Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Применение иммуномодуляторов при сальмонеллезе телят

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Московская ордена Трудового Красного знамени ветеринарная академия имени К.И.Скрябина

На правах рукописи ОКПАТТАХ Годвин Агбеко Куджо

ПРИМЕНЕНИЕ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ ПРИ САЛЬМОНЕЛЛЕЗЕ ТЕЛЯТ

16.00.03 - ветеринарная микробиология,вирусология, эпизоотология,микология и иммунология.

Автореферат диссертации на соскаиие ученой степени кандидата ветеринарных наук

Москва 1992

Работа выполнена в Московской ордена Трудового Красного знамени ветеринарной академии им. К.И.Скрябина

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор, ВОРОНИН Е.С.

Официальные оппоненты:

1. Доктор ветеринарных наук, профессор, ТАТАРИНЦЕВ Н.Т.

2. Кандидат ветеринарных наук, ст.н.сотр., БУЛАШНА М.В.

Ведущая организация: Всероссийский орДена Ленина научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р.Коваленко.

Защита состоится "/Г" 1993 г. в /ужасов

на заседании специализированного совета К 120.35.05 по защите диссертации на соскание ученой степени кандидата наук в Московской орцена Трудового Красного знамени ветеринарной академии им. К.И.Скрябина ( 109472, Москва, ул. Академика Скрябина, 23. Тел.377-93-83 ).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии.

Автореферат разослан

Ученый секретарь специплиаировонного совета

ФЕДОСЕЕВА Т.Н.

'©бШ.^тсйн^я

бИЕЛЙСПЁК^ 0БЩАЯ штшсшк РАБОТЫ

Актуальность темы. В настоящее время во всех странах,в той числе и на Африканской континенте,сальионеллез животных распространен, повсеместно (К.Б.Бияшев,Н.Н.Ахметсадыков,1991; Ы.С.Жаков,В.С. Прудников,1988 и др.) и наносит миллионные убытки хозяйствам (С.И. Загаевский,С.ЛДорницкий,1977).Продукты убоя,молоко и яйца больных иивотьих и птиц и сальмонеллоносителей при недостаточной тепловой обработке могут вызывать пищевые токсикоинфекции у людей (Bradford P., 1979i Ая Ak* Robertson, 1983 ).

Применяемые меры борьбы с сальмонеллезом животных не всегда дают желаемый результат.Для профилактики сальмонеллеза используют убитые и живые вакцины,но существующая система иммунопрофилактики не во всех случаях обеспечивает достаточно надежную защиту.Случаи заболеваний среди привитых продолжают иметь место,так как при.проведении прививок в уплотненные сроки возможно развитие в организме телят иымунодепрессивных процессов ( Э.Н.Шляхов и др.,1988; Г.А. • Красников и Др.,1989).

Это подтверждает целесообразность разработки и внедрения таких препаратов,которые были бы достаточно эффективными,экологически чистыми, экономичными,безвредными для животных и человека (Р.В.Петров, 1986). .

Роем этим требованиям отвечают препараты тимуса и костного мозга (Т-активин и В-активин),разработка и применение которых успешно ведется в медицине.В ветеринарии эти исследования незначительны. Кроне коррекции нарушений антиинфекционных механизмов защиты и повышения эффективности антибактериальной терапии,иммуномодудяторы Ти В-активин могут оказаться весьма ценными для усиления специфической иммунотерапии и иммунопрофилактики (В.Я.Арион,19е11,19в2,19с.?).

Таким образом.разработка целенаправленной тмунокоррокцац и

- г -

повышения иммуногенности вакцины против сальмонеллеза телят иммуно-модуляторами продиктована объективной необходимостью.

Цель и задачи исследований. Изложенные выше факты послужили основанием к изучению возможности использования имыуномодулирующих препаратов Т- и В-активин при сальмонеллезе телят.В связи с этим предстояло решить следующие вопросы:

1. Изучить действие иммуномодудяторов при экспериментальном сальмонеллезе на лабораторных животных.

2. Изучить действие иммуномодудяторов при совместном применении с противосальмонеллезной вакциной на лабораторных животных и телятах. ' • .

3. Разработать оптимальную схему иммунизации телят против сальмонеллеза при одновременном использовании вакцины и иммуномо-дулирующего препарата.

Научная новизна. Впервые установлены защитные свойства Т- и В-активина при экспериментальном сальмонеллезе мышей.Установлено усиление антигенной и иммуногенной активности концентрированной формолквасцовой вакцины против сальмонеллеза телят при совместном применении с иммуномодуляторами ( Т- и В-активин).

Практическая ценность. Введение телятам Т- и В-активина при проведении вакцинации против сальмонеллеза позволяет резко повысить имыуногенность вакцины.

Апробация результатов исследований. Основные положения диссер тации доложены на отчетных научных конференциях сотрудников Московской ветеринарной академии в 1990,1991 и 1992 г.г.

Публикации результатов исследований..По материалам диссертации опубликована I статья.

Г 'ъеы и структура диссертации. Диссертация объемом 127 страниц машинописного текста состоит из введения,обзора литературы, собственных исследований,обсуждения полученных результатов,выводов,

практических предложений,списка литературы и приложения.

Список литературы включает 192 источника,в том числе зарубежных авторов.Работа иллюстрирована 21 таблицами. ■

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материал и методы исследования

Работа выполнено в 1990-1992 г.г. в лаборатории болезней молодняка сельскохозяйственных животных Московской ветеринарной академии иы.К.И.Скрябина и в учебном хозяйстве ИВА "Леоновское" Восчресенс-' кого района.

■ Предварительно определяли минимальную летальную дозу (МЛД) суточной (даровой ) культуры сальмонелл ( З.Ъур^тигЬш ) Из штамма № 1433,которая вызывала 100^-ную гибель мышей.

' Первую серию опытов проводили на белых мышах с целью изучения эффективности иымуномодуляторов Т- и В-активина при экспериментальном сальмонеллезе при их раздельном использовании.Опыты проводили в двух схемах.В первой схеме было подобрано 45 мышей линии ВМ-В с массой 16-18 г.Ыыши были разбиты на 3 группы по 15 каждой.

Первая гру|!па мышей получала В-активин подкожно в дозе 0,1 мл на одну мышь .'Вторая группа мышей получала Т-активии подкожно в дозе 0,1 мл на одну ыышь.Иммуномодуляторы вводили в течение трех дней подряд.Третья группа мышей - контрольная.Нишам вводили физиологический раствор в дозе 0,2 мл..

Спустя три дня у всех мышей из трех групп воспроизводили экспериментальный сальмонелл?! МЛД суточной (агаровой) культурой сальмонелл внутрибрюшинно.

Во второй схеме опытов по раздельному использованию нимуномо-дуляторов при экспериментальной сальиэнеллезе мышей цроылилл на 30 ишшхЛишей разбили на 5 группы по 10 а каждой Лидам иьодллн

вчутрибрюшинно МДЦ суточной (агаровой) культуру сальмонелл; через 6 часов после заражения мышам первой группы ввели подкожно В-активин,

мышам второй группы ввели Т-активин.Иммуномодуляторы вводили в течение I

!

трех дней, по 0,1 мл на одну мышь.Третья группа мышей получала физио- ! логической раствор в дозе 0,2 мл. За мышами наблюдали 10 дней.Погибших | мышей подвергали вскрытию.

Вторая серия опытов была проведена на 59 мышах линии ВА£В с массой 16-18 г с целью изучения эффективности совместного введения иммуномоду- 1 ляторов Т- и В-активина при экспериментальном сальмонеллезе мышей. 15 мышей служили контролем.

Подопытным животным й течение трех дней подряд вводили подкожно препараты Т- и В-активин по 0,1 мл. Шшам контрольной группы вводили 0,2 мл физиологического раствора. По истечении трех суток все мыши . были заражены МДЦ суточной (агаровой) культурой.сальмонелл внутрибршич нно. За мышами наблюдали 10 дней. Погибших в течение этого времени мышей подвергали вскрытию с целью взятия отпечатков селезенки и проведения бактериологического исследования.

Для изучения возможности стимуляции препаратами Т- и В-активином противосальмонеллезного специфического иммунитета было подобрано 80 мышей линии ВА4В с массой 16-18 г. Мыши были разбиты на 5 групп по 16 в каждой. Предварительно определяли МЛД суточной культуры, сальмонелл из штамма № 1433, которая вызвала 1005£-ную гибель мышей в течение 10 дней. Она составила 6 млн микробных клеток. Также определяли минимальную дозу концентрированной формолквасцовой вакцины против сальмонеллеза крупного■рогатого скота, изготовленной Омской биофабрикой, обусловливанию" устойчивость мышей к МДЦ сальмонелл (0,02 мл/гол.).

I-я группа мышей получала по 0,1 -мл Т- и В-активина подкожно на одну м1 ъ в течение трех дней.

II-я группа мьппей получала Т- и В-активина подкожно по 0,1 мл

на одну мышь в течение трех дней и в первый день совместно с препаратами мышей,однократно иммунизировали вакциной в дозе 0,01 мл.

111-я группа мышей получала подкожно Т-активин и В-активин по 0,1 ил на одну мышь в течение трех дней и двукратно иммунизировали мышей вакциной ( 0,01 мл первично,вторично через 7 дней в дозе 0,02 мл).

I '-я группа мышей была иммунизирована двукратно,как выше описано.

У-я группа мышей получала физиологический равтвор.

Спустя 18 дней у всех мышей воспроизводили экспериментальный сальмонеллез.Погибших и вынужденно убитых мышей подвергали вскрытию. Вскрытие производили по три мыши от каждой группы - на 5, II, 18, 25 и 33 сутки.

Мазки-отпечатки делали с рассеченной поверхности селезенки, окраску проводили по Романовскому-Гимза.В каждой препарате на 5-10 полях зрения микроскопа подсчитывали общее висло клеток (около 300-500):лимфоциты,нейтрофилы,моноциты,зозинофилы и большие базофыль-ные клетки с бластной структурой ядра.

В третьей серии опытов использовали 24 теленка черно-пестрой породы в возрасте 10-12 дней.Телята для проведения опыта подбирались по принципу аналогов и были разделены на б групп по 4 животных в каждой. •

Всех животных иммунизировали согласно действующему наставлению концентрированной формолквасцовой вакциной против сальмонедле-

за телят,первично в возрасте 10 дней в дозе I мл,вторично через ?

«

дней в возрасте 17 дней в «озе 1,5 мл,кроме четвертой группы,где иммунизацию проводили однократно, в дозе I мл.Телятам перьо«! грушш вводили Т-активин по I мл после первой иммунизации и в иосдедуьаде два дня.Телятам второй группы вводили по аналогичной схеме В-нктиьии

I) дозе 3 мг.В третьей и четвертой группах телятам.одновременно вводили Т- и В-активин в вышеуказанных дозах три дня подряд.Телятам пятой группы вводили только иммуномодуляторы.Животным шестой группы не вводили иьмуномодуляторы.

Для специальных исследований у телят брали кровь,стабилизировала ее для определения количества лейкоцитов,определения факторов клеточного иммунитета (фагоцитарной активности,Т- и В-лимфоцитов), бактерицидной и лизоцимной активности,иммуноглобулинов,а также титров противосальмонеллезных агглютининов.

Для выделения лимфоцитов из периферической крови телят применяли метод фракционировайия крови.основанный на различной скорости седиментации клеток крови в градиенте плотности перкола с плотностью 1,058 г/мл (Кондрахин И.П. и др.,1985;Цымбал A.M.,1983).

Выделение лимфоцитов проводили центрифугированием на градиенте плотности перкола.Для отмывания и ресуспендирования лимфоцитов использовали среду № 199 с pH 7,2.С целью освобождения суспензии лимфоцитов от аутологичных эритроцитов ее обрабатывали дистиллированной водой.В работе использовали свежие или хранившиеся не более 5> дней в растворе Олсвера эритроциты барана.

Абсолютное содержание Т- и B-лимфоцитов в I литре -крови выводили по формуле: А х В х С

1000 '

где А - количество лейкоцитов в I литре крови; В г процент лимфоцитов в исходной крови; С - процент лимфоцитов,образующих розетки.

Определение фагоцитароной активности нейтрофилов крови,содержание лизоцима,иммуноглобулинов М и 6 классов в сыворотке крови,а также ее бактерицидную активность проводили по методам,описанным в и-^тоди чских рекомендациях Ёмельяненко H.A. ( 1980 ).

В качестве тест-микроба использовали взвесь суточной культуры ".coll ,штамм 817,полученнук из Всесоюзного научно-исследовательс-

?

кого института экспериментальной ветеринарии,в концентрации 500 илн. клеток бактерий при определении фагоцитарной активности нейг-рофилов в 2,5 млрд. взвесь £ I ил физиологического раствора цаС1 при определении бактерицидной активности сыворотки крови.Для определения дизоцима использовали ацетоновый порошок из клетов стенок М1огоооссив 1увос1е1к1;1сив.

Слределение уровня антител к сальыонеллезно;../ антигену проводили в реакции РИГА с помощью коммерческого О-эритроцитарного саль-ыонеллезного диагностикума.

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 2.2.1. Эффективность иьмуномодуляторов при их раздельной введении при экспериментальной салы.онеллезе мышей.

Применение иыыуноиодуляторов ( Т- и В-активин) раздельно способствовало повышению неспецифической резистентности иышей к экспериментальному сальмонеллезу.При введении В-акгивина профилактическая эффективность составила 86,7%; при ¿ведении Т-активина -73',В контрольна группе погиоли все мыши.

Применение иммуноиодуляюров раздельно через б часов пг"ле заражения s.typhlmuгluш уакяе оказало протекгивное действие .Так, при введении В-активина процент защищенности составил 80>.При введении Т-активина - 60^.

и органах иммунной системы мышей после иведвния тмуноюдулято-ров развивались.иммуноморфологические изменения,свидетельствующие о повышении неспецифического противосальмонеллеэного иммунитета. Патологоанатомические изменении,характерные для септической формы салььонеллеза,

Таким образом.введение т.муномодулнторов обесиечиьивт висикую профилактическую ъ.1; активность прл эксперимент алыом са-им лю.-ьн.-.ю мишей,но лучший эффект достигаете)! при их рин.н* иримиккил.

•

2.2.2. Эффективность совместного введения иммуномодуляторов■ при экспериментальном сальмонеллезе мышей.

После введения иммуномодуляторов и с последующим заражением мылой сальмонеллами в опытной группе из 44 мышей до конца опыта' (10 дней) выжили 40 ( 90,9% ). В контрольной группе, где не применяли иммуномодуляторы после проведенного экспериментального заражения культурой возбудителя сальмонеллеза все мыши заболели с клиническими признаками, характерными для этого заболевания, и мыши пали на 2-е сутки. При вскрытии наблюдали Патологоанатомические изменения, выражающиеся в катаральном воспалении слизистой оболочки желудка, тонкого .и толстого кишечника, увеличении печени и окраски ее в серова-то-гнилистый цвет, увеличении селезенки в 2-4 раза с характерным томно-красным цветом. При цитологии мазков отпечатков селезенки отмечали уменьшение количества лимфоцитов, плазмобластов.

Цитологические исследование мазков-отпечатков с рассеченной ' погорхности селезенки опытной группы мышей показало различное действие препаратов. Уже на 3-й сутки происходило увеличение количества клеток плазматического ряда, в том числе, базофильных плазмобластов.

•При вскрытии милей на 10-й день опыта видимых изменений, хара-кторплс для оальмонеллепа, мы не обнаружили. Цитология отпечатков показала нормалкляциэт морфологических данных:, лимфондных клеток с баз^филйными грохот вами цитоплазмы подержали четко различимые нуклсол*'

Таким образом, введение Т- и Б-активина обеспечивало гысокую г.; ^илчктическуо оф^екткрность при гксперимгнтялыюм <\ч.т>:.'онеллезе

2.2.3. Влилчкп Т-зкткркня и В-лкткяина на г.ротл'мгчльмонеллезш й'с/унятгт у ум г-Я.

.ЧП".'ГГ р' •Т.л.ЧГ/~ '/\rVVH "[.улят": О п РЯЯДРЛМГ! !■ ..«•,■>,•!••> Г гаКм1*НЛч

Прг>ТН& Сп."<уонелцеу>- уIV. О'Г& цхапхег-о- СШЪ Г4У-ЧЧ-Г

ные степени эффективности препаратов.

Эффективность совместного введения Т- и В-активина мышам первой группы и противосальмолеллезной вакциной мышам четвертой группы была одинакова и составила 75^.Наибольшей эффективностью обладали Т- и В-активин,введенные совместно с вакциной,которые предохраняли от гибели 100^ мышей второй и третьей групп.

После проведения заражения все невакцинированные мыши первой и пятой групп заболели,наблюдалось снижение аппетита,мыши стали малоподвижными,четыре из каждой группы пали.При патологоанатомичес-ком вскрытии у них обнаруживались патологоанатомические изменения, характерные для'сальмонеллеза.

У вакцинированных без применения иынуноь.одуляторов мышей-отмечалось угнетение. '

Динамика клеточных показателей селезенки белых мышей показала, что стимуляция клеточных факторов иммунитета в группах резко отличаются.Так на пятый день после начала опыта количество базофильных клеток с бластной структурой ядра у мышей первой,второй и третьей

групп увеличилось в 6-9 раз,что статистически достоверно,а в чет-

,_не,

вертой и пятой группах аналогичное увеличение наблюдалось (р< 0,05). £ь;сокий уровень базофильных клеток с бластной структурой ядра сохранялся до конца опыта у мышей,которым назначали икмуномодуляторы и вакцину совместно..

На пятый день опыта наблюдалась тенденция к увеличению числа нейтрофилов.Пик увеличения в первой и второй группах приходился на 13-е сутки,а в третье:! и четвертой группах на 25-е сутки ( в 5-10 раз выие показателей контрольной группы).Возрастание числа эозино-фплов наблюдалось в основном на 18-е и 25-е сутки опыта и было в 2 раоа о'олые,чеи соответствующие данные в контрольной группе.

В ¡:с(;к..:е дик поили ¿зедеп,. .препаратов Т- а 3-акг;;яиаа у ».в-ц,е,; по;;,пйепя зторой •«. третье»: групп огкечел* лпк^кпты с Оасо-

фильным темно-синим ободкам.цитоплазмы и светлым ядром,а среди нейтрофилов - большое количество палочкоядерных.

Таким образом,Т- и В-активин способствовали повышению эффективности иммунизации мышей вакциной против салышнеллеза крупного рогатого скота,усилению иммунологической реакции селезенки,что характерно для специфической фазы иммунитета.Наилучшие результаты были получены при введении Т- и В-активина совместно с вакциной.

2.2Л. Влияние Т- и В-активина на противосальмонеллез-ний иммунитет у телят.

Применение вакцины одновременно и раздельно с иммуномодулято-рами Т- и В-активином не вызывало осложнений у животных.На следующий день после иммунизации у всех телят на месте инъекции наблюдали некоторую припухлость,но это не отражалось на их общем состоянии.

При количественном изучении лимфоцитов установлено,что более. • заметные показатели изменения происходят только в популяции Е-ро-зеткообразующих клеток.В 17-ти дневном возрасте количество Т-лимфо-цитов возрастало во всех группах.У телм Ш-й подопытной группы на 24-е сутки их количество значительно увеличилось и составило Г8,0 - 1,08 "¡я против исходных показателей ( 30,5 £ 1,70 %).Увеличение количества Т-лимфоцитов в остальных группах было-незначительно.К 31-му дню количество Т-клеток 1-й группы достигало 61,5 * 2,25$ . У телят Ш-й группы их количество сохранилось на высоком уровне и составило 67,25 1 1,37 ^,что достоверно ( р< 0,05 ) превосходит аналогичные показатели У1-й группы телят ( 49,75 * 3,37 ) в указанные сроки.Количество Т-лимфоцитов у телят П-й,ХУ-Л и У-й групп на 51-е сутки не отличалось от данных,зафиксированных на 24-е сутки.

Количество В-ликфои«тов на протяжении всего опита в разных группах изменилось незначительно.Несютря а это,у телят Ш-й и IV-!! груш: их количество достоверно увеличивается на 17-е .1 24-е

сутки ( 39,25 ± 1,25; 44,25 * 1,49 и 36,25 * 1,10; 41,5 i 1,44) соответственно.

Данные,полученные после определения фагоцитарной активности, показывают,что увеличение процента фагоцитоза )! фагоцитарного индекса происходит во всех группах,причем это увеличение больше проявлялось у велят,которым вводили вакцину с иммуномодуляторами ( Т- и В-активином ) совместно.Среди показателей фагоцитарной активности, нейтрфилов крови процент фагоцитоза в различных группах,кроме Ш-й и 1У-й групп,в течение опыта не имели статистически достоверных из- -менений,хотя к 31-му дню отмечались высокие значения.Так,у телят 1-й группы процент фагоцитоза составил 82,0 i 1,82; у телят П-й группы - 82,0 i 1,82 и у телят У-й и 1У-Й групп - 71,5 i 2,75 и -80,25 * 0,85 соответственно.'

• Процент фагоцитоза у телят.третьей и четвертой групп после совместного введения имыуномодуляторов и иммунизации вакциной против сальмонеллеэа достоверно увеличивался на 24-е и 31-е сутки и составил у телят Ш-й группы 87,25 * 1,10 и 98,5 1,70 соответственно; у телят 1У-Й группы - 80,0 1 0,81 и 91,25 1 2,28 соответственно.

С помощью реакции пассивной гемагглютинации установлено,что в сыворотке крови телят перед иммунизацией вакцинай против сальмонел-леза телят агглютинины находились в низких концентрациях ( 1:50 ).

В 17-ти дневном возрасте было отмечено повышение титров агглютининов у разных групп животных.Так в 1-й,П-й и У-й группах они повысились до 1:62,5 i 12,5; 1:75 i 14,43 и 1:62,5 * 12,5 соответственно. У телят Ш-ей и 1У-й групп титры агглютининов повысились до 1:150 - 28,65 и 1:112,6 * 31,45 соответственно.

На 24-е и-31-е сутки отмечается дальнейшее нарастание титров агглютининов.Более заметно оно происходит на 31-е сутки у телят Ш-ей и 1У-И групп,получивших и В-активин совместно при вакцинации' двукратно и однократно и составлял 1:600 ± 115,47 и 1:500 i юо

соответственно.

На 43-и сутки в разных группах наблюдали тенденцию к снижению концентрации агглютининов.

Определение содержания иммуноглобулинов в сыворотке.крови телят подопытных групп показало,что количество отдельных клр^сов иммуноглобулинов изменяется неравномерно.Наибольшие изменения были установлены в. содержании ад .В 17-ти дневном возрасте у животных 1-й группы,получавших Т-активин,оно возросло от 12,0 - 0,40 ыг/ил до 13,25 * 0,25 мг/мл,у телят П-Й группы,получивших В-активин,от 11,75 * 0,47 кг/мл до 12,5 * 0,28 мг/мл; Т- и В-активин при двукратной иммунизации - от 12,0 * 0,57 мг/мл до 14,25 - 0,25 мг/мл; Т- и В-активин при однократной иммунизации - от 12,0 * 0,0 мг/мл до 13,0 * 0,57 мг/мл, и только вакцину - от 11,75 * 0,47 мг/мл до 12,5 * 0,50 мг/мл.Повышение содержания класса сохранялось и на 24-е и 31-е сутки.На 43-й день отмечен спад содержания класса в У-й и У1-й группах,при этом у животных Ш-й и 1У-й групп содержание иммуноглобулинов класса 6 сохранялось на высокой уровне ( 14,25 1 0,25 мг/>..л и 13,0 * 0,0 иг/мл) соответственно,что статистически достоверно. '

Существенных изменений в содержании у разных групп телят после иммунизации и введения иммуномодуляторов не отмечено.Так на 2м-е сутки у телят 1-й группы содержание класса достигало 2,25 * 0,25 мг/ыл против исходных значений 1,75 ± 0,25 мг/мл; у телят П-й группы - 2,25 ± 0,25 против 1,5 * 0,28 мг/мл; у телят

IV-й группы - 2,25 * 0,25 мг/мл против 2,0 * 0,40 мг/ыл; у телят

V-й группы - 2,5 ± 0,28 мг/мл против 1,75 1 0,25 мг/мл. Однако у животных Ш-й группы содержание 1вМ достигало 3,0 * 0,40 мг/ы. против своего исходного показателя 1,75 * 0,25 мг/мл,что достоверно различается.Этот уровень сохраняется до 31-го' дня.

Анализ данных, полученных после определения содержания лизоцима в сыворотке крови телят, показал, что количество лизоцима у телят разных групп снизилась на 17, 24 и 31-е сутки. Однако было установлено, Что количество лизоцима у телят, получивших Т- и В-активкн совместно после иммунизации, снизилось быстрее других групп. Так, например, на 24-е сутки у телят Ш группы оно составило 5ф,5 + 0,95 мкг/мл относительно исходных показателей ( 67,5 + 1,32 мкг/мл ), тогда как в группе телят, которой вводили только вакцину, количество лизоцима составило 59,0 + 1,58 мкг/мл относительно исходных данных ( 64,25 + 2,28 мкг/мл .). ' •

Бактерицидная активность сыворотки крови телят разных групп имела тенденцию к увеличению на 17-е' сутки. Ка 24-е сутки наблюдалось дальнейшее её повышение, особенно' в группе телят, где применяли иммуномодуляторы совместно с двухкратным введением вакцины ( бактерицидная активность сыворотки достигает 49,25 + 1,93$, что статистически достоверно ). Достоверное повышение бактерицидной активности сыворотки крови наблюдалось также у телят П группы, которым вводили Т- и В-активин совместно, но с однократным введением вакцины - С 43,25 + 1,93$ и 45,75 + 0,47 ) соответственно.

К 31-му дни отмечался некоторый спад бактерицидной активности у разных групп телкт, но у животных Ш группы она сохранилась на икс оком уровне ( 49,0 + 0,407* ), что статистически достоверно относительно исходных данных (41,75 + 0,62$ ).

IIя 43-Я день установлено понижение бактерицидной активности у лсех групп до исходных показателе"!, кроме телят И группы, где (¡льтвркцгкная актцрноеть била ниже исходной ( 35,25 + 3,43? что стп?1!ст!:ч.5с:ч; ьедог. огерно.

Полученные нам- данные свидетельствуют о том, что после ■ введения иммуномодуляторов и вакцины, наряду с активизацией клеточных факторов иммунитета, наблюдается усиление факторов гуморального иммунитета, что подтверждается нарастанием титра • специфических антител в сыворотке крови телят, особе>'чо у жи -•зотных, получивших Т - и В- активи н совместно с вакциной.

Таким образом, проведенные нами исследования показали, что после заражения мышей, получивших иымуномодуляторы, уже на 3-й сутки 'происходит увеличение количества клеток плазматического ряда, в том числе, базофильных плазмобластов. При цитологии мазков-отпечатков селезенки мышей контрольной группы отмечали уменьшение количества лимфоцитов, плазмобластов. Полученные данные свидетельствуют об иммунной перестроРке организма, что согласуется с результатами ряда исследователей (Лиццер Д.П. >. др., 1988; Линдер Д.П. и др., 1985).

Иммунокодуляторы Т- и В-активин способствуют увеличению числа базофильных клеток с властной структурой ядра в селезенке мышей на 5-е сутки после их введения с'вакциной против сальмоне-ллеза телят, кроме того, среди нейтрофилов наблюдалось большое количество палочкоядерных, что подтверждает усиление иммуно-. логической реакции селезенки на вводимые препарату.

Т- и В-активин способствуют повышению эффективности иммунизации телят вакциной против сальмонеллеза телят. Наилучшие результаты были получены при введении Т- и В-активина совместно при двукратной иммунизации телят.

Применение иммуномодуляторов раздельно, также показало увеличение Т-клеток. Динамика изменения количества В-лимфоцитов на протяжении всего оьыта показывала незначительное изменение количества В-лимфоцитов, за исключением телят, у которых вводили им-мунонод,.,яторн совместно при чкмуниэации.

Фагоцитарная активность нейтрофилов крови телят., особенно получивших иммуномодуляторы совместно при вакцинации была высокой.

Было отмечено повышение титров агглютининов у телят, получавших иммуномодуляторы совместно, в 2-3 раза выше, чем у телят других групп. Но при этом достоверное различие наблюдалось только у телят третьтей группы. Содержнние иммуноглобулинов 0 и М изменяется неравномерно,Наибольшие изменения были усыновлены в содержании 1в<3 класса, Т- и В-активин способствуют повышению класса при их применении с вакциной. В сыворотке крови в ответ на введение иммуномодуляторов и вакцины усилилась бактерицидная активность. Относительно содержания лизоцима, в отличие от других факторов иммунной систему, нами бкло отмечено, что на введение иммуномодуляторов и вакцины против сальмонёлл<?за телят происходит его стгажение на протяжении всего.опыта.

Полученные нами данные позволяют сделать вывод о том, что иммуномодуляторы Т- и В-активин способствуют корегкрованию угнетенных звеньев иммунной системы при сэльмонеллезе и повышению кммуно-генних своГств вакцины против сальмонеллеза крупного рогатого скота.

3. вывдцы ,

I. Установлена профилактическая эффективность после применения Т- и В-активина раздельно и в комплексг ари экспериментальном сальмонеллеяе мышей. Выявлена 86,7^-нап эффективность при применении В-активина, при применении Т-актнгпна - 73, 4^-ная эффективность, при применении Т- и В-активина в комплексе - 90,9#-ная _ эффективность; в контрольной группе погибли все мыши.

2. Применение иммуностимулирующих препаратов (Т- и В-активина «ерез 6 часол после заражения в-^»»«ницитакже оказало протективное деГ'Стм:е (В-ог-.тквки - 80?, Т-актлрин - 60?), но лучшие эффект

достигается при ранне»■ их применении.

3. Наибольшая профилактическая эффективность при экспериментальном сальмонеллезе мышей достигнута при совместном введении иммуномодуляторов и вакцины. При введении одной вакцины эффективность составила 75%, при введении ичмуномодулят~ров

и вакцины - 100%.

4. При.введении иммуномодуляторов и вакцины при экспериментальном сальмонеллезе мышей иммунная перестройка в организме проявлялась в увеличений количества базофильных клеток с бластной структурой ядра, клеток плазматического ряда и базофильных плазмобластов селезенки.

5. В крови телят при совместном введении иммуномодуляторов

и вакцины увеличивается количество Т- и В- лимфоцитов, повышается , фагоцитарная активность, увеличивается содержание иммуноглобулинов % класса до 14,25 + 0,25 мг/мл, титр противосальмонеллезных агглютининов достигает 1:600 + 155,47, усиливается бактерицидная активность до 49,25 + 1,93%, снижается содержание лизоцима до 56,5 + 0,95 мкг/мл.

4. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ЕЫВОДОВ

1. При профилактике сальмонеллезов телят следует прменять наряду с другими средствами Т-активин и В-активин.

2. Для повышения иммуногенности используемых в ветеринарной практике противосальмонеллезных вакцин их необходимо применять совместно с Т-активином и В-активином.

5. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

I. Окпаттах Г.А..;., Воронин Е.С. Эффективность иммуномодуляторов при сальмонеллезе белых мышей//Новое в диагностике, лечении

и профилпк чке болезней молодняка сельскохяйственных животных: Сб.науч. тр./Моск. вет. акад. м. к.И.Скрябина,1991. -С.32-33.

Подписано в печать 21.Ш. 1992 г. Зак. 700«. Ооршт 60x8-1/16. Тлр. 100.

Москва* Тлаография РАСХЛ»