Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.04) на тему:Разработка и изучение механизмов действия гирудотерапии при мастите у коров

На правах рукописи

РГБ ОД

1 8 ДЕК 2303

Петров Алексей Николаевич

Разработка и изучение механизмов действия гирудотерапии при мастите у коров

] 6.00.04. - ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Воронеж 2000

Работа выполнена на кафедре биологии и ветеринарии Мичуринского государственного аграрного университета

Научные руководители: Заслуженный ветеринарный врач

Российской Федерации, доктор ветеринарных наук, профессор

Попов JI. К. Заслуженный деятель науки Российской Федерации, доктор биологических наук, профессор Бузлама В. С.

Официальные оппоненты: Доктор биологических наук,

профессор Беляев В.И. Кандидат ветеринарных наук, доцент Ходаков A.B.

Ведущая организация: Саратовский государственный аграрный

университет им. Н.И.Вавилова

Защита состоится « » декабря 2000 г. в_часов на заседании диссертационного совета Д 020.65.02 во Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте патологии, фармакологии и терапии (394043, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114-6).

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке института Автореферат разослан « » ноября 2000 г. Ученый секретарь

диссертационного совета М.Н.Аргунов

п т. -//•/- £

-1 -1. Введение

1.1. Актуальность темы. Борьба с маститом коров является актуальной проблемой ветеринарной науки и практики. По данным Международной молочной ассоциации ежегодно клинической формой мастита переболевает 2% коров, а скрытой - до 50%. Экономический ущерб наносимый маститом молочному скотоводству складывается более чем из 12 категорий убытков. При этом одни из ведущих мест занимают: снижение молочной продуктивности, преждевременная выбраковка животных, ухудшение пищевых и технологических свойств молока, а также затраты на диагностику и лечение (А.П.Солдатов, 1986, 1990: М. С^Ыта е1. а!., 1990; Ю.Рубан с соавт., 1991; Г.Родионов, 1991; В.М.Юрков с соавт., 1997).

Для лечения мастита у коров предложено большое количество средств и методов, но они не всегда эффективны, а широкое применение препаратов, содержащих антибиотики и химиотерапевтические средства, привело к образованию лекарственно-устойчивых штаммов микроорганизмов (А.И.Сергиенко с соавт., 1988; В.А.Париков, 1990; Н.И.Полянцев, 1997; Л.К.Попов, 1998; А.И.Завражнов, Л.К.Попов, 1999).

Кроме того, бессистемное применение антибиотиков и химиотерапевтических препаратов привело к снижению механизмов естественной резистентности организма животных и способствовало появлению грибковых заболеваний (Г.Ф.Кочан с соавт., 1988; Л.И.Ефанова, 1997; В.М.Юрков с соавт, 1997; В.И.Рубцов, 1999).

Учитывая, что все, примененное животному, попадает в экологическую систему, включается в неё, и влияет на её жизнеспособность, а затем достигает человека, стала очевидной необходимость принципиально пересмотреть требования к ветеринарным и биологически активным препаратам (В.С.Бузлама, 1997).

Поэтому, изыскание новых экологически чистых и эффективных средств лечения мастита у коров, не обладающих побочным действием на организм животных, и не оказывающих влияние на технологические свойства молока является актуальной задачей ветеринарной науки и практики.

1.2. Цели и задачи исследований. Целью настоящей работы являлось изыскание новых экологически чистых эффективных средств лечения мастита и изучение их механизмов действия на организм животного (гирудотерапия).

Для достижения поставленной цели решали следующие задачи:

-21. Установить степень распространения скрытой формы мастита в зависимости от концентрации коров на фермах Тамбовской области.

2. Разработать эффективные способы трудотерапии и гирудоакупунктуры при мастите у коров, в сравнении с лазеротерапией и лазероакупунктурой.

3. Выяснить механизмы действия трудотерапии и гирудоакупунктуры при мастите у коров.

4. Провести производственные испытания и дать экономическую оценку трудотерапии и гирудоакупунктуры при мастите у коров.

1.3. Научная новизна работы. Впервые разработаны научные основы и изучены механизмы действия трудотерапии и гирудоакупунктуры в ветеринарии, в частности обосновано лечение скрытой формы мастита у коров.

1.4. Практическая значимость работы. Предложены научно обоснованные способы применения при скрытом мастите у коров экологически чистых и эффективных способов - трудотерапии и гирудоакупунктуры.

1.5. Апробация материалов исследований. Основные результаты диссертации доложены и одобрены на конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов Мичуринского государственного аграрного университета (Мичуринск, 1997, 1998 гг.); на конференции профессорско-препода-вательского состава и аспирантов Вологодской государственной молочно-хозяйственной академии (Вологда, 1999 г.); на международной конференции «Теоретические и практические аспекты возникновения и развития болезней животных и защита их здоровья в современных условиях» (Воронеж, 2000 г.).

Результаты исследований внедрены в учхозе «Роща» и учхозе-племзаводе «Комсомолец» Мичуринского государственного аграрного университета.

Материалы диссертации вошли в учебное пособие «Морфо-физиологические основы машинного доения и болезни молочной железы» (Мичуринск, 1999), а также используются в учебном процессе при изучении курса акушерства в Мичуринском государственном аграрном университете и Воронежском государственном аграрном университете им. К.Д. Глинки.

1.6.Основные положения, выносимые на защиту:

- о широком распространении субклинической формы мастита на примерах сельхозпредприятий Тамбовской области;

- разработка эффективных способов гирудотерапии и гирудоакупунктуры при мастите у коров, в сравнении с лазеротерапией и лазероакупунктурой.

- о механизмах действия трудотерапии и гирудоакупунктуры при скрытом мастите у коров.

- эффективность трудотерапии и гирудоакупунктуры при лечении скрытой формы мастита в сравнении с лазеротерапией и лазероакупунктурой;

1.7. Публикации. Основные научные результаты опубликованы в 5 научных работах, поданы 2 заявки на изобретение.

1.8. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на _

страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора' литературы, материала и методов исследований, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы, включающего 370 наименований, в том числе 85 иностранных авторов, и приложения.

2. Материалы и методы исследований

Работа выполнена в 1997 - 2000 г.г. на кафедре биологии и ветеринарии Мичуринского государственного аграрного университета и является составной частью исследований по теме: «Разработать меры борьбы и профилактики болезней молочной железы коров и повысить качество молока в условиях ферм и комплексов» (номер государственной регистрации 01.9.20006571).

Статистические, клинические и экспериментальные данные выполнены в лаборатории кафедры биологии и ветеринарии, учхозах «Роща» и «Комсомолец» Мичуринского государственного аграрного университета и в других хозяйствах Тамбовской области.

Изучение степени распространения субклинической формы мастита в зависимости от концентрации коров на ферме проводили экспресс методом с помощь 2%-ного раствора мастидина или 5%-ного раствора димастина. В целях исключения раздражения вымени исследование молока повторяли через 3 дня после предыдущего исследования.

В процессе исследований были изучены показатели обшей л локальной естественной защиты организма здоровых и больных скрытым маститом коров.

При изучении показателей гематобиохимического состава крови у здоровых и больных скрытым маститом коров определяли количество эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, гемоглобин, подсчитывали лейкоцитарную формулу, а также устанавливали фагоцитарную активность

лейкоцитов. В сыворотке крови определяли содержание общего белка и его фракций, бактерицидную и лизоцимную активность.

Определение вышеуказанных показателей проводили по следующим методам:

- количество лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов подсчитывали в счетной камере Горяева (И.П.Кондрахин с соавт., 1985);

- время свертывания крови, мин;

- гемоглобин колориметрически (И.П.Кондрахин с соавт., 1985);

- лейкоцитарную формулу выражали в процентах от 200 подсчитанных лейкоцитов;

- лизоцимную активность сыворотки крови по методике П.А.Емельяненко с соавт. (1980);

- фагоцитарную активность лейкоцитов крови по П.А.Емельяненко с соавт. (1980);

- бактерицидную активность лейкоцитов крови по П.А.Емельяненко с соавт. (1980);

- содержание общего белка рефрактометрически, на рефрактометре ИРФ-22 (В.С.Антонов с соавт., 1985);

- белковые фракции электрофоретически в агаровом геле.

В молоке здоровых и больных скрытым маститом коров определяли:

- рН с помощью потенциометра ЛПУ-01;

- количество соматических клеток с помощью счетной камеры Горяева по Н.М.Хилькевичу (А.И.Ивашура, 1991);

- титр лизоцима М по В.И.Мутовину (1974);

- общий белок в сыворотке молока рефрактометрически, на рефрактометре ИРФ - 22 (И.П.Кондрахин с соавт., 1985);

- активность каталазы по Г.В.Зверевой (1979).

При разработке и испытании гирудотерапии и гирудоакупунктуры для лечения скрытого мастита у коров было проведено три серии опытов.

В первой серии опытов изучалось влияние гирудотерапии и гирудоакупунктуры на организм здоровых коров. С этой целью было сформировано две группы коров по 5 в каждой.

Коровам первой группы, на предварительно выбритую кожу доли вымени подсаживали 3 медицинские пиявки. После насыщения кровью (25 - 30 мин) они самопроизвольно отпадали. Процедуру проводили трехкратно с интервалом в 24 часа.

У коров второй группы волос выбривали по обе стороны крестцовой кости, кожу дезинфицировали. После этого на кожу крестцовой кости подсаживали по 3 пиявки с каждой стороны, на примерно расположенные биологически активные точки (БАТ). После насыщения кровью (25 - 30 мин) пиявки самопроизвольно отпадали. Процедуру проводили трехкратно с интервалом в 24 часа.

У всех подопытных коров изучались показатели клеточного и биохимического состава крови до проведения процедуры, после первой постановки пиявок, сразу после окончания процедур и через 24 часа. В эти же сроки проводились исследования молока.

Во второй серии опытов проведенной на 10 коровах (разделенных на 2 группы по 5 в каждой) больных скрытым маститом изучали влияние гирудотерапии и гирудоакупунктуры на клеточные и биохимические показатели крови и цитобиохимические показатели молока. Исследования проводили до начала курса лечения, после первой постановки пиявок, затем сразу после окончания курса лечения, через 24 и 48 часов. Одновременно с этим отрабатывали терапевтический курс гирудотерапии и гирудоакупунктуры.

В третьей серии опытов проводили исследования по изучению лечебной эффективности гирудотерапии и гирудоакупунктуры, в сравнении с лазеротерапией и дазероакупунктурой. Эти исследования проведены на 60 коровах больных скрытым маститом. При этом трудотерапию и гирудоакупунктуру применили на 40 коровах, разделенных на две группы (в первой группе было 25 коров, а во второй 15 животных) по выше приведенным схемам.

Лазеротерапию и лазероакупунктуру также применили на двух группах коров (по 10 в каждой) больных скрытым маститом для этого на кафедре механизации Мичуринского государственного аграрного университета под руководством профессора А.С.Гордеева был создан лазерный аппарат ЛОП -1А. Его технические данные: мощность лазерного излучения - 0,1 Вт, длина волны - 850 - 980 им, частота импульсного излучения от 10 до 2000 Гц.

Коровам первой группы применяли лазеротерапию на больную долю вымени контактным сканирующим методом, приложив лазерный излучатель к коже вымени и постепенно передвигая его по поверхности в течение 2-х минут, 6 раз подряд с интервалом в 24 часа.

Коровам второй группы применяли лазероакупунктуру на точки БАТ расположенные по обе стороны крестцовой кости в течение 2-х минут, 6 раз подряд с интервалом в 24 часа.

Через 7 дней после окончания курса лечения, молоко от всех подопытных коров исследовали на наличие скрытого мастита с помощью 2%-го раствора мастидина.

Полученные цифровые значения обрабатывали с помощью программ Microsoft Excel, Stadia, Статистика (1993). Достоверность полученных цифровых значений результатов исследований определяли по Стьюденту (Р: * -0,05;**-0,01;***-0,001).

3. Результаты собственных исследований

3.1. Степень распространения скрытого мастита у коров в различных типах хозяйств Тамбовской области

В таблице 1 приведены данные о степени распространения мастита у коров в различных типах хозяйств Тамбовской области, которые свидетельствуют, что степень распространения скрытого мастита зависит от их концентрации на фермах. Так, в хозяйствах с концентрацией от 600 до 800 коров мастит выявлен у 20,4 - 27,0% животных. В учхозах «Роща» и «Комсомолец», где на фермах находилось 84 и 175 коров мастит зарегистрирован соответственно только в 1,1 - 3,4% случаев. В тоже время при обследовании 122 животных, содержащихся в индивидуальных хозяйствах, мастит не был выявлен ни у одной коровы.

Таблица 1

Степень распространения мастита у коров в различных типах

хозяйств Тамбовской области

Название хозяйства Количество обследованных животных в том числе больных маститом коров

количество %

ГПЗ им. Ленина 800 187 23,3

Колхоз «Родина» 600 162 27,0

Колхоз «Победа» 700 143 20,4

Учхоз «Комсомолец» 175 6 3,4

Учхоз «Роща» 84 1 1,1

Индивидуальные 122 - -

хозяйства

Резюмируя представленный материал можно сделать вывод, что широкое распространение мастита в крупных хозяйствах связано с большой

концентрацией животных. Это может быть связано с тем, что патогенная микрофлора, многократно пассажируясь, приобретает высокую вирулентность и поражает большое количество животных. В небольших же хозяйствах с малой концентрацией животных этого не происходит, поэтому и реже регистрируется мастит у коров.

3.2. Показатели общей и локальной резистентности здоровых и больных маститом коров

Нами были проведены исследования по изучению клеточных, биохимических и иммунологических показателей крови и молока, здоровых и больных маститом коров.

В таблице 2 приводим клеточные, биохимические и иммунологические показатели крови здоровых и больных маститом коров. У больных животных, по сравнению со здоровыми, в крови происходит увеличение СОЭ на 36,4%, содержания эритроцитов на 10.8%. и гемоглобина на 1.8%. Одновременно с этим у больных маститом коров достоверно увеличивается количество лейкоцитов в крови на 94,3% (Р< 0,001).

Изменение общего количества лейкоцитов повлияло на процентное соотношение отдельных их видов в лейкоцитарной формуле. Так, происходит достоверное увеличение количества палочкоядерных лейкоцитов в 4 раза (Р< 0,001), сегментоядерных лейкоцитов на 41.9% (Р< 0,001), моноцитов - в 2 раза (Р< 0.01), увеличение уровня базофилов почти в 2 раза. Происходит уменьшение количества лимфоцитов на 43.7% (Р< 0,001) и эозинофилов на 2,4%.

В таблице 3 представлены биохимические показатели молока здоровых и больных маститом коров.

Для больных маститом коров было характерно достоверное (Р<0,001) повышение рН, количества лейкоцитов, общего белка, альбуминов, бетга - и гамма — лактоглобулиновых фракций сывороточных белков, активность каталазы, при одновременном снижении титра лизоцима М.

Значительное увеличение в молоке лейкоцитов обусловлено их поступлением из крови при воспалении вымени. Все это говорит о том, что в первую очередь происходит усиление локальных защитных свойств молочной железы.

Таблица 2

Клеточные, биохимические и иммунологические показатели крови здоровых и больных маститом коров

Показатели Коровы

Здоровые Больные

Свертываемость крови, сек. 345,80 ± 5,72 344,60 ± 6,87

СОЭ, мм / ч 2,20 ± 0,23 3,00 ±0,35

Гемоглобин, г/л 94,80 ±3,78 96,60 ±2,08

Эритроциты, 101' / л 4,60 ± 0,67 5,11 ±0,28

Лейкоциты,109/л 8,80 ± 0,40 17,10 ± 1,3 Г"

Тромбоциты, 10у/л 537,10 ±26,92 535,00 ± 29,85

Лейкоформула: Ю, % - -

Палочкоядерные, % 1,00 ± 0,25 4,20 ± 0,42'"

Сегментоядерные, % 28,60 ±1,72 40,60 ± 1,26*"

Эозинофилы, % 8,60 ±3,40 8,40 ±0,97

Моноциты, % 6,00 ± 1,12 12,40 ± 1,04"

Базофилы, % 1,60 + 0,27 3,00 ±0,71

I Лимфоциты, % 55,80 ±3,98 31,41 ±1,35"*

Общий белок, % 7,20 ±0,18 7,61 ±0,14

Альбумины, % 30,22 ±2,10 23,32 ± 3,22

а - глобулины, % 19,21 ± 1,40 6,83 ± 0,78*"

Р- глобулины, % 9,68 ± 0,60 ■ 23,81 ±3,37"

у - глобулины, % 43,90 ± 1,60 46,13 ±2,96

Процент фагоцитоза 89,80 ± 0,58 93,60 ±0,51"

Фагоцитарный индекс, % 1,11 ±0,01 1,06 ±0,01"

Бактерицид. Активность крови,% 73,62 ± 0,39 75,80 ±0,37"

Активность лизоцима, мкг/мл 0,37 ± 0,006 0,34 ± 0,004"

Таблица 3

Биохимические показатели молока здоровых и больных маститом коров.

, - Коровы

Показателя Здоровые Больные

рН 6,48 ± 0,04 7,18 ±0,03"*

Соматические клетки, тыс./мл 199,00 ± 4,30 700,00 ±23,18'"

Общий белок, % 3,88 ±0,01 4,43 ±0,10"*

Альбумины, % 14,00 ±0,08 16.93 ±0,09'"

а - лактоальбумины, % 14,76 ±0,26 14,88 ±0,39

(3 - лактоглобулины, % 65,40 ±0,18 51,54 ±0.24*"

у - лактоглобулины, % 5,84 ±0,12 16,65 ±0,22""

Лизоцим М, мм 18,46 ±0,15 13,94 ±0,19""

Активность каталазы, сек. 380,00 ± 10.9 5,80 ± 0,86'"

3.3. Гирудотерапия и гирудоакупунктура при скрытом мастите у коров

З.Э.1. Влияние трудотерапии на показатели обшей и локальной резистентности здоровых коров

Для выяснения механизмов'действия гирудотерапии при скрытом мастите у коров необходимо установить влияние медицинских пиявок на показатели общей и локальной резистентности здоровых коров, а также показать безвредность действия пиявок на организм животных.

В таблице 4 приведены данные по влиянию гирудотерапии на клеточные, биохимические и иммунологические показатели крови здоровых коров.

Показано, что происходит увеличение количества эритроцитов и гемоглобина после трех постановок пиявок соответственно на 6,6% и 6.7%, а через 24 часа, после последней постановки этн показатели приходят к норме. Кроме этого под влиянием медицинских пиявок происходит кратковременное замедление свертываемости крови уже после первой постановки на 5,3% (Р< 0,01), а через 24 часа этот показатель возвращается почти к исходному уровню.

Под действием слюнных желез медицинских пиявок происходит уменьшение содержания тромбоцитов. Если до применения их было 618,40 ± 14,69-109/л, то после первой постановки происходит достоверное снижение на

Влияние гирудотерапии на клеточные, биохимические и иммунологические показатели крови здоровых коров

Показатели Изменение показателей после воздействия пиявок

До постановки После 1 постановки После 3 постановки Через 24 часа А

Свертываемость крови, сек. 342,80 ± 4,03 360,80 ±3,48** 374,40 ±4,19* 359,60 ± 2,58*

СОЭ, мм/ч 2,00 1,60 ±0,27 2,00 2,00

Гемоглобин, г/л 95,60 + 2,11 99,60 ± 2,75 102,00 ± 1,73* 98,60 ± 0,84

Эритроциты, 10|2/л 5,48 + 0,13 5,92 ±0,15 5,84 ±0,10 5,52 ±0,06

Лейкоциты, 109/л 13,52 + 0,07 12,68 ±0,15*** 11,84 + 0,36** 11,06 ±0,51**

Тромбоциты, 109/л 618,40 ± 14,69 . 557,60 ±20,13* 526,40 ± 20,73** 548,80 ±21,97*

Лейкоформула: Юные, % - - - -

Палочкоядерные, % 0,60 ± 0,24 - 0,60 + 0,24 0,60 ± 0,40

Сегментоядерные, % 40,40 + 0,67 39,20 + 0,80 36,00 ±0,32*** 39,00 ± 0,63

Эозинофилы, % 1,60 ±0,24 3,00 + 0,63 3,20 ±0,58* 1,60 ±0,40

Моноциты, % 10,40 ±0,40 12,00 + 0,84 10,60± 1,67 9,80 ± 1,11

Базофилы, % 3,20 ±0,3 7 7,40 ±0,60*** 10,60 ±0,68*** 8,00 ±0,84***

Лимфоциты, % 44,00 ± 0,89 38,40+ 1,40** 39,20 ± 1,28* 41,20 ± 1,53

Общий белок, % 7,61 ±0,02 7,61+0,02 7,50 ± 0,07 7,57 ± 0,05

Альбумины, % 49,92 ±0,61 54,72 ±0,67*** 54,20 ± 1,25* 51,50 ±1,15

а - глобулины, % 10,32 ±1,12 9,38 ± 1,24 7,98 ± 0,25 10,68 ±0,83

р — глобулины, % 22,44 ± 0,55 20,34 ± 0,29* 22,06 ±0,45 23,06 ±0,28

у - глобулины, % 17,32 ±0,72 15,56 ± 1,02 15,76 ± 1,21 14,76 ±0,60*

Процент фагоцитоза 89,20 ± 0,37 92,60 ±0,51*** 95,40 + 0,68* 91,0 ±0,57***

Фагоцитарный индекс, % 1,12 + 0,003 1,07 + 0,005*** 1,05 + 0,006*** 1,09 ±0,007*

Бактер. активность крови, % 73,22 ± 0,38 75,46 ± 0,48** 76,56 + 0,53*** 74,10 ±0,30

Актив, лизоцима, мкг/мл 0,36 ± 0,005 0,38 ±0,005** 0,41 +0,004** 0,38 + 0,004**

-119,8% (Р< 0,05), после трех постановок - 14,8°/о (Р<0,01), а через 24 часа их количество начинает повышаться.

Изменяется достоверно (Р<0,001) количество базофилов, содержание которых начинает повышаться до третьей постановки пиявок, а затем резко снижается.

Повышается процент фагоцитоза достоверно в период постановки пиявок, а через 24 часа снижается до нормы, а это в свою очередь повлияло на фагоцитарный индекс, который, достоверно вначале уменьшился, а затем повысился к 24 часам. Кроме этого, в крови происходит повышение бактерицидной активности и лизоцима после трех постановок пиявок на 4,5% (Р<0,001) и 17,1% (Р<0,01) соответственно. По остальным биохимическим показателям существенных изменений не произошло.

Влияние гирудотерапии на биохимические показатели молока здоровых коров приведены в таблице 5. После первого воздействия пиявками на молочную железу здоровых коров в молоке возросло содержание лейкоцитов на 12,8% (Р<0,01), после трех постановок - на 20.6% (Р<0,001), а через 24 часа после последней постановки их число возвращается почти до исходного уровня. Показатель рН после первой постановки пиявок достоверно сдвигался в щелочную сторону и к 24 часам возвращался к норме.

Происходит повышение содержания общего белка в молоке после третьей постановки на 7,8% (Р<0,001), а через 24 часа этот показатель возвращается в исходное положение. Изменение содержания общего белка в молоке повлияло на процентное соотношение его белковых фракций. Так, после третьей постановки понизилось количество альбумина на 8,4% (Р<0,001), а -лактоальбумина на 3,9% (Р<0,01), а содержание у-лактоглобулинов, наоборот, повысилось на 40,8% (Р<0,001), но к 24 часам эти показатели снижаются почти до исходного уровня.

После воздействия пиявками изменялся и титр лизоцима М, который повысился до третьей постановки на 15,8% (Р>0,999), а затем снизился к 24 часам.

Все это дает основание заключить, что медицинские пиявки оказывают разностороннее действие на цитобиохимические и иммунологические показатели крови и молока здоровых коров.

Влияние гирудотерапии на биохимические показатели молока здоровых коров

Показатели Изменение показателей после воздействия пиявок

До постановки После 1 постановки После 3 постановки Через 24 часа х

РН 6,46 ± 0,02 6,72 ± 0,04*** 6,64 ± 0,04** 6,52 + 0,02

Соматические клетки, тыс./мл 195,00 +'3,30 220,00 + 3,73** 235,20 ±2,98*** 211,80 ±2,35**

Общий белок, % 3,84 ± 0,02 3,96 + 0,04* 4,14 + 0,02*** 3,88 ± 0,02

Альбумины, % 13,98 + 0,06 13,52 ±0,07** 12,80 ±0,10*** 13,34 + 0,10***

а - лактоальбумины, % 15,08 ±0,10 14,76 + 0,10 14,48 ±0,08** 14,86 ±0,09

Р - лактоглобулины, % 65,36 + 0,28 64,34 + 0,36 64,86 ±0,31 65,30 ± 0,29

у - лактоглобулины, % 5,58 ±0,29 7,38 + 0,33** 7,86 ±0,32*** 6,50 ±0,31

Лизоцим М, мм 18,74 + 0,14 20,56 ± 0,29*** 21,70 ±0,41*** 20,80 + 0,29**

Активность каталазы, сек. 371,00 +6,40 381,00 + 6,39 385,60 ±6,62 377,40 ± 5,87

-133.3.2. Влияние гирудотерапии на показатели общей и локальной резистентности больных маститом коров

После того как было определено действие пиявок на организм здоровых коров, были проведены исследования по изучению влияния их на показатели общей и локальной резистентности больных маститом коров.

Данные о влиянии гирудотерапии на клеточные, биохимические и иммунологические показатели больных маститом коров приведены в таблице 6.

При гирудотерапии наступает значительное замедление свертывания крови после первой постановки на 4,8% (Р<0,001), трех постановок на 8,3% (Р<0,001), через 24 часа на 5,4% (Р<0,001), а к 48 часам приходит к норме.

Происходит падение количества лейкоцитов уже после первой постановки на 8,5%, достоверное уменьшение после трех постановок на 20% (Р<0,001), через 24 часа - 28,8% (Р<0,001), достигая своей физиологической нормы и удерживаясь на этом уровне через 48 часов.

Секрет слюнных желез пиявок воздействует на организм и способствует снижению тромбоцитов в крови после третьей постановки на 19,8% (Р<0.001), а через 48 часов происходит повышение их содержания почти до исходного уровня.

При рассмотрении лейкоцитарной формулы можно выделить следующие изменения: достоверное уменьшение уровня палочкоядерных лейкоцитов в 3 раза, эозинофилов - в 2 раза, моноцитов - в 1,5 раза через 48 часов после последней постановки пиявок. По такому показателю как лимфоциты происходит достоверное (Р<0,001) повышение их содержания через 48 часов.

После первой и третьей постановки пиявок достоверно увеличивается содержание в сыворотке крови альбумина на 9,8% (Р<0,001) и 17,1% (Р<0,001) соответственно, затем через 24 часа начинает снижаться и к 48 часам возвращается почти до исходного уровня.

Подвергаются изменениям и белковые фракции сыворотки крови. Так, после первой постановки идет снижение всех глобулиновых фракций, после трех постановок снижение а - и у - глобулинов на 20.5% и 15,3% (Р<0.001) соответственно, а (3 - глобулиновая фракция начинает повышаться. Через 24 часа уровень а - и (3 - глобулинов снова начинает повышаться, достигая исходного значения к 48 часам, а у - глобулины продолжают достоверно снижаться вплоть до 48 часов (Р<0,001).

У больных маститом коров возрастает фагоцитарная зктнвность лейкоцитов. Это проявляется в увеличении процента фагоцитоза, который

Влияние гирудотерапии на клеточные, биохимические и иммунологические показатели больных маститом коров

Показатели Изменение показателей после воздействия пиявок..

До постановки После 1 постановки После 3 постановки Через 24 часал Через 48 часов л

Свертываемость крови, сек. 339,60 ±2,52 355,80 ± 1,02*** 368,00+ 1,70*** 358,20 ±2,46*** 343,80 ±4,00

СОЭ, мм/ч 1,60 ±0,27 1,40 ±0,27 1,20 ±0,22 1,00 1,40 ±0,27

Гемоглобин, г/л 93,00+1,46 95,60 ± 1,64 96,80 ± 1,71 96,60 ± 1,56 94,40 ± 1,52

Эритроциты, 10|2/л 5,12 ± 0,12 5,44 ±0,11 5,24 ±0,10 5,50 ±0,11 5,24 ±0,14

Лейкоциты, 10% 16,30 ±0,29 14,90 + 0,71 13,04 ±0,47*** 11,60 ±0,31*** 11,50 + 0,20***

Тромбоциты, 109/л 699,201 12,81 646,80 ± 11,70* 560,10 + 22,21*** 634,10 ±8,37** 678,20 ± 15,90

Лейкоформула: Юные, % - - - - -

Палочкоядерные, % 3,00 + 0,31 2,80 + 0,20 2,20 ±0,37 1,40 + 0,24** 1,00***

Сегментоядерные, % 34,60 ±0,51 31,20 + 0,37*** 34,40 ± 0,24 37,60 ±0,24*** 39,80 ±0,37***

Эозинофилы, % 3,60 + 0,24 5,40 + 0,24*** 4,00 ±0,31 2,60 ± 0,40 1,80 ±0,20***

Моноциты,% 11,00 ±0,44 11,60 + 0,51 9,60 ±0,51*** 7,80 ±0,37*** 6,00 ±0,44***

Базофилы, % 9,80 ±0,37 13,80 + 0,38*** 11,60 ±0.24** 7,80 ±0,37** 5,20 ±0,37***

Лимфоциты, % 38,00 ± 0,63 35,20 ±0,80* 38,20 ± 0,73 42,80 + 0,37*** 46,20 ± 0,49***

Общий белок, % 7,91+0,11 7,84 ±0,10 7,84 ±0,10 7,97 ±0,11 796 ±0,11

Альбумины, % 36,70 ± 0,27 40,30 ±0,24*** 43,00 ±0,37*** 40,80 ±0,43*** 38,60 ±0,15***

а - глобулины, % 11,20 + 0,19 10,20 ±0,18** 8,90 ±0,28*** 12,10 ± 0,18** 14,10 + 0,34***

Р - глобулины, % 21,80 ±0,45 20,20 + 0,74 22,50 ± 0,73 24,50 ±0,32** 25,40 + 0,42***

у - глобулины, % 30,26 ±0,51 29,34 ± 0,67 25,60 ±0,54*** 22,60 ±0,49*** 21,80 ±0,33***

Процент фагоцитоза 92,80 + 0,37 95,80 + 0,58** 97,20 ±0,37*** 93,40 ±0,51 89,60 ±0,51***

Фагоцитарный индекс, % 1,08 ±0,004 1,04 + 0,006** 1,03 ±0,004*** 1,07 ±0,006* 1,12 ±0,006**

Бактер. актив, крови,% 74,72 ±0,51 77,02 ± 0,55* 78,48 ±0,34*** . 75,08 ± 0,73 72,56 + 0,44*

Актив, лизоцима, мкг/мл 0,34 ± 0,004 0,36 + 0,004** 0,39 ±0,004*** 0,37 ±0,003*** 0,33 + 0,006

достигает своего максимального значения после трех постановок (Р<0,001) и через 48 часов возвращается к физиологической норме. Это отражается на фагоцитарном индексе, который достоверно понижается после третьей постановки на 4,6% (Р<0,001) и, соответственно, повышается через 48 часов после последнего сеанса гирудотерапии.

Обращает на себя внимание и бактерицидная активность крови" Этот показатель, повышается на 5% (Р<0,001) после третьей постановки, к 48 часам снижается на 2,9% (Р<0,05) по сравнению с таким же показателем до постановки пиявок.

Действие пиявок оказало воздействие и на активность лизоцима, которая повысилась на 14,7% (Р<0,001) после третьего сеанса гирудотерапии, а к 48 часам почти достигла исходного уровня.

Влияние гирудотерапии на биохимические показатели молока больных маститом коров представлены в таблице 7. Происходит значительное увеличение содержания в молоке лейкоцитов после третьей постановки на 14.6% (Р<0,01), а к 48 часам оно снижается на 17,1% (Р<0,01). Кроме этого, сдвигается в щелочную сторону показатель рН, который к 48 часам приходит к норме. Повышается содержание общего белка после третьей постановки на 7,3% (Р<0,001), а через 48 часов уровень общего белка снижается до 3,84 ± 0,02 (Р<0,001).

Повышение содержания общего белка повлияло на процентное соотношение белковых фракций. Так, достоверно снижается количество альбуминов после первой постановки на 4,8% (Р<0,01), после третьей - 9,2% (Р<0,001), через 48 часов - 15,5% (Р<0,001), а - лактоальбуминов после третьей постановки на 7,8% (Р<0,05), через 24 часа - 11,4% (Р<0,01), через 48 часов -10,2% (Р<0,01). Такой показатель, как Р - лактоглобулиновая фракция после первой постановки незначительно снижается, а затем происходит её достоверное повышение к 48 часам на 21,2% (Р<0,001), по сравнению с показателем до постановки пиявок, у - лактоглобулиновая фракция имела обратную тенденцию. Сразу происходило повышение этого показателя на 17,9% (Р<0,001), а затем снижение к 48 часам более чем в 1,5 раза.

Кроме того, в молоке повышается титр лизоцима М на 20,6% (Р<0,001) и активность каталазы в 5 раз после третьей постановки пиявок, а через 48 часов титр лизоцима М увеличивается на 41,6% (Р<0,001). Активность каталазы возрастает более чем в 13,5 раза.

Влияние трудоюрашш на биохимические показатели молока больных мае пи ом коров

1 (оказатели Изменение показателей после воздействия пиявок

До постановки После 1 постановки После 3 пос1ановки Через 24 часа х Через 48 часов *

РН 7,22 ± 0,04 7,32 ± 0,04 7,0610,03*** 6,7410,05*** 6,5210,06***

Соматические клетки, тыс./мл 786,40121,14 850,00 ± 20,06 901,401 16,81** 765,801 17,50 652,001 17,07**

Общий белок, % 4,12 + 0,04 4,2610,05 4,42 + 0,04*** 4,1410,02 3,8410,02***

Альбумины, % 17,00 ±0,14 16,1810,18** 15,4210,18*** 14,6410,14*** 14,3610,17***

а - лакюальбумины, % 15,10 ± 0,31 14,5610,32 13,9210,27* 13,3810,24** 13,5610,07**

(} - лактоглобулины, % 51,6610,18 50,1010,26* 53,9210,12*** 58,0410,22*** 62,6010,24***

у - лактоглобулины, % 16,2410,29 19,16 + 0,31*** 16,7410,15 13,9410,30*** 9,4810,25***

Лизоцим М, мм 13,9810,19 15,4210,25** 16,8610,27*** 18,3010,26*** 19,8010,26***

Активность каталазы, сек. 3,6010,51 7,60 + 0,81** 20,201 1,65*** 28,4011,77*** 50,001 1,30***

Представленный материал дает основание заключить, что под воздействием медицинских пиявок происходит усиление защитных свойств организма коров в целом и молочной железы, в частности.

3.3.3. Влияние гирудоакупунктуры на показатели общей и локальной резистентности здоровых коров

В таблице 8 приведены результаты исследований о влиянии гирудоакупунктуры на клеточные, биохимические и иммунологические показатели крови здоровых коров.

Под влиянием медицинских пиявок происходит кратковременное замедление свертываемости крови уже после первой постановки на 4,8% (Р<0,01), а через 24 часа возвращается почти к исходному уровню.

После гирудоакупунктуры наблюдается кратковременное снижение количества лейкоцитов, которое восстанавливается через 24 часа.

Прослеживается тенденция к уменьшению содержания тромбоцитов в крови после первой постановки на 4,4%, после трех постановок - 17,4% (Р<0,001), а через 24 часам их количество повышается.

Рассматривая лейкоцитарную формулу можно заключить, что после первой постановки пиявок происходит резкое повышение содержания базофилов в 1.5 раза (Р<0,01) и не значительное снижение лимфоцитов на 8% (Р<0,01). По общему белку и белковым фракциям существенных изменений не произошло. Были выявлены изменения по проценту фагоцитоза, который достоверно повысился после первой постановки на 3% (Р<0,001), после трех постановок - 5,4% (Р<0,001), а через 24 часа этот показатель снизился. Одновременно с этим происходит достоверное уменьшение фагоцитарного индекса на 4,7% (Р<0,001), изменяясь в зависимости от процента фагоцитоза. Кроме этого, в крови повышается бактерицидная активность и активность лизоцима, которые достигают своего максимального значения после третьей постановки пиявок и, через 24 часа, понижаются до исходного значения.

В таблице 9 приведены данные по влиянию гирудоакупунктуры на биохимические показатели молока здоровых коров. Показатель рН сдвигается в щелочную сторону уже после первой постановки и возвращается к исходному уровню через 48 часов. После первой постановки в молоке возросло содержание лейкоцитов на 8,3% (Р<0,001), после трех постановок - 16,1% (Р<0,001), а через 24 часа их количество понижается до 212,20 ±1,16 тыс./мл (Р<0,01).

Влияние гирудоакупунктуры на клеточные, биохимические и иммунологические показатели здоровых коров

Изменение показателей после воздействия пиявок

Показатели

Свертываемость крови, сек.

СОЭ, мм/ч

Гемоглобин, г/л

Эритроциты, 10 /л

Лейкоциты,10 /л

Тромбоциты, 10 /л___

Лейкоформула: Юные, %

Палочкоядерные, % Сегментондсрные, % Эозинофилы, %_

Моноциты, % Базофилы, %

Лимфоциты, %

Общий белок, % Альбумины, %

« - глобулины, %

- глобулины, %

у - глобулины, %

Процент фагоцитоза

Фагоцитарный индекс, %

Бактерицидная актив.крови,%

Активность лизоцима, мкг/мл

До постановки

334,80 ±2,06

1,00

98,60 ± 0,60

5,40 ±0,11

12,40 ±0,32

701,40 ± 14,62

0,60 ± 0,24

39,20 ±0,97

2,60 ±0,51

9,00 ± 1,05

5,60 ±0,51

43,00 ±0,71

8,46 ±0,11

49,08 ± 1,83 12^50 ±0,61 14,94 ± 1,57

23,48 ± 1,63

92,80 ± 0,37

1,07 ±0,004

75,42 ± 0,34

0,34 ± 0,004

После 1 постановки

351,00 ± 2,70**

1,60 ±0,24"

101,20 ±0,58*

5,60 + 0,12

11,24 + 0,42

670,40 ± 17,19

1,20 ±0,20

37,40 + 0,51

4,00 ±0,71

9,40 ± 0,40

8,40 ±0,51**

39,60 ±0,40**

8,47 + 0,10

44,86 ± 1,61

13,08 ±0,51

17,58 ±2,13

24,48 ± 1,91_

95,60 ±0,24***

1,04 ±0,002***

77,48 ± 0,46**

0,36 ±0,004**

После 3 постановки 367~80± 2,75***

1,60 ±0,24"

101,80 ± 0,58**

5,46 ±0,12

11,00 ± о,«

579,40 ± 15,39***

0,40 ± 0,24 38,80 + 0,37

4,40 ± 0,67

10,00 ±0,32

6,00 ± 0,55

40,40 ±0,75*

8,35 ±0,08

41,60 ± 1,06** 14,02 ±0,39 19Д)0 ± 2,31

25,38 ± 1,87 _ 97,80 ±0,20*** 1,02 ±0,002***

78,70 ±0,45*** 0,39 ±0,004*"**"

Через 24часа _ 349,40 ±2,23»*

_1,40 ±0,24_

99,80 ±1~~20

5,74 ±0,15_

12,04 ±6.39

645,00 ± 17,06*

0,20 ± 0,20 41,8010,37* 1,80 ±037 9,00 ± 0,45 4^20 ± 0,49

43,00 ± 0,44

__8,40±0,08_

40,06 ± 1,02**_ __]3,46 ±0,36

__17^96 ±2,25 _

28^52 ± 1~61 94,2010,37*** 1,05 ± 0^00-4* __76,50±0,45 _ 0,35 ±0,002**

Влияние гирудоакупунктуры на биохимические показатели молока здоровых коров

Показатели Изменение показателей после воздействия пиявок

До постановки После 1 постановки После 3 постановки Через 24 часа

РН 6,54 ± 0,04 6,80 ±0,03*** 6,64 ± 0,02 6,42 ± 0,02*

Соматические клетки, тыс./мл 202,80 ±2,35 219,60+ 1,47*** 235,40 ± 1,07*** 212,20± 1,16**

Общий белок, % 3,82 ± 0,02 3,98 ±0,04** 4,10 ±0,03*** 390 ± 0,03

Альбумины, % 13,98 + 0,14 13,46 ±0,13* 12,58 ±0,08*** 13,38 ±0,07**

а - лактоальбумины, % 15,18 ±0,22 14,70 ±0,17 14,08 ±0,16** 14,60 ±0,14

Р — лактоглобулины, % 64,64 ±0,17 63,80 + 0,16** 64,68 ± 0,25 65,26 ± 0,25

у - лактоглобулины, % 6,20 ± 0,25 8,04 ± 0,19*** 8,66 ±0,16*** 6,76 ±0,19

Лизоцим М, мм 19,12 + 0,12 21,54 ±0,40*** 22,34+0,29*** 19,96 ±0,18**

Активность каталазы, сек. 367,60 + 7,08 379,80 ± 8,02 393,00 ± 7,00* 375,80 ±6,56

-20В молоке здоровых коров под действием гирудоакупунктуры повышается количество обшего белка после третьей постановки на 7,3% (Р<0,001), титра лизоцима М на 16,8% (Р<0,00П и активность каталазы на 6,9% (Р<0,05). Через 48 часов все эти показатели приходят к своей норме.

При рассмотрении белкового состава сыворотки молока можно отметить изменения. Так, содержание альбумина и а - лактоальбумина понижается после третьей постановки, соответственно, на 10% (Р<0,001) и 7,2% (Р<0.01), а у - лактоглобулиновая фракция, наоборот, повышается почти в 1.5 раза (Р<0.001). Все белковые фракции возвращаются к исходному значению через 24 часа.

Полученные результаты исследований позволяют заключить, что, как гирудотерапия, так и гирудоакупунктура не оказывает отрицательного влияния на цитологические и биохимические показатели крови и молока здоровых коров.

3.3.4. Влияние гирудоакупунктуры на показатели общей и локальной резистентности больных маститом коров

В таблице 10 показано влияние гирудоакупунктуры на клеточные, биохимические и иммунологические показатели больных маститом коров. Происходит достоверное увеличение времени свертывания крови уже после первой постановки на 4,2% (Р<0,01), после третьей - на 6% (Р<0,00Г), через 24 часа - на 3,6% (Р<0,05). На лицо имеется тенденция возвращения показателей к исходному значению, что видно через 48 часов.

Под действием гирудоакупунктуры происходит снижение содержания лейкоцитов и тромбоцитов в крови. Уже после первой постановки количество лейкоцитов уменьшается на 13,6% (Р<0,01), после трех постановок - на 23,4% (Р<0.001), а через 48 часов - на 30,6% (Р<0,001) и, соответственно, тромбоцитов - на 6,4% (Р<0,05), 15,1% (Р<0,01) и 5,8% (Р<0,05).

При изучении лейкоцитарной формулы коров больных маститом, в ней были выявлены достоверные изменения: понижение через 48 часов уровня палочкоядерных лейкоцитов в 3,2 раза (Р<0,001), эозинофилов в 3 раза (Р<0,01), моноцитов и базофилов более чем в 1,5 раза (Р<0,001). Одновременно с этим происходило повышение содержания сегментоядерных лейкоцитов на 7,4% (Р<0,05) и лимфоцитов - на 26,6% (Р<0,001), по сравнению с этими же показателями до постановки пиявок.

Влияние гирудоакупунктуры на клеточные, биохимические и иммунологические показатели больных маститом коров

Показатели Изменение показателей после воздействия пиявок

До постановки После 1 постановки После 3 постановки Через 24 часа 4 Через 48 часов х

Свертываемость крови, сек. 346,40+ 1,69 360,80 ± 2,81** 367,20 ±3,21*** 359,00 ± 3,26* 348,00 ± 2,98

СОЭ, мм/ч 1,40 ±0,24 1,20 + 0,20 1,60 ±0,24 1,60 ±0,24 1,00

Гемоглобин, г/л 92,80 + 3,00 96,40 ± 2,22 99,00 ± 2,82 98,20 ± 1,62 ' 97,80+ 1,49

Эритроциты, 10|2/л 5,50 ± 0,08 5,70 + 0,04 5,90 ±0,08** 5,70 ± 0,04* 5,70 + 0,02

Лейкоциты, 10ч/л 15,70 + 0,43 13,56 ±0,42** 12,20 ±0,26*** 10,84 ±0,25*** 10,90 + 010***

Тромбоциты, 109/л 684,80 + 7,88 641,00+ 13,66* 581.50 ±23,56** 619,50 ± 17,50** 645,10± 13,21*

Лейкоформула: Юные, % - - - - -

Палочкоядерные,% 3,20 ± 0,37 3,20 ±0,20 2,60 ± 0,24 1,40 ±0,24** 1,00***

Сегментоядерные, % 37,60 ±0,51 32,60 + 0,51*** 35,40 ±0,40** 38,60 ± 0,24 40,40 ± 0,67*

Эозинофилы, % 3,80 ± 0,66 5,60 + 0,51 4,00 ± 0,44 1,80 ±0,37* 1,20 ±0,20**

Моноциты, % 10,40 + 0,40 12,80 ±0,37** 11,40 ±0,40 8,20 ±0,37** 6,20 + 0,37***

Базофилы, % 8,20 ± 0,37 13,00 ±0,31*** 11,40 ±0,40*** 7,20 + 0,37 4,60 ±0,60***

Лимфоциты, % 36,80 ± 0,86 32,80+ 1,15* 35,20 ± 0,58 42,80 ±0,58*** 46,60 + 0,24***

Общий белок, % 8,44 ± 0,35 8,29 ± 0,22 8,10± 0,21 8,15 ±0,20 8,15 ±0,18

Альбумины, % 40,82 + 1,02 37,10 + 0,52* 31,80 ±0,46*** 31,30 ±0,55*** 36,40 ±0,66**

а — глобулины, % 11,36 ±0,18 12,90 ±0,22*** 14,70 ±0,32*** 13,70 ±0,49** 12,90 + 0,24***

Р - глобулины, % 15,60 + 0,78 16,80 + 0,61 18,40 ±0,61* 15,90 ±0,41 15,34 + 0,17

у - глобулины, % 32,20 ± 0,81 33,20 ± 0,63 35,00 ±0,56* 39,20 ±0,52*** 35,30 + 0,45*

Процент фагоцитоза 91,80 ±0,37 94,80 + 0,37*** 96,40 + 0,24*** 92,40 ±0,40 88,60 + 0,51***

Фагоцитарный индекс, % 1,09 + 0,004 1,05 ±0,004*** 1,03 ± 0,003*** 1,08 ±0,004 1,13 ±0,006**

Бактер. актив, крови,% 75,90 + 0,29 77,70 ±0,36** 79,20 ±0.28*** 76,90 ± 0,39 74,20 ±0,34**

Актив, лизоцима, мкг/мл 0,35 + 0,004 0,38 ±0,005** 0,42 ± 0,002*** 0,39 ±0,004*** 0,35 ± 0,006

ч л

По такому показателю, как общий белок, существенных изменений не произошло. Однако в белковых фракциях сыворотки крови наблюдаются незначительные изменения. Так, через 48 часов содержание альбумина понижается на 10,8% (Р<0,01), а а - глобулины и у - глобулины, наоборот, повышаются на 13,5% (Р<0,001) и 9,6% (Р<0,05) соответственно.

Также выявлены изменения по проценту фагоцитоза, который достоверно повышался до третьей постановки пиявок и составил 96,40 ± 0,24 (Р>0,999), а через 48 часов снизился до 88,60 ± 0,51 (Р<0,001). Одновременно с этим происходило достоверное уменьшение фагоцитарного индекса после третьей постановки на 5,5% (Р<0,001) и увеличение его через 48 часов, что показывает его зависимость от процента фагоцитоза. Кроме этого, в крови повышается бактерицидная активность крови и уровень лизоцима, которые увеличиваются до третьей постановки пиявок, и снижаются до исходного значения к 48 часам.

В таблице 11 приведены данные по влиянию гирудоакупунктуры на биохимические показатели молока больных скрытым маститом коров. Показано возрастание содержания соматических клеток после трех постановок на 11,9% (Р<0,001), а к 48 часам их количество снижается на 17,4% (Р<0,001), по сравнению с показателем до лечения.

Показатель рН сдвигается в щелочную сторону уже после первой постановки, а к 48 часам доходит до своей физиологической нормы.

В молоке больных маститом коров под действием гирудоакупунктуры повышается количество общего белка после третьей постановки на 6,2% (Р<0,001), а через 48 часов этот показатель снижается до 3,82 ± 0,02 (Р<0,001). Все эти изменения повлияли на соотношение белковых фракций сыворотки молока. Так, достоверно снижается количество альбуминов после третьей постановки на 9,8% (Р<0,001), через 48 часов - 15,3% (Р<0,001), а -лактоальбуминов после третьей постановки на 9,8% (Р<0,01), через 24 часа -12,6% (Р<0,001), а через 48 часов на 10,9% (Р<0,001). Изменяется и уровень Р -лактоглобулиновой фракции, который снижается после первой постановки на 3% (Р<0,01), а затем начинает повышаться и к 48 часам увеличивается на 21,3% (Р<0,001), по сравнению с показателем до постановки пиявок. 7 -лактоглобулиновая фракция имела обратную тенденцию. Её содержание в крови сразу повышается на 19% (Р<0,001), а к 48 часам этот показатель снизился более чем в 1,5 раза.

Кроме этого, в молоке после третьей постановки пиявок повышается титр лизоцима М на 19,1% (Р<0,001), активность каталазы более чем в 5 раз. Через

Iаолица 11

Влияние гирудоакупунктуры на биохимические показатели молока больных маститом коров

Показатели Изменение показателей после воздействия пиявок

До постановки После 1 постановки После 3 постановки Через 24 часа х Через 48 часов л

рН 7,16 ±0,02 7,26 ± 0,02* 7,04 ± 0,02** 6,76 ±0,05*** 6,48 ±0,04***

Соматические клетки,тыс./мл 800,60 ± 11,29 859,60 ± 15,54* 896,00 ± 14,31*** 767,80 ± 15,54 661,40 ± 13,07***

Общий белок, % 4,18 + 0,04 4,32 + 0,04* 4,44 ±0,02*** 4,20 ± 0,03 3,82 + 0,02***

Альбумины, % 16,98 + 0,21 16,26 + 0,31 15,32 + 0,22*** 14,54 + 0,12*** 14,38 + 0,12***

а — лактоальбумины, % 15,22+0,23 14,44 ±0,23 13,72 + 0,24** 13,30 ±0,23*** 13,56 + 0,10***

Р - лактоглобулины, % 51,70 ±0,24 50,14 ±0,27** 53,98 ±0,13*** 57,92 ±0,30*** 62,68 ± 0,26***

у - лактоглобулины, % 16,10 ±0,26 19,16± 0,31*** 16,98 ±0,15* 14,24 ±0,24*** 9,38 ± 0,19***'

Лизоцим М, мм 14,12 ± 0,14 15,22 ±0,23** 16,82 ±0,14*** 18,44 ±0,23*** 20,04 ±0,23***

Активность каталазы, сек. 3,80 ±0,58 9,00 ± 0,70*** 21,20 ± 1,65*** 31,60 ±3,04*** 51,80 ±2,22***

х - после третьей постановки

-2448 часов титр лизоцима М возрастает на 41,9% (Р<0,001), а активность каталазы -более чем в 13,5 раз.

Полученные данные позволяют сделать заключение, что применение медицинских пиявок на биологически активные точки позволяют нормализовать клеточные и биохимические показатели крови и молока, обеспечивающие общие и локальные защитные функции организма.

3.4. Результаты научно-производственных опытов по сравнительному изучению терапевтической эффективности гирудотерапии, гирудоакупунктуры, а также лазеротерапии и лазероакупунктуры при скрытом мастите у коров

Опыты по изучению терапевтической эффективности гирудотерапии и гирудоакупунктуры при скрытом мастите у лактирующих коров проводились в сравнительном аспекте с такими методами, как лазеротерапия и лазероакупунктура. Опыты проведены на 60 лактируюших коровах больных скрытым маститом. Результаты исследования приведены в таблице 12.

Наилучшим терапевтическим эффектом при скрытом мастите у коров обладает гирудоакупунктура. Применение этого метода позволило вылечить из 15 больных животных, у которых было поражено 18 долей вымени, 14 коров и 17 долей, что составляет соответственно 93,3% и 94.4%. При лечении 25 коров больных скрытым маститом методом гирудотерапии выздоровело 23 коровы. Терапевтическая эффективность этого метода составила 92,0%.

Таблица 12

Лечебная эффективность различных методов при скрытом мастите у лактирующих коров

— Метод Подвергнуто лечению Выздоровело

коров долей коров долей

к-во % к-во %

Гирудотерапия 25 25 23 92,0 23 92,0

Гирудоакупунктура 15 18 14 93,3 17 94,4

Лазеротерапия 10 10 9 90,0 9 90,0

Лазероакупунктура 10 12 9 90,0 11 91,6

При применении лазеротерапии на 10 коровах больных маститом выздоровело 9 животных, что составляет 90,0%. А при использовании лазероакупунктуры для лечения 10 коров с 12 пораженными долями вымени выздоровление наступило у 9 коров и 11 долей, при этом ■ лечебная эффективность составила 90% и 91,6% соответственно.

Эффективность применения при лечении мастита у коров гирудотерапии и гирудоакупунктуры показывает, что наиболее экономически эффективным является лечение мастита у коров методом гирудотерапии. На 1 рубль затрат получено прибыли 31,3 рубля, а при использовании гирудоакупунктуры на 1 рубль затрат получено прибыли 15,6 рубля.

Таким образом, лечение мастита у коров с помощью гирудотерапии или гирудоакупунктуры является экономически выгодным мероприятием.

4. Выводы

1. При широком распространении скрытого мастита у коров, достигающего 27,0%, при концентрации животных на ферме 600 - 800 особей, особое значение приобретает разработка экономически безопасных методов лечения, к, которым относится гирудотерапия.

2. Отработаны в эксперименте схемы оптимальных методов гирудотерапии и гирудоакупунктуры при скрытом мастите у коров:

- гирудотерапию проводят путем подсадки 3-х пиявок на кожу больной четверти вымени, при экспозиции 25 - 30 минут, в течение 3-5 дней, с интервалом в 24 часа.

- гирудоакупунктуру проводят путем подсадки на кожу крестца по 3 пиявки с каждой стороны, при экспозиции 25 -30 минут, в течение 3 -5 дней, с интервалом в 24 часа.

3. Гирудотерапия и гирудоакупунктура оказывают активное влияние на организм здоровых коров:

- постановка пиявок на кожу молочной железы сопровождается снижением свертываемости крови на 5,3%,лейкоцитов - на 12,4%, тромбоцитов на 14,8%, активизацией факторов клеточного и гуморального звеньев иммунитета крови (активность лизоцима) на 17,1%, увеличением в молоке уровня соматических клеток на 20,6%, общего белка - на 7,8%,

- постановка пиявок на кожу крестца коров сопровождается снижением свертываемости крови 4,8%, лейкоцитов - на 11,3%, тромбоцитов - на

-2617,4%, активизацией факторов клеточного и гуморального звеньев иммунитета крови (активность лизоцима) на 14,7%, увеличением в молоке уровня соматических клеток на 16,1%. общего белка - на 7,3%,

4. Лечебные механизмы гирудотерапии и гирудоакупунктуры обусловлены активизацией клеточных и гуморальных факторов неспецифической иммунологической резистентности организма:

- при трудотерапии у больных животных свертываемость крови снижается на 8,3%, лейкоцитов - на 20,0%, тромбоцитов - на 19,8%. В крови повышается процент фагоцитоза 4,7%, бактерицидная активность - на 5,0%, лизоцимная активность - на 14,7%. Для молока характерно увеличение уровня лейкоцитов на 14,6%, общего белка - на 7,3%, активности лизоцима М - на 20,6%.

- при гирудоакупунктуре у больных скрытым маститом коров свертываемость крови снижается на 6,0%, количество лейкоцитов - на 23.4%, тромбоцитов - на 15,1%, фагоцитоз возрастает на 5,0%, а гуморальные факторы иммунитета (активность лизоцима) на 20,0%. Для молока характерно мобилизация в него белковых компонентов защитной реакции.

5. Гирудотерапия и гирудоакупунктура не уступают по своей лечебной эффективности лазеротерапии и лазероакупунктуре при лечении скрытого мастита у коров.

6. Производственными испытаниями показано, что гирудотерапия и гирудоакупунктура, обеспечивающими 90,0 - 95,0% лечебного эффекта, являются эффективными фармакологическими средствами в арсенале ветеринарного врача.

7. Экономическими расчетами обоснована реальная возможность и перспективность использования гирудотерапии и гирудоакупунктуры в ветеринарной практике, в частности для лечения скрытого мастита у коров.

5. Практические предложения

5.1. Использование гирудотерапии и гирудоакупунктуры в ветеринарной практике, в частности, для лечения скрытого мастита у коров в ' соответствии с разработанными и апробированными в практике способами (решение о выдаче патента на изобретение от 23.03.2000 г., справок о внедрении от 25.10.2000 г. и 27.10.2000 г.).

-275.2. Использование в учебных курсах ветеринарных и зооинженерных факультетов материалов по гирудотерапии и гирудоакупунктуре на сельскохозяйственных животных (учебное пособие «Морфо-физиологические основы машинного доения и болезни молочной железы» Мичуринск, 1999).

Список опубликованных работ ло теме диссертации

1. Петров А.Н. Гирудотерапия при скрытом мастите у коров И Проблемы и перспективы развития АПК в условиях рыночных отношений. - Часть III. Животноводство и ветеринарная медицина. - Мичуринск. - 1998. -с. 19.

2. Попов Л.К., Петров А.Н. Роль концентрации коров в этиологии мастита // Высшая школа и проблемы научного обеспечения агропромышленного комплекса. Мат. науч. конф. посвященной 275-летию Российской академии наук. - Мичуринск. - Часть II. - 1998. - с. 154.

3. Попов Л.К., Петров А.Н. Показатели локальной защиты молочной железы коров разных генотипов II Актуальные проблемы зоотехнической науки по производству продуктов животноводства. Сб. научных трудов. - Вологда - Молочное. - 1999. - с.32.

4. Попов Л.К., Петров А.Н. Гирудоакупунктура при субклиническом мастите у коров // Ветеринария. - № 10. - 1999. - с. 23 - 24.

5. Попов Л.К., Гордеев A.C., Бузлама B.C., Петров А.Н. Сравнительная оценка гирудотерапии и лазеротерапии при мастите у коров // Теоретические и практические аспекты возникновения и развития болезней животных и защита их здоровья в современных условиях. Международная конф. посвященная 30-летию Всеросс. научно-исследовательского вет. института патологии, фармакологии и терапии РАСХН - Воронеж. - 2000. - с.205 - 206.

ПаТеь? РЯэ кам^еэБ/оете^ие A/Z 2.157-69Ь dnoep^ оъ&г&нил с£-Ь1я.То7<о алаеГыГа. с?

pfioi/3?ОИ0€ лtcf SM,

яо.ю.аобоъ

1.1. Актуальность темы. Борьба с маститом коров является актуальной проблемой ветеринарной науки и практики. По данным Международной молочной ассоциации ежегодно клинической формой мастита переболевает 2% коров, а скрытой - до 50%. Экономический ущерб наносимый маститом молочному скотоводству складывается более чем из 12 категорий убытков. При этом одни из ведущих мест занимают: снижение молочной продуктивности, преждевременная выбраковка животных, ухудшение пищевых и технологических свойств молока, а также затраты на диагностику и лечение (А.П.Солдатов, 1986, 1990; М. (Мила <Я. а1., 1990; Ю.Рубан с соавт., 1991; Г.Родионов, 1991; В.М.Юрков с соавт., 1997).

Для лечения мастита у коров предложено большое количество средств и методов, но они не всегда эффективны, а широкое применение препаратов, содержащих антибиотики и химиотерапевтические средства, привело к образованию лекарственно-устойчивых штаммов микроорганизмов (А.И.Сергиенко с соавт., 1988; В.А.Париков, 1990; Н.И.Полянцев, 1997; Л.К.Попов, 1998;

A.И.Завражнов, Л.К.Попов, 1999).

Кроме того, бессистемное применение антибиотиков и химиотерапевтиче-ских препаратов привело к снижению механизмов естественной резистентности организма животных и способствовало появлению грибковых заболеваний (Г.Ф.Кочан с соавт., 1988; Л.И.Ефанова, 1997; В.М.Юрков с соавт, 1997;

B.И.Рубцов, 1999).

Учитывая, что все, примененное животному, попадает в экологическую систему, включается в неё, и влияет на её жизнеспособность, а затем достигает человека, стала очевидной необходимость принципиально пересмотреть требования к ветеринарным и биологически активным препаратам (В.С.Бузлама, 1997).

Поэтому, изыскание новых экологически чистых и эффективных средств лечения мастита у коров, не обладающих побочным действием на организм жи5 вотных, и не оказывающих влияние на технологические свойства молока является актуальной задачей ветеринарной науки и практики.

Выводы

1. При широком распространении скрытого мастита у коров, достигающего 27,0%, при концентрации животных на ферме 600 - 800 особей, особое значение приобретает разработка экономически безопасных методов лечения, к которым относится гирудотерапия.

2. Отработаны в эксперименте схемы оптимальных методов гирудотера-пии и гирудоакупунктуры при скрытом мастите у коров:

- гирудотерапию проводят путем подсадки 3-х пиявок на кожу больной четверти вымени, при экспозиции 25 -30 минут, в течение 3-5 дней, с интервалом в 24 часа.

- гирудоакупунктуру проводят путем подсадки на кожу крестца по 3 пиявки с каждой стороны, при экспозиции 25 - 30 минут, в течение 3-5 дней, с интервалом в 24 часа.

3. Гирудотерапия и гирудоакупунктура оказывают активное влияние на организм здоровых коров:

- постановка пиявок на кожу молочной железы сопровождается снижением свертываемости крови на 5,3%,лейкоцитов - на 12,4%, тромбоцитов на 14,8%, активизацией факторов клеточного и гуморального звеньев иммунитета крови (активность лизоцима) на 17,1%), увеличением в молоке уровня соматических клеток на 20,6%, общего белка - на 7,8%),

- постановка пиявок на кожу крестца коров сопровождается снижением свертываемости крови 4,8%, лейкоцитов - на 11,3%, тромбоцитов - на 17,4%, активизацией факторов клеточного и гуморального звеньев иммунитета крови (активность лизоцима) на 14,7%, увеличением в молоке уровня соматических клеток на 16,1%, общего белка - на 7,3%,

4. Лечебные механизмы гирудотерапии и гирудоакупунктуры обусловлены активизацией клеточных и гуморальных факторов неспецифической иммунологической резистентности организма:

107

- при гирудотерапии у больных животных свертываемость крови снижается на 8,3%, лейкоцитов - на 20,0%, тромбоцитов - на 19,8%. В крови повышается процент фагоцитоза 4,7%, бактерицидная активность - на 5,0%, лизоцимная активность - на 14,7%. Для молока характерно увеличение уровня лейкоцитов на 14,6%, общего белка - на 7,3%, активности лизоцима М - на 20,6%.

- при гирудоакупунктуре у больных скрытым маститом коров свертываемость крови снижается на 6,0%, количество лейкоцитов - на 23,4%, тромбоцитов - на 15,1%, фагоцитоз возрастает на 5,0%, а гуморальные факторы иммунитета (активность лизоцима) на 20,0%. Для молока характерно мобилизация в него белковых компонентов защитной реакции.

5. Гирудотерапия и гирудоакупунктура не уступают по своей лечебной эффективности лазеротерапии и лазероакупунктуре при лечении скрытого мастита у коров.

6. Производственными испытаниями показано, что гирудотерапия и гирудоакупунктура, обеспечивающими 90,0 - 95,0% лечебного эффекта, являются эффективными фармакологическими средствами в арсенале ветеринарного врача.

7. Экономическими расчетами обоснована реальная возможность и перспективность использования гирудотерапии и гирудоакупунктуры в ветеринарной практике, в частности для лечения скрытого мастита у коров.

108

Практические предложения

1. Использование гирудотерапии и гирудоакупунктуры в ветеринарной практике, в частности, для лечения скрытого мастита у коров в соответствии с разработанными и апробированными в практике способами (решение о выдаче патента на изобретение от 23.03.2000 г., справок о внедрении от 25.10.2000 г. и 27.10.2000 г.).

2. Использование в учебных курсах ветеринарных и зооинженерных факультетов материалов по гирудотерапии и гирудоакупунктуре на сельскохозяйственных животных (учебное пособие «Морфо-физиологические основы машинного доения и болезни молочной железы» Мичуринск, 1999).

109