Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.04) на тему:Фармакотоксикологическая оценка ацетамида

1-Г>

сп

ее

о ____________________

--------------------

На правах рукотптс^--------------------------------

!_ «Э

О- |

ТУШИНА ГМИНА ЛМГГРИЕВШ'

ФАРМАКОТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕЬКА /ЩЕГЛШЩ:.

16.00.04. - "Ветеринарная фармэколо!т с токсикологией"

Автореферат диссертации на соискание ученгй стеклш кандидата ветеринарах наук

и с^-

Каа аш- - 199Ь

Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте, в Казанской государственно? академии ветеринарной медицины и Н-городской государственной сельскохозяйственной академии.

Научные руководители:

- доктор ветеринатзных наук, профессор АЛЕКСЕЕВ Г.А.;

- кандидат ветеринарных наук, ст.на/ч.сотр. СОФРОНОВ В.Г.

Официальные оппоненты:

- доктор ветеринарных наук, профессор ПАПУЩЦИ К.Х.;

- кандидат ветеринарных наук, ст.науч.сотр. ФАЙЗУЛЛИН A.A.

Ведущая организация - Всероссийский щучно-исследователъс-юй институт ветеринарной вирусологии и микробиологии (г.Покров) .

£.0

Защита состоится й^^ьлли^ | У> «О на заседа-

нии диссертационного совета K-I20.22.CE. в Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана (420074, Казань, ^иб,тракт, КГАВ'Я.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Казанск-^й государственной академии ветеринарной медицины.

Автореферат разослан ■Ш

Ученый секретарь диссертационного соьета

Корнишик А.П.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темнГО*яасть химйи и технологии средств защити в сельском хозяйстве развивается и растет. В этой -вязи постоянно увеличивается использование пестимдов, относящихся к фосфор-фгор-хлорор1 -ани»9ским и дру* им с^оди"эниж, которые применяются для защиты растений и кивотньк от вредите..эй и болезнс'!.

Достаточно 'тногочи слепнув группу в а-х-ой системе занимакг соединения используемые для истребления различных грызунов, являющихся вредителя!"! полей и.переносчиками опасных инфекционных болезней человека и ниво^ннх.

Наиболее токсическими ющёстваах этой груп,.лт кохсрае разрешены для применения в наше., стране, являйся та ле &горсрг™га-чеокыв препараты, как фторадетат бария, монофторин, фторацета-шд и глкфтор ( ИГалс1 V. ,19'6; (фтап, & 1955; ЯокгИеу <7. ,1963; Л.А.Востриков, х966; И.М.Козлов,1990). Одним из эффективное веще тв, освоении? пашей отечественна промышленностью и обеспечивавдим потребно, гь всех регионов нашей страх», является - глифтор, выпускаемый акционерным обществом "Каустик" Башко!:остаяа с троенной-моашостьга 15Г тонн в год. Этот зоищц, синтезированный учеными Легогградекото технолога-чсского института в 1963 году, используется на ппотбиках, сспо косах, на посева:-, трг.зо] юзых, а тптаэ в садах путем изготоя• ленкя пряманок в ручную, раепкленпя с автомобилей : самолстоо (Б.Ю.Фаг.:ко1г:!те!!н, 1964; С.С.Фоэтгарек 1976; В.А.Быковский, 1976; М.И.Шилов и др. ,1988; М.И.Иерзаот», 1989: Л.Н.Кравцов. 1981,,

Нарушение технологического регламента применен;"" этого сокотокспчнс-о зоедгда может яв'ет^'! прич;:".сй зонтамшга; /взн;!" пмг кормов, о. последующее стармяяватк» их гапзот:.ат,1 без обезвре-ли^.ашп гл~л соответствующего караяткнирования, "ст.от кр;'пгт.т" к массе, зим отравлешшм и гибели. 13 подобгшх случаях айст« животных возможно только имея в наличии эффективное терапевтическое средство.

До настоящего времени течения отравле»'чй фт рорганичес-¡.жлн соединениями применялись только сигяггскатпчоскке срздотЕа. что п предопределило выполнение данной работы.

Б отделе экотоксикологии Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института (г.Казань) с 1986 г. по настоящее время проводятся работы по изысканию антидотов при отрав-лыпш фторацетатсм бария и глпфтором. В результате целенаправленного поиска изыскан высокоэффективный лечебный препарат -ацетамид, представляющий из себя белый кристаллический порошок, хорошо растворимый в воде.

Ацетанид - амид ;;ссусной кислоты, химическая формула -СН3СО//Н2. Это бесцветные гексагональной формы кристаллы, в чистсл виде без запаха, температура плавления - 82°0, расплав-лешш" затвердевает. Хорошо растворяется в воде, спирте, глицерине. Получают ацетавдц нагреванием до кипения ацетата аммония в ледяной уксусной кислоте: СНдСООУН^ —>- СНдСО/, + ^О. Препарат можно получить также взаимодействием гксу^ного ан-идрида '•яи хлористого ацетила с аммиаком.

Ацетшлид применяют как растворитель для многих органических соединеш!й, как вещество, обладающее гигроскопически,ш свойства-ш, он используется в производстве кожи, бугтги.

Ранее были нзученн токсичность на лабораторных животных и разработаны регшк ого применения. Однако вопросы токсичности на сельскохозяйственных животных н фарма^отоксикологические свойства данного препарата оставались открытыми.

Цель и запачи исследоъаний. Основной целью исследований явилось изучение фармакотоксикологических свойств ацетамида и терапевтической эффективности при отравлении животных глифтором.

Для 1 ;ализащш вышеизложенного перед нами были поставлены следующие задач. :

1. Определить параметры острой токсичности и кумулятивнее свойства ацетамида для лаборагорных и сельскохозяйственных животных;

2. Изучить действие ацетамип яа организм лабораторных у. сельскохозяйственных яявотных в одно- и десятикратной ле* ;бной дозах;

3. Изучить действие препарата иа отдельные системы и органы животных;

4. Определить наличие аглергизирующих, эмбриотоксических и те патогенных свойств препарата;

5. Разработать рекомендации по применению ацетг'.гада в качестве" антидота -при. отравлецш^ животных глифтором и фторадета-том барм. " ------------------. __

Научная нов"зна. Впервые изучены токсические и кум/лятзпз-ние свойства ацета«чда для жвотшг^, получены данные о влиянии препарата на клтшко-гьматологическке и биохимические пока-ато-лп крови при пероральном применении для лабораторных сельскохозяйственных животных. Проведены лат омег-фологич. скис иссляп.и-валия внутренних органов и тканей шзотннх ьосло при^ненпл аиз-тамдаа.

Изучено влияние сгс па централы»,уы нервную систем и механизм действия с использованием различных ф?теакопг,гичог13ГС лкзаторов.

Получены сведения об отсутствии аллергизирующих, эмбриоток-скческих и тератогенных свойств препарат".

Апробированы режимы применения ацетамида при см.ортел-ном отравлении кроликов ыифтором. '

Практическая ценность работы заключается в том, что па ос?

"оваккп прозедог-шх зсслсоватг'1 д»на фар:лакотокгтколот,нческая

сценка ацетамида для лабораторных и сеяосохозтйбтввчнчх них, разработаны рекомендации пршееячвян о го г- качеепкг лечебного средства прг" отрюлешп! гавотных чроог.отскспшрл! фюрер-гакич'скетк соединениями. Полученные результаты во'—и в "Нют;:7>-ленпе иг применения ацетвдздгг дгя лечоигл явытпых *ТП отрэпо-шяг глифтором и фгорацетахоя бария", окофенкис научно-;^.гс~;:-чес; -и Ссэо- т "ЧШИ 0 ноября 1994 г. л каг^аь-.еннке для у?-верздения в Департамент ветэр.!йарии ПСХпП РссскПеко** Федерации.

пабот:!. Материал*! лг ?сертац.пг дацогсш и одсбро-Республиканской науч;ю~1твокзвод;,"'вст?ной конференция но вопросам веюршг->пя и зоотехния (Казань, 1992 г.); па Всероссийской конференции по" экологическим проблеял ватортгБрпс? Са-иитарил (Москва, 1ог>3 г.); на ХП научпо-пргчтлческой ксн^ерэн-щга 1,'олодшг ученых и специалистов по вопросам увичкчэнля производства п резервам повшзекгг качества ст'ьскохозяйст. энной продукции (Оренбург, 1993 г.); на Всероссийской научно-прскзБОДс-венной конференции по гигиене, ветсаяптарии к гколтш яизоткс-

водств,'' (Чебоксары, 1994 г.),

Публикация. По материалам диссертации опублгчоваио научных работ, в которых отражены основные положения диссертации.

На защиту выносятся следующие положат,я:

- токсичность и кумулятивные свойства ацетаыида для лабораторных и сельскохозяйственных нивотных;

- эксперт,¡ентапь"чд данные о влиянии ацетамвда на организм лабораторных и сельскохозяйственных животных;

- результаты исследований по изучещы механизма действия ацета**чда;

- аялергизирущие, эмбриотоксические и тератогенные свойства ацетамвда;

- результаты испытания аштамида в качестве антидота при «травлении кроликов глифтором.

Объем я структура работы. Диссертация изложена на Ш странззде. клинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, результатов ообстьенных исслрдоиний, обсувдения, практических предложений, выводов и списка использованной литературы. Работа иллюстрирована 25 рисунками и содержит Г"1 таблицы. Гписок использованной литературы вклччает 196 источников, в том »теле 36 инострааних.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Материал и мато..л исследования

Работа выполнена в период с 1990-94 г.г. в отделе экоток-сикодогии Всероссийи.ого научно-исследовательского ветеринарного института (ВНЧВИ), на кафедре фармакологии с токсикологией Казанской академии ветеринарной медищг а (КГАВМ) и на кафеграх фармакологии и микроб! логии Нижегородской счльскохозя^твенной академгч (НСХА).

Для выполнения поставивших задач в своих исследованиях ис-лльзовали ацеташд (ГОСТ (\84-70), изготовленный Шосткинским заводом химических реаюивов. Эксперимент ставились на 200 ку-

ритшх эмбрионах, 390 белых красах гбоого пола, ЗСО ^элнгс имзах, 10 кошках,-23 кроликах породы советская ииншкла, 40 морских свинках и 26 овцах пород»• "Прекос"г Опытные-и-контрольные.гтзуи-пи животных, сформированные по принципу аналогов, соде -шли г виварии на нормированном рационе. Определение параметров остро]! токсичности ацотаг.ыда гля гивотша ¡фо: >до .1 по г.. /году Кзрбера (Г931), а тазше графически - по Млллору и Тейнтер} (19-14).

1?Я45Штивг е сво!?сз\аа з.Зопграта епр«?4<"или "о методу «¡и -пС (1951),' с вычисленном коо^'рпцианга ку--ллц::;' п- форг.-уло Ю.С.Кагана ч Ь.В.С-анкевич (1964). Токсичность и ^г^ллтлшшо

ячетяы.ш» оц;:г™пли согласи-: классификации по Медведю (196-1, 1974).

При проведении клинчжо-^изиологиче^-ких исследований о:^ "гуляли температуру, пульс, количество дыхательных двннений, тактильную чувствительность, способность животных ориентироваться в помещении, выраженность слуховых и зрительных рефлексов.

Геютологиче'-.«г исследования вкл1-~:али определение количества лейкоцитов, эритроцитов, содержания гемоглобина, а та^ла вувялонпе лейкоцитарной формулы по общепринятым методам.

Ир;- биохк:.'и. веском не лсдо^анпя крови устанавливай содер-~ллпе сахара по цветней реакиии с ор^стс^' 'идикогйпд реактиве-.: Гулътмопу, содержание общего белка - рсфргктогдетричег.кпп шх- -дом (^.А.Засплъе. а, 7^82), епровиногр' ггной кислоты - по УнйТ'а^--ту в г.:од:п:ш:ац;ш П.М.сабаскппа (1970), количество ...конной кислоты - у; :оду Штерна (1957), "ультг-1р:игьшпг групп б тс:.:о-длзате - методом ажер^етричеокого тк~т>свашгл по в !-!сднф;;:;аць;! Ь.В,Соколовского (1962). калы,.кг - ко методу д?-Ваарди (Кудрявцев А.Л. и до., 1969).

^ корфс,.огиче-с. :1х изменениях - органа: и--тканях псоле пр?-кепЕи аиоч .оллда судаяп по вартятэ н^алогоана* омического вс-'.рытил ■ Гпстол' -ичеекпо исследования: проведекн дутой окраски срезов гематоксилином и аознном по общепринятой методике.

Изучение мехеназка д-зиствця ацеталнда чтроводили с ь^падь-зовэ'-^ем различных фатгзкслогкческпх анализаторов. Влияние аце-т амида на изолированное серг'.е .соезя-х кротаког былоизучено ¡.о .методу Леьэнс-ТраЕсольберга-Ппсеиского, з па пзетфовгнп'п отрезки тонкого отдела к»,- эчнпка кроликов и конек - п" методу

Магнуса.

В опытах по изучению влияния препарата на центральную нерв-нуо систему использовали вещества, возбуждающие (кофсин-'бекзоат, коразол, стрихнин) а угнетающие центра^ьнуг нервную систему (хлоралгидрат, гексегря). В процессе наблюдения отмечали время проявления действия препарато", продолжительность действия, время гибели &иеотных.

Для токсткологич^кой характеристики ацетамида использовали гексеналовую пробу, основанную на длительности гексонал..joro сна.

Ьыявление аллергизирущах свойств препарата проводили используя гест гисташнного шока, наиболее показательно выполняе-" »гай на морских свз'нкгг' (Гиршанович М.Я., 1954).

Наличие гмбриотоксйческих и тератог^шп .: свойств апотамида i-аучалп на 7 -ми дневных куриных змирионах в i зответствии с "Методическими указаниями ло тестиров'тага тяратогенной и эмбрио-токсической активности-новых лекарственных веществ".

Введение ацетамида ^ желточный мешок, с^оскопирование, инкубирование проводили по' общепринятым методикам. Плоды фиксировали в абсолютном спирте и изучали скелет, окршцешшй а ¡¡зарином ио методу Даусо'на с помощью мщсроско: а ШЗС-9."

Дг - изучения лечебной эффективности перорального применения ацетамида п^я правлении глифтором в смертельных дозах испияьзо-"вали кроликов живой массой 2,6-3,2 кг. ВоднгЧ раствор глифтора и ацетамида животным вводили в яелудок с помощью резинового зонда. О терапевтическом действии ацгчашда судили по клиническим данным, результатам морфо-биохшических исследований крови на I, 3, 5 и 7 сутки после начала лечения.

Экспериментально полученный цифровой материал обрабатывали с использованием программируемого микрокалькулятора типа "Электроника 1.ÍK-56" по методике Р.Х.Туд^аптова и Н.Х.Нигматуллина (1988), с последующим применением критерия Стьвдепт ..

Би<Зяиогр.5ичеоксч описание использованиях в диссертации литературных источит ;в осуществляла в соответствии' с требовг ¡ия-ш действующего ГОСТа 7.1. -84.

------------ОпреДелен - параметров токсг'иостп и кумуляп'-пыл

свойств ацетамкда-^ля аивоишх

При проведспя соответствующих экспериментов при п«рг»р«л;— ком и подко.~ном введении препарата ЛЛ«^ п ЛЛгоп дам белых «üs<m'í с роделить не удалось, тк как смерть опытных suBomix н*> -тулаяа дако от доза ¿OOCT irr/i:r. Ввести бодео увелкчш чую лоз»' мышам перорзльно практически невозможно. "оч psó' .и с "руттп, животными бнлг установлены нараи^трц острой .скси»кс% анет •-мнда, хсс?г?ы««и следующие (в мг/кг):

- дяя белых крис гря • -виден ДР - ТО 000,0; ДЦ1б = 12 ООО 0; Л%0 = 14'500,U (147Г"Ч?91УМ ¿Лал ..

= Т7 000,0; ЛД100 = 20 ООО:

- дяя белых крыс при подкояеток введении ЛЛ0 = 7 000,0; JUlj^= = 8 000,0; ЛД50 = 8960,0; ЛД^ = 10 100,0; ^jqq = I2ÛQ0.0:

- для овец при пероральном введении Лйд = 7 000,0; ЛД^ = = 8 000,0; ЛД50 - 10 000,0 +1Г9; лД^ = II 600,0; «Л10Г! = 12 000,0.

Научение !:.'"7лптиь;п;т eso:' "тз пт;отэм;;ла покачало, что в вопрлстаю'акх дозах от 1472 до J56B83.0 мг/'гг габахн кр;.:о напа\>-пала через 2? дней. :-:з ассн период спита наиболее устойчив ссобн чеду-кл:: ач-га;л'';;а в хазе 153 OPT, О кг/кг, что более раз болыйз его Ллч-р ара однократна;.: введен;:;;, ■

обработг-1 порученных данных показала, что ко^гаронт чукуд»;. : адата?.:ада равняется 3,28, что позволяет стлестк его к ip>.:r. прзг ратов о 1 с"збо внр^.чеппои кумуляцкЛ (Л К.:..адведь. I2F4-, ■ Кяинзческая сикаго^агл-га острых алвкенгаряях егчгвхчч---..•длйх х!<:гз!г, -19ДНХ впые п «зец «цЬтчмадогд я сроднсскаргг-ин дезах харзкт • рнзозалась енплвяи&м ДЕЯГятеяьлой активности. шаткостью походки. Перед гг.болко у глвоть-х каслндачсаг нгй7ггп~ -кишое возбуждение, сопровсямшреея судерсанчм секрагляг.г: "г" летной мускулатуры, спазмом дыхания.

íTpa :~огократно:л введении ацетачяда белки кр'гсаи в напас-laxGo,! каадне четыре (от ТЛОЛЛггд) Дозе клиня-ю'-сая картг-е "правленая Сила аналогичной, не ;;енаэ ьтах.^кче:

iípu вскрытии павгях квотных установлено, что ;ч;чч-ч:-тсде-0апа70"чпэск:'0 "гн.'.г.неннн "" ч стравлена" глетя,.,плом

рпзовал-оь незначительной гиперемий слизистой оболочки желудка.

Влияние ацетамида на органг пм лабораторных и сельсохозяйственных животных при однократном и многократном 1,|>именении

При изучении морфологических показателей крови кроликов и овец в условиях однократного пероралыюго введения ацетамида в дозе 500 ьгУкг установлено недостоверное увеличение содержания эрит-роцитсч, снгокепе гемог збик^, лейкоцитов.

В результате проведения биохимических исследований в первые сутки острой интоксикации ацетамидом в дозе 5П0 мг/кг отменено недостоверное увеличение общего белка, .В - и у -глобулинов, глюкозы ка~ьцйя и лимонной кислоты, а также некоторое уменьшение Л -глобул1.аов и пировиноградной кислоты,

Ввэдент"5 ацетамида в дозе 5 ОиО мг/;:г сопровоздается увеличением общего белка и уменьшением альбуминов, глюкозы и пировиноградной кислоты. Эти изменения также были статистич ски недос-то орными.

Анализ I .столглгаеских исследований в динамике через I и 5 суток после введения ацетамида в терапевтической и десятикратной лечебно? дозах дает ос^вание полага ь, что у овец этот препарат вызывает незначительные изменения микроструктуры печени, сердца и ночек зшцитко-приспособвтельного характера (мутное набухание, 8"тиваиия р ^тикулоэндотелия), которые к кош / срока ■ наблюдения нормализуются.

Влияние ацетамида Г1 изолированные органы

При проведении фармакологических исследований лекарственных средств ценные результаты дают опыты а изолированных орг пах. В этом случае -жепериминт в большей степени ' озволяет с здать относительно стабильные условия воздействия и исключить ряд со-путствувдих факторов при выяснении некоторых видов физиологичес-ко. активности хюличесгак соединений. Ацотамид применялся в виде раствора, приготовленного н? г отоническом физрастворе.

Влияние'аЦетамнда-на-изолированное сердца тоглокровных животних

Л 30 опытах на препаратах изолированного сердца изучено влияние ацотамида в 0,5, I, 2, 2,5, 5, 10 и 15^-ных ло1£центра-

ц1шх.

Установлено, что ацетамид в 0,5 п '""¿-них концентрациях не вызывал существеншх изменений в сокращениях изолированного сер-|..(а теплокровных тавотных (кошка, кролик). В 5^-ной кш'.донтра-ции ачвтакя вызовает кратковременное усиление ритиа и повышение амплитуда сокраь. .-ний. Боаве концентрированные растворы (15?) ацетамида вызывали кратковременное повышение тонуса и увеличение амплитуды сокращений, но более длительное воздействие це-тамидом в той же концентрации ведет к необратимой его остановке.

Влияние ацетамида ка изолированные отрезки тонкого отдела кишечника

Опыты, проведенное на изолированных отрезка., тонкого отдела г -шечник- кроликов, свидетельствуют, что ацетамид в 0,2 и 1$-ных концентрациях не оказывает существенного влияния на характер сокращения кишечника. Повышение ковдентрации до 10^-ов способствует временному снижению амплитуды и ритма сокращений, которые посла отмывания препарата питательной ¡а..,гчостыо возвращались к исходному уровню. Большие концентрации ацетамида (15%) значительно понижают тонус, амплитуду и ритм сокращений вплоть до их полного прекращения.

Огчты на изоли; званном отрезке кшь.чника кошек провидены с использованием ацетамида в 0,25 0,5, I, 2 и 5%-пых концентрациях. Установлено, что при «го воздействии в 0,2г1>-ной концен*1 -рации существенных изменений в сокращении отрезка кишки I эшки не отмечалось. 0,5%-ный раствор ацетамида вызывает некоторой повьч! гние тонуса мускулатуры. ' величание концентрации то 5^-ов си ••"обствоваяо снижению амн-ит: чн и частоты • -"-фащвипй, но поело отмывания растворе ■ характер сокращений г->сстзчавлн-.ался. Ьолее концентрированные растворы действовали угнотадае на о.резок кипе шика, вплоть до полного прскраг. пил сокращения. 0пыт1.

с применением фармакологических анализаторов показали, что раствор пилокарпина-гидрохлоркда (1:10~5) после при\-енения 252-кого раствора ацетамида стимулировал отрезок кишечника.

Ацетамид в 2^-ной концентрации, примененный на фоне пило-картпша-пирохлорвда, также способствует повышению амплитуды и тонуса сокращений петли кишечника, т.е. ацетамид усиливает холя-нергическул иннервацию.

Уменьшение сокращений работы изолированного кишечника после действия тгоепарата в болыщи концентрациях mosho объяснит* непосредственным угнетающим действием ацетамида на гладкую мускулатуру, тем более, что препарат значительно сникает возбуждающее действие бария хлорида.

Вякание ацетамида на центральную нервную систему

Опыты ..о изучения злюпптя ацетамида на центральную н"шнугэ chctemv были проведены в сопос .авлегош с хорош изученными з эксперт-гонте и клинике препаратам! - кофеином, коразелом и стрихнином, возбуадащнтгт центральную ¡.¿рвную систему и влкящиж; на различные её отдели. Кофеин действует преимущественно на кору головного мозга, коразол - на продолговатый мозг, стрихнин - на спншгой мозг. Такяз исследовалл ацетамид ка фоне воздействия веществ, угнетакщих центральную нервьув систему - хлор ягидрата и гексеаала.

Влияние веществ, возбуздаизве центральную " * нервную систем, ir фона действия ацетамида •

Опыти! с кофеином проводили'на 10 белых мызах, разделенных на опытнуг и контрольную группы, Мышам контрольной группы веодй-лн подконно кофеин в дозе I мг/кг в Г/с-ном растворе. Опытным ютам внутрнбршияно вводили апатамвд в дозе 500 мг/кг, а черт 10 иин - кофеин в той ке дозе, что и мыжам контрольной группы п проводили наблюдешю.

Установлено, что на фон, ацетамида действие кофеина несколько усиливалось: возбуждение, ъоксг еское действие проявля-

лись быстрее, ускорялись такне сроки гибели еивотных.

Опчтй "с" коразолом - проведены. по. вышеописанной схеме Кора-зол вводили пс;..:оеио в дозе 100 мг/кг в 1%-пои водном'растворе: -

В результате каблвдзнчй за ога;т ой и контрольной группа?® жгаотных бнло 01.лечено, что коразол у всех гатей вызывал кора-золозые судороги и смерть наступала через одинаково^- ^ремя.

Опыты со стрихнином. Стрихнин вводили подкозно в дозе 0,4 мг/к. в 0,02%-мял растворе контрольном г опытным довод чепез 10 мин после введения ацетамида.

В результате наблюдении за животными обеих групп тмечено, 470 " сп!!?! 'г МЬШеЙ но срдзяекмя с контоодьишл! значительно раньше наступали си птомы токсического действия ¡: смерть.

Анетамид не изменял закономерностей влияния кофс.ша, кора-зола и стрихнина, но повышал токсичность кофеина и стрихнина.

Таким образом, установлено, что действие ацетамида на центральную нервную систем направяегю, главным образом, на кору головного ;юзга к спинной мозг.

Влитие Б""еств, угнвтякмх центральную нервнуа

чистому, па фоне действия г'та«зла

.Ллл оллгоз и.мзло значсллч ссстс;-;;;1 кепздиьгс. лсрло-

: л. .^аза бокового почо.-онил со значил ельш;:.: расслабление?.; оке--;;сгной луокулатурл л прслклеплс:-; ¡лфлолтсрнол возбудимое! 11, чугстьаталыюстк при иакзеешш болевых раздражак

Хлсралгадри: в: ,дала вну.'ргбрадшшо а дозе 300 мг'кг в форме 3/о-ноге водцоь; раотЕо^-а, гексопал - внугрйбрвгзино в дозе ТОО мг/кг в ф- рме 0,4^-ного водного раствора, ацетамкд - з 'тедн.чдах опита;-:.

Уста л%лл:л ч;с ларК'лллл; ол у ;;:лг:р ль:;;.; ,,ул

пн длился 60,4+2,03 шт., лродешятелы»'.с*ь аиа у сг-глгг- лл: ;; состпила <36,6^ Г ,6Я мин (Р < 0,001). Более того про доля» дельность посленаркозного сна з контрольной и опытной группах соста-,'р-дне-л 8М_г1,85 ;; 1 7У ,П;5",ГЗ мин ( Р ' О,ПОТ), кллл: образом, лвод-лал: . :оуллгч лат.? . .ъкоежлч нл ¿олс; челеллчл «■■•отя;™"" чр^точп.оовало влияние ^а; пл "ш.

Улллс" гл'лл; л;:;"- ч^п-л:"-"/о: '-л' л>; ял. лч;;гл с-цр-

тамила на процессы торможения в коре головного мозга.

Влияние ацетамида на антитоксическую функцию печени

Для выявления токсического действия лекарственных веществ, широко используется гекстшловая (тиопенталовая) проба, основа'.'-пая на длительнс ,ти гексеналового сна, проводимая на ml. пах и крысах (В.Ф.Гладких и др.,1963; Д.Г.Розин, 1964; М.Н.Лебедева, 1967; А.Р.Османов, 1972 и др.).

Известно, что барбитураты инактивирултся, главкам образом, в печени, в связи с этим при поражении печени каюш-либс токсическим препаратом обезвреживание барбитуратов замедляется, что приводит к увеличению продолжительности сна, вызванного этими си творнымл.

Данный тест шире :о используется з эксперименте, так как является нал 'олее чувствстелкчш и легко поддается количесгзенко-му учёту.

^станоьлено, что ацетамид в высшей терапевтической дозе 500 мг/кг нивой мэ'сы у крыс чери 1,5 и 3 ч не оказывает отрн-цател лого влияния на антитоксическую функция печени. Так, продолжительность гексеналового сна у опытных животных составила 36,6+1,7 мин и 37,0+1,4 мин, а у контрольных - 36,5+1,7 млн л 36,8+2,16 мин (Р > 0,05). На фоне видения ацет-тмила т. доз о ■ 1500 мг/кг через 1,5 и 3 ч гексеналовнй сон увеличивался и равнялся соответственно 44,6+2,45 мнн.и 45,0+2,58 мин, у контрольных животных сон длился соответственно 36,5+1,7 м*гн и 3^,8j;2,ir мг. ■ (Р 0,01).

Таким образом, ацетамлд в дозе I 500 мг/кг, примененный перорьль-'о, оказывает некоторо угнетение антитоксической функции печени.

Аллергизируюшие свойства ацетамида

Мпогочислонная научная литература св-,:,",етельстг-ет о н°сом-ненном участии в аллергичес: тх процессах гистамина и ярким подтвержденном этого является усклвно? применение антигистампн-

ных веществ при данном состоянии.

В эксперименте нами использованы 12 клинически здоповнх

морских свинок ^яшой массой 250-350 г, разделённых пп опытную и------------------

контрольную группы.

Еивотншл опытной группы вводили пе'роральпо ацет&^ид в дозе 500 мг/кг в виде водного раствора. Контрольным гивол1ьм препарат не вводили.

Опытным яивотным через 3 ч после дачи ацетамида и одновременно контрольны" животным, вводили подложно гистамин в дозе о,5 мг/кг в 0,1^-ном раствора.

Полученные данные свидательотзу::? о том, что апеташд не обладает аллергенны/, действием, так как предварительное его введение животным не предотвращало и не ускоряло возникновение гис-таминного шока. Так, при введенга гистяыина опытны" живот г гм через 3 часа после дачи ацетат.-лда время наступления гистамшшого шока равнялось 17,3+0,8 мин., а у контрольных кивотннх -17,5+0,2 ,.лн (Р > 0Т05).

Эмбриотоксачность и тератогеннисть ацетамида

Для определен-я эмбрис 'окспчосксх и тератогенных свойств ацетамида использовали 7-ми дневные куриные г-<брионы. Ацетамид вводили в дозах 1/2, 1/10 и I/ 30 от ЛДзд для эмбрионов, равную 10 ООО от/кг, что соответствует 250 мг/яйцо; 50 иг/яйцо и 5 иг/яйцо. В качестве растворителя использовали ф! шологическнй растЕор натрия хлор' да. Ацетамид вводили в иелточннй мешок в объёме 0,2 мл, контролем служили омбрнонн, которым вводили физиологический раствор и контроль реакции на прокол.

Установлено, что при внешнем осмотре на 19 сутки инкубации у эмбрион п кон-рольных и опытш.. групп каких-либо в гдмге изменений но обнаружено, масса гмбрионов в группе, которым оыл введен препарат в -озе 250 мк/яйцо, составила в среднем .35,1+0,7 мг, в дозе 50 мг/яйцо - 2",9+0,9 мг и в доза 5 мг/яйцо -26,111,0 мг и находились с контрольными группами в бл гзких те-дклах (Р > 0,05).

Кранио-каудальний раз..^р, длина конечвостоР и вео внутренних органов у опытных и контрольных групп были в прицелах ледос-

говерности (Р > 0,05). Аномалий развития скелета у эмбрионов не выявлено. Гибель эмбрионов в опытных группах где вводили ' ацетамид в дозе 50 и 250 мг/яйцо была такой же, как и в контрольной группе (17^), а у другой опытной группы, где вводили ^ ацетамид 5 мг/яйцо, она была в 2-3 раза ниже по сравнении с контрольными. Все это'свидетельствует об отсутствии у аце^дмида эмбриотоксических и тератогенных свойств.

Актидотшэ свойства ацетамида при отравлении животных ГЛЛГОТОРОМ

Опыты проводились иа 1В-тя кроликах обоего пола, разделенных на 3 равные группы. Первой группе кроликов задазали 10 мл водного раствора глпфтораиз расчета 4 мг/кг (среднесмер. ельная доза), второй группе - в объеме.10 мл из расчета 6 ыг/кг (абсо-лотьо-смертельная' доз?). Контрольным животным вводили глифтор в абсолютно-смертельной дозе 6 мг/кг без лечьяия ацетамвдлч. Лечили животных обеих групп путем ьведения растворов ацетамида из расчета 5ГЗ мг/кг через 4 ч после затравки глифтором.

В результате проведенных экспериментов все опытные кролпкп выжили без видимых признаков 1Штоксикации, тогда ¡сак контрольные погибли спустя 20-24 ч с момента затравки.

Морфобиохякяческие исследования крови показали, что через сутки псзле введения ацетамида наблюдалось снижение ге моглоби-на на 11,1%, эритроцитоз-на 2,95?, лейкоцитов на 2,Ъ%. Однако все эти различия били статистически недостоверными.

При изучении белкового обмена установлено, что через сутки пос ~е начала лзчзния апетамидом уровень общего количества белка в крови опытных животных тлела тенденцию к снижению и составил 6,02+0,79 т%, при исходном 7,18^0,27 т%. Кроме того, отмечалось, увеличение альбуминов на 7,3?. Процентное содержание альфа-, бетта- и гамма-глобулкковых фракций понижалось на 8%, 13% и 12%' соответственно. В последующие сроки исследований данные показа-тш I не отличались от фоновых д-шшх. .

Через 24 ч после дата ацетамида зарегг утрировано статистически достоверное увеличение лимонной кислоты на 101,4% (Р< 0,005). Однако в последующие сроки эти изменения носили недос-

товарный характер и к седьмым суткам приблизились к фоповш.

Спустя одни сутки с начала опытабыли отмечены статистически_____

достоверные изменения в сторону утленьиения сулъшгидр;иьннх групп на 6,3£(Р 4. О,ОТ).

В клинической картине поведения кивотных необходимо отметить, что у опытных животных не отмечалось каких-либо видимых от; ючоний от нор:-."л. Яивотные свободно двигались, охотно принимали корм л воду, реагировали на вазшио раздражители, т.о. на отличались от интактных.

¡»•'"«»«зпоквнцйа псзггдяст заключить, что ацетамяд является эфрекалвннм лечебны;.? ;ipcnr.pamoM при ггтгсгнну инойко-

тскснчнымп фторорганическими соединениям! (гляфтор^ и оеко.'-ен-дсвать его для широких производственны): испытаний.

ВЫВОДИ '

Г. Изучены лечебные свойства ащ .-амида, предлогеьлого з кдчегтвс аффективного антпдстного оряаства при отравлении зивот-

.лл: льчглстикслчнимн $?opoprami4b(кв.-»! "олллелллли.

2 Дцс-га'31Д в чсзе 5Г0 .с/кг 1личос;шд"> к виде ьлашл ••:«'./.•-• в^ров соделает ьиракешшм Тйраплгллчосклл до;:-, ел-л» ,ipa доченп« . трарлсший яявотанх глнфюром и {¡торапсштсы tap&i.

3. Аистахяд ел носится к грушк» иилстг.ксичшм ии'-юйотш: срцд!1яя смертельная доза (JI&jq; при внутреннем щ ллшиии для белых крно сост-вляе™ 14500 мг/кг; для овец - Ш ССО гл'/кг. Ир«-парат обладает слабовкршкетшм кумулятигаым действием; коаТ^к-циент кумуляции для белых крыс при внутреннем применении оостс.з-ляет - 3,28.

4. Ац"тампд при пршенэшш г. :утрь в одно- и деся. зкрз;-асй лечебной дозе не оказывает заметных адатчай на клиническую т- -тину повод,, .шя животных, морфологический и биохимический составы крови, а также не вызнг ет патогистологических изменений' внутренних органов.

5. Ацетамид в машх конце ?раниях (0,5-Г не изменяет характер сокращений изо.шроваьаых органов Ссердпе, лшечиик) теплокровных животных, с увеличением концентрации (5-15?) отрицательное воздействие усиливается вплоть до остановки сокращений

изолированных органов.

6. Ацетамид в терапевтической дозе являет, л синергистом хлоралгидрата и гексенала, тем самым усиливает процессы торможения в коре головного мозга и не подавляет антитоксическую функцию печвня.

7. Препарат не обладает аллергизирующим, эмбриотоксическим и тератогенном свойствами.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ТШОНЕНШ

На основании проведенных исследований разработан и предложен для широких производственных исследований лечебно-профилактическое средство ацетамид при отравлении сельскохозяйствен*!« животных высо,.зтокскч;щм7 чяорорганическимп пестицидами.

Результаты исслелований включены в "Наставление по применению аде та мида для лечения животных при отр-влении г ликтором и фторацетатом бария", одобренное ••аучно-метлднческиг' советом ВГОЗИ 3 ноября 1994 г., и направленное для утверждения в Департамент ветеринарии М£ХиП РФ.

Список опубликованных работ по теме диссертации

1. Алексеев Г.А., Софронов В.Г.; Тушина Г.Д. Терапевтическое действие ацетатагда при отравлении ^'лифтором // Актуальные вопросы ветеринарии и зоотехнии: Тез.докл. Респ.нгуч.-произв. коьф. Казань, 1992. - С.15.

2. Софронов В.Г., Тушина Г.Д. Изыскание терапевтических средств ьра отравления высокотбксичными фторорганическими соединениями// Экологические проблемы ветеринарной санитарии: Тез. докл. научн.-техн. конф.~ И. ,1993.-С.¿5-6?.

3. Тушна Г.Д. Изучение аллергизируетщгх свойств аиетамдга // Пути увеличения производства и резервы повышения качества с.х. продукции: Тез.докл. ХП науч.-практ. ..онф. молодых ученых и специалистов.- Оренбург, 1193.-С.148-149.

4. Алексеев Г.А., Тушина Г.Д. Непторые фармако-токсиколо-

гические свойства ацеташща // Тез.докл. Всарос.науч.-произв. к нф. по гигиене, вет.санитарии и акт логкл нивотноводства.-Чебоксары, 1994. С.15.

5. "Наставление по применению адетамида для ле' п ш животных при отравлении глифторсм и фторацетатом бария", утвержденное научно-методическим советом ВНИВИ (Казань), 1994 г.

6. Тушина Г.Д., Софронов В.Г. Влияние ацетамида на антитоксическую функцию печени. Труды Iвнегородской гос. сельскохозяйственной академии, Н.-Новгород, 1995, (в печати).

ГМшетш». участок мьк. назань-чгишч. йстинститут.