Автореферат и диссертация по медицине (14.00.17) на тему:Тромбоцитоактивные свойства почек в норме и при активации перекисного окисления липидов

' '] ! 1 , О

^ 1 ч] .

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УССР ЛЬВОВСКИЙ ОРДЕНА ДРУКШ НАРОДОВ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ

На правах рукописи

МИЩЕНКО ИГОРЬ ВИТАЛЬЕВИЧ

УДК 612.461.239

ТРОМБОВДТОАКТИВНЫЕ СВОЙСТВА ПОЧЕК В НОРМЕ И ПРИ АКТИВАШ ПЕ-РЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИЩДОВ

14.00.17 - нормальная физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских

наук

Львов - 1990

Работа выполнена в Полтавском государственной медицинском стоматологическом институте ..

Научны® руководитель: доктор медицинских наук,профессор И.С.Расин

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,профессор В.А.Монастырский доктор медицинских наук,профессор К.В.Кованов

Ведущая организация: Всесоюзный гематологический научный центр ЫЗ СССР.

Защита диссертации состоится"1-1 ^-СС^ 1990 г. в часов на заседании специализированного охвата. К 088.21.02 во Львовском органа Дружбы Народов государственном медицинском институте /290010,гЛьвов,ул.Пекарская,69/.

С диссертацией мохно ознакомиться в наукой библиотеке Львовского ордена Дружбы Народов государственного медицинского института/290000,г.Львов,уж.17 Вересня.б/.

Автореферат разослан"!^..". Си^ЫЛ 1990 г#

Учёный секретарь специализированного

совета д.м.н.А.ДЛуцик

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ / Актуальность проблем ы.Среди заболеваний^ которые сталкивается терапевт широкого профиля,немалый удельный вес составляют болезни почек.Кроме того,многие системные заболевания начинаются с поранения почек,в результате чего клиническая картина таких заболеваний может стать менее выразительной /Н.А.Мухика.И.Е. Тареева,1985/.

Сановная функциональная способность почея всецело направлена на обеспечение постоянства внутренней среды организма,в тем числе и его ноагуляционного механизма/А.Я.ЯроЕезски2,Е.,К.гаворон-кова, 1972/.Если основные внутрипочечние процессы изучены достаточно подробно,то вопросы регуляции гемостаткческой функции почек ещё далеки от своего разрешения,несмотря на целый ряд работ в этом на-правлении/Б.К.Кузкик,Я.К.Калихмлн,1969;А.Я-ЯроЕеБСКИй,Е.К.5лворг)Н-кова, 1969,Х972;В.В.Жила,1980;В.В.гила,Ю.И.Кушш1рук,13ВЗ;Б. А.Монастырский и сотрудники.1985-1988 и др./.Особенно это касается реакций мнкроциркуляторного гемостаза.При" поражении почек в кровеносных сосудах начинаются реакции мнкросвёртывания.со всеми вытекающими отсюда последствиями отложением фибрина,развитием конкре-ментов/В.В.Еила и со авторы,1986/, нарушением физиологической вку-трипочечной еткрогемоданамики/Ю.И.Удовицкий,1985/ и другими.В реакциях такого кякросвёртыванкя существенное значение придаётся форменном элементам х:рови и,прежде всего,тромбоцитам,благодаря их ад~ гезивно-агрегационным свойствам.Последние во многом определяют па-чало тем процессам,которые приводят к микроциркуляторным нарушениям в различных тканях и органах,в том числе и в тканях почок.Однако сведения о возможности таких процессов в почках крайне скудны и противоречивы.

Так,если Hugues et al. /1970/считагт,что базальше мембраны почечных гломерул и канальцев способствует адгезии и агрегации тромбоцитов, выполняя важную роль на ранних этапах троибообразот-ния в почках,то. Huaag T. et al. /1974/,гзучая эти же мембраны почек показали,что они не вызывает агрегации тромбоцитов.Вместе с тем установлено,что другие продукты жизнедеятельности почек,например,ренин усиливают агрегационныа свойства тромбоцитов/В .Я. Радио-нов, 1974/.В последние же годы показрло.что почки синтезируют трои-боцит-активируотиЯ фактор/schlondorff D. et al.,193éjWelsnaa 3.et al.,i986}Kowaguohl,i986/,B результате действия которого может возникать локальная агрегация тромбсцитов.Этот же фактор влияет я на синтез простаглаядинов в почках/schlcndorfî D.et &1., 133 е-; -si -do 0., 1937 /.Простаглашшны,вырабатываемые печкамн достаточно хорошо изучены/Lee J.et ia.,lS67j'.iiller U.ct al.,193l;Kîkiwul г . •t.al.,198^.Известно,что некоторые яз нга/иростаЕИЕгггн.Е^.Бз/га-

ляются ингибиторами реакции агрегации тромбоцитов.Наиболее мощным в этом отношении среди них является простациклин и его аналоги,активность которых зависит от реакций перекисного окисления липвдов и антиоксиданткой обеспеченности организма.В частности, это особенно характерно для простациклина вырабатываемого в сосудах мозга, сердца,тканях пародонта/В.П.Мищенко и сотрудники,1985-1989/.Усиление же реакций перекисного окисления липкдов приводит к повреждению и даже разрушению структур различных тканей, в том числе и почек/СатеПп Ь.е'Ь а1. ,19В8 /.

Можно полагать,что почки,синтезируя простагланданы,способствуют уменьшению тромбоцитоактивных свойств крови.Однако,в случае активации свободнорадккальных процессов в организме,в тканях почек можно ожидать изменения тромбоцитоактивных свойств.В литературе практически отсутствуют данные о тромбоцитоактивных свойствах тканей почек,их связи с перекисным окислением лилидов и активностью антиоксидантной системы в норме.Нет' сведений об изменении этих показателей почек при активации перекисного окисления липидов.Ещё мало известны пути управления синтезом этих веществ в почках.

Цель и задачи исследован и я.В связи с вышеизложенным,мы поставили перед собой цель изучить тромбоштоак-тивные свойства тканей почек различных лабораторных животных в норме и выяснить их взаимоотношение с процессами перекисного окисления липвдов,антиоксидантной и свёртывающей системой крови при активации свободнорадакальных процессов в организме.

Исходя из этой цели перед нами были поставлены следующие задачи: 1.Изучить особенности тромбоцитоактивных,свободнорадикальных в антиоксидантных свойств тканей почек и процесса свёртывания крови у различных лабораторных животных,

2.Установить влияние различных экспериментальных состояний у животных,сопровождающихся нарушением процесса перекисного окисления лилидов,антиоксидантной обеспеченностью организма и свёртывания крови на тромбоцитоактивные свойства ткани почек.

3.Изучить влияние фармакологического/введение автиоксвдан-тов/ и немедикаментозного /дозированная физическая нагрузка/ путей управления тромбоцитоактивными свойствами тканей почек у животных при активации перекисного окисления лилидов. .

Научная н о в и з н а. Впервые получены данные об особенностях тромбоцитоактивных свойств тканей почек различных лабораторных животных,их связи с процессами перекисного окисления ли-садов,антиоксидантной обеспеченностью организма и геыокоагулирую-вей функцией крови.Установлено, например, что у кроликов наиболее

зыразены реакции перекисного окисления липидов, снижены антиоксидан-:ные свойства тканей почки и крови,повышена свёртываемость крови и угнетён фибринолиз.У них же и наиболее высокая антиагрегационная цстивность тканей почек,что несомненно является важной защитной реакцией этих органов от возможного внутрисосудистого свёртывания грови.

Впервые обнаружено,что при различных путях активации паре-шсного окисления лшшдов /фтористая интоксикация,безантиоксидант-зая диета,эмоционально-болевой стресс .гиподинамические условия,вдыхание табачного дыма/ у различных лабораторных жотютных/крыс, морских свинок,кроликов/ тромбоцитоактивные свойства тканей почек повышались.

Показана возможность восстановления тромб о цатоактивных свойств тканей почек не только фармакологическими/введение комп-аекса антиоксидантов/,но и немедикаментозными /дозированной физической нагрузкой/ путями.

Практическая ценность работы заключается в том,что на основании полученных данных о зависимости тромбоцитоактивных свойств тканей почек от реакций свободноради-кального окисления лшшдов, антиоксидантной обеспеченности организма и свёртывания крови можно более целенаправленно к дифференцировано подходить к решению профилактических и лечебных мероприятий, направленных на предупреждение развития внутрисосудистого свёртывания крови в самих почках и за их пределами при различных заболеваниях почек и других органов.Кроме того эти данные позволяют вести профилактику и возможных кровотечений из почек,особенно связанных о нарушением функциональных свойств тромбоцитов.Такой подход во время лечения позволит более адекватно подбирать комплекс препаратов, влияющих не только на тонус кровеносных сосудов почек /и в целой системы кровообращения/,но и на их участие в реакциях микрошгр-куляторного гемостаза и свёртывания крови.Йолученные данные могут служить в определённой степени основой для выработки противопоказаний или показаний к занятиям физической нагрузкой,особенно при заболеваниях почек,связанных с процессами,нарушаищамя структуру их кровеносных сосудов.

Наконец,особенности троибоцитоактивных свойств почек у различных лабораторных животных могут быть учтены при экспериментальном моделировании заболеваний почек,для более адекватной оценки их участия в генеэе этих заболеваний.

Результаты работы внедрены в нефрологическом отделении об-

ластной клинической больница г горбольницы JI2 г.Полтавы.Часть полученных данных внедрена в учебном процессе на кафедрах' нормально! физиологии /при чтения лекций по разделу "Физиология крови","Физи< логия ввделения"/,терапии 161 /при чтении лекций по теме "Болезни почак"Л1олтавского медицинского стоматологического института;на к федре нормальной физиологии Читинского медицинского института;на кафедре урологии Днепропетровского медицинского института.

На з а щ и т у выносятся следующие по л о ж е н и я:

1.Тромбоцитоактивные свойства почек различных животных нео динаковы,зависят от уровня перекисного окисления липвдов.антиокси дантной обеспеченности организма.

2.При активации свободнорадикалышх процессов в организме тромбоцитоактивные свойства тканей почек повышаются.

3.Аятиоксзданты и дозированная адаптируемая физическая наг рузка нормализуют тромбоцитоактивные свойства почек при активации перекисного окисления липидов.

Апробация диссертаци и.Материалы диссе1 тации долояены на областных научно-практических конференциях Полтавского облздравотдела и медицинского института/Полтава, 1986 1968/,УН Всесоюзной конференции по физиологии почек и водно-соле вому обмену/Чернигов,I985/;XII Республиканском' съезде Украинскогс физиологического общества им.И.П.Павлова/Львов,198б/;2-ой Всесою; ной конференции "Биоаятиоксидант"/Черноголовка,1986/;Всесоюзной конференции "Актуальные проблемы гемостаза в клинической практике/Москва, 1987/.

Публика ци к.По теме диссертации опубликовано 9 на иых работ.

Объём работы. Диссертация является фрагментом комплексной темы/государственный регистрационный MOI.86.0042321/"Изучить в з сперименте и клинике влияние физиологически активных веществ ант ксидантного действия на процессы адаптации и развитие хроническо возрастной патологии и разработать рекомендации по их применению как средств фармпрофилактики",входящей во Всесоюзную отраслевую научно-техническую программу в области медицины С.07 "Продление жизни" и "Биоантиоксидант".

¡¿атериаяы диссертации изложены на 147 страницах мяшнопис Работа иллюстрирована 42 таблицами и 8 рисунками.

Указатель литературы содержит 115 отечественных и 191 инс транкых работ.

- 5 -

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДУ ИССЛЕДОВАНИЙ

Для решения поставленных задач нами быки проведены экспериментальные исследования контрольных и опытных серий на 250 крысах, 28 морских свинках и 50 кроликах,а также осуществлены наблюдения на людях, занимащихся/25/ и незашц.1ашихся/20/ оздоровительным бегом.

Кровь для исследований у крыс и морских свинок забирала/на фоне гексеклового наркоза/ шприцем из сердца,у кроликоз - из какг>-лирочанной сонной артерии,у людей - из локтевой веки через сухую иглу без шприца свободным током в пробирки.В дальнейшем кровь смешивали с цитратом натрия/3,8% раствор/ в соотношении 9:1 и центрифугировали при 1500 об/мин в течение 10 кинут для получения трсмбоцпт-kü2 л 3000 об/шн в течение 30 минут - бестромбохштной длапмы.Дяя определения продуктоз деградации фибриногена к фибрина и фибрин-мономерных комплексов кровь смешивали в силякониравакной пробирке с .охлаждённой цитратно-Е-аминокапрокзвой смесью в отношении 9:1.

У людей забирали такке мочу для исследований коагулологичес-ких,тромбоцитоактивных и свободнорадакальных свойств.

Почки у животных получали и исследозали сразу ге после эксперимента.

При проведении исследований определяли метода,характеризующие: тромбоцигоактивнне свойства тканей почек /по степени торможения или активации агрегации тромбоцитов Moneada S, ,1978,в модификации К.М.Лакина,В.11.Балуды,1980,1981/;агрвгатное состояние кроьк ао уровню агрегации тромбоцитов/В.Л.Люсов и соавторы, 1972/,временя рекальцификации плазмц/Bergerbof Н. ,Rota L, ,1954/,тромбиновому времени/.Szirmai Е. ,1957/,антитромбину Ш/неавеп A.,Loeliger Е, 1963/,концентрации фибриногена/Р.А.Рутберг, 1961/.фибриногену В/сии-а1ле Н.,Ьуопв А,1948/,протаминсульфатному/11р1ввМ. B.Worowski ,1968/,) этаколозому тесту/Godal Н.,Abildgearä TJ. ,1966/,лизису эуглобули-нов/xowarzyk H.,Buluk К. , 1954/,содержанию продуктов деградации фибриногена и фибрина/ Tíwmttiga L. .OueBt М. ,1967/; свободноради-кальное окисление липидов и состояние антиоксидантной обеспеченности организма по кинетике накопления малонового диальдегида/Й. А .Владимиров, А.И.Арчаков, 1972/,пере кисной резистентности эритроцитов / Jager У. ,1968/,активности супероксидяисмутазц/н18га H.,rridovlch. 1972;0.С.Брусов и соавторы,1976/, глутатяона и его фракций/Л.Я.Пет-рунькнна,1961/,ликгвальному тесту/О.Н.Воскресенский и сотрудкягкг, 1930/.

С целью изучения влияния процессов переписного окисления лилидов на тромбоцитоактавкыа свойства тканей почек у животных юс-

производили синдром пероксидации содержанием их в течение ста дней на полунатуральном безантиоксидантном рационе .включающем жир с низким уровнем токоферола/0.Н.Воскресеяский,В.В.Витт,1971/.0пнтной группе животных,кроме того,давали с пищей препарат /в дозе 80 мг на кг массы тела/,представляющий собой комплекс,разработанный сотрудниками кафедры фармакологии Полтавского медицинского стоматологического института и включающий известные липидные и водорастворимые антиок-евданты и порошок жень-шаня.

Фтористую интоксикацию вызывали введением животным в ежедневный рацион в течение 30 дней фторвда натрия из расчёта 10 мг на кг массы.

• Острый эмоционально-болевой стресс ожидания вызывали по Оев1-йегеЪо /1970/в специальной камере,через пол которой животные получали электроболевые удары.В камере на полу расположены две решётчатые платформы: малая и большая.Периодически,без определённых временных интервалов,на решётчатый пол платформы,попеременно,то на малую, то на большую,подавали ток 4т-б ка,до тех пор пока животные не перебирались ка платформу,где болевой раздражитель отсутствовал.Основной фактор стресса в этих условиях - тревога,ожидание:

Гипокинезию воспроизводили помещением ггивотных в деревянные пеналы ежедневно на 6 часов в сутки в течение 30 дней.

Повышенную двигательную активность вызывали у животных в виде бега на тредбане .Всех экспериментальных животных в точение 5-6 дней приучали к равномерному бегу на тредбане/скорость ленты 10 м в минуту/,животные бегали ежедневно по 4 минуты,6 раз в неделю,в те чеиив 40 дней. . • . •

Опыты по выявлению влияния табачного дама на изучаемые показатели проводили на животных,которые вдыхали табачный дым /полученный от выкуривания одной сигареты /дважды: вечером-накануне исследования- и за час до него/.Для этого животных помещали в специальную камеру,насыщенную табачным дымом.

У ладей, занимающихся в не занимающихся оздоровительным бегом, все изучаемые показатели определяли в межтренировочный период,в утренние часа, натощак. Занятия оздоровительным бегом проводили в специальных группах.В одной из них тренировки осуществляли по 3 раза » неделю,занимающиеся бегали со скоростью 10-12 км/час по 3-5 км за занятие.В другое -более 10 хм за тренировку,практически ежеднев во.

Подученный в работе цифровой материал Ош подвергнут матема тячесхой обработке на ЗШ класса "Персональный компьютер-Искра 125

микро ЭВМ"БЗ—31" и ЭВМ "EC-I022".Проводили вычисление средней ариф-м е тиче ско й/М/, срз дне квадратич з с ко го отклонения/ С/, ошибки средней арифметической/м/.При сопоставлении результатов соответствующих серий использовали таблицы Стызданта.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ I.Тромбоцитоактивные свойства почек и перекисноо окисление

лшшдоа у интактных зявотных Kaie показали наш исследования у всех животных/крыс,морских саинок и кроликов/ в тканях почек тлеются Еещества,влияющие на агрегацию тромбоцитов,в частности,снижающие её.В наибольшей степени эта функции присущи пачкай зроликоэ/суммирушций индекс агрегации тромбоцитов под влиянием их тканей изменяется на больоуп величину -на 26^. /Р<0,05/,чем у крыс - на 1&,5%/?<0,1/ и морских свинок - на 18,2? /Р<0,05/.

При изучении степени накопления малонового диальдегида в тканях почек оказалось,что у кроликов этот показатель был также самым высоким,у них же самый большой процент перекисного гемолиза эритроцитов/15,7 против 9,3 у крыс и 8,15 - у морских свиной и самый низкий уровень фермента супероксиддисмутазн в эритроцитах.

Кровь же кроликов обладает самыми высокими свёртывающими свойствамигу них меньше уровень антитромбина III,больше концентрация фибриногена и встречается фибриноген"В"и самой низкой фибрино-литической активностью.

Можно полагать,что веществами,ингибирующими агрегашш тромбоцитов в тканях почек изучаемых животных ¡являются цростаглавдины /.ВоЬиал S. ,1977; Zusaaa R.et al. ,1977/,продукция которых в почках различных животных неодинакова.Так,известно,что в тканях почек КРОЛИКОВ. СИНТЕЗИРУЮТСЯ простагландины Ej/Sriffitha R. et ai. , 1983/,пр0стацйюшн/ Ozsan et al. ,1984; Chandhari A. e<rt al. , 1988/ и его конечные,болефтабильше продукты/ ?апш Я. et el. , 1987/.Вполне возможно,что их синтез в почках кроликов преобладает над образованием в них других простагландинов,наоборот,активирующих агрегацию тромбоцитов,в частности,простатландина.Eg/ chabardes D. et al. ,1988/,а также тромбоксанов/ Farman H.et al. ,1987/.У крас же в тканях почек обнаружено наибольшее количество про с тагланяика Е2/ Harria S. et.al. • ,198б/,тромбоксана Ag/ Roman R. et al. ,1988/ и В5/ Cook н. et al. ,1986/,что является важным доказательством их участия в активации агрегационных свойств тромбоцитов.

Наибольшая степень реакций перекисного окисления липидов и свёртывания крови у кроликов согласуется с данными других авторов /Н.Н.Грицай,1986;С.И.Сорокина,1986;Ю.И.Силенко,1988;В.П.Мишенко и

сотрудники,1973-1988/.Возможно поэтому ряд исследователей считают, что кролики весьма восприимчивы к атеросклерозу/Б.И.Кузник и сотрудники, 1969/.

Выявленные особенности изучаемых показателей в тканях почек и в крови указанных животных необходимы бшш нам для учёта их при моделировании патологических состояний,сопровождающихся изменениями тромбопитоактивных свойств тканей почек г процессов свёртывания крови при активации перекисного окисления лшшдов.

2.Изменение тромбоцктоактивных свойств почек при активации перекисного окисления лшшдов

2.1.При фтористой интоксикации. Под влиянием тканей почек, полученных от животных/крыс/,подвергнутых фтористой интоксикации, агрегационные свойства тромбоцитов увеличивались .Возросли процессы перекисного окисления лшшдов /процент перекисного гемолиза эритроцитов увеличился с I8,I±I,56 до 25,7±2,71,Р<0,05/и снижались антио-ксидантные свойства фови/активность супероксиддисмутазы упала с 2,94+0,25 ед/мл до 2,00±р,16 ед/мл,Р<0,05/.У этих животных развивалась гиперкоагуляция /например,время рекальцификации уменьшилось

с 87,7^2,15 с до 50,0±р,9 с,Р<0,01 ¡уровень антитромбина III с 67,2 до 48,4±5,5£,Р<г0,05/ и резко тормозился фибринолиз/время растворения эуглобулинов о 244,0±23,0 мин увеличилось до 590,0*44,8 мин/. '

Увеличение тромбоцитоактивных свойств тканей почек при фтористой интоксикации можно объяснить несколькими причинами.Известно, что фтор активирует процессы перекисного окисления липвдов/О.Н. Воскресенский и сотрудники,1979,1985/.Поязление перекисей лшшдов приводит к нарушению структуры мембран клеток и. увеличению их проницаемое ти/ю.А.Владимиров, 19?2и др./.Эти структурные изменения в тканях почек при фтористой интоксикации описаны в работах Т.В.Новосельцевой/1980/ . Несомненно, что этот фактор способствует повышению тромбоцитоактивных свойств тканей почек.

Активация же свёртывания крови при фтористой интоксикации во многом связана с реакциями перекисного окисления лиоддов /А.А.Кубатиев.С.В.Андреев,1981;В.П.Мишенко и сотрудники,1981-1989/. Кроме того,фтор г сам влияет и на проницаемость клеточных структур /Т.В.Новосельцева,1980/ к факторам свёртывания крови и на коагуля-гоонную её активность/Л.В.Забродина, 1979/.

2.2.При синдроме пероксидации. У кроликов,получавших без антзоксидантную диету,в почках возросли тромбоцитоактивные свойства со сравнению с кроликами,находившимся на обычном рационе вивария.

У них же обнаружено увеличение процессов перекисного окисления липи-дов/процент перекисного гемолиза эритроцитов с 15,7+0,5 увеличился до 30,0+5,7,Р<0,05/ и коагуляционной активности крови /время рекаль-дафккации уменьшилось с 71,7+4,1 с до 65,25+1,5 с,ВсО,01;концентра-дая фибриногена В с 1,0+0,1 усл.ед. до 1,88+0,3 усл.ед.,?<0,01/.

И в этих опытах возрастание коагулирующих свойств ::рови можно объяснить тем,что свободные жирнокислотные радикалы,накапливаемые при синдроме пероксидапии,повреждают мембраны эритроцитов,эндо-телиальных клеток и другихспособствуя выходу из них различных про-коагулянтов.

2.3.При эмоционально-болевом стресса, Тромбоцитоактквкне свойства почек еозросли и при развитии эмоционально-болевого стресса у крыс.Характерны:.; признаком для этого стресса такко ягддос!- усиление реакций перекисного окисления липздов /увеличение процента перекисного гемолиза эритроцитов с о..?,6+1,2 до 23,0+0,8,Р<0,01/ и свёртывания крови /уменьшение времени рекальцификации о 78,0+9,9 с до 64,1+6,5 с,Р<0,05;уровня антитромбина III с 65,6+5,5$ до 42,4+4,2$, Р<0,05;положительные тесты паракоагуляции и др./.

Механизм этих реакций во многом похож на предыдущий/развива»-м-'йся при екчдромэ пероксидации/.Однако при стрессе ожидания выра-л-.-ншо возрастает симпато-азрбяаловпя реагаия.Появлени0 избытка адреналина приводит к усилении потока кислорода и жирных кислот к тканям, что влечет за собой накопление продуктов перекисного окисления липвдов и срыв антиоксиданткой системы/О.Н.Воскресенский и сотрудники, 1979;Ф.З.Меерсон и сотрудники-, 1977,1&79;Ф.З.Моерсон, 1981,1984/. Кроме того,адреналин п сам может активировать как агрэгационнне свойства тканей,так к процесс свёртывания крови/А.А.Маркоеял,1966; Ыс Kay et al. ,1970/,а также способствовать этой реакции через потенцирование свободнорадикального окисления лидидов.

2.4.Под влиянием табачного дыма. В опытах на морских свинках мы обнаружили увеличение тромбоцитоактивных свойств тканей почек при действии табачного дыма.По-видимому,такие изменения тромбоцитоактивных свойств почечной ткани под влиянием табачного дыма связаны с возрастанием перекисного окисления лгошдов.Нами обнаружено,

в частности,что у животных возрастают эти процессы /процент перекисного гемолиза увеличился с 8,15+0,78 до 15,34+0,69,140,001,а активность сулерокскддисмутазн эритроцитов упала с 4,52+0,25 усл.ед. до 2,74+0,12 уел.ед,Р<0.05/.Табачный дна способствует накоплению продуктов свободнорадикального окисления липидов не только в крови ж тканях почек,но и также в аорте/А.И.Гогуиская,I£39/,в лёгккх/о.н.сл-

хова,1989/.

Неслучайно,что такая реакция на табачный дым приводила и к активации процессов свёртывания крови у этих животных/время рекальци-фикации плазмы уменьшалось со 104,5+8,7 с до 88,7±6,5 с,Р<0,Объявлялись положительные пробы на паракоагуляцив и др./.Этому процессу могла способствовать и гипоксия,развиваемая от действия табачного дыма/Л. В.Говорова,1982;.Вотааа С, ,1983/,которая усиливает агрегацию тромбоцитов/В.В.Баканьская, 1986/.Кроме того,под влиянием табачного дыма ингибируется и синтез простагландинов в почках,что несомненно приводит к нарушению их тромбоцитоактивных свойств/ Alasten et al. , 1983/. !

2.5.При гиподинамии. Как показали наши исследования под влия-' нием гиподинамии в тканях почек крыс усиливается синтез веществ,пре- : пятствующих агрегации тромбоцитов.В тоже время у этих животных мы выявили усиление реакций свободнорадакальных процессов/увеличение процента перекисного гемолиза эритроцитов с 6,0+0,6 до 31,6+4,2,Р<0,001/ и свёртывания крови/уменьшение уровня антитромбина III с 71,2+1,4$ до 65,2+1,152,Р<0, 05;появление положительных паракоагуляционных проб/.

Если активация процессов свободнорадикального окисления лилидов в 1фови б атих условиях вполне объяснима и . связана с тем,что при ограничении подвижности происходит увеличение содержания липопротеи-дов низкой плотности- и снижение содержания. лилопротеидов высокой плот ности и возрастание уровня холестерина/В.В,Бречко,1985/,то изменение тромбоцитоактивных свойств почек в сторону их ослабления требует более тщательного анализа.В тканях почек при гиподинамии наблюдается уменьшение накопления малонового диальдэгида. Такая же реакция отмечена при этом же воздействии и в тканях лёгких/О. Н.Шахова ,1989/. Вполне возможно,что ослабление тромбоцитоактивных и перекисных свойств в тканях почэк при гиподинамии связано с адаптацией к раздражителю. Кроме того,нам хотелось бы обратить внимание и на тот факт,что в условиях гиподинамии в эритроцитах увеличился уровень антиоксидантного фермента - супероксщщисму тазы.По данным В.В.Бречко/1983/ такая реакция вполне возможна в условиях гиподинамии у крыс.Увеличение же активности. этого фермента коррелирует с возрастанием антиагрегационных свойств других тканей/артерий-С.И.Сорокина,1986;Н.Н.Грицай,1986;лёг-ких-О.Н.Шахова,1989/.

Однако у этих же животных в крови возросли показатели агрегации тромбоцитов и активизировалось свёртывание крови,что вполне укладывается в объяснение,неоднократно изложенное выше,связанное с активацией процессов перекисного окисления лилидов.Именно такой эффект наблюдался я в этих опытах.

- II -

Таким образом,активация процессов перекисного окисления ли-пидов/при фтористой интоксикации,синдроме пероксидации и др./,как правило,приводит к усилению тромбоцитоактивных свойств тканей почек,что даёт нам основание предполагать о важной роли антиоксидантов в регуляции синтеза соединений,влияющих на агрегацию тромбоцитов в почках.

3,Фармако ло гичес кие и немедикаментозные пути регуляции тромбоцитоактивных свойств почек при активации перекисного ога.-бления ли-пидов.

3.1.Влияние антиоксидантов.Нами показано,что при введении кроликам на фоне синдрома пероксидации комплекса изучаемых антиоксидантов, тромбоцитоактивные свойства тканей почек уменьшались/т.е.они приобретали больший антиагрегационный эффект/.У этих же животных,как и следовало ожидать,происходило снижение процессов свободнорадикаль-ного окисления липидов/так,процент перекисного гемолиза эритроцитов с 30,0+5,7 у кроликов с синдромом пероксидации упал до 20,3+1,4 под влиянием комплекса антиоксидантов,КО,01;а активность супероксвддис-мутазн в эритроцитах возросла с 4,45+0,3 усл.ад.до 5,71+0,2 усл.ед., Р<0,01/.

Кроме того,комплекс антиоксидантов приводил к нормализации показателей свёртывания крови у кроликов с савдюмом пероксидации, которые приближались к данным интактной группы животных.Такая реакция естественно не явилась неояскдантой.ибо известно,что возрастание активности антисксидантных ферментов в организме препятствует развитию как синдрома пероксидащга или резко ограничивает его,так и активации свёртывания крови.

Этот же комплекс антиоксидантов был наш использован и для восстановления тромбоцитоактивных свойств тканей почек животных, находящихся в условиях эмоционально-болевого стресса,за счёт ингиби-рования процессов перекисного окисления лшщдов.Мы исходили из известной концепции Ф.З.Меерсона/1984/ .согласно которой применение вводимого извне антиоксиданта может предупреждать развитие стресса и вызванных им повреждений и по существу является таким же очевидным подражанием организму,как и во всех примерах антистрессорной защиты,связанной с выработкой собственных антиоксидантов,например,глюкокортя-коидов.Как показали наяш исследования при эмоционально-болевом стрессе комплекс антиоксидантов уменьшал тромбоцитоактивные свойства тканей почек,снижал напряжение свободно ради кальки процессов/пере ккскьм гемолиз эритроцитов падал с 23,5+2,0$ до 12,8+1,6%,Р<0,01;активность супероксиддисмутазы повышалась с 1,8+0,39 усл.ед. до 4,5+1,5 усл.ед.,

Р<0,05/ и реакций свёртывания крови/время рекальцификации удлинялось с 70,2+2,7с до 94,9+6,1с,Р<0,01;уменьшались случаи положительных проб на паракоагуляцию и др./.

Изучаемый нами комплекс антиоксидантов на животных на фоне вдыхания табачного дыма ослаблял тромбоцитоактивные свойства тканей почек,уменьшал процессы перекисного окисления липидов и лимитировал свёртывание крови.По-видимому.это ослабление изучаемых процессов связано с угнетением процессов перекисного окисления липидов г уменьшением состояния гипоксии/В.В.Еаканьская,1986/.

Наконец,мы использовали этот же комплекс антиоксидантов и в опытах на животных, подвергшихся воздействию гиподинаиического фактора. Нами установлено,что антиоксиданты и в этих условиях такте усиливают антиагрегационнне свойства тканей почек.Естественно,что в этих опытах при даче антиоксидантов снижался процесс перекисного окисления липвдов/так,процент перокисной резистентности эритроцитов с 19,5 +0,5 упал до 14,8^0,6,Р<0,001/.У них же уменьшалась агрегация тромбоцитов в крови/угол агрегации с 67,0+2,8 град.падал до 61,1+0,5 град., Р<0,05/,нормализовались показатели свёртывания крови/например,время рекальцификации плазмы у нелечённых' составляло 74,4+6,2 с,у леченных--82,5+6,0 с и врибл.:жалось к уровню интактных животных -81,0+6,5 с/. По всей видимости,такая реакция изучаемых показателей у этих животных на введение антиоксидантов вполне оправдана,если учесть,что явление гиподинамии в образе жизни современного общества становится хроническим, то такая- нормализация показателей свободнорадикальных процессов и реакций гемостаза даёт возможность при правильном,сбалансированном/насыщенном антиоксидантами/ пищевом рационе противостоять, в какой-то мере,тем повреадающим факторам,которые возникают при гиподинамии. Однако надо иметь ввиду,что такое "пассивное"снижение тром-боцитоактивных свойств тканей почек,процессов перекисного окисления липидов и свёртывания крови может принести естественно положительный эффект,но он будет носить временный характер и к тому же сопряжён с определёнными трудностями/продукты питания,насыщенные антиоксидантами,наличие лекарств и переносимость их людьми и т.п./.

Всё это побудило нас изыскать такие пути управления данными процессами .которые решались бы самим организмом,без поступления извне каких-либо веществ,т.е.немедикаментозные.В качестве такой модели решения этой проблемы мы избрали дозированную физическую натруз-ДУ.

3.2.Дозированная физическая нагрузка. Как показали наши исследования под влиянием дозированной физической нагрузки у крыс/бег на тредбане/прсясходит усиление антиагрегапионных свойств тканей по-

чек.И хотя у этих животных не происходило активации свободнорадика." них процессов на изучаемую нагрузку,мы отмечали в крови у них ускг/.-ние агрегации тромбоцитов и реакций свёртывания крови.По всей видимости,в этих опытах физическая нагрузка не была в достаточной степени адаптируемой,чтобы её можно было отнести к разряду оздоровительной.Хотя лимитирование реакций свободнорадикального окисления липи-дов в этих опытах к происходило,но повышение мощности физиологической антиоксидантной защиты мы не получили.По данным же Ф.З.Меерсона /1986/ при настоящей адаптации к физическим нагрузкам это должно оц-ло бы произойти.

Исходя из этого мы пришли к заключению,что в данной серии исследований всё-таки не реализовались адаптивные сдвиги в изучаемых показателях полностью и поэтому мы не могли отнести эти нагрузки к разряду тренированности.Такая ситуация и приблизительно такие же результаты прослеживаются и у людей, которые , только приступают к тренировкам,например,оздоровительным бегоч/Е.И.Гусинская, 1964;П.И. Губка,1984/.Поэтому мы и предприняли попытку изучить тромбоцитоактивные функции, почек у ладей,занимаотихся оздоровительным бегом более трёх лет/т.е.были ужа достаточно адаптированы к физической наг-рузке/.В связи с тем,что о функции почек у людей мы могли судить только по ввделяемой ими моче .нами и проведено изучение влияния мочи на ранее описываемые показатели.Нала установлено,что моча обладает большей антиагрегационной способностью у людей,занимающихся оздоровительным бегом/так,например,под её влиянием угол агрегации тромбоцитов у небегающих людей практически не отличается от контроля -58,1±1,4 и 62,4±1,6 град.,Р>0,5;у занимающихся оздоровительным бегом он уменьшается под влиянием мочи с 57,6+1,5 град.до 50,6+1,8 град Р<0,05/.Кроме того в моче этих людей больше антикоагулянтов,меньше накопление малонового .диальдегида. Анализ же крови свидетельствует о том,что в ней снижена агрегация тромбоцитов,увеличена концентрация антикоагулянтов/антитромбина III,продуктов деградации фибриногена и фибрина/ в повышена фибринолитическая активность.

Как же можно объяснить результаты полученные в этих наблю-денияхТПреаде всего,увеличение в крови этих людей активности антио-ксидантов/уменьшение времени лингвального теста с 13,3+0,2 до 11,0+ 0,4 с,Р<0,05/ и антиоксидантных ферментов/супероксвддисмутазы с 1,22±0,1 усл.ед. до 2,34+0,3 усл.ед. ,Р<0,01;окисленного глутатиога с 4,2±ß,5 до 7,2±1,1 мг£,Р<0,05/ свидетельствует как раз о том,что в организме этих людей наступила адаптация к данной.физической нагрузке.Это как раз и постулирует в своих работах Ф.З.Меерсон/1983- .

128б/.Антиоксздаяты же ингибируют агрегации кровяных пяастинок/А.А. кубатиев, С .В. Андреев, 1981/. Кромэ того,они стимулируют выход из сосудистой стенки простацшслшпгадобных соединений,что убедительно показано наш в этих наблюдениях в пробах с венозной окклюзией.На такую возможность выделения факторов цростациклинподобного рода из сосудов указывают Кагреи С, et al. ,1981; Rao Ш. et al. ,1983/.A простациклин и его метаболиты иягибируют агрегацию тромбоцитов и частично свертывание крови.

Таким образом,в организме в процессе занятий оздоровительным бегсм,накапливаются вещества,поддерживающие сохранение крови в кадкам состоянии,в связи с чем уменьшается возможность образования тромбов,в том числе и в по-ках.Это тем более реально,ибо в их тканях при данном виде нагрузки увеличивается образование фибринолити-ческих компонентов,в моче больше антикоагулянтов и снижен уровень малонового да альдегида.Последнее свидетельствует об ослаблении реакций свободнорадикального окисления лилидов в почках у лвдей, занимающихся оздоровительным бегом.То,что почки действительно при физической работе могут усиленно выделять различные метаболиты простацик-лина свидетельствуют данные Wenmaalon A. et al. /1988/.0ни,в частности, показали, что с мочой выделяются тромбокеаны и простациклин и приходят к заключению о пользе занятий физической нагрузкой для удушения функциональной активности почек.

На основании вышеизложенного мы приходим к заключению,что в случае адаптивных нагрузок /в наших наблюдениях они строились по режиму: 10-12 кчАгас-скорость бега,3-4 раза в неделю-частота занятий 3-5 км -дистанция за тренировку/ происходит повышение антиагрегацио них свойств мочи,что в значительной степени обусловлено снижением реакций перекисного окисления лилидов и усилением антиоксидантной обеспеченности организма.

Однако мы хотим обратить внимание на тот факт,что в ряде случаев нам пришлось исследовать мочу и кровь людей, занимающихся 6« гом на большие расстояния/более 10-20 км за тренировку/ и чаще,чем предыдущей группе.При таком режиме занятой нами обнаружены результг ты совершенно неадекватные нашей основной грулпы.В частности,анти-агрегационная активность мочи таких людей снижена,в крови усилены реакции перекисного окисления лилидов,агрегация тромбоцитов и свёр1 заниэ крови.Эти данные с несомненностью свидетельствуют о том,что ; г? иной группы обследуемых была перегрузка физическими упражнениями такой режим занятий нельзя отнести к разряду оздоровительных. По да зха Ф.З.Иеерсона/1984-1986/ именно такие реакций и наблюдаются при чрезмерной физической активности,когда организм работает с перегру кой.

- 15 -

Таким образом.в большинстве случаев при активации перекпсно-?о окисления лвлидов и снижении антиоксидавтной защиты организма в тканях почек повышаются тромбоцитоактивные свойства и уровень малонового дггальдэгяда.Эти реакции могут быть причиной ухудшения фуккдас-' .-зльных возможностей почек в таких условиях. К ним могут быть отпесе--га различные интоксикации/например,фтором/,курение,недостаточность г пищевом рационе антиоксидантов.эмоцконзльнне и физические перегруз-кь. и другие.Использование антпоксидантов монет в значительной степени нормализовать эта показатели.Однако это невсегда возможно из-за ряда трудкостей/дознрозка,способ введения, чувствительность к препаратам и др./'.Поэтому з арсенале врача могут окгь лспольэовзш: и не-¡лгдпкаментознне способы регуляции этих процессов.

Знание описанных механизмов может быть псподьзо-^то з таг-нике внутренних болезней при лечении больных с заболеггзп.тг: ггсч^к. Кроме того,они могут быть учтена з условиях врачебно-троготрсвочпого контроля при разработка показаний и противопоказаний к занятиям физической нагрузкой.Наконец, они могут быть применены для работы с широкими слоями населения для формирования здорового образа жизни/физическая активность,отказ от курения,правильный рекам питания с включением антпоксидантов растительного происхождения/.

В Ы В О Л Ы

I .Трокооцмсаитввкыв свойства поче>: различию: ужчвтчх не-~--дккаковы.Наибольшей аитиагрегапкоккой активностью обгатзвт ткхвг почек кроликов,меньшей крыс ц самой низкой,корсккх свинок.У кроликов саше высокие показатели перекисного окисления дшпидов и свёртывания крови,.

2.При фторпстой интоксикации и вдыхании табачного дыма тромбоцитоактивные свойства тканей почек у животных возрастают,у них же усиливаются реакции перекисного окисления липидов и свёртываемости крови.

3.При синдроме пероксидацга,вызванном кормлением животных безантиоксидаятной диетой и эмоционально-болевом стрессе происходит уменьшение антиагрегацаонных свойств тканей почек на фоке гиперкоагуляции и сниженной антиоксидантной обеспеченности оргедиз.ча.

4.При экспериментальной гипо- и гиперкияезии трокбошгтоак-тивнке свойства тканей почек уменьшится,у животных развивается гя-леркоагуляция;процесс перекисного окисления лнпидов при гкпокипегик усиливается,а гиперкинезии - ив изменяется.

Б.Тромбоцитоактнзкке свойства тканей почек/животных/ и мочг /людей/ зависят от реакций перекисного окисления лтаидсв г антхоксг-яантной обеспеченности органкзма,В болызквстве случаев, как сразгдо,

г.ри возрастании свободнорадикальных процессов в организме,они усили- ; заются. . .

6.Комплекс антиоксидантов нормализует тромбоцитоактивные свойства тканей почек,лимитирует реакции перекисного окисления липидов и свёртывание крови при их усилении.

7.Нормализация тромбоцитоактивных свойств почек и мочи,процессов перекисного окисления липидов,свёртывания крови и повышение антиоксидантной защиты организма может осуществляться немедикаментозным путём/адаптированным адекватным режимом физической трениров- . ки/.

ПРАКТИЧЕСКИЕ Й2К0МЕНДАЩИ

1.Улучшение антиагрегационных/а в связи с этим и функциональ- ' ных/сзойств почек может быть достигнуто путём ингибирования процессов перекисного окисления липидов,ослабление которых приведёт к снижению агрегации тромбоцитов и коагулирующих свойств крови.Такие реакции могут быть вызваны использованием антиоксидантов и ведением здо- • рового образа жизни/физическис тренировки,сбалансированное питание, отказ от курения и др./. 1

2.Такие показатели мочи,как её антиагрегационная активность, уровень в ней малонового диальдегида и гемокоагуляционных соединений могут быть использованы для оценки функционального состояния почета также могут быть методами контроля за адекватностью физичес- . кой нагрузки или тренировки.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ. ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1.Антиагрегационная/простациклинподобная/ активность почек крыс//УП Всесоюзная конференция по физиологии почек и водно-солевому обмену:сборник научных трудов-Чернигов,1985,-С.147-148.

2.Влияние антиоксидантов на синтез простацикяина в сосудах и тканях животных и человека//Биоантиоксидант: тезисы 11-ой Всесоюзной конференции.-Черноголовка,1986.-С.49-50/соавторы В.П.Мищенко,А.И.Го-гунская.Н.Н.Грицай,В. А.Петренко, Ю.И.Силенко,С.И.Сорокина/.

3.Взаемозв'язок м1ж процесами перекисного окисления л1п1д1в I противоагрегод1йною активн1стю судинно1 сйнки у Р1эних тварин I лю-ДИШ.//Ш э'1зд Укра1ньского ф1з1олог1чного товариства 1м.1.П.Павло-ва:тезы допов1дей,Льв1в,1986.-С.86/соавторы А.И.Гогунская.В.И.Силен-то ,С.И.Сорокина,]1.Н.Грихшй,В,А.Петронко,В.А.Пилюгин/.

4.Влияние полипептидного фактора сосудистой стенки"вазоннна* на состояние системы гемостаза при ъ кспариментальнои синдроме перок-СЕдапигУ/Сарыакол.и токсикология.-1986.-Л6.-С.39-42/соавторы Б.И.Куз-ккк,В.¡КШданко.З.Х.Хавжнсон,В.Г.Морозов,Н.Н.Грицай,Е.Л.Ерёмина,С.И.

Сорокина,О.Н.Воскресенский,В.Н. Бобырев, Е.М.Важшгчая,Т.Н.Степанова/.

5.Фтор в окружающей среде как один из дополнительных факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний на Полтавщине//Охрана окружающей среды и здоровье¡тезисы докладов облает.научно-практической конференции.Полтава.-1986.-С.146-148/соавторы Мищенко В.П. ,К0Е0сель-цева Т.В.,Сорокина С.И./.

6.Простацшшшовая активность сосудистой стенки различных регионоз системы кровообращения з условиях загрязнения окружающей среды табачным дымом//Охрана окружающей среды и здооровье:тез.докл. обл.научно-практической конференции,Полтава. -1986.-С.54-56/соавторы А.И.Гогунская,Н.Н.Гр1щай,Ю.И.Сплен::о,В.П.Боряк,С.11.11олонский,И.ВЛСа-штелянов/.

7.Мозаичность простациюшнподобной активности различных регионов кровообращения и её роль в системе РАСК//Актуальные проблемы гемостаза в. клинической практике.М.:тез.Всесоюзной конф. ,1987.-е.Зе /соавторы А.И.Гогунская,Н.Н.Грицай,В.А.Петренко,Ю.И.Силенко,С.И.Сорокина/. .

8.Влияние дозированного бега на антиагрегационные/проста-циюшнподобные/сзойства тканей почек//Научно-технический прогресс,

охрана окружающей среды,фундаментальные проблемы медицины и биологии: тез. обл. научно-практической конференции.Полтава,1988.-С.217.

Э.Гемокоагулируюшие.фибринолитические и антиагрегашоккые свойства мочи у людей,занимающихся оздоровительным бегом//Научнс-технический прогресс, охрана окружающей среды,фундаментальные проблемы медицины и биологии:тез.обл.научно-практической конференции.Полтава,1988.-С.218.