Автореферат и диссертация по медицине (14.00.07) на тему:Роль факторов питания в алиментарной профилактике гепатотоксического действия чужеродных веществ

АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК СССР

ИНСТИТУТ ПИТАНИЯ

На правах рукописи УДК: 613.2 : 612.354/613.63

МАРТИНЧИК Арсений Николаевич

РОЛЬ ФАКТОРОВ ПИТАНИЯ В АЛИМЕНТАРНОЙ ПРОФИЛАКТИКЕ ГЕПАТОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЧУЖЕРОДНЫХ ВЕЩЕСТВ

14.00.07 — Гигиена

АВТОР ЕФ ЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Москва — 1990-

Работа выполнена в Ияотитуте питания АЫН СССР (директор -чиэн-корреспондент АШ СССР, профессор М.Н.ВШГАРЕВ).

Офщиальнке опподанты:

Чден-корреояаедент £Ш СССР, доктор ыедишноигг наук, профессор .П.А.ЗОЗОТШ

Доктор шдтидаквг наук,профессор А.И.ГОНШШВ

Доктор медвцаноккх наук К.Д.КОРаШИКСВ

Ведущая организация:

Институт региональны проблем питания АМН СССР (директор - академик АМН СССР, профессор Т.Ш.ЕАРДШОВ).

У

Защята соотозтся

г/ 199 0 в часов ка заседании Специализированного совета Д 001.02.01 пря Институте питания АМН СССР (Москва, 109240, Устьинский

проезд 2/14).

» .

С днооертацией иохно ознакомиться в библиотеке Института паташш АМН ОССЗР.

Автореферат разоодан /X 1990 г.

Ученый секретарь Специализированного оовета кавдядат медициною» наук В.И.ЕМИНЧЕЖО

ОБЩАЯ ХАРАКТЕР ИС ТИКА. РЛБОТ11

Актуальность проблею;. В разлитых отраслях народного хозяйства используется огроияоо количество химических веществ. Профалаета-íta профессиональных забодевангП, а том числе п химической этиологи, провозглашена одной из вагшейшк государственных задач здравоохранения и медицину (II.®. Изиеров, 1984). Это о категорической необходимостью става? р ряд актуальна задач поиск иедкко-биологяческкх средств сохранения здоровья человека, вавшти его генофонда от воздействия химических агентов окрухавщой срвди.Сжв-дуат признать, что круг издикочЗиологичеоких средств профилактики неблагоприятного воздействия хямнчеспш: агентов среда крайне ограничен п яклкиает в себя главнш образо.ч элементы здорового образа япзни:питание, реши труда а отдыха, занятие физической культурой а спортоа, отказ os вредных привычек, раянез вшшюнио п леченио аайоя^^гдй и иевоторыэ другие здравоохраивячвекав ив-ри,

Знспврлмантадьяио исследования а нх обобщенна свидетельствуют о том, что хшячвскай состав пищи а ей фармакодинемичеокая активность способны существенным образоц влиять на токсичность сш-рокого круга чугеродних химических веществ: лекзрств, вредных про-мммеаяшс веществ, загрязнителей атмосферы п пища (А.А. Покровский, 1979; Бохй , 1369; Scbantoaan, 1974; Calabress , 1981; Воз , 1987).

С открытием йЕОШдическпх процессоэ, ответственных за метаболизм чужеродных вэиеств, исследование роли пища з регуляции этих процэссов обрело кодкретауя «отаболическуэ основу.

Использование в народной хозяйстве и воздействие на человека огромного количества химических веществ исключает практическую

возможность исследования роля шиш в реализация токсичности наа-1- 161/0

дого соединения или даке отдельных групп химических веществ. Развитие ксенобиологин а различных отраслей токсикологии позволяют в настоящее время выделить п сформулировать наиболее общие законо-иерности токсикофармакологических иеханизиов взаимодействия чужеродных веществ с живой клеткой и составлявшими её какро- и микро-ыолекулаыи ( Jacoby, Í980). Обобщение основных полохопиЯ биохимической токсикологии о механизмах токсичности ксенобиотиков и пут-рициологии о биологической роли нутряентов должяо составлять изто дологическую основу целенаправленного изучения влияния пищи на процесс« метаболизиа и реализации токсичности чужеродных веществ. Актуальность проблемы обусловлена как чисто паучнши её аспектами, связаннши с исследованием; роли шщя в регуляции ферментативных и неферментативных процессов метаболизма чужеродных веществ в печени, установлением закономерностей биологического действия прамшиенных веществ, поиском профилактических свойств пя-кгвых факторов, способных изменять токсичность ксенобиотиков в выявлением общих закономерностей модифицирующего эффекта пиаз.уад к аспектеми, связаннши с. разработкой принципов в практических рекомендаций по питан ив в особо вредньос условаях труда при воадей ствел вредных промышленных веществ. '

йелья доследования явилось изучение в эксперименте на 'SSeot-вых новых закономерностей влияния отдельнш: пвшавых весоств, количественных а качественных изиенени8:'пищевого радаоаа в новых источников пищевых веществ ка-процесса, биотраасфориащш ксенобиотиков в печени, экспершеятально-ГЕГиелотеское обоснований общих принципов алиментарной профилактики е-организации лечабао-профилактического питания при воздействии', вредльа ¿рщфшкаых Ьщэств,- в основе .механизма действия--которых', дают 'фвиотаи 'кат'й-

болотеской активация.

Для достижения указанной цели ревалнсь оладугше задача :

1. В экспериментах на крысах исследовать информативность отдельных процессов баотравсфсриацяа чугеродных вевеств в оценке бзохвигческих механизмов в степени гепатотоксяческого деЯст-вия химических проиилденных гэгцеств, подвергататсся а кояоокси-геназных реакциях даун типам ыетаболетеской активация - с образованней свободаорадшсадьных (дтаетодфорисняд) ада вдектрофаль-ных (хлорбензол) метаболитов.

2. Исследовать в эксперкдента роль отдельных пищевых веществ а модификаций пгаевого рацяояа в регуляции процессов ыик-росшального гадроксалнрования, коаъпгащш п перекясаого окисла-пая липвдов в аятактяоЗ печена а пря воздействия гепатотокоячэ-скях вешеотв.

3. Исследовать значение пищевых факторов в формирования в функционировании системы гяутатпояа в обосновать возиогнооть оценка обеспеченности оргааизыа аивотных (а человека) серосодор-гацши аминокислотами по уровню глутатиона в органах я тканях.

4. Обосновать возмоеность прогнозирования профилактического вдв потенцирувдего действия модификаций пищевого рациона тп отдельных пшцевых веществ а продуктов на реализации гепатотоксаче-ового действия химических агентов на основании исследования и шшяяия на процессы бвотргшсфориация чуаеродных веществ.

5. Оценить воггдогшооть исследования процессов биотрансфор-кашш чужеродных веществ а качеотвэ одаого пз кригернев шщэеоЗ ценности ц безопасности новых источников пищевого белка (белковых нзолятов я концентратов) и пияевых ¡шроа я их пригодности для создания опецяаяяз ироваяншс продуктов профилактического назначения шш использования в лечебно-профилактическом питании.

-46. Изучить фактичвскоо пвтанпе п состояние здоровья в связн о характером питания рабочих, коптйктирухящх о дпметилфорыанидом " ддорироваавшя бензолами. Исследовать коррелятивную вавяссшсть иезгду фактяческш потреблением огдзльнк* зшцэвиг веществ, з частности вятамппов В£, B.¿, Bg, С, Д, В я бгохЕлическими признаками обеспеченности ш оргшзпгиа рейочаг. в целях выявления азаоиспий Еотребнооти а ттатпах арп воздеЕс-лиш гепатотокснчэскзх

Бзществ,

7. Обосновать аа осцовашш экспериментальных в натурннж эпи-дошюлогаческиг исследований, а такго теоретического анализа ые-яаявама действия геоатотоЕсичесхих гяов а профилактического действия шцевьос веществ пршцшш лечебяо-профшштичеокого питания ври воздействии хшкческкс веществ, в механизме действия которых пграет решащул роль метаболическая акткващш.

Новизна исследования. Роль факторов питания в рагуллщш процессов бкотрансфориация чузеродньпг веществ нзучзаа нскплексяо в контексте оцошш соотиоаеанл процессов иихрооомшгьного окЕслеакя 2 шгьвгациояшя реакций Приорита-тЕша ягшштся данные о рагу-дящш авяшаосте в кшегяпеогшг csoücra гдутатяояредуктазы уровней восстановленного глучатвоаа з иачеан vivo , Установлена сбрагеая зависимость активности глутатаопредуктази от-уровяя восстановленного глутатиона в пзчеди, которая прослежена прп исследования 8 источников пжщзеого белка, характеризутессся разлячпкд саинохислотяш сяорон по серосодерхатаа аминокислотам.

Эйспорпмепташю уотаповдена гависЕЛость мегду баиноквелот-вш скорой белка по суше оерусодораавзах шшокаодог и -уровней восстановленного глутагнояа з почеап к даао «атематсчаское вырастав этой зозаошоств.

Обоояовсно сспойз'ованяо походов' наследования ггроцзссов кз-

таболизма чужеродных ващеота для оценки пшцэвоЗ ценаоота и безопасности новых еоточнняов петавых веществ. Впервые последовало влияние инрокого круга новых источников пшцевого белка на процессы бвотраясформацна чузгэродацх вешеотв.

Показана адекватная информативное« исследования переклепай Енактшзацин гртгохроиа Р-450 в цинросомах 1п у1йео для оценка ал-таоксдцаятпого потенциала шпсроссц и гярового компонента пята.

Подучанц иовиз данаиэ, характеровутапа механизм я бвохидичз-окй8 проявления гепатотоксического действия двух вредных прсиш-лепншс агентов дшетнлфорушпда а хлорбензола, вызшзаетшх снижение оодергаяпя цптохрома Р-450 п избирательное авгпбироваяна сео-роотя гидрокоилярованая субстратов в някросомах печени. Впервца показан феномен резкого увеличения кояценграцш! восстановленного гдутатпона в период иаксшального проявления некротического процесса в печена. Снкзеаае уровня цятохрома Р-450 а печеак пршо коррелирует со отепэпьэ копропорфпранурна у экспериментальных гавота ых.

Впервые получены пршыэ доказательства окисления аскорбиновой кислоты у яявотяи я человека под влиянием дгаетклфораешдец что является причиной повышения потребноста в аскорбиновой каоло-58 пра воздействия ксенобиотиков, Ендуцнругэдя перекесное окасле-яне дяпддов.

Предложен способ оценки потребности в витаминах В^, и Вд по анализу корреляция мевду фактпческш потреблением витаминов о пящей и коэффициентами актяваидя соответствующих эрнтроцитар-ццх ферментов.

Дано экспериментально-гигиеническое обоснование принципов

лечебно-профилактического питания при воздействии промышленных

веществ, подвергатаяхоя метаболической активации в печзнп. г- <ьч5

ррактическал значимость работы. На основании анализа данных акспериментально-гигиенических в натурных исследований оформули-рованы общие принципы лечебно-профилактического витания при воздействии чужеродных веществ в особо вредных условиях труда. Материалы работы включены в разработку "Методических рекомендаций по организации лечебно-профилактического питания рабочих, контактирующих с диыетнлформамидоы" (1985) п "Рекомендаций по рациональному использование продуктов безотходной технологии переработки колока с применением полимеров" (1988),

Разработан и предложен новый подход к определении потребности в витаминах В^, В2 и В6. Материала исследования использованы при разработке новых "Нора физиологических потребностей в пищевых веществах в энергии".

Проведена оценка пищевой ценности и безопасности рада новых источников пищевого и кордового белка, некоторых жировых и жиро-содергааах продуктов на основании анализа процессов биотрансфораа-вдш чужеродных веществ в печени.

Данные о регуляции пула глутатиона в печени уровнем серусо-держаядах ашшокислог в пищевых белках могут быть использованы для адекватной оценки обеспеченности организма серосодерашдош ааяно-кислотамн, а также легли в основу способа оценки достгоностп се-руоодераэдих аминокислот в пищевых белках (приоритет от 5.12.1988» & 4615729). Получены доказательства прешуоаства белков с вкеокаг амияокислотнда скорой по серусодержащш шинокнслотаы по сравнении с обогащениен рациона Ь -штиояенсш для повышения пула ъоо-сгаяовленного глутатиона ж печеаи, что; является вшшш для выбора путей адшентарной; профилактики ¿•ецатотоЕсдческого-.деЁствхш про-ишленнвзс. веществ,'' ">/■■■■

Обоснована ■яеобходиыобть [я долесо^ршность- дополинтельао! С-витшнд^шцш. лечебно-профЕЛ^.ТЕчЬского чпотаякд;- 'показан 'воз-

иогпый механизм потаецая потребпоотя в аскорбиновой киолотв пра воздействии чужеродных веществ, индуцирующих пареклсяое окясленаа

лепвдов.

Получена дашшэ об отсутствия неблагоприятного эффекта ксаш-лекса водораотворсшх ваТЕиадов в дозах, превышающие оугочяув потребность крис в 10 раз па процессы катаболизма чужеродных веществ, что не преплтотвуэт внедрении дополнительной витаианиаащш комплексом витаминов группы В лечебно-профилактического пятапяя.

Научные принципа лечебно-профилактического питания п путя алиментарной профилактика неблагоприятного биологического действия ксенобиотиков использовали а учебной nporpeaje проекта СССР-ШЕПД(РПТТВ "Контроль опасностя химических веществ для здоровья человека я окруяавщей среди". Материалы исследований попользовали также в программе работы Всесовзноа околц по вятбминолопш (1985) а в подготовке сборников "Методы исследования витаминной обеспеченности населеняя" (1984, 1987 гг),

Разработан способ исследования витаминной обеспеченности населения по анализу пробы крови, полученной из пальца.

Основные полоаения, выносшие на защиту.

1. Значение факторов питаяия в регуляции процессов биотрансформации я реализация токсичности чужэродних вещеотв определяется хшяческЕмя я биологическими свойства!® отдельных нутриентов я пеалЕментарных компонентов, а требует специфических методическая 3 ивтододогических подходов и оценок.

2. Решающее значение в регуляции пуда глутатиона в печени играет доступность серооодергащах аминокислот пищевого рациона. Активность глутатнонредуктазы и oS кинетические свойства в пече-пн регулируются уровнем восстановленного глутатиона m vivo по типу обратно! связи. Преимущество в обеспечения высокого содержа-

-а-

аая глутатиояа в печени имеет потребление белков о высоким скорой по серосодержащим аминокислотам, но ее обогащение рациона кристаллическим метиониноц,

3. Роль пищевых гиров в процессах, связанных о метаболизмом и реализацией токсичности чужеродных вещеотв, обусловлена соотношением в них антиоксидантов и субстратов ПОЛ - полиненасышенных жирных кислот.

4. Исследование процессов биотрансфорыацин чужеродных веществ ыожет быть попользовано в оценке степени и биохимических механизмов гепатотоксичности вредных промышленных веществ, а также в оценке пищевой ценности и безопасности новых источников пищевых веществ.

5. Коррелятивная взаимосвязь между фактическим потреблением витаминов и биохимическими параметрами обеспеченности иояет служить иетодои оценки потребности организма в витаминах.

Апробация работы. Материалы диссертация обсуждались на Всесоюзной конференции "Цитохроы Р-450 и охрана внутренней среды человека" (Пущгшо, 1985 г); Всесоюзной конференции "Цитохром Р-450 в модификация макромолекул" (Ялта, 1589 г.); Всесоюзном симпозиуме по медицинской энзимологии (Алма-Ата, 1983); Всесоюзной-вводе по витаминологии (Паланга, 1985 г.); на заседании Московского отделения ЕБО (1986 г.); на секции МОИП (1984 г.); на секции "Фактическое питание и рационализация питания населения СССР"Проблемной комиссии "Научные основы гигиены питания" (Пермь, 1987; Кемерово, 1988 г.).

Публикации. Материалы диссертации изложены в 25 работах, опубликованных в' отечественных и зарубежных журналах и грудах конференций и симпозиумов, в том числе в 1 монографии и I книге.

Структура и объём работы. Работа состоит из введения, лете-

ратурного обзора, описания материалов и методов исследования, результатов экспериментальных п натурных исследований, заключения, выводов я опиока литературы.

материалы и катоды исследования

Экспериментальнш исследования проводили на крысах-самцах ла-пгш Вистар. При моделировании различной обеспеченности витвмивоа С попользовали беспородных иорских свиное массой 250-300 г.

Начальная ыаоса тела крыо варпировала в завиошоста от задач эксперимента. Острьгз опыты проводили на крысах о начальной массой тала 250-300 г, подострые а хронические - о начальной массой 80120 г. При проведения биохетпчеокшс исследований в рамках оцзпха биологической ценноств белка использовали крыс-отъемшей.

Крыои получали ай ИМйа пзокалорийлыа полусинтетическка рационы, содеркадза 3-36^ балда а зависимости от задач последовав яая. Изменение квоты аира или белка в базовда рационе достигалось путем пзокалорийного изменения количества углеводов (кукурузного крахмала). Замена казеина в базовой рационе на другие источника белка осуществлялась по принципу изоазотистости ( нх 6,25).

Ингаляционную затравку хлорбензолом или длметилформамидсу проводили з затравочных камерах объёмом 200 л с реаимом затравка 5 раз в недели по 4 часа в день. При вяутрижелудочном введении использовала водные растворы диивтилфорцамвда (10-20%) а раствори хлорбензола з оливковом масле.

Выделение ыикросомной п цятозодьной фракция печени крыо проводила методом дифференциального центрифугирования (И.И. Карузияа, А. И. Арчаков, 1977). Осадок шпсрооом ресуспеядироваиш п хранили в среда 0,025 М Трис-ВС1, содереащай 20? глицерина (объём : вес). Активность монооксиганазпой системы печени характеризовала по оо-

дераанаа цптохрома Р-450 в гшогенатэ, содераантз в ышсросомах 3 ■ 4ьч

цитохрома Р-450 и Bg, скорости гидроксилирования анилина, бевз/а/-пнрена, к-деметклирования амидопирина или эташорфина. Содержание щггохрома Р-450 в гоыогенате печени определяли по üatsubara et al, (1975Ji используя для расчёта коэффициент молярной экстинции 104 tósf"1. CU1. Для определения содержания цитохроыа Р-450 в иик-росоыах использовала метод Ornara , Sato (IS64). Регистрацию дифференциальных спектров цитохрома Р-450 проводили на двухлучо-вом спектрофотометре Hitachi 557. Скорости гидроксилирования ашшопнрина, этилморфииа или анилина исследовали спектрофотомет-рически (И.И. Карузина, А.И. Арчаков (1977). Скорость гидрокоили-рования бенз/а/нирена определяли по üebort , Gelboin (1968),спек-трофлуориметряческш методом. Активность УДФ-глвкуронилтрансфера-8н анализировали в uoxpocouax печени с использованием в качестве субстрата 4-Нитрофенола, (Burchell, Weatheriel, 1961).

Скорость индуцированного ферментативного ШШ-зависшого и яеферыентативаого аскорбат-зависшого ПОЯ оценивали по накоплении МДА в динамика инкубации макросов (Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков, 1972). Для оценки окорости перехисной инактивации цнтохрош Р-450 в мякросоиох in vitro использовали одновременную регистрацию накопления 1&Ц& е остаточного количества цптохрогла Р-450 в система индукции ферментативного ПОЛ в ышсроссмах.

Содержание восстановленного глутатиопа (1ВД) в органах исследовали спеЕтрофотомегрнчесЕИ о реактивом Элдаава (ssiXak , Licdcaj, I96ñ)f 1968), а общего глутатвона - фвриеятагивяи! катодом о использованием глутатионредуктаэы из дроядай ( Tietso , 1969). Ак-тевность глутатионредуктази (ГР) в цитозола печени исследовала опектрофотометрачески (Carlberg , fciumervlk , 1975), глутатн-он-Е -трансферами (ГвТ) по Habig et el. (1974). Активность общей и ео-зависгаой глутатионперокоидаЗы спектрофотоаетрическЕ а

оопряженпой о глутатионредуктазой реакции (Wendel , 1981).

Для решения поставленных задач проводила комплекс гигиенических в клинико-биохимических исследований у рабочих промышленного предприятия, контактирущих о диметилформамидоы. фактическое питание изучалось анкетно-опросныа методом в течение 3-4 дней о расчётом содержания цакро- и мнкронутриентов в суточных рационах, согласно "Методическом рекомеадацияи* ЫЗ СССР (1984). Объектом биохимического исследования падевого статуса рабочих бшш злоиеа-тц крови п мочл. В сыворотке или плазма крова последовала содер-гаяие холестерина по Ильку (см. A.A. Покровский, 1969), липспро-тепдов (набор BilteD Cheoical Со ), общего белка ( Lowry ,1955), аскорбиновой кислоты (си. A.A. Покровский, 1969), витаминов А и В ( Thompson at eJ.., 1973). В эритроцитах исследовала активность транокетолазы, глутатионредуктазн и аспартатаминотраисферази в коэффициенты активация этих ферментов соответствующими кофермен-твиа о целью оценка обеспеченности организма рабочих витаминона Bj, В2 и В6 (см. "Методы оценки и контроля витаминной обеспеченности населения!' М., 1984).

Статистическую обработку проводили с использованием критерия Стьюдеята. Использовали ЭЗ-.( "Электроника ДЗ-28", "Иокра ICG0*.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Роль количества а качества белка в регуляции цроцеосоэ

биотрансформации чужеродных вещеотв в печени

Многоуровневые исследования показали, что при дефиците белка существенным образом изменяется соотношение процессов метаболизма ксенобиотиков в печени. Содержание цитохрома Р-450 и скорость гидроксшшрования модельных субстратов, а также интенсивность НАДФ-зависимого ПОЛ в микросоиах печени онижается при недостатке белка, хотя и с различной степень®.

Разнонаправленно изменяются при дефиците белка параметры кояъюгационвкх процессов: активность УДФ-ГГ возрастает в микро-ооыах печени почти в 1,5 раза, активность Г8Т и содержание TS И существенно снижается. При этоа не изменяется активность глута-тионпероксидазы я значительно возрастает активность цитозольной глутатионредуктаэы. Концентрация глутатиона в печени прямолинейно эазнсит от уровня поступающих о кормой серосодержащих амино -кислот только при определённых количествах белка - в пределах о? низких до нормальных величин (4-18Я), Повышение количества белка до 36? не вызывает повышения содержания глутатиона в печени. Дополнительное обогащение рациона с казеином кристаллическим ме-тиопнном пе приводит к существенному увеличению глутатиона, В обоих случаях имеет место насыщение пула глутатиона в печени.

Исследование механизма активации гдутатионредуктавы при дефиците белка позволило установить, что с уменьшением концентрации глутатиона в печени при дефиците белка возрастает У^^ я линейно снкхается к^ фермента по отношении к субстрату Ькисленнону глутатяону. Этот факт служит доказательства того, что активность глутатнонредуктазы в печени не является факторов, дшиткрувщш уровень восстановленного глутатиона, т.к. ее активность повьпаат-ся при снижения концентрации глутатиона со снижением сродства к субстрату окисленному глутатяояу.

Результаты исследования убедительно показывает, что ups дефицита белка шш серосодержащих еыинокислот создается крайне неблагоприятная в токсикологической плане ситуахш, характеризующаяся резкш сниаениеи содержания коипонеатов снстеш конъвгадап влектрофильных соединений с Г ЗН.

Исследование влияния качества пищевого белка было проведено с участием иирокого круга белков различного происхождения и раз-

дячяоВ- биологической ценности. Были исследованы изолят белка еэ оои (ИБС), концентрат бедка из шрота подсолнечника (КШ), биомасса мицелия гриба (ШГ), бедки микробиологического синтеза эпрш я паприя, концентрат белка из мяса криля (КЕК), пшеничные зароды-взвые хлопья, саркоплазыатическив бедки промысловых рыб, а таетз натуральные молочлорастительный в мясорастительный рационы.

Системный анализ фактических данных о состоянии процессов иатаболизма чуаеродных веществ в печена пра потреблении различных белков л белоксодержащих продуктов позволил выявить ряд закономерностей.

Особого внимания заслуживает зависимость содержания Г БН в печени крыс от содерааная суммы серусодержащзх ешшоккслот в потребляемых белках (рис. I). Эта зависшость описывается уравяенп-ел линейной регрессии о коэффициентом корреляции 0,91. Установ -ленная закономерность позволяет оценивать степень соответствия уровня серосодержащих аминокислот в источнике пищевого белка потребностям организма крыо и, в равной степени, оценивать обеспеченность организма крыо серосодержащими аминокислотами. Кроме того по суше серосодержакшх аминокислот в пищевом белке пра ах удовлетворительной усвояемости можно прогнозировать уровень ГВН в печени, который определяет в значительной степеоп реализаций токсичности реакционноопоаобиых электрофильных метаболитов чужеродных веществ.

Необходимо отметить различия в характере зависимости уроЕяя 18Н от количества добавляемого ыегионина дли при увеличении квота белка в рационе, когда наблюдается насыщение уровня 1ВН в гезчо-< и зависимости уровня 1ВН в печени от суммы серосодержащих аминокислот в потребляемом белке, когда наблюдается линейная зависимость без насыщения (рис. I). Более высокий уровнь 1ВЦ в печена 4 -

дооткгается при потреблении белков о высоким содерканием серооо-держащюс аминокислот, чем пря обогащении рациона кристаллический ивтионином.

Дополнительные доказательства регуляции активнооти глутатв-онредуктазы уровней Гзн в печени по принципу обратной связи представляет кахоздение обратной корреляции активнооти фермента от концентрации IBH в печени при потреблении белков с различнш еия-ноеислотныы окороы по серуоодерхапщм аминокислотам (рпо. 2).

Величины активности глутатионпероксидазы, селеп-завиоимого фермента цитозоля печени, отличались наибольшими колебаниями пра отсутствии определённой зависшости от биологической ценности белка ж уровня Is Н. Наименьшая активность глутатионперокоидаан наблэдалаоь при потреблении казеина и продуктов микробиологического синтеза - зприна, паприна, BIT. Величина активности глутати-шпероксидазы на порядок выше при потреблении растительных белков КШ, ИБС, пшеничных зародышевых хлопьев; белков морепродуктов КБК и саркоплааматических белков рыб, а также при потреблении вивар-ного рациона, содержащего семена подсолнечника, овес, пшеничннй хлеб. Приемлемое объяснение колебаниям активности глутатионпероксидазы заключается в количестве присутствующего в белках седана. Известно, что растительные белки и морепродукта богаты саленш (Fox, IS87). Можно также предположить, что в культуральной среде для микробиологического получения белковых продуктов оприна, палрина и ШГ селен отсутствует или его явно недостаточно, что обуславливает низкун активность гдутатнонпероксидаан,

Зависимость уровня компонентов в ферментативной активности ыоноокснгенааной системы ишсросои печени от характера источника пищевого.бедка и его биологической ценности носит неоднозначный характер. С увеличением,- биологической ценности белка удельпоз со-

-lü-

IS H.tSRMoWr

---------- -------- —-—..... г V

........-4........ ......i 0..... ------------ --------------

_________t ------------- ----------- --------- -----------

¿3

48 r/IOOsr

do «

s3 4Д

40

а 20

Ptso.I. Завтншозть иющвятргцяа ГЫ1 d пачзпя о* оодвретиая еукш овруоодвргацпх.акзисгкалот s шщавих баяках. 1ЛШС. 2.Е1СГ. З.КБП. 4.Казвгш. б.Эпран. б.ЕЬпрян. 7.1Ш5.

КИОЯЬ/мЗИ/йГ

------- ----— ------sf-j sïj ---- -------

■p S

м

5 _„„7 7й .

TsH, шаюгь/г fóo.2. Агтлвнооть гвутатяонрздузтаэы а ВОВЯСЯМООТЯ от уровня ßH 1 пэчзкя пра потрэбдзная рэзетчных бояяов. 1.ШГ. Л.Папрян. З.Рацяоа сяезряя. 4.Эпрзи. б.Казван.

держание цитохрома Р-450 в ыпкросомах печени имеет тенденцию к снижению. Так, белки с низкой биологической ценностью (КБП и ВЯ*) повышали содержание цитохрома Р-450 в микросшах печени крыо, а белка с высокой биологической ценностью не отличались по этому эффекту от казеина.

Менее определённая картина отмечается пра анализе активности ыикросшальных гвдрокснлаз, Максимальные величины активноотн гидроксилаз также связаны о потреблением ШГ е КШ. Однако закономерность нарушает дрожжевая биомасса эпрш, которая вызывает активации ыикросотальиых гидроксилаз,особенно бенз(а)пнренгидрокоа-лаэы. Напротив, ИБС, имеющий более низкую биологическую цеялость, характеризуется теми же скоростями гадрокоилироваявя субстратов, 410 о казеин. Следует шеть в ввду, что ИБС производства США отличается высокой степенью очистка (92?), а эпрпн - это биомасса, содержания 59$ белка.

Такш образом, при достаточном потребления белка (18? по калорийности) отсутствует прямая завясшость мевду биологической ценностью белка п активностью ионооксигеназяой овстеыы. Напротив, наблюдается тенденция к снегенжю уровня цстохроиа Р-450 прн попа-иеняп биологической ценности потребляемого белка.

Заключая анализ дшшнх о родя количества в качества белка в регуляцив процессов бнотраасформащш чужеродных веществ в печена представляется обоснованным заключить, что ааяболе© вааноя роль белкового компонента зашпкаетсл в регуляции системы глутатиона.в первую очередь в формирования пула восстановленного глутатиопа н активности связанных с ого метаболизмом ферментов. Йлесте с теп на состояние процессов метаболизма ксенобиотиков оказывают сущэ-ствзлное влияние присутствие в источнике белка друтсх пдкевых вли непотеркх вошеотв.

-1*7-

Исследоваяие влияния качества пищевых жиров п жиросодержашсх продуктов на процессы инкросомального гядроксаЗшрования и переквсного окисления липидов в печени

Дня оценки влияния качественных особенностей пищевых жиров на процессы иикрооомальлого гддроксилировання я ПО! в качества специального методического приема бил попользован метод одновременной регистрации накопления продуктов ПОЛ ж распада цитохрсма P-45Q в условиях in vitro в иикроооиах при индукции НАДФН-завя-0Е2ЮГ0 ПОД. Это? метод позволяет получать информации об устойчз- ' воота штросомальнов мембраны к индукция ПОЛ и об устойчивости а этих условиях цптохрома Р-450.

Процессы мшсрооомальпого гвдрокошшрования, ПОЛ я перекксвая гаактлнация автохрома Р-450 in vitro бнлп всследованы при потреблении крысамн термически обработанного ("гретого") подсолнечного таял, соевого в ихтиеяового масел, некоторых белоксодержащях продуктов: изолята белка из соа, концентрата белка из ыяоа'криля (последний содержит значительные количества жира), а также натуральных молочного, мясного л сметанного всварного рационов.

Потребление крысами в течения 14 недель рациона о "гретш" маслом без обогащения витамином Е сопровождалось снижением содержания цятохрома Р-450 в цикросомах печена по сравнения о группой, получавшей натуральное масло. Наряду о этш резко актавззирова -лось как аскорбат-, так п НАДШ-заввсвмое ПОЛ в мнкросомах печеаа (рио. 3 Б), Добавление к рациону о "гретш" маслом витамина S (5 iff/lOO г массы рациона) препятствовало снижении содержания цл~ тохрома Р-450 в микросомах, ингнбяровало аскорбатзавиоимое накопление !Щ до контрольного уровня. Однако витании S лезь частично снижал НАДфН-зависшоа накопление МДА и скорость перекисной ияак-тивацйи цитохрома Р-450 (рис. ЗА).

Рис. 3 Перекисная инактивация штохрома Р-450 в ыикросоыах печени крыс,потреблявших гретое подсолнечное йасяо 14 нея. А- диеты,обогащенные витамином £, Б- диету без витвиина Е,

■—и»» - контроль,-» — •» - опыт, 0 - уровень цитохроыа Р-450, О' - НАДЙ!-зависимое ПОЛ,. 55- вскорбат-эввискиов ГШ

На основавпл получзняых даняшс аогяо заключить, что метаболические эффекты терикческя обработанного растительного пасла связели па только о потерей витамина В, так как не все эффекта устранялись дополнительна введением витамина В. Имеет значенпэ действие'пакаплявагакхол продуктов териоокиоления я термопоЕг^з-ризаяил жирных кислот. Непосредственные токсикологяпеокяа эффекта "гретого" иаола выражштся а снижении автохрома Р-450 а иикро-ссмох печена при отеутотвиа дополнительного обогащения рациона пзтсиинса 3.

Исследования пщевих кяров с различна соотношением полгзе-вао1шанних ниртя кислот я токоферолов (субстратов п ПОЛ я аятп-окоядаятоз) показала, что при оодерганяп в наел ах достаточного количества токоферолов (в соевса паслогамма-токоферола), кля при обогащения рацпоноз витамином Б (нхтпеяовое масло) иекбраяы шгк-рооса сохраняет достаточную устойчивость а продуктам ПОЛ дала прз вшокой отепени ненасшЕенностп пищевого аира а при высокой содержания ГОШ з шшросшных ыенбраяах.

На основалаи проведенных исследований различных по качеотву аиров я кирооодергшцяж продуктов представляется обоснованна за-гиэтять, что соотношение а рационе антиоксндантных факторов а оутЗотратов ПОЛ - токофэрояой^йолшепасшвднных яярных кислот - является определявши пшзевш! фактороа для формирования устойчивых 8 продуктга ПОИ мембран эядоплазлатяческого ретикулума, что определяет в конечном итого степень гепатотокоичэского действия чужеродных веществ, С учетом этих экспериментальных данных формулировались требования к гировоау компоненту рациона лечебно-профилактического питания.

Информативность метода исследованил перекасной инактивация цитохрема Р-450 позволяет рекомендовать этот методические приеа

дяя сравнительной оценки влияния пищевых аиров на устойчивость нлкросомальных мембран к индукции ПОЛ.

Витамины и процессы биотрансформацзш чужеродных веществ в печени

С обиегигиепических позиций витаминизация представляется эффективным средством профилактики гиповктемкнозных состояний п удовлетворения повшеняой потребности в витаминах. В связи с этим представляло интерес исследование процессов биотрансфорнациа ксенобиотиков в печени при дополнительно;.? избыточном назначении комплекса водорастворимых витаминов. Задача состояла в оценке безопасности я целесообразности использовали поливитаминных препаратов при воздействии химических веществ, а также воамояяых негативных последствий комплексной поливитаминной недостаточности.

Для решения этой задачи бит смоделированы три состояния: поливитаминного дефицита, нормальной обеспеченности и избытка комплекса водорастворимых витаминов. При недостаточном потреблении витаминов (1/10 от нормального ограбления с полусинтетической пищевой смесь®) животных содержали на такой минимально возможной дозе витаминов, при которой ксютчаогся вторичные признаки полк-гдиовшгаиняоза (задержка роста и поедаемостя корма). Нря моделирования Езбытка витаминов крыса получала о кормом количество ва-тгашаной смеси, в 10 раз вревшахяэе нормальное« Такш образом» меаду дефицитом в избытком витаминов было 100-кратаое различие в потребления витаминов.

ЭкопоряУ9Чтальны0 дани«® свидетельствуют,что дфТпщэт Еита-МШ50В слабо влиял на уровень компонентов в активность формеятов азетаболЕвма чужеродных реществ.-.Могао лишь-отаетять .снижение ФДД-аавиошой глутатвсарадуктьсц.в содергадяя ЙЕ в печени. С другой стороны, 10-20-кратяоо превкаонго суточной потребяостя криз в го-

дораотворгаых витаминах таете существенно не сказывалось на активности п соотношении процеосов метаболизма ксенобиотиков в печена. Избыточное потребление витаминов не имеет никаких прейду -иеотв перед нормальной обеспеченностьп в формировании как специфических ферментативных витамин-зависимых активностей, так а процессов метаболизма ксенобиотиков. Вместе с тем, не выявлено каких-либо неблагоприятных биохимических изменений, что моэкет свидетельствовать о безопасности возможных передозировок витаминов прп осуществлении дополнительной витаминизации.

Не выявлено неблагоприятного действия субтоксическзх доз витамина А на состояние микросомального гидроокснлирования в пвча -ни, что предполагает безопасность применения витамина А в комплексном препарате, используемом для дополнительной витаминизация.

Сочетанное назначение витамина В-^» фолиевой кислоты ж мети-онина оказывало"сдердивайщее" дозозависимов действие на отепень индукции цитохрома Р-450 а И-дематилазы амидопирина в мякросшах печени. Исключение витамина В^ и фолацина из рациона крыо не оказывало существенного эффекта на соотояниа процессов микросовального гядроксилированял.

Экспериментальные исследования дополнительного назначения витаминов не выявило каких-дябо данных, препятствующих дополнительной витаминизации при воздействии чужзродаых веществ. Более того, как будет показано ниже, витамины Е я С оказывают профилактический эффект при воздействии гепатотокоического агента диметплформа-ыцда.

Анализ экспериментальных данных позволяет сделать заключение о том, что отдельные пищевые вещества имеют индивидуальные особен-ностя в регуляции процессов метаболизма чужеродных веществ, обуо-

6 - 1Ь <'/"

яовленные их пищевой и биологической ролью. Для адекватной оценки вас регулирующей роли необходимо применение специфических приемов и катодов исследования.

Исследование процессов метаболизма ксенобиотиков в печени при воздействии гепатотоксических промышленных веществ

В качестве модельных гепатотоксических агентов для изучения механизма гепатотоксичности и протекторных свойств пищевых факторов выбраны универсальный растворитель дшетилформаиид и хлорбензол (ДМ5А и ХВ).

Диагностическими критериями гепатотоксического действия чу-гародных веществ и профилактической эффективности алиментарных факторов била избраны процессы биотрансформации ксенобиотиков и процессы ПОЛ в печени»

В экспериментах на животных было показано, что при различных путях введения (ингаляционно, внутрижелудочно, через кожу) дше-тилформазад вызывал дозозависюаое снижение содержания цктохроыа Р-450 а избирательное ингибирование Е-деметилаз в микросомах печени бев влияния на скорость гвдроксшифования анилина. При атои развивается выраженная копропорфирлнурня (прирост экскреции коп-ропорфирнна более 3005?), которая прямо коррелирует оо степенью снижения цитохрома Р-450. Характерным для токсического действия ДЛФА является индукция перекисного окисления яепидов в шгкросо;тах в гомогенате печени. Наряду о внтабарованнеи моноокоЕгсназной системы наблюдалось существенное увеличение активности УДЗ-гявкуро-нплтравсферааы в микрооетах и ГЕТ в цитозола печени, а также резко - в 2-2,5 раза возрастало содержание ЁБ в печени в период максимального проявления гепатотоксического действия. Исследование фракций сульфгЕдрильных групп в печеяя позволило установить, что

в этот период происходит перераспределение сульфгндрЕльных групп

пз связанных о белком в свободные кислоторастворимые, т.е. в Г5Н.

На основании совокупности результатов исследования процессов иикроооиального гпдроксилирования и других систем метаболизма ксенобиотиков в печени была сформулирована о привлечением литературных данных рабочая гипотеза механизма гепатотоксичности ДОФА. .

Была показана возиогность образования из ыетилформамвда U. окошетклформемида, обладающего цитотоксическим действием. Это позволяет предположить народу с деметилированием ДАН альтернативный путь метаболизма ®!ФА и метилформаыцяа, а именно, процесс н-окисления. Продукты и-окисления весьма активны, способны вызывать индукцию ПОД, инактивацшз ила гшгибироваяие биосинтеза ци-тохрома Р-450 и другие биохимические эффекты.

Исследование другого промышленного вещеотва хлорбензола так-яа характеризуется снижением содержания цитохрома Р-450 я ингиба-рованиеа скорости гпдроксилирования в микросомах печени н активацией УД5-ГТ в микрооомах п 1ST в цитозола печени.

Исследование активности Is Т фруктозоаояофосфат аяьдолазы в сыворотке крови показало, что имеется определённая корреляция мез-ду снижением уровая цнтохрома Р-450 и гиперферментеияей. Это свидетельствует о том, что снижение содержания цнтохрома Р-450 в мп-яросшах печени является признаком гепатотоксического действия хлорбензола.

Наиболее характерным для воздействия хлорбензола явилось до-зозавиошоа обеднение пула 15Н в печена в первые часы после воздействия и значительное повышение концентрации его в период некроза. .. Увеличение концентрации ЁВН в печена сочетается с другими данными, характеризутеши гепатотоксичнооть хлорбензола.

Предпринятые исследования роля перэкисяого окисления липидоэ в механизме гепатотоксичности хлорбензола показали, что как при

ингаляционном, так и при внутрижелудочном введении хлорбензол на оказывал действия на динамику аскорбат- в НАДфН-зависимого образования МДА в микрооомах печени крыс» Не исключена возможность, что фенольные соединения, которые образуются при метаболизме хлорбензола, могут обладать антпоксидантной активность».

Таким наиболее чувствительным показателем воздействия хлорбензола является система глутатиона, в частности, содержание глу-татиоаа в печени, которое превосходит по чувствительности показателя пшерферментемяи, а уровень цитохрома Р-450 не уступает об~ щоприпятоыу критерии гепатотоксичнооти - гяперферментемна.

Исследование реализации гепатотоксичнооти двмвтияфорыамвда и хлорбензола под влиянием пищевых веществ шш модификаций пищевого рациона

Сформулированные аа основании экспериментальных исследований рабочие гипотезы иехаянзма гепатотоксического действия ДЛФА в хлорбензола определили дальнейшее направление исследования роли пищевых факторов в реализации токсичности этих соединений, как иодельнкх гепатотоксическюс агентов о различиш механизме« действия.

Исследование влияния ДМФА на процессы нккросоиаяьиого гцдро-кошшроваиЕЯ в печени крыо при потреблении качественно различных штров вытекает из признания феномена аддукция ПОЛ в печена, как ведущего механизма гапатотоксического действия ДШ.

Активность моноокоЕгеназной системы в печена крыо последовали пра воздействии ЛИФА (200 ыг/кг, 30 дней) па фоне экспериментальных диет, содержался лярд ил подсолнечное тало в качеоч?-ве единственных источников гира (10% по ыассо).

Анализ изменений уровня цитохрома Р-450 показывает (тс&л. I), что чем выао походный уровень гцтгохрема в.печени, теа вначстоль-

Вл&а&аз ДЕЫзтядфоризквда аа уровень цнтохре.иа Р—450 в печена а зяскрзшю порфлркнов у крно при-потребления рацпонов с качзстзеяно разлзчнша гщреиз (М ± а , и » 5 )

1 Цнтохроа Р-450 г 1 н-деиетнлазы, ныоль/мг/мш ? Копропорфиринн

Групяа 1 цмолъ/н? I белка, ! иикросома I а = 4 1 1 ! ! ЕМОЛЬ/Г печена (гомогенат) а = 6 1 » 5 1 ; 1 амидопирина! этшадорфина 1 !' ! икг/суткя 1. ■ " 1 мкг/г | креатина -

Подсолнечное масло, контроль 0,85+0,06 72,51.8,4 5,87+0,41 I2.0ip.08 0,2%0,03 61.116,0

Подсолнечное масло + ДДФА 0,46^0,02 (54?) 36,7*1.5 (51?) 2,76+0,21 (472) 4,85+0,3 (40?) 1,90*0,10 (655?) 266+13,3 (437?)

Лярд, контроль 0,73+0,05 66,6+4,8 5,60±0,47 11,8^0,7 0,56+0,05 131,7+11,8

Лярд + ДОА 0,54^0,02 44,^.0,83 4,12*0,35 9,2+0,5 1,6610,20 233,4126,0

... ; (74?) (67?) (73?) (78?) (295?) (177?)

В скобках процент (??) от соответствующего контроля.

нее его снижение под влиянием ДЙА. На рационе с лярдом уровень цитохрома Р-450 в печени интантных животных ниже, чей на диете о подсолнечным маслом, и ппи этом меньше степень его снижения под влиянием да&А. Степень иягибирования процессов и-деметилирования также более выражена на диете с подоолнечным маслом, чем на диете с лярдом.

Обращает на себя внимание тот факт, что уровень суточной экскреции копропорфирина обратно коррелирует о уровнем цитохрома Р-450 в микросомах печени как у животных контрольных групп,таг и у животных, подвергавшихся воздействию ДШ..

Уменьшение степени ингибирования активнооти деметилаз и цитохрома Р-450 в печени и степени копропорфирунурии под влиянием ЛМФА на диете, содержаще2 лярд в количестве единственного источника жира, может свидетельствовать о "смягчении" гепатотоксичео-кого эффекта ДЛФА «а указанной диете по сравнении о диетой, со -держащей подсолнечное масло.

Скорость спонтанного накопления МДА в гомогенате печени животных, получавших ДМ>А на диете с подсолнечным маслом, значительно превышала таковую на диете о лярдом и составляла, соответственно, 0,99 ¿0,05 и 0,62 £ 0,03 кмоль/г ткани/мин.

Одним из возможных объяснений защитного действия диеты, содержащей животный жир лярд и бедной ПНЖ, может быть уменьшение поступления о пищей субстратов ПОД ПНИ. Это соложение можно было бы принять бее оговорок, если бы растительные не являлись также и основными носителями природного антиоксиданта витамина В, В связи с эгш был проведен расчёт коэффициента витамин ЕЛШЖ (ыг/100 г)' в исследуемых рационах о учётом добавляемого к диетам витамина Е. Естественно, что содержание токоферола в подсолнечном масле несравненно выше, чем в лярда. Однако, с учетом

добавляемого к диетам витамина Е, коэффициент витамин Е/ПНЖК для диеты, содержащей лярд, в 2,6 раза выше, чем для диеты на подсолнечном масле.

Таким образом, как по количеству оубстратов ПОЛ (ПНЖ); так и по относительному содержании витамина Е на единицу массы ПНЖ, диета, содержащая з качестве источника жира лярд, является менее "прооксцдаятной", чем диета с подсолнечным маслом.

Для прялой экспериментальной проверки эффекта витамина Е в защите моноокскгеназной системы печени был проведен эксперимент с дополнительным назначением витамина Е крысам, получавшим обще-внварный рацион при ингаляционном воздействии Д.1ФА в течение 30 дней. Ежедневное назначение витамина Е 10 мг/крысу полностью нормализовало относительную массу печени, существенно восстанавливало концентрации цктохрома Р-450 и полностью нормализовало скорость й-деметилдроваяия этилморфша в минросомах печени.

Полученные результаты следует расценивать как свидетельство того, что в реализации гепатотоксического действия ДОФА существенное значений имеет соотношение аятиоксидантных и прооксидантных компонентов пищевого рациона, в частности соотношение витамин Е/ ПНЖ, а не их абсолютное содержание. Одним из реальных и эффективных путей увеличения антиоаоддантной активности пищевого рациона следует признать обогащение природным автиоксидантом витамином 3.

Б экспериментах на морских свинках показано, что интоксикация ИФА сопровоздаетея значительный снижением концентрации общей л восстановленной АК в печени и снпжгнпга концентрации всех форм АК в надпочечниках (табл. 2). Содержание дегидроаскорбиновой кислоты в печени, напротив, существенно, повышалось. Резко снижалась суточная экскреция аскорбиновой кислоты о мочой. У морских свинок,

Таблица 2

Содерхаяие АЕ (в мг/кг) и цитохрома Р-450 в печени морских свкнок и экскреция АК с мочой при воздействии ДШ. (М + м)

Группа 2ИВОТНЫХ ! ! Общая | АК 1 ¡Дегидро-1аскорбино-|вая кислота т --------------- ¡Восстановленная АК ! » 1 Общая АК ¡Дегидро- ¡Восстанови Экскреция ¡Цитохром }аскорбияо-}ленная АК ;АК с мочой",Р-450 ,-вая кисло-; ( мг/0™ ¡нмоль/г-;та ; ¡печени

печень надпочечники

1-я (контроль, п=5) Юб+П 16,4+2,8 30,0^,13,8 897^123 168 + 22 729^108 0,66+0/- 45,3+0,6

2-я 60,7111,6 25,2±3,0 35,5+10,3 331176 96,8±27,1 234*66 0,06+0,02 26,71?,9

А - ¿0,02 / 0,05 ¿0,02 / 0,01 ;> 0,05 /0,01 / 0,001 /0,05

3-я даз^+АК, 159^.15 110±14 1064+55 228+19 836+59 0,141,0,03 40,9±4,0

Р2 /0,001 / 0,01 /0,01 / 0,001 /0,01 / 0,001 /0,05 / 0,05

4-Я ЧЬ) 191±22 71,8^3,7 119^22 1434^160 277 1 26 11571134 1,2+0,09 50,314,4

Примечание: Р^ - по срашенив с контролем; . ., по сравяецш со 2-® группой.

такге как у крыс, Д»5ФА вызывает значительное снижение содержания дятохрома Р-450 в печени,что является признаком гепатотоксическо-го эффекта ДИФА. Ежедневное введение морским свинкам 50 иг аскорбиновой кислоты повышало до контрольного уровень обпей и восстановленной АК в печени и надпочечниках. При атом как в печени, так л в надпочечниках существенно возрастала концентрация дегидроас-корбиновоЗ кислоты, т.е. окисленной форды витамина С. Дополнительное назначение витамина С почтя полностью нормализовало содержа -ппэ цитохрома Р-450 в печали морских связок. Примечательно то,что дате 50 мг АК/двнв (10-кратноа превышение суточной потребности морской свишш) не нормализовало экскрецию витамина С с мочой при воздействий ДМФА.

Полученные данные в значительной степени раскрывают возможный механизм развития недостаточности витамина С при воздействии ДОА а других чужеродных веществ, который заключается в окисления АК в дегядро-АК. Этот процесс каким-то образом связан о функцией цитохрома Р-450 в метаболизме ЛМФА.

В отдельных экспериментах било изучено влияние различной обеспеченности белком я дополнительного назначения метяонина на ге -патотоксачнооть ЯМА. Только при выраженной недостаточности белка (5% казеина по калорийности) усиливается гепатотопсгганость ДОА. Цетаонш! аз сказывал загданого действия. Эти данные предполагают маяув вероятность участия 1ВН в обезвреживания ЛМФА или его метаболитов.

Как было установлено, отлхгсптолкюЯ особенностью биохимическая зэмепепяЗ з печени при.воздействии ХБ является резкое обеднение пула ЙИ э первые-часы окенреции,- что. является отражением козъвгадяз метаболитов-'ХБ с .'•:••'

Била пс.сд'бдовйпа токсичность.ХБ.за двух моделях"различной

обеспеченности организма серосодержащими аминокислотами« В первой модели была использована диета о изолятом белка из сои (ИБС) в качестве единственного источника белка, лимитированного по сумме серосодержащих аминокислот. Вторая модель достигалась путем дополнительного назначения метионина и пиридокоина, как предшест -венника кофактора (ПМФ), катализирующего одну из стадий превращения метионина в цистеин. Недостаточное потребление с пищей оо-рооодержащих аминокислот воледотвие лимитирования по ним ИБС,по-вшало чувствительность печени к гвпатотоксическому действии хлорбензола.

Дополнительное назначение метионина, увеличивая исходный пуд №Н, предотвращало его снижение в первые часы после воздействия ХБ, когда идет интенсивный метаболизм ХБ с участием мопооксигепаз-ной системы и образование рэакционноспособных метаболитов. Соче-танное введение метионина в витамина В£ не имеет преимущества перед введением только метионина.

Исследования регуляции пула ЗВН в печени под влиянием ппве-вых факторов нашли здесь свое подтверждение, и что не менее ваа-но, обрели токсикологическую значимость в реализации токсичности хлорбензола - гепатотоксического яда, метаболиты которого обезвреживаются путем конъюгации о РЗН.

Исследование токоичности двух химических соединений при различных модификациях пищевого рациона позволяет выделить основные критерии профилактической эффективности пища, которые сводятся к обеспечению рациона антиокоидантндаи факторами и белком о выоокш аыинокиолотнш скором по серооодержащим шинокиолотаа. Эти критерии обоснованы также экспериментальными данными по регуляции процессов метаболизма ксенобиотиков факторами питания у интактных животных.

Биохимические исследования пшпевого статуса и состояния

здоровья рабочих, контактирующих с дшетилформамидом

Результаты анализа фактического потребления энергии и пищевых вещеотв рабочих завода синтетических кож, контактирующих о ДЛА, свидетельствовали об отсутствии резко выраженных отклонений от принятых норм. Имеющиеся отклонения не носят критического характера, однако могут оказать влияние на состояние здоровья работников, а такяе на биохимические параметры пищевого отатуса.

Задачей биохимических исследований пищевого статуса рабочих, контактирующих о Д1М, явилось, во-первых, выявление изменений потребности в пищевых веществах, а во-вторых, поиск клинико-био-хшическжх данных, которые подтверждали бы экспериментальные данные по механизму действия ДШ.

Результаты биохимических исследований у рабочих, контактирующих с ЛМЭА, позволяют выделять ряд биохимических изменений,имеющих аналогия с даняшя экспериментального исследования механизма действия ДЛФА. Во-первых, было обнаружено снижение обеспеченности рабочих аскорбиновой кислотой по сравнению о контрольной группой, па различающейся по характеру питания. Резкое снижение экскреции аскорбиновой кислота о мочой и снижение концентрации её в плазме кровя свидетельствует об окисления аскорбиновой кислоты под влиянием да^А, аналогично наблюдаемому а эксперименте. Во-вторых , обеспеченность витаьшеа Е рабочих, контактирующих с ЛМФА, 'была Я22Э, чей работниц козтр(Ш.нсЗ группы, что свидетельствует .о на-■ пряже икл аатиоксидбятаоа оастеуы п повшенпом расходовании вита-иняа В, также как п аскорбиновой кислоты. В-третьих, обнаружена позызеядая экскреция о мочой уро- я-копропорфиринов, а также 6*-савяолввуаиновой кислоты, что является прямш указанием на копро-порфирстуряческоз действ ко ДОФА и прдаш подтвержден нем экспериментальных данных.

Таким образом, экспериментальные исследования по механизму действия Д№А наши овое подтверждение при исследовании рабочих, контактирующих о ДОМ. Спдовательно, предлагаемая гипотеза токсического действия ДОФА могла быть использована в качество метаболической основы для разработки и апробации мероприятий по алиментарной профилактике гепатотоксического дейотвия ДОМ..

Основные принципы разработки продуктового набора и

химического состава рациона лечебно-профилактического питания (ЛГИ)

В разработку рациона лечебно-профилактического питания при воздействии гепатотоксических агентов на примере воздействия ЛМФА и хлорбензола, исходя из экспериментальных, клинико-бЕохимическкх и гигиенических данных и анализа литературы были положены следующие принципы:

1. Суточная энергетическая ценность питания должна соответствовать затратам работников П группы интенсивности труда в составлять 3 ООО - 3 100 ккал для мужчин и 2 800 ккал для женщва. Отсутствуют какие-либо данные о возможном повышении энергозатрат при метаболических сдвигах, вызываемых гепатотоксическими соединениями. В соответствии с суточными потребностями в энергии рацн-оа (обед) ЛПЛ должен составлять 40-45$ суточной кадорийноотн шш 1200-1300 ккал.

2. Соотношение основных пищевых веществ в рационе ЛИЛ додано удовлетворять белково-углеводной ориентации питания и составлять 1:0,8:3,3-3,5.

3. Общее количество белка в суточном рационе должно составлять 90-100 г, а рацион ЛШ содержать около 55-60 г белка. Потребление белков животного происхождения должно составлять 50-551 от общего белка. Следует увеличить потребление источников белка о

высокии аминокислотным скором по серосодержащим аминокислотам. Это должно осуществляться эа счёт как животных,так и растительных продуктов, согласно величине скора по серосодержащим аминокислотам.

4. Еяровой компонент пищевого рациона должен удовлетворять сладупщю! требованиям:

- общее количество потребляемого аира по должно превышать 90-100 г/сутки;

- потребление высокояезасшеиных жиров следует ограничить количествами, обеспечйваящЕМИ потребность в незаменимой линоле-зой кислоте, и не превышать 25-30? общего количества жира в рационе;

- следует стремиться к максимально высокому соотношении в рационе ветеишн Е/ИНЖК, обеспечивающему защиту от окислительного отресса я напряжения.оксидантной системы;

- следует вскличить термичеокуэ обработку растительных масел а использовать--их. только в натуральном виде;

- но исклгзчается аспользованиз растительных масел из различных источников, при наличии в них токоферолов или обеспечении другими штиоксидаятамп.

5. Вагшш является удовлетворение потребности в витамине Вд, гофврментаад фуякдад которого обеспечивает пополнение пула глута-тлона, расходуемого на конъсгацкэ о электрофяльнши метаболитами.

С. Пра оценке потребности з витамине Вт следует учитывать тот факт, что тиамвн гнгзбируе? реакции шпсроссмального годрокси-лированля в паченя а тем сс:гцц могет способствовать снижению скорости образования электрофяльннх метаболитов в реакциях функцио-яализацин, катализируемых цятохромсаи Р-450. Целесообразность обогащения рациона ЛШ1 тпемяном обусловлена заданной вше ыодифика-

цией рациона по соотношению основных пищевых веществ. Балково-ут-леводная ориентация должна предусматривать повышение потребности в витамине В^, как иоточрчка кофермента углеводного обмена.

7. Необходимость дополнительного назначения витамина С обосновывается повышенным расходованием аскорбиновой кислоты в овязи с ее окислением, а также тем, что аскорбиновая кислота обладает способностью ингибировать образование аддуктов между электрофияь-ными метаболитами и нуклофильндаи центрами белков, нуклеотидов в фосфолиявдов клетки.

8. Обед ЛШ1 должен обеспечивать потребление не менее 10 г пищевых волокон за счет овощей и фруктов. Пищевые волокна способствует быстрому удалению попавших в кишечник о желчью метаболитов и выключению их из печеночно-кишечной циркуляции.

9. В силу кислотных свойотв метаболитов химических веществ и их конъюгатов и меркаптуровых кислот целесообразно употребление минеральных вод, характеризующихся высоким щелочным эквивалентом. Киолые метаболиты эффективнее экскретируются из плазмы в мочу при щелочной реакции мочи.

10. Метаболически обоснован вывод о неблагоприятном потенцирующем действии алкоголя на реализацию гепатотокоического действия галогенированных бензолов. Алкоголь, индуцируя моноокоиге-назную систему, одновременно приводит к снижению концентрации глутатиона в печени. В связи о этим следует ограничивать потребление в пищу продуктов, обладающих индуцирующим действием на систему микросоыаяьного гидрокоилироваяия, таких как приправы,специи, жареные яиры, крепкий кофе, а также избегать длительного при- <

ема медикаментов.

11. Так как в рамках регламентированного набора пищевых продуктов рациона ЛПП не удается обеспечить выполнения одновременно

ряда требований, то следует предпочесть выполнение в первую очередь следующих: соотношения основных пищевых веществ, повышенной потребности в серосодержащих аминокислотах, снижения потребления жира, снижение прооксидантных компонентов пищи. Витаминную <тсть рациона ЛПП можно обеспечить путем дополнительной витаминизации. Препаратом выбора следует считать "Ундевит" или Тексавит",удовлетворяю®® всем требованиям, изложенным выше, применительно к витаминам. Дозой, достаточной для удовлетворения потребностей в витаминах, следует считать I драже/день в рабочие дни.

На основании принципов лечебно-профилактического питания бил рассчитан химический состав рациона, который реализован в продуктовом наборе и меню-раскладках.

Результаты апробации рациона лечебно-профилактического

питания и дополнительной витаминизации

Разработанный рацион лечебно-профилактического питания и драже "Ундевит" рабочие, контактирующие о ДМФА, получаля в течение I месяца, посла чего для оценки его эффективности были проведены биохимические исследования фракций крови и суточной мочл по программа, аналогично той, которая проводилась в фоновой период.

Потребление рабочжи рациона ШШ и витаминных препаратов в течение 30 дней благоприятно отразилось на изучаемых биохимических показателях, характеризующих лкпидаый об^ен. В частности, в сыворотке крова как у мукчан, 1ак и женщин отмечалось достоверное снижение концентрации атерогенних явлспротеидоа низкой плотности, хиломикрояов, общего холестерина (у женщин), позызенке ©¿-холестерина (умуачип), значительное снижение коэффициента, характеризующего соотношение содержания холестерина в атерогенных и антп-атерогенных липопротеидах крови и повышение концентрации общего белка.

Применение в течение 30 дней рациона (обеда) ЛПП в витаминного препарата "Ундевит" сопровождалось устранением вох призна -ков недостаточности вита"инов, которые наблюдались в походный период у части обследованных. Наиболее выраженными бшш изменения в обеспеченности аскорбиновой кислотой (табл. 3). Под влиянием рациона ЛПП я витамина С в дозе 100 мг/деыь полностью нормализовалось содержание аскорбиновой кислоты в плазме крова и зкскрецил её о мочой.

Таблица 3

Показатели обеспеченности витамином С рабочих завода синтетических кож

(Содержание АК в плаз- Экскреция о • мочой i ме крови, мг$ j (женщины)

I- ■ -----! j мужчины i j женщины | I ыг/сутш | иг/час

Рабочие контрольной группы - 0,8I¿0,06 22,6¿0,3 -

Рабочие цеха синтетических кож (контакт с дал)

До витаминизации 0/46t.0,05 0,64¿0,05 5,9±I,4 0,I7tP,02

L 0,01 L 0.02 L o.ooi

После витаминизации i,05±0,05 I,I7t0,03 Z8,6¿2,2 0,94¿0,2S

?2 ■/ : i 0,001 L 0,001 ¿0,001 ¿ o.ooi

Pj - при оравнении с контролем

?2 - при сравнении с иеркодом до витаминизация

Был проведен анализ взаимосвязи меяду концентрацией аскорбиновой кислоты в плазма крови п уровнем фракций ляпвдов в плазме крови рабочих завода синтетических коа, до и после витаминизации виташшсы С.

По мере увеличения концентрации аскорбиновой кислоты в плаз-;,;о крови снижается содержание общего холестерина и ^-лкпопротеи-дов, а также существенно снижается индекс атерогенности за счет общего холестерина и повывения уровня оС-холестерина. Следует однако подчеркнуть, что высокий уровень аскорбиновой кислоты в плазме крови не имеет преимущества перед нормальными величинами в отношения сдвигов в лштядных фракциях. Проведенный анализ зависимости уровня лшидных фракций крови от обеспеченности аскорбиновой кислотой показывает существенное значение оптимизации обеспеченности аскорбиновой кислотой дош состояния лшшдаого обмена в организма.

Рацион ЖШ я витаминизация оказали существенное влияние на экскрецкэ метаболитов порфиринового обмена о суточной мочой (табл. 4). Установлено достоверное уменьшение экскреции б^аминолевуля-яовой кислота, копро- я уропорфиринов с суточной мочой работниц, получавших рацион ЛЩ и витаминные препараты, по сравнению с фо-аовит показателями.

Таким образсу, дополнительное применение витаминов А, 3, С, ЗЗр Вд п Вд в сочетания о рационом ЖШ оказали профилактическое влияние как в отношении устранения имеющихся проявлений недостаточности •. витаминов, так и в отношении устранения отдельных ме-тоЗодическк проявлений воздействия Д«!<?А на организм рабочих.

ч

Таблица €

Показатели порфирииового обмена у работниц, контактировавших о

Показатели

Работницы, контактировавшие о

До потребления рациона ЛПП и витаминных препаратов (п=11), контроль

После потребления рационов ЛПП и витаминных препаратов (п»Ш

С-аминолевулиновая кисло- 4,10 ± 0,66 та, мг/сутки

Копропорфирин:

мкг в суточной моче 35,2 5,0

мкг на I г креатинияа 63,0 ± 13,8 Уропорфирин:

мкг в суточной моче 1,69 + 0,17

мкг на I г креатинина 3,30 £ 0,57

Креатинин, мг в суточной 511,6 56,4 моче

2,52 t 0,20

15,4 t 2,0 а 30,7 t 3,5 s

0,64 х. 0.16 Е 1,89 ± 0,39 s 492,0 t ПО,9

г - достоверные различия

XX X

Основные пути алиментарной коррекции первичных метаболических нарушений, вызываемых гепатотоксическими соединениями, представляется возможным на основании обобщения экспериментальных и натурных биохшических исследований свести к ряду общих положений.

Во-первых, убедительно показано защитное действие аятиокси-дантных факторов в рационе. Витамины Е и С, обладающие антиокси-дантньыи свойствами, оказывали протекторное действие при интоксикации ДМ5А, предупревдая снижение содержания цитохрома Р-450 и ингибируя процессы ПОЛ. Важно подчеркнуть, что было показано первостепенное значение соотношения в рационе витамин Е/ПНЖ.кмею-

швв более важное значение, чем абсолютные величины потребления витамина Е. Целесообразность и необходимость обогаядения рациона витаминами Ей С была подтверждена такжо в натурных клинико-био-ХЕмическзх исследованиях рабочих, контактируших с ДШ.

Существенное влияние на соотношение антяоксидаятных и про-оксядаятных свойств пищи оказывает жесткая термическая обработка продуктов, особенно пищевых растительных масел. Это демонстрируется результатами исследования термически обработанного растительного масла. Накопление продуктов термоокисления я термополимеризации жирных кислот, а такжо потеря природного антиоксидаята витамина Е является негатизнгаи следствиями длительного потребления подвергавшегося нагревании растительного масла.

Другой ыетабодическгй критерий оценки пищевых веществ и характера питания в прогнозировании нх профилактических или потенцирующих свойств связал о регуляцией уровня 13Н в печени. Уровень глутатиоиа в строках пределах определяется количеством поступающих с пищей серооодеряащпх аминокислот - суммы меткойша и цистя-на. Вакнейшш факторен, дмепздзз принципиальное значение в практическом использования этого феномена в построении лечебно-профилактического питания, является преимущественно использование белков о высош! аипнокислотпш скорой по сумме серосодержащих аш-иокзелот по сравнении с обогащением рацяона кристаллическим ме-таонинш.

Накояец, третиЗ аспект оценки пищевых веществ и продуктов пятая кя заключается в анализе соотношения процессов метаболической активации п коаьагация, которое регулируется как алиментарными, так а пеалшеатаряшди компонентами продуктов питания. Усклеяяв активности процэссоа цикросомальяого гздроксилярования и перекисно-

го окисления липидов при отсутствии одновременного усиления ко-нъюгационных процессов и антиоксидантной оистемы является негативным фактором в оценкр свойств пищевых продуктов в лечебно-профилактическом питании. В связи о этим следует отметить значение процессов биотрансформации чужеродных веществ в развитии методических подходов даш оценки пищевой ценности и безопасности источников пищевых веществ, и не только с точки зрения применения этих продуктов в лечебно-профилактичеоком питания, а в общем токсикогигиеническом плане.

ВЫВОДЫ

1. Неблагоприятные последствия дефицита белка в рационе крыо при воздействии гецатотоксичеоких чужеродных веществ обусловлены резким снижением содержания в печени факторов, обеспечивающих конъюгацию электрофильных метаболитов ксенобиотиков о восстановленным глутатионоы, при умеренном онижении активности монооксигеназной оистемы. Уровень цитохрома Р-450 п активнооть монооксигеназной системы печени не коррелирует о биологической ценностью белка при достаточном его содержании в рациона, а зависят от характера источника белка, отепени его изоляции и очистки и присутствия других алиментарных и неалиментарных компонентов,

2. Уровень восстановленного глутатяона в печена лимитируется количеством поступающих о пищей серосодержащих аминокислот (сумма цистепн + метионин). Зависимость концентрации восстановленного глутатиона в печени от содержания оеросодержащих емино -кислот в пищевых белках описывается уравнением линейной регрео-сии с коэффициентом корреляции, близким к единице ( с» 0,91 ).

Погребление белков о высоким аминокислотным скором по серосодержащим аминокислотам смает преимущество в поддержании пула глута-тиона в печени по сравнении о обогащением рациона кристаллическим L -метионпном.

3. Концентрация восстановленного глутатиона в печени является фактором, регулирующим активность и кинетические свойства глу-татионредуктазы цитоаоля печени in vivo по типу обратной связи. Снижение концентрации восстановленного глутатиона в печени при дефиците белка или лимитировании белка по серосодержащим аминокислотам вызывает повышение удельной активности и^тах и снижение кажущейся Ка глутатионредуктазной реакции к окисленному глу-татиону. Активность глутатион-в-трансферазн и глутатионперокси-дазы не зависит от концентрации восстановленного глутатиона в печена.

Растительные белки (изолят из сои, концентрат из семян подсолнечника, пшеничные зародыиевые хлопья) и белки морепродуктов (концентрат белка из мяса криля, саркоплазматические белки рыб ) вызывают глногократяую индукцию глутатиояпероксидазы по сравнению с казеином или белками микробиологического синтеза.

4. Соотношение з рационе уровня субстратов перекисного окисления лппидов полияенасышениых жирных кислот и природных аятиок-сидаятов, в первую очередь витамина Е, обуславливают устойчивость мембран эндоплазматичеся -го ретикулума печени' к процессам пере -клсного окисления липядпв. Синхронная регистрация накопления продуктов перекисного окисления лиякдов и инактивация цитохрома Р-450 в микросоках jLn vitro является адекватным критерием оценки аятиокяелительнах свойств жирового компонента рациона и его обеспеченности антиоксидантяиш факторами.

-42«

5. Гепатотоксическое действие промышленных органических веществ диметилформамида и хлорбензола характеризуется снижением содержания цитохрома Р-45п и избирательным ингибироваяиеы окороо-ти гидроксилирования субстратов. Наряду о ингибированием ыоноок-сигеназной системы гепатотоксическое действия диметилформамида

и хлорбензола сопровождается существенным повышением активноотя глутатион- 6-трансферазы и УДф-глюкуронилтрансферазы, а также резким увеличением концентрации восстановленного глутатиона в период максимального проявления токсического действия. Снижение содержания цитохрома Р-450 в печени прямо коррелирует со степенью копропорфнринурии.

6. Механизм гепатотоксического действия диметилформамида в хлорбензола различен, несмотря на общнооть биохимических проявлений токсического действия. Диметилформамвд действует путем индукции перекисного окисления липидов в мембранах эндоплазматиче-ского ретикулуыа и его токсичность снижается при повышении соотношения в рационе витамина Е и полиненасыщенных жирных кислот.

Хлорбензол реализует гапатотоксичнооть пооредотвом воздействия метаболитов на иуклеофшшшэ центры молекул,и его токсичность снижается при повышении иоходного уровня восстановленного глутатиона в печени, регулируемого количеством поступающих о пищей серосодержащих аминокислот.

7. Воздействие гепатотоксического агента диметилформаывда сопровождается повышением расходования и потребности в витамине С морских свинок. Причиной этого является усиление окисления ао-корбияовой кислоты в дегидроаскорбиновую в печени и надпочечниках, что приводит к существенному снижения обеспеченности организма витамином С. Дополнительное назначение аскорбиновой кисло-

ты оказывает профилактический эффект при воздействии диметилфор-намвда.

8. Молоко и молочные продукты, составляющие белковую основу экспериментального рациона крыс, не обладают преимуществом в профилактике гепатотоксического действия химических веществ перед другими группами пищевых продуктов. Интенсивность процессов пере-кисяого окисления липидов в печени вше при воздействия диметил-формамвда яа молочном рационе, чем па мясном или смешанном.

9. Воздействие даметилформамдда яа организм работников в условиях производства сопровождается повышением потребности в витаминах С, Е я Вз, а такте повышением экскреция хопро- и уропорфя-рянов я !э-ашщолевулиновой кислоты, что прямо подтверждает данные о гепатотоксичностя диметйлформамвда, полученные в эксперименте на крысах я морских связках.

10. Зависимость между фактическим потреблением витаминов В^, В2 я В^ я коэффициентами активации соответствующих зрптроцитаряых ферментов транскетолазы, глутатионредуктазы и аспартатаминотранс-фзразн описывается уравнением линейной регрессия. Решение этого уравнения при минимально возмогших величинах ТЛФ-, ФАД- и ПАЛФ-оффектов дает величину'"должного потребления" витаминов В|, В, и Зд, которая позволяет судить об изменения потребности в этих ви-?смшах рабочих, контактирующих с зреднши химическими веществами.

11, Сформулированные на основания экспериментально-гигиениче-зкях ясследоЕЗЯЕЙ принципа профилактического питания при воздей-зткш гепатотскснчеспих промышленных веществ положены в основу практических рекскендашгЗ по разработке рациона лечебно-профллак-?ячесяого пятаяпя я дополнительной витаминизация комплексом вита-

-44«

минов. Совокупность рациона я комплекса витаминов обладала профилактическим действием и устраняла все проявления гепатотоксиче-ского действия диметилфогчамида на состояние питания и здоровье рабочих,

ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ РАБОТЫ В ПРАКТИКУ

Разработаны и утверждены МЗ СССР методичеокие рекомендации "Организация лечебно-профилактичеокого питания рабочих, контактирующих о диметилформамидом" (1985) и "Рекомендации по рациональному использованию продуктов безотходной технология переработки молока о применением полимеров" (1988),

Разработан способ оценки биологической доступности серосодержащих аминокислот в пищевых белках (приоритет от ,05.12.88. & 615729).

Опубликованы в ооавторотвэ I монография "Организация лечебно-профилактического питания" (Л.: Медицина, 1987, 216с.) е научный обзор "Питание и процессы биотрансформации чужеродных веществ" (Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Токсикология, 1987, 212с).

Материалы диссертации использованы в учебноЕ программе международного проекта ШШ/ЙРПТХВ; в подготовке материалов Всесоюзной школы по методам оценки витаминной обеопеченноотЕ населения.

Результаты исследования иопользоваяы при разработка норм потребностей в цтцевых веществах и анергии.

СПКСОХ ОСНОВНЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

I, Организация лечебно-профилактического питания. Л.: Медицина, 1987, 216 о. (Соавт, В.А. Доценко, Г.И. Бондарев).

3. Питание п процессы биотрансформация чужеродных веществ. Итога науки я техники. ВИНИТИ, Токсикология, 1987, т. 15, 212 о. (Соавт. В.Л. Тутельян, Г.И. Бондарев).

3. Витамины в процессах бпетгоаясформацяя чужеродных веществ. В кн.: Теоретические и титанические аспекты науки,о питании. Т.4. M., 1983, с. 186-192. (Соавт. Г.И. Бондарев, А.И. Фектистова, Я.Д. Лейте).

Л» Питание против чужеродиих веществ. /Демин ч кизнь, 1983, Щ, с. 34-43. (Соавт. Г.И. Бондарев).

5® Влияние дяметалформамшга на систему иикросомального гидроксн-дирования печени крыс, потреблявших рационы с качественно раз-личнши акрами. //Вопроса питания, 1984, 6, о. 42-46. (Соавт. А.И, Феоктистова, Я.Д. Лещик, Г.И. Бондарев).

3, Экспериментально-гигиеническое обоснование лечебно-профилактического питания при воздействии диметилформамяда..В кн.: Теоретические л клинические аспекты науки о питании. Т. 5. }.!., IS84, с,.104-114. (Соавт. Г.И. Бондарев, Я.Д. Лешак, А.й.Феоктистова).

?» Роль питания в метаболизма чужеродных веществ. В кн.: Профилактическая токсикология» Под ред. Н.Ф. Измерова. М., 1984? с. 97-108. (Соазт. Г.И. Бондарев).

О, Ватамкн А как один яз природных факторов, асобходя-яых для поддержания уровня датохрша Р-450 в печени, В кп.: Цатохром. Р-450 и охрана внутренней среды человека. .Пущггао, 1985, с. 70. (Соавт. И.Я. Конь).

9, Зяэргагпческяз затрату я йшдагеесков питание рабочих завода синтетических sos. //Вопроси пптаная, 1985, Л 4, с. 13-15. (Соавт. Г.И» Бондарев, Я,Д. Левин, А.И. Феоктистова).

10. Влияние термически обработанного подсолнечного масла в ра-цяонэ паиптохром Р-450 в микросомах печени крко. В кн.: Цитэ-

P-Î5Q охрана внутренней среды человека. Пущяпо, 1985, 0. 74-75.

11. Коррелятивная взаимосвязь фактического потребления витаминов В^, В2 и Вд с биохимическими показателями обеспеченности еш организма. //Вопросы питания, 1986, й 2, о. 34-37. (Соавт. Г.И. Бондарев, С.А. .' этимченко, Я.Д. Лешик, А.И. Соколов),

12. Подходы к определнию потребности в витаминах на основания анализа взаимосвязи уровней фактического потребления я биохимических параметров обеспеченности. //Вестн. АМБ СССР,1986, й II, с. 60-65. (Соавт. Г.И. Бондарев, С.А, Хотиыченко).

13. Активность глутатионредуктазы и глутатион-8 -трансферазы в печени крыс в зависимости от содержания глутатиона. //Вопр. мед. химии, 1986, т. 32, вып. 2, с. 39-42. (Соавт. Г.И. Бондарев).

14. Влияние белкового изолята из сои на биотрансформацию чужеродных веществ в печени крыс. //Фармакол. токсикология, 1987,

1* 6, с. 72-74. (Соавт. Р.В. Панова, А.И. Феоктистова, Г.й. Бондарев).

15. Индукция цитохрома Р-450 печена крыс некоторшя лекарственными препаратами н обеспеченность организма витшиноц А, //Бшл. экспарим. биол. и мед., 1987, СШ, Я 5, с. 557-560. (Соавт. И.Я. Конь, Е.К. Добкина).

16. Оценка обеспеченности организма витаминами А, Е, С, Вр с Вб по исследовании пробы крови из пальца. В кн.: Теоретические и клинические аспекты науки о питании. Т.8. Ц., 1987, с. 38-42. (Соавт, С.А. Хотиыченко),

17. Тиамин (Витамин В^). В кн.: Теоретические в клинические аспекты науки о питании. Т.'8. Ы., 1987, с. 87-9В. (Соавт. Т.И.Ларина, В.А. Исаева).

18. Особенности иеяоргаиного метаболизма глутатиона у крыо при различной обеспеченности белком к метвонипоа. // Вопросы питания, 1987, & 2, с. 44-48. (Г.И. Бондарев).

19. Метаболические основы лечебно-профилактического питания, В сб.: Дечебно-профилактнческое питание при воздействия вредных химических факторов производственной ореды. Пермь, 1988, о. 40-42. (Соавт. А.И. Феоктиотова, Е.В. Пескова, Г.И. Бондарев).

20. Лечебно-профилактическое питание рабочих, контактирующих с хлорбензолом. Л., 1988, с. 25-32. (Соавт. А.И. Феоктистова, Г.И. Бондарев, Б.В. Пескова).

21. Характеристика лечебно-профилактического питания рабочих химических предприятий. В сб.: Фактическое питание и рационализация питания населения СССР. Кемеров, 1988, с. 55-56. (Соавт. А.И. Феоктистова, В.М. Киселев, Е.В. Пескова).

22. Перекисное окисление лштидов в печени крыс при потребления изолятов балков различной биологической ценности. В сб.: Лечебно-профилактическое питание при воздействии вредных.химических факторов производственной среда. Пермь, 1988, с.61--62. (Соавт. А.И. Феоктистова, Е.В. Пескова).

23. Индукция ферментов метаболизма чужеродных веществ в печеня . крыс при длительном скармливания концентрата белка из криля. //Билл, эксперпм. биол. а мед., 1988, С VI, й 8, с. 254-255 (Соавт. Е.М. Мамаева, А.И. Феоктистова, Г.И. Бондарев, В.Г. Высоцкий).

Воздействие различных пищевых факторов на процессы перекиспо-го окисления лкпидов в микросомах печени крыс. // Вопросы.питания, .1988, Л 5* с. 46-51. (Соавт. А.И. Феоктистова, Г.И. Бондарев, И.С. Звлова).

25. Ингибпровалив процессов мнкроссмального гвдроксшшрования, . как показатель гепатотоксического действия дам-зтилформамида.-. В сб.: Лечебно-профилактическое питание при воздействии вредных химических факторов производственной среды. Пермь, 1988, с. 39-40. (Соавт. Я.Д. Лесяя)./- '

26. Состояние лилидаого обмена,' 'обеспеченность- аскорбиновой кислотой рабочих промышленного' ^предприятия. В Ьб, Фактическое шпанке я рационализ ацпя питания населения СССР. Кемеров , 1988, с.' 20-21''(Соавт. Я;Д.-.Дешк»),'

27. Использование; показателей токсикокинетики при гигиеническом . нормировании. //Бзстя...'¿'Л СССР, 1988,- й 3 , 6.-82-86. (Соавт. И.П. .Уланова, Г.Г.'Лвилсгл, В'.А. Карпухина, Е.Н. Крылова, Т.А-; :Ткачева)-.;•

-4828. Фактическое питании и биохимические параметра шщасого сг'с-туса рабочих, контактирующих с хлорбензолом. //Вопр. питйшш, 1989, НЗ, с. 25-29 (Соавт. А.И. Феоктистова, В.М. Киселев, Г.И. Бондарев, Е.Б. эскова).

29. effect of diiferolit vitaaia A status on cytoclirouo Г-45Э content ia ret liver. //Hutr.fieeearcUs 196S, v.O, 112, p.iS?« -199 OUtli I.Xa.Z-on, a.Xu.Mal'tssv).

Л^ИЩ Пода, к печати ¿й/й1" №0 г. Ф.ПЛ.З,£1 Тираж /00

Типография ОХО Мшшефтегазпроыа СССР. Зак. Из