Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Балльный принцип оценки состояния организма молочных коров и применение рибава-5 при гепатозе

ОРЕНБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

На права* рукописи

РГБ ОА

1 о май гаоз

Кислипския Лариса Геннадьевна

л

су,

БАЛЛЬНЫЙ ПРИНЦИП ОЦЕНКИ СОСТОЯНИЯ ОРГАНИЗМА МОЛОЧНЫХ КОРОВ И ПРИМЕНЕНИЕ РИБАВА-5 ПРИ ГЕПАТОЗЕ

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Оренбург-2000

Работа выполнена в кафедре физиологии и патофизиологии Оренбургского государственного аграрного университета

Научные руководители: - заслуженный деятель науки РФ,

доктор ветеринарных наук, профессор В.М. Мешков

заслуженный ветеринарный врач РФ, кандидат ветеринарных наук, профессор Г.Г. Михин

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук,

профессор Байматов В.Н.,

кандидат ветеринарных наук, доцент Бикчентаев Э.М.

Ведущая организация - Оренбургский НИИСХ

Защита состоится 2000г. в -/0е1' часов на заседании

диссертационного совета К 120.95.02 в Оренбургском государственном аграрном университете (460795 Оренбург, ГСП, ул. Челюскинцев, 18)

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке университета. Автореферат разослан 2000г.

Ученый секретарь диссертационного совета.

профессор Депярев В.В.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы. Организм животных постоянно испытывает действие разнообразных факторов внешней и внутренней среды, часть из которых являются надпороговыми. Именно поэтому у него нарушается постоянство внутренней среды и создаются предпосылки для развития различных патологий. Как показывает анализ боенского материала и результатов секции, у многих коров молочных пород обнаруживаются дистрофические изменения в печени - гепатозы. Изучению причин, механизмов развития болезни, диагностики, профилактики и лечению больных при ней посвящены исследования: И. Скоржен, Г. Тодорович (1965); С.И. Никова (1967);

A.M. Лемешко (1972); Б.В. Уша (1979); A.B. Жарова (1980); B.C. Постникова (1983); В.Н. Байматова (1982, 1987, 1989, 1990, 1994, 1998);

B.М. Данилевского, В.В. Влизло, В.Н. Морозова (1987); A.C. Логинова, Ю.Е. Блок (1987); В.А. Шкурупий (1989); Е.С. Воробьева, Г.Ш. Марутяна (1992); Н.Ш. Давлатова (1993); Х.Г. Нурхаметова, У.Г. Кадырова, Г.Р. Шакировой (1997); В.И. Выдриной, М.А. Шевцовой, A.A. Маслак, A.C. Мащенко (1998); Е.С. Albright et. al. (1990).

К сожалению, прижизненная диагностика гепатозов у молочных коров до сих пор затруднена, а потому они продолжают наносить ущерб животноводческим хозяйствам, складывающийся из: снижения молочной продуктивности, ухудшения воспроизводительной способности животных и качества производимой продукции, сокращения сроков производственного использования коров, осложнения болезнями и прочее.

Желая содействовать изменению сложившейся ситуации, мы сформулировали рабочую гипотезу, суть которой сводилась к следующему. Через познание структурных изменений в печени при

гепатозе и сопутствующих им гематологических, биохимических I иммунобиологических нарушений выйти на прижизненную оценк состояния печени.

1.2. В связи с этим целью настоящего исследования стал разработка балльного принципа прижизненной оценки состояни организма коров молочных пород и применение рибава-5 при гепатозе

В процессе реализации поставленной цели, решали таки

задач»:

1. На боенском материале от красной степной и симментальско пород изучить сопряженность структурных изменений печени пр гепатозе с функциональными нарушениями в системе крови, клеточном и гуморальном звеньях неспецифической защиты и на это основе разработать балльный принцип оценки прижизненног состояния печени.

2. Осуществить апробацию разработанного принципа балльно прижизненной оценки состояния организма молочных коров красно степной и черно-пестрой пород в производственных условиях.

3. Изучить характер изменений балльной оценки, в динамик месячного наблюдения, у больных гепатозом коров, не подвергавшихс никакому коррегирующему воздействию.

4. Поставить научно-производственный эксперимент п выяснению возможности применения разных доз рибава-5 дл коррекции состояния организма коров красной степной породы пр гепатозе.

5. Рассчитать экономическую эффективность применени рибава-5 при гепатозе.

1.3. Научная новизна работы заключается в том, что., в( первых, убедительно показана корреляция между структурой печен при гепатозе молочных коров и функцией этого органа, а также систем

крови и неспецифических факторов защиты. Указанную зависимость ложно выразить в баллах.

Во-вторых, расширены и углублены представления о принципах гестирования болезней.

В-третьих, дана балльная характеристика гепатоза в динамике наблюдения.

В-четвертых, создан прецедент применения рибава-5 для коррекции состояния организма коров при гепатозе.

В-пятых, гепатология пополнилась новыми сведениями по распространенности гепатоза среди коров красной степной, черно-пестрой и симментальской пород.

1.4. Для практической ветеринарной медицины работа ценна тем, что, с одной стороны, она вооружает специалистов доступным приемом прижизненного выявления больных гепатозом коров. С другой - она закончилась разработкой конкретных рекомендаций по курсовому назначению рибава-5 с целью коррекции состояния животного при гепатозе. С третьей - она раскрывает картину истинного положения дел по распространенности гепатоза в молочном скотоводстве и нацеливает специалистов на активные действия по профилактике данной болезни.

1.5. Апробация работы. Материалы диссертации доложены, обсуждены и одобрены на: Региональной конференции молодых ученых и специалистов (Оренбург, 1995); 8-й и 9-й межгосударственной межвузовской научно-практической конференции "Новые фармакологические средства в ветеринарии" (С.-Петербург, 1996,1997); научно-практической конференции "Актуальные проблемы патологии животных и человека" (Барнаул, 1996); итоговых научно-практических конференциях Оренбургского ГАУ (Оренбург, 1995, 1996).

1.6. Публикации. Основные научные результаты по теме

диссертации опубликованы в 4 печатных работах.

1.7. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на страницах компьютерного набора и состоит из: обще!! характеристики работы, обзора литературы, материала и мсгодое исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения заключения, выводов, практических предложений, списка литературы приложения. Диссертация иллюстрирована 28 таблицами, 11 рисунками, 3 актами на проведение работ. Список литературы включает 238 источников, в том числе 41 на иностранных языках.

1.8. Научные положения, выносимые на защиту:

1. Балльный принцип оценки структурного и функциональногс состояния печени при гепатозе вполне объективен.

2. Информативность балльного принципа прижизненно« выявления больных гепатозом коров в условиях производства доволык высокая.

3. Снижение общей балльной оценки функциональногс состояния печени у больных гепатозом коров в динамике наблюдсни: еще не свидетельствует об исчерпании возможностей организма ] проявлении защитно-компенсаторных механизмов и реакций.

4. Курсовое назначение рибава-5 больным гепатозом коровал-улучшает балльную оценку функционального состояния их печени. Пр! этом предпочтение должно быть отдано препарату в дозе 10 мл/сутки

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Наши исследования проводились в три этапа в 1995-97 гг. Не первом из них в АО МК "Оренбургский" перед убоем 105 коро] симментальской и красной степной пород из яремной вены брали кровг часть ее стабилизировали 10% раствором этилсндиамиптетрауксусно: кислоты натриевой соли (ЭДТАаатрия, трилоп Б). Из другой част: получали сыворотку крови после ретракции кровяного сгустка. По мер

убоя у животных отбирали кусочки печеночной ткани, имеющие видимые изменения, если таковых пс было, то их брали из любого участка органа. Макро- и микроскопические исследования проводились с применением известных в анатомии и гистологии методов.

Изучение клинического ста гуса проводилось по общепринятым методам: измерение температуры тела осуществляли с помощью электронного термометра модели MF-2, частоту сердечных сокращений определяли путем пальпации грудной клетки в области сердца за одну минуту. Частота дыхания выявлялась посредством аускультации дыхательных шумов в течение одной минуты. Пальпацией и перкуссией, с правой стороны по линии маклока, в области XII межреберья определяли болезненность печени и ее заднюю границу.

Гематологические исследования включали в себя: подсчет количества эритроцитов и лейкоцитов путем изучения разведенной крови в камере Горяева. Видовой состав лейкоцитов определяли в окрашенном по Романовскому-Гимзе в модификации И.Н.Филиппсона мазке крови при помощи микроскопа путем идентификации 100 клеток с последующим вычислением их процентного соотношения. Содержание гемоглобина устанавливали колориметрическим методом, гематокритное число определяли в полистироловых трубках путем центрифугирования до стабилизации в соотношении элементов крови и плазмы. Фагоцитарную активность нейтрофилов крови устанавливали по методу А.И.Иванова и Б.А.Чухловипа (1967). В качестве тест-культуры использовали Е. coli О выращенную в течение суток на МПА.

В сыворотке крови осуществляли определение общего белка с помощыо рефрактометра ИРФ-23, кислотной емкости - по методике СибНИВИ (1976).Проба с ртути дихлоридом была поставлена по методике, описанной И. П. Копдрахиным, Н.В. Куриловым, А.Г. Малаховым и др. (1985).

Определяли бактерицидную активность сыворотки крови по методу О.В. Бухарина и B.J1. Созыкипа (1972) с использованием тест -культуры Е. coli 0|1Г

JIизоцим1 ivio активность устанавливали по О.В. Бухарину (1971) с применением су i очной культуры Micrococcus lysodcicticus шгамм 2665 ГКИ им. J1.A. Тарасевича.

Бета - литическую активность сыворотки крови выявляли фотонефелометрическим методом по О.В. Бухарину и соавт. (1972). При этом в качестве тест - культуры использовали В. subtilis штамм 83 ГКИ им. Л.А. Тарасевича.

Для объективного суждения о состоянии печени у коров нами был разработан и применен метод комплексной балльной оценки. С этой целью каждому изучаемому показателю присваивали константу. Ею стало среднее значение этого показателя для данного вида животных, с учетом их возраста." Она равнялась: для количества эритроцитов - 6,25 Т/л, гемоглобина -105 г/л, количества общего белка в сывороте крови - 79 г/л, пробы с ртути дихлоридом - 2,1, бактерицидной активности сыворотки крови (БАС) - 51 %, бета-литической активности сыворотки крови - 6 %, лизоцимной активности сыворотки крови - 17 %, фагоцитарной емкости крови - 0,5 тыс. микроорганизм ов/мкл. Каждая константная величина приравнивалась к одному баллу.

Для перевода исходных данных в баллы, делили их на соответствующую константу, полученные при этом результать: суммировали.

Условились, что. если суммарный балл будет" больше восьми то это характеризует здоровых животных, а если меньше восьми ■ больных гепатозом.

Следующий этап позволил проверить эффективное"!! предложенною нами метода комплексной балльной оценю

прижизненного выявления больных гепатозом животных в условиях хозяйства. Исследования проводились на 24 коровах красной степной породы 5-8-летнсго возраста в сухостойный период, принадлежащих учхозу Оренбургского ГАУ. и стольки же коровах-аналогах черно-пестрой породы из соседнего хозяйства - АОЗТ "Овощевод"' г. Оренбурга. При эюм, для анализа использовались результаты клинических, гематологических, биохимических и иммунобиологических исследований.

Фагоцитарную активность клеточных элементов ретикулоэндотелиальной системы кожи определяли по методу В.И. Иоффе (1943) в модификации Д.А. Новака (1963).

Третий этап проводился в условиях учхоза Оренбургского ГАУ на коровах красной степной породы 4-8-летнего возраста, в период раздоя, которые имели выявленные предложенным нами методом комплексной балльной оценки, признаки гепатоза. С целью коррекции их состояния, им назначали рибав-5. Он представляет собой спиртовой раствор низших грибов, выращенных на отходах (корнях) женьшеня. Подопытные животные были разделены на три группы по 10 голов в каждой. Коровам первой группы внутрь per os в течение 10 суток подряд задавали рибав в дозе 10 мл на голову в сутки, второй - 15 мл, особи третьей группы ничего не получали и служили контролем. В течение курса назначения препарата проводили ежедневное клиническое исследованиеподопытных животных. На 1-е, 7-е, 14-е, 21-е сутки по его завершении проводили гематологические, биохимические, иммунобиологические исследования крови и ее сыворотки.

Всего за время исследования нами было получено 4836 разнообразных данных. Полученные при этом экспериментальные данные подвергнуты сгатисч ической обработке методами, описанными Г.В. Лакиным (1990). на персональном компьютере Pentium - 166ММХ, с использованием программы Microsoft Exccl 5.0.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ

ОБСУЖДЕНИЕ 3.1. Взаимосвязь структурных поражений печени и функционального состояния организма Самой продолжительной была первая серия опытов. Всего за эту серию было получено 2730 данных. У 69 подопытных коров в печени были обнаружены типичные для гепатоза изменения: некоторое увеличение ее в объеме; неравномерное красно-коричневое окрашивание; медленное восполнение ямки на поверхности органа после давления пальцем, иногда печеночная ткань при этом разрывалась; на поверхности разреза выступали капельки крови, а при движении по ней тыльной стороной ножа, получали умеренный соскоб; желчный пузырь переполнен адекватным содержимым.

Микроскопическое изучение срезов из печени больных гепатозом животных позволило выявить следующее. Междольковые перегородки слабо выражены. Ориентиром для определения долек служили портальные зоны. От центральной вены радиально расходились печеночные балки, как правило, состоящие из двух рядов гепатоцитов. Ближе к центральной вене стройность трабекул утрачена, границы гепатоцитов нечеткие. В цитоплазме оставшихся печеночных клеток видны вакуоли, имеется зернистость. Отдельные гепатоциты увеличены в объеме, их ядра находятся на грани митотического деления. Среди печеночных клеток и в портальной зоне встречаются пролиферирующиелимфоидныеи гистиоцитарные элементы. Крупные сосуды переполнены эритроцитами. В соединительнотканных элементах видны отложения гемосидсрииа.

При макро- и микроскопическом исследовании печени у 36 коров не обнаружено свойственных гепатозу изменений. На основании этих данных появилась возможность сделать заключение о распространенности Iепатоза среди молочных коров разных пород.

Так, у животных симментальской породы на 22 здоровые особи приходилось 42 гепатозпые коровы, что составляет 65.63 %. Примерно такое же количество пораженных (65,85 %) коров имеепся и в красной степной породе.

В ходе анализа гематологических и биохимических показателей у подопытных коров установили, что у животных, имевших структурные поражения печени, по сравнению с интактными, оказалось пониженным количество эритроцитов (р < 0,05), лейкоцитов, эозинофилов, лимфоцитов, общего белка и уменьшился показатель коллоидно-осадочной пробы. В то же время у них повысилось содержание гемоглобина и сегментоядерных нейтрофилов. Полагаем, что в основе описанных изменений лежат явления токсикоза, причем по двум последним параметрам они имеют компенсаторную направленность.

Компенсация структурно-функциональных утрат при гепатозе достигается также и за счет усиления лизоцимной (р < 0,05) и бета-литической активности сыворотки крови, а также повышения фагоцитарной емкости крови.

Все приведенные факты свидетельствуют о том, что только по двум параметрам изменения у гепатозных коров были существенными, а по остальным - они оказались на уровне тенденций.

Не привнес особой определенности в вопрос о диагностической значимости выбранных тестов при гепатозе и корреляционный анализ. Если поданным К.А. Лебедева. И.Д.Понякиной (1983), Р.М.Сугуровой (1998). О.В.Крячко (1997), при многих патологиях число корреляционных связей увеличивае тся, то у животных со структурными пораждениями печени, наоборот сокращается, особенно это касается средпсуровневых связей.

Именно поэтому мы решили проверить еще один прием -балльной оценки состояния животных, тем более, что рапсе на 'лом

направлеЕШи были получены обнадеживающие результаты (Павел Ю.Г.. 1976, Мешков В.М., 1990).

В окончательном виде вариант балльной оценки функционального состояния подопытных животных представлен в табл. 1 и 2.

Таблица 1

Балльная оценка состояния подопытных коров симментальской

породы

Перевод в баллы

№№ Воз- Эри- Гемо Общ Кол- БАС ЛАС Бета- Фаго- Сум- В сред- Дх-

г/п раст тро- гло- белок лоид- ЛИГН- цигар- мар- нем по товер-

коро- циты бин ная чес- 10Я ный группе ность

вы, гроба ская ем- балл разни-

лет кость цы (р)

1. 3 1,6 0,95 1 0,5 0,7 0,6 1,8 2,4 9,6

2. 5 1,1 0,95 1 0,9 0,8 0,1 2,8 1,98 9,63

3. 7 0,8 0,8 0,9 0,6 0,8 0.7 V 3,4 10,5

4. 7 0,8 0,8 0.9 0,7 0,7 0,6 2,8 2,5 9,8 9,26

5. 8 0,97 0,95 1,3 0,6 0,8 0,2 1,2' 2,4 8,52 ¿0,316

6. 5 0,7 0,9 0,9 0,7 0,7 0,6 1,5 2Д 82

7. 6 0,98 0,9 0,8 0,9 0,7 0,8 1,7 1,8 8,6

8. -» 0,4 и 0,9 0,9 0,7 0,6 0,9 12 6,7

9. 6 0,8 0,95 1,1 0,7 0,8 0.1 0,8 2,1 7,45

10. 7 0,9 0,9 0,8 0,8 0,7 ОД 0,5 1.6 6,4

11. 7 1.1 0,95 0,9 0,8 0,8 0,8 0.5 1,4 7,25 7,14 <0,01

12. 9 0,8 0,8 0,9 0,8 0,6 0,5 0,7 1.5 6,6 ±0.225

13. 5 0,8 0.9 0.95 0,8 0.6 0.3 1,8 1,7 7.95

14. 5 0,96 0,9 0.9 1 0,9 0.6 0,6 2 0.9 7.96 .. ..

Примечание: 1-7 - группа здоровых коров.

8-14 - группа коров со структурным поражением печени.

Таблица 2

Балльная оценка сос тояния подопытных коров красной степной

породы

Перевод в балты

Воз- Эри- Гемо Общ Кол- БАС ЛАС Бета- <1его- Сум- В сред- Дос-

п/п раст тро- гло- белок лоид- ЛИГ14- иигар- мар- нем по товер-

коро- циты бин ная чес- ная ный группе ность

вы, проба ская ем- балл разни-

лет кость цы (р)

1. 5 0,97 1,05 0 0,77 1,16 234 ззз 97?. 12,8

2 7 1,02 1,11 1,08 0,6 0,63 1,54 1,82 10,8

3. 5 0,68 0,76 0.8 0,98 0,33 0,91 283 \2 8,49

4. 5 1,02 0,78 0,99 0,71 0,92 034 3,17 1,13 9,06 9,7бь

5. 6 0,97 0,86 0,84 0,77 0,57 1,03 о т* ¿¿э 1,46 8,83 0,587

6. 5 1,21 0,86 0,85 0,7 0,67 034 283 138 8,84

7. 7 1,17 0,71 0,95 0,75 0,65 0,8 25 22 9,43

8. 4 0,61 0,69 1,1 0,78 0,88 03 П "»л 1 7,73

9. 4 0,92 0,71 0,91 0,895 0,77 0,8 1,17 ш 7,4

10. 3 0,75 0,76 1,1 0,71 0,53 0,11 0,5 0,52 4,98

И. 6 0,61 0,71 1,19 0,83 0,63 023 2,17 1,26 7,61

12 7 0,76 0,8 0,87 0,95 0,63 ОДЗ 2 0,42 6,66 6,00ь

13. 7 0,71 0,86 0,91 0,49 0,86 0,23 0,5 036 4,92 0384 0,001

14. 4 0,77 0,8 0,87 0,72 0,77 0,11 0,17 0,4 4,61

15. 6 0,76 0,71 0,95 0.72 0,88 0,51 0,5 0,58 5,61

16. 6 0,57 0,78 0,8 0,89 0.73 0,69 0,67 032 539

17. 8 0,84 0,72 0,84 0,77 0,82 0,11 0,33 0.7 5,13

Примечание: 1-7 - группа здоровых коров;

8-17 - группа коров со структурным поражением печени.

Из данных таблиц видно, что оценочные показатели в отдельности у здоровых коров симментальской породы имели разную характеристику - от 0,1 до 3,4 балла, а комплексная оценка по животному колебалась от 8,2 до 10,5 балла. Тем временем у коров.

имевших структурные поражения в печени, анализируемые параметры соответственно составили 0,1 - 2,1 и 6,4 - 7,95 балла. Разница по балльной оценке коров первой и второй групп значима при среднем пороге достоверности. Подобная зависимость с небольшими вариациями отмечена и в характ еристике функционального состояния организма коров красной степной породы. Следовательно, предлагаемый нами прием балльной прижизненной оценки состояния печени весьма перспективен.

3.2. Выявление больных генатозом коров с помощью балльного

способа

Во второй серии исследований мы провели апробацию предлагаемого способа для прижизненного выявления больных гепатозом коров в условиях хозяйства. Работа проводилась на 24 коровах красной степной породы и таком же поголовье черно-пестрой породы, в возрасте 5-8 лет, в сухостойный период.

Как обычно, от животных получали интересующие нас показатели, а потом перевели их в баллы. Всего в эту серию получено 1296 разнообразных данных.

Оказалось, что из 24 коров красной степной породы 10 животных были признаны здоровыми, потому что комплексная оценка у них изменялась в пределях от 8,1 до 10,4 балла. По возрасту эти животные распределились так: шесть животных имели пятилетний возраст, а четыре - шестилетний. Остальные 14 коров (58,3 %) признаны больными гепатозом, так как у 28,6 % из них балльная оценка была в пределах 7,2-7,7 балла, у восьми животных - в пределах 6,0-6,9 балла и двух - 5.6-5.7 балла. В возрастном аспекте во второй группе на долю пятилетних коров приходилось шесть особей, шестилетних - три, семилетних - четыре и восьмилетних - одна.

Вклад изучаемых показателей в общую балльную оценку у представителей разных групп был неодинаковым. Так, если у здоровых

коров на долю бета-литической активности сыворотки крови приходилось 29,4 %, то у особей с проблемным функциональным состоянием печени - 23,0 %, а фагоцитарной емкости крови, общего белка и гемоглобина соответственно 19,58 и 10,91%, 10,1 и 11,8 %. и 11.1 и 14,7%.

Апробация предлагаемого нами способа на 24 коровах черно-пестрой породы показала, что состояние животных на этот раз оценивалось от 5,9 до 14,4 балла. В группу здоровых вошли только девять особей, что составляет 37,5 %, поскольку у трех из них суммарный балл равнялся 8,0-8,9 балла, у одной - 9,4, двух - 10,-10,7, двух-11,0-11,2 и одной - 14,4 балла. На одну корову при этом приходилось 10,1±0,677 балла. Характерно отметить, что более половины всей суммы дали два показателя - бета-литическая и лизоцимная активность сыворотки крови, еще 13 % приходится на долю фагоцитарной емкости крови. Наименьшим был вклад в суммарный балл со стороны бактерицидной активности сыворотки крови. В основном (8) это были пятилетние коровы и лишь одна имела шестилетний возраст.

У пятнадцати коров состояние было оценено в 6,99±0,167 балла, что существенно (р<0,001) ниже, чем у коров первой группы. Анализируемую группу составили три четырехлетние особи, восемь -пятилетние и четыре - шестилетние. Отчетливо видно, что с возрастом вероятность поражения коров черно-пестрой породы гепатозом увеличивается. Интересные данные получены по структуре суммарного балла, 30 % всей суммы дала лизоцимная активность сыворотки крови. Далее в убывающем порядке составляющие располагаются в такой последовательности: коллоидная проба (13,6 %), фагоцитарная емкость (12,4%), общий белок (11.3 %). бета-литическая активность сыворотки крови (9,6 %), эри троциты (9.4 %), гемоглобин (9.2 %) и БАС (4,5 %). Как видим, у коров, отнесенных в группу с проблемным функциональным состоянием печени, значительно ослабляются позиции бета-лизинов и фагоцитарной системы.

На наш взгляд, все эти факты могут свидетельствовать о разном функциональном состоянии органов и систем у особей разных групп и пород.

3.3. Научно-производственный эксперимент

Целью данной серии стала коррекция состояния больных гепатозом молочных коров с помощью разных доз рибава-5. Исследования проводили в марте-апреле, на коровах красной степной породы. Предварительно обследовав 64 молочные коровы по предлагаемой нами схеме, выделили 30 больных животных, из которых сформировали три равноценные группы, поскольку балльная оценка в них колебалась от 6,67±0,172 до 7,10±0,205 балла. Всего было проведено 810 разнообразных анализов.

При анализе клинических показателей у подопытных животных нами установлено, что температура тела у представителей трех групп в течение всего срока наблюдения не выходила за рамки нормы для данного вида животных. Вместе с тем, у особей третьей, интактной грппы она была несколько выше, отчего в отдельные сроки, например, на 7-е и 21-е сутки учетного периода она существенно отличалась от аналогичного показателя у коров соответственно первой и второй (р<0,01) групп. Полагаем, что под влиянием рибава-5 нормализуется функция теплового центра.

Динамика частоты пульса и дыхания у подопытных животных подчинялась тем же закономерностям, что и температура тела. Так, у коров опытных групп указанные параметры со временем уменьшались, а у контрольных они оставались па исходном - высоком уровне. Вследствие чего появились существенные различия между анализируемыми показателями коров оиышых и контрольных групп.

Сопоставление гематологических показателей у подопытных животных разных групп убеждает в шм, что рибав-5 способствует улучшению количественного и качественного состава клеток красной

и белой крови. Очевидно, это связано с веществами, входящими в состав препарата, которые оказывают стимулирующее влияние на клетки -предшественницы мисло- и лимфопоэза в красном костном мозге.

Синтез белка в организме подопытных животных, как показали исследования, шел неодинаково. В частности, у контрольных животных за время наблюдения уровень общего белка в сыворотке крови постепенно снижался, в первой группе он сначала снижался, а потом медленно повышался. Во второй группе процесс снижения уровня белка затянулся еще на шесть дней, потом же количество белка стало возрастать. То есть потребовалось время, чтобы под влиянием рибава восстановилась функция гепатоцитов, специализирующихся на образовании альбуминов. В пользу правильности такого вывода говорят и результаты постановки коллоидно-осадочной пробы у подопытных животных. Эта проба свидетельствует о соотношении альбуминов и глобулинов и появлении патологически измененных белков.

Буферные возможности сыворотки крови у коров опытных групп выглядели предпочтительнее в течение двух недель после окончания курса назначения рибава. Есть основания полагать, что данный препарат способен изменять проницаемость мембран эритроцитов по отношению к ионам С1 и НСОя, потому что именно они являются основными регуляторами уровня гидрокарбоната натрия в плазме крови.

Клеточная и тканевая неспецифическая защита в динамике наблюдения у контрольных коров имела тенденцию к постепенному снижению. В опытных группах потребовалось время, чтобы нейтрализовать яды и создать благоприятные условия для фагоцитов. После прекращения назначения препарата проявился максимум его действия, потом же всё постепенно вернулось на прежние позиции.

Два изучаемых гуморальных фактора - бактерицидная и бета-литическая активности сыворотки крови у контрольных животных в

динамике наблюдения хотя и изменялись, но довольно вяло, так и не став достоверными. В то же время на 1-е сутки учетного периода произошло достоверное, по сравнению с фоновым, ослабление, а потом восстановление лизоцимпой активности.

Назначаемый животным опытных групп рибав-5. как нам представляется, способствовал восстановлению нарушенных ритмов в деятельности структур, продуцирующих гуморальные факторы. Однако этот процесс зависел от дозы преарата.

Ввиду того, что он шел более спокойно в первой группе, считаем дозу 10 мл/сутки приемлемой для коррекции состояния животных при гепатозе.

Основные исследования по изменению влияния разных доз рибава-5 на организм больных гепатозом коров продолжались в течение месяца. Поэтому интересно было знать, как изменялась за это время балльная оценка состояния животных. Оказалось, что в первой группе она повысилась, в третьей - понизилась по сравнению с исходной. Межгрупповой анализ этого показателя на заключительном этапе исследований выявил достоверные различия между первой и третьей, и второй и третьей группами. При этом также изменилась структура суммарного балла, по сравнению с исходным состоянием. Только доля гемоглобина у всех трех групп коров не изменилась, доля же лизоцима у всех групп в общем балле снижалась, а бета-лизина и фагоцитарной емкости крови - увеличилась. Эти изменения при гепатозе имеют компенсаторную природу. В контроле уменьшился удельный вес эритроцитов и общего белка в интегральной оценке, у особей обеих опытных групп он возрос, отсюда можно считать, что рибав-5 специфически изменяет белковосинтетическую и гемопоэтичсскую функции в организме. С его помощью можно ослабить дестабилизирующее действие болезни на сис1ему лизоцима, бактерицидную активность сыворотки крови и качество образуемых белков.

Немаловажным в этой ситуации стало изучение влияния рибава-5 на молочную продуктивность и воспроизводительную способность коров. Нами отмечено, что удой молока за три последующих после эксперимента месяца повысился в среднем в первой группе на 4,3 кг, во второй на 2 кг, а в третьей снизился па 0.4 кг. Индекс осеменения был равен соответственно 2,37 ; 2,50 и 3,25. Такое улучшение продуктивности и воспроизводительной способности коров мы связываем с модулирующим действием препарата на печень, красный костный мозг.

Экономические рассчеты показали, что назначение этого препарата больным гепатозом коровам выгодно, поскольку позволяет дополнительно получить от каждой коровы доход в сумме 212 786 руб. 09 копеек (в ценах 1996 г.).

Подводя итог, можно констатировать, что комплексная балльная оценка состояния животного, вполне состоятельна. Проверка предлагаемого способа на коровах разных молочных пород показала его полную доступность и хорошую информативность. Коррекцию состояния животных при гепатозе предпочтительнее осуществлять с помощью рибава -5, назначая его внутрь, один раз в сутки, в дозе 10 мл, в течение 10 дней.

ВЫВОДЫ

1. Структурно-функциональное состояние печени у молочных коров можно выразить в баллах. Для балльной оценки использованы восемь показателей, изменявшихся при наличии структурных поражений в печени. Ими стали: общий белок, коллоидно-осадочная проба, количество эритроцитов, содержание гемоглобина, фагоцитарная емкость крови, бактерицидная, бета-литическая и лизоцимная активность сыворотки крови.

2. В Оренбургской области у убойных коров симментальской породы структурные поражения печени, свойственные тепатозу, встречаются у 65,63 % особей, у красной степной - 65,85 %.

С помощью предлагаемого нами способа тестирования среди молочных коров красной степной и черно-пестрой пород выделено соответственно 58,33 и 62,5 % больных.

3. Месячное наблюдение за интактными больными гепатозом коровами показало, что произошло достоверное снижение балльной оценки (6,32±0,218 против 7,10±0,205) за счет уменьшения лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови, уровня общего белка и количества эритроцитов. Содержание гемоглобина у них осталось почти без изменения, а бета-литическая активность и фагоцитарная емкость крови даже повысились.

4. Десятисуточное пероральное назначение больным коровам рибава-5 в дозе 10 мл в сутки на животное привело к существенному улучшению комплексной оценки состояния в баллах - 7,66±0,232 вместо 6,83±0,159. Прибавка в основном обеспечена посредством оптимизации фагоцитарной емкости крови, образования эритроцитов и качества синтезируемых белков. У этих экспериментальных животных существенно повысился удой молока, а индекс осеменения составил 2,37.

5. Последствие 10-суточного применения рибава-5 внутрь по 15 мл на животное в день, проявилось в повышении комплексной оценки -7,17±0,331 против 6,67±0,172балла за счетповышения бета-литической активности сыворотки крови, фагоцитарной емкости крови, синтеза белка и эритроцитов. В то же время у них ослабела лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови. Учитывая последнее обстоятельство, а также принимая во внимание показатели экономического характера, считаем нецелесообразнымприменение препарата в этой дозе.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Ветеринарным специалистам, работающим в молочном скотоводстве, предлагаем воспользоваться разработанным намг способом балльной прижизненной диагностики гепатоза. Для чего надс

определить следующие параметры: количество эритроцитов, содержание гемоглобина и общего белка, поставить коллоидно-осадочную пробу, установить бактерицидную, лмзоцимную н бета-литическую активность сыворотки крови, а также фагоцитарную емкость крови. Полученные результаты разделить на соответствующие константы, а частное от деления суммировать. Если сумма составит более восьми баллов, то структурных изменений в печени нет, при меньшем, чем восемь баллов, есть поражения печени.

2. Для коррекции состояния коров при гепатозах рекомендуем назначать внутрь рибав-5, по 10 мл на животное ежедневно, в течение 10 суток подряд.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Телегина Л.Г., Мешков В.М., Михин Г.Г. О зависимости неспецифических факторов защиты организма коров от структурного состояния печени //Актуальные проблемы патологии животных и человека, материалы научно-практической конференции, 14-16 мая 1996 г., г. Барнаул. - Барнаул, 1996. - С. 73-74.

2. Телегина Л.Г., Мешков В.М. О сопряженности различных показателей сыворотки крови с функциональным состоянием печени коров //Актуальные вопросы сельскохозяйственного производства /Сб. науч. тр./ Оренбургский государственный аграрный университет. -Оренбург, 1996. - С. 54-56.

3. Телегина Л.Г., Мешков В.М. О диагностической значимости различных показателей в выявлении патологий печени у коров // Материалы 8-ой Межгосударственной межвузовской научно-практической конференции "Новые фармакологические средства в ветеринарии". - С.-Петербург, 1996. - С. 90-91.

4. Телегина Л.Г.. Мешков В.М., Ортман P.A., Михин Г.Г. Опыт применения рибавэ для лечения больных гепатозом коров //Материалы

9-ой Межгосударственной межвузовской научно-практической конференции "Новые фармакологические средства в ветеринарии". -С.-Петербург, 1997. - С. 38-39. /Сб. науч. тр./ Оренбургский государственный аграрный университет. - Оренбург. 1996. - С. 54-56.

К сожалению, прижизненная диагностика гепатозов у молочных коров до сих пор затруднена, а потому они продолжают наносить ущерб животноводческим хозяйствам, складывающийся из: снижения молочной продуктивности, ухудшения воспроизводительной способности животных и качества производимой продукции, сокращения сроков производственного использования коров, осложнения болезнями и прочее.

Желая содействовать изменению сложившейся ситуации, мы сформулировали рабочую гипотезу, суть которой сводилась к следующему. Через познание структурных изменений в печени при гепатозе и сопутствующих им гематологических, биохимических и иммунобиологических нарушений выйти на прижизненную оценку состояния печени.

1.2. В связи с этим целью настоящего исследования стала разработка балльного принципа прижизненной оценки состояния организма коров молочных пород и применение рибава-5 при гепатозе.

В процессе реализации поставленной цели, решали такие задачи :

1. На боенском материале от красной степной и симментальской пород изучить сопряженность структурных изменений печени при гепатозе с функциональными нарушениями в системе крови, в клеточном и гуморальном звеньях неспецифической защиты и на этой основе разработать балльный принцип оценки прижизненного состояния печени.

2. Осуществить апробацию разработанного принципа балльной прижизненной оценки состояния организма молочных коров красной степной и черно-пестрой пород в производственных условиях.

3. Изучить характер изменений балльной оценки, в динамике месячного наблюдения, ,у больных гепатозом коров, не подвергавшихся никакому корре-гирующему воздействию.

4. Поставить научно-производственный эксперимент по выяснению возможности применения разных доз рибава-5 для коррекции состояния организма коров красной степной породы при гепатозе.

5. Рассчитать экономическую эффективность применения рибава-5 при гепатозе.

1.3. Научная новизна работы заключается в том, что, во-первых, убедительно показана корреляция между структурой печени при гепатозе молочных коров и функцией этого органа, а также системы крови и неспецифических факторов защиты. Указанную зависимость можно выразить в баллах.

Во-вторых, расширены и углублены представления о принципах тестирования болезней.

В-третьих, дана балльная характеристика гепатоза в динамике наблюдения.

В-четвертых, создан прецедент применения рибава-5 для коррекции состояния организма коров, при гепатозе.

В-пятых, гепатология пополнилась новыми сведениями по распространенности гепатоза среди коров красной степной, черно-пестрой и симментальской пород.

1.4. Для практической ветеринарной медицины работа ценна тем, что, с одной стороны, она вооружает специалистов доступным приемом прижизненного выявления больных гепатозом коров. С другой - она закончилась разработкой конкретных рекомендаций по курсовому назначению рибава-5 с целью коррекции состояния животного при гепатозе. С третьей - она раскрывает картину истинного положения дел по распространенности гепатоза в молочном скотоводстве и нацеливает специалистов на активные действия по профилактике данной болезни.

1.5. Апробация работы. Материалы диссертации доложены, обсуждены и одобрены на: Региональной конференции молодых ученых и специалистов (Оренбург, 1995); 8-й и 9-й межгосударственной межвузовской научно-практической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (С.-Петербург, 1996, 1997); научно-практической конференции «Актуальные проблемы патологии животных и человека» (Барнаул, 1996); итоговых научно-практических конференциях Оренбургского ГАУ (Оренбург, 1995, 1996).

1.6. Публикации. Основные научные результаты по теме диссертации опубликованы в 4 печатных работах.

1.7. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 140 страницах компьютерного набора и состоит из: общей характеристики работы, обзора литературы, материала и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов, практических предложений, списка литературы, приложения. Диссертация иллюстрирована 28 таблицами, 9 рисунками, 4 актами на проведение работ. Список литературы включает 239 источников, в том числе 42 на иностранных языках. 7

1.8. Научные положения, выносимые на защиту:

1. Балльный принцип оценки структурного и функционального состояния печени при гепатозе вполне объективен.

2. Информативность балльного принципа прижизненного выявления больных гепатозом коров в условиях производства довольно высокая.

3. Снижение общей балльной оценки функционального состояния печени у больных гепатозом коров в динамике наблюдения еще не свидетельствует об исчерпании возможностей организма в проявлении защитно-компенсаторных механизмов и реакций.

4. Курсовое назначение рибава-5 больным гепатозом коровам улучшает балльную оценку функционального состояния их печени. При этом предпочтение должно быть отдано препарату в дозе 10 мл/сутки.

ВЫВОДЫ

1. Структурно-функциональное состояние печени у молочных коров можно выразить в баллах. Для балльной оценки использованы восемь показателей, изменявшихся при наличии структурных поражений в печени. Ими стали: общий белок, коллоидно-осадочная проба, количество эритроцитов, содержание гемоглобина, фагоцитарная емкость крови, бактерицидная, бета-литическая и лизоцимная активность сыворотки крови.

2. В Оренбургской области у убойных коров симментальской породы структурные поражения печени, свойственные гепатозу, встречаются у 65,63 % особей, у крарной степной - 65,85 %.

С помощью предлагаемого нами способа тестирования среди молочных коров красной степной и черно-пестрой пород выделено соответственно 58,33 и 62,5 % больных.

3. Месячное наблюдение за интактными больными гепатозом коровами показало, что произошло достоверное снижение балльной оценки (6,32±0,218 против 7,10±0,205) за счет уменьшения лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови, уровня общего белка и количества эритроцитов. Содержание гемоглобина у них осталось почти без изменений, а бета-литическая активность и фагоцитарная емкость крови даже повысились.

4. Десятисуточное пероральное назначение больным коровам рибава-5 в дозе 10 мл в сутки на животное привело к существенному улучшению комплексной оценки состояния в баллах - 7,66±0,232 вместо 6,83±0,159. Прибавка в основном обеспечена посредством оптимизации фагоцитарной емкости крови, образования эритроцитов и качества синтезируемых белков. У этих экспери

109 ментальных животных существенно повысился удой молока, а индекс осеменения составил 2,37.

5. Последствие 10-суточного применения рибава-5 внутрь по 15 мл на животное в день, проявилось в повышении комплексной оценки - 7,17±0,331 против 6,67±0,172 балла за счет повышения бета-литической активности сыворотки крови, фагоцитарной емкости крови, синтеза белка и эритроцитов. В то же время у них ослабела лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови. Учитывая последнее обстоятельство, а также принимая во внимание показатели экономического характера, считаем нецелесообразным применение препарата в этой дозе.

110

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Ветеринарным специалистам, работающим в молочном скотоводстве, предлагаем воспользоваться разработанным нами способом балльной прижизненной диагностики гепатоза. Для чего надо определить следующие параметры : количество эритроцитов, содержание гемоглобина и общего белка, поставить коллоидно-осадочную пробу, установить бактерицидную, лизоцимную и бета-литическую активность сыворотки крови, а также фагоцитарную емкость крови. Полученные результаты разделить на соответствующие константы, а частное от деления суммировать. Если сумма составит более восьми баллов, то структурных изменений в печени нет, при меньшем, чем восемь баллов, есть поражения печени.

2. Для коррекции состояния коров при гепатозах рекомендуем назначать внутрь рибав-5, по 10 мл на животное ежедневно, в течение 10 суток подряд.

Глава 5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Болезни, сопровождающиеся преимущественным поражением печени, у продуктивных животных встречаются довольно часто ( Савойский А.Г., 1956 ; Постников B.C., Шишков В.П., 1967 ; Жаров A.B., 1974 ; Уша Б.В., 1979 ; Бай-матов В.Н., 1999 ). В Оренбургской области, где в настоящее время насчитывается 387 тыс. молочных коров, этот вопрос изучен недостаточно. Имеются лишь отдельные сообщения (Сорокин В.И., Дворникова М.А., 1993), да и то они касаются выбраковки печени на мясокомбинатах области. Между тем рассмотрение вопросов прижизненной диагностики патологий печени могло бы оказаться полезным как для теории, так и для практики.

Свои исследования мы начали с выяснения распространенности поражений печени у коров, поступающих на мясной комбинат «Оренбургский » из хозяйств центральной зоны (Акбулакский, Оренбургский, Ташлинский, Октябрьский районы) Оренбургской области. Основная цель этого этапа эксперимента состояла в выяснении сопряженности структурного состояния печени с гематологическим, биохимическим и защитным статусами. Планировалось выйти на информативный метод прижизненной диагностики поражений печени.

На основании макроскопического исследования печени у 69 коров нашли, что в этом органе при гепатозе отмечаются типичные изменения: некоторое увеличение его в объеме, неравномерное красно-коричневое окрашщивание, медленное восполнение ямки на поверхности органа после давления пальцем, иногда печеночная ткань при этом рвется, на поверхности разреза выступали капельки крови, а при движении по ней тыльной стороной ножа, получали умеренный соскоб, желчный пузырь переполнен адекватным содержимым.

Микроскопическое изучение срезов из печени больных гепатозом животных позволило выявить следующее. Междольковые перегородки слабо выражены. Ориентиром для определения долек служили портальные зоны. От центральной вены радиально расходились печеночные балки, как правило, состоящие из двух рядов гепатоцитов. Ближе к центральной вене стройность трабекул утрачена, границы гепатоцитов нечеткие. В цитоплазме оставшихся печеночных клеток видны вакуоли, имеется зернистость. Отдельные гепатоциты увели-чины в объеме, их ядра находятся на грани митотического деления. Среди печеночных клеток и в портальной зоне встречаются пролиферирующие лимфо-идные и гистиоцитарные элементы. Крупные сосуды переполнены эритроцитами. В оставшихся в наличии соединительнотканных элементах видны отложения гемосидерина.

Итак, гистоструктура печени у этих животных характерна для поражения при гепатозах ( Кокуричев П.И., 1973 ; Жаров A.B., 1980 ; Данилевский В.М., Влизло В.В., 1987 ; Байматов В.Н., 1989 ).

При макро- и микроскопическом исследовании печени у 36 коров не обнаружено изменений, свойственных гепатозу.

На основании этих данных появилась возможность сделать заключение о распространенности гепатоза среди молочных коров разных пород. Оказалось, что у животных симментальской породы на 22 здоровые особи приходилось 42 гепатозных коровы, что составляет 65,6 %. Примерно такое же количество пораженных (65,85 %) животных имеется и в красной степной породе.

Эти факты могут свидетельствовать об одинаковой устойчивости животных двух пород. Данные обстоятельства интересны в том смысле, что коровы красной степной породы, предки которой разводятся в условиях Оренбургского региона вот уже более 200 лет, не имеют особых преимуществ по устойчивости к гепатозам перед животными симментальской породы, появившейся на территории области только в 30-х годах XX века. Значит, не наследственность определяет заболеваемость животных гепатозом, а условия их кормления, содержания и эксплуатации.

По данным В.Н. Байматова (1990 ), в молочных стадах обнаруживается от 30 - 60 % больных гепатозом коров. Как видим, это меньше, чем получено нами на убойных животных, что мы склонны увязать с неодинаковыми условиями кормления, содержания и эксплуатации подопытных животных.

От всех животных перед убоем мы брали кровь, часть ее стабилизировали, а другую использовали для получения сыворотки. Данные биологические субстраты исследовали по отработанным в нашей физиологической лаборатории методам. Полученные при этом результаты, анализировали в разрезе групп, сформированных на основе итогов макро- и микроскопических исследовании печени животных.

В ходе анализа гематологических показателей у подопытных коров, мы установили, что у животных, имевших структурные поражения печени, по сравнению с интактными, оказалось пониженным количество эритроцитов (р<0,05), лейкоцитов, эозинофилов, лимфоцитов, общего белка и уменьшился показатель коллоидно-осадочной пробы. В то же время у них повысилось содержание гемоглобина и сегментоядерных нейтрофилов. Полагаем, что в основе описанных изменений лежат явления токсикоза, причем по двум последним параметрам они имеют компенсаторную направленность. Количество лейкоцитов в единице объема крови у больных гепатозом коров немного снизилось, однако не достоверно. Преобладающими лейкоцитами крови у животных обеих пород и групп были лимфоциты, в то же время их у больных гепатозом коров оказалось на 3,46 % меньше, зато на 3,41% больше сегментоядерных нейтрофилов. Правда, отмеченные изменения в представительстве разных видов лейкоцитов в лейкограмме были недостоверными. По свидетельству И.М.Карпутя ( 1986 ), сочетание анемии с лимфоцитозом, а у них количество лимфоцитов было все же больше нормы, может говорить об интоксикации в организме. Именно эти процессы, как отмечалось масштабно идут в организме больных гепатозом животных (Жаров A.B., 1980).

Нашими исследованиями установлено, что у больных гепатозом коров все показатели фагоцитоза были лучше выражены, чем у интактных особей. Все эти изменения, на наш взгляд, имеют компенсаторную природу. Поскольку активность фагоцитов определяется в том числе и уровнем иптерлейкина-1 (Вой-нов В.А., 1997), выделяемого макрофагами, уместно предположить, что у больных гепатозом коров симментальской породы эти клетки функционируют более активно.

Как показал анализ результатов по определению содержания белка в сыворотке крови у больных гепатозом коров по сравнению с контролем белково-синтетическая функция ослабела, но не на столько, чтобы стать достоверной -72,08± 1,287 против 75,66±1,516 г/л.

Есть основания полагать, что изменения, возникшие в синтезе белка у больных коров, компенсируются усиленной деятельностью оставшихся нево-влеченными в патологический процесс структурами ретикулогистиоцитарной системы, отчего возрастает доля среднедисперсных белков - глобулинов в сыворотке крови. Об этом свидетельствует постановка коллоидно-осадочной пробы у подопытных животных. В абсолютном выражении ее показатели меньше у больных особей. Но и в этом случае различия между группами недостоверны.

Поскольку бактерицидные факторы имеют белковую природу, при таком состоянии белкового обмена у подопытных животных, мы вправе были прогнозировать у них различия и в характеристике гуморальных факторов. Так оно и произошло в действительности. Бактерицидная активность сыворотки крови у коров второй группы проявлялась слабее, чем у интактных аналогов. Следует подчеркнуть, что указанные особенности проявлялись на уровне тенденций. Между тем лизоцимная активность сыворотки крови была существенно (р<0,05) выше у больных гепатозом коров. Подобная закономерность для групп была характерна и по бета-литической активности сыворотки крови, только межгрупповые различия не стали достоверными. На наш взгляд, все отмеченное объективно отражает диалектичность происходящего и зависит от интерьерных породных особенностей, а не от нозологической единицы, которую мы изучали.

В связи с этим возникла необходимость проанализировать полученные материалы с помощью парного корреляционного анализа, который, как установили К.А. Лебедев и И.А. Поиякина (1983), О.В. Крячко (1997), позволяет обнаружить болезнь еще до того, как она проявится клинически. В ходе корреляционного анализа экспериментального материала, полученного от здоровых коров симментальской породы, нашли, что в трех случаях отмечена высокая степень взаимосвязи между изучаемыми показателями - (г = 0,718 - 0,981), в семи -средняя (г = 0,501 - 0,641) и в 39 - слабая (г = 0,300 - 0,497).

У коров этой породы, имеющих структурные поражения печени, число взаимодействующих показателей по первому варианту сократилось до двух, по второму - наоборот, увеличилось на один и составило восемь, а по третьему -уменьшилось до 20.

Та же математическая операция с изучаемыми параметрами у здоровых животных красной степной породы выявила связи высокого уровня в двух случаях, среднего - в 11 и слабого - в 36 случаях, а больных соответственно в пяти, пяти и 25. Как видим, общим для обеих пород является только то, что число слабовзаимодействующих показателей у больных животных, по сравнению со здоровыми, значительно уменьшается. Что же касается первых двух вариантов взаимосвязи, то они прямо противоположны у представителей симментальской и красной степной пород.

Такая неопределенность в результатах у животных разных пород, имеющих структурные изменения в печени, подвигла нас к необходимости проверить еще один способ - балльной оценки, тем более, что ранее на этом направлении были получены обнадеживающие результаты (Павел Ю.Г., 1976; Мешков В.М., 1990).

Для балльного тестирования нами взяты только те изучаемые показатели, по которым получены однотипные изменения у больных животных обеих пород. Ими стали: количество эритроцитов, содержание гемоглобина, уровень общего белка, коллоидно-осадочная проба, БАС, ЛАС, бета-литическая активность сыворотки крови и фагоцитарная емкость крови. В качестве константной величины взяли среднее значение конкретного показателя, характерного для крупного рогатого скота соответствующего возраста. Разделив каждый из восьми отобранных показателей на соответствующую константную величину, а она приравнивалась к одному баллу, получали балльную оценку. Оставалось сопоставить баллы со специально разработанной нами таблицей. Нами было установлено, что у здоровых коров обеих пород суммарная оценка их состояния колебалась от восьми баллов и выше (12,84), а у животных со структурными поражениями печени - ниже восьми баллов (4,61).

Во второй серии исследований мы проверили эффективность предлагаемого способа для прижизненного выявления больных гепатозом коров. Работа проводилась на 24 коровах красной степной породы и таком же поголовье черно-пестрой породы, принадлежащем соответственно учебно-опытному хозяйству Оренбургского ГАУ и АОЗТ «Овощевод» г. Оренбурга. В первом из них исследования проводили в конце второй декады декабря, а во втором - в начале третьей декады января.

Как обычно, от животных получали интересующие нас показатели, а потом перевели их в баллы. Оказалось, что из 24 коров красной степной породы (учхоз) 10 животных были признаны здоровыми, потому что 40 % из них имели вышесредний, а 60 % - средний уровень пороговых значений балльной оценки. По возрасту эти животные распределялись так: шесть животных имели 5-летний возраст, а четыре - 6-летний. Остальные 14 коров (58,3 %) признаны больными гепатозом, т. к. у 28,6 % из них балльная оценка была низкой (в пределах 7,2-7,7), у восьми животных - в пределах 6,0-6,9 балла и двух - 5,6-5,7 балла. В возрастном аспекте во второй группе на долю 5-летних коров приходилось шесть особей, 6-летних - три; 7-летних - четыре и 8-летних - одна. В этом смысле наши данные перекликаются с результатами В.Н. Байматова (1990).

На основании балльной оценки функционального состояния организма, коров разделили на две группы. Все полученные результаты сгруппировали в соответствии с этим подразделением, и обработали методом вариационной статистики.

Сравнивая гематологические показатели у коров красной степной породы учхоза с аналогичными данными у скота этой породы, полученными в первой серии, отмечаем однотипность соотношения между группой здоровых и больных особей по: количеству эритроцитов в единице объема крови, содержанию гемоглобина в крови, гематокриту, количеству эозйнофилов в крови. Единственное в этом случае отличие было в уровне показателя.

Так, для эритроцитов у коров учхоза он был ниже, а для гемоглобина -выше. Различия же коснулись количества лейкоцитов, палочкоядерных и сег-ментоядерных нейтрофилов, а также лимфоцитов. В частности, в пробах крови от убойных коров всех перечисленных видов клеток крови, кроме сегментоя-дерных нейтрофилов, было меньше. Данный эффект мы склонны объяснить различными условиями кормления и содержания животных и разделяем точку зрения Е.С. Эйдригевича (1968), который считал, что названные факторы оказывают на интерьерные показатели, даже большее влияние, чем порода и происхождение.

Между первой и второй сериями можно проводить параллели по направленности изменений у животных обеих групп в уровне общего белка сыворотки крови и коллоидно-осадочной пробы (у больных они меньше). И опять же степень выраженности показателей в разные серии неодинакова. Подобные закономерности в своих исследованиях отмечал Б.В. Уша (1979).

Во второй серии мы определяли кислотную емкость сыворотки крови у подопытных животных, и нашли, что у коров, больных гепатозом, она повышалась. Это вполне закономерно в условиях, когда снижались возможности белковой буферной системы.

Что же касается сопоставления результатов определения клеточных и гуморальных факторов защиты у подопытных животных в первой и второй сериях, то изменения здесь проходили с закономерностью до наоборот. В самом деле, если у убойных коров все показатели фагоцитоза у больных по сравнению со здоровыми, повышались, то у животных учхоза - понижались, причем снижение фагоцитарной емкости крови у особей второй группы оказалось существенным (р<0,01).

Нечто подобное происходило и с гуморальными факторами неспецифической защиты. В первой серии у животных второй группы они несущественно повышались, а во второй - наоборот, также недостоверно понижались. Различия, как нам представляется, связаны с развитием транспортного стресса у убойных животных, ведь их подавали на конвейер через 10-18 часов после доставки на мясокомбинат, а это, по данным С.И. Плященко и В.Т. Сидорова (1987 ), приводит к таким изменениям, которые мы и обнаружили.

Итак, с помощью балльного метода удалось достаточно объективно разделить животных на группы.

Апробация предлагаемого нами способа на 24 коровах черно-пестрой породы показала, что состояние животных на этот раз оценивалось от 5,9 до 14,4 балла. В группу здоровых вошли только девять особей, что составляет 37,5 %, поскольку у трех из них суммарный балл равнялся 8,0-8,9 балла, у одной -9,4, двух - 10,-10,7, двух - 11,0-11,2 и одной - 14,4 балла. На одну корову при этом приходилось 10,1±0,677 балла. Характерно отметить, что более половины всей суммы дали два показателя - бета-литическая и лизоцимная активность сыворотки крови, еще 13 % приходится на долю фагоцитарной емкости крови. Наименьшим был вклад в суммарный балл со стороны бактерицидной активности сыворотки крови. В основном (8) это были 5-летние коровы и лишь одна имела 6-летний возраст.

У пятнадцати коров состояние было оценено в 6,99±0,167 балла, что существенно (р<0,001) ниже, чем у коров первой группы. Анализируемую группу составили три 4-летние особи, восемь - 5-летние и четыре - 6-летние. Отчетливо видно, что с возрастом вероятность поражения коров черно-пестрой породы гепатозом увеличивается. Интересные данные получены по структуре суммарного балла, 30 % всей суммы дала лизоцимная активность сыворотки крови. Далее в убывающем порядке составляющие располагаются в такой последовательности: коллоидная проба (13,6 %), фагоцитарная емкость (12,4 %), общий белок (11,3 %), бета-литическая активность сыворотки крови (9,6 %), эритроциты (9,4 %), гемоглобин (9,2 %) и БАС (4,5 %). Как видим, у коров, отнесенных во вторую группу, значительно ослабляются позиции бета-лизинов и фагоцитарной системы.

Осуществив группировку полученных результатов с учетом балльной оценки, произвели их биометрическую обработку и сопоставление с данными первой и второй серии. В ходе аналитической работы установили, что как и в первой серии в эту данные второй группы изменялись однотипно по : количеству эритроцитов, эозинофилов, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофи-лов (везде снижение). В то же время отмечен численный рост лимфоцитов (р<0,05), а не их снижение как это было в первой серии. Мы склонны объяснить этот факт с позиции более сильного токсикоза, идущего в организме животных при высококонцентратном типе кормления.

Уровень общего белка сыворотки крови, а также коллоидные свойства, кислотная емкость сыворотки крови изменялись по тем же закономерностям, что и в первую, и во вторую серии. Возможные причины этих явлений уже рассматривались.

Фагоцитарная система коров второй группы черно-пестрой породы реагировала на возмущающие воздействия так же, как и у животных красной степной породы во второй серии, т.е. недостоверным снижением показателей фагоцитоза. Сходные изменения отмечены и в системе бета-лизинов (р<0,05), лизо-цима. Почти не претерпела перемен бактерицидная активность сыворотки крови. По всей видимости, именно этот фактор гуморальной защиты, а также лизо-цим взяли на себя осуществление защитной миссии в условиях значительного ослабления бета-литической активности сыворотки крови.

Таким образом, и эти факты свидетельствуют об информативности предлагаемого нами способа балльной оценки функционального состояния органов и систем при гепатозе.

Получив обнадеживающие результаты по возможности прижизненного выявления больных гепатозом коров, мы провели третью серию, целью которой была коррекция состояния больных гепатозом молочных коров с помощью разных доз рибава-5. Исследования проводили в марте-апреле, на коровах красной степной породы, принадлежащих учебно-опытному хозяйству Оренбургского ГАУ. Предварительно обследовав 64 молочные коровы по предлагаемой нами схеме, выделили 30 больных животных, из которых сформировали три равноценные группы, поскольку балльная оценка у них колебалась от 6,67±0,172 до 7,10±0,205 балла. Уход за животными разных групп осуществлял один и тот же человек. Содержались они в одном коровнике и потребляли одинаковые корма, в соответствии с рационами. Различие состояло лишь в том, что коровам первой и второй групп внутрь ежедневно, в течение десяти суток подряд, задавали ри-бав-5 в дозе соответственно 10 и 15 мл, предварительно разбавив его водой (10-кратно). За подопытными животными вели ежедневное наблюдение, а на 1 -е, 7-е, 14-е, 21-е сутки по завершении курса назначения у них, кроме того, отбирали пробы крови и сыворотки крови для разнообразных исследований. Полученные при этом результаты обработали методами вариационной статистики и сопоставляли их как в динамике наблюдения по группе, так и между группами.

При анализе клинических показателей у подопытных животных нами установлено, что температура тела у представителей трех групп в течение всего срока наблюдения не выходила за рамки нормы для данного вида животных. Вместе с тем у особей третьей, интактной группы она была несколько выше, отчего в отдельные сроки, например, на 7-е и 21-е сутки учетного периода она существенно отличалась от аналогичного показателя у коров соответственно первой (р<0,01) и второй (р<0,01) групп. Полагаем, что под влиянием рибава-5 нормализуется функция теплового центра. У животных же третьей группы более высокие значения температуры, очевидно, связаны с компенсаторным усилением образования тепла в скелетных мышцах, поскольку роль печени как генератора тепла в организме при гепатозе снижена.

В общих чертах динамика частоты пульса и дыхания у подопытных животных подчинялась тем же закономерностям, что и таковая температуры тела. В частности, у коров опытных групп указанные параметры со временем уменьшались, а у контрольной - они оставались на исходном высоком уровне. Этим самым создавались предпосылки для появления существенных различий между анализируемыми показателями животных опытных и контрольной групп.

Сопоставление гематологических показателей у подопытных животных разных групп убеждает в том, что рибав-5 способствует улучшению количественного и качественного состава клеток красной и белой крови. Очевидно, это связано с тем, что в состав препарата входят вещества, которые оказывают стимулирующее, влияние на клетки-предшественницы миело- и лимфопоэза в красном костном мозге (Чертков А.И., Воробьев А.И., 1961).

Синтез белка в организме подопытных животных, как показали исследования, шел неодинаково. Так, если у контрольных коров за время наблюдения уровень общего белка в сыворотке крови постепенно снижался, то в первой группе он сначала снижался, а потом медленно повышался. Во второй группе процесс снижения уровня белка затянулся еще на шесть дней, потом же количество белка стало возрастать. То есть потребовалось время, чтобы под влиянием рибава восстановилась функция гепатоцитов, специализирующихся на образовании альбуминов. В пользу правильности такого вывода говорят и результаты постановки коллоидно-осадочной пробы у подопытных животных. А эта проба, как раз свидетельствует о соотношении альбуминов и глобулинов и появлении патологически измененных белков (Байматов В.Н., Чумаков В.Ю., 1998). Буферные возможности сыворотки крови у коров опытных групп выглядели предпочтительнее в течение двух недель после окончания курса назначения рибава. Есть основание полагать, что рибав-5 способен изменять проницаемость мембран эритроцитов по отношению к ионам С1 и НСО3. Именно мембраны эритроцитов являются основными регуляторами уровня гидрокарбоната натрия в плазме (Войнов В.А., 1995).

Клеточная и тканевая неспецифическая защита в динамике наблюдения у контрольных коров имела тенденцию к постепенному снижению. Оно и понятно, токсические вещества, а их количество нарастает при гепатозе, парализуют деятельность фагоцитов и эозинофилов. Потребовалось время в опытных группах, чтобы нейтрализовать яды и создать благоприятные условия для деятельности фагоцитов. После прекращения назначения препарата проявился максимум его действия. Потом же все постепенно вернулось на прежние позиции.

Два изучаемых гуморальных фактора - бактерицидная и бета-литическая активность сыворотки крови у контрольных животных в динамике наблюдения хотя и изменялись, но довольно вяло, так и не достигнув достоверных значений. Этого нельзя, сказать о лизоцимной активности сыворотки крови. К середине срока наблюдения (7-е сутки учетного периода) произошло достоверное, по сравнению с фоновым, ослабление, а потом восстановление данного вида активности.

В этом мы усматриваем проявление ритмической деятельности защитных механизмов, о существовании которой у здоровых животных сообщали М.А. Поляков, В.М. Мешков (1998, 1999 ).

Из литературы известно (Алякринский Б.С., 1983; Мешков В.М.,1999), что различные болезни приводят к развитию десинхроноза, т. е. нарушению сложившейся ритмичности в жизнедеятельности органов и систем. Назначаемый животным опытных групп рибав-5, как нам представляется, способствовал восстановлению нарушенных ритмов в деятельности структур, продуцирующих гуморальные факторы. Однако процесс реабилитации ритмической деятельности зависел от дозы препарата.

Ввиду того, что он шел более спокойно в первой группе, считаем дозу 10 мл/сутки приемлемой для коррекции состояния животных при гепатозе.

Основные исследования по изучению влияния разных доз рибава-5 на организм больных гепатозом коров продолжались в течение месяца. Интересно было знать, как изменилась за это время балльная оценка состояния животных. Оказалось, что, по сравнению с исходной, она существенно разнилась в первой и третьей группах, причем в первой - она повысилась, а в третьей - понизилась. Межгрупповой анализ этого показателя на заключительном этапе исследований выявил достоверные различия между первой и третьей, а также второй и третьей группами. Хотелось узнать, как же изменилась при этом структура суммарного балла, по сравнению с таковой в исходном состоянии. В процессе аналитической деятельности установили, что только доля гемоглобина в общем результате не изменилась у всех трех групп животных. Очевидно, это может свидетельствовать о том, что такие изменения есть, но происходят они в околомесячном ритме, а потому и незаметны. Проверка этой гипотезы путем определения суммарного балла в середине срока исследования (7-е сутки учетного периода), выявила изменения только в первой группе. Значит, речь в данном случае должна идти об иной природе этого явления - о переходе на другой принцип взаимоотношений в системе крови: образование - циркуляция - разрушение.

Дальнейший анализ показал, что у представителей всех трех групп доля лизоцима в общем балле снижалась, а бета-лизина и фагоцитарной емкости крови увеличилась. С учетом этого считали, что изменения со стороны двух последних показателей имеют при гепатозе компенсаторную природу. Ввиду того, что в контроле уменьшился удельный вес эритроцитов и общего белка в интегральной оценке, а у особей обеих опытных групп он возрос, можно считать, что рибав-5 специфически изменяет белковосинтетическую и гемопоэтическую функции в организме. Кроме того, с его помощью можно ослабить дестабилизирующее действие болезни на систему лизоцима, бактерицидную активность сыворотки крови и качество образуемых белков.

Положительное действие рибава-5 на молочную продуктивность и воспроизводительную способность коров первой группы мы прежде всего связы

10'/ вали с его модулирующим влиянием на функции печени, красного костного мозга и др.Отсюда улучшается эффективность пищеварения, рационального использования энергетических и пластических ресурсов организма.

Экономические рассчеты показали, что назначение рибава-5 больным гепатозом коровам выгодно, поскольку позволяет дополнительно получить от каждой коровы доход в сумме 212786,09 рубля (в ценах 1996 года).

Подводя итог, можно констатировать, что наша рабочая гипотеза оказалась плодотворной. Ставка на комплексную балльную оценку состояния животного вполне состоятельна. Проверка предлагаемого способа на коровах разных молочных пород показала его полную доступность и хорошую информативность. Коррекцию состояния животных при гепатозе предпочтительнее осуществлять с помощью рибава-5, назначая его внутрь один раз в сутки, в дозе 10 мл, в течение 10 дней.