Автореферат диссертации по медицине на тему Влияние производных глицина и y-аминомасляной кислоты на течение экспериментальных аллергических реакций
На правах рукописи □030В3079
ШНЕУР Семен Яковлевич
ВЛИЯНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ ГЛИЦИНА И у-АМИНОМАСЛЯНОЙ КИСЛОТЫ НА ТЕЧЕНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ
14 00.25 - фармакология, клиническая фармакология
АВТОРЕФЕРАТ ДИССЕРТАЦИИ на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
? 3 МАЙ 2007
Старая Купавна - 2007
003063079
Работа выполнена на кафедре фармации ГОУ ВПО Тверской медицинской академии.
Научный руководитель доктор медицинских наук,
профессор Демидова М.А. Официальные оппоненты доктор медицинских наук,
профессор В.Л Ковалева доктор медицинских наук, профессор В В.Яснецов Ведущая организация Российский государственный
медицинский университет
Защита диссертации состоится « 30 » мая 2007 г. в 1030 ч. на заседании диссертационного совета Д217.004.01 в ВНЦ БАВ (142450, Московская область, пос. Старая Купавна, ул Кирова, 23)
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке и на сайте ВНЦ БАВ.
Автореферат разослан « 27 » апреля 2007 г.
Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук, профессор
Корольченко Л.В.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы Совершенствование фармакотерапии аллергических заболеваний является одной из важнейших задач фармакологии (Мокроносова М.А., 1997;. Хаитов Р.М, 2002; Гущин И.С., 1999, 2001; Адо А.Д, 1994; Гущин И.С., Ильина Н.И., Польнер С.А., 2002; Бу-лина OB., Горланов И.А, Калинина НМ, 2004; Brisman et al., 1995; Heinrich et al, 1995; Stark et al, 1996). Урбанизация и химизация, появление новых аллергенов, широкое применение лекарственных средств, в том числе антибиотиков, изменение характера питания и другие причины приводят к тому, что во всем мире регистрируется рост заболеваемости аллергией (Пыцкий В.И. и соавт., 1999; Паттерсон Рой и соавт, 2000; Хаитов Р М, 2002, Jlycc J1.B., 2002). В настоящее время в медицинской практике используют большое количество противоаллергических средств, однако они не всегда являются достаточно эффективными, поэтому изучение влияния лекарственных препаратов на течение аллергических заболеваний сохраняет свою актуальность (Ионов И.Д, 1991, Гущин И С., 2002, Чучалин А.Г , 2000-2004, Медуницын Н В , 2001; Хаитов Р М , Пи-негин Б В., 2003, Ковалева B.JI, 2006).
Известно, что в формировании аллергизации организма принимает участие центральная нервная система (Ковалев И.Е., Сергеев П.В , 1972; Козлов BJC, 1973, Абрамов В В, 1988-2006; Йегер JI, 1988, Пыцкий В.И, 1991; Leslie et al, 1989). Имеются данные о том, что нарушения нормальных взаимоотношений между нейроэндокринной и иммунной системами способствуют возникновению аутоиммунных и аллергических заболеваний или определяют характер течения этих болезней (Абрамов В.В., 1996). Описано участие в аллергическом процессе ГАМК- и опиои-дергических механизмов (Утешев Б С., Коростелев С А , 1990, Gentilini et al., 1995, Djuric et al, 1995, Демидова M А , 1997) Обращает на себя внимание и тот факт, что в процессе аллергизации организма наряду со специфическими иммунологическими изменениями развивается выраженная тканевая гипоксия (Адо А.Д, 1978, Пыцкий В.И., 1991) и происходят существенные метаболические сдвиги. В частности, наблюдается активация реакций свободнорадикального окисления на фоне понижения активности антиоксидантных систем (Кошелевский В И., 1987, 1997; Митина Т.В., 1991; Ракита Д.Р., 1997; Демидова М А , 1997-2006; Di Gianni, 1996 и др ) Регистрируются выраженные изменения мембранных липидов клеток-мишеней аллергического процесса (Йегер J1, 1988, Гущин И.С., 2003), в том числе фосфоинозитидов и продуктов их метаболизма (Демидова М А , Слюсарь Н.Н , 1997). Между тем известно, что фосфоинозити-
ды и их метаболиты принимают участие в реализации действия нейроме-диаторов на молекулярном уровне (Долго-Сабуров В.Б., 1989; Утешев Б.С., 1992; Baraban, 1989; Calvet et al., 1995, Li, 1990; Manzoni, 1990; Sharif et al., 1996 и др.), а также в процессах активации клеток-мишеней аллергического процесса (базофилов, тучных клеток) и иммунокомпе-тентных клеток (Лященко В.А.и соавт, 1988, Суслов А.П., 1990; Карга-полов А.В., Слюсарь Н Н , 1992-2005, Beaven et al., 1988, Gruchalla et al., 1990). При гидролизе полифосфоинозитидов происходит образование вторичных мессенджеров диацилглицеролов и инозитолтрифосфатов. Кроме того эти липиды являются одними из поставщиков арахидоновой кислоты и эйкозаноидов (Пыцкий В.И., 1991; Гущин И.С., 1993; Ковалева В.Л., Чучалин А Г., 1997; Bach, 1988; Abraham et al., 1989; Chilton, 1990, Seeger et al., 1990, Gibs et al., 1996 и др.). На метаболизм мембранных фосфоинозитидов оказывают влияние различные нейромедиаторы, в том числе нейроаминокислоты и их производные (Li X N , Song L., Jope R S , 2000) Однако эффекты новых производных аминокислот в этом отношении изучены недостаточно. С учетом роли центральной нервной системы и метаболических нарушений в патогенезе аллергии целесообразным представляется изучение влияния нейроаминокислот и их производных на течение аллергических реакций Известно, что многие производные нейроаминокислот наряду с центральным действием обладают рядом свойств, которые могут быть ценны для коррекции метаболических нарушений при аллергических реакциях. Так, например, ряд производных тормозных нейроаминокислот (глицина и у-аминомасляной кислоты) обладают выраженной антиоксидантной, мембраностабилизирующей и ан-тигипоксической активностью. Существуют сведения, что глицин оказывает выраженное противогипоксическое действие на моделях гистотокси-ческой, гиперкапнической и гипобарической гипоксии, причем введение фосфорилированного остатка в молекулу глицина приводит к повышению противогипоксической активности данной аминокислоты (Макарова JI.M , 2006). Результаты экспериментальных исследований показали, что новый оригинальный дипептидный препарат, содержащий глицин - но-опепт (этиловый эфир Ы-фенилацетил-1-пролилглицина) предотвращает вызванное стрессомнакопление продуктов перекисного окисления липи-дов, снижая содержание диеновых конъюгатов и шиффовых оснований, повышает активность эндогенных антиоксидантных систем - суперок-сиддисмутазы, каталазы и церулоплазмина, обладает антитромботиче-ским эффектом, проявляет противовоспалительный эффект на моделях острого неиммунного и хронического иммунного воспаления (Воронина
4
Т.А., Гудашева Т.А, Островская Р У, Воронина Т.А., Гарибова T.JL, 2004, 2006) Таким образом, известные фармакологические свойства глицина и его производных дают основания для изучения их эффектов при экспериментальных аллергических реакциях.
Работа выполнена по плану научно-исследовательской работы Тверской государственной медицинской академии (ТГМА) в рамках научного направления "Фармакология аллергии". Тема исследования утверждена на заседании ученого совета ТГМА и на заседании проблемной комиссии "Фармакология нервной системы" РАМН
Цель работы Исследование влияния производных нейроаминокис-лот на течение экспериментальных аллергических реакций (in vivo и in vitro).
Задачи исследования Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие конкретные задачи:
• Исследовать влияние глицина, 1\Г-фенилацетил-1-пролилглицина, пикамилона и натрия оксибутирата на течение системной (анафилактический шок у кроликов и системная анафилаксия у крыс) и местной (реакция активной кожной анафилаксии у крыс) анафилактических реакций в эксперименте на животных
• Оценить влияние глицина, М-фенилацетил-1-пролилглицина и натрия оксибутирата на развитие анафилаксии in vitro (в тесте прямой реакции дегрануляции базофилов крови кроликов).
« Исследовать влияние глицина и К-фенилацетил-1-пролил глицина на течение кожной аллергической реакции замедленного типа у мышей.
• Исследовать изменения содержания фосфоинозитидов и продуктов их метаболизма в крови, лимфоцитах и макрофагах крови ал-лергизированных животных под влиянием тормозных нейроами-нокислот и их производных;
• Оценить антигипоксическую активность глицина, N-фенилацетил-1-пролилглицина и натрия оксибутирата при экспериментальной анафилаксии;
• Провести сравнительный анализ эффектов действия глицина, N—- фенилацетил-1-пролилглицина и натрия оксибутирата при экспериментальной анафилаксии с действием глюкокортикостероидов (преднизолона) и кромолин-натрия.
Научная новизна работы Впервые на различных экспериментальных моделях анафилаксии (системной, местной и in vitro) обнаружено наличие умеренной противоаллергической активности у глицина и его про-
5
изводного нового оригинального препарата этилового эфира фенилацетил-1-пролилглицина (ноопепта). Впервые выявлена способность глицина и его производного (ноопепта) повышать устойчивость подопытных животных к анафилактической гипоксии. Впервые показано, что глицин и 1Ч-фенилацетил-1-пролилглицин оказывают корригирующее влияние на метаболизм фосфоинозитидов в крови, лимфоцитах и макрофагах крови при экспериментальной анафилаксии.
Научно-практическая значимость работы Результаты работы имеют как теоретическое, так и практическое значение. Фармакологически доказана возможность применения производных тормозных нейроа-минокислот в комплексной, патогенетически обоснованной терапии аллергических заболеваний. Выявлены изменения содержания фосфолипи-дов, в том числе фосфоинозитидов и продуктов их метаболизма, в крови, лимфоцитах и макрофагах при анафилаксии Показана возможность фармакологической коррекции нарушений гомеостаза фосфоинозитидов при аллергических реакциях немедленного типа с помощью нейроаминокис-лот и их производных. Показана возможность использования препаратов с антигипоксической активностью при анафилактическом шоке для повышения устойчивости организма к анафилактической гипоксии Результаты исследования позволяют рекомендовать 1Ч-фенилацетил-1-пролилглицин для расширенных доклинических испытаний в качестве противоаллергического средства.
По материалам диссертации было сделано 3 рационализаторских предложения.
Положения, выносимые на защиту.
1 Наличие противоаллергической активности у глицина и Ы-фенилацетил-1-пролилглицина.
2. Способность глицина и ТЧ-фенилацетил-1-пролилглицина восстанавливать содержание фосфоинозитидов и их метаболитов в крови и им-мунокомпетентных клетках крови при экспериментальной анафилаксии
3. Повышение устойчивости подопытных животных к острой гипоксии при анафилаксии под влиянием натрия оксибутирата, глицина и Ы-фенилацетил-1-пролилглицина.
Внедрение. Результаты исследований используются в учебном процессе при проведении занятий и лекций по следующим темам: "Противоаллергические средства", "Иммунотропные средства", на кафедрах фармакологии Пензенского государственного университета и Смоленской государственной медицинской академии, кафедре фармации Тверской государственной медицинской академии, а также в научных исследованиях, 6
проводимых в НИЦ Тверской государственной медицинской академии
Апробация работы. Основные положения диссертации обсуждены на XIV Всероссийском конгрессе "Человек и лекарство", на областных научно-практических конференциях (Тверь, 2006,2007), на расширенном заседании кафедры фармации
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ. Сделано 3 рационализаторских предложения
Объем и структура диссертации Работа изложена на 117 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 2 глав собственных исследований, заключения, выводов, научно-практических рекомендаций и списка литературы, включающего 250 источников, в том числе 160 отечественных и 90 иностранных. Диссертация иллюстрирована 13 рисунками и документирована 15 таблицами
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Опыты проведены на 38 кроликах калифорнийской породы обоего пола массой 2,3±0,2 кг, 134 крысах-самцах линии Вистар массой 190-200 г, 357 белых беспородных мышах обоего пола массой 20-22 г и 96 мышах-самцах линии Balb/C массой 21,2±0,4 г. Эффекты нейроаминокислот и их производных: глицина, этилового эфира 1Ч-фенилацетил-1-пролилглицина (ноопепт, НИИ фармакологии РАМН), натриевой соли N-никотиноил- у-аминомасляной кислоты (пикамилон, Мосхимфарм, Россия) и натрия ок-сибата (натрия оксибутират, Мосхимфарм, Россия) оценивали с использованием различных моделей анафилаксии (системной, местной и in vitro), а также кожной аллергической реакции замедленного типа В качестве препаратов сравнения использовали один из наиболее эффективных препаратов для лечения анафилаксии глюкокортикостероид преднизолон (преднизолона фосфат натрий, Симпекс Фарма, Индия), препарат кромог-лициевой кислоты, угнетающий высвобождение медиаторов аллергии из тучных клеток и базофилов - кромолин-натрий (интал®, Гедеон Рихтер, Венгрия) Исследуемые соединения вводили кроликам внутривенно, мышам и крысам внутрибрюшинно за 15 минут до разрешающей инъекции антигена и в последующие 5 суток.
Кроликов сенсибилизировали однократным подкожным введением свиной сыворотки в дозе 1 мл/кг по методу Четверикова Г.Н (1971), разрешающие инъекции антигена вводили внутривенно в дозе 1 мл/кг на 147
й день латентного периода сенсибилизации. При этом у подопытных животных развивалась двухфазная анафилактическая реакция, при которой немедленная фаза регистрировалась через 1-2 минуты после введения антигена, повторное развитие симптомов отмечалось через 6-8 часов в результате позднего ответа. Тяжесть анафилактического шока у кроликов в немедленной фазе определяли в баллах (Weigl, 1960). Использование модели анафилактического шока у кроликов позволило оценить влияние исследуемых препаратов на течение как немедленной, так и поздней фазы анафилактической реакции, при этом учитывали, что двухфазные анафилактические реакции развиваются у 5-20% пациентов (Чучалин А Г, 2007)
Активную иммунизацию крыс и мышей проводили овальбумином по методу ЛП Ишимовой, Нгуен Нанг Ан (1962) (Ветренко Т.В. и соавт, 1983) С этой целью подопытным животным трехкратно ежедневно подкожно вводили 1 мкг овальбумина (Sigma, grade III), разведенного в 0,2 мл изотонического раствора натрия хлорида с равным количеством вазелинового масла. Для индукции системной анафилаксии подопытным животным вводили внутрибрюшинно на 21-й день латентного периода сенсибилизации разрешающие инъекции овальбумина (1 мкг овальбумина в 0,25 мл изотонического раствора натрия хлорида) Системная анафилаксия у крыс и мышей проявлялась развитием анафилактического отека тонкого кишечника, выраженность которого оценивали по изменению содержания общей воды (методом высушивания до постоянной массы). Индукцию системной анафилаксии у крыс осуществляли для изучения влияния производных ней-роаминокислот на выраженность анафилактического отека внутренних органов. На модели системной анафилаксии у мышей оценивали антигипок-сическую активность исследуемых соединений в тесте острой гипоксии с гиперкапнией в гермообъеме
Реакцию активной кожной анафилаксии у крыс индуцировали на 21-е сутки латентного периода сенсибилизации С этой целью подопытным животным внутрибрюшинно вводили синий Эванса (0,25 мл 1,6% раствора на 100 г веса), после чего внутрикожно - 0,05 мкг овальбумина, что приводило к развитию местной аллергической реакции Через 20 минут подопытным животным внутрибрюшинно вводили исследуемые препараты. После достижения эффекта препаратов повторно внутрикожно вводили антиген с другой стороны живота Через 20 минут животных (под эфирным наркозом) забивали, отсепаровывали кожу и оценивали результаты реакции. Визуально кожная анафилаксия проявлялась окрашиванием участка кожи в синий цвет, что было связано с выходом красителя из кровеносного русла в очаг аллергического поражения. Выраженность реакции активной кожной ана-8
филаксии оценивали по площади опытных и контрольных пятен
Исследование анафилаксии на клеточном уровне проводили на модели антиген-индуцированной дегрануляции базофилов по Shelley в модификации (Серова Т.И., 1986), используя базофильные лейкоциты крови сенсибилизированных кроликов (Базанов Г.А, 1994, Демидова М.А., 1997) С этой целью определяли число дегранулированных базофилов (отличающихся от неповрежденных клеток измененной формой, нарушенным контуром, наличием псевдоподий и гранулокинезом) до и после их инкубации с антигеном Препараты лейкоцитарной взвеси крови кроликов окрашивали нейтральным красным (при этом базофилы приобретали буровато-красновато-коричневый цвет, что позволяло легко отдифференцировать их от других форменных элементов крови) Влияние исследуемых соединений на выраженность антиген-индуцированной дегрануляции базофилов крови оценивали в экспериментах in vitro (при инкубации базофилов крови сенсибилизированного кролика с исследуемым препаратом в концентрации 10"5 М до воздействия антигена) и in vivo (при внутривенном введении исследуемых препаратов сенсибилизированным кроликам за 20 минут до забора крови для постановки прямой реакции дегрануляции базофилов)
Моделирование аллергической реакции замедленного типа осуществляли на мышах-самцах линии Balb/c Подопытных животных сенсибилизировали однократно путем внутрикожного введения в основание хвоста 60 мкл эмульсии аллергена (овальбумина) в полном адьюванте Фрейнда, препятствующего формированию Т-супрессоров. Реакцию замедленного типа вызывали через 5 дней путем введения 0,04 мл аллергена (овальбумина) в подушечку задней лапы Эффект реакции оценивали через 6 часов, через 24 часа и через 48 часов, измеряя толщину лапки подопытного животного с помощью инженерного микрометра МК-0-25. По разнице в толщине лапки до и после введения аллергена определяли величину отека. Для оценки влияния тестируемых соединений и препаратов контроля на выраженность затяжной аллергической реакции осуществляли внутри-брюшинное ведение исследуемых соединений за 20 минут до постановки реакции. В каждую опытную группу входило по 10-12 животных.
Выделение клеток крови (лимфоциты, макрофаги) проводили на градиенте плотности фиколл-верографина. Из отмытых клеточных суспензий и цельной крови экстрагировали липиды, выделение общих липи-дов, фосфолипидов, в том числе фосфоинозитидов, осуществляли с помощью усовершенствованного метода проточной горизонтальной хромо-тографии (AB Каргаполов, Н.Н.Слюсарь, 1991-1992). Диацилглицеролы
(ДГ) выделяли методом тонкослойной хроматографии (Финдлей Дж.Б. и соавт., 1990). Содержание арахидоновой кислоты (АК) определяли с помощью газожидкостной хроматографии (Богдарин Ю.Аи соавт., 1982). Количество простагландинов (ПГ) определяли радиоиммунологическим методом (Некрасова А А.и соавт, 1977) с применением набора реагентов ("Clinical Assays", USA) для ПГЕ, (Institute of Isotops, Hungary) для ШТ2а, с помощью сцинтиляционного счетчика "Mark-3" ("Nuclear Chicago", USA) Концентрацию белка в отмытых клеточных суспензиях определяли биуретовым способом
Статистическую обработку цифрового материала проводили с применением стандартного пакета программ "Ms ЕхеР". Для ряда выборок вычисляли среднюю арифметическую и среднюю квадратическую ошибку. Все данные в диссертации представлены в виде М±т Для оценки достоверности различий выборок применяли параметрический t-критерий Стьюдента. Все цифровые материалы оформлены в виде таблиц и графиков с помощью прикладного пакета "Microsoft Graph" в программном продукте "Microsoft Office 2000".
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
На первом этапе экспериментального исследования была проведена оценка влияния препаратов тормозных нейроаминокислот на выраженность реакции активной кожной анафилаксии у крыс (табл 1). Оценивали действие глицина, этилового эфира М-фенилацетил-1-пролилглицина, натрия оксибутирата и пикамилона при внутрибрюшинном введении в диапазоне доз от 1/10 LD50 до 1/1000 LD50. Эффекты исследуемых соединений сравнивали с действием глюкокортикостероида преднизолона фосфата натрия (0,5 мг/кг), внутрибрюшинное введение которого угнетало выраженность активной кожной анафилаксии в среднем на 70,8% (р<0,01) по сравнению с контролем. Было выявлено, что среди производных нейроаминокислот имеются соединения угнетающие выраженность данной реакции. Так, например, в сериях опытов с внутрибрюшинным введением 1^-фенилацетил-1-пролилглицина (1 мг/кг), глицина (1 мг/кг) и натрия оксибутирата (100 мг/кг) выраженность реакции активной кожной анафилаксии снижалась соответственно на 50,8% (р<0,05), 35,8 (р<0,05); 22,1 (р<0,05) по сравнению с контролем. При этом все исследованные соединения уступали по своей активности препарату сравнения преднизолону (0,5 мг/кг) Достоверных изменений выраженности активной кожной анафилаксии при введении пикамилона обнаружено не было.
10
Таблица 1
ВЛИЯНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ НЕЙРОАМИНОКИСЛОТ НА ВЫРАЖЕННОСТЬ АКТИВНОЙ КОЖНОЙ АНАФИЛАКСИИ У КРЫС
№ Серия опытов Число Доза Активная кожная
крыс мг/кг, Анафилаксия
в/б Площадь ок- Изменения
рашенного реакции,%
пятна кожи,
мм2
1 Контроль (изотониче- 10 - 75,4+7,6 -
ский раствор натрия
хлорида)
2 Преднизолон 10 0,5 22,0 ±6,1 -70,8
3 ТЧ-фенилацетил-1- 8 0,1 61,3+8,4 -18,7
пролилглицин 10 1 37,1 ±4,6* -50,8
12 10 55,4±7,5* -26,5
4 Глицин 8 0,1 59,6±8,7 -21,0
10 1 48,4±9,1* -35,8
10 10 56,3±2,9* -27,9
5 Пикамилон (натриевая 8 2 78,4±8,1 +3,9
соль К-никотиноил-у- 8 20 69,9±5,6 -7,2
аминомасляной кисло- 10 200 69,2+6,9 -8,2
ты)
6 Натрия оксибутират 10 10 70,1+7,9 -7,0
10 100 58,7+4,6* -22,1
10 200 46,4±5,1* -38,5
Примечание Звездочка указывает на достоверность различий с контролем (изотонический раствор натрия хлорида) - (р<0,05)
Одновременно было выявлено, что производные нейроаминокислот изменяли течение анафилактического шока у кроликов (табл. 2) Так, натрия оксибутират уменьшал тяжесть и гибель кроликов как в немедленной, так и в поздней фазе анафилактического шока. Глицин и КГ-фенилацетил-1-пролилглицин оказывали незначительно влияние на тяжесть шока в немедленной фазе, но предупреждали гибель кроликов в поздней фазе шока Пикамилон не влиял на течение анафилактического шока у кроликов
Таблица 2
ВЛИЯНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ НЕЙРОАМИНОКИСЛОТ И ПРЕДНИЗОЛОНА НА ТЕЧЕНИЕ АНАФИЛАКТИЧЕСКОГО ШОКА (АШ) У КРОЛИКОВ
№ СЕРИЯ ОПЫТА ТЯЖЕСТЬ АШ ЧИСЛО КРОЛИКОВ, ПОГИБШИХ В РАЗЛИЧНЫЕ ФАЗЫ АНАФИЛАКТИЧЕСКОГО ШОКА, %
НЕМЕДЛЕННАЯ ФАЗА ПОЗДНЯЯ ФАЗА ВСЕГО
1 0,9% РАСТВОР №С1 п= 48* 3,0 50 22 72
2 ПРЕДНИЗОЛОН (0,5 мг/кг) п=10* 1,6 10 0 10
3 ГЛИЦИН (1 мг/кг) п=10 2,5 40 0 40
4 >1-ФЕНИЛАЦЕТИЛ-Ь-ПРОЛИЛГЛИЦИН (1 мг/кг) п=10 2,4 38 0 38
5 НАТРИЯ ОКСИБУ-ТИРАТ (100 мг/кг) п=10 1,8 0 10 10
6 ПИКАМИЛОН (200 мг/кг) п=8 3,0 50 25 75
* - по данным Демидовой М А
Исследования, проведенные на модели системной анафилаксии у крыс, позволили выявить среди препаратов нейроаминокислот вещества, уменьшающие выраженность анафилактического отека внутренних органов Известно, что шоковым органом при анафилаксии у мелких грызунов (крыс, мышей) является тонкий кишечник. В связи с этим выраженность системной анафилаксии у крыс оценивали по степени гидратации тканей тонкого кишечника Было выявлено, что во время системной анафилактической реакции содержание общей воды в тонком кишечнике подопытных крыс увеличилось в среднем на 8,2% (р<0,05) по сравнению с ее уровнем в тонком кишечнике интактных крыс. В остальных органах (в легких, печени и толстом кишечнике) увеличение степени гидратации было недостоверным
8-1
в-
со 7-
5 6 /
и 5-
0 1 р
i % 3- к"
со cl -о сп 2 1- x /
0- л
3 4
Серии опытов
Рис. Í. Влияние препаратов нейроамннокислот и преднизалона на выраженность анафилактического отека тонкого кишечника у крыс.
Примечание: *-р<0,05; #-p<0,¡.
1 - контроль; 2 - преднизалон (0,5 мг/кг);3 - натрия оксибутират (100 мг/кг); 4 - глицин (1 мг/кг); 5 — N-фенилацетил-l-пролилглицин (1 мг/кг);6 - пикамилон (200 мг/кг).
Внутрибрюшинное введение лреднизолона в дозе 0,5 мг/кг эффективно предупреждало развитие анафилактического отека внутренних органов у крыс, поэтому в дальнейших экспериментах действие преднизо-лона (0,5 мг/кг) рассматривалось как эталон для сравнения (рис.1). Было показано, натрия оксибутират 0 00 мг/кг) и N-фенилацетил-!-пролилглнцин (J мг/кг) достоверно (р0,05) уменьшали выраженность анафилактического отека тонкого кишечника у подопытных животных, причем эффекты натрия оксибутирата в этом отношении были сопоставимы с действием преднизолона (0,5 мг/кг), ТМ-фенилацетил-]-пролилглицин (1 мг/кг) и глицин (1 мг/кг) действовали слабее. Пикамилон (200 мг/кг) в этом отношении был не эффективен.
Действие препаратов нейроаминокислот при экспериментальной аллергии оценивали не только в экспериментах in vivo, но и in v/íro. В этом отношении особый интерес представляло изучение влияния соединений на процессы антиген-индуцированной дегрануляцин клеток-мишеней аллергического процесса (тучных клеток и базофилов). Исследования проводили с использованием базофильных лейкоцитов крови кроликов, сенсибилизированных свиной сывороткой. Базофильные лей-
13
коциты крови являются клетками-мишенями аллергического процесса I порядка, так как несут на своей поверхности высокоаффинные Гс рецепторы для ^Е. Их активация реакцией аллерген-антитело приводит к высвобождению различных биологически активных веществ, которые изменяют функцию других клеток (клеток-мишеней аллергии II порядка). От функциональных взаимоотношений, складывающихся между клетками эффекторного звена аллергического ответа зависит исход аллергического процесса (И.С.Гущин, 1998).
Таблица 3
ВЛИЯНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ НЕЙРОАМИНОКИСЛОТ (10"5 М) И КРОМОГЛИКАТА НАТРИЯ НА УРОВЕНЬ СПОНТАННОЙ И АНТИГЕН-ИНДУЦИРОВАННОЙ ДЕГРАНУЛЯЦИИ БАЗОФИЛОВ КРОВИ КРОЛИКОВ
IN VITRO
№ Серия Опытов Число наблюдений Дегрануляция базофилов, % Уровень АГ-индуцированной дегрануляции, % к спонтанной
Спонтанная Антиген-индуцированная
1 ИР NaCl 15 29,6±8,5 64,7+4,10 + 119,6
2 Кромогликат натрия (интал) 12 26,6±3,2 38,3+4,1* +43,9*
3 Глицин 12 25,8±4,5 51,2±7,1 +98,4
4 N-фенилацетил-1-пролилглицин 12 27,1±3,7 43,1±3,2* +59,0*
5 Натрия оксибутират 10 29,7±б,2 47,4±5,1* +59,6*
6 Пикамилон 10 27,6±4,5 59,3+7,2 +114,9
Примечание *-различия с контролем (ИР NaCl) достоверны (р<0,05)
Обнаружено, что М-фенилацетил-1-пролилглицин и натрия оксибу-тират уменьшали степень антиген-индуцированной дегрануляции базо-филов крови сенсибилизированных кроликов (табл 3, рис. 2) Отмечено, что в опытах in vivo (внутривенное введение веществ животным) производные нейроаминокислот более эффективно подавляли эту реакцию, чем в экспериментах in vitro (инкубация базофилов с веществами и антигеном). Эти факты свидетельствуют о том, что эти соединения оказывают не только прямое, но и опосредованное действие на мембраны базофиль-ных лейкоцитов. Вместе с тем следует отметить, что по своей способно-
ти подавлять антиген-индуцированную дегрануляцию базофилов натрия жсибутират и ^фенилацеяйл-1-лролилглицин (ноопепт) были в среднем 1 1,35 раза (р<0,05) слабее, чем кромогликат натрия.
0.9% р-р NaCI глицин
«жсибутират
Рис, 2. Влияние производных нейроаминокйслот и кромогликата натрия (интала) на антиген-индуцированную дегрануляцию базофилов крови сенсибилизированных кроликов in vivo и in vitro.
Примечание. * - различия с контролем (0,9% раствор NaCl) достоверны (р<0,05),
Эффекты препаратов ней роа м и н о к и с л от оценивали не только в отношении аллергических реакций немедленного типа (общей, местной и ¡п уПго), но и замедленного типа. В качестве модели аллергической реакции замедленного типа была использована кожная аллергическая реакция у мышей линии Ьа1Ь/с. С этой целью в подушечку задней лапки сенсибилизированных животных виутрйкожно вводили 40 мкл аллергена (овальбу-мина). О степени выраженности кожной реакции замедленного типа у мышей судили по величине отека лапки. Анализ данных проведенного исследования показал способность глицина и М-фенилацетил-1-пролилглицина уменьшать выраженность кожной аллергической реакции замедленного типа у мышей. В серии опытов с введением этих соединений кожная аллергическая реакция замедленного типа развивалась в более поздние сроки и была выражена в среднем в 1,3 раза (р<0,05) слабее, чем в контроле (табл. 4). Пикамилон и натрия оксибутират подобной активности не проявили.
Таблица 4
ВЛИЯНИЕ ГЛИЦИНА И Ы-ФЕНИЛАЦЕТИЛ-Ь-ПРОЛИЛ ГЛИЦИНА
НА РАЗВИТИЕ КОЖНОЙ АЛЛЕРГИЧЕСКОЙ РЕАКЦИИ _ ЗАМЕДЛЕННОГО ТИПА У МЫШЕЙ_
Серия опытов Период наблюдения Достоверность различий
До введения АГ Через 6 часов Через 24 часа Р1 Р2 Рз
Контроль ИР №С1 2,35±0,02 3,6±0,1 3,67±0,05 0,001 0,001 —
Глицин 2,28±0,06 2,70±0,10 2,94±0,09 0,05 0,05 0,01
Ы-фенилацетил-1-пролилглицин 2,22±0,10 2,46±0,05 2,72±0,11 0,3 0,05 0,01
Примечание Р1 - различия между значениями показателя до введения антигена и через 6 часов после введения,
Р2 - различия между значениями показателя до введения антигена и через 24 часа после введения,
Р} — различия между значениями показателя в опыте и контроле через 24 часа после введения антигена
Таким образом, результаты эксперимента, проведенного с использованием различных моделей аллергических реакций немедленного и замедленного типов, показали, что среди исследованных производных ней-роаминокислот имеются вещества, обладающие противоаллергической активностью. Наиболее перспективным соединением этого ряда является новый оригинальный препарат Ы-фенилацетил-1-пролилглицин Наибольший эффект этого соединения был выявлен в отношении кожных проявлений аллергической реакции как замедленного типа (в реакции отека лапы у мышей), так и немедленного типа (в реакции активной кожной анафилаксии), кроме того 1Ч-фенилацетил-1-пролилглицин, также как и глицин эффективно предупреждали развитие поздней фазы анафилактической реакции у кроликов.
На следующем этапе экспериментального исследования изучали влияние производных нейроаминокислот на содержание фосфоинозити-дов и их метаболитов (диацилглицеролов, арахидоновой кислоты и про-стагландинов) в крови и иммунокомпетентных клетках крови. Анализ результатов биохимических исследований показал, что при анафилаксии содержание фосфоинозитидов в крови подопытных крыс уменьшалось по
16 ч
равнению с их уровнем у сенсибилизированных животных в дошоковом ериоде и у интактных крыс (соответственно в 1,2 раза и 1,7 раза, <0,05) Одновременно обнаружено уменьшение количества этих липи-ов в макрофагах и лимфоцитах крови крыс соответственно в 1,2 и 1,4 аза (р<0,05) по сравнению с их уровнем в дошоковом периоде и в 1,3 и ,5 раза (р<0,05) по сравнению с их количеством у интактных животных. 4ежду тем известно, что при распаде фосфорилированных форм фос-юинозитидов образуются вторичные мессенджеры (инозитолмонофос-)аты, инозитолдифосфаты, инозитолтрифосфаты, диацилглицеролы). "ак, например, при гидролизе фосфатидилинозитол-4,5-дифосфатов про-[сходит образование основных вторичных мессенджеров - диацилглице-юлов и инозитол-1,4,5-трифосфатов (Утешев Б.С., Коростелев С.А., 990), которые соответственно активируют протеинкиназу С и мобилизуют ионы кальция, способствуя высвобождению медиаторов аллергии i усилению аллергизации организма Было отмечено, что содержание щацилглицеролов в крови крыс при анафилаксии было соответственно в i, 1 и 1,2 раза (р<0,05) выше, чем их уровень у интактных и сенсибилизированных крыс в дошоковом периоде. В макрофагах и лимфоцитах крови при анафилаксии также отмечалось увеличение количества диацилгли-церолов (соответственно в 1,15 и 1,2 раза (р<0,05) по сравнению с дошо-ковым периодом). Изменение содержания диацилглицеролов при анафилаксии сопровождалось увеличением количества арахидоновой кислоты в цельной крови и лимфоцитах соответственно в 1,1 и 1,3 раза (р<0,05) по сравнению с ее уровнем до введения разрешающей инъекции антигена Вместе с тем отмечено, что концентрация арахидоновой кислоты в макрофагах крови при анафилаксии, напротив, снизилась (в среднем в 1,5 раза (р<0,05) по сравнению с дошоковым периодом) Вероятно, это связано с усилением образования эйкозаноидов, в частности простагланди-нов, в макрофагах крови подопытных животных при анафилактическом шоке Так, одновременно с уменьшением количества арахидоновой кислоты в макрофагах крови отмечалось увеличение содержания в этих клетках ШТ2сс (в среднем в 1,2 раза (р<0,05) по сравнению с дошоковым периодом), тогда как количество ПГЕ не изменилось.
Следует отметить, что наибольшее корригирующее влияние на содержание фосфоинозитидов и продуктов их метаболизма в крови и имму-нокомпетентных клетках крови при анафилаксии оказывал N-фенилацетил-1-пролилглицин Так, в сериях опытов с введением этого соединения было отмечено увеличение содержание фосфоинозитидов в крови и макрофагах подопытных крыс в среднем в 1,4 раза (р<0,05) по
сравнению с контролем, что, вероятно, связано с уменьшением расходования этих липидов при анафилаксии. В сериях опытов с введением натрия оксибутирата и глицина уровень этих липидов в макрофагах крови увеличивался в среднем в 1,2 раза (р<0,05), тогда как пикамилон такого действия не оказывал (рис. 3).
*
0,9% Мэа пмрн мклии ктгтркисжсибуичяпг п%«ам*пон
[□ 0,9% рэствор МзО [3 глицин И ноолегтг И натрия оксиб/тиргсг □птаьмлон |
Рис. 3. Влияние производных нейроаминокислОТ на содержание фосфати-дилинозитов в макрофагах и лимфоцитах крови крыс при анафилаксии.
Примечание. * - различия с контролем (0,9% раствор ИаС1) достоверны (р<0,05).
тицин нослпт нэтрил скиЦуглря
|00.9% раоаор МаС10 глицин □ ноопегп и натрия окенбугираг 13 пикамилон]
Рис.4. Влияние производных нейроаминокислот на содержание диацилг-
лицеролов в макрофагах крови крыс при анафилаксии.
Примечание. * - различия с контролем (0,9% раствор МаС!) достоверны
(р<0,05). 18
О рвттцор глицин носпепт н»1 р«я (жсЛутирят ПММПКИ
[□ 0.9% раствор Г4аС1 о гпицин □ иоопепт □ натрия оксибутират апикамилон]
■'ис.5. Влияние производных нейроами нокислот на содержание простаг-
лзндиное* ПГР2а в макрофагах крови крыс при анафилаксии, примечание. * - различия с контролем (0,9% раствор ЫаС1) достоверны (р<0,05).
09-х. ресгьср N3^1 гли^т
мослетт нэтрда осиеутирят гмкэмипан
Рис. 6. Влияние производных нейроаминокислот на содержание арахидо-
новой кислоты в лимфоцитах крови крыс при анафилаксии. Примечание. * - различия с контролем (0,9% раствор ИаС1) достоверны (р<0,05).
Изменения уровня фосфоинозитидов в крови и иммунокомпетент-ных клетках крови под влиянием производных нейроаминокислот сопровождались изменением количества их метаболитов - диацилглицеролов, арахидоновой кислоты и простагландинов (рис. 5, 6, 7). Так, в сериях опытов с введение глицина, М-фенилацетил-1-пролилглицина (ноопепта) и натрия оксибутирата отмечено уменьшение содержания арахидоновой кислоты в лимфоцитах крови в среднем в 1,3 раза (р<0,05) и снижение количества П1Т2сс в макрофагах крови соответственно в 1,57, 1,27 и 1,39 раза (р<0,05). Кроме того при введении подопытным животным глицина и 1Ч-фенилацетил-1-пролилглицина было отмечено уменьшение уровня диацилглицеролов в макрофагах крови соответственно в 1,15 и 1,54 раза (Р<0,05).
Известно (А.Д Адо, 1978; В И Пыцкий, 1991), что при анафилаксии наблюдается выраженная гипоксия тканей Кроме того отмечено снижение устойчивости подопытных животных к анафилактической гипоксии (Демидова М.А , 1997, Шатохина Н.А , 2006). Так, например, было выявлено, что продолжительность жизни сенсибилизированных мышей в условиях острой гипоксии уменьшалась в среднем в 1,3 раза по сравнению с контролем (интактные животные). Известно, что натрия оксибутират проявляет выраженную антигипоксическую активность при использовании различных моделей гипоксии, что позволяет рассматривать его как эталон при тестировании потенциальных антигипоксантов (Сернов Л.Н., Гацура В.В , 2000) Имеются указания (Макарова Л.М , 2006) на наличие антиги-поксической активности у глицина, однако оценка антигипоксической активности нейроаминокислот и их производных при анафилаксии не проводилась. В экспериментах на мышах, сенсибилизированных овальбуми-ном, было обнаружено, что натрия оксибутират (100 мг/кг) и глицин (1 мг/кг) достоверно увеличивают продолжительность жизни подопытных животных в условиях анафилактической гипоксии Ы-фенилацетил-1-пролилглицин (ноопепт) не проявлял антигипоксической активности у интактных животных, однако применение этого соединения у сенсибилизированных мышей (в условиях индукции системной анафилаксии) повышало устойчивость последних к острой гипоксии (рис 7)
Таблица 5
ЛР\Щ ОПЫТОВ ПО ИЗУЧЕНИЮ ЛНТИГИПОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
.ь Исследуемый Группа наблюдения (число мышей в опыте)
1 Препарат Интактные Сенсибилизи- Системная
мыши рованные мыши анафилаксия
ИР N30 10 10 10
г ! ] атрия океибутират 10 9 10
Глицин 12 10 10
1, ' N - фе н ид ацетил -1 -пролилглицин 9 8 10
5. Пнкамвдон 9 г? 9
I 5
X
к
X
У
г л
Е
V
I
п
0
а
С %
X «
У X
1
в
1
Рис. 7. В лияние производных нейроаминокислот на продолжительность жизни животных (интактные и сенсибилизированные мыши при анафилаксии) в условиях острой гипоксии. Примечание. * - различия с контролем (0,9% раствор №аС1) достоверны
¿=71
натрия оксибугарат
выводы
1. Среди исследованных производных нейроаминокислот наибольшей антианафилактической активностью обладали натрия оксибутират (100 мг/кг) и Ы-фенилацетил-1-пролилглицин (1 мг/кг), которые увеличивали выживаемость подопытных кроликов при анафилактическом шоке и уменьшали выраженность реакции активной кожной анафилаксии у крыс соответственно в 1,5 и 1,2 раза.
2. Натрия оксибутират оказывал противошоковое действие как в немедленной, так и в поздней фазе анафилактического шока у кроликов Глицин и М-фенилацетил-1-пролилглицин предотвращали развитие только поздней фазы немедленной аллергической реакции.
3. Натрия оксибутират и 1Ч-фенилацетил-1-пролилглицин угнетали выраженность антиген-индуцированной дегрануляции базофильных лейкоцитов крови, уступая в этом отношении кромогликату натрия в среднем в 1,35 раза. При этом эффекты этих соединений in vivo были выражены сильнее, чем m vitro
4 Глицин (1 мг/кг) и ]Ч-фенилацетил-1-пролилглицин (1 мг/кг) уменьшали выраженность кожной реакции замедленного типа у мышей в среднем в 1,3 раза.
5 Натрия оксибутират (100 мг/кг), глицин (1 мг/кг) и N-фенилацетил-!-пролилглицин (1 мг/кг) повышали устойчивость подопытных животных к гипоксии в условиях анафилаксии соответственно в 2,1; 1,34 и 1,28 раза.
6. 1Ч-фенилацетил-1-пролилглицин (1 мг/кг) в 1,4 раза, а натрия оксибутират (100 мг/кг) и глицин (1 мг/кг) в 1,2 раза увеличивали содержание фосфоинозитидов в крови и макрофагах крови крыс при анафилаксии
НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Результаты работы позволяют рекомендовать производное ней-роаминокислоты глицина (этиловый эфир N-фенилацетил-!-пролилглицина, ноопепт) для расширенного доклинического испытания в качестве противоаллергического средства.
2 При проведении поиска антианафилактических средств целесообразно проводить изучение веществ с антигипоксической активностью
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
Демидова М А , Шатохина Н А , Шнеур С Я , Ковтун А А Антигипокси-ческая активность антиоксидантов при анафилаксии // Фармация - 2006 -№5 - с 35-36
Шатохина Н А , Шнеур С Я , Ковтун А А Влияние метаболических корректоров на течение системной анафилаксии у мышей // Сборник научных статей «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» - Пятигорск, 2007 - вып 62 - с 575-576 Шнеур С.Я , Галимская Е В , Ковтун А А Влияние производных нейроа-минокислот на уровень антиген-индуцированной дегрануляции базофилов // Сборник научно-практических работ «Лечебно-диагностические, мор-фофункциональные и гуманитарные аспекты медицины» - Тверь, 2007 -с 57-58
Шнеур С Я , Демидова М А , Галимская Е В , Ковтун А А Влияние производных нейроаминокислот на содержание фосфоинозитидов в крови при экспериментальной анафилаксии // Сборник научных работ Санкт-Петербургской химико-фармацевтической академии -Санкт-Петербург, 2007 - с 114-115
i Демидова М А , Шатохина Н А , Шнеур С Я , Ковтун А А Антигипокси-ческая активность реамберина, мексидола и дихолина сукцината при экспериментальной анафилаксии // Вестник Санкт- Петербургской Медицинской Академии им Мечникова-2006 -№2-с 183-184
6 Шнеур С Я , Ковтун А А , Галимская Е В Влияние производных глицина на течение экспериментальной анафилаксии // Тезисы докладов XIV Российского национального конгресса "Человек и лекарство", Москва, 2007 -с 899
7 Шнеур С Я , Шатохина Н А , Ковтун А А Влияние производных нейроаминокислот на течение анафилактического шока у кроликов // Сборник научно-практических работ «Лечебно-диагностические, морфофункцио-нальные и гуманитарные аспекты медицины - Тверь, 2007 - с 95-96
8 Шнеур С Я , Демидова М А , Ковтун А А , Галимская Е В Влияние но-опепта и мексидола на течение экспериментальных аллергических реакций//Фармация 2007 - №3 -с 33-34
9 Шнеур С Я. Способ лечения анафилактической гипоксии // Удост на рац предложение № 2729, выданное БРИЗОМ ТГМА 02 04.2007
10 Шнеур С Я Способ уменьшения выраженности анафилактического отека внутренних органов// Удост на рац предложение № 2727, выданное БРИЗОМ ТГМА 02 04 2007
11 Шнеур С Я. Способ лечения экспериментального анафилактического шока// Удост на рац предложение № 2728, выданное БРИЗОМ ТГМА 02 04 2007
Заказ 15045 Тираж ЮОэкз
Подписано в печать 17 03 2007 Объем 1 п л
Отпечатано ООО «Документ-сервис», Тверь, ул Радищева, 41/30
Оглавление диссертации Шнеур, Семен Яковлевич :: 2007 :: Тбилиси
ОГЛАВЛЕНИЕ.
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Взаимосвязь нервной и иммунной систем.
1.2. Патогенетические основы аллергии и направления современной фармакотерапии.
1.3. Препараты глицина и у- аминомасляной кислоты и возможности их использования при аллергии.
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Материалы исследования.
2.2. Методы исследования.
2.2.1. Модели экспериментальной аллергии.
Анафилактический шок у кроликов.
Системная анафилаксия у крыс и мышей.
Реакция активной кожной анафилаксии у крыс.
Моделирование анафилаксии in vitro.
Постановка реакции прямой дегрануляции базофилов.
2.2.2. Оценка антигипоксической активности производных нейроаминокислот при экспериментальной анафилаксии.
2.2.3. Определение содержания общих липидов в крови.
Определение содержания фосфолипидов с помощью метода тонкослойной хроматографии.
Определение содержания диацилглицеролов в цельной крови, макрофагах и лимфоцитах крови.
Определение содержания арахидоновой кислоты в цельной крови и лимфоцитах.
Определение содержания простагландинов в цельной крови и макрофагах
ГЛАВА 3.
ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ ТОРМОЗНЫХ НЕЙРОАМИНОКИСЛОТ НА ТЕЧЕНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ АЛЛЕРГИИ.
3.1. Влияние производных тормозных нейроаминокислот на течение анафилактического шока у кроликов.
3.2. Влияние производных тормозных нейроаминокислот на течение системной анафилаксии у крыс.
3.3. Влияние производных тормозных нейроаминокислот на выраженность реакции активной кожной анафилаксии у крыс.
3.4. Влияние производных тормозных нейроаминокислот на выраженность реакции дегрануляции базофилов.
3.5. Влияние производных тормозных нейроаминокислот на течение аллергической реакции замедленного типа у мышей.
ГЛАВА 4.
ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИГИПОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПРОИЗВОДНЫХ ТОРМОЗНЫХ НЕЙРОАМИНОКИСЛОТ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ АНАФИЛАКСИИ.
4.1. Оценка антигипоксической активности производных тормозных нейроаминокислот у интактных и сенсибилизированных животных.
4.2. Оценка антигипоксической активности производных нейроаминокислот при анафилаксии.
ГЛАВА
ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ ТОРМОЗНЫХ НЕЙРОАМИНОКИСЛОТНА СОДЕРЖАНИЕ ФОСФОИНОЗИТИДОВ И ПРОДУКТОВ ИХ МЕТАБОЛИЗМА В КРОВИ И ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТКАХ КРОВИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ АЛЛЕРГИИ.
5.1. Исследование содержания фосфоинозитидов и продуктов их метаболизма (диацилглицеролов, арахидоновой кислоты, простагландинов) в крови и иммунокомпетентных клетках крови крыс при анафилаксии.
5.2. Влияние производных тормозных нейроаминокислот на содержание фосфоинозитидов и продуктов их метаболизма в крови иммунокомпетентных клетках крови при анафилаксии.
Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Шнеур, Семен Яковлевич, автореферат
Актуальность проблемы. Совершенствование фармакотерапии аллергических заболеваний является одной из важнейших задач фармакологии (Мокро-носова М.А., 1997;. Хаитов Р.М, 2002; Гущин И.С., 1999, 2001; Адо А.Д., 1994; Гущин И.С., Ильина Н.И., Польнер С.А., 2002; Булина О.В., Горланов И.А., Калинина Н.М., 2004; Brisman et al., 1995; Heinrich et al., 1995; Stark et al., 1996). Урбанизация и химизация, появление новых аллергенов, широкое применение лекарственных средств, в том числе антибиотиков, изменение характера питания и другие причины приводят к тому, что во всем мире регистрируется рост заболеваемости аллергией (Пыцкий В.И. и соавт., 1999; Паттерсон Рой и соавт., 2000; Хаитов Р.М, 2002; Jlycc J1.B., 2002). В настоящее время в медицинской практике используют большое количество противоаллергических средств, однако они не всегда являются достаточно эффективными, поэтому изучение влияния лекарственных препаратов на течение аллергических заболеваний сохраняет свою актуальность (Ионов И.Д., 1991; Гущин И.С., 2002; Чучалин А.Г., 2000-2004; Медуницын Н.В., 2001; Хаитов P.M., Пинегин Б.В., 2003; Ковалева В.Л., 2006).
Известно, что в формировании аллергизации организма принимает участие центральная нервная система (Ковалев И.Е., Сергеев П.В., 1972; Козлов В.К., 1973; Абрамов В.В., 1988-2006; Йегер Л., 1988; Пыцкий В.И., 1991; Leslie et al., 1989). Имеются данные о том, что нарушения нормальных взаимоотношений между нейроэндокринной и иммунной системами способствуют возникновению аутоиммунных и аллергических заболеваний или определяют характер течения этих болезней (Абрамов В.В., 1996). Описано участие в аллергическом процессе ГАМК- и опиоидергических механизмов (Утешев Б.С., Ко-ростелев С.А., 1990; Gentilini et al., 1995; Djuric et al., 1995; Демидова M.A., 1997). Обращает на себя внимание и тот факт, что в процессе аллергизации организма наряду со специфическими иммунологическими изменениями развивается выраженная тканевая гипоксия (Адо А.Д., 1978, Пыцкий В.И., 1991) и происходят существенные метаболические сдвиги. В частности, наблюдается активация реакций свободнорадикального окисления на фоне понижения активности антиоксидантных систем (Кошелевский В.И., 1987, 1997; Митина Т.В., 1991; Ракита Д.Р., 1997; Демидова М.А., 1997-2006; Di Gianni, 1996 и др.). Регистрируются выраженные изменения мембранных липидов клеток-мишеней аллергического процесса (Йегер Л., 1988; Гущин И.С., 2003), в том числе фос-фоинозитидов и продуктов их метаболизма (Демидова М.А., Слюсарь Н.Н., 1997). Между тем известно, что фосфоинозитиды и их метаболиты принимают участие в реализации действия нейромедиаторов на молекулярном уровне (Долго-Сабуров В.Б., 1989; Утешев Б.С., 1992; Baraban, 1989; Calvet et al., 1995; Li, 1990; Manzoni, 1990; Sharif et al., 1996 и др.), а также в процессах активации клеток-мишеней аллергического процесса (базофилов, тучных клеток) и имму-нокомпетентных клеток (Лященко В.А.и соавт., 1988; Суслов А.П., 1990; Кар-гаполов А.В., Слюсарь Н.Н., 1992-2005; Beaven et al., 1988; Gruchalla et al., 1990). При гидролизе полифосфоинозитидов происходит образование вторичных мессенджеров диацилглицеролов и инозитолтрифосфатов. Кроме того эти липиды являются одними из поставщиков арахидоновой кислоты и эйкозанои-дов (Пыцкий В.И., 1991; Гущин И.С., 1993; Ковалева В.Л., Чучалин А.Г., 1997; Bach, 1988; Abraham et al., 1989; Chilton, 1990; Seeger et al., 1990; Gibs et al., 1996 и др.). На метаболизм мембранных фосфоинозитидов оказывают влияние различные нейромедиаторы, в том числе нейроаминокислоты и их производные (Li X.N., Song L., Jope R.S., 2000). Однако эффекты новых производных аминокислот в этом отношении изучены недостаточно. С учетом роли центральной нервной системы и метаболических нарушений в патогенезе аллергии целесообразным представляется изучение влияния нейроаминокислот и их производных на течение аллергических реакций. Известно, что многие производные нейроаминокислот наряду с центральным действием обладают рядом свойств, которые могут быть ценны для коррекции метаболических нарушений при аллергических реакциях. Так, например, ряд производных тормозных нейроаминокислот (глицина и у-аминомасляной кислоты) обладают выраженной антиок-сидантной, мембраностабилизирующей и антигипоксической активностью. 6
Существуют сведения, что глицин оказывает выраженное противогипоксиче-ское действие на моделях гистотоксической, гиперкапнической и гипобариче-ской гипоксии, причем введение фосфорилированного остатка в молекулу глицина приводит к повышению противогипоксической активности данной аминокислоты (Макарова JI.M., 2006). Результаты экспериментальных исследований показали, что новый оригинальный дипептидный препарат, содержащий глицин - ноопепт (этиловый эфир Ы-фенилацетил-1-пролилглицина) предотвращает вызванное стрессом накопление продуктов перекисного окисления липидов, снижая содержание диеновых конъюгатов и шиффовых оснований, повышает активность эндогенных антиоксидантных систем - супероксиддисмутазы, ката-лазы и церулоплазмина, обладает антитромботическим эффектом, проявляет противовоспалительный эффект на моделях острого неиммунного и хронического иммунного воспаления (Воронина Т.А., Гудашева Т.А., Островская Р.У., Воронина Т.А., Гарибова T.JL, 2004, 2006). Таким образом, известные фармакологические свойства глицина и его производных дают основания для изучения их эффектов при экспериментальных аллергических реакциях.
Работа выполнена по плану научно-исследовательской работы Тверской государственной медицинской академии (ТГМА) в рамках научного направления "Фармакология аллергии". Тема исследования утверждена на заседании ученого совета ТГМА и на заседании проблемной комиссии "Фармакология нервной системы" РАМН.
Цель работы. Исследование влияния производных нейроаминокислот на течение экспериментальных аллергических реакций (in vivo и in vitro).
Задачи исследования. Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие конкретные задачи:
• Исследовать влияние глицина, Ы-фенилацетил-1-пролилглицина, пика-милона и натрия оксибутирата на течение системной (анафилактический шок у кроликов и системная анафилаксия у крыс) и местной (реакция активной кожной анафилаксии у крыс) анафилактических реакций в эксперименте на животных.
• Оценить влияние глицина, Ы-фенилацетил-1-пролилглицина и натрия оксибутирата на развитие анафилаксии in vitro (в тесте прямой реакции дегрануляции базофилов крови кроликов).
• Исследовать влияние глицина и Ы-фенилацетил-1-пролилглицина на течение кожной аллергической реакции замедленного типа у мышей.
• Исследовать изменения содержания фосфоинозитидов и продуктов их метаболизма в крови, лимфоцитах и макрофагах крови аллергизиро-ванных животных под влиянием тормозных нейроаминокислот и их производных;
• Оценить антигипоксическую активность глицина, Ы-фенилацетил-1-пролилглицина и натрия оксибутирата при экспериментальной анафилаксии;
• Провести сравнительный анализ эффектов действия глицина, N-фенилацетил-1-пролилглицина и натрия оксибутирата при экспериментальной анафилаксии с действием глюкокортикостероидов (преднизо-лона) и кромолин-натрия.
Научная новизна работы. Впервые на различных экспериментальных моделях анафилаксии (системной, местной и in vitro) обнаружено наличие умеренной противоаллергической активности у глицина и его производного нового оригинального препарата этилового эфира Ы-фенилацетил-1-пролилглицина (ноопепта). Впервые выявлена способность глицина и его производного (но-опепта) повышать устойчивость подопытных животных к анафилактической гипоксии. Впервые показано, что глицин и Ы-фенилацетил-1-пролилглицин оказывают корригирующее влияние на метаболизм фосфоинозитидов в крови, лимфоцитах и макрофагах крови при экспериментальной анафилаксии.
Научно-практическая значимость работы. Результаты работы имеют как теоретическое, так и практическое значение. Фармакологически доказана возможность применения производных тормозных нейроаминокислот в комплексной, патогенетически обоснованной терапии аллергических заболеваний.
Выявлены изменения содержания фосфолипидов, в том числе фосфоинозити8 дов и продуктов их метаболизма, в крови, лимфоцитах и макрофагах при анафилаксии. Показана возможность фармакологической коррекции нарушений гомеостаза фосфоинозитидов при аллергических реакциях немедленного типа с помощью нейроаминокислот и их производных. Показана возможность использования препаратов с антигипоксической активностью при анафилактическом шоке для повышения устойчивости организма к анафилактической гипоксии. Результаты исследования позволяют рекомендовать Ы-фенилацетил-1-пролилглицин для расширенных доклинических испытаний в качестве противоаллергического средства.
По материалам диссертации было сделано 3 рационализаторских предложения.
Положения, выносимые на защиту:
1. Наличие противоаллергической активности у глицина и N-фенилацетил-1-пролилглицина.
2. Способность глицина и Ы-фенилацетил-1-пролилглицина восстанавливать содержание фосфоинозитидов и их метаболитов в крови и иммунокомпе-тентных клетках крови при экспериментальной анафилаксии.
3. Повышение устойчивости подопытных животных к острой гипоксии при анафилаксии под влиянием натрия оксибутирата, глицина и N-фенилацетил-1-пролилглицина.
Внедрение. Результаты исследований используются на кафедре фармации Тверской медицинской академии в учебном процессе при проведении занятий и лекций по следующим темам: "Противоаллергические средства", "Имму-нотропные средства", а также в научных исследованиях, проводимых в НИЦ Тверской государственной медицинской академии.
Апробация работы. Основные положения диссертации обсуждены на XIV Всероссийском конгрессе "Человек и лекарство", на областных научно-практических конференциях (Тверь, 2006, 2007), на расширенном заседании кафедры фармации.
Заключение диссертационного исследования на тему "Влияние производных глицина и y-аминомасляной кислоты на течение экспериментальных аллергических реакций"
1. Результаты работы позволяют рекомендовать производное нейроами-нокислоты глицина (этиловый эфир Н-фенилацетил-1-пролилглицина, ноопепт) для расширенного доклинического испытания в качестве противоаллергического средства.
2. При проведении поиска антианафилактических средств целесообразно проводить изучение веществ с антигипоксической активностью.
НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2007 года, Шнеур, Семен Яковлевич
1.Современные перспективы диагностики аллергий in vitro / А де Век // Новости науки и техники : сборник. М., 1997. - С. 25 - 26 - (Серия «Медицина»; вып.: Бронхиальная астма и другие аллергические заболевания).
2. Абрамов, В. В. Взаимодействие иммунной и нервной систем / В. В. Абрамов //Иммунология. 1988.-С. 126
3. Абрамов, В. В. Возможные принципы интеграции иммунной и нейроэндок-ринной систем / В. В. Абрамов // Иммунология. 1996. - № 1. - С. 60 - 61.
4. Абрамов, В. В. Интеграция иммунной и нервной систем / В. В. Абрамов // Иммуналогия .-1991.-С. 137
5. Абрамов, В. В. Комплексные механизмы взаимодействия иммунной и нервной систем : автореф. дис. док. мед. наук : Москва, 1991. - 26 с.
6. Абрамов, В.В. Принципы нейроиммунологии в эксперименте и клинике / В. В. Абрамов // Иммунология. 1995. - № 6. - С. 11 -15.
7. Адо, А. Д. Некоторые вопросы нервной регуляции иммунных и аллергических реакций (об отношении холиновых и антигенсвязывающих рецепторов) / А. Д. Адо // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1995. - Т. 58, № З.-С. 43
8. Адо, А. Д. Экология и аллергология / А. Д. Адо // Клиническая медицина. -1990.-Т. 65, №9.-С. 3-6.
9. Ажгихин, И. С. Биоформация и простагландины. Некоторые проблемы биофармации и фармакокинетики / И. С. Ажгихин, В. Г. Гандель //- 1972. С. 138141.
10. Александрова, А. Е. Антигипоксическая активность и механизмы действия некоторых синтетических и природных соединений / А. Е. Александрова // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2005. - Т. 68, № 5.- С. 7278.
11. Арушанян, Э. Б. Кардиоиитервалография в практике экспериментальной и клинической фармакологии / Э. Б. Арушанян // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1996. - Т. 58, N 5. - С. 74 - 78.
12. Арушанян, Э. Б. Нейрохимическая природа лекарственной психостимуляции: / Э. Б. Арушанян // Экспериментальная и клиническая фармакология. -2003.- Т. 66, № 2.- С. 72 80.
13. Создание нейроиммунокорригирующих средств актуальное направление современной фармакологии : тез. докл. конф. / IV Российский национальный конгресс "Человек и лекарство". - Москва, 1997. -245 с.
14. Влияние арахидоновой и эйкозапентаеновой кислот и эпадена на кальциевый ответ лимфоцитов / III Российский национальный конгресс "Человек и лекарство": Тезисы докладов. Москва, 1996.-С. 7.
15. Баевский, Р. М. Математический анализ изменений сердечного ритма при стрессе / Р. М. Баевский, О. Н. Кириллов, С. 3. Клецкин// 1984. - С. 112
16. Механизмы формирования клеточного ответа на внешние воздействия / И. М. Бажурина, и др. // Итоги науки и техники ВИНИТИ.-М., 1986.- С. 258
17. Базанов, Г. А. Влияние мембраноактивных соединений на аллергическую реакцию немедленного типа : автореф. дис. док. мед. наук. Купавна, 1994. - 42 с.
18. Базанов, Г. А. Способ определения шокового органа при АШ /Г. А. Базанов, М. Д. Айвазов // Рац. предл. N1201, утв. в Калининском медицинском институте 11.12.87.
19. Беклемишев, Н. Д. Поздняя фаза аллергических реакций немедленного типа / Н. Д. Беклемешев// Иммунология. 1988. -N 1.- С. 16 - 23.
20. Белозерцева, И. В./ И. В. Белозерцева, Б. В. Андреев // Журнал высшая нервная деятельность. 1997. - Т. 47, № 6.- С. 1024 - 1031.
21. Пикамилон новый цереброваскулярный и ноотропный препарат: Результаты экспериментального и клинического изучения. / Э. А. Бенедиктов и др..-Уфа: [б. и.], 1989.-с. 31-38.
22. Богдарин, Ю.А. Жирнокислотный анализ фосфолипидов / Ю. А. Богдарин, Г. А. Бояринов, J1. В. Горбунова // Лабораторное дело. 1982. - N 9. - С. 17-20.
23. Фармакокинетика дипептидного аналога пирацетама с ноотропной активностью ГВС-111 и его основных метаболитов / С. С. Бойко и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1997. - Т. 60, № 2. - С. 53 - 56.
24. Межвидовые различия фармакокинетики ноопепта./ С. С. Бойко и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2004. - Т. 67, № 1. - С. 40 -43.
25. Бугаева, Л. И. Функционально-поведенчиский профиль действия циклических аналогов ГАМК при изучении острой токсичности / Л. И. Бугаева, А. А. Спасов, В. Е. Веровский // Экспериментальная и клиническая фармакология.-2004. Т. 67, № 6. - С. 3
26. Величковский, Б. Т. Аллергические заболевания, анализ причин роста / Б. Т. Величковский // Вестник АМН СССР. 1991. - N 1. - С. 28 - 33.
27. Диссоциация антиамнестического и противогипоксического эффектов у производных N-никотиноил-ГАМК /А. Г. Вознесенский // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний : сборник. Гродно, 1991. - С. 136 - 137.
28. Вещества с ноотропным действием. Перспективы применения при старении и болезни Альцгеймера / А. Т. Воронина // Актуальные вопросы экспериментальной и клинической фармакологии: сборник.-- Смоленск , 1994. С. 28 - 30.
29. Место пикамилона среди известных ноотропных препаратов /Т. А. Воронина и др. // Результаты экспериментального и клинического изучения. Уфа, 1989.-С. 75-82.
30. Воронина, Т. А. Островская Р.У., Гудашева Т.А. Нейрохимические основы ноотропного эффекта // IV Российский национальный конгресс "Человек и лекарство" : Тезисы докладов. Москва, 1997. - С. 251.
31. Гаврилова С. А и др. . //Экспериментальная и клиническая фармакология// 2006. Т. 69, № 4-С.16 -18
32. Головенко, Н. Я. Цитохром Р-450 зависимый путь окисления арахидоновой кислоты и ее метаболитов / Н. Я. Головенко, Б. Н. Галкин // Укр. биохим. журн. 1986.-Т. 58,№2.-С. 104-116.
33. Громыхина, Н. Ю. Простагландинзависимые механизмы синтеза и действия иммунорегуляторных факторов, макрофагального и немакрофагального происхождения / Н. Ю. Громыхина, В.А. Козлов // Иммунология. 1996. - N 5. - С. 29-33.
34. О возможном пептидергическом механизме действия пирацетама / Т. А. Гу-дашева и др. . // Фармакология и научно-технический прогресс. Ташкент, 1988.-С. 100-101.
35. Пептидные аналоги пирацетама как лиганды предполагаемых ноотропных рецепторов / Т. А. Гудашева и др. // Химико-фармацевтический журнал. -1985.-№ 11.-С. 1322- 1329.
36. Гулак, П. В. Физиологические аспекты метаболизма фосфоинозитидов / П. В. Гулак//Усп. совр. биологии.- 1975.-Т. 80. Вып. 3.- №6.-С. 162- 177.
37. Гущин, И. С. Немедленная аллергия клетки / И.С. Гущин. М., 1976. -176 с
38. Гущин, И. С. Фармакологический контроль аллергии / И. С. Гущин // Врач.- 1993.-N 1.-С. 29-31.
39. Девойно, JT. В. Нейромедиаторные системы в психонейриммуномодуля-ции/ JI. В. Девойно, Р. Ю. Ильюченок//-Новосибирск, 1993.- 127 с.
40. Демидова, М. А. Влияние лекарственных препаратов на повторные аллергические реакции немедленного типа : автореф. дис. канд. мед. н. Смоленск, 1993.-24 с.
41. Джуменов, А. Б. Влияние патогенетической терапии на состояние метаболизма липидов мембран лимфоцитов при поллинозах у детей / А. Б. Джуменов, И. И. Балаболкин, Г. Ф. Гордеева // Вопросы охраны материнства и детства.- 1991.-Т. 36,№4.-С. 28-31.
42. Долго Сабуров, В. Б. Метаболизм фосфоинозитидов и нейрогуморальная регуляция / В. Б. Долго - Сабуров // Нейрохимия. - 1986. - Т. 5, № 3. - С. 306-314.
43. Долго Сабуров, В. Б. Роль мускариновых холинорецепторов в регуляции функциональной активности клеток / В. Б. Долго - Сабуров // Фармакология и токсикология. - 1989. -№ 2.-С. 100 - 105.
44. Доманский, В. Ю. Содержание фосфатидилинозитидов в крови онкологических больных / В. Ю. Доманский, А. В. Каргаполов, Н. Н. Слюсарь // Вопросы онкологии. 1990. - № 7. - С. 838 - 841.
45. Дюмаев, К. М. Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС / К. М. Дюмаев, Т. А. Воронина, JI. Д. Смирнов. Москва, 1995. - 271 с.
46. Изучение механизма гипертензивного действия FMRF-подобных пептидов / С. В. Жуковский и др. // Бюллетень Всесоюзного кардиологического научного центра АМН СССР. 1989. - № 1. - С. 45 - 48.
47. Структурно-функцио-нальный анализ пирацетама, никотинамида, 1,4-бензодиазепинов и родственных соединений / В. А.Загоревский, Р. А. Ахундов, Т. А. Воронина // Фармакология ноотропов: сборник научных трудов. М., 1989.-С. 104-112.
48. Зисельсон, А. Д. Поллиноз у детей. М.: мед., 1989. - 159 с.
49. Ионов, И. Д. Экспериментальное изучение противоаллергической активности фармакологических препаратов. М., 1986. - 20 с.
50. Йегер, JI. Клиническая аллергология и иммунология. М.: Мед., 1986. -Т. 2.-512 с.
51. Калуев, А.В. / Экспериментальная и клиническая фармакология// 1997. Том 61 №5 С. 3-7.
52. Калуев, А. В. О роли ГАМК в патогенезе тревоги и депрессии / А. В. Калуев, Д. Дж. Натт // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2004. -Т. 67, №4 с. 71-76.
53. Каргаполов, А. В. Анализ липидного состава митохондриальных и эндо-плазматических мембран с помощью проточной горизонтальной хроматографии / А. В. Каргаполов // Биохимия. 1981. - Т. 46. Вып. - С. 691 - 698.
54. Ковалев, Г. В. Ноотропные средства / Г. В. Ковалев. Волгоград, 1990. -367 с.
55. Ковалев, Г. И. Активация глутаматных рецепторов мозга как механизм психофармакологического эффекта пирацетама / Г. И. Ковалев // Медико-фарма-цевтический вестник. 1996. - № 3. - С. 49 - 52.
56. Ковалев, Г. И. Некоторые итоги и перспективы фармакологического изучения нейроактивных аминокислот и их аналогов / Г. И. Ковалев // Фармакологическое и клиническое применение нейроактивных аминокислот и их аналогов. Волгоград, 1985. - С. 11 - 20.
57. Ковалев, И. Е. Иммунотропная активность ГАМК в условиях индукции цитохрома Р-450 в печени / И. Е. Ковалев, Н. Е. Рябинина // Фармакология и токсикология. 1989.-№2.-С. 53 -55.
58. Ковалева, JI. А. Влияние веществ с ноотропной активностью на метаболические процессы в мозговой ткани в динамике черепно-мозговой травмы: ав-тореф. канд. дисс. / Ковалева JI. А. Смоленск, 1997. - 22 с.
59. Козлов, В. К. Анафилаксия и вегетативная нервная система / В. К. Козлов.-М, 1973.- 163 с.
60. Изучение иммунотропной активности у новых производных арилгетеро-алканкарбоновых кислот / О. П. Колесникова и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2006. - Т. 69, №3. - С. 47 - 49.
61. Кожемякин, JI.A. Механизмы действия препарата глутоксим/ JI.A. Кожемякин // Новая идеология сопровождения антибактериальной, противовирусной и противоопухолевой терапии: Сборник научных работ. Москва, 2003. - С.4-10.
62. Комиссаров, И. В. Психофармакологические средства как регуляторы си-наптической пластичности / И. В. Комиссаров, И. И. Абрамец // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1994. - Т. 57, № 5. - С. 45 - 50.
63. Комиссаров, И. В. Аспартат/NMDA сенсибилизирующий эффект пирацетама / И. В. Комиссаров, И. И.Абрамец, И. М. Самойлович // Доклады АН100
64. СССР. 1991. - Т. 316, № 2. - С. 501 - 503.
65. Электрофизиологические феномены головного мозга при иммунных реакциях / Е. А. Корнева и др.. Ленинград, 1989. - 126 с.
66. М рецепторная стимуляция обмена фосфоинозитидов в изолированном сердце кролика / В. И. Кочерга и др. // Фармакология и токсикология. - 1991. -Т. 54,№5.-С. 22-25.
67. Состояние перекисного окисления липидов и антоксидантная активность лимфоцитов при респираторных аллергозах у детей / В. И. Кошелевский // Иммунология и аллергия: сборник научных работ. Киев, 1987. - С. 27 - 30.
68. Особенности возрастных изменений у беспородных и Вистар крыс и фармакодинамика нооглютила / Крайнева В.А. и др. // Актуальные вопросы экспериментальной и клинической фармакологии: сборник научных работ. -Смоленск, 1994.-С. 63 -65.
69. Церебральные механизмы антигипоксического эффекта ноотропных средств / В. И. Кресюн, Я. В. Рожковский // Фармакологическая корекция ги-поксических состояний: сборник научных трудов. Гродно, 1991. - С. 213 -214.
70. Пептидергическая коррекция неврологического статуса в постгеморрагическом периоде / Я. В. Крушинская и др. // 1-й Всероссийский съезд фармакологов: тез. докл. Волгоград, 1995. - 213 с.
71. Крылова, И. Н. Нейрофармакологические свойства некоторых ноотропных средств: автореф. дис. канд. мед. наук. / Крылова И. Н. Москва, 1990. -24 с.
72. Кучеренко, Н. Е. Роль мембранных фосфоинозитидов в опосредовании гормональных эффектов / Н. Е. Кучеренко, Я. Б. Блюм // Украинский биохимический журнал.-1986.-Т. 58, № 1.-С. 86-101.
73. Кулинский, В. И. Нейропротекторный эффект антипсихотических средств при глобальной ишемии головного мозга / В. И. Кулинский, С. С. Гаврилов // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2006. - Т. 69, № 4. - С. 19 -22.
74. Лабараторные тесты выявления аллергии. Москва, 1988. - 11 с.
75. Лабораторные методы исследования в клинике / под. ред. В. В. Меньшикова. -М., 1987.-363 с.
76. Лев, Н. С. Нейропептиды и их роль в развитии аллергических заболеваний / Н. С. Лев // Вопросы охраны материнства и детства. 1989. - Т. 34, № 5. -С. 61 -65.
77. Лопатин, А. С. Лекарственный анафилактический шок / А. С. Лопатин. -М, 1983.- 158 с.
78. Антигипоксанты, подходы к их классификации, принципы применения / Л. Д. Лукьянова // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний: сборник научных трудов. Гродно, 1991. - С. 126 - 127.
79. Биоэнергетические механизмы формирования гипоксических состояний и подходы к их фармакологической коррекции / Л. Д. Лукьянова // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний: сборник научных трудов. Москва, 1989.-С. 11 - 43.
80. Луйк, А. И. Некоторые принципы классификации лекарств / А. И. Луйк, С. Е. Могилевич // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1992. -Т. 55, № 1.-С. 64-67.
81. Лященко, В. А. Механизмы активации иммунокомпетентных клеток / В. А. Лященко, В. А. Дроженников, И. М. Молотковская. М., 1988. - 237 с.
82. Влияние пирацетама и аминолона на фосфолипидный спектр печени крыс / Н. М. Мавлюдова // IV Российский национальный конгресс "Человек илекарство": тез. докл. Москва, 1997. - С. 77.
83. Макарова, JI. М. Изучение противогипоксической активности глицина и его фосфорилированного производного / JI. М. Макарова // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2006. Т. 69, № 3. - С 71 - 73.
84. Макарова, JI. М. Изучение нейропротекторного действия производного аспарагиновой кислоты при реперфузионных повреждений мозга / JI. М. Макарова, В. Е. тПогорелый //Экспериментальная и клиническая фармакология. -2004.-Т. 67, №5 С. 13-16.
85. Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов с ноотропным типом действия. Москва, 1989 .- 19 с.
86. Мирзоян, Р. С. Новый цереброваскулярный препарат пикамилон / Р. С. Мирзоян, Т. С. Ганыиина // Фармакология и токсикология. - 1989. - № 1. - С. 23 - 24.
87. Мирзоян, Р. С. Нейропротекторные и цереброваскулярные эффекты ГАМК-миметиков / Р. С. Мирзоян // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2003. - Т. 66, № 2. - С. 53 - 56
88. Молдавкин, Г. М. Анализ участия ГАМК-бензодиазепинового рецептор-ного комплекса в механизме анксиолитического эффекта пирацетама / Г. М. Молдавкин и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2006. -Т. 69, №3.-С. 7-9.
89. Влияние ГВС-111 и его метаболита цикло-Ь-пролилглицина на транскал-лозальный потенциал мозга крыс./ Г. М. Молдавкин и др. . // Обзор литератур.- 2002 .-Т. 2
90. Мокроносова, М. А. Роль лейкотриенов в патогенезе аллергических заболеваний / М. А. Мокроносова, В. А. Адо, Ю. Н. Перламутров // Иммунология. 1996. - № 1.-С. 17-19.
91. Мулик, А.Б. Иммуностимулирующий эффект ноотропов / А. Б. Мулик, Н. Г. Тихонов, М. Я. Кулаков // IV Российский национальный конгресс "Человек и лекарство": тез. док. Москва, 1997. - С. 277.
92. Некрасова, А. А. Радиоиммунологический метод раздельного определения простагландинов по сериям в крови и тканях / А. А. Некрасова, Ю. В. Левицкая, В. В Панфилов // Лабораторное дело. 1977. -№ 4. - С. 227 - 232.
93. Новиков, Д. К. Справочник по клинической иммунологии и аллергологии / Д. К. Новиков Минск, 1987. - 223 с.
94. Новиков, Д. К. Применение прямого теста дегрануляции базофилов для диагностики аллергии / Д. К.Новиков, Э. А. Доценко, Г. Я. Жаков // Лабораторное дело. 1990. - № 9. - С. 58 - 61.
95. Новиков, Д. К. Влияние натрия оксибутирата на анафилактическую и анафилактоидную реакции / Д. К. Новиков, B.C. Черемнов // Иммунология. -1983. -№ 6. -С. 59-61.
96. Остен, К.Френк Болезни, обусловленные гиперчувствительностью немедленного типа / Остен К.Френк // Внутренние болезни. Москва, 1996. - кн. 7.-С. 384-398.
97. Островская, Р. У. Влияние пирацетама на устойчивость организма к гипоксии / Р. У. Островская // Фармакология и токсикология. 1981. - Т. 44. - № 2. - С. 210 - 213.
98. Пептидные аналоги пирацетама новая группа ноотропов / Р. У. Островская и др. // Фармакология ноотропов: сборник научных трудов. - М., 1989. -С. 20 - 26.
99. Роль системы пироглутамат-пролин в механизмах обучения и памяти / Р.104
100. У. Островская и др. // Физиология и биохимия глутаматергических синапсов: сборник научных работ под ред. Мандельштам Ю. Е. М., 1989. - С. 152 - 163.
101. Перфилов, В. Н. Возможные механизмы антиангинального действия производных ГАМК / В. Н. Перфилов, И. Н. Тюренков // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2005. - Т. 68, № 5. - С. 68 - 71.
102. Перфилова, В. Н. Кардиопротекторные свойства производных ГАМК в условиях острой алкагольной интоксикации / В. Н. Перфилова //Экспериментальная и клиническая фармакология. 2006. - Т. 69, № 4. - С. 23 -27.
103. Петров, Р. В. Иммунология / Р. В. Петров. -М., 1987. 416 с.
104. Противоотечные и антиокислительные эффекты нооглютила при ишемии мозга / М. Б. Плотников и др. // Актуальные вопросы экспериментальной и клинической фармакологии: сборник научных работ. Смоленск, 1994. - С. 108 -110.
105. Поворов, Ш. В Влияние фенил-Т-бутилнитрона и нооглюцила на зону ишемического поражения мозга и память крыс / Ш. В Поворов и др. //Экспериментальная и клиническая фармакология. 2004. - Т. 67, №1. - С. 3 - 6
106. Подопригора, Г. И. Распространенность, социально-экономические последствия и факторы риска бронхиальной астмы и других аллергических заболеваний/Г. И. Подопригора//Иммунология. 1987. -№ 1.-С. 11 -15.
107. Поляков, И. В. Практическое пособие по медицинской статистике / И. В. Поляков, Н. С. Соколова Ленинград, 1975. - 150 с.
108. Пыцкий, В. И. Современное учение об аллергии / В. И. Пыцкий // Вестник отоларингологии. 1991.-№ 6.-С. 3 -10.
109. Пыцкий, В. И. Аллергические заболевания / В. И. Пыцкий, Н. В. Адриа-нова, А. В. Артомасова. М., 1991. - 366 с.
110. Райский, В. А. Психотропные средства в клинике внутренних болезней / В. А. Райский М, 1982. - 189 с.
111. Антигипоксическая активность оригинальных производных пирролидона / Рахманкулова И. X. и др. // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний: сборник научных трудов. Гродно, 1991. - С. 226 - 227.
112. Редькин, Ю. В. Противоаллергические средства / Ю. В. Редькин // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1996. - Т. 59, № 2. - С. 62 - 68.
113. Рожковский, Я. В. Механизмы антиоксидантной защиты новых БАВ-производных никотиновой кислоты в условиях гипоксии / Я. В. Рожковский // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний: сборник научных трудов. Гродно, 1991. - С. 468 - 469.
114. Особенности противогипоксического и метаболического действия мек-сидола в широком диапазоне доз: материалы 2-й международной конф./ Москва, 1996.-С. 56.
115. Особенности антигипоксического действия сукцинатсодержащих производных 3-оксипиридина / В. Е. Романова и др. // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний: сборник научных трудов. Гродно, 1991. - С. 167- 168.
116. Рэкер, Э. А. Биоэнергетические механизмы / Э. А. Рэкер// под ред. Ску-лачева В. П. М., 1979. - 217 с.
117. Сергеев П. В. Очерки биохимической фармакологи / П. В.Сергеев, П. А. Галенко Ярошевский, Н. JT. Шимановский. - М.: мед., 1996. - с. 270.
118. Сергеев, П. В. Рецепторы физиологически активных веществ / П. В. Сергеев, Н. JT. Шимановский. М.: мед., 1987. - 400 с.
119. Середенин, С. Б. Современное состояние и перспективы лекарственного лечения психических заболеваний / С. Б. Середенин, Т. А. Воронина // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1992. - № 1. - С. 4 - 9.
120. Слюсарь, Н. Н. Роль фосфоинозитидов и их метаболитов в онкогенезе: дис. докт. мед. наук. Тверь, 1992. - 286 с.
121. Слюсарь Н. Н., Дамиров М. М., Бакулева Л. П. Показатели динамики быстрых изменений фосфолипидов в изучении молекулярных механизмов развития злокачественных опухолей / Н. Н. Слюсарь, М. М. Дамиров, Л. П. Бакулева //МРЖ.- 1991.-№3.-С. 579.
122. Механизмы антигипоксического и антиишемического действия ГОМК / Г. Н. Смелянская и др. // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний: сборник научных трудов. Гродно, 1991. - С. 173.
123. Смирнов, А. В. Коррекция гипоксических и ишемических состояний с помощью антигипоксантов / А. В. Смирнов, И. В.Аксенов, К. К. Зайцева // Военно-медицинский журнал. 1992. - № 10. - С. 36 - 40.
124. Смирнов, JI. Д., Дюмаев К.М. Молекулярные механизмы действия и ак-тульные направления медико-биологического применения эмоксипина и мек-сидола / JI. Д. Смирнов, К. М. Дюмаев // Бюллетень ВНЦ БАВ. 1992. - № 1. -С. 9-13.
125. Фармакологический анализ антиамнестического действия пирацетама / А. М. Спринц и др. // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний: сборник научных трудов. Гродно, 1991.-С. 175 - 176.
126. Суслов, А. П. Макрофаги и противоопухолевый иммунитет / А. П. Суслов // Итоги науки и техники ВИНИТИ. Серия: Онкология. 1990. - Т. 19. -168 с.135. / Тонкопий В. Д и др. . // Экспериментальная и клиническая фармакология.-2005.- Т. 68, №5-С. 55 58.
127. Трофимов, С. С. Коррекция нооглютилом нарушений функций ЦНС, вызванных пренатальной алкоголизацией у крыс / С. С. Трофимов и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология, 1992.-Т. 55, № 1.-С. 18-21.
128. Трофимов, С. С. Коррекция нооглютилом и амидом Ь-пироглутамил-D-аланина когнитивных нарушений у крыс, вызванных внутриутробной гипоксией / С. С. Трофимов и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1995.-Т. 58,№5.-С. 10-13.1. А-*)
129. Утешев, Б. С. Инозитолфосфат и Са как вторичные мессенджеры / Б. С. Утешев // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1992. - № 4. - С. 69 - 74.
130. Утешев, Б. С. Влияние эндогенных опиоидных пептидов на антителоге-нез при первичном иммунном ответе на эритроциты барана / Б. С. Утешев // Фармакология и токсикология. 1988. - Т. 51, № 4. - С. 83 - 85.
131. Утешев, Б. С. Об оценке иммунотоксичности при доклиническом изучении биологически активных соединений / Б. С. Утешев, Е. В. Арзамасцев //108
132. Экспериментальная и клиническая фармакология. 1996. - Т. 59, № 3. - С. 56 -59.
133. Утешев, Б. С. Взаимодействие нейроэндокринной и иммунной систем и роль опиоидных пептидов в регуляции иммунного гомеостаза / Б. С. Утешев, С. А. Коростелев // Фармакология и фоксикология. 1990. - Т. 53, № 1. - С. 10 -16.
134. Утешев, Б. С. Иммуномодулирующее действие полинена-сыщенных фосфолипидов / Б. С. Утешев, И. JI. Ласкова // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1995. - Т. 58, № 5. - С. 49 - 53.
135. Утешев, Б. С. Иммуномодулирующее действие препаратов, обладающих мембранопротекторными свойствами, при интенсивных физических нагрузках / Б. С. Утешев, И. Л. Ласкова // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1996. - Т. 59, N 1.-С. 47-50.
136. Утешев, Б. С. Эффективность иммуномодулирующего действия эссен-циале и модифицированных им эритроцитов животных / Б. С. Утешев, И. Л. Ласкова // Экспериментальная и клиническая фармакология 1995. - Т. 58, № 6.-С. 52- 55.
137. Утешев, Б. С. Анализ современных направлений в создании иммуно-тропных средств / Б. С. Утешев, А. В. Сергеев, С. А. Коростелев // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1995. - Т. 58, N 3. - С. 3 - 7.
138. Образование полифосфоинозитидов: возможный механизм модуляции цАМФ системы мессенджера Са / А. Фараго, Д. Фаркас // 16 конференция ФЕБО: сборник научных трудов. М., 1987. - Т. 1. - С. 69 - 73.
139. Шатохина, Н.А. Влияние метаболических корректоров (препаратов янтарной кислоты, натрия сукцината и дихолина сукцината) на течение экспериментальных аллергических реакций: автореф. дис. канд. мед. н. Купавна, 2006. -24 с.
140. Финдель, Д. Б. Биологические мембраны / Д. Б. Финдель, У. Г. Увандс. -М., 1990.-424 с.
141. Фонталин, Л. Н. Ареактивность к поликлональной стимуляции сальмоза109ном после его повторного введения / Л. Н. Фонталин и др. // Микробиология. -1983.- № 10.-С. 68-71.
142. Фрейдлин, Н. С. Активация макрофагов под влиянием синтетического антиоксиданта / Н. С. Фрейдлин и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1988. - № 1. - С. 58 - 60.
143. Фримель, Г. Иммунологические методы / Г. Фримель. М., 1987. - С. 354-366.
144. Изменение содержания инозитолфосфатов в крови нейрохирургических больных / А. П. Хохлов и др. // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний: сборник научных трудов. Гродно, 1991. - С. 345 - 346.
145. Четвериков, Г. Н. Использование лекарственных средств в лечении аллергических реакций немедленного типа / Г. Н. Четвериков. М., 1987. - 76 с.
146. Четвериков, Г. Н. Основные принципы фармакологического воздействия на реакции немедленной аллергии / Г. Н. Четвериков // Фармакология и токсикология. 1987. - Т. 50. - № 4. - С. 78 - 87.
147. Фармакологический анализ немедленной аллергии / Г. Н. Четвериков // Аллергические реакции в эксперименте и клинике: сборник научных работ. -Москва, 1986.-С. 1-6.
148. Четвериков, Г. Н. Фармакологическая коррекция повторных аллергических реакций немедленного типа / Г. Н. Четвериков и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1992. - № 4. - С. 49.
149. Шабалин, В. Н. Клиническая иммуногематология / В. Н. Шабалин, JI. Д. Серова// Ленинград М., 1988.-312 с.
150. Яснецов, В. В. Регуляторные пептиды и процессы обучения и памяти / В. В. Яснецов // Авиакосмическая гипербарическая медицина и биология. М., 1993.-№ 1.-С.З-40.
151. Яснецов В. В. Фармакотерапия отека головного мозга / В. В. Яснецов, В. Е. Новиков М., 1994. - 169 с.
152. Abdel-Latif A.A. Metabolism of phosphoinositides // Handbook of neuro-chemistry.- New-York, 1983. V.3. - P.91-131.
153. Abracham W.M. The role of leukotrienes in allergen-induced late responses in allergic sheep // Ann.N.Y.Acad.Sci. 1988. - V.524. - P.260-270.
154. Adams D.O. Molecular interaction in macrofage activation // Immunol Today. 1989.-V. 10.-N2.- P. 33-35.
155. Atkinson T.P., Kaliner M.A., Hohman R.J. Phospholipase C-gamma 1 is translocated to the membrane of rat basophilic leukemia cells in response to aggregation of IgE receptors // J.Immunol. 1992. - V.148.- N.7. - P.2194-2200.
156. Atkinson T.P., Lee C.W., Rhee S.G., Hohman R.J. Orthovanadate induces translokation of phosholipase C-gamma 1 and -gamma 2 in permeabilized mast cells //J.Immunol. 1993. - V.151. -N.3. - P.1448-1455.
157. Auger K.R., Serunian L.A., Soltoff S.P. et al. PDGF-dependent tyrosine phosphorylation stimulates production of novel poliphosphoinositides in intact cells // Cell. 1989.-V.57.-N1.-P. 167-175.
158. Bach M.K. Lipid mediators of hypersensitivity // Prog.Allergy. 1988. - V.44. -P. 10-98.
159. Baraban J.M. Second messenger systems and psychoactive grug action: focus on the phosphoinositide system and lithium // Am. J. Psychiatry. 1989. - V.146. -N10.-P. 1251-1260.
160. Beaven M.A., Cunha-Melo J.R. Membrane phosphoinositide-activated signals in mast cells and basophils // Prog. Allergy. 1988. - V.42.- P. 123-184.
161. Beaven M.A., Maeyama K. Wolde Mussie E. et al. Mechanism of signal transduction in mast cells and basophils: studies with RBL-2H3 cells // Agents and Actions. 1987. - V.20. - N3-4. - P.137-145.
162. Bell R.M. Protein kinase С activation by diacylglycerol second messengers // Cell. 1986. - V.45. - N 5. - P. 631-632.
163. Bell R.M., Burnes D.J. Lipid activation of protein kinase С // J. of Biol. Chem111istry. 1991. - V.266. - N8. - P. 4661 -4664.
164. Berridge M.J. A novels cellular signaling system based on the integration of phospholipid and calcium metabolism. -Calcium and cell function / Ed. W. J. Cheung. N. I. 1983. - N3. - P. 1-36.
165. Berridge M.J. Inositol phosphates and diacylglycerole: two interacting second messengers // Ann. Rev. Biochem. 1987. - V.56. - N 2. - P. 159-193.
166. Bismuth G., Trautman A., Debre P. Calcium et activation lymphocytaire T // M/S: Med. Sci. 1990. - V.6. - N8. - P. 762-769.
167. Bormann B.L., Huang C.K., Mackin W.M., Becker E.L. Receptor-mediated activation of phospholipase A2 in rabbit neutrophil plasma membrane // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1984. - V.81. -N3. - P. 767-770.
168. Brisman J., Jarvholm В., Scand J. Occurence of self-reported asthma among Swedish bakers // Enveron. and Health. 1995. - V.21.- N 6. - P.487-493.
169. Burdess G.M., Mc Kinney J.S., Irvine R.F. et al. Inositol 1,4,5-tri-phosphate may a signal for f-met-leu-phe-induced intracellular Ca mobilisation in human leucocytes (HL-60 cells)//FEBS Lett. 1984.-V.176.-N1.-P. 193-196.
170. Cadette D.C. Effect of albumin-bound DNA on phosphoinositide phosphorylation in collagen stimulated human platelets // Thromb. Res.- 1990. V.58. -N4. - P. 435-444.
171. Carpenter C.L., Duskworth B.G., Auger K.R. et al. Purification and characterization of phosphoinositide-3 kinase from rat liver // J. Biol. Chem. 1990. -V.265. - N32. - P. 19704-19711.
172. Castagna M., Martelly I. Role de la proteine kinase С dans les regulations cel-lulaires et la promotion tumorale // Bull. Cancer. 1990. - V.77. - N5. - P. 489-494.
173. Chandler D.B., Fumber J.D. Prostaglandin synthesis and relese by subpopula-tion of rat alveolar macrophager // J. Immunol. 1987. - V.139.-N3. - P. 893-898.
174. Chartman R.W., Hey J.A., Rizzo C.A., Bolser D.C. GABAB receptors inthe lung//Trends. Pharmacol. Sci. 1993. - V.14. -N.l - P.26-29.
175. Chen C.K., Silverstein. Perinatal hypoxic-ishemic brain injury en-hances quis-qualic acid-stimulated turnover// J. Neurochem.- 1988.- V.51. -N.2. P.353-359.
176. Chi E., Henderson W., Klobanoff S. Phospholipase A2-induced mast cell secretion. Role of arachidonic acid metabolites // Lab. Invest. 1982. - V.47. - N 6. - P. 579-585.
177. Chilton F.N., Lichtenstein L.M. Lipid mediators of allergic reaction // Chem. Immunol. 1990.- V.49. - P. 173-205.
178. Cochet C., Filhol., Payraste B. et al. Interaction between the epidermal growth factor receptor and phosphoinositide kinases // J. Biol. Chem. 1991. - V.266. - N1. -P. 637-644.
179. Coleman I. Allergic reaction to drugs: curreny concepts and problems // Clin. Exp. Allergy. 1990. - V.20. - N1. - P.79-85.
180. Daniel J., Dangelmaie C., Selar M. ADP stimulates IP3 formation in human platelets // FEBS Lett. 1986. - V.206. - N2. - P. 299-303.
181. Dawson R.M.C., Gould R.M. Renewal of phospholipids in the myelin sheath // Func. and metabol. phospholipids Cent, and peripheral NerV. syst. 1976. - P. 96113.
182. Deenen L.L.M., Haas G.H. Phospoglycerides and phosholipases // Ann. Rev. Biochem. 1966. - V.35. - P. 157-194.
183. Djuric VJ., Wang L., Bienenstock J., Perdue MN. Naloxone exacerbates intestinal and systemic anaphylaxis in the rat // Brain-Behav-Immun.-1992. N.9. - P. 87100.
184. Dobson P.R., Skjodt H., Plested C.P. et al. Interleukin-1-stimulated diglyc-eride accimulation in the absence of protein kinase С activation // Regul. Peptides. -1990. V.29. - N2-3. - P. 109-116.
185. Drews J. Immunopharmacology: principles and perspectives.-Springer Verlag Berlin, 1990.-355 p.
186. Dygas A., Zborowski j., Wgtezak L. Decarboxylation of phospha-tidylserine by rat liver mitochondria // Acta Biochim. pol. 1980.- V.27. - P. 153-161.
187. Emilsson A., Sundler R. Differential activation of phospha-tidylinositol deace-tylation and a pathway via diphosphoinositide in macrophages responding to zymosan and ionophore A23187 // J. Biol. Chem. 1984. - V.259. - N5. - P.3111 -3116.
188. Emilsson A., Wijkandrf J., Sundler K. Diacylglycerol induces deacylation of phosphatidylinositol and mobilisation of arachidic acid in mouse macrophages // Bio-chem. J. 1986. - V.239. - N3. - P. 685-690.
189. Fain J.N., Berridge M.J. Relationship between hormonal activation of phos-phatidilinositol hydrolisis, fluid secretion and calcium flux in the blowly salivary gland // Biochem. J. 1979. - V. 178. - N1. - P. 45-58.
190. Fisher S.K., AgranoffB.W. Receptor activation and inositol lipid hydrolysis in neural tissues // J. Neurochem. 1987. - V.48. - N4. - P. 999-1017.
191. Fisher S.K., Vankooijen L., AgranoffB.W. Renewed interect in the poliphos-phoinositides // Trends Biochem. Sci., 1984. V.9. - N2. - P. 53-56.
192. Fukami K. Quantitative changes in polyphosphoinositides 1,2-diacylglycerol and inositol 1,4,5-triphosphate by plated derived growth factor and prostaglandin F2u // J. Biol. Chem. 1989. - V.264.- N25. - P. 14985-14989.
193. Gell P.G., Coombs R.R., Lachmann P.I. Clinical aspects of immunology.- Oxford: Blackwell Sci. Publ, 1975. P. 762.
194. Gentilini G., Franchi-Micheli S., Mugnai S. et al. GABA-mediated inhibition of the anaphylactic response in the guinea-pig trachea // Br-J. Pharmacol. 1995. -N.3. - P. 389-394.
195. Ghalayini A.J., Anderson R.E. Light adaptation of bovine retinas in citu stimulates phosphatidylinositol synthesis in rod outer segments in vitro // Curr. Eye. Res. -1995.-V.14.-N11.-P. 1025-1029.
196. Gibbs B.F., Amon U. Zitokine, Mastzellen und Basophile. Ein Beitrag zur114
197. Pathogenese allergischerErkrankungen //Focus. 1996. - V.13. -Nl.- P. 19-24.
198. Goodwin J.S., Ceuippens J. Regulation of the immune response by prostaglandins//J. Clin. Immunol. 1983. - V.13. - P. 295-302.
199. Hartmann H., Cohen S.A., Muller W.E. Effects of subchronic admi-nistration of pyritinol on receptor deficits and phosphatidylinositol metabolism in the brain of the aged mouse //Neuropharmacology. 1993. - V.32. - N 2. - P. 119-125.
200. Hawthorne J.N., White D.A. Myo-inositol lipids // Vitam. and Horm.- 1975. -N33. P. 529-573.
201. Huang H.M., Gibson G.E. Phosphatidylinositol metabolism during in vitro hypoxia // J. Neurochem. 1989. - V.52. - N 3.- P. 830-835.
202. Irvine R.F. Inositol phosphate in signal transduction // Biol. Chem. Hoppe -Seyler. 1986. - V.367. - N11. - P.l 106-1116.
203. Ishida Y., Chused T.M., Muracami S., Abe R. Antigen-specific cell conjugate formation and long-lasting calcium responses in recognition of Mis cellular superan-tigen by cloned murine T lymphocytes // Cell. Immunol. 1994. - V. 155. - N 2. - P. 414-427.
204. Jocelyne E., Francoise G. Possible role of an AMP-dependent phosphorylation in the calcium release mediated by inositol 1,4,5-triphosphate in human platelet membrane vesicles // Biochim. Biophys. Acta 1987. - V.18.- N1. - P.76-82.
205. Kates M. Texchigues of lipidology Amsterdam Elsevier Sci. Publ., 1986. -464 P.
206. Kikkava U., Nishizuka I. Inositol phospholipid turnover and protein kinase С in stimulus response coupling // Biochem. Soc. Trans. -1987. V.15. - N6. - P. 122125.
207. Kikkava U., Nishizuka I. The role of protein kinase С in transmembrane signaling//Ann. Rev. Cell. Biol. -1986.- V.2.- P.149-178.
208. Kiss Z. Possible phospholipid precupsor for phosphatidylserine in rat heart //1. Lipid Res. 1975.- V.3. - P.l.
209. Ко vacs K.A., Kavanagh T.J., Costa L.G. Ethanol inhibits muscarinic receptor stimulated phosphoinositide metabolism and calcium mobilization in rat primary cor115tical cultures // Neurochem. Res. 1995.-V.20. - N.8. - P. 939-949.
210. Kuriyama K., Hirouchi M. Structure and function of gamma-aminobutyric acid receptor: current state and prospectives // Nippon.Yakurigaku. Zasshi. 1989. -V.94.-N 1.-P.7-15.
211. Kuriyama K., Hirouchi M., Nakayasu H. Structure and function of cerebral GAB A A and GABAB receptors // Neuroschi. Res. 1993. - V. 17. - N2.- P. 91-99.
212. Kurosaea M., Okayama Y., Kobayashi S. Inhibitory effect of adenine nucleotides and antiallergic drags on phoshporilation of phospha-tidylinositol in rat mast cell granules//Allergy. 1989. - V.44. -N.8.- P.576-581.
213. Langlois D., Saez J.M., Begeot M. Effects of angeotensin on inositol phosphate accumulation and calcium influx in bovine adrenal and Y-l tumor adrenal cells // Endocrine Res. 1990. - V. 16. - N1. - P.31 -49.
214. Lapetina E.G. Metabolism of inositides and activation of platelets // Life sci. -1983. V.32. - N18. - P. 2069-2082.
215. Laychock S.G. Prostaglandin E2 inhibits phosphoinositide metabolism in isolated pancreatic islets // Biochem. J. 1989. - V.260.- N1. - P.291-294.
216. Leslie C.A., Mathe A.A. Modification of guinea pig lung anaphylaxis by central nervous system (CNS) perturbations // J. Allergy. Clin.Immunol. 1989. - V.83. -N.l. - P.94-101.
217. Leukotriens and other lipoxygenase products // Ed. Sanmelsson B. et al.- New York: Raven Press.- 1982. P. 365.
218. Li X.N., Song L., Jope R.S. Modulation of phosphoinositide metabo-lism in rat brain slices by excilatory amino acids, arachidonic acid and GABA // Neurochem Res. 1990. - V.15. - N.7. - P.725-738.
219. Low M.G., Finean J.B. Specific release of plasma membrane enzymes by a phosphatidylinositol-specific phospholipase С // Biochim. Biophys. Acta 1978. -V.508. - N3. - P.565-570.
220. Maurer D., Stingl G. Mechanismen der IgE-vermittelten Ubere- mpfindlichkeit // Hautnah Dermatol.- 1995. V. 11. - N 2. - P.216-217.
221. Meyer Т., Stryer L. Molecular model for receptor stimulated calcium spiking // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1988. - V.85. - N14. - P.5051.-5055.
222. Michell R.N. Recent advances in inositol lipid metabolism // Res. News FIRST. 1988,-N.3.-P. 16-17.
223. Murakami K., Whiteley M.K., Routtenberg A. Regulation of protein kinase С activity of Zn2+ and Ca2+ //J. Biol. Chem. 1987. - V.262.- P. 13902-13906.
224. Nigg E.A. Mechanisms of signal tranduction to the cell nucleus // Advance in cancer research. 1990. - V.55. - P. 271-310.
225. Ninnemann J.L. Prostaglandins and immunity // Immunol. Today. -1984. -V.9.-N6.- P. 170-173.
226. Ninomiya H., Taniguchi T. Phosphoinositide breakdown in rat hyppocampal slices: sensitivity to glutamate induced by in vitro anoxia // J. Neurochem. 1990. -V.55. - N3.- P. 1001-1007.
227. Patel K.V., Schrey M.P. Activation of inositol phospholipid signalling and Ca efflux in human breast cancer cells by bombesin // Cancer. Res. 1990. - V.50. - N2. - P.235-239.
228. Presky D.N., Low M.S. Role of phosphatidylinositol-anchored proteins in T-cells activation // J. Immunol. 1990. - V.144. - N.3. - P.860-868.
229. Puente Fraga J.C., Lorenz Aparicio P., Senar S. et al. Hexachlorocyclohex-anes affect the arachidonic acid releas from phosphatidilinositol but not from phospholipid classes in tubular cell cultures // Biosci. Rep. 1995. - V.15. - N4. - P. 191199.
230. Putney J.W. The role of phosphoinositide metabolism in signal trunsduction in117secretory cells // J. Experim. Biol. 1988. - V. 139. - P.l35-150.
231. Rasmussen H. The calcium messenger system // New Eng. J. Med. 1986. -V.314. - N17. - P.1094-1101.
232. Roifman C.M., Wang G. Receptor-mediated activation of human В lymphocytes in a nonphosphotyrosine-dependent manner // J. Immunol.- 1992. V.149. -N.4.- P.l 179-1184.
233. Scharenberg A.M., Kinet J.P. Initial events in Fc epsilon RI signal transduction // J. Allergy Clin. Immunol. 1994. - V.96. - N.6. - P.l 142-1146.
234. Seeger W., Grimminger F. The role of arachidonic acid metabolites in the pathogenesis of bronchial asthma // Verth. Dtsch. Ges. Inn. Med.- 1990.-V.96.-P.685-693.
235. Takenava Т., Ishitoya J., Nagal Y. Inhibitory effect of prostaglandin E, Forskol and dibutyryl AMP on arachidonic acid release and inositol phospholipid metabolism in guineapid neutrophils//!. Biol. Chem.-1986.-v.261.-P. 1092-1098.
236. Tilly B.C., Lambrechts A.C., Tertoolen L.C. Regulation of phosphoinositide hydrolysis induced by histamine and guanine nucleotids in human Hela carcinoma cells//FEBS Letl. -1990.- V.265.-N1-2.- P.80-84.
237. Wang P., Toyoshima S., Osawa T. Roles of phospholipase С and GTR-binding proteins in lymphocytes activation// J. Pharmocobio-Dyn. -1990.- V.13.- N5.- P. 105110.