Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Микрофлора дыхательного и пищеварительного трактов у цыплят-бройлеров и пути ее коррекции при колибактериозе

_ ' РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ сельскохозяйственных наук

.....РСЕРОССИЙСГОЙ НАУЧИО-ИССЛЕДЗНАТЕЛЬСКНЙ ИНСШТУТ БЕТЕШНАИЮЙ

САНИТАРИИ, В1ШШЫ И ЖОЛОШ

•илг-ь. * 1

На правах рукописи

ЖТГЖАКОВ МЫНБАЙ УДК 619:614.48:651.451.3

.МИКРОФЛОРА ДЫХАТЕЯШОГО И ПИЩЕВАРИТЕЛЬНОГО ТРАКТОВ У ДОПИНГ-БРОЙЛЗРОВ И ПУТИ БЕ КОРРЕКЦИИ ПШ КОЯШКТЕШОЗЕ

16.00.03. - ветеринарная микробиология«вирусология, эпизоотологая,микология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ дассертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Москва - 1993

Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательсно! институте ветеринарной санитарии,гигиены и экологии

Научный руководитель - лауреат Государственной премии,

Заслуженный деятель, наук РСФСР, .доктор ветеринарных наук.профессор А.А.Закомырцин

Научный консультант - доктор медицинских н«ук,1фофессор

Б.А.Шевдеров

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук

А.В.Куликовский ( ШИИВСГЭ ) доктор ветеринарных наук А.А.]^усев ( ШШПП )

Ведущее учреждение: Московская ветеринарная академия

Защит? состоится "ЛА," 1993 г. в часов

на заседании специализированного совета Д 020.50.01 при Всероссийском научно-исследовательском институте ветеринарной санитарии .гигиены и экологии ( ЕНШВСГЭ ) по адресу: 123022, Москва, Звенигородское шоссе,5.

С диссертацией можно ознакомиться вбиблиотеке ШИИВСГЭ.

Автореферат разослан " " 1993 г.

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат биологических наук

Л.П.Пимен ова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность теш. До последнего времени определенную опасность для промышленного птицеводства представляет таков заболевание,как к сшиб акте ри оз.

Исследованию коли бактериоза птиц посвящены работы многих отечественных и зарубежных авторов,тем не менее практика еще та имеет надежных средств профилактики этого заболевания.

По данным ряда авторов ( В.И.Ежов,ГД.Грошева,И.М.Минаев , 1970; В.П.Урбан.И.А.Радчук ,1975; Н.В.Баланин ,1982; В.П.Петровская ,1984 ) массовое применения антибиотиков.особенно широкого спектра действия,привело к селекции штаммов кишечной палочки, обладающих высокой-устойчивостью ко многим антибактериальным препаратам.

Следует также отметить,что лечебные и санирующие препараты, в некоторых случая,помимо воздействия а возбудителя,могут повреждать нормальную микрофлору животного,что нередко способствует формированию дисбактериоза и развитию других заболеваний (W.h%rJLcn., 19П; В.В.Сорокин,М.А.Тимошко,А.В.Николаева ,1973; В.Д.Соколов ,1982 ) .•

Многие авторы ( Б.Ф.Бессарабов,B.C.Кузнецов,В.Н.Редков и др., 1^5; И.Н.Блохвна.В.Г.Дороф Ччук ,1376; Н.М.Граче^а.О.В.Чахава, Поспелова В.В.,и др.,1986; Г.Н.Гончарова,Л.П.Семенова,А.М.Лян-ная и др.,1988 ) считают,что для коррекции дисбактериоза необходимы бактериальные ь^епараты, состоящие из нормальной микрофлоры ( бифидобактерии.ацидсЛильно-бульонные культуры.колибак-. терин ) или безвредные для ма:;роорганизма химические препараты.

К&-. показывают исследования последних лет ( С.И.Эйцелыатейн, В.С.Ярных,А.А.Закошрдан.Б.Ф. Ее сс арабов .В.Д.Соколов .В.Е.Зуев и др),

наяболее эффективным методом изменения препаратов в борьбе с ре пираторными заболеваниями является диспергирование их в аэрозоль ное состояние.

Разработаны и внедряются методы ингаляционного применения антибиотических и санирующих веществ,повышающих неспецифическую резистентность организт птиц. Вместе с тем следует отметить,что многие вопросы о влиянии аэрозольных форм химических препаратов на микро- и макроорганизм,в частности на микрофлору дыхательног и пищеварительного трактов у молодняка птиц,а также путей коррек ции микрофлоры,в тем числе и при колибактериозе птиц,еще не напи научно-обоснованного решения; актуальным остается и поиск новых высокоэффективных химических препаратов для профилактики колибак териоза.

Цель и задачи исследований. Целью данной работы явилось изуч ние микрофлора дыхательного и пищеварительного трактов у цыплят при промысленном их выращивании и разработка путей ее коррекции.

В связи с изложенным на разрешение были поставлены следующие задачи:

1.Изучить микрофлору ( аэробную и анаэробную ) дыхательного и пищеварительного трактов у цыплят-бройлеров разного возраста при промышленном выращивании.

2. Из учить микрофлору верхних дыхательных путей и кишечника у здоровых кур.

3.Изучить микрофлору при колибактериозе птиц.

4.Изучить микрофлору дыхательного и пищеварительного трактов цыплят-бройлеров после ( дискретного и перманентного ) применения аэрозолей препарата йодгриэтиленгликоля.

5.Изучить эффективность дезинфекции воздуха аэрозолями препарата ка основе четвертичных амдониевых основании.

6.Изучить острую и хроническую ингаляционную токсичность аэрозолей препарата на основе четвертичных аммониевых основании (асе-пур-К ) для цыплят.

7.Дать экономическую оценку научной разработке.

Научная новизна.В диссертации впервые изложены некоторые показатели возрастной динамики микрофлоры дыхательного тракта и кишечника у здоровых дагшят-бройлеров при промышленном выращивании; состава микрофлоры верхних дыхательных путей и кишечника здоровых кур,а также влияние на них аэрозолей йодгриэтиленгликоля;определена эффективность аэрозолей йодгриэтиленгликоля при экспериментальном колибактериоза птиц ¡установлена эффективность дезинфекции воздуха аэрозолями препарата на основе четвертичных аымониевых основании ;изученк-острая и хроническая ( ингаляционная ) токсичность аэрозолей препарата на основе четвертичных аммониевых оснований ( асспур-К ) для щплят.

Установлена возможность дезинфекции воздуха помещений и одновременной санации микрофлоры дыхательного тракта цыплят-бройлеров аэрозолями препаратов йодгриэтиленгликоля и асепура-К в период технологического цикла выращивания.

Раннее применение аэрозолей санируювдх ( йодгриэтиленгликоля я асепура-К ) препаратов с 2-х дней после посадки и последующие аэрозольные обработки воздуха помещения этими препаратами по предлагаемой наш режим-схеме способствуют коррекции степени контаминации организма микробами Е. coli ( органы дыхания,пищеварения ) и профилактикь колибактериоза птиц.

Практическая ценность.На основании результатов проведенных исследований разработаны режим и технология аэрозольной дезинфекции воздуха птицеводческих помещений и одновременной санации дыхательного тракта птиц с целью профилактики колибактериоза.

Разработано дополнением "Наставлению по применению йодгри-этиленгликаля при инфекционном ларинготрахеите и к сляб акте]» оз в птиц" (утверэденноаду ГУВ МСХ СССР Г7 февраля 1978 г.),которое об-суадено и одобрено Ученым советом ВНЖВСГЭ ( 12 декабря 1989 г.).

Дополнение включает режимы и технологию раннего применения аэрозолей йодгриэтиленгликоля я асепура-К с целью коррекции контаминации организма цыплят бактериями из группы кишечной палочки я профилактики колибактериоза.

Апробация работы .Материалы диссертации доложены и одобрены

на:

1.Всесоюзном семинаре ( 28-29 июня,1988 г., г.Москва )"Колони-зационная резистентность и химиотерапевтические антибактериальные препараты*.Всесоюзный НИИ антибиотиков.

2.Научной конференции молодых ученых ВШИВС (г.Москва,ноябрь, 1989г.).

3.Ученом совете ВНШВС (г.Москва,декабрь,1989 г. ).

4.Межлабораторном совещании ВНШВСГЭ.2 июля, 1992 г.

Публикация .По теме диссертации, сцуйликовано пять статьей,

одна статья находится в печати.

Объем работы .Диссертация изложена на страницах машинописного текста и состоит из введения,обзора литературы,собственных исследований .обсуждения полученных результатов и предложений для практики,списка использованной литературы и приложения. Ма-

териалы диссертации илюстрированы /^таблицами, £ фотографиями.

Список литературы включает /£>/ источников отечественных и Зй иностранных авторов.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материала и методы исследований. Экспериментальная работа гго теме диссертации проводилась начи в течение I986-I98S гг. во ШИИВС (лаборатория по изучению аэрозолей) и ВШИ антибиотиков, а также на базе Истро-Сенежской и Петелинской птицефабрик Московской области.

Материалом для баятеррологических исследований служйли с швы с поверхностей помещений птицефабрик (пол, стены, оборудование .воздух,корма) ,а также'органы здоровых цшлят и патологический материал от пашей птицы.

В исследованиях били использованы 6 паспортизированных энгеро-патогенных штаммов В.coli серогрупп 01, 02, 08, 055, 078, OUI, полученных из ВГНКЙ ветеринарных препаратов и 3 штамма Е.coli серогрупп 01, 02, 011?.выделенных нами от пашей больной колнбактерио-зом птицы. Гае штамм1- хранили в холодильника при температуре 4°С.

Для выделения зшеряхий применяли МПБ,МПА,агар Эндо.Родовую и видовую идентификацию Е.coli,а также серологическую типизацию штаммов эшерихий проводили i соответствии с "Нас-ывленивм по пр-менению агглютинирующих 0-коли сывороток"(1980).

Для выделения других грамотрицательных я грашалсжятельных микроорганизмов ^спользоиали соответствующие элективные я дифференциально-диагностические среда (Плоскирева.Сабуро с левомицепшом, маннитко-солевой (8,5^-ый со лавой ША) агар,МРС-4,Вяль'-сн-Влера, Бревер с антибиотиком и без антибиотика,suпит агар,анаэробный агар

БА т.е. выделения соответственно октеробактерий и анаэробных бштеоий.

Для выделения возбудителя колибактериоза птиц и других микроорганизмов с объектов внешней среда,а также из материала,взятого . от здоровых и павших птиц,применяли общепринятую методику.

Посевы для обнаружения аэробных бактерий инкубировали в термостате при 37°С - 24-48 часов, анаэробных - 9&-168.. часов;для выделения анаэробных бактерий использовали анаэростат (термостат), микроанаэростаты,содержащие смесь газов ( СО^+Н^ ). Посевы из исследуемого разведения делали капельным методом на вышеуказанные среда в дозе 0,02 мл. После соответствующей инкубации проводили подсчет выросших колоний, характерных для определенного вида бактерий, пер ее чет их количества соответственно количеству исследуемого материала ( выражали в десятичных логарифмах,й/г.). Колонии, выросшие на питательных средах при шееве из максимальных раз-ведений .подвергали группов й для аэробных неспорообразунцих бактерий и родовой (лактобациллы,энтерококки,клостридии,стафилококки) идентифг<ации.

Аэрозоли химических средств в лабораторных условиях получали с помощью струйного аэрозольного генератора САГ-1 и АЕЖ; в 1 роиз-водственных опытах использовали только САГ-1.

Аэрозоли химических препаратов,а также биологические аэрозоли в лабораторных условиях исследовали в герметизяропнных камерах объемом 8 и 30 иг4.

В качестве дезинфицирующих средств наш были испытаны аэрозоли йодтррэтиленгликоля,асепура-К и его композиция т.е. 5$-ый водный раствор четвертичной соли амлония на триэтиленгликоле.

Каждый опыт сопровождали соответствуют™ контролем,соблюдая аналогичные условия с той лишь разницей,что контрольные грулпы обрабатывались стерильной водой в той же дозе.

Полученные результаты исследований обрабатывали вариационно-статистическим методом с использованием критерия Стькдента (Мале-та Ю.С.,Тарасова В.В.,1982 ).

Расчеты экономической эффективности режина проводили в соотвнт-ствии с "Методикой определения экономической эффективности использования в сельском хозяйстве результатов научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ .новой техники .изобретений и рационализаторских предложений" ( 1983 ).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИИ

Микройлога дыхательного и пищеварительного трактов у здоровых

1уплят^5роЩёров при .прошшленном'шращиваши.

Ми кр об ко ло гя чз скому исследованию подвергались цыплята четырех возрастных груш:-на вторые сутки поело посадки в птичник,в 10, 30 и 50 суток выращивания.Пробы на микробиологические исследования брали из следукщих органов и тканей цыплят: горбачи (зева) .трахеи, зоба .мышечного желудка. гонкого и толстого отделов кишечника; одновременно брали пробы из воздух- и с поверхностей помещений ( пол, стены,оборудование ) и корма.

Микрофлору цыплят и объ_.лтов окружающей среды оценивали по частоте выделения видов микроорганизмов ( в процентах От числа, исследованных проб ) и по интенсивности - десятичному логарифму от среднего числа микробных тел (колоний) данного вада,Еыде~челшх из пробы ( с тампона,из грвмиа корма,грамма содержимого кишечника ), а также, общему количеству выделе.г"'кх аоробов и анаэробоз.

Из каждой возрастной группы обследовано по 20-25 цыплят; из различных локусов- исследовано более 1000 проб.

Результаты исследований показали,что интенсивность колонизации различных локусов микроорганизмами (аэробами и анаэробами) увашн-чивается с возрастом цыплят.Так,если в первые 2 дня количество общей микрофлоры исчислялось десятками колоний в пробе,то начиная с десятисуточного возраста цыплят и старше количество мякроорганю-мов увеличилось в десятки и сотни тысяч раз. , Видовоз* состав микрофлоры отдельных локусор у цыплят на 2-е сутки не имел стабильности.Из гортани .трахеи в пищеварительного тракта выделена ксиковая микрофлора (кокки, стафилококки),бактерии группы кисетной палочки .протей, субтили^,грибы рода пенициллиум, аспергиллы;при этом частота выделения1 отдельных видов микроорганизмов (oí числа исследованных проб) была низкой и колебалась -от 0,1 до 35#.Видобой состав микрофлоры,выделенной от вдшгят отличался от микроорганизмов, обнаруженных в прббах с поверхностей;птичника. Учитывая весьма тщательную санацию птичника перед посадкой цыплят, ; адо полагать,что контемянг ,ия цыплят произошла в основном еще в первые часы в выводных шкафах и сортировочном помещении инкубатория. *

Микробная колонизация отдельных локусов у цыплят к 10-ым сут- . кам выращивания имела стабильность. Так,частота выделения кокковой микрофлоры (кокки,стафилококки, стреотококки) из гортани и трахеи составила 62-75% (от числа исследованных проб);из отдельных локусов пищеварительного тракта ( зоб, мышечный желудок .тонкий и толстый отделы кишечника ) частота выделения стрептококков, энтерококков, лактобацилл составила от 75 до 92$ от числа исследованных проб;

- 9 -

E. coli, обнаруживали во всех пробах.

К 30-и и 50-и суточному возрасту значительно повысилась интенсивность контаминации отдельных локусов микробами грушы кишечной палочки ,лактобациллами,клостридия1Ди .грибами рода кандидат ряде проб из тонкого и толстого отделов кишечника были выделены бифядобактерии,грибы рола кандада,протей и др; тонкий и толстый отделы кишечника интенсивно колонизированы анаэробными микроорганизмами.

Степень микробного загрязнения поверхностей помещений,где выращивались цыплята как по частоте выделения отдельных видов микроорганизмов, так и по интенсивности обсеменения вышеуказанными микроорганизмами.прогрессивно повышается с увеличением возраста цыплят .В пробах из комбикорма выделены бактерии группы кишечной палочки,сальмонеллы,протей,энтерококки,грибы рода кандида.Однако частота выделения указанных видов микроорганизмов из комбикорма не была стабильной.

Таким образом,результаты проведенных исследований показали, что микрофлора, выделенная из дыхательного и пищеварительного трактов у цыплят-бройлеров .коррелирует с микрофлорой .выделенной с объектов среды их обитания.С возрастом цыплят ухудшалось санитарное состояние птичников,повышалась микробная обсеменекность объектов окружающей среда,что и отразилось на степени микробной колонизация данательного и пищеварительного трактов цыплят.

Некоторые показатели состава микрофлоры верх:шх дыхательных

путей л кишечника здороьыхкур.

Опыты проводили на курах породы белый леггорн в возрасте 270, 260 и 310 дней;под опытом находилась 40 кур с массой 1000-2000 rj условия их содержания отвечали требованиям 0КГП-85.Для микрс-

биологического анализа брали пробы кз зева,трахея и из фекалий. Всего из дыхательного тракта исследовано 150 проб,из фекалий -170 проб. *

Результаты исследований показали,что в количественном отношении микрофлора верхнего отдела дыхательного тракта и толстого отдела кишечника,выделенная от взрослых кур, незначительно отличается от аналогичных локусоЕ у цыплят-бройлеров в' возрасте 50 суток.Однако исследования показали стабильность по частоте выделения отдельных видов микроорганизмов .Так,в пробах из верхнего . отдела дыхательного тракта кур представители группы аэробов:Е.соЬ, стафилококки,энтерококки,были выделены практически во всех пробах ( 98-100$ );в пробах из фекалия лактобацидлы,кишечная палочка, энтерококки и бифидобактерии обнаружены в 100#;из фекалий также выделены грибы рода кандпда .клостридии, протей ( 54-825? ) и некоторые другие грам отрицательные и грампо ложи те льны е бактерии; кишечник интенсивно колонизирован анаэробными микроорганизмами.

Микрофлора дыхательного я пищеварительного трактов у цыплят.

и кур при искусственном аэрогенном заражении их энтеропатоГен-

ными штаммами К .'coll..

Аэрогенное заражение цыплят и кур проводили в герметизировав-ной камере объемом 8 и?.В опытах находилось 25 цыплят в возрасте 30 суток и 50 кур породы белый леггорн в возрасте 9 месяцев с массой 1500-2000 г.

Биологический аэрозоль с массовым медианным диаметром (At) частиц 14*2 мкм получали с помощью аппарата АРК и компрессора СО--7А.

Для отбора проб воздуха использовали сифонируюций прибор С.С.Речменского в модификации А.А.Закомырдина и электрический аспиратор Мигунова. Пробы воздуха брапи через 10, 20, 30 и 60 минут

( после диспергирования суточной культур! E.colt) ; скорость отбора воздуха 20 л/минуту.

Перед заражением птица в течение 14 дней находилась под клиническим наблюдением. Заражени е птицы проводили путем 3-х кратного ингалированвя аэрозолей суточной культуры. ( смась 4-х штатов Е. coll, серо групп 01, 02, 078, 0III ) с часовым интервалом. При этом заражакщая доза одной голова взрослой птицы,с учетом плотности аэрозоля ( 4,71 мл/м3 камеры ).кратности ингаляций.экспозиции я объема дыхания,составила 1,6 млрд. микробных тел.

Наблюдения показали .что взрослые куры к 7-14 суткам заболели с явными признаками колибакте.риоза.Одна курица пала на 16-ый день после аэрозольного, заражения;остальные куры переболели.

При бактериологическом исследовании слизи .взятой с поверхностей гортани павшей и убитой птицы,в .пробах,взятых из трахеи .легких, воздухоносных мешков, печени, селезенки .тонкого и толстого отделов кишечника выделены исходные серогруппи кишечной палочки;у контрольной птида E.coll- были выделены липь из зева,из содержимого тонкого я толстого отделов кишечника с низкой степенью контаминации;Е.colI из других исследованных органов не выделены.

Аэрогенное заражение 30-и дневных цыплят по вышеуказанному режиму оказалось для них губительным;начяная с 3-4 дня после заражения у цыплят проявились признаки заболевания: отказ от корла,повышенная жавда; к 5-6 дню - диарея; к 9-12 даю вся опытная группа цыплят ( 20 голов ) пала от колибактериоза.

Таким образ ом,результаты проведенных экспериментов свидетельствуют о, том,что при аэрогенном заражении цыплят и взрослой птицы энгеропатогенными штаммами E.coli.последние массивно колонизируют дыхательный и пищеварительный тракт,обнаруживаются во всех срг-

нах и тканях цыплят и кур.Взрослая птица в основном переболевает, а молодняк гибнет от калибактериоэа.

Микрофлора дыхательного и пище ва ри те ль того' т рактов у цыплят

при естественном "течении ксдиоактериоза.

Опыт проводили на цыплятах цеха по выращиванию иугият-бройлеров Петелинской птицефабрики Московской области.Бактериологическому исследованию было подвергнуто 244 пробы от больных и павших от ксяибактериоэа цыплят в возрасте 28 я*43 суток.

Из дыхательного тракта исследовали пробы из зева,трахеи,легких и воздухоносных мешков;из пищеварительного тракта- соскобы со слизистой оболочки и содержимое тонкого и толстого отделов кишечника.

Основное внимание в этих исследованиях уделено видовому составу выделенной микрофлоры,который определяли по классификации Берд-жи.

Результаты наших исследований показывают,что в пробах из дыхательного и пищеварительного трактов в 100$ выделены бактерии группы кишечной палочки;во многих пробах из указанных органов обнаружен энтерококки и стафилококков пробах из тонкого я толстого отделов кишечника превалируют протей,грибы рода какяида;клостри-дии, Оифидобактерии; у больных колибактериозом из кишечника выделены лишь в 2-3$ от числа исследованных проб .Обращает на себя внимание тот факт,что ь пробах со слизистой тонкого и толстого отделов кишечника,из фекалий от больной колибактериозом птицы анаэробные бактерии были выделены в незначительном количестве,что укрывает на снижение их барьерной функции.

Возрастная динамика контаминации дыхательного и пищеварительного трактов 1^1ияг^рдйд'ёрШ~5актериями &гоТГВринеа1аго-получии по крлибакт.ериоЖ.-

Под опытом находилась партия даплят клеточного содержания с первого дня по 60-е сутки их выращивания. Материалы для бактериологических исследований брали от цыплят 2-х,IG-и,30-и и 50-и дневного возраста;пробы брали из гортани (зева),трахеи.мышечного желудка, тонкого и толстого отделов кишечника;одновременно брали пробы из воздуха и о поверхностей помещения ( пол, стены, обарудование ).

Результаты исследований показали,что колонизация дыхательного и пищеварительного трактов цыплят-бройлеров бактериями Е. coll-повышается с их возрастом,Также как и в благополучных хозяйствах, однако интенсивность колонизации в неблагополучном по колибак-териозу птичнике значительно выше.

Так,если в первые двое суток в пробах из дыхательного и пище. варительного трактов на питательных средах <&ли обнаружены лишь единичные колонии Е.coll,то к 10-30 суткам количество кишечной палочки резко увеличивалось.При этом'критический уровень колонизации дыхательного и пущеварительного трактов бактериями кишечной палочки приходится к 25-30 суткам,когда были зарегистрированы клинические признаки колибактериоза среди цыплят-бройлеров.

Результаты наших исследований также показали,что при неблагополучии птицы по колибактериозу в период ее выращивания идет интенсивное обсеменение поверхностей и воздуха помещения микроорганхз-мами группы кишечной г тачки;резкое повышение плотности контаминации воздуха кишечной палочкой способствует аэрогенному распространению возбудителя колибактериоза.

В "тдзчи последующих наших исследований входил поиск эффективного способа коррекции плотности контаминации окружающей среды

(воздух) и дыхательного тракта цыплят бактериями Е.coli с целью профилактики колибактериоза.С указанной целью мы испытали аэрозоли-йодгриэтиленгликоля (препарат и режим ранее рекомендован В.Е.Зуевы м ). ...

Микрофлора_зева и кишечника здоровых кур под воздействием аэрозолей иодгриэтиленгликсия«

Предварительно мы провели опыты на 10-и здоровых .курах породы белый леггорн в возрасте 5-6 месяцев с массой11500-1800 г.Аэрозоли йодгриэтиленгликоля получали с помощью генератора САГ-1.Обработку птицы цроводили согласно Наставления по применению этого препарата,то есть три дня подряд с 2-х дневным интервалом в три цикла. Распыляемая доза препарата составила 1,1 мл/м3.

Результаты опытов показали,что аэрозоли йодгриэтиленгликоля ( в рекомендованной дозе ) существенно снижают количество микрофлоры ( Е.coIl) б дыхательном тракте и не вызывают дисбактериоз кишечника птиц.

Микрофлора 'зева .и кишечника у кур ( при искусственном аэро-гещом заражении энтеропатогенными _ штаммамиcolt )' по'д воздействием а&розолеиТортриэтиленгликоля.

Для аэрозольного заражения птг'У ( 25 голов 8-месячных кур ) применили суточную культуру четырех эктеропатогенных шташов E.coli ( серогрупп 01, 02, 078, OUI ) в дозе .4,71 мд/м3. Аэрозольное заражение смесью ââ вышеуказанными штаммами и обработку птицы йодтриэтиленгликолем проводил!" в камере объемом 8 м3,&роши препарата Йодтриэтиленгликоля и биологического аэрозоля получали с помощью генератора САГ-1.

Заражение птицы проводили путем 3-х кратного распыления суточной культуры Е.colt с часогшл интервалом.Опытную группу кур через час после заражения обрабатывали аэрозолями йодтриэтиленгликоля

( 1,1 последующее время провели три цикла обработок

птица аэрозолями'йодтриэтиленгличоля ( по три дня кшхд-'й;однократно в день с 2-х дневным интервалом между циклами ).

У всех кур накануне л в процессе эксперимента,через час после каждой обработки и по окончании 1-го,2-го,3-го циклов,исследовали пробы из зева,трахея,легких,с поверхности воздухоносного мошка,:«э селезенки .печени,из содержимого тонкого и толстого отделов кишечника на наличие кишечной палочки;одновременно исследовали Еоздух камеры.

Результаты наших исследовании показали,что после аэрозольного заражения и последующей аэрозольной обработки птицы йодтриэтилен-гликолем ( через час ) кишечная палочка обнаружена во всех исследуемых органах.Тогда как после третий обработки 1-го цикла 2.coll была обнаружена только в пробах,взятых из гортани (воможна повторная контаминация) ,а также в содержимом тонкого и толстого отделов кишечника.После последующих циклов обработки кишечная палочка была обнаружена лишь в тонком и толстом отделах кишечника.Все куры контрольной группы переболели кслибактериозом;У подопытной группы кур колибактериоз не установлен.

Как показали результаты наших опытов, аэрозоли йццтриэтяленгли-коля позволяют резко снизить обсемененность воздуха кишечной па-лочкой.Так,после 2-3-го циклов обработок из водуха были вцделены ■ лишь единичные колонии исходной культуры.Можно было предположить, что своевременная обработка птицы и воздуха производственного помещения аэрозолями йодтриэтиленгляксля позволит предотвратить заболевание птицы колибактериозом.

Эффективность . ретама применения аэрозолей йо ,дт ри эт и л ен гл ик оля с целью неспе:@ическрй профилактики калШактериоза цыплят-Трс^леров.

Нами бьии проведены испытания эффективности следующего режима применения аэрозолей йодтрийтиленгликоля ( таблица I ).

Таблица I

Режим применения аэрозолей йодтриэтиленгликоля

Возраст цыплят,! Доза препарата,! Экспозиция после! Кратность сутки ! ил/кг ¡распыления.минут ! обработки

2 0,5 --т— 15 I раз в день

3 0,5 15 к

10 1,1 23 _ к _

20 1.1 25 _ и _

30 1,1 25 2 раза в день с интервалом 3 часа

40 1,1 Я I раз - в день

50 1,1 25 _ и _

Опыты проводили в 2-х типовых помещениях одной из птицефабрик Московской области неблагополучной по коли бактериозу птиц.В одном помещении объемом 2900 м3 содержалось 16500 голов цыплят-бройлеров,с однодневного возраста до 70 сутбк выращивания на глубокой подстилке - опытный птичник.Контролем служил аналогичный птичник с равным количеством и возрастом птицы,с равным*условиями содержания и кормления птицы.Аэрозоли йодтриэтиленгликоля ( и воды ) получали с помощью распылителей САГ-1 и омпрессора ПКС-3,5;. ¿п аэрозоля 7 мкм.Контрольный птичник (воздух) обрабатывали аэрозолями кипяченной воды в равном с йодтриэтиленгликолем количестве.

Проб;* воздуха для бактериологического анг.../.за из опытного и

контрольного птичников отбирали до распыления препарата (или воды) и через каждае 10 минут в течение часа после распыления.Пробы воздуха отбирали { скорость отбора проб воздуха 20 л. в лднуту ) с помощью импинджера ( по В.И.Игнаткину ).У подопытной к контрольной птицы отбирали пробы из зева до и после каждой обработки.

Результаты микробиоло веского исследования воздуха опытного и контрольного птичников до я после распыления Йодгриэтиленгли-коля ( и вода ) на 3-й,10,20,30 день выращивания цыплят-брс/лсров, т.е. после 2-й,3-ей,4-ой,5-ой дезинфекции воздуха птичника приведены в таблице 2.Данные таблицы показывают,что периодическая обработка воздуха помещения аэрозолями йодгриэтиленгликоля достоверно снижает как общее количество микроорганизмов,так и санлтар-но-показательных микроорганизмов (микробы группы кишичной папочки, стафилококки );так,в пробах воздуха, взятых через 10,20,30 минут после распыления йодгриэтялонгликоля, кишечная палочка не обнаружена; на 38-75$,по сравнению с количеством до дезинфекции, снижалось общее чясло бактерий в воздухе помещения.Одновременно в воздухе контрольного птичника общее количество сакитарно-пока-зательных микроорганизмов с возрастом цыплят значительно повышается.

Результаты опытов по обнаружению кишечной палочки в пробах из гортани ццплят опытного и контрольного птичников показывают, .что после 3-ей,4-ой и 5-ой дезинфекции воздуха птичника (через 30 минут после распыления препарата)в посевах из гортани цыплят кишечная палочка не обнаружена; у цыплят контрольного птичника интенсивность обсеменения слизистой гортани значительно повышается с возрастом цыплят,в 100%' проб обнаружена кишечная палочка.

Апробированный режим и технология применения аэрозолей йод-

Таблица 2

Результате микробиологических исследований проб воздуха опытного птичника,-обработанного аэрозолями йодтриэтиленгликоля ( доза препарата 1,1 нт/м ).

Количество микроорганизмов в воздухе птичника,тыс.м.т./и?

F Опытный птичник , Контрольный птичник ( псслг м

! Поме ! Распыления вода) через,минут: 03

; 10 i 20 ! 30 ! ÏÔ Г 30

!0бщ.к-во!Е.соВ !Общ.к-во!Е.соН !0бщ.к-во!E.coIt ! Общ.к-во !Е.coll ! Общ. к-во !Е.coll •микробов! .'микробов! ¡шкробов! !микробов! ¡микробов!

10 15,5 17 ' - 25 - 40 18 39 19,5

20 56 - 52 78 120 39 137 42

30 250 - 125 - 135 - массивный массиЕн.массивн.массивн.

рост рост рост рост

Примечание: " - " нет роста.

"Массивный рост" - от 250 я более колоний в I мл ( разведение 1б3 ). Одна проба равнялось 2Э л. воздуха в минуту.

Возраст цыплят, сутки

- 19 -

триэтиленгликоля для дезинфекции воздуха птичника в присутствии птицы позволили снизить падеж птицы,предотвратить кслибактеряоз, а также повысить продуктивность птицы; сохранность поголовья в обработанном птичнике составила 81,7$; в контроле - 75,5^.

Поиск .новых тамических препаратов для аэрозольного применения

В связи с дефицитом йода возникает проблема поиска нсбых санирующих препаратов.За последние годы вс ВШШС создан ( А.Г.гдиля-новским ) новый препарат асепур-К на основе четвертичных аммониевых оснований,который рекомендован для наружного применения,как заменитель йода.

В задачу наших исследований входило изучение пригодности аэрозолей асепура-К и его композиций при колибактериозе цыплят .Учитывая то,что асепур представляет собой четвертичную соль .растворенную в этиловом спирте,нами ( совместно с авторам ) была приготовлена композиция: 55&-ЫЙ водный раствор аммониевой соли ( что в асе- ' пуре ) на триэтиленгликоле; асепур-К и его композицию т испытали в форме аэрозолей на предмет возможности името препарат равный йодтри этиленгликслю.

Эффективность дезинфекции воздуха,.искусственно конташкиоотан-

Тюго^одб^1теле.м,,^одатек»ё'ДОза.аэ^озйти препарата acenyrttj

и его композиции.

Эксперименты проводили в герметизированной кг^ере объемом 8 м3. Химический я биологический аэрозоль c«<i 7*3 мкм получали с помощью САГ-1;в опытах использовали суточную культуру Е.соЩ 01, 02 ). После распыление бактериальной суспензии сразу ( через 2-3 минуты) распыляли един из .дезинфицирующих препаратсв;доза распыляемых препаратов и бактериальной суспензии составляла 0,5 мд/м3;контролем служили аналогичные опыты, в которых вместо препарата распыляли

- so -

стерильную Еоду.

После распыления препарата,через кявдне Ю минут в течение часа брали пробы воздуха с помощью импицджера.

Результаты наших исследований показали,что Ю0#-ый бактерицидный аффект по отношению к кишечной палочке оказывают асепур-К и 5/&-КЙ водный раствор четвертичной ссли аммония на триэтилен-гликоле при расходе 0,5 мц/к? и экспозиции 10 минут.

Эффективность дезинфекции в оз ду xa ^ и ск у с ст венн о контаминирован-ного стаБилок ком, аэ розолями п ре трата асепур-К и его композиции .

Условия и методика проведения опытов аналогична опытам с Е.соЬ. В этих опытах применяли суточную культуру золотистого стафилококка (штамм 209Р).Результат« наших исследований показгли,что аэро аоли асепура-К при расходе 0,5 мл/м3 через 40 минут обеспечивают IGOíS-oe обеззараживание воздуха камеры. Аэрозоли 5%-го водного раствора четвертичной соли аммония на триэтиленгликоле при том же расходе снижают количество стафилококков в пробах воздухе, взятых через 10 минут на 76,3$,через 20 - 84,7%, через 30 - 89,3%,через 40 - 90,2%,через 50 - 93,2$,через 60 минут 94,356.

Изучение острой токсичности аэрозолей асепура-К для цыплят-брюйлепов". ■ —-

Острую токсичность аэрозолей асепура-К изучали на. здоровых цыплятах-бройлерах в возрасте 2, 3, 10, 20, 30, 40 и 50 дней.

При этом проверяли воздействие асепура-К на организм цыплят-бройлеров в дозах: 0,25 мл/м3; 0,5 мл/м3; 1,0 мл/м3.Цыплят аэро-зольно обрабатывали I раз в день с экспозицией 30 минут .Забой цып-ляг проводили через сутки.

В другой серии опытов было испытано влияние данного препарата на организм цыплят в дозах: 0,5 мл/м3; 1,0 мл/м3; 2,0 мл/м3 и 8,0

- 21 -

мл/м3 при экспозиции 4 часа,-цыплят обрабатывали I раз в день. Убой'цыплят проводили на 4-ые, 8-ые и на 14-ые сутки.

■ Результаты наших клинических наблюдений за состоянием здоровья у цыплят-бройлеров, обработанных аэрозолями асепура-К,не показали каких либо отклонении от нормы.

Данные токсикологических исследований дают основание считать, что в дозе 0,5 - 1,0 мл/м3 асепур-К безвреден для цыплят (опыты проводили совместно с- к.в.н.,Ф.Ф.Скеордоеым ).

Изучение хронической (ингаляционной) токсичности аэрозолей асепура^для цыплят^ороиле ров.

Хроническую токсичность аэрозолей асепура-К проверяли на цыплятах в возрасте 10 суток; препарат испытан в дозах: 0,25 мд/м3; 0,5 мд/м3 и 1,0 мд/м3 воздуха камеры.Цыплят обрабатывали аэрозолями асепура-К I раз в день три дня подряд с двухдневным интервалом ( в три цикла ).Экспозиция после аэрозольной обработки— 30 минут.Убой цыплят производили на 14-не сутки .После трех циклов обработки цыплят аэрозолями асепура-К клинические к патсдогоава-томические ясследовачия не выявили отклонений от физиологической нормы. Гистсисследования также не показали существенных отклонений от нормы.

• Производственные опыты по оценке эффективности аэрозолей асепура-К.

Опыты проводили в 2-х помещениях цеха по выращиванию иуплят-.\.бройлеров неблагополучного по 'колибактериозу.В каждом птичнике находилось по 15400 голов цыплят-бройлеров в возрасте двух дней; объем помещения 2300 м3.

Контролем служил аналогичный птичник с равным количеством и возрастом птицы,с равными условиями содержания и кормления опытной я контрольной птицы .Аэрозоли асепура-К (или воды) получали с по-

мощью генератора САГ-1 и компрессора ЛКС-З,5.Цыплят обраС гывали аэрозолями асепура-К один раз в день в возрасте 2, 3, 10 , 20 , 30, 40 и 50 суток.До и после обработки препаратом асепура-К брали пробы воздуха через каждые 10 минут в течение часа.Пробы воздуха брали с помощью кмпикджера ( со скоростью 20 л/минуту).

Результата исследовании отражены в таблице 3. Из данной таблицы видно,что аэрозоли препарата асепур-К в дозе 0,5 ш/м3через 23 минут оказывают 100$-ыЯ бактерицидный эффект по отношению к кишечной палочке; на 78,5? погибают стафилококки; снижают общее количество микробов на 70,2$.

В пробах из зева,взятнх после обработки аэрозолями асепура-К, Е.со11не обнаружена,товда как у контрольной группы птиц обнаружен массивный рост Е.соИ.

После применения аэрозолей асепура-К колябактериоз не зарегистрирован; в контрольном птичнике от коли бактериоза погибло 383 головы цыплят; общая сохранность птицы в обработанном птичнике составила 79,7$, в контроле - 73,2$.

Таким образом, применение аэрозолей асепура-К для дезинфекции воздуха птич;шка в присутствии птицы позволило снизить падеж птицы,предотвратить ксшибактериоз.

Экономическая оценка применения _ аэрозолей химических препаратовв "борьое с колибактериозш птиц.

В задачу исследований входило дать в сравнительном плане экономическую оценку прими.ения аэрозолей иогого препарата асепур-К и йодтриэтиленгликоля при колибактериозе птиц.

Экономический ущерб при колибактериоьи складывается в основном из падежа,недополучения привеса и шбракозкя птацы.

В качестве исходных данных для экономических расчетов были

Таблица 3

Эффективность обеззараживания воздуха птичника ( в присутствии птлц ) аэрозолями препарата асепур-К ( доза препарата 0,5 мл/м3 ).

Время отбора ! Количество микроорганизмов в воздухе помещзний.тыс.м.т./м3

проб воздуха !--------

после рас- , Опытный птичник ! Контрольный птичник

пыле ни я пре- ■---------—.....—~---

парата { Общее к-во ! Кишеччыа .'Стафилококки! Общее к-во ! Кишечные ¡Стафилококки'

(в минут ) ! микробов ! палочки ! ! микробов ! палочки !

20 30 0 14 94 37 60

30 34 0 16 89 35 56

40 36 0 18 85 33

50 48 0 28 82 31 49

50 54 0 35 79 29 47

Примечание: " 0 " - нет роста колоний кишечной палочки.

Средние данные по 3-5 бактериологическим исследованиям.

приняты результаты комиссионных испытаний эффективности применения аэрозолей йодгриэтиленгликоля и асепура-К с целью неспецифической профилактики ко ли бактериоза цыплят-бройлеров.

Результаты наших исследовании показали,что применение аэроволей йодгриэтиленгликоля с целью неспецифической профилактики колибактериоза позволяет предотвратить экономический ущерб в размере 20 рублей (-а по асепуру - 30 руб. ) в расчете на каждые 1000 голов птицы ( по ценам 1990 года ).

Таким образом,предлагаемый нами новый препарат для аэрозольного применения асепур-К как по биологическим,так и экономическим показателям может успешно заменить дефицитный йодсодержащий препарат йодгриэтнленгликоль в борьбе с колибактериозом птиц.

Раннее применение аэрозолей санирувдих ( йодтриэтиленгликоль или асепур-К ) препаратов - со второго дня после посадки цыплят в птичники и последующая аэрозольная обработка воздуха помещения этими препаратами по предлагаемой нами режим-схеме позволяют корректировать степень (интенсивность)' контаминации окружающей среды и организма птиц бактериями группы кишечной палочки и тем самым профилак'тировать кслибактериоз птиц.

ВЫВОДЫ

I.Впервые проведены комплексные исследования к он таи наци и объектов окружающей среды и возрастной колонизации дыхательного тракта и кишечника мик по организмами у здоровых цыплят-бройлеров при промышленном выращивании.

В первые две суток микрофлора указан -их локусов не стабильш,

К JO*суткам из органов дыхания коккогая микрофлора (кокки, стафилококки) выделена в 62-75? проб(от количества исследованных); из пищеь рительного тракта - стрептококки,phi- рококки.лактобацил-

- 25 -

лы в 75-92$ проб; Е.coli.обнаружена в 100$ проб.

К 30 я 50-я суточному возрасту цыплят значительно возросла колонизация отдельных локусов микробами группы кишечной палочки, лактобациллами .клостридиями,бифидобактериями,грибам! рода кандида, протеем и др.; тонкий и толстый отделы кишечника интенсивно колонизированы анаэробными микроорганизмами.

Микрофлора дыхательного и пищеварительного трактов у цыплят-бройлеров, выделенная на 10, 30 и 50 сутки выращивания коррелирует с микрофлорой,выделен'ой в этот период с объектов среды их обитания.

2.При естественном течении колибактериоза в пробах йз дыха-, тельного и пищеварительного трактов птицы в 100$ случаев выделяются бактерия группы кишечной палочки; из тонкого и толстого отделов кишечника - энтерококки,грибы рода кандида,протей; клостридпи, . бифидобактерии выделены из кишечника лишь в 2-3$ от общего числа исследованных проб; концентрация анаэробов в кишечном тракте снижена ( по сравнению со здоровой птицей ).

3.Интенсивность колонизации дыхательного и пищеварительного трактов цыплят-бройлеров эшерихиямп повышается с увеличением возраста цыплят;в неблагополучных птичниках критический уровень колонизации дыхательного и пищеварительного трактов бактериями кишечной палочки приходится к 25-30 суткам,в этот период зарегистрированы клинические признаки колибактериоза среди цыплят.

4.При аэрогенном заражении энтеропатогекными штатами Е. coli, цыплят и E3poc.:-jii птицы бактерии обнаруживаются практически во всех органах и тканях;взрослая птица переболевает,а молодняк погибает от колибактериоза.

5.Дезинфекция воздуха птичника в присутствии птиш аэрозолями

йодтриэтиленгликоля при дозе 1,1 мл/м3 через 10 минут обеспечивает 100/Мгое уничтожение кишечной палочки ;общая бактериальная обсемекенность воздуха снижается на 36-66$.

6.Аэрозоли асепура-К в дозе 0,5 мл/м3 обеспечивают 100#-ное уничтожение в воздухе кишечной палочки через 10 минут,а золотистого стафилококка - через 40 мийут.

7.Аэрозоли асепура-К и йодтриэтиленгликоля при дезинфекции воздуха помещения в присутствии птицы одновременно санируют верхний отдел дыхательного тракта пт.чцы ( но кишечной палочке ).

в.Наибслее эффективным препаратом из числа испытанных композиций на основе четвертичных аммониевых оснований в форме аэрозолой при дезинфекции воздуха оказался 5$-ый водный раствор четвертичной соли ашс:;ия на триэтиленгликоле.

9.Аэрозоли 5%-го водного раствора четвертичной соли аммония на триэтиленгликоле оказывают Ю0$-ый дезинфицирующий эффект в отношении к кишачной палочке {снижают количество золотистого стафилококка в воздухе через 10 минут на 76,3$,через 20 - 84,7$,через 30 - 89,3$,через 40 - 90,2%,через 50 - 93,2$,через 60 минут 94,3$ по сравнению с контролем.

10 .С целью профилактики коли бактериоза птицы предложены режимы и технология применения препаратов йодтриэтиленгликоля и асепура-К в форме аэрозоля.

11 .В хозяйствах неблагополучных по колибактериозу ранняя дезинфекция воздуха птичников ( со 2-го дня после посадки цыплят) аэрозолями препаратов йодтриэтиленгликоля или асепура-К позволяет своевременно корректировать интенсивность контаминации организма цыплят и окружающей среды микробами из групгы кишечной палсчки и тем самим профклактировать колвбактериоз.

- 27 -

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПШЛСЖЕШЯ

Г.На основании результатов проведенных исследований разработаны режимы я технология аэрозольной дезинфекции воздуха птицеводческих помещений и одновременной санации дыхательного тракта птиц с целью профилактики колибактериоза.

2.Разработано дополнение к "Наставлению по применению аэрозолей йодтриэтиленгликоля при инфекционном ларинготрахеите и коли-бактериозе птиц",которые обсуждены и одобрены Ученым советом ВШИВС ( 12 декабря 198У г. ) .Дополнения включают режимыи технологию раннего применения аэрозолей йодтриэтиленгликоля и асепура-К

с целью коррекции степени контаминации организма цыплят и окружающей среда бактериями из грушн кишечной палочки и профилактики колибактериоза.

3.Разработанные нами режимы и технология применения аэрозолей йодтриэтиленгликоля и асепура-К апробированы и внедрены на Истро-Сенежской и Петелинской птицефабриках Московской области.

СПИСОК ОПУЫИКОЕАНШХ РАБОТ ГО ТИПЕ ДИССЕРТАЦИИ

1.Умитжанов М, Динамика изменения микрофлоры зева и кишечника кур обработанных аэрозолями йодтриэтиленгликоля // Труды ЕНИИА -Москва, 1988,часть I, С.83-84.

2.Умитжанов М.,Шендеров Б.А. Некоторые показатели состава микрофлоры верхних дыхательных путей и кишечника здоровых кур //

:-•.. Труда ВНИИА - Москва, 1988 .часть 1, С. 85-86.

3.Умитжанов М. Возрастная динамика микрофлоры дыхательного и пищеварительного трактов у цыплят-бройлеров при промышленном выращивании // Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана.-Алма-Ата, 1991,Ш, С.66-68.

4.Умитжанов М. Эффективность аэрозолей йодтриэтиленгликоля

- ж -

при ксшибактериозе птиц // Сб. научн. трудов молодых ученых.-Мос-ква,1992, выпуск 1..С.70-79.

5.УКИТЖРЛОВ М. Экология микроорганизмов дыхательного и пищеварительного трактов у цыплят-бройлеров // Сб. научн. трудов молодых ученых. - Москва, 1992,выпуск 2.,С.104-108.

6.Умктаансв М. Эффективность режима применения аэрозолей йод-триэтилеигликоля с целью не специфической профилактики колибак-териоза у цыпллт-бройлерэв // Труда Каз.НИВИ - Алма-Ате ,1992 ( в печати ).

Москва, НШВСГЭ, 1993 г. Зак й£/^гТир. 80 экз.