Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.05) на тему:Клиническое состояние организма, местные и общие показатели естественной резистентности при кератоконъюнктивите молодняка крупного рогатого скота, вызываемого Moraxella bovis

МОСКОВСКАЯ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ВЕТЕРИНАРНАЯ АКАДЕМИЯ имени К.И.СКРЯБИНА

На правах рукописи

СОТНИКОВА. Лариса Федоровна

клиническое состояние организма, местные и общие показатели естественной резисте1шюсти при кератоконъюнктивите молодняка крупного рогатого

скота,-вызываемого Моголе LIcl Wis

16.00.05 - ветеринарная хирургия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Москва - 1992

Работа вкполнона в Московской ордена Трудового Крясногб Знамени ветеринарной академии смени К.И.Скрябина

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор Петраков К.А.

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор Борисович В.В. доктор ветеринарных наук, доцент Белоусова Р.В.

Ведущая организация: Воронежская аграрная академия им. К.Д.Глинки Защита диссертации состоится " ^ " tXiLp^^Ui 1992 г> . в(О час на заседании специализированного совета Д 120.36.01 по защите диссертации ка соискемяг ученой степени доктора наук в Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной академии имени K.M. Скрябина / 109-172, Москва, ул. Академика Скрябина,23, тел.: 377-93-83/ .

С диссертацией ыокно ознакомиться d библиотеке академии. Автореферат рааослан

«¿реёралО^ 1992г.

Ученый секретарь специализированного совете

Слесаренко H.A.

• Актуальность проблема. Среди болезней, которые з настопцее ?емя имеют тевденцав к распространении, видное место замша»? ioooBue кератовонъюннтивлты. Кератононъпнктивити раздичкой эта-югии у крупного рогатого енота встречается как в вашей страна, ш а за рубежом н наносит больиоа экономический уиерб гнвотгго-»дческим хозяйствам (Авроров В.Н., 1973; Плахотек а,В.„ \973f гсииов 1938j Ualph Т. 11,, 19801 Harris Н.Е, at el,, 19Б0{

Latter К.В. et al., 1982).

Этиология,патогенез, клиническое проявление кератоконызнн-'внтов крупного рогатого скота значительно иаменилиоь а требувг >вого подхода в их изучении. Это необходимо еие и потоку, ч?о I судествует единого мнения об основном апологическом агедто, is ив а еде и массовые поражения глаз у животных. В настоящее эр ем л ■довоЗ состав возбудителой кератоконьюнктиввтов расширился а зо-едователи называет среди них ринкетсии, вирусы, талязии, хдаиз-н, мнкоплазмы. Большинство авторов за рубежом, а сейчас и в й стране, придержиаавтея бактериальной этиологии, отводя в&жзуа ль Uoraxella bovia, а также снижении естественной реэиотевтно-в и ишунологнческой реактивности крупного рогатого скота (Ка-улин U.E., 1982» Андриаоян В.к., 1988; Копенки» К.П., 1989).

Однако ряд вопросов по этиологии, патогенезу, иммунологиче-ой реактивности при кератоконыонктииите молодняка крупного ро-того икота, визиваеиогй uoraxella ЪаПв, недостаточно изучены тробувт детального в воеоторониего исследования.

Исходя из атого обстоятельства, особый интерео представляет учение патогенеза кератоконъюнктавита мододаака крупного рога-го скота, вскрытие закономерностей обдей и местной защиты орга-з«а при глазной патологии, что в конечном очвтв прадопроделнт чение и исход заболевания, наметит эффективные а экономичные особы леченая и профилактики. Решение данной проблемы является зой из насущных практических задач в области ветеринарной оф-• иьмологии.

Педь и задачи исследования. Цель» исследования является азу-«ю патогенеза кератоконгюнктивита молодняка крупного рогатого эта, выяснение роли местных и общих &зктороа естаственноа реза-знтностк в развитии и течении патологического процесса.

Задачи исследования:

1. Экспериментально воспроизвести кератоконъанктивит молод-

зяка крупного рогатого скота, используя в качестве этиологического агента УогахвПа Ъот1в. ■

2. Изучить влияние кератоконълшпавита на клвнико-гематоло-узческие показателя.

3. Изучить дянашшу гуиоральашс факторов естественней резв-cseasEoctH в сыворотке крови а слезной жидкости больных керато- ' ¡соаъвштвитои вивотвых.

4. Исследовать влияние бактериальное сенсибилизации конъюн-миш eu развитие и течение болезни.

Исследования выполнены в соответствии с планои НИР ИВА жие-i^i К.Я.Скрябина (В гос.регистрации 01860025652).

Даучаая довязяа. Вперзые с использованием современных клен*. ::о-иор5ологвчеоквх и иммунологических методов всследовавия уста-яовдаии общие патогенетические закономерное« течения я развитая керагйзонмактнииа молодняка крупного рогатого скота, влияние -л'о пз odaee состояние организма в веспецв(яческие факторы гумо-ральаого шауннтета.

Згсаеряаевтальво воспроазведев кератоконъекктввят молодняка зруяаого рогатого скога, изучена клиническая картина в влияние сто не. некоторые геиатологзчеекке показатели.

йлерзы'з s навей стране приведены сведения о содержание выну когдойуазаоз класса в слезиоа хндкоств здоровых и больных

-lii-boliiluz. • •

Изучала датаяка бактерицидной, азводвыпоВ ыстнввости, обг4е iя ййлзс з C23S0 й сиворонка крогв при керсюкогавялтаввте ыолод ;:л::г груезого porasore скогь.

Лоаучсига. сэадгдак о влннвиа бактериальной обсеыенеспзсги кл р«агя»ав к гсчоаве габолевогяс.

"еоой?ачаская а аэаатичвехвя яначныость. Реаулыатв воучевя .зяззийа К'Лрьгйзюаьэззкгвгга иолодвякь круввого рогатого скота,вь '¿¿z-jazoxb UtcKasilii '¿avis, нь общее осстоавве оргавази® я весп« .4Уфш>ски> фыиорз sjaapxaisero шауниок возвел ы>? ргсхрвхь в u'^fte-a вгггзк-лв а кмогевез гд&глой патоаогвв.

Swyewoaa мйя ддаяие ©si взвевешв седержавна вииувогдебу-.илзэ 2 сайги ¡гго: й-гьандызйг: кг оодареаияв в сиворонке крова ои лау** а еуцесгзезг^и казака сякого оииоэа оеврегорвкг в .тледайаадогаг хаилтгагяс^уяаЕОх, учвяваря» а форанроваюге ыесг: sasiysaiiл'«..

>ьзуsosmzfixesss кеогедоваввВ .costscsa д<

зтовврное повышении общего белка и бактерицидной активности сыво-)отки крови в.острый период заболевания, что указывает ва зовле-»енив в воспалительный процесс отдельных механизмов обцей заэдти )рганизма.

Установлено влияние бактериальной сенсибилизации конъюнктм-¡и на развитие и течениа болезни. Снижение изучаемых факторов ао-■о^тввиной слезной хидг.оста на фоне интенсивного размножения мик-юфлори^ аа слизистой оболочке глаза, снижает местную резистент-юоть конъюнктивы, усугубляет патологический процесс и споообст-iyai образование язви роговицы.

Выявлено болыгоо значение дязоцвма, как фактора неспецифиче-кой местной окулярной зашиты.

Результаты наших исследований позволяют прогнозировать тече-ие и исход болезни, даст основание для выбора методов, тактики е'чеция и профилактики кератокоыюнктивита молодняка крупного ро-атого скота, вызываемого uoraxolla bovis.

Основные положения, выносимые на защиту;

1. Закономерности общей задиш организиа при кератоконъюнк-ивите молодняка крупного рогатого скота.

2. Значение местной окулярной задаты в развитии воспалитель-ых признаков переднего отрезка глаза.

3. Влияние кератоконъюпктивата на клииико-гематологичеокие эказатели,

4. Взаимосвязь мекду развитием я течением патологического роцесса в переднем отрезке глаза, местными показателями естест-знной резистентности и бактериальной обсомененносты) конъвнкта-i.

Структура работы. Диссертация состой? из 3 глав, которые сличают общую характеристику материала и методические вопросы, i локальное обсуждение и, наконец, заключение, где представлеяи 1Иболее существенные положения диссертации и обсуждены возможные >покти ее теоретической и практической реализации.

Обцкй объем работы 220 страниц машинописного текста, 15 ри-гнкоз, 10 таблиц. Библиография содержит 146 наименований, в том юле 81 отечественних и 67 зарубежных авторэв.

Апробация работы и публикация результатов исследования. Ре-'льтаты исследования долодены на конференции молодых ученых МВА 983), на Всесоюзных.конференциях ".Актуальные проблемы ватервнар-ifl и зоотехнической науки и интенсификации тавотвоводства. X 703 * I

летаю ИЗД." (Москва, 1990), *Хг.рургичзские болезни сельскохозяИст-зааащс кпвогных11 СЛенинград,.1989), "Проблемы хирургической пато-зогяи сельскохозяйственных животных" (Белая Церковь, 1991)» научной конференции профессорско-преподавательского состава ИВА. (198£ 1991>. . ; «

•2. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МАТЕРИАЛА И МЕТОДИЧЕСКИЕ ВОПРОСИ ИССЛЩОВАИИЙ '' "

О долья достижения объонтивиостя в оценке обцеЗ к местной рсз;;ст2К';соста у крупного рогатого окота пря массовых. кератоконъ-j)íiHrasi::rbx проЕрдево сравнительное сопоставление показателе ее-•¿•ооузоййой р&экстности эксперанентальвцх н конт^Ъльиых животных. Ъ ийспорииои'гапьаих исследовании. кспользовался крупный рогатый ског 4Sp2ö-fl0CTj}03 породы* в ■ возрасте 5-5 месяцев, в количестве йО голов: йз.шис 15 голов составляли вивотвые экспериментальной группы а 5 х-олоз ЕКвотпые контрольной группы."

«lai'epüaa дая зарагеняя получеа в колхозе им. Владимира Ильиче, ÜookoscroS области от больных яивотных. Животным с острыми прз síuuceüe кэратокоааваагЕвкта в erze:;B свод ховышнтввц помещали ifi'üpäasiaa £&shk, кезодяэдася на конце проволоки, после чего пол; чошш2 гмйрггл аатодои гаэоаа вйсезалп на 5£ вровявоВ агар, я к: зубнроюааг пря 'I 35cCj SS часоа. При осмотре посевов обраяалг. bei ;jüuxe ал удокш» колоезя; свро-4влав прозрачные, кругхвв, ровкш ирга В-гсуокпгои, дкаиетрои 1-2 ва, которые вкоеь пересевалп :rp022üöS агар я явяубагровалн пря Т 37°С, 36 часов. 'ъ 4iä2y Eüsp« с нульгуральпыы ростои síortacalla bovia добаз лют о'-'орзаьгшЗ psaoscfauscsslä раогвор, зстрахявав доводили кои ■звз'-федгз й'З Еозцептргщвз определяли по ста

JIíipvj' ¡JySÜOCKJ. . .

7' емлйрам^аусаьаих з soHvpoxsEK! гзвбгвых перед гаралесава иргавд&с* iaspodsmori^soKSÄ хаскедозагзя ховгютиввадьвого соде .•iü¡02»0 -í. 2ал«аэ 52огас»!?.г bovia» З^рззокзв осуществляла njse* ззвдваза 2 ezssesseabsaS охоЗ рогоггзд Ofl tut подготовленной eye ¿•ö23ia:. Коягродьжа аазамзм ггвдшз 0,1'гя «дорешвого фазаозм

г.ОСКОГО p£üV2¿?&<

Eß 1 s 2 А V¡"ó, rDxSO oy«x= поело з&рагеигк ссаучаав ' лгвггув' аддо«» ¡.'s ocxvícto гхегс,'& eaxra ¡га 1í2s5»'!0,15s20,S^ хсьз», крозь es кре^цэй зон«:.

Ssaasias» гроздзгось мгагс&'ЗЗйз сйследсзбгге аавомкг, к:

мерялись температура тела, частота пульса, Фюло дыхательных Двн-жений животных. Исследование общего состояния, морфологического состава крови проводили по общепринятым методикам. Особое значение уделяли органу зрения, при этой обращали внииание на положение век н их краев, величину глазной цели, характер и количество выделяемого экссудата. Пальпацией определяли местную температуру, болезненность век и глазного яблока. При осмотре коныанктивы обращали виимание на ее целостность, цвет, бархатистость, отечность, инъекции сосудов. При осмотра роговицы обращали внимание на ео зеркальность, блеск, цвет, инъекции сосудов, дефекты на поверхности, инфильтрат, наличие вросших сосудов. Для определения ' эрозий и язв на роговице в..конъюнктивальний мешок закаливали М раствор флиоресцеина.

Количество белка в сыворотке крови и слезной жидкости определяли на спектрофотометре specord uv Vis СГДР).

Активность лнзоцима сыворотка крови и слезной жидкости определяли по методу .Е.Оваогтал (1966) в модификации П.А.Емедьянен-ко и соавт. (I960), основанному на способности лизоцима лизиро-* вать клеточные оболочки :uc.Lyaodellcticu3, взвешенные в агаре.

Бактерицидною активность сыворотки крови и слезной жидкости определяли по методу и.А.Смир'новой и 'Г.А.Кузьминой (1966).' .

Содержание иммуноглобулинов класса ü,ii в сыворотке крова я иммуноглобулинов классов a,u,g в слезной жидкости определяли методом радиальной иммунодиффузии (Емельнненко П.А. я соавт.,1S00).

Микробное .число слезной жидкости определяли путем разбавления материала фаз.раствором и посевом полученного разведения на ' ИЛА. После инкубации при X 37°С 24 часа подсчитывали число колоний и уиноаали на разведение. Всего исследовано .150 проб слезной «идкостя u 100 проб сыворотки крови. •

Матеиатическую обработку полученных данных с заданной (не . ионее 95Í) степенью вероятности, а такке статистический анализ получанных результатов проводили с использованием 31¿5 по специально разработанным программам.

3. КЛИНИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ ОРГАНИЗМА ti НЕКОТОРЫЕ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ .IIPU KEP ATS СН'Ь СШ'ЛМВ НТЕ U0i0£HHKA •КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА . ' .

Однократное введение в эпителиальный слоЛ роговица бактериальной взвесн Uoiaxolla bovia концентраций!1. 2x10° микробных кло-

*'0К в ил, £ объеие 0,1 ил, вызывало кератокоцъпнктивит у всех . охспириненталышх животных. Введении фенологического раствора .¡аболгвания не вызывало.'

Анализируя клинические признака по характеру воспалительных признаков переднего отрезка глаза нами выделено тра перндда: острый, подосярыЗ, хронический. Острый - характеризуется резкой ;;оцыш:тнЕакьной реакцией, обильный слезотечением, эрозией и из- , зой роговица с клеточной инфильтрацией. К 14 дни период закаачи- , дастся образованием грануляционного барьера. ПодострыЯ протекает а 14 по 20 день после заражения, характеризуется уменьшенной гра-¡¡улвыа и рассаошаннеи ин$плмрата по периферий роговицы. Хроня-чвсвай, арогеяаедяй с 20 по 35 дань, выражается в {ориированкд к р&ссасизашш рубцов роговицы.

Керауокодьвнктквиг йолодеяко крупного рогатого скота в острый период болезна вызывает угнетение общего состояния животных, аоашааг сбцую зеупзрагуру тела на 1-1,2^ (Р< 0,05), увшшчива-02 часгоау пульса аа 20-22 удара, число дыхательных движений на В хроэп о'лшчаезек повасснке количества ле?.ноалтов на 5-7

КС.

Нала уоуасоглево, чте первая половаза острого процесса (1-дзеь болезна) протохаах с наиболее выражеяньшк клЕЕичесгашя вряагшкеш а переднац -сгрззио глаза (конъюнктива, роговица, ра-дузлая оболочка). 2С оанг-гш^ завогнше отпоч&хя виражеляыЯ блефро-опага, Йодззкзнпоэть щ>а пегькацив через века глазного яблоки, ¿¿адсаеавв о« • сгроаао-слеггогого до сдазксю-гвоекого экссудата. Пэззаиикзе. гздггого явдоза, тик, отечпая,. красаого цвета, сооу-дй ггздодюжгга. Рвгоззцс. дг^-уако пскутдеггав от свро-боло-гсду-йо-гГсгр-г«його дае«». 3 цвагро роговкци декокт 5x5,5 ки, зйиазызаоа фшресцбЗЕа; овргазваадойся а зедокий цзог Скз-к; режзадО* Део ггва сарс-гогуЗого цгета-. Радугпап оболочка' ¿з?яач5С?о цгаь» аеровЕ£|;« аабрааа 2 озгадк», зрачок слабо реггг-ж01> гс, еэкг. «5-5-8 йозь Солэзе: ияздэд&гн гсворхвосхаув гао-

ал) - краевое вр^с^ге сосудов в рогозгцу, "зрчцд: оссв г&зддо от хкиба»

вгсро£ половкпе остроге Еркгес.оь вааа устааовяево (7-144 боааегл) свазегяе асспакахельваг: прЕЗшсов переднего отрез-га Ч20Р по-авдккоаз * связано с образованней гранулвцвонио-

ус барьера ва счез? поверхкоогвих сосудов роговици, которые, вет-змь к обраауь ькасгчжсьи, окрозквас* роговиц? в красный цвет.

б

Достигнув на 12-13 день краев язвы, поверхностные сосуды в виде валика офужййт инфильтрат, в результате чего образуется конусовидная припухлость, поднимающаяся над поверхностью роговицы. ' Слезотечение на 13-14'день болезни отсутствует или незначительно выражено. • *

Общае состояние экспериментальных животных в подострый и хронически!! периоды болезни удовлетворительное. Температура тела, частота пульса, число дыхательных движений в пределах* физиологической нормы. В крови отмечается снижение общего количества лейкоцитов до.уровня контрольных животных.

Подострый период болезни характеризуется дальнейшим снижением воспалительных признаков передного отрезка глаза. Конъюнктива •ярко-роговог.о цвета, умеренно отечная. Роговица по периферии прозрачная. В центральной части образуется припухлость 3x3 белого цвета о учьстками покраснения.

На 25-30 дни наступало клиническое выздоровление животных, что выражается образованием рубцов роговицы (иакули, нубекула) а отсутствием воспалительных явлений в роговице, конъюнктиве, радужной оболочки.

У контрольных животных в первые 2 дня отмечали незначительное слезотечение и ограниченное помутнение в центральной части-роговицы, инфильтрат которого рассосался к 4-му дню% СдизиЬтая оболочка бледно-розового цвета, слезотечение^ отсутствует.

4. содержание ншноглобулйнов класса а,ы,0 в слезной жидкости и сыворотке крови при керат0к0нш1ктивите ы0л0дняка крупного рогатого скота

•

Анализ результатов проведенной работы по изучению гуморальных иммуноглобулинов слезной жидкости у экспериментальных и контрольных животных показал наличие иммуноглобулинов трех классов А,а,6 из них 55* всех иммуноглобулинов до заражения соотавили иммуноглобулины класса А, 36* - иммуноглобулины класса а • и 14$ -иммуноглобулины класса Я. • .

В первую половину острого периода болезни (1-7 деиь клеточная инфильтраций и изъязвление роговицы), в олззноЯ жидкости установлено снижение иммуноглобулина А р. 2 раза (с 132+20 икг/мл до 70+3 мкг/мл), иммуноглобулинов й в 1,3 раза <чс 9У+5 мкг/мл до 5575+5,8 мкг/мл), иммуноглобулина У в 1,5 раза (,с 39+0,5 мкг/мл до 24+0,5 мкг/мл), Р \ 0,05*

'С момента появления поверхностно/, сосусь ¿-сп.-..^ донь) до образования грануляционного барьера (10-14-й день) в олеаной жидкости установлено устойчивое нарасгание изучаемых показателей. Концентрация иммуноглобулина Ы достигает наивысшего уровня на 10-й день (62+0,2 ыкг/мл), иммуноглобулина о -с аа 20-й день (240+7 мкг/мл), иммуноглобулина А - на 25-30 день (155+74 икг/мл), Р< 0,05. У всех эксперимзнтальных животных содержание иммуноглобулинов в слезной жидкости в пориод выздоровления было на 155» вьше, чем у животных контрольной группы.

Могло допустить, что понижение содержания иммуноглобулина с в первуо дни болезни связано с обильный слезотечением в результате чего происходит разбавление и вымывание изучаемого показателя. Повыиеьие- содержания иммуноглобулина во второй половине острого-процесса, по-видимому," осулестилнется за счет поиышония порозно-сти стойки кровеносных сосудов конъюнктивы, что приводит к диффузии иммуноглобулина в слезную падкость. Стабильное повыаение иммуноглобулина в подострый и хроь-:ческий периоды (признаки воспалительных явлений переднего отрезка глаза но выражены), по-видимому, связано как о диффузией ого чорез стенка сосудов, так и местным синтезом специфических антител. При этом, как указывает В.Б.Ыальханов и сОавт. (1987), дифференцировать местно синтезируемые иммуноглобулина от поступающих в результате транссудации из крови представляется затруднительным.

■ Стабильное повыаенио содержания имцуноглобулина А скорее всого связано с местным синтсгом секреторных иммуноглобулинов.

Совокупность данных литературы,"а таххо результаты налпх исследований позволяет допустить, что поступление яшуноглсбуляна Ц в слезную жидкость в острый период осуадсТЕЛязтся из развитой се. тп лимфатических соЪудов, круговой иыэце глаза (больвая молекулярная иасса иммуноглобулина делает цазолисиди'ц диффузии показателя из кровеносных сосудов). При воспалительном отеке набухает эндотелий лимфатических сосудовв происходит открытао ыезэндотолпалышх соединений, расизрение просвета лимфатических сосудов, благодаря чему пз очага госпйлошш осуществляется проникновение белкоз с больной молекулярной иассой (Щербаков Э.Р. п соазт., 1980). При енлиошш признаков воспалительного отека конызнктявы наблвдалв уменьноаио иммуноглобулина 11 в слезе. -о

Вместе с тем, нами не било выявлено существенных изменений сЬдорнания иммуноглобулинов И и с в сыворотко кровп как у зкепе-

риментальных, так и опытных животных, а имеющиеся незначительные колебания их уровня находились в-пределах физиологической'нормы.' '

Таким образом, полученные нами данные об изменении иммуноглобулинов в слезной жидкости при неизменной их содержании в сыворотке крови говорят в пользу гипотезы о сущестговании независимого синтеза секреторных и специфических иммуноглобулинов, участвующих, в формировании местного иммунитета.'.

Одновременно с этим, если признать правомерным существование в глазу местной системы синтеза секреторнцх и специфических имму- . ноглобулинов^ несущих защитные функции, то изменение их уровня в слезной жидкости может в определенной мере служить прогностический тестом и способствовать выработке рациональной терапии.

Конечно, иммуноглобулины не являются единственным регулятором патологического процесса в глазу, однако определение их наряду с другими неспецифическсуи факторами защиты (таких, как ляэо-, циы и др.), является необходимым диагностическим показателем, определявшим применение медикаментов-иммуностимуляторов'.

•

5. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ АКТИВНОСТИ ЛИЗОЦИМА СЛЕЗНОЙ ЖИДКОСТИ И СЫВОРОТКИ КРОВИ ПРИ КЕРАТОКОНЫЭНИИВИТЕ МОЛОДНЯКА. КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Для более глубокого и всестороннего анализа механизмов общей • и местной защиты организма при кератоконъхшктивитз молодняка круп- ■ ного рогатого скота било Изучено состояние лпзоцииаой активности слег ной жидкости к сыворотки крови, как одного яз лахнейшх $акто-?ов неспецкфической защити организиа от инфекции.

Выявлено, что ллэоцинная активность слезной жидкости у экспе-)йиеитал1-Н1хх и контрольных*жавотншс до болезни состзвил 305 + 72 иг/ил. И первно 2-3 дня болезнл у'экспериментальных животных .наб-шдада достоверное повыиеняо к уровня контрольных кивотных, лязо-1И1ШОЙ активности слезной жидкости до 1013+130 «кг/ил, затои к ¡-6 деэ (.инфялътрацня и изъязвление роговицы) ьровань ззучаоиого юказатзля заходился на очзнь низко« уровне - 2-^7 икр/ил, Р<^0,05 из но проявлял своп активноотз. Начиная с 10 дня поело эарахения 1Ктазность лизоцима яиеот устойчивуэ тенденции к повизвЕга, дости-■ая 624+ЬЗ икг/мл, к 20 дню болезни, после чего содержание; ого виаается до уровня контрольных яивотшос, до 410 + 33 икг/ил -: 30 дню. '

Повышение з 3 раза лизоцимной активности слезы в парвыо

2-3 дня, по-видимому, связано с гиперфуш4цией слезных желез, являющихся .одним из основных источников синтезирования лизоцима. Прж этой, как указывает В.Б.Борисавич (1977), вовлекаются в ак- ' тивный секреторный процесс ацидусы отдельных долек слезных желез, пребывающие до введения антигена в фазе покоя. Однако, как известно, у любой биологической'системы при постоянной чрезмерной .ее стимуляции есть предел функциональных возможностей, за которыми следует падении активности и стадия истощения. Чрезмерная стимуляция слезотечения приводит к снижению синтетической активности в нарастанию гидроли$ическшс процессов. Это и является объяснением низкого уровня лизоцима на 5-6 дань. Устойчивое повышение диао-цимной активности, начиная с 7-10 до 20 дня, вероятно, связано со скоплением большого количества макрофагов в'очаге воспаления, которые, как указывает Г.З.Човэта (1975), нвлнетсл источниками лизоцима. При этом ми lie исключаем выработку дизоцима и слезной железой. При этом нами ие установлено достоверного изиеиеия лизоции-ной активности сыворотки крови как эксперимеитальцых, так и коит~* рольных животных.

Таким образом, изменение лиаощииой активности слезной жидкости при неизменном содержании.лизоцима"о сыворотке кровл говорит о большом значении лизоцима как фактора местной неспецифической защиты глаза. . •

6. СОДЕРЖАНИЕ ОБЩЕГО БЕЛКА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ И СЛЕЗНОЙ ЖИДКОСТИ ПРИ КЕРАТОШЬШТШШТВ кОЛОДНЯКА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Известно, что при повреждении тканей а действии на организм болезнетворных агентов в качестве первоначального ответа развивается воспаление, Местные и общие проявления воспалительного процесса могут вх.иять на характер иммунного ответа. Воспалительная реакция сопровождается повышением "остродефицитных белков", в плазме крови (Алексеев A.M. и соавт., 1982)/

Результаты получениих исследований свидетельствуют о том,чтс уровень общего белка сыворотка крови экспериментальных яиьотних по сравнению с таковыми у животных контрольной группы подвергся существенным изменениям, чтб выражается в повыиении (Р < 0,05) концентрации общего белка и разгар заболевания (9,22+0,45 иг/мл • ца 7-а сутки болезни в 10,09+0,87 мг/ил- на 15-е сутки болезни) по сравнению о периодом выздоровлении (.8,92+0,24 иг/мл на 20-е

сутки, Р< 0,05) и группой контроля (8,61+0,37 иг/ил, Р > 0,05) независимо от клинического течения болезни.

.• Совокупность литературных данных, а также результаты наших исследований позволяют предположить, что достоверное повышение на 151 общего белка сыворотки крови в разгар клинических признаков обусловлено за счет белков острой фазы воспаления или адаптивных белков, синтез которых, как сообщает А.В.Сорокин и соазт. (1588), происходит в печени..Поврежденная ткань в начальный период воспаления становится, как указывают авторы, источником пока не выясненных факторов, кото^о о током крови переносятся в печень я стимулируют ее белковообразованив. Снижение уровня общего белка сыворотки крови при переходе острого периода болезни в подострив •связано, как мы считаем, о уменьшением воспалительных явлений в переднем отрезке глаза.

Таким образом, повышение общего белка плазма крови неразрывно связано с воспалительными явлениями, протекающими в конъюнктиве, роговица, что говорит об вовлечении в воспалительный процесс отдельных механизмов общей защиты крупного рогатого скота."

- Анализ данных при изучении содержания общего белка показал обратную зависимость между содержанием изучаемого показателя в слезной жидкости я сыворотка крови.

Снижение уровня белка в слезной жидкости (с 7,'14+0,13 иг/ил до 4,67+0,0 иг/мл) нз 2-Й день болезни, вероятно, связано с обиль-. ним слезотечением, разбавленном и вымыванием белковых фракций с поверхности конъюнктивы.

Повышение содержания общего белка слезной хидкости в подост-рый и хрошгческай периоды связано, как на считаем, с уконьпением слезотечения к воспалительных признакоз переднего отрезка глаза. Наш не установлено достоверных изменения общего балка сыворотки крози слезной жидкости у контрольных аивотных. 3читывал вше сказанное, ыохко говорить о совершенной пластичности аехзннзыа защиты организма, что подтверждает гипотезу к.Е.кореску а соавт.' (1383) о той, что нер&тоховъатстйввт молодняка крупного рогатого скота, вызываемого ЦогахвИа ЬотАа» заболеваете больве общее, ?еа местаоо.

. 7.' Ркзттдты ИССЛЕДОВАНИЯ РАЗВШЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ' . ' . КЕРАТаСОНЬЮНКТИБИТА НА. ФОНЕ EAKTEPÜAJJbHOi!

ОБСВШШШОСТИ коньшшш •

При моделировании бактериального кератоконъюнктивита у крупного рогатого скота нами установлена прямая зависимость между • развитием н.течением патологического процесса а переднем отрезке глаза, ивстаиии показателями естественной резистентности и бактериальной обсемененностыо конъюнктивы, отражающей содержание всех видов бактерии в 1 мл слези.

Б первую половину острого процесса на фоне снижения бактерицидное активности слезной жидкости, являющейся' суммарным показателем дейсгь'ня кестных гуморальных факторов эадиты, установлено увеличение бактериальной о'бсемененности конъюнктивы в ü раз {о 58700+1200 до 376000+1300 на 4-й день и 4WUUU+7710 микроб.тел/мл на '¿-В день болезни, Р < 0,и01).-

Анализ литературных данных, а также результаты наших исследований позволят предположить, что интенсивное размножение liora-xalla bovis в роговице, выделение ею дермонекротических токсинов еннхает устойчивость конъюнктивы к патогенцым микробам, усугубляет патологический процесс, подавляя образование факторов естесг- • вениой резистентности ь. слезной жидкости, способствует образованию язьи роговицы. ' •

Далее во второй половине острого процесса 17-И донь болезни) установлено некоторое снижение бактериальной обсемененности конъюнктивы", однако показатели обсеменунности еще достоверна отличаются от данных, полученных в группе контроля {.232200+96С0 микроб.тел/мл, Р > 0,05)'. В этот период в' слезной аидкости увеличивается содержание изучаемых показателей неспецифической защиты, а клиническая картина характеризуется некоторым снижением воспалк тельных признаков переднего отрезка глаза. Полученные данные о снижении бакториальной обсемененности объясняются активизацией uü стных защитных сил организма, что выражается в повышении до 100$ бактерицидной'активиости слезной кадкости, 'а также образовании .гранулпционного барьера.

Ныш выводи подтверждаются дашшии, полученныци s подострый и хронический периоды, когда при повшшши изучаемых показателей местной иеспецифнческой заэдты количество патогенной микрофлоры ча слизистой оболочке, глаза'снижается до уровня контрольных аивоз

ннх (405СО+4000 - экспериментальные животные, 58800+6000 накрой, тел/ил - контрольные животные /Р> 0,05/). ~

Таким образом, в разгар острых клинических признаков установлено повышение степени бактериальной обсемененности конъюнктивы в 8 раз, в подоотрый и хронический периоды отпечено постепен-

•нов снижение показателя до уровня контрольных животных. * •

8. БАКТЕРИЦИДНАЯ АКТИВНОСТЬ СЫВОРОТКИ КРОВИ И СЛЕЗНОЙ ЖИДКОСТИ ПРИ КЕРАТСКОНЫЗНШВИТЕ МОЛОДНЯКА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

*Как известно, гуморальные факторы, обеспечивая ранит защиту организма от инфекционного начала, дают тем самый время организму на формирование более совершенного специфического иммунитета. Бактерицидная активность является суммарным показателем действия гуморальных ф-акторЪв защиты.0

Результаты полученных исследований свидетельствуют о той,что бактерицидная активность сыворотки крови экспериментальных: животных по сравнению о таковыми у животных контрольной группы подвергся существенным изменениям, что выражается в повышении бактерицидной активности в острый период болезни до 98,09+1,47£ на'10 сутки болезни (Р <. 0,05), по' сравнению о периодом выздоровления (72,8+7,3) в группой контроля (.70,54+5,7*).

Зто говорит об вовлечении в воспалительный процеос отдельных механизмов общей защиты, что доказывает предположение, что керато-нонъюнктивит молодняка крупного рогатого скота - заболевание боль-ае обцео, чей иестноо.

Нами установлена пряиад зависимость между тяжестью клинических признаков переднего отрезка глаза и бактерицидной активность» слезной жидкости. Снижение бактерицидной активности слезной жидкости в острый период болезни Со 89,22+16,6 до с 4,4+4,32* на 7-Й день болезни) снижает устойчивость конъюнктивы к патогенной микрофлоре, способствует образованию язвы роговицы. Снижение бактерицидной активности слезной жидкости, по-видимому> происходит за счет угнетения образования местных гуморальных секторов защиты иикробными токсинами. *

Такай образом, развитие воспалительных явлений в переднем отрезке глаза непосредственно зависит от местной окулярно устойчивости.

выводы'

1.Стократное введение в эпителиальный слой роговицы бактериальной взвеси М»\а«У!а концентрацией 2x10^ микроб, те л/мл, в объеме 0,1 мл, вызыве.ет кератоконъюнктивит у молодняка крупного рогатого скота. ^ . *

2.По характеру воспалительных признаков переднего отрезка' глаза при кератококьюнкгивите у животных установлено 3 периода течения, болезни: острый, подострый, хронический. Острый протекает с

I по 14 день после заражения и характеризуется резкой конъюнкти--альной реакцией, обильным слезотечением, эрозией и язвой роговицы с образованием грануляционного барьера. Подострый - протекает с 14 по 20 день, характеризуется уменьшением гранулемы и рассасыванием инфильтрата по периферии роговицы. Хронический период протекает с 20 по 30 день, выражается в формировании и рассасывании рубцов роговицы.

3.Кератоконъюнктивит молодняка крупного рогатого скота в острый период болезни вызывает угнетение общего состояния, повышение общей температуры тела, учащение частоты пульса и дыхательных движений. В крови повышается количество лейкоцитов ка 5-7 тыс. В подострый и хронический периоды болезни эти показатели снижаются до уровня исходных данных. ' . ' ••

4.Слезная жидкость крупного рогатого скота экспериментальных животных содержит А 132 мкг/мл, 1]Ц 33 мкг/мл, 1^98 мкг/мл, общий белок 7,14+0,13 мг/мл, лизоцим 306+76 мкг/мл и обладает бактерицидной активность» Зб£. Бактериальная обсемененность конъюнктивы составляет 58700+1200 микроб, тел/мл.

5. В пер'вую половину острого периода кератоконыонктивита - 1-7 день поело заражения - в слезной жидкости установлено снижание бактерицидной активности в 2,5 разд. (до 34,4+4,3%). общего белка

в 2 раза (до 3,48+0,8 мг/мл), .в 2 раза (до 70+3 мкг/мл) 1уС> в 1,8 раза (до 59+5,8 мкг/мл). Содержание лиэоцима увеличивается в 3-4 на 2 день болезни, а затем к 5-7 дню снижается до низкого уровня (до 24,4+7,4 мкг/мл). Уровень после однодневного снижения в 1,5 раза, постепенно увеличивается. На фоне снижения показателей местной защиты установлено повышение (в 8 раз), степени бактериальной обсемененности конъюнктивы.

Во второй половине острого периода болезни (7-14 день болезни) установлено постепенное увеличение содержания в слезной жидкости

1<}С(с 59.5+5,8 до 108+19,8 мкг/мл), ^А (с 7+3,9 до 97+6.3 мкг/мл). лиэоцима (с 24.4+7,4 до 524+39 мкг/мл), бактерицидной активности (с 34,4+4,3 до £0,8+13,1%), общего белка (с 3,48+0,8 до 4,75+1,1 м'г/мл). Бактериальная сенсибилизация конъюнктивы снижается с 4036000+7700 до 232200+9600 микроб.тел/мл.

В сыворотке крови выявлено повышение, в сравнении с контрольными животными, бактерицидной активности до 10056 и общего белка в 1,4 раза, лизоцимная активность и содержание >М находились на уровне исходных данных.

б.Подострый период характеризуется активизацией местных защитных сил организма: установлено дальнейшее увеличение уровней

до 109+4 и 240+7 мкг/мл соответственно, бактерицидноЛ и ли-зоцимной активности (61,6+12,4% и 624+63,6 мкг/мл соответственно). В сыврротке крови - снижение общего белка и бактерицидной активности до 8 92+0,24 мг/мл и ^2,6+6,73 соответственно. Не наблвда-. лось в этот период достоверного изменения в сравнении с контрольными животными иммуноглобулинов класса К,С , лизоцимной активности.

В хронический период установлено снижение как местных, так и общих изучаемых факторов естественной резистентности. К концу наблюдений уровень их оставался на 10-205? выше исходного.

ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ • НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Результаты исследований по теме диссертации включены в мето-шческие указания по ветеринарной офтальмологии и.используются в гчебнои процессе и при проведении научных исследований кафедрой >етерннарной хирургии им. К.И. Скрябина.

РЕКОМЕНДАЦИИ ОБ ИСПОЛЬЗОВАНИИ НАУЧНЫХ ПОЛОЖЕНИЙ

1.Выявленный комплекс общих и местных клннико-иммунологичес-их изменений позволяет раскрыть и глубже понять патогенез керато-онгьюнктииита молодняка крупного рогатого скота.

2.Полученные данные, отражающие патогенетические закономер-ости общей и местной защиты позволяют прогнозировать .течение и гход заболевания, дают основание выбору методов и тактики лечения злышх кератоконъюнктивитом животных.

3.Установленше изменения неспецифических факторов гумораль->го иммунитета в слезной жидкости и сыворотке крови могут быть ¡пользованы при налисанин соответствующих разделов учебнйх посо-й по ветеринарной офтальмологии. Материалы диссертации могут

быть использованы в учебной процессе зооветеринарных и биологических ВУЗов и факультетов, при написании учебников и монографий.

СПИСОК РАБОТ,ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

I.. Копенкин Е.П., Бахтннов В.А., Сотников« Л.Ф. Инфекционный кератоконъюнктивит молодняка крупного рогатого скота /Проблемы лейкоза и инфекционных заболеваний с-х. животных: Межвузов.сб. науч* тр/ МВА им К.И.Скрябина., 1988.- С.146-148.

2. Копенкин Е.П.,Сотникова Л.Ф., Бахтинов В.А. Экспериментальный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота и его течение /Проблемы лейкоза и инфекционных ааболвваний с-х. животных: Межвуаов.. сб. научн. тр./ ИВА им. К.И.Скрябине., 1988.-С.146-143

3. Копенкин Е.П., Бахтинов В.А.,Сотникова Л.Й.,Абдаллах Б., Дануэло Ш. К патогенезу инфекционного кератоконъюнктивит« крупного рогатого скота/ Хирургические болезни с-х. животных:* Сб. науч. тр./ Лонингр. вот. ин-т.-1989.-С.122-126.

4. Копенкин Е.П., Сотникова Л.Ф., Денисенко В.Н. Патогенез инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота/Актуаль-ныв пробл. ветерин. и эоотехн. науки и интенсификации животноводства: Матер, конф. посвященной 70- жетию ЫВА,- 1990.-С.168-169.

5. Сотникова Л.Ф.,Копенкин Е.П., Денисенко В.Н. Носпецифическив факторы гуморального иммунитета при инфекционном квратоконъюнк-тивитв/ Проблем» хирургической патологии с-х. животных: Tea. докл. всесоюэ. науч. конф./Белоцерковский с-х институт им. П.Л.Погребняка- I99I.-C.52-53. .

6. Копенкин Е.П.,Сотникова Л.Ф. Буюсеф А. Инфекционный

. кератоконъюнктивит молодняка крупного рогатого скота/Проблемы хирургической патологии с-х. животных: Тез. докл. всесоюэ. науч. конф. /Б<!Лоцерковский с-х. ин-т им. П.Л.Погрвбнякп-' -1991 - С. 65-66.