Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.01) на тему:Мембранное пищеварение углеводов у свиней при нитратно-нитритной интоксикации

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ СМ СССР ПО ПРОДОВОЛЬСТВИЮ И ЗАКУПКАМ

ЛЕНИНГРАДСКИЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ

ма правах рукописи

СТАРЧЕНКОВ СЕРГЕЙ ВАСИЛЬЕВИЧ

удк 591.133 13/145.2.636.4

МЕМБРАННОЕ ПИЩЕВАРЕНИЕ УГЛЕВОДОВ У СВИНЕЙ ПРИ НИТРАТНО - НИТРИТНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ (ЭТИОЛОГИЯ И ПАТОГЕНЕЗ)

16.00.01 — диагностика и терапия животных

автореферат диссертации на соискание ученоп степени кандидата ветеринарных наук

ЛЕНИНГРАД

1990

Робота вшюлнпня на кафедре внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных Ленинградского ветеринарного института и ъ лаборатории физиологии питания Института физиологии им. И.П.Ппгловн АН СССР,

Научные руководители: доктор ветеринарных наук, профессор Щербаков Г.Г., доктор медицинских наук, профессор Уголев A.M.

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный работник вкешей школы ЕССР Конопелько П.Я., доктор биологических наук Оз'олс А. Я.

Ведущая организация - Казанский ордена Ленина государственный ветеринарный институт им, Н.Э. Баумана,

Защита диссертации состоится "JU я 13 часов на заседании Специализированного совета Д 120,20,01. при Ленинградском гетеринарном институте (1%0СА, г, Ленинград, Московский проспект, II?),

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке ленинградского ветеринарного института.

Автореферат разослан

"¿О" НОлЗфУ 1990г.

Учёный секретарь Oneциализ прованного совета, до цент

Никитина И.В.

ОЕЦАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблем». В настоящее время в Советском Союзе и го всём мир«? неуклонно растёт производство и использование з сельском хозяйство минеральных удобрений. Их применение признано наиболее эффективным средством погашения плодородия почвы и урожайности сельскохозяйственных культур. Показано, что азотные удобрения в нитратной форме являйтся быстродействующим источником азота для растений. Установлено также, что коэффициент использования растелиями азота сравнительно невысок и не превышает 50$, что способствует накоплению неусвоевиегося нитрата в почве и воде (Кузина К.И., и др., 1955).

Известно, что нитратно-нитритная интоксикация сопровождается нарушением функций многих органов'и систем.и прежде всего -пищеварительной. Особый интерес в этом плане представляют расстройства мембранного пищеварения, осуществляющего промежуточные и заключительные стадии гидролиза пищеЕых веществ и интегрирующего процесса пищеварения и всасывания. Считается, что за счёт него расщепляется до 00$ связей пищевых молекул. Показано также, что в функциональном плане (в основном это ферментатив-но - транспортные аспекты) и структурном отношении (преимущественно состояние мембраны энтероцитов) мембранный гидролиз и транспорт являются высокочувствительными организациями клеточ-но - молекулярного уровня к различного рода неблагоприятным алиментарным факторам (Уголев A.M., 1963, 1967, IS72, I9C5, IS87; Тимофеева U.M., 1977; Иеэуитова H.H., 1979; Куиак Р.И., I960, 1983; Озолс А.Я., 1982, 1984; Гербаков Г.Г., 1984; Мембранный гидролиз...., 1986; Авас А., 1990; Ложкина Г-Г., 1990 и др.).

У свиней отдельные стороны этого типа пищеварения исследовались лишь в норме и при некоторых формах патологии (Поливода Д.М., 197«; Галочкин Б.А., 1979; Озолс А.Я., 1961, 1984; Данилевская Н.В., 1985, 1987; Алтухов И.М., I9Ö9; Ложкина Г.Г., 1990; "xW^W/ Г^бО. 1561 и др.).

Исследований состояния мембранного пищезарения углеводов при хроническая (субклинической) форме нитратко-нитритной интоксикации у срияеЯ в отечественной и пирогой практике не,проводилось.

Цель и задачи исследования. Целью работы являлось изучение мембранного гидролиза и всасаьания углеводов у молодняка свиной

при хронической (субклинической) '5»рме нитратно-нитритной интоксикации. Для еб выполнения нами были поставлены следующие задачи:

1.' Изучить мембранное пищеварение углеводов в различных органах кслудочпо-китечного тракта у здоровых свиней и при хронической кормовой нитратно-нитритной интоксикации;

2. Изучить механизм всасывания глюкозы в тонкой кишке при перфузии оё солевом раствором нитрата натрия;

3. Изучить механизм действия (патогенез) нитратно-нитритно-го токсикозя на всасывания глюкозы в тонкой кишке;

Изучить способность восстановления всасывания глюкозы в тонкой кивке после прекращения воздействия на неё солевым раствором нитрата натрия;

5, Пропости клинические, гематологические, патолого-анатоми-ческие, гистологические и электронномикроскопические исследования у здоровых свиней и при нитратно-нитритной интоксикации.

Научная иовизна. Впервые на клеточно-молекулярном уровне установлено, что у свиней при хронической (субклинической) форме нитратно-нитритной интоксикации происходит нарушение механизма мембранного пищеварения углеводов в различных органах же-лудочно - кишечного тракта.

Охарактеризована топография распределения активностей ферментов, осуществляющих мембранное пищеварение углеводов вдоль желудочно-кишечного тракта у здоровых овиней и при нитратно-нитритном токсикозе. Установлена функциональная неравноценность разных отделов пищеварительного тракта по исследованным ферментам и показано наличие в нем прокснмо-ди'отального (кранио-кау-' дального) градиента активности указанных энзимов,

В сериях хронических экспериментов при длительном (в течение длитечьных сроков,от двух до четырех недель) ежедневном воздействии солевого раствора нитрата натрия на участок тонкой кишки свиней изучили механизм его действия (патогенез) на всасывание глскозы. Исследовали также возможность восстановления всасывающей способности тонкой кишки после прекращения влияния на неё нитратны» раствором.

Креме того, при проведение хронических експзриментог на свиньлх по изучению влияния нитрата нп всасывание глшклзы с тонкой кипке использовали оригичальныз хирургичесил, перфу- • зионные и современные биохимические методы.

Практическая ценность работы. Клинические, гематологические, патолого-анатомические, гистологические и электронномикроокопи-ческие исследования свиней, а также результаты биохимического анализа гомогенатов слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта с целью определения величины активности ферментов, расщепляющих в нем углеводы, изучение всасываютей способности тонкой кишки у здоровых животных и при нитрагао-нитритном токсикозе могут быть использованы в научно-исследовательской работе при изучении мембранного пищеварения не только у свиней, но и у других видов сельскохозяйственных животных, для лабораторной и клинической диагностики нитратного отравления. Кроме того, в лекциях и лабораторно-практических занятиях для студентов на кафедрах физиологии и патфизиологии, клинической диагностики, внутренних незаразных болезней, кормлении, фармакологии и токсикологии.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы докладывались и обсуждались на:

- Ленинградской городской конференции молодых учёных и специалистов (Ленинград, 1988г);

- научных конференциях Ленинградского ветеринарного института в 1988, 1989 и 1990 годах;

- УИ-ом билатеральном симпозиуме СССР - ЧССР - "Современные аспекты теоретической и прикладной гастроэнтерологии" (Ужгород, 1989г);

- 8-й конференции молодых учёных-биологов (Рига, 1989г);

- ХУ-й Всесоюзной конференции "Физиология пищеварения и всасывания" (Краснодар, 1990г).

Публикация результатов исследования. Основные материалы диссертации опубликованы в б-и статьях.

Структура и объём работы. Диссертация изложена на29° страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора лите-ратеры, собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Она иллюстрирована 15 таблицами и 38 рисунками.

Список литературы включает 608 источников, из них 365 на иностранных языках.

Основный положения, выносимые на защиту.

I. У свиней при хронической (субклиническоя) форме нитратно-

нитритпой интоксикации нарушается механизм всссывания глюкозы з тонкой кичке.

2. Процесс восстановления всасывающей способности тонкой киккк у свиней после прекращения воздействия на её слизистую оболочку нитратом натрия.

3. У свиней при хронической (субклинической) нитратно-нит-ритной интоксикации происходит нарушение мембранного пищеварения углеводов в различных органах желудочно-кишечного тракта.

В организма животных, в том числе и в органах пищеварения, происходят адаптационно-компенсаторные перестройки.

5. При нитратно-нитритном токсикозе нарусается структура, слизистой оболочки тонкой кишки и ультраструктура энтероцитов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнялась в течение 1987 - 50 гг. на кафедре внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных Ленинградского ветеринарного института и б лаборатории физиологии питания Института физиологии им. И.П.Павлова АН СССР.

Опыты проводились на 35 поросятах крупной белой породы 3 -4-х месячного возраста из совхоза "Федоровское" Тосненского района Ленинградской области. Формирование опытных групп осуществлялось по принципу аналогов.

квотные содержались в стационаре кафедры при свободном доступе их к корму и воде. Суточный рацион был сбалансирован по основным кормовым компонентам.

В сериях острых опытов поросята были разделены на 5 групп по пять животных в каждой.

1-иеотные 1-й группы являлись контрольными. Свиньи 2-й группы получали внутрь с кормом нитрат натрия в дозе 320 мг (по нитрат - йону) на голову в сутки или 12.6 мг нитрат-йона на I кг л ивой массы.3-я группа - это животные, которым задавали внутрь с кормом нитрат натрия в дозе 600 мг (по нитрат - йону) на голову в сутки или 26.2 мг нитрвт-йона ка I кг живого веса. Поросята k-ñ группы получали внутрь с кормом нитрат натрия в дозе 2.*1г (по нитрат-йону) на голову в сутки или III.I мг нитрат-йона на I кг хпвой пассы тела. Свиньям 5-й группы задавали внутрь с кормом нктрат натрия в дозе 4.8г (по нктргт-йону) на голову в сутки или 221 !-т нитрат-йона ка I кг »шого веса.

!Ь. 26-й день ^т начала ск^рг'ливанкл поросятам нитрата в результат« заболевания бронхопневмонией бы ли выбракованы до>а ки-

вотных (одно из 1-й группы, а другое из 2-й).

Животные подвергались клиническому, а полученный после их убоя экспериментальный материал - пэтолого-анатомическоглу, гистологическому и олектронномикроскопическому исследованиям общепринятыми методами.

В соответствии с поставленными задачами в исследованиях цспОлъзптлпсь методика острых опитов и получение изолированных от организма ферментных препаратов (гомогенатов) слизистой оболочки из разных органов желудочно-кишечного трпкта.

Критериями исследования служило определение активности ферментов желудка, тонкой и толстой кишок, осуществляющих заключительные этапы гидролиза углегодов - систекн мальтаз (К§ 3.2.1.?0.), которое проподилось при помощи глвкозооксидазного метода ( /}., XS64) и еахараян (КФ 3.2.1.4В), кото-

рая определялась модифицированным методом Нельсона (Оголев A.M., Иезуитова H.H., 1969). Ферментативная активность препаратов слизистой оболочки хелудка и кишечника выражалась в молях образующихся продуктов гидролиза соответствующих субстратов за I мин. инкубации в рассчёте на I г влажной массы ткани, что принималось за условную единицу (у.е.).

В .хронических экспериментах, также как и в острых опытах, использовалось 10 поросят 3 - 4-х месячного возраста из того же хозяйства.

После проведения на них хирургических операций с целью изоляции участка тонкой кишки и вывода его концов с помощью фистул наружу (длинн участка кишки' 9 см) по методу Тири - Вел-ла и последующего выздоравления, осуществляли хронические пер-фузиош'ые* эксперименты в течение двух и болеэ недель по изучению ежедневного влияния на величину ckoj зсти всасывания глюкозы в указанном участке кишки растворами Рингера и нитрата чатрия (Ю г/л).

Для более детального изучения механизма общего и местного (локального) действия нитратного токсина на всасывание глюкозы з тонкой кишке провели две серии модельных хронических экспериментов на крысах-самцах Зистар, как на наиболее изученных, доступных и дешёвых объектах. В каждой такой серии использовалось по б крыс.

С целью определения скорости всасывания глюкозы, получен-ниР в результате перфузии изолированного участка тонкой кишки

растворами глюкозы (27,5 мМ), Рингера и нитрата натрия пер-(^уэат подвергался биохимическому анализу при помощи глвкозо-оксиднзного метода ( ^aktc^'/lS't,^., 1964). В качестве субстрата использовалась глюкоза. Величина скорости всасывания глюкозы выражалась в микромолях всосавшегося субстрата за I -мин. перфузии изолированной петли тонкой кишки (мкмоль/мин).

Экспериментальные данные, полученные как при проведении острых, так и хронических опытов, подвергались обработке методой иарианиониоП статистики с использованием критерия Стью-дснта,

РЕЗУЛЬТАТА СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Известно (Уголрв А.М., 1963, 1967, 1972, 1985, 1987; Тимофеева Н.М., 1977; Иезуитова H.H., 1979; Кушак Р.И., 1983; Озолс А.Я,, 1984.; Щербаков Г.Г., 1984 и др.), что уровни активности ферментов, осуществляющих мембранный гидролиз и транспорт углеводов в желудочно-кишечном тракте, особенно в тонкой кишке, определяется'прежде всего скоростью синтеза энзимов энт'роцитами. Показано также, что при желудочно-кишечной патологии эти процессы осуществляются иначе, чем в норме.

Результаты исследований влияния нитратно-питритного токсикоз за на скорость всасывания глюкозы в тонкой кигако свиней представлены в таблицах 2-7 (по крысам - в табл. 8 - 12), а величина мальтазной (сахаразной)йктивности-в слизистой оболочке желудочно-кишечного тракта при скармливании свиньям малых и средних доз нитрата - в таблицах 13 и 14 диссертации.

I. Всасывание глюкозы в тонкой кипке у здоровых свиней и при воздействии на неб нитратом

С целью изучения всасывания глюкоза в тонкой кишке у здоровых свиней, а также при влиянии на неё растворами Рингера и нитрата натрия проведены 2-е серии хронических перфузионных экспериментов.

'Условия эксперимента. В первые б дней опыты проводились по следующей схеме: первые 60 мин. изолированный участок тонкой кишки свиней длиною 9 см перфузировали соленым раствором глюкозы (27.5 мМ), затем в течение 30-и мин. раствором Рингера и вновь повторяли 60 мин. перфузию указанного участка кишки исходным раствором субстрата. Начиная с 7-го опыта при 30-и мин.

перфузии изолированного участка тонкой кишки раствор Рингера заменяли на солевой раствор нитрата натрия (10 г/л) (1-я серия хронических опптов). 2-ю серию хронических экспериментов проводили по той же схеме, что и 1-я, но, начиная с 14-го опыта, бмссто 30-и мин. воздействия нитратным раствором на участок тонкой кишки вличли 30 мин. раствором Рингера до последнего 19-го дня экспериментов.

Результаты экспериментов, полученные во 2-й серии хронических опытов были аналогичны таковым в 1-Я серии, и приведены в таблице б (2, 3, 4, .5, б и 7) диссертации, на рис. 2 - 15.

Из них видно, что у клинически здоровых свиней в перзие б опытов величина скорости всасывания глюкозы в изолированном участке тонкой кишки (в первые 60 мин. перфузии его раствором глккозы) не изменялась, оставаясь на одном уровне от 100,% (1-я опыт) до 110.5$ (максимальная величина на 5-Я день экспериментов) (р - 0.05). Эти даннпе били аналогичны таковпн в 1-й серии хронических экспериментов (табл.3), и в дальнейшем служили в качестве контрольного уровня.

Поскольку сразу после 60-и м'лл. перфузии изолированной петли тонкой кишки fffi-тгором глпкозы на неё 30 пин. воздействовали раствором Рингера (только пергые б опытов), то в последующие вторке 60 мин. перфузии определяли изменение величины скорости всасывания глюкозы в указанном участке кишки под рличнием физиологического раствора. Установили, что раствор Рингера не оказывал существенного влияния на скорость всасывания глюкозы в исследуемом участке кишки во вторые 60 мин. его перфузии исходным раствором субстрата. Она возрастала всего на (в 1-й серии хронических экспериментов) - % (во 2-й серии хронических экспериментов) (р s 0.05). Полученные данные на клинически здоровых животных при дальнейшей исследовательской работе с ними использовались в качестве контрольных.

Начиная о 7-го дня опытов, ежедневно по 30 мин. (вместо раствора Рингера) воздействовали на изолированней участок тонкой кишки солевкм раствором нитрата натрия. Установили, что величина скорости всасывания глюкозн в исследуемой петле кими прк постоянных 30-и мин. воздействиях на неё нитратным раствором, начиняя с £-го - 10-го опытов, регулярно снижалась, с 99% (величина скорости всасывания глюкозы в пер,вне 60 мин. перфузии, до 30-и мин. влияния на участок тонкой килки раствором нитрата)-63* (скорость всасывания глюкозы во вторые 60 ми. перфузии,

после 30-и мин. воздействия на участок кишки нитратным раствором) (9-й день экспериментов) до 57.8$ (скорость всасывания глюкозы в первые 60 кин. перфузии, 12-й опыт) (р -0.05) - 48.9$ (скорость всасывания глюкозы во вторые 60 мин. перфузии, П-й опыт) (р *0,05), то есть в 2 раза ниже по сравнению с контрольным уровнем. Анологнчиые изменения наблюдали и в 1-й серии хронических экспериментов на свиньях.

Затем, несмотря на ежедневно продолжавшиеся ЭО-к мин. влияния нитратного раствора на изолированный участок тонкой кишки, величина скорости всасывания глюкозы не изменялась, оставаясь на одном уровне от 54 (1^-й опит) до 57.7% (12-й опыт) в первые 60 мин. перфузии (р - 0.05) и от 45.3 (13-й опыт) до 49$ (11-й опыт) во вторые 60 мин. перфузии (р ^0.05), по сравнению с контрольным уровнем. В эти дни, как в организме животных, так и в учаотке тонкой кишки к указанному нитратному токсину наступало привыкание (адаптация). Сходные изменения наблюдали при проведении 1-й серии хронических экспериментов на свиньях.

В дальнейшем, на 14-й день хронических опытов, прекращали 30-и мин. воздействия на изолированную петлю тонкой кишки раствором нитрата натрия, заменив его на раствор Рингера (схема перфузионных опытов с 14-го по 19-й заключительный эксперимонт была такой же как в первые 6 дней хронических экспериментов). Установили, что, начиная с 15-го опыта, величина скорости всасывания глюкозы постепенно возрастала как в первые 60 мин. перфузии (до 30-и мин. воздействия на участок тонкой кишки раствором Рингера), так и во вторые 60 мин. перфузии его исходным раствором глюкрзы (после 30-и мин. воздействия на участок кишки физиологическим раствором), достигая максимального уровня в 73 (во вторые 60 мин. перфузии, 19-й опыт) - 76% (первые 60 мин. перфузии, 19-й заключительный опыт) по сравнению с контрольным (р * 0.05).

Следовательно, прекращение воздействия нитратного раствора и замена его на раствор Рингера способствует значительному восстановлению резорбции глюкозы в пораженной тонкой кишке, но полного восстановления не происходит.

Таким образом, при длительном воздействии (ь течении 2-х и более недель), хотя и в слабой концентрации, нитрата на тонкую кивку наступает значительное нарушение (ингибирование), в 2 и более раза (результаты исследований в хронических модельных экс' периментах на крысах) по сравнению с клинически здоровыми жи-

вотными, резорбции глюкозы в пораженном органе. На определенном этапе нитратного токсикоза (в наших экспериментах это 5 -6-е дни от начала воздействия нитратом на участок кишки) в тонкой кишке и в организме животного к токсину поступает привыкание (адоптация) и, несмотря на его дальнейшее поступления и влияние на киику, уровень всасывания глюкозы остается неизменным. Прекращение нитратного воздействия на тонкую кишку >: последующая его замена на раствор Гингера приводит к восстановлению уровня резорбции глюкозы в пораженном органе, но не полному, а на 70 - 80% от контрольного. Это указывает на значитольни*1 лечебный и антитоксический эффект от применения раствора Гингора.

Аналогичную динамику изменений во всасывании глюкозы в участке тонкой кишки при ежедневных 30-и мин. воздействиях на .её слизистую оболочку растворами Рингера и нитрата натрия (10 г/л) наблюдали в сериях модельных хронических экспериментах на крысах-самцах Виотар. В этих сериях опытов установили также, что всасывание глюкозы в тонкой юшке ингибируется как в результате локального (местного), так и при обшем действии на организм нитратного токсина.

Поскольку процесс всасывания углеводов тесно взаимосвязан о их мембранным гидролизом, в основном на апикальной поверхности энтероцитов, до в этой связи; следующей задачей наших исследований на свиньях являлось изучение механизма действия малих и средних доз нитрата (нитрата натрия) на мембранное пищеварение сахароз в желудочно-кишечном тракте, особенно в тонкой кишке поросят.

2. Мембранное пищеварение углеводов в разных отделах желудочно-кишечного . тракта у здоровых свиней и при хронической форме нитратно-нитритной интоксикации

Установлено, что у здоровых свиней при исследовании величины мальтазноя (сахаразной) активнооти в разных органах желудочно-кишечного тракта, наивысший еь уровень проявлялся в медиальном отделе тонкой кишки (в тощей кишке) и составлял (табл. 13 и 1'0 65.15 £ 1.36 мкмоль/ккк х г (или у.е.), что полностью согласуется о данными полученными рядом других исследователей (Озолс А.Я., 1984; Алтухов И.М., 1989; Ложкина Г.Г., 19г0;

, и др.). Значительно ни*е её уро-

вень был в соседних участках тонкой кишки, так в. дренадцатл-

перстной кишкэ - 30.''О 1 6.60 у.е. или в 2 раза и р подвздошной клике, - 31.64 1 0,68 у.в. или в 2 раза. Величина мальтаз-пой активности в желудке и толстой кишке у здоровых свиней весьма незначительна - 1.40 - 0.14 и 2,10 £ 0.27 у.е. соответственно.

Получонныо на здоровых поросятах данные отражают топографию распределения мальтазной (сахарозной) активности в слизистой оболочке не протяжении желудочно-кишечного тракта.

При длительном скармливании свиньям цитрата натрия (30 дней) в выше указанных дозах резко изменяется величина активности мальтазы (енхарази).

Так, в желудке и толстой кике у животных всех групп, ко-, торы:-! задавали внутрь с кормом нитрат, мальтазная активность возрастала до 2.85 £ 0.20 у.е. (3-й экспериментальная группа, р - 0.05) - 4.50 £ 0.15 у.е. (4-я экспериментальная группа) (р * 0.05) ми на 104 - 221% ъ желудке, и до 3.56 £ 0.54 у.е. (5-я экспериментальная группа, р -0.05) - 6.33 £ 0.41 у.е. (2-я подопытная группа, р ^0.05) или на 70 - 201$ в толстой кивке. То ость, активность мальтазы при хронической (субклинической) £орме нктратно-нитритной интоксикации в желудке и толстой киаке свиной возрастала в 1.5 - 3 раза по сравнению со здоровыми животными.

Одновременно с повшениём величины мальтазной активности в желудке и толстой кишке у свиней при нитратно-нитритном токсикозе происходило резкое её падение в тонкой кишке.

Так, в двенадцатиперстной кишке активность мальтазы снижалась до 22.17 £ 1.12 у.е. (5-я группа животных) - 17.70 £ 2.27 у.е.' (2-я экспериментальная группа) или на 27.5 - 42/2 (в 1.5 - 2 раза) по сравнению с контрольными животными,(р - 0.05).

В тощей кишке величина активности указанного энзима также значительно уменьшалась - до 29.08 £ 6.84 у.е, (4-я группа свиней) - 42,88 £ 1.94 у.е. (5-я экспериментальная группа) или на 34 - 48Х (в 1.5 - 2 раза) по сравнению со здоровыми животными (р £ 0.05).

В подвздошной кишке, также как и в двенадцатиперстной и тощей, регистрировали падение мальтазной активности у всех групп поросят, которым задавали внутрь с кормом нитрат натрия - до 23.56 £ 5.47 у.е. (2-я опытная группа) - 8.44 £ 1.08 у.е. (5-я экспериментальная группа) или на 25.5 - 73.3$ (в 1.5 - 4 раза) по срсвнеьиг с контрольным уровнем (р - 0.05).

Таким об^.шзом, л тонкой кивке у свиней при их нитратно-нитрлт-ном токсикозе происходит резко», падение мальтазной (сахаразной) активности во всех её отдёлах, в 1.5 - Ч раза, по сравнению с клинически здоровыми гкивотшши.

Следовательно, на фоне хронической (субклинической) нитратно-нитритной интоксикации в желудочно-кишечном тракте свиней возникают адаптационно-компенсаторные перестройки ферментативных активностей мальтаэа и сахаразы, осуществляющих заключительные стадии гидролиза Сахаров, которые характеризуются тем, что резко, в 1.5 - 4 раза, снижается величина активности указанных энзимов в проксимальном (краниальном), медиальном и дистелъном (кау-дальном) отделах тонкой кишки и значительно, в 1.5 - 3 раза, она возрастает в желудке и толстой кишке, где в норме уровень её весьма невелик.

На основании результатов,- полученных на поросятах в острых и хронических экспериментах, можно заключить, что у больных при нитратно-нитритном токсикозе животных нарушается механизм мембранного гидролиза и всасывания углеводов в тонкой киике. На определённом этапе развития отравления как в организме, так и в желудочно-кишечном тракте сгиней происходят адаптационно-кокпснса-торнне перестройки.

Полученные с помошью биохимических анализов результаты затем полностью подтвердились при проведении гистологических и элект-ронномикроскопических исследований слизистой оболочки тонкой кишки, взятой от свиней указанных о-кспсриментальных групп.

При гистологическом исследовании стенки тонкой киежп от свиней с питратно-нитритнын токсикозом установили выраженную атрофию, укорочение или деформацию ворсинок, значительную инфильтрацию собственной пластинки слизистой оболочки лейкоцитами, преимущественно лимфоидного ряда.

При электронномикроскопическом исследовании слизистой оболочки тонкой кишки больных свиней обнаружили — как микроворсин^и, так и щеточная кайма энтероцитов, которую они образуют, существенно деформированы или полностью разрушены. В результате снижения защитных свойств наблюдали в щеточной кайме и в энтероцитах большое количество различных форм микроорганизмов.

Специфических (особенных) клинических симптомов у свиней' с хронической (субклинической) формой нитратно-нитритной интоксикации не регистрировали, за исключением 5-й подопытной группы, у мвот-

них которой отмечали незначительное, на 0.5°С, понижение температуры тала, изменчивый аппетит и отставание в росте по сравнению со своими сверстниками. А при проведении хронических перфузии шшх экспериментеи с применением нитрата натрия - болезненность в области жиьотч. и беспокойство во время опыты.

Гематологические исследования, проводившиеся совместно с доцентом кафедры внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных Ленинградского ветеринарного института А.А.Ефимовым, показали наличие эритроцитопении при неизменном уровне .гемоглобина, а в лейкограмме - увеличение процента палочкоядерных и уменьшение процента сегментоядерных нейтрофилов (нейтрофилия с дегенеративным сдвигом ядра влево), В начале и в конце проведения хронических экспериментов отмечали лимфоцитоз. Установили также ускорение СОЗ.

Результаты вскрытия убитых больных нитратно-нитритным токсикозом свиней напоминали типичную картину хронической формы данной интоксикации. Причом, наиболее четкие патологоанатомические изменения наблюдали у животных 4-й и 5-й подопытных групп, которым задавали нитрат в средних дозах (2.4 и 4,8 г питрат-йона на голову в оутки). Они характеризоЕолись буровато-коричневым цветом артерипльной и венозной крови, долго не сворачивающейся на воздухе, неестественно красной окраской скелетных мншц, катар-ралышч, катеррально-геморрагическим или геморрагическим воспо-ленияки слизистой оболочки желудка, толстой и тонкой кишок и многочисленными точечными, по юочатыми и 1штии<Ч'иьи кровоизлияниями под слизистой и серозной оболочками, Со сторонн других внутренних органов видимы.^ патологических изменоний не неблюдп-ли.

3, Заклг чрцие

' Основное зрк.л>>ченио, которое сделано но основе результатов проведенных исследований состоит в том, что при хронической (субклинической) форме питратно-ннтритной интоксикации у свиней возникнет глубокие нарушения мгтнизм'а мембранного пищеварения углепо/ов, складывающиеся из расстройств ферментативного статуса кочудочно-кишечного тракта, особенно тонкой кишки, осуществляющего гидролитические и транспортные Функции и иярушепия м^мбрвнн энтероцитов, являпг.ейся структурной осногой этого типа

пищеварения. Одновременно о этим в организме свиней при нит-ратно-нитритном токсикозе возникают серьезные нарушения со стороны функционирования других органов и систем. Бажным является также то, что на определенном этапе течения данной интоксикации в организме свиней происходят адаптационно-компенсаторные перестройки.

ВЫВОДЫ

1. В острых и хронических экспериментах у здоровых свиней и при различной степени нитратно-литритной интоксикации охарактеризовано мембранное пищеварение углеводов, проведены клинические, гематологические, патологоанатомические и морфологические исследования.

2. В сериях хронических экспериментов, включая модельные опыты с ежедневной (в течение нескольких недель) перфузией изолированного участка тонкой кивки животных растворами Рингера и нитрата натрия, установили, что физиологический раствор у клинически здоровых свиней существенно не влиял на всасывание глюкозы в тонкой кишке, тогда как раствор нитрата при длительном

и ежедневном его воздействии на слизистую оболочку кишки резко, в 2 - 3 раза, понижал величину скорости всасывания глюкозы в ней.

Следовательно, при хронической форме нитратно-нитрптной интоксикации у свиней нарушается функция всасывания углеводов в тонкой кишке.

3. На определённом этапе нитратно-нитритного токсикоза слизистая оболочка тонкой кишки адаптировалась к поступавшему нитратному токсину (5 - б-е сутки). Зто характеризовалось тем, что продолжающееся поступление в исследуемый участок топкой кишки нитрата натрия не влияло на величину скорости всасывания глюкозы. Она оставалась неизменной.

4. Замена нитрата раствором Рингера сопровождалась возрастание»' резорбции глюкоза в тонкой кишке до 70 - 60;? по сравнению с контрольным уровнем.

5. При исследовании величины активности сахараз'; и маль-тазы у здоровых свиней и при хронической нитратно-нитритной интоксикации обнаружили, что она у больных животнпх была намного нкте, чем у здоровых во всех отделах тонкой к;ики возрастала в желудке и толстой киихе. •

Зто свидетельствовало о том, что при хронической нитратно-нитритной интоксикации происходит нарушение процессов синтеза энзимов пораженными энтероцитами к, как следствие отого, нарушение мембранного гидролиса углеводов в воспаленной тонкой кишке. В организме наступали адаптационно-компенсаторные перестройки, которые характеризовались тем, что возрастал гидролиз углеводов в желудке и толстой кишке, где обычно он незначителен.

6. Охарактеризована топография распределения активностей ферментов, осуществляквдх мембранное пищеварение углеводов вдоль желудочно-кишечного тракта у здоровых (3 - 4-х месячных) поросят и при нитратно-нитритнойкнтсксикации.

Установлена функциональная неравноценность разных отделов пищеварительного тракта по исследованным ферментам и показано наличие в нём проксимо-дистального (кранио-каудального) градиента активности указанных энзимов. Наивысший уровень маль-тазной- и сахаразной активностей был зарегистрирован в тощей кишке (медиальный отдел тонкой кипки).

7. Специально проведенными экспериментами продемонстрировано, что токсический эффект на всасывание глюкозы и гидролиз Сахаров в тонкой кишке свиней проявлялся как в результате местного (локального) действия нитрата на слизистую оболочку тонкой киики, так и при общем его воздействии на организм животного.

8. Проведённые оерии хронических и острых экспериментов у молодняка свиней по изучению влияния1 хронической формы нитратного отравления позволяет понять механизм действия (патогенез) нитрата на мембранное пищеварение углеводов, особенно в тонкой кишке, что является основанием для разработки эффективных методов лечения и профилактики данной патологии.

9. При гематологических исследованиях установили эритроци-топению, абсолютный лейкоцитоз, а в лейкограмме - нейтрофилив палочкоядеркого характера. В начале и в конце хронических экспериментов - лимфоцитоз.

10. Гистологические исследования стенки тонкой кишки поросят при хронической форме нитратно-нитритной интоксикации выявили выраженную атрофию и укорочение, деформацию ворсинок, значительную инфильтрацию собственной пластинки слизистой оболоч-

ки лейкоцитам, преимущественно ликф-оидного ряда. Эчектрошм-микроскопическими исследованиями установлены деформация и деструкция щёточной каймы оптероцитов, характеризующиеся разрежением и укорочением кикроворсинок или их исчезновением.

II. Результаты проведенных исследований дают основание считать, что при хронической (субклкнической) нитратно-нитратной интоксикации свиней происходят расстройство неубранного пищеварения углеводов в тонкой киике и нарушения Функционирования других,органов и систем.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Результаты клинических, гематологических, патологоагттоуи-чоских, а также исследований, касающихся определения гидролитической и всасывающей способности слизистой оболочки гелудоч-но - кишечного тракта, особенно тонкой кишки, её ультрамореологической структуры у здоровых свиней и при нитратпо-нитритной интоксикации, могут быть использоааны:

- в клинической практике для диагностики нитратмо-китрит-ного отравления;

• - для лабораторной диагностики нитратпо-китритиих токсикозов;

- для терапии тавотных при китратно-нитритных иктексикаци-

ях;

- б научно-исследовательской практике и учебном процессе на кафедрах физиологии и патфизиологии, клинической диагностики, внутренних незаразных болезней, фармакологии и токсикологии;

- для лечения свиней при отравлении их нитратами и нитритами предлогаем использовать внутрь животным раствор Рипгера, который обладает значительными лечебными и антитоксическими свойствами.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИЯ

I. Рурэкс Я.Я.. Стярченков C.B., Панкин Е.А. Влияние белковой лииЧ И некоторых фармакологических агентов на всаоивйннэ глюкозу и глицина у крыс // р< ::н.: Механизмы регуляции физиологических Функций / Тез. докл. Ленинградской городской хонф.

молодых учёных и специалистов.- Ленинград, 1988,- С. 65 - 66.

2. Агас.А., Пашкин В.А., Старченков C.B. Влияние экологических факторов на ферментативно-транспортные функции тонкой кишки млекопитающие // В кн.: Экологические вопросы рационального природопользования / Тез. докл. 8-й конференции молодых ученых-биологов.- Рига, 1989,- C.I69 ~ 170.

3. Пашкин В.А., Старченков C.B. Влияние характера кормления на всасывание аминокислот (глицина) в тонкой кишке млекопитающих. // В сб.: Профилактика незаразных болезней и терапия сельскохозяйственных животных и пушных зверей,- Ленинград, 1989.— С. 134 - 137.

4. Старченков C.B., Пашкин В.А. Влияние нитратов на активность ферментов, осуществляющих мембранное пищеварение у свиней // В сб.: Профилактика незаразных болезней и терапия сельскохозяйственных животных и пушных зверей.- Ленинград, 1989,-C.I57 - 161.

5. Щербаков Г.Г., Пашкин В,А., Старченков C.B., Авас А. Влияние нитратной интоксикации на мембранное пищеварение в тонкой кишке млекопитающих // В сб.: Современные аспекты теоретической и прикладной гастроэнтерологии: экзо-, эндоэкология

и желудочно-кишечный тракт / Тез. докл. УП билатерального симпозиума (СССР - ЧССР).- Ужгород, 1989.- С. 170.

6. Щербаков Г.Г., Пашкин В.А., Старченков C.B., Хоанг В.Н. Влиячие нитрэтно-нитритной "интоксикации на мембранное пищеварение в тонкой кишке // В кн.: Физиология пищеварения и всасывания / Тез. докл. ХУ Всесоюзной конференции.- Краснодар, 1990,-

С. 325.

Ртп.ГГО.14.II.90.3ак.604.T.IOQ,Бесплатно