Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Клинико-эпизоотологический мониторинг микстинфекций новорождённых телят в условиях Нижегородской области

На правах рукописи

Блохин Андрей Александрович

003482698 КЛИНИКО-ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ' МИКСТИНФЕКЦИЙ НОВОРОЖДЁННЫХ ТЕЛЯТ В УСЛОВИЯХ НИЖЕГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологи-ей и иммунология

1 ^

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени кандидата ветеринарных наук

Нижний Новгород 2009

003482698

Работа выполнена на кафедре анатомии сельскохозяйственных животных ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия», в хозяйствах и государственных ветеринарных учреждениях Нижегородской области.

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор Молев Аркадий Иванович

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор Пашкина Юлия Викторовна

кандидат ветеринарных наук Гладкова Надежда Алексеевна

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана»

Защита состоится « 1 » декабря 2009 года в/0 часов на заседании диссертационного совета Д 220.047.02 при ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия» (603107, г. Нижний Новгород, просп. Гагарина, д. 97).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке НГСХА (603107, г. Нижний Новгород, просп. Гагарина, 97). Автореферат опубликован на официальном сайте ФГОУ ВПО «НГСХА» www.agri.sci-nnov.ru « Ссби, 2009г.

Автореферат разослан «sffi» C>UJU \ ^S) 2009 года.

Учёный секретарь диссертационного совета, кандидат ветеринарных наук, доцент А.В. Пашкин

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Обеспечение сохранности нарождающегося молодняка сельскохозяйственных животных является одной из приоритетных задач животноводства. Достоверно известно, что наибольший отход телят наблюдается в первые дни после рождения. В большинстве случаев (до 95%) это вызвано развитием заболеваний, проявляющихся клинически диареей и этиологически обусловленных воздействием ассоциаций вирусов и бактерий (В.М. Апатенко, 1990 Х.З. Гаффаров и соавт., 2002; А.И. Молев и со-авт.,2004; В.В. Сочнев и соавт,, 2000). Данные заболевания имеют широкое распространение, сопровождаются высокой заболеваемостью, летальностью и смертностью и наносят значительный экономический ущерб.

Среди многообразия вирусных агентов особая роль в возникновении заболеваний проявляющихся диарейным синдромом, отводится ротавирусам (род Rotavirus), коронавирусам (род Coronavirus), вирусу вирусной диареи КРС (род Pestivirus). Инфицированные ими животные становятся более восприимчивыми к воздействию условно-патогенной микрофлоры, отягощающей течете инфекционного процесса (В.Н. Сюрин и соавт., 1998; С.А. Ме-bus et al., 1973). Возбудители микстинфекций новорожденных телят являются лишь конечным эффектором, оказывающим своё патогенное действие в условиях негативного влияния факторов внешней среды (факторов риска) и приводящим к развитию заболевания, характеризующегося яркой манифестацией.

Вследствие действующих в среде обитания животных неблагоприятных факторов риска, у животных формируется патологическая стресс-реакция, обуславливающая снижение иммунореактивности организма и способствующая проявлению инфекционного процесса. К тому же в процессе коэволюции макроорганизмов и вирусов последние приобрели способность непосредственно угнетать функционирование иммунной системы (Фёдоров Ю.Н. 2002). При этом функционирующая в рамках животноводческого комплекса инфекционная паразитарная система приобретает качественно новый уровень взаимоотношений между соактантами, что характеризуется формированием ассоциаций микроорганизмов и развитием клинически выраженного заболевания , как правило, у молодых менее адаптированных к условиям среды обитания животных. У взрослых животных инфекционный процесс протекает в скрытой форме с персистенцией возбудителей.

Мультифакторность и полиэтиологичность данной формы патологии диктуют необходимость использования комплексного подхода при диагностике этиологических факторов заболевания с учётом данных не только клинического осмотра и патологоанатомического вскрытия животных, но и результатов эпизоотологических, вирусологических, бактериологических, иммунологических, биохимических, серологических и гистологических исследований.

Весьма актуальной'остаётся проблема поиска и разработки новых высокоэффективных средств лечения и профилактики диарейной патологии ново-

рожденных телят с использованием иммуностимуляторов, пробиотиков и средств эпизоотической защиты, действия которых были бы ориентированы на исключение ключевых механизмов развития патологии.

Цель работы: В условиях животноводческих хозяйств в сравнительном аспекте и динамике провести многофакторный анализ и изучить характер эпизоотического процесса при смешанной диарейной патологии новорожденных телят и на этой основе усовершенствовать технологические, ветери-нарно-санитарные и специальные мероприятия по сохранению здоровья животных с использованием экологически безопасных препаратов и средств эпизоотической безопасности.

Задачи исследований:

> В условиях хозяйств Нижегородской области изучить эколого-эпизоотологические предпосылки болезней новорожденных телят, проявляющихся синдромом острого расстройства пищеварения.

> Изучить клинико-морфологическую манифестацию ассоциированных гастроэнтеритов новорождённых телят.

> В сравнительном аспекте изучить иммунологические изменения в организме у телят при ассоциированном вирусно-бактериальном гастроэнтерите.

> Научно обосновать и усовершенствовать систему лечебно-реабилитационных и профилактических мероприятий при вирусно-бактериальном гастроэнтерите новорождённых телят с использованием иммуностимулирующих, антибактериальных, пробиотяческих, симптоматических и биологических препаратов и дезинфицирующих средств.

Научная новизна. Получены новые научные данные о воздействии экологических и эпизоотологических факторов как пусковых механизмов возникновения и развития ассоциированных (вирусно-бактериальных) гастроэнтеритов новорождённых телят.

Доказано, что использование клинико-эпизоотологических, морфологических и иммунологических методов исследований значительно повышает эффективность комплексной зпизоотологической диагностики этих болезней и позволяет осуществлять эпизоотологический мониторинг их эпизоотического проявления и эпизоотологических параметров популяции крупного рогатого скота.

Установлено, что ключевым моментом в возникновении ассоциированного гастроэнтерита телят является сниженная резистентность и низкий иммунный статус новорождённых телят, которые обусловлены в равной степени иммуносупрессивным влиянием патологической стресс-реакции и вируса диареи КРС.

Впервые научно обосновано применение иммуностимуляторов ксимедона гидрохлорида и миксоферона при коррекции стресс-индуцированного и вызванного вирусом диареи КРС вторичного иммунодефицита у телят.

Впервые показана необходимость применения дезинфекганта ГААС-45 как средства, обеспечивающего экологическую и эпизоотическую безопасность на каждом из этапов системы выращивания телят.

Разработаны комплексные схемы лечебно-реабилитационных и профилактических мероприятий при ассоциированных гастроэнтеритах телят с использованием иммуностимулирующих (ксимедона гидрохлорида и миксофе-рона), пробиотических (ветом 1.1., сквашенное органическими кислотами молоко), антибактериальных, симптоматических и биологических препара-, тов, а также средства экологической безопасности - ГААС-45.

Практическая значимость. Научно обосновано и практически подтверждено, что эпизоотическое проявление факторных ассоциированных гастроэнтеритов телят — процесс управляемый. Разработанные схемы лечебно-профилактических мероприятий оказались востребованными и используются с высокой эффективностью ветеринарными врачами производственной и государственной ветеринарной службы Нижегородской области в хозяйствах промышленного типа, неблагополучных по моно- и ассоциированным вирус-но-бактериальным гастроэнтеритам телят.

На защиту диссертации выносятся следующие основные положения:

У Ассоциированный вирусно-бакгериальный гастроэнтерит телят является факторным заболеванием, а постоянное воздействие факторов риска обуславливает его энзоотачность.

Жлинико-морфологическая манифестация ассоциированного вирусно-бакгериального гастроэнтерита телят обусловлена уровнем неспецифической резистентности и иммунного статуса их организма и составом ассоциации, где ведущую роль играет вирусный компонент.

> Использование ксимедона гидрохлорида и миксоферона в комплексе лечебно-реабилитационных и профилактических мероприятий при стресс-индуцированном и вызванным вирусом диареи КРС вторичном иммунодефиците телят является высокоэффективным.

> Применение средств экологической защиты животных в условиях крупных животноводческих ферм является важной составляющей технологического процесса получения и выращивания телят.

> Способы лечения и профилактики ассоциированного вирусно-бактериального гастроэнтерита телят, основанные на комплексном применении иммуностимулирующих, антибактериальных, пробиотических, симптоматических и биологических препаратов, а также средств экологической безопасности, являются доступными и эффективными.

Пути реализации. Результаты исследований могут быть использованы при разработке научно обоснованных систем по диагностике и мерам борьбы с ассоциированными диарейными заболеваниями новорождённых телят в различных регионах страны, а также в учебно-педагогическом процессе при подготовке специалистов ветеринарного и биологического профиля, на семинарах и курсах переподготовки в системе послевузовского образования.

е

Апробация работы. Тема диссертации, её основные положения, направления и результаты исследований рассмотрены на заседании совета ветеринарного факультета ФГОУ ВПО «НГСХА» (2006-2009). Материалы диссертации доложены и одобрены на научно-практических конференциях по проблемам ветеринарии (Киров, 2008, Санкт-Петербург, 2007); на 16-ой Всероссийской научно-методической конференции по патологической анатомии животных «Современные проблемы патологической анатомии, патогенеза и диагностики болезней животных» (Ставрополь, 2007); на первом Международном конгрессе ветеринарных фармакологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства» (Санкт-Петербург, 2008); на научной конференции, посвкщённой 100-летшо со дня рождения заслуженного деятеля науки РСФСР, академика АМН СССР Д.А.Жданова (Москва, 2008); на У1-м Всероссийском съезде общества анатомов, гистологов, эмбриологов (Саратов, 2009).

По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ, в т.ч. 2 в центральных изданиях, рекомендованных ВАК РФ для публикации материалов докторских и кандидатских диссертаций.

Внедрение. Результаты научных исследований под авторским надзором и с положительным эффектом внедрены в 2006-2009 годах в хозяйствах Нижегородской области и вошли в издание «Диагностика, терапия и профилактика ассоциированного вирусно-бактериального гастроэнтерита телят» (рассмотрено, одобрено и рекомендовано к изданию Комитетом государственного ветеринарного надзора Нижегородской области от 06.08.2009г.). - Н. Новгород, 2009.

Объём и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 184 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, собственных результатов исследований и их обсуждения, выводов, практических предложений, библиографического списка литературы. Материалы иллюстрированы 19 таблицами и 37 рисунками. Список использованной литературы включает 261 источник, в т.ч. 48 зарубежных авторов.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалы и методы

Работа выполнена в 2006-2009 годах на кафедре анатомии с.-х. животных ветеринарного факультета ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия», на базах Нижегородской областной и Дальнеконстантиновской районной ветеринарной лабораторий, производственные исследования проводились в хозяйствах Нижегородской области. В ходе эксперементально-теоретического обоснования основных положений работы и формулирования выводов применялись эпизоотологические, кли-нико-инструментальные, биохимические, иммунологические, морфологические, вирусологические, бактериологические и статистические методы исследований.

Постановка предварительного диагноза на диарею гелят основывалась на анализе данных анамнеза, общего клинического исследования с использованием инструментальных методов. Определяли температуру тела телят в разные периоды заболевания, пульс, частоту дыхания, давали характеристику клинических признаков (Смирнов А.М. и др., 1988).

Установление роли ротавирусов, коронавирусов, вируса диареи КРС в этологии смешанных форм инфекционной диареи телят проводили путем вирусологического скрининга содержимого кишечника (п=48) как от телят с выраженными клиническими признаками заболевания, так и от клинически здоровых телят. По количественному составу идентифицированных вирусов судили о характере вирусного фона в стаде крупного рогатого скота хозяйства и о составе вирусного компонента вирусно-бактериальных ассоциаций.

Идентификацию вирусов по определению соответствующих антигенов в образцах фекалий производили в соответствии с «Наставлением по применению набора компонентов для диагностики вирусной диареи-болезни слизистых крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа» (1997), «Наставлением по применению набора компонентов для выявления ротави-русного антигена в фекалиях крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа» (1990) и «Наставлением по применению набора для диагностики коронавирусного энтерита крупного рогатого скота методом гемагг-лкгошации» (1990).

Установление роли бактериального компонента в этиологии смешанных форм инфекционной диареи телят осуществляли путём микробиологического скрининга содержимого кишечника клинически больных телят, органов и тканей павших телят (п-23), воздуха профилактория и кормов.

Микробиологические исследования проводили в соответствии с «Методическими рекомендациями по выделению и идентификации условно-патогенных энтеробактерий и сальмонелл при острых кишечных заболеваниях молодняка сельскохозяйственных животных» (1990).

Исследование микробной контаминации воздуха (п=11) осуществляли се-диментациокиым методом по Коху, кормов - в соответствии с правилами бактериологического исследования кормов.

Определение степени влияния показателей микроклимата на заболеваемость новорожденных телят проводили по стандартным методикам в двух различных по условиям содержания профилакториях.

Гистологические исследования тканей и органов павших и вынужденно убитых животных осуществляли общепринятыми методами (Лилли Р., 1969).

Для определения параметров гомеостаза, состояния неспецифической ре-зистенгности и иммунологической реактивности проводили исследование крови и сыворотки крови клинически здоровых (п=42) и больных телят (п=30) общепринятыми в ветеринарии методами (Кондрахин И.Г1., 2004).

Общий белок в сыворотке крови определяли рефрактометрическим методом, иммуноглобулины - с сульфатом цинка. Активность ферментов - аспар-татаминотрансферазы (АсАТ) и аланинаминотрансферазы (АлАТ) в сыво-

ротке крови определяли по Райтману-Френкелю (1956). Фагоцитарную активность нейтрофилов оценивали по результатам НСТ-теста. Исследование лизоцимной активности сыворотки крови производили по методу В.Г.Дорофейчук (1968), основанному на способности лизоцима лизировать суточную агаровую культуру Micrococcus lysodeiklicus. Бактерицидную активность сыворотки крови определяли по методу О.В.Смирновой и Т.А.Кузьминой (1966). Оценку иммунного статуса проводили путём определения количества Т-лимфоцитов в реакции спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана по методу М. Jondae (1972) в системе E-ROC, В-лимфоцитов - в реакции спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана по методу E.N.Mendes (1978) в системе EAC-ROC.

На основе полученных результатов исследований проводили корректировку технологических процессов и разработку лечебно-профилактических мероприятий с применением иммуностимулирующих (ксимедона гидрохлорида и миксоферона), пробиотических (ветом 1.1.) препаратов и средств обеспечения экологической безопасности (ГААС-45).

Оценку эффективности лечебно-профилактических мероприятий на по-пуляционном уровне осуществляли с использованием методов аналитической эпизоотологии (когортного исследования и исследования типа «случай-контроль») (Макаров В.В., 2001).

Результаты исследований подвергали статистическому анализу по Н.А. Плохинскому (1970) и Хитоси Кумэ (1990).

Результаты исследований

1. Скрининг этиологических Факторов смешанной инфекционной патологии новорождённых телят

Изучили роль экологических и хозяйственно-технологических факторов в формировании и развитии патологии пищеварительного тракта новорождённых телят. При анализе кофакторов заболеваемости новорожденных телят в первые 10 дней с признаками диарейного синдрома установили, что наибольшее влияние на развитие заболеваемости оказывает микробная контаминация воздуха (Е. Coli, стрептококки, протей), особенно к концу стойлового периода в марте-апреле месяце. Данный показатель превышает нормативы в 4-5 раз и составляет 72-84 тыс. микробных тел в м3 условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, обитающих не только во внешней среде профилактория, но и в пищеварительном тракте животных.

Влияние на заболеваемость животных оказывает и скорость движения воздуха и его относительная влажность, которые составляют 0,4м/с и 83% соответственно и превышают нормативы в 2 и 1,075 раза. Коэффициенты коррелятивной связи выше перечисленных параметров относятся к средней прочности с заболеваемостью телят, и соответствуют г = +0,661 и г - +0,524.

Остальные факторы микроклимата (температура воздуха, концентрация NH3iC02, H2S, освещенность, объем помещения на одно животное) непостоянны и динамично изменяются как в течение суток, так и по сезонам года.

Однако все факторы, взаимодействуя в совокупности, оказывают сильнейшее влияние на развитие стресс - реакции и, как следствие, патологического процесса и имеют выраженную прямую коррелятивную связь с заболеваемостью телят острыми расстройствами пищеварения (ОРП), что подтверждается коэффициентом множественной корреляции, который равен г = +0,844.

В фекалиях телят методом ИФА идентифицированы антигены ротавиру-сов и пестивируса вирусной диареи КРС. Из органов павших телят выделены и серотипированы энтеротоксигенные штаммы Е. Coli серогрупп 078 и 0111.

Полученные данные позволяют считать, что основной причиной возникновения и развития клинически выраженного течения смешанных форм инфекционных диарей новорождённых телят является влияние факторов внешней среды, а само заболевание является факторным. При этом конечным этиологическим агентом являются ротавирус и пестивирус вирусной диареи КРС, которые, повреждая эпителий кишечника, способствуют вовлечению в инфекционный процесс условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, тем самым осложняя течение болезни.

2. Манифестация смешанных форм инфекционных гастроэнтеритов

новорождённых телят

Нами установлено, что для вирусно-бактериального гастроэнтерита телят характерен обширный спектр клинических признаков, которые зависят от видового состава соактантов инфекции, биологических свойств возбудителей, от формы течения заболевания и резистентности макроорганизма, что в конечном итоге определяет исход заболевания. Но при всех вариантах проявляется энтеритный синдром с дегидратацией и токсикозом организма.

2.1. Манифестация смешанной формы диареи новорождённых телят«

вызванной ассоциацией ротавируса с Escherichia coli

Ассоциированный вирусно-бактериальный гастроэнтерит телят, вызванный ротавирусом и Е. Coli, протекал остро и клинически проявлялся в 2-3-дневном возрасте диареей. Болезнь продолжалась от 2 до 4 суток. Исход заболевания зависел от своевременности и адекватности терапевтических мероприятий и от иммунобиологической резистентности организма телёнка. Патологоанатомическая картина в данном случае характерна для осгропроте-кающего катарально-десквамативного абомазо-энтерига. В мезентериальных лимфатических узлах, сопредельных патологически измененным участкам тонкого отдела кишечника, отмечали картину, характерную для серозного лимфаденита.

При гистологическом исследовании в тонком отделе кишечника имели место разрушения энтероцитов верхнего слоя кишечных желез слизистой оболочки и местами сплошной десквамацией покровного эпителия, с замещением его на кубический и плоский. Ворсинки были укорочены, а их соединительнотканная основа утолщена за счет резкого наполнения кровенос-

ных сосудов, инфильтрации тканевой жидкости с эритроцитами, лейкоцитами, лимфоцитами, гистиоцитами. В сохранившихся железистых структурах отмечали десквамацию бокаловидных клеток.

Таким образом, проявление ассоциированного вирусно-бактериалыюго гастроэнтерита телят, вызванного ассоциацией ротавируса с Escherichia coli, характеризуется катарально-десквамативным поражением аппарата пищеварения.

2.2. Клиническое проявление и патоморфологичсские изменения при

ассоциации вируса диареи КРС с ротавнрусом и Escherichia coli

При персистенции вируса диареи КРС в организме создаётся благоприятный фон для проявления действия ротавируса и эшерихий. В клинической картине у телят прогрессировали признаки обезвоживания, появлялись эрозии на носовом зеркальце и слизистой оболочке ротовой полости с обильным истечением вязкой слюны и катарального экссудата из носовых отверстий. Температура тела повышалась до 40,5-41,5 °С. Отмечались парезы тазовых конечностей и потеря кожной чувствительности. Нарушалась координация движений. На 4-5-е сутки заболевшие животные впадали в коматозное состояние и погибали.

При патоморфологическом исследовании при смешанной диарее телят, вызванной вирусной диареей КРС, осложненной ротавирусом и эшерихиями, в фундальной части сычуга на слизистой оболочке обнаруживали картину катарально-эрозивного абомазита с петехиальными кровоизлияниями и деск-вамацией покровного эпителия, частичным разрушением фундальных желез. В тонком отделе кишечника превалировали изменения, характерные для острого катара с очаговым геморрагическим акцентом. В толстом отделе кишечника установлены изменения, характерные для катарально-десквамативного и эрозивно-язвенного колита.

В мезентериальных лимфатических узлах наблюдали картину острого серозного и серозно-геморрагического лимфаденита. В селезенке отмечали обеднение пульпы клеточными элементами и развитие соединительнотканных тяжей стромы. В тимусе установлены признаки гипоплазии и акциден-тальной трансформации.

Установленные клинико-морфологические изменения, вызванные синер-гичным воздействием вируса диареи КРС, ротавируса и Escherichia coli как на органы пищеварения, так и на лимфоидные органы, ассоциированные со слизистой оболочкой, характеризуют инфекционный процесс как более тяжёлый. Ключевым моментом в патогенезе заболевания, вызванного подобной ассоциацией микроорганизмов, является поражение лимфоидного аппарата слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта.

2.3. Оценка гистофнзиологичсских изменений в органах иммунной

системы.

При микроскопическом исследовании органов иммунной системы (тимус, селезенка, мезенгериальные лимфатические узлы) больных телят наблюдали

морфологические изменения во всех структурно-функциональных компонентах органов, что в определенной степени свидетельствовало о происходящих при этом функциональных перестройках.

У телят с иммунодефицитным состоянием при гистологическом исследовании тимуса выявляются стойкие и характерные изменения, характеризующиеся как акцидентальная трансформация. Морфологически это проявлялось гибелью Т-лимфоцитов по пути апоптоза и некроза, уменьшением и изменением формы долек, атрофией паренхимы и склерозом стромы органа.

В селезенке не просматривались четко сформированные зоны белой пульпы, лимфоидные узелки находились в стадии формирования, преобладают клетки фибробластического ряда, что указывает на пролиферацию соединительнотканных элементов с резким утолщением трабекул и капсулы.

В мезентериальных лимфатических узлах телят при ассоциированных инфекциях на фоне иммунодефицита нами наблюдалась картина уменьшения размеров иммунологически функциональных структурных компонентов (кортекса, паракортекса, медуллы), серозного и серозно-геморрагического лимфаденита. В лимфатических узлах, расположенных вдали от очага патологии и регионарных соматических лимфатических узлах, в корковой зоне отмечали преимущественно первичные лимфоидные фолликулы и наличие немногочисленных вторичных со слабо выраженными реактивными центрами.

При гистологическом исследовании органов иммунной системы телят черно-пестрой породы, постоянно находящихся под воздействием стресс-факторов или являющихся персистентно инфицированными вирусом диареи КРС, выявляется картина дистрофических и атрофических процессов с обеднением гимуса, селезенки и лимфатических узлов лимфоцитами с адаптационным разрастанием стромальной ткани, что свидетельствует о развитии иммунодефицита.

2.4. Оценка морфофуыкционального состояния механизмов гомеоста-

за телят в раннем ностнаталыюм онтогенезе в условиях хозяйства

Установлено, что такие показатели неспецифической резистентности, как лгооцимная и бактерицидная активность сыворотки крови, относительно физиологических нормативов снижены на 8,28% и 23,80% соответственно.

Лейкограмма новорожденных телят характеризуется высоким содержанием нейтрофилов. Данный показатель сильно коррелирует с показателями фагоцитарной активности клеток крови и индекса завершённости фагоцитоза.

Механизмы специфического иммунного ответа на данном этапе онтогенеза характеризуются низким уровнем содержания как общих лимфоцитов, так и их популяций: Т- и В-лимфоцнтов, что в общих чертах характерно для возрастного физиологического иммунодефицита.

Для выявления патологических процессов в органах иммунной системы телят рассчитали индексные показатели. В результате установили, что лейко-Т-клеточный и лейко-В-клеточный индексы выше физиологических нормативов в 2 и 1,4 раза соответственно. Эти показатели новорожденных телят

свидетельствуют о развитии тяжёлого иммунодефицита, связанного с недостаточностью как Т-, так и В-клеточного звена.

Таким образом, иммунологическая недостаточность в первые дни постна-тапыюго периода обусловлена не только возрастными особенностями молодняка, но и развитием глубоких патологических процессов в лимфоидных органах под влиянием разнообразных экологических факторов риска.

Указанные выше аспекты причинности и условий проявления ассоциированного гастроэнтерита новорождённых телят были использованы нами как отправные позиции при разработке средств и методов борьбы и профилактики при данной форме патологии новорождённых телят.

3. Разработка и оценка эффективности системы лечебно-пеабнлитацнонных и профилактических мероприятий при смешанных инфекционных диареях новорождённых телят!

3.1. Исследование эффективности лечебно-реабилитационных мероприятий при микстиифекциях на суборганизменном и организменном уровне.

Для проведения исследований по принципу парных аналогов были сформированы три группы телят (п=15). 1-я опытная группа, клинически больные телята, лечение которых осуществляли в соответствии с разработанной нами экспериментальной схемой терапевтических мероприятий. При лечении использовали антибиотик (4%-ный раствор гентамицина сульфата в дозе 4 мл/гол.), регидратационный раствор (глюкэт в дозе 100 мл/гол, внутривенно и редиар в дозе 100 г/гол. на отваре трав, перорально), иммуностимуляторы (миксоферон в дозе 500000 МЕ/гол. на физрастворе подкожно, ксимедона гидрохлорид в дозе 25 мг/кг массы тела внутримышечно, в форме 10%-ного водного раствора), пробиотик ветом 1.1. в дозе 50мг/кг массы тела (2гр/гол), 2 раза в сутки, витамин В12- 500 мкг/кг.

2-я опытная группа, клинически больные телята, лечение которых осуществляли в соответствии с базовой схемой хозяйства, которая включала применение только антибиотиков (дорин, окситетрацикяина гидрохлорид, би-циллин-5) и регидратационных растворов (раствор глюкозы - 5% в дозе 100 мл/гол., внутривенно, лерс перорально) и тем самым имела лишь симптоматическую направленность лечения;

3-я контрольная группа, клинически здоровые телята.

При осуществлении терапевтических* мероприятий у телят опытной группы №1 лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови и фагоцитарная активность лейкоцитов к 21-му дню исследований возрастают на 81,23%, 197,9% и 42,0%,а в опытной группе №2 на 39,81%, 109,14% и 20,32% соответственно.

Количество лейкоцитов в периферической крови у телят опытной группы №1 к 21-му Дню исследований снизилось на 17,38% и составило 10,6±0,51 тыс./мкл, что ниже данного показателя телят, лечение которых осуществлялось базовым способом на 2,03%. Однако у телят обеих опытных групп ко-

личество лейкоцитов оказалось выше, чем у ингактных животных на 35,75% и 37,06% соответственно.

При анализе лейкограммы установлено снижение содержания эозинофи-лов в крови телят опытных групп №1 и №2 на 22,22% и 55,55% соответственно к 21-му дню исследований.

У телят опытной группы №1 в процессе выздоровления снижение количества палочкоядерных нейтрофилов через три недели составило 70,17%, а у телят опытной группы №2 - 57,89%.

Снижение содержания сегменгоядерных нейтрофилов в крови телят первой группы составило 53,21% (с 56,0±1,37 до 26,2±1,43%), второй группы -19,28% (с 56,0±1,37 до 45,2±1,12%). При этом у телят опытной группы №1 их количество было на 14,54% ниже, а у телят группы №2 выше на 45,25% относительно аналогичного показателя клинически здоровых телят.

Динамика содержания в периферической крови моноцитов характеризуется их снижением у телят опытной группы №1 на 53,84%, а у телят группы №2 - на 62,53% по сравнению с исходными показателями.

К 21-му дню возрастает количество лимфоцитов в крови всех групп телят. Однако наиболее выраженное увеличение (на 63,43%) наблюдается у телят, которым применяли иммуностимуляторы и пробиотики. У телят опытной группы №2 увеличение лимфоцитов составило 48,95% и достигло уровня 48,0±1,50%, но количество их оказалось ниже на 22,58% относительно ин-тактных животных.

Применение иммуностимулирующих препаратов больным животным оказало иммуностимулирующее действие на находящуюся в состоянии им-муносупрессии иммунную систему телят. Содержание Т- и В-лимфоцитов в крови телят опытной группы №1 увеличивается в динамике к 21-му дню на 52,68% (с 24,7±1,32 до 52,2±1,42,%) и 74,13% (с 3,0±0,24 до 11,6±0,35%) соответственно. У телят опытной группы №2 количество Т-лимфоцитов, напротив, снижается на 4,45% (с 24,7±1,32 до 23,6±1,21%), а В-лимфоцитов увеличивается на 11,76% (с 3,0±0,24 до 3,4±0,27%).

Для оценки степени влияния на иммушплй статус рассматриваемых методик лечения использовали показатели лейко-Т- и лейко-В-клеточных индексов. Так, у телят опытной группы №1 лейко-Т-клеточный индекс к 21-му дню снизился на 82,75% и составил 2,85. Лейко-В-клеточный индекс снизился на 90,57% и достиг уровня 12,86. Относительно клинически здоровых телят эти показатели были ниже на 53,20% и 46,92% соответственно. Снижение лейко.-Т-клеточного и лейко-В-клеточного индексов у телят опытной группы №2 оказалось менее выраженным, составило 46,58% и 45,6% и достигло значений 8,83 и 61,47,

Оценку функциональных изменений гуморального звена иммунитета при различных комплексах терапии осуществляли по показателям содержания в сыворотке крови иммуноглобулинов и общего бежа.

У телят опытной группы №1 наблюдается увеличение содержания иммуноглобулинов на 58,20% (с 3,49±0,19 до 8,35±0,13 мг/мл), а общего белка на 36,48% (с 4,3±0,34 до 6,77±0,22 мг%) по сравнению с исходными данными.

У телят второй опытной группы концентрация иммуноглобулинов и общего бежа в сыворотке крови увеличилась на 35,37% (с 3,49±0,19 до 5,4±0,20 мг/мл) и 12,95% (с 4,3±0,34 до 4,94±0,39 мг%) соответственно, но эти показатели были меньше на 1,45% и 13,48% относительно показателей у интакгпшх животных.

В лечении телят при смешанных инфекционных диареях имеет значение симптоматическая терапия, об эффективности которой можно судить по показателю резервной щелочности. У телят обеих опытных групп в результате лечения кислотно-основное равновесие нормализуется. В первой группе увеличение резервной щёлочности составило 24,0% (с 42,23±1,85 до 55,58±1,45 об% С02), во второй - 14,89% (с 42,23±1,85 до 49,62*1,33 об% С02). Осуществляемые лечебно-реабилитационные мероприятия в опытной группе №1 благоприятно влияют на кислотно-щелочное равновесие, электролитный состав и гомеостаз организма в целом.

Исследование активности трансфераз в сыворотке крови позволяет выявить не только токсическое влияние на организм каких-либо веществ, но и является необходимым для оценки мембраностабилизирующего действия некоторых фармакологических средств (в нашем случае, ксимедона гидрохло-рвда).

Активность аспартатаминотрансферазы у телят первой опытной группы к 21-му дню снижается на 11,99% (с 0,717±0,01 до 0,631±0,011 ммоль/л*час), а у телят второй группы, напротив, увеличивается на 10,70% (с 0,717±0,01 до 0,803±0,01 ммоль/л*час) по отношению к исходным данным. В первом случае наблюдается положительный эффект мембраностабилизирующего действия и отсутствие токсического влияния на клетки печени и миокарда, как экзогенных веществ, так и эндогенных метаболитов. Во втором случае возрастание активности АсАТ свидетельствует о прогрессировании деструктивных процессов в печени и поперечнополосатой мышечной ткани сердца.

Увеличение активности АлАТ у телят опытной группы №1 незначительно и составляет 5,05%, тогда как у телят второй опытной группы активность АлАТ к 21-му дню возрастает на 34,72% и превосходит аналогичный показатель клинически здоровых телят на 13,75%, что указывает на прогрессирова-ние дистрофических изменений в печени под влиянием не только эндогенных токсинов, но и фармакологических препаратов, применяемых для лечения.

Полученные в производственных условиях данные, свидетельствуют о высокой эффективности лечебно-реабилитационных мероприятий с применением иммуностимулирующих и пробиотических препаратов, действие которых направлено на устранение этиологических факторов заболевания и восстановление нарушенного гомеостаза организма новорожденных телят.

3.2. Разработка и мониторинг эффективности профилактических мероприятий при ассоциированных инфекциях новорожденных телят

Профилактика заболеваемости новорожденных телят вирусно-бактериалъной инфекцией складывалась из вакцинации коров-матерей за 50 и 20 дней до отела вакциной инакгивированной комбинированной против ИРТ, ПГ-3, вирусной диареи, респираторно-синцитиальной, рота - и корона-вирусной болезни телят (Комбовак). Запуск стельных коров осуществляли с использованием антибактериальных средств, таких как нафпензал 1ЭС и ор-бенин ЕЭС за два месяца до отёла, что снижало заболеваемость сухостойных коров маститом до 0,4% и обеспечивало высокую санитарную безопасность и ценность молозива.

Соблюдете схемы заселения в профилактории (все пусто - все занято) с биологическим разрывом в 4-8 дней позволяло своевременно проводить дезинфекцию индивидуальных клеток (препаратом Вироцид 0,5% с нормой расхода 0,2 л/м2 и экспозицией 30 минут) и помещения профилактория (аэрозолем йодалюминия и хлоралюминия с экспозицией 2 часа в течение 3 дней), что позволяло проводить комплектование групп телят в течение 4-5 дней.

Новорожденные телята в 1-й и на 10-й день после рождения подвергались ветеринарным обработкам, направленным на предупреждение иммунодефицита (введение препаратов ксимедона гидрохлорид в дозе 2 г/гол. и миксофе-рон - 900000МЕ/гол.), гиповитаминозов (применение нитамина - воднодис-персного комплекса витаминов А, Дз, Е, С в дозе 5 мл/гол.), недостаточности йода, селена и железа (седимин в дозе 5 мл/гол.).

Выпойка молозива осуществлялась первые 3 дня жизни с добавлением препарата Ветом 1.1 в дозе 2 г/гол., что обеспечивало формирование нормального микробного пейзажа в просвете кишечника. С 4-го дня телятам выпаивалось сквашенное 8,5%-ным раствором муравьиной кислоты молоко в пропорции 12 мл кислоты на 1 литр молока. Объём выпаиваемого молока составлял 6 литров в сутки.

В течение всего профилакторного (10-15 дней), всего молочного периода и периода доращивания до 3-месячного возраста один раз в сутки с интервалом три дня помещения, где содержались телята, подвергались аэрозольной обработке средством ГААС-45.

3.2.1. Контроль качества дезинфекции при использовании средства ГААС-45

Для установления качества аэрозольной дезинфекции средством ГААС-45 отбирались пробы воздуха из профилактория для бактериологических исследований. В целях определения конкретных сроков действия дезинфицирующего действия в рамках технологического цикла выращивания новорожденных телят и выявления динамики микробной загрязнённости воздуха профилактория бактериологическое исследование производили серийно се-диментационным методом Коха до и после дезинфекции через 0,5 часов, 2 часа, 24 часа, двое и трое суток.

Установлено, что после аэрозольной дезинфекции снижение микробной загрязненности воздуха составило относительно исходного показателя 99,46% (с 84,738±1,6 до 0,451±0,59 тыс. м.т/м3) (Р<0,01) через 30 минут и 99,64% (с 84,738±1,6 до 0,301±0,44 тыс. м.т/м3)(Р<0,01) через 2 часа соответственно.

Однако через сутки концентрация микроорганизмов в воздухе профилактория возрастает до 9,482±1,07 тыс. м.т/м, т.е. на 96,82%. Через 2 суток после аэрозольной дезинфекции содержание микроорганизмов в воздухе увеличивается ещё на 59,09% и достигает количественно 23,178±1,34 тыс. м.т/м3, что превосходит санитарно-гигиенические нормативы (20,0 тыс. м.т/м3) на 13,71%. Через 3 суток микробная контаминация воздуха количественно достигает 43,347±1,65 тыс. м.т/м3,т.е. увеличивается ещё на 46,52%. Это, по нашему мнению, обусловлено как поступлением микроорганизмов из родильного отделения и цеха сухостойных коров, так и их выделением с экскретами новорождённых телят.

Применение ГААС-45 позволяет эффективно обеззараживать воздух в помещении в присутствии животных и обеспечивает поддержание санитарно-гигиенических параметров по показателю микробной загрязнённости воздуха в соответствии с нормами ОНТП-1-77 в течение 2 суток. Результаты исследований показывают, что применение средства ГААС-45 возможно в существующем технологическом цикле профилактория с интервалом через каждые 2 дня.

3.2.2. Эффективность профилактических мероприятий при ассоциированном гастроэнтерите телят на суборганишеином уровне

С целью определения эффективности профилактических мероприятий на суборганизменном уровне по принципу парных аналогов были сформиро-ванны опытная и контрольная группы телят (п=15)в возрасте 1-3 дня.

Первая группа - опытная. Телята подвергались обработкам, направленным на формирование высокого иммунного статуса и обеспечивающим их экологическую и эпизоотическую безопасность в соответствии с разработанным нами экспериментальным комплексом профилактических мероприятий.

Вторая группа - контрольная. Телята содержались по базовой технологии, практикуемой в хозяйстве.

Установлено, что как у телят опытной группы, так и у телят контрольной группы увеличение показателей неспецифической резистентности наиболее интенсивно происходит в период с 1-го по 8-й день при относительно низких показателях специфического иммунитета. Интенсивный рост показателей специфического иммунитета наблюдается в период с 8-10-го по 22-24-й день и только у телят опытной группы.

При сравнительном анализе исходных показателей и данных, полученных через 21 день, у телят опытной группы лизоцимкая активность сыворотки крови возрастает на 65,82% (с 16,15±!,19% до 26,78±1,0%). Бактерицидная активность сыворотки крови телят опытной группы увеличилась на 135,69% относительно исходного показателя (24,43±1,15%) и достигла уровня

57,58±0,9%. Фагоцитарная активность и индекс завершённости фагоцитоза у телят опытной группы увеличиваются на 12,6% и 13,84% соответственно.

Динамика показателей лейкограммы у телят опытной группы характеризуется увеличением числа лимфоцитов на 107,54% (с 32,33±1,44 до 67,1 ±1,4%) и параллельным снижением количества палочкоядерных (на 79,15%) и сегментоядерных нейтрофилов (на 45,34%). Количество Т-лимфоцитов в крови телят увеличивается на 66,14% (с 32,7±1,09 до 54,33±1,11%) (Р<0,01). Количество В-лимфоцитов возрастает на 95,61%. Параллельно и взаимосвязанно с этим происходит снижение индексных показателей, которые достигают физиологических значений 2,75±0,13 и 11,92±0,7 соответственно.

У телят контрольной группы лизоцимная активность сыворотки крови увеличивается на 37,10% (с 16,25±1,23% до 22,28±1,16%), бактерицидная активность на 101,13% (с 24,66±1Д1% до 49,6±1,45%). Фагоцитарная активность клеток крови и индекс завершённости фагоцитоза увеличиваются 1,11% (с 47,41±1,2 до 48,0±1,3%) и 13,07% (с 1,3±1,3 до 1,47±0,61) соответственно. Показатели содержания общего белка и иммуноглобулинов в сыворотке крови телят контрольной группы также повышаются соответственно на 18,21% (с 4,83±0,43 до 5,63±0,37 мг%) и 33,65% (с 4,10±0,28 до 5,7±0,18).

Однако у телят контрольной группы наблюдается снижение количества Т-лимфоцитов в крови на 18,46%, а динамика В-лимфоцитов характеризуется незначительным их повышением на 3,9% относительно исходных данных. Такая динамика нммунокомпитентных клеток связана с иммуносупрессив -ным влиянием факторов среды и микроорганизмов (в первую очередь, вируса диареи КРС) на центральные и периферические органы иммунной системы телят.

Содержание общего белка в сыворотке крови телят опытной группы в процессе постановки опыта возрастает на 40,91%, а увеличение содержания иммуноглобулинов составляет 56,08%.

В динамике активности трансфера? у телят как опытной, так и контрольной группы отмечается повышение их активности, с той лишь разницей, что у телят опытной группы увеличение активности ферментов менее выражено.

Увеличение активности АсАТ у телят опытной группы к 21-му дню составило 54,25%, а АлАТ на 6,16%, тогда как у телят контрольной группы увеличение активности аминотрансфераз составило 71,67 и 28,04%.

Полученные результаты исследований на суборганизменном уровне свидетельствуют о высокой эффективности профилактической схемы с включением иммуностимуляторов и пробиотических препаратов. Ксимедона гидрохлорид и миксоферон в предложенных дозах положительно влияют на имму-нореактивность организма.

Мембраностабилизирующее действие ксимедона гидрохлорида на гепа-тоциты и миокардиоциты и отсутствие токсического влияния сквашенного муравьиной кислотой молока на организм телят отражено в активности ин-трацеллюлярных ферментов - АсАТ и АлАТ, уровень которых в сыворотке

крови телят опытной группы ниже, чем у телят контрольной группы. Таким образом, предложенная нами схема профилактических мероприятий является эффективной и экологически безопасной с точки зрения её оценки на субор-ганизменном уровне.

3.7. Эффективность лечебно-профилактических мероприятий на по-пуляциониом уровне

Исследование эффективности лечебно-профилактических мероприятий на популяционном уровне осуществляли в период 2007-2008 гг. Были сформированы две группы телят: опытная (п=352) и контрольная (п=445).

При когортном исследовании установлено, что наличие стресс-факторов оказывает негативное влияние на организм и шансы заболеваемости составляют 4,63%, что превышает на 94,38% шансы заболеваемости телят при отсутствии их негативного воздействия. Исключение негативного воздействия факторов среды на организм телят с помощью разработанного нами экспериментального комплекса профилактических мероприятий позволило снизить вероятность заболеваемости до 0,26%.

При оценке факторов среды как ключевых факторов, определяющих сохранность новорожденных телят, с использованием метода «случай контроль» установлено, что при проведении целенаправленных лечебно-профилактических мероприятий шансы сохранности составляют 49,25%. В то же время пренебрежение ветеринарно-санитарными правилами и нормами получения и выращивания новорожденных телят снижает шансы сохранности на 87,69% до показателя 6.06%.

Анализ интенсивности проявления эпизоотического процесса показывает, что при содержании новорожденных телят в условиях, где негативное влияние факторов риска сведено к минимуму, заболеваемость телят смешанными формами инфекционных диарей составляет 21,02%, летальность - 9,45%, а смертность - 1,98%, тогда как в группе контрольных животных (п=445) данные показатели выше в 3,9; 1,8 и 7,1 раза соответственно.

Большое значение для оценки интенсивности проявления эпизоотического процесса имеет установление сезонности проявления заболевания в течение года. При отсутствии целенаправленных профилактических мероприятий в условиях базового хозяйства в течение всего года заболеваемость телят находилась на уровне 38,9% с выраженными сезонными надбавками в декабре, феврале - апреле месяце. Это свидетельствует как о выраженной сезонности смешанных форм диарейной патологии новорождённых телят, так и о непрерывности эпизоотического процесса во времени.

При проведении: комплексных профилактических мероприятий круглогодичная заболеваемость телят отсутствует в течение четырёх месяцев. Это доказывает возможность прерывания эпизоотического процесса во времени и свидетельствует о высокой эффективности предлагаемых профилактических мероприятий.

При проведении полного комплекса лечебно-профилактических мероприятий заболеваемость новорожденных телят сокращается на 79,78% (с 366 до 74 голов), летальность снижается на 88,88% (с 63 до 7 голов), а сохранность телят составляет 98,01%, что на 12,17% выше, чем в контрольной группе - 85,84%

На основании проведенных исследований следует сделать вывод, что предлагаемые методы лечения и профилактики являются высокоэффективными и востребованными в условиях животноводческих хозяйств Нижегородской области.

ВЫВОДЫ

1. Ассоциированный вирусно-бактериальный гастроэнтерит новорождённых телят является факторным заболеванием. Анализ интенсивности проявления эпизоотического процесса показывает, что при содержании новорожденных телят в условиях нарушения санитарно-гигиенических норм и режимов технологии выращивания в условиях функционирования инфекционной паразитарной системы, соактантами которой являются вирусы, бактерии и крупный рогатый скот, заболеваемость составляет 82,24%, летальность -17,21%, смертность - 14,15%. Роль средовых факторов риска как критических механизмов, определяющих возникновение манифестаций, подтверждается коэффициентом множественной корреляции г=0,844 и показателем шансов заболеваемости 4,63. При этом из всей совокупности факторов наибольшее влияние на развитие заболеваемости оказывает микробная загрязненность воздуха. При сохранении негативного влияния факторов среды на организм животных эпизоотический процесс поддерживается круглогодично на уровне заболеваемости 38,9% с выраженными сезонными надбавками в зимне-весенний период.

2. Манифестная форма вирусно-бактериального гастроэнтерита свойственна новорождённым телятам, менее адаптированным к условиям среды и имеющим низкие показатели иммунобиологической реактивности. Латентная регистрируется у взрослого поголовья и спорадически проявляется абортами.

Иммуноморфологическая перестройка в центральных и периферических органах иммуногенеза при ассоциированных гастроэнтеритах телят характерна для вторичного иммунодефицита и сопровождается:

- в тимусе уменьшением плотности заселения органа тимоцитами и выраженным апоптозом и некрозом лимфоидных меток.

- в мезеитериальных лимфоузлах уменьшением Т- и В-зависимых зон лимфоидных образований, метаплазией лимфоидной ткани в жировую и проявлением воспалительных процессов.

- в селезенке проявляется резким снижением плато белой пульпы и диаметра лимфоидных фолликулов.

3. Результативность диагностики ассоциированного вирусно-бактериального гастроэнтерита телят определяется её комплексностью, с использованием эпизоогологических параметров популяции, её клинико-

эпнзоотологического статуса, показателей иммунологических, патоморфоло-гических, вирусологических и бактериологических исследований.

4. При осуществлении терапевтических мероприятий по разработанной нами методике лгооцимная и бактерицидная активность сыворотки крови и фагоцитарная активность клеток крови у телят возрастают на 81,23%, 197,9% и 42,0% соответственно. Содержание Т- и В-лимфоцитов увеличивается на 52,68% и 74,13% соответственно. Одновременно наблюдается снижение лейко-Т-клеточного и лейко-В-клеточного индексов на 82,75% и 90,57%.

При осуществлении разработанных нами профилактических мероприятий, затрагивающих все аспекты причинности и патогенеза заболевания, лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови возрастают на 65,82% и 135,69% (Р<0,01) соответственно. Количество Т-лимфоцитов в крови телят увеличивается на 66,14% (Р<0,01), а В-лимфоцитов на 95,61%. Параллельно и взаимосвязанно с этим происходит снижение индексных показателей. Лей-ко-Т-клеточный индекс снижается на 70,93%, лейко-В-клеточный индекс -на 75,42% соответственно.

5. Применение нового дезинфектанта ГААС-45 позволяет эффективно обеззараживать воздух в помещении в присутствии животных и обеспечивает поддержание санитарно-гигиенических параметров по показателю микробной загрязнённости воздуха в соответствии с нормативами в течение 2 дней.

6. Система лечебно-профилактических мероприятий, включающая комплексную диагностику, коррекцию приобретённого иммунодефицита, использование пробиотических препаратов и средств обеспечения экологической и эпизоотологической безопасности, является высокоэффективной и позволяет контролировать эпизоотическую ситуацию и снижать напряжённость эпизоотического проявления заболевания в популяции крупного рогатого скота. При проведении полного комплекса лечебно-профилактических мероприятий заболеваемость новорожденных телят сокращается на 79,78%, летальность снижается на 88,88%. Сохранность при этом составляет- 98,01%.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ

1. Основные направления эпнзоотологического надзора при ассоциированном вирусно-бактериальном гастроэнтерите новорождённых телят.

2. Комплексная система мероприятий по борьбе и профилактике ассоциированного вирусно-бактериалыюго гастроэнтерита новорождённых телят.

3. Система контроля качества лечебно-профилактических мероприятий при ассоциированном вирусно-бактериальном гастроэнтерите новорождённых телят.

4. «Диагностика, терапия и профилактика ассоциированного вирусно-бактериального гастроэнтерита телят» (рассмотрено, одобрено и рекомендовано к изданию Комитетом государственного ветеринарного надзора Нижегородской области от 06.08.2009г.). - Н. Новгород, 2009. - 5,0 печ. л.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Блохин A.A. Гидрохлорид ксимедона в коррекции иммунодефицита при смешанном вирусно-бактериальном энтерите / A.A. Блохин, Д.А. Яшин, И.Г. Павлова [и др.]. // Мат. XIX Международной научно-прахтической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии» Саш<т-11етербург, 23-24 мая 2007г. - СПб., 2007. - С. 50-51.

2. Блохин A.A. Показатели крови и патологоанатомические изменения у телят при сметанном вирусно-бактериальном энтерите и иммунокоррекции / A.A. Блохин, Д.А. Яшин, И.Г. Павлова, А.И. Молев [и др.]. // Современные проблемы патологической анатомии, патогенеза и диагностики болезней ясивотаых: сб. науч. тр. по мат. 16-ой Всероссийской научно-методической конференции по патологической анатомии животных 20-22 сентября 2007г. - Ставрополь, 2007. - С. 38-41.

3. Блохин A.A. Клинико-морфологические изменения у телят при вирусно-бактериальном энтерите и его фармакокоррекция / A.A. Блохин // Достижения ветеринарной науки и пракгаки: сб. ст. Всероссийской научно-практической конференции 17-18 апреля 2008г. - Киров, 2008. - С. 29-31.

4. Блохин A.A. Фармакокоррекция вирусно-бактериальной диареи у телят / A.A. Блохин, В.И. Великанов, А.И. Молев [и др.]. //Мат. первого Международного конгресса ветеринарных фармакологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства», Санкт-Петербург, 20-23мая 2008г. - СПб., 2008. - С. 13.

5. Блохин A.A. Морфология лимфоидных органов у телят при микстинфекции I A.A. Блохин, А.И. Мелев, В.И. Великанов [и др.]. // Ж. «Морфология»: мат. конференции, посвященной 100-летию со дня рождения академика АМН СССР Д.А.Жданова. - Москва, 20 сенгября'2008г. - СПб, 2008. - Т. 133. - Xs4. - С. 58-59.

6. Блохин A.A. Патоморфогепез в органах иммунной системы телят в постна-тальиом периоде / A.A. Блохин // Ж. «Морфология»: мат. докладов VI Всероссийского съезда общества анатомов, гистологов, эмбриологов. - Саратов, 23-26 сентябри 2009г. - СПб, 2009. - Т. 136. - Ш. - С. 101-102.

Блохин Андрей Александрович

КЛШШКО-ЗПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ МИКСТИНФЕКЦИЙ НОВОРОЖДЁННЫХ ТЕЛЯТ В УСЛОВИЯХ НИЖЕГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени кандидата ветеринарных наук

Корректор О.Ф. Костина Компьютерный набор и верстка А. А. Блохин

Подписано в печать 20.10.2009г. Формат 60/84 1/16. Печать офсетная. Бумага офсетная. Усл. печ. л. 1,3. Тираж 100 экз. Заказ

Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия 603107, г. Нижний Новгород, просп. Гагарина, 97

Типография НГСХА

Развитие сельского хозяйства России, как известно, является одним из приоритетных национальных проектов. В связи с этим во многих хозяйствах страны происходит интенсификация производства, основной целью которой является увеличение производства продукции животноводства. При этом экономическая эффективность производства зависит от ряда ключевых показателей, таких как: выход телят на 100 голов маточного поголовья, сохранность молодняка, уровень продуктивности и других.

Обеспечение сохранности нарождающегося молодняка сельскохозяйственных животных является одной из важнейших задач животноводства. Достоверно известно, что наибольший отход телят наблюдается в первые дни после рождения. В большинстве случаев (до 95%) это вызвано развитием заболеваний, проявляющихся клинически диареей, и этиологически обусловленных воздействием ассоциаций вирусов и бактерий (В.М. Апатенко, 1990 Х.З. Гаффаров и соавт., 2002; А.И. Молев и соавт.,2004; В.В. Сочнев и соавт., 2000). Данные заболевания имеют широкое распространение, сопровождаются высокой заболеваемостью (50-100%), летальностью (30-86%) и смертностью (25-78%) и наносят значительный экономический ущерб.

Возникающие вирусно-бактериальные ассоциации объединяют чаще всего условно-патогенных возбудителей, взаимодействие которых приводит к развитию болезни. (Петровская В. Г., Марко О. П., 1976; Апатенко В. М.,

1990; Коромыслов Г. Ф. и соавт., 1993). Среди многообразия вирусных аген тов, особая роль в возникновении заболеваний проявляющихся диарейным синдромом отводится ротавирусам (род Rotavirus), коронавирусам (род Coronavirus), вирусу вирусной диареи КРС (род Pestivirus). Инфицированные ими животные становятся более восприимчивыми к воздействию условно-патогенной микрофлоры, отягощающей течение инфекционного процесса (В.Н. Сюрини соавт., 1998; С.А. Mebus et al., 1973).

Одновременное взаимодействие нескольких инфекционных агентов с организмом животного является сложным и сопровождается качественно новым ответным процессом, который не может быть выражен простым суммированием признаков, характерных для каждой из основных составляющих его моноинфекций.

Крупные комплексы и животноводческие фермы представляют собой искусственные экологические системы со своим спектром микроорганизмов. Неблагоприятные экологические факторы среды такой системы приводят к развитию стрессов и, как следствие, - обуславливают иммунодефицитное состояние у животных. Поэтому эффективность профилактических мероприятий, проводимых только путем вакцинаций и пассивной иммунизации с применением специфических гипериммунных сывороток, недостаточна, не обеспечивает формирования стойкого иммунитета ко всем этиологическим компонентам (Панина А. Н., Серых Н. И. и соавт., 1996). Более того, низкие адаптационные возможности новорожденных животных к многочисленным стрессовым факторам, возникающим при нарушении технологии получения, содержания и кормления, а так же накопление биологических агентов во внешней среде животноводческих помещений, необоснованное применение средств, обладающих иммунодепрессивными свойствами (в частности антибиотиков), обуславливают массовое проявление острых кишечных расстройств. (Плященко С. И., Сидоров В. Г., 1987; Маринин Е. А. и соавт., 1997; Вавина О. В. и соавт., 1999).

Недостаточность иммунной системы, связанная с морфологическими и функциональными особенностями развития новорожденных, углубляет тяжесть течения заболеваний, способствует частым рецидивам, обуславливает слабую эффективность специфических методов лечения и профилактики, провоцирует патогенность банальной микрофлоры.

В результате эпизоотический процесс развивается как мультифакторная инфекция, с обязательной персистенцией возбудителей у животных на фоне иммунодефицита. Персистенция вирусов у животных является необходимым 5 условием переживания их в природе и функционирования паразитарной системы. Эволюционно это обусловлено иммуносупрессивным влиянием вирусов на органы и клетки иммунной системы (Фёдоров Ю.Н. 2002; Мищенко В .А. 2005; Шахов А.Г. 2005).

Вследствие постоянно действующих в среде обитания животных неблагоприятных факторов и персистенции возбудителей происходит снижение неспецифической резистентности и иммунореактивности организма животных. Такое разностороннее иммуносупрессивное воздействие абиотических и биотических факторов среды приводит к тому, что функционирующая инфекционная паразитарная система приобретает качественно новый уровень взаимоотношений между соактантами. Все это проявляется в развитии нетипичных клинических признаков и патоморфологических изменений.

При этом диагностика этиологических факторов заболевания становится затруднительной.

Эти обстоятельства настоятельно диктуют применение комплексного эпизоотологического подхода и мониторинга экосистемы хозяйства в целом с установлением пространственного и временного распространения и динамики заболевания с целью установления причинно-следственных связей в интересах решения вопросов профилактики и оздоровления на популяцион-ном уровне (Макаров В.В. с соавт. 2005).

Учитывая все выше сказанное, в комплексе лечебно-профилактических мероприятий при мультифакторных заболеваниях необходимо применение методов и средств, направленных на устранение иммунодефицитных состояний и повышения резистентности организма, а также средств обеспечивающих экологическую и эпизоотологическую безопасность животных. За последние годы с целью стимуляции иммунной системы и коррекции иммуно-дефицитов было предложено большое количество разнообразных препаратов, у многих из них экспериментально и клинически была подтверждена иммуностимулирующая активность (Передерий В. Г., 1990; Придыбайло Н. б

Д., 1991; Кветков В. П., 1992; Макаров Д. В. и соавт., 1996; Webster A. D., 1983; Hobbs Y. 1984).

Цель работы:

В условиях животноводческих хозяйств в сравнительном аспекте и динамике провести многофакторный анализ и изучить характер эпизоотического процесса при смешанной диарейной патологии новорожденных телят и на этой основе усовершенствовать технологические, ветеринарно-санитарные и специальные мероприятия по сохранению здоровья животных с использованием экологически безопасных препаратов и средств эпизоотической безопасности.

Задачи исследований:

В условиях хозяйств Нижегородской области изучить эколого-эпизоотологические предпосылки болезней новорожденных телят, проявляющихся синдромом острого расстройства пищеварения.

Изучить клинико-морфологическую манифестацию ассоциированных гастроэнтеритов новорождённых телят.

В сравнительном аспекте изучить иммунологические изменения в организме у телят при ассоциированном вирусно-бактериальном гастроэнтерите.

Научно обосновать и усовершенствовать систему лечебно-реабилитационных и профилактических мероприятий при вирусно-бактериальном гастроэнтерите новорождённых телят с использованием иммуностимулирующих, антибактериальных, пробиотических, симптоматических и биологических препаратов и дезинфицирующих средств.

Научная новизна.

Получены новые научные данные о воздействии экологических и эпизо-отологических факторов как пусковых механизмов возникновения и развития ассоциированных (вирусно-бактериальных) гастроэнтеритов новорождённых телят.

Доказано, что использование клинико-эпизоотологических, морфологических и иммунологических методов исследований значительно повышает эффективность комплексной эпизоотологической диагностики этих болезней и позволяет осуществлять эпизоотологический мониторинг за их эпизоотическим проявлением и эпизоотологическими параметрами популяции крупного рогатого скота.

Установлено, что ключевым моментом в возникновении ассоциированного гастроэнтерита телят является сниженная резистентность и низкий иммунный статус новорождённых телят, которые обусловлены в равной степени иммуносупрессивным влиянием патологической стресс-реакции и вируса диареи КРС.

Впервые научно-обосновано применение иммуностимуляторов ксимедо-на гидрохлорида и миксоферона при коррекции стресс-индуцированного и вызванного вирусом диареи КРС вторичного иммунодефицита у телят.

Впервые показана необходимость применения дезинфектанта ГААС-45 как средства обеспечивающего экологическую и эпизоотическую безопасность на каждом из этапов системы выращивания телят.

Разработаны комплексные схемы лечебно-реабилитационных и профилактических мероприятий при ассоциированных гастроэнтеритах телят с использованием иммуностимулирующих (ксимедона гидрохлорида и миксоферона), пробиотических (ветом 1.1., сквашенное органическими кислотами молоко), антибактериальных, симптоматических и биологических препаратов, а также средства экологической безопасности — ГААС-45.

Практическая значимость.

Научно обосновано и практически подтверждено, что эпизоотическое проявление факторных ассоциированных гастроэнтеритов телят — процесс управляемый. Разработанные схемы лечебно-профилактических мероприятий оказались востребованными и используются с высокой эффективностью ветеринарными врачами производственной и государственной ветеринарной службы Нижегородской области в хозяйствах промышленного типа, небла8 гополучных по moho- и ассоциированным вирусно-бактериальным гастроэнтеритам телят.

На защиту диссертации выносятся следующие основные положения:

Ассоциированный вирусно-бактериальный гастроэнтерит телят является факторным заболеванием, а постоянное воздействие факторов риска обуславливает его энзоотичность.

Клинико-морфологическая манифестация ассоциированного вирусно-бактериального гастроэнтерита телят обусловлена уровнем неспецифической резистентности и иммунного статуса их организма и составом ассоциации, где ведущую роль играет вирусный компонент.

Использование ксимедона гидрохлорида и миксоферона в комплексе лечебно-реабилитационных и профилактических мероприятий при стресс-индуцированном и вызванным вирусом диареи КРС вторичном иммунодефиците телят является высокоэффективным.

Применение средств экологической захциты животных в условиях крупных животноводческих ферм является важной составляющей технологического процесса получения и выращивания телят.

Способы лечения и профилактики ассоциированного вирусно-бактериального энтерита телят основанные на комплексном применении иммуностимулирующих, антибактериальных, пробиотических, симптоматических и биологических препаратов, а также средств экологической безопасности являются доступными и эффективными.

Пути реализации.

Результаты исследований могут быть использованы при разработке научно-обоснованных систем по диагностике и мерам борьбы с ассоциированными диарейными заболеваниями новорождённых телят в различных регионах страны, а также в учебно-педагогическом процессе при подготовке специалистов ветеринарного и биологического профиля, на семинарах и курсах переподготовки в системе послевузовского образования.

Апробация работы.

Тема диссертации, её основные положения, направления и результаты исследований рассмотрены на заседании совета ветеринарного факультета ФГОУ ВПО «НГСХА» (2006-2009). Материалы диссертации доложены и одобрены на научно-практических конференциях по проблемам ветеринарии (Киров, 2008, Санкт-Петербург, 2007); на 16-ой Всероссийской научно-методической конференции по патологической анатомии животных «Современные проблемы патологической анатомии, патогенеза и диагностики болезней животных» (Ставрополь, 2007); на первом Международном конгрессе ветеринарных фармакологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства» (Санкт-Петербург, 2008); на научной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения заслуженного деятеля науки РСФСР, академика АМН СССР Д.А.Жданова (Москва, 2008); на У1-м Всероссийском съезде общества анатомов, гистологов, эмбриологов (Саратов, 2009).

По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ, в т.ч. 2 в центральных изданиях рекомендованных ВАК РФ для публикации материалов докторских и кандидатских диссертаций.

Внедрение.

Результаты научных исследований под авторским надзором и с положительным эффектом внедрены в 2006-2009 годах в хозяйствах Нижегородской области и вошли в издание «Диагностика, терапия и профилактика ассоциированного вирусно-бактериального гастроэнтерита телят» (рассмотрено, одобрено и рекомендовано к изданию Комитетом государственного ветеринарного надзора Нижегородской области от 06.08.2009г.). - Н. Новгород, 2009.

Объём и структура диссертации.

Диссертационная работа изложена на 184 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, собственных результатов исследований и их обсуждения,

выводы

1. Ассоциированный вирусно-бактериальный гастроэнтерит новорождённых телят является факторным заболеванием. Анализ интенсивности проявления эпизоотического процесса показывает, что при содержании новорожденных телят в условиях нарушения санитарно-гигиенических норм и режимов технологии выращивания в условиях функционирования инфекционной паразитарной системы, соактантами которой являются вирусы, бактерии и крупный рогатый скот, заболеваемость составляет 82,24%, летальность -17,21%, смертность - 14,15%. Роль средовых факторов риска как критических механизмов определяющих возникновение манифестаций подтверждается коэффициентом множественной корреляции г=0,844 и показателем шансов заболеваемости 4,63. При этом из всей совокупности факторов, наибольшее влияние на развитие заболеваемости оказывает микробная загрязненность воздуха. При сохранении негативного влияния факторов среды на организм животных эпизоотический процесс поддерживается круглогодично на уровне заболеваемости 38,9% с выраженными сезонными надбавками в зимне-весенний период.

2. Манифестная форма вирусно-бактериального гастроэнтерита свойственна новорождённым телятам, менее адаптированным к условиям среды и имеющим низкие показатели иммунобиологической реактивности. Латентная регистрируется у взрослого поголовья и спорадически проявляется абортами.

Иммуноморфологическая перестройка в центральных и периферических органах иммуногенеза при ассоциированных гастроэнтеритах телят характерна для вторичного иммунодефицита и сопровождается:

- в тимусе уменьшением плотности заселения органа тимоцитами и выраженным апоптозом и некрозом лимфоидных клеток.

- в мезентериальных лимфоузлах уменьшением Т- и В-зависимых зон лимфоидных образований, метаплазией лимфоидной ткани в жировую и проявлением воспалительных процессов.

- в селезенке проявляется резким снижением плато белой пульпы и диаметра лимфоидных фолликулов.

3. Результативность диагностики ассоциированного вирусно-бактериального гастроэнтерита телят определяется её комплексностью, с использованием эпизоотологических параметров популяции, её клинико-эпизоотологического статуса, показателей иммунологических, патоморфоло-гических, вирусологических и бактериологических исследований.

4. При осуществлении терапевтических мероприятий по разработанной нами методике лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови и фагоцитарная активность клеток крови у телят возрастают на 81,23%, 197,9% и 42,0% соответственно. Содержание Т- и В-лимфоцитов увеличивается на 52,68% и 74,13% соответственно. Одновременно наблюдается снижение лейко-Т-клеточного и лейко-В-клеточного индексов на 82,75% и 90,57%.

При осуществлении разработанных нами профилактических мероприятий, затрагивающих все аспекты причинности и патогенеза заболевания лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови возрастают на 65,82% и 135,69% (Р<0,01) соответственно. Количество Т-лимфоцитов в крови телят увеличивается на 66,14% (Р<0,01), а В-лимфоцитов на 95,61%. Параллельно и взаимосвязано с этим происходит снижение индексных показателей. Лей-ко-Т-клеточный индекс снижается на 70,93%, лейко-В-клеточный индекс — на 75,42% соответственно.

5. Применение нового дезинфектанта ГААС-45 позволяет эффективно обеззараживать воздух в помещении в присутствии животных и обеспечивает поддержание санитарно-гигиенических параметров по показателю микробной загрязнённости воздуха в соответствии с нормативами в течение 2 дней.

6. Система лечебно-профилактических мероприятий, включающая комплексную диагностику, коррекцию приобретённого иммунодефицита, использование пробиотических препаратов и средств обеспечения экологической и эпизоотологической безопасности является высокоэффективной и позволяет контролировать эпизоотическую ситуацию и снижать напряжённость

160 эпизоотического проявления заболевания в популяции крупного рогатого скота. При проведении полного комплекса лечебно-профилактических мероприятий заболеваемость новорожденных телят сокращается на 79,78%, летальность снижается на 88,88%. Сохранность при этом составляет- 98,01%.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ

1. Основные направления эпизоотологического надзора при ассоциированном вирусно-бактериальном гастроэнтерите новорождённых телят.

2. Комплексная система мероприятий по борьбе и профилактике ассоциированного вирусно-бактериального гастроэнтерита новорождённых телят.

3. Система контроля качества лечебно-профилактических мероприятий при ассоциированном вирусно-бактериальном гастроэнтерите новорождённых телят.

4. «Диагностика, терапия и профилактика ассоциированного вирусно-бактериального гастроэнтерита телят» (рассмотрено, одобрено и рекомендовано к изданию Комитетом государственного ветеринарного надзора Нижегородской области от 06.08.2009г.). -Н. Новгород, 2009. - 5,0 печ. л.