1353

На правах рукописи

ЯЦЮК Валентина Яковлевна

ФАРМАКОГНОСТНЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ РАСТЕНИЙ РОДОВ ГОРИЦВЕТ И ТЫСЯЧЕЛИСТНИК - КАК источников БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

15.00.02 — фармацевтическая химия и фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора фармацевтических наук

Москва — 1996

Диссертационная работа выполнена в Курском государственном медицинском университете.

Научные консультанты: _

— доктор фармацевтических наук, проф. ]Э. В. Гелла

— доктор фармацевтических наук, проф. Н. Ф. Комиссаренко

— доктор медицинских наук, проф. В. В. Пичугин

Официальные оппоненты:

— доктор фармацевтических наук, профессор 3. П. Костенникова

— доктор фармацевтических наук, профессор В. А. Куркин

— доктор медицинских наук, профессор С. Я. Соколов Ведущая организация — Сибирский медицинский университет (Томск).

Защита состоится «¿¿7» у ¿г л 1996 г. в час.

на заседании Диссертационного совета Д 074.28.01 при Научно-исследовательском институте фармации (117418, г. Москва, Нахимовский проспект, д. 34).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан « & » ^еигз^Ьл 1996 года.

Ученый секретарь

Диссертационного совета, Д 074.28.01 канд. фармац. наук,

ст. науч. сотрудник Л. М. Боброва

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. В последние два десятилетия установилась устойчивая тенденция к использованию в комплексном лечении различных патологий лекарственных растительных средств и фитопрепаратов, которые, по сравнению со многими химическими препаратами, лучше переносятся больными и не вызывают существенных побочных явлений. Из общего арсенала лекарственных средств, применяющихся в мировой медицинской практике для профилактики и лечения болезней, третью часть составляют препараты растительного происхождения. Значительная часть фитопрепаратов создана на основе карденоли-дов, алкалоидов, терпеноидов, производных бензо-а-пирона, фенил-бснзо-у-пирона, которые обладают широким диапазоном фармакоте-рапевтического действия.

Систематический поиск растений, содержащих упомянутые классы веществ, изучение их структуры и фармакологического действия с целью создания на их основе новых эффективных лекарственных препаратов для профилактики и лечения сердечно-сосудистых, онкологических, урологических и др. заболеваний является актуальной проблемой. В ряду первостепенных задач стоит проблема лечения сердечнососудистых заболеваний. Растения по-прежнему остаются основным промышленным источником препаратов кардиотонического действия.

В решении проблемы поиска сырьевых источников для их получения наше внимание привлекли растения родов Горицвет и Тысячелистник, богатые различными группами биологически активных веществ, многие из которых являются лекарственными.

В связи с потерей традиционных мест заготовки и экологическими изменениями в результате последствий Чернобыльской трагедии сократилась сырьевая база лекарственных растений, используемых для производства препаратов, обладающих кардиотропным действием. Уменьшились и стали недостаточными для промышленного производства кардиотонических препаратов запасы сырья горицвета весеннего. По данным литературы и нашим исследованиям, перспективным сырьем могут являться, кроме горицвета весеннего, и другие близкие в филогенетическом отношении виды этого рода, запасы которых значительны.

Таким образом, поиск сырьевых источников, создающий реальные предпосылки для получения фитохимических препаратов с обеспеченной сырьевой базой, является актуальной проблемой фармацевтической науки, направленной на реализацию социального заказа здравоохранения.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования является целенаправленный поиск сырьевых источников из растений ро-

дов Горицвет и Тысячелистник для получения биологически активных веществ и создание на их основе фитопрепаратов, обладающих кардио-тонической, антибластической, антиаллергической и противовоспалительной активностью.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие основные задачи:

— изучить химический состав и биологическую активность однолетних и многолетних видов рода Горицвет в сравнении с горицветом весенним;

— выделить и установить строение основных групп биологически активных соединений: карденолвдов, флавоноидов, кумаринов;

— изучить возможность использования выявленных карденолид-содержащих растений в качестве сырьевых источников новых шш существующих сердечно-сосудистых препаратов;

— провести химическое изучение и фармакологический скрин-нинг растений рода Тысячелистник в сравнении с тысячелистником обыкновенным;

— провести исследование по выявлению факторов, влияющих на количественный и качественный состав эфирных масел растений рода Тысячелистник;

— из выявленных перспективных видов выделить и установить строение гетероциклических соединений: производных 2-фе-нил-бензо-у-пиронов, бензо-а-пирона и сесквитерпеновых лак-тонов;

— показать перспективы по рациональному использованию растений рода Тысячелистник в технологии фитопрепаратов, обладающих противоопухолевой, противовоспалительной, диуретической активностью;

— разработать нормативно-техническую документацию на лекарственное сырье и препараты.

Научная новизна. В ходе химического исследования (селективной экстракцией, цветными тестами, хроматографией на бумаге и в тонком слое сорбента) установлен видовой химический состав биологически активных веществ 8 видов растений рода Горицвет и 17 видов рода Тысячелистник. В растениях рода Горицвет выявлены карденолиды, флавоноиды, кумарины, многоатомный спирт, аминокислоты. В растениях рода Тысячелистник — сесквитерпеновые лактоны, эфирные масла и производные у- и а-пиронов. Установлено, что исследуемые виды тысячелистника содержат эфирное масло, количественное содержание которого колеблется от следовых количеств до 0,74%. Содержание ха-мазулена в эфирных маслах изменяется от 0 до 40%.

Выявлена корреляционная связь между накоплением проазуленов в траве тысячелистников и условиями их обитания.

Установлено влияние географических, климатических факторов и степени освещенности на содержание эфирного масла и проазуленов в растениях рода Тысячелистник.

В связи с термолабильными свойствами эфирных масел тысячелистников разработано устройство, позволяющее получать масло без длительного нагревания, что обеспечивает его постоянный состав.

С учетом химических свойств БАВ изучаемых растений, морфоло-го-анатомического строения сырья и степени его измельчения разработаны методики выделения карденолидов, производных у- и а-пиро-нов, сесквитерпеновыхлакгонов и многоатомного спирта.

Из исследуемых растений выделено и идентифицировано методами химических превращений и спектрального анализа 10 карденолидов, 20 флавоноидов, 10 кумаринов, 7 сесквитерпеновыхлакгонов и адонит.

Новыми для растений рода Горицвет являются: сердечные глико-зиды — цимарол, конваллотоксол, к-строфантозид; флавоноиды — кос-мосиин, цинарозид; кумарины — герниарин; для рода Тысячелистник: кумарины — герниарин, эскулетин, зскулин, цихорин; флавоноиды — цинарозид, скутелляреин, скутеллярин, гиперозид; для тысячелистников крупноцветкового, дваждырассеченного и пижмолистного сескви-терпеновые лактоны — матрикарин, балханолид, ацетилбалханолид.

Установлено, что по строению стероидного ядра карденолиды горицветов относятся к цис А/В ряду. Их биологическая активность зависит от места присоединения к стероидному ядру заместителей, их пространственной ориентации и структуры. В сердечных гликозидах с одинаковым агликоном биологическая активность зависит от природы сахарных компонентов.

Выделенные флавоноиды представлены 5, 7, 4'-триоксифлавоном, 5, 7, 3', 4'-тетраоксифлавоном и их С- и О-гликозидами. Структурные особенности флавонов и адонит являются хемотаксономическим признаком рода Горицвет.

Разработаны научные подходы к стандартизации лекарственного растительного сырья изучаемых родов. Качество сырья растений рода Горицвет необходимо устанавливать с учетом биологической активности и содержания адонита; рода Тысячелистник — по количеству эфирного масла и содержания в нем хамазулена.

На основании результатов фармакологических и химических исследований доказана возможность использования горицветов волжского и сибирского в качестве лекарственного растительного сырья для получения новых или существующих сердечно-сосудистых препаратов горицвета. Однолетние виды горицвета перспективны для промышленного производства диуретических препаратов. Среди растений рода Тысячелистник выявлена видовая специфическая активность. Тысяче-

листник обыкновенный, т. щетинистый, т. благородыный обладают кровоостанавливающим действием; т. таволговый и т. благородный — седативным; т. хрящеватый — диуретическим действием. Выявлено, что эфирные масла тысячелистников мелкоцветкового, щетинистого, благородного, обыкновенного, крупноцветкового проявляют выраженную цитотоксическую активность.

С помощью фармакологического скриннинга, с учетом установленного фармакологического действия растений, подобран состав сбора, обеспечивающего диуретической и противовоспалительный эффект у больных ишемической болезнью сердца, гипертонической болезнью и хроническим пиелонефритом.

На основе масляного экстракта травы тысячелистника разработан способ получения средства для кожи «Линадерм», обладающего противовоспалительным, антиаллергическим, ранозаживляющим и защищающим кожу рук при работе с агрессивными средами.

Выявлены новые виды лекарственного растительного сырья из растений родов Горицвет и Тысячелистник, что позволит расширить сырьевую базу для получения лекарственных средств, обладающих кардио-тонической, диуретической, противовоспалительной активностью, и создания цитотоксических препаратов онкологического профиля.

Приоритет исследований подтвержден двумя положительными решениями НИИГПЭ на выдачу патентов РФ (5039815/14 (020174) от 22.12.93 г.; 5041391/13 (011723 от 16.11.93 г.).

Практическая значимость. На основании проведенных исследований разработаны и внедрены:

— сбор мочегонный «Гербафоль» (разрешен для медицинского применения фармакологическим комитетом, протокол №7 от И июня 1996 г.);

— показатели, регламентирующю качеспю сбора мочегонного «Гербафоль» (ВФС №^ТгфТ1каз5 М3%1 МП РФ №316 от 13 августа 1996 г.);

— состав, способ получения средства для кожи «Линадерм» (положительное решение комитета РФ по патентам и товарным знакам НИИГПЭ 5039815/14 (020174) от 22.12.93 г. о выдаче патента РФ; разрешен к изготовлению и применению в качестве лечебного и профилактического средства секцией фармакологии и фармации МЗ РФ, протокол №3 от 17.03.92 г.);

— устройство для определения эфирного масла (положительное решение комитета РФ по патентам и товарным знакам НИИГПЭ 5041391/13 (011723) от 16.11.93 г.);

— методика определения примесей в траве тысячелистника обыкновенного («Методические рекомендации по определению при-

месей в траве тысячелистника обыкновенного». Внедрены в ГПП «Фармация» Курской, Воронежской, Белгородской областей) (акты о внедрении от 1993, 1994, 1995 гг.);

— методика по сбору лекарственного растительного сырья («Методические рекомендации по сбору лекарственного растительного сырья. Внедрены в ГПП «Фармация» Курской, Воронежской, Белгородской областей (акты о внедрении от 1993, 1994 гг.).

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены:

— на IV Всесоюзном съезде фармацевтов, Рязань, 1986 г.;

— на конференции «Фитонциды и антибиотики внешних растений», Клев, 1990 г.;

— на конференции молодых ученых ММИ, Москва, 1990 г.;

— на научно-практической конференции «Состояние и перспективы развития фармации в Сибири и на Дальнем Востоке», Томск, 1991 г.;

— на конференции «Актуальные вопросы фармацевтической науки и практики», Курск, 1991 г.;

— на научно-практической конференции «Резервы совершенствования лекарственного обеспечения населения РСФСР», Владимир, 1991 г.;

— на республиканской конференции по фармации и фармакологии «Проблемы фармации, подготовки и использования провизорских кадров», Пятигорск, 1993 г.;

— на I Международном научном конгрессе «Традиционная медицина и питание, теоретические и практические аспекты», Москва, 1994 г.;

— на I Всероссийской конференции «Актуальные вопросы аккредитации и лицензирования медицинской и фармацевтической деятельности», Курск, 1994 г.;

— на конференции «Актуальные вопросы экспериментальной и клинической медицины и фармации», Курск, 1995 г.;

— на международном экологическом форуме «Современные экологические проблемы провинции», Курск, 1995 г.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Курского государственного медицинского университета по проблеме №10.06 АМН СССР «Фармация», № государственной регистрации 01.86.0068103.4^,

Публикация результатов. По теме диссертации опубликовано 38 научных статей, получено 2 положительных решения НИИГПЭ на выдачу патента Российской Федерации, в которых отражено основное содержание работы.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 361 странице машинописи, состоит из введения, обзора литературы (первая глава), семи глав экспериментальных исследований, выводов, списка литературы, который включает 397 источников, в том числе на иностранных языках — 107, приложения. Работа иллюстрирована таблицами, рисунками.

В первой главе приводятся сведения литературы о ботанической характеристике, сырьевой базе, распространении, химическом составе, использовании в научной и нетрадиционной медицине растений родов Горицвет и Тысячелистник. Дается оценка качеству лекарственного растительного сырья, способам выделения биологически активных веществ и их роли при терапии различных патологий.

Вторая глава посвящена поиску перспективных растений родов Горицвет и Тысячелистник как сырьевых источников для получения фитопрепаратов.

В третьей главе приведены результаты экспериментальных исследований по выделению и идентификации карденолвдов растений рода Горицвет.

Четвертая и пятая главы посвящены методам выделения и установления химического строения кумаринов, адонита, флавоноидов растений родов Горицвет и Тысячелистник.

В шестой главе приводятся результаты исследований сесквитерпе-новых лактонов видов рода Тысячелистник.

В седьмой главе рассмотрены особенности анатомического строения и морфологических признаков надземной части растений рода Тысячелистник.

В восьмой главе обсуждаются практические рекомендации и перспективы использования лекарственных средств и растительного сырья родов Горицвет и Тысячелистник.

На защиту выносятся:

— Результаты химического и фармакологического исследования растений родов Adonis L. и Achillea L.

— Методы выделения и установления строения карденолвдов, флавоноидов, кумаринов, сесквитерпеновых лактонов и других классов природных соединений.

— Предложения по использованию многолетних и однолетних видов рода Горицвет для получения препаратов кардиотониче-ского и мочегонного действия.

— Рекомендации по использованию растений рода Тысячелистник в качестве лекарственных средств и сырьевых источников для получения фитопрепаратов, используемых в кардиологии, дерматологии и онкологии.

— Научно-методические подходы к стандартизации лекарственного растительного сырья растений родов Горицвет и Тысячелистник.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

1. Поиск перспективных растений родов Adonis L. и Achillea L. как сырьевых источников для получения фитопрепаратов

Предварительные исследования восьми видов рода Горицвет и семнадцати видов рода Тысячелистник, которые проводили методом хроматографии на бумаге и в тонком слое сорбента в различных системах растворителей с применением соответствующих качественных реакций, позволили определить основные классы биологически активных веществ. В растениях рода Горицвет выявлены сердечные гликозиды, флавоноиды, кумарины, аминокислоты, полисахариды и многоатомный спирт.

В горицвете весеннем, г. волжском, г. сибирском, г. амурском, г. золотистом, г. туркестанском и г. тяньшанском обнаружено не менее 12 карденолидных веществ, в горицветах пламенном и летнем — не менее 5.

Анализ результатов хроматографических исследований показал, что химический состав многолетних видов горицвета близок и характеризуется незначительными колебаниями в количестве отдельных сердечных гликозидов. Карденолидный состав однолетних видов рода Горицвет значительно отличается от такового горицвета весеннего как в количественном, так и в качественном соотношении компонентов. Многолетние виды Горицвета обладают более высокой биологической активностью (60—70 ЛЕД) по сравнению с однолетними видами (30—35 ЛЕД).

На хроматограммах обнаруживается от 4—5 (у горицветов пламенного и летнего) до 7 (у горицветов волжского и весеннего) фла-воноидов.

Многолетние виды содержат не менее 3, а однолетние — не менее 2 веществ бензо-а-пироновой структуры. Обнаруженные вещества флюоресцировали в УФ-свете характерным для кумаринов голубым или зеленовато-голубым цветами, что позволило отнести их к оксикума-ринам.

Изучили водорастворимые полисахаридные комплексы исследуемых растений. Установили, что в состав водорастворимых полисахаридов входят D-галакгоза, D-глюкоза, L-рибоза, L-рамноза, L-арабино-за, D-ксилоза.

Аминокислотный состав изученных видов незначительно отличается и представлен глицином, глутаминовой кислотой, алани-

ном, серином, пролином, валином, аргинином, ß-фенил-а-алани-ном.

Установлено, что многолетние виды горицветов: г. волжский, г. туркестанский, г. амурский, г. золотистый, г. тяньшанский и г. сибирский по их химическому составу близки к горицвету весеннему. Это в сочетании с достаточной биологической активностью позволяет предположить, что изучаемые виды Горицвета после углубленного химического и фармакологического изучения навдуг применение в медицинской практике наравне или наряду с горицветом весенним.

Однолетние виды рода Горицвет по химическому составу кардено-лидов и флавоноидов отличаются от горицвета весеннего; из-за низкой биологической активности не могут использоваться в качестве сырья для получения кардиотропных препаратов. Однако значительное количество пятиатомного спирта адонита в этих видах может способствовать созданию на их базе диуретических средств.

В растениях рода Тысячелистник выявлены флавоноиды, кумари-ны, сесквитерпеновые лактоны, эфирные масла.

На содержание эфирных масел исследовали более 1000 образцов растений рода Тысячелистник, собранных в 20 областях Европейской части СНГ.

Установлено, что все исследуемые виды содержат эфирное масло, основными компонентами которого являются: ос-гашен, камфеи, ментол, линалоол, борнеол, типол и п-цимол.

По мнению многих исследователей, фармакологическая ценность тысячелистника обыкновенного обусловлена содержанием в нем хама-зулена. Нами выявлено, что не все эфирные масла изучаемых видов содержат хамазулен (табл. 1).

Возможно, эти виды подразделяются на хеморасы, не содержащие проазуленов и содержащие их.

Наиболее перспективными азуленсодержащими видами являются Achillea millefolium L., A. asiatica Serg, A. collina Beck, A. asplenifolia L.

Количество эфирного масла и проазуленов в растениях зависит от рада условий, основными из которых являются: освещенность местообитания, фаза развития растения, обеспеченность почвы элементами питания и т. д.

Изучение динамики содержания проазуленов на примере тысячелистника обыкновенного показало, что сырье, собранное на солнце, содержит их значительно больше, чем сырье, собранное в тени.

Наиболее богатыми проазуленами оказались образцы сырья тысячелистника, собранного в фазу цветения в областях Центрально-черноземного региона.

В областях средней полосы СНГ сырье тысячелистника содержит эфирного масла в 1,8 раза, а проазуленов в 3 раза больше по сравнению с южными районами.

Таблица 1

Эфирные масла некоторых видов АсЬШеа Ь. и содержание в них азуленов.

Изучаемый виц Выход эфирного масла, % Цвет эфирного масла Содержание хамазулена в масле, % Количество азуленовых веществ в траве, мг %

A. millefolium 0,74 синий 40 296

A, nobilis 0,68 светло-коричн. — не обнаружено

A. setacea 0,32 желто-зеленый 5,2 16,6

A. coffina 0,21 синий 30 63

A. bisserata 0,35 зелено-голубой 21 73,5

A. filipendulina 0,63 желтый — не обнаружено

A. michranta 0,62 зелено-голубой 10 62

A. asiatica 0,41 синий 32 131

A. asplenifolia 0,7 синий 28 196

A. tanacetifolia 0,62 желтый — не обнаружено

A. stricta 0,51 желтый — не обнаружено

A. acuminata 0,31 желто-зеленый — не обнаружено

A. grandiflora 0,8 светло-коричн. — не обнаружено

A. Biebersteinii 0,48 желтый — не обнаружено

A. latiloba 0,71 желтый — не обнаружено

A. Neilreichii 0,52 желтый — не обнаружено

A. ptarmica 0,21 светло-коричн. — не обнаружено

2. Карденолиды рода Adonis L.

Извлечение сердечных гликозидов из растительного сырья зависит от ряда факторов: характера используемого растворителя, свойств растительного сырья, химического строения и растворимости карденолидов.

Мы использовали для экстракции сердечных гликозидов спирто-хлороформную смесь в соотношении 3:7, так как этим экстрагентом достигается достаточная степень экстракции карденолидов, а количество сопутствующих веществ не так велико, как при извлечении спиртом или водой. Применение спирта с хлороформом в других соотношениях менее рационально, так как увеличение концентрации спирта приводит к резкому увеличению содержания сопутствующих веществ, в то время, как уменьшение его концентрации не обеспечивает достаточно высокого выхода карденолидов.

Для очистки экстракта от хлорофилла и липофильных веществ извлечение сгущали, густой экстракт растворили в дистиллированной воде. Выпавший осадок отфильтровали. Дополнительную очистку экстракта от полифенольных соединений провели фильтрацией через полиамидный сорбент и окись алюминия III степени активности по Брок-ману. Из фильтрата хлороформом извлекли сумму малополярных сердечных гликозидов; спирто-хлоформной смесью 1:2 — полярные гли-козцды.

Сумму сердечных гликозидов разделили на отдельные компоненты методом колоночной хроматографии на окиси алюминия, полиамиде и сшшкагеле. В результате получено 10 веществ. Из хлоформного извлечения получены дигитоксигенин Ц), сомалин (2), цимарин (4), цима-рол (8), из спирто-хлороформных извлечений 1:2 — остальные карде-нолиды (табл. 2).

По структуре агликона полученные вещества (1—10) принадлежат к четырем группам: дигитоксигенина, строфантидина, адонитоксиге-нина и строфантидола.

Дигитоксигенин (1). В УФ-спектре вещества 1 наблюдается максимум поглощения при 217 нм, что свидетельствует о наличии ненасыщенного пятичленного лактонного кольца при С17 стероидного скелета.

Отсутствие максимума поглощения при 303 нм характерно для сердечных гликозидов, которые при С10 не содержат альдегидной группы.

В ИК-спектре наблюдается полоса поглощения с максимумом при 1392 и 1374 см-1, что характерно для третичной метальной группы, находящейся между двумя шестичленными кольцами при С10.

Его ацетильное производное (с общей формулой С25Н3605, т. пл. 220—223°С, [а]20 + 19,3 (хлороформ) содержит одну ацетильную группу.

Следовательно, гидроксильная группа, способная к ацетилирова-нию, находится при С3, другая ОН-группа, как у всех агликонов кар-денолидов, находится при С14.

Анализ спектральных данных и химических превращений позволяет сделать вывод, что вещество Ц) является Зр, 14-дигидрокси-5р-кард-20(22)-енолидом (цигитоксигенином).

Сомалин (2). Вещество дает положительную реакцию на 2-дезок-сисахара, легко гидролизуется 0,05 н раствором серной кислоты. Из продуктов кислотного гидролиза выделили генин и сахар- О-цимарозу.

Конфигурацию гликозидной связи в исследуемом гликозиде определили методом Кляйна. Установили, что сахарный компонент присоединен к агликону (3-связью. Исходя из полученных данных, вещество (2) является Зр-(0-р-В-цимарозопиранозил)-14р-гидрокси-5р-кард-20(22)-енолидом (сомалином).

Таблица 2

Основные свойства карденолидов, выделенных

из растений рода Adonis L. _

Вещество и его шифр Общая формула Т. ПЛ., °с 20 MD Источник выделения

Дигитоксиге-нин (1) С23Н3404 248-256 +18,5 Adonis wolgensis Adonis sibirica

Сомалин (2) С30Н46О7 133-136 197-198 +9,5 Adonis wolgensis Adonis sibirica

Строфанти-дин (3) С23 н,2 о6 138-143 222-225 +4,3 Adonis sibirica Adonis vernalis Adonis wolgensis Adonis aestivalis Adonis flammens

Цимарин (4) С30Н44О9 137-139 +37 Adonis sibirica Adonis vernalis Adonis wolgensis Adonis aestivalis Adonis flammens

К-строфан-■ган-р (5) C36HS4Ou 187-193 206-210 32 Adonis sibirica Adonis vernalis Adonis wolgensis Adonis aestivalis Adonis flammens

К-строфанто-зид (6) С42Н64°19 179-182 +13,8 Adonis vernalis Adonis wolgensis

Конвашгаток-син (7) CJ9H42Ol0 245-247 -4 Adonis vernalis Adonis wolgensis

Цимарол (8) С30Н46О9 225-229 +37 Adonis vernalis Adonis wolgensis

Конваллоток-сол (2) ^-'29^44^10 170-172 -10 Adonis sibirica Adonis vernalis

Адониток-син (10) С29Н42О10 240-255 262-265 -27,0 Adonis vernalis Adonis wolgensis

Строфантидин (3). Дает положительные реакции Легаля, Раймонда, Либермана-Бурхарда, что указывает на наличие в молекуле исследуемого стероидного соединения ненасыщенного пятичленного лакгонного кольца. В УФ-спектре наблюдается два максимума поглощения при 220 нм и 303 нм, что характерно для пятичленного лакгонного кольца при С17 и карбонильной группы при С10. В ИК-спектре, наряду с полосами поглощения бутенолидного кольца (1640 см-1 и 1956 см-1), имеется полоса поглощения при 1734 см-1, характерная для карбонильной группировки. По молекулярной массе вещество (3) отнесено к апшконам.

Обработкой уксусным ангидридом в среде безводного пиридина получили моноацетильное производное.

Из трех, имеющихся в веществе (3), гидроксильных групп только одна ацетилируется, две другие являются третичными и располагаются при С5 и С14. Вторичная гидроксильная группа находится у С3. Такая структура вещества характерна для 3(3-5,14(3-трищцрокси-19-оксо-5р-кард-20(22)-енолида (строфантидина).

Цимарин (4). В отличие от строфантидина (3), является гликози-дом, который дает положительную реакцию на 2-дезоксисахара с ксант-гидролом.

В ИК-спектре вещества имеются полосы поглощения, характерные для ненасыщенной лактонной группировки и гидроксильных групп сахарного компонента. Исследуемый гликозид легко гидролизуется 0,05 н раствором серной кислоты до строфантидина и Э-цимарозы.

Б-цимароза присоединена к агликону р-гликозидной связью. Исследуемый гликозид (4) по строению представляет собой Зр-(0-(3-Б-цимарозопиранозил)-5,14р-дигидрокси-19-оксо-5р-кард-20(22)-енолид (цимарин).

К-строфаитин-[3 (5). Дает положительные реакции на сердечные гли-козиды: ксантгидрольную, Легаля, Раймонда, Вебб-Леви, с 84% серной кислотой образует переходящие во времени окраски. В УФ-спекгре имеются полосы поглощения с максимумами при 203 нм и 320 нм, что характерно для гликозидов строфантидинового ряда.

При кислотном гидролизе 0,05 н серной кислотой вещество (5) расщепляется на строфантадин, Б-цимарозу и Б-глюкозу. В результате ферментного гидролиза были получены цимарин и Б-глюкоза. Методом разностей молекулярных вращений установлена р-конфигура-ция гликозидных связей.

Структуру исследуемого гликозвда можно представить как Зр-(0-р-Б-цимарозопиранозидо-(4->1) 0-р-Б-глюкопиранозил)-5,14р-дищц-рокси- 19-оксо-5р-кард-20(22)-енолцд (К-строфантин-Р).

К-строфантозид (6). Как и предыдущие гликозиды, дает положительную реакцию с ксантщцролом на 2-дезоксисахара. Большая моле-

кулярная масса дает основание предположить, что вещество относится к тригликозидам. Кислотный гидролиз приводит к образованию Б-цимарозы, Б-глкжозы, которая обнаруживается в значительно больших количествах, чем Б-цимароза, а также агликон строфантидин. При ступенчатом ферментном гидролизе на хроматограммах обнаруживаются цимарин и К-строфантин-р.

Результаты кислотного и ферментного ступенчатого гидролиза позволяют представить структуру выделенного вещества как ЗЬ-(0-р-Б-цимарозопиранозидо (4'<-1")-0-р-В-глюкопиранозо(4"<-Г")-0-(3-0-гшо-копиранозил)-5,14р-дигидрокси-19-О1®о-5р-кард-20(22)-енолид (К-сгро-фантозид) (рис. 1).

Конваллотоксин (7). При гидролизе по Манниху и Зиверту расщепляется на строфантвдин и Ь-рамнозу.

В отличие от других гликозидов, выделенных из растений рода, конваллотоксин трудно гидролизуется разбавленными минеральными кислотами, что объясняется наличием при С2 — сахара, ОН-группы, а-гликозидной связи и пиранозного окисного цикла в Ь-рамнозе. Методом Кляйна установлено, что Ь-рамноза со строфантидином сочленены а-гликозидной связью. Структуру исследуемого гликозида можно представить как Зр-(0-а-Ь-рамнопиранозил)-5, 14р-дигидрок-си-19-оксо-5р-кард-20(22)-енолид (конваллотоксин).

Конваллотоксол (8). Вещество является моногликозидом. В УФ-области спектра абсорбиции имеет один интенсивный максимум поглощения при 218 нм, характерный для ненасыщенного пятичленного лактонного кольца. В отличие от карбонилсодержащих у С10 кардено-лидов, вещестю не дает максимума при 303—305 нм.

Кислотным гидролизом конваллотоксол расщепляется на генин С23Н3406 и Ь-рамнозу (рис. 2).

Генин образует диацетильное производное. В УФ-спектре обнаруживается один максимум в области 219 нм, характерный для бутено-лидного кольца при С17. В агликоне имеется четыре оксигруппы, две из которых ацетилируются, а две другие не ацетилируются, являются третичными и находятся у С5 и С14.

Один из ацетилируемых гцдроксилов находится при третьем углеродном атоме и имеется во всех природных агликонах карденолидов. Второй гидроксил, способный ацетилироваться, может находиться, вероятнее всего, при С19.

Расположение оксигрупп у С3, С5, С14 и С19 характерно для стро-фантидола. Для подтверждения полученных данных нами проведено восстановление строфантидина до строфантидола натрия боргидридом. Полученное соединение оказалось идентично агликону исследуемого гликозида.

Рис. 1. Химические превращения карденолидов группы строфантидина.

Ь-рамноза присоединена к агликону а-гликозидной связью.

Структуру исследуемого сердечного гликозида (8) можно представить как строфантидол-Зр-О-а-Ь-рамнопиранозид (конваллотоксол).

Цимарол (9). Легко щцролизуется 0,05 н серной кислотой до стро-фантидола и Б-цимарозы. Согласно правилу Кляйна, Б-цимароза присоединена к сгрофантвдолу р-гаикозвдной связью.

онон

Конваллотоксол

ОН

Строфантмдол

СНз О - цимароаа

Рис. 2. Химические превращения карденолидов группы строфантидола.

Следовательно, исследуемый гликозид представляет собой строфан-тидол-З-О-р-О-цимаропиранозид (цимарол).

Ддонитоксин (10). При кислотном гидролизе образует сахар Ь-рамно-зу и генин С23Н3206, который имеет тот же состав, что и строфантидин, однако при обработке вещества на хроматограммах фосфорной кислотой в УФ-свете дает голубую флюоресценцию, что указывает на возможное присутствие при С-16 гидроксильной группы. При ацетилировании, в

отличие от строфангвдина, образует диацетильное производное. Вещество (10) является моногликозидом адонитоксигенина и Ь-рамнозы. По правилу Кляйна определена а-гликозидная связь. Таким образом, вещество (10) представляет собой Зр-(0-а-Ь-рамнопиранозил)-14,1бр-дищцрок-си-19-оксо-5р-кард-20(22)-енсшвд (адонитоксин).

Цирамол, К-строфантозвд, конваллотоксол из растений рода Горицвет выделены впервые.

3. Выделение и идентификация кумаринов и адонита

Растения родов Горицвет и Тысячелистник являются источниками производных бензо-а-пирона. Кумарины из надземной части растений экстрагировали водно-спиртовыми растворами, сгущенные извлечения разбавляли 5-кратным количеством горячей воды и фильтровали через слой окиси алюминия или полиамидного сорбента с целью очистки от сопутствующих веществ. На окиси алюминия сорбируются различные углеводы, фенольные соединения, кислоты и другие полярные вещества. Кумарины из водною злюата экстрагировали диэтиловым эфиром и хлороформом. После удаления экстрагентов для разделения кумаринов применили полиамидный сорбент. Колонку элюировали бензолом, бензолом с хлороформом и хлороформом. Кроме адсорбционной хроматографии мы использовали распределительную хроматографию на силикагеле, применяя в качестве неподвижной фазы формамид, а подвижной — бензол, хлороформ и их смеси.

Из надземных и подземных органов растений рода Тысячелистник выделены кумарины: (П), (12), (13), (14), (15), (16), (17), (18); из надземных органов рода Горицвет — (12), (13), (15) (табл. 3).

Вещества (11)—(18) расщепляются йодистоводородной кислотой в среде жидкого фенола и уксусного ангидрида до кумарина, что позволяет отнести их к производным бензо-а-пирона. Вещество (11) не давало депрессии температуры плавления с достоверным образцом кумарина.

Принадлежность исследуемых соединений к оксикумаринам подтверждается данными УФ- и ИК-спекгров (табл. 4). Так, максимумы поглощения в УФ-области находятся в пределах 230—298 нм в коротковолновой области и в пределах 328—343 нм — в длинноволновой области. При добавлении этилата натрия наблюдается батохромный сдвиг максимума длинноволновой области спектра, что свидетельствует о наличии в молекуле исследуемых соединений ОН-группы фе-нольной природы. ИК-спектры веществ имеют полосы поглощения при 1712-1690 см-1. (=С=(Э группа а-пирона), 1610-1576 см"1 (—С=С— бензольного кольца), 3350—3260 см-1 (ОН-группы). Для веществ 13,15,18 имеются полосы поглощения в области 2843—2985 см-1, которые указывают на наличие метоксильных групп. В ИК-спектре

Таблица 3

Основные свойства кумаринов растений родов Adonis L. и Achillea L.

Вещество Общая Т. пл, °С 20 [al 1 D Источник выделения

формула Achillea L. Adonis L.

Кумарин (11) С^О, 67-68 A. filipendulina A. ptarnica

Умбеллифе- С9 Не Оэ 232-238 A. millefolium A. vernalis

рон (12) A. Biebersteinii A. wolgensis

A. asiatica A. aestivalis A. setacea A. tanacetifolia A. stricta

A michranta _

Гарниарин (13) Ci0Hg 03 117-118 A. millefolium A. bisserata A. ptarnica A. asplenifolia A. wolgensis A. ílamens

Эскулетия (14) С, Н6 04 269-270 A. millefolium

A. setacea

A. nobilis

A. millefolium A. vernalis A. bisserata A. wolgensis A. asiatica A. Biebersteinii A. filipendulina A. setacea A. michranta

Эскулин (16) С15Н1609 147-150 -143 А. тШеМшт

(метанол) А. зе1асеа

А. поЬШб

Цихорин (17) С15Н16 09 212-215 -105 А. ве1асеа

(метанол) А. пискгайа

А. ВИрепёиЦпа

Изоскополе- CI0HS О, 230-232 -130 A. millefolium гин (18) (метанол) A. setacea

A. bisserata

(14) нет полосы поглощения в области 2843—2985 см-1, что дает возможность предположить наличие в его структуре ортодиоксигруппы. Вещества (12), (15), (14), (16) имеют на хроматограммах голубую флюоресценцию, усиливающуюся при обработке их спиртовым раствором едкого калия или парами аммиака, что позволяет предположить наличие гидроксильных групп при С-7 кумаринового ядра. Положение

Скополе- С,0На О, 200-202 гин (15)

Таблица 4

УФ- и ИК-спектральная характеристика кумаринов горицвета и тысячелистника.

Вещество и его шифр Поглощение в УФ-области Поглощение в ИК-области

96% этанол этилат натрия -с=с- -ОН -осн3 =С=0

Кумарин (11) 275, 311 — — 1730

Умбеллиферон (12) 230, 328 231, 370 1616- 3260 — 1720

7-оксикумарин 1576

Скополетин (15) 230, 256 240, 393 1610 3350 2985- 1730

6 -метокси -7-окси - 298, 343 2843

кумарин

Изоскополетин (18) 230, 256 250, 310 1630 3340 2930- 1712

6-окси-7-метокси- 298, 343 395 2866

кумарин

Эскулетин (14) 230, 250 240, 390 1610- 3340- — 1710—

6,7-диоксикумарин 271, 316 1590 3225 1690

Эскулин (16) 6-0, 231, 257 240, 395 1612 3530 — 1720-

Р -О-глюкопиранозил, 3500 1680

7-оксикумарин 3300

Цихорин (17) 230, 256 250, 310 1632 3550 — 1720-

6-окси, 7-0- 295, 344 395 3500 1685

р -Б-глюкопирано-зил-кумарин 3326

гидроксильных групп устанавливали также на основании продуктов превращения исследуемых веществ. Метальное производное (12) было идентифицировано с герниарином (13), а исходное вещество (12) с умбеллифероном. Вещества (15), (14), (18) при метилировании образуют одно вещество, идентичное 6,7-диметоксикумарину, что дает основание отнести (15) к 6-метокси-7-оксикумарину (скополетину), (18) — к его изомеру 6-окси-7-метоксикумарину (изоскополетину) и (14) — к 6,7-диоксикумарину (эскулетину).

Вещества (16), (17) являются гликозидами, которые при ферментном гидролизе расщепляются на 6, 7-диоксикумарин (эскулетин) и Б-глюкозу.

Гликозиды при гидролизе образуют одинаковые продукты расщепления эскулетин (14) и Б-глюкозу. Для выяснения места присоединения Б-глюкозы к (14) проведено метилирование их фенольного гид-роксила диазометаном.

Полученные соединения были идентичны скополину и изоскопо-лину, продуктами щцролиза которых являются скополетин (15) и изо-скополетин (18).

Проведенные исследования позволяют заключить, что (16) является 6-0-р-0-глюкопиранозил-7-сксикумарином (эскулином), а (17) — 6-окси-7-0-р-В-глюкопиранозил-кумарином (цихорином).

На основании физико-химических свойств, данных УФ- и ИК-спек-тров, величинам Ш" в различных системах и флюоресценции в УФ-свете, выделенные вещества были идентифицированы с кумарином (11), умбеллифероком (12), герниарином (13). скополетином (15), эскулети-ном (14), изоскополетиком (18), эскулином (16), цихорином (17).

Кроме кумариков, из растений рода Горицвет выделили соединение 02) с общей формулой С5Н!205, которое представляет собой бесцветные кристаллы сладкого вкуса. На хроматограммах легко обнаруживается бензидин-перисдатным реактивом. Вещество (19) образует дибснзалыше производное, окисляется периодатом натрия до формальдегида и муравьиной кислоты.

На основании физикс-ххшических свойств вещества (19) к его производного, а также количественного взаимодействия с ШЮ4, око идентифицировано с 5-атомным спиртом адонктом (рибитшсм).

Количественное содержание адонита (12) в надземной части горицветов определяли объемным методом, основанным на селективной окислительной способности перйодата. Надземная часть исследуемых видов горицвета содержит в значительных количествах (2—3%) пяти-атсмный спирт адокит. По всей вероятности, адонит является хемотак-сономическим признаком рода Горицвет.

4. Флавоноиды растений родов Горицвет и Тысячелистник

В растениях изучаемых родов наряду с кумаринами выявлены производные 2-фенил-бензо-у-пирона.

Н

Н

н

■> 2нсон + знсоон * н^о

Флавоноиды из измельченного воздушно-сухого растительного сырья экстрагировали 80% этиловым спиртом. Из спиртового извлечения после упаривания и очистки от сопутствующих веществ получили сумму флавоноидов, которую разделили на отдельные компоненты колоночной хроматографией на полиамидном сорбенте.

Из растений рода Горицвет выделили 8 флавоноидов (20—22), из тысячелистников — 14 флавоноидов (20—34) (табл. 5).

Выделенные флавоноццы представлены флавонами и флавонолами.

Вещества (20), (23), (28), (30), (34) дают положительную цианиди-новую реакцию по Брианту, характерную для флавоноидных аглико-нов. В ИК-спектре имеются полосы поглощения при 3400 см-1 (ОН-группа) и 1645 см-1 (С=0 у-пирона). На основании результатов реакции с хлористым цирконилом и лимонной кислотой вещества (20), (23), (28) отнесены к классу флавонов, вещества (30), (34) — к флаво-нолам. Вещество (28) дает положительную реакцию Баргеллини, что указывает на наличие в агликоне трех вицинальных оксигрупп. Количество оксшрупп в исследуемых соединениях определяли анализом их полных ацетильных производных. Данные УФ-спектроскопии (табл. 6) позволили определить места, занимаемые свободными гидроксильными группами. В продуктах щелочного расщепления всех выделенных флавоноидов, кроме (28), найден флороглюцин. Вещества (20), (28), (34) образуют п-оксибензойную кислоту, (23) и (30) — протокатеховую кислоту. На основании приведенных данных, идентифицировали вещества: (20), как 5, 7, 4' — триоксифлавон (апигенин), (23) — 5, 7, 3', 4' — тетраоксифлавон (люгсолин), (28) — 5, 6, 7,4' — тетраоксифлавон (ску-телляреин), (30) — 3, 5, 7, У, 4' — пентаоксифлавон (кверцетин), (34) — 3, 5, 7, 4' — тетраоксифлавон (кемпферол).

Космосиин (21). В продуктах кислотного гидролиза обнаружили апигенин и Б-глюкозу. Гликозвд, по данным УФ-спектров, имеет свободные оксигруппы при С-5 и С-4'. В присутствии ацетата натрия в УФ-спектре не наблюдается батохромных сдвигов максимумов длинноволновой полосы, но они имеются в агликоне, что свидетельствует о нахождении углеводного заместителя при С-7. По правилу Кляйна установили, что Э-глюкоза связана с агликоном р-гликозидной связью и находится в пиранозной форме. На основании полученных данных вещество (21) идентифицировали как 5,4'-диокси-7-0-р-Б-глю-копиранозифлавон (космосиин).

Витексин (22). Кислотный гидролиз по Килиани расщепляет молекулу флавона на апигенин и Б-глюкозу. Выход агликона составляет 52%, что характеризует исследуемое вещество как моногликозид. В ПМР-спектре вещества (22) отсутствует сигнал протона С-8, что явля-

Таблица 5

Основные свойства флавоноидов, выделенных из растений рода Adonis L. и Achillea L._

Вещество Общая Т. пл., Источник выделения

формула ■с род Achillea L. род Adonis L.

1 2 3 4 5 6

Апигенин (20) 5,7,4'-триоксифлавон с15н10о5 348-350 A. millefolium A ptarnica A tanacetifolium A bisseiata A nobilis A vernalis A sibirica A wolgensis A aestivalis

Космосиин (21) 5,4'-диокси-7-0-р-0-глюкопиранозш1флавон С21на 239-240 -50 A millefolium A ptarnica A tanacetifolium A bisseiata A. sibirica A wolgensis

Витексин (22) 5,7,4'-триокси-8-С-р-0-глюкопиранозилфлавон 262-264 -15 (0,5 метанола) A vernalis A wolgensis A flamens

Лютеолин (23) 5,7,3',4'-тетраоксифлавон 330-331 A seteceae A nobilis A fflipendulina A bisserata A vernalis A wolgensis A sibirica A aestivalis A flamens

Цинарозид (24) 5,3',4'-триокси-7-0-р-0-шюкопиранозилфлавон СА°п 250-252 -40 A millefolium A fflipendulina A bisserata A vernalis A wolgensis

Гомоориентин (25) б-С-р-О-глюкопиранозид лютеолина <W>U 238-240 +30 (1,0 этанол) A millefolium A nilreichii A cartilagínea A bisseiata A vernalis A. wolgensis A flamens

продолжение таблицы 5

1 2 3 4 5 6

Ориентин (26) 8 -С- р - П -глкжопира! газид люгголина сАоп 264-265 +20 (0,6 этанол) А. тШеГоНит А. иИтсЬи А. сагШа&пеа А. Ы55ега1а А. усгпай А. wolgeIlsis А. аез^уа^

Ацо1Шверних (27) люхеолин-8-С-р-В-глюкопираноэил (2")-0-р-Б-ксилопиранозид вда, 204-205 -24 (-1,0 этанол) А. уегпай А. 51Ьтса А. мто^епмв

Скутелляреин (28) 5,6,7,4'-тетраоксиф: швец I 340-343 Л. азрктГоНа А. 1апасеШоИа А. {ггапсМоЦа А. поЬШя

Скугеллярин (29) 5,6,4'-триокси-7-0-р-В-глюкуронид 281-283 -131,1 А. авркшТоЦа А. СапасеШоНа А. поЬШя

Кверцетин (30) 3,5,7,3',4'-пентаоксифлавон «уу, 310-312 А. тШеГоЫит А. асшпта1а А. ¡£-ап<ШоИа А. поЫ1ц

Рутин (31) З-О-р-О-глюкопиранозил-б-О-а-Ь-рамнопиранозид кверцетина с*нэ.°6 188-192 -37,5 А. тлИеРоЦит А. поЬШя

Изохверцитрин (32) З-О-р-О-глкжопиранозид кверцетина с21нио12 209-210 -35 А. тШеГоКшп А. аситшаШ

Гиперозид (33) 3-О - р-О -галактопират юз ид кверцетина с2,н„о12 239-241 -58,7 А. тШеМшт А. аз1айса А. ЁирепдиЦпа

Кемпферол (34) 3,5,7,4'-тетраоксифлавон 274-27б А. 5с[асеас А. поЪйш А. Ы5хега1а

Таблица 6

УФ-спектральная характеристика флавоноидов, выделенных из растений родов Adonis L. и Achillea L.

Соединение Полосы поглощения 5 • 10 мол. раствора в абсолютном этаноле Ацетат натрия Ацетат натрия + борная кислота Алюминия хлорид Этилат натрия

X АХ X АХ X АХ X АХ

1 1 3 4 5 6 7 8 9 10 11

Алигенин I II 340 270 380 275 +40 +5 340 270 0 0 385 276 +45 +6 400 277 +60 +6

Космосиин I II 337 268 357 378 +20 + 10 335 269 — 398 268 +61 360 177 +25 +11

Витексин I TJ 340 268 380 272 +40 +4 340 268 — 388 267 +48 -1 406 265 +66 -з

Лютеолин I тт 350 255 382 269 +32 +14 375 261 +25 +6 400 267 +50 +12 410 771 +60 +16

Цинарозид I II 355 265 405 276 +50 +11 355 365 396 268 +41 +2 390 274 35 +9

Гомоориентин I II 350 268 381 380 +31 +2 383 270 +33 +2 412 271 +62 +3 419 273 +69 +5

Ориентин I IT 350 271 380 277 +30 +6 380 267 +30 -4 411 269 +61 -2 416 216 +66 -2

Кверцетин I тт 370 257 390 274 +20 +17 387 260 +27 +3 444 270 +74 + 13 330 245 -35 -12

Рутин I II 358 292пл 268пл 258 390 272 +32 +14 378 264 +20 +6 412 273 +34 +15 410 274 +52 + 16

Изокверцитрин I тт 360 265 375 270 +15 +5 385 270 +25 +5 420 270 +60 +6 415 272 +40 +10

Гиперозид I тт 360 260 380 265 +20 +5 395 265 +35 +5 415 210 +55 +10 405 275 +45 + 15

Кемпферол I II 369 265 380 265 +11 0 375 265 +6 0 455 280 +86 +15 320 270 -49 +5

Скугелляреин I II 345 290 370 280 25 -10 355. 295 10 5 375 310 30 20 385 320 40 30

Скугеллярин I II 345 . 290 345 290 0 0 335 295 -10 5 360 305 15 15 390 310 45 20

ется доказательством наличия замещения сахарным компонентом этого положения. Исходя из полученных данных, вещество (22) идентифицировали как 8-С-р-Б-глюкопиранозид апигенина (витексин).

Цинарозид (24). При гидролизе 20% серной кислотой и ферментом виноградной улитки вещество (24) расщепляется на лютеолин и Б-глюкозу. Отсутствие батохромного сдвига длинноволновой и коротковолновой областей УФ-спекгра в присутствии натрия ацетата сравнительно с агликоном свидетельствует о замещении оксигруп-пы при С-7 углеводным компонентом. Величину окисного цикла и конфигурацию гликозидной связи определили сравнением молекулярных вращений исследуемого гликозида и фенил-гликозидов. Вещество (24) является 5,3',4'-триокси-7-0-р-0-глюкопиранозил фла-воном (цинарозид ом).

Ориентин (26) и гомоориентин (25). Дают характерные для флаво-ноидных гликозидов цветные реакции.

ИК-спекгры сходны и имеют полосы поглощения 1650 см-1 (—С=Ю), 3400—3520 см"1 (—ОН) и три интенсивные полосы при 1010—1100 см-1, характеризующие пиранозную форму глюкозы. Исследуемые соединения не отщепляют сахарного компонента при кислотном гидролизе в жестких условиях. Поэтому мы провели гидролиз веществ смесью Ки-лиани. Из продуктов щдролизата выделили лютеолин и Б-глюкозу и в качестве примеси хроматографией на бумаге обнаружили Б-арабинозу.

Анализ разности молекулярных вращений исследуемых гликозидов по сравнению с известными фенил-С-гликозидами показал, что они являются р-Б-глюкопиранозидами.

Анализ УФ-спектров, снятых в присутствии ионизирующих и ком-плексонообразующих реактивов, показывает, что свободные гидроксиль-ные труппы занимают 5,7,3',4' положения (табл. 6).

В ПМР-спекгре вещества (26) отсутствует сигнал протона при С-8, а у вещества (25) отсутствует протон в положении С-6. Вещество (26) по физико-химическим свойствам определено как 8-С-р-Б-глюкопи-ранозид лютеолина (ориентин), вещество (25) идентифицировано с б-С-р-Б-глюкопираноэвдом лютеолина (гомоориентином).

Адонивернит (27). 5%-ной серной кислотой гидролизуется в течение часа до ориентина и Э-ксилозы. Медленно щдролизуется ферментами улитки, что возможно при присоединении Б-ксилозы к глико-зильному остатку 1->2 связью. Устойчивость адовернита к гидролизу ферментом виноградной улитки является характерным для затрудненного второго положения Б-глкжозы в биозиде с 1->2 гликозидной связью между сахарами. Отсутствие в ПМР-спекгре полного ацетата адонивернита сигнала в области 1,85 м. д., принадлежащего ацетильной группе у С-2 гликозидного остатка ориентина, также свидетельствует о присоединении к нему Б-ксилозы.

На основании полученных данных, структуру исследуемого глико-зида (27) можно представить как л кггеол ин- 8 - С - р - Б-гл юкопиранозил (2')-0-р-Б-ксилопиранозид (адонивернит).

Скутеллярин (29). Положительная цианидиновая реакция и отрицательная по Брианту позволяет отнести исследуемое соединение (22) к флавоновым гликозидам. Из продуктов кислотного гидролиза получен скутулляреин и обнаружена Б-глюкуроновая кислота. Отсутствие зеленого окрашивания раствора вещества (22) в абсолютном спирте с этилатом натрия свидетельствует о замещении одной из трех вици-нальных оксигрупп кольца А скутелляреина. Анализ УФ-спектра, полученного с добавкой ацетата натрия, показывает, что сахарный компонент гликозида присоединен к гидроксилу при С-7 агликона. Конфигурацию гликозидной связи в гликозиде определяли по правилу Кляйна. Сравнительная разность молекулярных вращений монозида скутелляреина с молекулярными вращениями метил-О-а и р-Б-глю-коронопиранозидом определяет р-конфигурацию гликозидного центра в В-глюкуроновой кислоте. Приведенные данные позволяют исследуемый гликозвд идентифицировать как 5,6,4'-триоксифлавон-7-0-р-В-глк> куронвд (скутеллярин).

Рутин (31). Дает положительную цианидиновую реакцию и отрицательную в модификации по Брианту. По данным УФ-спектроско-пии, вещество (31) имеет свободные оксигруппы в положениях С-5, С-7, С-3' и С-4'. В продуктах кислотного гидролиза обнаружены квер-цетин, В-глюкоза и Ь-рамноза. Для определения порядка присоединения Сахаров проведен ступенчатый гидролиз, который позволил обнаружить промежуточный монозид, идентичный З-О-р-В-глюкопирано-зиду кверцетина.

Вещество (31) щдролизуется рамнодиастазой на кверцетин и рути-нозу. Отщепление рутинозы при ферментном гидролизе а-рамнодиа-стазой указывает на 1->6 порядок между сахарами. Таким образом, биозид представляет собой З-О-р-Б-глюкопиранозил-б-О-а-Ь-рамно-пиранозид кверцетина.

Изокверцитрин (32). Гидролизуется 0,1 н хлороводородной кислотой на кверцетин и В-глюкозу. По данным УФ-спектроскопии, вещество (32) имеет свободные оксигруппы в положениях С-5, С-7, С-3' и С-4'. Отрицательная реакция с азотнокислым цирконилом и лимонной кислотой подтверждает, что глюкоза присоединена кагликону в положении С-3. По правилу Кляйна установили, что В-глюкоза связана с агликоном р-гликозидной связью и находится в пиранозной форме. Вещество (32) идентифицировали как З-О-р-Б-глюкопиранозид кверцетина (изокверцитрин).

Гиперозид (33). Кислотный гидролиз расщепляет вещество (33) на кверцетин и D-галакгозу. По данным УФ-спектроскопии, вещество (33) имеет свободные оксигруппы в положениях 5, 7, 3', 4'. Следовательно, D-галакгоза присоединена кагликону в положении С-3. Анализ молекулярного вращения по правилу Кляйна позволил установить Р-конфигурацию гликозидной связи и пиранозную форму D-галактозы. Таким образом, вещество (33) является З-О-р-Б-галактопиранози-дом кверцетина (гиперозидом).

Выделенные флавоны и флавонолы относятся к флороглюциновому типу замещения A-кольца. Исключение составляют скутелляреин и ску-теллярин, которые имеют дополнительную оксигруппу у С-6. По замещению Б-кольца флавоноиды растений родов Adonis L. и Achillea L. отличаются незначительно, в основном встречаются оксигруппы у С-3' и С-4'.

Соединения с С-гликозцдной связью принадлежат только к классу флавона, а О-гликозвды представлены обоими классами. Сахарная часть выделенных флавоноидов включает D-глюкозу, L-рамнозу, D-ксило-зу, D-глюкуроновую кислоту, D-галакгозу. Класс флавона объединяет группы апигенина, лютеолина и скутелляреина. Класс флавонола включает группы кверцетина и кемпферола.

5. Сесквитерпеновые лактоны растений рода Тысячелистник

Для экстракции сесквитерпеновых лактонов тысячелистников нами использовалась в качестве экстрагента смесь петролейного эфира с ацетоном. В результате проведенных исследований по подбору экстрагента, мы пришли к выводу, что в наших условиях целесообразно использовать смесь петролейного эфира с ацетоном в соотношении 1:3. При экстракции указанным экстрагентом достаточно полно извлекаются сесквитерпеновые лактоны, немного сопутствующих примесей, и процесс концентрации извлечений можно проводить при невысоких температурах. Для разделения суммы сесквитерпеновых лактонов использовали силикагель.

В качестве элюента использовали петролейный эфир и смесь петролейного эфира с ацетоном. Соотношение разделяемой суммы к сорбенту 1:100. При хроматографическом разделении суммы веществ отбирали фракции по 50 мл и определяли их состав с помощью тонкослойной хроматографии в системах бензол, бензол — ацетон 95:5, бензол — этилацетат 9:1. Фракции, имеющие одинаковый состав, объединяли и концентрировали. В тех случаях, когда вымывались индивидуальные вещества, после удаления растворителя осуществляли дальнейшую их очистку перекристаллизацией из подходящего растворителя. Фракции, содержащие 2 и более сесквитерпеновых лактона, подвергались рехроматографии.

Описанным способом нами выделено 7 сесквитерпеновых лакто-нов (табл. 7).

Гроссмизин (35). При дегидрировании в присутствии 8е образуется хамазулен. При дегидрировании тетрагидропроизводного получен арте-

Таблица 7

Основные свойства сесквитерпеноидов, выделенных из растений рода АсЫПеа Ь.

Вещество и его шифр Общая формула Т. пл., 'С 20 WD Источник выделения

Аустрицин (36) С15Н18О4 150-150 +14,1 A. millefolium A. setacea A. nobilis

Леукомизин (38) С15Н18°3 201-203 +56,0 A. millefolium A. filipe ndulina A. setacea

Гроссмизин (35) С15Н18°4 156-158 + 110 A. millefolium A. michranta

Матрикарин (37) 194-195 +22,8 A. grandiflora A. michranta

Балханслид (40) С15Н24°3 153-154 + 183 A. bisserata A. collina A. setacea

Ацетилбалханояид (41) с17н24о4 125-126 +128,1 A. bisserata

A. collina

A. asplenifolia

Ханфиллин (39) С15Ц0°3 190 +154,1 A. asiatica

A. michranta

мазулен. В ИК-спекгре исследуемого вещества широкая полоса поглощения при 1754 см-1 указывает на наличие в его структуре у-лактонно-го цикла. Полосы поглощения при 3500 см"1 характерны для ОН-груп-пы и 1635 см-1,1610 см-1 — для двойных связей в сопряжении.

При гидрировании над платиновым катализатором (по Адамсу) поглощается 2 моля водорода и образуется тетращдропроизводное С15Н2204. Восстановление тетрагидропроизводного N38114 образует вещество, в ИК-спекгре которого отмечается интенсивная полоса при 3350 см"1, характерная для ОН-группы, полосы поглощения карбонильной и кето-групп отсутствуют. Вещество с уксусным ангидридом в среде пиридина образует моноацетильное производное С17Н20О5 с Т пл. 190—19ГС, которые указывают на наличие вторичной гидроксильной группы.

Вещество (35) имеет углеродный скелет гвайанолида, кето- и гидрожильные группы, две двойные связи в сопряжении и у-лактонный цикл, который в гвайанолвде находится у С( и С7. три углеродных атома в гвайанолидах представлены метальными группами у С4, С10 и Сп.

Химические и спектроскопические данные позволяют идентифицировать сесквитерпеновый лакгон (35) как гроссмизин.

Аустрицин (36). В его ИК-спекгре имеются полосы поглощения, характерные для у-лактонного кольца (1779 см-1)) у-ненасыщенного кетона (1687 см-1), двойных связей (1642 и 1619 см-1), вторичных ОН-групп (3545 см-1).

Ацетилированием в пиридине легко образуется моноацетильное производное С17Н20О5 с т. пл. 190—19ГС, что характерно для первичных или вторичных гидроксильных групп. При гидрировании в присутствии платинового катализатора в уксусной кислоте (по Адамсу) затрачивается 2 моля водорода. Из продуктов реакции выделено тетра-гидропроизводное С15Н2204 с т. пл. 178,1—180,4°С. Для выяснения положения щдроксила проведено окисление тетращдропроизводного хромовым ангидридом в среде уксусной кислоты.

Получено кето-производное С15Н20О4 с т. пл. 185,1—156,3°С, в ИК-спектре которого имеется сильная полоса поглощения при 1720 см-1 (циклогептанон), следовательно гидроксильная группа находится в се-мичленном цикле.

Свойства, анализ спектральных данных этого вещества и сопоставление их с литературными позволяют сделать вывод, что выделенный лакгон является аустрицином.

Матрикарин (37). На основании анализа его ИК-спектра можно охарактеризовать как сесквитерпеновый лактон, углеродный скелет которого представляет собой гваяновое ядро, конденсированное с у-лактонным циклом. В его ИК-спектре наблюдаются полосы поглощения, характерные для y-лакгонного кольца, ацетоксигруппы, кето-группы в пятичленном кольце и сопряженных двойных связей. Наличие вышеуказанных групп подтверждается результатами химических исследований. При каталитическом гидрировании в присутствии платинового катализатора 1 моль исходного вещества поглощает 2 моля водорода. Из продуктов реакции выделили тетрагидропроизводное C17H24Os, с т. пл. 176,1—178, 25°С. Для доказательства присутствия ацетильной группы проведен гидролиз тетращдропроизводного в присутствии K^COj. В ИК-спектре продукта гидролиза С15Н2204 с т. пл. 183—185°С находилась полоса поглощения ОН-группы (3320 см-1). Восстановление С15Н2204 алюмогидридом лития приводит к образованию вещества, в ИК-спектре которого отсутствуют полосы поглощения, характерные для кетонного и y-лакгонного карбонила. Следова-

тельно, в результате этой реакции карбонильные группы в пяти-членном лактонном кольце и углеродном скелете восстановились до ОН-групп.

На основании спектрального анализа и химических превращений можно охарактеризовать вещество (37) как матрикарин. Матрикарин из растений рода Тысячелистник выделен впервые.

Леукомизин (38). Полосы поглощения в ИК-спектре лактона при 1687 см-1, 1642 см"1, 1619 см-1, 1779 см-1 позволили предположить наличие в молекуле рассматриваемого соединения кето-группы, двойных связей и у-лактонного кольца.

Каталитическим гидрированием исходное вещество трансформируется в тетрагвдропроизводное С15Н2203, т. е. в процессе гидрирования поглотилось 2 моля водорода, что обусловлено наличием в молекуле двух двойных связей. Кетонная и лактонная карбонильные группы тетрагидропроизводного восстанавливаются NaBH4 до ОН-групп. В ИК-спектре образовавшегося триола отмечается интенсивная полоса ОН-группы (3386 см-1) и отсутствуют полосы поглощения кето-группы в пятичленном цикле и у-лактонного карбонила. Дегидрирование триола селеном приводит к образованию артемазулена.

Приведенные спектральные и химические превращения позволяют заключить, что исследуемое соединение представляет собой сесквитер-пеновый лактон гвайянового ряда, в 5-членном кольце которого находится кетогруппа. Константы рассмотренного вещества, а также его производных полностью совпадают с константами леукомизина.

Ханфиллин (39). Содержит у-лактоновое кольцо, которое при обработке растворами щелочей раскрывается с образованием соли у-окси-кислоты, а при подкислении вновь замыкается в исходный лактон. В ИК-спектре исследуемого лактона имеются полосы поглощения ОН-группы (3487 см"1), у-лакгонного кольца в конъюгации с двойной связью (1748 см-1), сопряженных двойных связей (1665 см""1, 1640 см-1). Ацетилирование вещества уксусным ангидридом в пиридине приводит к образованию моноацетильного производного С17Н2204 с т. пл. 240—24ГС, в ИК-спектре которого отсутствует гидроксильная группа и появляется полоса поглощения при 1735 см-1, 1270 см-1, характерная для сложноэфирной группы. Наличие сопряженной с лак-тонным карбонилом экзоциклической метиленовой группы подтверждается смещением полосы поглощения лактонного карбонила с 1775 см-1, 1800 см-1 до 1748 см-1. Полоса поглощения 1405 см-1, 1410 см-1 характерна для метиленовой двойной связи.

Сравнением полученных физико-химических констант, спектральных данных с литературными вещество QS) идентифицировали как ханфиллин.

Балханолид (40). Относится к сесквитерпеновым лактонам герма-кранового ряда. В его ИК-спектре имеются характерные полосы поглощения для OH-ipyimbi (3530 см-1), лактонного кольца (1760 см-1) и двойных связей декалинового цикла (1660 см"1, 1640 см-1). Присутствие у-лактонного цикла устанавливали по растворимости исследуемого вещества в щелочных растворах. При подкислении образовавшейся соли, сесквитерпеновый лакгон возвращается в исходное положение. Наличие двух двойных связей устанавливали гидрированием над платиновым катализатором, поглощается 2 моля водорода и образуется тетра-гидропроизводное С15Н26Оэ. Вещество (40) легко ацетилируется уксусным ангидридом в пиридине, образуя моноацетильное производное С17Н2404 с т. пл. 125—127°С, в ИК-спектре которого отмечено отсутствие полосы поглощения ОН-группы и появление полосы, характерной для сложноэфирной группы. Для выявления характера гидроксила проведено окисление тетрагидропроизводного хромовым ангидридом. В результате окисления ОН-группы получен кето-лактон С15Н2403 с т. пл. 136—137°С. Следовательно, гидроксильная группа является вторичной.

Учитывая наличие в исследуемом гсрмакранолиде двух двойных связей, одной гидроксильной 1руппы, у-лактонного цикла и литературные данные о том, что у гермакранолидов двойные связи обычно расположены при С,—С10, С4~С5, три углеродных атома С13-С14—С15 представлены метальными 1руппами, можно предположить для исследуемого соединения структуру балханолида. Сопоставляя свойства исследуемого гер-макранолида и его производных с литературными данными для балханолида и его производных, можно сделать вывод об их идентичности.

Ацетилбалханолид (41). Растворяется в щелочах, а при подкислении возвращается в исходную форму.

В ИК-спектре проявляются полосы поглощения, характерные для у-лактона (1766 см-1), сложноэфирной группы (1745 см-1 и 1250 см-1) и двойных связей (1739 и 1244 см"1).

При гидрировании над платиновым катализатором поглощается 2 моля водорода, образуется тетрагидропроизводное C17H2g04 с т. пл. 126°С.

Омыление тетрагвдроацетилбалханолида в щелочной среде приводит к образованию вещества, в ИК-спектре которого появляется полоса, характерная для гвдроксильной группы.

Окислением тетращдроацстилбалханолвда хромовой кислотой в среде уксусного ангидрида с последующей нейтрализацией смеси получено С15Н2403 с т. пл. 136—137°С.

Константы выделенного вещества, а также его производных, полностью совпадают с константами сесквитерпенового лактона ацетил-балханолида.

Сесквитерпены, полученные из исследуемых видов тысячелистника, представлены двумя типами: гваяна (вещества (35), (36). (37), (38) и гермакрана (вещества (32), (40), (41).

Многообразие сесквитерпеновых лактонов этих типов обусловлено разнообразием функциональных групп, их расположением, сочетанием и степенью насыщенности.

6. Перспективы использования лекарственных средств и растительного сырья родов Adonis L. и Achillea L.

В результате фармакогностического и фармакологического изучения растений родов Adonis L. и Achillea L. разработаны рекомендации по рациональному использованию и предложены препараты для клинического изучения. Из числа исследуемых растений выявлены перспективные виды, которые могут служить сырьем для получения существующих или новых препаратов.

Проведенные исследования многолетних видов рода Adonis — горицвета весеннего, г. волжскою, г. сибирского показали, что они сходны по карденолидному составу и не отличаются по биологической активности. Фармакологические исследования водных извлечений травы горицветов волжского и сибирского позволили сделать вывод о малой токсичности, высокой биологической активности, выраженном диуретическом и седативном эффектах и типичном для сердечных гликози-юв влияния на биологическую активность сердца. Эти исследования позволяют рекомендовать траву горицветов волжского и сибирского 1ля использования в медицинской практике аналогично траве горицвета весеннего. Полученный из них адонизид соответствовал требованиям ГФ-Х. Для фармацевтической промышленности перспективны горицвет волжский и горицвет сибирский, т. к. их сырьевая база достаточна для промышленной переработки.

В ходе исследований однолетних видов горицвета пламенного и горицвета летнего установлено, что их карденолидный состав подобен горицвету весеннему, но они имеют невысокую биологическую активность. В связи с этим, не могут использоваться для производства адонизида и других препаратов кардиотонического и седативного действия эез изменения аппаратурной и технологической схемы производства. Эднако однолетние виды горицвета по содержанию пятиатомного спир-га адонита не уступают многолетним видам. Адонит обладает высокой щуретической и дегидратирующей активностью, и на его основе целесообразно создать осмотический диуретик, подобный «Манитолу».

Результаты проведенных фармакологических исследований расте-зий рода Achillea L. свидетельствуют о том, что наряду с тысячелист-

ником обыкновенным, в практической медицине могут применяться и другие виды. Они обладают широким и разнообразным фармакологическим действием.

Наиболее выраженным мочегонным действием среди них обладает тысячелистник хрящеватый.

При изучении кровоостанавливающего действия установлено, что наибольшей активностью обладают тысячелистники обыкновенный, щетинистый и благородный.

Свойства растений рода Тысячелистник увеличивать латентный период и удлиннять гексеналовый сон можно применять, включая их в успокоительные сборы или принимать настой из данных видов как седативное средство.

При исследовании эфирных масел растений рода Тысячелистник выявили перспективные виды для получения хамазулена. Среди них A. millefolium, A. asiatica, A. asplenifolia.

Наряду с противомикробной активностью эфирных масел тысячелистников обыкновенного, мелкоцветкового, щетинистого, крупноцветкового, в лаборатории эмбрионального гистогенеза Института морфологии человека определили их действие на жизнеспособность нормальных лимфоцитов и злокачественных клеток человека линий К-502, MOJIT-4. Значительный цитотоксический эффект вышеуказанных эфирных масел на злокачественные (К-502, МОЛТ-4) клетки делает возможным применение их в перспективе как цитотоксических препаратов онкологического профиля.

Особый интерес в ряду препаратов, предложенных нами для фармакологических испытаний, вызывает густой экстракт, основными компонентами которого являются сесквитерпеновые лакгоны, кумарины и каротиноиды. Для его получения использовали надземную часть A. millefolium, A. asiatica и A. asplenifolia. Препарат изучался на противоопухолевую активность в отделе экспериментальной химиотерапии НИИ ЭДИТО ВОНЦ РАМН. Установлено, что препарат при пероральном введении проявляет противоопухолевые свойства. Лучший эффект получен при меланоме В-16, где зарегистрировано ТРО на 56—83%.

Совместно с кафедрами фармакологии, гигиены, кожных болезней КГМУ нами разработан способ получения средства для кожи «Лина-дерм», основной лекарственной субстанцией которого является масляный экстракт травы тысячелистника обыкновенного.

Предлагаемое средство для кожи «Линадерм», по сравнению с существующими средствами, имеет следующие преимущества: не обладает местнораздражающим, общетоксическим и сенсибилизирующим действием, предупреждает аллергенное влияние полимеров и других агрессивных химических средств при их длительном воздействии на кожу.

«Линадерм» рекомендуется для предупреждения дерматитов, вызываемых применением химических и косметических средств, а также для лечения экзем.

Для внедрения в практику здравоохранения предлагается также новое лекарственное средство «Сбор мочегонный Гербафоль». В ходе исследования установлен оптимальный состав сбора: листья толокнянки 33%, трава тысячелистника обыкновенного 33%, трава хвоща полевого 34%. Предлагаемое диуретическое средство по мочегонной активности не уступает сборам №1 и №2, а по противовоспалительным свойствам превосходит их.

«Сбор мочегонный Гербафоль» рекомендуется к применению в качестве умеренного средства для больных ишемической болезнью сердца и гипертонической болезнью. Сбор обладает отчетливым противовоспалительным действием у больных хроническим пиелонефритом. Он может быть использован в качестве основного или дополнительного средства лечения обострения заболевания.

7. Изучение морфологических признаков и анатомического строения надземной части различных видов рода Тысячелистник

В результате проведенных исследований растений рода Тысячели-:тник нами выявлен ряд характерных для каждого вида признаков, которые могут служить диагностическими для лекарственного сырья и использованы в нормативной документации. Отличительными признаками видов рода Тысячелистник являются размеры и количество устьиц, железок, волосков, а также степень извилистости клеточных ленок эпидермиса листа и стебля. Важным отличительным диагности-геским признаком видов является форма поперечного сечения листо-зой пластинки, черешка, стебля.

Полученные данные позволили научно обосновать и разработать «Методическое письмо по определению примесей в траве тысячелистника обыкновенного». Использование этих рекомендаций позволяет избежать ошибок при заготовке сырья тысячелистника обыкновенного л обеспечить его качество.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. В результате проведенных теоретических и экспериментальных «следований установлено, что растения родов Горицвет и Тысячелистник являются перспективным источником биологически активных зеществ, обладающих кардиотонической, диуретической, кровоостанавливающей, антиаллергической, антиоксидантной, противоопухолевой

активностью, на основе которых возможно создание новых лекарственных препаратов.

2. В растениях рода Горицвет и Тысячелистник обнаружено около 100 биологически активных веществ, относящихся к кардиостероидам, производным фенил-бензол- и бензо-а-пиронам, сесквитерпеновым лактонам, аминокислотам, многоатомным спиртам.

3. Из 5 видов рода Горицвет и 17 видов рода Тысячелистник выделено 44 вещества, изучены их свойства и структура.

Многолетние виды горицветов содержат сердечные гликозиды, фла-воноиды, кумарины, адонит.

Горицветы волжский, туркестанский, сибирский, амурский, золотистый по химическому составу и кардиотонической активности подобны горицвету весеннему и могут служить сырьем для производства препаратов Горицвета.

Из растений рода Горицвет выделены и идентифицированы карде-нолиды: дигитоксигенин, сомалин, строфантидин, цимарин, к-стро-фантин-р, к-строфантозид, конваллотоксин, конваллотоксол, цимарол, адонитоксин; флавоноиды: апигенин, космосиин, витексин, лютеолин, цинарозвд, гомоориентин, ориентин, адонивертин; кумарины: герниа-рин, умбеллиферон, скополетин; пятиатомный спирт адонит, полиса-харидный комплекс.

Впервые из растений рода Горицвет выделены сердечные гликозиды: цимарол, к-строфантозид, конваллотоксол; флавоноиды: космосиин, цинарозид; кумарины: герниарин и полисахарвдный комплекс.

Дан анализ зависимости биологической активности карденолидов от их строения. По сравнению стероидного ядра карденолвды горицветов относятся к цис А/В ряду. Показано, что биологическая активность зависит от места присоединения к стероидному ядру заместителей, их пространственной ориентации и структуры. В сердечных гли-козидах с одинаковым агликоном биологическая активность зависит от природы сахарных компонентов.

Выделенные флавоноиды представлены 5,7,4'-триоксифлавоном, 5,7,3',4'-тетраоксифлавоном и их С- или О-гликозидами.

Характерным для рода Горицвет является многоатомный спирт адонит (рибитол). Структурные особенности флавонов и многоатомного спирта являются хематаксономическим признаком рода Горицвет.

4. Горицветы волжский и сибирский рекомендуются для производства препаратов кардиотонического действия, гак как запасы сырья этих видов достаточны для их промышленной переработки.

Однолетние виды горицвета: пламенный и летний — по биологической активности уступают горицвету весеннему и не могут быть использованы для производства кардиотонических препаратов без изменения

гехнологии производства. Установлено, что однолетние виды горицвета могут служить источником получения осмотического диуретика (адони-га), т. к. выход его из этих видов сравним с таковым из г. весеннего.

5. Виды рода Тысячелистник содержат сесквитерпеновые лактоны, флавоноиды, кумарины и эфирные масла.

Из надземной части растений рода Тысячелистник выделены и идентифицированы производные бензо-а-пирона: умбеллиферон, герниа-рин, эскулетин, скополетин, эскулин, цихорин, изоскополетин; производные 2-фенил-бензо-у-пирона: апигенин, космосиин, лютеолин, цинарозид, ориентин, гомоориентин, скутелляреин, кверцегин, рутин, изокверцитрин, пшерозтщ, кемпферол; сесквитерпеновые лактоны гер-макранового и гваянового рядов: аустрицин, леукомизин, гроссмизин, матрикарин, балханолид, ацетилбалханолвд, ханфиллин.

Новыми для некоторых видов рода Achillea L. являются кумарины: кумарин, герниарин, эскулин, цихорин; сесквитерпеноиды: матрика-эин, балханолид; флавоноиды: скутелляреин, гиперозид.

Показано, что тысячелистник продуцирует как простые кумарины ¡кумарин), так и его производные с замещениями по С-7 и С-6-ОН, ЭСН3 группами.

6. Все исследуемые виды тысячелистника содержат эфирные Macla, количественное содержание которых колеблется от следовых коли-юств до 0,74%. Содержание хамазулена в эфирных маслах изучаемых видов изменяется от 0 до 0,6% от веса абсолютно-сухого сырья.

Наиболее перспективными азуленсодержащими видами являются V millefolium L., A. asiatica Serg, A. colina Beck, A. asplenifolia L.

Установлено влияние географических, климатических факторов и степени освещенности на содержание эфирного масла и проазуленов в эастениях рода Тысячелистник. Выявлены наиболее перспективные зайоны для проведения заготовок лекарственного сырья тысячелист-шка.

7. Изучены особенности морфолого-анатомического строения над-¡емной части видов рода Achillea L., установлены отличительные морфологические и микродиагностические признаки, позволяющие избегать ошибок при заготовке травы тысячелистника обыкновенного и обеспечить его качество, т. к. тысячелистники, произрастающие на территории РФ, не равноценны по химическому составу и фармаколо-■ической активности. Тысячелистники обыкновенный, щетинистый, благородный обладают преимущественно кровоостанавливающим дей-;твием; т. таволговый и благородный — седативным; т. хрящеватый — (иуретическим действием.

8. Разработана НТД на «Сбор мочегонный Гербафоль», в состав соторого включена трава тысячелистника обыкновенного. Сбор реко-

мендуется применять в качестве мочегонного средства при заболеваниях сердечно-сосудистой системы (гипертоническая болезнь, ишемиче-ская болезнь сердца и др., сопровождающихся хронической недостаточностью кровообращения), антисептического и противовоспалительного средства при бактериальных воспалительных заболеваниях почек и мочевыводящих путей (пиелонефрит, цистит).

9. Показано, что комплекс липофильных веществ травы тысячелистника обыкновенного и эфирные масла тысячелистников обыкновенного, мелкоцветного, благородного и щетинистого проявляют значительный циготоксический эффект на злокачественные (МОЛТ-4, К-502) клетки и являются перспективными для создания препаратов онкологического профиля.

10. Разработан способ получения суспензионно-эмульсионного линимента «Линадерм», который рекомендуется как эффективное лечебное средство при дерматозах и как профилактическое — для рук при работе с агрессивными средами (Решение НИИГПЭ 5039815/14 (020174) от 22.12.93 г. о выдаче патента РФ).

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Еськова И. Л., Дремова Н. Б., Яцюк В. Я. Изучение спроса населе-

ния на лекарственное растительное сырье и возможности его удовлетворения // — Курск. — 1984. — 9 с. — Деп. во ВНИИМИ МЗ СССР №8922-84.

2. Елецкая О. А., Яцюк В. Я., Чумакова Л. В. Изучение сохранности запасов лекарственного растительного сырья в Курской области // — Курск. — 1985. — 10 с. — Деп. во ВНИИМИ МЗ СССР №10084-85.

3. Елецкая О. А., Яцюк В. Я. К вопросу рационального планирования заготовок лекарственного растительного сырья по некоторым районам Курской области // — Курск. — 1987. — 5 с. — Деп. во ВНИИМИ МЗ СССР №13922-87.

4. Елецкая О. А., Яцюк В. Я. Поиск новых лекарственных препаратов мочегонного действия // Современные экологические проблемы провинции: Междунар. экологический форум. — Курск, — 1995. - С. 91-92.

5. Защитная мазь из растительного сырья для профилактики дерматозов, вызываемых контактом с пластмассами / Е. А. Губарев, Э. В. Гелла, В. Я. Яцюк и др. // Современные вопросы дерматовенерологии. — Курск. — 1995. — С. 38—40.

6. Комиссаренко Н. Ф., Корзенникова Э. П., Яцюк В. Я. Кардено-лиды Adonis wolgensis Steven // Химия природ, соединений. — 1973. - №3. - С. 433-435.

7. Комиссаренко Н. Ф., Яцюк В. Я., Корзенникова Э. П. Флаво-ноиды Adonis wolgensis Steven //Химия природ, соединений. —

1973. - №3. - С. 439-441.

8. Комиссаренко Н. Ф., Корзенникова Э. П., Яцюк В. Я. Кардено-лиды Adonis wolgensis Steven // Химия природ, соединений. —

1974. — №6. - С. 806-807.

9. Новое лечебное средство «Линадерм» для наружного применения /

B. Я. Яцюк, Э. В. Гелла и др. // Традиционная медицина и питание: теоретические и практические аспекты. — Материалы между-нар. науч. конгресса. — М. — 1994. — С. 222.

10. Полисахариды Adonis vernalis L. и A. Wolgensis Steven / В. Н. Чу-шенко, В. Я. Яцюк, Н. Ф. Комиссаренко, О. Б. Карамова // Раст. ресурсы. — 1995. — Вып. 3. — С. 97-99.

11. Препарат тысячелистника обыкновенного для профилактики и лечения дерматозов / Яцюк В. Я., Губарев Е. А., Жигулин В. А., Воронова Л. Я. // Современные вопросы дерматовенерологии. — Курск. - 1995. - С. 160-162.

12. Рябчиков О. П., Яцюк В. Я. Действие экстрактов из различных видов рода Тысячелистник на жизнедеятельность нормальных лимфоцитов и злокачественных клеток человека линий К-502 и МОЛТ-4 //Актуальные проблемы общей и частной патологии. — М., - 1993. - С. 156-158.

13. Суханова Л. А., Яцюк В. Я. Сравнительный статистический анализ заготовки тысячелистника аптечными учреждениями Курской области // — Курск. — 1988. — Деп. в НПО «Союз-мединформ». 11.04.89, №17529. — 7 с.

14. Трембаля Я. С., Яцюк В. Я., Ховрина М. П. Влияние минеральных удобрений на антимикробную активность эфирного масла тысячелистника обыкновенного // Фитонциды. Бактериальные болезни растений. — Материалы конференции. — Киев-Львов. — 1990. - С. 23.

15. Трембаля Я. С., Яцюк В. Я. Возможность повышения качества сырья тысячелистника обыкновенного с помощью минеральных удобрений в условиях его культуры // Актуальные вопросы фармацевтической науки и практики. — Курск. — 1991. —

C. 249-250.

16. Трембаля Я. С., Яцюк В. Я. К вопросу повышения качества тысячелистника обыкновенного // Лекарственные растения Центрального Черноземья и вопросы их рационального использования. — Курск. — 1994. — С. 95-101.

17. Яцюк В. Я., Комиссаренко Н. Ф., Гелла Э. В. Кфитохимиче-скому изучению полифенольного состава адониса волжского // Исследование лекарственных препаратов природного и синтетического происхождения: материалы конференции. — Томск. — 1975. - С. 19-20.

18. Яцюк В. Я., Комиссаренко Н. Ф., Гелла Э. В. Химический состав надземной части горицвета волжского // Раст. ресурсы. — 1975. - Вып. 3. - С. 515-518.

19. Яцюк В. Я., Комиссаренко Н. Ф., Гелла Э. В. Карденолиды Adonis volgensis // Химия природных соединений. — 1976. — №5. - С. 672.

20. Яцюк В. Я., Кузьмина Н. И. Изучение химического состава горицвета летнего и горицвета осеннего // — Курск. — 1982. — 3 с. - Деп. во ВНИИМИ МЗ СССР №6580-83.

21. Яцюк В. Я., Юдина И. П. Биологически активные вещества корней тысячелистника обыкновенного // Актуальные вопросы экспериментальной и клинической медицины и фармации: материалы юбилейной конференции, посвященной 60-летию Курского государственного медицинского университета. — Курск. - 1995. - С. 123-124.

22. Яцюк В. Я., Ященко Е. JI. Результаты инвентаризации запасов лекарственных растений Курской области // — Курск. — 1983. — 5 с. - Деп. во ВНИИМИ МЗ СССР №6579-83.

23. Яцюк В. Я., Шатунова JI. В. Результаты инвентаризации запасов лекарственных растений в некоторых районах Курской области // - Курск. - 1984. - 10 с. - Деп. во ВНИИМИ МЗ СССР №8945-85.

24. Яцюк В. Я., Доля В. С., Гелла Э. В. Фитохимическое исследование надземной части Adonis aestivalis // Химия природных соединений. — 1983. — №5. — С. 641.

25. Яцюк В. Я., Гелла Э. В. Анатомическое строение однолетних видов Adonis L. // Раст. ресурсы. — 1987. — Вып. 4. — С. 566-575.

26. Яцюк В. Я. Пошуки антиоксидантних сполук серед лжарьских рослин родини Asteraceae // Фармац. журн. — 1989. — №5. — С. 75-76.

27. Яцюк В. Я. Сравнительный анализ анатомического строения тысячелистника обыкновенного и тысячелистника крупноцветкового // - Курск. - 1989. — 4 с. - Деп. во ВНИИМИ МЗ СССР, 15.05.90 №17837.

28. Яцюк В. Я. Исследование химического состава тысячелистника дваждырассеченного // Состояние и перспективы развития фармации в Сибири и на Дальнем Востоке: (тез. докл. научн.-практ. конф.) — Томск. — 1991. — С. 207-208.

29. Яцюк В. Я. Тысячелистники Курской области // — Курск. — 1990. - 8 с. — Деп. во ВНИИМИ МЗ СССР, 15.05.90 №20625.

30. Яцюк В. Я. Влияние условий заготовки на качество сырья тысячелистника обыкновенного // Резервы совершенствования лекарственного обеспечения РСФСР: (Тез. докл. научн. конф.) — Владимир. — 1991. — С. 39-40.

31. Яцюк В. Я. Фармакогаостическое изучение растений рода Achillea L., произрастающих в Курской области // Лекарственные растения Центрального Черноземья и вопросы их рационального использования. — Курск, — 1994. — С. 102—111.

32. Яцюк В. Я. Поиск противоопухолевых средств среди растений флоры СССР //Актуальные вопросы фармацевтической науки и практики: (Тез. докл.) — Курск. — 1991. — С. 229—230.

33. Яцюк В. Я. Влияние процесса ферментации сырья на выход и состав эфирного масла травы тысячелистника обыкновенного // Актуальные проблемы фармации. — Тюмень. — 1994. — С. 151.

34. Яцюк В. Я., Ванина М. Д., Сизенцева Е. В. Сравнительное изучение химического состава тысячелистников обыкновенного и птарниколистного // Актуальные проблемы медицины и фармации: материалы конференции. — Курск, 1995. — С. 89—90.

35. Яцюк В. Я., Ванина М. Д., Юдина И. П. Углеводы травы и корней тысячелистника обыкновенного //Актуальные вопросы экспериментальной и клинической медицины и фармации: Материалы Юбилейной конференции, посвященной 60-летию Курского государственного медицинского университета. — Курск. - 1995. — С. 125.

36. Яцюк В. Я., Комиссаренко Н. Ф. Биологически активные вещества растений рода Горицвет // Современные экологические проблемы провинции: международный экологический форум. — Курск. — 1995. — С. 289-290.

37. Яцюк В. Я. Использование ИК-, УФ-спекгроскопических методов для идентификации сердечных пшкозцдов растений рода Горицвет (Adonis L.) // Актуальные проблемы фармацевтической химии: научн. труды, т. XXXV. — Москва, 1996. — с. 24—28.

38. Яцюк В. Я., Комиссаренко Н. Ф., Сухомлинов Ю. А. Метод газожидкостной хроматографии для определения химического состава эфирных масел некоторых видов рода Тысячелистник (Achillea L.) // Актуальные проблемы фармацевтической химии: научн. труды, т. XXXV. — Москва, — 1996. — С. 66—69.