Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Лечение и профилактика желудочно-кишечных и респираторных болезней телят

КАЗАХСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК

Казахский научно-исследовательский ветеринарный институт

На правах рукописи

' •■ и '■}

УДК 619:616. (33/34+2)- 07/т~ 053-2:636.2 В А С А Н Е Ц Виктор Михайлович

лечение и профилактика желудочно-кишечных и респираторных болезней телят

16.СЮ.03 - ветеринарная микрооиология, иммунология, эпизоотология и инфекционные болезни животных

Авторе ф,-е р а т

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Алматы, 1994

Тв

Работа выполнена в лабораториях по изучению болезней крупного рогатого скота и Еирусологии Казахского научно-исследовательского ветеринарного института Казахской академии сельскохозяйственных наук

Научные руководители:

доктор ветеринарных наук, старший научный сотрудник Л.А.АФАНАСЬЕВ

доктор ветеринарных наук, старший научный сотрудник

Н.Н.П131ГЩШ03

Официальные оппоненты: доктор биологических наук

Е.Е.ГОШЕВ

кандидат ветеринарных наук Ш.К.ТУРСУНКУЛОВ

Ведущая организация - Институт микробиологии и вирусологии

HAH Республики Казахстан;

Защита диссертации состоится " iS " U. LO 1994 г. в ( О часов на заседании специализированного совета Л 55.03„01 при Казахском научно-исследовательском ветеринарном институте по адресу: 480029, г.Алматы, проспект Райымбека, 223.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан " / " С/ 1994 г.

Ученый секретарь -у

специализированного совета, Mku^1^ доктор ветеринарных наук [Г Б.С?.КЕР1'З.ГАНОЗА

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТУ

Актуальность теш. Желудочно-кЕкечные в респираторные болезни крупного рогатого скота, вызываемо бактериально-вирусными инфекциями, особую остроту приобрели з Казаасгане еп кэрэ перевода отрасли на прошшленнув оснсзу.Этв болезни икро&о распространены.. а наносят значительный экономический ущерб (I.A. Афанасьев и др., 1988-1993; Н.Н.Гизитданов и др., 1987-1993), обусловленный заболеваемость» от 60 до 100, гибелью телят от 7 до 15 и потерей продуктивности до 25 процентов, а такте затратами на проведение профилактики и лечения.

Среди бактериально-вирусных болезней яивотннх наиболее часто регистрируется колибактериоз (Я.Е.Коляков и др., 1970-1986; М.А. Сидоров 1980-1988; В.Г.Зароза I983-I99I; JI.А.Афанасьев, 1990) и в ассоциации с рота-, корона,- адено,- герпес- и вирусной диареи (Г.Ф.Коромыслов и др., 1980; Н.Н.Крюков и др., 1980-1989; Е.В.Андреев и др., 1984-1987; В.Н.Сирин и др., I984-I99I; JI.B. Погуляева и др., 1986; Н.К.Осташенко и др., 1989; З.М.Апатенко, 1990-1992; С.М.Сулейменов и др., 1990; М.Н.Соколов, 1994).

За последние годы достигнуты определенные успехи в разработке методов диагностики, профилактики и лечения колибакте-

раоза, парагрлппа-3 (ПГ-3), вирусной диареи (ВД), парвовируснай

инфекции (ПВИ), инфекционного ринотрахеита (ИРТ) и пастереллеза

крупного рогатого скота.

Успешное решение проблемы желудочно-кишечных и респираторных болезней телят до трехмесячного возраста сдергивалось многообразием факторов, играющих роль в возникновении п развитии, а тагске отсутствием системного подхода к их изучению. Поиски средств и методов лечения и профилактики этих болезней заслуглвают внимания.

Некоторые исследователи (Б.П.Урбан и др., 1987; В.Г.Зароза, 1991; В.Н.Сюрин е др., 1991; Т.С.Сайдулдин, 1992) указывают на прямую связь гипо - ш агвммаглобулинемии у телят с заболеваемостью их колибактеркозом и смешанными вирусными болезнями.

Стремясь восполнить дефицит гамма-глобулинов у новоровден-ных, ряд исследователей стали применять различные сывороточные препараты из кроЕИ и молока крупного рогатого скота. При этом, их получали разными методами, в разных дозах и по различным схемам, нередко без учета их активности..

Цель и задачи исследований. Цель исследований - научно

обосновать и разработать комплекс технологических приемов и про-

тивоэпизоотических мероприятий, средств специфической профилактики к лечения сывороточными и антимикробными препаратами при

массовых болезнях органов пищеварения и дыхания инфекционной

этиологии.

В задачи исследований входило:

- изучить наличие антител (агглютининов) в сыворотке крови коров по сезонам года к ряду патогенных сорогрупн экерихий;

- разработать ускоренный и экономичный метод получения гло-булиновых препаратов из сыворотки крови клинически здоровых коров;

- Изучить активность полученных сывороточных глобулинов по отношения) к определенным патогенным сарогруппам зшершшй, испытать профилактическую и лечебную эффективность их отдельно и в сочетании с антимикробными средствами и предложить рациональную схему применения этих препаратов при колибактериозе телят;

- разработать, получить и провести испытание сухой поливалентной иммунолактосыворотки (ПИЛС) при вирусных пневмоэнтери-тах телят.

Научная новизна. В результате проведенных исследований

установлены сезонные колебания общего белка и его фракций в сыворотке крови, агглютининов а гемагглютшдаюв к патогенным эшерихлям, проведен сравнительный анализ содержания этих антител в глобулинах.

Для постановки РПГА впервые изготовлено 13 эритроцитарных диагностикумов из различных серогрутш эшерихий, дезинтегрированных ультразвуком.

Модифицирован метод получения полиглобулинов (96-процентным этиловым спиртом) из сыворотки крови крупного рогатого скота.

Изучено влияние сульфадиметоксина, фтазииа, энтеросептола, нвЕиграмона на кишечную палочку, энтерококки и молочнокислые бактерии в организма больных телят и впервые эти препараты испытаны в Казахстане при колибактэриозе телят.

Установлено, что заболеваемость пневмоэнтеритами телят возрастает по мере снижения колострального иммунитета у них и постинфекционного - у маточного поголовья. Этот феномен исполь- • зован для разработки комплексных лечебно-профилактических мероприятий с применением сывороточных препаратов при бактериально-вирусных болезнях телят в возрасте 1-90 дней, в основе которого лежит создание невосприимчивости у животных. Научная новизна работы подтверждена удостоверением на рационализаторское предложение № 215 от 13 октября 1973 г.',' Комплексный способ лечения колибактериоза телят", авторскими свидетельствами № 1208620 от I октября 1985 г. "Способ получения поливалентного антителосо-держащего биопрепарата против вирусных пневмоэнтеритов крупного рогатого скота" и № 1564774 от 15 января 1990 г. "Способ профилактики парвовируского энтерита у собак".

Практическая данность работы. Разработаны и испытаны в хозяйствах Казахстана комплексные мероприятия по профилактике и

лечению бактериально-вирусных болезней, результаты которых ьошли в рекомендации: "Профилактика и лечение колибактериоза телят" (1975); "Основные мероприятия по выращиванию телят, профилактике желудочно-кишечных и респираторных болезней для хозяйств молочного направления" (1988).

Представлена совместно с сотрудниками лаборатории вирусологии разработанная ГОД (Г/, инструкция по изготовлению, контролю и наставление по применению иымунолактосыворотки против смешанных вирусных респираторных и желудочно-кишечных болезней телят поливалентной сухой"(1988).

По результатам исследований разработаны научные подхода в решении профилактики и лечения бактериально-вирусных болезней телят, что способствует снижению летальности в 2-5 раз ж увеличению среднесуточной ыассы тела на 30-343 г .

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Закономерность изменения общего белка и его фракций в сыворотке крови коров по сезонам года, а также сезонные изменения агглютининов и геыагглютининов в указанной сыворотке;

2. Способ получения глобулина с применением ЗО-процантного этилового спирта-, из сыворотки крови;

3. Профилактическая и лечебная эффективность неспецифических иммуноглобулинов из сыворотки крови коров;

4. Схемы применения антибактериальных и их сочетаний с гло-буллновыми препаратами при лечении колибактериоза телят;

5. Способ получения и применения сухой поливалентной иммуно-лактосывороткн при смешанных вирусно-бактериальных болезнях телят.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и обсудцены на научной конференции молодых ученых КавНИВИ (1971), на Второй Всесоюзной конференции молодых ученых по ветеринарии

(1971), на конференциях ученых г. Алма-Аты (1972,, 1982, 1993) и межлаборстогном соЕе::;а;ик КазНИВЙ (1994).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 статей и по-лучано два авторских свидетельства за й 1208620 от I октября 1985 г. и я 1564774 от 15 января 1990 года.

Объем п структура диссертации, диссертация иалоиша на 221 странице машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, заключение, выводы, практические предложения, список литературы и прилокение. Работа иллкзтриро-вана 28 таблицами и 16 рисунками. Список использованной литературы включает 272 источника, в т.ч. иностранных - 66.

совствтш нсовдсадки

Материал и методы исследований. Работа выполнена в течения 1968-1971 и 1980-1993 гг. в лабораториях по изучению болезней молодняка и вирусологии при Казахском научно-исследовательском ветеринарном институте КазАСХЯ, в одном благополучном (контроль) и 8 неблагополучных по коллбактериозу и вирусным шевмоэнтеритам телят хозяйствах АлматинскоГ; области. В них препмуцествепно разводится скот алатаусской породы. Содержание животных стоПлсеоэ и стоЛлово-пастбищное. Вшотноводческие помещения типовые. Рационы сбалансированы по кормовым единицам с учетом имеющихся кормов.

Надой на фуражную короЕу в среднем составил 2500-3200 л. От 100 коров получено по 68-90 телят.

По данным районной ветеринарной лаборатории, в сыворотке крови сухоетой!ых коров за 1-1,5 месяца до отела, принадлехацпх ТСаз'.КС, содержалось каротина от 0,12 до 0,22 иг/% к резервной щелочности - от 260 до 480 мт/%.

Целудочно-кииечние и респираторные болезни отмечались в те-

чение года, поражая 50-90/5 телят в возрасте 1-90 дней. При этом отход в отдельные месяцы года достигал 10-68 процентов»

С целью установления диагноза на колибактериоз бактериологически исследовали патматериал от 19 павших, фекалии от 44 больных и 10 клинически здоровых телят (контроль) в возрасте 1-5 дней. Из патологического материала высевы делали в ШБ, на среду Эндо и культуру клеток по общепринятой методике. Для изучения патогенных свойств эпизоотических культур эшерихий (25 ткпироЕанных и 38 метилированных) использовали 297 белых мышей массой 16-18 г .

Объектом для наблюдений и лабораторных исследований служили 118 коров 4->7 лет, 98 реконвалесцентных и 10 подвергнутых гипер-иммунпзации вакциной "Бивак" бычков 6-12-тп месячного возраста, 20661 теленок 5-120 дневного возраста, 1460 новорожденных телят 1-3-х дней, 72 морокие свинки, 297 белых мышей, 196 л' сыворотки крови, 1534 л иммуколактосыворотки, в т„ч„ 1399 л подвергли распылительной супке 'о выходом . 44,4 кг сухого препарата (ГОШС).

Опытных и контрольных животных подвергали клиническому обследованию, определяли температуру, частоту пульса и дыхательных движений. Кровь от коров и телят брали из яремной вены (101500 мл) для определения титра агглютининов, гемагглктгашнов, ЕируснейтраЛизующих антител и получения глобулинови; препаратов. Методом отстоя получали сыворотку крови, а из нее готовили глобу-линовые препараты по способу Н.В.Холчева и др.(1947), при этом охлажденного спирта добавляли не 50^, а 53 до его конечной концентрации 26^ в смеси (Кон, вариант "Б") и по ускоренной методике Э.С.Ельяшкевич и др. (1969)с модифицированный наш.

Общий белок определят на рефрактометре РПЛ-1, рН - на потенциометре ЛПУ-01» Химическую чистоту препаратов, соотношение белковых фракций в сыворотке крови изучали методом электрофореза

на фильтровальной бумага (В.М.Красов,1961). При этом исследовано 12 серий глобулиновых препаратов и 266 проб крови, которую брали от 20 опытных и 10 контрольных коров в апроле, августе, октябре з январе месяца?:.

Стерильность глобулинов и ПШГС проверяли путем лесав? гх па ША, !Л1Б, среды Кктт-Тароцци и Сабуро, а безвредность каждой серил глобулинов определяли путем отбора 3 проб а подкогсюго введена? их морским свинкам и белым мышам (по 2 свнпяя s 3 мази на каж,пую пробу) в дозе 3 и 0,5 мл соответствен!». Безвредность ПМО проверяли на 16 клинически здоровых телятах Г-1,5-2,5 - месячного возраста, путем однократной аэрозольной обработки юс 5-кратной дозой (25 г/м3 камеры). Активность препаратов опродзляли по титру антител в РА,РИГА, РТГА и РН на культуре клеток НЭК и ПТ по общепринятой методике. Пробирочную агглютинацию и РПГА ставали с 600 пробами крови в разведениях от 1:50 до 1:6400 и 1:20-1:20480 соответственно с антигенами эшерихий 12 серогругш: 01,02,08,09,015,035,078, 0101,0115, 0117, 0138, 0139,0141 и с 13-ю неитированнима, но патогенными для белых мышей культурами кишечной палочки. /нтлгека-ми для РА служили 20-часовыо тест-культуры эшзрихий, выраженные на КПА, смытые физиологическим раствором хлорида натрия (5 млрд./ мл) и подвергнутые 2-чаоовому кипячению в водяной бане.

Параллельно готовили растворимый антиген для РПГА из ЗО-млрд. взвеси суточных культур вышеназванных серогрупп (В.М.БасанецДЭТЗ).

Чувствительность 40 культур эшерихий к 12 антимикробным препаратам определяли методом серийных разведений в ШБ с рН 7,2-7,4 по общепринятой методике. Микробный "пейзаж" в кишечнике 25 новорожденных телят до и в период заболевания коллбактериозом, а также после клинического выздоровления и у здоровых (в т.ч.10 гол.) изучали по методике Н.С.Королева (1971).

Профилактическую эффективность гамма-глобулина испытали на 25 1иворозденнях телятах, бета+гамма-глобулинов - на 28, в контроле оыло 26 животных (глобулиновые препараты не вводили).

Лечебную эффективность бета+гамма-глобулинов изучали на II больных колибактериозом , а в сочетании с антимикробными препаратами - на 80. Эффективность применения химиопрепаратоз отдельно и ь различных сочетаниях между собой - на 1245 животных.

Для изготовления ПИЛС использовали 7 здоровых лактирукищх коров в возрасте 3-4 лет, живой массой 300-350 кг, среднесуточным надоем молока 7-10 л и отрицательно реагирующих на бруцеллез, туберкулез, лейкоз и кровепаразитарные бслазни.

Грунд- и диателнческув гипериммункзацию проводили эталонны;,ш вирусами парагриппа-3 (ПГ-З), .штамм ПТК-45/86; инфекционного рино-трахеита ,(И?Т)0 штамм ТК-А; диареи (БД), штамм Орегон "С-24ук; с титром активности не пике 4,5-5,5 ^ ТЦД^о/мл и парвовирус (ПВИ), штамм "Дж" с титром активности 6,5^ TUE^qAus по разработанному liaiли способу (а.с„ № 1208620 от I октября 1985 г.) к по инструкции, утвержденной 1УВ Госагропрома СССР от 29 июня Ï988 г.

Титры вирусов высчитывали по методу Рида и Ыенча и выражали в ТЦДддуШ. По дсстваешш вируснейтрализумцих антител в сыворотке молока в титрах не ниже 1:128 против каждого исходного антигена, то есть после 4-5 циклов, проводили сбор молока в течеьие 10-14 дней, затем цикл гипериммунизации повторяли в той же последовательности введения антигенов. Полученное молоко сепарировали, осаждали казеин пепсином, полученную сыворотку консервировали антибиотиками, фильтровали через пластины "Ф" фильтра Сальникова, сливали в стерильные бутыли, определяли титр айтител и хранили при температуре 5-7°С. Отсутствие вирусной контаминации определяли путем трехкратного пассажирования на 3-4- суточной культуре клеток

ПЗК и перевиваемой культуре ПТ при соответствующих контролях.

Сухую иммунолактосыворотку получали методом распыления напевного препарата в аппарате "Бойко", который поступал в сушильную хамеру со скоростью 7-II л/час, под давлением 1,5-2,0 атм. В токе нагретого воздуха (130-180°С) иммунолактосызоротка выпадает в виде сухого порошка. В каждой микросерии препарата определяли внешний вид, цвет, дисперсность, влажность, растворимость, стерильность, рН, активность, безвредность и превентивные сзойства по общепринятым методам. Определение массовой доли влаги проводили по ГОСТ 24061-80. Превентивные свойства НШ1С изучали на 12 телятах двухмесячного возраста, которых три раза с интервалом 10 дней аэрозольно обработали ГШС в дозе 5 г/м3 камеры и через 6 дней после последней обработки, их и 12 контрольных животных перевели в группу, где содержались 87 телят, больных смешанны?.а вирусными пневмоэнтеритами. За ними вели наблюдение в течение 115 дней. По заболеваемости оценивали превентивные свойства препарата.

Комиссионное испытание ПШ1С проводили согласно приказа Л 6 от 20.01.86 г. Г/В Госагропрома СССР, рабочей программе, утверл--денной ЕГНКИ ветпрепаратов Госагропрома СССР от 17.08.87 г. и календарного плана, утвержденного членами комиссии 22.09.87 г.

Профилактические я лечебные свойства ШШС против смешанных

вирусных пневмоэнтеритов (ПГ-3, ИРТ, ВД, ЛВИ) изучали отдельно и

в сочетании с сывороткой против пастереллеза крупного рогатого скота в промкомплексе "Дяетыгенскяй" на 3948 бычках и в трех

совхозах-поставщиках - на 1625 телятах 5-20-45-' дневного возраста. Всего поливалентной иммунолактосывороткой аэрозольно обработали 5342 теленка в дозе 1-3-5 г/м3, в том числе с профилактической целью - 4283 (три раза с интервалом 10-15 дней) и лэчебной-1059 животных (пять раз, в первые 10 суток три раза и две после-

дующие обработки через 10-15 дней).Кроме того, с профилактической цплиз ПШ1С ев о деле подкокно в дозе ОД г/кг живой массы к аэрозольно I г/м3 с интервзлом 10-15 дней по схемам: 107 телятам в возрасте 5-10 дней 3 раза препарат вводили подкожно; 54-2 раза подкожно и 3 раза аэрсзольно и 70-ти животным в возрасте 20 дней -подкожно и 3 раза аэрозольно. Для предупреждения пастереллеза вы-ноуказанных телят (5077 гол.) дважды аэрозольно обработали специфической сывороткой крови из расчета 5-10 мл/м3. В контроле было 15060 животных в том числе: 10348 - базовый и 2777 - в;¡утрксекционный контроля, им сывороточные препараты не применяли; 1147 и 24 гол. - этим контрольным группам кнтраназально вводили вакцины "Паравак" и "Бивак" соответственно; 384 и 380 - аэрозольно сыворотку крови против пастереллеза (2 раза), бивалентную гипериммунную сыворотку крови, приготовленную нами против вирусов ПГ-З и ИРГ, и сыворотку крови реконвалесцентов соответственно (3 раза в дозе 5 мл/м8).

Затраты на лечение и профилактику учитывали по "Методике определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий, утвержденной 1УВ МСХ СССР 1969 и 1982 гг., а предупрежденный ущерб вычисляли по Л.И.Иванову (1972). При определении экономической эффективности профилактика новых способов за базовый вариант приняты показатели в контрольной группе. В качестве показателей, характеризующих экономическую эффективность, В8яты предотвращенный ущерб и экономия затрат на профилактику, Они определены по общепринятой методике. Статистическую обработку цифровых данных проводили по В.С.Асатиани (1965) к Н.А.Плохинскому (1969), достоверность разности средних показателей - по критерию Стьвдента

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ -

Согласно отчетов, иг 19 областей Республики Казахстан в 10 -

п

■зарегистрирован колибакториоз с летальностью от 30 до 41%, а в КазМПСе в отдельные периоды года - до 68£„ Болезнь отмечали в течение всего года с наибольшим поражением телят в осенне-весенний период, а в совхозах иАксай","Октябрьский":'И учхозе "Дханашэрсюй" - в зимне-весеннее время года, то есть этот период совпадает о массовыми растелами коров, перегрузкой телятников-профилакториев и ухудшением санитарного состояния их.

Вирусные пневмоэнтериты (ПГ-3, ИРТ, БД и ПЗИ) и бактериальные (пастервллез«-. сальыоявдЯйа) инфекции'отнэчаэтся в-точешо"года,, поражая 50-9СЙ телят от 7-20 до 120 дневного возраста. При. этом отход достигал 2,2-23,4$.

Сезонная динамика содор.т.зння агглютининов в_крови_коров и народившихся от них телят. Исследовали сыворотку крови от 60 стельных и 61 отелившихся животных и 16 новорожденных телят до 5-дневного возраста на наличие в ней антител к патогенным заэри-хиям. Установили: в сыворотке крови коров неблагополучного по ко-либактериозу хозяйства титр агглютининов несколько выше относительно благополучного и почти од;гааков к некоторым эперихиям по степени увеличения антител в зависимости от сезона года. За 1-1,5 мес. до отела у 19 коров агглютинины к антигенам из серогрупп 08, 078, патинированной патогенной культуры (выделенных от больных'и павшие телят в Каз'З'С) и штаммам 09 и 0119, взятым из музея, были обнаружены не у всех хшвотных. Содержание не гемагглптшганов в сыворотке крови таких животных несколько выпе к эперихиям, выделении?.' в данном хозяйстве по отношению к тгатарованным штаммам, полученным из музея ВП1К11. В период массовой заболеваемости и гибели телят от колибактериоза в КазШСе у их матерей исследовали кровь на наличие в ней агглютининов к эшерихиям, которые изолировали из внутренних органов трупов. Установили: в сыворотке крови

II коров за 15-20 дней до отела среднеарифметический титр агглютининов к этой культуре был 268, а через 7 дней после первого исследования - 209 и через 2-5 дней после отела - 127. В сыворотке крови телят, до кормления их молозивом, антитела к эпзркхиям отсутствовали, через 24 ч. после кормления агглютинины обнаружили в титре от 1:25 до 1:10и (у 2 из 10 они отсутствовали), а гемагглютишшк к серогруппам 08, 078 и 0119 - от 1:16 до 1:640. Через 48 ч„ титр этих антител был 1:20-1:160. При этом у I теленка гемагглютикинн отсутствовали, а у 2 других они были в титра 1:20-1:80. Отмечено: эти телята (3) в суточном возрасте заболели колибактериоэом. У 43? всех больных набдвдали снижение титра антител в 2 раза по отношению здоровых. Аналогичные данные получены и при вирусных лневиоэн-теритах. Дри этом, через 2-3 дня после появления клинических признаков болезни, у больных телят вируснейтралпзующие антитела к циркулируемым вирусам не обнаруживались,, а на 10 день роконзалес-ценции были 1:5, 30-й - 1:64 и 45-й - 1:128о Следует отметить, что в первые 10 дней жизни у телят колостралыше антитела протнь вируса ПГ-З были в 1,5 раза вше по сравнений с материнскими н в 2,3 раза выше - чем у новорожденных, которые не получали молозиво от своих матерей.

Псигучзние сывороточных глобулинов и их характеристика. Известно, что при тожсикоинфвкцияж комплекс бэта+гамма-глоОулннов активнее гамма-глобулина„ так как бете-глобулин - носитель антитоксических антител. Руководствуясь этим, мы по 4 серии полиглобулина (бета+гадаа) изготовили из сыворотки крова 20 коров, принадлежащих совхозу "Октябрьский"„ и от Ю - экспериментальной базы КазНИВИ (контроль,' благополучное х-во по колибактеркозу), одну серию гамма-глобулина - от 40 гол. убойного скота Алматинского

мясокомбината. Эти препараты получали по ускоренной методика, отработанной нами. Методом спиртового фракционирования белков из I л сыворотки крови получали 72-95 г осадка бзта+гамма-глобулина, затрачивали 4-6 дней на производство серии препарата, сэкономила 42д' спирта по сравнению с классическим методом Кона. Полученный полиглобулин был стерильным, безвредным и в нем содержалось 77-84/о ß+%- глобулина, 8-13% - Л -глобулина, б-9#-альбумлна.

Содержание агглютининов в бета+гамма-глобулинах, получениях из сыворотки крови 10 коров благополучного и 20 животных неблагополучного по колибактериозу телят хозяйства к 25 штаммам эшэ-рихкй, в течение года было подвержено значительным колебаниям. Наиболее высокие их титры обнаружили в зимне-весенний период (табл.1). Полученные результаты свидетельствуют об интенсивном образовании агглютининов в организме коров к большинству штаммов эшерихий, что, по нашему мнению, связано с активным и продолжительным контактом их с возбудителем болезни в условиях коровника и сезонной циркуляцией определенных серогрупп кишечной палочки.

В полученном нами и на Орловской биофабрика гамма-глобулинах гемагглютинины обнаружили к 12 эритроцитарным диагкостихумам из штаммов E.coli в титре от 1:80 до 1:20480. Более высокий титр этих антител в бета+гамма-глобулиновой фракции, по сравнению с гамма-глобулиновой связан с присутствием антитоксических 0-анти-тел в ней, а в гамма-глобулине - преимущественно к поверхностному А-антигену E.coli (Н.В.Голубева и др., i960).

В доступной литературе мы не нашли сведений об изменении содержания белковых фракций сыворотки крови коров благополучного и неблагополучного по колибактериозу хозяйств в зависимости от периода года и опткмалыгых сроках получения глобулиновых препаратов. Для выяснения этого вопроса кровь от 20 опытных и 10 копт-

Таблица I

Содержание агглютининов в сывороточном } + ^-глобулинах крупного рогатого скота

к эаерихияы

Сезоны года

Серогруппы эшерихий эталонных шташов

01

02 08

09

015 | 035 0101 01X5) 0И7| 013810139 0141) Ы

титры агглютининов

Хозяйство, благополучное по колибактериозу телят

Весна (май) 800 800 800 400 400 200 800 400 400 200 800 800 556,6

Лето (август) 400 400 400 800 400 200 800 400 200 - 200 400 375.0

Осень (октябрь) 200 200 100 400 200 100 800 400 100 - 100 50 154.0

Зима (январь) 400 800 1600 400 400 200 800 1600 1600 800 800 1600 916,6

. Хоэяйство,шблагополучное пс > колибактерлозу телят

Весна (май) 800 800 400 800 400 100 800 400 800 50 400 800 546 ,0

Лете (август) 400 400 100 -4)0 200 100 800 400 400 50 400 400 337,5

Осень (ноябрь) 800 400 200 400 400 100 800 800 800 200 200 50 427,5

Зима (декабрь) 3200 3200 400 800 1600 3200 800 1600 1600 1600 800 800 1633,0

Зима (февраль) 3200 32С0 400 800 1600 3200 800 1600 1600 1600 800 800 1633,0

Примечание» Разведение глобулиновых препаратов •• 1:50 - 1:3200; 11 - среднеарифметический титр агглютининов.

рольных корон исследовали по сезонам года. Установили, что количество общего белка и гамма-глобулина увеличено летом (август), а бета-глобулина (опытная группа) - зимой (февраль). Показатели существенной разности изменений общего белка и его фракций была достоверными с надежностью о? В0> 0,90 до В3> 0,999.

Таким образом, проведенные исследования показывают, что зпмнб-весенняй период к август месят; следует считать наиболее приемлемым для получения вета+гаьма-глобулшюв. Специфическая ко направленность в изучении образования антител к эперлхиям является необходимей при характеристике активности глобулинов в РА л РИГА.

Дечебно-профилактпческая^элективное? ь^сывопоточных глобулинов при колибактериозе телят, Профильктичзсзсуа эффективность сывороточного "гамма-глобулина изучали на 25 и бета+гамма-глобули-ны на 29 новорожденных телятах в неблагополучном по колибакторио-зу хозяйстве КазМИС по следующим схемам: препараты вводили в!1утри-мышечно через 2 ч. после рождения в дозе I мл/кг массы тела. Через?. сутки яту манипуляцию повторяли; бота+гямма-глобулшш задавали перорально в дозе 2 т/га* 4 раза с 6-часовым интервалом п последующей 1-кратной внутримышечной инъекцией его в дозе I мл/кг массы тела. По первой схеме испытали 3 серии бета+гамма-глобули-нов на 29 толятах. Контролышм (20) их не вводили. В I серию отнесены бета+гамма-глобулины, полученные в совхозе "Октябрьский" в весенне-летне-осеншй периоды; зо II - аналогичные препараты из экспериментальной базы КазНШЗИ и в III - глобулины, получегм ные в Каэ!,51Се (в глпрте) от коров. 25 телят,. которым вводили гамма-глооулин, и 15 (из 22), получавших полиглобулин (р + у) различных серий, а также все контрольные яивотныа заболели в течение порЕых 2-х суток, один - через 4 и 6 телят - через 7 дноГг. Животные, которым инъецировали осенние препараты, заболели в г.ер-

гл'о 48 ч. Болезнь у телят, получавших глобулины I серии, продолжалась 1-3 дня и протекала сравнительно легко. Глобулины III серии, полученные в неблагополучном по колибактеркозу хозяйстве и испытанные там же, обладали более выраженным профилактическим эффектом по сравнению с аналогичными препаратами других серий. По 2-й схеме глобулины II серии, полученные осенью, вводили 6 телятам. Столько же было в контроле. Все контрольные и 5 опытных животных заболели в I-2-дневном Еозрасте, а I - на 4-й день, что указывает на низкую профилактическую эффективность их. Очевидно, это связано с недостаточным содержанием в осеннее время агглютининов (I: 200) и гемагглютининов (1:320) к циркулируемым эшерихиш.

Лечебную эффективность бета+гамма-глобулиновых препаратов испытали по 2 схемам: полиглобулин вводили внутримышечно б дозе I мл/кг массы тела 4-кратно с суточным интервалом. В опыте было 5 больных колибактериозом телят. Их лечили глобулинами I серии. По степени выраженности клинических признаков, заболевание у этих животных протекало менее остро, чем у контрольных; препараты вводили внутривенно в дозе 2 мл/кг массы животного, 4-кратно с интервалом 12 ч. В этом случае у 6 тяжело больных телят выраженного лечебного эффекта не получили. Результаты изучения лечебно-профилактических свойств сывороточных'глобулинов при колибактериозе показали, что в опыте телята болели значительно легче контрольных.

Изучение лечебной эффективности глобулинов в сочетании с антимикробными препаратами при колпбактешюзе телят. От павших телят изолировали эшерихии и определяли их чувствительность к антимикробным препаратам. Установили, что левомидетин задерживал рост килечной палочки серогруппы 078 и нетипировашой культуры К-2 в концентрации 0,5 мг/мл питательной среды, энтеросептол -от 30 до 60 ыкг/мл, фурацилин'- 5 мкг/мл, стрептомицин и оксите-' '

трациклин - 100 ЕД/мл, лоляыиксин - 125 ВД/мл, тетраолеан не задерживал роста эшерихий в концентрации 112 ЕД/мл. К невиграмону 16 эпизоотических серогрулп эшерихпй, внделегашх от павншх телят из 5 областей, были чувствительны 13 в концентрации от 1,9 до 31,25 мкг/мл, а 3 - нечувствительными (125 мкг/мл). В то не время, рост культур эиерихиЯ, изолированных из брыжеечных лимфатических узлов одного и печени - другого теленка, подавлялся полимпксином в кощентрации 0,03-0,12 ЕД/мл, неомицином - 4,5-0,31 ЕД/глл, суль- _ фадиметоксином - 1428,5-385,12 мкг/мл к сочетанием полимзксина а сульфадшлетоксина в рав1шх соотношениях 0,03-0,12 ЕД/мл и 83,53179,5 мкг/мл питательной среды. Данные о чувствительности .осзри-хий к названным препаратам послужили основанием для изучения лечебной эффективности глобулинов в сочетании с антимикробными препаратами, которые испытали на 91, химпопренаратов отдельно и в сочетают мезду собой - на 1245 телятах, больных колибактернозом. В первом опыте полиглобулян больным телятам инъецировали внутримышечно в дозе I мл/кг массы тела два раза с суточным интервалом и перорально энтеросептол по 14-15 мг/кг три раза в сутки. Все „5 телят выздоровели через 6-8 дней лечения. Во втором опыте вышеперечисленные препарат применяли аналогично первому только к ним добавили левомицетин, который задавали перорально первый раз в дезе 0,5 г на животное, в последующие дачи -- по 0,25 г через каждые 6 ч. Из 29 телят выздоровело 28 (96,4$). В контроле из 35, ;;ечо-ных энтеросептолом, 31 животное выздоровело (79,5/5) п 8 поло (20,5). Таким образом , лечение колибактериеза телят энтеросептолом, ле-вошэдетином в сочетании с яолиглобулином, эффективнее на 13,9/5, чем лечение без глобулина. В 3 опыте 7 тяжело больным лжвотншл применяли описанный во втором опыте набор препаратов. Однако пели-глобулин был получен от коров из этого жо хозяйства. Ттггр £,ггл:о-

■тининов в нем к циркулируемой серогруппе 078 на ферме был 1:1600 и гемагглютининов - 1:1280. Выздоровление в этом случае наступало в течение 2-6 дней. Данные 9 других оштов.(леч.1285 гол.) по применению различных лекарственных средств показывают, что наибольший эффект 94,6-100$ получен от применения химиопрепаратов и ш: комбинаций с бета+гамма-глобулинами, тогда как лечение без них значительно уступает по эффективности (леч„ эффектив. энтеросептола была 70$, сульфадиметоксина - 90$, фтазина - 91,7$). Следует ¿тме-тпть, что микробный "пейзаж" у 10 больных до лечения характеризо-зался наличием в I г фекалий, в среднем 17088-10 килечных палочек,

с К

1056-10 - молочнокислых и 1378-1С - энтерококков. Соотношение этих групп бактерий у опытных животных до лечения (полиглобулином в комплексе с фтазином, энтеросептолом, сульфадиметоксином и поли-миксином) выражалось, соответственно, как 1:0,06:0,08. Через 2 дня после прекращения диареи количество зшерихий сократилось в 14 с энтерококков - в 3 раза, а молочнокислых бактерий увеличилось в 5 раз. В другом опыте, через 24 ч. после дачи невиграмона количество эшерихий уменьшилось в II раз, а молочнокислых бактерий

увеличилось соответственно в 21 раз. После клинического выздоровления количество кишечных палочек уменьшилось в 39 раз, а молочнокислых бактерий увеличилось почти в 30 раз. При этом лечебную помощь больным оказывали в самом начале появления первых признаков болезни. Из результатов проведенных опытов следует, что экономический эффект от применения сульфадиметоксина, фтазина, энтеросептола, полиыиксина отдельно и в сочетании с бета+ гамма-глобулином при лечении колпбактериоза составил 8884 руб. Затраты на лечение I теленка не превышали 2,4 руб. (в ценах до 1990 года), эффективность терапии - 98,6$.

Получение и применение ШШС при смешанных виртсно-бактепислу-ных болознях телят. Гипаряммуназадаю 7 лактирующих коров проводили вирусами ИГ-3,ИРТ,ВД и ПВИ по способу, описанному в автор, свидетельстве )'! 1208620 за 1985 г. При этом титр антител против использованных вирусов в сыворотке молока составил 1:64-1:128,'который держался на этом уровне в течение 12-14 дней. Всего получено 1534 л нативной сыворотки, из нее 1399 л подвергли распылительной суп'ке по разработанной нами технологии и получили 44,4 кг сухого препарата гли 31,73 г из I л. Это мелкодисперсный стерильный порошок, серовато-желтоватого цвета, не кантамилирогал вирусами, с остаточной влажностью 5-7%, рН - 5,4-7,0. Препарат был безвредным и ооладал, превентивными свойствами. При этом в течение 10-115 дневного наб-лвдения все контрольные телята (12) заболели, а в опыте (из 12) -I {8%},. В хозяйствах, где проводились эксперименты, смешанными ви-рус;гшя {ПГ-З.ИРТ,ВД и ПВИ) и бактериальными (пастереллез, сальмо-неляез) инфекциями было поражено от 50 до 90$ животных, падеж составил 2,2-14,255 (в промкомплексе) я 4,1-23,4/2 (в совхозах-поставщиках) о В 1987 г. от названных болезней промкомглексу напп,~ сен ущерб в сууме 250 тыс, руб„Профилактические (4514 гол.) и де-чбОгыо (1059) свойства 1БИС ъ той числа изучали з промкомплексе "Дяотыгансхяй" на 3948 бычках 1-1,5 месячного возраста и в 3-х совхозах-поставщиках - на 1625 животных в возрасте 5-45 дней. При этом, аэрозолъно обработано 5342 теленка 1-1,5 мрояцев в дозе 1-5 г/м3 (в ч.ч. I г/м3 - 4502 гол., 3 - 645 и 5 - 195 гол.), подкожно— .161 животное в возрасте 5-10 дней из расчзта 0,1 г/хг массы тела и подкожно ж 3 раза аэрозольно - 70 гол. а возрасте 20 дней (0,1 г.£г а I г/и3). Дяя профилактики пастереллеза 5077, вышеназванны}- ■ телят, 2 раза обработали специфической сывороткой крови. 3 контроле било 15060 телят, игл ПИЛО не применяли. Установлено, что после

Рис. 2 Вируснейтрализуодио и гсмагглютинирутацие антитела против вируса ПГ-З в сыворотке крови коров и народившихся от них телят „ однократно обработанных 1ШС

- РН, телята обработанные ПИЛС в дозе 5 и 25 с/гР Контроль;

Рис. 3. Показатели лечеоно-профялактаческой вффоктквноста бата+гакка-гдобуланов пра колибактериозе и 1Е1ЛС пра смешанных вирусных пневыоэнтеритах у тлят

—= ^ Яачебв^нрофкяактнчоекая эффективность Ояшиютесках препаратов (бета+гаша-глооулиноз я ПИЯС)

Контр<ш> (специфические препараты не пршишцш)

Оштшя группа (прирост жгаой шеен н г)

¿"летроль (прирост жиеой иассн в г)

¿да иводешя препаратов

Предупревдошшй уцерб на одно животное е рублях

1=3

Л Пу

Солибактсрпоз

Гчг

8СЦ 6С;

40. 20

-

Впрусно=бакт8рпалы2ыо пневыоэнтооаты ________а ■ л л

98,6 7С

~ <4.

23

80

79

190

540

575 616

503 949

95.9

77

95.9

76,6

573 907

О

Дня

. Пу

Бета+гата-глобулинн г/ы

15 „2

шдс

п/к

Пу = 383

пшю шшс шшс

¡1 а р о з о л ь н о

—т—

10

15

Т" 20

чг

25

т-

30

"Г

50

90

■■■ I1 ■

150

1£0 210

аэрозольного применения ГСШС количество (Зольных пнегмоэнтеритами не превышало 4-19$, то есть прсфчлактическая и лечебная эффективность составила ^0-85$, смертность - в 2-4 раза ниже чем в контроле, а предотвращенный ущерб на одно животное был от 54,5 до 383 руб. в ценах до Г9Э0 года. В то же время, сочетанное прлт.юл-онпе (подкожно и аэрозольно ПИЛС телятам в возрасте 5-10 дней) профп-лактг.рова^о их от пневмоэнтеритоя до 100$, а обработанных по этой схеме в 20-ти дневном возрасте - на 50$. Изложенное дает основание считать, что профилактику вирусно-бактериальных заболеваний следует начинать с более раннего периода, т.о. с 10-ти дневного возраста. На основании многолетних наблюдений и проведенных опытов в лабораторных и производственных условиях наш разработан комплексный подход в решении проблемы колпбактериоза и вирусно-бактериальных пневмоэнтеритов у телят (рис.3), основанный на парентеральном применении бета+гамма-глобулинов в первый день жизни, затем подножном введении ПИЛС в 10-ти дневном возрасте и через 10-20 днеЯ-сочетанном аэрозольном распылении ПИЛС (3 раза) с сывороткой против пастереллеза крупного рогатого скота (2 раза) с интервалом 10-15 дней, создающие по фону колостральпого иммунитета специфическую невосприимчивость за счет пассивно приобретенных антител (рис.2). При этом, в результате контакта организма с возбудителем, происходит частичная пли полная нейтрализация его секреторным иммуноглобулином класса А, что способствует спаду эпизоотии за счет ослабления полевого вируса и образованию естественной невосприимчивости (рис.2) благодаря сохранению антигенного начала, и как следствие - снижение летальности в 2-5 раз, увеличению среднесуточной массы тела на 30-120 г (в нромкомшшкее) и 343 г (е совхозах-поставщиках). При этом, лечебно-профилактическая эффективность применяемых биологических препаратов составила 95,9$ (рис.3).

ВЫВОДИ

1. В хозяйствах Алматинской области при колибактериозе телят из патологического материала выделяются в основном патогенные эшерихии серогрупп 08, 078, 0119 и 0141.

2. Наиболее высокие титры агглютининов (1:3200) к эшерихиям обнаруживаются у коров в зимне-весенний период.

3. Предлагаемый способ фракционирования сыворотки крови крупного рогатого скота позволяет получать препарат бета+гамма-глобулин в течение 4-6 дней и сокращает расход этилового спирта на 42$, по сравнению с методом Кона.

4. Комплексное лечение больных колибактериозом телят бета+ гамма-глобулинами и активными антимикробными препаратами обеспечивает выздоровление их от 96 до 99 процентов и сокращает лечение на 1-2 дня.

5. Аэрозольное применение поливалентной иммунолактосыворотки в сочетании с сывороткой против пзстереллеза крупного рогатого скота с лечебно-профилактической целью способствовало снижение заболеваемости на 50-85/» и летальности - на 20$.

6. Эффективность предлагаемого принципа комплексной профилактики бактериально-вирусных нневмоэнтеритов у телят до трех месяцев составила 98,6%.

ПРАКТИЧЕСКИ ПРШОШПШ

Научные разработки, положения и выводы нагей работы рекомендованы и применяются в ветеринарной практике и вояши в следующие нормативные документы:

- Рекомендации по профилактике и лечению колгбэктериозо телят.- Алма-Ата, 1975;

- Лтгс-менная инструкция о мероприятиях по борьбе с колиб^к-

' терзозом молодняка с.-х. животных. Утверждена 1УВ МСХ СССР 8.12.76 г.;

- Оснозные мероприятия по выращиванию телят, профилактике келудочко-кппечных и респираторных болезней для хозяйств молочного направления (рекомендации).- Алма-Ата, 1988;

- НТД (ТУ, инструкция по изготовлению , контролю и наставление по пргменению иммунолактосыворотки поливалентной сухой против смешанных вирусных пневмогнтерптов ПГ-3, IIPT, БД и ГШИ крупного рогатого скота. Утвервдены ГУБ Госагропрома СССР 29.06.88 года;

- Рационализаторское предложение: "Комплексный способ лечения колибактериоза телят". Уд. В 215 от 13.10.73 г. Принято КазМИС.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТИЛЕ ДИССЕРТАЦШ

1. Бэсанец В.М. Ускоренный метод получения глобулинов из сыворотки крови крупного рогатого скота //Вестник с.-х. науки.-Алма-Ата,- 1971.- Л 6.- С.60-62.

2. Басанец В.М. Эффективность некоторых хикиопрепаратов при колибактериоза телят //Вестник с.-х. науки.-А-Ата,1972.~УЛ.-С.62.

3. Басанец В.М. Определение титра гемагглютининов в белковых препаратах с помощью дезинтегрированного ультразвуком антигена

из E.coli (РПГА) //Вестник с.-х; науки Казахстана.- Алма-Ата, 1973.- Я I,- С.78-81.

4. Басанец В.И. Содержание агглютининов в глобулиновых препаратах из сыворотки кроЕи коров к патогенным эшерихиям //В кн.: Инфекционные, паразитарные и незаразные болезни с.-х. животных

в Казахстане.- Алма-Ата, 1976.- Т. ХУ1.- С.262-264.

5. Гиэнтдпнов H.H., Валеева Ф.К., Салахова С.К., Бахтахунов Ю.Х., Басанец В.М. Способ получения поливалентного антителосодер-жащего биопрепарата против вирусных пневмоэнтеритов крупного рогатого скота //Автор, свид. # 1200620 от I октября 1985 г.

6. Басанец В.М., Слободсков Н.П. Способ профилактики napsi-вирусного энтерита у собак // Автор, свид. ¡ё 1564774 от 15.01.90 г.

7. Басанец В.М., Ли В.А. Профилактические и лечебные свойства сыворотки крови реконвалесцентов при респираторных заболеваниях телят //В кн.: Инфек. болезни с.-х. животнкх.-Алматы,1993.-С.106-1П.

БАСАНЕЦ Виктор Михайлович Буэаулардац аскаэан-отен изне респираторлн^

ауруларын вмдеу аанв алдни му Ipi г?ара мал г?ан сарксу=псд 0®л!мет!н ^^-глобултшдврд!!? алину vrosv 96£ эттш саярт!мен модифкяецяяланда, беяоягар мен аи-тндеьелерд1ч вшеряхийлврден мерз!мтв байлаяыстн тэуелд! екен! дэлелденд!.

Уль?радабыспен ввделген гшерихийлерд!ц эритроцитарлн диагностик умы туцгыш руг дайындалдыо

Колибактеркозбек аунргаи буэауларды -глобулиндермен жэ-не активт! аиттаняробта препараттармен комплекс?! ттрдв емдеу оларда 96 чей 99% -же двй!н сауыктнрада.

Буэаулардац зяруеты пневмоэнтериттер!не царсн аптидвиэлер! бар препарат /таютл о л ак v о с арн су/ алында, оннц тлнии-техникалык ^ртатгеари я&зияеп бек1?!лд!<,

Поякиалеиет! квяуноя&етссарксудщ вяргуста пиевмоантериттер-ге царгз еосдеу-профияадпгякалик ?я!мд!я!г! 50 - 85f? болдн.

BASANETS Victor Hikhailovich Treatment and prophylaxis of gastrointestinal

and respiratory diseases of calves The method of reception of y?-^-globulins from perure of cattle m:.i3 improved, the reasonal dependence of protein and nr.ti-odiea »icfiin3t B.coli was found.

The erythrocytic diagnosticum from ultrasound dezlntograting E.coll were preparated.

¿"^-globulins and active antimicrobe preparations Id highly effective (96 - 93% ) against colibacteriosis of calvea.

Antipneuiuoenteritis of oalves antibody preparation (immuno-lactataerum) waa preparated. The sclentifio and techinical document was composed and affirmed.

A high efficacy of inanunolactatserum (50 - 85%) in treatment and prophylaxis of pneumoenteritis of calvea was demonstrated.