Пато- и морфогенез дисметаболической кардиомиопатии при эндотоксикозе

Марков, Дмитрий Евгеньевич

Диссертации по медицине → Патологическая анатомия

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.15) на тему:Пато- и морфогенез дисметаболической кардиомиопатии при эндотоксикозе

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Марков, Дмитрий Евгеньевич Волгоград 2004 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.15

Автореферат диссертации по медицине на тему Пато- и морфогенез дисметаболической кардиомиопатии при эндотоксикозе

На правах рукописи

Марков Дмитрий Евгеньевич

ПАТО- И МОРФОГЕНЕЗ ДИСМЕТАБОЛИЧЕСКОЙ КАРДИОМИОПАТИИ ПРИ ЭНДОТОКСИКОЗЕ

(экспериментальное исследование) 14.00.15 - патологическая анатомия

АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Волгоград - 2

Работа выполнена в Волгоградском научном центре РАМН и Администрации Волгоградской области и Волгоградском государственном медицинском университет е

Научный руководитель -доктор медицинских наук НОВОМ АДОВ Валерий Валерьевич

Официальные оппоненты -доктор медицинских наук, профессор БОГОМОЛОВА Нина Викторовна; доктор медицинских наук ТУМАНОВА Елена Леонидовна;

Ведущая организация -Научно-исследовательский институт морфологии человека РАМН

Защита состоится « 2.6 » ОКЯЛЮ/^аЯ 2004 года в -Со часов на заседании диссертационного Совета Д 208.008.01 при Волгоградском государственном медицинском университете но адресу: 400131, Волгоград, пл. Павших борцов, 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Волгоградского государственного медицинского университета.

Автореферат разослан « <23 » 2004 года

Ученый секретарь диссертационного Совета, доктор медицинских наук,

профессор

2oof-£ 140Z2

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

В современном мире, как подтверждается многочисленными статистическими исследованиями, в структуре патологии в целом, а в структуре причин смерти - в особенности, устойчиво доминируют заболевания сердечно-сосудистой системы. При этом, их патоморфоз в последние десятилетия привел к тому, что на второе место после ишемической болезни, вышли и имеют тенденцию к дальнейшему росту заболевания сердца токсической, дисметаболической природы, описываемые как кардиомиопатии [Непомнящих JI.M., 1998, 2004; Зайратьянц О.В., 2000; Мишнев О.Д., с со-авт., 2004; Коваленко B.JL, 2001, 2004; Пальцев М.А., Аничков Н.М., 2001; Richardson P., et al., 1996; Nakano М., 1998; Bengochea L., et al., 1999; Vendemiale G., et al., 1999; Penicaud L., et al., 2000; Drake-Holland A.J., et al., 2001; Lilly L.S., 2003].

Эндотоксикоз (ЭТ) является процессом, при котором нарушения тканевого обмена развиваются не только с самых ранних сроков, но и в дальнейшем начинают играть самостоятельную, подчас ведущую роль в пато- и морфогенезе вторичного повреждения внутренних органов [Симбирцев С.А., Беляков Н.А., 1994; Яковлев М.Ю., 1998, 2002; Мишнев О.Д., Щего-лев А.И., 2001; Новочадов ВВ., 1998, 2001; Kauschke S.G., et al., 1999; Hoebe К Н., et al., 2000; Diomede L., et al., 2001; Kmiec Z., 2001].

При ЭТ, сама концепция которого подразумевает полиорганность развивающейся патологии, миокард также становится мишенью повреждения эндогенными токсическими соединениями. Комплекс морфофункцио-нальных изменений при этом описывается собирательным понятием «дис-метаболическая кардиомиопатия» [Непомнящих Л.М., 1998, 2001; Neiman J., et al., 2000; Eriksson C.J., 2001; Lang C.H., et al., 2001; Nemoto S„ et al., 2002; Vona-Davis L., et al., 2002]. В то же время участие в ее развитии тканевых нарушений белкового и липидного метаболизма до настоящего времени остаются малоизученными Исследование в этом направлении может привести к расширению современных представлений об ЭТ, его органах-мишенях, подходах к диагностике и патогенетической коррекции дисметаболической кардиомиопатии.

С этих позиций актуальным представляется морфофункциональное исследование миокарда при остром и хроническом ЭТ.

Цель работы - установить закономерности структурных изменений в миокарде при остром и хроническом эндотоксикозе, роль нарушений тканевого метаболизма в их пато- и морфогенезе.

PUi.. h/ ЧИиНАЛЬНАЯ i БИБЛИОТЕКА |

Задачи исследования.

1. Изучить морфофункциональные изменения в сердечной мышце при остром и хроническом эндотоксикозе.

2. Изучить содержание белков, спектр липидов, ацилазную и липоли-тическую активность, состояние свободнорадикального окисления липидов в ткани миокарда при остром и хроническом эндотоксикозе.

3. Показать роль продуктов нарушенного белкового и липидного обмена в пато- й морфогенезе дисметаболической кардиомиопатии при эндотоксикозе.

4 Выявить наиболее информативные морфобиохимические и мор-фометрические критерии развития дисметаболической кардиомиопатии при эндотоксикозе.

Научная новизна.

Впервые при исследовании различных моделей острого и хронического эндотоксикоза изучены структурные изменения в сердечной мышце на разных сроках развития процесса, показаны наиболее характерные сосудистые, паренхиматозные изменения и структурная перестройка вегетативного аппарата сердца.

На основании новых представлений об участии продуктов нарушенного обмена белков и липидов в пато- и морфогенезе повреждения миокарда при остром и хроническом эндотоксикозе, выявлены сроки, характер развития и наиболее значимые морфобиохимические и морфометрические диагностические признаки дисметаболической кардиомиопатии.

Научно-практическая значимость.

Практическая направленность работы определяется возможностью расширения современных представлений о полиорганности патологии при эндотоксикозе, морфологической диагностики его в клинической практике Полученные данные расширяют представления о пато- и морфогенезе повреждения миокарда при остром и хроническом эндотоксикозе за счет участия в нем продуктов нарушенного метаболизма, а также вегетативной диз-регуляции.

Положения, выносимые на защиту.

1 Основными критериями дисметаболической кардиомиопатии при остром ЭТ являются прогрессирующее уменьшение объемной доли, площади сечения и размеров ядер кардиомиоцитов, а также изменение мор-фофункциональных характеристик сердечной мышцы (содержание белка, липидов, ДНК, РНК, активность тканевых ферментов межуточного обме-

» '"ч / .»М*«

* * КмЬГ..-

на), которые развиваются в отсутствие выраженных признаков ишемии паренхимы, некрозов и заместительного склероза.

2. В основе кардиомиопаггии при хроническом ЭТ лежит структурная перестройка миокарда с преобладанием дистрофии и атрофии КМЦ, развитием компенсированного периваскулярного кардиосклероза. Ведущими механизмами этого процесса являются дисметаболические и дизрегулятор-ные процессы, развивающиеся непосредственно в миокарде.

Апробация работы.

Основные результаты диссертационного исследования докладывались и обсуждались на 60-й и 61-й итоговых конференциях НОМУС Волгоградского государственного медицинского университета (Волгоград, 2002, 2003); VII региональной конференции молодых ученых Волгоградской области (Волгоград, 2002); Всероссийской научно-практической конференции «Медико-биологические и психолого-педагогические аспекты адаптации человека» (Волгоград, 2002); Третьей Всероссийской конференции «Гипоксия: механизмы, адаптация, коррекция» (Москва, 2002); Международной конференции «Центральные и периферические механизмы вегетативной нервной системы» (Донецк, 2003); IV Всероссийской конференции «Гомеостаз и инфекционный процесс» (Сочи, 2003); П Общероссийской конференции с международным участием «Проблемы морфологии» (Сочи, 2003), II и III Международных конференциях «Гомеостаз и эн-доэкология» (Хургада, Египет, 2003, 2004).

Апробация работы осуществлена на расширенном совместном заседании проблемной комиссии по морфологии, сотрудников кафедры патологической анатомии Волгоградского государственного медицинского университета и отдела общей и экспериментальной патологии Волгоградского научного центра РАМН и Администрации Волгоградской области 7 сентября 2004 года. По теме диссертации опубликовано 11 научных работ, в том числе 5 - в центральной печати

Реализация и внедрение результатов исследования.

Работа была выполнена на кафедре патологической анатомии Волгоградского государственного медицинского университета и в отделе общей и экспериментальной патологии Волгоградского научного центра РАМН и Администрации Волгоградской области.

гоградского научно-исследовательского противочумного института, Волгоградского областного патолого-анатомического бюро.

Структура и объем диссертации.

Диссертация изложена на 133 страницах машинописного текста, содержит 11 таблиц, иллюстрирована 47 рисунками. Она состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, двух глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов и выводов. Список использованной литературы включает 207 источников: 79 отечественных и 128 зарубежных.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа носила экспериментальный характер и была выполнена с использованием 106 лабораторных животных - белых крыс и морских свинок (табл. 1).

Закономерности развития ЭТ, связанные с ним изменения обмена белков и липидов в тканях сердца были изучены в двух экспериментальных моделях острого ЭТ (ожоговое повреждение и введение бактериального липополисахарида) и при хроническом процессе

Таблица 1

Общая характеристика материала исследования по сериям

Модель эндотоксикоза Вид животных Характеристика серии Кол-во животных

Ожоговая Токсемия крысы Контроль 8

6 часов 6

12 часов 6

24 часов 6

Контроль 12

Введение морские 3 часа 12

ЛПС свинки 12 часов 12

24 часа 12

Хроническое контроль 8

введение Крысы 30 сут 8

ЛПС + ТХМ 60 сут 8

90 сут 8

Всего животных 106

В последнем случае крысам вводили каждые 48 ч 10% масляный раствор ТХМ из расчета 3-5 мл/кг массы, на 6-й день к этой процедуре прибавляли внутрибрюшинно ЛПС в дозе 0,2 мл/кг массы тела На седьмой * день манипуляций не проводили. Данный способ в течение последних пяти лет широко применяется на кафедре патологической анатомии ВолГМУ для моделирования хронического ЭТ [Новочадов В В., с соавт, 2001].

В качестве интегральных лабораторно-биохимических показателей развития ЭТ было использовано определение веществ средней молекулярной массы (ВСММ) по М.Я.Малаховой (1995), а также их олигопептидной и липидной фракции по В.В Новочадову (2001). В ряде случаев в плазме крови были также определены концентрации продуктов свободноради-кального окисления липидов. Концентрацию малонового диальдегида (МДА) определяли по модификации Л.И.Андреевой с соавт. (1988), расчет производили в мкмоль/г липидов.

Для оценки тяжести поражения органов-мишеней ЭТ были использованы также методики, основанные на определении активности тканевых ферментов межуточного обмена: ацилаз [Жуков С.А. с соавт., 1991] и лецитин' холестерин-ацилтрансферазы - JIXAT [Новочадов В.В., 2001].

При морфологическом исследовании тканей сердца были использованы общепринятые методики с окрасками гематоксилином и эозином, кармином (по Бесту), по Браше, по Фельгену, Суданом Ш и нильским голубым В двух последних случаях использовали свежезамороженные срезы Для исследования нервной ткани в области сердца было дополнительно проведено при окраске по Нисслю и серебрением по Билыновскому.

Для прямого морфометрического исследования был использован компьютерный комплекс «Видеотест-Морфо» (Россия). Он включал в себя бинокулярный исследовательский микроскоп «Биолам», аналого-цифровой преобразователь, компьютер с высокоразрешающим цветным принтером и программное обеспечение. В ткани миокарда объемные доли (мкм3/мкм3) рассчитывали для кардиомиоцитов (КМЦ), сосудов, интерстиция и соединительной ткани. Также определяли среднюю толщину КМЦ (мкм), площадь их поперечного сечения (мкм2), объем ядер КМЦ (мкм2), средние размеры и число липидных капель на 1 мм' ткани. Морфометрические исследования были также проведены в ганглиях и проводящих структурах вегетативной нервной системы.

Исследование липидного обмена включало в себя определение ли-пидного состава плазмы крови и ткани, определение интенсивности и содержания продуктов ПОЛ, исследование ферментов липидного метаболизма: фосфолипазы А2 и триацилглицерол-липазы [Камышников В С., 2001].

Статистическая обработка проведена общепринятыми для медико-биологических исследований методами с помощью программных пакетов EXCEL 7.0 и АРКАДА.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Проведенное исследование показало, что во всех опытных группах в условиях острого и хронического ЭТ развивались изменения в сердечной мышце, которые по морфофункциональным проявлениям можно было отнести к разновидностям кардиомиопатии.

Начиная с 6 ч после ожоговой травмы и с 12 ч эндотоксемии, в плазме крови животных опытной группы регистрировались повышенные уровни ВСММ, их олигопептидной и липидной фракций, увеличивалась концентрация МДА. К 72 ч уровни исследованных биохимических маркеров ЭТ в кровотоке не имели тенденции к уменьшению. Параллельно о развитии дисметаболического повреждения внутренних органов можно было судить по уменьшению активности тканевых ацилаз. В печени и почках их активность уменьшалась более чем в 2 раза к третьему часу эндотоксемии, более чем в 2,5 раза - к 24 ч с момента начала эксперимента (рис. 1).

Контроль

в ч 12 ч

Контроль Зч в-8ч

Ожоговая токсемия

лпс

Рис. 1. Увеличение содержания ВСММ и олигопептидов в плазме крови при остром эндотоксикозе, вызванном ожоговым повреждением и введением ЛПС.

Как известно, при остром ЭТ основное вторичное повреждение внутренних органов за пределами оси «кишечник - печень - легкие» происходит путем переноса к ним эндогенных токсических соединений, главным образом продуктов свободнорадикального и ферментативного разрушения белков и липидов [Проскурякова И.С., 1996; Абидов М.Т. с соавт, 2000; Мишнев О.Д. с соавт., 2003; Новочадов В.В., 2001, 2004; Mason С.М., et al., 1998; Wright G. et al, 2002].

Таким образом, именно поступление к миокарду в запредельных количествах ЭТС, образовавшихся в кишечнике, печени и легких, обеспечи-

вает при остром ЭТ инициацию повреждения КМЦ. Этот процесс, судя по экспериментальным данным, имеет место, начиная с 3-6 ч острого ЭТ, и не имеет тенденции к уменьшению в дальнейшем.

Данное положение частично объясняет как характер, так и гистото-пографию развивающихся морфологических изменений.

Наиболее ранними признаками дисметаболического повреждения миокарда при остром ЭТ становились резко выраженные сосудистые изменения в виде расширения и полнокровия капилляров и венул с явлениями сладжа, интерстициального отека с очаговым диапедезом эритроцитов и лейкоцитов. В более крупных сосудах выявлялись повреждения всех слоев стенки, максимально выраженные для эндотелия с формированием в местах обширных десквамаций пристеночных тромбов. Характерной особенностью острого ЭТ было более выраженное повреждение вен миокарда, по сравнению с артериями, и венулярного отдела микроциркуляции, по сравнению с артериолярным. Повреждения КМЦ на этом этапе ограничивались отеком и начальными явлениями дегенерации, единичные кардиомиоциты находились в состоянии контрактуры и парабиоза.

В течение последующих суток микроциркуляторные и водно-электролитные интерстициальные нарушения сохранялись и имели тенденции к усугублению. Повреждение, по-прежнему, было более интенсивным в венулах микроциркуляции и венах миокарда. В стенках коронарных артерий также уже выявлялись более глубокие изменения в виде фибрино-идного набухания, местами присутствовали истинные лимфоцитарные инфильтраты.

В то же время морфологическое исследование КМЦ свидетельствовало о нарастании дисметаболического повреждения. К его признакам следовало отнести: выявление части КМЦ (до 12%) в состоянии контрактур-ного повреждения, развитие смешанной дистрофии мышечных клеток, неравномерность распределения ядер по сарколемме на продольных срезах миокарда, а также появление характерных скоплений лейкоцитов вблизи КМЦ. При окраске Суданом 1П выявлялось накопление мелких липидных капель в саркоплазме, а также периваскулярно - в межклеточном пространстве. При гистохимическом исследовании обнаруживалось изменение тканевых энергетических депо миокарда: истощение тканевых запасов гликогена при увеличении мелкокапельной инфильтрации нейтральными ли-пидами Дополнительно, как признаки дисметаболического повреждения, в миокарде животных на фоне острого ЭТ были выявлены неравномерность фуксинофилии и потеря поперечной исчерченности части КМЦ. Особенностью всех перечисленных феноменов являлась их максимальная интенсивность вблизи коронарных сосудов, что исключало ишемическую природу развивающегося повреждения.

К 72 ч указанные изменения не имели тенденции к уменьшению, что свидетельствовало о необратимом характере развивающейся кардиомиопа-тии. Развитие и глубина поражения миокарда при введении ЛПС оказывались более интенсивными, по сравнению с моделью ожоговой токсемии.

Отдельного внимания заслуживают выявленные изменения в элементах вегетативной нервной системы. При остром ЭТ они выявлялись не ранее 24 ч и были представлены отеком, дистрофией и начальными явлениями нейролиза малой части клеток вегетативных сердечных ганглиев и волокон кардиальных ветвей блуждающего нерва. В то же время, часть нейронов находилась в состоянии гиперхромии, связанной с острой гиперфункций. Наиболее измененными оказались ганглии периаортальной и левой предсердной области. Обнаруженные изменения, безусловно, могли быть морфологическим субстратом вегетативной дисрегуляции сердца и усугубить тяжесть тканевого повреждения миокарда при остром ЭТ, но лишь на поздних сроках эксперимента. По-видимому, с этим частично можно связывать формирование необратимого повреждения миокарда при этом процессе. С другой стороны, подобная морфологическая картина трактуется рядом исследователей [Ульянинский Л.С. и др., 1994; Непомнящих Л.М. и др., 1998] как проявление защитно-приспособительных процессов в парасимпатической нервной системе при остром повреждении миокарда.

Таким образом, изменения в сердечной мышце при остром ЭТ, по результатам наших исследований можно трактовать как дисметаболиче-ские, а механизм действия ЭТС на миокард рассматривать как комплексный: прямой и опосредованный через повреждение сосудов, тканевой микроциркуляции и элементов вегетативной регуляции сердца. Подобное многокомпонентный характер острого повреждения сердечной мышцы был ранее показан для ишемического (гипоксического) и экзогенного токсического воздействия на миокард [Меерсон Ф.З., Пшенникова М.Г., 1988; Швалев В.Н. и др., 1992; Л.М. Непомнящих, 1997; 2001; Лычкова А.Э., 2002; ВаИГау VI.1., е1 а!., 1999; Ми1кеу Т., еГ а1., 2000; НиевНв М.А., е! а1, 2001, ВгаЬаск Ь., НишЫе М„ 2001].

Количественная и гистотопографическая оценка патологии, развивающейся при остром ЭТ, была дана на основе морфометрического и мор-фобиохимического исследования.

На основании исследования тканевых гомогенатов миокарда было вывялено несколько характерных проявлений дисметаболизма (табл. 2).

1. Уменьшение содержания ТГ в ткани миокарда.

2. Увеличение содержания ФЛ.

3. Уменьшение степени эстерификации ХС.

4 Прогрессирующее возрастание активности тканевых липаз

Таблица 2

Показатели липидного обмена в ткани миокарда морских свинок при остром эндотоксикозе

Показатели Контрольная Введение бактериального ЛПС

• группа Зч 12 <1 24 ч

Общие липиды, г/л 3.32+0.10 4.04+0.33 4.15+0.38 3.22+0.12

Фосфолипиды,

ммоль/г 3.93+0.30 5.61+0.50 * 4.16+0.37 4.09+0.33

Триглицериды,

ммоль/г 14.51+1.01 13.84+1.36 11.65+1.22 10.71+0.88 *

Свободные жирные

кислоты, мкг/г 2.01+0.14 1.70+0.20 1.54+0.13 * 2.05+0.18

Холестерин, ммоль/г 6.04+0.42 9.32+0.66 * 8.63+0.75 * 8.33+0.56*

Эфиры ХС, ммоль/г 33.28+2.01 30.24+2.81 27.54+2.24 22.99+2.14*

ТГ-липаза,

мкКат/г белка 7.71+1.51 17.57+2.58 * 17.97+2.60 * 18.93+3.51*

Фосфолипаза А2,

мкКат/г белка 12.44+0.99 21.74+1.83 * 52.33+4.75 * 56.42+4.55*

Амплитуда вспыш-

ки, мВ 1.86+0.13 2.49+0.18 * 2.41+0.20 2.38+0.18*

вз», усл. ед. 18.38+1.14 24.46+1.99 * 21.27+1.76 14.89+1.04

Гидроперекиси

липидов, мэкв/г 55.5+3.2 142.1+12.0 * 156.2+14.8 * 217.9+17.0*

Диеновые конъюга-

ты, мкмоль/г 6.32+0.29 14.99+1.08 * 22.30+1.33 30.37+2.10*

МДА, мкмоль/г 5.74+1.27 7.62+0.45 15.60+1.54 * 29.63+2.44*

5. Увеличение конечных продуктов ПОЛ в ткани миокарда при более позднем и незначительном возрастании интенсивности собственного сво-боднорадикального окисления.

Дополнительно на основании морфометрии обычных и гистохимиче-ски окрашенных срезов миокарда были получены морфологические критерии кардиомиопатии при остром ЭТ (табл. 3, рис. 2).

1. Возрастание ОД сосудов более чем на треть от показателей у контрольных животных.

2. Увеличение толщины и/или поперечного сечения КМЦ более чем на 20% и 40% от исходных величин, соответственно.

3. Возрастание числа липидных капель и/или интенсивности свечения срезов на липиды на 50% и 25%, соответственно.

4. Уменьшение интенсивности свечения при окраске на белок более чем на 10%.

5. Разнонаправленность изменений интенсивности окраски на нуклеиновые кислоты возрастание для РНК до 40%, ослабление для ДНК на 20%.

Рисунок 2. Изменения интенсивности окраски миокарда на ДНК, РНК, белок и липиды при остром ЭТ у крыс (в % от содержания в ткани интактных животных).

Таблица 3

Показатели морфометрии миокарда при остром ЭТ у крыс (М+т)

Показатель Контроль Хронический эндотоксикоз

Зч 12 ч 24 ч

Объемные доли, %:

-КМЦ 73,5+3,0 74,0+3,2 75,8+2,6* 65,0+2,4*

- сосуды 2,2+0,2 2,8+0,2* 3,4+0,2* 5,5+0,2*

- сателлиты 5,2+0,4 7,0+0,4 6,2+0,4 5,8+0,4

- соединительная ткань

и инфильтраты 18,5+0,9 16,2+1,4 14,6+1,3 25,7+1,8*

Толщина КМЦ, мкм 40,0+1,6 48,6+1,5* 50,4+2,3* 58,9+1,8*

Поперечное сечение,

мкм1 - КМЦ 148,5+10,1 196,3+13,81* 211,5+6,9* 290,5+6,9*

- ядер КМЦ 26,8+1,8 27,4+1,6 27,9+0,9 24,0+1,3*

Число липидных ка-

пель, на 1 мм2 125,4+11,0 200,1+13,5* 212,7+22,5* 385,0+31,3*

Особенностью острого ЭТ являлось то, что все эти признаки были максимально выражены в наиболее васкуляризованных участках миокарда. Снижение объемной доли КМЦ, клеток-сателлитов и соединительной ткани, по нашим данным, не являются характеристиками острого процесса.

Наличие достоверных корреляционных связей между содержанием ЭТС в плазме крови и перечисленными показателями морфометрии свидетельствуют о. том, что при остром ЭТ продукты нарушенного обмена веществ белковой и липидной природы действительно являются основой токсического повреждения миокарда при остром ЭТ.

Данные о патогенезе острого эндогенного повревдения сердца наиболее подробно освещены в специальных обзорах по стрессу [Меерсон Ф.З., 1984; Пшенникова М.Г., 2001] и в основе своей содержат идеи нервизма. С этих позиций возбуждение высших вегетативных центров приводит к возрастанию концентрации катехоламинов и активации аденилат-циклазы. Это влечет за собой мобилизацию ионов кальция в саркоплазму, уменьшение резерва гликогена и реализацию липидной триады (активация ПОЛ, фосфолипаз и липаз, детергентное действие жирных кислот). В результате этого происходит повреждение лизосомальных мембран и освобождение протеолитических ферментов. Избыток ионов кальция в саркоплазме ведет к контрактуре миофибрилл, нарушению функции митохондрий, активации миофибриллярных протеаз и митохондриальных фосфолипаз, и вновь активирует липидную триаду, усугубляя повреждение. Одновременно под влиянием продуктов ПОЛ возникают разрывы в молекулах ядерной ДНК, которые в большинстве случаев устраняются путем репарации, а в немногих - приводят к разрушению ДНК и гибели клеток [Пшенникова М.Г., 2001; Ибрагимова И.Ф. с соавт, 1997; Непомнящих ЛМ, 2002].

Представленная патогенетическая цепь реализуется не только в кар-диомиоцитах, но и в эндотелии и миоцитах коронарных сосудов, что является основой их первичного спазма, повреждения стенки и тромбообразо-вания, играющего определенную роль в дальнейших нарушениях коронарного кровообращения.

В то же время, часть обнаруженных изменений может быть трактована как признаки компенсаторных и приспособительных изменений в миокарде на стадии острой адаптации к ЭТ. К ним, в первую очередь, следует отнести реакции клеток-сателлитов, а также изменения в элементах вегетативной нервной системы. Изменение тинкториальных свойств пери-карионов и нервных проводников, нарастание их извитости, увеличение содержания РНК в нейронах свидетельствуют о том, что ЭТС при остром процессе не только повреждают часть нейронов, но и стимулируют сохранившиеся клетки. Это неизбежно составляет часть острой адаптации миокарда к воздействию токсинов и продуктов дисметаболизма.

При хроническом ЭТ процесс повреждения миокарда оказывается более сложным и имеет значительное количество внутренних взаимосвязей мевду элементами повреждения и компенсации, свидетельствующее о формировании классической патологической системы по Г.Н. Крыжанов-скому (рис. 3).

ТХМ + ЛПС

30 сут 60 сут 90 сут

Рисунок 3. Динамика показателей биохимических показателей ЭТ, тканевых ацилаз и ЛХАТ внутренних органов по мере нарастания сроков эксперимента (100% - показатели в контрольной группе).

При моделировании хронического ЭТ в плазме крови животных содержание ВСММ, их олигопептидной и липидной фракции было увеличено на всех сроках эксперимента, превышая аналогичные показатели у животных контрольных групп в 1,4 - 3,5 раза Характерным являлось постепенное нарастание концентраций ЭТС с 30-х по 90-е сутки эксперимента

Активность ацилазы печени и почек, как и в сериях с острым ЭТ, оказывалась сниженной более чем 2 раза, активность ЛХАТ уменьшалась в несколько меньшей степени.

Таким образом, как модель ТХМ-гепатофиброза, так и комплексная модель с введением ТХМ и ЛПС позволяла наблюдать дисметаболические изменения в миокарде при хроническом ЭТ.

Морфологические изменения в сердце при хроническом ЭТ имели ряд качественных отличий от острого процесса.

Во-первых, микроциркуляторные нарушения и изменения в стенках коронарных артерий не были столь выраженными и не носили доминирующего характера в ткани сердечной мышцы. Основными проявлениями сосудистых нарушений являлись дезорганизация клеточных элементов со-

судистой стенки, периваскулярный фиброз, гиалиновые пробки в просвете сосудов, в отдельных участках миокарда сочетающиеся с признаками острых нарушений кровообращения.

Во-вторых, типичным для хронического процесса являлось прогрессивное -уменьшение неповрежденных КМЦ, причем явления смешанной дистрофии и/или единичных некрозов клеток уступали место атрофии мышечных элементов. Явления паренхиматозной жировой инфильтрации были выражены весьма умеренно. Мелкие инфильтраты в областях максимального повреждения КМЦ имели лимфомоноцитарный характер. Данные явления прогрессивно нарастали на протяжении всех 90 суток эксперимента. В то же время, начиная с 60 суток, выявлялись отдельные КМЦ в состоянии гипертрофии, что свидетельствовало о развитии внутриорганной компенсации. Характерным моментом морфогенеза наблюдаемых изменений было, как и в остром процессе, их преобладание в максимально васку-ляризованных участках миокарда.

Наконец, наиболее ярким проявлением хронической патологии миокарда при ЭТ становилась тканевая стромальная перестройка, в основе которой лежало накопление клеток-сателлитов, упрощение сосудистой архитектоники миокарда и увеличение соединительнотканных элементов. Характер фиброгенеза можно было определить как диффузный с формированием мелких очагов, расположенных преимущественно периваскулярно.

Все эти признаки позволяли отнести данное состояние к варианту дисметаболической кардиомиопатии, имеющему сходный морфогенез и динамику развития с хроническим поражением миокарда этанолом Исходя из известных литературных данных, в ее развитии основное значение стали приобретать продукты, выделяемые лимфоцитами и моноцитами инфильтратов и распадающимися КМЦ, а значение ЭТС, приносимых с кровотоком от других органов и тканей как бы отходит на второй план [Швалев В.Н. с соавт., 1999; Абидов М Т. с соавт., 2000; Соколова Р.И., Жданов В С , 2002; Grocott M.R. et al., 1998; Booke M„ et al„ 1999].

Возможно, что увеличение объема стромапьных компонентов в миокарде при атрофии определяется потребностями паренхиматозных клеток и направлено на обеспечение более длительного, оптимального для данных условий морфофизиологического уровня функционирования КМЦ. При этом сложная система взаимодействий между клетками соединительной ткани, межклеточным матриксом, нервными окончаниями, клетками паренхимы и микроциркуляторным руслом, осуществляемая посредством различных медиаторов, гормонов, продуктов распада клеток и межклеточного матрикса, координирует и интегрирует всю систему тканевого микрорайона при адаптации к новым условиям [Непомнящих Л М , 1997, 2001J.

Наблюдаемое увеличение относительного объема соединительной ткани связано не только с диспропорциональным уменьшением паренхиматозных компонентов, но и с пролиферативной реакцией стромы. Подобный процесс отмечен и при гипертрофии сердца, развившейся в условиях спонтанной гипертензии у крыс линии SHR и в процессе геронтоге-неза у крыс линии Вистар, а также при гипертрофии сердца, индуцированной стенозом аорты [Червова И.А., 1983; Непомнящих Jl М., 1997].

Интересным моментом исследования стало изучение изменений в вегетативной нервной системе в области сердца.

К 30 суткам эксперимента отчетливо выявлялись мозаичные преобразования в сердечных ганглиях. Часть нейронов находилась в состоянии острого раздражения или дегенерации вплоть и даже нейролиза, другие нейроны были гиперхромными с большим количеством хорошо прокрашенных отростков. При окраске по Браше выявлялось глыбчатое распределения РНК в цитоплазме, гипохромия ядрышек нейронов Эти изменения становились еще более отчетливыми к 60 суткам эксперимента, когда выявлялись также признаки выраженного сателлитоза В поздние сроки опыта указанная динамика сохранялась- степень повреждения нейронов и реакция сателлитов возрастали, количество нейронов в состоянии гиперактивности - несколько снижалось. С учетом известных гистофизиологических сведений, можно было утверждать, что максимальному повреждению подвергались наиболее функционально нагруженные области ганглионарного аппарата сердца - периаортальная и левая предсердная области [Смирнов А В , 1998; Швалев В.Н. с соавт., 1999; Коновалов Г.В., 1989; Цинзерлинг В.А., Антонов П.В., 2000].

Для проводящих нервных элементов характерным являлось резкое изменение архитектоники с исчезновением равномерного рисунка, зональностью по слоям сердца и формированием различных скоплений, расцененных как компонент вторичного токсического поражения и компенсаторных реакций на него Эти изменения монотонно нарастали по мере увеличения сроков эксперимента.

Как известно, изменение адаптационно-трофического воздействия вегетативной нервной системы играет важную роль в генезе трофических нарушений в миокарде при хроническом повреждении По аксонам в миокард поступают не только классические нейромедиаторы, но и большое количество биологически активных нейропептидов: вазоактивный инте-стинальный полипептид, нейропептид У, субстанция Р, нейрокины А и В, энкефалины, соматостатин, бомбезин, кальцитониноген-родственный пептид, гистидин-изолейцин и другие. Таким образом, первостепенное значение для рабочего и проводящего миокарда, а также системы коронарного кровообращения имеет состояние медиаторных регуляторных систем сердца, главным образом, холин- и адренергической [Швалев В.Н. и др., 1992]

При развитии хронической патологии вегетативных ганглиев сердца значительно увеличивается резистентность органа к тормозному воздействию блуждающего нерва [Пшенникова М.Г. 2001], что можно рассматривать как структурную основу нарушений автоматии ритма и сократительной способности миокарда, как функциональных проявлений дисметабо-лической кардиомиопатии.

Морфобиохимическое исследование миокарда при хроническом ЭТ выявило ряд существенных признаков, имеющих достоверные отличия по показателям от нормальных величин, нарастающих во времени и корреляционно связанных с величинами концентраций различных ЭТС (табл. в^еди них было выявлено несколько проявлений, которые можно было отнести к диагностически ценным.

1. Прогрессирующее уменьшение содержания ФЛ и ТГ в ткани сердца.

2. Снижение концентрации свободных жирных кислот

3. Снижение степени эстерификации холестерина

4. Высокое содержание продуктов свободнорадикального окисления липидов при незначительном повышении активности тканевых липаз миокарда.

5. Более чем 10-кратное снижение активности ЛХАТ.

6. Уменьшение концентрации белка в миокарде более чем на треть.

Таблица 4

Показатели липидного обмена в ткани миокарда крыс при хроническом эндотоксикозе

Показатели Контрольная Введение бактериального ЛПС

группа 30 сут 60 сут 90 сут

Общие липиды, г/л 3.79+0.19 2.93+0.30* 3.09+0.24 3.39+0.30

Фосфолипиды, ммоль/г 4.03+0.24 2.44+0.25* 1.79+0.20 1.65+0.15*

Триглицериды, ммоль/г 10.06+0.96 5.76+0.60 2.98+0.23 3.15+0.24 *

Свободные жирные кислоты, мкг/г 1.91+0.13 1.18+0.20 0.83+0.09 0.78+0.09

Холестерин, ммоль/г 3.78+0.24 2.06+0.15* 2.49+0.18* 2.34+0.21*

Эфиры ХС, ммоль/г 9,80+0.17 4.42+0.36 2.39+0.15 2.11+0.16*

ТГ-липаза,

мкКат/г белка 9.63+0.80 10.19+0.95 11.97+2.60 10.99+0.87

Фосфолипаза А2, мкКат/г белка 27.90+3.25 25.01+2.04 22.73+1.71 21.28+2.03*

МДА, мкмоль/г 5.13+0.56 13.96+1.10* 15.16+1.05* 10.81+0.94*

Полученные данные служат дополнительным доказательством того, что в основе дисметаболического повреждения миокарда при хроническом ЭТ лежат процессы, развивающиеся непосредственно в сердечной мышце, а нарушенный приток метаболитов к миокарду имеет несколько меньший вес.

Морфометрическое исследование выявило еще несколько признаков, которые могут быть положены в основу диагностики дисметаболической кардиомиопатии при хроническом ЭТ (табл. 5, рис. 4)

1. Снижение объемной доли КМЦ, их средней толщины и/или сечения на 15% и 25%, соответственно.

2. Уменьшение размеров ядер КМЦ той же выраженности.

3. Увеличение объемной доли соединительной ткани в 1,5 раза и более.

4. Высокое число липидных капель в единице объема ткани и повышение интенсивности окраски на липиды более чем в 1,5 раза

5. Уменьшение интенсивности окраски на белок, ДНК и РНК не мене чем на 20% по каждому показателю.

Средняя толщина и площадь поперечных срезов КМЦ, а также среднее число липидных капель на площади среза миокарда, интенсивность свечения при окрасках на белок, липиды, ДНК и РНК могут являться, таким образом, количественными критериями при морфологической диагностике хронической дисметаболической кардиомиопатии при отсутствии качественных или количественных признаков выраженных микроциркуля-торных нарушений.

Рисунок 4. Изменения интенсивности окраски миокарда на ДНК, РНК, белок н липиды при остром ЭТ у крыс (в % от содержания в ткани интяктиых животных).

Таблица 5

Показатели морфометрии миокарда при хроническом ЭТ у крыс (М+т)

Показатель Контроль Хронический эндотоксикоз

30 сут 60 сут 90 сут

Объемные доли, %:

-КМЦ 71,5+3,0 66,5+3,2* 61,8+2,7* 60,0+2,5*

- сосуды 2,2+0,2 1,8+0,2 1,4+0,2* 1,3+0,2*

- сателлиты 6,2+0,4 5,0+0,4 5,1+0,4 4,8+0,4

- соединительная ткань 19,5+0,9 26,7+1,4* 31,7+0,9* 33,9+1,1*

Толщина КМЦ, мкм 45,2+1,6 35,6+1,5* 30,4+1,3* 28,9+1,8*

Площадь поперечного

сечения, мкм2

-КМЦ 148,5+10,1 126,3+9,89 111,5+6,9* 90,5+6,0*

- ядер КМЦ 28,4+1,8 20,4+1,5* 17,9+0,9* 14,5+1,1*

Число липидных

капель на 1 мм2 118,4+10,2 224,1+17,5* 412,4+31,7* 435,6+36,3*

Увеличение объемной плотности соединительной ткани в миокарде, мы склонны расценивать как компенсаторный процесс.

Дополнительные сведения были получены при морфометрическом исследования парасимпатического аппарата сердца. Изменения затрагивали как тела ганглиоцитов, так и проводящие нервные элементы органа В максимальной степени уменьшалась средняя площадь сечения ядер ганг-лионарных клеток, расположенных в периаортальной области, левой пред-сердной и межпредсердной областях сердца. Увеличение ОП обычно сопровождалось некоторым утолщением нервных волокон интрамуральной системы сердца. Снижение роста объема нейроцитов и их ядер, увеличение объемной плотности глиального компонента свидетельствовало о снижении функциональной активности нейронов и проводящих элементов Дисбаланс в работе вегетативной нервной системы, в сочетании с имеющимися повреждениями КМЦ играет важную роль в генезе фибрилляций желудочков и внезапной сердечной смерти - основы танатогенеза при кар-диомиопатии самой разной этиологии.

Таким образом, пато- и морфогенез дисметаболической кардиомио-патии при хроническом ЭТ имеет комплексный характер и включает в себя, как минимум, элементы переноса ЭТС к сердечной мышцы от других внутренних органов, сосудистые нарушения, собственные (тканевые) нарушения метаболизма, вегетативную дисрегуляцию и тканевую перестройку с преобладанием диффузного компенсированного кардиосклероза

ВЫВОДЫ

1 Морфофункциональные изменения в сердце при остром эндоток-сикозе заключаются в развитии мйкроциркуляторных нарушений с преобладанием повреждения эндотелия капилляров и венул миокарда (с 3 ч), прогрессирующей смешанной дистрофии стромального компонента (с 6-8 ч), кардиомиоцитов и клеток мышечного слоя коронарных сосудов (12-24 ч). Наибольшая выраженность повреждения кардиомиоцитов характерна для участков сердечной мышцы с максимальной васкуляризацией.

2. В пато- и морфогенезе повреждения миокарда при остром эндо-токсикозе основное значение играют продукты нарушенного обмена белков и липидов, приносимые от других внутренних органов. Их токсические эффекты обусловливают сосудистые нарушения, которые опосредуют дальнейшие процессы повреждения стромы и кардиомиоцитов.

3. Наиболее характерными количественными изменениями в миокарде при остром эндотоксикозе являются увеличение активности тканевых липаз, содержания продуктов (но не интенсивности) перекисного окисления липидов, увеличение плотности липидных капель при снижении содержания триглицеридов и степени эстерификации холестерина, увеличение объемной доли сосудов, интенсивности окраски на РНК при снижении интенсивности окраски на ДНК и белок.

4 При хроническом эндотоксикозе изменения в сердце можно отнести к разновидностям дисметаболической кардиомиопатии, в основе которой лежат прогрессирующее уменьшение объемной доли кардиомиоцитов и стромальнО-сосудистая перестройка с развитием диффузного кардиосклероза. Для этих изменений закономерными являются прогрессирующее развитие в течение 30-90 суток процесса и относительно большая зависимость от собственной метаболической перестройки миокарда в сравнении с прямым действием эндогенных токсических соединений, приносимых с кровотоком.

5. При остром, и, в особенности, при хроническом эндотоксикозе, морфологические изменения развиваются в вегетативном аппарате сердца. Они имеют резко выраженный мозаичный характер, включают в себя признаки токсического повреждения нейронов и проводников, нейронофагии с заместительным сателлитозом в сочетании с признаками повышенной функциональной активности части нейронов. Соотношение данных структурных изменений в конкретных ганглиях и нервных проводниках зависит от их исходной функциональной нагруженности, степени васкуляризации и представительства глиальных элементов.

6 Наиболее диагностически ценными признаками повреждения миокарда при хроническом эндотоксикозе являются уменьшение объемной доли, толщины и/или поперечного сечения кардиомиоцитов, содержания в них РНК и ДНК, увеличение объемной доли соединительной ткани в миокарде и признаки хронического токсического повреждения вегетативных ганглиев сердца.

СПИСОК НАУЧНЫХ ТРУДОВ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Изменения липидного обмена в ткани миокарда при хемоиндуци-рованном стрессе // Медико-биологические и психолого-педагогические аспекты адаптации человека: Материалы Всеросс. н.-пр. конф. - Волгоград: ВолГУ, 2002. - С. 63-64. (соавт. В.В.Новочадов).

2. Нарушения липидного обмена и механизмы вторичного повреждения миокарда при ишемии-реперфузии кишечника // Материалы III Всеросс. н. конф. «Гипоксия: механизмы, адаптация, коррекция». - М , 2002 -С. 89. (соавт. В.В.Новочадов).

3 Морфобиохимическое исследование липидов миокарда при экспериментальном эндотоксикозе // Материалы VII региональной конфер молодых ученых Волгоградской области. Направления 17-18. - Волгоград, 2002. - С. 12-14. (соавт. А Н Горячев).

4. Морфобиохимические изменения в ткани миокарда при действии микробного липополисахарида на фоне измененной вегетативной регуляции // Архив клин, и эксперим. медицины (Украина). - 2003. - С. 73 (соавт. В.В.Новочадов).

5. Миокард при эндотоксикозе: механизмы и морфофункциональные проявления вторичного повреждения // Успехи современного естествознания - 2003. - N5. - С. 77-78. (соавт. В В.Новочадов).

6 Развитие дисметаболической кардиомиопатии при хроническом экспериментальном эндотоксикозе // Успехи современного естествознания - 2003. - N8 - С. 109-110. (соавт. В.В.Новочадов).

7. Корреляционный анализ в оценке влияния вегетативной дисрегу-ляции на развитие кардиомиопатии про хроническом эндотоксикозе // Успехи современного естествознания - 2004. - N3. - С. 35-36. (соавт. Д.А.Соснин, В.В.Новочадов).

8. Морфометрическая характеристика миокарда при хроническом экспериментальном эндотоксикозе // Лечение и реабилитация ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС Сб. н тр - Волгоград, 2004. - С. 121-125. (соавт. В.В.Новочадов, В.И.Фролов).

9. Развитие дисметаболической кардиомиопатии при ожоговой токсемии у крыс // Лечение и реабилитация ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС: Сб н. тр. - Волгоград, 2004 -С. 125-126

10. Морфофункциональная характеристика миокарда при хроническом эндотоксикозе на фоне вегетативного дисбаланса // Акт. проблемы современной ревматологии и кардиологии: Сб.н. трудов. - Вып. 21. - Волгоград: НИИ КЭР РАМН, 2004. - С. 192-193. (соавт. В.В.Новочадов, Д.А.Соснин, В.И.Фролов)

11 Морфофункциональная характеристика вегетативных ганглиев сердца при хроническом эндотоксикозе // Вестник ВслГМУ. - 2004 -N11. -С. 10-12. (соавт. В.В Новочадов, В.И.Фролов, С.А.Калашникова).

Подп. в печать 10.09.04. Формат 60 х 84/16 Бум. тип. N1. Печать офсетная. Усл. печ. л. 1.0 Тираж 100. Заказ 35. Волгоградский государственный медицинский университет, 400131, Волгоград, Пл. Павших борцов, 1.

»1873g

РНБ Русский фонд

2005-4 14022

Оглавление диссертации Марков, Дмитрий Евгеньевич :: 2004 :: Волгоград

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. СЕРДЦЕ КАК ОРГАН-МИШЕНЬ ЭНДОГЕННЫХ

ТОКСИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ

1.1. Дисметаболическая кардиомиопатия: современное состояние проблемы

1.2. Морфофункциональные особенности миокарда, способствующие высокой чувствительности к токсическим агентам

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Характеристика материала и экспериментальных моделей

2.2. Методы оценки выраженности эндотоксикоза

2.3. Морфологические методы исследования

2.4. Морфобиохимическое исследование

2.5. Математическая обработка полученных данных

Глава 3. РАЗВИТИЕ И МОРФОФУНКЦИОНАЛЫ1АЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДИСМЕТАБОЛИЧЕСКОЙ КАРДИО-МИОПАТИИ ПРИ ОСТРОМ ЭНДОТОКСИКОЗЕ

3.1. Критерии острого эндотоксикоза.

3.2. Морфологическая характеристика миокарда

3.3. Количественные критерии развития кардиомиопатии

Глава 4. РАЗВИТИЕ И МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДИСМЕТАБОЛИЧЕСКОЙ КАРДИОМИОПАТИИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ЭНДОТОКСИКОЗЕ

4.1. Критерии хронического эндотоксикоза.

4.2. Морфологическая характеристика миокарда

4.3. Количественные критерии развития кардиомиопатии 90 ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ 97 ВЫВОДЫ 108 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации по теме "Патологическая анатомия", Марков, Дмитрий Евгеньевич, автореферат

Актуальность работы.

В современном мире, как подтверждается многочисленными статистическими исследованиями, в структуре патологии в целом, а в структуре причин смерти — в особенности, устойчиво доминируют заболевания сердечно-сосудистой системы. При этом, их патоморфоз в последние десятилетия привел к тому, что на второе место после ишемической болезни, вышли и имеют тенденцию к дальнейшему росту заболевания сердца токсической, дисметаболической природы, описываемые как кардиомиопатии [Непомнящих JI.M., 1998, 2004; Зайратьянц О.В., 2000; Мишнев О.Д., с соавт., 2004; Коваленко B.JL, 2001, 2004; Пальцев М.А., Аничков Н.М., 2001; Richardson P., et al., 1996; Nakano М., 1998; Bengochea L., et al., 1999; Vendemiale G., et al., 1999; Penicaud L., et al., 2000; Drake-Holland A.J., et al., 2001; Lilly L.S., 2003].

Эндотоксикоз (ЭТ) является процессом, при котором нарушения тканевого обмена развиваются не только с самых ранних сроков, но и в дальнейшем начинают играть самостоятельную, подчас ведущую роль в пато- и морфогенезе вторичного повреждения внутренних органов [Симбирцев С.А., Беляков Н.А., 1994; Яковлев М.Ю., 1998, 2002; Мишнев О.Д., Щеголев А.И., 2001; Новочадов В.В., 1998, 2001; Kauschke S.G., et al., 1999; Hoebe K.H., et al., 2000; Diomede L., et al., 2001; Kmiec Z., 2001].

2001; Neiman J, et al., 2000; Eriksson C.J., 2001; Lang C.H., et al., 2001; Nemoto S., et al., 2002; Vona-Davis L., et al., 2002]. В то же время участие в ее развитии тканевых нарушений белкового и липидного метаболизма до настоящего времени остаются малоизученными. Исследование в этом направлении может привести к расширению современных представлений об ЭТ, его органах-мишенях, подходах к диагностике и патогенетической коррекции дисметаболической кардиомиопатии.

Задачи исследования.

1. Изучить морфофункциональные изменения в сердечной мышце при остром и хроническом эндотоксикозе.

2. Изучить содержание белков, спектр липидов, ацилазную и липолитическую активность, состояние свободнорадикального окисления липидов в ткани миокарда при остром и хроническом эндотоксикозе.

3. Показать роль продуктов нарушенного белкового и липидного обмена в пато- и морфогенезе дисметаболической кардиомиопатии при эндотоксикозе.

4. Выявить наиболее информативные морфобиохимические и морфометрические критерии развития дисметаболической кардиомиопатии при эндотоксикозе.

Научная новизна.

Научно-практическая значимость.

Практическая направленность работы определяется возможностью расширения современных представлений о полиорганности патологии при эндотоксикозе, морфологической диагностики его в клинической практике. Полученные данные расширяют представления о пато- и морфогенезе повреждения миокарда при остром и хроническом эндотоксикозе за счет участия в нем продуктов нарушенного метаболизма, а также вегетативной дизрегуляции.

Положения, выносимые на защиту.

1. Основными критериями дисметаболической кардиомиопатии при остром ЭТ являются прогрессирующее уменьшение объемной доли, площади сечения и размеров ядер кардиомиоцитов, а также изменение морфофункциональных характеристик сердечной мышцы (содержание белка, липидов, ДНК, РНК, активность тканевых ферментов межуточного обмена), которые развиваются в отсутствие выраженных признаков ишемии паренхимы, некрозов и заместительного склероза.

2. В основе кардиомиопатии при хроническом ЭТ лежит структурная перестройка миокарда с преобладанием дистрофии и атрофии КМЦ, развитием компенсированного периваскулярного кардиосклероза. Ведущими механизмами этого процесса являются дисметаболические и дизрегуляторные процессы, развивающиеся непосредственно в миокарде.

Апробация работы.

Основные результаты диссертационного исследования докладывались и обсуждались на 60-й и 61-й итоговых конференциях НОМУС Волгоградского государственного медицинского университета (Волгоград, 2002, 2003); VII региональной конференции молодых ученых Волгоградской области (Волгоград, 2002); Всероссийской научно-практической конференции «Медико-биологические и психолого-педагогические аспекты адаптации человека» (Волгоград, 2002); Третьей Всероссийской конференции «Гипоксия: механизмы, адаптация, коррекция» (Москва, 2002); Международной конференции «Центральные и периферические механизмы вегетативной нервной системы» (Донецк, 2003); IV Всероссийской конференции «Гомеостаз и инфекционный процесс» (Сочи, 2003); II Общероссийской конференции с международным участием «Проблемы морфологии» (Сочи, 2003), II и III Международных конференциях «Гомеостаз и эндоэкология» (Хургада, Египет, 2003, 2004).

Реализация и внедрение результатов исследования.

Материалы диссертации внедрены в учебный процесс в Волгоградском государственном медицинском университете, Саратовском государственном медицинском университете, Астраханской государственной медицинской академии. Разработанные методики используются в работе Волгоградского научно-исследовательского противочумного института, Волгоградского областного патолого-анатомического бюро.

Структура и объем диссертации.

Заключение диссертационного исследования на тему "Пато- и морфогенез дисметаболической кардиомиопатии при эндотоксикозе"

ВЫВОДЫ

1. Морфофункциональные изменения в сердце при остром эндотоксикозе заключаются в развитии микроциркуляторных нарушений с преобладанием повреждения эндотелия капилляров и венул миокарда (с 3 ч), прогрессирующей смешанной дистрофии стромального компонента (с 68 ч), кардиомиоцитов и клеток мышечного слоя коронарных сосудов (12-24 ч). Наибольшая выраженность повреждения кардиомиоцитов характерна для участков сердечной мышцы с максимальной васкуляризацией.

2. В пато- и морфогенезе повреждения миокарда при остром эндотоксикозе основное значение играют продукты нарушенного обмена белков и липидов, приносимые от других внутренних органов. Их токсические эффекты обусловливают сосудистые нарушения, которые опосредуют дальнейшие процессы повреждения стромы и кардиомиоцитов.

4. При хроническом эндотоксикозе изменения в сердце можно отнести к разновидностям дисметаболической кардиомиопатии, в основе которой лежат прогрессирующее уменьшение объемной доли кардиомиоцитов и стромально-сосудистая перестройка с развитием диффузного кардиосклероза. Для этих изменений закономерными являются прогрессирующее развитие в течение 30-90 суток процесса и относительно большая зависимость от собственной метаболической перестройки миокарда в сравнении с прямым действием эндогенных токсических соединений, приносимых с кровотоком.

6. Наиболее диагностически ценными признаками повреждения миокарда при хроническом эндотоксикозе являются уменьшение объемной доли, толщины и/или поперечного сечения кардиомиоцитов, содержания в них РНК и ДНК, увеличение объемной доли соединительной ткани в миокарде и признаки хронического токсического повреждения вегетативных ганглиев сердца.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2004 года, Марков, Дмитрий Евгеньевич

1. Абидов М.Т., Нелюбов М.В., Хохлов А.П. и др. Роль макрофагов в патогенезе токсического синдрома, вызванного введением эндотоксина. // Бюлл. экспер. биол. и мед. 2000. -Прил. 3.- С. 20-21.

2. Автандилов Г.Г. Компьютерная микротелефотометрия в диагностической гистоцитопатологии. М.: РМАПО, 1996.- 256 с.

3. Автандилов Г.Г. Основы количественной патологической анатомии. М.: Медицина, 2002. - 240 с.

4. Акмаев И.Г. Нейро-иммунно-эндокринные взаимодействия: их роль в дисрегуляторной патологии // Патол. физиология .- 2001. N4. - С. 310.

5. Алиев Р.Г., Алиханова З.М., Магомедов Ш.М. Роль трансплантации фетальных тканей человека при ревматоидном артрите // Бюлл. экспериментальной биологии и медицины. 1997. - Т. 123, № 6 - С. 698-700.

6. Андреева Л.И., Кожемякин Л.А., Кишкун А.А. Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с тиобарбитуровой кислотой //Лаб. дело. 1988. - N11. - С. 41-43.

7. Арчакова Л.И., Ковалева Н.М., Емельянова А.А. Электронно-микроскопичсекое изучение реакции афферентного звена нервной системы на действие в организме липополисахаридов // Арх. клин, и экспер. медицины (Украина). 2003. - N1. - С. 30.

8. Банин В.В. Роль сосудистого эндотелия в патогенезе синдрома эндогенной интоксикации // Эндогенные интоксикации: Материалы междунар. симпозиума. СПб, 1994. - С. 10-17.

9. Бардахчьян Э.А., Харланова Н.Г., Ломов Ю.М. Ультраструктурные основы полиорганной недостаточности в патогенезе эндотоксинового шока // Патол. физиология 1999. - N3. - С. 22-25.

10. Беляков Н.А., Малахова М.Я. Критерии и диагностика эндогенных интоксикаций // Эндогенные интоксикации. Материалы междунар. симпозиума. СПб, 1994. - С. 60-62.

11. Березовская И.В. Регламентация содержания лабораторных животных в токсикологическом эксперименте // Ланималогия 1993. - N1. -С. 42-43.

12. Биленко М.В., Ладыгина В.Г., Федосова С.В. Сравнительная характеристика цитотоксического эффекта перекиси водорода и ФИО на неишемизированные и ишемизированные эндотелиальные клетки // Вопр. мед. химии. 1998. - N11. - С. 229.

13. Богомолова Н.В. Бактериальный эндотоксикоз (пато и морфогенез): Автореф. дис. доктора мед. наук. М., 1993. - 34 с.

14. Гельфанд Б.Р. Сепсис: современное состояние проблемы // Инфекции и антимикробная терапия. 2001. - №3. - С. 69-70.

15. Глумов В.Я., Кирьянов Н.А., Баженов Е.Л., Иванова Г.С. Перитонеальный эндотоксикоз, морфология и морфогенез поражений биосистем экспериментальных животных // Бюлл. эксперим. биологии и медицины 1994. - N12. - С. 636-639.

16. Голиков П.П., Николаева Н.Ю., Гавриленко И.А. и др. Оксид азота и перекисное окисление липидов как факторы эндогенной интоксикации // Патол. физиология. 2000. - N2. - С. 6-9.

17. Гольфарб Ю.С., Казачков В.И., Лужников Е.А. и др. Неотложная терапия острых отравлений и эндотоксикозов: Спр. рук-во. -М.: Медицина, 2001. 304 с.

18. Грачев С.В., Ярошенко И.Ф., Новочадов В.В., Якунин Г.А. Гемо- и лимфостаз при эндотоксемии // Клин. лаб. диагностика 1992. -N.6-7.- С. 6-10.

19. Гринев М.В., Голубева А.В. Проблема полиорганной недостаточности // Вестн. хирургии. 2001. - №3. - С. 110-114.

20. Еськов А.П., Каюмов Р.И., Соколов А.Е. и др. Эндотоксикоз: модель и лабораторная диагностика // Токсикол. вестник — 2001. — N4. С. 13-16.

21. Зайцев В.М., Лифляндский В.Т., Маринкин В.И. Прикладная медицинская статистика. СПб, 2003. - 430 с.

22. Ковалева Н.М., Новаковская С.А., Арчакова Л.И. Морфофункциональная характеристика вегетативных узлов при введении в организм липополисахаридов // Арх. клин, и экспер. медицины (Украина). -2003. -N1. С. 38.

23. Коротько Г.Г., Решетов И.В., Бровко В.Н. Маркеры эндогенной интоксикации по данным капиллярного электрофореза ТХУ-супернатанта // Клин. лаб. диагностика 2001. - N8.-С. 14-17.

24. Крыжановский Г.Н. Некоторые общебиологические закономерности и базовые механизмы развития патологических процессов // Архив патологии 2001. - N6. - С. 44-47.

25. Курляндский Б.А., Филов В.А. Общая токсикология. М.: Медицина, 2002. - 608 с.

26. Лиходед В.Г., Ющук Н.Д., Яковлев М.Ю. Роль эндотоксина грамотрицательных бактерий в инфекционной и неинфекционной патологии // Арх. патологии 1996. - N2. - С. 8-13.

27. Лычкова А.Э., Смирнов В.М. К вопросу о влиянии фосфолипидного состава тканей на реализацию синергизма между отделами вегетативной нервной системы // Бюлл. экспер. биол. и медицины 2002. -N4.-С. 364-366.

28. Малахова М.Я. Метод оценки эндогенной интоксикации.- СПб, 1995.-72 с.

29. Мишнёв О.Д., Щеголев А.И., Лысова Н.Л., Тинькова И.О. Печень и почки при эндотоксемии. М.: РГМУ, 2003. - 210 с.

30. Молдавская А.А., Журавлева Г.Ф., Врочинский К.К. Морфо-функциональные аспекты проявления токсикоза у рыб. — Астрахань, 2003. — 182 с.

31. Мушкамбаров Н.Н., Кузнецов С.Л. Молекулярная биология. -М.: МИА, 2003. 544 с.

32. Недоспасов А.А. Биогенный NO в конкурентных отношениях // Биохимия 1998.-Т. 63,N8.-С. 122-132.

33. Непомнящих Л.М., Лушникова Е.Л., Семенов Д.Е. Паренхиматозно-стромальные отношения в миокарде: регенераторно-пластическая недостаточность кардиомиоцитов и развитие диффузного кардиосклероза// Бюлл. эксп. биол. и медицины. -2001. — N7. С. 103-109.

34. Непомнящих Л.М., Циммерман В.Г. Преднекротические контрактурные повреждения кардиомиоцитов: фотохимическое флюорохромирование и люминесцентная микроскопия миокарда // Бюлл. экспер. биол. и медицины 2001. - N9. - С. 343-349.

35. Новиков В.Д. Оценка взаимоотношений структуры и функции с позиций теории функциональных систем // Морфология 2002. - N5. - С. 19-24.

36. Новочадов В.В. Морфофункциональная характеристика тканей внутренних органов при эндотоксикозе в остром эксперименте // Акт. вопросы патол. и нормальной морфологии: Матер, республ. н.-пр. конференции Ижевск, 1999.- С. 171-173.

37. Новочадов В.В., Писарев В.Б. Моделирование эндотоксикоза прямым введением олигопептидных и липидных компонентов веществсредней молекулярной массы // Вестник Волгогорадской мед. академии -N5. Волгоград, 1999,-С. 15-17.

38. Новочадов В.В. Патология липидного обмена при эндотоксикозе: Автореферат дисс. . доктора мед. наук. Волгоград, 2001. - 35 с.

39. Новочадов В.В. Моделирование острого и хронического эндотоксикоза: формат проблемы // Успехи современного естествознания — 2004. -N3.- С. 24.

40. Новочадов В.В. Состав и биологические эффекты in vitro липидов, полученных из среднемолекулярной фракции плазмы крови животных с эндотоксемией // Вестник ВолГМУ 2004. - N10. - С. 11-13.

41. Новочадов В.В. Кибальникова Р.И. Микрометод разделения липидов на пластинках "Силуфол" // Новые материалы и методы в медицине. Тр. ВМА, Т. 51., вып 2. Волгоград, 1995.- С. 65-67.

42. Павлович Е.Р. Ультраструктура миокарда сердца кролика в поздние сроки иммобилизационного стресса // Бюлл. эксп. биол. и медицины. -2001.-N7. -С. 99-102.

43. Пальцев М.А., Иванов А.А. Межклеточные взаимодействия. М.: Медицина, 1995. С. 224.

44. Пальцев М.А., Аничков Н.М. Патологическая анатомия. В 2-х т. Т. 2 (ч. 1). М.: Медицина, 2001. - 736 с.

45. Пермяков Н.К., Яковлев М.Ю. Сердце при эндотоксиновом шоке // Патол. физиология. 1990. N 2. С. 45-48.

46. Персидский Ю.В., Барнштейн Ю.А. Биологические проявления действия фактора некроза опухоли и его роль в патогенезе ряда заболеваний // Арх. патологии 1992. - Т.54, N1. - С. 5-10.

47. Петров В.И. (ред.) Основы клинической фармакологии и фармакотерапии. М.: Альянс-В, 2002. - 816 с.

48. Писарев В.Б. Морфофункциональная организация гипоталамуса при ишемической болезни сердца: Автореф. дис. . доктора мед. наук. М., 1990. - 24 с.

49. Пшенникова М.Г. Феномен стресса: Эмоциональный стресс и его роль в патологии // Актуальные проблемы патофиологии: избранные лекции / Под ред. акад. РАМН Б.Б.Мороза. М.: Медицина, 2001. - С. 220339.

50. Робинсон М.В., Труфакин В.А. Апоптоз и цитокины // Усп. совр. биологии 1999.-Т. 119, N4.-С. 359-367.

51. Савельев B.C., Гельфанд Б.Р., Филимонов М.И. и др. Системная воспалительная реакция и сепсис при панкреонекрозе // Анестезиол. и реаниматол.- 1999.- № 6.- С. 28-33.

52. Саркисов Д.С., Перов Ю.Л. Руководство по гистологической технике. М.: Медицина, 1996. - 242 с.

53. Симбирцев С.А., Беляков Н.А. Патофизиологические аспекты эндогенных интоксикаций // Эндогенные интоксикации. Матер, междунар. симпозиума. СП, 1994. - С. 5-9.

54. Степанова И.П. Метаболические интегральные индексы эндотоксикоза: автореф. дис. . кандидата мед. наук. — Омск, 1999. 19 с.

55. Судаков К.В. Новые аспекты классической концепции стресса // Бюл. экспер. биологии и медицины 1997. - N2. - С. 124-130.

56. Тарасенко J1.M., Непорада К.С., Скрыпкин И.Н. и др. Зависимость реакции соединительной ткани на стресс от типологических свойств организма // Патол. физиология 2000. - N2. — С. 17-19.

57. Тарасова Т.В., Дубовская Т.Н., Саушев И.В. и др. Модель эндотоксикоза // Клинико-экспериментальные аспекты современной медицины: Матер, н. конфер. Ч. 2. - Саранск, 1999. - С. 22-24.

58. Теричев А.Е., Бакайкин В.М., Кокорев А.В. Влияние продуктов эндотоксикоза на миокард при остром перитоните на фоне комплексной терапии // Гистологическая наука России в начале XXI века: итоги, задачи, перспективы. М.: РУДН, 2003. - С. 271-272.

59. Ткачев В.К., Захаров В.Ю., Ткачев П.В., Еськов А.П. Эндотоксикоз в хирургической практике // Матер, юбил. н.-пр. конфер., посвященной 30-летию каферды и 25-летию клинической базы. М., 1999. -С. 101-102.

60. Трахтенберг И.М. Проблема нормы в токсикологии. М.: Медицина, 1991.-208 с.

61. Тютиков В.В. Эфферентная детоксикация при полиорганной недостаточности в условиях острого экзо- и эндотоксикоза: Автореф. дис. . доктора мед. наук. Новосибирск, 1997. - 66 с.

62. Учайкин В.Ф., Молочный В.П. Инфекционные токсикозы у детей. М.: Издательство РАМН, 2002. 248 с.

63. Фрейдлин И.С., Шейкин Ю.А. Эндотелиальные клетки в качетсве мишеней и продуцентов цитокинов // Мед. иммунология 2001. -N4.-С. 499-514.

64. Харланова Н.Г. Закономерности биологического действия эндотоксина Е. Coli на ультраструктуру органов-мишеней: Автореф. . дис. доктора биол. наук. М., 2001. - 37 с.

65. Чарыева И.Г., Князева JI.A., Липатова В.А., Пылаев А.С. Сравнительное исследование проницаемости гематоганглионарных барьеров автономных нервных узлов // Актуальные проблемы морфологии: Тр. Сибирского мед. ун-та. Томск, 2002. - С. 75-76.

66. Червонская Г. П., Панкратова Г. П., Миронова Л. Л. и др. Этика медико-биологического эксперимента в доклинических исследованиях. // Токсикол. вестн. 1998. - N 3. - С. 2-8.

67. Чеснокова Н.П., Михайлов А.В., Моррисон В.В. Воспаление. Клинические и патофизиологические аспекты. Саратов: изд-во СМУ, 1999.- 166 с.

68. Чумаков П.М. Функция гена р53: выбор между жизнью и смертью // Биохимия 2000. - Т. 65, N1. - С. 34-47.

69. Яковлев М.Ю. Системная эндотоксемия в физиологии и патологии человека: Автореф. дис. . доктора мед. наук. М., 1993. - 55 с.

70. Яковлев М.Ю., Лиходед В.Г., Аниховская И.А. и др. Эндотокси-ниндуцированные повреждения эндотелия // Арх. патол. 1996. N2. С. 41-45.

71. Яковлев М.Ю.: Yakovlev М. Elements of endotoxin theory of human physiology: systemic endotoxinemia, endotoxin aggression and endotoxin insufficiency // J. Endotoxin Res. 2000. - Vol. 6. - P. 120.

72. Ярилин A.A. Апоптоз: природа феномена и его роль в норме и при патологии //Актуальные проблемы патофизиологии: избранные лекции / Под ред. Б.Б.Мороза. М.: Медицина, 2001. - С. 13-56.

73. Aldeguer X., Debonera F., Shaked A. Interleukin-6 from intrahepatic cells of bone marrow origin is required for normal murine liver regeneration. // Hepatology. -2002. Vol. 35, Nl.-P. 40-48.

74. Andonegui G., Goyert S.M., Kubes P. Lipopolysaccharide-induced leukocyte-endothelial cell interactions: a role for CD 14 versus toll-like receptor 4 within microvessels // J. Immunol. 2002. - Vol. 169, N4. - P. 2111 -2119.

75. Asakura H., Suga Y., Aoshima K., et al. Marked difference in pathophysiology between tissue factor- and lipopolysaccharide-induced disseminated intravascular coagulation models in rats. // Crit. Care Med. 2002. -Vol. 30,Nl.-P. 161-164.

76. Bathe O.F., Rudston-Brown В., Chow A. W., Phang P.T. Gut is not a source of cytokines in a porcine model of endotoxicosis // Surgery 1996. -Vol. 120, N3.-P. 522-533.

77. Bolger A.P., Sharma R., von-Haehling S. et al. Effect of interleukin-10 on the production of tumor necrosis factor-alpha by peripheral blood mononuclear cells from patients with chronic heart failure // Am. J. Cardiol. -2002. Vol. 90, N4. - P. 384-389.

78. Bowden R.A., Ding Z.M., Donnachie E.M. et al. Role of alpha4 integrin and VCAM-1 in CD18-independent neutrophil migration across mouse cardiac endothelium // Circ. Res. 2002. -Vol. 90, N5. - P. 562-569.

79. Burg J., Krump-Konvalinkova V., Bittinger F., Kirkpatrick C.J. GM-CSF expression by human lung microvascular endothelial cells: in vitro and in vivo findings. // Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 2002. - Vol. 283, N2. - L460-L467.

80. Cheng Y.J., Yang B.C., Hsieh W.C., et al. Enhancement of TNF-alpha expression does not trigger apoptosis upon exposure of glial cells to lead and lipopolysaccharide. //Toxicology.- 2002. -Vol. 178,N3. P. 183-191.

81. Cho S., Kim C.H., Cubells J.F., et al. Variations in the dopamine beta-hydroxylase gene are not associated with the autonomic disorders, pure autonomic failure, or multiple system atrophy. // Am. J. Med. Genet. — 2003, -Vol. 120A, N2.-P. 234-236.

82. Comporti M. Lipid peroxidation and biogenic aldehydes: from the identification of 4-hydroxynonenal to further achievements in biopathology // Free Radic. Res. 1998. - Vol. 28, N6. - P. 623-635.

83. Deitch E.A., Rutan R., Waymack J.P. Trauma, shock, and gut translocation // New. Horiz. 1996. - Vol. 4.- P. 289-299.

84. Diemel R.V., Walch M., Haagsman H.P., Putz G. In vitro and in vivo intrapulmonary distribution of fluorescently labeled surfactant. // Crit. Care Med. 2002. - Vol. 30, N5. - P. 1083-1090.

85. Eisenbarth S.C., Piggott D.A., Huleatt J.W. et al. Lipopoly-saccharide-enhanced, toll-like receptor 4-dependent T helper cell type 2 responses to inhaled antigen // Exp. Med. 2002. - Vol. 196, N12. - P. 1645-1651.

86. Fan J., Kapus A., Marsden P.A., et al. Regulation of Toll-like receptor 4 expression in the lung following hemorrhagic shock and lipopolysaccharide.//J. Immunol. 2002.-Vol. 168, N10.-P. 5252-5259.

87. Farghali H., Canova N., Gaier N.; Inhibition of endotoxemia-induced nitric oxide synthase expression by cyclosporin A enhances hepatocyte injury in rats: amelioration by NO donors. // Int. Immunopharmacol. 2002. -Vol. 2, N1. - P. 117-127.

88. Gayle D.A., Ling Z., Tong C., et al. Lipopolysaccharide (LPS)-induced dopamine cell loss in culture: roles of tumor necrosis factor-alpha, interleukin-lbeta, and nitric oxide. // Brain Res. Dev. Brain Res. 2002 Jan 31.-Vol. 133, N1.-P. 27-35.

89. Gibbins I.L., Jobling P., Morris J.L. Functional organization of peripheral vasomotor pathways. // Acta Physiol. Scand. 2003. — Vol. 177, N3. -P. 237-245.

90. Giusti-Paiva A., De-Castro M., Antunes-Rodrigues J., et al. Inducible nitric oxide synthase pathway in the central nervous system and vasopressin release during experimental septic shock. // Crit. Care. Med. 2002.-Vol. 30, N6. - P. 1306-1310.

91. Gourine A. V., Gourine V.N., Tesfaigzi Y.,et al. Role of alpha (2)-macroglobulin in fever and cytokine responses induced by lipopolysaccharide in mice. // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Сотр. Physiol. 2002.-Vol. 283, N1. - P. R218-226.

92. Grocott M.R., Shah A.M. Cardiac dysfunction in sepsis: new theories and clinical implication. // Intensive Care Med. 1998. - Vol. 24. -P. 286295.

93. Hagberg H., Peebles D., Mallard C. Models of white matter injury: comparison of infectious, hypoxic-ischemic, and excitotoxic insults. // Ment. Retard. Dev. Disabil. Res. Rev. 2002. - Vol. 8, N1. - P. 30-38.

94. Han D.W. Intestinal endotoxemia as a pathogenetic mechanism in liver failure. // World J. Gastroenterol. 2002. - Vol. 8, N6. - P. 961-965.

95. Ilocherl K., Dreher F., Kurtz A., Bucher M. Cyclooxygenase-2 inhibition attenuates lipopolysaccharide-induced cardiovascular failure // Hypertension. 2002. - Vol. 40, N6. - P. 947-953.

96. Hoebe K.H., Monshouwer M., Witkamp R.F., et al. Cocultures of porcine hepatocytes and Kupffer cells as an improved in vitro model for the study of hepatotoxic compounds // Vet. Q. 2000. - Vol. 22, N1. - P. 21-25.

97. Hofseth L.J., Saito S., Hussain S.P., et al. Nitric oxide-induced cellular stress and p53 activation in chronic inflammation. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-2003.-Vol. 100, N1.-P. 143-148.

98. Ishikawa K., Mochida S., Mashiba S., et al. Expressions of vascular endothelial growth factor in nonparenchymal as well as parenchymal cells in rat liver after necrosis // Biochem. Biophys, Res. Commun. 1999. - Vol. 254, N3. -P. 587-593.

99. Iwai-Kanai E., Hasegawa K., Fujita M. et al. Basic fibroblast growth factor protects cardiac myocytes from iNOS-mediated apoptosis // J. Cell. Physiol. -2002.-Vol. 190, N1. P. 54-62.

100. Jeohn G.H., Cooper C.L., Jang K.J., et al. Go6976 inhibits LPS-induced microglial TNFalpha release by suppressing p38 MAP kinase activation. // Neuroscience. 2002.-Vol. 114, N3. - P. 689-697.

101. Jermendy G. Clinical consequences of cardiovascular autonomic neuropathy in diabetic patients. // Acta Diabetol. 2003. - Vol. 40, Suppl. 2. -S370-S374.

102. Karayaylali I., San M., Kudaiberdieva G., et al. Heart rate variability, left ventricular functions, and cardiac autonomic neuropathy in patients undergoing chronic hemodialysis. // Ren. Fail. 2003. - Vol. 25, N5. - P. 845-853.

103. Kawano H., Okada R., Yano K. Histological study on the distribution of autonomic nerves in the human heart // Heart Vessels. — 2003. -Vol. 18, N1.-P. 32-39.

104. Khadour F.H., Panas D., Ferdinandy P. et al. Enhanced NO and superoxide generation in dysfunctional hearts from endotoxemic rats // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2002. - Vol. 283, N3. - P. 1108-1115.

105. Koay M.A., Gao X., Washington M.K., et al. Macrophages are necessary for maximal nuclear factor-kappa В activation in response to endotoxin. // Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. 2002. - Vol. 26, N5. - P. 572-578.

106. Kono H., Asakawa M., Fujii H., et al. Edaravone, a novel free radical scavenger, prevents liver injury and mortality in rats administered endotoxin. // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2003. - Vol. 307, Nl.-P. 74-82.

107. Kotake Y., Sang H., Tabatabaie Т., et al. Interleukin-10 overexpression mediates phenyl-N-tert-butyl nitrone protection from endotoxemia. // Shock. 2002. - Vol. 17, N3. - P. 210-216.

108. Koulchitsky S.V., Subbotin O.V, Azev O.A., et al. NO-ergic mechanisms are implicated in a disturbed cardiac rhythm after systemic application of lipopolysaccharide E. coli to rats // Auton. Neurosci. 2002. -Vol. 98,N1-2.-P. 99-101.

109. Kubes P., Payne D., Woodman R.C. Molecular mechanisms of leukocyte recruitment in postischemic liver microcirculation. // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 2002. - Vol. 283, N1. - G139-G147.

110. Kushwaha S.S., Fallon J.T., Fuster V.F. Medical progress: restrictive cardiomyopathy//N. Engl. Med. J. 1997. - Vol. 336. - P. 267-276.

111. Lecour S., Chevet D., Maupoil V., et al. Intrarenal detection of nitric oxide using electron spin resonance spectroscopy in hypertensive lipopolysaccharide-treated rats. // J. Cardiovasc. Pharmacol. 2002. - Vol. 40, Nl.-P. 9-17.

112. Ledeboer A., Binnekade R., Breve J.J., et al. Site-specific modulation of LPS-induced fever and interleukin-1 beta expression in rats by interleukin-10. //Am. J. Physiol. Regul. Integr. Сотр. Physiol. -2002.-Vol. 282, N6. R1762-R1772.

113. Li C.Y., Chou T.C., Lee C.H., et al. Adrenaline inhibits lipopolysaccharide-induced macrophage inflammatory protein-1 alpha in human- monocytes: the role of beta-adrenergic receptors. // Anesth. Analg. 2003. - Vol. 96, N2. - P. 518-523.

114. Lilly L.S.: Лили Л. Патофизиология заболеваний сердечнососудистой ситемы. М.: Бином, 2003. - 582 с.

115. Marian A.J., Roberts R. Recent advances in the molecular genetics of hypertrophic cardiomyopathy // Circulation 1995. - Vol. 92. - P. 1336-1347.

116. Maser R.E., Mitchell B.D., Vinik A.I., Freeman R. The association between cardiovascular autonomic neuropathy and mortality in individuals with diabetes: a meta-analysis. // Diabetes Care. 2003. - Vol. 26, N6. - P. 18951901.

117. Mason C.M., Dobard E,, Kolls J., Nelson S. Effect of alcohol on bacterial translocation in rats // Alcohol. Clin. Exp. Res. 1998. - Vol. 22, N8. -P. 1640-1545.

118. Medan D., Wang L., Yang X., et al. Induction of neutrophil apoptosis and secondary necrosis during endotoxin-induced pulmonary inflammation in mice.//J. Cell. Physiol. 2002. - Vol. 191, N3.-P. 320-326.

119. Meng X., Harken A.H. The interaction between Hsp70 and TNF-alpha expression: a novel mechanism for protection of the myocardium against post-injury depression // Shock. 2002. - Vol. 17, N5. - P. 345-353.

120. Merlin Т., Woelky-Bruggmann R., Fearns C., et al. Expression and role of CD 14 in mice sensitized to lipopolysaccharide by Propionibacterium acnes. // Eur. J. Immunol. 2002.-Vol. 32, N3. - P. 761-772.

121. Montosi G., Garuti C., Iannone A., Pietrangelo A. Spatial and temporal dynamics of hepatic stellate cell activation during oxidant-stress-induced fibrogenesis // Am. J. Pathol.- 1998.-Vol. 152, N5.-P. 1319-1326.

122. Nemoto S., Vallejo J.G., Knuefermann P. et al. Escherichia coli LPS-induced LV dysfunction: role of toll-like receptor-4 in the adult heart // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2002. -Vol. 282, N6. - P. 2316-2323.

123. Okada Т., Zinchuk V.S., Seguchi H. et al. Lipopolysaccharide administration increases acid and alkaline phosphatase reactivity in the cardiac muscle // Microsc. Res. Tech. 2002. - Vol. 58, N5. - P. 421-426.

124. Okada M., Nishikibe M. BQ-788, a selective endothelin ET(B) receptor antagonist. // Cardiovasc. Drug Rev. 2002. - Vol. 20, N1. - P. 53-66.

125. Ostos M.A., Recalde D., Zakin M.M. et al. Implication of natural killer T cells in atherosclerosis development during a LPS-induced chronic inflammation // FEBS. Lett. 2002. - Vol. 519, N1-3. - P. 23-29.

126. Raeburn C.D., Calkins C.M., Zimmerman M.A. et al. ICAM-1 and VCAM-1 mediate endotoxemic myocardial dysfunction independent of neutrophil accumulation. //Am. J. Physiol. Regul. Integr. Сотр. Physiol. -2002. -Vol. 283, N2. P.477-486.

127. Raeburn C.D., Dinarello C.A., Zimmerman M.A. et al. Neutralization of IL-18 attenuates lipopolysaccharide-induced myocardial dysfunction // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2002. - Vol. 283, N2. -P.650-657.

128. Remick D.G. Pathophysiologic alterations induced by TNF // Int. Rev. Exp. Pathol. 1993. - Vol. 34, N B. - P. 7-25.

129. Richardson P., et al., McKenna W., Bristow M., et al. Report-1995 of WHO and Federation of Cardiology Task Force on the definition and classification of cardiomyopathies // Circulation 1996. - Vol. 93. - P. 841-842.

130. Risco С., Pinto-da-Silva P. Cellular functions during activation and damage by pathogens: immunogold studies of the interaction of bacterial endotoxins with target cells // Microsc. Res. Tech. 1995. - Vol. 31, N2. - P. 141-158.

131. Sakamoto S., Okanoue Т., Itoh Y. Involvement of Kupffer cells in the interaction between neutrophils and sinusoidal endothelial cells in rats. // Shock. 2002. - Vol. 18, N2.-P. 152-157.

132. Sanz N., Diez-Fernandez C., Alvarez A.M., et al. Age-related changes on parameters of experimentally-induced liver injury and regeneration // Toxicol. Appl. Pharmacol. 1999. - Vol. 154, N1. - P. 40-49.

133. Schmid C.D., Sautkulis L.N., Danielson P.E., et al. Heterogeneous expression of the triggering receptor expressed on myeloid cells-2 on adult murine microglia. // J. Neurochem. 2002. - Vol. 83, N6. - P. 1309-1320.

134. Schoemaker M.H., Ros J.E., Homan M., et al. Cytokine regulation of pro- and anti-apoptotic genes in rat hepatocytes: NF-kappaB-regulated inhibitor of apoptosis protein 2 (cIAP2) prevents apoptosis. // J. Hepatol. 2002. - Vol. 36, N6. - P. 742-750.

135. Schromm А.В., Brandenburg K., Rietschel E.T. et al. Lipopolysaccharide-binding protein mediates CD14-independent intercalation of lipopolysaccharide into phospholipid membranes // FEBS Lett. 1996. - Vol. 399, N3.-P. 267-271.

136. Schulman C.I., Wright J.K., Nwariaku F. et al. The effect of tumor necrosis factor-alpha on microvascular permeability in an isolated, perfused lung // Shock. 2002. - Vol. 18, N1. - P.75-81.

137. Schumacker P.T. Kazaglis J., Connolly H.V. et al. Systemic and gut 355 extraction during endotoxemia. Role of nitric oxide synthesis // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1995.-Vol. 151, N1.-P. 107-115.

138. Schumann R.R., Zwieger J. A novel acute-phase marker: Lipopolysaccharide binding protein (LBP) // Clin. Chem. Lab. Med. 1999. -vol.37, N3.-P. 271-274.

139. Schwartz D.A. TLR4 and LPS hyporesponsiveness in humans // Int. J. Hyg. Environ. Health. 2002. - Vol. 205, N3. - P. 221-227.

140. Sharshar Т., Gray F., Lorin-de-la-Grandmaison G., et al. Apoptosis of neurons in cardiovascular autonomic centres triggered by inducible nitric oxide synthase after death from septic shock // Lancet. 2003. - Iss. 362, N9398. -P. 1799-1805.

141. Shimizu Y., Margenthaler J.A., Landeros K. et al. The resistance of P. acnes-primed interferon gamma-deficient mice to low-dose lipopolysaccharide-induced acute liver injury. // Hepatology. 2002. - Vol. 35, N4.-P. 805-814.

142. Shotton H.R., Clarke S., Lincoln J. The effectiveness of treatments of diabetic autonomic neuropathy is not the same in autonomic nerves supplying different organs // Diabetes. 2003. - Vol. 52, N1. - P. 157-164.

143. Steiger D., Hotchkiss J., Bajaj L., et al. Concurrent increases in the storage and release of mucin-like molecules by rat airway epithelial cells in response to bacterial endotoxin // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1995. - Vol. 12, N3.-P. 307-314.

144. Stern J.E., Zhang W. Preautonomic neurons in the paraventricular nucleus of the hypothalamus contain estrogen receptor beta. // Brain. Res. 2003. -Iss. 975, N1-2.-P. 99-109.

145. Stolz D.B., Zamora R., Vodovotz Y., et al. Peroxisomal localization of inducible nitric oxide synthase in hepatocytes. // Hepatology. 2002. - Vol. 36,N1.-P. 81-93.

146. Straub R.H., Besedovsky H. Integrated-evolutionary, immunological, and neuroendocrine framework for the pathogenesis of chronic disabling inflammatory diseases//FASEB J. 2003. - Vol. 17.-P. 2176-2183.

147. Swank G.M., Deitch E.A. Role of the gut in multiple organ failure: bacterial translocation and permeability changes // World J. Surg. 1996. - Vol. 20, N4.-P. 411-417.

148. Tabuchi Y., Furuhama K. Protective effect of DS-4574, a peptidoleukotriene receptor antagonist, against endotoxin-induced intestinal injury in rats. // Eur. J. Pharmacol. 1995. - Vol 273, N3. - P. 281-284.

149. Tang X., Neckel N.D., Schramm L.P. Locations and morphologies of sympathetically correlated neurons in the T(10) spinal segment of the rat. // Brain. Res. 2003. - Iss. 976, N2. - P. 185-193.

150. Tang Z.L., Wasserloos K.J., Liu X. et al. Nitric oxide decreases the sensitivity of pulmonary endothelial cells to LPS-induced apoptosis in a zinc-dependent fashion // Mol. Cell. Biochem. 2002. - Vol. 234-235. - P. 211-217.

151. Tasaka S., Ishizaka A., Yamada W., et al. Effect of CD 14 blockade on endotoxin-induced acute lung injury in mice. // Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. -2003.-Vol. 29, N2.-P. 252-258.

152. Tashiro К. Li W.Z., Yamada К. et al. Surfactant replacement reverse respiratory failure induced by intratracheal endotoxin in rats // Crit. Care Med. -1995.-Vol. 23, Nl.-P. 149-156.

153. Tazi K.A., Barriere E., Moreau R., et al. Role of shear stress in aortic eNOS up-regulation in rats with biliary cirrhosis. // Gastroenterology. 2002. -Vol. 122, N7. - P.1869-1877.

154. Terao A., Apte-Deshpande A., Dousman L., et al. Immune response gene expression increases in the aging murine hippocampus. // J. Neuroimmunol.- 2002. Vol. 132, N1-2. - P. 99-112.

155. Thomas J.A., Tsen M.F., White D.J., Horton J.W. IRAK contributes to burn-triggered myocardial contractile dysfunction // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2002. - Vol. 283, N2. - P. 829-836.

156. Thomas J.R., Harlan J.M., Rice C.L., Winn R.K. Role of leukocyte CD11/CD18 complex in endotoxic and septic shock in rabbits // J. Appl. Physiol.- 1992.-Vol. 73, N4.-P. 1510-1516.

157. Thomas N.J., Carcillo J.A., Herzer W.A., et al. Type IV phosphodiesterase inhibition improves cardiac contractility in endotoxemic rats. // Eur. J. Pharmacol. 2003. - Vol. 465, N1-2. - P. 133-139.

158. Thompson R.H., Swanson L.W. Structural characterization of a hypothalamic visceromotor pattern generator network // Brain Res. Brain Res. Rev. 2003. - Vol. 41, N2-3. - P. 153-202.

159. Tomaszewsky K.E., Harries G.C., Jeffrey P. The production of hepatic cirrhosis in rats//J. Appl. Toxicol. 1991.-Vol. 11, N3. - P. 229-231.

160. Tygstrup N., Bangert K., Ott P., Bisgaard H.C. Messenger RNA profiles in liver injury and stress: a comparison of lethal and nonlethal rat models. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002. - Vol. 290, N1. - P. 518-525.

161. Tzeng H.P., Ho F.M., Chao K.F., et al. beta-Lapachone reduces endotoxin-induced macrophage activation and lung edema and mortality. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2003. - Vol. 168, N1. - P. 85-91.

162. Tzeng S.F., Lee J.L., Kuo J.S., et al. Effects of malonate C60 derivatives on activated microglia. // Brain Res. 2002. - Vol. 940, N1-2. - P. 61-68.

163. Ulich T.R., Howard S.C., Remick D.G. et al. Intratracheal administration of endotoxin and cytokines. VI. Antiserum to CINC inhibits acute inflammation //Am. J. Physiol. 1995. - Vol. 268, N2, Pt. 1. - L245-L250.

164. Vasselon Т., Hanlon W.A., Wright S.D., Detmers P.A. Toll-like receptor 2 (TLR2) mediates activation of stress-activated MAP kinase p38. // J. Leukoc. Biol. 2002. - Vol. 71, N3. - P. 503-510.

165. Vona-Davis L., Wearden P., Hill J., Hill R. Cardiac response to nitric oxide synthase inhibition using aminoguanidine in a rat model of endotoxemia// Shock. 2002. -Vol. 17, N5. - P. 404-410.

166. Wagner J.G., Harkema J.R., Roth R.A. Pulmonary leukostasis and the inhibition of airway neutrophil recruitment are early events in the endotoxemic rat // Shock. 2002. - Vol. 17, N2. - P. 151 -158.

167. Wang W., Falk S.A., Jittikanont S., et al. Protective effect of renal denervation on normotensive endotoxemia-induced acute renal failure in mice. // Am. J. Physiol. Renal Physiol. 2002. - Vol. 283, N3. - P. F583-587.

168. Watanobe H., Hayakawa Y. Hypothalamic IL-lbeta and TNF-alpha, but not IL-6, mediate the endotoxin-induced suppression of the reproductive axis in rats // Endocrinology. 2003. - Vol. 198. - P. 1517-1525.

169. Watson A.D., Mogulkoc R., McAllen R.M., May C.N. Stimulation of cardiac sympathetic nerve activity by central angiotensinergic mechanisms in conscious sheep // A. J. Physiol. Integr. Сотр. Physiol. 2004. - Vol. 10. - P. 1152.

170. Welch T.R., Frenzke M., Witte D., Davis A.E. C5a is important in the tubulointerstitial component of experimental immune complex glomerulonephritis. // Clin. Exp. Immunol. 2002. - Vol. 130, N1. - P. 43-48.

171. Werlich Т., Stiller K.J., Machnik G. Experimental studies on the stem cell concept of liver regeneration. II // Exp. Toxicol. Pathol. 1999. - Vol. 51, N1.-P. 93-98.

172. Wheeldon E.B., Walker M.E., Murphy D.J., Turner C.R. Intratracheal aerosolization of endotoxin in the rat: a model of the adult respiratory distress syndrome (ARDS) // Lab. Anim. 1992. - Vol. 26, N1. - P. 29-37.

173. Wigle E.D., Rakowski H., Kimball B.P., et al. Hypertrophic cardiomyopathy: clinical spectrum and treatment // Circulation 1995. - Vol. 92. -P. 1680-1692.

174. Wigmore S.J., Fearon K.C., Maingay J.P., et al. Effect of interleukin-2 on peripheral blood mononuclear cell cytokine production and the hepatic acute phase protein response. // Clin. Immunol. 2002. - Vol. 104, N2. - P. 174-182.

175. Wong M.L., O'Kirwan F., Khan N., et al. Identification, characterization, and gene expression profiling of endotoxin-induced myocarditis. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003. - Vol. 100, N24. - P. 14241-14246.

176. Wu Y., Singer M., Thouron F. Effect of surfactant on pulmonary expression of type IIA PLA(2) in an animal model of acute lung injury. // Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 2002. - Vol. 282, N4. - L743-L750.

177. Yagi S., Takaki A., Hori Т., Sugimachi K. Enteric lipopolysaccharide raises plasma IL-6 levels in the hepatoportal vein during noninflammatory stress in the rat. // Fukuoka Igaku Zasshi. 2002. - Vol. 93, N3. -P. 38-51.

178. Yamaguchi H., Kita Т., Sato H., Tanaka N. Escherichia coli endotoxin enhances acute renal failure in rats after thermal injury. // Burns. -2003. Vol. 29, N2. - P. 133-138.

179. Yan W., Zhao K., Jiang Y. et al. Role of p38 МАРК in ICAM-1 expression of vascular endothelial cells induced by lipopolysaccharide // Shock. 2002. -Vol. 17, N5. - P. 433-438.

180. Yan W.S., Kan W.H., Hang Q.B. et al. Expression of intercellular adhesion molecule-1 in different organs of the mice with endotoxic shock induced by lipopolysaccharide // Sheng. Li. Xue. Bao. 2002. - Vol. 54, N1. - P. 71-74.

181. Yanada M., Kojima Т., Ishiguro K., et al. Impact of antithrombin deficiency in thrombogenesis: lipopolysaccharide and stress-induced thrombus formation in heterozygous antithrombin-deficient mice. // Blood. 2002. - Vol. 99, N7. - P.2455-2458.

182. Yoshikawa M., Suzumura A., Ito A., et al. Effect of phosphodiesterase inhibitors on nitric oxide production by glial cells. // Tohoku. J. Exp. Med. -2002. -Vol. 196, N3. P. 167-177.

183. Zeuke S., Ulmer A. J., Kusumoto S. et al. TLR4-mediated inflammatory activation of human coronary artery endothelial cells by LPS // Cardiovasc. Res. -2002. -Vol. 56, N1. P. 126-134.

184. Zhang В., Yang L., Konishi Y., et al. Suppressive effects of phosphodiesterase type IV inhibitors on rat cultured microglial cells: comparison with other types of cAMP-elevating agents. // Neuropharmacology. 2002. -Vol. 42, N2.-P. 262-269.

185. Zhang P., Quinton L.J., Bagby G.J. et al. Interferon-gamma enhances the pulmonary CXC chemokine response to intratracheal lipopolysaccharide challenge // J. Infect. Dis. 2003. - Vol. 187, N1. - P. 62-69.

186. Zutphen L.F., Baumans V., Beynen A.C. Principles of laboratory animal science. Amsterdam: Elsevier, 1993. - 389 p.