Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.04) на тему:Фармако-токсикологическое обоснование применения натрия гипохлорита в ветеринарии и животноводстве

На правах рукописи

Жолобова Инна Сергеевна

Фармако-токсикологическое обоснование применения натрия гипохлорита в ветеринарии и животноводстве

16.00.04- ветеринарная фармакология с токсикологией 16.00.01- диагностика болезней и терапия животных

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

Воронеж, 2006

Работа выполнялась на кафедрах Кубанского аграрного университета и Кубанской медицинской академии, в научных подразделениях Краснодарского научно-исследовательского ветеринарного института (КИЙВИ) и Всероссийского НИВИ патологии, фармакологии и терапии (г. Воронеж), клинические опыты и производственные испытания в условиях животноводческих хозяйств Краснодарского края и Воронежской области.

Научные консультанты: доктор ветеринарных наук, профессор

Трошин Николай Алексеевич

доктор медицинских наук, профессор Петросян Эдуард Арутюнович

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Никулин Иван Алексеевич

доктор ветеринарных наук, профессор Дорофеев Виталий Иванович

доктор ветеринарных наук Уразаев Дмитрий Николаевич

Ведущая организация: Казанская академия ветеринарной

медицины им. Н.Э. Баумана

Защита состоится 2006 г. в /¿У часов

на заседании диссертационного совета Д 006.004.01 при ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии» Россельхозакадемии (394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова,! 14-6).

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке института. Автореферат разлослан <4«£/>>_/ ^ 2006 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Т.И. Ермакова

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Улучшение ветеринарного обслуживания животноводства, разработка наиболее эффективных методов и средств профилактики и лечения заболеваний сельскохозяйственных животных является актуальной задачей ветеринарной науки.

В указанных целях широко используют различные фармакологические средства, обладающие антимикробными свойствами. Однако их эффективность в последнее время значительно снизилась из-за изменения биологических свойств микроорганизмов и проявления у них множественной резистентности после многократного пассажирования через организм больных животных. Устойчивые к известным препаратам серотины возбудителей, как новая биологическая популяция, циркулируют в природе и, инфицируя животных, резко усугубляют течение патологического процесса, существенно затрудняя терапию заболевших.

Все это требует поиска и разработки новых средств с различными механизмами антимикробного действия. С рассматриваемых позиций значительный интерес представляет препарат натрия гипохлорит, получаемый путем активизации воды электрохимическим способом с помощью аппаратов различной конструкции, в том числе, ЭДО-3, выпускаемых Региональным центром научно-технических исследований (г. Москвы) и «Ключ» (НПО «Петролайзер»).

Получаемый раствор представляют собой бесцветную прозрачную жидкость, 1 л которой содержит от 300 до 3000 мг/л активного вещества натрия гипохлорита.

Электроактивированная вода получила достаточно широкое применение в медицине в различных показаниях (Э.А.Петросян, 1991; Е.Егоров, 1992; Т. Абрамова, 1995). В последние десятилетия проведены два Международных симпозиума в Киеве в 1990 и в Москве в 1994 году, а также Всероссийская научно-практическая конференция (Москва, 1992 г.) по применению электроактивированной воды в различных областях здравохранения.

В ветеринарной практике не разработаны четкие показания к применению электроакгивировашшй воды на сельскохозяйственных животных, не определены ее основные фармако-токсикологические свойства (В.И. Дорофеев, 1997).

В данной работе предусматривалось проведение исследований по разработке показаний и определению оптимальных параметров применения препарата при различных болезнях животных в соответствии с установленными требованиями, изучению специфической активности и основных токсикологических и фармакологических свойств.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования является изучение, разработка и внедрение в практику ветеринарии и животноводства раствора натрия гипохлорита для лечения и профилактики ряда заболеваний животных и птицы. Для реализации этой цели были поставлены следующие задачи:

- дать обоснование для разработки и внедрения раствора натрия гипохлорита в практику ветеринарии и животноводства;

- изучить биологическую активность препарата в отношении возбудителей отдельных болезней животных;

- определить основные токсикологические, фармакологические, иммунологические характеристики препарата и разработать методы его контроля;

- разработать показания к его применению, установить лечебно-профилактическую эффективность при ряде заболеваний животных и птиц;

- разработать необходимую нормативную документацию на его применение в целях внедрения в практику ветеринарии и животноводства.

Научная новизна. В результате проведенных исследований предложен препарат - натрия гипохлорит, изучены его биологическая, антимикробная, антигрибная, антигельминтная активность; в соответствии с установленными требованиями, определены основные фармако-токсикологические характеристики и методы контроля; отработаны показания к применению, оптималь-

ные схемы и дозы при лечении и профилактике наиболее распространенных заболеваний сельскохозяйственных животных и птицы.

Практическая значимость. Для практической ветеринарии предложен препарат натрия гипохлорит, обладающий высокой лечебной и профилактической эффективностью при ряде желудочно-кишечных, респираторных, акушерско-гинекологических и хирургических болезней, а также применяемый в качестве дезинфектанта, антисептика и консерванта.

Практическая ценность препарата подтверждается положительными результатами широких производственных испытаний и Наставлением по применению в ветеринарии, одобренным Ветфармбиокомиссией и утвержденным Департаментом ветеринарии в установленном порядке и Методическими указаниями по применению натрия гипохлорита в ветеринарной практике, утвержденные Академиком-секретарем РАСХН А.М. Смирновым.

Внедрение результатов исследований. Производство приборов по получению натрия гипохлорита освоено АО «Регнатис» г. Москва, «Петролай-зер» г.Санкт-Петербург. В соответствии с разработанной документацией в условиях животноводческих хозяйств страны обеспечено его применение в качестве высокоэффективного лечебно-профилактического, дезинфицирующего и консевирующего средства.

Апробация работы. Материалы диссертации были доложены на:

- заседании Ветфармбиокомиссии Департамента ветеринарии МСХ РФ.

- научно-практических конференциях (Новочеркасск, 1999; Краснодар, 19992004; Москва, 2004; Чебоксары, 2004; Казань, 2005)

- производственных совещаниях ветеринарных специалистов Краснодарского края 1998-2006 г.

На защиту выносятся:

- обоснование разработки натрия гипохлорита;

- результаты исследований биологической активности препарата; . ^

- результаты его фармако-токсикологических исследований;

- результаты разработки показаний к применению и изучения лечебно-профилактической эффективности препарата при различных заболеваниях с/х животных и птицы;

- практические предложения по применению и внедрению препарата активного натрия гипохлорита в ветеринарии.

Публикации. Основные материалы диссертации опубликованы в 33 научных статьях.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 296 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, заключения, выводов, предложений производству, библиографического списка, включающего 284 источника, из них 222 отечественных. Работа иллюстрирована 68 таблицами, имеет приложение.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования были проведены на кафедре фармакологии и токсикологии Кубанского госагроуниверситета и кафедре оперативной хирургии Кубанской медицинской академии под руководством проф. Э.А. Петросяна, в научных подразделениях Краснодарского НИВИ и ВНИВИ патологии, фармакологии и терапии при содействии проф. М.И. Редкого, клинические опыты и производственные испытания - в условиях животноводческих хозяйств Краснодарского края и Воронежской области.

При постановке экспериментов были использованы клинические, фармакологические, иммунологические, токсикологические, микробиологические, морфологические, статистические и другие методы исследования.

В результате поисковых работ для фармакотоксикологических исследований и внедрения был отобран новый препарат антисептического действия, получаемый путем активизации 0,9% раствора хлорида натрия с помощью установок «Ключ», ЭДО-3 натрия гипохлорит. При этом определены требования и нормы к препарату по его физико-химическим характеристи-

кам, стерильности, пирогенности и безвредности. На основании этих исследований разработаны Технические условия по контролю качества и безвредности препарата.

Биологическую активность натрия гипохлорита изучали путем выяснения его антимикробных, антигельминтных, антигрибных, акарицидных и овоцидных свойств.

Антимикробную активность препарата in vitro изучали по отношению штаммов микроорганизмов, являющихся возбудителями наиболее распространенных заболеваний животных. Эксперименты проводили методом серийных разведений в бульоне Хоттингера, МПБ и МПА, для чего делали разные концентрации препарата в питательных средах. Бактериостатические свойства определяли визуально по отсутствию роста культур в пробирках после суточной и двухсуточной инкубации при температуре 37°С. О степени активности препарата судили по его концентрации в 1 мл питательной среды, вызывающей полное угнетение роста тест-культур. Определение антимикробной активности натрия гипохлорита проводилось также с использованием метода диффузии в агар.

Антимикробную активность in vivo оценивали по химиотерапевтиче-ской эффективности (ЕД50) при экспериментальной эшерихиозной септице- . мии белых мышей при внутрибрюшинном заражении летальными дозами микроорганизма.

Степень обеззараживания кожи вымени и наружных половых органов коров определяли по показателям общего количества аэробных и анаэробных микроорганизмов, отдельно числа кишечных палочек и стафилококков, выделяемых с поверхности тест-объектов после обработки раствором натрия гипохлоритом. Для этого раствором натрия гипохлорита, тщательно обрабатывали поверхность кожи вымени и наружных половых органов животных разных групп. Спустя 5 мин делали смывы с этих объектов на площади 100 смг с использованием тампонов, смоченных стерильным физиологическим раствором, которые затем помещали в пробирки со стерильным физиологи- ■

ческим раствором в объеме 10 см3. Из исходных суспензий готовили десятикратные разведения от 10"2 до 10"6. В объеме 1 см3 полученные суспензии высевали в пробирки с расплавленными и остуженными до 40-45°С различными питательными средами. После перемешивания суспензий в пробирках с расплавленными средами их содержимое переливали в стерильные чашки Петри и оставляли при комнатной температуре до застывания среды, а затем помещали в термостат на 24-48 ч при I - 37°С.

При определении количества стафилококков, суспензии в объеме 1 см3 вносили на поверхность спиртово-солевого агара в чашках Петри, после чего материал равномерно рассевали по всей поверхности среды и инкубировали при температуре 37°С в течение 48 часов, а затем проводили подсчет колоний (для каждой пробы из двух разведений), среднее число колониеобра-зугощих единиц (КОЕ) умножали на разведение пробы. Контролем служили смывы с соответствующих объектов, полученные после обмывания их теплой водопроводной водой.

Для определения бактерицидной активности натрия гипохлорита (600 мг/л) при обеззараживании резиновых сосок, сосковых поилок, используемых для кормления новорожденных телят, их помещали в емкость с изучаемым препаратом, а стационарно закрепленные кормушки обрабатывали натрия тпохлоритом. По истечении 5, 10, 15 мин соски и сосковые поилки извлекали, из кормушек удаляли натрия гипохлорит и делали смывы с поверхностей указанных объектов стерильными тампонами. После нейтрализации их погружали в пробирки с МПБ, которые инкубировали при температуре 37°С в течение 48 ч. Контролем служили пробы смывов с аналогичных объектов, промытых водопроводной водой.

С целью проверки обеззараживающего действия растворов натрия гипохлорита по отношению к определенному виду микроорганизмов, были определены концентрация и время, необходимые для уменьшения в инфицированной воде общего числа микроорганизмов данного вида на 99,9%. В каче-

стве тест-микроорганизмов использовали E.coli, Str.faecalis, Proteus vulgares, Bac.subtilis. Чистые культуры эталонных штаммов микробов засевали на поверхность плотных питательных сред с мясопептонным агаром, инкубировали в течение 24 часов при температуре 37°С. Из выросших колоний отбирали наиболее характерную колонию, которую переносили стерильной петлей в пробирку с мясопептонным бульоном. Необходимое количество концентрированных суспензий микроорганизмов получали путем смывов стерильными физиологическими растворами посевов, выращенных на твердых питательных средах.

При изучения процесса обеззараживания воды взятой из природного водоема, проводилось ее искусственное инфицирование санитарно-показательными микроорганизмами и в дальнейшем после смешивания ее препаратом, определялось санирующее действие натрия гипохлорита.

Антимикотичсское действие препарата определяли по В.В. Титову (1984) в отношении грибов, возбудителей дерматомикозов и микотоксико-зов, антигельминтное - на возбудителя аскаридиоза кур и дождевых червей, акарицидное - на возбудителя псороптоза кроликов и овоцидное - на яйца Псороптес куникули. Эти исследования проводили методом контакта с ток-сшшрованными поверхностями, обработанными препаратом, ларвицидное действие изучали на личинках мух.

Токсикологические свойства препарата изучали путем определения параметров острой, подострой и хронической токсичности, общего влияния на организм, органы и системы, а также ветеринарно-санитарной оценкой продуктов убоя и патоморфологаческими исследованиями органов и тканей животных после назначения им натрия гипохлорита.

Изучение острой токсичности проводили на белых мышах и белых крысах, при назначении в разных дозах однократно внутрь, внутримышечно, внутрибрюшинно и подкожно. О токсическом действии препарата судили по картине интоксикации и результатам патологоанатомичсского Вскрытия убитых животных после его применения. Подострую токсичность препарата

' изучали на белых крысах при ежедневном в течение 10 дней внутреннем введении в различных дозах. О токсическом действии препарата судили по картине интоксикации и по изменению показателей крови. Хроническую токсичность натрия гипохлорита изучали на белых крысах при многократном его введении внутрь в оптимальных терапевтических и трехкратно превышающих лечебные дозы в течение 30 дней, что соответствует трехкратному сроку. При ежедневных наблюдениях учитывали клинические показатели: общее состояние, аппетит, показатели дыхания, пульса и температуры тела, функции органов пищеварения и мочеоотделения, динамику прироста массы тела. При изучении влияния натрия гипохлорита на кровь животных ее исследовали общепринятыми методами, основные морфо-иммуно-биохи-мические показатели.

В отдельном опыте исследовали влияние натрия гипохлорита на кровь собак, в которой изучали отдельные показатели обмена белков. Местное действие натрия гипохлорита изучали методом накожных аппликаций и конъюк-тивальной пробой.

Изучение влияния натрия гипохлорита на функциональное состояние печени было проведено на поросятах. Для этого в конце опыта у животных брали кровь, в которой исследовали протеин, фермент- и пигментобразова-тельные функции.

Функциональное состояние почек под влиянием препарата оценивали общепринятыми методами по физико-химическим показателям мочи. При этом' определяли цвет, консистенцию, запах (оргшюлептически), прозрачность, удельный вес урометром Фогеля. Наличие или отсутствие в моче белков определяли при помощи пробы Роча, кипячением с азотной и сульфаци-ловой кислотой, углеводов - пробой Гайнеса, кровяных и желчных пигментов - бензидиновой и пробой Тарквея соответственно.

Влияние препарата на эмбриональное развитие и генеративную функцию животных проводили на свиноматках и овцематках путем вычисления

процента пред- и постнмплатационной гибели эмбрионов, обнаружения аномалий и уродств.

Изучение аллергизирующего действия натрия гипохлорита проводили на кроликах путем воспроизведения местной аллергической реакции - скари-фикационным тестом и путем воспроизведения анафилактического шока.

Ветеринарно-санитарнуга оценку мяса кроликов, убитых после применения препарата, проводили общепринятыми методами: внешним обследованием туш, органолептической оценкой вкусовых качеств мяса и бульона, определением концентрации водородных ионов с помощью рН-метра, реакции на пероксидазу.

Наряду с этим, были проведены патоморфологические исследования тканей и органов животных, использованных в опыте по изучению хронической токсичности. Гистологическому исследованию были подвергнуты печень, желудок, толстый и тонкий отделы кишечника, сердце, селезенка, почки, мезентериальные лимфоузлы. Фиксацию материала для гистологического исследования осуществляли в 10% растворе нейтрального формалина и резали на замораживающем микротоме. Окраску проводили гематоксилин - эозином.

Фармакологическое изучение включало следующие исследования: влияние натрия гипохлорита на функции желудочно-кишечного тракта, биоэлектрическую активность желудка, секреторную функцию желудочно-кишечного тракта, также на изменение концентрации водородных ионов кишечного сока, активность амилазы и трипсина.

Изучение влияния патрия гипохлорита на моторную функцию кишечника проводили на изолированном отрезке кишечника кроликов, используя метод Магнуса, для чего изолированные отрезки кишки помещали в раствор Тироде. Запись сокращений отрезков кишечника проводили на кимографе. Изучение влияния его на биоэлектрическую активность желудка проводили на кроликах. Запись осуществляли на электрогастрографе ЭГС-4 М через час после кормления. Препарат вводили ежедневно перорально за 5 дней до на-

чала опыта. Перед началом опыта животных выдерживали на 12 часовой голодной диете. Через сутки после последнего введения делали заключительную запись сокращений желудка.

Влияние натрия гшкшюрита на секреторную функцию желудочного тракта изучали на поросятах с фистулами желудка и двенадцатиперстной кишки. В собранном соке определяли концентрацию водородных ионов электрометрически - рН метром ЛПУ-04, переваривающую силу желудочного сока по Метту, свободную и связанную соляную кислоту, общую кислотность желудочного сока, а также каталитическую активность трипсина и амилазы кишечного сока общепринятыми методами.

Уровень интенсивности процесса перекисного окисления липидов (ПОЛ) и состояния антиоксидантной системы (АОС) оценивали в крови телят до введения натрия гипохлорита, а также через 3, 6 и 24 часа после введения. Для оценки интенсивности течения ПОЛ и состояния системы антиоксидантной защиты организма определяли: содержание в крови конъюгиро-ванных диенов и кетодиенов (Гаврилов В.Б. с соавт., 1988); содержание в сыворотке крови флуоресцирующих оснований Шиффа (усл.ед. 1 мл) (Bid-lack W.R. et al, 1973; содержание в крови мапонового диальдегида (Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г., 1977, Двинская Л.М., Никифорова Л.И., 1980); активность катадазьг в крови (Королюк М.А. с соавт., 1988); активность глутагион-редуктазы в крови (Крутикова Г.О., Штутмак И.М., 1976); активность глу-татионггероксидазы в крови с использованием в качестве субстрата перекиси водорода (Haferman D.G. et al, 1974).

При изучении влияния однократного парентерального введения натрия гипохлорита на показатели ПОЛ и АОС исследования проведены на 2-х группах беспородных белых крыс-самцов с массой тела 200-250 г. Контрольным крысам (п — 5) внутрибрюггшнно применяли 0,9% раствор NaCl. Животным опытной группы (п — 25) однократно вводили натрия гипохлорит с концентрацией 600 мг/л. Через 1,3,6,12,24 часа после инъекции у 5-ти крыс

опытной группы в крови определяли показатели, характеризующие интенсивность ПОЛ и АОС.

Изучение влияния парентерального применения натрия гипохлорита на интенсивность процесса ПОЛ и активность ферментативного звена АОС у клинически здоровых и больных диареей телят проведено на 8 животных, ко-' торым в возрасте 2 -7 дней в дозе 100-150 мл с концентрацией 600 мг/л вводился внутривенно однократно. Уровень интенсивности процесса ПОЛ и состояние антиоксидантной системы оценивался в крови телят до, а также через 3, б и 24 часа после введения.

Во второй серии аналогичные опыты проведены на 30 телятах. Все животные были разделены на три группы. Первая группа здоровые телята, вторая (контроль) и третья (опыт) - телята, больные диареей. Клиническим, обследованием установлена, что течение процесса у больных животных до лечения было тяжелым. Телятам опытной группы внутривенно или внутри-брюшинно вводили натрия гипохлорит в дозе 100-150 мл с концентрацией (600 мг/л) 1 раз в день в течение 3-4 дней. Препарат применяли до выздоровления. Больным жизотным из контрольной группы назначали комплексное лечение с использованием принятых в хозяйстве медикоментозных средств, в том числе антимикробных и антитоксических препаратов, биологически активных веществ (макро-, микроэлементы и витамины). Кровь брали на 3-5 сутки после начала применения натрия гипохлорита. Учитывали общее состояние, температуру тела, частоту пульса и дыхания. Оценку интенсивности течения процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и состояния антиоксидантной системы (АОС) защиты организма определяли по вышеприведенным показателям.

Исследования детоксицирующей функции печени проводили гексена-ловым тестом, спустя 24 часа после последнего внутрибрюшинного введения гексенала (Д. Г. Розина,1964).

Состояние микросомальной окислительной системы печени после введения натрия гипохлорита в дозе 5, 100, 500, 1000, 2000 и 3000 мг/л, изучали

соответственно на 70 беспородных белых мышах и на 70 мышах самцов-гибридов первого поколения Fi (СВА х C57BL), разбитых на 7 равных групп. Для оценки состояния микросомальной окислительной системы печени животных убивали в утренние часы под легким эфирным наркозом путем декапитации в холодной камере. У животных извлекали печень, определяли ее массу, а затем методом дифференциального центрифугирования (Ф. И. Арчаков, Т. Ф. Жирков, И. И. Карузина, 197L) выделяли микросо-мальную фракцию, в которой исследовали количество белка по 0. I.owry (1951). В гомогенатах печени определяли количество цитохромов Р-450 и В5 на спектрофотометре "Specord" (Германия) по методу T.Omura, R Sato (1964). В микросомальной фракции определяли также скорость п-гидрок-силировация анилина и N-деметилирования аминопирина, используемых в качестве модельных субстратов метаболитов лекарств (И.И. Карузина, А.И.Арчаков, 1977). Во всех случаях натрия гипохлорит вводили внутри-брюшинно из расчета 25 мл/кг массы. Контрольным группам животных вводили физраствор.

Гуморальный иммунитет оценивали по количеству IgM-продуцирую-щих антителообразуюших клеток (АОК) в селезенке мышей. Через 24 часа после последней инъекции натрия гипохлорита мышей иммунизировали эритроцитами барана (ЭБ). На 4-е сутки после введения антигена исследовали уровень IgM-АОЕ по A.J. Cunningham, A. Szenberg (1963).

В качестве показателя клеточного иммунитета использовали реакцию гиперчувствителъности замедленного типа (ГЗТ), выраженность который оценивали через 24 часа после последней инъекции натрия гипохлорита. На 4-е сутки после введения ЭБ, ГЗТ исследовали по методике P. Н. Lagrange, I.V. McKannes, Т.Е. Miller (1974).

Изучение иммунной системы проведено на 104 мышах-самцах - гибридов первого поколения Fi (СВА х C57BL), массой 18-20 г. Изучения реакции гуморального и клеточного иммунитета на введение натрия гипохлорита, ис-

следовали при использовании доз: 5, 100, 500 и 1 ООО мг/л. У этих же мышей изучали НСТ-тест макрофагов. В каждой группе находилось по 6 животных.

В исследованиях влияния сочетанного применения натрия гипохлорита и антибиотиков на антибиотикочувствительность микроорганизмов были использованы 12 антибактериальных препаратов: карбенициллин, мономицин, полимиксин М, полимиксин В, стрептомицин, хлорамфеникол (левомици-тин), канамицин, эритромицин, гентамицин, тетрациклин, рифампицин, бен-зилпенициллин, стрептоцид, фуразолидон и фурацилин. С этой целью использованы музейные штаммы E.coli К12 J53 и Staph, aureus 209Р, а также 78 клинических штаммов патогенного стафилококка и 54 штамма кишечной палочки, выделенных у больных с гнойно-воспалительными процессами.

Для этого, на микроорганизмы, проводилось одновременное воздействие антибактериальных препаратов в суббактериостатических концентрациях и натрия гипохлорита в дозе 5, 20, 40 и 80 мкг/мл в течение 18-20 ч. Через сутки после совместного воздействия препаратов исследовали антимикробную активность данных смесей. Сравнение антимикробной активности антибиотиков в сочетании с натрия гипохлоритом с активностью соответствующих препаратов, применяемых самостоятельно, производилось путем определения процента выживаемости микробных клеток. Подсчет числа выросших колоний выражали в процентах по отношению к контролю. В качестве контроля оценивали антимикробное действие препаратов, находящихся в течение суток в изотоническом растворе хлорида натрия.

Результат комбинированного действия оценивали как синергидный, если МПК антибиотиков снижалась в 4 раза и более, аддитивный - в 2 раза индифферентный, если МПК антибиотика не изменялась и как антагонистический, если МПК увеличивалась. Микробная нагрузка во всех опытах составляла 5x10 кл/мл. Опыты проводились не менее чем в 5 повторяемостях.

Исследование морфологических показателей крови на введение натрия гипохлорита проводили на интактных кроликах. Натрия гипохлорит в концентрации 300 и 600 мг/л вводили внутривенно В объеме 25-28 мл (1/10 ОЦК)

со скоростью 5 мл/мин. Пробы крови отбирали через 15 мин после инфузии. Подсчет количества форменных элементов крови проводили на автоматическом счетчике «Minos STX» (Франция).

В другой серии содержание эритроцитов и лейкоцитов определяли методом их подсчета в камере Горяева; гемоглобина - унифицированным гемо-глобинцианидным методом; скорость оседания эритроцитов - способом осаждения их с цитратом натрия; гематокритное число - центрифугированием крови в капилярной трубке с последующим определением результата по специальной шкале; форменные элементы крови - унифицированным методом морфологического исследования с дифференциальным подсчетом лейкоцитарной формулы; цветной показатель - методом деления количества гемоглобина на количество эритроцитов.

Изучение обмена белков проводили в крови по содержанию общего белка - рефрактометрически; белковых фракций - унифицированным методом олектрофоретического разделения белков сыворотки крови в агаровом геле; активность аминотрансфераз - колориметрическим динитрофенилгидразинов ым методом.

Влияние на активность пищеварительной системы изучали по результатам исследований физико-химических свойств фекалий, его консистенции, формы, цвета, запаха, присутствия посторонних примесей. Кроме этого, изучали физико-химические свойства каловых масс: концентрацию водородных ионов - лакмусовой бумагой,наличие крови - бензидиковой пробой, желчных пигментов - пробой Тарквея, жира и крахмала - микроскопически общепринятыми методами.

Фармакокинетику натрия гипохлорита изучали на 10 кроликах-самцах, которым в краевую вену уха вводили 25 мл раствора натрия гипохлорита с концентрацией 300 мг/л и 600 мг/мл (соответственно по 5 животных). На протяжении 24 часов (через 30 мин, 1, 3, б, 12 и 24 часа) отбирали пробы крови и мочи для измерения концентрации натрия гипохлорита, которую определяли титрометрически по изменению окраски при добавлении к 2,0 мл

плазмы крови или мочи 0,05 г кристаллического калия иодида (И) с последующим титрованием 0,01 н раствором КагвгОз.

Обработку показаний к применению, терапевтической дозы и кратности назначения натрия гипохлорита проводили на телятах, поросятах, птице и собаках. Определяли лечебную и профилактическую эффективность при различных наиболее распространенных заболеваниях.

Заключение о положительном действии препарата делали на основании результатов комплексных клинических, биохимических, гематологических и иммунологических методов исследований. Лечебно-профилактическую эффективность изучали в сравнении с наиболее широко применяемыми средствами в этих показаниях и отрицательным контролем. При этом эксперименты проводили на животных, больных желудочно-кишечными заболеваниями (диспепсия, колибактериоз), респираторными (парагрипп-3), при акушерско-гинекологической патологии (эндометриты, маститы), хирургической патологии (свежие инфицированные раны), для детоксикации септицимии и токсемии, сопровождающие различные заболевания собак, в т.ч. вирусные заболевания, фурункулезы, пиодермии и эндометриты, предупреждение мико-токсикозов, а также в качестве средства для консервации мяса и санации питьевой воды, обработки инкубационных яиц, для дезинфекции животноводческих помещений, лабораторной посуды и хирургических инструментов, обработки рук хирурга, консервации кормов и в качестве средства при кетозе коров.

За всеми животным ежедневно в течение периода назначения препарата, а также 30 дней после его окончания, вели клинические наблюдения за общим состоянием, аппетитом, продуктивностью, заболеваемостью и сохранностью. Показателем продуктивности служил прирост массы тела. Все животные были занумерованы и их взвешивание проводили индивидуально до введения препарата и затем однократно в месяц на всем протяжении опытов. На основании полученных данных высчитывали средний прирост массы тела животного и среднесуточный привес. ... . . ,

Расчет экономической эффективности проводили по H.H. Никитину (2001) с учетом «Методики определения экономической эффективности использования в сельском хозяйстве результатов научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ» (М., Колос, 1988)

Экспериментальный материал обрабатывали методом вариационной статистки с определением средних арифметических (М), их стандартных отклонений (м) и доверительных границ. Разницу между двумя величинами считали достоверной при уровне вероятности Р<0,05 (М.Л. Беленкий, 1963).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Получение и контроль качества натрия гипохлорита

Получение натрия гипохлорита основано на электролизе физиологического раствора (0,89% раствора натрия хлорида) с помощью различных типов электролизеров (ЭДО-3, «Ключ» и др.) Получаемый в результате раствор представляет собой газожидкостную смесь, содержащую активные формы хлора, связанные с кислородом в смеси с гипохлоритом натрия.

Контроль препарата ведут в соответствии с техническими условиями утвержденными Департаментом ветеринарии МСХ и П РФ.

Натрия шпохлорит представляет собой раствор с легким зеленоватым оттенком, со специфическим запахом хлора.

Содержание активного хлора в растворе колеблется от 300 мг/л до 3000 мг/л. Готовый раствор является самостерилизующим. Натрия гипохлорит разлагается при нагревании, поэтому не должен подвергатся термической стерилизации.

Срок хранения натрия гипохлорита без заметной потери активности в холодильнике при +4°С два месяца, далее активность падает и раствор превращается в обычный физиологический раствор. Никаких токсичных продуктов при этом не появляется, поэтому нет никаких противопоказаний для его внутривенного использования.

Под активной реакцией pH препарата подразумевают активные кислотные и щелочные вещества, обусловленные концентрацией в растворе ионов водорода HjO+ и гидроксила ОН". Величина pH натрия гипохлорита должна быть в пределах 7,5-8,5. Препарат должен соответствовать стерильным и апирогенным качествам. Вместе с тем, он должен быть безвредным, после внутрижелудочного (5 мл) и подкожного (2 мл) введения белым крысам. Состояния последних должно оставаться без существенных изменений.

3.2. Биологическое действие натрия гипохлорита

Проведенными исследованиями установлено, что все изученные нами штаммы микроорганизмов проявляли к гипохлориту натрия высокую чувствительность. Повышенной устойчивостью к натрия гипохлориту обладали Staöhilococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, которые погибали после контакта с раствором через 15-20 минут. Pasterella multocida не давала роста через 10 минут после контакта с раствором натрия гипохлорита. Штаммы кишечной палочки и сальмонелл сохраняли свою жизнеспособность в течение 20-30 минут натрия гинохлорит при бактериальной нагрузке 1,0 млн/мл действует бактерицидно в концентрации 0,32% на E.coli 020 и 0,08% - S.aureus, P.aeruginosa соответственно. При изучении бактериостатической активности установили, что препарат не обладает выраженным антимикробным действием в отношении исследованных штаммов микроорганизмов. При этом отмечалась лишь некоторая задержка роста культур по времени и, несмотря на значительную концентрацию препарата, регистрировали рост исследованных тест-культур аналогичных контролю. Очевидно, это объясняется блокированием активного хлора и атомарного кислорода питательной средой.

При сравнительном анализе различных форм галоидов (гипобромита и гипойодита), установлено, что максимальный бактерицидный эффект по отношению к различным возбудителям гнойной хирургической инфекции на-

блюдался у натрия гипохлорита, максимальная бактерицидная концентрация находилась в пределах 6,25-28 мкг/мл.

При комбинированном применении различных химиотерапевтических средств с натрия гипохлоритом, последний усиливает антимикробную активность нитрофурапов к кишечной палочке в 2,5-2,85 раза, сульфаниламидов (стрептоцид) в 1,5 и 2 раза соответственно. Усиление активности антибиотиков при своместном применении с натрия гипохлоритом колебалось от 1,5 до 10 раз. Чувствительность различных видов микроорганизмов располагается в следующем порядке кишечная палочка, стафилококк, вульгарный протей, синегнойная палочка, грибок кандида, при этом концентрация микроорганизмов влияет на антимикробную активность препарата, чем она выше, тем выше необходимая действующая концентрация натрия гипохлорита.

Натрия гипохлорит при парентеральном введении не обладает химио-терапевтическим действием при экспериментальной эшерихиозной инфекции. При этом терапевтическую дозу препарата определяли при внутрибрю-шинном его введении в объеме 1 мл на животное через 1 час после инфицирования. Установлено, что раствор натрия гипохлорита, несмотря на введение в значительных количествах, не предохранял мышей от гибели, что указывает на отсутствие химиотсрапевтического действия.

В другом опыте изучено действие препарата после внутреннего заражения мышей эшерихиозной водной взвесью суточной агаровой культурой в объеме 0,5 мл. Препарат вводили через 2 часа после инфицирования животных в дозе 1 мл на мышь. В результате установлено, что натрия гипохлорит предупреждал эшерихиозную септицемию мышей и профилактировал гибель животных. Контрольные животные при этом погибали в течение 1-2 суток. Эти результаты свидетельствуют об антисептическом действии препарата и возможности его внутреннего применения при диарейных заболеваниях животных с терапевтической целью.

Натрия гипохлорит в концентрации 1000 мг/л обладает фунгистатиче-ским действием в отношении аспергилл, пеницилл, альтернарий. По отноше-

нию к фузариям пенициллам он проявляет губительное действие после 2-5 часовой экспозиции и аспергилл после 5 часового воздействия, в концентрации 1000 мг/л.

Установлено, что натрия гипохлорит с концентрацией 600 мг/л обладает слабым акарицидным действием в отношении клещей Psoropt.es. Гибель их наступала через 3-6 часов воздействия на них НГ. Физраствор не обладал акарицидным действием. Вместе с тем, не отмечалось и овоцидного действия препарата. Выведение личинок при воздействии натрия гипохлорита с концентрацией 600 мг/л происходило аналогично контролю. Натрия гипохлорит в этой концентрации оказывает слабое ларвицидное действие на личинок мух. Гибель их наступала после 3-6 часовой экспозиции. Картина интоксикации характеризовалась сначала возбуждением, а через 1,5-3 часа замедлением движений, параличом и гибелью.

При изучении шггагельмшшюго действия препарата установлено слабое губительное действие на аскарид. Гибель их наступала после 1-2 часовой экспозиции. Картина интоксикации характеризовалась слабым возбуждением червей с последующим параличом и гибелью.

3.3. Токсикологические свойства натрия гипохлорита

При исследовании основных токсикологических параметров установили, что натрия гипохлорит является малотоксичным препаратом. Его максимальное внутреннее введение белым мышам в дозе 1 мл не оказывало выраженного токсического действия. У животных в течение 2 часов с момента введения препарата отмечалось лишь слабовыраженное угнетение, которое, по-видимому объясняется введением большого объема жидкости в желудок.

В опыте на белых крысах при введении 5 мл препарата внутрижелу-дочно так же не было обнаружено выраженного токсического действия, за исключением быстропроходящего угнетения. При этом каких-либо нарушений функции физиологических процессов в организме не наблюдали.

Введение такого же объема физиологического раствора контрольным животным вызывало примерно аналогичные изменения. При назначении препарата внутримышечно, внутрибрюшинно, подкожно также не регистрировали гибели животных и существенного изменения физиологических параметров.

В опытах по определению подострой токсичности натрия гипохлорит на белых крысах задавали в разных дозах 1,3,5 мл и в контроле - 5 мл дистиллированной воды, в течение 10 дней, установили, что у животных как опытных, так и контрольных групп на протяжение всего периода наблюдений не регистрировали существенных' отклонений в поведении, общем состоянии, аппетите. Явлений интоксикации не наблюдали.

При длительном внутреннем назначении НГ в течение 30 дней белым крысам и кроликам препарат не вызывал токсикоза у животных. Клинически выраженных нарушений функции жизненноважных органов и систем организма не регистрировали, масса их тела и отдельных органов не отличалась от таковых в контроле. Препарат отрицательно не влиял на процессы пищеварения и мочеотделения. Он также не влиял негативно на динамику прироста массы тела и внутренних органов, а также морфобиохимических показателей крови.

Назначение натрия гипохлорита вне зависимости от дозы не оказывало существенного влияния на содержание эритроцитов. Содержание лейкоцитов под влиянием препарата увеличивалось и находилось в прямой зависимости от дозы. С увеличением последней их количество возрастало.

В результате проведенных экспериментов было отмечено, что гипохлорит натрия не вызывал нарушений основных функций печени. Количественное содержание билирубина, грубодисперстных белков сыворотки крови, ферментов АлАТ и АсАТ у свиней обоих групп было идентичным.

Длительное ежедневное назначение (до 30 дней) натрия гипохлорита в различных дозах также не влияло отрицательно на общее состояние и аппетит, показателей температуры, пульса, дыхания кроликов.

Внутривенное введение натрия гипохлорита кроликам в различных концентрациях от 100 до 600 мг/л существенно не влияло на их морфологические показатели крови и общее состояние животных.

При остром внутривенном введении препарата (600 мг/л) собакам не отмечено существенных отклонений в показателях пульса и дыхания и других отклонений со стороны клинического статуса, биохимического состава и свертываемости крови, нарушения функций жизненно-важных систем и органов. Они оставались на протяжении всего опыта в пределах нормы. '

В опытах на поросятах установлено, что длительное назначение натрий гипохлорита не влияют отрицательно на основные функции органов пищеварения и мочеотделения. При этом физико-химические показатели мочи и фекалий на всем протяжении опыта оставались в пределах нормы. -< • ■ Препарат не оказывал местно-раздражающего Действия при накожных аплйкацияхи конъюнктйвальныхпробах. " . •»

При изучении аллерГизирующего действия НГ путем воспроизведения местных аллергических реакций й анафилактического шока установили, что он не обладает местным аллергизирующим действием, ни у одного животного не удалось вызвать картину анафилактического шока.

Опыты по изучению эмбриотоксического и тератагенного действия проведенные на белых крысах показали, что применение натрия гипохлорита животным отрицательно не влияет на эмбриональное развитие и постнаталь-

НЫЙ ПерИОД ЖИЗНИ ПЛОДОВ.

Патоморфологическим исследованием внутренних органов кроликов, получавших длительно препарат в 3-х кратной дозе, установлено, что НГ не оказывает вредного воздействия на ткани, органы и системы организма. Отмечаемые: изменения' сводятся, в основном, к небольшим скоплениям лимфо-идно-гистиоцитарных клеток в паренхиматозных органах.

Проведенная нами ветеринарно-санитарная оценка мяса кроликов, дает основание утверждать, что Натрия гипохлорит не оказывает токсического действия на организм животных, не изменяет качества и вкусовые свойства

мяса, не придает ему постороннего запаха. Проведенные опыты дают основание считать, что убой животных можно проводить независимо от сроков применения препарата.

3.4. Фармакологические свойства натрия гипохлорита

Результаты. исследования фармакинетики показали, что уже через 30 минут после инфузии в крови натрия гипохлорит не определяется. В моче натрия гипохлорит не определялся во все сроки исследования.

• Проведенными исследованиями различных сторон фармакодинамики установлено, что натрия гипохлорит помимо выраженного антимикробного действия оказывает разностороннее влияние на функции пищеварительного тракта. В концентрациях 300 мг/л и 600 мг/л он не вызывал существенных изменений сокращений изолированных отрезков кишечника. При воздействии препарата в концентрации 1000 мг/л наблюдали некоторое замедление ритма сокращения, и уменьшения амплитуды, которые через 10-15, минут восстанавливались. Пятидневное пероральное введение натрия гипохлорита кроликам в дозе 10 мл/кг повышало моторную функцию желудка, которая проявлялась увеличением биоэлектрической активности.

Результаты опытов на поросятах с фистулами желудка и двенадцатиперстной .кишки показали, что pH желудочного сока при многократном введении натрия гипохлорита повышалась. Через 24 часа после прекращения назначения препарата pH восстанавливалась до исходной. Введенный однократно,. он приводил к незначительному (в течение часа) снижению концентрации свободной соляной кислоты до 90,2% от фонового показателя. После двукратного и трехкратного введения препарата уровень свободной соляной кислоты возрастал в 2 раза. Через 3 часа количество соляной кислоты уменьшилось;и составило 135,3% от фона и через б часов количество свободной соляной кислоты почти достигло фонового показателя и составило 106% К фону. ........

Однократное введение в течение 3 дней подряд натрия гипохлорита 600 мг/л в дозе 150 мл вначале снижало концентрацию водородных ионов в желудочном соке, концентрацию связанной соляной кислоты, а так. же общую кислотность. Через час после назначения происходило увеличение рН содержимого желудочного сока, связанной кислоты и общей кислотности. Через б часов с начала эксперимента вышеуказанные показатели были в- пределах физиологической нормы. После трехкратного назначения в начале он уменьшал щелочность кишечного сока, каталитическую активность .трипсина1 и амилазы, спустя час после введения повышал эти показатели. Через б часов после назначения препарата все исследуемые нами показатели были в пределах физиологической нормы. -

При изучении влияния натрия гипохлорита на интенсивность, перекис-ного окисления липидов и показателей ферментного звена антиоксидантной системы здоровых новорожденных телят установлено, что препарат оказывает тормозящее влияние на интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ), снижая уровень конъюгированных диенов, кетодиенов, малонового диальдегида и малонового альдегида в течение 24 часов и повышает активность основных антиоксидантных ферментов: глютатионпероксидазы и глю-татионредуктазы, а также увеличение каталазы. Все это способствовало повышению антиоксидантного потенциала организма.

У больных диареей телят эта тенденция в действие натрия гипохлорита сохранилась. Применение натрия гипохлорита способствовало уменьшению явлений эндогенной интоксикации, стабилизировало процессы ПОЛ, активизировало ферментативное звено системы антиоксидантной защиты у больных животных, что позволяло увеличить энергетическую эффективность окислительных (оксидазных процессов, усилить некетозофосфатный путь окисления углеводов) и тем самым создать более благоприятные условия для процессов детоксикации, регенерации и нормализации метаболизма обмена в организме. Кроме того, препарат непосредственно реагируя с токсическими-про-

дуктами нарушенного метаболизма и другими токсинами натрия гипохлорит окисляет и нейтрализует их. .. ..

Аналогичная • фармакодинамика НГ установлена при однократном внутрибрюшинном введении препарата в опытах на интактных белых крысах.

Известно, что продукты лизиса эритроцитов повышают устойчивость организма к инфекциям где основными механизмами является стимуляция антителообразовандя, повышение бактерицидной и комплементарной активности сыворотки крови и активизация фагоцитоза. В наших экспериментах было установлено, что НГ проявляет гемолиз эритроцитов барана.в.концентрации 500 мг/л, а в плазме крови оказывает достоверное увеличение степени гемолитической способности в концентрации 1000 мг/л и выше. Показано, что кровь, окисленная раствором НГ гемосовместимы в концентрации от 500 до 1000 мг/л при объемном соотношении 1:10. • .

и . При внутрибрюшинном введении мышам .эритроцитов окисленной препаратом крови барана наблюдается четкая тенденция к стимуляции пока--зателей гуморального иммунитета, в частности, иммуноглобулинов класса М (JgM) антитело образующих клеток (АОК), которые характеризуют. Т и В звенья системы иммунитета. .. .

Наиболее существенная стимуляция отмечается при введении эритроцитов гемолизноЙ крови 0,06% раствором натрия гипохлорита в соотношении 6:1. При этом количество и JgM - АОК возрастает на 205% относительно исходных данных. Внутрибрюшинном введении натрия гипохлорита в дозе 5 мг/л из расчета 0,5 мл на мышь (0,025 мг/мышь) вызывало существенную стимуляцию показателей гуморального и клеточного иммунитета, животных. Так,- через 2 суток после последней-инъекции отмечалась мощная индукция ■JgM-АО К - 211б9,2±1848,5 (Р<0,001) и гиперчувствительность замедленного -типа (ГЗТ)-0,47±0,09 мн (Р<0,001), против соответственно 12б12,0±2042,0 и 0,20±0,02 мм показателей контроля^ . ■■•,

При изучении функционального состояния .макрофагов селезенки с помощью НСТ-теста, характеризующего напряженность внутриклеточного ки-слородозависимого метаболизма, установлено, что способность фагоцитов восстанавливать HCT достоверно снижена у мышей, получавших натрия ги-похлорит в дозе 5 мг/л (2,2±0,5%), против 9,0±1,1% в контрольной группе (Р<0,001). Установлено, что однократное и пятикратное введение натрия ги-похлорита в дозе 5 мг/л вызывает достоверную стимуляцию клеточного иммунитете до 0,47±0,09 мм и 0,52±0,07 мм против 0,20±0,06 мм и 0,17±0,04 мм в контроле (Р<0,001) и гуморального, когда количество JgM-AOK. увеличивалось до 21612,0±1650,0 и 34066,2±3896,6 этих величин селезенки мышей, г против 12612,0±2042,0, и 10341,8±1674,4 клеток в контроле (Р<0,001). .

Степень воздействия препарата зависит от кратности введения. Высокие концентрации препарата проявляют иммунодепрессивное действие.

При изучении влияния непрямого электрохимического окисления, на микросомальную монооксигеназную систему печени, обеспечивающую метаболизм : ксенобиотиков установлено, что натрия шпохлорит при внутри-брюшинном введении в дозе 5 мг/л белым мышам достоверно снижал барбитуровый наркоз по модели гексеналового сна на 57,7% (Р<0,001),по сравнению с контролем 36,9 мин, что свидетельствует об индукции этой системы и о повышении ее детоксицирующей функции. ■■■'■;"■•■•

: Вместе с тем, препарат в этой же дозе вызывает индуцирование, содержание цитохромов Р-450 и В-5 соответственно на 118,1% и 110,2% по отношению к исходным данным (Р<0,001). Высокие дозы проявляли обратное действие. Полученные данные открывают перспективы для разработки патогенетически обоснованных методов коррекции детоксикации организма при отравлениях и синтетических процессах.

При изучении механизма антимикробного действия натрия гипохлори-та установлено, что препарат способствовал ускорению Iag-фазы роста золотистого стафилококка. Воздействие препарата на клетки микроорганизма вызывало нарушение: механизмов регуляции ДНК и приводило, к существенно»

му увеличению его количества в клетках. Под воздействием препарата кишечная палочка теряла способность утилизировать лактозу, у синешойной палочки уменьшалась продукция пигмента пиоцианина, а золотистый стафилококк терял плазмокоагулазную активность. Кроме того кишечная палочка частично утратила способность гемолизировать эритроциты, а золотистый стафилококк - гемолитическую и лецитиназную активность. Таким образом, натрия гипохлорит в период 24-48 часов подавляет большинство факторов патогенности у микроорганизмов, что свидетельствует об угнетении у них токсинообразования и вирулентности. Препарат также угнетает активность дегидрогеназ, в частности, ппокозодегидрогеназы по отношению к контролю на 24-44%, перуватдегидрогеназы на 43-67% и сукцинатдегиДрогеназы на 5058%. ■ • .

Натрия гипохлорит проявлял потенцирующее действие на бактерицидную активность сыворотки крови в отношении кишечной палочки.

При изучении влияния натрия гипохлорита на проницаемость микробной клетки установлено, что препарат индуцирует выход ионов К+ как из грамположительных, так и грамотркцател ьн ых микроорганизмов. При этом утечка ионов К4" происходит более интенсивно из кишечной палочки и меньше из золотистого стафилококка. Следовательно, механизм антимикробного действия натрия гипохлорита, очевидно, связан с увеличением К+-ионной проницаемости за счет нарушения целостности поверхностных структур, а также нарушения лшшдно-белкового взаимодействия у бактерии. . .

3.5. Применение натрия гипохлорита в ветеринарии и животноводстве

При проведении клинических испытаний натрия гипохлорита с целью разработки показаний к его применению установлено, что выраженные антисептические и разностороннее фармакологическое действие, заключающиеся в антиоксидантном, иммуномодулирующем, детоксицирующим и других

действиях, способствует высокой лечебной и профилактической эффективности препарата при различных заболеваниях животных и птиц.

Профилактическая эффективность натрия гипохлорита при диспепсии телят составила 68-80%, а при гастроэнтерите поросят - 88-92%, а при коли-бактериозе цыплят-бройлеров - 96,8%, утят - 92,7%.

Лечебная эффективность препарата при диспепсии телят составила 87,5%, а при гастроэнтерите поросят составила 94%. Терапевтическая эффективность натрия гипохлорита при колибактериозе цыплят регистрировалась на уровне 94%, утят 97,2%. Полное выздоровление больного поголовья сельскохозяйственных животных регистрировали на 5 сутки, а птицы на 7 сутки (таблица 1).

Профилактическая эффективность препарата натрия гипохлорита при респираторных заболеваниях молодняка крупного рогатого скота составила 90%. Лечебная эффективность натрия гипохлорита при респираторных заболеваниях молодняка крупного рогатого скота составила 90%. Во второй серии опытов, где для аэрозольной обработки больного поголовья применяли натрия гипохлорит в комбинации с норсульфазолом лечебная эффективность была 100%. Назначение натрия гипохлорита в рекомендуемых дозах и концентрациях с профилактической и лечебной целью способствовало быстрому улучшению общего состояния больного поголовья, снижению процента заболеваемости и падежа. По всем опытным группам средний прирост массы тела животных и птиц в среднем был 2,5 раза больше, чем в контрольных группах.

Применение натрия гипохлорита для профилактики и лечения различных заболеваний животных и птиц не вызывало токсикоза в крови. При этом отмечено положительное влияние на содержание эритроцитов и насыщение их гемоглобином, повышением уровня общего белка.

. л- •.. ■ Таблица 1

Лечебная эффективность гипохлорйта натрия при колибактериозе птицы

Группа Показа- •' Дни опыта Лечебная

птица тели ' ' 1 ': 2 3 4 5 6 7 эффек-

тивность,

%

Утята бн. 250 250 198 93 41 . 29 Т

опыт зд. ' - ' - 52 157 209 221 ' 243 97,2

% заб. 100 100 ' 79,2 . . 57,2 16,4 11,6 2,8 ■

бн. 250; 250 250 210' 196 180 178-45*

контроль зд. ... - - . 40 54 70 72 46,8

% заб. 100 100 100 84 78,4' 72 53,2

Цыплята- бн. 250 ; 250 150 96, 76 41 , 15-8'

бройлеры зд. . - ,- > 50 . 154 174, ; 209 255 94

опыт % заб. 100 100 75 38,4 • 30,4. 16,4 6

бн. 250 250 230 230 210 208 196-42*

контроль зд. . . - 20 20 40 • 42 £ 54 21,6

% заб. • 100 100 92 92 84 83,2 * 78,4

* - количество павшей птицы; бн - количество больной птицы; зд - количество здоровой птицы; , % заб - процент заболеваемости.

Профилактическая эффективность натрия гипохлорита при эндометрите у коров составила 80%. Это позволило у коров опытной группы в среднем на 19,7 дпя сократить продолжительность бесплодия в сравнении с коровами контрольной группы (таблица 2).

Таблица 2

Эффективность натрия гипохлорита при гнойно-катаральном эндометрите коров

Показатели Опытная группа (п-75) Котрольная группа (п=64)

Излечено коров 68 49

% 90,7 76,5

Кратность введения 4,5 5,7

Курс лечения, дней 5,4 8

Срок от отела до стадии возбуждения 52,2 58,3

Период от отела до стадии плодотворного осеменения 66,2 78,2

Индекс оплодотворения 1,4 1,9

Терапевтическая эффективность препарата при остром гнойно-катаральном эндометрите была на уровне 90,7%.

Исследование терапевтического действия натрия гипохлорита проводили при лечении лактирующих коров с признаками острого гнойно-катарального мастита. Через пять дней от начала лечения выздоровело 60%, через 10 дней - 90% больных маститом коров. Установлена оптимальная терапевтическая доза натрия гипохлорита для лечения мастита лактирующих коров, которая составила 100 мл с концентрацией 600 мг/л на одно интерцис-тернальное введение.

При профилактике гнойно-воспалительных осложнений ран и проведении первичной хирургической обработки через 8-12 часов после травмы показатели микробной обссмененности ран после применения натрия гипохлорита составили 0,04%, а риванола - 0,4%. После первичной хирургической обработки в ряде случаев посевы были стерильными и у 7 из 10 наблюдали отсутствие микробов на обработанных поверхностях. Сроки заживления ран

зависели от сроков проведения первичной хирургической обработки. При обработке ран риванолом через 8-12 часов после ранения заживление наступало через 15,9±1 дней, а обработке через 20-24 часа после ранения — на 24,2±0,7 сутки (таблица 3).

При использовании же натрия гипохлорита соответственно через 9,9±0,3 дня и 12,9±0,5. При применении препарата не было обнаружено каких-либо признаков интоксикации, раздражения кожи или тканей раны, а также изменения общего клинического состояния животных. Применение натрия гипохлорита для лечения свежих инфицированных, ран способствовало заживлению по первичному натяжению.

Изучение терапевтической эффективности натрия гипохлорита проводили на модели кожно-мышечной загрязненной раны. При этом он эффективнее снижает обсемененность ран стафилококками по сравнению с фура-цилином, достигая достаточно низких абсолютных величин 293±30 микробных тел на 1 смг. В отдельных случаях наблюдали полное отсутствие роста микроорганизмов, чего не отмечено ни в одном из случаев использования фурацилина.

Натрия гипохлорит, применяемый для лечения микробно загрязненных ран оказывает благотворное влияние на течение раневого процесса у телят.

При применении натрия гипохлорита аппликационным методом, обильно смоченных салфеток, срок лечения больных дерматитом собак был на 4 дня короче контроля и составил в среднем 5,48±0,51 дня, против 9,04±0,59 дня при применении 10% линимента синтомицина.

При лечении собак и кошек с гнойными ранами (карбункулы, нагноившиеся гематомы, флегмоны и абсцессы) уже после 3-х процедур отмечалось отсутствие признаков воспаления и к 5-6 дню происходило полное заживление ран. В контроле, где применяли 2% р-р перекиси водорода и линимент синтомицина, заживление наступало на 9-10 дни (таблица 4).

Влияние антисептиков на обсемененность и сроки заживления ран

Время по- Количества м.кЛ см2 Вид заживления

Антисептик Кол-во животных сле обра- Сроки заживления (дни)

ботки до обработ- после об- Натяжение Смешанный тип

травмы, час ки работки первичное вторичное

Эта1фидина

лактат 10 8-12 104375±2008 412±117 4 3 3 15,9±1

20-24 1x106 606±98 2 4 3 24,2±0,7

Натрия ги-похлорит 600 мг/л 10 8-12 20-24 10612±1529 1x106 10±0,47 56±10 8 9 - 2 1 9,9±0,5 12,9±0,5

Эффективность применения натрия гипохлорита при хирургических

заболеваниях

Капп. Диагноз Группа Количество животных Дни лечения

1. Мокнущая экзема Контроль (линимент синтомицина) 24 5,48+0,51

Опыт (натрия гипохлорит 600 мг/л) 24 9,04±0,59 Р<0,001

2. Абсцесс Контроль (2% перекись водорода) 9 9,11±1,05 начаио грануляции 5,56±0,47

Опыт (натрия гипохлорит 600 мг/л) 9 5,44±0,29 начало граунял-ции 3,0±0,33 Р<0,001

3. Кесерево сечение, удаление опухоли Контроль (раствор бриллиантового зеленого) 5 9,0±4),45

Опыт (натрия гипохлорит 600 мг/л) 5 5,2±0,37 Р>0,001

Заживление швов после операционного вмешательства (кесарево сечение и удаление опухолей) после обработки их раствором натрия гипохлорита происходило на 5-6 день, тогда как в контроле оно было дольше на 3,6 дня.

При назначении натрия гипохлорита и карсела (р-каротин с селеном) при гепатозе коров установлено положительное влияние этих препаратов на морфобиохимические показатели крови больных животных, в частности отмечено достоверно увеличение уровня общего белка на 13,7-17,5% по сравнению с контролем, нормализация фракционного состава белковых фракций сыворотки крови и увеличение концентрации мочевины опытных групп. У последних также снижался уровень аминотрансфераз и на 12,5 увеличивался коэффициент де Ритиса (таблица 5).

Морфологические и биохимические показатели сыворотки крови здоровых и больных гепатозом коров

Показатели Здоровые Больные

Лейкоцита, 10 /л 8,11±0,38 10,05*0,14

Эритроциты, 1012/л 5,79*0,11 5,06*0,17

Гемоглобин, г/л 107,9*1,28 99,6*0,54*

Общий белок, г/л 76,84*4,17 65,38*1,41«

Альбумины, % 40,2*1,45 29,9*2,01

а-глобулик 10,510,48 16,8*0,91

р-глобулин 14,8*0,87 22,7*0,04*

7-глобулин 34,5*2,11 30,6 ±2,47

Тимоловая проба 0,23*0,05 0,47*0,04*

Глюкоза, ммоль/л 2,91*0,56 1,16+0,28

Мочевина, ммоль/л 4,22*0,14 2,41*0,31

Обш. лииидьт, г/л 3,41*0,28 3,56*0,11

Холестерин, ммоль/л 3,73*0,49 2,05*0,48

ЩФ, ммоль/ч.л 0,36*0,04 0,39*0,08

ALT, ммоль/ч.л 0,38*0,15 0,94*0,22

AST, ммоль/ч.л 0,51*0,32 1,08*0,29

Коэфф. де Ритиса 1,3 1,1

Каротин, мг% 0,97*0,12 0,32*0,08*

Витамин А, мкмояь/л 1,21*0,59 0,54*0,24

Витамин Е, мкмоль/л 10,24*0,93 8,09*0,36

билирубин общий, мкмоль/л 6,7*0,27 9,3*0,91

Об активизации репаративных процессов печени свидетельствовало уменьшение тимоловой крови в 2,2-2,7 раза. При этом в сыворотке крови увеличивался уровень витаминов, по каротину в 2,9, по ретинолу в 1,4, по то-каферолу в 1,3 раза.

Бактерицидная активность натрия гипохлорита позволяет использовать его для продления сроков хранения мяса. Так мясо говядины и кур, обработанные раствором натрия гипохлорита с концентрацией активного хлора 300 мг/л в условиях бытового холодильника +4°С сохраняют свойства свежего мяса в течение 20 суток. Мясо, обработанное активным раствором натрия гипохлорита и хранящееся при температуре +23-25°С, оставалось свежим в те-

чете двух суток. Контрольные образцы мяса уже через 20 часов имели гнилостный запах. Эти образцы полностью теряли товарные свойства. Образцы мяса, обработанные натрия гипохлоритом сохраняли органолептические свойства свежего мяса. Бульон от этих образцов был прозрачный и имел приятный запах и вкус.

Изучение влияния натрия гипохлорита на выводимость куриных эмбрионов показало, что в опытной партии из 103 эмбрионов было выведено 89 жизнеспособных цыплят или 86,4%, а в контрольной партии из 47 эмбрионов выведено 37 жизнеспособных цыплят или 78,7%. Аэрозольная обработка куриных эмбрионов гипохлоритом натрия из расчета 50 мл/м3 инкубационного шкафа при экспозиции 20 мип. является безвредной. Последующее развитие цыплят опытной группы (в течение 10 дней наблюдения) было нормальным.

Опытами по обеззараживанию лабораторной посуды и хирургических инструментов (шприцы, ножницы, иглы, пинцеты) установлено, что гибель микроорганизмов на объектах исследования совпадает по срокам гибели при непосредственном контакте микроорганизмов с натрия гипохлоритом.

Результаты применения натрия гипохлорита для дезинфекции животноводческих помещений свидетельствуют, что после дезинфекции количество микробных клеток в 1 м3 воздуха коровников значительно снизилось. До дезинфекции этот показатель был 520100 микробных клеток в 1 м3, после дезинфекции - 50200-48150. Проводимые санитарные мероприятия в родильных отделениях также позволили снизить бактериальную загрязненность воздушной среды и двести ее до 26040-32080 микробных клеток в 1 м3, что в 1,5 раза меньше допустимой нормы.

При применении препарата при актиномикозе крупного рогатого скота при наружном (аппликационном), обкалывании актиномикозного очага и внутривенном его назначении у животных наблюдали улучшение общего состояния, размягчение и отсутствие боли очагов и быстрое их созревание. Последующее вскрытие и обработка препаратом приводило к заживлению процесса в течение 8-10 дней

Натрия гипохлорит применяли для детоксикации при следующих заболеваниях у собак: сепсисе, пиодермии, фурункулезе различной этиологии, послеродовом эндометрите, характеризующихся токсемией и сепсисом эндогенной этиологии. О степени интоксикации судили по динамическому изменению крови собак.

Однократное капельное введение собакам натрия гипохлорит в дозе 5 мл/кг живой массы вызывало улучшение показателей крови. В частности, отмечали снижение цветного показателя (ЦП) с 1,6-1,9 до 1,3-1,4, уменьшение количества лейкоцитов на 20-30%, большее разнообразие их морфологического состава, В лейкограмме появлялись моноциты, снижалось количество сегментоядерных нейтрофилов, на 60-70%, уменьшалось количество па-лочкоядерных и юных нейтрофилов. У контрольных животных явных изменений в картине крови отмечено не было.

В результате проводимого лечения наблюдали быстрое улучшение состояния животных. Выздоровление при лечении сепсиса наблюдали в 98,7% случаев, в то время как эффективность общепринятых схем лечения составила 83%. Внутривенное введение препарата при фурункулезе сокращало сроки выздоровления с 14-18 дней до 5-7 дней в сравнении с антибиотикотерапией.

Применение натрия гипохлорита в качестве антисептика при орошении полостей вскрываемых абсцессов показало, что после трехкратной обработки (1 раз в сутки) происходило снижение воспалительной реакции вокруг раны, а в дальнейшем шло ускоренное заживление ран.

Натрия гипохлорит в качестве основного лечебного средства при послеродовом гнойном эндометрите у собак способствовал быстрому выздоровлению (отсутствие клинических признаков, гноя в мазках и смывах из половых органов, нормализации картины крови), которое отмечали на 2-3-ий день с момента начала лечения, а полная нормализация состояния животных происходила на 5-6 сутки. Лечение контрольных животных по стандартной схеме лечения с использованием антибиотиков и антимикробных препаратов

затягивала процесс на 7-9 дней, а в отдельных случаях оно переходило в хроническую форму.

Таким образом, натрия гипохлорит, достаточно эффективен при различных. патологиях у собак, сопровождающихся септическими явлениями и токсемией. О снижении уровня эндогенной интоксикации в результате проведенной терапии, свидетельствовало снижение к концу эксперимента концентрации средних молекул в 1,4-1,5 раза по отношению к контролю.

Положительный эффект натрия гипохлорита обеспечил при применении коровам больных кетозом. При этом отмечалась нормализация содержания лейкоцитов, повышение эритроцитов и гемоглобина, а также содержания белка в сыворотке крови. У опытных коров после проведения лечения не выявлялись кетонурия, кетолактия и гиперкетонемия (количество кетоновых тел в крови не превышало 6 мг/л). Следовательно, введение в схему лечения кетоза высокопродуктивных коров натрия гипохлорита в дозе 300-500 мл/ на животное способствует нормализации кислотно-щелочного равновесия, белкового, углеводного и витаминного обмена, стимулирует эритро- и гемопоэз.

Препарат оказался эффективным при микотоксикозах кур, при назначении его с кормом, пораженными различными микотоксинами.

При этом у опытной птицы исчезали клинические признаки гепатоди-строфии, холонгиты, клоациты, мочекислый диатез. При вскрытии цыплят опытных групп отмечено увеличение массы иммунокомпетентных органов, а также других внутренних органов (печени, желудка). При этом происходило увеличение общего белка, сыворотке крови, глюкозы, снижение мочевой кислоты и активность трансфераз, улучшались показатели продуктивности и сохранности птицы.

Применение натрия гипохлорита для дезинфекции инкубатория способствовало повышению выводимости цыплят до 86,4% в опыте, против 78,7% в контроле, а также повышение их дальнейшей жизнеспособности, сохранности и улучшения развития.

Введение натрия гипохлорита в питьевую воду с концентрацией 1000 мг/л с целью обеззараживания воды способствовало ее надежной дезинфекции. При этом в течение 3-19 минут происходила гибель на 99,9% кишечной палочки, фекального стрептококка, протея вульгарного и сенной палочки. Последние были наиболее устойчивыми к препарату.

При дезинфекции сосковых поилок натрия гипохлоритом (800 мг/л) рост бактерий в смывах с их поверхностей полностью отсутствовал уже после 5-10 мин воздействия. Препарат оказался эффективным для обработки и другой молочной посуды.

Установлено, что после обработки кожи молочной железы натрия гипохлоритом уровень контаминации бактериями группы кишечных палочек составлял 0,008-0,08 млн. КОЕ на 100 см2, стафилококками - 1,4-3,5 млн., а общее количество микроорганизмов - 2,4-11,2 млн., в то время как у контрольных животных количество бактерий группы кишечных палочек колебалось в пределах 0,84-2,6 млн. КОЕ/ЮО см\ стафилококков 18,3-39,7 млн., а общее количество микроорганизмов находилось в пределах 26,3-60,4 млн. КОЕ/ЮО см2.

После обработки натрия гипохлоритом кожи и слизистой оболочки наружных половых органов коров количество бактерий группы кишечных палочек было в пределах 0,3-1,9, а общее число микроорганизмов составляло 3,9-7,8 млн. КОЕ/ЮО см2. Число бактерий в контрольной группе животных находилось в пределах, соответственно 16,4-42,6; 16,5-26,9 млн.; 47,869,8 млн.

При консервировании кукурузного силоса натрия гипохлоритом (3000 мг/л) заметно снижается интенсивность микробиологических процессов. При силосовании кукурузы с применением натрия гипохлорита (15 л на тонну) продолжительность газовыделения снижалась на 5 суток, объем выделенного газа на 1,25 л/кг. Содержание органических кислот повышалось на 0,25%, а рН кукурузного силоса достигало 4,0. За счет применения НГ при силосовании кукурузы питательность корма повышалась на 9,5%. Бычки, получавшие

силос с испытуемым консервантом, имели лучшую поедаемость кормов рациона, они больше по сравнению с контролем потребляли кормовых единиц (на 4,2-11,2%), сухого вещества (на 4,6-7,2), обменной энергии (на 3,8-9,2), переваримого протеина (на 7,3-12,9%). Среднесуточный привес бычков рост массы в опыте составил 910 г, против 760 г в контроле (таблица 6).

Таблица 6

Показатели качества силосов при применении натрия гипохлорита

Показатели Контроль С применением натрия гипохлорита С применением закваски «Биотрофф»

Сухая масса, % 33,1 39,2 34,0

Кислотность рН (3 суток) 4,9 4,1 4,3

Кислотность рН (90 суток) 4,2 4,0 4,1

Молочная к-та, % в сух.м. 3,7 15,6 12,5

Уксусная к-та, % в сух.м. 1,4 1,0 1,6

Масляная к-та, % в сух.м. 0,1 0,0 0,0

Сахар, % в сух.массе 5,3 9,9 9,5

Ш3-Ы, % всего N 12,0 6,0 6,0

Потери сухой массы, % 5,7 4,1 4,4

Применение натрия гипохлорита при псевдомонозе свиней показало, что обработка препуциальной полости у хряков препаратом в концентрации 600 мг/л последняя остается стерильной в течении часа у 100% животных, через три часа у 87% и через 6 часов у 63% животных, что значительно превосходило эффективность обработки 3% раствором хинозала. Поэтому применение препарата рекомендуется назначать не позднее одного часа до взятия спермы.

Материалы настоящих исследований фармакологических и токсикологических свойств натрия гипохлорита, его эффективность при различных заболеваниях, разработанная нормативно-техническая документация на его применение одобрены Ветфармбиокомиссией Депаратмента ветеринарии МСХ и П РФ, что послужило основанием для утверждения в установленном

порядке Постоянного наставления по применению натрия гипохлорита в Ветеринарии (протокол № 2 от 23 апреля 1999 г.).

Таким образом, натрия гипохлорит является малотоксичшлм лекарст-вешшм средством, обладающим выраженными фармакологическим и антисептическими свойствами. Он эффективен в качестве лечебного и профилактического средства при желудочно-кишечных, респираторных, акушерско-гинекологических, хирургических, инфекционных заболеваниях. Натрия гипохлорит является хорошим средством для борьбы с токсемией эндогенного происхождения. Препарат также является хорошим дезинфицирующим средством.

Цена препарата но высокая, а применение его в ветеринарии и животноводстве экономически эффективно.

4. ВЫВОДЫ

1. Натрия гипохлорит (ЫаСЮ) - новый для ветеринарии препарат антисептического действия, получаемых путем электрохимической активации изотонического раствора натрия хлорида, механизм действия которого обусловлен активностью атомарного кислорода и активного хлора.

Раствор представляет собой газожидкостную смесь содержащие активные формы хлора, связанные с кислородом в смеси с натрия гшюхлоритом.

Содержание активного хлора в растворе колеблется от 300 мг/л до 3000 мг/л. Величина рН натрия гипохлорита в пределах 7,5-8,5 . Контроль препарата ведут в соответствии с Техническими условиями утвержденными Департаментом ветеринарии МСХ РФ.

2. Натрия гипохлорит обладает бактерицидной активностью в отношении штаммов кишечной палочки, золотистого стафилококка, пневмонийного стрептококка, синегкойной палочки, сальмонелл, вульгарного протея и многие другие. Более чувствительной к препарату была пастерелла, а менее штаммы кишечной палочки и сальмонелл. Бактериостатическая активность

не установлена, что связано, очевидно, с блокированием АДВ с питательной средой.

Натрия гипохлорит при бактериальной нагрузке 1,0 млн/мл действует бактерицидно в концентрации 0,32% на Е.соН 0,20 и 0,08% - Б.аигеиз и Р.аеп^тоза соответственно.

При комбинированном применении различных химиотерапевтических средств с натрия гипохлоритом, последние усиливает антимикробную активность нитрофуранов к кишечной палочке в 2,9-4,85 и золотистого стафилококка в 2,5-2,85 раза, сульфаниламидов (стрептоцид) в 1,5 и 2 раза соответственно. Усиление активности различных антибиотиков при совместном применении с натрия гипохлоритом колебалось от 1,5 до 10 раз.

Механизм антимикробного действия препарата, очевидно, связан с увеличением К+ ионной проницаемости оболочки микробной клетки, а также нарушения липидно-белкового обмена микроорганизма. Препарат при парентеральном введении не обладает химиотерапевтическим действием при экспериментальной эшерихиозной инфекции. При внутреннем введении препарат предупреждал эшерихиозную септицемию мышей и профилактировал их гибель, после энтералыюго инфицирования

3. Натрия гипохлорит с концентрацией 600 мг/л обладает слабым ака-рицидным в отношении клещей псороптеса, ларвицидным на личинок мух действием. Установлено также слабое антигельминтное действие в отношении аскаридии и определенная функгицидная активность в отношении грибов — дерматофитов и грибов продуцентов микотоксинов. Натрия гипохлорит в концентрации 1000 мг/л обладает фунгистатическим действием в отношении аспергилл, пеницилл, альтернарий, цефалоспор. По отношению к фузариям и пенициллам он проявляет фунгицидное действие после 2-5 часовой экспозиции и аспергилл после 5 часового воздействия в той же концентрации (1000 мг/л).

4. Натрия гипохлорит является малотоксичным препаратом для лабораторных и сельскохозяйственных животных. При длительном многократном

пероралыюм введении препарата в оптимальных и трехкратных терапевтических дозах он не оказывает токсического влияния на организм животных, морфо-иммуно-биохимические показатели крови, процессы пищеварения, мочеотделения и функции печени. Не отмечены отрицательные морфофунк-циональные изменения в органах и тканях.

Препарат не изменяет физико-химические и вкусовые качества мяса. Не проявляет кумулятивную активность, а также местнораздражающего и кожно-резорбтивного токсического действия.

5. Фармакокинетика препарата характеризуется тем, что уже через 30 минут после внутривенной инфузии кроликам в концетрации 300 и 600 мг/л в крови он количественно не определяется, а в моче во все сроки исследования.

6. Фармакодинамика натрия гипохлорита обусловлена выражешюй антимикробной активностью в отношении возбудителей многих болезней животных и птиц, положительным влиянием на каталитические и другие процессы пищеварения и непрямого окисления токсинов в тканях. Препарат проявляет антиоксидантное действие активно участвуя в окислительно-восстановительных процессах в организме. При этом он оказывает тормозящее влияние на интенсивность ПОЛ, снижая уровень конъюгированных диенов, кетоодисков, малонового диальдегида и малонового альдегида в течение 24 часов и повышает активность основных антиоксидантных ферментов: глютатионпероксидазы и глютатионредуктазы, а также увеличение каталазы.

Внутрибрюшинное применение натрия гипохлорита также стимулирует процессы ПОЛ и у больных животных, активизирует ферментативное звено системы антиоксидантной защиты и снижает использование кислорода в процессах свободнорадикального окисления.

При внутрибрюшинном введении препарата происходит существенная стимуляция показателей гуморального и клеточного иммунитета животных. Через двое суток после последней инъекции происходит мощная индукция иммуноглобулинов класса М ^М), антителообразующих клеток и гилерчув-

ствительности замедленного типа, а также активизация макрофагов селезенки по НСТ тесту.

Натрия гилохлорит активизирует микросомальную монооксигеназную систему печени, достоверно снижая барбитуровый наркоз по модели гексе-нилового сна на 57,7%, что свидетельствует о повышении детоксицирующей функции печени.

Препарат достоверно повышает содержание цитохрома Р — 450 и В — 5 соответственно 118,1% и 110,2% по отношению к исходным данным.

7. Натрия гипохлорит является эффективным профилактическим и лечебным средством при различных болезнях желудочно-кишечного тракта, органов дыхания сельскохозяйственных животных и птицы.

Профилактическая эффективность препарата при диспепсии телят составила 68-80%, гастроэнтерите поросят 86-92%, а терапевтическое действие при диспепсии телят - 87,5%, гастроэнтеритах поросят - 70-90%.

Профилактическая эффективность натрия гипохлорита при респираторных болезнях молодняка крупного рогатого скота достигала 90%, лечебная - 90%.

Применение натрия гипохлорита в качестве лечебного средства аку-шерско-гинекологической практике при эндометритах было положительным в 90,7%, а маститах - 90% случаев.

Назначение натрия гипохлорита больным животным ускоряло процесс выздоровления в среднем на 2-3 суток и положительно влияло на их общее состояние, функции пищеварительного канала, на основные биохимические показатели крови опытных животных.

Экономическая эффективность активного раствора натрия гипохлорита составила от 3 до 8 руб. на 1 рубль затрат.

8. Применение натрия гипохлорита эффективно в хирургической практике, в частности, как средство первичной хирургической обработки ран, а также обработки рук хирурга, хирургических инструментов и лабораторной посуды.

При применении натрия гипохлорита аплликационным методом срок лечения дерматитов собак составил 5,48±0,5 дня, против 9,04±0,5 дня в контроле. При лечение собак и кошек с гнойными ранами к 5 — 6-ому дням происходило заживление ран, а при применении 5% линимента синтомицина на 9-10 сутки. Заживление швов после операционного вмешательства происходило на 5-6 день, тогда как в контроле оно было дольше на 3,8 дня.

9. Препарат проявил высокую лечебную эффективность при актиноми-козе крупного рогатого скота при различных методах введения. При этом он быстро улучшал общее состояние животных, течение воспалительного процесса и способствовал его быстрейшему заживлению в течении 8-10 дней.

Обеззараживание питьевой воды животных в течение 3-19 мин приводило к 99,9% ее санации от кишечной палочки, фекального стрептококка, вульгарного протея и синегнойной палочки. 5-10 минутное воздействие на сосковые поилки и другую молочную посуду обеспечивало их надежную дезинфекцию,

Обработка кожи молочной железы резко снижало ее контаминацию кишечной палочкой (0,008-0,08 млн КОЕ на 100 смг против 0,84-2,6 млн в контроле) и золотистым стафилококком (соответственно 1,4-3,5 млн и 18,339,7 млн), а слизистой оболочхи половых путей снижало ее обсемененность в 11-20 раз. Обработка натрия гипохлоритом в концентрации 600 мг/л препу-циальной полости у хряков при псевдомонозе стерилизовала ее от синегно-ной палочки в течении 1 часа на 100%, через 3 часа - на 87% и через 6 часов -на 63%, что было значительно выше чем при применении 3% раствора хино-зола.

10. Натрия гипохлорит является эффективным детоксицирующим средством при токсемиях различной этиологии у животных больных гепато-зом и гепатитом, а также кетозе крупного рогатого скота.

При этом установлено положительное влияние препарата на морфо-биохимические показатели крови животных: увеличение уровня общего белка, мочевины, каротина, ретинола и токоферола, нормализация состава бел-

ковых фракций сыворотки крови, снижение трансфераз печени. О снижении эндогенной интоксикации свидетельствовало уменьшение концентрации средних молекул в 1,4-1,5 раза к контролю.

Введение в схему лечения кетоза натрия гипохлорита способствует нормализации кислотно-щелочного равновесия, стимуляции эритро- и гемо-поэза.

Установлена высокая эффективность препарата для детоксикации организма при сепсисе, пиодермиях, фурункулезе, послеродовых эндометритах собак.

Назначение его с кормом при микотоксикозах кур приводило к исчезновению химических признаков гепатодистрофии, холангитов, хлоацитов и мочекислого диатеза у птиц. При этом в крови происходило увеличение общего белка Глюкозы, снижение мочевой кислоты и активности трансфераз, повысилась продуктивность и сохранность птицы.

11. Натрия гипохлорит проявляет выраженные консервирующие свойства и может быть использован в качестве консерванта для продления сроков хранения мяса и кормов, а также силосования кормов.

При консервации кукурузного силоса снижалась интенсивность нежелательных микробиологических процессов, содержание органических кислот повышалась на 0,25%, рН-достигала 4,0, а питательность корма повышалась на 9,5%. При скармливании бычкам такого корма повышалась его поедае-мость, потребление к.е. возросло на 4,2-11,2% сухого вещества — 4,6-7,2 обменной энергии - 3,8-9,2 и переваримого протеина - на 7,3-12,9%. Среднесуточный привес опытных жиовтных составил 910 против 760 г в контроле.

11. Натрия гипохлорит можно использовать в качестве дезинфицирующего средства для обработки животноводческих помещений, лечебно-санитарных объектов, инкубаториев для повышения выводимости куриных эмбрионов. При этом выводимость цыплят возрастает до 86,4% против 78,7% в контроле, повышается жизнеспособность, сохранность и улучшается их рост и развитие.

5. ПРЕДЛОЖЕНИЕ ПРОИЗВОДСТВУ

Ветеринарной практике рекомендуется новый, эффективный препарат - раствор натрия гипохлорита для применения в различных показаниях ветеринарии и животноводстве.

Применение препарата регламентируется Наставлением по применению препарата — раствора активного натрия гипохлорита в ветеринарии. № 13. - 5-2/1659 от 25.06.99., утвержденным в установленном порядке Департаментом ветеринарии МСХ и П РФ, а также Методическими рекомендациями по применению препарата, утвержденными Академиком-секретарем Отделения ветеринарной медицины РАСХН А.Н. Смирновым.

Производство препарата организовано в ООО «КНИВИ-ФАРМ» г, Краснодар.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Жолобова И.С., Сулейманов С.М. Золотарев А.И.Профилактическая эффективность глимса при бронхопневмонии телят. В сб. «Использование новых методов диагностики и фармакологических средств в лечении и профилактике незаразных болезней животных» Воронеж, 1993, с. 66-68.

2. Жолобова И.С. Токсикологическая характеристика глимса. Материалы научной конференции, посвященные 50-летию Краснодарской НИВС. - Краснодар 1996, с.98.

3. Жолобова И.С., Дорожкин В.И. Токсикологические свойства гипохлорита натрия. Материалы 11-ой межгосударственной межвузовской научпо-практической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии». - Санкт-Петербург, 1999, с. 81-82.

4. Жолобова И.С. Общетоксические свойства раствора активного гипохлорита натрия. Труды Кубанского государственного аграрного университета. Выпуск 375 (403). Профилактика и лечение болезней сельскохозяйственных животных. Краснодар, 1999, с. 138.

5. Жолобова И.С. Эффективность применения раствора активного гипохлорита натрия при диарейных заболеваниях птиц. Труды Кубанского государственного аграрного университета. Выпуск 375 (403). Профилактика а лечение болезней сельскохозяйственных животных. Краснодар, 1999, с. 138.

6. Жолобова И.С. Применение гипохлорита натрия при лечении инфицированных ран у собак. Материалы 2-й региональной конференции «Актуальные проблемы вете-

ринарной медицины мелких домашних животных на Северном Кавказе» 27 мая 1999 г. п. Персиановский, с. 62.

7. Жолобова И.О., Турченко А.Н.,Ткачев В.К., Шалагинов Е.К., Лимаренко A.A., Попов Ю.И. Лечение субинволюции матки и эндометритов у коров. Плакат, Краснодар, 2000 г., 4 с.

8. Жолобова И.С. Фармакологические исследования раствора активного гипохлорита натрия в ветеринарии. Автореферат кандидатской диссертации. Казань, 1999. -24 с.

9. Жолобова И.С. Трошин H.A. Фармако-токсикологическое исследование раствора активного гипохлорита натрия. Труды Краснодарского института агробизнеса, Краснодар, 1999 г., 14 с.

10. Жолобова И.С. Антилов В.А., Терехов В.И., Трошин H.A. Рекомендации «Фармакотерапия диарей телята. Краснодар, 2000. с. 14.

11. Жолобова И.С., Решетникова Н.Г., Трунов М.А. Применение препарата PATH. Труды Калининградской НИВС. Калининград, 2002 г. с. 227

12. Антилов В.А., Жолобова И.С. Перспективы применения минеральных вод в животноводстве. Труды Калининградской НИВС. Калининград, 2002. с.

13. Жолобова И.С., Лимаренко A.A. Применение натрия гипохлорита при остром эндометрите у коров. Материалы научно-практической конференции Краснодарской НИВС, Краснодар, 2001, с. 55

14. Жолобова И.С., Лимаренко A.A. Гипохлорит натрия при акушерско-гинекологаческой патологии у коров. Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 100-летаю А.П. Студенцова. Казань, 2004, с. 204.

15. Жолобова И.С., Зыков Е.Д., Антилов В.А. Технические условия по контролю препарата РАГН. ТУ, Москва, 1999,23 с.

16. Жолобова И.С. Наставление по применению натрия гипохлорита в ветеринарии. № 13-5-2/1659 от 25.06.99, утвержденным в установленном порядке Департаментом ветеринарии МСХ и П РФ.

17. Жолобова И.С. Влияние активного раствора гипохлорита натрия на выводимость куриных эмбрионов. Сборник научных трудов. ВНИИВСГиЭ. Т. 116. Москва, 2004, с. 76-77. ■

18. Жолобова И.С., Антипов В.А. РАГН перспективный препарат ветеринарного назначения. Сб. научных трудов ВНИИ ветеринарной санитарии, гигиены и экорло-гни. Т. 116. Москва, с. 74-75.

19. Жолобова И.С., Антипов В.А. Биоцидное действие гипохлорита натрия. Сборник научных трудов ВНИИВСГиЭ. Т. 116. Москва, с. 78-80.

20. Жолобова И.С. Применение РАГН для детоксикации организма собак. Краснодар. Сб.научлрудов КГАУ, 2004, с. 209

21. Жолобова И.С. Раствор активного гипохлорита натрия в лечении гнойных ран. Материалы юбилейной научно-практической конференции, посвященной 35-летию ГУ Прикаспийского зонального научно-исследовательского ветеринарного института. Махачкала, 2003, с. 131.

22. Жолобова И.С. Детоксикация организма животных с использованием препарата • РАГН. Материалы юбилейной научно-практической конференции, посвященной

35-летию ГУ Прикаспийского зонального научно-исследовательского ветеринарного института. Махачкала, 2003, с. 132.

23. Жолобова И.С., Антипов В.А. Основы терапии животных. Воронеж: Издательство «Истоки», 2004. -195 с.

24. Жолобова И.С., Антипов В.А., Петросян Э.А., Зафириди А.Г. Рекомендации по применению гипохлорита натрия в ветеринарной практике. Кубанский государственный аграрный университет. Краснодар, 2004. — 25 с.

25. Жолобова И.С., Антипов В.А., Петросяп Э.А., Зафириди А.Г. Методические рекомендации по применению натрия гипохлорита в ветеринарной практике. Москва, 2004.-26 с.

26. Жолобова И.С. Применение PATH для профилактики гастроэнтерита поросят. Материалы Всероссийской научно-практической конференции и XII Межвузовского координационного совета «Свинина», пос. Персиановсхий, 2004, стр. 129.

27. Жоллобова И.С., Зафириди А.Г. Лечебная эффективность РАП1 при гастроэнтерите поросят. Материалы Международной научно-практической конференции. Состояние и проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии в животноводстве (сборник научных трудов) Чебоксары, 2004 г., с. 409-11.

28. Жолобова И.О., Зафириди А.Г. Лечение гипохлоритом натрия колибактериоза птиц. Материалы Международной научно-практической конференции. Состояние и проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии в животноводстве (сборник научных трудов) Чебоксары, 2004 г., С.411-413.

29. Шипицын А.Г., Жолобова И.С. Информационный листок № 74-04. Новые дезин-фектапты для аэрозольной обработки помещений. ЦНТИ. Краснодар, 2004,4 с.

30. Жолобова И.С. Эффективность натрия гипохлорита при диарейных заболеваниях телят и поросят. Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины. Н.Э. Баумана, том 180. Казань, 2005, с. 207-208.

31. Жолобова И.С., Петросян Э.А. Фармакологические свойства натрия гипохлорита. Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, том 181, Казань, 2005, с. 14.

32. Жолобова И.О.. Кузьминова Е.В., Зафириди А.Г. Нормализация функции печени у крупного рогатого скота. Всероссийская газета для ветеринарных врачей, зооинже-неров «Ветеринарный консультант» № 8/123 апрель 2006, с, 8-9.

33. Жолобова И.С. Применение натрия гипохлорита для продления срока хранения мяса Материалы 5-й Международной и практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины - ветеринарно-санитарного контроля на биологической безопасности с/х продукции посвященной 75 лет МГУПБ. Москва, с. 208209.

Подписано в печать Бумага офсетная Печ. л. 1,5 Тираж 1001 экз.

19.10.2006 г. Формат 60x84

Офсетная печать Заказ № 562

Отпечатано в типографии КубГАУ 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13

Улучшение ветеринарного обслуживания животноводства, разработка наиболее эффективных методов и средств профилактики и лечения заболеваний сельскохозяйственных животных является актуальной задачей ветеринарной науки.

В указанных целях широко используют различные фармакологические средства, обладающие антимикробными свойствами. Однако их эффективность в последнее время значительно снизилась из-за изменения биологических свойств микроорганизмов и проявления у них множественной резистентности после многократного пассажирования через организм больных животных и повышения вирулентных свойств. Устойчивые к известным препаратам серотипы возбудителей, как новая биологическая популяция, циркулируют в природе и, инфицируя животных, резко усугубляют течение патологического процесса, существенно затрудняя терапию заболевших.

Все это требует поиска и разработки новых средств с различными механизмами антимикробного действия. С рассматриваемых позиций значительный интерес представляет отечественный препарат натрия гипохлорит, получаемый путем активизации воды электрохимическим способом с помощью электролизеров различной конструкции, в том числе, ЭДО-3, выпускаемых Региональным центром научно-технических исследований (г. Москвы) и «Ключ» (НПО Петролайзер).

Получаемые растворы представляют собой бесцветную прозрачную жидкость, 1 л которой содержит от 300 до 1000 мг/л активного вещества натрия гипохлорита.

Электроактивированная вода получила достаточно широкое применение в медицине в самых различных показаниях (Е.Егоров, 1992; Т. Абрамова, 1995). В последние десятилетие проведены два Международных симпозиума в Киеве в 1990 и в Москве в 1994 году, а также Всероссийская научнопрактическая конференция (Москва, 1992 г.) по применению электроактивированной воды в различных областях здравохранения.

В ветеринарной практике не разработаны четкие показания к применению электроактивированной воды на сельскохозяйственных животных, не определены ее основные фармако-токсикологические свойства (В.И. Дорофеев, 1997).

В данной работе предусматривалось проведение исследований по разработке показаний и определению оптимальных параметров применения препарата при различных болезнях животных в соответствии с установленными требованиями, изучению специфической активности и основных токсикологических и фармакологических свойств.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования является изучение, разработка и внедрение в практику ветеринарии и животноводства раствора активного натрия гипохлорита для лечения и профилактики ряда заболеваний животных и птицы. Для реализации этой цели были поставлены следующие задачи:

- дать обоснование для разработки и внедрения раствора активированного натрия гипохлорита в практику ветеринарии и животноводства;

- изучить биологическую активность препарата в отношении возбудителей отдельных болезней животных;

- определить основные фармацевтические, токсикологические, фармакологические свойства препарата и разработать методы его контроля;

- разработать показания к его применению, установить лечебно-профилактическую эффективность при ряде заболеваний животных и птиц;

- разработать необходимую нормативную документацию на его применение в целях внедрения в практику ветеринарии и животноводства.

Научная новизна. В результате проведенных исследований предложен натрия гипохлорит, изучены его биологическая, антимикробная, антигрибная, антигельминтная активность; в соответствии с установленными требованиями, определены основные фармако-токсикологические характеристики и методы контроля; отработаны показания к применению, оптимальные схемы и дозы при лечении и профилактике наиболее распространенных заболеваний животных и птицы.

Практическая значимость. Для практической ветеринарии предложен препарат натрия гипохлорита, обладающий высокой лечебной и профилактической эффективностью при ряде желудочно-кишечных, респираторных, акушерско-гинекологических и хирургических болезней, а также применяемый в качестве дезинфектанта и антисептика.

Практическая ценность препарата подтверждается положительными результатами широких производственных испытаний и Наставлением по применению в ветеринарии, одобренным Ветфармбиокомиссией и утвержденным Департаментом ветеринарии в установленном порядке.

Внедрение результатов исследований. Производство натрия гипохлорита освоено АО «Регнатис» г. Москва, «Петролайзер» г.Санкт-Петербург. В соответствии с разработанной документацией в условиях животноводческих хозяйств страны обеспечено его применение в качестве высокоэффективного лечебно-профилактического, дезинфицирующего и консевирующего средства.

Апробация работы. Материалы диссертации были доложены на:

- заседании Ветфармбиокомиссии Департамента ветеринарии МСХ и Продовольствия.

- научно-практических конференциях (Новочеркасск, 1999; Краснодар, 19992004; Москва, 2004; Чебоксары, 2004; Казань, 2005)

- производственных совещаниях ветеринарных специалистов Краснодарского края 1998-2004 г.

На защиту выносятся:

- обоснование разработки натрия гипохлорита;

- результаты исследований биологической активности препарата;

- результаты его фармако-токсикологических исследований;

- результаты разработки показаний к применению и изучения лечебно-профилактической эффективности препарата при различных заболеваниях животных и птицы;

- практические предложения по применению и внедрению препарата активного натрия гипохлорита в ветеринарии.

Публикации. Основные материалы диссертации опубликованы в 33 научных статьях.

6. ВЫВОДЫ

1. Натрия гипохлорит (NaCIO) новый для ветеринарии препарат антисептического действия, получаемых путем электрохимической активации изотонического раствора натрия хлорида, механизм действия которого обусловлен активностью атомарного кислорода и активного хлора.

Раствор представляет собой газожидкостную смесь содержащие активные формы хлора, связанные с кислородом в смеси с натрия гипохлоритом.

Содержание активного хлора в растворе колеблется от 300 мг/л до 3000 мг/л. Величина рН натрия гипохлорита в пределах 7,5-8,5 . Контроль препарата ведут в соответствии с техническими условиями утвержденными Департаментом ветеринарии МСХ РФ.

2. Натрия гипохлорит обладает бактерицидной активностью в отношении штаммов кишечной палочки, золотистого стафилококка, пневмонийного стрептококка, синегнойной палочки, сальмонелл, вульгарного протея и многие другие.

Более чувствительной к препарату была пастерелла, а менее штаммы кишечной палочки и сальмонелл. Бактериостатическая активность не установлена, что, очевидно, блокированием активного хлора и атомарного кислорода питательной средой.

Натрия гипохлорит при бактериальной нагрузке 1,0 млн/мл действует бактерицидно в концентрации 0,32% на E.coli 0,20 и 0,08% - S.aureus, P.aeruginosa соответственно.

При комбинированном применении различных химиотерапевтических средств с натрия гипохлоритом, последние усиливает антимикробную активность нитрофуранов к кишечной палочке 62,9-4,85 и золотистого стафилококка в 2,5-2,85 раза, сульфаниламидов (стрептоцид) в 1,5 и 2 раза соответственно.

Усиление активности различных антибиотиков при совместном применении с натрия гипохлоритом колебалось от 1,5 до 10 раз.

Механизм антимикробного действия препарата очевидно связан с увеличением К+ ионной проницаемости оболочки микробной клетки, а также нарушения липидно-белкового обмена микроорганизма. Препарат при парентеральном введении не обладает химиотерапевтическим действием при экспериментальной эшерихиозной инфекции.

При внутреннем введении препарат предупреждал эшерихиозную септицемию мышей и профилактировал их гибель, после энтерального инфицирования

3. Натрия гипохлорит с концентрацией 600 мг/л обладает слабым ака-рицидным в отношении клещей псороптеса, ларвицидным на личинок мух действием. Установлено также слабое антигельминтное действие по тесту дождевых червей и определенную функгицидную активность в отношении грибов - дерматофитов и грибов продуцентов микотоксинов.

Натрия гипохлорит в концентрации 1000 мг/л обладает фунгистатиче-ским действием в отношении аспергилл, пеницилл, альтернарий, цефалос-пор. По отношению к фузариям и пенициллам он проявляет фунгицидное действие после 2-5 часовой экспозиции и аспергилл после 5 часового воздействия в той же концентрации (1000 мг/л).

4. Натрия гипохлорит является малотоксичным препаратом для лабораторных и сельскохозяйственных животных. При длительном многократном пероральном введении препарата в оптимальных и трехкратных терапевтических дозах он не оказывает токсического влияния на организм животных, морфо-иммуно-биохимические показатели крови на процессы пищеварения, мочеотделение и функции печени. Не отмечены отрицательные морфофункциональные изменения в органах и тканях.

Препарат не изменяет физико-химические и вкусовые качества мяса. Не проявляет кумулятивную активность, а также местнораздражающего и кожно-резорбтивного токсического действия.

5. Фармакокинетика препарата характеризуется тем, что уже через 30 минут после внутривенной инфузии кроликам в концентрации 300 и 600 мг/л в крови он количественно не определяется, а в моче во все сроки исследования.

6. Фармакодинамика натрия гипохлорита обусловлена выраженной антимикробной активностью в отношении возбудителей многих болезней животных и птиц, положительным влиянием на каталитические и другие процессы пищеварения и непрямого окисления токсинов в тканях. Препарат проявляет антиоксидантное действие активно участвуя в окислительно-восстановительных процессах в организме. При этом он оказывает тормозящее влияние на интенсивность ПОЛ, снижая уровень конъюгированных дисков, кетоодисков, малонового диальдегида и малонового альдегида в течение 24 часов и повышает активность основных антиоксидантных ферментов: глютатионпероксидазы и глютатионредуктазы, а также увеличение каталазы. Все это способствовало повышению антиоксидантного потенциала организма.

Внутрибрюшинное применение натрия гипохлорита также стимулирует процессы ПОЛ и у больных животных, активизирует ферментативное звено системы антиоксидантной защиты и снижает использование кислорода в процессах свободнорадикального окисления.

При внутрибрюшинном введении препарата происходит существенная стимуляция показателей гуморального и клеточного иммунитета животных. Через двое суток после последней инъекции происходит мощная индукция иммуноглобулинов класса М (JgM) антителообразующих клеток и гиперчувствительности замедленного типа, а также активизация макрофагов селезенки по НСТ тесту.

Натрия гипохлорит активизирует микросамальную монооксигеназную систему печени, достоверно снижая барбитуровый наркоз по модели гексе-нилового сна на 57,7%, что свидетельствует о повышении детоксицирующей функции печени.

Препарат достоверно повышает содержание цитохрома Р - 450 и В - 5 соответственно 118,1% и 110,2% по отношению к исходным данным.

7. Натрия гипохлорит является эффективным профилактическим и лечебным средством при различных болезнях желудочно-кишечного тракта, органов дыхания сельскохозяйственных животных и птицы.

Профилактическая эффективность препарата при диспепсии телят составила 68-80%, гастроэнтерите поросят 86-92%. Терапевтическое действие при диспепсии телят - 87,5-100%, гастроэнтеритах поросят - 70-90%.

Профилактическая эффективность натрия гипохлорита при респираторных болезнях молодняка крупного рогатого скота составила до 90%, лечебная от 90%.

Применение натрия гипохлорита в качестве лечебного средства аку-шерско-гинекологической практике при эндометритах было положительным в 90,7%, а маститах - 90% случаев.

Назначение натрия гипохлорита больным животным ускоряло процесс выздоровления в среднем на 2-3 суток и положительно влияло на их общее состояние, функции пищеварительного канала, на основные биохимические показатели крови опытных животных.

Экономическая эффективность активного раствора натрия гипохлорита составила от 3 до 8 руб. на 1 рубль затрат.

8. Применение натрия гипохлорита эффективно в хирургической практике, в частности, как средство первичной хирургической обработки ран, а также обработку рук хирурга и хирургических инструментов и лабораторной посуды.

При применении натрия гипохлорита оплликационным методом срок лечения дерматитов собак составил 5,48±0,5 дня, против 9,04±0,5 дня в контроле.

При лечение собак и кошек с гнойными ранами к 5-ому - 6-ому дню происходило заживление ран, а при применении 5% линимента синтомицина на 9-10 сутки заживление швов послеоперационного вмешательства происходило на 5-6 день, тогда как в контроле оно было дольше на 3,8 дня.

Он проявил высокую лечебную эффективность при актиномикозе крупного рогатого скота при различных методах введения.

9. При этом он быстро улучшал общее состояние животных, течение воспалительного процесса и способствовал его быстрейшему заживлению в течении 8-10 дней. Обеззараживания питьевой воды животных в течение 319 мин приводило к 99,9% ее санации от кишечной палочки, фекального стрептококка, вульгарного протея и синегнойной палочки, 5-10 минутное воздействие на сосковые поилки и другую молочную посуду обеспечивало их надежную дезинфекцию.

Обработка кожи молочной железы резко снижало ее контаминацию кишечной палочкой (0,008-0,08 млн КОЕ на 100 см2 против 0,84-2,6 млн в контроле) и золотистым стафилококком (соответственно 1,4-3,5 млн и 18,339,7 млн), а слизистой оболочки половых путей снижало ее обсемененность в 11-20 раз. Обработка натрия гипохлоритом в концентрации 600 мг/л пре-пуциальной полости у хряков при псевдомонозе стерилизовала ее от синег-ноной палочки в течении 1 часа на 100%, через 3 часа на 87% и через 6 часов на 63%, что было значительно выше чем при применении 3% раствора хино-зала.

10. Натрия гипохлорит является эффективным детоксицирующим средством при токсемиях различной этиологии у животных больных гепатозом и гепатитом, а также кетозе крупного рогатого скота.

При этом установлено положительное влияние препарата на морфо-биохимические показатели крови животных: увеличение уровня общего белка, мочевины, каротина, ретинола и токоферола, нормализация состава белковых фракций сыворотки крови, снижение трансфераз печени. О снижении эндогенной интоксикации свидетельствовало уменьшение концентрации средних молекул в 1,4-1,5 раза к контролю.

Введение в схему лечения кетоза натрия гипохлорита способствует нормализации кислотно-щелочного равновесия, стимуляции эритро- и гемо-поэза.

Установлена высокая эффективность препарата для детоксикации организма при сепсисе, пиодермиях, фурункулезе, послеродовых жндометри-тах собак назначение препарата с кормом при микотоксикозах кур приводило к исчезновению химических признаков гепатодистрофии, холангитов, хлоацитов и мочекислого диатеза у птиц. При этом в крови происходило увеличение общего белка глюкозы, снижение мочевой кислоты и активности тремофераз, повысилась продуктивность и сохранность

11. Натрия гипохлорит проявляет выраженные консервирующие свойства и может быть использован в качестве консерванта для продления сроков хранения мяса и кормов, а также силосовании кормов.

При консервации кукурузного силоса снижалась интенсивность нежелательных микробиологических процессов, содержание органических кислот повышалась на 0,25%, рН-достигала 4,0, а питательность корма повышалась на 9,5%. При скармливании бычкам такого корма повышалась его поедае-мость, потребление к.е. возросло на 4,2-11,2% сухого вещества - 4,6-7,2 обменной энергии - 3,8-9,2 и переваримого протеина - на 7,3-12,9%. Среднесуточный привес опытных жиовтных составил 910 против 760 г в контроле.

12. Натрия гипохлорит можно использовать в качестве дезинфицирующего средства для обработки животноводческих помещений, лечебно-санитарных объектов, инкубаториев для повышения выводимости куриных эмбрионов. При этом выводимость цыплят возрастает до 86,4% эмбрионов. При этом выводимость цыплят возрастает до 86,4% против 78,7% в контроле, повышается жизнеспособность, сохранность и улучшается их рост и развитие.

7. ПРЕДЛОЖЕНИЕ ПРОИЗВОДСТВУ

Ветеринарной практике рекомендуется новый, эффективный препарат - раствор натрия гипохлорита для применения в различных показаниях ветеринарии и животноводстве.

Применение препарата регламентируется Наставлением по применению препарата - раствора активного натрия гипохлорита в ветеринарии. № 13. - 5-2/1659 от 25.06.99., утвержденным в установленном порядке Департаментом ветеринарии МСХ и П РФ. Производство препарата организовано в ООО «КНИВИ-ФАРМ» г. Краснодар.

5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Улучшение ветеринарного обслуживания животноводства, разработка наиболее эффективных методов, средств профилактики и лечения распространенных заболеваний сельскохозяйственных животных является актуальной задачей ветеринарной науки.

Мировой опыт борьбы с заболеваниями животных показал, что основная роль при этом отводится лекарственной терапии, позволяющей значительно снизить наносимый животноводству экономический ущерб.

В этих целях используют различные химиотерапевтические и антисептические фармакологические средства, обладающие химиотерапевтическими и антисептическими свойствами. Однако их эффективность в последнее время значительно снизилась из-за изменения биологических свойств микроорганизмов и проявления у них множественной резистентности при многократном пассажировании через организм больных животных, повышения их вирулентных свойств. Устойчивые формы возбудителей, как новая биологическая популяция циркулирует в природе и инфицирование животных происходит устойчивыми штаммами микроорганизмов к известным препаратам, что существенно затрудняет терапию заболеваний.

Проведенный анализ показал, что одной из основных причин низкой рентабельности отечественного животноводства является значительная себестоимость ветеринарных мероприятий, что обусловлено в основном высокой ценой, применяемых лечебно-профилактических средств и их низкая эффективность из-за снижения резистентности возбудителей заболеваний.

Все это требует поиска и разработки новых антимикробных средств с различными механизмами антимикробного действия. С рассматриваемых позиций значительный интерес представляет отечественный препарат активного раствора натрия гипохлорита.

Получение натрия гипохлорита основано на электролизе физиологического раствора (0,89% раствора натрия хлорида) с помощью различных типов электролизеров (ЭДО-3, «Ключ» и др.) Получаемый в результате раствор представляет собой газожидкостную смесь, содержащую активные формы хлора, связанные с кислородом в смеси с гипохлоритом натрия.

Контроль препарата ведут в соответствии с техническими условиями утвержденными Департаментом ветеринарии МСХ и П РФ.

Натрия гипохлорит представляет собой раствор с легким зеленоватым оттенком, со специфическим запахом хлора.

Содержание активного хлора в растворе колеблется от 300 мг/л до 3000 мг/л. Готовый раствор является самостерилизующим. Натрия гипохлорит разлагается при нагревании, поэтому не должен подвергатся термической стерилизации.

Срок хранения натрия гипохлорита без заметной потери активности в холодильнике при +4°С два месяца, далее активность падает и раствор превращается в обычный физиологический раствор. Никаких токсичных продуктов при этом не появляется, поэтому нет никаких противопоказаний для его внутривенного использования.

Под активной реакцией рН препарата подразумевают активные кислотные и щелочные вещества, обусловленные концентрацией в растворе ионов водорода НзО+ и гидроксила ОН". Величина рН натрия гипохлорита должна быть в пределах 7,5-8,5.

Препарат должен соответствовать стерильным и апирогенным качествам.

Вместе с тем, он должен быть безвредным, после внутрижелудочного (5 мл) и подкожного (2 мл) введения белым крысам. Состояния последних должно оставаться без существенных изменений.

Этот препарат обладает разносторонним фармакологическим действием, малотоксичен и поэтому перспективен для применения в ветеринарии.

Все вышеприведенное послужило основанием для фармако-токсикологического исследования натрия гипохлорита с целью разработки его применения в ветеринарии.

Проведенными исследованиями установлено, что все изученные нами штаммы микроорганизмов проявляли к гипохлориту натрия высокую чувствительность. Повышенной устойчивостью к натрия гипохлориту обладали Sta5hilococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, которые погибали после контакта с раствором через 15-20 минут. Pasterella multocida не давала роста через 10 минут после контакта с раствором натрия гипохлорита. Штаммы кишечной палочки и сальмонелл сохраняли свою жизнеспособность в течение 20-30 минут натрия гипохлорит при бактериальной нагрузке 1,0 млн/мл действует бактерицидно в концентрации 0,32% на E.coli 020 и 0,08% -S.aureus, P.aeruginosa соответственно. При изучении бактериостатической активности установили, что препарат не обладает выраженным антимикробным действием в отношении исследованных штаммов микроорганизмов. При этом отмечалась лишь некоторая задержка роста культур по времени и, несмотря на значительную концентрацию препарата, регистрировали рост исследованных тест-культур аналогичных контролю. Очевидно, это объясняется блокированием активного хлора и атомарного кислорода питательной средой.

При сравнительном анализе различных форм галоидов (гипобромита и гипойодита), установлено, что максимальный бактерицидный эффект по отношению к различным возбудителям гнойной хирургической инфекции наблюдался у натрия гипохлорита, максимальная бактерицидная концентрация находилась в пределах 6,25-28 мкг/мл.

При комбинированном применении различных химиотерапевтических средств с натрия гипохлоритом, последний усиливает антимикробную активность нитрофуранов к кишечной палочке в 2,5-2,85 раза, сульфаниламидов (стрептоцид) в 1,5 и 2 раза соответственно.

Усиление активности различных антибиотиков при своместном применении с натрия гипохлоритом колебалось от 1,5 до 10 раз.

Чувствительность различных видов микроорганизмов располагается в следующем порядке кишечная палочка, стафилококк, вульгарный протей, синегнойная палочка, грибок кандида, при этом концентрация микроорганизмов влияет на антимикробную активность препарата, чем она выше, тем выше необходимая действующая концентрация натрия гипохлорита.

Натрия гипохлорит при паратеральном введении не обладает химиоте-рапевтическим действием при экспериментальной эшерихиозной инфекции. При этом терапевтическую дозу препарата определяли при внутреннем и внутрибрюшинном его введении в объеме 1 мл на животное через 1 час после инфицирования мышей. В результате установлено, что раствор натрия гипохлорита, несмотря на введение в значительных количествах, не предохранял мышей от гибели, что указывает на отсутствие у него химиотерапев-тического действия.

В другом опыте изучено антимикробное действие препарата после внутреннего заражения мышей эшерихиозной водной взвесью суточной агаровой культурой в объеме 0,5 мл. Препарат вводили внтурь через 2 часа после инфицирования животных в дозе 1 мл на мышь. В результате установлено, что натрия гипохлорит в данном случае предупреждал эшерихиозную септицемию мышей и профилактировал гибель животных. Контрольные животные при этом погибали в течение 1-2 суток. Результаты данного опыта свидетельствуют об антисептическом действии препарата и возможности его внутреннего применения при желудочно-кишечных заболеваниях животных с терапевтической целью.

Натрия гипохлорит в концентрации 1000 мг/л обладает фунгистатиче-ским действием в отношении аспергилл, пеницилл, альтернарий, цефалос-пор.

По отношению к фузариям пенициллам он проявляет губительное действие после 2-5 часовой экспозиции и аспергилл после 5 часового воздействия, в концентрации 1000 мг/л.

Проведенными испытаниями установлено, что натрия гипохлорит с концентрацией активного хлора 600 мг/л обладает слабым акарицидным действием в отношении клещей Psoroptes. Гибель клещей наступала через 36 часов воздействия на них натрия гипохлорита. Физраствор не обладал акарицидным действием, поскольку существенных изменений в состоянии клещей и их гибели не отмечали. Вместе с тем, не отмечалось и овоцидного действия препарата. Выведение личинок при воздействии натрия гипохлорита с концентрацией 600 мг/л происходило аналогично контролю.

Натрия гипохлорит в этой концентрации оказывает слабое лярвицид-ное действие на личинок мух. При этом гибель их наступала после 3-6 часовой экспозиции. Картина интоксикации характеризовалась сначала возбуждением, а через 1,5-3 часа замедлением движений, параличом и гибелью.

При изучении антигельминтного действия препарата установлено слабое губительное действие по тесту дождевых червей. При этом их гибель наступала через 15-30 минут. Картина интоксикации характеризовалась слабым возбуждением червей с последующим параличом и гибелью. Гибель аскарид наступала после 1-2 часовой экспозиции.

Таким образом, натрия гипохлорит обладает слабым антигрибным и антигельминтным действием.

Длительное назначение препарата белым крысам и кроликам не влияло негативно на динамику прироста массы тела и не вызывало статистически достоверных изменений массы внутренних органов, а также морфобиохими-ческих показателей крови.

При назначении препарата внутримышечно, внутрибрюшинно, подкожно также не регистрировали гибели животных и существенного изменения физиологических параметров.

При исследовании основных токсикологических параметров установили, что натрия гипохлорит является малотоксичным препаратом. Его максимальное внутреннее введение белым мышам в дозе 1 мл не оказывало выраженного токсического действия. У животных в течение 2 часов с момента введения препарата отмечалось лишь слабовыраженное угнетение, которое, по-видимому объясняется введением большого объема жидкости в желудок. В остальное время состояние всех мышей было удовлетворительным.

В опыте на белых крысах при введении 5 мл препарата внутрижелу-дочно так же не было обнаружено выраженного токсического действия, за исключением быстропроходящего угнетения. При этом каких-либо нарушений функции физиологических процессов в организме не наблюдали. Введение такого же объема физиологического раствора контрольным животным вызывало примерно аналогичные изменения.

В опытах по определению подострой токсичности натрия гипохлорит на белых крысах задавали в разных дозах 1,3,5 мл и в контроле - 5 мл дистиллированной воды, в течение 10 дней, установили, что у животных как опытных, так и контрольных групп на протяжение всего периода наблюдений не регистрировали существенных отклонений в поведении, общем состоянии, аппетите. Явлений интоксикации не наблюдали.

При длительном внутреннем назначении натрия гипохлорита в течение 30 дней кроликам препарат не вызывал токсикоза у животных. Клинически выраженных нарушений функции жизненноважных органов и систем организма не регистрировали, масса их тела и отдельных органов не отличалась от таковых у контрольных животных.

Назначение натрия гипохлорита вне зависимости от дозы не оказывало существенного влияния на содержание эритроцитов. Содержание лейкоцитов под влиянием препарата увеличивалось и находилось в прямой зависимости от дозы. С увеличением последней их количество возрастало.

В результате проведенных экспериментов было отмечено, что гипохлорит натрия не вызывал нарушений основных функций печени. Количественное содержание билирубина, грубодисперстных белков сыворотки крови, ферментов АлАТ и АсАТ у свиней опытной и контрольной групп было идентичным.

Препарат существенно не влиял на процессы пищеварения и мочеотделения.

Опыты по изучению влияния натрия гипохлорита на животных были поставлены на кроликах. Препарат задавали в 3-х кратной терапевтической дозе в течение 30 суток. В ходе наблюдений обращали внимание на общее состояние кроликов, аппетит, показатели температуры, пульса, дыхания, а так же определяли состояние слизистой ротовой полости. Проводили взвешивание животных.

Внутривенное введение натрия гипохлорита кроликам в различных концентрациях от 100 до 600 мг/л существенно не влияло на их гематомор-фологические показатели и общее состояние животных.

При остром внутривенном введении препарата (600 мг/л) собакам не отмечено существенных отклонений в показателях пульса и дыхания, а ат-кже основных биохимических показателей крвои и ее свертываемости.

Длительное ежедневное назначение (до 30 дней) натрия гипохлорита в различных дозах также не влияло отрицательно на общее состояние и аппетит, показателей температуры, пульса, дыхания кроликов.

Аналогичные опыты на собаках также не показали отклонений со стороны клинического статуса, биохимического состава и свертываемости крови, нарушения функций жизненно-важных систем и органов. Они оставались на протяжении всего опыта в пределах нормы.

В опытах на поросятах установлено, что длительное назначение натрия гипохлорита не влияют отрицательно на основные функции органов пищеварения и мочеотделения. При этом физико-химические показатели мочи и фекалий на всем протяжении опыта оставались в пределах нормы.

Препарат не оказывал местно-раздражающего действия при накожных апликациях и конъюнктивальных пробах.

При изучении аллергизирующего действия натрия гипохлорита путем воспроизведения местных аллергических реакций и анафилактического шока . установили, что препарат не обладает местным аллергизирующим действием, ни у одного опытного животного не удалось вызвать картину анафилактического шока.

Опыты по изучению эмбриотоксического и тератагенного действия проведенные на белых крысах показали, что применение натрия гипохлорита животным отрицательно не влияет на эмбриональное развитие и постнаталь-ный период жизни плодов.

Патоморфологическим исследованием внутренних органов кроликов, получавших длительно препарат в 3-х кратной терапевтической дозе, установлено, что натрия гипохлорит не оказывает вредного воздействия на ткани, органы и системы организма. Отмечаемые изменения сводятся, в основном, к небольшим скоплениям лимфоидно-гистиоцитарных клеток в паренхиматозных органах.

Результаты ветеринарно-санитарной экспертизы мяса опытных животных являются вспомогательным тестом определения токсичного воздействия препарата на организм. Проведенная нами ветеринарно-санитарная оценка мяса кроликов, дает основание утверждать, что натрия гипохлорит не оказывает токсического действия на организм животных, не изменяет качества и вкусовые свойства мяса, не придает ему постороннего запаха. Проведенные опыты дают так же основание считать, что убой животных можно проводить независимо от сроков применения препарата.

Фармакокинетику натрия гипохлорита изучали по наличию препарата в крови и моче кроликов после его внутривенного введения в количестве 25 мл с концентрацией активного хлора 300 мг/л и 600 мг/л.