Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Морфологические аспекты токсического и побочного действия нового противоопухолевого гормонального препарата эстразин
- Ученая степень
- кандидата ветеринарных наук
- ВАК РФ
- 16.00.02
Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Морфологические аспекты токсического и побочного действия нового противоопухолевого гормонального препарата эстразин
На правах рукописи
Козлов Алексей Алексеевич
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ТОКСИЧЕСКОГО И ПОБОЧНОГО ДЕЙСТВИЯ НОВОГО ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ГОРМОНАЛЬНОГО ПРЕПАРАТА ЭСТРАЗИН
16.00.02 - патология, онкология и морфология животных
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук
МОСКВА-2004
Работа выполнена на кафедре ветеринарной патологии Российского университета дружбы народов
Научные руководители:
доктор биологических наук, профессор Макаров Владимир Владимирович доктор биологических наук Михайлова Людмила Михайловна
Официальные оппоненты:
доктор ветеринарных наук, профессор БЕЛЯКОВ ИВАН МАКСИМОВИЧ доктор биологических наук, профессор заслуженный деятель науки РФ БОГУШ ТАТЬЯНА АНАТОЛЬЕВНА
Ведущее учреждение:
Институт по изысканию новых антибиотиков РАМН
Защита состоится 2004 г. в Я часов на заседании
диссертационного совета К 212.203.02 в Российском университете дружбы народов по адресу: 117198, Москва, ул. Миклухо-Маклая, д.8, к.2.
Адрес электронной почты: v.v.makarov@agro.pfu.edu.ru
С диссертацией можно ознакомится в Научной библиотеке Российского университета дружбы народов по адресу: 117198, Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6.
Л1
Автореферат разослан 2004 г.
Ученый секретарь диссертационного совета кандидат сельскохозяйственных наук, доцент 1 В.Н. Гришин
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.
Актуальность темы. Гормональные препараты зарекомендовали себя как высокоэффективные лекарственные средства для лечения онкологических заболеваний.
Они применяются для лечения злокачественных заболеваний, как в медицине, так и, все чаще, в ветеринарии. Основными показаниями для применения гормональных препаратов являются, главным образом, опухоли тех органов, которые находятся под влиянием гормонов, так называемые, гормонозависимые опухоли (Гарин А.М.2000;Дильман И.М. 1990).
Хорошо известны результаты гормонотерапии рака молочной железы, предстательной железы, эндометрия, щитовидной железы, почки (Бернштейн Л.М.1998).
В последнее время накоплены данные, свидетельствующие о гормональной зависимости рака гортани, меланобластомы, опухолей желудочно-кишечного тракта, хондро- и остеогенной саркомы. Эти данные открывают возможности дальнейшего расширения показаний к применению гормонотерапии, как в медицине, так и ветеринарии (Bhakoo.H.et.al.1981; Karakousis.aet.al. 1980).
К основным гормональным средствам, используемым при лечении злокачественных опухолей животных и человека, относятся стероидные гормоны (андрогены, эстрогены, гестогены), их синтетические аналоги и антигормоны (антиэстрогены, антиандрогены, антипрогестины и препараты, сочетающие в себе действие двух антигормонов).
В последнее время большое внимание уделяется, созданию эффективных в противоопухолевом отношении гормональных препаратов из группы гормоноцитостатиков, а также гипоталямических гормонов и их аналогов (Смирнова З.С.2001; Ржезников В.М и соавт.1996).
Создание новых лекарственных средств для терапии злокачественных новообразований остается актуальной проблемой, поскольку все существующие в настоящее время препараты характеризуются недостаточной активностью, низкой избирательностью специфического действия, высокой токсичностью.
При доклиническом изучении токсических и побочных эффектов (безвредности) новых противоопухолевых препаратов особое место'занимают патоморфологические исследования. Эти исследования являются обязательными в доклиническом изучении безвредности каждого нового противоопухолевого препарата, поскольку результаты функциональных токсикологических исследований не всегда дают возможность корректно прогнозировать интенсивность повреждения органов и тканей, а также степень их обратимости.
Патоморфологические исследования позволяют выявить нежелательные
повреждающие эффекты на нормальные органы и ткани животных; находить
границы применения безопасных доз изучаемых препаратов, а также выявить
их тропность копре ;тканям. Исследований "последнего к т а
Г РОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ |
БИБЛИОТЕКА 3
С Петербург
09 500>*»
особенно важно при изучении новых гормональных препаратов и гормоноцитостатиков - препаратов с комбинированным биологическим действием (гормональным и цитостатическим). Морфологические исследования позволяют прогнозировать чувствительность опухолей конкретных локализаций к изучаемому препарату и/или спектр органов-мишеней его побочного действия.
Патоморфологическая и функциональная оценка действия препарата на органы и ткани животных является одним из ведущих звеньев в сложной программе доклинического изучения новых противоопухолевых препаратов. Она гарантируют безопасность клинического применения препарата, позволяет более рационально строить его терапевтические режимы.
Цель и задачи исследования. Целью исследования является морфологическая оценка характера и особенностей токсического и побочного действия (безвредности) нового гормонального препарата эстразин.
Задачи исследования.
1. Исследование патоморфологических изменений внутренних органов
собак при однократном ректальном введении эстразина, изучение зависимости побочного и токсического действия эстразина от режима применения и величины дозы (острая токсичность препарата).
2. Исследование патоморфологических изменений внутренних органов
собак при многократном (курсовом) ректальном введении эстразина, изучение зависимости побочного и токсического действия эстразина от режима применения и величины дозы (хроническая токсичность препарата).
3. Исследование патоморфологических изменений внутренних органов крыс
при многократном (курсовом) внутрибрюшинном применении эстразина (хроническая токсичность препарата).
4. Патоморфологическая оценка обратимости и скорости репаративных
процессов в органах и тканях животного после применения эстразина.
5. Исследование местно-раздражающего действие эстразина при его
ректальном применении у собак.
Новизна и научная значимость.
Впервые дана исчерпывающая патоморфологическая оценка характера, интенсивности, обратимости и особенностей токсического и побочного действия нового противоопухолевого гормонального препарата эстразин на внутренние органы животных: пищевод, желудок, 12-перстная кишка, тощая, подвздошная, ободочная и прямая кишка, печень, почки, аорта, легкие, сердце, лимфатические узлы, селезенка, семенники, мочевой пузырь, надпочечники, поджелудочная железа, гипофиз, щитовидная и предстательная железа.
Патоморфологическая оценка совместно с функциональной характеризует токсичность (безвредность) препарата, что дает возможность
прогнозировать побочные эффекты эстразина при клиническом применении у человека и животных.
Практическая ценность.
Практическая значимость работы состоит в получении данных по безвредности препарата эстразин, обязательных для внедрения его в медицинскую и ветеринарную практику. Совокупность данных, полученных при патоморфологическом изучении токсического и побочных эффектов эстразина, характеризуют его как малотоксичный препарат и обосновывают возможность проведения клинических испытаний.
Апробация результатов
Материалы диссертации апробированы.на 1-й Всероссийской научно-практической конференции с международным участием « Отечественные противоопухолевые препараты» Москва, 17-19 марта 2002г, на 2-й Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Отечественные противоопухолевые препараты», Москва, 20-22 марта 2003 г. Материалы доложены и обсуждены на научной конференции студентов и аспирантов кафедры ветеринарной патологии РУДН (2004).
Положения, выносимые на защиту:
1. Патоморфологические изменения внутренних органов лабораторных животных при однократном и курсовом применении гормонального противоопухолевого препарата эстразин, характеризующие его как малотоксичный противоопухолевый препарат.
2. Патоморфологическая характеристика местно-раздражающего действия препарата эстразин, подтверждающая возможность использования его в лекарственной форме: свечи для ректального применения.
Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 6 печатных работ, в том числе 3 в материалах конференций с международным участием.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на I страницах машинописного текста и состоит из введения, списка использованных сокращений, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, изложения результатов исследования и их обсуждения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы из 169 источников, в том числе 59 отечественных. Работа иллюстрирована 3 таблицами и 151 рисунком.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материалы и методы
В работе изучено действие нового отечественного гормонального противоопухолевого препарата эстразин на нормальные внутренние органы животных (крысы и собаки). Препарат синтезирован в Уральском политехническом институте им.С.М.Кирова.
Основой эстразина является эстрон - метаболит основного естественного эстрогена эстрадиола.
Эстразин образован путем прибавления к эстрону гидразоновой группы =КН-КН2.
Предполагалось, что замещение карбонильной группы в молекуле стероида на гидразоновую должно пролонгировать гормональное действие соединения и его противоопухолевый эффект в связи со способностью простейших гидразонов стероидных кетонов в организме подвергаться окислению с образованием реакционноспособных диазостероидов, более прочно связывающихся с рецепторами соответствующих гормонов.
Эстразин представляет собой 3-оксиэстра-1,3,5-триен-17-гидразон соединение. По структуре входящего гормона (эстрон) и модифицирующего фрагмента (гидразоновая группировка) препарат не имеет аналогов среди применяющихся для лечения рака предстательной железы эстрогенов: синэстрол, диэтилстильбэстрол, эстрадурин, этинилэстрадиол, фосфэстрол, хлортрианизен.
Лекарственная форма эстразина - свечи на водорастворимой полиэтиленоксидной основе для ректального введения разработаны в Украинском НИИ фармакотерапии эндокринных заболеваний (до 31.01.92г. Харьковский НИИ Эндокринологии и химии гормонов).
Для патоморфологического исследования внутренних органов животных при применении эстразина использовано 14 собак- самцов породы Английский бигл в возрасте от 8 мес. до 2 лет и массой от 6 кг до 13 кг и 75 крыс - самцов.
Опыты на собаках.
Препарат вводился животным ректально в лекарственной форме, представляющей собой свечи, состоящие из 210 мг эстразина и 1290 мг полиэтиленоксида. В качестве контроля использованы собаки, получавшие per rektum свечи без эстразина — «плацебо».
Эстразин вводили животным однократно (опыты по острой токсичности) или многократно (опыты по хронической токсичности).
Дозы препарата, сроки забоя, лекарственная форма, способ и режим применения препарата при однократном введении представлены в таблице 1.
Таблица 1.
Схема эксперимента по изучению острой токсичности эстразина у собак.
N Доза Сроки эвтаназии
п/п (мг/кг) (сутки)
1 140 7
2 140 30
3 140 120
4 280 7
5 280 30
6 280 120
• - способ введения - однократно, per rectum
• - лекарственная форма - свечи
Дозы препарата, сроки забоя, лекарственная форма, способ и режим применения препарата при многократном введении представлены в таблице 2.
Таблица 2
Схема эксперимента по изучению хронической токсичности эстразина у
собак.
N п/п Доза мг/кг (разовая) Доза, мг/кг (суммарная) Сроки. эвтаназии (сутки)
1 35 700" 1
2 70 1400 1
3 «плацебо» 80 свечей 1
4 35 700' 30
5 70' 1400 30
6 «плацебо» 80 свечей 30
7 35 700' 120
8 70' 1400 120
9 «плацебо» 80 свечей 120
• - способ применения — 20-кратно,per rectum
• - лекарственная форма - свечи
Эвтаназию собак производили утром, натощак с помощью внутривенного введения тиопентала натрия из расчета 100 мг/кг.
Для гистологического исследования были взяты: пищевод, желудок, 12-перстная кишка, тощая, подвздошная, ободочная и прямая кишка, печень, почки, аорта, легкие, сердце, лимфатические узлы, селезенка, семенники, мочевой пузырь, надпочечники, поджелудочная железа, гипофиз, щитовидная и предстательная железа.
Материал фиксировали в 10% нейтральным формалине, заливали в парафин, гистологические срезы окрашивали гематоксилин-эозином, по Ван-Гизону, Суданом 3.
Опыты на крысах.
Крысам - самцам эстразин вводили внутрибрюшинно в дозах 100, 200, 500 мг/кг ежедневно на протяжении 20 дней. В качестве контроля использовались интактные крысы и крысы, получавшие свечи без эстразина -«плацебо» внутрибрющинно в том же режиме. Для внутрибрюшинного введения свечей с эстразином и «плацебо» их измельчали и растворяли в дистиллированной воде, вводили по 6,3 мл.
Дозы препарата, сроки эвтаназии, лекарственная форма, способ и режим введения препарата представлены в таблице 3.
Таблица 3
Схема эксперимента по изучению хронической токсичности эстразнна у
крыс.
N. п/п Доза мг/кг (разовая) > Доза мг/кг (суммарная) Сроки эвтаназии• (сутки)
1 100' 2000 2
2 200 4000 2
3 500 10000 2
4 «плацебо» 20 инъекций 2
5 100 2000 30
6 200- 4000 30-
7 500 100001 30:
8 «плацебо» 20 инъекций 30
9 100 2000 120
10 200 4000 120
11 500 10000 120
12 «плацебо» 20 инъекций 120
• - способ применения — 20-кратно, внутрибрюшинно
• - лекарственная форма - раствор 6,3 мл
Эвтаназия крыс в количестве 5 голов из каждой группы проведена с помощью диэтилового эфира через 2, 30 и 120 суток после окончания курсовых введений. Для гистологических исследований взяты: желудочно-кишечный тракт, сердце, легкие, печень, почки, селезенка, тимус, лимфатические узлы, щитовидные железы, поджелудочная железа, гипофиз, надпочечники, мочевой пузырь, семенники.
2.2Результаты исследований
2.2.1 Патоморфологические изменения внутренних органов собак при однократном ректальном введении эстразина.
После однократного применения эстразина в виде ректальных свечей в дозах 140 и 280 мг/кг собакам - самцам породы Английский Бигл, во внутренних органах собак на ранних сроках исследования обнаруживались признаки расширения и полнокровия капилляров и венул органов, отек. Патологические изменения были умеренными и наблюдались в тонком и толстом кишечнике, почках, печени, легких, предстательной и щитовидной железах, гипофизе. Глубина патологических изменений зависела от дозы и времени после воздействия препарата
Изменения в тонком кишечнике в ранние сроки после однократного применения эстразина носили характер альтеративного воспаления, которые в
поздние сроки приобретали признаки хронического воспаления с четкими репаративными проявлениями.
Изменения в толстом кишечнике (ободочная и прямая кишка) отражали умеренное обратимое местно-раздражающее действие эстразина.
В почках и печени дистрофические изменения паренхиматозных клеток в ранние сроки сопровождались нарушением сосудистой проницаемости эндотелия клубочков почек и синусоидов печени, что, по-видимому, способствовало более стойким изменениям в этих органах в поздние сроки (120 сутки).
Изменения в семенниках, предстательной и щитовидной железе в ранние сроки после применения эстразина носили выраженный деструктивный и атрофический характер. Позднее (30 - 120 сутки) в этих органах преобладали признаки репаративной регенерации. Выраженные атрофические < и деструктивные изменения сохранялись к 120 суткам лишь у собак, получивших эстразин в дозе 280 мг/кг.
В гипофизе собак отмечено увеличение числа эозинофильных клеток. В надпочечниках отмечена гиперплазия клубочкового и субклубочкового слоев. К 120 суткам эти изменения в гипофизе и надпочечниках собак практически исчезали.
Изменения в легких собак носили характер хронического воспаления, с картиной обострения в ранние сроки и выраженной репаративной регенерацией в поздние сроки после применения эстразина
2.2.2 Патоморфологические изменения внутренних органов собак при курсовом ректальном введении эстразина.
После хронического применения эстразина у собак в суммарных дозах 700 и 1400 мг/кг в виде ректальных свечей четкие морфологические изменения обнаруживались в почках, печени, желудочно-кишечном тракте, легких, сердце, эндокринных и половых железах собак. Изменения сопровождались сосудистыми нарушениями в виде отека, полнокровия и расширения капилляров и венул, иногда геморрагии. Глубина морфологических изменений в органах зависела от дозы и сроков после прекращения воздействий. В большинстве органов эти изменения были обратимы и исчезали к 30 и 120 суткам.
В почках дистрофические и деструктивные изменения канальцевых и клубочковых структур выявлялись на фоне выраженного отека, застойных сосудистых проявлений; были стойкими и сохранялись в большей или в меньшей степени до 120 суток.
В печени собак умеренные дистрофические изменения гепатоцитов, расширение сшгусоидов, пространств Диссе, отмеченные в ранние сроки, практически исчезали к кошту наблюдения (120 сутки).
В желудке, миокарде, мочевом пузыре очаговые дистрофические изменения клеток, сосудистые нарушения были полностью обратимы к 30 и 120 суткам.
В легких и тонком кишечнике в ранние сроки обнаруживались выраженные воспалительные изменения с признаками обострения хронических проявлений. В поздние сроки после окончания введений эстразина в этих органах преобладали репаративные изменения.
Изменения в прямой и ободочной кишках отражали умеренное вполне обратимое местно-раздражающее действие эстразина.
Изменения в половых и эндокринных органах с одной стороны отражали токсический эффект высоких доз эстразина, а с другой - действие его гормонального компонента. Так, в семенниках и предстательной железе собак после применения эстразина отмечены очаговые деструктивные и атрофические изменения, которые в большей или меньшей степени сохранялись до 30 суток и практически исчезали к 120 суткам. В фолликулах щитовидных желез собак отмечено нарушение структуры и образование коллоида Признаки частичной нормализации в фолликулах наблюдались на 30 сутки на фоне очаговых атрофических изменений. Полное восстановление в щитовидных железах наблюдалось на 120 сутки.
В гипофизе собак отмечено четкое увеличение числа эозинофильных клеток, преобладание которых сохранялось и до 120 суток.
В надпочечниках собак в ранние сроки после применения обеих доз эстразина отмечена умеренная гипоплазия пучкового слоя, которая, однако, была обратимой к 30 или 120 суткам.
23 Местно-раздражающее действие эстразина.
Исследование местно-раздражающего действия эстразина проведено на 14 собаках - самцах породы Английский бигл в опытах по изучению острой и хронической токсичности препарата.
Эстразин в виде свечей вводили per rectum однократно в дозах 140 и 280 мг/кг или многократно в дозах 35 и 70 мг/кг на протяжении 20 дней. В качестве контроля использовались собаки, получавшие ректально свечи без эстразина.
Забой собак внутривенным введением тиопентала натрия проводили через 7,30 и 120 суток после многократных введений эстразина.
2.3.1 Патоморфологическое изучение прямой и ободочной кишок собак после однократного ректального введения свечей с эстразином.
При макроскопическом осмотре слизистой прямой и дистального отдела ободочной кишки через 7 суток после введения свечей с эстразином в дозах 140 и 280 мг/кг отмечена умеренная, неравномерная гиперемия слизистой, отек.
Через 30 и 120 суток изменений не обнаружено.
При гистологическом исследовании прямой кишки через 7 суток после введения эстразина отмечены признаки отека, участки очаговой и тотальной десквамации эпителия крипт, расширение лимфатических и кровеносных сосудов, воспалительная инфильтрация. В ободочной кишке - отек, очаговые деструктивные изменения эпителия крипт, отсутствие слизеобразования. Деструктивные, воспалительные и атрофические изменения при дозе 280 мг/кг выражены сильнее в обоих отделах толстой кишки.
Через 30 суток после однократного введения свечей с эстразином в дозах 140 и 280 мг/кг в слизистой прямой и ободочной кишки отмечены признаки выраженной регенерации эпителия, рубцовые изменения на месте эрозий, восстановление слизеобразования. Однако сохранялись участки атрофии апикальных участков крипт.
Через 120 суток в прямой и ободочной кишках отмечено полное восстановление слизистой.
23.2 Патоморфологическое изучение прямой и ободочной кишки собак после курсового введения свечей с эстразином.
Макроскопические изменения слизистой прямой и дистального отдела ободочной кишки через 1 сутки после курсового ректального введения свечей с эстразином и плацебо были сходными и выражались в умеренной гиперемии. Позднее (30 и 120 сутки) изменений не обнаруживалось.
При морфологическом изучении слизистой прямой и ободочной кишок собак, получавших свечи без эстразина, отмечен небольшой отек, встречались участки десквамации поверхностного эпителия крипт, умеренная воспалительная инфильтрация, полнокровие и расширение капилляров и венул. У собак, получавших свечи с эстразином в дозах 35 и 70 мг/кг (суммарные дозы 700 и 1400 мг/кг), в слизистой прямой и ободочной кишок наблюдались подобные морфологические изменения, а также обнаруживались мелкие участки кровоизлияний.
Через 30 суток после окончания введений собакам свечей с эстразином в дозе 35 мг/кг (суммарная доза - 700 мг/кг) отмечена выраженная регенерация эпителия, сохранялись отдельные инфильтраты. После окончания введений собакам свечей с эстразином в дозе 70 мг/кг (суммарная доза - 1400 мг/кг) в слизистой прямой и ободочной кишок сохранялись участки, лишенные поверхностного эпителия.
К 120 суткам у всех собак в слизистой прямой и ободочной кишки отмечены выраженные репаративные изменения эпителия крипт и рубцовые изменения в строме крипт.
Проведенное исследование показало, что лекарственная форма эстразина в виде ректальных свечей вызывает умеренное, обратимое местно-раздражающее действие в слизистой прямой и ободочной кишок собак, как при однократном, так и при многократном применении.
Морфологические проявления местно-раздражающего действия эстразина более выражены при однократном применении и зависят от дозы препарата. Многократное применение свечей с эстразином и без него вызывает сходное местно-раздражающее действие в прямой и ободочной кишке собак.
На основании полученных данных можно заключить, что лекарственная форма эстразина (ректальные свечи) может быть рекомендована для клинического применения.
2.4 Патоморфологические изменения внутренних органов крыс при курсовом внутрибрюшинном применении эстразина.
После курсового внутрибрюшинного введения эстразина в суммарных дозах 2000 , 4000 , 10000 мг/кг (разовые дозы - 100 , 200 , 500 мг/кг соответственно) морфологические изменения обнаруживались в печени, почках, семенниках, а также в лимфатических узлах, тимусе, надпочечниках, щитовидной железе и гипофизе.
Глубина морфологических изменений зависела от дозы эстразина и сроков после окончания его воздействий.
Изменения в печени, миокарде в ранние сроки после применения эстразина в суммарной дозе 2000 мг/кг были незначительными и представляли собой очаги вакуолизированных клеток. С увеличением дозы очаги дистрофии становились более распространенными и увеличивались в размерах. Эти изменения были преходящими и исчезали к 30 суткам. При дозах 2000 и 4000 мг/кг в печени крыс на 120 сутки наряду с участками вакуольной дистрофии по периферии долек наблюдали предопухолевые изменения, локализующиеся центролобулярно, а у одной крысы (2000 мг/кг) обнаружена гепатома (аденома).
В печени одной павшей крысы после применения эстразина в дозе 10000 мг/кг наблюдали участки некрозов.
В почках крыс изменения носили стойкий деструктивно-дистрофический характер. Они проявлялись на фоне выраженного интерстициального отека
После применения эстразина в высокой токсичной дозе (суммарная доза. 10000 мг/кг) характер изменений в почках в поздние сроки наблюдения соответствовал нефрозу.
В семенниках крыс в ранние сроки после применения эстразина в дозах 2000 и 4000 мг/кг отмечены очаговые дегенеративные и атрофические изменения сперматогенного эпителия, которые становились более выраженными (вплоть до полной атрофии сперматогоний) при увеличении дозы до 10000 мг/кг. Характер восстановления в семенниках зависел от дозы эстразина. К концу наблюдения полного восстановления в семенниках не наблюдалось.
В лимфатических узлах и тимусе крыс в ранние сроки после курсового воздействия эстразина отмечались очаговые деструктивные и атрофические изменения, глубина которых зависела от величины дозы препарата Выраженные репаратативные изменения в этих органах обнаруживались к 30 суткам, у единичных крыс очаговые атрофические изменения лимфоидной ткани сохранялись позднее.
В надпочечниках крыс наблюдалось преходящее увеличение коркового слоя, наиболее выраженное после применения эстразина в суммарных дозах 4000 и 10000 мг/кг.
В щитовидных железах отмечено обратимое увеличение содержания коллоида в фолликулах при всех использованных дозах эстразина Увеличение числа крупных фолликулов с сопутствующим снижением количества
интрафолликулярной ткани отмечено после применения эстразина в дозе 10000 мг/кг.
В гипофизе крыс после введения эстразина в дозе 2000 мг/кг выраженных изменений не обнаружено. Позднее были обнаружены участки гиперплазии. После дозы 4000 и 10000 мг/кг отмечено снижение числа эозинофильных клеток в ранние сроки, которое сменялось очаговой, компенсаторной гиперплазией этих клеток на 120 сутки.
В легких и тонком кишечнике морфологических особенностей по сравнению с контрольными животными не выявлено.
В остальных изученных органах (пищевод, желудок, толстый кишечник, аорта, мочевой пузырь, селезенка, поджелудочная железа) изменений не обнаружено или они были незначительными и преходящими.
3. ВЫВОДЫ
1. По степени выраженности морфологических изменений внутренних органов лабораторных животных новый противоопухолевый гормональный препарат эстразин может быть отнесен к категории низкотоксичных препаратов.
2. При однократном и курсовом применении эстразина у собак и крыс морфологические изменения обнаружены в почках, печени, эндокринных, половых железах, сердце, легких, тонком и толстом отделе кишечника и лимфопролиферативных органах.
3. Глубина и характер повреждений. зависит от вида животных, дозы эстразина, способов его введения и сроков наблюдения.
4. Наиболее чувствительными к токсическому действию эстразина органами у собак являются почки и печень, у крыс - почки, печень и семенники.
5. У собак морфологические изменения в органах и тканях сопровождаются более четкими, чем у крыс сосудистыми нарушениями в виде отека, полнокровия и расширения капилляров и венул.
6. Морфологические изменения, обусловленные токсическим действием эстразина, в большинстве органов являются обратимыми и исчезают практически полностью к 30 - 120 суткам после применения препарата. Исключение составляют почки и печень, морфологические изменения в которых у отдельных животных сохраняются позже 120 суток.
7. Лекарственная форма препарата эстразин - ректальные свечи вызывает умеренное обратимое местно-раздражающее действие как при однократном (в большей мере), так и при многократном применении и может быть рекомендована для практического применения.
4. ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПО ПРАКТИЧЕСКОЙ РЕАЛИЗАЦИИ.
НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ
• Эстразин, обладающий выраженной противоопухолевой, эстрагенной и антиандроненной активностью, является низкотоксичным гормональным препаратом, что обосновывает возможность его дальнейшего исследования и применения в медицине и ветеринарной практике.
• Лекарственная форма эстразина (ректальные свечи) может быть рекомендована для использования в клинике.
5. СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ
ДИССЕРТАЦИИ
1. И.Б.Меркулова, А.А.Козлов, Л.М.Михайлова Патоморфологическое исследование внутренних органов собак при однократном ректальном введении эстразина // Материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. Российский биотерапевтический журнал.- 2002.- т. 1. №2.- С. 131.
2. А.А.Козлов, И.Б.Меркулова, Л.М.Михайлова Патоморфологическое исследование внутренних органов собак после многократного ректального введения эстразина // Материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. Российский биотерапевтический журнал. - 2003.- №1.- С. 26.
3. И.Б.Меркулова, А.А.Козлов, Л.М.Михайлова Патоморфологическое исследование внутренних органов крыс при курсовом внутрибрюшинном введении эстразина // Материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. Российский биотерапевтический. - 2003.- №1.- С.31.
4. А.А.Козлов Изменение внутренних органов крыс при курсовом внутрибрюшинном введении эстразина // Концепции, практика и перспективы современного земледелия. Материалы научной конференции аграрного факультета 15-16 апреля 2003; М. Издательство Российского Университета дружбы народов.-2003.- С. 170-171.
5. А.А.Козлов. Новый противоопухолевый гормоноцитостатик эстразин: патоморфологическое исследование действия // Концепции, практика и перспективы современного земледелия. Материалы научной конференции аграрного факультета 15-16 апреля 2003; М. Издательство Российского Университета дружбы народов.-2003.- С. 173-175.
6. А.А.Козлов, И.Б.Меркулова, Л.М.Михайлова. Оценка местно-раздражающего действия эстразина. Ветеринария.-2004.- №5.- С.50-53.
Козлов Алексей Алексеевич (Россия) МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ТОКСИЧЕСКОГО И ПОБОЧНОГО ДЕЙСТВИЯ НОВОГО ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ГОРМОНАЛЬНОГО ПРЕПАРАТА ЭСТРАЗИН
Работа посвящена изучению выраженности и особенностей морфологических изменений внутренних органов лабораторных животных (собак, крыс) при однократном и курсовом применении нового противоопухолевого гормонального препарата эстразин в рамках его доклинического изучения. Исследование проведено в соответствии с требованиями Фармакологического комитета МЗ РФ. В результате проведенного исследования показано,, что эстразин при применении в виде ректальных свечей вызывает морфологические изменения в печени, почках, тонком и толстом кишечнике, семенниках, надпочечниках и ряде других органов. Наиболее чувствительными органами к токсическому действию эстразина являются почки, печень, семенники.
Морфологические изменения по степени выраженности можно отнести к категории умеренных. Все морфологические изменения, в том числе наблюдаемые в наиболее чувствительных органах, являются обратимыми и практически полностью исчезают к 30-120 суткам после введения препарата. Лекарственная форма эстразина - свечи для ректального применения, вызывает умеренное местно-раздражающее действие, что не препятствует ее практическому применению.
Alexey A. Kozlov (Russia) MORPHOLOGICAL ASPECTS OF TOXIC AND SIDE EFFECTS OF A NOVEL ANTI-CANCER HORMONE DRUG ESTRASIN
The study aimed at the investigation of expression and characteristics of morphological changes of laboratory animals' (dogs and rats) internal organs at single or course administration of a novel anti-cancer hormone drug estrasin within pre-clinical study. The investigation was carried out according to the requirements of the Pharmacological Committee, Ministry of Health, RF. The results of the study showed that estrasin caused morphological changes in liver, kidneys, large and small intestines, testicles и adrenal glands and some other organs when administered in the form of rectal suppository. The most sensitive organs to estrasin toxicity were kidneys, liver and testicles. Morphological changes in terms of expression rate can be determined as moderate. All the morphological changes including those in the most sensitive organs are reversible and disappear completely by the 30-120th day after drug administration. Estrasin dosage form, which is suppository for rectal administration, has moderate locally irritating effect that does not prevent from its medical use.
Служба множительной техники ГУ РОНЦ им. H.H. Блохина РАМН Подписано в печать 20.05.04 Заказ № • 149 Тираж 100 экз
»13 999
Оглавление диссертации Козлов, Алексей Алексеевич :: 2004 :: Москва
Введение.
Глава 1. Обзор литературы.
1.1. Гормональные препараты как средства противоопухолевой терапии. Применение, механизм действия.
1.2 Эстразин. Структура, физико-химические свойства, биологическая активность.
1.3 Возможные показания клинического применения эстразина в ветеринарной практике.
1.3.1 Опухоли перианальных желез собак.
1.3.2 Опухоли яичка собак.
1.3.3 Опухоли предстательной железы собак.
Глава 2. Материалы и методы.
Глава 3. Результаты собственных исследований.
ЗЛ.Патоморфологические изменения внутренних органов собак при однократном ректальном введении эстразина.
3.1.1.Макроскодическое исследование внутренних органов.
3.1.2.Гистологическое исследование внутренних органов.
Введение диссертации по теме "Патология, онкология и морфология животных", Козлов, Алексей Алексеевич, автореферат
Актуальность темы. Гормональные препараты зарекомендовали себя как высокоэффективные лекарственные средства для лечения онкологических заболеваний.
Они применяются для лечения злокачественных заболеваний, как в медицине, так и, все чаще в ветеринарии. Основными показаниями для применения гормональных препаратов являются, главным образом, опухоли тех органов, которые находятся под влиянием гормонов, так называемые, гормонозависимые опухоли (3,9).
Хорошо известны результаты гормонотерапии рака молочной железы, предстательной железы, эндометрия, щитовидной железы, почки.
В последнее время накоплены данные, свидетельствующие о гормональной зависимости рака гортани, меланобластомы, опухолей желудочно-кишечного тракта, хондро - и остеогенной саркомы. Эти данные открывают возможности дальнейшего расширения показаний к применению гормонотерапии, как в медицине, так и ветеринарии (67,97).
К основным гормональным средствам, используемым при лечении злокачественных опухолей животных и человека относятся, стероидные гормоны (андрогены, эстрогены, гестогены), их синтетические аналоги и антигормоны (антиэстрогены, антиандрогены, антипрогестины и препараты, сочетающие в себе действие двух антигормонов).
В последнее время большое внимание уделяется созданию эффективных в противоопухолевом отношении гормональных препаратов из группы гормоноцитостатиков, а также гипоталямических гормонов и их аналогов (42,45).
Создание новых лекарственных средств для терапии злокачественных новообразований остается актуальной проблемой, поскольку все существующие в настоящее время противоопухолевые препараты характеризуются недостаточной активностью, низкой избирательностью специфического действия, высокой токсичностью.
При доклиническом изучении токсических и побочных эффектов (безвредности) новых противоопухолевых препаратов особое место занимают патоморфологические исследования. Эти исследования являются обязательными в доклиническом изучении безвредности каждого нового противоопухолевого препарата, поскольку результаты функциональных токсикологических исследований не всегда дают возможность корректно прогнозировать интенсивность повреждения органов и тканей, а также степень их обратимости. t
Патоморфологические исследования позволяют выявить нежелательные повреждающие эффекты на нормальные органы и ткани животных, определить границы применения безопасных доз изучаемых препаратов, а также выявить их тропность к определенным тканям. Исследование последнего аспекта особенно важно при изучении новых гормональных препаратов и гормоноцитостатиков - препаратов с комбинированным биологическим действием (гормональным и цитостатическим). Морфологические исследования позволяют прогнозировать чувствительность опухолей конкретных локализаций к изучаемому препарату и/или спектр органов-мишеней его побочного действия.
Патоморфологическая и функциональная оценка действия препарата на органы и ткани животных является одним из ведущих звеньев в сложной программе доклинического изучения новых противоопухолевых препаратов. Она гарантируют безопасность клинического применения препарата, позволяет более рационально строить его терапевтические режимы.
Цель и задачи исследования. Целью исследования является морфологическая оценка характера и особенностей токсического и побочного действия (безвредности) нового гормонального препарата эстразин.
Задачи исследования.
1. Исследование патоморфологических изменений внутренних органов собак при однократном ректальном введении эстразина, изучение зависимости побочного и токсического действия эстразина от режима применения и величины дозы (острая токсичность препарата).
2. Исследование патоморфологических изменений внутренних органов собак при многократном (курсовом) ректальном введении эстразина, изучение зависимости побочного и токсического действия эстразина от режима применения и величины дозы (хроническая токсичность препарата).
3. Исследование патоморфологических изменений внутренних органов крыс при многократном (курсовом) внутрибрюшинном применении эстразина (хроническая токсичность препарата).
4. Патоморфологическая оценка обратимости и скорости репаративных процессов в органах и тканях животного после применения эстразина.
5. Исследование местно-раздражающего действие эстразина при его ректальном применении у собак.
Новизна и научная значимость.
Впервые дана исчерпывающая патоморфологическая оценка характера, интенсивности, обратимости и особенностей токсического и побочного действия нового противоопухолевого гормонального препарата эстразин на внутренние органы животных: пищевод, желудок, 12-перстная кишка, тощая, подвздошная, ободочная и прямая кишка, печень, почки, аорта, легкие, сердце, лимфатические узлы, селезенка, семенники, мочевой пузырь, надпочечники, поджелудочная железа, гипофиз, щитовидная и предстательная железа.
Патоморфологическая оценка совместно с функциональной характеризует токсичность (безвредность) препарата, что дает возможность прогнозировать побочные эффекты эстразина при клиническом применении у человека и животных.
Практическая ценность.
Практическая значимость работы состоит в получении данных по безвредности препарата - эстразин, обязательных для внедрения его в медицинскую и ветеринарную практику. Совокупность данных, полученных при патоморфологическом изучении токсического и побочных эффектов эстразина характеризуют его как малотоксичный препарат и обосновывают возможность проведения клинических испытаний.
Апробация результатов
Материалы диссертации апробированы на 1-й Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Отечественные противоопухолевые препараты» Москва, 17-19 марта 2002г, на 2-й Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Отечественные противоопухолевые препараты», Москва, 20-22 марта 2003 г.
Материалы доложены и обсуждены на научной конференции студентов и аспирантов кафедры ветеринарной патологии РУДН (2004).
Положения, выносимые на защиту:
1. Патоморфологические изменения внутренних органов лабораторных животных при однократном и курсовом применении гормонального противоопухолевого препарата эстразин, характеризующие его как малотоксичный противоопухолевый препарат.
2. Патоморфологическая характеристика местно-раздражающего действия препарата эстразин, подтверждающая возможность использования его в лекарственной форме: свечи для ректального применения.
Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 6 печатных работ, в том числе 3 в материалах конференций с международным участием.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 175 страницах машинописного текста и состоит из введения, списка использованных сокращений, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, изложения результатов исследования и их обсуждения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы из 169 источников, в том числе 59 отечественных. Работа иллюстрирована 3 таблицами и 151 рисунком.
Заключение диссертационного исследования на тему "Морфологические аспекты токсического и побочного действия нового противоопухолевого гормонального препарата эстразин"
Выводы
1. По степени выраженности морфологических изменений внутренних органов лабораторных животных новый противоопухолевый гормональный препарат эстразин может быть отнесен к категории низкотоксичных препаратов.
2. При однократном и курсовом применении эстразина у собак и крыс морфологические изменения обнаружены в почках, печени, эндокринных, половых железах, сердце, легких, тонком и толстом отделе кишечника и лимфопролиферативных органах.
3. Глубина и характер повреждений зависит от вида животных, дозы эстразина, способов его введения и сроков наблюдения.
4. Наиболее чувствительными к токсическому действию эстразина органами у собак являются почки и печень, у крыс - почки, печень и семенники.
5. У собак морфологические изменения в органах и тканях сопровождаются более четкими, чем у крыс сосудистыми нарушениями в виде отека, полнокровия и расширения капилляров и венул.
6. Морфологические изменения, обусловленные токсическим действием эстразина, в большинстве органов являются обратимыми и исчезают практически полностью к 30 — 120 суткам после применения препарата. Исключение составляют почки и печень, морфологические изменения в которых сохраняются позже 120 суток.
7. Лекарственная форма препарата эстрразин - ректальные свечи вызывает умеренное обратимое местно-раздражающее действие как при однократном (в большей мере), так и при многократном применении и может быть рекомендована для практического применения.
Предложения по практической реализации научных выводов
• Эстразин, обладающий выраженной противоопухолевой, эстрагенной и антиандроненной активностью является низкотоксичным гормональным препаратом, что обосновывает возможность его дальнейшего исследования и применения в медицине и ветеринарной практике.
• Лекарственная форма эстразина (ректальные свечи) может быть рекомендована для использования в клинике.
Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2004 года, Козлов, Алексей Алексеевич
1. Байматов В.Н., Мухамадиев Р.Г. Морфофункциональные изменения в печени крыс при использовании цитостатиков // Доклады Россельхозакадемии.-1997.№ 5.-С. 40-41.
2. Бассалык JI.C., Кузьмина З.В. Муравьева Н.И. и соавт. Рецепторы стероидных гормонов в опухолях человека // М.: Медицина, 1987, 224с.
3. Бернштейн Л.М., Рыбин Е.П. Дильман В.М. Эндокринные изменения при раке прямой и ободочной кишки // Вопр. Онкол,- 1987.Вып.ЗЗ.№6.-С. 12-22.
4. Бертнггейн JT.M. Мегестрол ацетат как средство гормонотерапии в онкологии //Вопросы онкологии.- 1998. Том 44. № 2.- С. 142-148.
5. Вайс Э., Фрезе К. (E.Weiss, K.Frese). Опухоли кожи // Международная гистологическая классификация опухолей домашних животных. Бюллетень ВОЗ. Женева.- 1975. Вып. 50. №1.- С. 77-99.
6. Валуева И.М. Экспериментальные основы лекарственной терапии опухолей яичника.: Дис. канд. мед. наук. М., 1981.
7. Введенская Н.А., Юшков С.Ф., Коняева О.И. Патоморфологические изменения внутренних органов экспериментальных животных после применения препарата кортифен // Сб.науч.тр/ Химиотерапия опухолей в СССР.- 1985. Вып.43. С. 105-110.
8. Гарин A.M. Принципы и возможности современной эндокринной терапии опухолей.- М. 2000.-207с.
9. Гистология. М. Медицина, 1972. Под ред. В.Г.Елисеева, Ю.И.Афанасьева, Ю.Н.Копаева, Н.А.Юриной. 616с.
10. Голубева В.А., Кузьмина З.В., Герштейн Е.С., и соавт. Вопросы онкологии.- 1992. Вып.38. №4.- С. 464-469.
11. Гормонотерапия злокачественных опухолей. / Под ред. Проф. Н.И.Лазарева.- М. 1968.- 216 с.
12. Дильман И.М., Бернштейн Л.М., Цырлина Е.В., Ревской С.Ю. Гормоны в экспериментальной и клинической онкологии. Итоги науки и техники. Онкология. /М.:ВИНИТИ.- 1990. № 20.- 216 с.
13. Иваненко Т.И., Плужнокова Г.Н. Федотов В.П. Гормональные свойства новых модифицированных 11-а-оксипроизводных эстрогенов // Проблемы эндокринологии.-2001. Вып.48. №3. С. 42-43.
14. ИрдЕ.А. Бюлл. эксперим. биол. и медицины.- 1964.Вып.З. С. 89-93.
15. Лунькова Е.Ф. Материалы 1 съезда эндокринологов УССР. Харьков.-1965. С. 271.
16. Касавина Б.С., Торбенко В.П., Ухина Т.В. Реакция различных видов соединительной ткани на введение гормонов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины,- 1977. Вып.84. №7. С.38-41.
17. Киселев В.И., Лагова Н.Д., Софьина З.П., Валуева И.М. Сравнительный анализ противоопухолевой активности гормоноцитостатиков кортифена и амбукора // Экспериментальные проблемы экспериментальной химиотерапии опухолей. Черноголовка.- 1987. С.88-91.
18. Кураксина JI.JI. Изменения почек под влиянием синтетических препаратов половых гормонов в эксперименте.: Автореф. дис. канд. Биол. наук. Ташкент., 1975.
19. Лагова Н.Д. Гормонотерапия рака молочной железы в эксперименте // Гормонотерапия злоачественных опухолей. М,- 1968. С. 48-69.
20. Лагова Н.Д. Буренин И.С. Чебышев А.П., Валуева И.М. Пролактин как противоопухолевый препарат // Труды VII итоговой научной конференции Ин-та. эксп. и клин, онкологии АМН СССР,- 1971. С. 114-117.
21. Лагова Н.Д. Роль эндокринных механизмов в противоопухолевом действии гормоноцитостатиков // Экспер. Онкол.- 1982. №5. стр. 38-42.
22. Лазарев Н.И. Теоретические основы профилактики и терапии дисгормональных опухолей. М.- 1963.
23. Ларионов Л.Ф., Манкин З.В. Биологические и химические способы лечения рака//Злокачественные опухоли. Ленинград.- 1948, Вып.1. 4.2. С. 117-152.
24. Ларионов Л.Ф. Сложные алкилирующие метаболиты как новый класс противоопухолевых соединений // Патологическая физиол. и экспер. терапия,-1961. Вып.2. С. 3-9.
25. Мальцева Л.Ф, .Муратова Г.П,.Арефьева А.К и др. Токсичность и кумулятивные свойства имофена // Химиотерапии опухолей в СССР. М.-1975. Вып. 19. С. 83-89.
26. Меркулова И.Б., Гаврилова Т.Н. Результаты патоморфологического исследования внутренних органов экспериментальных животных при применении циклоплатама // Сб. Циклоплатам. М.-1993. С. 34-40.
27. Меркулов Г.А. Курс патологогистолоической техники.-М.: Медгиз, 1961.-240с
28. Методические рекомендации по доклиническому изучению новых фармакологических веществ. М.2000 г.
29. Михайлова JI.M. Токсикология новых отечественных противоопухолевых препаратов: Дис. доктора, биол. наук. М., 1995.
30. Михайлова JI.M., Пильщиков С.Н., Ермакова Н.П., Сыркин А.Б. Предклиническая токсикология нового отечественного противоопухолевого препарата-эстразина // Вестник ОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН.- 1996. № 3. С. 28-32.
31. Нильсен С., Лейн Д.(Ы1е1зеп S.W., Lein D.H.) Опухоли яичка // Международная гистологическая классификация опухолей домашних животных. Бюллетень ВОЗ. Женева.-1975. Вып. 50,1-2Б С. 70-77.
32. Орлова Л.В. Распространение опухолей и лейкозов у собак: Дисс. канд. мед. наук, М., 1970.-158с.
33. Подильчак М.Д., Калынюк П.П. Гистоморфология печени и селезенки после продолжительного введения синестрола. Фармакология и токсикология. Сб. научных трудов, вып.1. Киев, 1964, 137-140.
34. Пономарьков В.И., Голубева В.А. Клинико-морфологический анализ спонтанных опухолей яичка у собак // Архив патологии.- 1986. №8. С.28-34.
35. Розен В.Б., Смирнов А.Н. Рецепторы и стероидные гормоны.-М.,Изд-во МГУ.- 1980.-310 с.
36. Смирнова З.С, Н.Д.Лагова, В.И.Киселев, Л.М.Борисова, В.И.Нифонтов, Е.А.Штокорева, Л.Н.Воловельский. Эстразин новый противоопухолевый препарат адресованного действия // Вестник РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН.- 1996. № 3. С. 24-28.
37. Смирнова З.С. Новые производные гормонов как противоопухолевые препараты (экспериментальное исследование): Дис. докт. мед. наук. М., 2001.
38. Е.В.Соловьева. Новые синтетические аналоги эстрогенов и антиэстрогенов, молекулярные механизмы действия: Автореф. дис. канд. мед. наук. М., 1996.
39. Соколов В.Е., Шабадаш С.А. Гепатоидные железы особый тип кожных желез млекопитающих // Известия АН СССР. Серия биологическая.- 1987. Вып.1. С. 82-95.
40. Сулейманов А.С., Хамдамов Т. Влияние эстрадиола дипропионата (ЭДП) на гистоморфологическое строение некоторых внутренних органов. Научные труды Самаркандского с/х института, Самарканд. 1979.
41. Тарасов С.А. Сахаров С.Ф. Опухоли собак по секционным данным // Вопросы онкологии.- 1968. Вып.14. №12. С.72-75.
42. Терехов П.Ф. Ветеринарная клиническая онкология. Москва, Колос, 1983, 208с.
43. Терехов П.Ф. Спонтанные злокачественные новообразования домашних животных (Клиника, распознавание, лечение): Автореф. дис. док.мед.наук. М., 1972.- 39с.
44. Фисенко В.П, Е.В.Арзамасцев, Э.А.Бабаян, В.М.Булаев, и др. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М.- 2000. С. 100-102, 104.
45. Химиотерапия опухолевых заболеваний. Под редакцией Н.И.Пере-водчиковой. М.-2000.- 391 с.
46. Холл У. Нильсен С., Мак-Энти К. (Holl W.C., Nielsen S.W., McEntee К.) Опухоли проостаты и пениса // Международная гистологическая классификация опухолей домашних животных. Бюлл. ВОЗ. Женева. -1977. Вып.53. № 2-3. С. 229-238.
47. Юшков С.Ф., Бухарова И.К., Трещалин И.Д Морфологическая характеристика особенностей токсического действия платина // Химиотерапия опухолей в СССР.- 1978. Вып.25. С. 191-196.
48. Юшков С.Ф., Бухарова И.К., Введенская Н.А., Еременко М.П. Патоморфологические аспекты токсического действия препарата дистрон // Химиотерапия опухолей в СССР.-1979. Вып. 28. С.61-67.
49. Юшков С.Ф.,.Бухарова И.К,.Гзовская О.Н Морфологическая характеристика внуиренних органов лабораторных животных при применении препарата хлофоцил // Химиотерапия опухолей в СССР.-1976. Вып.21. С. 186-190.
50. Юшков С.Ф. Материалы к изучению морфологических изменений нормальных тканей и некоторых перевиваемых опухолей при применении противоопухолевых препаратов: Автореф. дис. докт. мед. наук. М., 1970.
51. Alexander J.W., Appel G.O. A malignant neoplasms resembling a circumanal gland adenocarcinoma in a dog // Cornell Vet.- 1976.-Vol. 66. P. 97-104.
52. Banks W.J. Applied veterinary histology, Baltimore est, Williams and Wilkins.- 1986.-583p.
53. Barsanti J.A., Finco D.R. Medical menagement of canine prostatic hyperplasia // In Kirk's Current Veterinary Therapy XI1. Eds J.D. Bonagura and R.W/Kirck. Philadelphia , W.B. Saunders.- 1995.- P. 10331073.
54. Barsanti J.A., Finco D.R. Canine prostatic diseases // Vet.Clin. of N. Am. Smoll Animal Pract.- 1986.-Vol.l6.№3. P. 587-591.
55. Bastianello S.S. A survey on neaplasia in domestic specees over a 40-year period from 1935 to 1974 in the Republic of South Africa // VI. Tumours occuring in dogs. Onderstepoort J. Of Vet.Res.-1983.- Vol.50. №3. P.199-220.
56. Berrocal A., Vos J.H., Ingh T. et al. Canine perianal tumors // J.Vet.Med. Series A.- 1986,- Vol.36. №10. P. 739-749.
57. Bescrovny A.M. Indused mammarytumors in rats as a model for studyng the antitumoral activity of hormonal compounds of the androstane series // Neoplasma.- 1966.-Vol.13. P.159-167.
58. Bhakoo H., Milholland R., Lopez R., Karakosis C. High incidence and characterization of glucocorticoid receptors in human malignant malanoma // J.Natl.Cancer Inst.-1981.- Vol.66 № 1 P. 21-25.
59. Bostock D.E., Neoplasms of the skin and subcutaneous tissues in dogs and cats //Brit. Vet. J.-1986.- Vol.142 P.l-19.
60. Carpenter L., McNeel S., Grier R. What's your radiographic diagnosis? Perianal gland adenocarcinoma with secondary metastasis to sublumbar lymph nodes in dogs // Lowa St. Univ.Vet.-1982.- Vol.44. №2. P. 118-120.
61. Chastain C., Ganjan V. Chemical endocrinology of compation animals // Lea and Febiger, Philadelphia.- 1986.- Vol.568. P. 498-499.
62. Christoph H.J., Diseases of dog. The encyclopedia for the smoll animals practitioner// Pergamonpress. Oxford.- 1975.- 496 p.
63. Dhaliwal R.S., Kitchell B.E., Knight B.L., Schmidt B.R. Treatment of aggressive testicular tumors in four dogs // J.of the Amer. Anim.Hosp. Assoc.-1999.-Vol.35. №4. P.311-318.
64. Dorfman M., Barsanti J. Diseases of the canine prostate gland // Сотр. On Contin. Educ. For the Pract. Veter.- 1995.- Vol.17 №6. P.791-811.
65. Dorn A.S., Bone D.L., Bellah J.R. Sex hormone-related diseases treated surgicaly in male dogs // Modern.Vet. Practice.- 1985.- Vol.66.№10. P. 727733.
66. Durham S.K., Dietze A.E. Prostatic adenocarcinoma with and without metastasis to bone in dogs // J.Amer.Vet.Med.Assoc.-1986.- Vol.188. №12. P. 1432-1434.
67. Elling H., Ungemach F.R. Steroidhormonrezeptoren in perianaltu-moren des hundes // Berliner und Munchener Tierarztliche Wochen-schrifL-1981.-Vol.94. №2. P.33-35.
68. Englesman E., Persijn J.P., Korsten C.B., Cleton F.J. Oestrogen recept in human breast cancer tissue and response to endocrine therapy // Br. Med. J.- 1973.-Vol.2. P. 750-752.
69. Er J.C., Sutton R.H. A survey of skin neoplasms in dogs from the Brisbane region//Austral. Vet.J.-1989.-Vol.66.№7. P.225-227.
70. Esson E.C. Possibilities for the cure of Hodgkin's disease // Cancer (Philad).- 1966.- Vol.19. P. 346-350.
71. Ettinger S.J. Textbock of veterinary internal medicine: Disiases of the dog and cat. 3rd ed. , W.B.Saunders Сотр., Philadelphia.-1989.- Vol.1. №2. P. 1276-1328.
72. Evans R.M. The steroid and thyroid hormone receptor superfamily // Sci.-1988.-Vol.240. P. 889-895.
73. Evans C.R., Pierrepoint C.G. Tissue-steroid interactions in canine hormone-dependent tumours // Vet.Rec.- 1975.- Vol.97. P. 464-467.
74. Gandini C. Hiperplasia prostatica benigna nel cane // Summa.- 1989.-Vol.6. №4. P. 263-266.
75. Geisler H.E. The use of high-dose Megestrol acetate in the treatment of ovarian adenocarcinoma// Semin. Oncol.-1985.-12 (Suppl.1.1), P.20-22.
76. Gison S.D., Miller R.T., Hardie E.M., Spaulding K.A. Unusual prostatic mass in a dog//J.Amer.Vet.Med.Assoc.-1992.- Vol.200. №5. P. 702-704.
77. Gronemeyer H.Transcription activation by estrogen and progesterone receptors //Annu. Rev. Genet.-1991.- Vol.25. P. 89-123.
78. Hansen M.Mogens. Chronic lymphocytic leukemia // Copenhahen.-l973.
79. Helfand S.C., Principles and applications of chemotherapy // Vet. Clin. N. America: Small Anim. Pract.-1990.- Vol.20. №4. P. 879-1197.
80. Horwitz K.B., VcGuire W.L., Pearson O.H., Segaloff A. Predicting response to endocrine therapy in human breast cancer: a hypothesis // Sci.-1975.-Vol.189. P. 762-772.
81. Jensen E.V., DeSombre E.R. Steroid hormone binding and hormone receptors. In "Cancer Medicine" // Eds. Holland J.F. et al.-1997.- P. 10691059
82. Jenses E.V., Jacobson H.I. Basic guides to the mechanism of estrogen action // Rec. Prorg. Horm.Res.-1962.-Vol.18. P. 387-414
83. Karakousis C., Lopez R., Bhakoo H . et al. Estrogen and progesterone receptors and tamoxifen in malignant melanoma // Cancer Treatm. Rep.1980,- Vol.64. P. 819-827.
84. Katzenellenbogen B.S., Korach K.S. A new actor in the estrogen receptor drama-enter ERB // Endocrinology.-1997,- Vol.138. P. 861-862.
85. Kawakami E., Tsutsui Т., Shimisu M., et al. Effects of oral administration of chlormadinone acetate on canine prostatic hypertrophy // J.Vet.Med. Scien.- 1993.-Vol.55. №4. P. 631-635.
86. Kay N.D., Birchard S.J., Sherding R.G. Diseases of the prostate gland // Saunders manual of smoll animal practice.-1999.- Vol.2. P. 987-994.
87. Kaya M., Atasoy N. Koperlerde prostat hastaliklarinin klinik degerlendirmesi. Uludag. Univ. Veter.Fak. Derg.-1989/1990.- 8/9, 1/3, P. 185-197.
88. Kennedy P.C., Ling G.V. Pathology of the lower urinary tract and prostate // USA. St.Louis, Mosby-Year Book. Lower urinary tract diseases of dog and cat: diagnosis, medical, management, prevention.-1995.- P. 107113.
89. Kennedy P.C., Cullen J.F., Edwards J.F. et al. Histological classification of tumors of the genital system of domestic animals // Washington: Armed Forces Institute of Pathology.-1998.
90. King W.J., Greene C.L. Monoclonal antibodies localise estrogen receptor in the nuclei of target cells //Nature.-1984.- Vol.307. P. 745-749.
91. Koenders P.G., Beex LVAM., Langens R. Et al. Steroid hormone receptor activity of primary human breast cancer and pattern of the first metastasis // Br. Cane. Res. Treat.-1991.- Vol.18. P. 27-32.
92. Kuiper G.G.,Carlsson В., Grandien k. Et al. Comparison of ligand binding specificity and transport tissue distribution of estrogen receptor а и p // Endokr.-1997.- Vol.138. P. 863-870.
93. Kumatr V., Green S., Stack C. Et al. Functional domain of the etrogen receptor //Cell.-1987.-Vol.51. P. 941-951.
94. Kvols L.d. Metastatic carcinoid and the carcinoid syndrome // Amm.J.Med.- 1986.- Vol.8l.(Supll. 6B). P. 49-53.
95. Kvols L.D., Moertel C.G., O'Connel M.J. et al. Treatment of the malignant carcinoid syndrome //N.Engl.J.Med.-1986.- Vol.315. P. 663-666.
96. Lee-Parritz D.E., Lamb C.R. Prostatic adenocarcinoma with osseous metastases in a dog // J. Amer. Vet.Med.Assoc.-1988.- Vol.-192.-№l 1. P. 1569-1572.
97. Lipowitz A.J., Schwartz A., Wilson G.P. et al. Testicular neoplasms and concomitant clinical changes in the dog // J. Am. Vet. Med.Assoc.-1973.-Vol. 163. P. 1364-1368.
98. Lippman M.E., Dickson R.B.,Gelmann E.P. et al. Growth regulatory peptide production by human breast carcinoma cells // J. Ster. Bioch.-1988.-Vol.29. P. 79-88.
99. Looijenga L.H.J., Olie R.A., Gaag I. Van der et al. Seminomas of the canine testis. Counterpart of spermatocytic seminoma of men // Laboratory Investigation.-l 994.- Vol.71. №4. P.490-496.
100. Luce J.K. Gamble J.F., Wilson H.E. Combined cyclophosphamide, vincristine and prednisolone therapy of malignant lymphoma // Cancer (Philad).-1971.-Vol.28. P. 306-317.
101. Maass H., Engel В., Hohmeister L., et al. Estrogen receptors in human breast cancer tissue // Am.J.Gyn.-1972.- Vol.113. P. 377-382.
102. MacGregorJ.I.,Jordan V.C. Basic guide to the mechanisms of anti-estrogen action // Pharm. Rev.-1998.- Vol.50. №2. P. 151-196.
103. Madewell B.R., Mulnix J.A., Neoplasms of endocrine glands // Vet.Clincs ofNoth Amer.-1977.- Vol.7. №1 P. 195-204.
104. Malicka E., Piusnski W., Sendecka H. Et al. Canine neoplasms diagnosed between 1985-1993 //Medycyne Weterynaryjna.-1996.- Vol.52. №2. P. 103106.
105. Marakoshi M., Ikeda R., Tagawa M., Makayama T. Immunolocalization of androgen receptor in canine prostatic hyperplasia effect of antiandrogen // Tokai J. of Experim. and Clin.Med.-1999.- Vol.24. №3. P. 77-83.
106. Marakoshi M., Ikeda R., Tagawa M., Makayama T. Immunolocalization of androgen receptor in canine prostatic hyperplasia effect of antiandrogen //Tokai J. of Experim. and Clin.Med.-1998.- Vol.23. №5. P. 209-212.
107. McCavin M.D., Fishborn F. Perianal adenoma of apocrine origin in a dog // J. Amer.Vet.Med.Assoc.-l975.- Vol. 166. №4. P. 388-389.
108. McMichael A.J., Potter J.D. Reproduction, endogenous and exogenous sex hormones and colon cancer: a review and hypothesis // J.Natl. Cancer Inst.- 1980.-Vol.65. P. 1203-1205.
109. Meurer D.G., Mischke R. Clinical feature of tumours of the testis in dogs//Praktische Tierarzt.-2000.- Vol.81. №8. P. 628-637.
110. Milli U.H., Kutsal O. Canine perianal gland tumors // The J. of the faculty of vet. Medicine university of Ankara.-1993.- Vol.40. №3. P. 361368.
111. Moriello K.A., Rosental R.C. Clinical approach to tumor of the skin and subcutaneous tissues // The Vet. Clinics of Noth. Amer.-1990.- Vol.20. №4. P. 1163-1190.
112. Moses H.L.,Yang E.Y.,Pietenpol J.F. TGF-beta stimulation and inhibition of cell proliferation: new mechanistic insights // Cell.-1990.-Vol.63. P.245-247.
113. Moulton J.E., Tumors in domestic animals // Univ. of California press. USA.-1978.- 465p.
114. Muller G.H., Kirk R.W., Scott W. Small animal dermatology // Philadelphia, W.B. Saunders Co.-1983.
115. Nandi S.K., BoseP.K., Das B.B., Sengupta J. Seminoma in a dog// Indian Vet. J.-1995.- Vol.72. №11. P. 1217-1218.
116. Nestbitt G.H. Canine and feline dermatology. A systematic approach. USA, Lea and Febiger, Philadelphya.-1983.- 224p.
117. Nielsen S.W., Aftosmis J. Canine perianal gland tumors // J.Amer. Vet. Med. Assoc.-1964.- Vol.144. №2. P. 127-135.
118. Nieto J., Pizarro M., Balaguer L., Romano J. Canine testicular tumors in descended and cryptorchid testes // Dtsch.Tierarztl. Wschr.-1989.- Vol.96. №4. P. 186-189.
119. Osborn C.K., Yochmowitz M.Z., Knight W.A., McGuire W.L. The value of estrogen and progesterone receptors in the treatment of breast cancer // Cancer.-1980.- Vol.46. P.2884-2888.
120. Patnaic A.K., Mostofi F.K., A clinicopathologic, histologic and immunohistochemical study of mixed germ cell-stromal tumors of the testis in 16 dogs //Vet. Pathology.-1993.- Vol.30. №3. P.287-295.
121. Pena F.J., Dominguez J.S. Clinical aspects of testicular cancer in the dog //Medicina Veterinaria.-1997.- Vol.14. №11. P.625-631.
122. Peters M.A.J., Rooij D.G. Teerds K.J. et al. Spermatogenesis and testicular tumours in ageing dogs // J. of Reproduction and Fertility.-2000.-Vol.120. №2. P.443-452.
123. Preziosi R., Salda L.D., Ricci D.J. et. al. Quantitation of nuclear organizer regions in canine perianal gland tumour // Res. In Vet.Scien.-1995.- Vol.58. №3. P.277-281.
124. Prufer A. Diagnosis und therapie von prostataerkrankungen // Kleinierpraxis.-l990.- Vol.35. №12. P.633-643.
125. Reinfinger M. Statistische untersuchungen bei haussaugetieren // J. Veter. Med. Ser. A.-1988.- Vol.35. №1. P.63-72.
126. Rendina G.M., Donadio C. And Giovannini M. Steroid Receptors and progestinic therapy in ovarian endometrioid carcinoma // Eur. J. Gynaecol. Oncol.-1982.- Vol.3. P.241-246.
127. Roberts A.B., Spon M.B. Physiological actions and clinical applications of transforming growth factor p (TGF-P) // Growth factors.-1993. Vol.8. P.l-9.
128. Rogers K.S., Wantschek L., Lees G.E. Diagnostic evalution of the canine prostate // Commend. Contin.Educ. Pract.-1986.- Vol.8. №11. P. 799-811.
129. Santos R.L., Silva C.M., Ribeiro A.F.C., Serakides R. Testicular tumors in dogs: frequency and age distribution // Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaria e Zootecnia.-2000,-Vol.52. №1. P.25-26.
130. Schreiber A.B., Winkler M.E., Derynek R. Transforming growth factor alfa a more potent angiogenic member than epidermal growth factor.-1986-Vol.232 P. 1250-1253.
131. Scott D.W., Reimers Ph. D. Tail gland and perianal gland hyper- plasia associated with testicular neoplasia and hypertestosteronemia in a dog // Canine practice.-1986.- Vol.13. №1. P.25-26.
132. Sikic B.I., Scudder S.A., Ballon S.C. et.al. High-dose Megestrol acetate therapy of ovarian carcinoma: A phase 11 study by the Northern California Oncology Group // Semin.Oncol.-l 986.- Vol.13. P.26-32.
133. Slotman B.J., and Rao B.R. Ovarian Cancer (Review). Etiology, diagnosis, prognosis, surgery, radiotherapy, chemotherapy, endocrine therapy //AnticancerRes. -1988.- Vol.8. P.417-434.
134. Smirnova Z.S., Osetrova I.P., Rzheznikov V.M., Fedotov V.P. Sushinina L.P., Tolkachov V.N. New cytotoxic-linked estrogens // Abstr.8111 NCI-EORTC symposium on new drugs in cancer therapy, Amsterdam, March 15-18.-1994.-P. 93.
135. Spackman С.J.A., Roth L. Prostatic cyst and concurrent Sertoli cell tumor in a dog // J. Amer. Vet. Med.Assoc.-1988.- Vol.192. №8. P.1096-1098.
136. Stewart A.J., Westly B.R., May F.E.B. Modulation of the proliferative response of breast cancer cells to growth factors by estrogen // Br. J.Cancer.-1992.- Vol.66. P.640-648
137. Stftel A.D., Spirnal J.P., Resnich M.J. Hormonal therapy for advanced prostatic carcinoma//J.Surg.Oncol.-l989.- (supl.l), P. 14-20.
138. Stone E.A. Urogenital tumors // Vet.Clinics of N. Amer.: Smoll Anim.Pract.-l985.- VoU5.№3. P.597-608.
139. Strafuss A.C. Skin tumors // Vet Clinics of N. Amer: Small Anim. Pract.- 1985.- Vol.15. №3. P.473-492.
140. Suess R.J., Barr S.C., Sacres B.J. Bone marrow hypoplasia in a feminized dog with an intestinal cell tumor // J. Amer. Vet. Med. Assoc.-1992.-Vol.200. №9. P. 1346-1348.
141. Sutherland R.L., Watts C.K., Musgrove E.A. Cyclin gene expression and growth control in normal and neoplastic human breast epithelium // J. Steroid Bioch. Mol.-1993.-P.47-99.
142. Tafti A.K., Ahmadi M.R., Baniadam A. Sertoli cell tumour and metastatic seminoma in a dog // Indian Vet.J.-1998.- Vol.75. №5. P.412-415.
143. Theilen C.H., Madewell B.R. Veterinary cancer medicine.USA, Lea and Febiger. Philadelphia.-1987.- 436p.
144. Trouillas J., Morel Y., Pharaboz M.O., Girod C., Andre J. Morpho-fimctional modifications associated with the inhibition by estradiol of MtTF4 rat pituitary tumor growth // Cancer Res.-1984.- Vol.44. P.4046-4052.
145. Umplet R.C., Bertoy R. Tumors of the perianal gland: a case report and review // Compation Anim.Pract.-1988.- Vol.2. №12. P.30-32.
146. Weiner S.A., Alberts D.S.Surwit E.A., Davis J. and Grosso D. Tamoxifen therapy in recurrent epithelial ovarian carcinoma // Gynekol. Oncol.-1987.-Vol.27. P.208-213.
147. Wellman M.L. The cytologic diagnosis of neoplasia // Vet.Clin. of N.Amer.- 1990.- Vol.20. №4. P.919-920.
148. Williams J., Niles J. Prostatic diseases in the dog // In Practice.-1999.-Vol.21. №10. P.558-575.
149. Willson J.E., Brown D.E., Malignant perianal gland tumor with metastasis in a dog // J. Amer.Vet.Med.Assoc.-1964.- Vol.144. №4. P.389-394.
150. Withrow S.J. Mammary and perianal gland. Congress synopses and clinical research abstract. International Convention Centre, Birmingham, UK, WSAVA, BSAVA and FECAVA Wold Congress, 3 ed., 6-th April 1997. 333. P. 167.
151. Wittlif J., Feldhoff P., Fuchs A., Wiehle R. Polymorphism of estrogen receptors in human breast cancer.- in: Physiology of endocrine diseases and mechanisms Of hormone action/- New York.-1981.- P.276-396.
152. Yager J. A., Wilcock B.P. Color atlas and text of surgical pathology of the dog and cat. Dermatopathology and skin tumors. Canada, Ontario, Wolfe.-1994.- Vol. 1.315 p.
153. Zugmaier G., Lippman M.E. Effects of TGF beta on normal and malignant mammary epithelium. Ann NY Acad. Sci.-1990.- 593 p.