Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Влияние иммуностимулятора натрия тиосульфата на иммуноморфогенез у цыплят, вакцинированных против болезни Марека



^ #

ВПТВВСКАЯ Г О СУДАРСТВКЯНАЯ АКАДДШТЯ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ

УДК 619:616.93:578.828.11-097.3:636.5-053.2

ПРПБЫТЫСО Светлан» Штрозяа

ВЛХШШВ ЕКМУ ПО СТИМУЛЯТОРА НАТРИЯ ТИОСУЛЬФАТА НА НММУИОМОРООГВНБЗ У ЦЫПЛЯТ, ВАКЦИНИРОВАННЫХ ПРОТИВ БОЛВЗПИ МАМКА

16.00.02 - пггология, стшлогпя в исрфологпя ¿хезотпш

Автореферат

диссертации на сопсхаипе учепоЯ степеая гапдядегавегерпнгрнья пгтух

Витебск -1998

Работа выполнена в Витебской государственной академии ветеринарной меднцииы

На^пиЛ руководитель - доктор ветеринарных иаук, профессор, академик МАН ВШ и Бел АО М.С. Жаков

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных иаук, профессор, академик ОРАН Крквутенко А.И (Одесский СХИ), доктор ветеринарных наук, профессор Максимович В.В. (ВГАВМ).

Оппонирующая организация - Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины.

Защита состоятся 14 мая 1998 года в 14 часов ш заседал па созета по защите диссертаций Д 03.33.01 в Витебской государственной академия ветеринарной медицины по адресу: 210602, г. Витебск, ул. Доватора 7/11, государственная академия ветеринарной медицины.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Витебской (государственной академии ветеринарное медицины.

Автореферат разослан 7 апреля 1998 года

Ученый секретарь Совета но защите диссертаций, кандидат ветеринарных иаук, доцент 113. Севрюк

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы диссертации

Со времени первого описания /I. Marek. 1907/ болезни Марека к ней привлечено внимание онкологов, вирусологов, иммунологов и патоморфологов. Был выделен я изучен возбудитель заболевания /P.M. Biggs, 1970/, установлена контагиозность и эпизоотические особенности заболевания /Б.И. Дозоров, 1975; Р.Н. Коровин, 1979/, вариабельность клинического и пятологоанатомнческого проявления / Г.И. Демкин. 1983; АА. Новых. 1985, 1988/, разработаны меры диагностики 'Т. - Q. Cheng et al., 1984; C.B. Сафронов н соавт., 1987; S. Reddy et al., 1988; B.A Лукина, 1992; В.Г. Ропоинч, 1993/ и специфической профилактики болезни / R.R. Simonson, 1984; Kwenzhon Tong, 1985; A- M Fanner, 1992; Wu Yantao et al., 1992/.

Однако до снх пор не предложены достаточно эффективные меры профилактики болезни Марека кур. Многие ученые считают, что на эффективность вакцинации в значительной иере влияет иммунный статус птицы. Поэтому наряду со специфической профилактикой данной болезни необходимо применять иммуностимуляторы / Н.Д Чубис и соавт., 1982; Н.Д. Придыбайло, Г.Е. Афанасьева, ЛН. Якушева, 1987 н др./. В последние годы в качестве иммуностимулятора предложен натрия тиосульфат. Установлено, что тиосульфат натрия оказывает положительное влияние на выработку иммунитета при вакцинации против некоторых инфекционных болезней /АИ. Теш, 1989; B.C. Прудников, 1991/.

Сведения в литературе об инмуноморфологнческнх изменениях в организме птиц при нх вакцинации против болезни Марека немногочисленны Нет работ, посвященных влиянию натрия тиосульфата на иммуногенез и иммуноморфогенез у вакцинированных против болезни Марека цыплят.

Связь работы с крупными научными программами, темами

Настоящие исследования являются составной частью плана НИР Академии и темы кафедры патологической анатомии и гистологии; " Иммуноморфогенез у животных прн болезнях и вакцинациях 8 условиях применения иммуностимуляторов" ( номер госрегистрации 0186.0072792).

Цель и задачи исследований

Целью нашнх исследований являлось выяснение особенностей формирования иммунитета против болезни Марека и возможности стимуляции этого процесса натрия тиосульфатом.

Исходя нз этого мы поставили задачу изучить;

1. Иммуноморфогеиез у цыплят, парентерально вакцинированных против болезни Марека внрусвакцнной из штамма ФС - 126 вируса герпеса индеек а апатогенвого штамма" ВНИВИП" против болезни Марека.

2. Стимулирующее влияние натряя тиосульфата на иммуноморфогеиез у цыплят при введении внрусвакцнны нз штамма ФС - 126 вируса герпеса индеек н апатогеииого штамма "ВШШИП" против болезни Марека

Научная новизна полученных результатов

В работе впервые представлен иммуноморфогеиез у цыплят, иммунизированных внрусвакцнной из штамма ФС -126 вируса герпеса индеек н апатогепного штамма "ВНИВИП" против болезни Марека, а также при вакцинации совместно с иммуностимулятором натрня тиосульфатом.

Практическая значимость полученных результатов

Выявленная вами возможность введения вакцины нз штамма ФС -126 вируса герпеса нвдеек н аяагогенного штамма "ВНИВИП" против болезни Марека в смеси с 7%-вым водным раствором натрня тиосульфата ( иммуностимулятором ) позволяет-повысить эффективность проводимых вакцинаций против этой болезни за счет выработки у цыплят более напряженного иммунитета по сравнению с иммунизацией без иммуностимулятора Производственный опыт, проведенный нами на цыплятах в неблагополучной по болезни Марека кур птицефабрике, подтвердил полученные нами положительные экспериментальные данные.

Экономическая значимость полученных результатов

Полученные результаты исследований свидетельствуют о том, что иммунизация цыплят внрусвакцнной н штамма ФС -126 вируса герпеса индеек н апатогеииого штамма "ВШШИП" против болезни Марека в снесн с 7%-иым водный раствором натрия тиосульфата позволяет повысить сохранность поголовья, выход мяса птицы и снизить процент поражения цыплят болезнью Марека Поэтому полученные нами результаты могут быть использованы в качестве коммерческого продукта.

Основные положения диссертации, выносимые назащиту

1. Динамика развития нммуноморфологнческнх реакций у цыплят, парентерально иммунизированных внрусвакцнной нз штамма ФС -126 вируса герпеса индеек и

аяатогенного штамма "ВЫЯВИЛ" против болезни Марека совместно с иммуностимулятором 7%-ным водным раствором натрия тиосульфата.

2. На основании изученной динамики нммуноморфологическнх реакций у цыплят предложен способ парентеральной иммунизации цыплят против болезни Марека с одновременным применением иммуностимулятора 7%-ного водного раствора натрия тиосульфата.

Личный вклад соискателя

Экспериментальные и теоретические исследования по теме диссертация проводились лично соискателем под научным руководством доктора ветеринарных наух, профессора, академика МАН ВШ н Бел АО М.С. Жахова. Иммуноферментный анзлнз (ИФА) исследуемых проб сыворотки крови цыплят проводила иа кафедре эпизоотологии при участии доаентаЮ.Г. Зелюткова

Апробация результатов диссертации

Результаты исследований доложены и обсуждены на итоговых научных конференциях профессорско-преподавательского состава Витебской государственной академии ветеринарной медицины /1994; 1995/, Международном симпозиуме /Санкт-Петербург, 1994/, юбилейной конференции Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. Х.И. Скрябина /Москва, 1995/, научной конференции, посвященной 70-летию ФВМ Воронежского ГАУ /"Воронеж, 1996/,1-й международной научно-практической конференции по ветеринарным и зоониженерпым проблемам животноводства /Витебск, 1996/, 2-й международной научно-практической конференции / Витебск. 1997/.

Опубликованность результатов

Основные положения диссертации изложены в 7 работах, опубликованных в ученых записках академии, материалах международных конференций и симпозиумов.

Структура и объем диссертации

Диссертация объемом 114 страднц машинописного текста состоит из введения, общей характеристики работы, основной части, включающей в себя 4 главы, выводов, списка использованных источников. Список использованных источников включает 204 наименования, в том числе 93 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 22 рисунками и 10 таблицами.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ Экспериментальная часть и методика исследований

Экспериментальная часть работы по изучению ннмуионорфогенеза у цыплят, вакцинированных аирусвакцнной из штамма ФС-126 вируса герпеса индеек н алатогенного штамма "ВНИВИП" против болезни Марека, н влияния на него иммуностимулятора яатрня тиосульфата, была выполнена в 1992-1995гт в лаборатории кафедры патологической анатомии и гистологии Витебской государственной академии ветеринарной медицины и наВнтебской бройлерной птицефабрике.

Было проведено две серии опытов. Первая серия была проведена на 15 цыплятах однодневного возраста с целью определения оптимальной концентрации раствора натрия тиосульфата, который будет использован для растворения вакцины нз штамма ФС-126 вируса герпеса индеек п алатогенного штамма "ВНИВИП" против болезни Марека.

Животные подбирались по принципу аналогов н были разделены на 5 групп.

Цыплятам 1-й группы вводили вакцину, растворенную в 1%-м растворе натрия тиосульфата в дозе 0,2 мл на голову (внутримышечно, в верхнюю треть бедра) согласно наставлению.

Цыплятам 2-й группы вводили вакцину, растворенную в 3%-м растворе натрия тиосульфата, аналогичным способом в дозе 0,2 мл на голову.

Цыплят 3-й группы иммунизировали вакциной, растворенной в 5%-м растворе натрия тиосульфата в дозе 0,2 мл на голову тем же способом.

Цыплятам 4-й группы вводили вакцину, растворенную в 7%-м растворе натрия тиосульфата аналогичным способом а в той же дозе.

Цыплятам 5-й группы вводили вакцину, растворенную в 9%-м растворе натрия тиосульфата в дозе 0,2 мл на голову тем же способом.

При проведения опыта нас интересовала реакция со стороны тканей на месте введения вакцины в смеси с раствором натрия тиосульфата, так как факт усиливающего воздействия растворов натрия тиосульфата на иммуногенность вакцин, применяемых в целях профилактика у свнней как бактериальных, так и вирусных болезней, уже был установлен сотрудниками нашей кафедры /В С. Прудников, 1991 н др./.

После убоя цыплят исследовали морфологические изменения в тканях по месту введения препарата.

Наилучшие результаты были получены у цыплят, которым вводили вахцнну, растворенную в 7%-м растворе натрия тиосульфата. По месту нньекцни в мышечной тканн бьш выражен слабый серозный отек, ярко выраженные микро-, макрофагальная н плазмоцитарная реакции. У цыплят, которым вводили вакцину, приготовленную на

растворе натрня тиосульфата меньшей концентрации, также отмечалась клеточная реакция в гканях по месту введения вакцины, но она была выражена в меньшей степени. При введении вакцины, растворенной в 9%-м растворе натрия тиосульфата, в тканях на месте введения преобладали процессы атьтерацнн н экссудации нал клеточными реакциями, были ярко выражены признаки некроза, дистрофические изменения s стенке сосудов н значительный серозный отек.

Тахим образом, наын было установлено, что 7%-я концентрация раствора натрия тиосульфата была оптимальной для растворения вакцины против болезни Марека Болевая реакция, которая наблюдалась сразу после введения вакцины, растворенной в 7%-м растворе нагрня тиосульфата, нсчезалав течение нескольких минут.

Во второй серии опытов было использовано 112 цыплят однодневного возраста. Цель этого опыта заключалась в изучении нммуноморфогеиеза у цыплят, вакцинированных совместно с иммуностимулятором натрня тиосульфатом против болезни Марека.

Животные отбнрхтнсь по принципу аналогов и содержались в клетках на Витебской бройлерной птицефабрике. Кормление их производилось согласно зоотехническим нормам. Цыплята были разделены на 4 группы по 28 голов в каждой.

Цыплятам 1-й группы вводили парентерально (внутримышечно в верхнюю треть бедра) вакцину в смеси с 7%-м раствором нагрня тиосульфата в дозе 0,2 мл на голову.

Цыплят 2-й группы вакцинировали тем же способом без применения натрия тиосульфата в дозе 0,2 мл на голову.

Цыплятам З-ä группы вводили парентерально 7%-ный раствор натрня тиосульфата без вакцины в дозе 0,2 мл на голову.

Цыплята4-й группы были контрольными.

Перед началом опыта, а также на 3, б, 9 н 12 сутки после вакцинации подвергли убою по 4 цыпленка из каждой группы для изучения иммуноморфологичесхнх изменений.

При проведении морфологических исследований кровь получали путем декапнтацин цыплят. Содержание гемоглобина в кровн цыплят определяли на ФЭК-М по методу, предложенному Г.В. Дервизом и AB. Воробьевым /1959/. Количество эритроцитов, лейкоцитов н тромбоцитов подсчитывала в счетной камере с сеткой Горяева после разведения кровн по методу АА. Кудрявцева и Л.А. Кудрявцевой /1974/ с использованием разбавителя, приготовленного на основе фосфатного буфера /■Natt, Herrick, 1932; И.А Болотников, Ю.В. Соловьев, 1980/.

Мазки крови высушивали на воздухе н фиксировали а метиловом спирте. Для выведения лейкограммы их окрашивали азур-эозином по методу Романовского-Гнмзы и подсчитывали 100 клеток/В.Н. Ннкитнн, 1936/.

Содержание рибонуклеиновой кислоты в лимфоцитах выявляли по методу Браше в модификации MC. Жакова в HLM. Карпутя /1967/. Оценку относительного количества

рибонуклеиновой кислоты производили по 3-батьной системе, подсчитывали 100 клеток. Интенсивно окрашенные клетки отмечали +++, среднео крашенные ++, слабоо крашенные г, неокрашенные - 0. Для сопоставления полученных результатов выводили средннй цитохимический коэффициент (СЦК) по формуле G. Astaldi и L. Verga/Э.И. Тереитьева, 1969/.

Т- н В-лнмфоцнгы в кровн определяли методом розеткообразовання О происхождении Т- и В-лимфоцитов суднли по величине и характеру ядра н цитоплазмы/N. Vujanovic, 1972; G. Voisin, 1975; П.М. Мусиенко, 1986/. Фагоцитарную активность псевдоэозинофилов определяли по методу А.И. Ивановой н Б.А. Чухловнна /1967/. Завершенный фагоцитоз учитывали по методу О.Г. Алексеевой н А.Г. Волковой /1966/. Общее содержание белка в сыворотке крови устанавливала рефрактометрическим методом с использовал не и рефрактометра ИРФ-3 н таблицы для вычисления процентного содержания белка по коэффициенту преломления сыворотки. Количественное определение белковых фракций проводили методом пластинчатого электрофореза в поли акр илам иди ом геле /В.М. Холод, Г.Ф. Ермолаева, 1988/. Уровень антител в сыворотке кровн определяли методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Для нмнуноморфологнческнх исследований брали следующие органы: тннус, фабрицвеву сумку, селезенку, слепокишечные миндалины, дивертикул Мекхеля, железу Гард ер а, печень и сердце.

После убоя цьшляг материал, предназначенный дня ннмунонорфологнческнх, нымунохимических н цитохимических исследований фиксировали в жидкости Карнуа, 96%-ном этиловом спирте, 10%-ном растворе нейтрального формалина в в спирт-формалине. Зафиксированный материал подвергли уплотнению путем заливки в парафин по общепринятой методике /Г.А. Меркулов, 1969/, а также замораживанием. Гистологические срезы готовили на санном и замораживающем микротомах.

Для изучения общих структурных изменений срезы окрашивали гемэтоксшшн-эозином, для дифференцировки нммуиокомпетентных клеток в органах иммунной системы - по методу Браше. Гликоген а тканях выявляли по методу Шабадаша /1947/, аскорбиновую кислоту - реакцией Жиру н Лебдона/Г.И Роскнн, Л.Б. Левинсон, 1957/ с докраской препаратов гематокснлнн-эознном, активность кислой н щелочной фосфатаз в клетках органов иммунной системы - по методу Гоморн /О.В. Волкова, Ю.Х. Елецкий, 1982/. Все проводимые нммуно- и гистохимические исследования сопровождались соответствующими контролями.

Подсчет клеточных элементов производили в 50 полях зрения микроскопа (объектив 100, окуляр 7, бинокуляр 1,25).

После экспериментального изучения нммуноморфогенеза у цыплят, вакцинированных вирусвакциной из штамма ФС-126 вируса герпеса индеек и апатогенного штамма "ВНИВИП" против болезни Марека, и влияния на него

иммуностимулятора натрия тиосульфата, был проведен производственный опыт по использованию вакцины против болезни Марека, растворенной в 7%-м растворе натрня тиосульфата, на 41770 цыплята* на Витебской бройлерной птицефабрнке. В производственном опыте изучали заболеваемость птицы болезнью Марека, сохранность поголовья и приросты живой яассы птицы.

Весь цифровой материал статнстнчесхя обработан.

Экспериментальная часть

Целью нашей работы было изучение иммуноморфогенеза у цыплят, парентерально нммунпзироваяных вакциной нз штамиа ФС-126 вируса герпеса нпдеек н алагогениого штамма "ВНИВИГГ против болезни Марека, а также влияние на него иммуностимулятора натрня тиосульфата.

Данные, полученные нами в результате проведенного опыта на цыплятах, свидетельствуют о том, что в органах иммунной системы этих животных после зиутрямышечного введения вакцины против болезни Марека развиваются нымуноморфологнчесхне изменения, свидетельствующие о формировании напряженного иммунитета против этой болезни.

Так, на 3-й день после вахзшнацнн яа месте введения вакцины с иммуностимулятором в мышечной ткана цыплят 1-й группы наблюдались ярко выраженные микро- н яакрофагальная а плазмоцитарная реакции.

В тимусе цыплят всех четырех групп макроскопических изменений не отмечалось. Гистологически у цыплят 1-й группы наблюдалось расширение мозговой зоны тимуса за спет увеличения количества лимфоцитов.

В фабрнц невой сумке цыплят 1-й группы отмечалось достоверное /Р;.40,05/ увеличение числа плазматических клеток за счет цлазмобласгов я незрелья плазмоцнтов, их .количество было в 1,2 раза больше, чем у цыплят 2-й группы, вакциннроваяных без натрня тиосульфата, у которых среди плазматических клеток преобладали плазмобласты. Увеличение количества плазматических клеток, по сравнению с контролем, у цыплят 2-й группы было недостоверным. На 3-й день после вакцинации в фабрнциевой сумке цыплят 1-й и 2-й групп достоверно повышалось количество клеток в состоянии янтоза, оно было в 1,6 раза выше по сравнению с контролем.

В цитограмне селезенки цыплят 1-й группы, вакцинированных совместно с натрия тиосульфатом, происходило достоверное увеличение числа плазматических клеток за счет щтазмобластов и незрелых плазмоцнтов. Количество плазматических клеток было в 1,4 раза больше /Р].;<0,01/, чем у цыплят 2-й группы, вакцинированных без натрня тиосульфата, и в 1,45 раза выше, чем у цыплят контрольной группы /Р1-4<0,01/. Изменение числа плазматических клеток у цыплят 2-й н 3-й групп было

недостоверным по сравнению с контролем. У цыплят 1-й н 2-й групп достоверно выше было содержание клеток в состоянии мнтоза.

В слепокишечных миндалинах цыплят 1-й группы среда плазматических клеток преобладали плазмобласты н незрелые плазмоциты, юс содержание было в 1,8 раза выше , чем у цыплят 4-й группы, н в 1,2 раза по сравнению с цыплятами 2-й группы. У цыплят 2-й группы, вакцинированных без натрня тиосульфата, увеличение числа плазматических клеток происходило за счет плазмобластов. Достоверно выше, по сравнению с контролем, было содержание клеток в состоянии митоза у цыплят 1-й н 2-й групп.

Аналогичные изменения наблюдались в дивертикуле Меккеля тонкого кишечника и железе Гардера. где так же, как н в других органах иммунной системы, рост числа плазматических клеток у цыплят 1-й группы происходил за счет плазмобластов и незрелых плазмоцнтов н превосходил в 1,2-1,4 раза эти показатели цыплят 2-й группы и в 1,5-1,7 раза показатели цыплят контрольной группы. У цыплят 2-й группы увеличение числа плазматических клеток происходило за счет плазмобластов. В дивертикуле Меккеля цыплят 1-й и 2-й групп к этому сроку исследования достоверно повышалось содержание лнмфобластов, а в железе Гардера - клеток в состоянии митоза

При гистохимическом исследовании в этот период выявлено снижение аскорбиновой кислоты и гликогена в печени и сердечной мышце цыплят 1-й и 2-й групп. Содержание кислой фосфагазы в Т-лннфоцнтах и макрофагах, щелочной фосфатазы в В-лннфоцнтах органов иммунной системы цыплят 1-й и 2-й групп было высоким.

В крови цыплят 1-й группы наблюдалось увеличение количества лейкоцитов. В лейкограмме вакцннированпых цыплят отмечалось достоверное увеличение числа лимфоцитов.

К этому сроку исследования в крови вакцинированных совместно с натрня тиосульфатом цыплят достоверно повышалось количество Т-лнмфоцитов. Увеличение содержания В-лнмфоцитов было статистически недостоверным по сравнению с контролен. Содержание РНК в цитоплазме лимфоцитов было достоверно выше по сравнению с контролен. СЦК составил в 1-й группе 2,71±0,02 /Р1-4<0,001/, 2-й - 2,58АО,03 /Р2^<0,001/, 3-й - 2,67±0,03 /Р3-4<0,001/, 4-й - 2,31±0,02.

У вакцинированных животных повышалась фагоцитарная активность псевдоэозняофилов, причем повышение более проявлялось у цыплят 1-й группы, которым вводили вакцину с натрия тиосульфатом.

В кровн к этому сроку исследования у вакцинированных цыплят повысилось содержание иммуноглобулинов классаМ, причем это повышение было более выражено у цыплят 1-й группы, иммунизированных с применением натрня тиосульфата Изменение содержания иммуноглобулинов класса А а й было недостоверным но

сравнению с контролен. Уровень антител з сыворотке ¡фовн цыплят 1-й группы был з 2,3 раза выше, чем у цыплят 2-й группы.

При анализе полученных нами результатов пеобходнмо отметить, что увеличение содержания плазматических клеток з большинстве органов иммунной системы цыплят 2-й группы было недостоверным по сравнению с контролем. В то же время у цыплят 1-й группы, вакцинированных с нагрня тиосульфатом, наблюдалось активное накопление не только плазмобластов, ао и незрелых форм плазматических клеток. Это свидетельствует о том, что у цыплят 1 -й группы под влиянием натрия тиосульфата уже на 3-й день после иммунизации а органах иммунной системы активно развивается яинуноморфологическая перестройка, в то время как у цыплят 2-й группы, вакцинированных без натрия тиосульфата, эти изменения выражены в меньшей степени.

На б-й день после иммунизации 1 тимусе цыплят 1-й и 2-й групп наблюдалось расширение мозговой зоны тимуса и обиаружнвалнсь тельца Гассаля в мозговом веществе тимуса

В фаорипиевой сумке цыплят 1-й группы зозросло количество плазматических клеток за счет плазмобластов я незрелых плазмоцнтов, а во 2-й группе увеличение количества плазматических клеток происходило за счет плазмобластов. Достоверно выше было я содержание клеток в состоянии аптозау цыплят всех подопытных групп.

В селезенке цыплят 1-й группы содержание плазматических клеток увеличилось, главным образом, за счет плазмобластов и незрелых плазмоцнтов и превысило уровень, контроля з 1,2 раза. Во 2-й группе цыплят среди плазматических клеток увеличилось количество плазмобластов. На 6-й день после иммунизации у цыплят 1-й и 2-й групп достоверно увеличилось содержание лнмфобластов я митозов по сравнению с контролем.

В слепокншечяых миндалинах цыплят 1-й группы увеличилось содержание плазматических клетох в 1,5 раза по сравнению с цыплятами 2-й группы /Р;.2<0,01/ за -лет плазмобластов и незрелых плазмоцнтов. Во 2-й группе цыплят увеличение числа плазматэтеских клеток происходило за счет плазмобластов. Достоверно зыше, по сравнению с контролен, у цыплят 1-й и 2-й групп было содержание лнмфобластов н митозов.

В днвертнкуле Мекхеля пьтляг 1-й группы холнчество плазматических хлеток было з 1,3 раза зыше, чей у цыплят 2-й группы 'Р\.2<0,001/, глазным образом, за счет плазмобластов, незрелых а зрелых плазмоцнтов. У цыплят 2-й группы содержание плазматических клеток достоверно превышало уровень контроля за счет плазмобластов. У вакцинированных цыплят обеих групп мнтотическая активность клеток оставалась на высоком уровне.

В железе Гзрдера цыплят 1-й группы плазматические клетка были представлены, в основном, плазмобластамн и незрелыми плазмоцнтамн, а у цыплят 2-й группы -

плазмобластаыи. Достоверно выше было содержание лнмфобластов н клеток в состоянии митоза у вакцинированных цыплят обеих групп.

При гистохимическом исследовании было установлено снижение содержания аскорбиновой хнслоты н гликогена в печени и сердечной мышце цыплят 1-й н 2-й групп. Содержание кислой фосфат азы в Т-лныфоцнтах н макрофагах, щелочной фосфатазы в В-лнмфоцитах органов иммунной системы цыплят 1-й н 2-й групп оставалось высоким.

В крови вакцинированных цыплят сохранялось повышенное содержание лейкоцитов, содержание РНК в лимфоцитах цыплят, вакцинированных совместно с иммуностимулятором, достоверно превышало уровень контроля. Относительное содержание лннфоцнтов у цыплят 1-й группы оставалось на высокой уровне, продолжало достоверно повышаться абсолютное содержание Т- а В-лимфоцитов. Изменение этих показателей у цьшлят других групп было недостоверным.

Фагоцитарная н переваривающая способность псевдоэозннофнлов кровн вакцинированных цыплят сохранилась на высоком уровне. У цьшлят, которым вводили вакцину совместно с натрня тиосульфатом, был выше, чем у иммунизированных одной вакциной, фагоцитарный индекс н процент переваривания. К 6-му дню после введения натрня тиосульфата /без вакцины/ достоверно повышался по сравнению с контролем, процент фагоцитоза у цьшлят 3-й группы.

В сыворотке крови цьшлят 1-й и 2-й групп сохранилось на высоком уровне содержание иммуноглобулина М я возросло содержание иммуноглобулинов классов А н в. Уровень антител в крови цьшлят 1-й группы был в 1,3 раза выше, чем у цыплят 2-й группы.

На 9-й день после вахцннацни а тимусе цьшлят наблюдались такие же нзменення, что и в предыдущие сроки исследования, но ярче выраженные.

В бурсе Фабрициуса цыплят 1-й группы достоверное увеличение содержания плазматических хлеток происходило за счет зрелых плазмоцнтов, наряду с этим содержание плазмобластов н незрелых плазмоцнтов оставалось на высоком '/ровне. У цьшлят 2-й группы увеличение количества плазматических клеток происходило, в основном, за счет незрелых плазмоцнтов. В фабрнцневой сумке цыплят 1-й группы х этому сроку исследования достоверно выше, по сравнению с контролем, было содержание лнмфобластов.

В селезенке цыплят 1-й группы так же, как и в бурсе Фабрициуса, наблюдалось закономерное повышение содержания плазматических клеток за счет клеток разной степени зрелости, в том числе за счет зрелых плазмоцнтов. Этот показатель превышал уровень контроля в 1,6 раза л0,001/ а в 1,5 раза/Р1.г<0,01/ уровень цыплят 2-й группы, у которых рост числа плазматических клеток происходил за счет незрелых форм. В селезенке цыплят 1-й группы митотическая активность клеток продолжала оставаться на высоком уровне.

В слепокишечных миндалинах, дивертикуле Мекке ля и железе Гзрдера цыплят 1-й группы увеличение плазматических клеток происходило за счет всех форм плазмоцптов, в то время как у цыплят 2-й группы среди плазматических клеток преобладали незрелые формы. В этих органах нннупной системы пыпляг 1-й группы достоверно выше было содержание клеток в состоянии митоза Этот показатель у цыплят других групп был статистически недостоверным.

При гистохимическом исследовании-на 9-е сутки после вакцинации, в отлнчие от предыдущих сроков исследования, отмечалось увеличение количества аскорбиновой кислоты н гликогена в печени и сердечной мышце цыплят первых двух групп.

В крови вакцинированных цыплят на 9-й день после иммунизации содержание лейкоцитов приблизилось к уровню контроля, а содержание РНК в лимфоцитах сохранилось на высоком уровне лить у цыплят 1-й группы, в то время как у цыплят других групп оио не имело достоверных различий с контролем. Наметалась тенденция к снижению фагоцитарной а переваривающей способности псевдоэозннофнлов хрови цыплят, хотя некоторые показателя была еще достоверно выше по сравнению с контролем.

В крови продолжалось накопление иммуноглобулинов А и О, особенно активное у цыплят 1-й группы, вакцинированных с натрня тиосульфатом. Этот показатель у них достиг 0,586±0,026 г/л /Р-^<0,03/, у вакцинированных же без загрня тиосульфата цыплят 2-й группы в сыворотке крови было ,505±0,02 г/л /?2-4>0,03/ иммуноглобулинов этих классов.

Полученные нами результаты свидетельствуют о том, что на б-9-й день после иммунизация происходит резкое усиление плазыоцитарной реакции с накоплением зрелых плазмоцитов, активно синтезирующих антитела, что особепно выражено прн использовании иммуностимулятора натрня тиосульфата. Плазмоцитарная реакция в органах иммунной системы цыплят отражает общую иммунную перестройку организма, которая коррелирует с накоплением иммуноглобулинов М, А н в, антител, чем обуславливает невосприимчивость цыплят х болезни Марека

На 12-е сутки после вахцннаани а тнмусз цыплят 1-й и 2-й групп наблюдались те же изменения, что я в предыдущие сроки исследования.

В фабрициевой бурсе цыплят 1-й и 2-й групп количество плазматических клеток не имело достоверных различий.. У цыплят как 1-й, так и 2-4 группы среди плазматических клеток преобладали зрелые формы, содержание их было достоверно выше по сравнению с контролем.

В селезенке цыплят 1-й группы содержание плазматических клеток было больше в 1,3 раза по сравнению с цыплятами 2-й группы, вакцинированными без натрня тиосульфата Среди клеток хак в 1-й, так а во 2-й группах преобладали зрелые плазмоциты и плазмобласты.

В слепокишечных миндалинах цыплят 1-3 группы содержание плазматических клеток было в 1,4 раза выше, чем у цыплят 2-Й группы. Среди них преобладали зсе формы плазматических клеток.

.Аналогичная хартнна наблюдалась в дивертикуле Меккеля и железе Гардера цыплят, где среди плазматических клеток преобладали зрелые формы в сочетании с незрелыми формами. Митотнческая активность клеток снижалась к этому сроку исследования. Изменение содержания плазматических клеток у цыплят 3-й н 4-й групп было недостоверным.

В крови цыплят на 12-й день после иммунизации снижалось содержание лейкоцитов, абсолютное количество Т- н В-лимфоцнтов, РНК в лимфоцитах, снижалась фагоцитарная а переваривающая способность псевдоэозннофилов крови цыплят н не имела достоверных различий с контролем.

Таким образом, проведенные нами исследования показали, что парентеральное введение вакдииы из штаына ФС-126 вируса герпеса индеек н аиатогенного штамма "ВНИВИГГ' против болезни Марека цыплят совместно с иммуностимулятором 7%-ным водным раствором натрня тиосульфата вызывает более выраженное, по сравнению с одной вакциной, развитие иммунной перестройки организма цыплят. Под воздействием натрня тиосульфата сокращалась продолжительность и повышалась эффективность индуктивной фазы иммунного ответа Продуктивная стадия иммуногенеза стала более интенсивной, что выражалось в усилении плазмоцнтарной реакции в органах иммунной системы,. * акпЬнзацпн митотической активности клеток. В крови в ответ на введение вакцины совместно с нмнуностнмулятором увеличивается количество лейкоцитов, в том числе Т- н В-лнмфопнтов, богатых РНК, актнвизнроватась поглотительная и переваривающая способность псевдоэозннофнлов, в сыворотке крови повышалось содержание иммуноглобулинов н антител.

Полученные данные позволяют сделать заключение о том, что натрия тиосульфат повышает нммуногенные свойства вакцины против болезни Марека цыплят и в смеси с нею обеспечивает формирование более напряженного иммунитета, чем при введении вакцины без иммуностимулятора. За счет антитоксического, десенсибилизирующего и противовоспалительного действия натрия тиосульфат снижает реактогенные свойства вакцины.

Производственные испытания предложенного намн способа вакцинации цыплят против болезни Марека з неблагополучной по этой болезни птицефабрике показали положительные результаты. Сохранность поголовья цыплят, вахцннированнъи с применением иммуностимулятора 7%-ного водного раствора натрня тиосульфата, составила 92,5%, в то время как сохранность цыплят, вакцинированных без натрня тиосульфата, равнялась 86,9% /на 5,6% ниже/. Средняя масса тушки при убое составила в 1-й группе 1,110 кг, во 2-й - 1,062 кг /на 48 г

меньше/, процент утилизации тушек был соответственно 0,99% и 1,89%. Зо 2-Я группе заболеваемость птицы кожной формой болезни Марека составила 0,56%, в то время как в 1-Й группе случаев заболевания болезнью Марека не отиечхюсь.

Экономическая эффективность в ценах января 1997 года составила 18,27 рубля на рубль затрат.

ВЫВОДЫ

1. Парентеральная иммунизация однодневных цыплят вакциной из штамма ФС-126 вируса герпеса индеек п аяатогенного штамма "ВНИВИП" против болезни Марека, растворенной з 7%-ноы растворе аагрия тиосульфата, вызывает, по сравнению с введением вакцины без натрия тиосульфата, более интенсивную олазмоцнтарную реакцию в органах нмнунной системы - фабрпцневой бурсе, селезенке, слепокашечных чнндалппах, дивертикуле Меккеля, железе Г ордера, за счет штазмоблзстов, незрелых а зрелых алазматнчесхих хлеток.

2. В крови цыплят, привитых вакциной совместно с натрня тиосульфатом отмечается увеличение общего количества лейкоцитов, содержания РНК в лимфоцитах, усиление фагоцитарной активности псевдоэозинофштов /поглотительная и переваривающая способность/, увеличение количества иммуноглобулинов М, А и С, а также специфических антител

3. Плазмоцнтарная реакция в органах иммунной системы цыплят, разливающаяся под влиянием вакцпны а иммуностимулятора натрия тиосульфата, отражает общую иммунную перестройку организма цыплят, которая хоррелнрует с усилением фагоцитарной активности псеядоэозииофдлоа, накоплением в крови иммуноглобулинов М, А, О н специфических антител, чем обуславливает невосприимчивость их к вирусу болезни .Марека.

4. 7%-ный раствор натрия тиосульфата, используемый совместно с закциной, снижает реактогенные и повышает иммунные свойства вакцины и обеспечивает формирование у цыплят иммунитета более высокой напряженности по сравнению с введепием одной вакцины.

5. Экономическая я эпнзоотологнчесхая эффективность при использовании з производственном опыте вакцины совместно с 7%-ныы водным раствором натрня тиосульфата в неблагополучной по болезни Марека птицефабрике выше, чем при иммунизации одной вакциной /без иммуностимулятора/. В группе цыплят, вакцинированных с использованием 7%-ного раствора натрия тиосульфата, зыше, чем в группе цыплят, иммунизированных одной вакциной, сохранность поголовья на 5,6%, средняя масса тушки при убое на 4,5%, процент утилизации тугае к в 1,9 раза ниже. Болезиь Марека у дтнцы, привитой вакциной с иммуностимулятором, не выявлялась, з

то время хак в группе с использованием вакцпиы без иммуностимулятора выявлено 0,56% случаев хожной формы болезни Марека

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

В птицеводческих хозяйствах а фабриках, неблагополучных по болезни Марека хур, для специфической профилактики этой болезни н повышения напряженности иммунитета у цыплят рекомендуем разбавлять вакцину из штамма ФС-126 вируса герпеса индеек и апатогенного штамма "ВНИВИП" против болезни Марека кур 7%-ным водным раствором натрия тиосульфата. Вакцинировать цыплят следует согласно наставлению по применению вакцины.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕЕТАЦШ1

1. Жаков М.С., Прнбытъко C.IL Иыыуноыорфологаческве реакции в крови и органах цыплят, вакцинированных против болезни Марека совместно с иммуностимулятором натрия тиосульфатом //Ученые записки Витебской государственной академии ветеринарной медицины, - Витебск, 1994,- Т.31.- С.93-96.

2. Жаков М.С., Прудников B.C., Большакова EJL, Лулпова ИМ, Прябыгъко С.П. Морфология иммунитета у животных а ответ на парентеральное заедены« вакцин и методы его стимуляции //Проблемы моделирования патологических процессов у человека н животных; нинуподгфнцнты, их диагностика и коррекция. Международный симпозиум,- СПб., 1994.- С. 14-15.

3. Жаков М.С., Прнбьпъко С.П. Имнуноыорфологическне реакции у цыплят, вакцинированных против болезни Марека совместно с иммуностимулятором натрия тиосульфатом //1-я Всероссийская научная конференция /Л1ымунодефициты с.-х. жнв-х. Тезисы докладов,- М., 1994,- С.34-36.

4. Жаков М.С., Прнбьггько С.П. Иммудоыорфогенез у цьшлят, вакцинированных против болезни Марека совместно с иммуностимулятором натрия тиосульфатом //Ученые записки Витебской государственной академии ветеринарной неднцины.-Ватебск, 1995.- Т.32.- С.101-103.

5. Жаков М.С., Жуков А. И., Луппова И.М., Горбунов А А, Прнбьпъко С.П Влияние иммуностимуляторов на нмнуноморфогенез у животных при нх вакцинации /УВетерннарные и зоонвженерные проблемы животноводства Материалы 1 международной научно-практической конференции.- Витебск, 1996,- С. 102-103.

6. Жаков М.С., Жуков А.И., Луппова И.М., Горбунов АА, Прнбьпъко С.П Влияние иммуностимуляторов на нымуаоморфогенез у животных при их вакцинации //Научные асцекты профилактики и терапии с.-х. жнвогных. Материалы научной конференции.

посвященной 70-летню факультета ветеринарной медицины Воронежского ГАУ, Часть 1, Воронеж, 1996.-С.178-179.

7. Прибмгько С.П. Влияние иммуностимулятора натрия тиосульфата на яммуноморфогенез у цыплят, вакцинированных против болезни Марека // Ветеринарные н зооннжеиерные проблемы в животноводстве я научно-методнческое обеспечение учебного процесса. Материалы 2-й Международной научно-практической конференции, г. Витебск, 25-26 сентября 1997г. - Минск, 1997.-С.206-108.

РЕЗЮМЕ

Прябытько Светлана Петровна Влияние иммуностимулятора натрия тиосульфата на имыуноморфогенез у цыплят, вакцинированных против болезни Марека.

Ключевые слова; аммуноморфогенез, натрия тиосульфат, болезнь Марека, вакцина, плазматические клетки, антитела, лимфоциты, микро- и макрофаги, иммуностимулятор, цыплята, парентеральная иммунизация.

Объектом исследования были цыплята от одного- и до двенадцзгидневного возраста, янтактные н вакцинированные против болезни Марека, без применения н с применением 7%-ного водного раствора натрия тиосульфата

Нами поставлены опыты по изучению нммунонорфогенеза у цыплят, парентерально вакцинированных вахцнной аз штамма ФС-126 вируса герпеса индеек и апатогенного штамма "ВНИВИП" против болезни Марека, растворенной в 7%-ном растворе натрия тиосульфата Реалнзадня поставленной цели осуществлялась путем ныыунонорфологнческях исследований органов иммунной системы 112 иммунных цыплят с помощью светового микроскопа и специальных методик окраски клеток и тканей. При проведении производственного опыта по оценке экономической знаяимоетн вакцинации цыплят против болезнн Марека с применением 7%-ного водного раствора аатрия тиосульфата было использовано 41770 цыплят.

Научная новизна исследований заключается в том, что вами впервые изучено влияние натрия тиосульфата яа аммуноморфогенез у цыплят, вакцинированных против болезни Марека, и показана высокая эффективность данного препарата как иммуностимулятора

Полученные результаты исследований используются а учебном процессе, а также в научных исследованиях при изучении нммунонорфогенеза у птиц. Натрия тиосульфат можно применять в птицеводстве для стимуляции и коррекции иммунных реакций у цыплят при вакцинации нх против болезни Марека

РЭЗЮМЭ

Прыбыцька Светлана Пятроуна

Уплыу ¡мунастымулятара натрыя щясульфэту на ¡муна.чорфагенэз у хураняг, закдынавалых супраць хваробы Марэка

Ключавыя словы: ¡мунаморфагенэз, натрыя шясульфат, хвароба Марэка, вакцына, плазматычныя хлетш, анщцелы, л^мфацьпы, Mixpa- i махрафап, парэнтэратьная ¡мушзадыя.

Аб'екгам даследавання Gbuii хураняга ад аднаго да дванаццацизгннага узросту, ¡нтактпыя i вахцынаваяьи супраць хворобы Марэха, без прымяненпя i з прымянеянеы 7%-га раствору натрыя шасульфэту.

Наш зроблены доследы па вызучэнню ¡мунаморфагенэзу у куранят яарэнтэральна вакцынаваных вакцынай з штача ФС-126 aipvca герпеса ¡ндыях i апатогенага штама "ВНШЗИП" супрадь хваробы Марэха, растворанай у 7%-ньш растворы натрыя Ц1ясульфагу. Рэал1зацыя паст ауле най мэты ажьщцяуляпася шляхам ¡мунаморфалапчных даследаваяняу оргаяау ¡муннай с1стэмы 112 ¡мунных куранят з даламогай светавога MixpacKona i спепыяльных методах афарбоую клетак i тканш. Пры правядзент выгворчага доследу па ацэнпы эканам1чпай 3Ha4Hacni вакцынацьи куранят супраць хваробы Марэка з прымяненнем 7%-га. раствору натрыя Ц1ясульфату было выхзрыстава41770 хурал яг.

Навуковая нав1зна даследавання заключаецца у тым, што нач1 упершыню вьшучаны уплыу натрыя щясульфату на шунаморфагенэз у куранят, вакцынаваных супраць хваробы Марэка, i паказала высокая эфектыунасць гэтага прэпарату як ¡мунастымулятара

Атрынаныя вышк! даследаваяняу аыкарыстоуваюцца у навучальным прадэсз, а таксама у аавуковых даследаваннях пры вывучэнш ¡мунаморфагенэзу у птушак. Натрыя щясульфят чожна ужываць у птушкагадоугп для стымулявання i карэкцьп ¡мунных рэакцьш у куранят пры аакцынадьп ix супрадь хваробы Марэка

SUMMARY

Pnbytko SvetlanaPetrovna Influence of the sodium tiosulphate the immunostimulant upon immunomorphogenesis in chicks vaccinated against Marek's disease.

Key words', unmuuomorphogeaesis, sodium tiosulphate, Marek's disease, vaccine, plasmatic cells, antibodies, lymphocytes, micro-, macrophages, immunostimulant, chicks, parenteral immunisation.

The subject of investigation were 1-12 days old chicks, intact and vaccinated against Marek's disease with and without application of sodium tiosulphate 7% water solutioa

The experiments were carried out to study unmunogenesis in chicks parenterally vaccinated by vaccine from turkey herpes virus stain FS-126 and apatogenic stain "VNTVTP" against Marek's disease diluted in 7% of sodium tiosulphate solution. To reach the aim the immunomorphological investigation of immune system organs of 112 immune chicks with the help of light microscope and special dying technics for cells and tissues were undertaken .

In industrial experiments for esaluation of economic significance in chicks vaccination against Marek's disease with the application of 7% water solution of sodium tiosuphate 41770 birds were envolved.

Scientific innovation of our investigation is that for the first time the influence of sodium tiosulphate on immunomorphogenesis in chicks vaccinated against Marek's disease has been studed and high efficiency of this preparation as immunostimulant has been shown.

The obtained results are used for academic purposes as wele as in scientific researches dealing with immunomorphogenesis in fowl. Sodium tiosulphate can be used in poultrybreeding for stimulation and correction of immune reactions in chicks at vaccination against Marek's disease.