Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.07) на тему:Разработка новых методов и средств профилактики и лечения острого послеродового и посттрансплантационного гнойно-катарального эндометрита у коров

I I О

1 Б шш да

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ ПАТОЛОГИИ, ФАРМАКОЛОГИИ

И ТЕРАПИИ

На правах рукописи

СЛИПЧЕНКО Станислав Николаевич

РАЗРАБОТКА НОВЫХ МЕТОДОВ И СРЕДСТВ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ОСТРОГО ПОСЛЕРОДОВОГО И ПОСТТРАНСПЛАНТАЦИОННОГО ГНОЙНО-КАТАРАЛЬНОГО ЭНДОМЕТРИТА У КОРОВ

Специальность 16.00.07 — акушерство и искусственное осеменение

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

ЬоронеЖ

1994

Работа выполнена в Ставропольском научно-исследовательском 'институте животноводства л кормопроизводства Роесельхозакадемии.

Научный консультант: Заслуженный деятель науки Российской Федерации!, академик Международной академии «а.у.к Высшей школы, ректор н зав. «эфедрой акушерства и гинекологии Ставропольской государственной сельскохозяйственной академии, профессор В. Я. Никитин.

Официальные оппоненты:

1. Доктор ветеринарных наук, профессор Ильинский Е. В.

2. Доктор ,ветер!И'нарных шаук, .профессор Чирков В. А.

3. Доктор ветеринарных наук Желтобрюх Н. А.

Ведущая организация —■ Волгоградская государственная сельскокозянственная академия.

Защита состоится « /9 » ¿(¿1сЦ 19<йГг. в (О час.

на заседании епедиализ.ирован>ного совета Д.020.65.01 при Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте патологии, фармакологии ш терапии (394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 1146).

С диссертацией >можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан « ¡3 » СелблЗ:^1994 г.

Ученый секретарь Специализированного совета В. И. СлободянИК

1.ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1.Актуальность проблемы.В реяекни вопросов интенсификации вое» гроизводетва крупного рогатого окота а повыдения его продуктивности »ахное зкачение имеет прэфидактика и эффективное лечепие симптома-жческого и искусствеэкс приобретенного бесплодия, к которым отио-1ЯТСЯ острый послеродовой и поеттрангплантациоинвй гкойно-хатараль-шй эндометрит у коров.Эндометриты регистрируются во всех регионах 'оссии и охватывает от 10 до 51% поголовья «орел( Г; С. Шипилов, [967-1990;Е. В, Ильинский, 1868-1977; Г. В.Зверева, 1972-1988; В.Я.Ники-» ■ин, 1972;Э.НуГрига, 1974; А. Г. Неаданов, С.А.Власов, 1980; Т. Е. Грлгорьо-1а, 1988; ГгВ.Небогатпков, 1992

Основной причиной возникновения эпдокзтритоэ является уелеано ¡атореикая и патогенная микрофлора в совокупности с предрасполагав-,ши факторами,снихаввдмя неепецифическую резистентность тканей-иат-:л и организма в цэлом.йг^нцирование -родополовнх путей посторонней инрофлорой в процессе родовспомогения¿удаления последа и траие-лантации эмбрионов, а такхе поврзздеяие при этом целоетяоетл кх лигистнх оболочек и тканей приводят к развитию острого гнойно-ка-арального эндометрита.Иеребояевиие животные в 30-45/& случаев утра~ иваст свои хозяйственно-полванне качеетва-плодовитоеть и продуя-ивность.Накопившиеся в теории я практике отечественных и еарубех-нх ученых сведения о методах профилактики задержания последа и терапии послеродовых ослокнений разноречивы н по многим вопроса« не-остаточш,нет единого имения о роли условно патогенной микрофлоры этиологии острого эндометрита коров.

Одним из экзогенных факторов,приводящим к наруиению у коров вос-роизводитаяьной способности,бесплодию и яловости.является масляная ислота,которая нарушает в организме хивотных кислотно-щелочное рав -овесие,обменные процессы,тормозит усвояемость каротина.Нарушение' бмена веществ ведет к снихемш уровня еетеатвенной неспецифической езистентноети и имммунобкологической реактивности,на этом фоке ктивизируется условно патогенная и патогенная микрофлора,что веет к заболеванию как неааразкышутак и инфекционными и инваэион-ами болезнями (Р. Мекингтон, 1952;й.Г.Шарабрин, 1965;П.Ф.Солдатен-зв, 1971;Г.В.-Зверева, 1972;В.Т.еамохйн, 1976,1992). '

Основным источником попадания масляной кислоты в организм кивотах является недоброкачественный еилое, в котором она накапливается * результате нарушения микробиологических процессов.Силосование зляется биологическим методой консервирования кормов, в основе второго лехит молочнокислое брохениэ,протекающее под влиянием

молочнокислых бактерий» С накоплением в силосуемой массе достаточного количества молочной кислота и достихедаием величины рН 4,2-4,6 масдянокислые бактерии не раэвиваютоя.Биотехнологические метода борьбы с маслянокислым брохением в силосе основаны яа интенсификацию! молочнокислого брохения в консервируемой масса растений цутек внесения в нее лактобактерий с высокой кислотообразующей способностью и обладающих антагонистической активностью к клостридиям^ возбудителям масяянокислого брохения, в виде бактериальной вак-в«оки<0днако,исполь8уемне до настоящего времени молочнокислые закваски ,трудоемки в изготовлении,для их проиеводства используется сырье.представляющее продукты питания,низка их кислотообразующая, ферментативная и антагонистическая активность,их микрофлора мохет развиваться в пределах 32-40°С,что ограничивает применение заквасок при "горячем"методе силосования.В этой связи разработка биотехнологии производства высокоактивной закваски для силосования кормов с учетом изоляции и селекции местных штаммов лактобактерий»обладающих высокой устойчивой кислотообразующей и ферментативной активностью,способной подавлять развитие иаслянокислых бактерий, а такхе изыскание возмохности для ее производства применения продуктов вторичной промышленной переработки молока (сыворотки), представляют определенную научную и практическую■значимость как для животноводства,так и для молочной промышленностиг

Проблема ликвидации и профилактики бесплодия крупного рогатого скота не мохет успешно решаться и без эффективного лечения коров, больных острым послеродовым и посттрансплантационным гнойно-катаральным эндометритом.Однако эффективность терапии в последние годы Ьслохняется тем, что широкое применение в ветеринарной практике антибиотиков и сульфаниламидных препаратов,обуславливает у животных иммунодепрессивные явления,адаптацию и селекцию резистентных к ним микроорганизмов,что значительно повышает тяхесть течения и степень распространения гинекологических заболеваний;снихает оплен дотворяющую способность коров и результативность их лечения,-

Неизбехная контаминация полости мзтки у коров-доноров при нехирургическом трансцервикальном извлечении ранних эмбрионов для'их пересадки реципиентам, а такхе травмирование родополовнх'путей-вследствие несовершенства используемых для этой цели катетеров.,являются основными причинами посттрансплантационного эндометрита и прездевременной выбраковки хивотных с высоким генетическим потенциалом, снихения результативности эмбриопересадок-нового биотехно-логичского метода ускоренного размнохения и селекции хивотных.

3.

В этой связи методы и средства профилактики и терапии острых эндометритов доллш*совершенствоваться и обновляться^ Поиски новых резервов профилактики,изыскание и разработка новых методов и средств лечения острого- гнойно»катарального эндометрита,ооэдаиие инструментов,сникающих травмирование и контаминации родополовнх органов^микрофлорой при извлечении эмбрионов у коров,имеют большое . • теоретическое и практическое значение в системе мероприятий »Направленных на повышение плодовитости хивотннх репродуктивных и племен-'них ферм.■

1,2» Цель и задачи исследований.Целью настоящей работы являлось изыскание,разработка и внедрение новых эффективных методов и средств профилактики и лечения поолеродового и посттрансплантациоя-.ного гнойнсккатарального эндометрита у коров с учетом причин,вызывающих снихение ее тес гвенной. реэла т ентнос ти организма хивотных.-

Для реализаций поставленной цели определены следующие аадачи исследований:

1.Установить степень распространения и причины возникновения острого послеродового и поеттраноплантационного гнойно-катарального эндометрита у коров в условиях молочно-товарных ферм Ставропольского края*г

2.Разработать и внедрить в производство новый метод профилактики острого-шослеродового гнойно-катарального эндометрита у коров путем скармливания им силоса,приготовленного с биологическим коноервантом-антагонистической молочнокислой закваской амилонитробактерии,повышающей эффективность обменных процессов и естественную реаистентность организма отельных коров.

3.-Разработать технологию и внедрить в производство новый этиотроп-ный препарат лактобрил для лечения и профилактики острого послеродового и посттрансплантационного гнойно-катарального эндометрита,способствующего повышению у коров юшунокомпетентности организма и активизации фанторов местной гуморальной защиты матки.

4.Разработать комплекеную схему лечения коров при остром послеродовом гнойно-натараяьном эвдометрите с учетом применения лактоб-рила и ерадетв патогенетической терапии.

5* Разработать и апробировать новый -катетер,повывающий извле-каемость эмбрионов у коров и профилактирующий у них заболевав- ; мость острым посттрансплантационным гнойно- катаральным эндометритом.

1^3,- Научная новизна исследований состоит в научно обоснованной разработке нового пйдхода к выбору методов и средств профилактики и лечения оотрвго послеродового и посттрансгаантационнвго гнойно-катарального эндометрита у коров,обьединивиего в себе три биотехнояогнчеоких решения:

«•новую молочнокислую аакваску амидонитробактерин для биологического консервирования кормов.применение которых повышает эффективность обмена веществ и естественную резистентность организма стельных коров,косвенно профилактирует у них родовую и послеродовую патологию;-

-новый бактерицидный препарат лактобрил для лечения и профилактики острого послеродового и посттрансплантационного гнойно-жатарального эндометрита у коров,повышающий естественную резистентность хивотных-и способствующий активизации факторов-локальной гуморальной защиты и регенеративных процессов в матке ;

- новый катетер для извлечения эмбрионов.профилактирующий травмирование и бактериальное обсеменение родополовых путей у коров-доноров и заболеваемость их острым посттрансплантационным эндометритом^

С этой целью:

-изучена роль"масляной кислоты в возникновении и развитии- родовой и послеродовой патологии и ее влияние на репродуктивную способность коров;

- уточнен состав несдеЦифических возбудителей острого гнойно-катарального эндометрита у коров на фермах Ставропольского края ;

- в естественных условиях выделены и идентифицированы чистые культуры мезофильных и термофильных лактобактерий,изучены их биохимические свойства и доказана воэмо1ность их совместного культйви-рования в молочной сыворотка при производстве закваски для силосования кормов;

-разработаны методы качественного и количественного определения компонентов лактобрила в препарате и молоке;изучена стабильность препарата при хранении.

В соответствии с требованиями Департамента ветеринарии МСХ РФ проведены лабораторные и производственные испытания лактобрила на специфичность,безвредность,бактершадность и терапевтическую эффек-

тивность|(

Для восстановления"репродуктивной функции коров при остром поо-леродовом гнойно-катаральном эндометрите разработано и апробировано

сочетанчое применение лактоорила ео средствами симптоматической и патогенетической терапии:тривитамиком,синэстролом,окситоцином,АСЯ-2 и новокаином.

С целью профилактики травматического посттрансплантационного эндометрита разработана и испытана конструкция нового травмобезопасного катетера,повышающего извлекаемое« ранних эмбрионов у коров-доноров и эффективность метода трансплантации эмбрионов.

1,4. Практическая значимость работы. Результаты научных исследований явились основой разработки принципиально нового эффективного комплексного метода профилактики и лечения острого послеродового и посттрансплантационного гнойно-катарального эндометрита у коров,- С-этой целью разработаны и внедрены в производство новый биологический консервант кормов,этиогропное бактерицидное лекарственное средство и травмобезопасное устройство для извлечения ранних эмбрионов.

1.Уточнена роль патогенных стафилококков в'этиологии острого послеродоього гнойно-катарального Эндометрита у коров и изучено влияние масляной кислоты на их воспроизводительную способность.

¿.Научно-техническая разработка"Ьактерицеднкй препарат лакто-брил"защищен авторским аввдетельотвом 5 1672629(автор С.Н.Слипченко, и др.", 1Ь91) и оформляется патентная защита. Разработанные схемы лечения острого гнойно-катарального эндометрита е применением лактобрила, обеспечивают выздоровление и плодотворное осемененке до 90% коров. Промышленное производство лактобрила и компонентов закваски амилонит-робактерш освоено и осуществляется по заявкам потребителей Ставропольским экспериментальным биотехнологическим заводом НИИ КИМ Минатом-энергии РФ.йактобркл производится в соответствии с ТУ Ь 291-001-07532Б00-5о и применяется на основании"Наставлешя по применению лак-тобрлла для профилактики и лечения эндометритов у коров".утаерхденко-го департаментом ветеринарии йСХ РФ,и приказа ? 30 от ¿З.ОЗ.ЫЭг.Глав-вотупра лСХ СССР.Кроме того.лактобрил разрешен для лечения хелудочно-кишечшх диа^ейных болезней новороздек;-шх телят (наставление 7 15>-Ь-4/145-146 от 18.10. ЬУог),

3.применеьие катетера конструкции С.Н.Слипченко с сотр. (19511 (авт. свад.'^оос^Ьо) сокращает время извлечения эмбрионов и уменьшает а 1 раз коктаминацию матки микрофлорой.Травмобезопасен, удобен в работе,прост в изготовлении.

4.для производства молочнокислой закваски амилонитрооактерин (авг.св. 1151575 в соавторстве)раэработаны и утверадены в соответствующем порядке следуют е нормативно-технические документы; закваска"Амилонитрооактерин"- и 1и 1ч!ФСР 153-67;сухой бактериальный концентрат

" Стамидобак"—ТУ 10 РСФСР 151-87; "Биактиватор "-'ГУ 10 РСФСР 152-8?. Готовую к применению закваску производят предприятия молочной промышленности или непосредственно а местах заготовки силосе."Стамилобак" расфасован в стеклянные флаконы и содержит в 1г. 200млрц.микробных клеток;

5.->Центральннй музей промышленных микроорганизмов института ВНИИ-генетика,принял на депонирование 3 культуры лакто0актерий(коллекционные номера В-2454,В-2455,Б-2456) в качестве штаммов,перспективных для использования в составе молочнокислых заквасок для силосования кормов( в соавторстве). '

1.-5. Апробация рцботы.-Материалы диссертации доложены и обсухде-ны на . 44-й и 54-й,и58 научных конференциях Ставропольской ордена ТруДовог о Красного Знамени\сель*оз анемии(Ставропель,1977,1978,1991), научно-практических конференциях молодых ученых Северного Кавказа (Краснодар,1987,1988;Саратов,1988);регионарных научно-технических ксдференциях:"Эффективность безотходной технологии в молочной про- - -мышленности"(Ставрополь,1582,1983),"Химики Северного Кавказа-народно-му хозяйству"(Нальчик,1991);республиканской научной конференции"Состояние и перспективы развития биотехнологии в животноводстве"(Харь-крв,1988); Всесоюзных научно-технических конференциях:"Проблемы зко-логик в ветеринарной медицине"(Воронеж,1989),"Профилактика и лечение болезней молодняка сельскохозяйственных гиботных",(Воронеж,1991); Международной конференции-"Рани и раневая инфекция" Российской Академии медицинских наук(Москва.октябрь 1993); научной конференции Воронежского Госагроуниверситета (Воронеж,1994).

1.6.' Реализация результатов исследований.¿втор диссертационной работы принимал непосредственное участие в разработках нормативно-технических "документов и внедрении в производство закваски амилонит-робактериь и бактерицидного препарата лактобрил. на этапах:Ставрополье кого краевого,республиканского и Российского Федеративного уровней,. Закваска амилонитробактеринл применяется с 1382года,за этот период Ставропольским экспериментальным биотехнологическим, заводом КШКИМ ■йинатомэкзргии РФ изготовлено и реализовано хозяйствам Ставропольского и Краснодарского краев, и Ростовской области компонентов закваски сухого бактериального концентрата "Стамилобак"-292584 доз(флаконов) и биактиватора-97528 упаковок.В 1982 году хозяйствами Ростовской области заготовлено с применением заквавки амилонитробаг.терик 320 тыс. тонн силоса,а Ставропольского края- 1 млн.тонн.

Лактобрил выпускается с 1988 геда, за этот период изготовлено и реализовано 23 областям,краям и республикам России, а такхе гоо.у-

7- -

1арствам CHI- Б ат ору с сии, Украине, Каз ахс тану, Армения и Аэербайдхану ¿046578 доз(флаконов) препарата. Лахтобрил применяется на 378 фер-iax 24 районов Ставропольского края с охватом 225 тыс. коров.*

Новый катетер применяется в практике работы Ставропольского цент» ж трансплантации эмбрионов крупного рогатого скотам

Разработанная методика"Определение подлинности лекарственной оркы лактобрил" применяется в аналитической работе биохимической [аборатории СНИИ1К, - а такхе в научно-педагогической практике-кафедры фармацевтической химии Пятигорского фармацевтического института, ¡олохения диссертационной работы включены в тематику дипломных и кур-:овнх работ студентов ветеринарного факультета Ставропольской сельс- . ¡охозяйетвенной академии по дисциплино"Ветерияарное акушерство и 'инекология".йгдано 5 икф. листков'для работников животноводства ерез систему Ставропольского ЦНТИ(1976-1990 годах).

1.7. Публикации. По материалам диссертации опубликовано 23 аботн, в числе которых 3 авторских свидетельства на изобретение.

1»8«Обьеи и структура диссертации. Диссертация изложена mJ^S траницах машинописного текста.содерхит 31 таблицу,12 фотографий рисунков. Состоит из введения,обяора литературы,результатов соб-твенных исследований.выводов и практических предложений;списка ли-ературы,включающего 216 отечественных и 29 иностранных источников, сследования выполнены по Государственной целевой программе МСХ-и hHT 051.25.01,Госрегистрация 3 01827055332.

,' 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнялась в 1974-1993 годах во НИИ комплексного ис-ользования молочного сырья(НИЖНИМ) Минатомпрома РФ и на его экспе-иментальном биотехнологическом заводе(Ставрополь),Ставропольском ШК,Пятигорском фармацевтическом институте,кафедре акушерства и ннекологии Ставропольской сельхозакадемии,Ставропольеком центре йбриопересадок,

Обьектами исследований являлись:мслочнояислая микрофлора,силос, ровь,кусочки матки,маточная слизь.печень,-почки коров,лабораторные явотные,коровы,телята,лекарственные препараты,7-дненные эмбрионы, устройства для их кехирургического извлечения.

Экспериментальная часть работы выполнялась на коровах красной гепной и черно-пестрой пород,содержавшихся в условиях молочно-то-ipHHx ферм хозяйств.агрофирм и акционерных обществ Ставропольского жя.Исследования проведены на 1789 лакирующих коровах;80 коровах-знорах эмбрионов,от которых получено и оценено 259 эмбрионов;

д.

24 реципиентах,272 телятах до 2-х месячного возраста,80белых мышах. Диспаисеризкрована 11081 новотельная короьа.Биохимическим анализам подвергнуто 6662 пробы рилоса,470 проб сывороток крови,заготовлено и оценено 5 экспериментальных партий силоса.Изолировано с поверхности растений и из молочнокислых продуктов 123 штамма лактобактерий,в том числе кокков- 102,палочек-21.Проведен микробиологический анализ 203 маточных смывов,2СС смывов с оборудования,стен коровников и рух обслухивающего персонала.В с ¿швах из полости катки выделено и вденти фицировано 339 штаммов микрофлоры, в числе которой идентифицировано 170 штаммов коагулааополохитэльных стафилококков. Выделение чистых бактериальных культурой их идентификации до веда проводили по- морфологическим, культурально-биохииическим.тинкториалышм и патогенным свойствам в соответствии с общепринятыми методами микробиологически; исследований.При этом руководствовались Международной таксонометрической номенклатурой,а такхб действующими инструкциями и наставлениями Департамента ветеринарии МСХ Р$,Минздрава РФ,кратким определите^ бактерий Берги (1Ь»80) и работами отде^х авторов»отмеченными в дисс< тации.Аля выделения стафилококков использовали элективные ¡штатшьк среды:лх патогенность определяли по способности коагулировать плазм; крови кролика,гемолкзировать эритроциты хивотннх и наличию ДНК-азно! активности(В.М.Карташова,А.Й.Ивашура,1988). Выделение и идентификащ отделных видов микрофлоры проводили методами : маслянонислых бактерий- по ГОСТ 25102-90 ¡бактерий группы кишечной палочки- на средах аесслер и Эндо;общее количество мезофильноЯ микрофлоры,молочнокислы: бактерий- по ГССТ &225-84:плесекей -. на среде Сабуро по ГОСТ 10444-) споровых аэробов - по методу Г.П.Калина и Л,Т.Комаровой(1975).Антаг нистичеекую активность молочнокислых бактерий изучали на 7 штаммах клостридий,3 штаммах бактерий группа'кишечной палочки и 3 штаммах плесеней, методом пер-пендикуляршх штрихов(А.В.Гудков, 1972).Амидол» тическую активность заквасочной микрофлоры определяли по размерам э гидролиза крахмала, а такхе по ГОСТ 20,264.4-74.

фовь для биохимических исследований брали из яремной вены через Ь-4 часа после кормления животных.3 крови онределяли содерхадае: эр роцитов и гемоглобина-колориметрически(ФЭК);глюкозы-оргов.9лувдинова методом¡общего белка-рефрактометрически;белковнх фракций- по Олл-На корду в модификации Карпюка С.А.(1962); кальция.фосфора,каротина-обцепринятыми методами биохимического анааиаа(И»П.Кондрахик,1985); витамина А-по Карру-Прайсу¡билирубина -по диааораакции( И. П. Конд-рахин,1985)¡качественное определение кетоновых тая в моче я молоке-по Ланге и Россу-нитропрусвднатриевой пробой и реактивом Лестраде.

Количество кетоновых тел в крови, -по Энгфельду в модификации С.Лай-теса и А.Одино ,вой-иодометричесхим методом¡резервную щелочность-диффуз^Шм методом по И.П.Кондрахину(1585).Лейкограмму выводили по общепринятой методике -микроскопией мазков крови,окрашенных по Рома-мовсждцу-Гимза,-

Уровень естественной и местной гуморальной иммунологической реак- ' тивности у хивотных определяли: по фагоцитарной активности нейтрофи-лов(по Йахомычеву, 1968),используя в качестве тест-культуры З'Сшюч штамм Р 3278А,полученный из института питания АНРФ;бактерицидную-ак-тивность сыворотки крови- по 0.-В. Смирновой и ТгА4 Цузьминой(1966) и лизоцимную активность сыворотки крови - по Дорофейчук (1968).

Биохимические исследования кормовых достоинств опытных и производственных партий силоса вели по общепринятым■методам зоотехнического анализа кормов (В. А.-Разумов, 1982), -.• •

Штаммы молочнокислых бактерий,закваска для силосования кормов ами-лонитробактерин,приготовленная в составе этих культур;силос.приготовленный с применением закваски;бактерицидный препарат лактобрил,-были испытаны.апробированы и исследованы на специфичность,безвредность, токсичность и тератогенноеть методами.предусмотренными-для новых кор^ мовых средств и лечебно-профилактических препаратов Департаментом ветеринарии МСХ РФ и его фармакологической комиссией ВГНКЙ(М.1973).

Подлинность лактобрила,сохраняемость в композиции и молоке -его составных элементов устанавливали на основании разработанных «ами качественных и количественных методов.дасщих воэмохность обнарухивать компоненты препарата в пределах 10".....-Ю"? 1 мл раствора при относительной ошибке С,65...,0,85%(С.Н.Степанюк,Н.В.Благоразумная, С.Н. Слипченко, 1991).

При научении влияния масляной кислоты и силоса,приготовленного с "закваской амилок;:?'-':бактерий,на воспроизводительную способность коров учитывали.'ьнболеваемость коров острым гнойно-катаральным эндометритом ,час юту зале:хания последа при родах,сроки нормализации половых циклов у новотельных коров,их оллодотворяемость,число дней бесплодия,индекс оплодотворения,эмбриопродуктивность и качество эмб-рионэв.плодовитость,1изнеспособность телят,уровень у коров и телят факторов кввпйдафическойо имцунитета.

Терапевтическую эффективность лактобрила сравнивали с фуразоли-доновыми палочками.С этой целью было отобрано 160 больных острим послеродовым гнойно-катаральннм эндометритом коров и их по принципу аналогов распределили на 3 опытные и одиу контрольную группы по 40 голов в каждой(табя,1). Всем коровам во всех 4-х группах через 6-8 часов после отела,независимо от времени отделения пооледа.иньециро-

вали внутримышечно 2мл масляного '<$> раствора сикэстрола и 40 ИЕ окситоцина.Инъекцию повторяли через'48 часов.

Таблица 1

Схема

лечения острого'послеродового гнойно-катарального эндоиет рита* коров

Груп- -¡Коли- : „ па ко-;Н9ство: Лечебный ров :хивот-: комплекс (схема:ных : препаратов лече- : í ния) :

Кратнорть и сроки приме-применения

1 " 40

2 40

3 40

4 40 (контроль- -ная)

Глактобрда

J +

■чвода дисгилли-[рованная

0,8г 100,0мл

вцутрима-точно

{i

[лакт обрил тривитамин лактобрил тривитамин

АСД-2 + новокаина 0,5% раствор

внутрика-точно

0,8г

100,0мл

0,8г в^утрима-

100,0мл точно

1,0-1,2мл в седалищ-но-хвосто-25-30 мл вую складку

фуразолидоновые Зшт палочки

внутрима-точно

1-е сутки-2 раза

в день

2-е и последующие- 1раз в

еутки

1-е сутки-2 paaS;

в день 2-е и последующие - 1 раз в .сутки

1 сутки- 2 раза

2-е и в Де® последующи©-1раз в сутки

1-3-5сутки-1 раз в день

1-е сутки-2 раза

в день

2-е и последующие - 1 раз в

сутки

Если через 24 ч. после первой инъекции миотропных перпаратов послед не отделялся,то его удаляли оперативно.используя в качестве антисептического и смачивающего средства, в 1-3 группах коров раствор лактобрила в равведении 1:5000, а в контрольной группе-раствор фу-рацилина в той хе концентрации. , '

Терапевтическую эффективность лактобрила определяли по ехеднев-ным клинико-гинекологическим наблюдениям.В итоге подсчитывали количество- выздоровевших хивотных.длительность лечения,сроки восстановления полноценных половых циклов,число дней бесплодия,индекс опло-

дотворения.оплодотворяемость.Во всех группах было отобрано по 20 коров,которые заболели гнойно-катаральный эндометритом после оперативного отделения последа» У них до лечения и в стадии выздоровления отобрали и провели микробиологичские анализы маточных оинвов (дополнительно -через 25и 60 дней).исследовали кровь, в которой определяли изменения уровня неспецифичеехой резистентности.морфологический и биохимический состав вышеиелохеяннинметодомм.

С целью установления влияния испытуемых схем леченая гнойно-катарального эндометрита у коров на регенеративные процессы в матке и факторы местной гуморальной защити,провели гистологические и гистохимические (на 5 больных коровах от каздой группы и 5 коровах с нормально-протекающими послеродовыми процессами) исследования.

РНК,ДНК и количество плазматических клеток определяли в срезах, изготовленных из биопсийного материала слизистой матки,окрашенных по методу Браше(ОгВ.-йолкова и О.Д.Елецкий, 1982).Подсчет РНК иДНК проводили полуколичественным методом по В.В.Соколовскому,используя окулярную сетку микроскопа,с площадью одного квадрата 0,025 мм^в 10 квадратах одного препарата (А.И.Кононский,1976)*Плазматические клетки -в субэпителиальном елее эндометрия коров определяли в 100 полях зрения одного препарата .окраше^ого по Романовскому-Гимза.-

Уровень иммуноглобулинов класса й и М в маточной слизи определяли методом РйД-реакцией радиальной нммунодиффузии в агаровом геле по Манчини(1Ь65) с использованием моноспецифических сывороток,полученных в ВИЭВ.

Премедикадаю и индуцирование полиовуляции у коров-доноров' эмбрионов проводили в соответствии с требованиями инструкции по трансплантации эмбрионов.В опытах использовали сывороточный гонадотропин Чешского производства,Оценку качества эмбрионов вели по 5-бальной системе. (Н.И. Сергеев, 1985).

Результаты лабораторных и научно-хозяйственных экспериментов подвергали биометрической обработке по методу Н.А<Г1лохинехого( 1970).Ко-личесгво повторностей опытов и хивотных выбирали в соответствии с целью эксперимента и вариабельности признаков*

3, РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3,1. Степень распространения и причины возникновения острого послеродового гнойно-катарального эндометрита у 'коров на фермах Ставропольского крал,-

В результате диспансеризации 11081 отелившийся коровы.проведенной в 1986-1992г в 12-ти хозяйствах 7 районов Ставропольского края,

с охваток 36 ферм,находящихся в различных природно-климатических зонах,было установлено,что 4568(41,6%) из. них пернболели острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом.Анализ заболеваеиэсти свидетельствует,что основная часть переболевшего маточного стада • (79,5%)приходится на'животных с родовой патологией-задерханием пос-леда.При физиологически нормальном родовом процессе эндометритом, заболевали 8,5% коров,что в общем числе послеродовых осложнений составляло 20,5% (табл.2).

" , • Таблица 2.

Заболеваемость коров острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом в Ставропольском крае

Год дис:йсследо- • иэ ш в ™Г^исде ' , — пансери:вано оте~:'заболело:с задерха-:с нормаль:бесплодные более зации .лившихся :эндомет- :нием'пос- :ным оте- :3-х месяцев_

коров :коров ;ритом :леда :лом :с задер: :с норма-

:ханием : льным

: : :последа :отелом

1986 612 257 203 . 54 108 3

' 1987 ' 223 95 75 • 20 24 _

1988 " 1052 441 338 103 ' 118 6

1989 • 2008 956 766 190 231 . 12

1990 2040 836 650 186 - 240 13

1991 1756' 602 465 13? 139 7

1992 еВ90 1381 1133 248 385 21

Итого: . 11081 4568 3630 938 1245 62

У переболевших животных,длительное время-более '6-х месяцев после родов-не восстанавливались полноценные половые циклы и многие иэ ;;их(28,б7°) оставались бесплодными. Причем, коровы переболевшие эндометритом в результате задержания последа, в числе бесплодных составляли 34,3"а>(11,2/° от числа отелившихся),а не имевшие родовой пато-логйи-6,6/'о(0#5% от числа отелившихся).Следовательно,задерхание последа у коров-рохениц способствует развитию воспалительного процесса в матке и заболеванию острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом.Отсутствие у коров родовой патологии сокращает заболеваемость эндометритом более чем в 3,8 раза.

Наши исследования покаэали,что задерханию последа подвергаются коровы в тех стадах,которые круглогодично находятся на привязном содержании,лишены активного моциона и не обеспечены доброкачествен-шми кормами.

О роли микрофлоры в этиопатогенезе эндометрита коров среди ученых.

;о настоящего времени нет единого- шекия. Большинство исследовате-.ей считают,что условно патогенна» микрофлора .питает уровень им-[унокомлетентности организма J и являемся основной причиной >азвитии острого послеродового гнойно-катарального-аедоиетрита&ио-'ов(В.11.Шишков,1962;й. Г.Шарабрин, 1965; Р. Тассел, 1967;Д*Д,Логвинов, .971; Г. В.Зверева, 1972;Н.у1.!.юлянцев, 1974;Е. В.Ильинский, 1977; А. Г,Нёх-,аноа,1980 и др.).Однако некоторые отдаст предпочтение только отельным видам аэробных бактерий(0.!1.Радченков,1988) или отрицают , ообще роль микрофлоры з этиологии эндометритов(Р.А \tCSaf i~z схТ /^.,1968).В тоже время ни ь одной работ» отечественшх и зарубехннх ченых нет сведений о повышении оплодотворяемости у млекопитающих ивотных под влиянием факультативно'патогенных и патогенных кикро-рганиэмов(Н.Г.Балашов, 1980).,

В этой связи .было решено изучить видовой и качественный состав икрофлоры матки при остром послеродовом эндометрите и в процессе ыздорсвления коров, уделив основное внимание стафилококковой инфваяй. Это связано с тем,что в результате бессистемного применения ак-ибиотиков и других бактерицидных препаратов, стафилококки приобрели ысоиую вирулентность и устойчивость и являются неопецифичэокими оэбудителями многих незаразных заболеваний человека и животных.При ■ кааании акушерской помовд,оперативном отделении вадерхавиегося посада в условиях коровника етафилококхи ваносятея в пслоеть матки и кгибно в ней размножаются,хак в монокультуре,так и в, сочетании с ругими факультативно патогенными микроорганизмами,нередко приобретающими в процессе заболевания патогенные свойства;

В 1Ь85-1992гг о"5уоольных острым послеродовым гнойно-катаральным едометритом коров было получено 203 маточных сшва и проведено их -«кробиологическое исследование.Условно патогенную и патогенную мик-Офлсру выделили у 103 животных(90,3%)в-количестве ЗЗЭ штаммов,/ото- . ая была представлена 19 видами неспецифических возбудителей-завоевания» В общем обьеме микрофлоры 50,¿/о составляют стафилококки; 5,0% -энгеробактерии, 8,6%- протей; Я,97^-стрептококки;4,8%" зробная споровая почвенная микрофлора(сенная и картофельная палоч-а);4,4/4- синегнойная палочка;2,9%-- споровые анаэробы(клострвдии); ,№-грибы.-Аэробная меаофильная микрофлора превалировала над оотаяь- ' эй и составила ь5У°.Из ЗЬ9 птаммов микромира 84,3% проявляют пато-знность, в том числе среди бактерия синегнойдой палочки,-75%;ота-ллококков- 81,7/£; вульгарного протея-49,3%; пиогенного стрептококка-2,0'/о, споровых анаэробов и грибов иа рода яандида-90Й*

"Особенно высокая патогенное?ь была откбчека в -СНыЛиезб а к т ерий: золотистый стафилоконк+вульгаркыК протей¡золотистый етафилококк+гно-еродный стрептококк; а также в смешанных культурах килечной палочки и клострвдий" ^ ^-/¡еи»,); кишечной палочки и ота-филококка.В этих ассоциациях установлена 100%*смертность лабораторных хивотных(белых мышей).Усиление патогенности у факультативно патогенных видов микроорганизмов'под влиянием золотистого стафилококка свидетельствуют о синергизме этих микробов при заболевании коров острым гнойно-катаральным эндометритом.

Особенно бурный рост стафилококков,характеризующийся псдавле-. тем ими развития общей гнилостной микрофлора.устанавливали Поело оперативного удаления последа.Патогенных стафилококков выделяли из .полости матки в случае терапии фуразолидоновнми палочками в течение 12,3+1,3 дня (Р<0,02) после клинического выздоровления, в у отдельных коров- е течение .7-ми месяцев.

При исследовании 203 маточных смывов,полученных от больных коров,выделили 170 шташов стафилококков.Эпидермалыше(53Д$) и сапрофитные^^) виды в период максимального развития стафилококковой микрофлоры в матке,начинали проявлять несвойственные им вирулентные свойства (ДНК-азную и гемолитическую активность),-

При легком течении заболевания выделяли в основном монокультуры апатогенннх бактерий,среди которых доминировали почвенные споровые аеробы.Общее количество микрофлоры,ее вирулентные свойства скиха-лись в период выздоровления хивотных,что сопряхено с повышением естественной резистентности организма хивотных и активизацией имму-нокомпетентшх клеток.

После переболавзния острым порлеродовым гнойно-катаральным эндометритом коровы, могут длительное Бремя(6-7мес)являться стафияо-кокконосителями без клинического проявления заболевания и выдать бесплодае у хивотных.

Проведенные исследования дают основание утверхдать,что'золотистый стафилококк является основным неепецифичесним возбудителем острого послеродового эндометритаукоров,что сообразуется с результатами исследований Г.В.Зверевой и С.П.Хомина(1976);Е.В.Ильинокого (1977,1983);Т.Е» Григорьевой (1985,1988), выделявших ву"сшв£х коров,, в 30-7® случаев заболевания,стафилококки.

3.2. Родовая и послеродовая патология при кормлении стельных коров недоброкачественным силосом.

Ведущим факторе» возникновения эндометрита у коров является али-

иентарннП,приводящий к нарушению обмена веществ и снижению резистентности организма в сусоетойинй и поолеотелышй периода(Е.ИЛирд, РД. Симоне, 1961;Г» В.Зверева, 1972; В ¿Т.Сомохин, 1976; А., Г* Нехдаисв, 1980

Заянчковсхий,1991).Основной причиной нарушения метаболизма в эимне-стойдовнй период у стельных коров является скармливание им недоброкачественного силоса.содержащего масляную кислоту(IiiГ.Шараб-. рин, 1S65;Г1»$.Солдатенков, 1S71;В.Л.Никитин, 3«Н.Грига, 1979).

Анализ биохимических исследований 6662 проб силоса,заготовленного в Ставропольском крае в 1982-1989годах,показал,что 1026 проб (15,4$) содержат.масляную кислоту в количестве от 0,05 до 2%.Более 30% проб содержали ее в количестве 0,6-2?«.,

С целью определения влияния масляной кислоты на воспроизводительную функцию, коров в одном из хозяйств'края, в хотором отсутствовала возможность обеспечения коров доброкачественными кормами,был поставлен ОПЫТг ,

^ эксперименте участвовало 930 коров красней етепиой породы, стельностью 4-5 месяцев.Зтй лактации,продуктивностью 3,0-3,2 тыс.кг молока в год,хивой кассой 400-420кг.По принципу анадогов их распределили на 2 группы: опытную (465коров) и контрольную (465коров). В период опнта(октябрь 1986- октябрь 1987г) хивотные обеих групп v содерхЕЛИоь ночью в коровниках на принязи,а днем на выгульно-кср-мовых площадках.Подопытные коровы ехеоуточно получали кукурузао СО/о) - подсолнечниновый(30%) силое в количестве 25 кг-, .содержащий 1,65% масляной кислоты,в опытной группе и 0,02%- в контрольной.-5жесуточно каждая подопытная -корева получала с оияосом:масляной кислоты-412,0г,;укеусной-342,0г.; молочной-194,5г; а контрольная-соответственно 4,3;201,2 ;50б,0г.Соотношение киелот молочная уксусная в опытной группе составляло 1:1',-75, а в контроле -2,5:1.

За -4 месяце в подопытной группе абортировало 6 коров(1,3%), лабораторными исследованиями инфекционные заболевания были исключены. Оставшиеся 4-59 подопытных коров отелились и у 228 (49,6%) из г.ях н&бдюдади задержание последа, в контроле соответственно-у 124 коров,иди 26,7% (табл.3).

В обеих группах отмечали:полное(6>5% в опыте и 4,8% в контроле), неполно*(88,3 и'91,2$) и частичное (5,3 и~4,0%) задержание последа, то есть доминировало в обеих группах неполное задержание плодных оболочек.Для рожениц опытной группы была характерна прочная связь оболочек плода с материнской частью Плаценте вплоть до сращения. S рееультате у 55 подопытных коров и у 9 в контроле послед полностью удалить оперативным путем не удалось,

У 63 рохениц в опыте и у 20 в контроле отмечали слабые родовые

схватки и потуги и им оказывали ро/овспоможение.Впоследствии у них наблюдали атоцдо'и субинволюцию матга.

Таблица 3.

Анализ родовой и послеродовой патологии у коров опытной и контрольной групп

11

оказатели

1'

руппа коров

опытная

:контрольная

Поело в зимовку-1986-1987 г.,коров

Отелилось,коров

Абортировало, коров

,Задержание последа, коров/%

Сращение материнской и плодной частей плаценты, коров/% '

Форма задержания последа, ксров/%:

-полное

^-нецолное

-частичное

Заболело острым гнойно-катаральным эндометритом: -всего

в том числе: о родовой патологией, коров/% к отелу.

без родовой патологии, коров/%

465 459 6

465 465

228/49,6 124/26,7

55/24,1 9/7,3

15/6,5 6/4,8

201/88,3 113/91,2

12/5,г 5/4,0

205/44,0 103/22,1

135/2; ,4 62/13,3

70/15,3 41/8,8

Кроме того,116 роженицам опытной группы коров из 228,имевших задержание поеледа(50,87°),последний удаляли оперативней методом.

В контрольной группе таких животных было только 53,что в 2,1 раза меньше,чем в опытной группе.Кроле того,была установлена повышенная заболеваемость ¿актирующих коров гнойно-катаральным мас.титом( в опыте 67 и 26-"в контроле),который протекал как самостоятельное заболевание,но наиболее часто мастит, поражал-животных в послеродовой период в процессе переболеванкя их эндометритом.В опытней группе таких коров было в 2,8 раза больше,чек в контрольной(соответственно 53 и 19 коров).

Результаты опыта свидетельствуют,что скармливание стельным коровам силоса,содержащего 1,65% масляной кислоты,повышает гинекологическую заболеваемость коров в родовой и послеродовой периоды,выражающуюся е 6,1 разовом увеличеши случаев сращения материнсокй и плодной частей плаценты,;в 1,83 кратном увеличении числа живот-

щ

ных с эадерханием последа (228 коров- вопите и 124 в контроле), в 2-кратном увеличении числа коров,заболевающих острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом(205 в опыте против 103 в контроле)/ и 2,4 разовом увеличении случаев заболевания маетитом(67 в опыт«* и 28 в контроле), снитетек активности родового акта »-Повышенная заболеваемость коров в послеродовой период маститом, а такхе одновременно маститом и эндометритом свидетельствуют об этиологической идентичности этих заболеваний.

Биохимические исследования крови коров' опытной и контрольных -. групп показали,что количество заболевших хивотных и тяхееть забо- ■ левания острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом при корм лекии их вилосом с повышенным содерханием масляной кислоты,находятся в прямой корреляции с уровнем метаболизма и иммунологической реактивности организма хивотных. - • -- --- - - - -

Кровь для исследований брали у коров-из числа-опнтной-и-контрольной групп: ,не имевших родовой и послеродовой патологии,за-3-4-дня до начала опыта (п= 15) и через 3-4-дня -после родов (п* 10). В крови хивотных,получавших силос с содерханием 1,6Э&(опнт) и 0,02% (контроль) масляной кислоты,определяли количественное содерхание: общего белка,альбуминов,глобулинов и его фракций,кетоновых тёл.билн-рубша,каротина,глюкоэнту^агоцитарной.лиайцимной и бактерицидной активности сыворотки крови; учитывали количество эритроцитов,лейкоцитов и гемоглобина.

В обе-их группах за 4 месяца опыта снизился уровень общего белка 6 крови: на 7,&( с 73,4+2,4 до 68,1+3,1 г/л) в опытной и на 5,3% ( с 74,1+2,3 до 70,2+2,6 г/л) в контрольной за счет уменьшения содерхания альбуминов.Повышение концентрации глобулинов в крови коров обеих груш шло за счет повышеще уровня иммунных белхов гам-ма-глобулиновой фракции на фоне сюиения альфа - и бета-глобулино-вых фракций. Количество гамма-глобулинов у норов опытной группы увеличилось на 8,2 пункта( с 25,3+0,60% до 33,5+1,22%), а у контрольных хивотных- на 2,4 пункта(с25,6+0,5/^до 28,0+0,62%),что в 3,4 раза меньше,чем у подопытной группы.Подобные изменения в составе белков крови являются характерными для хроничесних токсикозов , гепатитов и кетозов (И. П. Ковдрахин, 1585). Аналогичная картина нарушения белкового «Йгабализма свойственна для стельных коров, предрасполохеншх к родовой и послеродовой патологии(А.Г.Нехда-нов,1992).

У коров обеих групп установлено изменение фосфорно-кальциевого обмена, в результате коэффициент Р:Са повышался с 0,60 до 0,78 у

у коров контрольной и снижался с 0,5? до 0,43 у коров опытной групп* Увеличение содержания »альция(Р< 0,02) в.крови коров опытной группы на 8,4%(с 2,64+0,12 до 2,88^0,1Я£лов&з№о с компенсацией дефицита эвого элемента за счет деминерализации костной ткани организма животных. '

В крови животных накапливались кетоновые тела-в опытной группе их количество увеличивалось в 38,4 рава(о 1?01+0,001 до 38,8+1,54 иг/%), а в контроле- в 5 раз меныне(с1,02+0,001 до7,75£0,63 мг/%), и превышало соответственно верхнею границу допустимого уровня в 6 и 1,3 раза. ...••.. •

Нарушалась функция печени и структура ее клеток¡что приводило к накоплению в крови общего и прямого билирубина.Достоверно но сравнению с контрольными животными( Р<<5,05-0,001} снижалось:количество эритроцитов и г.емоглобина;фагоцитарная,лизецимная ^бактерицидная активность сыворотки крови -основных факторов гуморального иммунитета. Под постоянным хроническим действием на организм-масляной кислоты-были установлены морфологические изменения-в .: ~ . .¡л :: почках зернистая дистрофия и некротизация клеточных элементов эпителия в извитых канальцах,главным образом первого порядка,пролиферация -хл&-ток ретикулозвдотелия. •

Следовательно.скармливание стельным коровам еилоеа,содержащего 1,65$ масляной кислоты,являлось основным фактором повышения тяжести родов и гинекологических осложнений в родовой и послеродовой периоды-задержания последа и заболеваемости острым гнойно-катаральным эндометритом в результате нарушения метаболивма основных питательных веществ,пигментов и каротина,нарушения буферности крови и накопления кетоновых тел,структурных и функциональных изменений-в органах ретикуло-эвдотелиальной системы,снижения факторов естественной резистентности организма животных.

С выходом на пастбище опытного(465 коров) и контрольного 465) стада коров и прекращением кормления их силосом с наличием маеля-ной кислоты, у переболевших эндометритом животных.начали восстанавливаться полноценные половые циклы и они стали плодотворно осеменяться (табл.4). Однако,хронический токсикоз масляной кислотой . оказал отрицательное действие на репродуктивную способность коров,-141(Ь0,7%) из них в опытной группе и 91>(19,8%) в контрольной остались бесплодными и были выбракованы. У остальных животных опытной группы межотельнай период в среднем составил(149,6+285)=434,6 дня, а индекс воспроизводительной способкости(434,6:365) составил 1,19 ( в контроле 362,6:665=0,99). Это означает,"что коровы 'з опытном стаде в течение 1 года не дали потомства.После отела коровы з епш-

ной группе оплодотворялись на 149.,6±9,3 день, что в 1,9 раза-превышало этот период! у животных в контроле (?< 0,01). '

Таблица 4.

Характеристика воспроизводительной функции коров опытного и контрольного стадас

Показатели

Группа коров

опытная : 459 контрольная 459

205/44,6 103/22,4

117,6+5,7 53,8+3,7 х

-316/69,3 368/80,1 х

95/29,8 165/44^8

' 223/70г2 -203/55,2

141/30,7 91/19,8

149,6+9¿3 77,6+4,2 х

3,45+0,47 1,87+0,38х

2879 ~ 3217-

Количество отелившихся коров

Заболело эндометритом

Период от отела до стадии возбуждения полового цикла (СВПЦ),дни

Оплодотворилось после осеменения, коров/ %

в том числе:после 1-го осеменения

после 2-3-го осеменения.

Остались бесплодными,коров/%

Период от отела до плодотворного осеменения,дни

Индекс оплодотворения

Удой за 305 дней лактации,кг

Примечание: числитель-количество коров,знаменатель- % Дпстонммп к кпнтрплп'тзц p.m. ■

оа счет-переболевания терялась молочная продуктивность у каждой коровы на 338 кг. молока за лактацию , -в 1,8 рава по сравнению с контрольными животными увеличивался расход спермодоз на их плодо- -гворное осеменение*

Проведенные исследования дают основание утверждать,что скармли-зание стельным коровам силоса с наличием масляной кислоты снижает зоспроизводательную бпоообноеть у коров за счет увеличения родовой 1 послеродовой патолокии у новотельных животных.Следовательно,разработка способа силосования кормов,не допускающего накопления в них' гасляной "кислоты,повывающего их биологическую и питательную ценноетJ 5вляетоя важной научно-хозяйственной проблемой, решение котррой 1овы««^т рента<*ельность молочно-мясного скотоводства. '

3.3»Раэработка и внедрение косвенного метода профилактики родовой и послеродовой патологии у коров путем повышения биологической и питательной ценности силоса

Bi3il, Повышение качества силоса на основе применения молочнокислой закваски ашлонитробактерии

В целях профилактики родовой и послеродовой патологии-задержания последа к гнойно-катарального эрометрита, повышения плодовитости дойного стада коров ва счет повышения биологической и-питательной ценности силосованных кормов нами разработан биотехнологический метод ингибиции маслянокислого брожения в консервируемых растительных Kojfwax.путем внесения в зеленую массу растений культур молочнокислых бактерий в составе закваски амилонитробактерин,-

Мезофильные и термофильные лактобактерии,входящие -в состав закваски для силосования кормов,выделены нами в природных условиях с поверхности силосуемых растений и из молочнокислых продуктов.Они обладают амилолитичесной и кислотообразующей способностью,активностью роста в неблагоприятных для других молочнокислых бактерий условиях,антагонистической активностью к эпифитной микрофлоре растений: гнилостным микроорганизмам,бактериям группы кишечной палочки, плесеням а также споровым анаеробам - возбудителям маслянокислого брожения.Было- изолировано 123 штаима лактобактерий,ив которнх отобрано, селекционировано и зарегиотрировано в центральном Цуаее промышленных микроорганизмов института ВНИИ-генетика-и депонированы в нем в качестве перспективных для производства силосных закваоок-под номенклатурой: Lie. ,П-Ю,Б-2456;//<-- ¿etfyei/eus -2S8.B-2465;

^г.Легмер^&х-Щ}^ ,В-2454.Названные молочнокислые бактерии обладают симбиотичесними свойствами и их при -производстве бактериальное концентрата" Стамилобах",-используемого для приготовления вакваски амилонитробактерин,одновременно нультивирувт глубинным методом в гидролизованной протеолитическики ферментами молочной сыворотке при рН 6,6~6,8.0птимальная температура роста находится в пределах 30-55°С,-Закваска аыидоиитробахтерии приготавливаете« на предприятиях молочной промышленности или непосредственно" в местах заготовки силоса.В качестве питательной среды используется пастеризованная молочная сыворотка, в тем чиоде соленая,не находящая применения в промышленности и сельском хозяйстве.Для производства закваски

1риме>.шются: сухой бактериальный тгонцектра г молочнокислых бактерий 'Стакилобак", а для их реактивации и регвдратации - сухая питательная среда под названием "Биоактиватор".

-закваска амилонитробактерин мояет применяться для консервирования ррудносилосуемых и грубосгебельчатнх растений и предназначена для :окрашения в кормах потерь основных питательных веществ.сохранения : I них биологичской и питательной ценности за счет направленных фер-(ентативных процессов в силосуемой массе на основе интенсификации юлочнокиояого брожения и амилояитической активности.

С целью установления специфической антагонистической активности акваски на эпифитнуа микрофлору и влияния на сохраняемость питатель-нх веществ в зеленой массе растений был поставлен опыт.В две хеле-обетонные емкости обьемом 1 м3-залохили измельченные растения ку-уруэы в стадии молочно-восковой спелости ив каждую внесли из расче-а на 1 кг массы по 5000 спор маслянокислых бактерий из рода клост-вдиум: бутирикум(7 штаммов) и тиробутирикун(2 штамма),В емкость ®1 несли дополнительно эаквасцу амилонитробактерин,из расчета 1 л на тонну массы,.разведенную 1:10 молочной сывороткой, а контрольную 2-гакое хе количество кипяченой воды. В опытной емкости молочно-ислое брохение началось раньше и протекало более активно:величина-

эз 6 суток в опытной массе не обнаруживалось маслянокислых бактерий, в емкости Ш оки-активно развивались.Через 2 мзсяца была произво-эна биохимическая,микробиологическая*^ сенсорная оценка качества-•Ш1ного и контрольного силоеа {табл.5),

Данные таблицы 5 свидетельствуют,что в силосе,приготовленном с 1кваокой,соотношение Л1К было физиологически оптимальным, для хвач-IX хивотных, в нем лучше,чем в контроле сохранены основные питатель-(е вещества и каротин,не содержалось масляной кислоты, аз общем ¡ставе микроорганизмов'доминировали молочнокислые бактерии, доатрольный оилос по еанитарно-биолопическим требованиям был'приз-1Н непригодным к скармливанию.Он имел гщглостно-ацетоновый запах, нзно-ееленый цвет,махущуюся консистенцию. В 1 грамме содержалось 9 спор маслянокислых бактерий и 380 тыс. клатон гнилостной мик-флоры, а каротина сохранилось в 2,7 раза меньше,чем в опытном." Закваска амилонитробактерин нашла широкое применение вЬхных гионах России,-только в Ставропольской крае и Ростовской области 1982году с ее применением было заготовлено 1,32 мян.т. доброка-ствениого склоо«^

22»; -' Таблица 5.

Сохранность питательных веществ и каротина

в 2-х месячной силос<э(в% к исходной маасе) и его бактериальный

состав ( &+/и)

Показатели : Силос

; опытный ; контрольный

Сухое вещество 83,4+2,7 75,8+2,5

Протеин 78.Л+0,-3 66,8+2,9

Г и р 65 ¿0+2 ^1 47,0+7,6

Клетчатка 93,-8+3^ 93,2+3}9

.Б Э В 77,8+3,4 70;3+5;8

Сахар . 17,7+0,5 7,8+0/4

Каротин , 67,3+2,8 24,7+4,9

Кормовых еда!ниц 0|23+0,02 0419-Ю ,02

рН 4,11 5,82"

Количество бактерий в 1гх108

-маслянокислые 0 0,109

•гнилостные 0,005 380,0

-молочнокислые 8 А 0,007

Органические кислоты,% всего 2,1 3,4

Соотношение кислот,%

-молочная 69 10

-уксусная .31 56

-масляная 0 .35

Достоверно к контролю при Р< 0,05-0,01 -

виохимический аналие производственных партий силоса свидетельст-ву£т,что биологическая и питательная ценность его,по сравнению с приготошхенным традиционным способом, была выше по калорийности на 1?,4%^(0,23к.ед* в опытных и 0,19к.ед. в традиционных партиях корма); по содержанию переварикого протеина- на 13,9%(соответственно 15,2 против 13,1 р/кг);углеводов- на 41,2%(7,34против 4,32 г/кг) и каротина -на 38,8%(18,3пр0тив 11,2 мг/кг).

Масляная кислота отсутствовала,в общем обьеме органических кислот 67,2% занимала молочная'кислота; в 80 рае сокращалось количество гнилостной микрофлоры.

3.3.2. Закваска амилонитробактеркн как косвенное средство профилактики острого послеродового гнойно-катаральноео эндометрита у корову

По принципу аналогов в опнт и контроль было отобрано по 140 нетелей красной степной -юроды,осемененных в мае-июне 1987г.Регулярно, 2 раза в неделю, им предоставляли активный моцион как до, так и после отела.Для опытной группы нетелей заготовили и скармливали силос с закваской амилонитробактерин, а коитрольноГг-традидаонннм способом. Силосуемая масса была идентичной и состояла из растений кукурузн-70% и подсолнечника - 30% дивоткых в обеих группах кормили по детализированным нормам В¿41, в который включали по 25 кг. силоса.Опытная и контрольная партии силоса перед началом опыта соответственно содержали: кормовых единиц- 0,23 и 0,19;переваримого протеина-15,2 и13,1 г/кг;каротина-18,3 и 11,2 мг/кг; масляной кислоты О н 0,^¡процентное соотношение молочная:уксусная: масляная кислоты:67,2:29,3:0 и 53,7:41,7:0,2;количество, бактерий в 1г.- силоса:молочнокислых-170,2 и- -25,3 тысяч;гнилостныг-0,07 и 5,6 тысяч;маслянокислых- 0 и 0,15 тысяч ( Р< 0,05).Перед началом эксперимента(октябрь) у 10 подопытных и 10 контрольных нетелей проведены биохимические и иммунологические исследования крови. По содержанию каротина (1,3540,20 мг%);глюкозы (2,87+0,15 шояь/л);кальция(3,0+С,25-муоль/л);неоргаяического фосфо-ра(1,6+0,10 ммоль/л);общего белка(78.3+1,9? г/л);кетоновых тел -(1,07+0,001 мг%)¡резервной щелочности крови(65,05+1,68 об./0СО2);фагоцитарной (25,5+1,32 %),лизоцимной(38,7+1,42 %),бактерицидной, активности крови(¿4,2+2,01 %) животные обеих групп не имели достоверных различий (Р< 0,01).Повторные исследования по этим показателям у'этих же животных провели через 10 дней после их отела и дополнительно учитывали состояние здоровья.жизнеспособность к прирост живой маесн у новорожденных телят, а также молочную продуктивность у коров обеих групп.,

В результате 4- месячного опыта не установлено в крови коров обеих групп достоверных различий в содержании обшего белка(соответ-ственно 77,6+1,65 ч 77.2+1,45 г/л), глюкозы(2,40+0,12 и2,01+0,11 ммоль/л),кальция(2,24+0,11 и 2,20+0,11 ымоль/л),фосфора(1,35+0,09 и 1,80+0,10 ммоль/л),хотя и имелас:» тенденция к их количественному уменьшение,кроме фо<^ора. В тоже время отмечено увеличение содержания кетоновых тел: у торов опытной группы- в пределах физиологичес-

Ной. нормн(4,32+0,33) , а в контроле предельно допустимое-содержание (6,0 мг%) было превышено в 1,5 раза(9,0+0,45 мг^).Снижалась резервная щелочность крови до 53,4+1,22 у подопытных и до 38,3+2, ^^контрольных животных .содержание каротина (доО.б?^, 03 и 0,24+0,001 мг/%), ; фагоцитарная (соответственно на 5,1 и 8,1 пунктов),лиэоцимная(на 6,05 и 6,о9 пунктов)-и оактёрицидная (на. 5,4,и 14,0 пунктов) активность заворотди крови.Ути изменения в опытной группе коров были менее значительными по сравнению с животными контрольной группы,особенно по содержанию кетоновых 'тея,каротина,буферности крови и факторам иммунологической реактивности оргвнизма ( Р ^ 0,и5).' '

Эффективный метаболизм белка,минеральных веществ и каротина,стабильное кислотно-щелочное равновесие,высокий уровень естественной резистентности организма подопытных нетелей по сравнению е контрольными способствовали рождению у них брлее жизнеспособного молодняка,заболеваемость и падеж котвр.огоот диарейных болеэней( в опыте заболело 1'7 ипало 5 телят, а-в контроле соответственно 21 и 9 телят),был в 1,2 и 1,8 раза меньше; чем в контроле.

Повышенная жизнеспособность телят в.неокатальный период подтверждена биохимическими исследованиями.В крови 3 суточных телят,по сравнению с телятами,родившимися от коров контрольной группы содержалось на 4,5 г/л больше общего количества белков",среди которых гаша-гло-булиновая фракция составляла 40,3_+1,85%( в контроле-31,2+1,81«),что свидетельствует о их более напряженном кояоетральном иммунитете (Р<Г 0,001) (табл.6),„что снижало их заболеваемость и падеж.

Таблица 6

Протеинограмма сыворотки крови 3-х суточных телят

■ ( М±т)

._Телята от гр.упп коров___

Белок и его фракции :ооттная(№=10) :контрольная(п=10)

Общий белрх,г/л 74,7+3,2 70,1+4,1 . Фракции белка,г/л:

-альбумины 30,6+1,5 31,4+1,3

-глобулины '44,3+1,8 38,-7+1,75

в том числе гамма-глобулинк,% 40,3+1,85х. 31,2+1,61

белковый индекс (А:Г) 0,69* 0,80

* _ .

Достоверно к контррлю при: х- Р< 0,001

При растеле з опытной группе коров задержаний последа по сравнению с контрольной бнло с 1,9 раза (^ВННКмЗ), а заболеваний острым послеродовым гьойно-катаральным эндометритом в 1,75рава (ММШЯиМЯИМЦР) меньше.После отела в опытной группе остались бесплодными 9(6,5%)коров, а в контрольной-17(12,Коровы, получавшие силос.приготовленный с. закваской амиленитробактерии,на 1£.дней раньше животных контрольной группа плодотворно(43,8% после первого осеменения, в контроле- 37%)осбкенялись;продолхительность бесплодия у них пооле отача составила 33,5+7,1 дня, а в контроле-45,5+8,2 дня, а ивдекс осеменения был на 5,8% меньше(1,6+0,31 про-тв 1,9+0,37).Каждая корова опытной группы дала-за лактацию на 250 кг молока больше,чем ее сверстница э контрольной группе*

Следовательно,кормление стельных коров силоссм,приготовленные с применением молочнокислой эанваски аиилонитробактерии,повышает у них воспроизводительную способндсть за счет снижения количества задерха-кий последа и заболеваемости острым гнойно-катаральным эндометритом в послеродовой период ; енихает заболеваемость и падеж телят от диа-рейных болезней в результате повышения эффективности обменных процессов и уровня естественной резистентности организма стельных коров."

3.3.3. Влияние скармливания коровам силоса с закваской на качество эмбрионов

Уровень полиовуляции и качество извлекаемых для трансплантации зародышей, их, приживляемоеть и жизнеспособность во мкогом сопряжены с полноценностью кормления коров-доноров?

В качестве доноров были л/слользованы 40,благополучно отелившихся коров, опытной и контрольной групп.предыдущего опыта, по 20 голов от каадой.Полиовуляцию индуцировали сывороточным генадотропи-ном Чешского производства^ Реципиентами служили служили 24 телки 18 Месячного возраста красной степной породы,синхронные по половому циклу с донорами.

Их кормила по нормам ВИ1 , в рацион входил доброкачественный силос,) приготовленный с закваской (опыт),и без нее (контроль).

Результаты опыта приведены в таблице 7.

Данные таблицы свидетельствуют,что эмбриопродуктивность коров-доноров, получавшие силос с применением закваски амилонитробактерии, была биологически более полноценной,чем у контрольных животных.

<■ " Таблица Ту

Уровень суперовуляции и качееув» эмбрионов ^

у подопытных и контрольных доноров (М+т

; Группа коров-доноров......

а з а т в д и _: опытная_: контрольная

Обработано хоров-доноров 20 .20

Реагиревало суперовудяцней,гол/% 15/75- 12/60

Число овуляций на 1 донора 7,7+0,72 х 7,5+0,37

Извлечено яйцеклеток й эмбрионов. *

на 1 реагирующего донора, всего 4;4+0,45 3,6+0,39

в том числе: качественных 3,-2+0^2 х 1,8+0,-21

дсгенерированных 1,0+0,01 х 1,2+0,30

неоплодотвореуных

яйцеклеток 0,2+0,01 0,6+0,02

Проведено эмбриопересадок 12 • 12

Родилось телят-трансплантатов 5 - - 8 -

Прихивляемость эмбрионов,У»__41,6 х_25,0

Достоверно к контролю Х- Р< 0,05

От доноров в опытной группе получено в 1г7 раэа больше качественных эмбрионов и их хизнеспособность были в 1-,6-раза выше,чем в контроле,-Следовательно.повышая у-коров-доноров уровень естественной-резистентности за счет более высокой -биологической и питательной ценности силоса,приготовленного с закваской, у них повышается эмбриопродуктив-ность.улучшается качество и жизнеспособность эмбрионов и ,как след- -ствиеу-устойчивость новорожденных телят к диарейннм заболеваниям в неокатальный период.У них в 1,8 раза сокращается падех и на 4,7% повышается энергия роста по сравнению со сверстниками,родившимися от коров контрольной группы.У коров сокращаются случаи проявления родо-вой~( в 1,9 раза) и послеродовой( в 1,75раза) патологии,на 6 пунктов повышается оплодотворяемость(93,4% - в опыте и 87,4% в контроле) и на 12 дней сокращается продолжительность бесплодия по сравнению с контрольными животными.

Результаты исследований подтверждают целесообразность производства и применения а&кваски амилонитробактерин для консервирования Кормов,используемых для кормления маточного стада крупного рогатого

скота , в том числе коров-доноров эмбрионов.

3.4. Разработка и внедрение в производство нового эффективного сродства профилактики и лечения острого послеродового и посттрансплантационного гнойно-катарального эндометрита у короэ

3.-4.1.Рецептура' нового бактерицидного препарата, лактобрил ■ и его апробация,

С целью повышения результативности терапии и профилактики острого послеродового и побттрансплантационного гнойно-катарального эндометрита у коров,нами-была разработана рецептура и освоено промышленное производство нового лекарственного средства- лактобрил (бриллиантовый зеленый на молочной основе). ' - - -

Лактобрил представляет лиофильно высушенную композицию лекарственных веществ химичеокого и биологического синтеза.Препарат безвреден -для человека, хивотных. и окружающей среды.он оказывает бактерицидное дейсйие на грамполярную антибиотикоустойчивую гнилостную микрофлору. По внешнему виду- это однородная аморфно-кристаллическая гигросокпическая масса,темно-зеленого цвета,без запаха , с массовой долей влаги не более 4,0%,расфасованная в стеклянные флаконы. Каждый флакон содержит одну дозу препарата(0,4г сухого вещества), хорошо растворяющегося в воде в виде стойкой взвеси, а также в спирте,растительных и минеральных маслах. Лактобрил содержит следующие компоненты, мас.%:

Бриллиантовый зеленый обладает сильным антимикробным действием на . грамполярную микрофлору.В водном растворе 1:10 млн. он бактерициден для золотистого стафилококка и гноеродного стрептококка. Калия йодвд при внутриматочном применении оказывает противовспалительное и рассасывающее действие.Фуразолидон(фурацилин)бактерициден для антибиотикоустойчивой микрофлоры,не теряет совей активности в гнойном экссудате. Ш31 вырабатывается из коровьего обезжиренного молока и яблочного пектина по ТУ 49*1171-85,стабилизирует период хранения препарата, в нем растворяются все его компоненты, а при лиофильном высушивании формирует необходимую структуру препарата, содержит биологически активные вещества молока. Хлоро-

фуразолидон(фурацилин) бриллиантовый зеленый калия йодид хлороформ

концентрат структурирующий пищевой (Ш1)

-остальное (до 100 мл),

1,0 - 1,5

0*3 - 0,5

2,5 - 3,0.

1,5 - 2,0

28а

форм применяется для растворения бриллиантового зеленого и в процессе сублимации полностью испаряется,- Срок годности препарата-1 год 5 месяцев.Все применяемые компоненты химически совместимы и при совместном применении усиливают действие друг друга. Суммированный эффект бактерицидного действия лактобрила превышает сумму аффектов компонентов в сдельности(синергическое действие). Это дадо возможность снизить дозы, входящих в состав лактобрияа веществ,уменьшив тем самым его токсичность,обеспечить безвредность и специфичность, не снижая бактерицидности. Препарат не вызывает адаптации к себе патогенной микрофлоры. Острую и хроническую токсичность.лактобрила определяли на белых мышах путем в ну трибрюшкного и внутреннего введения препарата в дозах от 500 до5000иг/кг,Установлено,что при внут-рибрщинном введении ЛД0 составляла 800мг/кг,ЛДс£р1950мр/кг и ЛДдоо равнялась 3500 мг/кг, а при внутреннем применении JД0 составляла 950 мг/кг, ЛДэд -2500" иг/,кг и Д2Ц00 -4500 мг/кг.

Лактобрил в рекомендуемых лечебных дозах не оказывает отрицательного влияния на морфо-биологические показатели крови лабораторных животных и являетея препаратом с малой острой тояоичностын-Беввред-ность препарата подтверждена лабораторией клинической биохимии и терапии ВНИВИПФиТ, доктором вет.наук(м.й.Немченко,1992]. Лактобрил повышает эффективность обмена белков.улучшает функционирование органов РЭС и кровообращения,повышает резистентность новорожденных телят и в суточной дозе 1,2-1,4 г оказывает эффективное терапевтическое действие при диарейных незаразных болезнях молодняка,-

Лактобрил в разведении 10"^ на среде Дюльбекко оказывает санирующее действие на 7-дневные эмбрионы коров при двукратной ^минутной зкспозициии и не влияет отрицательно на их приживляемость и эмбриональное развитие трансплантатов^ них не отмечено уродств и отклонений от норм развития в постнатальннй период.Препарат не обладает раздражающим действием при нанесении его в водном и масляном растворе на кожу кролика и человека. Не отмечено каких-либо клинико.-био-логических_отклонений от нормы при интрацервикальном введении лактобрила в матку здоровых коров и телок. Изучение бактерицидных свойств

лактобрила провели с наиболее часто встречающейся при остром посяе-

- , яттогеннол-

родовом гнойно-катаральном эндометрите факультативно патогеннбйуявд-

рофлорой.Испытания показали,что лактобрил-в разведении Ю"^ .

микробоциден для антибиотикоустойчивого золотистого энтеротоксиген-

ного штамма стафилококка; вульгарного протея,кишечной палочки и пио-

генного стрептококка; а,в разведении 5x10"?..Ю~3убивает вегетатив-

нне формы синегнойной палочки и грибы из рода кандида.Последнее очень значимо,так кан многие авторы обращали внимание на повышенную устойчивость синегнойной палочки и вульгарного протея в половых органах крупного рогатого скота обоих полов (Эллиот с согр,-1968 Осташко,1972 ¡Т.Е.Григорьева, 1985 ;Е.Т.Тришкина,и

Л.Х.Галушко,1985 ;Б.Л.Гуртовой и др.,1988 к другие). Бактерицид-ность лактобрила в 5-50 раз превышает,входящий в его состав,фура-золидон.(табл.8).

Таблица 8;

Минимальная бактерицидная концентрация

лактобрила и фуразолидона (

Номенклатура микрофлоры hp : лактобрил e п a p a т :ф.уразолвдон

оТ Otfteus ,сер.493 5 X 3 x Ю-2

ptci'etxs ,cep.'a01 25 X кгь 3 x 10"3

,cep. 125 15 X ю-4 3 x о 10 ^

,cep. 12-1 7 X 10"5 3 x 10-3

PS, рфрр^л а/f» 5 X 10"d 2 x 10"^

Ô*/tc6c/aé aé&eos. 10-з 3 x lû""2

rie установлено адаптации к лактобрилу гнилостной микрофлоры,выделенной из половых органов'коров и хенщда,больных гнойно-катаральным эндометритом, из ран и полостей человека(А.П.Пошеченков с сотр.,1993). "

Результаты изучения терапевтической эффективности лактобрила в сравнительном аспекте с фуразолидонсзыми гинекологичскими палочками при лечении острого гнойно-катарального эндометрита, в составе 3-х представленных нами схем,изложены в таблице 9.

Результаты исследований свидетельствуют, что терапия острого гнойно-катарального эндометрита у норов лактобрилом по испытанным схемам 1-3 сокращает,по сравнению с лечением фуразолидоновыми палочками,продолжительность бесплодия на 12,0-22,4 дня и он составил у подопытных животных соответственно номерам групп 48,2+4,3... 42,6+7,'8... 37,8+6,2 дня, а в контроле - 60,2+7,3 дня.

Терапия лактобрилом по схемам 1-3 способствовала усиленному выделению из матки гнойного эквсудата на 3-4 день,который на 5-6 день из красно-серого становился прозрачным.На 6-7 день лечения количество выделений уменьшалось и к 8-10 дню у 80-90% животных они

за.

прекращались,уоиливалась моторика шатки.

Сравнительная эффективность лечения коров при остром гнойно-катаральном эндометрите

Таблица 9

(М*»>)

Показатели -

Группа коров и схема лечения

: лактобркл лахтобшл ; +тривита^,

>щн

: п=40

п=40

3 4

лактобрил фураэолвдон +тривитамин

+АЩ-2 +но- (контроль) векаин

п=40 п=40

Выздоровело, гол| 30/75

£|урс лечения,

суток 11,2+0,81

Период от отела до стадии возбуждения полового цикла,суток 52,3+2,4

Оплодотворилось всего, гол/% 29/72,5

в т.ч.после:

1-го осшене- ■ , ния,гол/% 11/38,0

2-3-го осе- . менения,гол/% 18/62,0

Период от отела до плодотворного осеменения, суток 78,2+4,3

Число дней

б есплодия 48,2+4,3

Индекс оплодотворения 1,85+0,21

33/82,5 37/92,5 28/70

10,4+0,63 9,7+0} 52 12,840,78

58,4+3,3 53,2+2,7 69.3+3,3

30/75.0 36/90,0 26/65,0

14/46,6 18/50,0 9/34,6

16/53,4 ч 18/50,0 17/65,4 _

72,6+7,8 67,8+6,2 90,2+7,3

42,6+7,8 37,8+6,2 60,2+7,3

1,80+0,19 1,70+0,13 2,3+0,32'

Достоверно тс контроле при Р<0,05~0,01 При лечении по схемам 1-3 выадоровело 75-92,5% животных в срав-ненш с 70% эффективностью в группе 4 (контроль).В последующем стали стельнйми в порядке номеров групп: 72,5...75,0...90%,переболевших подопытных животных, и 65% а-контроле.

В опытных группах коров раньше,чем в контрольной восстанавливались полноценные половые циклы о они плодотворно осеменялись,- -

После 1-го осеменения оплодотворилось 45,2%, а в, контроле 34,6%. В результате в 1,2-1,4 раза сокращался расход спермодоз на плодотворное осеменение коров, леченных по схемам 1-3. Наиболее эффективным оказалось лечение острого послеродового гнойно-катарального эндометрита у коров по предложенной схеме 3.Повышению терапевтической эффективности лактобрила по этой схеме способствовало комплексное применение препарата совместно со средствами патогенетической терапии: тривитамином,.синэстролом,окситоцином,А0Д-2, новокаином, которые при синергическои лекарственном вваииод.ействии обеспечивали выздоровление больных'животных.

глинические наблюдения за выздоравливающими животными подтверждались- гематологическими,гистохимическими,биохимическими ,иммуно-логическики и гистологическими исследованиями крови,маточной слизи, биопсийоного материала матки у коров"до лечения и в стадии выздоровления (табл.10).

Результаты анализов свидетельствуют,что лактобрил в сочетании с симптоматическими средствами повышает эффективность белкового обмена: снижает в крови количество альбуминов, и альбумлно-глобу-линовоё соотношение с 0,81-до лечения заболевания - до 0,75-0,72 ' (против 0,77 в контроле),.Это происходит в результате возрастания в крови уровня глобулинов.Фракционный состав иммунных белков под воздействием терапевтических средств во всех группах коров изменяется :на фоне снижения альфа-глобулинов идет достоверное(Р^0,01~0,05 нарастание иммунологической активности организма больных животных за счет увеличения в крови иммунных франций баяна- бета-и з;амма-глобулинов. Суша последних в 1-3 группах в процессе выздоровления животных увеличивается по сравнению с долечебннм периодом соответственно на 5...5,8...7,4 пунктов ( в контроле 4,3 пункта),» том числе'гамма-глобулинов ..'«на 4...5,2...6,6( в контроле -на 2,7) пунктов,что соответственно на 32,5...48,1 и 59,1% превышает повышение количества этой основной иммунной фракции белков в контрольной группе коров,прошедших терапию фуразолидбнсм- одним из составных компонентов лактобрила, ' . .

Из результатов исследований следует,что терапия острого послеродового гнойно-катарального эндометрита лактобрилом повышает' у коров обиенные1процессы и активизирует у них факторы местной гуморальной защиты,направленных на саногенез и угасание патологического послеродового процесса в матке под влиянием испытуемого лекарственного средства.

Таблица 10

шььление ;ов резистентности коров в процессе лечения острого эвдометрита.

П о к а з а - : ■ : В стадли выздоровления.группы коров

: лоченкя : 1 : 2 :' 3 : 4

т е я и :• п=20 : п=20 : п-20 : п=20 -: п=20

'Сыворотка крови;

Общий белок, , г/л 72,3^-2,07 74,8+.?,С? 7Ь,.с+2,34 75,4+2,46 74,0+2,05

Альбумины,% 44,9+2,44 43,1+2,58 42,8+2,4-1 42,0+1,37 43,7+2,42

Глобулины,% 55,1+2,95 ' 56,9+3,75 57,2+2,54 58,0+3,01 56,3+2,47

Соотношение ■

А;Г 0,С1 0,75 0,74 0,72 0,77

Фракции глобулинов, % < - -

альфа - 16,5+1,42 13,3+0,21 12,8+0,56 12,0+0,83 13,4+0^31

бета - 12,¿0,75 ' ' 13, 4Ю, 43 13,-0^0,38 13,2+0127 14,0+0,34

гамма - 26,2+1,09 30,2+1,36 31,4+1,77 32,8+1,39 23,9+0,27

Бактерицидная активность,% 62,3+1,69 68,4+1,82 70,7+1,51 73,8+1,31 66,3+1,72

Л^оцимная активность,% 26,0+0,71 30,2+0,34 36,7+0,84 41,2+0,81 29,2+0,46

Фагоцитарная а.нтивность,% 22,3+0,43 29,4+0,42 34,1+0,58 38,2+0,56 '28,4+0,44

Лимфоциты,% 42,0+0,51 45,3+0,23 53,4+0,34 57,0+0,33 42,1+0,58

Эндометрий:

РйК,ад/мм2. 53,4+1,34 73,2+1,16 79,8+0,74 96,8+0,53 59,3+0,86

ДНК,ед/ш2 79,3+1,88 98,4+1,54 106,0+2,52 115,6+1,75.83,2+2,35

Достоверно к долзчебному-периоду и контроле при Р^ 0,01-0,05

Дополнительным подтвержденная этого является достоверное изменение в сторону физиологической нормы состава форменных элементов крови: увеличение количества эритроцитов,!на 1,24-1,82 млн/мкл) и незернистых клеток белей крови- лимфоцитов (на 3 ф-44- ,-9 %)-,моно-цитов(-в 1,5-2,5 раза)¡снижение -количества палочко - и •егментс-ядерных нейтрофилов,- В опытных 1-3 группах коров,особенно в 3-й, активизировались гуморальные защитные свойства бедок крови-- фаго-цитирозать.лизировать и ингкбировать развитие биологичоких. анти-

гено/макроорганиэма - патогенную и условно патогенную микрофлору; отмечалось восстановление кислотно-мелочного баланса»

Для подтверждения терапевтической активности испытуемых схем лечения, острого послеродового гнойно-катарального эндометрита было изучено их влияние на регенеративные процесса и местную именную защиту матки новотельных коров.Для этого у них до лечения и на стадии выздоровления была изучена морфологичекая картина клеток эндометрия Л больных животных отмечали .'инфильтрацию подслизистого слоя клеточными элементами,десквамацию эпителиальных клеток,уменьшение количества маточных желез и их деструктивные изменения,наличие тром- , бов в сосудах.В стадии' выздоровления патологические и морфологические изменения нормализовались наиболее быстро у животных 3-й группы. Количество маточных желез у коров 1-й и 4-й групп возрастало в 1,5-2,0 раза , а у 2-3 группы- в 2,5-3 раза; в рыхлой соединительной ткани появлялись участки пролиферации фиоробластов, а также плазматические клетки в субэпителиальном слое эндометрия,что свидетельст-. вовало об активизации регенеративных процессов и восстановлении морфофункционального состояния матки.

Гистохимические исследования биопсийного материала ив эндометрия показали,что в процессе выздоровления в эпителиальных клетках маточных желез идет накопление нуклеиновых кислот.Их количество и интенсивность накопления коррелируют с активностью регенеративных процессов в воспаленном органе. У коров Зй группы по-сравнению с долечеб-. ннм периодом увеличение содержания РНК шло в 7,3 раза , а ДНК - в 9,3 раза быстрее,чем. у животных лечившихся фуразолидоновыми палочками.

Увеличение, количества нуклеиновых кислот, в эндометрии аыздорав-"-ливающих коров,свидетельствует'об активности митоза эпителия маточных желез и нарастании их защитных свойств,так как регенерируемые •ткани содержат ДНК и РНК в большем количестве,чем отмирающие старые клетки(В.И.Г1узик, 1961;Бабаева А.Г., 1972). Кроме тог о, количественное ' увеличение в процессе выздоровления плазматических клеток в субэпителиальном слое эндометрия в 13-21 раз( с14,7+1,72 до 259,7+4,25) в опытных и в 9,5 раз ( с 14,7+1,72 до 131,2+1,25) в контрольной группах коров свидетельствуют об активном нарастании защитных гуморальных реакций в матке,гак как плазматические клетки,по данным А.Е.Вер-шигора(1990),являются местным источником иммунных белков в маточном секрете и способствуют восстановлению ее функции. Увеличение содержания иммуноглобулинов в маточном секрете,как фактора местной имм.у-

нокомпетонции органа, слухиг критерием клинического выздоровления животного (ii.fi.Антонова с сотр.,1976). С учетом того,что из пяти известных наиболее показательных при эндометрите у коров являются иммуноглобулины класса 8и М ( &. К. Аккаааров, 1968) ,свои ис с л адова» ния мы ограничили Названными классами иммуннн* белков. Иммуноглобулины класса б и М слизистых оболочек животных относятся к нормальным (природным) или"дежурным" антителам,обладают высоким спектром специфичной™ и осуществляют первое взаимодействие с антигенной микрофлорой слизистых оболочек животных (Д.Ф.0сидзе,А.П.Простяков, 1982 ; В.Й.Беляев с сотр.,1990,1992).Изучение иммунных белков в маточном секрете у здоровых коров в сравнении с их содержанием в начале острого гнойно-катарального эндометрита и в 'стадии выздоровления показадо ( по'5 коров в каждой группе),что лактобрил не угнетает иммуногенез,.а способствует активному количественному увеличению и 'проявлению его факторов.

До начала лечения заболевания уровень 1$ М был на " 0,22 -0,36 мг/мл, а Ц й в 1,9 -2,0 раза меньше,чем у животных ,не имевших пос-. леродовой патологии . Но с развитием восстановительного процесса, концентрация обоих классов иммуноглобулина в маточном секрете нарастала и в стадии выздоровления в 1-3 группах коров превышала исходный уровень'по содержанию 1у8 в 5 -6,2 раза, а по М - 2,0-2,1 раза,при количественном увеличении в контроле соответственно в 3,5 и 3,1 раза (табл.11). Наибольшее количественное увеличение 1уС отмечено в 3-й группе коров, а М - в 4-й контрольной .Это свидетельствует о преимущественной эффективности лечения эндометрита лактобрилом, так как ,по данным Б.К.Акназарова (1988),обнару хивается в маточной слизи только при тяжелом гнойно-катаральном воспалении матки.

В процессе выздоровления коров в маточном секрете увеличивается содержание иммуноглобулинов класса б и-М, что говорит о возраста- • нии в процессе терапии местной гуморальной реактивности матки,направленной на ликвидацию контаминирующей ее микрофлоры. ,

Наибольшее увеличение иммунных белков происходит за счет накопления иммуноглобулинов класса б , которые находятся в высокой оте-пени корреляции с количеством плазматических клеток в субэпителиальном слое эндометрия коров 2-3 групп, у которых восстановительные процессы шли наиболее активно и подтверждались всеми показателями . лабораторных исследований.

Таблице 11

Динамика накопления иммунных белков в маточном секрете коров в процессе выздоровления,- ч

. ..... С И+т)

Схемы лечения и : Время : Содержание иммуноглобулинов .мг/мл групш животных :исследо- : ' - -__ ,-вания : 1 _■ ЦК_

1. Лактобрил А 2,00+0,10 1| 42+0,18

3,75^0,27 1,45+0,20

1,53+0,20 3,45+0,35 1,40+0,23

1,36+0,15 2,80+0,42 1,2 +0,31

1,40+0,18 4,35+0,15 ' 2,75+0,12

1,75+0,12 0,95^0,10

Достоверно к долечебному периоду и контролю . при Р«. 0,01.

Примечание: А -до лечения ; Б- в стадии выздоровления ; С- через 10 дней после выздоровления

Лактобрил не вызывает в организме больных коров иммунодепрессив-ных явлений,Его терапевтическое действие при'остром гнойно-катаральном эндометрите основано на направленном бактерицидном воздействии на патогенных и факультативно патогенных возбудителей заболевания- и нормализацию репродуктивной способности животных за счетг повышения естественной резистентности их организма и мобилизации факторов мест ной гуморальной защиты матки.

Результаты проведенных исследований подтверждают и обосновывают целесообразность применения лактобрила при остром послеродовом гнойно-катаральном эндометрите у коров. •

Б 10,60+0,53

С 3,21+0,20

2, . Лактобрил + А 2,38+0,23

тривитамин Б 11", 65+0,52

С 4,32+0,36

3. Лактобрил+три-

витамин+АСД-2 А 2,20+0,37

+ новокаин Б 13,78+0,34

С 6,30+0,25

А 2,22+0,29

,4 Фуразолидон ^контроль) Б 7,17+0,31

С 2,56+0,14

5. Здоровые коровы после

отела : на 5-6 день 5,86+0,44

на 14-15 день 2,45+0,18

3.4.2,- Профилактика острого посттрансплантационного гнойно-катарального .эндометрита у коров - доноров эмбрионов

С внедрением в,производство новой биотехнологии ускоренного воспроизводства и селекции крупного рогатого скота методом трансплантации ранних эмбрионов етали регистрировать новую форму искусственно приобретенного бесплодия,в результате-эаболеванйя 7-10%-коров-доноров и 3-5% коров -реципиентов острым гнойно-катаральным эндометрл-том.Острое воспаление катки происходит вследствие механического повреждения ее-стенок и внесения условно патогенной и патогенном -микрофлоры несовершенными катетере.ш при трансцервикальном извлечении и трансплантации эмбрионов.^ Такой патологический процесс мы Назвали острым поеттрансплантационннм гной:<о-катаральным эндометритом. Переболевшие эндометритом высокопродуктивные ж.а-отные,не могут в дальнейшем использоваться в качестве доноров эмбрионов,30-40% из них остаются бесплодными и выбывают из хозяйственного использования.

Помимо названных недостатков современные отечественные и зарубежные. катетеры имеют низкую интрацервикальную проникающую способность (53,8%) и не обеспечивают достаточную извлекаемость эмбрионов, которая достигает только 41% (В.Ф.Довгопол,В.П.Игнатенкс,1988).

С целью профилактики острого посттрансплантационного гнойно-катарального эндометрита.вызванного травмированием и занесением микрофлоры в родополовые пути коров-доноров эмбрионов, а также для обеспечения более полной извлекаемости зародышей,нами разработан и апрбирован новый катаетер для трансцервикального извлечения эмбрионов, повыщающий эффективность современной биотехнологии ускоренного размножения и селекции животных.

Новый катетер отличается от прототипа тем,что с целью предотвращения выхода стального стилета за пределы промывных отверстий,он .снабжен металлическим наконечником каплевидной формы .-Каплевидная форма »крестообразные продольные выемки и плотно закрываемые.стилетом промывные(дренахные) отверстия наконечника обеспечивают на-' дехную проникающую способность катетера через закрытый канал шейки матки коров,не поврехдая ее тканей; глубокое проникновение в верхушки рогов матки и более полное удаление из полости рогов матки промывной жидкости, а вместе с ней эмбрионов.Затраты времени на извлечение эмбрионов сокращаются на 25-30%

конструкция нового катетера позволяет извлекать 88,2%,имеющих-

ся в матке ранних эмбрионов,чтс-в 1,6 раза больше,чем при работе катетером-прототипом,и в 7 раз сокращает контаминацию матки микрофлорой (табл.12).

Таблица 12 ■

Показатели эффективности применения нового катетера при извлечении ранних эмбрионов

(М+ /

по казатели

Вариант катетера

прототип

новый

количество коров-доноров 20 20 '

Количество овуляций на 1донора 6,77+0,28 ■ 5,1+0,21

Извлечено эмбрионов на 1 донора, шт 3,7 +0,2 4,5+0.25

в т.ч. качественных 2,8+~0|1 3,2+0,12

Процент извлечения эмбрионов 55,1+1,2 88¡2+1,8

Удалено промывочной жидкости,% 93,7+2,4 97,0+0,37

Общее количество микрофлоры в„ промывочной жидкости,тыс/1 см м.т. 0,? 0,1 .

оаболело острым эндометритом доноров 2 _

иоличесгво дней от извлечения эмбрионов до СВПц 17,3+1,7 ■ 13,5+2,4

Плодотворно осеменено доноров после извлечения эмбрионов, сутки 81,7+6,7 ' 58,2+5,5

Достоверно к прототипу при Р4 0,01.

С целью санации полости матки от занесенной в нее в процессе извлечения эмбрионов микрофлоры,мы заменили растворе антибиотиков лах-тобрилом.В опыте 20 коровам после извлечения у них эмбрионов в полость матки вводили 0,4г лакгобрила,растворенного в 50 мл жидкости Дюльбекко,-

В результате у подопытных коров отсутствовали воспалительные посттрансплантационные процессы в родополовых путях и они на 23+1,2 дня раньше контрольных животных плодотворно осеменялись после извлечения эмбрионов.Это увеличивает возможность многократного использования коров с высоким генетическим потенциалом в качестве доноров эмбрионов. Помимо прямого назанчения катетер может применяться для взятия маточных смывов.дренирования и взедения лекарственных растворов в матку и другие закрытые полости у хивотных.

4. В Ы В О Д Ы

1.- Острый послеродовой гнойно-катаральный эндометрит относится

к наиболее распространенный заболеваниям коров на фермах Ставропольского края и регистрируется у 41,6% отелившихся животных.вызывая у < 26,6 % из них симптоматическое бесплодие.

2.- Основной причиной заболевания коров острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом является инфицирование матки неспецифической патогенной и условно патогенной мккрофлорой.Задержание последа у 75,5% коров-рохениц и низкая естественная резистентность организма стельных коров в результате кормления недоброкачественным оилосом,- являются решающими факторами заболеваемости животных в ' послеродовой период.

3» В условиях Ставропольского края основным неспецифическим возбудителем острого послеродового гнойно-катарального эндометрита у коров является золотистый стафилококк.проявляющий патогенные свойства в 81,7% случаев выявления этого микроорганизма.В общем количестве выделенных штаммов микрофлоры стафилококки составляют 50,2/о. является неспецифическим возбудителем заболевания

как. в монокультуре, так и в ассоциации с другими факультативно патогенными микроорганизмами и можзт обнаруживаться в матке пере- -болевших хивотных в течение 7 месяцев после их выздоровления.

Из числа,наиболее часто обнаруживаемой'микрофлоры при остром эндометрите у коров^ следует отметить энтеробактерии (25,0%), протей (8,6%) " .почвенные споровые аэробы(4,8%Г, а также синегнойную палочку (4,4%). В симбиозе с золотистым стафилококком эти микроорганизмы усиливают свои патогенные совйсгв?.,что свидетельствует о синергическом взаимодействии этих неспецифических возбудителей заболевания ^коров острым воспалением матки.

4. Одним из основных'факторов.способствующих задержанию последа у коров-рожениц и заболеванию их послеродовым гнойно-катаральным эндометритом в зимне -стойловый период.является скармлиЕа-ние им силоса с повышенным содержанием масляноК кислоты.вызывающей накопление в организме кетоновых тел .нарушь.ще обмена веществ, -снижающей уровень естественной резистентности животных.

о. Разработан и внедрен в практику косвенный метод профилактики родовой и послеродовой патологии у коров путем кормления их

силосом с повышенной биологической и питательноЯ ценности). Эхо достигается интенсификацией молочнокислого брожения в результате внесения в консервируемую массу мезофильных л термофильных молочнокислых бактерий в составе закваски амилонитробактерин,обладающей цеда-направленным.антагонистическим действием на эпифитную, в том числе маслянокислую,микрофлору растений.Приготовленная на молочной сыворотке,закваска обогащает силосованный корм незаменимыми аминокислотами и биологичски активными веществами молока.В результате более полного сохранения основных питательных веществ растений калорийность консервированного корма повышается на 17,4%¡содержание переваримого протеина- на 13,углеводов- на 41,2/£ и каротина -на38,8%. За счет,-улучшения качественного состава микрофлоры достигается оптимальное соотношение летучих жирных кислот в силосе,используемом для кормления жвачных животных, в частности стельных коров.

6. йорыление стельных коровсилосом,приготовлением с закваской амилонитробактерин,повышает эффективность обмена веществ и естественную резистентность организма, в результате чего обеспечивается сокращение задержаний последа- в 1,ь.раза,заболеваемости острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом- в- 1,75 раза',продол-житглькости бесплодия у какдого животного на 12 дней.Повышаются: огшодотэоряемость животах на 7,Ь%,резистентность эмбрионов-в 1,6 ' раза,эмбриопродудтивность коров-доноров - в 1,7 раза,мелочная про-дуктивность-на 250 кг за лактацию.В 1,8 раза снижается падеж' телят

в неонатальный период от диарейных"заболеваний за счет более высокого у них приобретенного колострального иммунитета.

7. Разработана технология и освоено промышленное производство нового бактерицидного препарата лактобрил,который апробирован и принят к применению в ветеринарной гинекологичской практике для профилактики и лечения острого послеродового'и посттрансплантационного гнойно-катарального эндометрита у коров. Препарат представляет лггафильно высушенную-композицию лекарственных веществ химического

и биологического синтеза.Он безвреден для животных и человека,окружающей среды и оказывает оактэршадное действие на граиполярнув антибиотикоустойчивую гнилостную микрофлору.В разведении 107?. 10"^ бактерициден для золотистого стафилококка,вульгарного протея,бах-терий группы кишечной палечки и пиогенного стрептококка, а в разведении 107?. 5 х 10"? убивает вегетативные формы синегнойной палочки и грибы из рода каедида. Бактерицидность лактобрила в 5-50 раз

превышает .входящий в его состав.фураэолидон.Лактобрил расфасован в стеклянные флаконы.массой нетто 0,4г,составляющей 1 терапевтическую дозу.Препарат растворяется в воде,спирте,растительных и минеральных маслах.срок годности- 1 год.

8. Терапия острого послеродового гнойно-катарального эндометрита у коров лактобрилом по сравнению с фуразолидоновыми палочками сокращает продолжительность бесплодия у каждого животного на 12,022,4 дня и 1^урс лечения на-1,6-3,1дня; обеспечивает оплодотворяемо еиость у 90% выздоровевших коров( в контроле~6о%);в 1,2-1,4 раза сокращает расход спермодоэ на их плодотворное осеменение.

9. наибольший терапевтический эффект (92,5% )достигае®ся при использовании лактобрила в комплексе со средствами патогенетической терапии: миотропныщ (синэстрол и окоитоцин),биологически активными (АСД-2),витаминными (тривитамин) препаратами и новокаином.

Терапевтическое действие'лактобрила при остром послеродовом гнойно-катаральном эндометрите у корсз достигается в результате направленного бактерицидного дсжстзия препарата на возбудителей заболевания-,повышение эо£ективности'метаболизма(снижение в крови в ' процессе выздоровления альбуминов и альфа-глобулинов при одновременном нарастании бета- и гамма-глобулиновш; фракций белка),естественной резистентности организма животных, 'а также мобилизации у них факторов местной(локальной) гуморальной защиты матии,направленных на активизацию регенеративных и противовоспалительных процессов в ней(увеличение в субэпителии в 21 раз количества плазматических клеток ; в 9,о раза- уровня ДшС и в 7,3 раза- РНЛ в эпителиальных клетках желез эндометрия ; в 2,5-3,0 раза количества маточных желез; иммуноглобулинов класса С - б 6 раз и класса й- в 2,6 раза в маточном секрете),

10. Дактобрия в разведении 10"^ на среде Дшьбекко оказывает санирующее действие на извлеченных у коров-доноров 7-дневных эмбрионов. Раствор лактобрила не обладает токсическим и тератогенным действием и не оказывает отрицательного влияния на приживляемость эмбрионов,обеспечивая 100% стерильность поверхности зародышей. Однократное внутриматочное введение 0,4 г лактобрила.растворенного ь 50 мл среды Дшьбекко,профилактирует у коров- доноров эмбрионов развитие острого -посттрансплантационного гнойно-катарального эндометрита при нехирургическом извлечении эмбрионов.Раствор лактобрила в концентрации 5 х 10 при однократном орошении полости влагалища коров сокращает его бактериальную обсемененность более

чем в 8 раз.

а,

11? Лактобрил является перспективная лечебным средством при незаразных диареях новорожденных телят,а также лечения маститов и раневых инфекций у животных.Мелет применяться как антисептическое^ средство при искусственном осеменении коров.

12.„ С целью профилактики острого посттрансплантационнного гнойно-катарального эндометрита,вызванного травмированием и занесением в матку коров- доноров эмбрионов микрофлоры, а также для обеспечения более полной извлекаемости зародышей,разработан новый трав-мобезопасннй катетер,обеспечивающий:

-сокращение времени на извлечение эмбрионов у одного донора на 25-30/6'; .■ -

-повышение извлекаемости зародышей в 1,6 раза ; -сокращение количества вносимой в матку микрофлоры в 7 раз; -сокращение продолжительности бесплодия у коров-доноров - после извлечения у них эмбрионов на 23+1,2 дня.

13.Применение нового катетера п^и извлечении эмбрионов увеличивает возможность многократного использования коров с высоки генетическим потенциалом в качестве-доноров1 эмбрионов.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРВДЛ01ЕШ

1.Для обеспечения молочного и мясного скота силосованным кормом с высокой биологической и питательной ценностью,обеспечивающего физиологически нормальные обменные процессы в орга'низме коров,высокую естественную резистентность.профилактирующего родовую и послеродовую патологию,повышающего воспроизводительную способность и рождение жизнеспособных телят с высокой энергией роста и низкой заболеваемостью незаразными диарейными болезнями,при его заготовив необходимо применять молочнокислую закваску амилонитробактерин.По заявке потребителей ее производят молокоперерабатывающие предприятия России,

Закваску вносят в силосуецую масеу в процессе ее закладки в силосохранилище из расчета 1литр на 1 тонну зеленой массы,предварительно раствору ее в- 10 литрах -молочной сыворотки или питьевой воды. Влажность силосуемой массы должна составлять 65-70% и она может состоять как из легко-так и трудносилосуемнх растений* Процесс закладки силоса включает тщательное уплотнение силосуемой массы и рав-номеряете^зе'орошение раствором закваски.после чего сооружение ук-

рывается с целью недопущения промерзания и затекания атмосферных осадков. Силос готов к скарюшвашю через 1,5-2 месяца после закладки и мохет использоваться в течение .2-2,5 лет в соответствии с нормами кормления сельскохозяйственных хивотннх-.

2* Для лечения и профилактики острого послеродового и посттрансплантационного Гнойно-катарального эндометритаукоров с учетом быстрого выздоровления и высокой оплодотворяемости переболевших животных следует применять лактобрия в комплексе с препаратами патогенетической терапии,повышающих эффективность обмена веществ,ж><5й-лиаацию факторов местной гуморальной защиты матки и естественную резистентность организма:тривитамином,АСД-2,новокаином и миотропнн-ми средства»ш-окситоцином и синестролом.

•В первые сутки заболевания корове утром и вечером внутриматочно вводят 0,8г лактобрила,растворенного в 100 мл тривитамина, или в 100мл дистиллировашой (кипяченой) воды.На вторые и последующие дни лечения раствор лактобрила ввод« один раз в сутки(хелательно на ночь). Дополнительно в 1-3-5-7 с/тки один-раз в день, в еедалищ-но-хвостовую складку вводится препарат АСД-2, из расчета 0,0025 мл на 1 кг хивой массы животного,растворенный-в 25-30 мл 0,5% -кого раствора новокаина.-В процессе ле^шя коровам предоставляли 1-2 часовни активный моцион*

3.С целью профилактики острого поеттрансплантационного гнойно-катарального эвдометрита у коров-доноров эмбрионов им-после извлечения зародышей внутриматочно вводят 0,4г(1флакон)лактобрила,растворенного в 50 мл среды Дюльбекко.^ целью профилактики острого пост-транеплантаадркного эндометрита у короров-реципиентов им перед пере-

./садкой эмбрионов однократно орошают влагадище и шейку матки лакто-брилом в разведении 5 хЮ~3 на среде Дюльбекко.Перед пересадкой эмбрионы промывают в растворе лактобрила на среде! Дюльбекко в разведении 10"^,двукратно с 2-х минутной экспозицией,

4. С целью профилактики острого постт^днсплант'ационного гнойно-катарального эндометрита у коров-доноров эмбрионов.вызванного травмированием и занесением в матку микрофлоры, а также обеспечения более полной извлекаемоети зародышей при -применении еов&рменного биотехнологического метода ускоренного размножения животных цутем трансплантации эмбрионов, необходимо применять травмобезопасный катетер конструкции С.Н.Слипченко е сотр;'(1991)*

5.Для решения проблемы профилактики родовой и послеродовой патологии на фермах Ставропольского края следует уделять внимание

зыполнвнгаэ ветерианрно-еанитарннх регламентов в часта строительства и оборудования родильных отделений,подготов ки коров к отелу и оказании квалифицированной акушерской помощи роженицам.Только высокая санитарная культура в родильных отделениях,своевременная и качественная дезинфекция,соблюдение асептики и антисептики могут стать гарантами профилактики стафилококковых эндометритов у коров, приобретающих при несоблюдении этих ветерианрно-санитарных правил форму энзоотии,и приводящих к симптоматическому бесплодию."

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ОСНОВНЫМ ПОЛОЖЕНИЯМ ДИССЕРТАЦИИ ■

1» Полянин А.Н.',Гудков A.B. ,Ярашенинин П>ф., Карликанова С.Н., Слипченко С.Н., Храмцов А.Г.,Михлин Э.Д. Производство и применение закваски для силосования кормов = Молочная промышленность,1975,Р12 2. Слипченко С.Н.,Атаманченко П.М. и др. Использование закваски молочнокислых бактерий при силосовании кукурузы =Труды Став-' ропольского НИИСХД977, в.44

3. ГудковА.В.,Полянин А.Н. »Слипченко С.Н. ,Михлин .Н,- Применение сыворотки в силосовании» Полочная промышленность,1978,$5.

4. Гудков A.B.,Гошев Г.Н.,Слипченно С.Н. и др. О коагулазо-полохительных стафилококках = Молочная промышленность,1980,МО

5. Гудков A.B..Кандрина С.И..Слипченко С.Н. Закономерности развития стафилококков = Молочная промышленность ,1981, PI

6. Слипченко С.Н.,Карликанова С.Н. и др. Использование творожной сыворотки для приготовления бактериальной закваски =Гезизн краевой научно-технической конференции СФ ВНИИМС,Ставрополь,1982

7. Слипченко С.Н. и др. Закваска амилонитробактерин для силосования кормов с использованием молочной сыворотки = Тезисы докл. научно-технич. конф."Эффективность-безотходной технологии в молочной пром-ти", СФ ВНИИМС,Ставрополь,1983,4,1.

8. Слипченко С.Н.,Соколовский Н.С. Уровень полиовуляции и репродуктивная способность коров после извлечения эмбрионов = Тезисы докл. конф* молодых ученых "Перестройке сельского хозяйства-научное обеспечение", СННИШ, Краснодар,1988

9. Слипченко С.Н.,Лапша м.Н. Новый препарат лактобрил для применения в ветеринарной акушерской практике .= Тезисы докл.респ. научной конф."Состояние и перспективы развития биотехнологии в животноводстве",НИМ Лесостепи и Полесья УССР,Харьков,1988

10. Слипченко С.Н. Восстановление репродуктивной способности у коров.= Сборник науЧн.дохл. Ставропольского СХИ,Ставрополь,1988

11, Слипченко С.Н. Препарат лактобрил для применения в ветеринарной акушерской практике. -- Те-зисы докл.Всесоюзная научно-тех-нич. конф. "Проблемы экологии в ветеринарной медицине" Воронеж,1989

12. Слипченко С.К., Соколовский Н.С. Совершенствование нехи-рургичесхого метода извлечения эмбрионов у коров. = РФ "Молочное и мясное скотоводство",. 1991,с.14. Дек. под ff 65/l3,ßC~Sl

13. Слипченко С.Н.»Соколовский HvC. и др. Многократное использование коров-доноров для извлечения эмбрионов.= Тезисы докладов

ВИ1.Дубровицн,1990

14. Слипченко С.Н.,Тимченко Л.Д, Препарат лактобрил для борьбы с симптоматическим бесплодием коров,= Сборник трудов Поволжского НИШ, Саратов, 1991 . •

15î- Слипченко С.Н. ^Тимченко Л.Д, Препарат лактобрил для борь-сы с симптоматическим бесплодием коров,= Тезисы докл. Всвсоюзн. научно-технич. конф. "Профилактика и лечение болезней молодняка с/х животных" .Воронеж,1991

16. Степанюк С.Н. .Благоразумная А.-В. .Слипченко С.Н.- Разработка и определение некоторых лекарственных веществ в молоке = Тезисы докл. 3-й регион, конф. "Химики Северного Кавказа- народному хозяйству",Нальчик,1Ь91

17. Слипченко С.Н, Масляная кислота как фактор снижения плодовитости коров = Ьоотёхния,1994,?10 ' ,

18. Слипченко С.Н. Повышение качества эмбрионов молочнокислыми бактериями = Молочное и мясное скотоводство, 1994-,Р 3

19. Слипченко С.Н..Тимченко Л.Д. Терапия острого гнойно-катарального эндометрита коров лактобрилом.= Ветеринария,1994,Р11

" ¿0. Слипченко С.Н. Повышение биологической и питательной ценности силсса= Кормопроизводство,1994,F3

21. Шиндялова Е.В,,Молочников В.В..Карликанова С.Н.,Слипченко С.Н.,Гудков A.B. "Способ приготовления молочнокислой закваски для силсеования кориов"= Авт. свид. ?1151575 от 7.05.1982

22. Слипченко С.Н. и др."Устройство для извлечения ранних эмбрионов у животных".= ^вт. свид. i1655435 от. 15 февраля 1991г.

23. Слипченко С.Н. и др."Бактерицидный препарат лактобрил".=' Авт. свид. ¡В 1672629 от 22 аперлл 1991г.

24. Лактобрил .Технические условия Т7 9291-001-07532800-93 ОКИ 92 91430000 Утв. МСХ РФ,срок действия до 15.09.2003г.