Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Сравнительная характеристика иммуногенеза, вызванного инактивированными химической и живой противобруцеллезными вакцинами
- Ученая степень
- кандидата ветеринарных наук
- ВАК РФ
- 16.00.03
Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Сравнительная характеристика иммуногенеза, вызванного инактивированными химической и живой противобруцеллезными вакцинами
^чг г.": о
На правах рукописи
СО
О- ^
Петрова Марина Ивановка
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИММУНОГЕНЕЗА, ВЫЗВАННОГО ИНАКТИВИРОВАННЫМИ, ХИМИЧЕСКОЙ И ЖИВОЙ ПРОТИВОБРУЦЕЛЕЗНЫМИ ВАКЦИНАМИ
16.00.03. - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология
16.00.02. - патология, морфология и онкология животных
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук
Омск 1998
Работа выполнена в лаборатории специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота Всероссийского научно-исследовательского института бруцеллеза и туберкулеза животных, в областной лаборатории гнсто-цнтохимии и электронной микроскопии при патоморфологнческом отделе Омского диагностического центра
Научные руководители: доктор ветеринарных наук, профессор
А.А.Новицкин;
доктор медицинских наук, профессор А.В.Конолов.
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор
С.К.Димов;
доктор ветеринарные наук, профессор Н.Г.Мелышк.
Ведущее учреждение: Всероссийский научно-исследователь-
ский ветеринарный институт (Казань)
Защита состоится " с_1998 г. в час на
заседании диссертационного совета Д.120.48.01 при институте ветеринарной медицины Омского государственного аграрного университета по адресу: 622007, ул. Октябрьская, 92.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института Автореферат разослан " Сос-фи^ 1998 г.
Ученый секретарь диссертационного совета, ^ /
доцент ' Н.А.Королева
Актуальность проблемы. В настоящее время благодаря научно-обоснованной системе специальных мероприятии, бруцеллез животных ликвидирован на обширных территориях Российской Федерации. При этом главную ролт. в деле оздоровления от бруцеллеза крупного рогатого скота сыграла специфическая профилактика с использованием вакцины из штамма B.abortus 82. Однако в новых условиях складывающегося благополучия становится уже не оправданным использование живых вакцин, экологически далеко небезопасных. В частности, о негативных свойствах вакцины из штамма 82, связанных с ее абортогенностыо, перснстенцнеи, реверсией, трансформацией сообщали многие исследователи (А.В.Кононов, 1979; П.Е.Игнатов, 1983; А.А.Новицкий с соавт., 1989; 1990; О.Я.Исхаков, 1991; И.А.Косилов, 1992; А.А.Алимов, 1995). Помимо этого Г.Г.Попова (1974, 1978); H.H.Ильинских (1974); И.Г.Шройт с соавг. (1978); Г.М.Волгарева с соавт. (1992) указывают на мутогенное действие всех живых протнво-брунеллезных вакцин.
В рекомендациях ФАО/ВОЗ, изложенных в 6 Докладе экспертов комитета по бруцеллезу (1985), в части о необходимости продолжения дальнейших исследований по убитым вакцннам, в особенности в связи с применением усовершенствованных иммуностимуляторов и адь-ювантов.
Цель исследований. Провести сравнительную оценку ннактн-внрованных, химической и живой противобруцелезных вакцин для обоснования выбора предпочтительного метода получения и вариантов применения вакцинных препаратов, не обладающих высокой ре-актоагенностыо, сенсибилизирующей активностью, экологически безопасных и создающих достаточный иммунитет в сочетании с иммуностимулятором.
Задачи исследования:
1. Изучить ректогенные, нмммуногенные, антигенные свойства культур бруцелл после воздействия у-излучения.
2. Охарактеризовать морфологические изменения в органах и тканях, вызываемых противобруцеллезными вакцинами, с позиции взаимоотношений "антиген-макрофаг".
3. Изучить иммунистимулирующую активность токоферола в сочетании с различными противобруцеллезными вакцинами.
4. Изучить иммуногенность бруцеллезной химической вакцины (БХВ) с использованием штосом как носителей специфических нмму-ногенов в процессе формирования иммунитета.
Научная новизна. В нашей работе впервые в динамике изучены иммунобиологические свойства антигена бруцелл после воздействия у-облучення, в сочетании с иммуностимулятором, морфология вакцинного процесса, вызванного этим антигеном. Использование им-муноморфологической методики в сочетании с иммунологическими и
бактериологическими методами позволили дать объективную оценку тканевым изменениям. Нами показано, что воздействие у-лучей на микробную клетку усиливает пролонгирующее действие вакцины, иммунологическая перестройка организма сопровождается активным биосинтезом специфических антител и характеризуется определенными изменениями в органах вакцинированных животных, что делает возможным дальнейшее изучение этой вакцины на поголовье крупного рогатого скота, как экологически безопасной.
Практическая значимость. Полученные результаты открывают возможность разработки биотехнологии нового поколения противо-бруцеллезных вакцин, используя для этого доступные и сравнительно недорогие методы физического воздействия, в частности облучения у-лучами, способствующего почти полной утрате токсичности антигена при сохранении (или возрастании) его протективных свойств.
Апробация работы. Основные положения работы докладывались на Ученом совете и методической комиссии ВНИИБТЖ в 19911998 гг.; на научно-практической конференции по аграрным проблемам, Омск, 1997; 2-й научной конференции Новосибирского отделения Паразитологического общества РАН, Новосибирск, 1997; на юбилейной научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов "ОмГАУ - исторический опыт, проблемы и пути развития АПК Сибири", Омск, 1998; на объединенном заседании сотрудников лаборатории специфической профилактики; диагностики бруцеллеза; туберкулеза; биофизики; экологии и идентификации Ь-форм баюгерий ВНИИБТЖ, апрель1998; на заседании Областного Научно-технического комитега, секция животноводства, май 1998.
На заншту выносятся следующие основные положения исследования:
1. Метод получения инактивированной противобруцеллезной вакцины за счет воздействия у-излучения.
2. Способ повышения возможности иммуиогенности вакцинных препаратов при использовании токоферола в качестве нммуномоду-лятора.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 работ.
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, пяти глав обзора литературы, пяти глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений и рекомендаций и списка литературы, который включает 266 отечественных и 147 зарубежных источников. Текстовая часть изложена на 166 страницах компьютерного текста. Работа иллюстрирована 27 рисунками, 13 таблицами.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В проведенной работе в качестве объекта исследования в экспериментах использовано 560 морских свинок массой 350 г.
В воспроизведении любого инфекционного (вакцинного) процесса основным является вопрос о дозе возбудителя. Для морских свинок определены оптимальные дозы вирулентных бруцслл, вызывающих заражение и вакцинных, создающих иммунитет близкий к естественному. В связи с тем, что даже вирулентные штаммы В.abortus вызывают генерализацию процесса с очень скудными морфологическими изменениями, мы использовали для иммунизации значительные дозы бруцелл (2 млрд. м.к.), (Х.С.Котлярова, 1947; Н.А.Грекова, Н.Н.Островская, 1964; П.А.Вершплова, 1971). Доза живой стандартной вакцины В.abortus штамма 19 и обработанной у-лучамп устанавливались по оптическому стандарту мутности. Способ обработай бруцеллезной вакцины у-лучами патентуется.
Дозы бруцеллезной химической вакцины (0,6 мг), лнпосом (0,5 мл), дезннтеграта взвеси бруцелл (0,5 мл) были экспериментально установлены д.б.н., профессором лаборатории бруцеллеза ВИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи Е.А.Драновской.
Доза а-токоферола-ацетата составила 1 мл 10% раствора выпускаемого фармакологической промышленностью.
В работе были использованы вакцины, полученные в лаборатории бруцеллеза ВИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи АМН СССР методом уксуснокислого гидролиза из клеточной стенки бруцелл в S-форме, представляющий полисахаридный комплекс с содержанием общих Сахаров 55%, белка - 30% и 4% нуклеиновых кислот (Е.А.Драновская, 1976). Нами были изучены вакциныдвух серий: БХВ, серия 40, приготовленная из штамма B.melitensis 565 (вирулентный штамм) и БХВ, серия 44, приготовленная из штамма В.abortus 19 (слабовнрулептпый вакцинный штамм).
Кроме того, испытан дезинтеграт взвеси бруцелл. Разрушение микробных клеток проводили в дезинтег раторе Lab Sonu в течение 7 мин. прерывистыми циклами по 30 секунд каждый при температуре 4-6°С, в лаборатории бруцеллеза ВИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи Е.А.Драновской.
Липосомы получены на основании а.с. № 1655503, зарегистрированного в Госреестре изобретений СССР 1502.91 Шестаков К.А., Музея Г.И., Драновская Е.А., Куликов В.И. "Способ получения липо-сом, коныогнрованных с бактериальными антигенами". В работе использовали липосомы двух серий: липосомы, серия 14 с включенной в них БХВ 1,4 мг/мл, в 10 мл, с соотношением липид БХВ=20:1, при концентрации липндов 28 мг/мл; серия 15, "пустые" липосомы без БХВ, концентрация липндов 28 мг/мл. Состав обеих серий лнпосом
следующий: лецитин, холестерин, фосфотиднл - (Ы-(Ы-оксисукциппл идилсукщтил)) этаноламин в соотношении 8:2:2 в молях.
Антигены и стимулятор инъецировались подкожно в левую паховую область.
Выбор сроков иммунологических, бактериологических и гистологических исследований животных в динамике инфекционного (вакцинного) процесса мы проводили на основании имеющихся сведений о патогенезе экспериментального бруцеллеза, основные этапы которого,по главным характеристикам>подобны естественному течению инфекции и подчиняются закономерностям особого инфекционного процесса (Х.С.Котлярова, 1947; П.А.Вершилова, 1971; П.А.Триленко, 1976). Мы ограничились исследованиями только в определенные "пиковые сроки", которые знаменуют переход из одной фазы вакцинного процесса в другую или представляют наиболее яркое его проявление. Так, для изучения уровня фагоцитарной реакции в местном воспалительном очаге и характера взаимодействия системы "антиген-макрофаг", животные исследовались в сроки: 3, 6, 12, 24 часа после инокуляции вакцины. Чтобы проследить переход фазы регионарной в фазу генеразованного (если такая будет иметь место при применении различных, противобруцеллезных антигенов) процесса животные убивались в сроки 3, 7, 14, 21 сутки, затем динамика оценивалась на 30-е, 60-е, 90-е сутки. В указанные сроки животные вскрывались равными партиями по 3 морских свинки в группе, вакцинированной одним антигеном. После вскрытия животных морфологически исследовались кожа, подкожная клетчатка, и подлежащая мышечная ткань в месте введения антигенов, легкие, селезенка, печень, потен, синовиальные капсулы суставов. Особенное внимание уделялось исследованию периферической лимфоидной системе.
Для проверки иммунитета использовали эталонный вирулентный штамм В.аЬогШБ 19.
Дифференциацию вакцинного и вирулентного штамма проводили пробами по Каротич-Галота и с ихтиолом.
Для изучения аггшотнногенных свойств противобруцеллезных вакцин использовали реакцшо агглютинации в пробирках (РА), реакцию связывания комплемента (РСК), реакцшо Кумбса (РК).
Материал на гистологические исследования фиксировали в жидкости Карнуа, в забуференном формалине, а для иммунофлюрес-центных исследований фиксация проводилась по щадящей методике в 96° этиловом спирте на холоде (+4°С) с последующей заливкой в парафин.
Мазки-отпечатки готовили из тканей, полученных в месте инокуляции антигенов, из лимфатических узлов, селезенки, печени. В криостатных срезах из этих же объектов проводили обнаружение ан-
тигена, оценивалась его топография относительно гистологических структур.
Парафиновые срезы толщиной 5-6 мкм окрашивались гематоксилином и эозином, азуром-11-эозином, по методу Ван-Гнзона, по Браше, проводилась окраска по Перлсу.
У всех убитых животных бактериологически исследовали лимфатические узлы (паховые, пояснпчно-аортальные, подчелюстные, заглоточные, предлопаточные), селезенку, печень, кровь, мочу, костный мозг. Посевы делали по методике П.А.Вершиловой и Х.С.Котляровой (1950). Высевы из лимфатических узлов и паренхиматозных органов были проведены на одну пробирку с мясо-печеночно-гшокозо-глицериновым бульоном (МПГГБ) и две пробирки мясо-печепочно-глгокозо-глицсринового агара (МПГГА). Высевы проводили стерильной пастеровской пипеткой после предварительного прижигания места укола паталогического материала разогретым на пламени спиртовки шпателем.
Пробирки с засеянным патологическим материалом инкубировали в термостате при +37°С до 30 суток с периодическим просмотром характера роста культур.
Выделенные культуры индентифицировалн по общепризнанным методикам и дифференцировали от вакцинного штамма В.abortus 19.
Индекс инфнцированности вычисляли по формуле: И=(Ах100)/В, где И - индекс инфнцированности, А - количество культур, В - количество объектов, из которых проведены посевы.
Работу с живыми культурами проводили в соответствии с режимом, установленным при работе с возбудителями второй группы.
Оценка некоторых признаков проводилась по принципу альтернативного распределения, а именно, наличие гранулем в регионарных и отдаленных лимфатических узлах, присутствие в них многоядерных гигантских симпластов и т.д.
Информативно морфологические признаки оценивались по критерию Кульбаха (1976, 1978).
Таким образом, мы старались подобрать комплекс методик, который позволял бы достаточно объективно оценивать положительные и отрицательные стороны изучаемых антигенов и иммуностимулятора.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Ионизирующая радиация является существенным фактором воздействия на микроорганизмы. В ряде случаев она может быть использована для направленного изменения природы бруцелл, для получения новых форм микробов и с помощью высокодозового облучения возможно получение инактивнрованной вакцины с улучшенными
иммуногенными и сниженными токсическими свойствами (М.А.Туманян, Д.С.Каушанский, 1974; И.В.Рубцов соавт., 1984; Е.А.Драновская с соавт., 1987; А.В.Иванов с соавт., 1995; В.Р.Матросова с соавт., 1995; Л.Д.Серова с соавт., 1995; А.В.Санин с соавт., 1996). Кроме того, Г.Р.Михайлова, Л.П.Горшукова (1969), Г.М.Волгарева (1995) указывают, что инактивнрованные УФ и у-лучами вакцины не оказывают повреждающего действия на хромосомы мышей в экспериментах.
В нашей работе на первом этапе исследований мы провели сравнительной изучение иммунного ответа и иммунитета у лабораторных животных на введение облученной вакцины в сравнении с эталонной вакциной из штамма 19. Результаты серологических исследований представлены в талице 1.
На 30-й день после заражения животных были убиты для выяснения степени напряженности иммунитета и было проведено бактериологическое исследование патматериала. Живая вакцина создала иммунитет у 71,4% морских свинок (ИИ=10,0) облученной у - 85,8%, (ИИ=5,7).
Несмотря на то, что в наших исследованиях уровень серологических реакций после введения облученной вакцнны и жнвой отличался незначительно (т.к. основой к получению инактивнрованной вакцины взяли агглютиногенный штамм В.abortus 19), мы продолжили ее изучение. Нас интересовала сама возможность получения вакцины таким образом и ее способность создавать достаточный иммунитет.
Таблица 1.
ИММУННЫЙ ОТВЕТ У МОРСКИХ свинок
ПОСЛЕ ВАКЦИНАЦИИ И ЗАРАЖЕНИЯ_
Характе- Количество Результаты серолигических исследований
ристика (дни)
групп животных Реакции % реагирующих животных / средний титр
но группе
после вакцннвацин после
зараже-
ния
7 14 21 30 30
В. abortus РА 100/100 100/180 100/175 100/160 100/110
штамм 19 РСК 0/0 о/о о/о 100/5 100/27
живая 7 PK 0/0 100/450 100/650 100/820 100/1000
Облученная РА 100/80 100/150 100/140 100/130 100/100
вакцина 7 РСК о/о 0/0 0/0 100/10 100/20
PK о/о 0/300 100/500 100/560 100/400
Физ раствор контроль РА о/о 0/0 0/0 0/0 100/120
5 РСК о/о о/о 0/0 0/0 100/15
PK о/о о/о 0/0 0/0 100/15
Многочисленными исследованиями установлено, что напряженность и длительность иммунитета, вызванного живыми вакцинами, обусловлена интенсивностью размножения и расселения брунелл в организме. Процесс расселения вакцинного штамма брунелл в организме сопровождается развитием определенных морфологических сдвигов в лимфатических узлах и органах иммунизированных животных. В следующем экcпqшмeнтe мы сравнили гистологнчесие изменения, происходящие при взаимодействии!! макроорганизма с облученной, химической, дезинтегрированной и живой вакцинами.
Таблица 2.
ИММУННЫЙ ОТВЕТ У МОРСКИХ СВИНОК
ПОСЛЕ ВАКЦИНАЦИИ И ЗАРАЖЕНИЯ_
Характерис- Кол во Вид Результаты серолпгических исследовании (дни)
тика групп свинок реакции % реагирующих животных / средний титр по группе (МЕ)
после вакцинвации после заражения
7 14 21 28 30
Накцшшр. РА 95/100 100/178 100/175 100/158 100/130
В.аЬогигс из 35 РСК 0/0 0/0 0/0 100/15 100/30
штамма 19 РК 0/0 100/400 100/780 100/840 100/990
Вакцннмр. РА 100/84 100/150 100/140 100/136 100/100
1).аЬог1ш из 35 РСК 0/0 0/0 0/0 100/12 100/20
штамма 19, РК 0/0 0/300 100/510 100/560 100/480
облученная
Вакцшшр. РА 70/120 80/140 100/150 100/150 100/130
дезшптрнр. го песыо 35 РСК РК 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 100/300 90/5 100/380 100/10 100/580
брунелл
Вакцин! 1р. РА 90/50 90/80 100/110 100/110 100/80
БХВ + 33 РСК 0/0 0/0 0/0 90/10 80/18
ЛНПОСОМЫ РК 0/0 0/0 100/420 100/620 100/540
Физ. раствор РА 0/0 0/0 0/0 0/0 100/140
(плацебо 6 РСК 0/0 0/0 0/0 0/0 100/18
группа) РК 0/0 0/0 0/0 0/0 100/760
Бактериологическое исследование патологического материала было проведено из 10 объектов от каждого животного. Просмотр вели в течение месяца.
Животных опытных групп вакцинировали: 1-я группа - 2-х суточная культура из штамма В.аЬоПиБ 19 в дозе 2 млрд м.к. в 1 мл; 2-я группа - 2-х суточная культура нз штамма В.аЬоПиэ 19 в дозе 2 млрд м.к. в 1 мл., облученная; 3-я группа - дезинтегрированная взвесь бру-целл, содержащая 82,5 мг/мл. белка; 4-я группа - смесь, состоящая из БХВ и липосом. Морские свинки 5 группы вакцинации не подвергались и являлись контрольными.
Через 30 дней после вакцинации животных всех групп заразили вирулентной 2-хсуточной культурой из штамма В.аЬоПиз 54 в дозе 100 м.к. Иммунный ответ после вакцинации и заражения представлен в таблице 2. Живая вакцнна создала иммунитет у 66,7% животных (ИИ=4,4). Облученная вакцина создала, при 100% заражении контрольных животных, иммунитет у 77,8% животных (ИИ=3,5); дезинтегрированная взвесь бруцелл у 63,7, (ИИ=4,5); смесь БХВ с лнпосо-мами у 50% морских свинок, (ИИ=6,6).
При иммунофшооросцентном исследовании в срезах и мазках-отпечатках, получешшх с места введения бруцелл, обнаруживали в большом количестве клетки, в цитоплазме которых наблюдали микробный антиген и свободно лежащие микробные клетки.
Введение инактивированных антигенов вызывало у морских свинок слабую местную воспалительную реакцию, сопровождающуюся незначительной нентрофильной инфильтрацией. Уже в этот период динамика фагоцитоза инактивированных и живой вакцин ясно показала, что поглощение мононуклеарами инактивированных антигенов протекало значительно быстрее по сравнению с живой корпускулярной вакциной.
К исходу 3-х суток с момента вакцинации во всех группах животных антигеносодержащие клетки удалось обнаружить в синусах лимфатических узлов, регионарных к месту введения антигена, при этом наблюдался острый лимфоцитоз синусов.
К 7-м суткам иммунофлюоросцентным методом антигенсодер-жащие клетки, в группах животных с инактивнрованными антигенами, обнаружены в пределах регионарных лимфатических узлов - паховых и подвздошнопарааортальных. В группе животных, привитых живой вакциной, макрофаги, содержащие антиген, определяли в нерегионарных лимфатических узлах, печени и селезенке. Факт генерализации процесса подтверждался бактериологическим исследованием.
Качественным отличием реакции периферической лнмфопдной ткани в группе морских свинок, привитых живой вакциной, является формировашю в паракортикалыюй зоне лимфатических узлов участков скопления монуклеарных фагоцитов в количестве 15-20 клеток. В регионарных лимфаузлах обнаружены многоядерныные клетки типа клеток инородных тел, расположенные свободно в синусах или среди скоплений мононуклеарных фагоцитов.
В синусах селезенки животных, вакцинированных живым антигеном отмечали единичные многоядерные симпласты типа клеток инородных тел, а у животных, вакцинированных облученной вакциной, лишь некоторый отек и полнокровие красной пульпы.
В 14-дневный срок изменения в печени сводились к нарушению циркуляторного и дистрофического характера.
Максимум изменении обнаружен у животных, вакцинированных смесыо БХВ с липосомами, у которых наблюдали выраженную гипертрофию купферовскнх клеток, нарушение проницаемости стенки сосудов, диффузная зернистая дистрофия гепатоцнтов (токсикоз).
У животных, вакцинированных ¡тактированными вакцинами, признаков гранулематоза в 14-дневнын срок не отмечалось.
К месячному сроку при иммунизации облученной вакциной, гранулемы обнаруживали в регионарных лимфаузлах и не определяли в паренхиматозных органах.
В группе животных, привитых живым бактериальным агентом, отмечали пышную гранулематозную реакцию, максимальное количество гранулем было обнаружено в регионарных лимфатических узлах и печени.
Полученные данные показывают, что проверенные в опыте инактнвированные вакцины достаточно иммуногенны.
Учитывая положительные данные литературы, касающиеся применения антигенов, включенных в липосомы К.А.Шестаков с со-авт. (1988); Т.К.Каленик (1997), мы провели некоторые исследования в данном направлении.
Таблица 3
ИММУННЫЙ ОТВЕТ У МОРСКИХ СВИНОК _ ПОСЛЕ ВАКЦИНАЦИИ_
Хар-ка кол- Результаты серологических исследований (дни)
групп во % реагирующих животных /средшштитр по группе (МЕ)
BOT-
Ш. IX
7 14 21 28 60 90
Ж тая РА 80/150 100/200 100/200 100/180 100/100 100/70
вакцлш
D.abortiis 37 РСК 0/0 0/0 0/0 90/10 100/39 100/35
штамм 19 РК 0/0 80/460 100/460 100/500 100/1300 100/1300
БХВ + РА 100/250 100/300 100/300 100/250 100/150 100/130
липосомы, 37 РСК 0/0 0/0 60/10 100/15 100/28 100/25
серия 14 РК 0/0 100/700 100/780 100/800 100/1300 100/1300
Липосомы РА 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0
серия 14 37 РСК 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0
РК 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0
Фт. РА 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 о/о
раствор 10 РСК 0/0 0/0 ою О/О о/о о/о
(плацебо РК 0/0 о/о о/о 0/0 о/о о/о
iipvnra)
Животных опытных групп вакцинировали: 1-я группа - 2-х суточная культура В.аЬоги^ штамм 19, 2 млрд. м.к. в 1 мл.; 2-я группа -липосомы, серия 14 с включенными в них БХВ, 1,4 мг/мл, доза 0,5 мл; 3-я группа - "пустые" липосомы без антигена, серия 15, доза 0,5 мл; 4-я
группа - интактные животные, антигенной стимуляции не подвергались.
Сформированные 4 группы разделили на 2 подгруппы каждую. Животных первой подгруппы через 30 суток, второй - через 90 с уток-после иммунизации заразили вирулентным штаммом B.abortus 54 в дозе 100 м.к. подкожно.
Перед иммунизацией сыворотки крови морских свинок реагировали в РА, РСК, РК отрицательно.
Установление, что на 7-й день после иммунизации реагируют животные только в РА в титрах от 150 до 250 ME и пик антителооб-разования выявлен на 14 день. В группе, где применяли, включенную в липосомы БХВ, антителообразование происходило наиболее быстро и с высокими титрами (Таблица 3).
Степень защиты морских свинок после вакцинации и последующего заражения составила: на 30-н день после вакцинации - в первой группе животных 71% (ИИ=17,0); второй 62%, (ИИ=10,0); в третьей и четвертой группах иммуных животных не было, а ИИ=60,0 и 66,0, соответственно.
На 90 день после вакцинации степень защиты животных составила в первой группе 62% при ИИ=31,0; во второй 60% иммунных при ИИ=19,0; в третьей и четвертой группах иммунных морских свинок не было, а ИИ составил 62,0 и 72,0 соответственно.
При иммунофлюоресуцентном исследовании в срезах и мазках-отпечатках, полученных с места введения живых бруцелл, обнаружены в большом количестве клетки, в цитоплазме которых определяли бактериальный антиген и свободно лежащие микробные клетки. К 12 часам у морских свинок, вакцинированных БХВ с липосомами, антиген определялся в фагоцитах в виде гомогенной массы, так называемого "растворенного" антигена. Это связано с неодинаковым характером фагоцитоза в этих двух группах.
В группе животных, привитых живой вакциной, фагоцитоз протекал значительно медленнее. Так, к 24-48 часам после инокуляции вакцины, здесь помимо внутриклеточнорасположенных корпускулярных масс антигена определяли и нефагоцитированные бруцел-лы.
К исходу 2-х суток с момента вакцинации животных БХВ с липосомами антнгенсодержащне клетки удалось обнаружить в синусах лимфатических узлов, регионарных к месту введения препарата. Краевой и промежуточный синусы при этом были резко расширены, отмечался их отек, гипертрофия литторальных клеток. Такие же изменения при иммунизации живой вакциной наблюдали к исходу 3-х суток.
Морфологическая структура печени через 3 дня после инъекции БХВ с липосомами заметно менялась Ретикулоэндотелиальные клетки
были растянуты огромными вакуолями, в то время как в гепатоцнгах лизосомнын аппарат, содержащий липосомы, был лишь немного увеличен. В вакуолях вместе с липосомами можно было обнаружить гликоген, митохондрии и другие цитоплазматические компоненты.
Метод нммунофлюоресценцни позволил обнаружить в это время специфический "растворенный" антиген в звездчатых ретикулоэн-догелиоцитах (купферовских) клетках печени и дендритных клетках фолликулов селезенки.
При вакцинации БХВ с липосомами и живой вакциной наблюдали одинаково протекающий лимфоцитоз синусов нерегиональных лимфатических узлов.
К 14 дшо антигенсодержащие клетки определяли в синусах всех групп лимфатических узлов, в селезенке, в печени. В периферической лимфоиднон ткани увеличивалось число терминальных центров фолликулов, отмечалась их гипертрофия и антнтелогенез. Максимальной величины площадь терминальных центров достигала к 14-м суткам, что совпадало с динамикой титров антител. Причем подобная закономерность прослеживалась в обеих группах.
К этому времени у животных, иммунизированных живой вакциной, в региональных лимфатических узлах и селезенке наблюдали очаговые клеточные пролифераты, а в группах, иммунизированных БХВ с липосомами основную массу клеток в лимфаузлах составили лнмфобласты, плазмобласты и зрелые плазматические клетки, а в селезенке регистрировали отек и полнокровие красной пульпы.
К месячному сроку при вакцинации БХВ с липосомами сформировалось гранулематозное воспаление. Гранулемы обнаруживали, как правило, в регионарной к месту введения лимфоиднон ткани. В группе животных, привитых живым антигеном, наблюдали пышную гранулематозную реакцию с гигантоклеточной трансформацией фагоцитов.
В срок 2-3 месяца вакцинный процесс в группе БХВ с липосомами проявлялся в виде гранулематозной реакции, не выходящей за пределы регионарного лимфатического барьера, в гранулемах не отмечали гигантоклеточной трансформации. В группах животных, иммунизированных живой вакциной максимально проявлялась цэану-лематозная реакция. Лимфоидная ткань в лимфаузлах вытеснялась. На ее месте формировались гранулемы из крупных, светлых мононук-леарных фагоцитов, встречались в небольшом количестве эпителоид-ные и гигантские клетки. Однако, в основном гигантоклеточная реакция была представлена мононуклеарными фагоцитами и снмпла-стами типа клеток инородных тел. В таких гранулемах не встречалось эпителиодных клеток. В печени, почках формировались гранулемы из лнмфоидных клеток. Среди клеточных элементов гранулем, обнаруживаемых в паренхиматозных органах, находили небольшое колпче-
ство плазматических клеток. Гранулемы располагались иернваску-лярно и не имели признаков некроза. В этот же срок регистрировали признаки продуктивного васкулита. Артериолы и мелкие вены были окружены валом, состоящим из мелких лимфоцитов. Более крупные сосуды имели внутристеночные и пристеночные инфильтраты, стенка их была разволокиена, эндотелий пролиферировал, клетки его выглядели набухшими, гиперхромными. Мелкие сосуды находились в состоянии плазматического пропитывания и гликолиза.
В 2-3 месячный срок развития вакцинного процесса, вызванного живой вакциной, очень ярко проявлялись системные суставные поражения. Крупные суставы у таких животных были резко увеличены. При вскрытии в капсуле сустава, в синовильной оболочке н жировой подушке отмечались мелкоточечные кровоизлияния. Гистологически в таких суставах определялась гипертрофия синовиацитов, среди них располагались мононуклеары. Отмечались участки отторжения синовиацитов с обнажением волокнистых структур. Сколько-нибудь заметных признаков артрита у морских свинок, вакцинированных БХВ с липосомами выявить не удалось.
Таким образом, БХВ, включенная в липосомы, по протектив-ным свойствам незначительно уступает живой противобруцеллезной вакцине и является менее реактогенной. Однако она обладает выраженной агглютшюгенностыо. Метод приготовления липосом довольно трудоемкий и дорогой. Так же вызывает сомнения возможность длительного их хранения и транспортировки. Поэтому мы считаем, что на сегодняшний день широкое применение липосом в ветеринарии является проблематичным.
Известно, что дополнительное введение животным витамина Е повышает устойчивость организма к инфекционным болезням, при этом активируется как клеточный, так и гуморальный иммунитет. Стимулируется активность Т-хелперов и фагоцитоз (Ю.И.Афанасьев, Т.В.Броннхина, 1987; Н.Д.Придыбайло, 1990). Токоферол, являясь антиоксидантом повышает иммунный статус и способствует увеличению концентрации у-иитерферона у животных (В.Н.Суколинскнй, 1990) и даже такие высокоактивные антиоксиданты как ионол, дилу-дин, 6-эпигид, не могут заменить витамин Е (Г.В.Доиченко с соав., 1988).
Мы в своей работе использовали в качестве иммуностимулятора а-токоферола ацетат, который обладает очень низкой токсичностью. Так, максимально переносимые уровни поступления этого витамина в организм в 100-250 раз превышают величину необходимых доз (О.Г.СошЬк, 1988). Для сравнения максимально переносимые дозы витамина А и Д отличаются от необходимых уровней обычно в 10 раз; рибофлавина и пантотеновой кислоты в 10-20 раз.
Через месяц после вакцинации живая вакцина создала иммуни-
тет у 87,5% морских свинок, облученная у 85,5%, а облученная с токоферолом у 75% морских свинок, а через 3 месяца, соответственно у 50%, 62,5% и 75% при ИИ=2,5. Полученные нами данные показывают, что токоферол способствует пролонгированию защитных свойств облученной вакцины, что подтверждается гистологическими исследованиями.
Схема опыта была следующей: 1 группа - Живая прогивобру-целлезная вакцина из штамма В.аЬоПиБ 19; 2-я группа "облученная" вакцина из штамма В. аЬоПи519; 3-я группа "облученная" вакцина с токоферолом; 4-я - интак. животные (физ. р-р). После иммунизации серологические исследования проводили на 7, 14, 21, 28, 60, 90 дней, а также на 30 день после заражения. Результаты представлены в таблице №4.
Таблица 4.
ДИНАМИКА СЕРОЛОГИЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ У МОРСКИХ СВИНОК ПОСЛЕ ВВЕДЕНИЯ ПРОТИВОБРУЦЕЛЛЕЗНЫХ
Характеристика групп Кол-во животных Реакция Результаты серологических исследовании после вакцинации (дни) % реагирующих животных / средний титр по группе (МЕ)
7 14 21 28 60 90
1. Живая вакцина протн- вобруц. вак. игг. 19 43 РА РСК РК 90/50 ОЛ) 0/0 100/200 0,« 100/400 100/190 0/0 100/650 100/185 100/10 100/750 100/130 100/42 100/1000 100/90 100/35 100/850
2. Облуч. противо бруц. вакц., шт.19 43 РА РСК РК 100/90 0/0 0/0 100/160 0/0 100/390 100/150 0/0 100/390 100/136 100/12 100/680 100/115 100/27 100/600 100/58 100/20 100/440
3. Облуч. вакц.+ токоферол 43 РА РСК РК 100/102 0/0 0/0 100/170 0/0 90/510 100/170 0/0 100/590 100/150 100/5 100/780 100/130 100/35 100/700 100/90 100/30 100/530
4. Контроль и РА РСК РК 0/0 0/0 0/0 О/О 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 о/о о/о 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0
Принципиальным отличием в динамике вакцинного процесса на 14-й день вызванного облученной и облученной вакцинами с токоферолом явилось формирование в паренхиматозных органах перн-васкулярных лимфоидных инфильтратов, тогда как в органах морских свинок привитых живой вакциной начали проявляться иници-
альные признаки гранулематозной реакции.
К месячному сроку у животных иммунизированных живой вакциной наблюдали яркую гранулематозную реакцию развития моно-нуклеарных фагоцитов достигших уровня многоядерных симпластов. Эти явления обнаружили в лимфаузлах и печени, тогда как в группах с облученной вакциной и облученной вакциной с токоферолом мы наблюдали гранулемы, представленные мононуклеарнымн фагоцитами
К 3-му месяцу развития вакцишюго процесса, вызванного облученной вакциной и облученной вакциной с токоферолом, по-прежнему определяли гранулематозную реакцию. Гранулемы локализовались в лимфоидной ткани регионарных узлов и редко в нерегпо-нарных, селезенке и печени, в основном у животных, привитых облученной вакциной без токоферола. Гранулемы состояли из крупных мононуклеарных фагоцитов. В печени отмечена гипертрофия купфе-ровских клеток по ходу печеночных балок. Перисннусоидальные пространства были расширены. Дистрофические процессы, в группе животных, привитых облученной вакциной, отмеченные в рашше сроки в центральных отделах дольки были более выражены, чем в группе морских свинок, привитых облученной вакциной с токоферолом.
Одновременно у животных привитых живой вакциной установили максимальное проявление гранулематозной реакции. В регионарных лимфаузлах лимфоидная ткань вытеснялась, а на ее месте формировались гранулемы из крупных светлых мононуклеарных фагоцитов, встречались в небольших количествах эпителиодные н гигантские клетки, в основном представлешилх симпластами типа клеток инородных тел. Такие же гранулемы обнаружены в печени и почках. Гранулемы были без признаков некроза, одновременно регистрировали признаки продуктивного васкулита, ярко проявлялись суставные поражения, чего не наблюдали в других группах.
При сравнительном изучении иммуногенных свойств БХВ, серия 40; БХВ, серия 44 с токоферолом и живой бруцеллезной вакцины нами установлено, что все они создают достаточно напряженный иммунитет. У большинства морских свинок, через месяц после введения антигенов живая вакцина защищала 85,7% морских свинок; БХВ, серия 40 - 80%; БХВ, серия 44 с токоферолом - 84,6%. В контрольной группе все животные были заражены с ИИ=55,7.
Через 3 месяца степень защиты была, соответственно: 57,1%, 50% и 67,3%, при 100% заражении контрольных морских свинок с ИИ=57,1.
Тканевая реакция в первичном очаге вне зависимости от характера вакцинного препарата, через 3-6 часов после вакцинации была достаточно характерна и выражалась в массовом фагоцитозе антигена.
К 12 часам после инокуляции БХВ и БХВ с токоферолом нам не удалось иммунофлюоресцеитны методом обнаружить внеклеточно-раеположеннын антиген. Весь он определялся в "растворенном" виде в макрофагах сосочкового слоя дермы. Хотя, судя по гистологической структуре, уровень фагоцитарной дермо-эпидермалыюн инфильтрации в зоне инокуляции БХВ и БХВ с токоферолом был таким же, как и при введений живой протшзобруцеллезной вакцины из штамма В.abortus 19, что BqjoHTito связано не с реактогенностыо препарата, так как мы уже к 1-м суткам отмечали значительные качественные различия в фагоцитозе различных вакцин.
При введении БХВ отмечена лишь лейкоцитарная дермоэпи-дермальная инфильтрация, к 3-м суткам в зоне введения этого препарата восстанавливалась нормальная структура ткани. Напротив, в группе животных, вакцинированных живой вакциной и БХВ с токоферолом на смену сегментоядерным лейкоцитам выступала мононук-леарная инфильтрация.
Кроме того, в зоне инокуляции живой вакцины иммунофлюо-ресценгным методом определяли свободно лежащие бруцеллы, а фагоцитированный материал в цитоплазме макрофагов давал популярный, сетчатый характер свечения.
При вакцинации БХВ с токоферолом наиболее яркой была реакция фолликулярной зоны лимфаузлов. Верифицировали большое количество бластных форм клеток, определяли высокую митотиче-скую активность форменных элементов, составляющих терминальный центр. БХВ вызывала у морских свинок более слабую ответную реак-цшо.
К месячному сроку пролифератшзные процессы были выражены в селезенке, гранулем обнаружено не было. У животных, вакцинированных живой вакциной гранулемы определялись в большом количестве.
К 3-м месяцам, в группе животных, привитых БХВ, структура паренхиматозных органов восстанавливались. Нам не удалось определить каких-либо остаточных проявлений прошедшей антигенной стимуляции.
При вакцинации БХВ н БХВ с токоферолом мы практически не отмечали гранулематознон реакции. Даже в регионарных лимфаузлах мы крайне редко обнаруживали гранулемы.
Однако, к этому сроку, у животных, вакцинированных БХВ с токоферолом, фолликулы лимфаузлов были значительно увеличены и центры размножения их раздражены и, хотя, гранулем мы не обнаружили, продуктивные васкулиты определяли в большом количестве.
выводы
1. Полученная с помощью у-облучення противобруцеллезная вакцина не уступает по нммуногенности живой вакцине из штамма 19 В. abortus.
2. Дезинтегрированная взвесь бруцелл и смесь липосом с БХВ уступают по нммуногенности вакцине, полученной с помощью у-облучения.
3. Противобруцеллезная вакцина, полученная методом у-облучения, вызывает более доброкачественные изменения в органах и тканых животных, по сравнению с живой вакциной из штамма В. abortus 19. После применения вакцины, приготовленной путем у-облучения, гранулемы в небольшом количестве располагались не только в региональных лимфоузлах, но и в печени, селезенке формировались суставные поражения.
4. Противобруцеллезные вакцины: полученные путем у-облучения, химическая, дезинтегрированная подвергаются более быстрой утилизации в организме лабораторных животных, чем противобруцеллезная вакцина из штамма B.abortus 19.
5. Токоферол, используемый в качестве иммуностимулятора, повышает специфический противобруцеллезный иммунитет у лабораторных животных.
6. Механическая смесь липосом с БХВ обладает токсичностью для лабораторных животных: в печени наблюдаются выраженная гипертрофия купферовских клеток, нарушение проницаемости сосудов, диффузная зернистая дистрофия гепатоцнтов.
7. БХВ, включенная в липосомы по нммуногенности превосходит ее механическую смесь с липосомами, но уступает живой проти-вобруцеллезной вакцине из штамма В. abortus 19.
8. Противобруцеллезная вакцина, полученная методом у-облучення, в экспериментах на морских свинках показала высокую иммуногенность и слабую реактогенность, что делает возможным се дальнейшее изучение на сельскохозяйственных животных.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ И РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Материалы диссертации доложены на ученом совете ВНИ-ИБТЖ" . Рекомендованы к производственному испытанию в производственных условиях. Протокол совета № 5., от 09.04.98.
2. Рекомендации по производственному испытанию облученной вакцины заслушаны и одобрены на областном техническом совете (секция животноводства). Рекомендованы к представлешпо в Департамент Ветеринарии Минсельхозпрода РФ. Решение совета, 1998 г.
Оглавление диссертации Петрова, Марина Ивановна :: 1998 :: Омск
Введение
1. Обзор литературы
1.1. Патогенность, факторы патогенности и персистенция микроорганизмов в организме хозяина
1.2. Реализация иммунитета. Современные представления о механизме взаимодействия клеток иммунной системы. Молекулы адгезии в межклеточном взаимодействии. Цитокины
1.3. Специфическая профилактика при бруцеллезе
1.4. Неспецифическая стимуляция иммунитета
1.5. Генотоксическое действие вакцин
2. Собственные исследования
2.1. Материалы и методы.
2.2. Испытание противобруцеллезных вакцин, полученных различными способами
2.2.1. Испытание вакцины, полученной методом облучения.
2.2.2. Иммуноморфологическая и морфологическая характеристика вакцинного процесса, вызванного различными вакцинами.
2.2.3. Испытание противобруцеллезных вакцин в сочетании с липосомами.
2.2.4. Изучение иммунитета, создаваемого облученной противобру-целлезной вакциной в сочетании с иммуностимуляторами
2.2.5. Изучение возможности использования токоферола в виде иммуностимулятора, но уже в сочетании с бруцеллезной химической вакциной
3. Обсуждение результатов
4. Выводы.
5. Практические предложения и рекомендации
Введение диссертации по теме "Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология", Петрова, Марина Ивановна, автореферат
Актуальность темы. История борьбы с бруцеллезом животных в бывшем СССР и в том числе в Российской Федерации четко подтверждает исключительно важную роль специфической профилактики. Благодаря массовой иммунизации скота в зонах широкого распространения бруцеллеза и особенно по научно разработанным во ВННИБТЖ, ИЭВС и ДВ, ВНИВИ (г. Казань) схемам, бруцеллез перешел в разряд контролируемых и управляемых ветеринарной службой инфекций. Динамика снижения заболеваемости бруцеллезом указывает на перспективу полного оздоровления страны в ближайшем будущем.
Отдавая должное специфической профилактике бруцеллеза, следует указать, что массовая иммунизация животных всех половозрастных групп, тем более неоднократная, живыми противобруцеллезными вакцинами в полной мере оправдывает себя лишь в условиях широкого распространения инфекции, когда создается большая угроза перезаражения животных.
Известно, что противобруцеллезная - достаточно иммуногенная вакцина из штамма 82 в силу своей нестабильности, вирулентности, абортогенности далеко небезопасна для организма крупного рогатого скота, у которого вакцинный процесс протекает по типу малой инфекции, а в случае, если она используется на ин-тактных в отношении антигена бруцелл животных, вакцинный процесс может быть аналогичен инфекционному со всеми вытекающими отсюда последствиями (аборты, серологические реакции в высоких титрах).
Попытки использовать для специфической профилактики стабильные про-тивобруцеллезные вакцины из авирулентных S-форм бруцелл В.abortus (19, 104-М и др.) не оправдывают себя в силу выраженной агглютиногенности. Кроме того, живая противобруцеллезная вакцина В.abortus из штамма 19 влияет на хромосомный аппарат лейкоцитов крови привитых животных (т.е. обладает лейкемогенно-стью), что в ряде случаев приводит к появлению клонов клеток с измененными ка-риотипами, а это, на фоне ухудшевшейся экологической ситуации и роста числа иммунодефицитных состояний в животноводстве, вызванных распространением инфекционных заболеваний, в частности лейкоза, является весьма отрицательным фактором.
R-формы (В.abortus 16/4, В-1, В-8 и др.) в силу своей слабой иммуногенно-сти и потенциальной способности к реверсии по типу R-RS-SR-S-формы создают определенные трудности для своего использования.
В связи с этим, становится очевидным, что принятый во многих регионах России, имевших в недалеком прошлом сложную эпизоотическую ситуацию, регламент специфической профилактики, в настоящей время при складывающемся благополучии себя уже не оправдает.
За весь период широкой вакцинопрофилактики бруцеллеза животных, а это более 40 лет, вопрос экологической безопасности этой меры был второстепенным. В настоящее время, во всем мире вопросы экологии вышли на первое место во всех отраслях деятельности человека.
Несомненно это имеет прямое отношение к иммунопрофилактике бруцеллеза живыми вакцинами, от чего рано или поздно придется отказаться.
Практически во всех развитых странах уже давно не проводят специфическую профилактику бруцеллеза, а если, где она и осуществляется, то только на молодняке.
В большинстве западных областей России уже несколько десятилетий не проводят иммунизацию скота против бруцеллеза.
До сего времени широкую иммунизацию крупного рогатого скота против бруцеллеза осуществляют в регионах Урала, Западной и Восточной Сибири, Поволжья, Северного Кавказа. Анализ эпизоотической ситуации по бруцеллезу крупного рогатого скота Уральско-Сибирского регионов указывает на резкое улучшение эпизоотической ситуации. Имеются предпосылки к полному оздоровлению указанных регионов в ближайшем будущем.
В связи с этим используемый жесткий регламент иммунизации крупного рогатого скота, оправданный в период широкого распространения бруцеллеза, требует существенной корректировки.
Для плавного перехода от вакцинной к безвакцинной профилактике бруцеллеза наиболее целесообразно использовать экологически безопасные, достаточно иммуногенные вакцины, что возможно лишь на основе современных достижений биотехнологии, иммунологии и генетики.
В мире получена первая полностью синтетическая вакцина против малярии, страшной болезни, уносящей ежегодно около 3 млн. жизней. Сейчас группа ученых Национального института Колумбии разрабатывают метод математического моделирования принципов создания вакцины против любого заболевания.
В лаборатории специфической профилактики бруцеллеза ВНИИБТЖ в течение ряда лет проводится изыскание и испытание антигенных комплексов бруцелл, извлеченных различными методами.
Особый интерес представляет способ обработки бруцелл у-лучами. Поскольку по отдельным литературным данным воздействие лучей на микробную клетку не только сохраняет ее иммуногенные свойства, но даже усиливает их и пролонгирует.
Однако проводимые в этом направлении исследования касались в основном микробиологических и иммунологических аспектов проблемы, в то время как патом орфологическим исследования уделялось крайне малое значение. Между тем проведение патоморфологических исследований позволяет достоверно и убедительно показать весь характер и суть структурных сдвигов в тканях и системах организма, выполняющих защитную функцию при вакцинном процессе и дать оценку этим изменениям.
На 9-м Международном конгрессе иммунологов, проведенном в Сан-Франциско (США) в июле 1995 года были представлены результаты основных исследований, в сравнении с материалами, изложенными на 8-м съезде иммунологов (Будапешт, 1992 г.) с указанием возможных перспектив иммунологических исследований. Основные направления иммунологии варьируют от открытий в области структуры имму но логически активных молекул, контроля экспрессии цитокинов до создания новых вакцин.
Отмечено, что при изучении и открытии иммунологами Т- и В-систем иммунитета огромный вклад внесен морфологами. И в дальнейшем предлагается изучать процессы и явления в комплексе иммуноморфологических , цитогистохимиче-ских и иммунологических методов исследований.
На 2-м международном конгрессе «Иммунореабилитация и реабилитация в медицине», проходившем в Анталии, 6-10 мая 1996 года рассматривался вопрос о целесообразности повышения эффективности вакцинации одновременно с применением витаминов. В частности, жирорастворимый витамин Е, как антиоксидант, является средством защиты генетического аппарата, одновременно оказываясь иммуностимулятором для иммнной системы.
Цель исследования. Провести сравнительную оценку инактивированных . химической и живой противобруцеллезных вакцин для обоснования выбора предпочтительного метода получения и вариантов применения вакцинных препаратов, не обладающих высокой реактогенностью, сенсибилизирующей активностью, экологически безопасных и создающих достаточный иммунитете в сочетании с иммуностимуляторами.
Для достижения указанной цели решались следующие задачи:
1. Изучить реактогенные, иммуногенные, антигенные свойства культур бруцелл после воздействия у-излучения;
2. Охарактеризовать морфологические изменения в органах и тканях, вызываемых противобруцеллезными вакцинами, с позиции взаимоотношений «антиген-макрофаг».
3. Изучить иммуностимулирующую активность токоферола в сочетании с различными противобруцеллезными вакцинами.
4. Изучить иммуногенность бруцеллезной химической вакцины (БХВ) с использованием липосом как носителей специфических имуногенов в процессе формирования иммунитета.
Научная новизна. В нашей работе впервые в динамике изучены иммунобиологические свойства антигена бруцелл после воздействия у-излучения, в сочетании с иммуностимулятором, морфология вакцинного процесса, вызванного этим антигеном. Использование иммуноморфологической методики в сочетании с иммунологическими и бактериологическими методами позволили дать объективную оценку тканевым изменениям. Нами показано, что воздействие у-лучей на микробную клетку усиливает пролонгирующее действие антигена, иммунологическая перестройка организма сопровождается активным биосинтезом специфических антител и характеризуется определенными изменениями в органах вакцинированных животных, что делает возможным дальнейшее изучение этой вакцины на поголовье крупного рогатого скота, как экологически безопасной.
Практическая ценность. Полученные результаты открывают возможность разработки биотехнологии нового поколения противобруцеллезных вакцин, используя для этого доступные и сравнительно недорогие методы физического воздействия, в частности облучения у-лучам и, способствующего почти полной утрате токсичности антигена при сохранении (или возрастания) его протективных свойств.
На защиту выносятся:
1. Метод получения инактивированной противобруцеллезной вакцины за счет воздействия у-излучения.
2. Способ повышения . " иммуногенности вакцинных препаратов при использовании токоферола в качестве иммуномодулятора.
Апробация работы.
Основные положения работы докладывались на Ученом совете и методической комиссии ВНИИБТЖ в 1991-1998 гг.; на научно-практической конференции по аграрным проблемам, Омск, 1997; 2-й научной конференции Новосибирского отделения Паразитологического общества РАН, Новосибирск, 1997; на юбилейной научно-практической конференции профессорско-преподавательс-кого и аспирантов «ОмГАУ - исторический опыт, проблемы и пути развития АПК Сибири», Омск, 1998; на объединенном заседании сотрудников лаборатории специфической профилактики; диагностики бруцеллеза; туберкулеза; биофизики; экологии и идентификации Ь-форм бактерий ВНИИБТЖ, апрель 1998; на заседании Областного Научно-технического комитета, секция животноводства, май 1998.
Публикации.
По теме диссертации опубликовано 5 работ.
Структура и объем диссертации.
Диссертация состоит из введения, пяти глав обзора литературы, пяти глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений и рекомендаций, списка литературы, который включает 266 отечествен
Заключение диссертационного исследования на тему "Сравнительная характеристика иммуногенеза, вызванного инактивированными химической и живой противобруцеллезными вакцинами"
Выводы
Полученная с помощью у-облучения противобруцеллезная вакцина не уступает по иммуногенности живой вакцине из штамма В. abortus 19.
2. Дезинтегрированная взвесь бруцелл и смесь липосом с бруцеллезной химической вакциной уступает по уровню иммуногенности вакцине, полученной с помощью у-облучения.
3. Противобруцеллезная вакцина, полученная методом у-облучения, вызывает более доброкачественные изменения в органах и тканях животных, по сравнению с живой вакциной из штамма В.abortus 19. После применения вакцины, приготовленной путем у-облучения, гранулемы в небольшом количестве располагаются только в регионарных лимфатических узлах, а после введения живой вакцины они образуются не только в лимфатических узлах, но и в печени, селезенке, формируются суставные поражения.
4. Противобруцеллезные вакцины: химическая, дезинтегрированная, полученная путем у-облучения подвергаются более быстрой утилизации в организме лабораторных животных, чем противобруцеллезная вакцина из штамма В. abortus 19.
5. Токоферол, используемый в качестве иммуностимулятора, повышает специфический противобруцеллезный иммунитет у лабораторных животных.
6. Механическая смесь липосом с БХВ обладает токсичностью для лабораторных животных: в печени наблюдаются выраженная гипертрофия купферов-ских клеток, нарушение проницаемости сосудов, диффузная зернистая дистрофия гепатоцитов.
7. БХВ, включенная в липосомы, по иммуногенности превосходит ее механическую смесь с липосомами, но уступает живой противобруцеллезной вакцине из штамма В. abortus 19.
8. Противобруцеллезная вакцина, полученная методом у-облучения, в экспериментах на морских свинках показала высокую иммуногенность и слабую реактогенность, что делает возможным ее дальнейшее изучение на сельскохозяйственных животных.
Практические предложения и рекомендации
1. Материалы диссертации доложены на ученом совете ВНИИБТЖ. Рекомендованы к испытанию в производственных условиях. Протокол совета №5 от 09.0£/.98.
2. Рекомендации по производственному испытанию облученной вакцины заслушаны и одобрены на областном техническом совете (секция животноводства). Рекомендованы к представлению в Департамент Ветеренарии Минсельхозпрода РФ. Решение совета. 1998 год.
3. Полученные результаты могут быть использованы при усовершенствовании методики изготовления инактивированных экологически безопасных вакцин.
Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 1998 года, Петрова, Марина Ивановна
1. Абакин C.B., Замахаева Е.И., Чернышева М.И. Изучение вакцинного штамма B.abotrus 104-М в опытах на овцах // Ветеринария. — 1962. №3. - С. 51-53.
2. Абдылбаев М. Реактогенные свойства вакцины из штаммов Br.inelitensis 53Н38 и Br.abortus 45/20. Специфическая профилактика и диагностика инфекционных болезней животных. - М., 1986. - С. 27-28.
3. Абрамов В.В. Интеграция иммунной и нервной систем. Новосибирск, 1991. - 141 с.
4. Авилов В.М. Состояние и задачи агробиологической промышленности в обеспечении стойкого протиэпизоотического благополучия Российской Федерации Научн.-произв.конф, посященная 100 летию Курской биофабрики: Тез.докл. -Курск, 1996. С. 3-6.
5. Адаменко Г.П. Взаимодействие поли и мононуклеарных фагоцитов крови человека: продукция цитокинов в смешанной культуре нейтрофилов и моноцитов культивируемых в адгезивных и суспензионных условиях // Журнал иммунологии. 1995. - №6. - С. 37-39.
6. Адамов А.К. Теоретические основы искусственных вакцин. Саратов, Изд-во Саратовского унив-та, 1981. - 65 с.
7. Айала Ф., Кайгер Дж. Современная генетика. М.: Изд-во «Мир», 1987. -Т.1.-С. 93-95, 210, 246
8. Айала Ф., Кайгер Дж. Современная генетика. М.: Изд-во «Мир», 1987. -Т.2.-С. 237-244, 324.
9. Айала Ф., Кайгер Дж. Современная генетика. М.: Изд-во «Мир», 1987. -Т.З.-С. 54-56.
10. Алиев Э.А., Шарипов Д.Ш. Иммунологическая оценка различных вакцинных штаммов бруцелл // Проблемы патоморфологической диагностики болезней в промышленном животноводстве: Тез. докл. Вильнюс, 1986. С. 59-60.
11. Алимов A.M. и др. Изучение электрофоретических профилей антигенно-сти полипептидов бруцелл // II съезд биохимического общества РАН: Тез. Стенд.
12. Докл. Москва, Пущино, 1997. - Ч. II. - С. 300.
13. Алимов A.M. Теоретические и экспериментальные подходы к конструированию нового поколения вакцин // Материалы Республиканского научн-произв. Конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии. Казань, 1996. -С. 5.
14. Альберте Б., Брей Д., Льюис Дж., Рафор М.и др. Молекулярная биология клетки. М.:Мир, 1994. - С. 79-105.
15. Альбертян М.П. Стабильность свойств вакцинного штамма Br.abortus 104-М при пассировании через организм телят (по данным патоморфологии) // Бюлл. ВИЭВ. 1987. - Вып. 64. - С. 71-73.
16. Арбулиева Е.А. Клинико-патогенетическое значение инфекционной ан-тигенемии при различных формах бруцеллеза. Автор.дисс. . канд.мед.наук. Москва, 1985. - 28 с.
17. Арипова Т.У., Мусаходжаева Д.А. и др. Повышение эффективности вакцинации витаминами // J.Immunoreihail. 1996. - №2. - Р.90.
18. Асташова Е.А., Гуткин B.C. Электронноцитохимическая характеристика взаимодействия лизосомальных ферментов макрофагов с рожистыми микробами ВР-2 // Труды Азербайдж. НИВИ. Баку, 1978. - Т. 27. - С. 156-159.
19. Афанасьев Ю.И., Боронихина Т.В. Витамин Е: значение и роль в организме // Успехи современ.биологии. 1987. - Т. 104. - Вып. 3(6). - С. 401-411.
20. Баева A.A., Таран И.Ф. Иммуногенные свойства клеточных компонентов бруцелл // ЖМЭИ. 1975. - С. 71-76.
21. Бажин М.А., Кондауров Б.И. Содержание иммуноглобулинов у телят после первичного и вторичного введения вакцины из штамма В.abortus 104-М. — Сб. научн.работ СибНИИВИ, 1977. Вып. 29. - С. 3-8.
22. Балаян В.Д., Озерецкий H.A. Реактогенность коклюшных вакцин и их иммуногенные и адъювантные свойства // ЖМЭИ. 1970. - №5. - С. 99-103.
23. Басканьян И.А., Мельникова В.А. Стрессовые белки у бактерий // ЖМЭИ. 1996. - №6. - С.99-103.
24. Белозерова Г.А., Салмаков K.M. Иммунитет у животных после прививки новой живой бруцеллезной вакциной // Всесоюзный иммунол.съезд: Тез.сек. истенд.сообщений. М., 1989. - С. 138.
25. Беляков Д.В., Голубев Н.С. и др. Саморегуляция паразитарных систем. -М., 1987. 220 с.
26. Бондаренко В.М. Изучение факторов патогенности шигелл как основы конструирования диагностических и профилактических препаратов // ЖМЭИ. -1996. -№3. С. 29-34.
27. Бондаренко В.М., Яблочков A.A. Эволюция генома и генофонд бактериальных популяций// ЖМЭИ. 1986. - №8. - С. 92-99.
28. Бочков Н.П., Богословский П.А., Напалков Н.П. Мутагены, патогены и карцерогены: опасности реальные и возможные // Вестн. АМН СССР. - 1986. -№9.-С. 18-25.
29. Богцьян Г.М. Химический состав бактерий // Всесоюзная академия сельскохозяйственный наук им. В.И. Ленина. 1939. - №10. - С. 41.
30. Брондз Б.Д Т-лимфоциты и их рецепторы в иммунологическом распознавании.-М., 1987. 381 с.
31. Бронников B.C., Новицкий A.A., Драновская Е.А. Иммунохимическая характеристика антигенных комплексов бруцелл // Методы профилактики и диагностики бруцеллеза с.-х. животных: сб. научн. трудов. Новосибирск, 1991. — С. 46.
32. Бужиевская Т.И. Вирусиндуцированный мутагенез в клетках млекопитающих. Киев: Наук, думка, 1984. - 136 с.
33. Бухарин О.В. Биомедицинские аспекты персистенции бактерий // ЖМЭИ. 1994. - Приложение. - С. 4-13.
34. Бухарин О.В. Персистенция бактериальных патогенов,как результат взаимоотношений паразит-хозяин // ЖМЭИ. 1997. - №4. - С. 3-9.
35. Бухарин О.В. Персистенция бактерий. Куйбышев, 1990 . - С. 5-14.
36. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионосительство. Екатеринбург, 1996.- 240 с.
37. Васюренко З.П., Синяк K.M., Коротич A.C., Антонова JI.A. Состав жирных кислот бруцелл различных видов и его связь со средой выращивания // ЖМЭИ.- 1977. №8. - С.53.
38. Вершилова П.А. Сравнительное определение вирулентности вакцинных штаммов B.abortus 19-Ва и 104-М, предложенных для иммунизации людей // ЖМЭИ. 1959. -№Ц. -С. 41-44.
39. Вершилова П.А., Кокорин И.Н. Морфологическая и бактериологическая характеристика вакцинного процесса при бруцеллезе морских свинок // Труды АМН СССР. Вопросы инф.патологии и иммунологии. 1954. - №2. - С. 244.
40. Вершилова П.А., Чернышова М.И., Драновская Е.А. Изучение токсических, антигенных и сенсибилизирующих свойств препаратов, выделенных из клеточной стенки бруцелл // Бюлл. экспер. биол. и медицины. 1971. - №6. - С. 62.
41. Вершилова П.А., Чернышова М.И., Князева Э.Н. Патогенез и иммунология бруцеллеза. М.:Медицина, 1974. - 272 с.
42. Волгарева Г.М., Ревязова Ю.А., Ревязова Е.С. и др. Цитогенетический анализ действия бесклеточной коклюшной вакцины в костном мозге бестимусных nu/nu мышей и мышей гетерозигот nu/+ // ЖМЭИ. 1992. - №11-12. - С. 60-61.
43. Волгарева Г.М. Генотоксичность вакцин: эколого-генетическая проблема с незавершенным решением // Генетика. — 1995. Т.31. - №4. - С. 437-457.
44. Воробьев A.A. Физиологические пути введения антигенов и других биологически активных веществ в организм // Иммунология. 1996. - №6. - С. 4-8.
45. Воробьев A.A., Васильев H.H. Адъюванты. М.: Медицина, 1969. - 355 с.
46. Воробьев A.A., Медуницын Н.В. Клеточная теория иммунитета И.И, Мечникова и концепция антиинфекционной резистентности // Журн. микробиол. -1995. №3. - С. 36-42.
47. Втюрин Б.В., Делекторский В.В., Ковальчук В.К. Механизмы патогенно-сти бактерий при различных инфекциях // Арх. патол. 1994. - №5. - С. 56.
48. Галаев Ю.В, Структура и биосинтез поверхностных образований бактериальной клетки. Саратов, изд-во Саратовского унив-та, 1983. - 184 с.
49. Гермезон С.М. Основы современной генетики. Киев: Наук, думка, 1979. - 505 с.
50. Гордиенко JT.H. Биологические свойства L-вариантов Brucella abortus : Дисс. . канд. вет. наук. Новосибирск, 1989. - 189 с.
51. Горелов В.Н., Куляков Ю.К., Селютина Д.Ф. и др. Клонирование генов Brucella в клетках Esherichia coli К12 и анализ продуктов клонированных генов // Мол. генетика. 1990. - №8. - С. 18-23.
52. Грекова H.A., Островская H.H. Патоморфологическая характеристика органов морских свинок, зараженных агглютинабильными культурами Br. melitensis // ЖБЭИ. 1964. - №6. - С. 111-115.
53. Григорьева Г.И., Игнатов П.Е. Антигенная структура бруцелл // Успехи современной биологии. 1991. -Т. 111. - Вып. 6. - С. 17-21.
54. Григорьева Г.И., Игнатов П.Е. Инактивированные вакцины в профилактике бруцеллеза животных // Профилактика и лечение инфекционных, инвазионных заболеваний с.-х. животных в Нечерноземье: Тез. докл. Горький, 1988. - С. 16-21.
55. Гринин A.C., Кошуков С.Д. Экспериментальное изучение иммунитета у коров, привитых вакциной из штамма 19 // Сб. трудов СибНИИВИ: Бруцеллез с.-х. животных и его профилактика. Омск, 1966. - С. 180-188.
56. Громов В.Б. Строение бактерий. Л.: Ленингр. гос. универс., 1985. - 192с.
57. Громыхина Н.Ю. Простагландин-зависимые механизмы синтеза и действия иммунорегуляторных факторов макрофагального и немакрофагального происхождения // ЖМЭИ. 1996. - №5. - С. 29-34.
58. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов. Л.: Медицина, 1978,- 240 с.
59. Гусман Б.С. Иммуноморфология детских инфекций М.: Медицина, 1975.-240 с.
60. Дмитриев Б.А., Книрель Ю.А., Шеремет O.K. и др. Антигенные полисахариды бактерий. V. Структура О-специфической полисахаридной цепи липополи-сахарида Shigella dysenteriae тип 10 // Биоорганическая химия. 1977. - №9. - С. 1219-1225.
61. Домарадовский И.В. О "побочных" эффектах плазмид (R-плазмиды и вирулентность) // Мол. генет., микробиол., вирусол. 1987. - №6. - С.З.
62. Домарадовский И.В. Зачем микробам токсины? // Мол. генетика. 1990. -№8. - С. 3-10.
63. Домарадовский И.В. Вирулентность бактерий как функция адаптации // ЖМЭИ. 1997. -№4. - С. 16-20.
64. Домарадовский И.В. Чума (современные состояние, гипотезы, проблемы). Саратов, 1993. - 208 с.
65. Домарадовский И.В. Роль токсинов в экологии бактерий // ЖМЭИ. -1993. -№1.~ С. 103-106.
66. Домарадовский И.И. Некоторые проблемы адаптации патогенных бактерий к окружающей среде // ЖМЭИ. 1997. - С. 31-35.
67. Дорофеев A.A., Путилов В.М, Изучение сухой бруцеллезной вакцины из штамма 19 (СБВ) на крупном рогатом скоте // Ветеринария. 1945. - №4-5. - С. 29-30.
68. Драновская Е.А. Антигены бруцелл и некоторые подходы усовершенствования таксономии возбудителя, диагностики и иммунопрофилактики бруцеллезной инфекции // Всесоюз. научн. конф. специалистов противочумных учреждений:
69. Тез докл. Иркутск, 1984. 4.2. - С. 98-99.
70. Драновская Е.А. Биологические свойства бруцелл и получение диагностического и профилактического антигенов: Автореф. дисс. . докт. биол. наук. — М., 1976.-413 с.
71. Драновская Е.А. Таксономия возбудителя бруцеллеза // Актуальные вопросы профилактики бруцеллеза и организации медицинской помощи больным: Тез. докл. Москва. - 1989. - С.52-55.
72. Драновская Е.А., Маликов В.Е., Грекова H.A. Экспериментальное изучение иммуногенности облученной бруцеллезной химической вакцины // Разработка новых бактериальных вакцин: Сб.трудов. М., 1987 - С. 176-184.
73. Дубровская И.И. Изменение химического состава бруцелл и антигенных комплексов под влиянием фага // Изменчивость микроорганизмов и бактериофагия. -М., 1960.-С. 307-314.
74. Дубровская И.И. Изменение химического состава бруцелл и антигенных комплексов под влиянием фага // Изменчивость микроорганизмов и бактериофагия. -М., 1969.-С. 91-95.
75. Дубровская И.И. О наличии некоторой корреляции между составом специфических полисахаридов и вирулентными свойствами бруцелл // Вакцины и сыворотки: Сб. трудов Московского НИИВС . 1970. - Вып. 12. — С. 73.
76. Дубровская И.И. О наследственно закрепленных изменения химического состава вариантов бруцелл, полученных под влиянием фага // Генетика микроорганизмов. М., 1963. - С. 230-239.
77. Дубровская И.И. Особенности химического состава антигенных компонентов форм бруцелл // Биохимия. 1964. - Т.29. - Вып. 5. - С. 846-850.
78. Дубровская И.И., Островская Н.И. Изменение антигенных комплексов бруцелл под влиянием фага // Биохимия. 1961. - Т. 26. - С. 290- 293.
79. Дурнев А.Д., Середенин С.Б. Антиоксиданты, как средство защиты генетического аппарата // Химикофармакологический журнал. 1990. - Т.24. - №2. - С. 92-100.
80. Езепчук Ю.В. Патогенность как функция биомолекул // АМН СССР. М.: Медицина, 1985. - 240 с.
81. Ершов Ф.И., Малиновская B.B. Иммуномодуляторы в профилактике и терапии вирусных инфекций // Микробиология. 1996. - №3. - С. 122-135.
82. Жованник H.H. Активная профилактическая иммунизация животных против бруцеллеза: Дисс. . докт. вет. наук. Харьков, 1973. - 471 с.
83. Захарова И .Я, Павлова И.Н. Литические ферменты микроорганизмов. -Киев: Наук, думка. 1985. - 179 с.
84. Захарова М.С., Ширко Г.И., Перверзев H.A. Метод получения и контроль ультразвуковых микробных дезинтегрантов с высокой протективной активностью // Дезинтеграция микроорганизмов: Материалы Всесоюзной конфер. Пущино, 1972.-С. 193-201.
85. Земсков A.M. Некоторые механизмы действия адъювантов // Иммунология. 1982. - №1. - С. 6-13.
86. Земсков A.M., Земсков В.М., Золоедов В.И., Бжозовский Е. Специфическая и неспецифическая иммунокорреция // Успехи совр. биологии. 1997. - Т. 117.-Вып. З.-С, 261-268.
87. Иванов A.B. и др. Результаты испытаний эффективности вакцины из штамма 86-ВНИВИ против бруцеллеза животных // Материалы научн.-произв. конф. по проблемам ветеринарии и животноводства. Казань, 1995. - С. 14-15.
88. Иванов М.М. и др. Итоги изучения вакцинных штаммов бруцелл // Труды ВГНКИ. 1977. - Т. 23. - С. 94-103.
89. Иванова О.Н. Изыскание стимуляторов для повышения иммуногенности противобруцеллезных вакцин: Автореферат дисс. . канд. вет. наук. Омск, 1996. -19 с.
90. Игнатов П.Е. Перспективы конструирования вакцин против бруцеллеза на основе их протективного антигена // Бюлл, ВНИИ экспериментальной ветере-наиии. 1983. - Т.50. - С. 3-6.
91. Игнатов П.Е. Синтетические полимеры в качестве пролонгаторов и стимуляторов иммунного действия бруцеллезной химической вакцины // Бюлл. ВИЭВ. 1980.-С. 38-40.
92. Игнатов П.Е. Экстрацеллюлярный фактор патогенности бруцелл и некоторые его функциональные особенности // Актуальные вопросы профилактикибруцеллеза и организации медицинской помощи больным: Тез. докл. Москва, 1989.-С. 63-64.
93. Идрисов Г.З. Иммуноморфологические изменения сосудов при вакцинации против бруцеллеза // Арх. патол. 1974. - Вып. 2. - С. 23-27.
94. Идрисов Г.З., Салмаков К.М. Иммуноморфологическое изучение органов и тканей крупного рогатого скота, привитого бруцеллезными вакцинами из штаммов 82 и 19. // Учен, записки Казанского ветер. Института. Казань, 1975. - С. 135142.
95. Ильинских И.И. Влияние инфекционных факторов на цитогенетические структуры человека и животных // Цитология. 1976. - Т. 18. - №6. - С. 731-738.
96. Ильинских Н.Н., Ильинская И.Н. Мутагенные свойства бактерий Aero-monas punctata, выделенных из природной популяции обыкновенного карася Caras-sius carassius // Вопр. ихтиологии. 1982. - Т. 22. - Вып. 2. - С. 341-343.
97. Ильинских И.И., Ильинских И.Н., Бочаров Е.Ф. Цитогенетический го-меостаз и иммунитет. Новосибирск: Наука, 1986. - 256 с.
98. Исхаков 0.3. Система мер борьбы с бруцеллезом животных в РСФСР и ее эффективность // 3-я Всесоюзн. конферен. по эпизоотологии: Тез. докл. — Новосибирск, 1991.-С. 17-18.
99. Каленик Т.К. Особенности биотехнологии липосомальных комплексов БАВ и биостимуляторов на основе природного дальневосточного сырья: Автореф. дисс. . докт. биол. наук. Москва, 1997. - 24 с.
100. Кандауров Б.И., Чекишев В.М., Сулимова А.А. Неполные антитела в крови при бруцеллезе // Ветеринария. 1970. - №11. - С. 59.
101. Карьппева А.Ф., Фариков И.С., Кулешов Э.К. и др. Приготовление бактерийных антигенов электроимпульсной дезинтеграцией // Ветеринария. 1975. -№3. - С. 46-48.
102. Касьянова Л.Ф, Инактивированные адъювант-вакцины из штаммов В.abortus 45/20 и B.melitensis 53Н38 при бруцеллезе крупного рогатого скота: Ав-тореф. дисс. . канд. вет. наук. М., 1991. - 19 с.
103. Касьянова Л.Ф. Антигенные, аллергенные и иммуногенные свойства убитых адъювант-вакцин из штамма B.abortus 45/20 и B.melitensis 53Н38 // Специфическая профилактика и диагностика инфекционных болезней: Сб. научн. трудов ВГКИ. М., 1986. - С. 24-26.
104. Керкис Ю.Я., Ильинских H.H., Казначеев В.П. и др. Влияние стрептоли-зина О на возникновение хромосомальных аберраций в культуре эмбриональных фибробластов человека // Генетика. / 1970. Т.6. - №8. - С. 170-174.
105. Кетлинский A.C., Симбирцев С.А., Воробьев A.A. Эндогенные иммуностимуляторы. С.Петербург, 1992. - 129 с.
106. Кетлинский С.А., Калинина H.H. Цитокины мононуклеарных фагоцитов в регуляции реакции воспаления и иммунитета // Иммунология. 1995. - №3. - С. 30-44.
107. Киршин Б. А. Иммунитете у крупного рогатого скота в зависимости от дозы и кратности введения вакцины из штамма 82 // Научн. труды Казанского гос. ветеринарного института. 1980. - Т. 135. - С. 98-101.
108. Кирилов Н.К. Характеристика химического состава отдельных клеточных компонентов некоторых штаммов бруцелл в зависимости от их вирулентности // Уч. Записки Казанского гос. ветеринарного инстита. 1978. - Т. 129. - С. 44-47.
109. Кирилова Н.К. Антигенная активность клеточных стенок и цитоплазмаtтических фракций бруцелл // Научн. труды Казанского гос. ветеринарного института. Т. 132. С. 52-55.
110. Книрель Ю.А., Кочетков Н.К. Строение липополисахаридов грамотри-цательных бактерий III структура О-специфических полисахаридов // Биохимия. -Т. 59.-Вып. 12.-С. 1784-1851. 1934.
111. Кокорин И.Н. Опыт морфологического изучения процессов инженерии и иммунитета при экспериментальном бруцеллезе и риккетсиозах: Дисс . докт. биол. наук. М., 1958. - 427 с.
112. Коновалов А.И., Масленников И.М. О длительности иммунитета прибруцеллезе крупного рогатого скота // Ветеринария. 1945. - №11-12. - С. 25-26.
113. Кононов А.В. Патоморфология инфекционного процесса при изменчивости возбудителя (на модели бруцеллеза): Автореф. дисс. . канд. мед. Наук. -Новосибирск, 1979. 24 с.
114. Константинова М.А. Иммуногенные комплексы и повреждения тканей. М.: Медицина, 1996. - 256 с.
115. Копьева Т.Н., Кактурский JI.B. Определение диагностической информативности неспецифических морфлологических признаков // Арх. Патол. 1976. -Вып. 12. - с. 60-63.
116. Коромыслов Г.Ф., Артюшин С.К. Исследование нуклеиновых кислот бруцелл. Достигнутые результаты и перспективы // Актуальные вопросы профилактики бруцеллеза и организации медицинской помощи больным: Тез докл. Москва, 1989.-С. 68-70.
117. Коромыслов Г.Ф., Игнатов П.Е. Иммуностимуляция: средства, методы и перспективы (обзор) // С.-х. биология. 1983. - №7. - С. 99-106.
118. Косилов И.А. Бруцеллез сельскохозяйственных животных. Новосибирск, 1992. - 260 с.
119. Косилов И.А„ Дегтяренко Л.В„ Контантинов А.П., Шумилов Н.В. Иммуногенные свойства вакцины из штамма В.abortus 104-М в опытах на коровах // Научн.-техн. Бюлл. ИЭВСИиДВ. 1985. - Вып. 32. - С.41-45.
120. Котлярова Х.С. Динамика инфекции и самовыздоровления при бруцеллезе // ЖМЭИ. 1947. - №7. - С. 21.
121. Котлярова Х.С. Сравнительные данные о вакцинных штаммах бруцелл коровьего типа в опытах на морских свинках // ЖМЭИ. 1950. - №6. - С. 13-19.
122. Кошуков С.Д. Морфологические изменения в органах коров, неоднократно вакцинированных против бруцеллеза // Бруцеллез сельскохозяйственных животных и его профилактика: Сб. СибНИИВИ. Омск, 1966. - С. 176-180.
123. Красиков А.П. Использование иммуномодуляторов при бруцеллезе животных // Всесоюзн. конф. «научные основы технологии промышленного производства вететеринарных биологических препаратов : Тез. докл. М., 1991. - С. 121.
124. Кудрявцев A.A. Биофизическое исследование процессов баллистической дезинтеграции микроорганизмов: Дисс. . канд. физ.-мат. Наук. Пущино, ИБФ АН СССР, 1978. - 180 с.
125. Кудрявцева A.A. Об оптимальном времени дезинтеграции клеток микроорганизмов // Дезинтеграция микроорганизмов: Материалы Всесоюзн. конференции. Пущино, 1972. - С. 288-304.
126. Кузнецов Ю.А., Усманова Ф.И. Получение бруцеллезных аллергенов с помощью ультразвука // Вестник с.-х. науки. 1971. - №6. - С, 63-68.
127. Кулаев И.С. Строение клеточной стенки бактерий // Сорос, образ, журнал-1997. №3. - С. 27-31.
128. Кульберг А.Я., Молекулярная иммунология. М.: Высшая школа, 1985. - 379 с.
129. Кулаков Ю.К., Горелов В.Н., Мотин B.J1. и др. Высокочувствительная неизотопная система гибридизации ДНК с применением амплификации (ПЦР) для идентификации и индикации бруцелл // Журнал мол. генетики. 1992. - №7-8. - С. 23-27.
130. Кулаков Ю.К., О'Коллаган Д., Рамю М. и др. Генетические и молеку-лярно-биологическое изучение факторов патогенности бруцелл // ЖМЭИ. — 1996. -№3. С.34-39.
131. Кулаев И.С., Северин А.Н., Абрамочкин Г.В. Бактериолитические ферменты микробного происхождения в биологии и медицине // Вестн. АМН СССР.1984. №8.-С. 64-69.
132. Лазарева Д.Н., Алехин Е.К. Стимуляторы иммунитета. М.: Медицина,1985.-256 с.
133. Лапаева И.А., Переверзев H.A. Выделение из ультразвуковых дезинтеграторов тонких структур бактериальной клетки // Дезинтеграция микроорганизмов: Материалы Всесоюзн. конф. Пущино, 1972. - С. 219-222.
134. Лим A.A. Иммунологическая реактивность крупного рогатого скота в зависимости от метода введения вакцины из штамма 104-М // Бюлл. ВИЭВ. 1985. - №59. - С. 7-12.
135. Лим A.A. Иммунологическая реактивность крупного рогатого скота в зависимости от метода введения вакцины из штамма Br.abortus 104-М: Автореф. дисс. . канд. вет. наук. М., 1987. - 22 с.
136. Липосомы в биологических системах /Под ред. Г.Грегориадиса, А.Алисона. М.: Медицина, 1983. - 384 с.
137. Лихолетов С.М. Современные аспекты разработки вакцин, адъювантов и иммуномодуляторов // Успехи совр. биологии 1988. - Т. 105. - Вып.1. - С. 83-99.
138. Льюин Б. Гены. М.: Мир, 1987. - 589 с.
139. Лященко В.А., Воробьев A.A. Молекулярные основы иммуногенности антигенов. М.: Медицина, 1982. - 272 с.
140. Мазуренко Н.П. Роль вируса в этиологии лейкоза. Киев: Госмедиздат УССР, 1962.-218 с.
141. Маликов В.Е., Селютина Д.Ф., Горелов В.Н. и др. Сенсибилизирующие свойства белков и антигенов бруцелл, синтезированных в клетках Echerichia coli К12 // Журнал мол. генетики 1991. - №7. - С. 29.
142. Мальцев В.Н., Смирнова О.В., Стрельников В.А., Муравьева Л.И. Радиация и вакцинация. М.: Медицина, 1976. - 192 с.
143. Марголис Л.Б., Берельсон Л.Д. Липосомы и их взаимодействие с клетками.-М., 1986.-74 с.
144. Маруашвили Г.М., Баралидзе И.В., Цигарели З.Г., Втюрин Б.В. Электронно-микроскопическое исследование морфологии бруцелл и механизмы фагоцитоза их клетками крови // Арх. патол. 1980. - №8. - С. 70-75.
145. Матросова В.Р. и др. Убитая вакцина против бруцеллеза молодняка крупного рогатого скота // Материалы научн.-произв. конф. по проблемам ветеринарии и животноводства. Казань, 1995. - С. 16-17.
146. Мошиашвили И.Я. Получение ультразвуковых растворимых антигенов в поле звуковой радиации // Вакцины и сыворотки. 1991. - Вып. 4. - С.113-119.
147. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге.1. Новосибирск, 1989. 135 с.
148. Маянский А.Н., Невмятуллин А.Л., Маянский H.A. Проблемы управления фагоцитарными механизмами иммунитета ЖМЭИ. - 1995. - №3. - С. 21-26.
149. Маянский А.Н., Пикуза О.И. Клинические аспекты фагоцитоза. Казань, 1993.- 134 с.
150. Медуницын Н.В. Побочное действие вакцин // Иммунология. 1995. -№2. - С. 6-8.
151. Медуницын Н.В. Процессинг и презентация антигена макрофагами // Иммунология. 1995. -№3. - С. 17-21.
152. Медуницын Н.В., Акользина С.Е. и др. Цитокины и вакцины // Int. J. Immunorehabil. 1996. - №2. - P.66.
153. Мельникова A.A. Эпизоотологическая эффективность противобруцел-лезной вакцины из штамма 82 // Труды Дальнее. ЗНИВИ. 1980. - Вып. 11. - С. 4144.
154. Минделл Э. Справочник по витаминам и минеральным веществам. М.: Медицина и питание . - 1997. - 320 с.
155. Михайлов H.A., Салмаков K.M., Кирилин Б.А. Результаты проверки свойств отдельных серий сухой вакцины из штамма 82 (живой противобруцеллез-ной) // Научн. тр. Казанского гос. ветеринарного института. 1980. - Т. 135. - С. 48-60.
156. Михайлова Г.Р., Горшукова Л.П. Хромосомные нарушения в клетках костного мозга мышей при иммунизации различными противовирусными вакцинами // Вопр. вирусологии 1969. - №3. - С. 326-331.
157. Михалева Н.И., Фихте Б.А. Сравнительная характеристика препаратов мембран E.coli, полученных разными методами механической дезинтеграции клеток // Микробиология. 1982. - Т. 51. - С. 443-447.
158. Морякова О.И. Длительность иммунитета и поствакцинальной бактере-мии у телят, вакцинированных штаммов 19 // Ветеринария. — 1946. №7. - С. 19-20.
159. Морякова О.PI. Изучение иммунитета, создаваемого живой вакциной из штамма B.abortus 19 // Сб. работ ВИЭВ. М., 1949. С. 16-25.
160. Никифоров И.П., Морковина В.Н. Причины серологических реакций укрупного рогатого скота в отдельные сроки после прививки вакциной из штамма 82 // Научн. техн. Бюлл. ИЭВСиДВ 1980. - Вып. 19 - С. 3-8.
161. Николь И. Эволюция заразных болезней. М., 1937. 138 с.
162. Новицкий А.А„ Красиков А.П., Панкратов С.А. и др. Иммунологический ответ организма телок на введение различных доз противобруцеллезных вакцин из штаммов 82, 104-М и 19 // Сб. научн. трудов ВНИИБТЖ. М., 1988. - С, 1726.
163. Новицкий A.A., Троицкая ЛИ., Горбунов В.И, Иммунологические реакции крупного рогатого скота, привитого противобруцеллезной вакциной из штамма 82 // Хронические инфекции животных: Сб. трудов. Новосибирск, 1981. - С. 1720.
164. Новицкий A.A., Яковлев И.Н., Тягунина Е.А., Троицкая Л.И, Иммунитет у крупного рогатого скота, привитого вакциной из штамма 82 // Инфекционные болезни животных: Сб. трудов СибНИВИ. Вып. 34. - Омск, 1979. - С.3-7.
165. Овчинников Ю.А., Иванов В.Т., Шкроб A.M. Мембрано-активные ком-плексоны. М.: Наука, 1974. - 463 с.
166. Орлов Е.С„ Акулов A.B., Шумилов К.В. Испытание вакцин из штаммов В.abortus 104-М и 19 на телятах // Ветеринария. 1972. №4. - С, 29-31.
167. Орлов Е.С., Морякова О.И., Замурий И.Р. и др. Результат испытаний противобруцеллезной вакцины из штамма 19 в производственных условиях // Труды ВИЭВ. 1951. - Т. 18. - С. 154-162
168. Основы радиационной биологии / Под ред. Кузина А.М„ Шапиро Н.И. -М.: Наука. 1964.-403 с.
169. Патоморфологическая физиология острой лучевой болезни / Под ред. Горизонтова П.Д. М.: Мед. литература, 1958. - 375 с.
170. Перегудов Т.А., Вождаев Н.С., Бричук П.Ф., Мун К.Б. Изучение морфологических изменений у животных, привитых вакцинами из штамма 82 В.abortus //
171. Новое в изучении болезней с.-х. животных и птиц в Киргизии. Фрунзе, 1987. -Вып. I. С. 25-33.
172. Передереев Н.И., Блехерман Б.Е., Рубан Е.А. И др. Ультразвук в биологической промышленности // «Физико-химические основы действия физических факторов на живой организм и его антиокислительные системы: Сб. научн. трудов. -М., 1974.-Т. 78.-С. 41-43.
173. Петров Р.В., Атауллаханов Р.И. Биохимия мембран. / Кн. 9. Клеточные мембраны и иммунитет. М.: Высшая школа. 1991. - 144 с.
174. Петров Р.В., Хаитов P.M. Искусственные антигены и вакцины. М.: Медицина, 1988. - 288 с.
175. Петровская В.Г., Бондаренко В.М. Микробиологические аспекты имму-нобиотехнологии. Современное состояние, проблемы, перспективы. М., 1992. -С. 100-108.
176. Петровская В.Г., Бондаренко В.Н. Общие принципы генетического контроля патогенности бактерий // ЖМЭИ. 1994. - №3. - С. 106-110.
177. Петровская В.Г., Маракуша Б.И., Бондаренко В.М. Генетические принципы конструирования живых сальмонелезных вакцин // ЖМЭИ. 1996. - №3. - С. 25-28.
178. Плецитый К.Д. Витамины А и его синтетические производные как стимуляторы противоопухолевого иммунитета // Вопросы онкологии. 1988. — Т. 34. -№11.- С. 1283-1290.
179. Плецитый К.Д. Витамины в иммунном ответе // Тер. Архив. 1980. -№2. - С. 5-8.
180. Плецитый К.Д. О влиянии витамина А на развитие адъювантного артрита у крыс // Иммунология. 1981. - №1. - С. 61-63.
181. Попов B.JI., Губина Е.А., Грекова H.A. и др. Влияние бруцелл на ультраструктура макрофага при фагоцитозе // Актуальные вопросы профилактики бруцеллеза и организации мед. помощи больным: Тез. докл. М., 1989. - С. 58-60.
182. Попова Г.Г. Цитогенетическая оценка вакцинных штаммов бруцелл // Сб. трудов Всесоюзн. научно-контрольного института ветеринарных препаратов. -М„ 1978.-Т. 26.-С. 30-34.
183. Попова Г.Г., Иванов М.М., Тиняков Г.Г. Цитогенетическая реакция лимфоузлов и селезенки при вакцинации против бруцеллеза // Цитология и генетика. 1973. - Т. 7. - №5. - С. 468-470.
184. Придыбайло Н.Д. Иммунодефициты у сельскохозяйственных животных и птиц, профилактика и лечение их иммуномодуляторами. М.:ВАСХНИЛ, 1991. — 44 с.
185. Прозоровский C.B., Вульфович Ю.В., Раковская И.В., Горина Л.Г. Некоторые механизмы персистенции in vivo микоплазм и L-форм бактерий // ЖМЭИ. Приложение. - 1994. - С. 14-17.
186. Прозоровский C.B., Кац Л.Н., Коган Г.Я. L-формы бактерий (механизмы образования, структура, роль в патологии). М., 1981. - 235 с.
187. Прокофьева-Бельговская A.A. Действие вирусов на хромосомы // Основы цитогенетики человека / Под ред. Прокофьевой-Бельговской A.A. — М.: Медицина, 1969.-С. 199-233.
188. Пушкаренко Я.Е. Течение бруцеллезного инфекционного и вакцинного процессов в облученном организме // Вопросы радиационной иммунологии и микробиологии. М., 1963. - С. 51-53.
189. Равилов А.З. Разработка и внедрение эффективных биопрепаратов для диагностики инфекционных болезней // Научн.-произв. конф. посвященная 100-летию Курской биофабрики. Курск, 1996. - С. 237-242.
190. Рапопорт Я.Л. Проблема патоморфоза / Арх. патологии. 1962. - №2. -С. 3-11.
191. Ройт А. Основы иммунологии. М.: Мир, 1991. - 328 с.
192. Романова Ю.М., Гинзбург A.A. Генетический контроль индукции не-культивируемого состояния у патогенных бактерий // ЖМЭИ. 1996. - №3. - С. 1618.
193. Ромахов В. А., Клочков A.A. и др. Им му но генные свойства вацины из штамма В.abortus 104-М в опытах на морских свинках // Труды ВИЭВ. 1985. -Т.63.- С. 7-11.
194. Ртищева JI.B. Изучение клинико-биохимических показателей состояния сосудисто-тканевой проницаемости у больных бруцеллезом: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Ставрополь, 1995. - 24 с.
195. Рубцов И.В., Недугова Г.И., Самойленко И.И. Влияние у-излучения на иммунобиологические и иммунохимические свойства холерного эндотоксина. Сообщение II. Иммуногенные свойства неочищенного облученного фильтрата-токсина // ЖМЭИ. 1984. - №8. - С. 111-112.
196. Рузаль Г.И., Галаев Г.Р. Взаимодействие Nesseria meningitidis с культурой клеток по цитоморфологическим наблюдениям // ЖМЭИ. 1985. - №9. - С. 4649.
197. Рыжкова Л.П. Морфологические и гистохимические изменения в органах лабораторных животных, зараженных R-формой бруцелл // Сб. научн. трудов СибНИВИ. Вып. 21. - Омск, 1974. - С. 74-76.
198. Рыжкова Л.П. Морфологические и гистохимические изменения в органах лабораторных животных, зараженных культурами Br.abortus штамм 82 // Инфекционные болезни животных:Сб. трудов СибНИВИ. Вып. 32. - Омск, 1978. - С. 46-48.
199. Рыжкова Л.П., Кошуков С.Д. Морфологические изменения в органах морских свинок, зараженных культурой бруцелла абортус различных биотипов // Сб. научн. трудов СибНИВИ. Вып. 20. - Омск, 1972. - С. 23-27.
200. Савельев Е.П., Петров Г.И. Молекулярные основы строения клеточной стенки бактерий // Успехи биол. химии. 1978. - Т. 19. - С. 106.
201. Салмаков K.M. Изучение иммунитета на морских свинках и крысах, привитых штаммом 19 и 82 // Учен, записки Казанского ветеринарного института.- 1966.-Т. 97.-С. 125-128.
202. Салмаков K.M. Живая вакцина против бруцеллеза из штамма Br.abortus 82 // Ветеринария. 1975. - №7. - С. 43-45.
203. Салмаков K.M. Результаты изучения вакцинного штамма бруцелл штамма 82 // Учен, записки Казанского ветеринарного института. 1972. - Т. 112. -С. 81-89.
204. Санин A.B., Сосновский О.Ю., Лапаева И.А. Иммунобиологические свойства корпускулярной коклюшной вакцины, инактивированной у-облучением // ЖМЭИ. 1996. - №3. - С. 57-59.
205. Санин С.М. Морфология иммунодефицита// Ангиол. и сосуд, хирургия.- 1995. №2. - С. 126.
206. Санин С.М. Сосудисто-тканевые взаимоотношения в органах иммунной системы // Ангиол. и сосуд, хирургия. 1995. - №2. - С. 126.
207. Селютина Д.Ф. Иммунобиологическая характеристика белков наружной мембраны бруцелл, генетические детерминанты, которых экспрессируются в клетках Echericliia coli // Мол. генетика. 1993. - №1. - С. 17-20.
208. Серова Л.Д., Голубева В.А., Павлов Е.Б. и др. Стерилизация антилим-фомина радиационным методом в сочетании с фильтрацией // Журнал микробиол.- 1995. №6. - С.7
209. Скогшнская С.Н., Ярков С.П. Липосомальный иммуноанализ // Иммунология. 1996. - №2. - С. 6-11.
210. Скрябин Г.К., Кулаев И.С. Лизоамидаза вызов микробам // Наука в СССР. - 1990. - №2. - С. 52-53.
211. Сомов Г.П., Литвин В.Ю. Сапрофитизм и паразитизм патогенных бактерий. Новосибирск, 1988. 274 с.
212. Станиславский Е.С. Бактериальные структуры и их антигенность. М.: медицина, 1971. - 220 с.
213. Станиславский Е.С. Жванецкая М.И. Антигенные свойства клеточных структур Е. coli // ЖМЭИ. 1963. - №1. - С. 32-38.
214. Сулейманов А.К., Юшук Н.Д., Никулин В.Н. и др. Функциональная активность периферической крови у больных хроническим бруцеллезом // ЖМЭИ. -1993,-№4. С. 99-103.
215. Супотницкий М.В. Порообразующие белки иммуногенные компоненты ветеринарных вакцин // Ветеринария. - 1996. - №4. - С. 19-23.
216. Сухомлинский В.Н. Перспективы применения антиоксидантов в комбинированном лечении злокачественных опухолей // Вопросы онкологии. 1990. - Т. 36. -№2. - С. 138-144.
217. Таран И.Ф., Елкин Ю.М., Васильев Н.В. Сравнительное изучение напряженности иммунитета против бруцеллеза в зависимости от дозы, метода и сроков введения живых вакцин в опытах на морских свинках // Микробиология. -1961,-№8. -С. 96-99.
218. Тимаков В.Д., Каган Г.Я. L-формы бактерий и семейство Mycoplasmata-сеае в патологии. М.: Медицина, 1973. 390 с.
219. Тимашева O.A., Горовиц Э.С. Иммуногенные свойства липосомальных препаратов на основе фосфолипидных антигенных комплексов // ЖМЭИ. 1994. -№6. - С. 70-71.
220. Ткаченко Л.И. Функционально-метаболическая активность нейтрофиль-ных гранулоцитов у больных различными клиническими формами бруцеллеза в процессе лечения: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Ставрополь, 1995. - 24 с.
221. Триленко П.А. Бруцеллез сельскохозяйственных животных. Л.: Колос,1976. 278 с.
222. Троицкий В.А., Каулен Д.Р., Туманян М.А. и др. Радиационная иммунология. М.:Медицина, 1965. - 375 с.
223. Туманян М.А., Каушанский Д.С. Радиационная стерилизация . М., 1974. - С. 27-32.
224. Тягунина Е.А., Новицкий A.A., Рыжкова Л.И. Изучение некоторых биологических свойств бруцелл вакцинного штамма 82 // Сб. трудов СибНИВИ. -Вып. 34. Омск, 1979. - С. 13-17.
225. Тягунина Е.А., Новицкий A.A., Рыжкова Л.П. Дифференциация культур бруцелл, выделенных от коров, привитых вакциной из штамма 82 // Труды Иркутской НИВС. 1980. - Вып. 5. - С. 21-23.
226. Урбан В.П. Иммунопрофилактика инфекционных болезней животных // Проблемы ветеринарной иммунологии: Тез. докл. М.: Агропромиздат, 1985. - С, 9-12.
227. Филиппова С.Н. Получение субъединичного антигена бруцелл и оценка его антигенных и имму но генных свойств: Дисс. . канд. вет. наук. Казань, 1997. -197 с.
228. Фихте Б.А., Гуревич Г.А. Дезинтеграторы клеток. М.: Наука, 1988.224 с.
229. Фрейдлин И.С. Ключевые позиции макрофагов в цитокиновой регуля-торной сети // Иммунология. 1995. - №3. - С. 44-48.
230. Хаитов P.M., Земсков В.М. Некоторые избранные проблемы функциональной активности макрофагов // Журнал микробиологии. 1995. - №3. - С. 2732.
231. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Основные представления об иммунотропных лекарственных средств // Иммунология 1996. - №6. — С. 4-9.
232. Христофоров Л. Вирулентность и полисахариды у возбудителей бруцеллеза // Актуальные вопросы микробиологии, вирусологии и иммунологии. -1975. №1. - С, 74-77.
233. Чекишев В.М. Иммуно-биохимические изменения в сыворотке крови вакцинированных и зараженных бруцеллезом телок: Автореферат дисс. . канд. вет. наук. Омск., 1970. - 24 с.
234. Чередереев А.Н., Ковальчук Л.В. Мембранные белки мононуклеарных фагоцитов в межклеточных взаимодействиях // ЖМЭИ. 1995. - №3. - С. 12-20.
235. Чернышева М.И. Экспериментальное изучение процесса формирование иммунитета при бруцеллезе: Дисс. . докт. мед. наук. -М., 1962. 397 с.
236. Чернышева М.И., Вершилова П.А. Гуморальные показатели резистентности морских свинок при бруцеллезной инфекции // Микробиология. 1967. - №8. - С.77.
237. Чибисов В.А., Селютина Д.Ф., Горелов В.Н. и др. Выделение и очистка антигенов бруцелл, синтезированных клетками Echerichia coli К 12 // Журнал мол. генетики. 1992. - №3-4. - С. 12-17.
238. Цинзерлинг A.B., Цинзерлинг В.А. Патологическая анатомия // СПб.: Сотис, 1996. 370 с.
239. Шевлягин В.Я., Снегирева А.Е., Шапошникова Г.М. Влияние липополи-сахаридов грамотрицательных бактерий на развитие лейкоза Раушера у линии мышей BALB/c // ЖМЭИ. 1989. - №4. - С. 14-17.
240. Шевченко С.И., Садовский Ю.П., Панченко Л.П. Токсическое и мутагенное действие продуктов жизнедеятельности риккетсия подобных бактерий (РПБ) // Цитология и генетика. 1988. - №4. - С. 17.
241. Шеенков Н.В. Роль антилизосомной активности бактерий в развитии инфекционного процесса и пути ее регуляции: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. -Челябинск, 1993. 29 с.
242. Шин Н.Г. и др Химический состав иммуногенности глюкопротеида бруцелл // Актуальные вопросы борьбы с бруцеллезом. Научн. труды ИЭ мин. Болезней . - Алма-Ата, 1978. - С. 85-90.
243. Шин Н.Г. и др. К изучению химического состава белковополисахарид-ного комплекса бруцелл // Актуальные вопросы борьбы с бруцеллезом: Тез. докл. -Алма-ата, 1978. Т. 15. - С. 80-85.
244. Шин Н.Г., Загорская H.H. Антигенное строение бруцелл разных видов в иммунохимическом и электрофоретическом исследованиях // Труды института краевых патологий Каз. ССР. 1970. -Т.20. - С. 29-32.
245. Шройт И.Г., Анисимова JI.A., Шишкина Е.С. Изучение ассоциированного действия коревого и паротигного вирусов на лимфатический аппарат морских свинок // Вопр. Вирусолологии - 1978. - №2. - С. 226-229.
246. Шумилов К.В. Испытание иммунитета у телок, привитых вакцинами из бруцелл различных видов // Труды ВИЭВ. 1978. - Т.47. - С. 63-70.
247. Шумилов К.В., Акулов A.B. Изучение вакцинных штаммов В.abortus 104-М, B.melitensis Rev-1, В.abortus 82 на крупном рогатом скоте // Труды ВИЭВ. -1977. Т.45. - С. 29-36.
248. Шумилов К.В., Альбертян М.П., Клочков A.A., Ромахов В.А. Иммунизация телок малой дозой вакцины из штамма В.abortus 104-М // Бюлл. ВИЭВ. -1983. Вып. 51.-С. 71-74.
249. Шумилов К.В., Клочков A.A. Изучение вакцины из штамма В.abortus 104-М в производственных условиях // Труды ВТНКИ. 1980. - Т. 30. - С. 171-174.
250. Шумилов К.В., Уласевич П.С., Ромяхов В.А. и др. Результаты изучения вакцины из штамма В.abortus 104-М. // Сб. научн.тр. ИЭВС и ДВ. 1985. - с. 20-21.
251. Эндрюс К. Естественная история вирусов. М.:Мир, 1969. - 312 с.
252. Юсковец М.К. Некоторые данные изучения бруцеллезной вакцины из американского штамма 19. Предварительное сообщение // Ветеринария. 1946.10. -С.17.
253. Юсупов Р.Х. и др. Реактогенность, безвредность и иммуногенность инактивированной бруцеллезной вакцины // Мет. Научн.-производ. конф. по пробл.ветеринарии и животноводства. Казань, 1995. - С. 11-12.
254. Ярилин А.А., Беляков И.М. Тимус орган эндокринной системы // Иммунология. - 1996. - №1. - С. 4-9.
255. Ярилин А.А., Пинчук В.Г., Гриневич Ю.А. Структура тимуса и диффе-ренцировка Т-лимфоцитов // Киев, 1991. 72 с.
256. Abbas Abul Die and let live: Eliminating dangerous lymphocites // Cell. -1996. Vol. 84. - №5. - P. 655-657.
257. Aba Toru, Watanaba Hisami, Sekikava Hiroho Multiplicity of sites for extrat hymie T-cell differentioation // Acta med. Et biol. 1993. - Vol. 41. - №2. - P. 59-79.
258. Agnew S., Spink W. The erythrocyte sedintation role in brucellosis // Amer. J. Med. Sci. 1949. - №2. - P. 211-215.
259. Allison A.C., Gregoriadis G. Liposomes as immunological adjuvants // Nature. 1974. - P. 25.
260. Allison A.C., Gregoriadis G. The earner potential of liposomes in biologi and medicine // N. Engl. J. Med. 1976. - Vol. 295. - P. 704-710.
261. Allison A.C., Gregoriadis G. In: Recent Result's in Cancer Research / Eds G.Mathe, J. Flolantum, M. Simmler. Springer Verlagm Heidelberg, 1976. - P.58-64.
262. Alton G.G. The control of bovine brucellosis. Resenrdeve;opments // World animal Rev. 1981. - Vol. 39. - № 1. - P. 17-24.
263. Anczykowski F. Studies in the usefulness of the autoglobulin test (AG) in cattle brucellosis // Pol Arch. Wet. 1986. - Vol. 26. - №1/2 . - P. 61-73.
264. Baroton C.E., Lomme J.R. Reduced-dose whole vacination against brucellosis: a review of recent experience // S. Amer. Vet. Med. Assoc. 1980. - Vol. 177. -№12.-P. 1218-1220.
265. Berman D.T., Kurtz R.S. Relationship of biological activities to structures of Brucella abortus endotoxine and LPS // Ann .Inst. Pasters Microbiol. 1989. - Vol. 138. - №1. - P. 98-101.
266. Blalock S.E. The syntax of immune-neuroendocrine communication // Immunol. Today. 1994. - Vol. 15. -№11. - P. 504-511.
267. Bos J.D. The skin as on organ immunity // Clin. And Exp. Immunol. 1997.
268. Vol. 107. Suppl. l.-P. 3-5.
269. Bradly L.M., Palton D.K. A direct role for JFN-y in regulation of Jh-1 cell development // J. Immunol. 1996. - Vol. 157. - №4. - P. 1350-1358.
270. Bretscher P.A. Requirement for antigen in lipopolysaccharidi-dependent induction of B. cells // Europ. J. Immunol. 1987. - V. 8. - № 7. - P. 534-537.
271. Broun V., Hantke K. Bacterial cell surface reseptors / In: Organisation of procariotic cell membranes// Ed. B.K. Glosh. New York: CRC Press BoctaRaton (EL), 1982. - Vol. 6. - P. 37-64.
272. Brugge L.A. , Herr B. Profiles of serological reactions following adult cows innoculation with standart dose Brucella abortus strain 19 vaccine // J. South Afr. Vet. Ass. 1986. - Vol. 56. - №2. - P. 93.
273. Bundle D.R. et al. The lipopolysaccharides of Brucella abortus and Brucella melitensis // Ann Inst. Pasteur Microbiol. 1987. - Vol. 138. - №1. - P. 92-98.
274. Cartwight J.E., Whitley G.J., Johnsone A.P. The expression and release of adhesion molecules by human endothelial cell lines and their course quent binding of lymphocytes // Exp. Cell. Res. 1995. - Vol. 217. - №2. - P. 329-335.
275. Chukwn C.C., Cunninham B. Humoral and cell-mediated immune responses in after vaccination and revaccination with Brucella abortus killed strain 45/20 adjuvant vaccine // Irish.veter. J. 1986. - Vol. 40. - P.62-71.
276. Claman H.N., Miller S.D. Requirements for induction of T-cell tolerance to DNEB: efficiency of membrane-associated DNFB // J. Immunol. 1976. - Vol. 117. -№2.-P. 480-485.
277. Combs G.F. Vitamin tolerance in livestock // Cornell Nutrition conf. for beed manufacturers East Suracuse. Proc., 1988. - P. 35-40.
278. Confer A.W. et al. Vaccination of cattle with chemically modified and unmodified salt-extiactable proteins from Brucella abortus // Veter. Microbiol. 1987. -Vol. 15. -№4.-P. 325-339.
279. Cortes F., Oitis T. Induction of chromosomal aberration in the CHO mutant EM9 end its parental line AA8 by E cor Irestiiction endonucleases: electroporation experiments // Mutat. Res. 1991. - Vol. 246. - №1. - P. 221-226.
280. Czupiynski C.J. Virulence Mechanisms of Bacterial pathogens / Ed. J.A. Roth. Washington, 1988.-P. 141-160.
281. Dam H. Interrelatio betwenn vitamin E and noly in saturated fatty acids in animals // Vitamins and Harmones. 1982. - Vol. 20. - P. 527.
282. Davis C.Y., Sell J.L. Effects of all-transretinol and vitamin E. Nutririve on the immune system of chicks // J. Nutr. 1983. - Vol. 113. - P. 1914-1919.
283. Dees S.B., Hollis D.G. Covalent lipoprotein from outer membrane of Brucella // Clin. Microbiol. 1984. - V. 14. - №1. - P. 355-362.
284. Deyce B. effect of reduced da sages of Brucella abortus strain 18 in Cattle Vaccinated as yeareings // Annmecing proceed. 1979. - Vol. 83. - №2. - P. 92-104.
285. Douni E., Akassoglou K., alexopoulou L. et al. Transgenic and knovkout analyses of the role of TNF in immune regulation and disease pathogenesis // J. Inflamm. 1995. - Vol. 47. - №12. - P. 27-38.
286. Drobler K. Basiswissen: Die zellvermittelte Immunital // Allergologic 1995. -V. 18. -№10.-P. 477-478.
287. Edwards J., Hongzhi R., Obunike J. Et al. Difdferentiated macrophages synthesize a heparan sulfate proteaglycan that bind LPS // Arteriosclerosis, Thombosis and Vase. Biol. 1995. - Vol. 15. - №3. - P. 400-409.
288. Fanci A.S., Haynes B.E., Kat S.P. The spectrum of vasculitis. Clinical pathologic, immunoglobulinic and therapeutic consideration // Ann. Inern. Med. 1978. -Vol. 95. - Parti. - P. 660-676.
289. Franchini A., Beituzzi S., Meluzzi A. The influence of high doses of vitamin E on immune response of chicks to inactivated oil adjuvant vaccine // Clin. Veter, 1996. -Vol. 109. -№1.- P. 117-127.
290. Franchini A., Canti M., Sperati et al. Impiego della vitamina E, quale componte di vaccine inativati ed emulsionati, e sua influenza lulla resposta immunitaria delpollo da carne // La clínica veterinaria. 1988. - Vol. 111.- №1/2. - P. 121-134.
291. Galdiera F., Caratelli C., Romano et al. Enhanced cellular response in mice treated with a Brucella antigen-lipopsome mixture // FEMS Immunol. And Med. Microbiol. 1995. - Vol. 10. - №3-4. - P.235-243.
292. Gershon R T-xell control of antibody production / Ed. M.D. Cooper, Wagner, New York, 1974. Vol. 3. - P. 1-35.
293. Gherchenson S.M. Virusis as environmental mutagenic factors // Mutat. Res. 1986.-Vol. 167.-№3.-P. 203-213.
294. Ghuysen J.M., Hakenbeck R. Bacterial cell. Wall. - Amsterdam: Elsevier, 1994.-213 p.
295. Goodman D.J., Albertini M., Willson A. et al. Direct activation of procine endothelial cells by human natural killer cell // Transplantation. 1996. - Vol. 61. - №5. - P.763-771.
296. Gray D. Immunological memory // Ann. Rev. Immunol. Vol. 11. - 1993. -P. 49-77.
297. Gregoriadis G. In: Enzyme Replacement Therapy in Lysosomal Starage Disease / Eds J.M. Tager, G.J. Hooghovinki, W.Th. Daems. North Holland Publishing Co., 1974.-P. 131-148.
298. Gregoriadis G. In: Lysosomes in Biolgiu and Pathology / Eds J.T. Dinglr, R.T. Dean. North Holland Publishing Co., 1975. - P. 265-294.
299. Griebel Ph.J., Hein W.R. Expanding the role of Peyer's patches in B-cell ontogeny // Immunol. Taday. 1996. - Vol. 17. - №1. - P. 30-39.
300. Groettrup Marcus, Coza Andrea, Kuckelkorn Wrike Peptide antigen production by the proteasome; complexity provides efficiency // Immunol. Today. 1996. -Vol. 17. - №9. - P.429-435.
301. Guidelines for Assuring the Quality of Pharmaceuitical and Biological Products Prepared by Recombinant DNA Tehnology // WHO Expert Committe on Biologic Standartization Report 41. W1140. - Geneva, 1991. - P. 59-71.
302. Haiford W.P., Gebhaz U., Bruann M., Can- D.J. Persistent cytokine expression in trigeminal ganglion latently infected with herpes simplex virus type I // J. Immunol. 1996. - Vol. 157. - №8. - P. 3242-3549.
303. Hanna N., Larosch E., Leskowitz S. Altered Immunogenicity produced by change in mode of link age of hapten to earner // Proc. Soc. Exp. Biol. (N.Y.). 1972. -Vol. 140.-№1.-P. 89-92.
304. Heijnen C.J., Kavelaars A., Bailieux R.E. Endoiphines and the immune system // Neuroendocrine Leff. 1988. - Vol. 15. - №4. - P. 206.
305. Heilman D.H., Rice E., Howard D.H. et al. Tissue culture studies on bacterial allerge in experimental Brucellosis 2. The cytoxocity of nucleoprotein fractions of Bru-cellae // J. Immunol. 1980. - Vol. 85. - P. 258.
306. Hisatsune Kazuhito, Londo Siichi Lipopolysacharides of R mutants isolated from Vibria cholerae // Biochem. J. 1980. - V. 185. - №1. - P. 77-81/
307. Horstmann R.D. Complement resistance of pathogenes // Abstr. Keystone Symp. "Mol. Events Microb. Pathogene" J. Cell Biochem. - 1994. - Suppl. 18A. - P. 36.
308. Huang L., Pagano R.E. Interaction of phospholipid vesicles with cultired mammalian cells // J. Cell. Biol. 1975. - Vol. 67. - P. 38-48.
309. Jann K., Westphal O. Microbial polysaccharides / In: the antigens // Ed. M. Sela. New York, 1975. P. 1-126.
310. Johnson E., Therm A. et al. A highly varable region in members of the Streptococcal M protein family binds the human complement regulator C4BP // J. Immunol. 1996. - Vol. 157. - №7. - P. 3021-3029.
311. Joint F AO/WHO Expert Commitee on Brucellosis Sixth Report Technical Report Serias №740WHO. Geneva, 1986. - P.96.
312. Kalyuzhin O.V. Muremyl dipeptide denivatives in experimental and clinical use // J. Microbiol. 1998. - №1. - P. 104-108.
313. Kaushansky K., Shoemaker S.G., O'Rork C.A. McCarty J.M. Coordinate regulation of multiple human lymphokine genes fu ort'-l and potentially novel 45 and 43 kDa polypeptides //J. Immunol. 1994. - Vol. 152. - №4. - P. 1812-1820.
314. Kimelberg H.K. Differential distribution of liposome-ehyrappad (3H) methotrexate and labelled lipids after intravenous injection in a prima // Biochim. Bio-phys. Acta. 1976. - V. 448. - P. 531-550.
315. Kijolhede Ch., Beisel W. Vitamin A and the immune function: A symposium // J. Vitr. Immunol. 1995. - Vol. 4. - №1-2. - P. 1-143.
316. Koziel M.J. Immunology of viral hepatitis // Amer. J. Med. 1996. - Vol. 100. -№3.~ P. 98-109.329. .Kramer T.R. Relationship between vitamin A status and T-lymphocyte responsiveness // J. Nutr. Immunol. 1995. - Vol. 4. - №1-2. - P. 77-85.
317. Kula M.-R., Hustedt H., Kmoner K. Et al. New developments in large seale protein isolation processes. Biotechnology-83: Proc. Intern. Conf. Northwood (UK): Online Publ., 1983. P. 359-372.
318. Kuusi N., Nurminen M., Saxen H., Makela P.H. Immunization with major outer memrane protein (potin) preparations in experimental murine Salmonellosis: Effect of lipopolysaccharide // Indect. Immunol. 1990. - Vol. 34. - P. 328-382.
319. Landau M.E., Wright G.G. Pullian J.D. et al. Radiation effects pasterella vaccine polivalent // Bacterid. 1968. - Vol. 96. - P. 804-810.
320. Lawell G., Amselem S. Submicron emulsion of vaccine adjuvants: 11700 PCT, MKU5A61K 39/008, A61K 39/085, A61K 39/21 Plarmos Corp. USA. -№US93/10402. 29.10.93. - printed 04.05.95.
321. Leserman L. Machy P., Zlphati O. Immunoliposome-mediated delivery of nucleic acids // J. Liposome Res. 1994. - Vol. 4. - №1. - P. 107-119.
322. Liang-Takasaki C.J., Makela P.H., Leivel H. Phagocitosis of bacterial by macrophages: Changing the carbohydrate of the lipopolysaccharide after interaction with complement and macrophages // J. Immunol. 1982. - Vol. 128. - №3. - P. 1229-1235.
323. Lin Yong-Sun, Ban Cheraku J. The path and molecular control of peripheral B-cell development // Immunologist. 1996. - Vol. 4. - №2. - P. 55-66.
324. Luderitz O., Freudenberg M.A., Galanos et al Lipopolysacharides of gramnegative bacterial. / In: Microbiol. Membrane lipids // Ed. C.S. Razin, S. Rottem New York: Acad. Press. - 1982 - Vol. 17. - P. 79-151.
325. Lyons A., Brace P., Christopher R. Are murine marginal-zone macrophages the splenic white pulp analog of high endothelial venules // Eur. J. Immunol. 1995.
326. Vol. 25. -№11. -P. 3165-3172.
327. Madden D.R. The three-dimensionel structure of peptide MHC complexes // Annu. Rev, Immunol. Vol. 13. - Palo Alto (Calif.) - 1995. - P. 587-622.
328. Manesis W.E., Talcott M.L et al. Acomparison of negatively and polynosinic polycytidylic acid for interferon-induction in mice // Biochim. Acta. 1978. - V. 451. - P. 610-618.
329. Manjunath N., Ardman B. Impaired II 12 responses and enhanced development of Th2 cells in stat 4-deficient mice // Nature (Cr. Brit.) 1996. - Vol. 382. - № 6587.-P. 174-177.
330. Marazuella M., Sanchez Madrid F. et al. Expression of vascular adhesion molecules on human disorders // Clin. And Exp. Immunol. 1995. - Vol. 102. - №2. -P.328-334.
331. Martin F.J. et al. Lipid vesicle-cell interactions III. Introduction of a new antigenic determinant into erythrocyte membranes // J. Cell. Biol. 1978. - Vol. 70. - P. 414-426.
332. Martin S., Lampeter E.F., Kolb H A physiological role for circulating adhe-siom molecules ? // Immunol. Today. 1994. - Vol. 15. - №3. - P. 141.
333. Mezes M Inhibitory effect of thyrotropin (TSH) on vitamin E utilization in domestic fowl // Acta Vet. Hung. 1987. - Vol. 35. - №3. - P. 307-311.
334. Minota S. The role of heat shock proteindin varios autoimmune disease // Asian Med. J. 1996. - Vol. 39. - №3. - P. 115-122.
335. Mixich F. Induction of chromosomal aberrations by restriction endonucleases encapsulated in liposomes // Mutat. Res. 1991. - Vol. 262. - №3. - P. 177-181.
336. Mondina A., Khoruts A., Senkins M The anatomy of T-cell activation and tolerance // Proc. Nat. Acad. Sci. USA 1996. - Vol. 93. - №6. - P. 2245-2252
337. Moreno E., Mayer H., Moripon J. Characterization of aq native polysaccharide hapten from Brucella melitensis // Infect Immunol. 1987. - Vol. 55. - №11. - P. 2850-2853.
338. Moriyon J., Gamazo C., Diaz R. Properti es of tje outer membrane of Bru-cells // Ann. Inst. Pasteur. Microbiol. 1990. - Vol. 138. - №1. - P. 89-91.
339. Morrison D.S., Kline L.F. Activation of the classical and properdin pathwayof complement by bacterial lipopolysacharides (LPS) // J. Immunol. 1977. - Vol. 118.2.-P. 362-368.
340. Murray J.S., Kasselman J.P., Schountz T. High-density presentation of an immunodominant minimal peptide on B-cell's in MHC-linked to Th-21ike immunity // Cell Immunol. 1995. - Vol. 166.- №1. - P.9-15.
341. Mustafa A.S., Lundin R.F. et al. HLA-DRA-restricred T-cell epitopes from the mycobacterial 60000 MW heat shock protein (hsp 60) do not map to the sequence homology regions with himan hsp 60 // Immunologi. 1996. - Vol. 87. - №3. - P.421-427.
342. Musthoff G., Hightower L.E. Cell surface expression of heat chock proteins and the immune response // Cell Stress and Chaperones. 1996. - Vol. 1. - №3. - P. 167176.
343. Nathan C. Natural resistance and nitric oxide // cell. 1995. - Vol. 82. - №6.- P. 873-876.
344. Nersessian A.K., Zilfian V.N., Koumkoumad V.A. Inhibitory effect of rat immunization with tularemia vaccine on the in vivo clactogenicity of 4 antracycline antibiotics // Mutat. Res. 1991. - Vol. 260. - №2. - P. 215-218.
345. Nikumori H., Horiuchi T., Zhu L. et al. Genetic bases of human complement C7 deficiency // J. Immunol. 1996. - Vol. 157. - №9. - P. 4239-4243.
346. Nowotny A., Friedman H., Klein T. et al Inter lympocytes on Immunnologi-cal adjuvants and modulators of non-specific resistance to microbiol. Infections. USA.- 1986. P.9.
347. Nuzzo F., Sela F., Biondi O. et al. Chromosomal aberration induced in human cultured cells by liposome en capsulated deoxyribonuclease // J. Mutat. Res. 1987.- V. 177. -№1. P. 117-124.
348. Pahlavani M., Harris M. et al. The expression of heat stock protein 70 dee rases with age in lymphocytes from ratsand rhesus monkeys // Exp. Cell. Res. 1995/1. Vol.218. -№i. p. 310-318.
349. Pardue S.L., Thaxton S.P. Vitamin E in poultry: a review // World's Poultry Sc. J. 1986. - Vol. 42. - №2. - P. 107-129.
350. Pamas J. Zucherbausteine and Aminosäuren bei Brucella and Parvobacteria-cae // Zbl. Bacterial. 1965. - Vol. 1. - №198. - P. 498.
351. Patel Y.R., Wase D.A. Some factors affecting the ultrasonic disintegration of microorganisms // Biotechnol. Lett. 1982. - Vol. 4. - №10. - P. 653-654.
352. Pichler W.J. Regulation der Immunant Wort: Des Th-1/Th2 Konzept // Schweiz. Med. Wochenschz. 1997. - 127. - №9. - P. 341-348.
353. Plommet M., Plommet A.M. Anti-Brucella cell-mediated immunity in mice vaccinated with a cell-wall fraction // Ann Rech. Vet. 1987. - Vol. 18. - №4. - P. 429437.
354. Povak Tadeusz Czynnik wzzostowy komorek pnia (SCF) // Acta haematol. Pol. 1994. - Vol. 25. -№3. - P.205-214.
355. Poccia F., Piselli P., Vedetti S. Et al. Heat chock-enhanced T cell apoptosis with heat stock protein 70 on T cell surface in multicentric Castleman's disease // Clin. And Exp. Immunol. 1996. - Vol. 106. - №2. - P. 351-356.
356. Ponvert C., Dassonvol C, Ignatowicz B. et al. Les reactions allergiques oux vaccinations // Rev. fr. allergol. et immunol clin. 1996. - Vol. 36. - №5. -P. 482-496.
357. Reitschel E.T., Sclade V., Sensen M. et al. Bacterial endotoxins: chemical structure biological activity and role in septicaemia // Scand. J. Infect. Dis. 1982. - Vol. 31. - Suppl. -P. 8-21.
358. Renoux M. Le mastocyte cible et source de cytokines // Rev. Br. allergol. Et Immunol. Clin. 1995. - Vol. 35. - №2. - P. 120-124.
359. Robey F., Harris T. Interaction between major outer membrane protein (0-8)and lipopolysaccharide in E.Coli K-12 // J. Biochem. 1992. - Vol. 105. - P. 209-218.
360. Rodríguez-Zapata M., Salmerón J. et al. Defective interferon-gamma production by T-lymphocytes from patients with acute brucellosis // Eur. J. Clin. Invest. -1996. - Vol. 26. - №3. - P. 136-140.
361. Rooijen N. van, Su Donghui Immunoadjuvant action of liposomes: mechanisms // Immunol Adjuvantsand Vaccines: Proc. NaTO. New York, 1989. - P. 95-106.
362. Rooijen N. van, Nivmegem R. Van Phospholipid model membranes II. Permeability propeitis of hydrated liquid crystals // Biochim. Biophys. Acta. 1978. - Vol. 107. - P. 239-252.
363. Rooijen N. van et al. Distribution and fate of synthetic lipid vesicle in the mouse. A combined radionuclide and spin label study // Proc. Nat. Acad. Usa. 1979 -Vol. 71. - P. 3487-3491.
364. Rooijen N. et al. The effect of particle size and change on the clearance rates of liposomes and liposome encapsulated drugs // Biochem. Biophys. Res. Com. 1980. -Vol. 63. - P. 651-658.
365. Rosmarin A.G., Caprio D.G., Kirsch D.G. et al GABP and PU1 complete for dinding, yet cooperative to increase CD 18 ((3? leukocyte integrin) transvription // J. Biol. Chem. 1995. ~ Vol. 270. - №40. - P. 23627-23633
366. Roux J., Aeselineau J., Serre A., Lacave C. Propriétés immunologique d'un extrait phenol-insolnable de Bruc. Melitensis (fraction P.) // Ann. Inst. Pasteur. 1967. -V. 113.-P. 411.
367. Russell J.H. Activation-induced death of nature T-cell in the regulation of immune responses // Cuit. Opinion Immunol. 1995. - Vol. 7. - №3. - P. 282-388.
368. Sanders F., Huddleson J.F. The influence of enviromental conditions on the growth andd dissociation of Br. abortus // Amer. J. Vet. Fes. 1956/ - Vol. 17(63) - P. 324-430.
369. Schmitt D. Response immunitaire de la pion // Rev. Fr. Allergol. Et immunol. Clin. 1995. - Vol. 35. - №5 - P. 447-454.
370. Schumann R.R., Kirstehming C. Et al. LPS binding protein (LPB) is secretory class acute phase protein, that is transcriptionally actiproteins to the AP-1 and c/EPB-sites // Brit.J. Haematol. 1996. - Vol. 93,- Suppl.2. - P.263.
371. Segal A.W., Wills E.J. et al/ Morphological observation on the cellular and subcellular destination of intravenously administered liposomes // Br. Exp. Path. 1974. -V. 55. - P. 320-327.
372. Semba R.D. Vitamin A, immunity and infection // Clin. Infec. Desease. -1994. Vol. 19. - №3. - P. 489-499.
373. Siedl P., Schlufer K. Opsonic recognotion of Staphylococci mediated by cellwall peptidoglycan: antibody-independent activation of human complement and opsonic activity of peptidoglycan antibodies // J. Immunol. 1986. - Vol. 124. - P. 1167-1173.
374. Smith H. Bacterial and Viral Inhibition and Modulation of Host Defenses // Biol. Rev. 1985. - Vol. 70. - P. 277-316.
375. Stingl G. The skin as a bridge between the environment and the immune system // Nova acta Leopoldona. 1996. - Vol. 72. - №294. - P. 123-131.
376. Swenberg J.A., Kerns W.D., Mitchell R.J. et al. Induction of squamous cell carcinomas of the ratnasal caving by inhalation exposure to formaldehyde vapor // Cancer Res. 1980. - Vol. 40. - №9. - P. 3398-3402.
377. Tang D-shu, Gazdar Adi E., Carbone D. In vivo cytotoxicity assay for assessing immunity // J. Immunol. Meth. 1996. - Vol. 189. - №2. - P. 173-182.
378. Tekes L. Mohacsi L Brucella ovis ferozottseg kimutatage ELISA-probaval // Magyal albat orv. Laps'a/ - 1987 - Vol. 42. - №8. - P. 471-474.
379. Toth Th.E., Cobb J.A. et al. Selective humoral immune response of Balb/c mice to Brucella abortus proteins expressed by vaccinia virus recombinants // Vet. Microbiol. 1995. - Vol. 45. - №2-3. - P. 171-183.
380. Umanue E.R. Granulamotous hypersensibility // Prog. Allergy. 1967. -V.ll.-P. 36-88.
381. Umanue E.R. et al. Regulation of immunity and in flammation by mediators from macrophages // Amer. J. Pathol. 1976. - Vol. 85. - №2. - P. 465-478.
382. Umanue E.R. Function of macrophages // Fed. Proc. 1975. - Vol. 34. - №8. -P. 1723-1724.
383. Umanue E.R. The regulation of lymphocite function by the macrophage II Immunol. Rev. 1978. - Vol. 40. - P. 128-153.
384. Vallete L. Effcacite coparea des vaccins antibracellignes le test do immuno-phagocitosa // Bull., Soc. Med. Compar. 1984. - P. 441.
385. Verstreate D R. et al. Outer membrane proteins of Br.abortus: isolation andcharacterization // Infec. And Immun. 1982. - Vo. 35. - №3. - P. 979-988.
386. Vilson E.E., Morrison D.S. Evidens for different requirment in physical state for the ineraction if LPS with classical and alternative pathways of complement // Eur. J. Biochem. 1982. - Vol. 128. - P. 137-141.
387. Wagner H. lmmunostimulants of plant origin // Croat, chem. Acta. 1995. -Vol. 68. -№3.-P. 615-626.
388. Westpahl O. Bacterial endotoxin // Int. Arch. Allergy. 1975. - Vol. 49. - P.1.43.
389. WinterA.J. Outer membrane proteins of Brucella // Ann. Inst. Pasteur. Microbiol. 1987. - Vol. 138. - №1. - P. 87-89.
390. Wisse E., Gregoriadis G. The uptake of lyposomes by the liver // Res. J. Reticuloendothelial Soc. 1975. - V. 18. - P. 10a.
391. Wisse E., Gregoriadis G., Daems Th. In: The reticulamdo the lial system in health and Disease Functions and Characterisicd / Eds S.W. Reichard, M.R. Escobar. -Plenum Publishing Corgm New York, 1976. P.237-245.
392. Wonderling Ramani S., Gheffar Abdul, Mayer E. Lipopolysacchfiride-induced suppression of phagocytosis: Effects on the phagocyti machinery // Immuno-pherma col, and Immunotoxicol. 1996. - Vol. 18. - №2. - P. 267-289.
393. Wright K.L., Moore T.L. et al. Major histocompatibility complex class II-associated invariant chain gene expression in up-regulated by cooperative interactions of Spl and NF // J. Biol. Chem. 1995. - Vol. 270. - №36. - P. 20978-20986.
394. Wright G.G., Swack N.C., Mitzel J.R. Radiation sterilisation of Medical Products // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1969. - Vol. 131. - P. 858-860.
395. Wu A.M., Adams L.G., Pugh R. Immunochemical and partiol characterization of fraction of membrane bound smooth lipopolysaccharide-protein complex from Brucella abortus // Molec, Cell. Biochem. 1987 - Vol. 75. - №3. - P. 93-103.
396. Zajae-Kaye M. Ts. DNAasa J. Encapsylated in ;iposomes can induce neoplastic transformation of Syrian hamster embryo cell in culture // Cell 1984. - Vol. 39. -P. 427-437.
397. Zinkeznagel R.M., Bachmann M.F., Kündig Th.M. et al. On immunological memoiy // Annu Rev. Immunol. Vol. 14. - 1996. - P. 333-367.
398. Zipfel P.F., Skerka C. Complement factor H and related proteins: an expanding family of complement-regulatory proteins? // Immunol. Today. 1994. - Vol. 15. - №3. - P. 121-126.