Автореферат и диссертация по медицине (14.00.10) на тему:Особенности процессов перекисного окисления липидов и активность ферментов антиоксидантной защиты в клетках крови детей, больных острыми респираторными вирусными инфекциями, и пути корригирующей терапии

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИИ

САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ДЕТСКИХ ИНФЕКЦИЙ

На правах рукописи УДК (616.988.7:616-085/—577.1)—053.2

ТИХОМПРОВА Ольга Вячеславовна

ОСОБЕННОСТИ ПРОЦЕССОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ И АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ В КЛЕТКАХ КРОВИ ДЕТЕЙ, БОЛЬНЫХ ОСТРЫМИ РЕСПИРАТОРНЫМИ ВИРУСНЫМИ ИНФЕКЦИЯМИ, И ПУТИ КОРРИГИРУЮЩЕЙ ТЕРАПИИ

14.00.10 — инфекционные болезни

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

САНКТ-ПЕТЕРБУРГ 1992

Работа выполнена в Санкт-Петербургском научно-исследовательском институте детских инфекций.

Научные руководители — доктор медицинских наук В. В. Иванова, доктор медицинских наук Е. Е. Дубинина.

Официальные оппоненты — доктор медицинских наук, профессор И. М. Воронцов, доктор медицинских наук, профессор К. М. Сергеева.

Ведущее учреждение — Санкт-Петербургский Государственный институт усовершенствования врачей имени С. М. Кирова.

с¿0

Защита диссертации состоится 1992 года в ча-

сов на заседании Специализированного педиатрического ученого совета, шифр К.084.12.02, Санкт-Петербургского педиатрического медицинского института (194100, г. Санкт-Петербург, ул. Литовская, д. 2).

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке института.

Автореферат разослан

Ученый секретарь Специализированного совета, доцент

А. Я. Трубина

Актуальность проблемы, Острие респираторные вирусные инфекции (ОРВИ) занимпют ведущее место среди общей заболеваемости детского населения, в особенности у детей первых лет яизии. Это предопределяет необходимость дальнейшего углубленного изучения патогенеза этик патологических состояний, а тпкже изыскание путей предотвращения и коррекции возникших нарушений.

Общепризнано, что наиболее чувствительными к влиянию повреждающих факторов являются'мембранные структуры клеток, которые и становятся первоначальными объектами патологического воздействия, в том числе при ОРВИ, Одним из ведущих механизмов дестабилизации клеточных мембран является норушенне интенсивности перекисного окисления липидо'в (ПОЛ) ( Еельтищев D.E., 1981; Каган В.Е. и соввт., 1986; Петровский Б.В. и соавт., 1987; Владимиров Ю.А., 1967; Тг.аъыа D.L. et al. , 1967).

В литературе имеется ряд сведений о сдвигах показателе* ПОЛ в сыворотке крови и вритроцитах при рецидивирующем бронхите (Сорогин В.П., 1967), острых и хронических пневмониях у детей (Лекомцева С.А., 1966; Шамсиев Ф.С., 1968; Алиева Т.М., 1990; Даминов Т.А. и соавт., 1991). Активацию ПОЛ в эритроцитах при ОРВИ отмечали Ананенко A.A. и соавт., 1989; Анохин В.А. и соавт., 1990; Каблукова Е.К., 1991.

Практически отсутствуют данные об интенсивности процессов

ПОЛ в лимфоцитах, в том числе и при инфекционных заболеваниях.

i

Вместе с тем, реализация лимфоцитами функций иммунной защиты зависит от состояния рецепторного аппарата плазматических мембран, структуры и проницаемости их, что в свою очередь обусловлено их фосфолипндным составом и интенсивностью ПОЛ (Петров Р.В, и соавт., 1983; 'ftaill k.n., ./ich g., 1984; Садовникова И.П., 1986; Извекова В.А., 1991).

Проявлении иовреаздающего действия свободных радикалов и перекисних соединений препятствует сложная многокомпонентная анткоксиданткая система. Ферменты антиоксидантнсй защиты (АОЗ) -суПерокспддисмутаза и квталаза играит ключевую роль и регуляции, процессов ПОЛ (Кг1асж1ой .г.- , 1978-; 1 ^ию!' в.е., Пер1пе 1909; Побереэкина Н.Б;,-Осинскал Л/2.,: 1969; Дубинина Е.Е., 1589; ОииогЫкз о.:'.4.'С.,. 1990) •

Публикаций, в которых представлены итоги изучения комплекса показателей, характеризующих интенсивность процессов ПОЛ и антиокепдантную защиту клеточных мембран лимфоцитов и эритроцитов у детей, больних 0РВИ,нИ'Б отечественной, ни в зарубежной литературе нам встретить не удалось. Шесте с тем, оценка функционального состояния клеточных мембран лимфоцитов и эритроцитов у детей с ОРВИ открывает перспективы по изысканию - путей терапевтической коррекции возникших нарушений.

Различные витамины и другие препараты ч комплексном -Лечении осложненных и неослоююшшх форм СРйй аачнетув щимеиямтся беа учета их воздействия на процессы свободно-радикального,окисления. Изучение влияния витаминов на процессы ИОЛ и ферментативную ЛОЗ ■ в клетках крови детей, больных ОРВИ, позволит определить наиболее целесообразную терапевтическую тактику.

Цель исследования^ Обосновать дифференцированное применение витаминов в комплексе лечения неосложнешшх и осложненных бронхитами и пневмониями ОРВИ на основании изучения состояния системы переписного окисления липидов и ферментов антиоксидантной защиты в клетках крови больных дегей.

• Задачи исследования. Изучить состояние процессов ПОЛ по уровню диеновых конъюгатов, диенкетонов и малонового диальдеги-да в лимфоцитах и эритроцитах больнкх 'ОРВИ детей.

Исследовать активность клетчвптлс ^срглептов алтиокспдаптиой защити -- оупсроясиддпсмутази я каталазн в лиифгптях, эрятроця-тах п плазмп крот*п дете.П, большх ОРШ,

Определять эфГеятлвпосгь паполБЗотяшгя вятатстнов, воздейст-вуквдх па процаоеп свободго-рядякального отгелепшт: вятяетпов В, А, Да и аскорбиновой кполоти в комплексе с пелезосодержздам препаратом.

Обосновать прииеиенив ттпмллов ъ зависимости- от иптеясвв-постз! процессов ТОЛ в плетках крови у детей и остром периоде леослояпепитпг и ослотоештшс 0РТ51!.

■ Научна! иовяпна. В работе впертое проведено одпомомептное комплексное! изучите состояния ПОЛ п Лермептатпвпой ЛОЗ в лимфоцитах и эрятропзтгж пря яеослояггептк фортот: я бропхолегочпшс осложнепкяг ОРШ у детей в дипамлке заболввавтот, сопоетамзгш а оцепени получентше результатн.

В лим£опптах болыгах ОРВИ детей показан характер нзиеяеяяй иптеяслвпоотя ПОЛ п установлена, связь мевду уровнем свободло-радякальпого окяслепия я иммунологическим!» показателями

• Па осповаипл определения экспресс-методом уровня диеновых конъкгатов в клетках крови у'детей в остриП период ОРВИ осу- , ществлено даК'ерегщировяпное назяачепйе витаминов В, Л, С и Д2 и определена эКектявиость воздействия их на пропессы ТТОЛ и Лерменгнна системы, пргтялгакяке участие'в его регуляции.

Практическая ценность работн. Разработан комплекс экспресс-ыетодов.лля'оцеякя состояния кптснсивйозти ПОЛ и антиоксидантяоР запита в лг^огктах и эритроцитах детеП, больных ОРИ!., '' ' Показало, что определите пптойсяпиобта' свбйодоо-радикаль-■ пЬх' тггог'.посЬп р л!":хоп':т"Х представляет больпиг* "пн*'6р?.!аттшше ' вог?г:о"ностп, в ор^ттюгтттл'с •• т,о-*пт ^нтт> использовано в

- а -

качества дополнительного критерия оценки степени тякссти к течения заболевания.

Наиболее тяжело 0РВ11 протекаит у болшге с максималышми отклонениями интенсивности ПОЛ в т^сттах (при концентрации ДК менее 0,36 л более 0,50 мююль/пг 0Л);

Обосновано назначение вптпшнов-антиоксидянтов Е, А и 31,2 болышм о брокхолегочнмм осложнениями ОРВН, 'а при сопутствующей келезодефщцитной анемии - аскорбиновой кислоты с феррогра--думетом.

Апробония и внедрение результатов; Основные положения работы доложены на заседании научного общества инфекционистов в г. Санкт-Петербурге (1391),' на яаучпо-практических конференция* НИИ детских инфекций (1991 {'1992;;' на конференции молоди* ученых в ПНИ экспериментальной медицины г.Санкт-Петербурга (1991);' 'Результата исследований внедрена в практику диагностик ческой и лечебной работ» клиники ресгофяторних вируснпх пи^ек— дай ШЩЩ Даяние диссертационной работп иснольяутася в лекционном материале для врачей-слушателей на кафедре инфекциокнпх болезней у детей факультета усовершенствования врачей Санкт-Петербургского педиатрического медицинского института. В ходе внполиения настоящей работы зарегистрировано изобретение : "Способ оценки степени деструкции мембран лжфоцпгоп при инфекционной патологии у детей" (приорететная справка № 50169Э0 от 3.01.92), оформлено 2 информациошшх шюьма: "Прогноз характера течения ОРБИ и их истодов на основании определения интенсивности ПОЛ в остром периоде болезни" и "Дифференцированное применение • средств антиокседаитяой терапии при ОРШ у детей". По штериаяам диссертации опубликовано 5 научных статьи, 3 - послано в печать.

' Положения, выносимые па защиту. . Характер изменения интенсивности перекиспого окисления липидов в лим^цитах и эритроцитах у детей в острый период ОРШ.

Состояние фериепгатиппоП аптиоксидантпой защптн й клетка* крот и плазте больных ОРШ детей в аавнотатастя от процессов пероксидация липядов.

Ди№репдлровапное пютсчеппе в комплексную терапию витаминов Е, А, Л2 и С с $ерроградуметои п их влияние па клиническое течение, уровень перекиспого окисления липидов и активность ферментов аптиокспдантпоЯ: защиты у больных ОРШ детей.

Объем 'л структура диссертации. Диссертация изложена на 187 страницах машинописного текста/ состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, обсуждения результатов, гаводов, практических рекомендаций и приложения. Работа иллюстрирована 35 • таблицами, 8 рисунками, выписками из историй болезни наблюдавшихся детей. Указатель литературы включает 133 отечественных и 114 иностранных источников.

,Материалы и методы исследования.. В работе обобщены и проанализированы .результаты клинического и лабораторного обследования 140 детей в возрасте от 2 мес. до 9 лет, в том числе 38 {27,1/0 с неосложненной формой ОРШ, 48 (34,3;?) - осложненной бронхитом и. 54 (38, - пневмонией. 30 здоровых детей того же возраста составили контрольную группу.

Наряду с определением клинических параметров течения ОРШ проведено исследование показателей, характеризующих состояние свободно-радикальтк процессов в клетках крови (лимфоцитах и эритроцитах)у детей при использовании обычной патогенетической я симптоматической терапии (сравнительная группа) и у больных, которке дополнительно получали г.тгачяшг антлотеипаптного деЯст-.

вид (таблица I),

Таблица I.

Характеристика доз и способов применения лекарственных препаратов при ОРШ у детей

Наименование препарата, форма выпуска Суточная доза препарата Крагяость введения в сутки Путь введения .Длительность курса

Витамин .Е (шгьфа-токофе-рож) ICf,Z маоляшшй р-р 5-10 ыг' 2 раза через рот 5 дней

Витамин А. (ретинол) 3.44J? маошншй р-р 400-500 МКГ I раз через рот 5 дней

Витамин До (оргокальци-Ферол) 0,0625$ каслянннЯ р-р 500 f.TE I раз через рот 5 дней

Внташн С (аскорбиновая кислота) в порошках 50-100 № S раза через рот Б дпеП

Ферроградумет в таблетках 1 I тяйл. (105 иг олзгентзр кого уеле I рая чч) через рот б дней

ЛшТоцагн выделяли аз целы/о* гепарштапровяшюй крови по методу • Mandes K.J. et al,(1974). Урогень обнят лтшвдов в лимфоцитах и эритроцитах определяли сулъфофосфорноватшшовш.т ' методом в шкромодифпкацли ТаранопоР, H.П. и Говоровой Л.В. (1987). Первичные продукты перекисного окисления липидов -диеновые конъюгати (Ж) и диенкетони (К) исследовали спектро-фогометрическп (Лпнкин В.З. я соавг., 1979). Содержание шлоко- . 'вого диальдегида (УДА) в эритроцитах определяли с помощью реакции с тиобарбитуровой кислотой (bmtth J.B. et al, 1976 ) в модификации Юркова Ю.А. и соавт. (1?В4), Активность супероксид-

дпспутазы (СОД) (КФ.I.IR.I.I.") в лимфоцитах, эритроцитах и плазме кропи исследовали нефсриеитаглвт-т методом по стонет ипгибпро-юггая скорости реакции восстановления штросинего тетразолия (Hishiteirai и. et al. , 1972). Об активности кятплазн эритроцитов (Ki.I.II.1.6.) судили по скорости разрушения ферментом переписи водорода (Boutler е., 1975).

Исследования проводились в дипат.шке респпраторно-впрусного заболевания у .болытнх детеА: в'первчй день поступления в стационар (1-5 дни болезни) и в периоде рекоггоалесцеггщга (спустя 7-9 дней прибивания в клинике). Забор крови осуществлялся натощак . в утренние часн.

Статистическая обработка материала проведена с помощью специально составлении* программ на ЭШ IBM-PC-AT на математико-мехапичеоком факультете университета г.Санкт-Петербурга.

Результаты исследования.

Среди обследованных детей с неооложненннш и бронхолегочны-ми осложнениями ОРБИ преобладали больнне с гриппозной инфекцией (58,4^) как в качестве моноинфекцга, так и в ассоциации с другими вирусами; По результатам бактериологического обследования установлена ведущая этиологическая роль пневмококка в развития бронхолегочных осложнений ОРШ, Так, у детей с острой пневмонией пневмококк был выделен в 64,8??, при бронхитах - в 66,бактериологически расшифрованных случаев.

Анализ клинической .симптоматики различных этиологических форм ОРЩ и их бронхолегочных осложнений подтвердил наличие типичных симптомов этого заболевания, описанных большинством исследователей, ванитасщяхся данной проблемой (Сергеева K.M. в соавт., 1979; Рйчинский 0.В1, Таточенко B.K., 1988; Иванова В.В. и соавт., 1989, 1990; Дрейзин Р.С;, Аотафьева IT.B., 1991).

Реаультати наших ишивдвваний показали, что в острый период заболевания у детей, больных неослояненными ОРШ и броихолегоч~ шыи осложнениями заболевания, усилена активность перекисного окяелекия лиггадов в эритроцитах. Концентрация нативного ВДЛ достигала 20,5+4,9 мкмоль/мл/чао у детей с неослокнешшми (Термами и 32,4+5,6 - у больных бронхолегочными осложнениями ОРШ при 19,5+1,2 мкмоль/мд/чао в контрольной группе. При различных форма* ОРШ уровень ДК возрастал в 2,2 - 3,4, а дпенкетояов - в 2,1 - Й,4 раза по сравнению о показателями здоровых детей. Соотношение концентраций Ж и К, позволяющее судить о глубине процессов перок-оидации, при неослоиненннх формах заболевания и простом бронхите не отличалось ог показателей у здоровых детей и составляло I,10+0,03 и 1,12+0,05 соответственно, в то вреда как у больных обструктивными бронхитами н пневмониями коэффициент ДИ/К был достовернб нихе (0,92+0,04 и 0,90+0,03), что свидетельствует о • том, что выраяеняоегь изменения пвроксидации лплвдов в эритроцитах имеет прямую связь о тяжестью заболевания у детей с ОГШ.

Наряду а повышением интенсивности процессов ПОЛ отмечено снижение уровяя общих лиггадов (ОЛ) в эритроцитах, что является дополнительным подтверждением нарушения структурной целостности аритроцитарных мембран при ОРШ.

Подобной закономерности не было гшявлено в лимфоцитах, что обусловлено отличающимся липидным спектром мембран эритроцитов и лимфоцитов и рааличиен функций этих клеток.

Проведенный анализ наша данных выявил вариабельность изменений интенсивности ПОЛ в лимфоцитах больных ОРШ детей я позво- . лил выделить группы с различным уровнем ДК в лимфоцитах в острый период заболевания: больные с концентрацией Ж менее 0,36 шшоль/мгОЛ, 0,36-0,50 мкмоль/мгОЛ к более 0,50 ккмоль/мгОЛ. При пересчете содержания ДК на количество клеток выявлен схояий

характер изменений.

Активация процессов ПОЛ била отмечена у 49,3$ детей, у 41,45 обследовании* показатели пероксидация липидов бшга в среднем в 2 раза ниже, я только у - соответствовали значениям здоровых детей.

Установлено, что наиболее тяжелые формы заболевания (ОРШ, осложненные обструктивннмя бронхитами и сегментарными пневмониями) встречались у детей с наибольшими отклонениями (как в сторону повышения, так и понижения) содержания ДК и К в лимфоцитах (таблица 2).

Особенностью пневкопий у детей о высоким уровнем ДК явилось наличие дихателвпой недостаточности и обструктивного синдрома (в 75£ случаев). При пневмониях с поражением двух и более сегментов, с тяжелым течением заболевания в 2 раза чаще была выявлена низкая (менее 0,22 мкмоль/мгОЛ) концентрация ДК в лимфоцитах. При ОРШ, осложненных пневмонией и плевритом, били резко снижены показатели ПОЛ в лимфоцитах, что явилось неблагоприятны»/! фактором в развитии заболевания.

. Известно, что регуляция свободно-радикального гомеостаза, степень проявления- токсического действия свободных радикалов и перекнсннх соединений зависит от активности антяогссидаятной системы. Нами выявлено, что активность ключевого фермента 'антиоксидантной защити - СОД в клетках и плазме крови у детей в остром периоде ОРШ' спияеиа, что обусловлено, по-пвдииому, истощением первичного уровня ферментативной АОЭ (.Султанов А.Т. и соавт., 1989; Даг.ганов Т.и соавт., 1991). 7 детей с галой концентрацией ДК в лимфоцитах отмечены наиболее низкие показателя активности СОД в тиеткях и плазме крота. Ток, при зчачеггаях ДК rerse 0,36 ютоль/'тОЛ ":<т-тт>гюстъ СОЛ составляла 0,?0±0,Ю

.Т^/ТОтл./т-"!». против Т,С7+0,Тв 7VlOTt-./f-Hr. у здоровых, тогда

Таблица 2.

Показатели процессов ПОЛ в лимфоцитах детей с неосложкенными и осложненными формами ОРБН, имевших различный уровень ДК в лимфоцитах

Тип ОРВИ Число детей „ОЛ (мкг/10°клеток) ДК (мкмоль/мгОЛ) К (УЕ/мгОЛ)

I II I II I 1 II I II

Неосложненные ОРВИ 13 16 40,3*3,9 42,5-4,2 0,25+0,02* 1,15+0,09Х 0,19+0,02 X 0,46+0,04

Простым ш" бронхитом .13 ю- 48,3+4,5 49,3+.4,0 0,23+0,02""" 1,23+0,07Х 0,22+0,02 0,44+0,05Х

| Обструктивным Л' бронхитом б 15 43,5+3,6 23,4+3,Р 0,19+0,01^ 1,45+0,0р 0,18+0,02 0,71+0,0р

5 Очаговой . пневмонией 12 16 33,7+4,3 42,9+4,2 0,23+0,03Х 1,30+0,05* 0,19^0,02 0,65+0,0р

§ Сегментарной ° пневмонией 14 8 64,2+4,Р 34,0+4,О* 0,17+0,02* 1,45+0,07^ 0,15+0,01Х 0,70+0,07^

Здоровые дети 30 50,0+7,3 ■ 0,43+0,03 0,23+0,02

го I

х - показатели, достоверно отличавшиеся от таковых у здоровых детей XX - показатели, достоверно отличающиеся от таковых у детей с неослокненшми формами ОР@И I - дети с концентрацией ДО в лимфоцитах менее 0,35 мкмоль/мгОЛ тт ----- - ~~,гт,а„тгм,пыо1> ЛК я лимЬспитазс более 0,50 мкмоль/мгОЛ

как при пнсокой концентрации Ж (более 0,50 гкмоль/чгОЛ) этот показатель бил равен 1,40+0,17 УР/Ю^игУмин.

Установлено повышение активности каталаэн эритроцитов у больных ОРВИ детей и зависимость этого показателя от интенсивности процессов ПОЛ, что мотет являться свидетельством компенсаторного механизма действия данного фермента в ответ на активацию процессов пероксидация липидов в эритроцитах. Наиболее выраженные ферментативные изменения в системе А03 тлели место в группе больных 0РВ11 детей с пневмониями.

Наги установлено нарушение структуры и исчезновение характерных для эдоровга детей корреляционных взаимосвязей меяду показателями ПОЛ и ЛОЗ в глотках нрови у детей в острый период ОРШ.

Выявленные изменения ПОЛ в лимфоцитах больных ОРШ свидетельствуют о различной функциональной активности этих клеток, что подтверждается установленной наш существенной взаимосвязью мелщу интенсивностью пероксидацяи липидов в мембранах лимфоцитов и, иммунологическим! показателями в раннюю фазу ответа на ОРШ у детей. Соотношение регулятор!®* субпощшший (ТФР, то есть субпопуляют преимущественно хелпершг клеток) и теофяллинчувст-вителышх (ТОТ, то' есть субпопуляции преимущественно сулрессорннх клеток) при высокой концентрации ДК в лимфоцитах имел тенденцию к снижению по сравнению со здоровыми детьми и составлял 1,62+0,41 против 1,32+0,21. Коэффициент ТФР/ТСЧ в группе с низкими показателями ПОЛ бил достоверно вше, чем в контрольной группе (3,18+0,41), особенно при'наличии бронхолегочкшс осложнений ОРШ. Абсолютное число Т- и В- лимфоцитов у детей всех обследованных групп не отличалось от такового у здоровых,

Для оценки Функционального состоят«! лимфоцитов периферической' крови при различной интенсивности процессов ПОЛ у 128 детей была выполнена реакция бластяой трансформация лимфоцитов (РБТЛ)

- и -

с фитогемагглютинином (ФГА) в качестве стимулятора. У больных первого года жизни и более старших детей имели место сходные -изменения исследуемых показателей. При низкой концентрации ДК в лимфоцитах выявлено достоверное снижение спонтанной БТЛ (244,0+27,3 имп./ЮОс. при неосложнентшх формах и 561,5+25,0 имп./ЮОс. у детей с бронхолегочныш осложнениями) по сравнению с больными, имевшими высокий уровень Ж (357,1+25,6 и 456,6+31,7 имп./ЮОс. при неослояиенных и осложненных Формах ОРШ соответственно). Индекс стимуляции ФГА в группе больншс с неосложненными формами заболевания и низкой интенсивностью ПОЛ в 1,5 раза был више, чем у детей с высокой концентрацией ДК в лимфоцитах. Это повышение было значительным и среда переносящих броюсолеточные ослокяения ОРБИ: индекс стимуляции ФГА составил 115,7+7,7 при нивкой против 94,1+4,0 при высокой интенсивности начальных этапов ПОЛ у детей первого года казни и 116,9+6,4 против 93,5+4,2 соответственно у более старших детей, р-=:0,05.

Очень важной характеристикой ш.мунокомпетентных клеток является их способность к продукции щгокшюе, в частности, интер-феронов, как основного факторна регуляции противовирусного ответа (Кузнецов В.П., 1989). У детей с различной интенсивностью ПОЛ в лимфоцитах интерфероновый статус бил неодинаковым.

Содержание ввдогенного интерферона при низком уровне ДК лимфоцитов было достоверно ниже, чем у больных, имевших высокую концентрацию начальных продуктов ПОЛ, как при неосложненных формах (15,4+2,5 против 25,1+3,7 ед/мл), так и при бронхолегочных осложнениях ОРШ (11,5+2,8 против 19,8+3,3 ер/т). Низкому уровню Ж- . в лимфоцитах соответствовала и менее активная продукция интерферона в культуре лейкоцитов, чем при высоком (11,3+3,2 против 44,5+.6,5 ед/кл - у детей с неосложнешшми формами ОРВИ и 13,6+3,7 против 29,5+3,6 ед/ж - у детей с бронхолегочныга осложнениями).

По-видимому, выход интерферона в кровяное русло в значительной степени обусловливается интенсивностью начальных этапов ПОЛ, влияющих на структуру и проницаемость мембран лимфоцитов.

Следовательно, определение состояния процессов ПОЛ и регулирующей их интенсивность систем ЛОЗ мокет Являться дополштелииш диагностическим тестом," отрагаэдпм степень функциональной активности лимфоцитов, что," возможно, в свою очередь является одной из причин различного течения ОРШ.

При сопоставлении тягести течения ОРШ! у детей с исходно различным уровнем ПОЛ в лимфоцитах било выявлено, что наиболее благоприятно заболевание протекало у детей, имевших норгильную концентрацию ДК в лимфоцитах. Отклонение интенсивности ПОЛ в лимфоцитах п ту или инуп сторону сопровождалось достоверном увеличе-нпем продолжительности клинических симптомов ОГК!, а им.ишо -длительности лихорадки, инток'снкацни, катарального синдрома, аускультативных изменений в легких. У детей с високим (12,5^) и низким содержанием да в лимфоцитах (18,7/') 6<Ш1 зарегистрировали случаи вирусного супериифшетрованш. Однако наиболее тяжело заболевание протекало в той группе больных детей, у которых концентрация ДК в лимфоцитах била менее 0,36 мкмоль/кгОЛ-, по срявненип о больными,, имешиш средние или повшюнине показатели. У детей, переносящих неосло.тнеятше 0РП1 и имевших низкую исходную концентрацию ДК в лимфоцитах более длительпшга бнли лихорадка и кашель, чем у больных с нормальным и повниеннпм уровнем ДК в первпе дни болезни (р<0,05), Продолжительность лихорадки, интоксикации и катарального синдрома у детей с бронхолегочнгал осложнениями при концентрации да лимфоцитов менее 0,36 мкмоль/мгОЛ такие била боль-,ие (р^0,05). Возможно, это обусловлено более низкой функциональной активностью имтунокомпетентннх клеток у этих детей,

Впявленппе патогенетические меха ни зги ггрм вирусной инфекция

у детей позволили предложить патогенетически обоснованные принципы терапия 0PBIÍ средствами, воздействующими на процессы свободно-радикального окисления.

Больным ОРШ детям с высоким уровнем ДК в лимфоцитах в остром периоде заболевания в комплексную терапию были включены витамины Е или А. Для оценки влияния используемых лекарственных средств на процессы ПОЛ и активность ферментов ЛОЗ проведено сопоставление биохимических показателей у больных, получавших витамины Е и А и группы сравнения. В группу оравяения были отобраны дети того *е возраста, о тем ?.е диагнозом и с исходным высоким уровнем ПОЛ в лимфоцитах.

Проведенные исследования показали выраженное антиоксидантное действие этих препаратов в клетках крови, что согласуется с данными литературы (Burton G.V/., Ingold к.П.,1984; Heffner J.E., Repine J.в., 1989; Chow O.K., 1991). В лимфоцитах и эритроцитах детей, получавших витамины В или А, выявлено достоверное снижение интенсивности процессов ПОЛ до значений здоровых детей при всех формах заболевания к периоду реконвалесценщш (таблица-3).

Выявлено неоднозначное воздействие витамина Е на активность СОД в клетках и плазме крови. Введение Л- токоферола не оказывало влияния на активность СОД эритроцитов, что объясняется различным механизмом действия этих антиокоидантов на процессы свободно-радикального окисления в организме. Отмечено снижете активности СОД лимфоцитов и плазмы при применении витамина Е, которое свидетельствует о стабилизации свободно-радикальных лропессов и нормализации соотношения про- и антиоксидантны* систем у этих детей к периоду реконвалесценции.

Нами установлено уменьшение активности каталазы эритроцитов до нормальных величин у больных ОРБ!" после проведения курса лечения вата^ию;.: 3: с 16,5+2,1 ло 9,5+1,7 !1Е/1012кл./шш. при

Таблица 3.

::î£ аоказагелей процессов лерс:_.с:;огс о:-лсленй& в кзесхвх крозн деге:;,

болыа": ОЗЛ :¡ гслрга^з злгакзн В л А.

11т :'0F¿:Í ГртсггЁ" ÖOZbEZS 1"СЛО дегс-ii -г.: ""CiiiiTL" Эрл грош! гк

01 г гж/123 0- К 'JL/iT 0Л OZn К1-з?/10'гл да !ЛС.:0ЛЬ/1.!Г К УЕ/i.T ОЛ ЦИА Е£)Г. / ¡.»1 ч

о О CD ' §а О CD При г.осзтплепи Идоле са после iöTi-са Группа сраздеяпя <17 5 5 7 -12,5^,2 X 55,G+3, -i 53,9x7,1 - XX 31,5x4.,I* XX " " 'x 0,47x0,Со •X 0,40x0,04 XX 0,70x0,10* XX 0,40+0,^.4 0,25-0, o:x ~ • -X 0,22+0', 07 ~ • XX о,41+з;оз XX L3,S+I,6 XX 13,4±1,7 ¿4,S-¿,IXX 13,3+1, XX 0,39+0,03 0,14+0,02 0,13+0,02Х ~ • XX 0,29+0,05 0,32+0,03* 0,18+0,04Х 0,13+0,03* 0,29+0,05 39,244,0 х 22,5¿3,4X 24,I¿¿,0Х 34,2+4,

кЬц S о S § Прл пос-îyUISEïïII После 1'лт,-са зиг.1Г после курса вяз.л* Гпуппе срааменля 38 II II IÛ XX 37,4+3,8 : о, 3+8,2* X 52,6+3,4 - XX 32,7+5,2 XX 1,38+0,07 ... .y 0,40+0, CG - • • X 0,43+0,04 - • XX 0,07+0,05* XX 0,G5x0,0S T . * 0,27+0,04 X 0,23+0,04 - ' 0,39+0,03 XX 14,8+2,1 13,2+1,8Х XX 14,8+1,0 Г XX 12,9+0,7 XX 0,42+0,03 0,IG¿0,0Ix ü,IS+0,02* ~ • XX 0,35+0,04 XX 0,34+3,07 0,13+0,02* 0,1510,04х 0,32+0,04Х XX 35,8+3,G 25,6x3,5Х ~ • X* 27,7+4,2* XX З'О f ¿ о

Здорозио Д 30 50,3x7,3 0,43+0,03 0,23+0,02 52,. 8+0,6 0,10+0,01 0,03+0,01 IS,5x1,2

X - пскгзагел::, достоверно огллча-о^чеся oí рсзтлъгахов обследования при поступлении - показагелд, достоверно етл^чагетеоя or хакозюс у-здорова: дегеЁ

неослоетенгшх формах и с 15,9+3,2 до 9,8+1,9 МЕУЮ12кл./шн. прп брокхолсгочных осложнениях 0FDI (у здоровых детей активность каталазы составляла .7,8+0,8 Г.Ш/1012кл./юш.). Возможно, это обусловлено способностью витамина Е подавлять оксидативный гемолиз эритроцитов, что может привести к снижению скорости обновления состава эритроцитов молодыми формами с более высоким уровнем активности <Т«рмеятов, в частности, каталазы, кроме того, с питается концентрация гемпнового железа, необходимого для синтеза каталазы, за счет снижения скорости распада и повшпения скорости синтеза гемоглобина (Кожевников D.H., 1985),

Виташн А выступал как антиоксидает, снижая и нормализуя интенсивность ГОЛ в лил^оцитах и эритроцитах больных ОРШ детей. Отмечено снижение активности СОД лиг.фэцитов при применении витамина А. ИзменепиП активности СОД эритроцитов и плазмы, а также каталазы эритроцитов под воздействием витамина А не было.

В литературе имеются сведения об участии витаминов Е и А в регуляция иммунных реакций (Плецигый К.Д., 1985; Афанасьев Ю.И., Бороюгхина Т.В.^ 1987; Bendich к. et al.,1989; Keusch G.Т.,1991). Пами отмечено, что у детей о высоким уровнем ДК в лимфоцитах, которые получали эти препараты, происходит нормализация соотношения регуляторных субпопуляций ТФР- и ТСЧ- лимфоцитов к периоду реконвалесценцки. Выявлено повышение индекса стимуляции у больных, получавших витамины Е или А (до 132,6+10,3 и 127,7+9,6 соответственно при неослояненных ОРШ и до 118,9+8,4 и 116,7+9,1 при бронхолегочнкх осложнениях). После курса витаминов увеличивалось содержание эндогенного интерферона при неосложненных и осложненных $ормах. ОРШ (рс0,05),' чего не установлено в группе срав- ■ нения.

При применении встатшов Я и Л был достигнут хороший терапевтически э^ект у больных 0PHI с бропхолегочнпг.ш ослошетгаяш»:

тлело место уменьшение длительности основных клинических симптомов заболевания в среднем на 2 для. Установлено, что у больных, которые получали данные препараты в комплексной терапии, в более короткие сроки купировались симотош интоксикации, лихорадка, кашель, ринит, исчезли аускультатив!ше изменения в легких (р-^0,С5)

Детям с исходно пиэким уровнем ГОЛ в лимфоцитах в комплексную терапии были включены аскорбиновая кислота и витамин Д2.

Битами С назначали детям о ОРШ и сопутствующей желеэодефящит-ной анемией в комплексе с железосодержащим препаратом феррогра-думетом.

Пяти установлен аитиоксидантный офТект применения витаминов С и Яд в эритроцитах (таблица 4). Ингибиругацэе действие на перок-сидяцню лигшдов витамина С отмечают многие авторы (Bendieh A.et ai. T90R; i'rsi n. ot ai.I988). Считается, что он мотет непосредственно туиитъ активные формы кислорода и способствовать попдеряанли в тктмх ачпасов вякнейиего лппнлпого ангпокспданта - восстановленного шшшина 1?. Поступившее в оргашзм железо включается в процессы эритропоэзл, о чем свидетельствует выявленное нами улучшнно показателей красно? крови у получпвгмх питаюти С с ферроградуиотом. Установлено увеличение содсртшпш гемоглобина, потпвеияе общего числа эритроцитов и нормализация уровня сино-роточного-железа. Нзвостно, что аскорбиновая кислота способствует всасыванию гелеза (Руселъ В,А., Иаркот К.В., Т.90Э), и освобождению железа из фагоцитирующих макрофагов (Калиничева В.И., I90S). .

В лимфоцитах детей, получавших витамин С с ферроградуметом или витамин Я2. тлело место повптоше я нормализация исходно .нивкого уровня ПОЛ. Выявлена активация ферментативной АОЗ в клетках и плазме крови после курса лечения данными препаратами. При неосложненннх 0РШ1 активность СОД в лимфоцитах повышалась

Таблица 4.

Дп;'.а.\'дка показателей процессов перекисного окисления лапидов у больных ОГВП детей, получавших аскорбиновую кислоту с ферроградунегом и витамин -Д/?.

О^'Л ГОУШШ-больных % ело дет ел Явмйоцпш Зрдтрощин

01 д 'цкг/М кл ¡ж ■ шкель/мг 01 , к УЕ/мг 01 ,0Лп мкг/10 эр лк ¿школьДт ОЛ ■К УЗДп: 0Л. «Лй. наг. ■ • /МЛ Ч

а ¿1 и О с -о Прл иос- 16 40,3+3,9 X* 0,25+0,02 0,19+0,02 XX 14;в±3,1 0,15+0,02 XX 0,18+0,02 XX 30,5+2,8

После кто-са в:зт;£Г 5 37,8+4,8 0,39+0,Об" 0,24+0,03 XX 14,7+5,1 0,1040,01х 0,12+0,03* 20,6+4,3Х

После Г-ХР-са зг.г.До 5 36,5+6,9 XX 0,58+0,07х 0,32+0,03^ . XX 13,2+4,1 0,14+0,02 XX 0,17+0,04 22,8+3,2

Гпупда сЪЬз ЕС К11Я 6 39,7+5,2 X X 0,23+0,04 0,20+0,06 XX 15,6+5,0 лл 0,20+0,03 XX 0,17+0,02 хк 32,5+1,4

£ 1 о о >'-| Ч О о :1 : ( ° о и ¿пУ Ярп кос- ■ 34 49,4+4,6 хк 0,21+0,02 0,13+0,02 Ху 18,6+2,7 * XX 0,18+0,02 0,20+0,02* лх 30,6+3,0

После кут> са зпг.С ' 9 46,5+5,2 0,44+0,03- 0,28+0,05Х XX 21,6+3,1 0,12+0,02. 0,13+0,03* 22,8+3,1*

после курса плг.До ' II • 48,2+5,1 0,55+0,05х XX 0,35+0,06х XX 20,6+4,0 XX 0,16+0,01 0,15+0,02 X 23,4+3,1

Ггг/ппа с-оазнсния ■ 14 44,4+6,1 0,26+0,06 0,12+0,02* XX 21,1+3,4 XX 0,22+0,02 хх 0,21+0,02 лх 37,4+5,2

-дороапе дэги. 30 50,0+7,3 0,43+0,03 0,23+0,02 32,9+0,6 0,10+0,01 0,09+0,01 19,5+1,2

х - показатели, достоверно отличающиеся от результатов обследования при аоад^пябнпд.' хх - -показатели, достоверно отлдчаып&еся от такових у здоровых дето::.

до нормальных знпченпЯ (I,("7+0,18 УЕ/Юбкл./мзш.), при бронхоле-гочггнх осложнениях - до 1,82+0,2 и Г,28+0,17 УР/Ю6кл./м1ш. у получавших витамины С пли До соответственно. У болышх после курса лечения аскорбиновой кислотой с ферроградуметом в периоде реконвалеецепцли, в отличие от группы сравнения, выявлены достоверная активация СОД эритроцитов и тенденция к погашению актив-поста СОД плазмы.при всех формах ОРБИ, хотя эти показатели и не достигали значений здоровых детей. Повшпегате активности СОД эритроцитов свидетельствует об обновяении состава этих клеток при введении ипта-шпа С .с ферроградуметом, возмолио, за счет стимуляции эритрспоэза.

Назначение витаминов С и До приводила к изменении иммунологических показателе? у длиной группы больных. Курс лечения аскорбиновой кислотой с ';;арроградуметом, а таете витамином Д2 опо~ собстпопал нормализации соотношения Т№- и ТИ- меток, усилетга спонтанной ГчЛ, что отражает активацию иммупокомпетентных клеток в организме. Виталан С вызывал увеличение синтеза иммуиоглобула-нов классов Л и М, свидетельствующее об активации гуморалыгж механизмов иммунного ответа. У детей, получавших витамины С или Д2. достоверно повышалось содержание эндогенного интерферона в сыворотке крови, в отличие от больных, которым не назначали витамины. ■ .

Под воздействием витаминов С с ферроградуметом или До улучшалось клиническое течение осложненных бронхитами и пневмониями .ОРШ, что проявлялось уменьшением продолжительности интоксикации, температурной реакции, катарального синдрома по сравнению с больными, получавши.® обычную терапию (р -<0,05).

Применение в комплексном лечении 'ОРВИ витаминов способствовало стабилизации процессов в системе ПОЛ-АОЗ, о чем свидетельствует восстановление утраченных в остром периоде заболевания

корреляционных связей между изучаемыми показателями и характер скагерграш главных компонент.

Таким осЗразом, при. СРВ", оолоупенннзс брогагагами и пиевмоняя-гл1, дифференцированное назначение витаминов, влияющих на процессы свободно-радикального окисления, патогенетически обосновано.

виводы

1. Определение интенсивности процессов свободно-радикального окисления в лимфоцитах детей, больных ОРШ, представляет большие информативные возможности, чем в эритроцитах. Установлена зависимость выраженности и характера изменений показателей перекисного окисления липидов в лимфоцитах от тляести течения неосложненных ОРШ и их бронхолегочных осложнений.

2. Острый период ОРВИ сопровождается нарастанием интенсивности перекисного окисления липидов в эритроцитах и компенсаторной активацией каталаэы. Установлена прямая зависимость активности каталазы от концентрации начальных, продуктов ПОЛ.в.эритроцитах.

3. Низкие величины активности супероксидцисмутазы свидетельствуют об истощении ферментативной антиоксидантной защиты в клетках

и плазме крови в острый период ОРШ. у детей.

4. Выявлена связь мекду интенсивностью процессов ПОЛ в мембранах . лимфоцитов и иммунологическим! показателями. У больных с

высоким уровнем ПОЛ в лимфоцитах усилена спонтанная бласткая .трансформация лимфоцитов и повышено содержание эндогенного интерферона в сыворотке крови, с низким - спонтанная БТЛ и концентрация эндогенного интерферона снлкены при повышении • . соотпошекия теофиллянрезистентных и теофяллинчувствительных лимфоцитов.

Б. Назначение антиоксидаитных средств детям с ОРВЙ требует

индивидуального подхода о учетом интенсивности ПОЛ и активности ферментов антиоксидантной защиты, В коррекции метаболических нарушений нуждаются больные с резко сниженным уровнем начальных продуктов ПОЛ (ДК менее 0,36 мкмоль/мгОЛ) и о вцра-яенной активацией липидной лерокоидавдш в лимфоцитах (ДК более 0,50 мкмоль/мгОЛ).

6. Включение в комплекс лечебных мероприятий жирорастворимых витаминов-антиоксидантов: алг}а-токоферола, витаминов А и Д^ в физиологических дозировках бальным брокхолегочными осложнениями ОРВИ обеспечивает улучшение клинического течения заболевания, нормализацию интенсивности ПОЯ в клетках крови и восстановление корреляционных связей между показателями в системе перекисное окисление липидов - антлоксидантная защита,

7; При бронхолегочных осложнениях ОРЕЛ с сопутствующей яелезо-лефицимюй анемией показано назначение водорастворимого антиоксидаята - аскорбиновой кислоты с ({«рроградуметом, что приводит к сокращению основных клинических симптомов заболевания, нормализации интенсивности ПОЛ в лимфоцитах и эритроцитах, улучшению показателей красной крови и восстаноаченко утраченных корреляционных связей в системе иерекисное окисление лиггадов - антиоксидантная защита.

6, Вариабельность метаболических сдвигов, широкие'компенсатор-ние возможности организг/а ребенка требуют комплексной оценки процессов свободно-радикального окисления для определения . показаний к назначению антиоксидантной терапии.

- ?л -

, ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ .

1. Определение интенсивности процессов перекионого окисления лшпщов и активности ферментов антиоксидантной защиты у детей," больных ОРШ, рекомендовано проводить в лимфоцитах, что наиболее информативно и может быть использовано как дополнительный-критерий оценки тяжести течения ОРШ и конт-'роля за эффективностью лечения.

2. У больных бронхолегочныш осложнениями ОРШ на основании экспресс-исследований уровня диеновых конъюгатов в лимфоцитах обосновано включение' виташнов-антиоксидаптов в комплекс лечебных мероприятий. При ДК более 0,50 мкмоль/мгОЛ показано назначете виташнов Е или А, у больных с ДК менее 0,56 . мкмоль/мгОЛ - витамина Д2. В случае сопутствующей железоде-

фищгоюй анемии и низких показателей ДК целесообразно назначение аскорбиновой кислоты-с ферроградуметом. Витамины( применяются в физиологических дозировках через рот в течение 5-7 дней,-

СПИСОК РАБОТ, ОПУШ'ЮРЛШЖ ПО ГЕНЕ ДИССЕРТАНТ

1. Тихомирова О.В., Иванова Б,В., Говорова Л,В, Применение вмтаганов антиоксидянтного деГотвпя для коррекции процессов ПОЛ у детеП при ОРВП // Детские инфекции.-СПб.-T99I.-Вш,Я.-С.45-54.

2. Тихомирова 0,В, Процесс» перекиокого окисления лшшдов

и антиоксидантнои защити у детеР при ОРШ // Острие респираторные нируснне инфекции у детеА.-СПб.-Т99Я.-0.62-69.

В. Гелезпикот Г.Ф., Тихомирова O.S., Иванова В.Б. Перпиченое огтслегтпо лтгидов и «гпуяорерктишгость Т-лгофштов nr.i ОРШ у детеА // Сборник патрр^ллоч нпуяно-прагшигескоП «..Hfeperacia Pf тос-нно-горского ордена Бенина госпиталя им. H.A. Сетаияко, посляпепчоП 37Б-детяю со дня 0пн0Рптот.-Кр01лтгпдт.-1992.-О.йе-2?.