Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Патоморфологические и биохимические изменения при криптоспоридиозе у новорожденных поросят

На правах рукописи

РЕШЕТНИКОВА ТАТЬЯНА ИВАНОВНА

ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПРИ КРИПТОСПОРИДИОЗЕ У НОВОРОЖДЕННЫХ ПОРОСЯТ

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Саранск 2004

Работа выполнена на кафедре анатомии домашних животных и биологии Ижевской государственной сельскохозяйственной академии, на кафедре патанатомии, инфекционных и инвазионных болезней животных Мордовского государственного университета им. Н. П. Огарева

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук профессор Васильева Валентина Алексеевна

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук профессор

Столяров Владимир Алексеевич

заслуженный ветеринарный врач РФ кандидат ветеринарных наук Денисов Василий Георгиевич

Ведущая организация: Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия

Защита состоится /^¿Уы^/Ры 2004 г. в. на заседании

диссертационного совета К 212.117.05 при Мордовском государственном университете им. Н. П. Огарева (430000, г. Саранск, ул. Большевистская, 68).

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке Мордовского государственного университета им. Н. П. Огарева

Автореферат разослан

2004 г.

Ученый секретарь ^^

диссертационного совета Т. А. Романова

aoos-if

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Свиноводство занимает важное место в промышленном животноводстве. При этом молодняк свиней в больших количествах гибнет от заболеваний желудочно-кишечного тракта. Так как в условиях интенсивных технологий ведения животноводства новорожденные животные с первых дней жизни подвергаются воздействию факторов как инфекционной, так и неинфекционной природы, что приводит к снижению общей неспецифической резистентности организма и вызывает резкие структурно-функциональные отклонения в желудочно-кишечном тракте, которые отражаются на работе пищеварительного тракта, росте и продуктивности животного.

Доказано, что патогенная микрофлора активизируется на фоне имму-нодефицитов и поражения слизистой оболочки кишечника паразитическими простейшими класса Sporozoasida, отряда Eucoccidiorida, и в частности криптоспоридиями (Я. Прокопич, И. Павласек, 1983; Т. В. Бейер, 1987; Т. А. Шибалова, 1987; В. Ф. Никитин, И. Павласек, 1988; 1989; Ю. К. Горбов, А. П. Мачинский, А. Р. Омаров, 1991; И. И. Бочкарев, И. С. Решетников, 1994; И. И. Бочкарев, 1996; У. Г. Тайчинов, 1996,2000; В. А. Васильева, 1998; 1999; 2002; 2003; В.А.Васильева, И. Н. Борисова, 2004; R. L. Kemp, 1974; I. Pavlasek, V. F. Nikitin, 1983; Т. Landverk, 1987; С. A. Acedo, G. Quflez, 1995; L. G. Davis, R. Soave, 1998; R. B. Duncan, D. Caudell, D. S. Lindsay et al., 1999; M. S. Abrahamsen, 1999; P. Maqqi, A. M. Larocca, M. Quarto et al., 2000, и др.).

Роль последних в этиологии диарей остается изученной недостаточно. Это относительно новая проблема ветеринарной медицины.

В настоящее время криптоспоридии признаны важной причиной диареи более чем у 20 видов животных и у людей. В странах с развитым свиноводством падеж поросят по данной причине составляет 20 - 30 %.

Сведений о патоморфологических изменениях, особенно желудочно-кишечного тракта, вызванных криптоспоридиями у новорожденных поросят очень малочисленны. Слабо разработаны методы раннего прогнозирования заболеваемости животных с использованием биохимических показателей. Поэтому решение проблем, связанных с патологией, вызываемой криптоспо-ридиями, имеет определенное научное и практическое значение

Цель и задачи исследований. Целью нашей работы явилось изучение патоморфологического изменения в желудке, тонком и толстом отделах кишечника поросят при криптоспоридиозе, а также некоторых гистохимических и биохимических показателей с целью уточнения патогенеза. Для реализации указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Выявить характер патоморфологических изменений в желудке, в тонком и толстом отделах кишечника поросят.

2. Изучить взаимосвязь между биохимическими,-гистохимическими и

патоморфологическими изменениями.

3. Установить динамику биохимических изменений с учетом эндогенных стадий развития криптоспоридий.

Научная новизна. Впервые патоморфологическими и гистохимическими методами детально охарактеризованы особенности изменений в желудочно-кишечном тракте поросят при экспериментальном криптоспоридиозе. Выявлено, что патоморфологические изменения локализуются от желудка до прямой кишки. Установлена взаимосвязь между патоморфологическими, гистохимическими методами исследования и биохимическими изменениями в сыворотке крови поросят.

Практическая ценность работы. Результаты проведенного исследования расширяют и дополняют информацию о вредном воздействии криптоспоридий на организм поросят и дают возможность точной и своевременной их диагностики при желудочно-кишечных заболеваниях поросят.

Результаты исследований вошли в методическое пособие «Патоморфо-логическая диагностика криптоспоридиоза поросят», утвержденной методической комиссией Аграрного института Мордовского университета.

Полученные материалы используются в учебном процессе на кафедрах анатомии домашних животных и биологии Ижевской государственной сельскохозяйственной академии; анатомии, гистологии и патанатомии Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии; патанатомии, инфекционных и инвазионных болезней Аграрного института Мордовского государственного университета, а также в 10 лабораториях Республики Мордовия.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

1. Патогенное влияние криптоспоридий на желудочно-кишечный тракт поросят по данным патологогистологического метода исследования.

2. Характеристика гистохимических изменений в тонком и толстом отделах кишечника.

3. Характеристика биохимических изменений выявленных в сыворотке крови.

Апробация работы. Основные положения работы доложены на межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Перспективы развития регионов России в XXI веке» (Ижевск, 2002); Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Ульяновск, 25-26 сентября, 2003); IV Международной научно-практической конференции (Новосибирск, 12-13 февраля, 2004); Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 50-летию высшего аграрного образования в Удмуртской Республике (Ижевск, 24-27 февраля, 2004); расширенном заседании кафедры патанатомии, инфекционных и инвазионных болезней животных Аграрного института Мордовского госуниверситета (протокол № 8 от 30 августа); расширенном заседании

кафедры анатомии домашних животных и биологии Ижевской государственной сельскохозяйственной академии (протокол № 10 от 10 сентября 2004 г.).

Публикации. По материалам исследований опубликовано 2 статьи и 1 методическое указание, в которых изложены основные положения и выводы по изучаемым вопросам.

Объем и структура диссертации. Диссертация включает общую характеристику работы, обзор литературы, анализ результатов собственных исследований, их обсуждение, выводы, практические предложения, список использованной литературы, приложение. Она изложена на 117 страницах машинописного текста, иллюстрирована 27 рисунками, 2 графиками, 1 таблицей. Список использованной литературы включает 174 источника, в том числе работы иностранных авторов.

2.СОБСТВЕННЫЕИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследования проводились в 2001 - 2004 гг. на кафедре анатомии домашних животных и биологии Ижевской государственной сельскохозяйственной академии, а также на кафедре патанатомии, инфекционных и инвазионных болезней животных Аграрного института Мордовского государственного университета в соответствии с планом его научно-исследовательской работы (номер государственной регистрации 01200105275).

При выполнении экспериментальных исследований нами использованы 30 новорожденных поросят крупно-белой породы 3-дневного возраста массой 1,0 - 1,5 кг и 90 поросят массой 3,0 - 5,5 кг 1 - 10-дневного возраста, спонтанно инвазированных ооцистами криптоспоридий. Животные были разделены по принципу аналогов на опытную и контрольную группы по 15 и 45 голов соответственно.

Для заражения использовали суспензию ооцист С. parvum, которую получали методом флотации из фекальных масс больных криптоспоридиозом телят, поросят. Количество ооцист в 1 мл культуры определяли в камере Го-ряева. Этими ооцистами per os заражали поросят, выращенных в условиях ОПХ «Ялга», где поросят содержали в отдельных станках изолированно, в одинаковых условиях, исключающих спонтанное заражение криптоспори-диями. Доза заражения составляла 2 тыс. ооцист на 1 кг массы тела.

Поросятам контрольной группы вводили физиологический раствор в дозе 1 мл/кг.

Для исключения возможного влияния времени суток на результаты исследования убой животных осуществляли в одно и то же время с 9 до 11 часов на 3, 5, 8, 10, 12-е сутки после заражения, по 3 головы в каждый срок при экспериментальном, по 9 голов - при спонтанном.

Спустя 5 суток после заражения ооцисты криптоспоридий выявлялись

в фекалиях поросят. Ооцисты С. рагуиш от экспериментально и спонтанно зараженных животных окрашивались в мазках фекалий стандартным методом - карболовым фуксином по Цилю - Нильсену (Т. В. Бейер и др., 1987; И. А. Чайка, Т. В. Бейер, 1990), а также генциановым фиолетовым по Н. В. Сидоренко (1988).

Ооцисты С. рагуиш от экспериментально и спонтанно зараженных животных, окрашенные по Цилю - Нильсену, имели вид округлых образований диаметром до 5 мкм, ярко-красного цвета, внутри которых удавалось рассмотреть удлиненные спорозоиты. Сопутствующая микрофлора окрашивалась в зеленые тона. При окрашивании генциановым фиолетовым ооцисты криптоспоридий имели вид неокрашенных или слабо окрашенных округлых образований диаметром до 5 мкм. Внутри некоторых ооцист удавалось рассмотреть бледно-голубые удлиненные и слегка изогнутые тельца (спорозои-ты) с красноватыми гранулами внутри. Спорозоиты располагались по периферии ооцисты, оставляя ее центральную часть пустой.

Для патогистологического исследования кусочки разных частей желудка (дно, кардиальную, пилорическую часть), 12-перстной, тощей, подвздошной, слепой, ободочной и прямой кишок фиксировали в жидкости Карнуа и в 10 %-ном водном растворе нейтрального формалина, заливали в парафин и полученные срезы окрашивали гематоксилин-эозином. Все фрагменты кишок, кроме прямой, исследовали также гистохимически, для чего материал помещали в жидкий азот сразу же после убоя и готовили из него криостатные срезы. Активность щелочной, кислой фосфатаз определяли методом одновременного азотосочетания с производными нафтола и стабильными солями диазония Гомори в модификации Холта, 1959 (Бикенски, 1963, цит. по Гайеру, 1971; Г. Б. Эврановой, В. Г. Эврановой, И. Г. Карандашова, и др. 1983; Г. И. Роскин, Л. Б. Левинсон, 1957). Щелочную и кислую фосфатазу в сыворотке крови определяли на полуавтоматическом анализаторе (НушаШег, 2000).

Весь цифровой материал обработан на персональном компьютере с использованием критериев Стьюдента, Т-критерия Уайта.

2.2. Патоморфологические и гистохимические изменения в желудочно-кишечном тракте поросят при криптоспоридиозе

При экспериментальном и спонтанном криптоспоридиозе новорожденные животные погибали через 8-10 суток после рождения. Трупы павших поросят подвергали вскрытию для подтверждения поставленного прижизненного диагноза на криптоспоридиоз и изучали патолого-анатомические изменения органов и тканей при спонтанном криптоспоридиозе, а желудочно-кишечного тракта - при экспериментальном.

2.2.1. Патоморфологические изменения в отдельных органах и тканях поросят при спонтанном криптоспоридиозе

При вскрытии павших и убитых поросят наблюдали развитие катарального воспаления желудка, тонкого, толстого отделов кишечника. Содержимое кишечника жидкое, иногда с пузырьками газа. На всем протяжении слизистая оболочка гиперемированная, набухшая, покрыта толстым слоем слизи. Слизистая оболочка подвздошной кишки с многочисленными кровоизлияниями, местами изъязвлена.

Брыжеечные лимфатические узлы увеличены, сочные на разрезе, местами покрасневшие. Селезенка и печень незначительно увеличены, с мелкими кровоизлияниями под капсулой. Сердце увеличено в размере из-за расширения правых полостей. Легкие тоже увеличены, края притуплены, с кровоизлияниями под плеврой. Отмечается прямая зависимость между выраженностью патолого-анатомических изменений и степенью пораженности кишечника криптоспоридиями.

Наиболее выраженные патогистологические изменения у поросят мы обнаружили в тонком отделе кишечника. Отмечали набухание слизистой оболочки тонкой и подвздошной кишок, обусловленные выраженной в различной степени инфильтрацией собственной пластинки слизистой оболочки лимфоцитами и эозинофилами с преобладанием последних. В энтероцитах некоторых ворсинок имелись криптоспоридии эндогенных стадий. Пейеровы бляшки гиперплазированы. Просвет крипт нередко расширен, со скоплением распадающихся клеток. В млечных сосудах ворсинок и между железами находили шизонты и мерозоиты.

У некоторых животных отмечали деформацию ворсинок и гибель желез с замещением их скоплениями из эозинофилов и лимфоцитов. При этом было массовое поражение эпителия ворсинок и желез макро-, микрогаметами и ооцистами.

Изменения в печени характеризовались появлением круглоклеточной инфильтрации в соединительнотканной основе органа. Ядра гепатоцитов -крупные, относительно темные. Большая часть клеток имела своеобразный пенистый вид. Около кровеносных сосудов выявлены скопления клеток лим-фоцитарного ряда. На периферии долек находили мелкие скопления клеток в различных отделах.

В легких стенки альвеол имели разрывы. Бронхиолы расширенны, часто округлой формы. Слизистая обильно покрыта муцином. В просвете некоторых бронхиол содержатся десквамированный эпителий и бластные клетки.

В селезенке содержание клеточных элементов в фолликулах уменьшено, стенки центральных артерий утолщены. Ядра эндотелия в состоянии пик-ноза. Трабекулы разрыхлены, в некоторых из них наблюдалась инфильтрация бластных клеток. Красная пульпа содержала эритроциты, сидерофаги.

В почках изменения выражалисть в том, что кгубочки были неправильной формы, эндотелий капилляров пролиферирован. Просвет капсулы Шум-лянского-Боумена расширен, серповидной формы.

Большинство канальцев выстланы набухшим эпителием. В их просвете содержалась белковая масса, клубочки имели полигональную форму, капиллярные сплетения напоминали форму лопастей.

Соединительно-тканная основа представлена прослойками волокнистых элементов и клеток лимфоидно-гистоцитарного ряда. Стенки отдельных артериол утолщены. Кровеносные сосуды полнокровны, с множественными явлениями эритродиапедеза.

Кардиомиоциты имели признаки мутной набухшей цитоплазмы. Ин-терстиций миокарда отечен, по ходу волокон Пуркинье, в нем иногда обнаруживали скопления лимфоидных, гистиоцитарных клеток. Капилляры полнокровны. Соединительнотканная основа разрыхлена, отечна, насыщена крупными клетками типа бластов и клетками макрофагального ряда.

У некоторых поросят в синусах и мякотных тяжах брыжеечных лимфатических узлов наблюдали большое количество макрофагов и эозинофи-лов. У других отмечали значительное расширение коркового плато, увеличение количества лимфатических фолликулов в корковом веществе, их гиперплазию, а также расширение синусов с наличием в них макрофагов небольшого количества, лимфоцитов, эозинофилов и плазматических клеток, истончение мякотных тяжей, инфильтрацию их эозинофилами. В краевых и промежуточных синусах находили отдельные шизонты, иногда в состоянии распада, с клеточной реакцией по периферии из макрофагов и эозинофилов.

Результаты наших исследований показали, что в паренхиматозных органах развивались дистрофические изменения на почве интоксикации и ге-модинамических расстройств. В лимфатических узлах отмечали гиперплазию лимфоидной ткани, десквамацию синусов, в селезенке - склеротические изменения кровеносных сосудов, в легких - признаки эмфиземы, с последующим развитием катаральной бронхопневмонии. В кишечнике установили деформацию ворсинок, слизистую дистрофию и разрушения эпителиоцитов тонкого отдела кишечника макро-, микрогаметами и ооцистами.

2.2.2. Патоморфологические изменения органов поросят, экспериментально инвазированных ооцистами С. paгvum

Результаты патоморфологических исследований желудочно-кишечного тракта поросят показали, что криптоспоридиоз при дозе заражения 2 тыс. на 1 кг массы тела в различные сроки убоя проявляется в следующем:

Гистологическим исследованием дна желудка выявлено, что при убое на 3-й сутки после заражения желудочные ямки глубокие, проникают на 1/3 толщины эпителиальной пластины; через 5 дней после заражения желудочные ямки узкие, местами сглажены. Трубчатые железы узкие, длинные, тесно прилегающие друг к другу, с узкими просветами, в глубоких донных отделах они переплетаются между собой, образуя трубчатые структуры.

Мышечная пластинка слизистой оболочки местами плохо видна. Под-слизистая основа разрыхлена, несколько отечна, и имеет клеточную ин-

фильтрацию из лимфоцитов, гистиоцитов и плазматических клеток.

Мышечная оболочка представлена 3 слоями гладкомышечных волокон. В межмышечных пространствах выявляются мелкие инфильтраты из лимфоцитов, гистиоцитов и плазматических клеток. Серозная оболочка тонкая, покрыта слоем клеток мезотелия.

На 8-е сутки после заражения желудочные ямки утолщены, призматические клетки эпителия с признаками ослизнения апикальных частей. Трубчатые железы узкие, тесно прилегающие друг к другу, со слабо заметными просветами, в глубоких отделах переплетаются между собой и формируют тубулярные структуры. Мышечная оболочка слизистой тонкая, местами еле заметна.

Подслизистая основа несколько отечна, со слабой клеточной реакцией из лимфоцитов, гистиоцитов, плазматических клеток. Мышечная и серозная оболочки обычного вида и строения. На отдельных участках имеется белковый экссудат, состоящий из слущенных клеток призматического эпителия, единичных лейкоцитов, лимфоцитов и гистиоцитов.

К 10-му дню желудочные ямки также узкие. Трубчатые железы узкие, высокие, тесно прилегающие друг к другу, с плохо различимым просветом, в тонких отделах формируют тубулярные структуры. Мышечная пластинка слизистой оболочки представлена гладкомышечными клетками, тонкая, местами еле видна. Подслизистая основа несколько разрыхлена, со слабой клеточной реакцией из лимфоцитов и гистиоцитов. Мышечная оболочка состоит из 3 слоев гладкомышечных волокон, идущих в разных направлениях, в межмышечных пространствах мелкие инфильтраты из лимфоцитов, гистиоцитов и плазматических клеток. Серозная оболочка тонкая, представлена пластом клеток мезотелия.

На 12-й день заметных изменений не произошло по сравнению с 10-м

днем.

При исследовании пилорического отдела желудка на 3-й сутки после заражения слизистая покрыта тонким слоем слизи с примесью лимфоцитов, гистиоцитов и единичных клеток слущенного призматического эпителия. Желудочные ямки сглажены, покрыты призматическим эпителием с признаками ослизнения. Мышечная пластинка слизистой оболочки выражена довольно четко.

Подслизистая основа утолщена, разрыхлена, инфильтрирована лимфоцитами, эритроцитами, гистиоцитами и плазматическими клетками.

Мышечная оболочка представлена тремя пластами идущих в разных направлениях гладких мышечных волокон. Между слоями содержатся мелкие инфильтраты из лимфоцитов, гистиоцитов и плазматических клеток.

Серозная оболочка тонкая, покрыта слоем мезотелиальных клеток.

У поросят, убитых на 8-е сутки после заражения, слизистая пилориче-ского отдела желудка покрыта толстым слоем слизи, желудочные ямки широкие и более глубокие, покрыты призматическим эпителием и множеством бокаловидных клеток.

Подслизистая основа значительно утолщена, отечна, с массивной кле-

точной инфильтрацией из лимфоцитов. Подобная клеточная инфильтрация наблюдается в межмышечных соединительнотканных пластинках мышечной оболочки желудка.

Серозная оболочка значительно утолщена, отечна. В основании отдельных желез в подслизистом слое и межмышечных соединительнотканных пластинках встречаются эритроциты округлой формы с прозрачной розовой окраской.

На 12-й день после заражения поросят в пилорическом отделе желудка желудочные ямки мелкие, местами сглажены, покрыты призматическим эпителием с примесью бокаловидных клеток, разрыхлены, отечны с клеточной инфильтрацией из лимфоцитов, гистиоцитов и плазматических клеток.

Мышечная пластинка слизистой оболочки тонкая, местами почти не видна. Подслизистая основа хорошо выражена, несколько разрыхлена, отечна, содержит большое количество расширенных кровеносных и лимфатических сосудов с явлениями спазма кровеносных сосудов и слабой клеточной инфильтрацией из лимфоцитов и гистиоцитов.

В пространствах между мышечными слоями слабая клеточная инфильтрация из лимфоцитов, гистиоцитов и плазматических клеток. Серозная оболочка утолщена, разрыхлена, с большим числом расширенных кровеносных и лимфатических сосудов, с мелким клеточным инфильтратом из лимфоцитов, гистиоцитов и плазматических клеток.

В двенадцатиперстной кишке при убое на 3-й день после заражения слизистая с полиморфными, местами деформированными ворсинками, с полнокровным излиянием в строму. Просветы железистых крипт свободны. Мышечная пластинка слизистой оболочки тонкая, местами еле заметна, состоит из гладкомышечных волокон. Подслизистая основа разрыхлена, состоит из однородных округлых дуоденальных (Брунноровских) желез.

Через 5 дней после заражения слизистая двенадцатиперстной кишки складчатая, с полиморфными глубокими ворсинками и трубчатыми железами. В просвете железистых крипт (люберкюновых желез) встречаются лимфоциты, гистиоциты и клетки слущенного эпителия.

Мышечная пластинка слизистой оболочки тонкая, местами плохо прослеживается. Подслизистая основа разрыхлена, с крупными очагами однородных скоплений и однотипных округлых и дуоденальных желез с артериальными, венозными и лимфатическими сосудами, мелкими клеточными инфильтратами, состоящими из лимфоцитов, гистиоцитов и плазматических клеток.

У поросят, убитых на 8-й и 12-й день после заражения, слизистая двенадцатиперстной кишки с полиморфными несколько отечными ворсинками, глубокими кишечными железами (криптами), призматическим эпителием и бокаловидными клетками с вакуолизированной цитоплазмой. В просвете отдельных кишечных крипт встречаются единичные лимфоциты и клетки слу-щенного эпителия.

Мышечная пластинка слизистой оболочки тонкая, состоит из гладко-мышечных волокон, местами плохо видна. Подслизистая основа довольно

широкая, разрыхлена, с очагами мелких округлых дуоденальных желез.

Мышечная оболочка представлена двумя слоями: продольным и циркулярным, идущих в разных направлениях. Между мышечными слоями имеются мелкие клеточные инфильтраты, состоящие из лимфоцитов, гистиоцитов и плазматических клеток. Серозная оболочка тонкая, выстлана клетками мезотелия.

У поросят, убитых на третьи и пятые сутки после инвазирования, в тощей кишке слизистая с утолщенными и укороченными ворсинками, в просвете видны ооцисты С. paгvum, покрытые призматическим эпителием. Бокаловидные клетки представлены с вакуолизированной цитоплазмой, просвет кишечных крипт расширен, в нем имеются следы слизи и единичные слу-щенные клетки эпителия.

Мышечная пластинка слизистой оболочки тонкая, представлена переплетающимися гладкомышечными волокнами. Подслизистая основа разрыхлена, в ней встречаются сосудистые сплетения, в щелях имеются единичные лимфоциты и гистиоциты. Мышечная оболочка представлена двумя слоями: циркулярным и продольным. В межмышечных пространствах встречаются лимфоциты и гистиоциты.

Серозная оболочка тонкая, представлена клетками мезотелия.

В последующие сроки, через 8-10 суток, слизистая оболочка в тощей кишке с полиморфными, несколько отечными ворсинками, покрытыми призматическим эпителием, с примесью бокаловидных клеток с вакулизирован-ной цитоплазмой. Просвет отдельных кишечных желез (крипт) расширен, содержит слизь, единичные клетки слущенного эпителия, лимфоциты, гистиоциты, плазматические клетки и скопления ооцист и шизонты.

В строме ворсинок наблюдаются явления слабого отека с единичными лимфоцитами и гистиоцитами.

Мышечная пластинка слизистой оболочки представлена гладкими мышечными волокнами, которая местами едва заметна. Подслизистая основа разрыхлена, с кровеносными и лимфатическими сосудами, с явлениями гемо-и лимфостаза, слабой клеточной инфильтрацией из лимфоцитов, гистиоцитов и плазматических клеток. Мышечная оболочка представлена двумя слоями: продольным и циркулярным, мышечными волокнами, идущих в различных направлениях. В межмышечных пространствах мелкие инфильтраты из лимфоцитов, гистиоцитов. Серозная оболочка тонкая, покрыта слоем клеток ме-зотелия.

На 12-е сутки после инвазирования в тощей кишке слизистая с утолщенными полиморфными ворсинками, покрытыми призматическим эпителием с примесью бокаловидных клеток с вакуолизированной цитоплазмой. В просвете кишечных крипт встречаются лимфоциты, гистиоциты и клетки слущенного эпителия, а также ооцисты С. paгvum.

Мышечная пластинка слизистой оболочки тонкая, местами плохо прослеживается. Подслизистая основа разрыхлена, с крупными очагами скопления однотипных округлых дуоденальных желез с артериальными и венозными сосудами и лимфатическими щелями, мелкими клеточными инфильтра-

тами из лимфоцитов, гистиоцитов и плазматических клеток. Мышечная оболочка представлена двумя слоями мышечных волокон: продольным и циркулярным, идущих в различных направлениях. В межмышечных пространствах мелкие инфильтраты из лимфоцитов, гистиоцитов и призматических клеток. Серозный слой тонкий, представлен слоем мезотелиальных клеток.

Первые изменения в подвздошной кишке были выявлены на 3 - 5-е сутки после заражения. Слизистая оболочка представлена полиморфными, местами деформированными ворсинками, видны скопления ооцист на различных стадиях развития. Кишечные железы удлинены, покрыты призматическим эпителием и большим числом бокаловидных клеток с вакуолизиро-ванной цитоплазмой. В просвете ворсинок местами видны узкие лимфатические щели и мелкие капилляры с явлениями гемостаза. В просвете кишечных крипт следы слизи и единичные клетки слущенного эпителия.

Мышечная пластинка слизистой оболочки тонкая, местами значительно истончена, едва заметна. Подслизистая основа разрыхлена, содержит большое количество расширенных кровеносных и лимфатических сосудов с явлениями гемо- и лимфостаза.

Мышечная оболочка представлена двумя слоями мышечных волокон, идущих в различных направлениях. Серозная оболочка тонкая, представлена слоем мезотелиальных клеток.

У поросят, убитых на 8-е сутки после заражения, в подвздошной кишке слизистая с полиморфными, местами деформированными ворсинками, покрытыми призматическим эпителием. В просвете ворсинок видны ооцисты С. ряггош. В просвете кишечных крипт следы слизи и единичные клетки слущенного эпителия.

Мышечная пластинка слизистой оболочки тонкая, представлена гладкими мышечными волокнами, местами значительно истончена, плохо заметна. В подслизистой основе встречаются массовые лимфоидные образования.

Через 10 суток после инвазирования в подвздошной кишке слизистая представлена удлиненными полиморфными, местами, деформированными ворсинками, покрытыми призматическим эпителием. Единичные бокаловидные клетки имеют вакуолизированную цитоплазму. В просвете отдельных ворсинок видны тонкие лимфатические щели и мелкие капилляры с явлениями гемостаза. Просвет кишечных желез несколько расширен, содержит единичные клетки слущенного эпителия.

Мышечная пластинка слизистой оболочки тонкая, местами разрыхлена, несколько отечна, содержит лимфоциты и гистиоциты. Мышечная и серозная оболочки несколько истончены, с очагами клеточной инфильтрации.

На 12-е сутки после заражения изменения происходят, но они более сглажены.

В слепой кишке поросят, убитых на 3-й сутки после инвазирования, слизистая оболочка и кишечные железы выстланы призматическими клетками. Крипты местами расширены, в просвете содержат следы слизи и единичные клетки слущенного эпителия.

Мышечная пластинка слизистой оболочки очень тонкая и местами невидна. Подслизистая основа хорошо выражена, с признаками слабого отека, пронизана кровеносными сосудами. Встречаются небольшие инфильтраты, состоящие из лимфоцитов и гистиоцитов. Хорошо выражена мышечная оболочка, состоящая из двух слоев. Серозная оболочка утолщена, с фибринозными наложениями и клеточной инфильтрацией из лимфоцитов и тканевых клеток.

На 8-е и 10-е сутки после заражения кишечные железы в слепой кишке выстланы призматическим эпителием с большим числом бокаловидных клеток со светлой сетчатой цитоплазмой. В просвете крипт местами содержатся слизь и клетки слущенного эпителия, единичные лимфоциты и ооцисты С. рагуиш. Строма железистых крипт несколько отечная, с инфильтрацией из лимфоцитов, гистиоцитов и плазматических клеток.

Мышечная пластинка слизистой оболочки очень тонкая, представлена гладкими мышечными волокнами, которые местами невидны. Подслизистая основа несколько разрыхлена, в ней заметны кровеносные сосуды и расширенные лимфатические щели. Мышечная оболочка представлена двумя мышечными слоями гладких мышечных волокон, идущих в разных направлениях. Между ними пространство содержит клеточные инфильтраты из лимфоцитов, гистиоцитов и плазматических клеток. Серозная оболочка тонкая, покрыта клетками мезотелия.

Через 12 дней после заражения слизистая оболочка и крипты в слепой кишке покрыты призматическим эпителием с множеством бокаловидных клеток с вакуолизированной цитоплазмой. В просвете крипт содержатся слизь, клетки слущенного эпителия и единичные лимфоциты.

В ободочной кишке поросят, убитых на 5 - 12-е сутки после инвазиро-вания, слизистая оболочка покрыта слоем слизи, а в остальном морфологическая картина идентична описанию слепой кишки.

Через пять дней слизистая оболочка в прямой кишке представлена железистыми криптами, выстланными призматическими клетками с множеством бокаловидных клеток, многие из которых с вакуолизированной цитоплазмой. В просвете железистых крипт следы слизи, единичные клетки слу-щенного эпителия и лимфоциты, на отдельных участках слизистая оболочка покрыта тонким слоем слизи с примесью клеток слущенного эпителия, лимфоцитов и гистиоцитов.

Мышечная пластинка слизистой оболочки тонкая, местами трудно прослеживаемая. Подслизистая основа хорошо выражена, в ней много кровеносных сосудов. Мышечная оболочка представлена двумя мышечными слоями гладких мышечных волокон. В межмышечных пространствах встречаются лимфоциты и гистиоциты. Серозная оболочка несколько утолщена, с множеством мелких кровеносных сосудов и клеточной инфильтрацией из лимфоцитов, гистиоцитов и единичных плазматических клеток.

На 8 - 12-е сутки слизистая оболочка в прямой кишке хорошо выражена, представлена высокими и широкими железистыми криптами, выстлан-

ными призматическим эпителием с обилием бокаловидных клеток. В просвете отдельных крипт следы слизи, единичные клетки слущенного эпителия и лимфоциты.

Мышечная пластинка слизистой оболочки представлена гладкомышеч-ными волокнами, очень тонкая, местами не прослеживается.

Изменения в кишечнике были однотипны у всех животных, но более резко выражены у поросят, убитых в поздние сроки.

Схему патоморфогенеза криптоспоридиоза у поросят можно представить следующим образом. В желудочно-кишечном тракте в щеточной каемке энтероцитов развиваются все эндогенные стадии паразита. При этом ооцисты мелкие, в большинстве случаев около 5 мкм в диаметре. Большое число генераций шизогонии и аутоинвазия, особенно на фоне иммунодефицита, приводят к разрушению апикальных частей клеток на значительной площади поверхности. Это в свою очередь ведет к нарушениям мембранного пищеварения и явлениям диспепсии.

2.2.3. Гистохимические изменения при экспериментальном криптоспоридиозе поросят

В настоящее время в медицине и ветеринарной практике большое внимание уделяется гистохимическим исследованиям, что особенно актуально для ветеринарной практики.

Методам, используемым для выявления щелочной и кислой фосфатаз в отдельных клеточных структурах, придается важное значение, особенно при различных патологических процессах и при изучении механизмов патогенеза инфекционных и инвазионных заболеваний (В. Г. Эвранова, Д. В. Васильева, И. Г. Карандашов, 1983; Н. М. Вовченко, 1981; В. А. Васильева, 1984; 1998; Т. В. Тюрина, В. А. Васильева, А. В. Кузьмин, 2003; И. Н. Борисова, 2004, и др.).

Наши исследования показали снижение активности щелочной (ЩФ) и кислой (КФ) фосфатаз в процессе развития болезни. Снижение активности КФ впервые выявили через 3-5 дней после заражения в дистальном участке тощей и в подвздошной кишке. Максимальное угнетение активности ЩФ и КФ, вплоть до полного их отсутствия в местах локализации гамет и ооцист, наблюдали во всех участках тонкого отдела кишечника через 8-12 дней. Особенно резкое снижение выявлено в подвздошной кишке.

В период выздоровления в участке тощей кишки активность ЩФ и КФ полностью восстанавливалась, в то время как в дистальном отделе и в подвздошной кишке полное восстановление активности этих ферментов отмечали только в отдельных участках.

Мы считаем, что первое снижение активности ферментов в кишечнике связано со стадией шизогонии, а наивысшее ее угнетение приходится на конец стадии шизогонии и гаметогонии, когда происходит массовое поражение энтероцитов ворсинок и желез паразитами (гамонтами и ооцистами). При гистохимическом исследовании толстого отдела кишечника у контроль-

ных поросят выявили КФ, а ЩФ отсутствовала. Активность кислой фосфота-зы в клетках покровного эпителия и желез была ниже, чем в тонком отделе кишечника.

Снижение активности ферментов в ободочных кишках наблюдали через 10—12 дней после заражения, позже она полностью восстанавливалась. Закономерное снижение активности ферментов выявлено в местах с поражением эпителия возбудителем, в участках же слизистой оболочки без паразитов активность не изменялась или снижалась незначительно. В клетках с гамонтами и ооцистами ферменты отсутствовали, что можно объяснить ингибирующим действием криптоспоридий на клетку и нарушением в ней метаболизма. Этот факт отмечают авторы, изучавшие криптоспоридиозную инвазию у других видов животных (О. С. Партии, И. Т. Щербаков, 2000; Н. В. Свежова, 1995; 2001; В. П. Иванюк, 2003, и др.).

Снижение ферментативной активности является причиной нарушения расщепления белков, жиров, углеводов кормовой массы и всасывания продуктов, что приводит к развитию синдрома «мальабсорбции», нарушению углеводного, белкового, жирового и водно-электролитного обмена. Кормовая масса в кишечнике подвергается не ферментативному расщеплению с образованием молочной и уксусной кислоты. Все это создает условия для оттока жидкости из организма, его дегидратации, приводит к развитию диареи, снижению приростов и потере живой массы.

2.2.4. Биохимические показатели сыворотки крови поросят при экспериментальном криптоспоридиозе

В настоящее время возросший интерес к разработке методов раннего прогнозирования различных патологических состояний способствовал вовлечению в систему анализа многих биохимических показателей, в том числе ферментов щелочной и кислой фосфатаз (Л. Мусия, 1985; Р. X. Кармолиев, 1997, 1999; И. Д. Шелякин, В. Н. Кузьмичева, 2003; М. Э. Онуфриенко, 2003; В. А. Васильева, И. Н. Борисова, 2004; И. Д. Шелякин, В. Н. Кузьмичева, 2004; С. Г. Аллуханов, 2004, и др.).

Результаты исследований показали, что на 3 - 4-й день после заражения в фекальных массах обнаруживались единичные ооцисты криптоспори-дий в поле зрения микроскопа. Наибольшее их количество выделено в момент появления выраженных клинических признаков (8 - 10-й день).

Клинические изменения (диарея, дегидратация) отмечали у поросят во всех опытных группах. Показано, что паразитирование криптоспоридий в организме животных вызывает изменения биохимического состава сыворотки крови поросят. При биохимическом исследовании выявлено, что первые изменения в опытной группе появились на 3-и сутки после заражения и выражались в увеличении количества щелочной и кислой фосфатазы. На 5-е сутки наблюдали рост уровня щелочной фосфатазы с 41,01 + 0,06 (Р<0,001) до 176,1+ 0,07 (Р<0,001) мкмоль/л.ч., а кислой фосфатазы - с 49,02 + 0,09 (Р<0,001) до 150,2 ±1,06 (Р<0,001) мкмоль/л.ч.

На 8-е сутки их уровень составил соответственно 512,2 + 0,04 (Р<0,001) и 382,7 ± 0,08 (Р<0,001) мкмоль/л.ч., а на 10-е отмечено значительное уменьшение содержания этих ферментов - соответственно до 370,5 + 0,05(Р<0,001) и 264,4 ± 1,05 (Р<0,001) мкмоль/л.ч. На 12-е сутки их уровень снизился еще более - соответственно до 222,6 + 0,06 (Р<0,001) и 190,3 + 0,06 (Р<0,001) мкмоль/л.ч. (рис.1, рис.2).

дфмрюммм >ирм|сгтак чармвсугск чатвдт« ««рмЮсутм •мротНсутс«

■Контроль ВОпытная

Рис.1. Динамика активности щелочной фосфагазы в сыворопп* крови поросят при экспериментальном инвазировании С. рагуиш.

«ом

«ХМ»

домрмнм ч*(мЗогпж <щт|3йуки чаемасутм чцмюсцпж чярмНсуга

ВКонтроль ВОпытная

Рис.2. Динамика актмвноси кислой фосфагазы в сыворотке крови поросят при экспериментальном инвазировании С. рагуит.

Проведенные нами исследования позволили выявить взаимосвязь между возрастанием активности исследуемых ферментов и циклом развития криптоспоридий. Через 8 суток у поросят второй опытной группы активность ЩФ и КФ максимально возрастала. В этот срок происходит массовое размножение ооцист криптоспоридий, паразиты достигают наибольшей массы, выделяют большое количество метаболитов. Мы полагаем, что выделяемые паразитами экскреты обладают гепатотропным действием, что обусловливает повышение активности ферментов. Развитие криптоспоридий сопровождается нарушением биохимического гомеостаза у инвазированных животных. Очевидно, паразитирующие ооцисты криптоспоридий и выделяемые ими продукты метаболизма являются для поросят раздражителями, вызывающими развитие неспецифической реакции организма.

ВЫВОДЫ

1. При спонтанном криптоспоридиозе наблюдаются дистрофические изменения в паренхиматозных органах. В тонком отделе кишечника наблюдается деформация ворсинок, слизистая дистрофия, а в толстом - катаральное воспаление. Отмечается прямая зависимость между выраженностью па-толого-анатомических изменений и степенью пораженности кишечника криптоспоридиями.

2. У поросят, экспериментально инвазированных С. раггош, наиболее выраженные патоморфологические изменения развиваются в тонком и толстом отделах кишечника. Они раньше появляются и более интенсивны в дистальном участке тощей кишки и в подвздошной кишке, что связано с более сильным поражением их криптоспоридиями. Позднее и менее значительно поражаются проксимальный участок тощей кишки и ободочная кишка.

3. Для стадии шизогонии характерны низкая паразитарная инвазия энтероцитов, дистрофия и некроз отдельных, пораженных криптоспоридия-ми, клеток эпителия ворсинок и желез; слабая инфильтрация эозинофилами и лимфоцитами собственной пластинки, небольшое снижение в некоторых участках слизистой оболочки активности ферментов (щелочной и кислой фосфатазы).

4. В стадии гаметогонии гистохимические изменения наиболее сильно выражены. Массовое поражение клеток ворсинок и желез паразитами (макро-и микрогаметы, ооцисты на разных стадиях развития) обусловливает атрофию собственной пластинки слизистой оболочки ворсинок, разрушение энтероцитов, деформацию и атрофию ворсинок, замещение погибших крипт скоплениями эозинофилов, лимфоцитов.

5. Снижение активности щелочной и кислой фосфатаз в тонком отделе кишечника приводит к нарушению пристеночного пищеварения (преимущественно в участках локализации криптоспоридий), способствует развитию

синдрома «мальабсорбции», что зависит от интенсивности поражения кишечника паразитами и тяжести патоморфологических изменений.

6. Криптоспоридиозная инвазия приводит к увеличению в сыворотке крови поросят щелочной и кислой фосфатаз, что свидетельствует о нарушении нормальной проницаемости мембран клеток, обусловленном интоксикацией организма. Продукты метаболизма являются для поросят раздражителями, вызывающими развитие неспецифической реакции организма.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Полученные нами данные по динамике патоморфологических, гистохимических изменений в желудочно-кишечном тракте и биохимических - в сыворотке крови поросят при криптоспоридиозе, позволили рекомендовать научно-исследовательским учреждениям использовать их при изучении болезней поросят, протекающих с поражением желудочно-кишечного тракта.

Материалы диссертации используются:

1) для дифференциальной диагностики болезней свиней с симптомами диареи невыясненной этиологии;

2) для расшифровки патогенеза острой и хронической форм крипто-споридиоза поросят.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Решетникова Т. И. Патоморфологическая диагностика криптоспоридиоза поросят: Метод, указания. - Саранск, 2003. - 14 с.

2. Решетникова Т. И. Морфологические изменения в слизистой оболочке кишечника поросят при криптоспоридиозе // Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 50-летию высшего аграрного образования в Удмуртской Республике. - Ижевск, 2004. - С. 125-127.

3. Васильева В. А., Решетникова Т. И., Малахов Н. С. Биохимические и пато-морфологические изменения при криптоспоридиозе поросят // Материалы VI Сибирской Международной научно-практической конференции по проблемам ветеринарной медицины. - Новосибирск, 2004. - С. 47-49.

Подписано в печать 30.09.04. Объем 1,0 п. л. Тираж 100 экз. Заказ № 1731. Типография Издательства Мордовского университета 430000, г. Саранск, ул. Советская, 24

»18 65 t

РНБ Русский фонд

2005-4 20367

Актуальность темы. Свиноводство занимает важное место в промышленном животноводстве. При этом молодняк свиней в больших количествах гибнет от заболеваний желудочно-кишечного тракта. Так как в условиях интенсивных технологий ведения животноводства новорожденные животные с первых дней жизни подвергаются воздействию факторов как инфекционной, так и неинфекционной природы, что приводит к снижению общей неспецифической резистентности организма и вызывает резкие структурно-функциональные отклонения в желудочно-кишечном тракте, которые отражаются на работе пищеварительного тракта, росте и продуктивности животного

Доказано, что патогенная микрофлора активизируется на фоне имму-нодефицитов и поражения слизистой оболочки кишечника паразитическими простейшими класса Sporozoasida, отряда Eucoccidiorida, и в частности криптоспоридиями (Я. Прокопич, И. Павласек, 1983; Т. В. Бейер, 1987; Т. А. Шибалова, 1987; В. Ф. Никитин, И. Павласек, 1988; 1989; Ю. К. Горбов, А. П. Мачинский, А. Р. Омаров, 1991; И. И. Бочкарев, И. С. Решетников, 1994; И. И. Бочкарев, 1996; У. Г. Тайчинов, 1996, 2000; В. А. Васильева, 1998; 1999; 2002; 2003; В. А. Васильева, И. Н. Борисова, 2004; R. L. Kemp, 1974; I. Pavlasek, V. F. Nikitin, 1983; T. Landverk, 1987;

C. A. Acedo, G. Quflez, 1995; L. G. Davis, R. Soave, 1998; R. B. Duncan,

D. Caudell, D. S. Lindsay et al., 1999; M. S. Abrahamsen, 1999; P. Maqqi, A. M. Larocca, M. Quarto et al., 2000, и др.).

Роль последних в этиологии диарей остается изученной недостаточно. Это относительно новая проблема ветеринарной медицины.

В настоящее время криптоспоридии признаны важной причиной диареи более чем у 20 видов животных и у людей. В странах с развитым свиноводством падеж поросят по данной причине составляет 20 - 30 %. ^пЛ тм л ■ I/™1 * ■ »"Ч Д\ П 11 I >11 ■ 1 1илилилиил«/ Л Л Л Л м^ПштЛинЛ о Па10М0рфшш1 и Ч^^лпл плисп^пилл, кишечного тракта вызванных криптоспоридиями у новорожденных поросят очень малочисленны. Слабо разработаны методы раннего прогнозирования заболеваемости животных с использованием биохимических показателей.

Пптраш? патттаптго гтлйтто»* опетп#1ттттт¥Л7 л ттптлттлттттотт тл 11-11 *т^пл»»птт ттт| I « нилут) ^олосшшил V 1Ш1ШШ1 пьи, цвишиак/миИ крш! 1 иши" рипиями имеет определенное научное и практическое значение

I |лт п гтппт« полпптжпплттг! I |аттт тл ттпгттап гл<»Г»/*ч-т » гттттт/ллт ттг»жптл¥тт1а ц.111» «1 лццти дуСлмцряпИи. цулши пашуш раич/хш лошш^о ио^ патоморфологичсского изменения в желудке, тонком и толстом отделах кишечника поросят при криптоспоридиозе, а также некоторых гистохимичелтлттлг гт ^тт/ллгтп»тжтталт^ттлг ттАИ'ппптаттатж п ттаттт тл ТП^ЛТТПатгт!« ттпТАпаттапп П ттгг «лп лил XI ишилхшпЧСулшл V ци11>К/ ) ЮЧп^ш1л 11а1и1 ьп^оа. /~\ЛУ1 ^ьа

ТТТТТ1Т1Т1Т1 Т ГТ/-П п ПТТТТ/ЛТ1 ттатттт ^ТЖТТТТ ЖТЛЛ'ГПП ттаттт Т ЛПО ТП ГТГ\1ТТТ1Р ПП ТТПТ1ТТ'

1шош1пии цмш иоиш и^кии^ши оиДаЧы.

1. Выявить характер патоморфологичсских изменений в желудке, в тонком и толстом отделах кишечника поросят

2. Изучить взаимосвязь между биохимическими, гистохимическими и патоморфологическими изменениями.

3. Установить динамику биохимических изменений с учетом эндогенных стадий развития криптоспоридий.

Научная новизна. Впервые патоморфологичсскими и гистохимическими методами детально охарактеризованы особенности изменений в желудочно-кишечном тракте поросят при экспериментальном криптоспоридиозе. Выявлено, что патоморфологичсскис изменения локализуются в желудке, в тонком и толстом отделах кишечника. Установлена взаимосвязь между патоморфологичсскими, гистохимическими методами исследования и биохимическими изменениями в сыворотке крови поросят.

Практическая ценность работы. Результаты проведенного исследования расширяют и дополняют информацию о вредном воздействии крип тпгтт'лг\т1 тттхтг тто птлготтттк плпал ггт тх ттот/лт пт^тм/'ттлртт тлттттпп тх рлооигл^тксотт-ттотж ттл^ тттжпг'ттппц'! 1 шлтт ттт>тх м<»атг* гггпттттл т/»ттттт£1тгттт »V опЛлттлтютгтт/пг ТТЛЛЛ/^ПТГ дип пл Дгш п^Аших при ж^л)' Д^/*1по1л оаиилч/сашмл иирО^лх.

Юлп* г п ■ ТЛТ1 ■ ||ЛЛг(ЛпЛСО*!!1М п/Чш пи г» >« лтл г»« тЛЛи-ЛА //ТТлтЛ! я

1 п^мАсДиЬапгш оиииш х> хидап^ли^ ¿хик/иип^ \\xxaiOivivjpvpw ттлггггторт/о а тттхтгттоРТТТТ^^ тлптхттгпрттлтм! тттхлоо ттаплг» т ггпопму ттаттттатх «готг» тттх хул д11ш 1ыу1шш крип 1 ^ии рид! 1v аи иириу/и//^ у x х>ч/рух\/д, ^ахххч^хх 1¥а v x уу^птгрот/»гчтт тул* гттлттлт» а •рлппттлГЛ тгттпттт^ ггп ттлм>г»т/>лг«п ч гтгп'плплтжтатп п^^кип 1ч\^1ухV/V«'!^а ги рарпш О ¿1x1 Vх ±х а ^ аса 1Ухирдио\/гчи1 к/ )шшч/рушС1а.

I I Л Ш П1 Л и 1 Г • ■ Л 1 I ОТ«ЛЛ 1>ПГТ1 ■ I I Л ■""! Л Г"| * ГЛ1 м /ЛтЛ л Г» * / • ■ I ■ Л 1 Я ПЛЛ ¥ Ж ЛЛЛЛ • • О Л ППАЧ/ нилучьпШиС ivia.ivpwaj.iDi ш/ииЛЬо^пл^л о уЧСОшм ll^uцvvvv па 1\аф^д}/ал пттапп/\*»тггт ттл» ТПТТ*ТТТ^ мет*«/-V ■ <■ ■ ■ тV тт ^¡ттлттлт^тжтт Ы^^аплтло*? г»/ллт гттп*\/»тт)лтттт/\тт ааахишш дОтаШппл /плошшнл и имилинш I.1 1

1лл v ли ГШ ЖЛ лтпл1 i ■ ■ /л 1ж п 1го д ii11 ' Щ10ТЛ111111 г11птлпог1ш i Я i 1 о' i 'о i 1 оч^л ч 1111 \/ т 1 i пнап zivt/олпч/1 ич/пихл'! шш1шп(ш, 1му1или1ш1 ii на 1шш1 и«1н11 ^ ли/и1и1>

X »-»V У V1 иСШШП Ч^^ХиЧ/АЧ^ЛЧ^О-САЛЧ^ 1 и^ш шчиДипши, ни А ини 1 ишИы, инфекционных. И ИНВаЗИОННЫХ бОЛСЗНСИ АтрарКОГО института !МЪрДОВСКОГО Г0сударственного университета, а также в 10 лабораториях Республики Мордовия,

Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

1. Патогенное влияние кршггоспоридий на желудочно-кишечный тракт поросят по данным патологогистологического метода исследования

2. Характеристика гистохимических изменений в тонком и толстом отделах кишечника

3. Характеристика биохимических изменений выявленных в сыворотке крови.

Апробация работы. Основные положения работы доложены на межрегиональной научно-практичсскои конференции молодых ученых и специалистов «Перспективы развития регионов России в XXI веке» (Ижевск, 2002); Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Ульяновск, 25-26 сентября, 2003); IV Международной научно-практической конференции (Новосибирск, 12-13 февраля, 2004); Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 50-летию высшего аграрного образования в Удмуртской Республике (Ижевск,

Л П /ti/хп »*ч n n i, r4A/>tiiimmnmt ■ ormn пщ>и ■■ i^n п*м ж гжлч^липтпчии И Т1Ж /"»I г х,-т—i ф^о^алл, т{/avumpvnbuin MvtAaimn пафудрш uaianaiummi, nmyvivционных и инвазионных болезней животных Аграрного института Мордовского юс университета (протокол №8 от 30 августа); расширенном заседании пЛЛж| ПЛЛЛПГДЛ! ■ лац^Дрт апашмш! дишашлпл лшаи!ш>1Л И Uhujiuijui г i/h^cvKwh íuv^apviiivn i fi лпп| f* rl íí ■ ■ i/\ii mm rmtjiin í плл^/мгл тя лгл 1 о лт 1 л ллш «ñor» ^гчп пин wjiovkoav/oaíiv townnun ададиших ^upuiuivwi \j l хм vvii

ОЛЛ/t ^ \

UUf i. . j.

Публикации. По материалам исследований опубликовано 2 статьи и

I ж гат/л тттжтталт/'ло irpnintttiq т> tj*/viva**ttv tiitt/\waitt т í\/4i(\nrn i и ттлттлч'аттпа it n i i ií гч x wiviuáciiwkvc }ktuaíin^, ь aulv/pnia гили/1vvпш v/vnuonmv uujlv/lwni'ui u biuduды по изучаемым вопросам

Объем и структура диссертации. Диссертация включает общую характеристику работы, обзор литературы, анализ результатов собственных ислттагггтпгт*1т1 t rv лйпхтлтеттатттжQ ni in о тт т ттг\ п т/"|'| л lyanT^Tia гтгжатитлчлатттжп nTTIT^ j~\тс туп кл^диоаппп, 11л ошЬОДЫ, iipcuvihnvviuiv и^СДли/п^шш, vimvuiv jrxvяользованной литературы, приложение. Она изложена на 117 страницах машинописного текста, иллюстрирована 27 рисунками, 2 графиками, 1 таблицей. Список пользованной литературы включает 174 источника, в том числе работы иностранных авторов.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Х«Ха 1T1V рфологичсскос строение желудочно-кишечного тпякта млекопитающих

- ^,, -f - <

IIА ■ 11 11 !■ ■ iumniv ппттлппп í Т) Д TTTnt/ пПад/чпП 1/ "Ч А I Ati nO*\rt 1 П О Л • kj даппшм шашнл odiu^ud V1-*- п. Шаллашиоа, iv. Л. i адцарсц i^ot, Л Г"* I I 1т > £лтгтт «1 А Л Г|ЛТ1ТТ»РГ\Г1 П N4 1 OQ /1 - Г Р Рлп^г*ттт ТЛГ» i»i, х . ■ ■ i jOri-lci, Л, i л., riiiiCpa, J±. vvx. Jidiapbouii, 1УОТ, i . O. ruvvv/jionu,

Л Л П,^, .««no 100П. 1У A ^'.cKan^ o« A TV Л ТП" ЮОЛ. 1 ОПТ • v. п. iíj joipvoa, i ^^и, iv. п. ^фариЬа, п. xv/. Хилдаш^оа, l j jkj^ v. и. ±v0С1ЮКСБИ4, В. Ф. r íB&HOSOü, 1998: и др. / б желудке млекопитающих и

Iirtnrtnrttrn Ai^ п 1 til п (f^'i - ■ЛЛППИПЩ 1 »4 г I /Л Д\1 f» i n l inri /Л i i |П ttiiA пгЛпП^ i I ПИПЛШШП iwiv/Dviva разлгНаЮi ivapwuuiDtijriu, ^jiiMajiunjiv ^juna Ana — luía; n uiuiu^iiivскую зоны.

I/"o*% ттттпттт ттпа плттп nimirwooT Ttvn тт ггтттттаг>л ттп т» wa^ttтттлт/1 тптттп гпат ттпттЛл ххарДманопс&д ouna uKpj/uavi олид шиц^сида d /xvCjí)^ua, oanmviavi nciíiwüплл п ла и ki о rv i i ■ д ма а гл 11 олтч >ц a n ао ■ • ^т-а ■» ^лт i |/»лгл riiio п i tiiio лп am>»i • ■ ю iivv iipuivvuMdlibiijш wiv lavib. mvavjm jiuu jv/iuii 1\арД1г1а1 ibumv vjш/iuu>iw, трубчатые, разветвленные, открываются в желудочные ямки. Желудочные ямки глубокие, проникают на 1/3 толщины эпителиальной пластинки. Эпителий кардиальной зоны включает поверхностные слизистые клетки (мукоци-ты), слизистые шеечные, редкие париетальные клетки, эндокринные клетки.

ТТТТП ГГОТУП 1ПТПТ1ГПОТ IIT'II I I Л' I из 1ТТ ТТТ ГГ/-Ч TTO/>fTT WüTTirTTfí'» "W а ттт г тт/лттттт т а juna ДНа — ik/jia ocixu-iiviciC i ohanriiCjlbhyiú nal/1D ли/л^дКа. Л^л^Ди-иш^ ямки здесь менее глубокие, фундальные железы простые трубчатые, иногда елаборазветвленные на концах, группами открываются в желудочные ямки. В каждой железе различают шейку, тело и дно. Тело и дно не резко ограни ттаттт т тт лаот^Т* тт<пат л л*/»*\лтл«ттт.ттт Афтгатт млаттаот т о ттт ¿л тттл«-» гтаттртпт» тт/гот»

ЧСпш п vuviaDJi/iiUх v^ivpC¿U|jnbiu \j¿дч/Л /ivwjivobi, ci iiivriiva ii^vAví.odjíawí wuuuíi короткую выводящую часть, открывающуюся в желудочную ямку. Эпителий фундальной зоны содержит 5 основных видов клеток! поверхностные слизистые, железистые слизистые (добавочные и шеечные), париетальные, главные (зимогенные) и эндокринные.

Пилорическая зона занимает ди стальную часть желудка. Желудочные ямки здесь более глубокие, чем в теле желудка и занимают около половины толщины слизистой оболочки. Лилорические железы расположены более редко, часто разветвляются и имеют извитые концевые отделы. Эпвтелиальif г тр туттртг/Ti тхплпттолт/лтт '>í\i it i т^тпппчТЛТ гг/лпаг^утт'т^тттт Tíi ii та iiuiv lulwiiui íuuivj^u4wviiv/ri juuin uiuuu-iului iiv/uwpAliuvUUiib wmjuviiuv, íuwivjü пттта ommit/irpria тлоитлтгй ппткугпттт ттт та тх ^лут плтмлтггтттт та Лтто ттаттатттта tt\ntttttt

V1IUW vjinjni/i Div, uapubiwibniuv и Л1Дvivpuluioiv. vu^^wivnn^ i рапиц пилорической зоны базируется на наличии разветвленных желез и отсутствии в них главных (зимогенных) клеток. к~ч ¿лтттг \ J ATJTTTTT TT wa TT* г ттг»т^ лтцплтттаттт TIA íírVTTT ТТТГЧТТ i ii iii Tan t~\ ттттл wwv/^liiiv/viil, J VDrirtDK /nCj ijl дил W1 IlWV^n i WIDtlU ишшшин, imli4,vo0/i,nv}тлттттатттГАГл т*1жттп * tin i ■ i л itttpl в ал птпr\aiir i йаттт tttati т/пттипттт т lUuuC'mtfiu iriiiu, Aapcuvivpu^vivA пшШЧИСш w ыирипш wjiomuu i\(jnDnoiibl, tiiia 1гп1чт111л пиплптшптп la«4l Allium iraniflallll a na^vl'lllfali ■ i an«\a n n al i v/jiuj пардаа, Anovpiimjíjia — uivmuvuiuiu vvuuivuii — </ Бьрлуитип, nmipaojiwn

ITATT ТЛтгтшПТТТА ¥ I TT ТТТЛП IT /-> f1« АФАПАТТТТ TT /ЛТТ/ЛП ^T^T I ЧСатТТГТТТ/'П ТТТТГ» am^TTT^T Г TT rtfrTTprríT£VIVT(r пин i\ajдшш1ш и Du^jaDU. Uü vlOpv/imt iiOjiUviirj. Я1к/л}ДКа vj 1./j,tj 1 лтатт1 ttimti атттпт1ртли /\ /tili\tiii-Il conwattaotiptnft ттпаттт amnitarpati 'ч¿ло tt^-\ttt/*tt tta cnjia^nvn vanjnvivn uwjiviivh. íjwmvjivoHviнл TUHD tjjnjnv/1Uli и^ОлОЧКИ txvболыпих размеров, достигает только дивертикула. Область кардиальных желез обширная, занимает весь участок дивертикула и левый отдел желудка. Область желез дна желудка приближена к пклоркческой части. Пилориче-ская область сравнительно небольшая. Пилорус состоит из полулунного валика со стороны большой кривизны и пуговчатой подушки привратника -torus pylori - со стороны малой кривизны желудка.

Топкий отдел кишечника состоит из: двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок. На границе с толстой он имеет илеоцекальный сфинктер. Благодаря ему кишечное содержимое проходит только в паправлешш толстой кишки.

Основная функция кишки заключается в переваривании и всасывании питательных веществ. Кроме того, здесь осуществляются зкзокрииная и эндокринная, иммунная, моторно-звакуаторная функции. Сложность функционирования кишки обусловлена гетерогенностью структуры и архитектоники составляющих частей стенки тотжой кишки.

Строение. Стенка тонкой кишки включает слизистую оболочку, под-слизистую основу, мышечную и серозную оболочки. Если рассмотреть слизистую оболочку, то она, слагаясь из эпителия, соединительнотканного и мышечного слоев, имеет характерный рельеф благодаря наличию складок, крипт, ворсинок. Структурно-функциональной единицей слизистой оболочки тл1|1лли (гииип! ппппртлл 1га1лпт1а1лл 1лп11пто плпп11мгп тз 'vi л ииа1лт,лп

1ишчип АПШП/! ЛШ1ЛС1ЪЛ пршии ии|/^ши\и. и ^ 1 ип I ^ШС

Ч ж I и /Л п А1II II I / ■» п I |Гк II I ■■ I ПГ«Л||14ЛЛ1Г11Л111Л11МЛ »(ЛЧГПК ж ■ *"ч /Л Г111 /-"V1М IПI > ж у"» ■■!!.!■■!■ дппшппп^пи^ о^эоИМи*-» шьлуд) ирОлИ^рпру длцнтп, дифференцирующими, фуши|нонирую1цг1М.и и зкструзирующимися ЗПйТСЛИ

О Т11 11Г 1каи 1ЛПЛТ1гЛ»ш П^ЦШПЛТИЛПЮМИМ ^\Т11к111 ПЛП1ГППМ11П1111

ШШШХШ1 шшишпш, xxJivxwij.Cj.ulC иосиим^и 1 нишч/шш ш^/ЛхДу лшшп нии^:шцняшн п тпт^М'й тлип/ли л^лц/чп ттаттттп « отжптакго пттопа'г оп пл^/лтт три ютттттго птл а 1 аК/пс 1ышшл иипио^^аил о оа \j\j\j\jki. шш^п^ш^ архитсктоники слизистой оболочки тонкой кишки, вызывает нарушение функции органа.

В тонкой кишке пул пролиферирующих и дифференцирующихся клетИ ■ г- г» ж гГЧ ж ■ ж-» "Г-О Л' П ж г I ж ж г ж ж ж ж ж ж ж ж ж I ж гч ж ж ж ж ■ Л' ж ж 1\|Г А'Г-Ж^ ж IГ Ж ж »"Ч ж I ж 11 ■ I ж Ж' ЛII ж ж 14

1и1\ vv;vpvмulu1vn о кушиал, а ф)|шщ11иш1р^1и1Ц1'1л И 1р)лир)а/щплСл — па гт г~\ г> ¿лтл тт^чп чч я т!л»лпт1ттгм/| т л т» ттпоттаттпу л тт* тптж/ч'глтт пйлттАпт! ц пттппжагга тлтли ■ ■' г ч 1 нио^^лпис 1 п ои^гшик, 1, V. о ииииу/Ши Оиилипкп Ь пршна тзл<>ртт1плп лпоттптпттто 1 ■ « тттт т аттттт1£1т¥ттпттт тii iv т/'тта'глтл тттлл/ч'гппттлтпаттттл ЬирСИпла 1хппо1ч^ чулЫ линышсиишшл 1 ул 11^1/1 ра^и>Сппи раоиищены.

Особенности. У свиньи двенадцатиперстная кишка длиной до 40-80 см, идет в правом подреберье по печени дорсокаудально, у каудального конца печени прикрепляется связкой к ободочной кишке и далее направляется кра-пиалыю вдоль медиального края левой почки, рядом со своим начальным от= делом, по возращении в правое предреберье переходит в тощую кишку. Желчный проток открывается на расстоянии 2-5 см от шшоруеа, а проток поджелудочной железы - на расстоянии 15-20 см.

Тощая кишка длиной до 15-20 м, образует множество кишечных петель, висящих на длинной брыжейке между конусом ободочной кишки с одной стороны и желудком и печенью с другой стороны. Лимфатические бляшки (их 6-38) лентовидные, длиной от 50 см до 3 м.

Подвздошная кишка входит втулкообразно в толстую кишку дорсокра-нильно и вправо, намечая границу между слепой и ободочной кишками.

Толстый отдел кишечника состоит из слепой кишки, ободочной (вое

У и \ V ходящей, нисходящей^, прямой, которая заканчивается анальным отверстием.

Строение. Стенка толстой кишки на всем протяжении образована слизистой, подслизистой основой, мышечной и серозной оболочками. Слизистая и подслизистая основы образуют постоянные полулунные складки, увеличивающие поверхность толстой кишки. В ней расположены крипты (железы),

I''Т¥ сл КаТРР от тта1г п 11г»ттт^лтт т^тттттт^а ■'■ ч т »-><»/»» т ✓ \ ттм^щ/чгг ттгтАПтао

Аихиршь иС/ЛС^. рающш, пет о хихимти. пишпь. хчршиш рс1Ь/И\лли1 сиО 1 vл иЛ V 1x14^,

Т£111 п 1^/\ТТГ/«ЛТ1 ТТТТ ГТТ^ П 1Г1 га» ^/лттаа ¥ттттлт/«т1тт ¥1 / Л 11 ОТ VI» |^Т¥ПТТТ ¥¥Т ¥а о хиаКиИ шухыи! Ош^ ШН|7УЛПП ириуо^х и ^ид^рлча! Кшшишшши^ т ¥ ИЛ » ■ и ТI' I ■ I Т г\||11<1 1атт¥¥а IV Л т ТТТТ 1 1 11 ТТТ ЛТТПТТ лЙппЩгат^ гга¥¥¥¥¥¥ ол^ш^пш Эитшшл. кшшсЧшнп 1лип ии^ао)«/! 1^ппп.

I [г\Па|ЛП ЛПЛЛ^>ГЛП ТА II и ■ Л I III 1 М I АЛ'ПГА! • ТЛПЛТЛ" |Г|11||1Л|] о О

ААрЛГмид иишКи л1 ^ртЬиилиишш у ж 1\\Л¥1 хилихии тпшуц, оа вершается анальным каналом

Слизистая оболочка прямой кишки состоит из эпителия, собственной и мышечной пластинок. В верхней части прямой кишки имеются кишечные крипты. Они несколько длиннее, чем в ободочной кишке, но менее многоттттг» тгдттттт т О ХГТТ'Ф'ттттяг лтттл ттп V т>*тттттт<»т» ту^>тттттт т ттпг»т*аттаттттг* ттоттаоптт ^тттгга тгттт?

15 П11ЖШ1л ихд^лол Агшт^! лршх хок аи^А^и^гшу; п^оал/ А . хЛш

П Т"» \/ м Л » « АТ7 п Л п /Ч г-р *> па! Л м !/■ I ■ > 11 я / г» Л Л и Л гт1 шж Л »-«Л «Л п Л ^ у"» гт » ■ Л г» /л М III « «"■ г| ГЧ цг>» я О о оч^рл-п^лм ПрлмиИ КИШКИ ^А^ аашшпши летала.) идпиьл^ппош прилиатический, далее - многослойный кубический, в промежуточной - многослойный плоский пеороговевающий, в кожной многослойный плоский оро= говевающий. Переход от многослойного кубического эпителия к многослойному плоскому совершается резко в виде аноректальной линии. Эпителий прямой кишки состоит из призматических, бокаловидных и эндокринных клеток

Собственная пластинка слизистой оболочки принимает участие в формировании складок прямой кишки. В ней располагаются одиночные лимфо-идные узелки и кровеносные сосуды. В области столбчатой зоны собственной пластинки залегает сеть тонкостенных кровеносных лакун, кровь которых оттекает в геморроидальные вены. В собственной пластинке этой области проходят протоки желез, расположенных в поделизистой основе. В промежуточной зоне анальной части прямой кишки собственная пластинка содержит большое количество эластических волокон, лимфоцитов и тканевых базофилов (тучных клеток). В ней расположены и единичные сальные железы

Мышечная пластинка слизистой оболочки, как и в других отделах толстой кишки, состоит из двух слоев: внутреннего циркулярного и наружного — продольного. Пучки гладких миоцитов, тянущиеся до столбчатой зоны, по

Tûnûllllrt I Л ЛтА | 111 О IА Т-(А «т ПЛЛПЙ наг^/Ч HOIIÛOIIAT Р Л ТШ'1 II о '"VT ' I Т И I 1111 ii'ÏO Л'1' П П'1г'14'1 vivuviuiu iiv i vyii чши iiuvjK ibiu uvHbJWui. и vu/uu v J i rnvi uvnvouvi puji pa ттттатттта ппкпфпажтттптт ттттапочгтттт^тт ti ттл ттл ттжт1т*паттж ппипщ т nnnviuiv WOl/lD^naUU HJlUb inhnn n иидииииъшш uvnuupi. nnn^tiiiflll^'raii ал1 |лпа t*\ p a iinpi^l гч'г л п Г* a / п tio'1'1 i л ■ ■ i 1лt^ пи! a11 11 a'i'iï

M-t iiv/^wulouvivn uviiuiiw [/uviwjiui tuu iva vuvj,4uviuiC n iiCpuiiinv citjiwi V

TITIif 'PATÏT/'nfvraTTTTrTa Г011ЛП*\АТГ1ТПТ1ТТ1ТТа иаИТТ D TT A ТТЛ ТТТЖТТГАТАТ! ЛАТТЛпа (ITn 1T ^ Т * Г.

ПИЛ, lVnKvVlCHnDlC 1 VinUp^UUACUUinUC DVlibl. 41UAVJUUUVlUn VJVI1UDV tlUJlU-ltt" iv vt i плтп-т tt п tirmt^tttiittlttalf a ita a » гт tttt лтттт att i™4 tt atttctt гт/пгатг тлтттттт/" » t tt va tt îtt ivn Juan ri о J-Vriprv j Jiyijjxiwivi uiuv шшш^'шип иШЛиЧМ iip/imv/n ллшдп полидлх* ся анальные железы.

Мышечная оболочка состоит из двух слоев: внутреннего циркулярного и пару ясного продольного. Циркулярный слой па разных уровнях прямой тлттттттстт nKnnniraT ТТТТ П Т Г^А тттттатттт <Т Т^/угЛПТ та пгтттатттаппа»ж ТЛ#1Т/' аггттоттт ТТТ та 'II l'l'IV* rvjriijj.i\jri uupcijjvl доа у 1 wjiLU,wnii/i, ivuiupoiv ooi^bJuiiuiVA IVClIV ui^uimmnv auaiu" мичсскис образования - сфинктеры. Внутренний анальный сфинктер - глад-комышечный, наружный образован поперечнополосатой мышечной тканью. Наружный продольный слой мышечной оболочки прямой кишки, в противоположность другим отделам толстой кишки, сплошной. Между обоими мышечными слоями имеется прослойка рыхлой волокнистой неоформленной соединительной ткани, в которой лежат мышечпо=кишечпые сплетения и сосуды. Серозная оболочка покрывает прямую кишку в первой трети ее части, в следующих отделах прямая кишка покрыта адвеитицией. t \а а^дтттта аттж \ I о и т tttt tt a tt ¿ттт а tt т^тттттт/п тсаг1 ат^сп гт гглтт атп/т i/аттт г a a q tt ттт тп гт ■ wui/vimu^tu. j VDiiiibh vjiviiaii ivirlLLiKci KupUIКал, iujiviaA, Kun)vuotl^iuül, имеет три тении и три ряда карманов - haustra ceci. Передний конец ее находится близ заднего конца правой почки, а верхушка направлена каудально и загнута вправо.