Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Морфофункциональные изменения в организме телят при использовании тканевого стимулятора для профилактики бронхопневмонии

На правах рукописи

Кабалина Юлия Евгеньевна

Морфофункциональные изменения в организме телят при использовании тканевого стимулятора для профилактики бронхопневмонии

16 00.02- патология, онкология и морфология животных

Автореферат

Диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Екатеринбург - 2004

Работа выполнена на кафедре анатомии и физиологии с.-х. животных ФГОУ ВПО Костромской государственной сельскохозяйственной академии.

Научный руководитель: Заслуженный деятель науки РФ,

доктор ветеринарных наук, профессор Ложкин Эдуард Федорович

Официальные оппоненты: Сидорова Клавдия Александровна

доктор биологических наук, профессор

Татарникова Наталья Александровна доктор ветеринарных наук

Ведущая организация: ФГОУ ВПО Ивановская

государственная сельскохозяйственная академия

Защита состоится «10» декабря 2004 г. в 10°° часов на заседании диссертационного совета Д 220.067.03 в Уральской государственной сельскохозяйственной академии по адресу: 620 219, г. Екатеринбург, ул. Карла Либкнехта, 42.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Уральской государственной сельскохозяйственной академии.

2004 г.

Автореферат разослан

Ученый секретарь диссертационного совета, доцент

Рабовская JLA.

l&oS-tf

тн

3

Общая характеристика работы

1.1 Актуальность работы.

Интенсификация животноводства требует для более успешного развития этой отрасли постоянного улучшения продуктивных и племенных качеств, разработки и внедрения научно-обоснованных природоохранных, экологических и высокоэффективных лечебно-профилактических мероприятий с учетом видовых, половых и возрастных особенностей животных, мест их обитания.

Особого внимания заслуживают сведения об активизации механизмов неспецифической защиты организма животных при нарушениях обменных процессов и других патологиях, вызванных как общеэтиологическими, так и специфическими факторами (В.М. Данилевский, 1974,1985; АЛ. Брынин, 1983,1986; П.Н. Кориков, 1983; В.Т. Самохин, 1982,1988).

Из многочисленных работ отечественных и зарубежных исследователей известно, что воспалительные процессы в органах пищеварения и дыхания с острым, а чаще подострым и хроническим течением, сопровождаются вторичными иммунодефипитными состояниями, неотъемлемым компонентом которых является недостаточность клеточных и гуморальных факторов неспецифической защиты организма животных (Ф.Ф. Порохов и др., 1974; В.П, Шишков, 1981, 1985; П.Я. Конопелько и др., 1983; АА, Кабыш, 1985; Y. Dreux, 1984; R. Argenzio, 1984; U. Fogarty etal, 1983).

В последние годы все большее внимание уделяется изысканию и совершенствованию средств, направленных на повышение защитных сил организма при болезнях органов дыхания и пищеварения, включая комплексные препараты различного происхождения в качестве стимуляторов или модуляторов специфического и неспецифического иммунитета (Х.Г. Гизатуллин, 1972; С.С. Абрамов, Ф.Ф. Порохов, 1983; Г.Ф. Коромыслов и др., 1983).

1.2 Цель и задачи исследования.

Цель работы - изучить влияние тканевого стимулятора на основе кожи крупного рогатого скота на морфо- функциональные показатели организма и возможность его использования для профилактики бронхопневмонии у телочек костромской породы.

Были поставлены следующие задачи:

- изучить влияние тканевого препарата на характер проявления бронхопневмонии у телочек костромской породы

- исследовать динамику морфологического состава крови у клинически здоровых (стимулированных) и не стимулированных телочек тканевым биостимулятором.

- проследить динамику роста телочек

- определить показатели фагоцитарной активности нейтрофилов крови до и после применения тканевого стимулятора

провести морфо- метрическое исследование структур регионарных легким лимфатических узлов у животных опытных и контрольных групп.

- рассчитать экономическую эффективность применения тканевого стимулятора приготовленного из кожи крупного рогатого скота для профилактики бронхопневмонии

1.3 Научная новизна работы

Проведены комплексные исследования по применению тканевого стимулятора из кожи крупного рогатого скота для профилактики бронхопневмонии у телочек костромской породы. Впервые показано влияние тканевого препарата из кожи на гематологические показатели.

Усовершенствована методика приготовления тканевого стимулятора из кожи крупною рогатого скота. Впервые дана подробная морфо-метрическая характеристика структурных элементов лимфатических узлов телочек больных бронхопневмонией. Определен оптимальный возраст телочек при котором тканевая стимуляция оказывает положительное влияние на рост и развитие животных.

1.4 Теоретическая значимость и практическая ценность работы

Теоретическая значимость работы заключается в том, что выявлено положительное

влияние тканевого стимулятора на рост и развитие животных, повышение резистентности организма. Результаты исследований могут быть использованы для написания соответствующих разделов учебных пособий и руководств по возрастной и функциональной анатомии, а также в учебном процессе ветеринарных, зооинженерных и биологических факультетов средних и высших учебных заведений.

Установленные нами изменения в организме дают возможность целенаправленно влиять на снижение заболеваемости телочек бронхопневмонией. Результаты производственного опыта по применению тканевого препарата могут быть использованы при проведении профилактических мероприятий для повышения сохранности молодняка.

1.5 Реализация результатов исследования.

Результаты исследования по применению тканевого стимулятора из кожи крупного рогатого скота внедрены в СПК «Гридино» Красносельского района Костромской области.

Используются для чтения лекций и проведения занятий в Костромской, Ивановской, Бурятской, Самарской, Ярославской, Уральской ГСХА, Сагаст- Петербурской, Казанской, Московской академиях ветеринарной медицины, Ставропольском, Мордовском, Воронежском государственных университетах, Алтайском, Уральском институтах ветеринарной медицины.

1.6 Апробация работы

Материалы исследований доложены и обсуждены на межвузовских научно -практических конференциях, 55 - ой международной научно- практической конференции профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов Костромской, Ивановской ГСХА в 2000- 2004 гг.

1.7 Основные положения выносимые на защиту.

1. Особенности клинических проявлений бронхопневмонии у стимулированных и не стимулированных телочек тканевым биостимулятором.

2.Влияние тканевого стимулятора из кожи крупного рогатого скота на гематологические показатели крови и характер изменений показателей неспецифической резистентности фагоцитарной активности телочек костромской породы.

3. Сравнительная морфология лимфатических узлов у телочек костромской породы при применении тканевой стимуляции.

1.8 Объем и структура диссертации

Диссертация состоит из общей характеристики работы, обзора литературы, материала и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, практических предложений, списка использованной литературы,

Работа изложена на 124 страницах машинописного текста, содержит 23 таблицы, 28 рисунков. Список литературы включает 207 наименований, в том числе 18 на иностранных языках.

1.9 Публикации

По теме диссертационной работы опубликовано восемь работ.

Результаты собственных исследований 3.1 Материалы и методы исследований

Экспериментальная часть работы проводилась в период с 1998-2004 года на базе СПК Тридино" Красносельского района Костромской области, в лаборатории кафедры анатомии и физиологии с.-х. животных Костромской ГСХА, лаборатории иммунологии Костромской области, областном патологоанатомическом бюро.

СПК 'Тридино" является племенным хозяйством по разведению крупного рогатого скота костромской породы. Для опыта были отобраны телочки костромской породы в возрасте от 1,5 до 3 месяцев, которые были разделены на 8 групп по принципу аналогов. Все животные были клинически здоровы. Под наблюдением находилось в опытных и контрольных группах 188 животных.

Таблица 1 Схема опыта

Серия, Кол- Время Средний Дни исследований Количество

группа во имплан- возраст, голов в группе

голов тации мес. М±т

Гемаголо ФАН Заболе Подверг-

гических вших нутых гистологи ческому исследова шло

1 Серия Оп. 27 Октябрь 3,2 ±0,22 До опыта - 7 3

К. 27 1999 г. 3 ± 0,28 5,13,42 день - 16 2

2 Серия Оп. 23 Ноябрь 1,65 + 0,12 До опыта - 3 -

К. 23 1999 г. 1,73+0,1 13,42 день - 3 3

3 Серия Оп. 24 Март 3,04 ±0,21 До опыта До 6 2

К. 24 2000 г. 3,34 ±0,21 5,22,27 день опыта 22,27 день 7 2

4 Серия Оп. 20 Октябрь 2 + 0,24 До опыта До - -

К. 20 2000 г. 2,27 ±0,31 12 день опыта - -

12 день

Телята опытных групп подвергались биостимуляции тканевым препаратом изготовленным из кожи взрослого крупного рогатого скота.

Биостимулятор готовили из кожи коров молодого возраста: из подвздошно - паховой области вырезали кусочки кожи предварительно удаляя, путем выбривания волосяной покров, по методике разработанной на кафедре Костромской ГСХА,

Перед использованием биостимулятор размораживали естественным путем и использовали при достижении им температуры окружающей среды.

Животное фиксировали в стойле, готовили по общепринятой методике операционное поле, затем в области средней трети шеи делали вертикальный разрез длиной 3-4 см. до подкожной фасции. Ручкой скальпеля в каудальном направлении под кожей делали карман глубиной 4 см и в него при помощи пинцета имплантировали кожный лоскут (биостимулятор). Швы не накладывали, края раны сводили и обрабатывали спиртовым раствором йода. Заживление, начиналось через сутки, и на 4 день рана практически затягивалась. Послеоперационных осложнений не наблюдалось. Имплантацию проводили в осенне-весенний период (октябрь, ноябрь, март) для предотвращения инфицирования ран мухами.

Материалом для исследования служила кровь, которую брали в утренние часы до кормления, сыворотка крови, а также патологический материал: регионарные лимфатические узлы, легкие от вынужденно убитых животных.

Из числа общих показателей исследовали количество эритроцитов, лейкоцитов пробирочным методом, путем подсчета в камере Горяева, содержание гемоглобина по Сали, концентрацию общего белка в сыворотке крови рефрактометрическим методом, определяли лейкоцитарную формулу путем подсчета лейкоцитов в мазках окрашенных по Романовскому -Гимзе.

При изучении строения органа применили комплексный метод исследования с использованием анатомических, гистологических, морфологических и статистических методик.

Для гистологических исследований кусочки лимфатических узлов фиксировали в 10%-ном водном нейтральном растворе формалина. Материал обрабатывали по общепринятой методике с применением заливки в парафин (Р. Липли, 1969). На санном микротоме модели получали гистологические срезы толщиной 5-10 мкм. На препаратах бронхиальных и средостенных лимфатических узлов, окрашенных гематоксилином и эозином Карацк, проводили морфометрические исследования, а также количественный анализ тканевого состава лимфатических узлов.

Были изучены 43 объекта исследования. На гистологических препаратах определяли толщину капсулы, ширину трабекул в начальном отделе и конечном отделе, ширину краевого синуса, ширину промежуточного синуса, диаметр и площадь фолликулов, толщину мозговых трабекул, ширину мозгового синуса, толщину стенки кровеносных сосудов.

Динамику живой массы определяли путем индивидуального взвешивания до опыта и в первые шесть месяцев после применения стимулятора, утром перед кормлением. Скорость роста - вычислением абсолютного, среднесуточного и относительного приростов живой массы по общепринятым формулам.

Влияние стимулятора на организм телочек определяли путем контроля за клинически здоровыми животными, определения числа заболевших и проявления у них бронхопневмонии. Проводили оценку клинического статуса животных методом наблюдения. Тяжесть течения определяли по выраженным клиническим признакам и оценивали по бальной системе, здоровые - 0 баллов, легкая степень - 1 балл, средняя степень - 2 балла, тяжелая степень - 3 балла.

Состояние резистентности оценивали по общим и специфическим показателям. Из числа неспецифических показателей естественной резистентности в лаборатории иммунологии Костромской области изучали фагоцитарную активность лейкоцитов,

фагоцитарное число, фагоцитарный индекс. Фагоцитарную активность лейкоцитов определяли по числу лейкоцитов участвующих в фагоцитозе и выражали в процентах, фагоцитарный индекс и фагоцитарное число расчетным путем (П.Н. Смирнов, Н.Б. Гончарова и др. 1989).

Статистическую обработку материала проводили с помощью программ Microsoft Excel с использованием методов вариационной статистики на компьютере типа IBM PC.

3.2 Результаты собственных исследований 3.2.1 Сравнительные особенности клинического проявления бронхопневмонии у телочек

Основным фактором, способствующим возникновению и развитию этих болезней, является снижение общей резистентности организма в результате нарушения технологии выращивания молодняка. При суммарном воздействии на организм ряда возбудителей клинико-морфологическое проявление болезни существенно меняется, что затрудняет диагностику, лечение и профилактику респираторных болезней.

У животных опытной и контрольной групп в первые дни болезни при бронхопневмонии наблюдали ослабление аппетита и повышение температуры тела. Наиболее яркая картина болезни после первых проявлений выражена на 6-8-е сутки: отмечается серозно-слизистые носовые истечения, вначале сухой, а затем влажный глубокий кашель, учащенное дыхание и слабая одышка, умеренное учащение сердечных сокращений.

При аускультации легких выявляли жесткое везикулярное дыхание и мелкопузырчатые хрипы. В дальнейшем даже даже в результате проведения лечения болезнь принимала хроническое течение.

При вскрытии вынужденно убитых наблюдали признаки острой и хронической бронхопневмонии. При острой форме пораженные участки легких красного цвета, уплотненные, с поверхности разреза выделяется мутная жидкость, из бронхов - тягучая слизь. Количество слизи значительное, оттенок ее беловатый. В основном поражения затрагивали отдельные дольки легкого, но встречались и лобарные очаги воспаления. В легких обнаруживали участки эмфиземы и ателектаза непосредственно между пораженными участками.

У нескольких животных выявлены признаки хронической бронхопневмонии: легкие плотные, мясистые поверхность бугристая. Цвет легких красный, на поверхности разреза с сероватыми участками. Рисунок бронхиального дерева хорошо выражен, из бронхов выделяется серовато-белый экссудат. Вокруг бронхов отмечается разрастание грануляционной ткани. У телочек контрольной группы поражения легких выражены ярче с

преобладанием признаков характерных для хронического течения болезни в то время как у животных опытной группы признаков острого течение болезни.

Рисунок 1 Проявление бронхопневмонии

Наиболее длительно болезнь протекала во 2-й контрольной группе, разница между опытной и контрольной группами достоверна, однако тяжесть течения болезни была самой низкой из всех контрольных групп. Процент заболеваемости в этой группе существенно не отличался от опытной однако максимальная длительность болезни обусловила отсутствие выздоровевших во второй контрольной группе т.е. гибель всех заболевших животных.

В третьей контрольной группе отмечено наиболее тяжелое течение болезни из всех исследуемых групп. Разница показателей опытной и контрольной групп достоверна. Процент выздоровления в ней составил 28,6%.

Животные первой контрольной группы характеризовались короткой продолжительностью болезни, но большим количеством заболевших, процент заболеваемости составил 59,2%, а процент выздоровевших с 12,5%.

Из всех опытных групп во второй группе отмечена низкая продолжительность течения болезни и благоприятное ее течение. В данной группе наблюдалось 100% выздоровление животных. В четвертой опытной группе заболевших животных не выявлено.

Следует отметить, что отхода телят в СПК «Гридино» по причине заболевания бронхопневмонией в среднем в год составляет 41% от всех выбывших телят. Процент отхода всего по хозяйству составляет 13%.

В период проведения опыта процент отхода молодняка по причине бронхопневмонии сократился в 1999 году на 10,8%, 2000 - 27,7%, 2001 - 17,3% по сравнению с 1998 годом. Начиная с августа 1999 г. отход телят снизился, в ноябре текущего года на 8%, декабре -9,3%, в 2000 г. - 5,6% и 7,5%. Самый низкий процент выбытия наблюдался в 2000 году при применении стимулятора в марте и октябре текущего года.

Оценивая отход телят по причине заболевания бронхопневмонией по месяцам за 4 года установлено, что за период наблюдения максимальный процент отхода приходится на март

(20,6%), апрель (20,6%) и декабрь 21,7%. В январе, ноябре показатель остается на высоком уровне и равен 16,8 и 18,1 %. В период с мая по сентябрь отмечен самый низкий процент отхода телят

3.2.2 Гематологические показатели телочек

Исследование гематологических показателей телочек в первой группе проводилось до имплантации стимулятора и после на 5,13 и 42-й день.

В опытной группе идет достоверное увеличение количества эритроцитов к 42 дню, характер этого увеличения равномерный. Максимальное увеличение количества эритроцитов отмечено на 26,7% на 42-й день по сравнению с первоначальным значением.

Разница межу опытом и контролем достоверна на 13 день при Р < 0,05.

В контрольной группе отмечено первоначально высокое содержание гемоглобина (86,0 + 4,08) и постепенное уменьшение его содержания при росте общего количества эритроцитов.

Для сравнения с первой опытной группой и отслеживания характера изменений показателей исследование крови телочек во второй группе проводилось до применения тканевого стимулятора и после имплантации на 13 и 42-й день в те же дни.

Во второй группе у опытных животных максимальное количество эритроцитов отмечено на 13 день с увеличением на 12,7%. Количество гемоглобина максимально на 42 день и по отношению к контролю достоверно увеличилось на 7,5%. Общее содержание эритроцитов у животных контрольной группы было значительно ниже, чем у животных опытной группы, как до применения стимулятора, так и на протяжении всего периода наблюдения.

В опытной группе наблюдается корреляционная зависимость между изменением количества эритроцитов и количеством гемоглобина.

Гематологические показатели телочек третьей группы до стимуляции и после стимуляции исследовали на 5, 22 и 27-й день. У животных опытной группы количество эритроцитов достоверно увеличилось на 5 день - 12,1%, гемоглобина- 18,6%, максимальное содержание гемоглобина отмечено на 22 день.

Разница между опытом и контролем по содержанию эритроцитов и гемоглобина достоверна на 5 день, по содержанию эритроцитов на 13 день, по содержанию гемоглобина на 42 день. Количество гемоглобина выросло на 41,2 % к 42 дню.

В контрольной группе увеличение содержания гемоглобина составило 9%. У животных контрольной группы сохранялось высокое содержание гемоглобина на протяжении всего периода наблюдения, в среднем оно превышало значение в опытной группе на 9,6 %.

Исследование крови телочек в четвертой группе проводилось до применения тканевого стимулятора и после на 12-й день. У животных 4 группы отмечено возрастание количества эритроцитов на 40,8 % при одновременном увеличении гемоглобина на 11,6 %. Изменения показателей подвержено общей тенденции увеличения во всех опытных группах.

Более полное представление об изменениях в крови телочек дает определение количества лейкоцитов и выведение лейкоцитарной формулы. Количество лейкоцитов у животных обеих групп первой серии опыта приближено к верхней границе этого значения для здоровых животных, оно сохранялось на этом уровне до 42 дня. На 5-й день в опытной и контрольной группах отмечено повышение содержания палочкоядерных нейтрофилов при одновременном сокращении содержания сегментоядерных нейтрофилов, однако общее количество нейтрофилов было в пределах нижней границы.

До имплантации в опытной и контрольной группах отмечалось повышенное содержание палочкоядерных нейтрофилов и низкое содержание сегментоядерных нейтрофилов. Через 5 дней после применения стимулятора содержание сегментоядерных нейтрофилов снизилось на 44,9 %, в опытной группе осталось на прежнем уровне. Количество нейтрофилов снизилось на 22,1 %.

К 42 дню в опытной и контрольной группах количество лейкоцитов приблизилось к физиологической норме и имело достоверную разницу при Р< 0,01.

Во второй группе у телочек контроля наблюдается эозинопения, а в опытной группе наблюдается повышение содержания эозинофилов к 13 дню и резкое снижение их к 42 дню (на 47,2 %). Общее уменьшение количества палочкоядерных нейтрофилов в группах отмечено к 42 дню. Одновременно увеличилось содержание сегментоядерных нейтрофилов в опытной группе на 19,2 %. Общее число нейтрофилов также увеличилось. В данной группе отмечено низкое содержание количества моноцитов. К 42 дню достоверная разница содержания лейкоцитов составила 1,81 ± 0,64 при Р < 0,05.

В третьей группе у контрольных животных количество лейкоцитов во все периоды наблюдения оставалось практически неизменным, а в опытной группе на 5 день уменьшилось на 28,5% с последующей стабилизацией. В опытной группе у телочек на 22 день отмечается снижение содержания нейтрофилов с одновременным сокращением палочкоядерных и сешентоядерных нейтрофилов при этом увеличивается количество лимфоцитов. Сокращение палочкоядерных нейтрофилов составило в опытной группе 31,8%, в контрольной 61,5%. Общее количество лимфоцитов оставалось на высоком уровне в течении всего периода наблюдения.

У животных четвертой группы отмечено увеличение общего количества лейкоцитов на 26,4%, эозинофилов на 63,2%, палочкоядерных нейтрофилов, при одновременном

уменьшении сегментоядерных нейтрофилов на 26,8%. Количество нейтрофилов при этом уменьшилось на 13%.

Одновременно с гематологическими исследованиями проводили изучение белковой картины крови. В первой контрольной группе до имплантации стимулятора уровень общего белка был выше, чем в опытной группе на 18,3%, а за период наблюдения у данных животных показатель практически не изменялся.

К 42 дню процент снижения белка в сыворотке крови составил 10,9%, по сравнению с первоначальным. В первой опытной группе максимальное увеличение общего белка отмечено на 13 день и составило 27,2%. Достоверное увеличение общего белка происходит во второй группе на 13 день при Р < 0,001 и на 42 день при Р < 0,01.

Во второй опытной группе также на 13 день увеличилось содержание общего белка на 17,9% и к 42 дню было выше чем в контрольной группе на 10,5%.

У животных третьей опытной группы отмечено самое высокое содержание общего белка и максимальное увеличение на 27,1% к 22 дню наблюдения. При этом к 27 дню значение этого показателя приблизилось к первоначальному достоверно изменяясь. В сыворотке крови животных контрольной группы установлено более низкое содержание общего белка, чем у животных опытной группы.

3.2.3 Динамика прироста абсолютной массы и относительной скорости

роста

Создание условий, соответствующих особенностям индивидуального развития, позволит растущему организму теленка реализовать его биологические возможности и тем самым повысить его жизнеспособность.

Содержание телок в одинаковых условиях позволило свести до минимума влияния воздействия факторов внешней среды и наиболее точно отразить индивидуальные особенности их роста и развития, обусловленных физиологическими данными. Наблюдение за растущими телочками от момента применения тканевого препарата и в течении 6-ти месяцев было направлено на поиск оптимального возраста для имплантации тканевого стимулятора. Во всех группах была определена их структура в зависимости от линии отца.

Телочки первой опытной и контрольной групп характеризуются преобладанием дочерей Барона 44-46,2% и равномерным распределением между дочерями Эрлинга и Льва. Телочки второй группы характеризуются преобладанием в опытной группе дочерей Льва (65,2%) и значительным количеством дочерей Барона (21,3%). В третьей группе также преобладают и в контрольной и в опытной группе дочери Льва, но в опытной группе значительный процент составляют дочери Брига (20,8%) и Эрлинга (16,6%). В четвертой группе 40% дочерей Льва и в опытной и в контрольной группе. Результаты опыта,

проведенного в СПК «Гридино», свидетельствуют о положительном влиянии тканевого препарата из кожи крупного рогатого скота на рост и развитие животных.

При постановке на опыт разница по живой массе между контрольными и опытными животными первой группы составила 1,4%, второй группы 4,2%, третьей группы 5,7%, четвертой группы 2,3%.

Так в первой опытной группе с преобладанием дочерей Барона отмечены более высокие различия между опытными и контрольными животными в первые 3 месяца в среднем на 8,1%, 3-6 месяцы на 10,3%.

Во второй группе в первые 3 месяца различия по живой массе составили 2,54%, в 3-6 месяц 6,3% в данной группе преобладали дочери Льва.

В третьей группе в первые 3 месяца наблюдается значительная разница между опытными и контрольными животными, масса контрольных превышает массу опытных на 14 %. Однако к 6 месяцу прослеживается незначительное превышение показателя массы опытных животных в среднем на 1,7%.

Живая масса животных первой группы в конце 3 месяца превышала массу животных второй, третьей и четвертой групп на 10,2%, 6,9%, 11,3% соответственно.

К концу наблюдения показатели первой группы превышали показатели групп на 9,7%, 1,3%, 25,8%. Достоверная разница массы животных установлена в первой группе при Р < 0,001, во второй группе при Р < 0,01, в четвертой группе при Р < 0,05.

Анализируя абсолютный прирост живой массы в первые 3 месяца, после применения стимулятора следует отметить, что в первой группе он превышает значение контрольной на 29,1%. Среднесуточный прирост живой массы превышал в первой опытной группе показатели контрольной на 29%.

Положительное влияние тканевой стимуляции отмечено в период с 3-6 месяцы. В данный период показатели абсолютного прироста превышали значения в опытных группах в среднем на 15,3%. Значительный различия отмечены по среднесуточному приросту, во всех опытных группах: он превышал значение контроля в первой группе на 22,9%, во второй -15,7%, в третьей - 8,7%, в четвертой -14,2%.

3.2.4 Фагоцитарная активность нейтрофилов крови телочек костромской породы В задачи исследования вошло изучение уровня клеточной реактивности телочек до и после применения тканевого стимулятора и влияние стимулятора на заболеваемость и течение бронхопневмонии. Проведенные исследования крови телочек 34 опытной и контрольных групп показали, что среднее значение фагоцитарной активности лейкоцитов в опытной группе составяет 32,7%, а в контрольной 31,2%.

Показатели фагоцитарной активности нейтрофилов (ФАН) телочек опытной группы, первоначально превышают показатели контрольной группы, различия между ними до опыта составляют 3,4%, к концу опыта 4,8% . В опытной группе на 27 день ФАН увеличилась на 4,2%, а по сравнению с 22 днем на 5,34%. ФАН в контрольной группе изменялась незначительно и к 27 дню увеличилась на 2,9% от исходного.

Фагоцитарное число определяющееся отношением числа фагоцитирующих бактерий к общему числу подсчитанных в опытной группе увеличилось на 19,4%, 21,3% соответственно на 22 и 27 день при Р< 0,05, в контрольной процент увеличения составил 8,9% и 13,7%.

В опытной группе увеличение ФЧ носит более равномерный характер. До опыта показатель ФЧ был больше чем в контрольной на 8,25%, к концу опыта на 16,2%.

Среднее число поглощенных бактерий приходящихся на один активный и участвующий в фагоцитозе нейтрофил (ФИ) до опыта, в опытной группе превышало значение контрольной на 0,4%, а к концу опыта на 7,9%. Максимальное увеличение ФИ произошло в опытной группе к 22 дню на 20,6% по сравнению с исходным и на 3,2% по сравнению с 27 днем. В контрольной группе ФИ увеличился на 8,5%. Установлена достоверная разница изменения показателя при Р< 0,05.

Фагоцитарная емкость нейтрофилов крови телят в опытной группе превышало ФЕ в контрольной на 32,9% , а в конце периода на 5,71%. В контрольной группе показатель равномерно увеличивался к 22 и 27 дню на 18 % и 22,5% соответственно.

В опытной группе отмечается снижение ФБ на 22 и 27 день на 18,4% и 12,8% это связано с уменьшением содержания общего количества лейкоцитов в крови животных данной группы.

В четвертой опытной группе ФАН крови превышала показатель контрольной группы до опыта на 5,3%, после опыта на 4,6%. Процент увеличения фагоцитарной активности нейтрофилов в опытной группе составил 5,3% в то время как в контрольной 2,4%. Установлена достоверная разница между опытом и контролем на 12 день при Р < 0,001.

Фагоцитарное число увеличилось в обеих группах в опытной на 5,1%, а в контрольной на 2%. В конце периода показатель телок опытной группы превышал показатель телок контрольной на 13%.

Достоверно увеличился фагоцитарный индекс в опытной группе на 9,5% при Р < 0,001, в то время как в контрольной за 12 дней существенных изменений не наблюдалось.

ФЕ (фагоцитарная емкость) у животных опытной группы увеличилось на 32,9%, в контрольной группе за 12 дней увеличение составило 2,8 %. Расчетным путем у животных опытной группы был определен индекс сдвига (ИС), т.е. коэффициент определяющий, на

сколько изменился тот или иной показатель иммунной системы под влиянием тканевого препарата.

ИС= показатель до применения / показатель после применения Индекс сдвига показателя ФЧ максимальный, в целом в третьей опытной группе его значения превышают показатели четвертой опытной группы В четвертой опытной группе минимальный индекс сдвига у фагоцитарной емкости.

Индекс сдвига ФАН в третьей опытной группе меньше, чем в контрольной на 1,04%, а показатели ФЧ, Фй, ФЕ превышают данные показатели на 15,4%, 6,5% и 52,5% соответственно. Таким образом у животных третьей опытной группы показатели резистентное™ после применения стимулятора были более значимые, чем у животных четвертой группы.

ФАН ФЧ ФИ ФЕ

□ 3-я опытная В 4-я опытная

Рисунок 2. Индекс сдвига у животных третьей и четвертой опытных групп

3.2.5 Макро - микроанатомия бронхиальных и средостенных лимфатических узлов при применении тканевого стимулятора Морфологические исследования лимфатических узлов телят в возрасте от 1,5-3 месяцев после имплантации тканевого стимулятора у которых диагностировали бронхопневмонию показали, что лимфатические узлы морфологически не одинаковы В бронхиальных лимфатических узлах в ответ на имплантацию кожного лоскута наблюдаются значительные морфологические изменения При исследовании выявлено, что в основном у животных встречаются лимфатические узлы округлой и эллипсовидной формы У животных опытных групп в соотношении 4 1, контрольных групп 4 3 округлые к эллипсовидным

Средняя масса лимфатических узлов опытных животных превышала массу контрольных в 1,6 раза, разница достоверна при Р< 0,001, а масса легких была больше на 8,2% при Р< 0,01.

При определении соотношения массы лимфатических узлов и массы легких выявлено, что в опытной группе на 1 г лимфатических узлов приходится 614,78 г легких, а в контрольной 2255 г легких. Этот показатель в опытной группе отличается от показателя контрольной группы в 2,6 раза. Кроме массы лимфатических узлов были определены их линейные размеры и вычислен индекс формы.

ИФ= Ширина /Длина *100 Длина, ширина и толщина лимфатических узлов животных опытной группы меньше чем животных контрольной соответственно на 4,6%, ширина - 13,6%, толщина - 9,2%. При этом различия показателя индекса формы можно считать незначительными они составляют 3,9%, так как данное значение показателя характеризует одну форму лимфатических узлов (округлую). Различия между группами по толщине и ширине лимфатических узлов являются достоверными при Р < 0,001, длины при Р< 0,01.

Реактивность лимфоидной ткани при имплантации обусловлена физиологически функцией узлов, так как они являются сложными фильтрующими барьерами. Процесс пролиферации ретикулярных клеток распространяется и на мозговое вещество. Синусы узла расширены.

Соединительно-тканные элементы у животных опытной группы значительно отличались линейными размерами, так толщина капсулы больше на 130,55 мкм при Р < 0,001, толщина трабекул начального отдела на 45,25 мкм при Р < 0,05, толщина трабекул конечного отдела на 35,89 мкм при Р < 0,001.

Ширина краевого синуса лимфатических узлов опытных животных больше на 13,94 мкм, но различия являются недостоверными.

Элементы коркового вещества - фолликулы у сравниваемых животных также отличались. Диаметр фолликулов опытных животных больше диаметра контрольных на 99 мкм при Р < 0,05, а площадь фолликулов превышает значение контрольных животных в 2 раза.

Несмотря на это количество фолликулов в обеих группах не имеют различий и соответствует 13.

Ширина промежуточного синуса у животных подвергнутых тканевой стимуляции превышает ширину синуса контрольных на 2,88 мкм в 1,6 раза.

Размеры мозгового вещества также имели значительные различия, так ширина мозгового синуса опытных животных превышала ширину синуса контрольных на 3,5 мкм

(56,4%), толщина мозговых трабекул на 8 мкм (3,47%). Установлена достоверная разница между опытной и контрольной группами в толщине мякотных тяжей которая составляет 10,9 мкм при Р < 0,05. Размеры стенки кровеносных сосудов превышали размер стенки у контрольных на 0,06 мкм, что составило 33,3 %.

В целом оценивая линейные размеры структурных компонентов бронхиальных и средостенных лимфатических узлов отмечено, что значительные изменения после применения тканевого стимулятора выявлены по толщине капсулы, толщине трабекул конечного отдела и площади фолликулов.

3.2.6 Экономическая эффективность применения тканевого стимулятора Современные условия обуславливают обязательное поведение экономического обоснования результатов работы. В структуре выручки от полученной продукции в хозяйстве денежные поступления от реализации мяса крупного рогатого скота составляет в среднем 15 %, от реализации молока 72,7%. Поэтому расчет экономической эффективности применения препарата телочкам костромской породы имеет важное значение.

За 1999 - 2000 гг. количество выбывших животных в хозяйстве в возрасте до года в среднем составил 50 %.

Экономический ущерб наносимый хозяйству по причине бронхопневмонии

-от падежа телят составляет 14136 руб., - от вынужденного убоя 108014,35 руб., -от снижения продуктивности 821,39 руб. Удельная величина ущерба на одно животное составила 19,55 рублей.

Экономическая эффективность ветеринарных мероприятий -в результате лечения:

- экономический ущерб, предотвращенный в результате лечения составил 12199,2 руб. -экономический эффект полученный в результате лечения 11236,3 руб. -экономическая эффективность на 1 рубль затрат составила-11,6 руб. -в результате профилактики:

экономический ущерб, предотвращенный в результате профилактики составил 57985

руб.

-экономический эффект полученный в результате профилактики 56992 руб. -экономическая эффективность на 1 рубль затрат составила- 57,3 руб. Профилактические мероприятия оказались дешевле в 18,3 раза, а в результате их осуществления получена экономическая эффективность в 4,5 раза выше, чем при лечении больных животных.

Выводы

1. У телочек после тканевой стимуляции изменяется характер течения бронхопневмонии, уменьшается тяжесть течения болезни и тем самым обуславливается высокий уровень выздоровления от 33 % -100 %.

2. Имплантация тканевого препарата телочкам костромской породы достоверно повышает содержание эритроцитов в крови в среднем на 23 %, содержание гемоглобина на 20,1%.

3. После тканевой имплантации повышаются показатели неспецифической резистентное™ организма. В третьей группе наблюдается повышение фагоцитарной активности нейтрофилов (ФАН) на 4,2 %, фагоцитарного числа (ФЧ) - 21,3 %, фагоцитарного индекса (ФИ) - 20,6 % при (Р< 0,05), в четвертой группе на 5,3 % ФАН, 20,9 % ФЧ, 9,5 % ФИ, 32,9 % ФЕпри (Р< 0,001).

4. Имплантация телочкам тканевого препарата в виде кожного лоскута способствовала повышению общего количества белка в сыворотке крови в среднем от 17,9% -27,2% по сравнению с контрольными животными.

5. Тканевая стимуляция ускоряет интенсивность роста опытных телочек в период с 3-6 месяц по сравнению с телочками контрольных групп. Разница по живой массе в первой опытной группе составила 10,3 % при (Р< 0,001), во второй опытной группе - 6,3 % при (Р< 0,01), в третьей опытной групп 1,7% при (Р< 0,05).

6. Имплантация тканевого препарата активизирует процессы пролиферации клеток в лимфатических узлах влияя на массу лимфатических узлов, у опытных животных масса лимфатических узлов больше чем у контрольных в 2,6 раз, а соотношение массы легких к массе бронхиальных лимфатических узлов составляет в опытной группе 1:614,78 г легких, в контрольной 1:2255 г легких.

7. Тканевая стимуляция телочек костромской породы в возрасте 3-х месяцев с профилактической целью позволила снизить заболеваемость бронхопневмонией и повысить сохранность молодняка на 18,6 % и. Получить экономическую эффективность в 4,5 раза выше, чем при лечении больных животных традиционными методами. Экономическая эффективность составила 57 руб. 3 коп. на 1 рубль затрат.

Практические предложения

На основании результатов проведенных исследований, следует рекомендовать производству

следующие мероприятия, внедрение которых позволить снизить процент отхода животных по причине заболевания бронхопневмонией и повысить сохранность молодняка.

1. Для профилактики бронхопневмонии и повышения общей резистентности организма и повышения интенсивности роста рекомендуем применять стимуляцию тканевым

препаратом из кожи крупного рогатого скота однократно в возрасте 3 - 4-х месяцев в осенний период года.

2. Применение тканевой стимуляции телочкам оказывает благоприятное влияние на гематологические показатели, что позволяет рекомендовать ее использование для нормализации показателей крови при различных изменениях.

3. Материалы диссертационной работы могут быть использованы в учебном процессе при чтении лекций и проведении практических занятий по морфологии, патологической анатомии на ветеринарных, зооинженерных, биологических факультетах образовательных заведений.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Кабалина, Ю.Е. Влияние тканевого стимулятора на показатели общей неспецифической резистентности молодняка крупного рогатого скота ранних возрастов/ Ю.Е. Кабалина, Э.Ф. Ложкин // Актуальные проблемы науки в агропромышленном комплексе. -Материалы межвуз. науч. - практ. конф. - Кострома, 2000. - С. 104.

2. Ложкин, Э.Ф. Применение тканевого стимулятора в условиях АО «Гридинское» Красносельского района / Э.Ф. Ложкин, Ю.Б. Кабалина // Актуальные проблемы науки в агропромышленном комплексе. - Материалы межвуз. науч. - практ. конф. - Кострома, 2000. - С. 122.

3. Кабалина, Ю.Е. Клинико- гематологические исследования у телочек 2,54 месячного возраста В АО «Гридинское» / Ю.Е. Кабалина // Актуальные проблемы науки в агропромышленном комплексе. - Материалы 52-й межвуз. науч. - практ. конф. -Кострома, 2001. Т.1. - С.67-68.

4. Ложкин, Э.Ф. Применение тканевого стимулятора с целью изучения его влияния на фагоцитарную активность нейтрофилов в АО «Гридинское» / Э.Ф. Ложкин, Ю.Е. Кабалина // Актуальные проблемы науки в агропромышленном комплексе. - Материалы 52-й межвуз. науч. - практ. конф. - Кострома, 2001. Т.1. - С.77.

5. Ложкин Э.Ф. Динамика фагоцитарной активности нейтрофилов крови у телят при применении тканевого стимулятора / Э.Ф. Ложкин, Ю.Е. Кабалина // Актуальные проблемы науки в агропромышленном комплексе. - Материалы 53-й межвуз. науч. -практ. конф. - Кострома, Т.1.- 2002. - С.118.

6. Ложкин, Э.Ф. Некоторые результаты стимуляции общей неспецифической резистентности телочек при бронхопневмонии / Э.Ф. Ложкин, Ю.Е. Кабалина // Сельскохозяйственная наука и развитие агропромышленного комплекса. - Материалы, науч. - практ. конф. -Иваново, 2002. - С.69-70.

»21 68$

7. Кабалина Ю.Е. Динамика живой массы телочек после применения тканевого препарата / Ю.Е. Кабалина, Э.Ф. Ложкин // Актуальные проблемы науки в агропромышленном комплексе. - Материалы 54-й межвуз. науч. - практ. конф. - Кострома, Т.1.- 2003 - С. 7677.

8. Кабалина Ю.Е. Морфологическая характеристика бронхиальных лимфатических узлов телят после применения тканевого стимулятора ЛО.Е. Кабалина //Актуальные проблемы науки в агропромышленном комплексе.- Материалы междун. науч. - практ. конф. -Кострома, Т.2.- 2004. - С. 102.

Подписано в печать 3.11.2004 Усл. печ. л. -1,2

Отпечатано в типографии ООО «ИРА УТК» 620219, г. Екатеринбург, ул. К. Либкнехта, 42

Формат 60x84 1/16 Тираж 100 экз. Заказ №180

Интенсификация животноводства требует для более успешного развития этой отрасли постоянного улучшения продуктивных и племенных качеств, разработки и внедрения научно-обоснованных природоохранных, экологических и высокоэффективных лечебно-профилактических мероприятий с учетом видовых, половых и возрастных особенностей животных, местом их обитания.

Выполнение этих комплексных задач невозможно без глубоких обстоятельных знаний их биологии, в частности морфологии и физиологии.

Проблема индивидуального развития животных является одной из актуальных проблем всех наук биологического комплекса.

Особого внимания заслуживают сведения об активизации механизмов неспецифической защиты организма животных при нарушениях обменных процессов и других патологиях, вызванных как общеэтиологическими, так и специфическими факторами (В.М. Данилевский, 1974, 1985; А.П. Брынин, 1983, 1986; П.Н. Кориков, 1983; В.Т. Самохин, 1982, 1988).

Из многочисленных работ отечественных и зарубежных исследователей известно, что воспалительные процессы в органах пищеварения и дыхания с острым, а чаще подострым и хроническим течением, сопровождается вторичными иммунодефицитными состояниями, неотъемлемым компонентом которых является недостаточность клеточных и гуморальных факторов неспецифической защиты организма животных (Ф.Ф. Порохов и др., 1974; В.П, Шишков,1981, 1985; П.Я. Конопелько и др., 1983; А.А, Кабыш, 1985; Y. Dreux, 1984; R. Argenzio, 1984; U. Fogarty et.al, 1983).

В этой связи, в последние годы все большее внимание уделяется изысканию и совершенствованию средств, направленных на повышение защитных сил организма при болезнях органов дыхания и пищеварения, включая комплексные препараты различного происхождения в качестве стимуляторов или модуляторов специфического и неспецифического иммунитета (Х.Г. Гизатуллин, 1972; С.С. Абрамов, Ф.Ф. Порохов, 1983; Г.Ф. Коромыслов и др., 1983).

1.2 Цель и задачи исследования

Цель работы - изучить влияние тканевого стимулятора на основе кожи крупного рогатого скота на морфо- функциональные показатели организма и возможность его использования для профилактики бронхопневмонии у телочек костромской породы.

Для выполнения цели работы были поставлены следующие задачи:

- изучить влияние тканевого препарата на характер проявления бронхопневмонии у телочек костромской породы

- исследовать динамику морфологического состава крови у клинически здоровых (стимулированных) и не стимулированных телочек тканевым биостимулятором.

- проследить динамику роста телочек после применения стимулятора

- определить показатели фагоцитарной активности нейтрофилов крови до и после применения тканевого стимулятора

- провести морфо- метрическое исследование структур лимфатических узлов у животных опытных и контрольных групп.

- рассчитать экономическую эффективность применения тканевого стимулятора приготовленного из кожи крупного рогатого скота для профилактики бронхопневмонии

1.3 Научная новизна работы

Проведены комплексные исследования по применению тканевого стимулятора из кожи крупного рогатого скота для профилактики бронхопневмонии у телочек костромской породы. Впервые показано влияние тканевого препарата из кожи на гематологические показатели.

Усовершенствована методика приготовления тканевого стимулятора из кожи крупного рогатого скота. Впервые дана подробная морфо-метрическая характеристика структурных элементов лимфатических узлов телочек больных бронхопневмонией. Определен оптимальный возраст телочек при котором тканевая стимуляция оказывает положительное влияние на рост и развитие животных.

1.4 Теоретическая значимость и практическая ценность работы

Теоретическая значимость работы заключается в том, что выявлено положительное влияние тканевого стимулятора на рост и развитие животных, повышение резистентности организма. Результаты исследований могут быть использованы для написания соответствующих разделов учебных пособий и руководств по возрастной и функциональной анатомии, а также в учебном процессе ветеринарных, зооинженерных и биологических факультетов средних и высших учебных заведений.

Установленные нами изменения в организме дают возможность целенаправленно влиять на снижение заболеваемости телочек бронхопневмонией. Результаты производственного опыта по применению тканевого препарата могут быть использованы при проведении профилактических мероприятий для повышения сохранности молодняка.

1.5 Внедрение результатов исследования в практику

Результаты исследования внедрены в СПК «Гридино» Красносельского района, Костромской области. Используются для чтения лекций и проведения занятий в Костромской, Ивановской, Бурятской, Самарской, Ярославской, Уральской ГСХА, Санкт- Петербурской, Казанской, Московской академиях ветеринарной медицины, Ставропольском, Мордовском, Воронежском государственных университетах, Алтайском, Уральском институтах ветеринарной медицины.

1.6 Апробация работы

Результаты исследований доложены и обсуждены на межвузовских научно - практических конференциях, 55-ой международной научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов Костромской, Ивановской ГСХА в 20002004 гг.

1.7 Основные положения выносимые на защиту

1. Особенности клинических проявлений бронхопневмонии у стимулированных и не стимулированных телочек тканевым биостимулятором.

2. Влияние тканевого стимулятора из кожи крупного рогатого скота на гематологические показатели крови и характер изменений показателей неспецифической резистентности фагоцитарной активности телочек костромской породы.

3. Сравнительная морфология лимфатических узлов у телочек костромской породы при применении тканевой стимуляции.

1.8 Объем и структура диссертации

Диссертация состоит из общей характеристики работы, обзора литературы, материала и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, практических предложений, списка использованной литературы.

Работа изложена на 124 страницах машинописного текста, содержит 23 таблицы, 28 рисунков. Список литературы включает 207 наименований, в том числе 18 на иностранных языках.

1.9 Публикации

По теме диссертационной работы опубликовано восемь работ.

Выводы

1. У телочек после тканевой стимуляции изменяется характер течения бронхопневмонии, уменьшается тяжесть течения болезни и тем самым обуславливается высокий уровень выздоровления от 33 % -100 %.

2. Имплантация тканевого препарата телочкам костромской породы достоверно повышает содержание эритроцитов в крови в среднем на 23 %, содержание гемоглобина на 20,1%.

3. После тканевой имплантации повышаются показатели неспецифической резистентности организма. В третьей группе наблюдается повышение фагоцитарной активности нейтрофилов (ФАН) на 4,2 %, фагоцитарного числа (ФЧ) - 21,3 %, фагоцитарного индекса (ФИ) - 20,6 % при (Р< 0,05), в четвертой группе на 5,3 % ФАН, 20,9 % ФЧ, 9,5 % ФИ, 32,9 % ФЕ при (Р< 0,001).

4. Имплантация телочкам тканевого препарата в виде кожного лоскута способствовала повышению общего количества белка в сыворотке крови в среднем от 17,9% -27,2% по сравнению с контрольными животными.

5. Тканевая стимуляция ускоряет интенсивность роста опытных телочек в период с 3-6 месяц по сравнению с телочками контрольных групп. Разница по живой массе в первой опытной группе составила 10,3 % при (Р< 0,001), во второй опытной группе - 6,3 % при (Р< 0,01), в третьей опытной групп 1,7 % при (Р< 0,05).

6. Имплантация тканевого препарата активизирует процессы пролиферации клеток в лимфатических узлах влияя на массу лимфатических узлов, у опытных животных масса лимфатических узлов больше чем у контрольных в 2,6 раз, а соотношение массы легких к массе бронхиальных лимфатических узлов составляет в опытной группе 1:614,78 г легких, в контрольной 1: 2255 г легких.

7. Тканевая стимуляция телочек костромской породы в возрасте 3-х месяцев с профилактической целью позволила снизить заболеваемость бронхопневмонией и повысить сохранность молодняка на 18,6 % и. Получить экономическую эффективность в 4,5 раза выше, чем при лечении больных животных традиционными методами. Экономическая эффективность составила 57 руб. 3 коп. на 1 рубль затрат.

Практические предложения

На основании результатов проведенных исследований, следует рекомендовать производству следующие мероприятия, внедрение которых позволить снизить процент отхода животных по причине заболевания бронхопневмонией и повысить сохранность молодняка.

1. Для профилактики бронхопневмонии и повышения общей резистентности организма и повышения интенсивности роста рекомендуем применять стимуляцию тканевым препаратом из кожи крупного рогатого скота однократно в возрасте 3 - 4-х месяцев в осенний период года.

2. Применение тканевой стимуляции телочкам оказывает благоприятное влияние на гематологические показатели, что позволяет рекомендовать ее использование для нормализации показателей крови при различных изменениях.

3. Материалы диссертационной работы могут быть использованы в учебном процессе при чтении лекций и проведении практических занятий по морфологии, патологической анатомии на ветеринарных, зооинженерных, биологических факультетах образовательных заведений.

103