Автореферат и диссертация по медицине (14.00.46) на тему:Особенности морфологии эритроцитов периферического звена эритрона у жителей г. Беслана

На правах рукописи

ПЛИЕВА Альбина Борисовна

ОСОБЕННОСТИ МОРФОЛОГИИ ЭРИТРОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОГО ЗВЕНА ЭРИТРОНА У ЖИТЕЛЕЙ г. БЕСЛАНА

14.00.46 - Клиническая лабораторная диагностика

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва - 2009

003462713

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» и в Государственном учреждении Гематологическом Научном Центре Российской Академии Медицинских наук.

Научный руководитель:

доктор медицинских наук консультант: доктор медицинских наук, профессор

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор доктор медицинских наук, профессор

Сарычева Тереза Георгиевна

Тогузов Руслан Тимофеевич

Сухоруков Владимир Сергеевич Девиченский Вячеслав Михайлович

Ведущее учреждение:

Российская медицинская академия последипломного образования Росздрава Защита состоится « » 2009 года на заседании

диссертационного совета Д.208.072.08 при ГОУ ВПО РГМУ Росздрава по адресу: 117997, Москва, ул. Островитянова, д.1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО Российского государственного медицинского университета по адресу: 117997, Москва, ул. Островитянова, д. 1.

Автореферат разослан « » 2009 года

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор

А.К.Рылова

Актуальность исследования.

Эритроциты играют основную роль в обеспечении организма человека кислородом, представляя собой высокоспециализированную транспортную систему, переносящую кислород от легких к тканям. Установлено, что у здорового человека в периферической крови большинство эритроцитов представлено дискоцитами правильной формы. Дискоциты обладают высокой деформабильностью и эластичностью, что позволяет им продвигаться как в крупных сосудах, так и мелких капиллярах диаметром 3-5 мкм. Такая форма эритроцитов обеспечивает наиболее адекватное обеспечение тканей кислородом и во многом определяет эффективность протекания физиологических процессов. Изменение формы эритроцитов (пойкилоцитоз) может быть результатом нарушения внутриклеточного обмена или возникать вследствие внешних физико-химических и иммунологических воздействий, то есть клетки могут подвергаться различным обратимым и необратимым трансформациям [Ю.К. Новодержкина, З.Г. Шишканова, И.Г. Козинец, 2004].

Форму эритроцитов исследуют в мазках периферической крови, окрашенных по Романовскому в световом микроскопе, но данная методика является в большей степени субъективной оценкой формы клеток и имеет достаточно высокий коэффициент вариации. Разработка метода компьютерной морфометрии положила начало новому периоду в исследовании эритроцитов периферической крови. С помощью данного метода стало возможным исследование морфологических изменений в эритроцитах и получение более полной информации о состоянии эритрона по сравнению с традиционными лабораторными методами. На основании анализа контура, формы клетки, профиля оптической плотности возможно проведение автоматической классификации клеток на морфологические типы эритроцитов: дискоциты, эхиноциты, эллиптоциты, мишеневидные, каплевидные клетки и др. Анализируется такое число клеток, которое делает результат исследования статистически достоверным и резко снижает коэффициент вариации.

Работы, посвященные изучению формы эритроцитов в норме и при патологических состояниях с помощью компьютерной морфометрии в московском регионе, в том числе и в Северной Осетии малочисленны. Нами изучена морфология эритроцитов здоровых людей (мужчин и женщин), проживающих в Северной Осетии и при развитии железодефицитной анемии у женщин.

Результаты исследования количественных и качественных характеристик периферической крови позволили дать оценку состоянию периферического звена эритрона у жителей Северной Осетии, что в свою очередь может быть использовано в качестве регионального диагностического критерия в лабораторной медицине.

Цель исследования:

Выявление особенностей морфологии эритроцитов у здорового населения г. Беслана (Северная Осетия) в возрасте от 18 до 45 лет, у беременных женщин, у женщин детородного возраста, страдающих железодефицитной анемией.

Задачи исследования:

1. Проанализировать показатели периферической крови у жителей г. Беслана:

• здоровых мужчин;

• здоровых женщин детородного возраста;

• женщин детородного возраста с железодефицитной анемией;

• беременных женщин с нормальными показателями эритрона;

• беременных женщин с железодефицитной анемией.

2. Провести морфометрию эритроцитов периферической крови всех обследованных групп и оценить количественный и качественный состав клеток.

3. Изучить и охарактеризовать количественный и качественный состав ретикулоцитов периферической крови с использованием классификации по Гельмейеру.

4. Сравнить полученные показатели периферического отдела эритрона здоровых жителей данного региона с показателями, полученными при обследовании

4

здоровых людей той же возрастной группы московского региона (контрольная группа).

Научная новизна работы.

Впервые с помощью методики компьютерной морфометрии выявлены особенности периферического звена эритрона у здоровых жителей г. Беслана и отмечена повышенная активность эритроидного ростка.

Практическая значимость:

Выявление особенностей количественных и качественных изменений показателей периферического звена эритрона у населения г. Беслана позволило использовать эти показатели в качестве критерия оценки в диагностике заболеваний крови.

Положения, выносимые на защиту.

1. У здоровых мужчин г. Беслана увеличено содержание гемоглобина и некоторых эритроцитарных индексов по сравнению с мужчинами той же возрастной группы московского региона.

2. Мужчины и женщины одинаковых возрастных групп данного региона имеют изменения в количественном и качественном составе эритроцитов.

3. Количество ретикулоцитов у мужчин и женщин г. Беслана увеличено по сравнению с жителями московского региона.

4. У здоровых беременных женщин и беременных с ЖДА (жителей Беслана) увеличено количество предгемолитических форм эритроцитов.

Апробация работы.

Апробация состоялась 5 июня 2008 г. на совместном заседании кафедры клинической лабораторной диагностики ФУВ, ПНИЛ нуклеинового и белкового обмена ГОУ ВПО РГМУ и лаборатории гемоцитологии Гематологического научного центра РАМН.

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 4 печатные работы.

Личный вклад автора.

Автор разработал алгоритм обследования пациентов, изучил количественные и качественные показатели периферического звена эритрона, исследовал морфологию эритроцитов с помощью компьютерной морфометрии, охарактеризовал количественный и качественный состав ретикулоцитов, провел статистическую обработку и анализ полученных результатов.

Объем и структура диссертации.

Диссертационная работа изложена на 113 страницах машинописного текста. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов и списка литературы, включающего 49 отечественных и 58 иностранных источников. Работа иллюстрирована 16 таблицами, 12 рисунками.

Материалы и методы.

Материалы.

Пациенты города Беслана были обследованы на базе Центральной районной больницы. Пациенты московского региона - на базе ГУ Гематологического Научного Центра РАМН г. Москвы.

Исследование проводили в период с сентября 2005 по сентябрь 2007 года, в осенне-зимний период.

Краткая клиническая характеристика групп представлена в таблице №1. Таблица №1. Клиническая характеристика обследованных групп.

Обследованные лица (п=265) Количество лиц в каждой группе

Мужчины (норма) I группа 38

Женщины (норма) II группа 38

Женщины (ЖДА) III группа 39

Беременные женщины (норма) IV группа 20

Беременные женщины (ЖДА) V группа 30

Контрольная группа мужчины (норма) VI группа 50

Контрольная группа женщины (норма) VII группа 50

Методы исследований:

Для оценки периферического звена эритрона использовали следующие методы:

• анализ эритроцитарных параметров на гематологическом анализаторе;

• компьютерная морфометрия эритроцитов периферической крови на сухих

неокрашенных мазках с помощью автоматизированной установки, разработанной в лаборатории ГУ ГНЦ РАМН;

• микроскопический метод ретикулоцитометрии с определением процентного

содержания клеток разных типов («формулы» ретикулоцитов по Гейльмейеру).

Анализ крови на гематологическом анализаторе.

Материалом исследования была венозная кровь 265 обследованных. Подсчет клеток крови проводили на автоматическом гематологическом анализаторе фирмы "Sysmex" КХ- 21 (Япония).

Данный анализатор позволяет одновременно анализировать 18 параметров крови, из них 7 показателей по эритроцитам: RBC (количество эритроцитов), HGB (гемоглобин), НСТ (гематокрит), MCV (средний объем эритроцита), RDW (ширина распределения эритроцитов по объему), МСН (среднее содержание гемоглобина в эритроците, аналог цветового показателя), МСНС (средняя концентрация гемоглобина в эритроците); 4 - по лейкоцитам: WBC (количество лейкоцитов) и частичная дифференцировка лейкоцитов на три популяции (лимфоциты, средние клетки и гранулоциты в процентном соотношении и в абсолютных цифрах); 4 - по тромбоцитам: PLT (количество тромбоцитов), МРУ(средний объем тромбоцитов), PDW (ширина распределения тромбоцитов по объему), РСТ (тромбокрит). Прибор регистрирует 3 гистограммы распределения клеток по объему (эритроциты, лейкоциты и тромбоциты).

Компьютерная морфометрия эритроцитов периферической крови.

На основании анализа контура, формы клетки, профиля оптической плотности при помощи персонального компьютера проводилась автоматическая классификация клеток на морфологические типы эритроцитов: дискоциты, эхиноциты, эллиптоциты, кодоциты, сфероциты и другие. Таким образом определяли «формулу» эритроцитов, т.е. процентное содержание клеток разных типов.

Микроскопический метод ретикулоцитометрии.

В основе метода лежит суправитальная окраска красителями, выявляющими ретикулофиламентозную субстанцию в молодых эритроцитах (вариант окраски в пробирке бриллиантовым крезиловым синим, готовый набор фирмы «Гем», краситель «Диахим-Гемистейн-РТЦ» НПФ «Абрис+», Санкт-Петербург). Микроскопию мазков проводили с иммерсией. Разделение ретикулоцитов на классы проводили по классификации Гейльмейера - по степени созревания данных клеток.

Классификация ретикулоцитов (Гейльмейера).

1 0 группа - это ядросодержащие эритроидные клетки с густой

ретикулофиламентозной сетью в центре (соответствует оксифильному нормобласту)

2 I группа - ретикулоциты с грубой шарообразной сетью в центре клетки.

3 II группа - ретикулоциты с менее густой сетью, распространенной по всей цитоплазме.

4 III группа - ретикулоциты с обрывками ретикулофиламентозной сети в разных участках цитоплазмы.

5 IV группа - ретикулоциты с единичными нитями или гранулами ретикулофиламентозной сети в отдельных участках цитоплазмы.

В норме в периферической крови содержится 61% ретикулоцитов IV группы; 32% - к III группе, 7% - ко II группе; около 0,1% к I группе. Левый сдвиг (в сторону II, I, 0 групп) на фоне ретикулоцитоза имеет место при активации эритропоэза. У взрослого человека в периферической крови содержание ретикулоцитов колеблется от 2 до 12%0.

Результаты собственных исследований и их обсуждение.

В работе был проведен сравнительный анализ характеристик количественного

и качественного состава периферического звена эритрона групп здорового

населения (мужчин и женщин) г. Беслана и здорового населения (мужчин и женщин) московского региона; группы женщин, страдающей ЖДА (г. Беслан); группы здоровых беременных женщин и беременных женщин с ЖДА (г. Беслан).

Морфологическая характеристика периферического звена эритрона у здоровых жителей.

Было обследовано 76 человек (38 мужчин и 38 женщин) в возрасте от 18 до 45 лет, жителей Беслана. Анализировали эритроцитарные параметры, которые определяются прямым способом (гемоглобин, количество эритроцитов, гематокрит) и эритроцитарные индексы. Для проведения сравнительной характеристики были использованы показатели периферического звена эритрона здоровых людей (50 мужчин и 50 женщин), полученные при обследовании в ГУ ГНЦ РАМН, г. Москвы. Проведенное исследование эритроцигарных параметров у здорового населения г. Беслана и здорового населения московского региона позволило выявить как общие закономерности, так и различия. Показатели периферического отдела эритрона здоровых мужчин представлены в таблице №2.

Таблица № 2. Показатели эритроцигарных параметров здоровых мужчин (М±га).

Обследованные лица Параметры

КВС10|2/л ШВг/л НСТ% МСУфл МСНпг МСНСг/л ШЭ^/о

I группа 4,6±0,06 151,8±1,86* 42,5±0,39 87,4±1,24* 31,7±0,54* 36,1 ±0,25* 13,4±0,13

VI группа 4,8±0,11 144,3±2,40 44,0±0,90 90,4±0,80 29,9±0,40 33,0±0,32 13,7±0,20

Примечание: * р<0,05

У здоровых мужчин г. Беслана среднее значение гемоглобина (151,8±1,89г/л) было выше, чем у здоровых мужчин московского региона (144,3±0,24г/л), что статистически достоверно (р<0,05). Зарегистрировано также увеличение среднего

ю

содержания и средней концентрации гемоглобина в эритроците (р<0,05). В группе здоровых мужчин г. Беслана наблюдается снижение среднего объема эритроцитов (р<0,05). Все полученные нами показатели свидетельствуют о нормальном эритропоэзе, однако некоторые из них (НвВ, МСН, МСНС) отличны от показателей группы сравнения. Тенденция к увеличению общего гемоглобина, повышение содержания и концентрации гемоглобина внутри клетки, возможно, обусловлена изменением форм и размера клеток, на что указывает уменьшение объема эритроцита (р<0,05). Изменение состава эритроцитов может быть одной из причин повышения содержания гемоглобина у здоровых мужчин.

«Формула» эритроцитов, т.е. процентное соотношение различных по форме эритроцитов, представлена в таблице №3.

Таблица №3. Данные компьютерной морфометрии эритроцитов здоровых мужчин (М±т).

Формула эритроцитов, % I группа (п=38) VI группа(п=50)

Дискоциты 65,26±4,20* 83,17±4,60

Эхиноциты 0,88±0,40 -

Эллиптоциты 2,0±0,55* 0,20±0,04

Дакриоциты 1,8±0,12* 0,10±0,02

Кодоциты 0,20±0,08 0,15±0,09

Дегмациты 0,70±0,04* 0,10±0,02

Сфероциты 22,7±5,0* 15,27±4,40

Прочие 8,28±2,57* 1,22±0,20

Эритроцитометрия

Средний диаметр эритроцита 7,20±0Д8 7,17±0,03

Показатель овалоцитоза 0,82±0,02 0,88±0,01

Морфометрия

Показатель пойкилоцитоза 18,80±4,72 16,60±0,01

Показатель анизоцитоза 7,60±0,85 5,80±0,10

Показатель анизохромии 21,2±3,21 17,0±0,50

Примечание: * р<0,05

У мужчин Беслана выявлено снижение количества дискоцитов (65,26±4,2%), увеличение количества сфероцитов до 22,7±5,0%, а также других форм эритроцитов до 8,28±2,57%, что статистически достоверно. Обнаружена тенденция к увеличению пойкилоцитоза и анизохромии.

Результаты исследования мазков крови с использованием светового микроскопа и последующим подсчетом содержания ретикулоцитов представлены в таблице №4.

Таблица №4. Количество ретикулоцитов (%) различных классов у здоровых мужчин (М±ш).

Ретикулоциты, %о I группа VI группа

0 класс - -

I - -

II 2,33±0,13* 1,4±0,20

III 3,62±0,66* 1,9±0,30

IV 3,37±0,66 2,8±0,40

сумма 7,87±1,59* 4,8±0,80

Примечание: * р<0,05

Установлено, что количество ретикулоцитов у здоровых мужчин г. Беслана (7,87±1,59%) соответствуют норме. Однако, при сравнении с данными контрольной группы (4,8±0,80), количество ретикулоцитов у жителей Беслана почти в 2 раза

12

выше (р<0,05). Повышение ретикулоцитов идет за счет более молодых форм, что свидетельствует об активации эритропоэза.

Сравнительная характеристика показателей периферического отдела эритрона здоровых женщин г. Беслана и московского региона представлена в таблице №5.

Таблица №5. Показатели эритроцитарных параметров здоровых женщин (М±ш).

Обследованные лица Параметры

RBClO''/л HGBr/л НСТ% МСУфл МСНпг МСНСг/л RDW%

II группа 4,26±0,06 129,0±1,55 37,9±0,33 85,3±1,05* 30,7±0,41* 35,1±0,34* 13,7±0,30

VII группа 4,32±0,05 126,5±1,50 38,0±0,50 88,8±1,02 29,3±0,30 32,9±0,21 13,6±0,14

Примечание: * р<0,05

Средние значения гемоглобина, количества эритроцитов, гематокрита, показателя анизоцитоза у женщин обеих групп не отличались. У женщин г. Беслана достоверно выше среднее содержание гемоглобина в эритроците (МСН) и средняя концентрация гемоглобина в эритроците (МСНС). При увеличении этих показателей отмечается снижение среднего объема эритроцита (р<0,05).

Данные морфометрического исследования эритроцитов исследования представлены в таблице №6.

Таблица №6. Данные компьютерной морфометрии эритроцитов здоровых женщин (М±ш).

Формула эритроцитов, % II группа (п=38) VII группа (п=50)

Дискоциты 75,60±4,54 83,17±4,60

Эхиноциты 1,1±0,0 -

Эллиптоциты 2,0±0,55* 0,20±0,04

Дакриоциты 1,80±0,12* 0,10±0,02

Кодоциты 0,20±0,08 0,15±0,09

Дегмациты 0,70±0,04* 0Д0±0,02

Сфероциты 21,62±4,18 15,27±4,40

Прочие 2,30±0,12 1,20±0,20

Эритроцитометрия

Средний диаметр эритроцита 7,22±0,16 7,17±0,03

Показатель овалоцитоза 0,89±0,01 0,88±0,01

Морфометрия

Показатель пойкилоцитоза 21,0±6,43 16,6±0,01

Показатель анизоцитоза 6,4±0,42 5,8±0,10

Показатель анизохромии 19,0±4,29 17,0±0,50

Примечание: * р<0,05

При проведении морфометрического исследования эритроцитов у здоровых женщин была выявлена тенденция к снижению содержания дискоцитов

14

(75,6±4,54%), увеличению числа сфероцитов (21,62±4,18%) и показателя пойкилоцитоза у женщин г. Беслана. У них обнаружено статистически достоверное увеличение количества эхиноцитов по сравнению с таковым у жительниц московского региона.

Исследование количества ретикулоцитов показало увеличение как их общего количества (9,42±1,81%о), так и их отдельных форм (р<0,05) у здоровых женщин г. Беслана. Данные представлены в таблице №7.

Таблица №7. Количество ретикулоцитов (%) различных классов у здоровых женщин (М±т).

Ретикулоциты,/оо II группа VII группа

0 класс - -

I - -

II 1,6±0,39 1,4±0,20

III 4,8±1,06* 1,9±0,30

IV 4,7±1,06* 2,8±0,40

сумма 9,4±1,81* 4,8±0,80

Примечание: * р<0,05

Анализ показателей периферической крови здоровых людей (мужчин и женщин) г. Беслана показал, что эритроцитарные индексы не выходят за возрастные референтные пределы, но при этом имеют некоторые свои региональные особенности.

В крови здоровых лиц количество дискоцитов правильной формы,

характерной для функционально сохранного эритроцита, составляет 85,05±1,0%.

Нарушения эритропоэза, изменения электролитного баланса крови приводят к

появлению обратимо измененных клеток (эхиноцитов и стоматоцитов) и

необратимо измененных (сфероцитов, эллиптоцитов, кодоцитов). Количество так

называемых переходных форм эритроцитов составляет в среднем 12,86±0,38%.

Предгемолитических форм эритроцитов, которые потеряли способность принимать

15

форму правильного дискоцита, необходимую для нормального функционирования этих клеток, - около 2,14±0,1%. Такие эритроциты имеют форму купола, сферы, спущенного мяча. Встречаются единичные дегенеративно-измененные клетки (0,19±0,06). По своему строению клеточная мембрана двояковогнутого эритроцита на всем протяжении одинакова. Впадины и выпуклости могут возникать и занимать различные ее участки. При этом давление изнутри или снаружи может колебаться в пределах 15%, не вызывая сморщивания клетки, указывая на значительную лабильность в изменении формы клетки без накопления энергии эластичности. Если клеточная мембрана нарушается, клетка принимает сферическую форму и может гемолизироваться. [С.А.Сторожок, А.Г.Санников, Ю.М. Захаров, 1997].

При обследовании здоровых мужчин и женщин Северной Осетии нами обнаружены некоторые изменения форм эритроцитов, и эти изменения проявились в снижении количества дискоцитов и увеличении количества эритроцитов другой формы.

Все полученные данные не выходят за референтные пределы и указывают на достаточно стабильное функционирование эритроидного ростка. При обработке данных были получены средние значения показателей периферической крови, морфометрического исследования эритроцитов и ретикулоцитометрии, которые дали возможность определить физиологическую норму для данной возрастной популяции, проживающей в регионе.

Морфологическая характеристика эритрона у женщин детородного возраста с железодефицитной анемией г. Беслана.

Были исследованы показатели периферической крови 39 женщин репродуктивного возраста с установленным диагнозом ЖДА.

Основной причиной развития анемии в этой группе была хроническая кровопотеря и недостаточное поступление железа в организм.

В таблице №8 представлены показатели периферического отдела эритрона женщин с ЖДА.

Таблица №8. Показатели эритроцитариых параметров здоровых женщин и женщин с ЖДА (М±гп).

Параметры RBC 10и/л HGBr/л HCT % MCV фл МСН пг МСНСг/дл RDW %

II группа 4,26±0,06 129,0±1,55 37,9±0,33 85,3 ±1,05 30,7±0,40 35,1±0,34 13,7±0,30

III группа 3,98±0,07* 103,2±1,45* 30,6±0,39* 77,9±0,86 24,6±0,35* 27,7±0,38* 15,0±0,44*

Примечание: * р<0,05

Сравнительный анализ полученных показателей периферического звена эритрона у здоровых женщин и страдающих ЖДА выявил статистически достоверную разницу практически по всем показателям (р<0,05).

В этой же группе была проведена морфометрия эритроцитов периферической крови. Данные представлены в таблице №9.

Таблица №9. Данные компьютерной морфометрии эритроцитов здоровых женщин и женщин с ЖДА (М±т).

Форму ла эритроцитов, % II группа (п=38) III группа (п=39)

Дискоциты 75,60±4,54 62,40±4,69*

Эхиноциты 1,10±0,47 0,90±0,49

Эллиптоциты - 1,97±0,40*

Дакриоциты ■ 1,20±0,42*

Кодоциты 0,60±0,25 0Д5±0,09

Дегмациты 0,70±0,04 0,65±0,15

Сфероциты 21,62±4,18 15,27±4,40

Прочие 2,30±0,12 13,70±4,16*

Эритроцитометрия

Средний диаметр эритроцита 7,22±0,16 6,87±0,57

Показатель овалоцитоза 0,89±0,01 0,86±0,03

Морфометрия

Показатель пойкилоцитоза 21,0±6,4 23,2±9,0*

Показатель анизоцитоза 6,40±0,42 9,20±0,28

Показатель анизохромии 19,0±4,29 31,6±5,36*

Примечание: * р<0,05

Морфометрическое исследование эритроцитов показало, что у женщин с ЖДА снижено количество дискоцигов (р<0,05), увеличен показатель анизоцитоза (р<0,05) и анизохромии (р<0,05) по сравнению с таковыми в группе здоровых женщин.

При исследовании ретикулоцитов периферической крови с учетом классификации по Гейльмейеру отмечена тенденция к увеличению, как каждого класса клеток, так и их общего количества. Однако, статистически достоверных различий не обнаружено.

Морфологическая характеристика эритрона беременных женщин г. Беслана.

Из 668 беременных женщин, наблюдающихся в поликлинике г. Беслана в 2005 году, у 155 (23,2%) диагностирована ЖДА.

Обследование периферического отдела эритрона здоровых беременных (п=20) и с ЖДА (п=30) проведено во II и III триместрах беременности. Полученные данные представлены в таблице №10.

Таблица №10. Показатели эритроцитарных параметров беременных женщин (М±ш).

Параметры ЛВС 1012/л НИЗт/л нет % МСУ фл МСН пг МСНСг/дл ЫЖ%

IV группа 4,59±0,14 130,8±2,28 39,4±0,70 83,01±0,62 30,9 ±0,33 34,9±0,32 13,6±ОДО

V группа 3,89±0,06* 106,2±1,24* 31,9±0,51* 75,9±0,38* 23,0±0,23* 27,2±0,36* 15,0±0,57*

Примечание: * р<0,05

Во время беременности увеличиваются потребности железа в организме женщины, которые компенсируются за счет поступления его из депо и увеличения абсорбции железа из желудочно-кишечного тракта, но при низком исходном уровне развивается его дефицит. ЖДА - самая распространенная анемия, которая встречается среди беременных. Из 30 обследованных беременных с установленной железодефицитной анемией - в первой половине беременности железодефицитная анемия диагностирована у 11 женщин, а во второй - у 19. Увеличение количества женщин с ЖДА во второй половине беременности обусловлена нарастающим дефицитом железа в организме.

При сравнении показателей периферической крови у беременных женщин с нормой и с ЖДА было обнаружено статистически достоверное (р<0,05) снижение всех эритроцитарных показателей у беременных женщин с анемией.

Полученные данные морфометрии эритроцитов беременных женщин представлены в таблице №11.

Таблица №11. Данные компьютерной морфометрии эритроцитов беременных женщин (М±т).

Формула эритроцитов, % IV группа (п=20) V группа(п=30)

Дискоциты 70,10±6,37 69,9±6,0

Эхиноциты 3,0±1,07* 0,85±0,10

Эллиптоциты 1,70±0,38* 0,50±0,08

Дакриоциты 1,10±0,38 1,95±0,90

Кодоциты 0,30±0,12 6,70±3,80*

Дегмациты 0,75±0,25 0,20±0,08

Сфероциты 10,02 ±2,66 18,60±4,40*

Прочие 2,30±0,12 13,70±5,25

Эритроцитометрия

Средний диаметр эритроцита 6,94±0,21 6,24±0,60

Показатель овалоцитоза 0,85±0,06 0,88±0,03

Морфометрия

Показатель пойкилоцитоза 23,0±4,07 28,2±6,0

Показатель анизоцитоза 7,40±1,71 7,60±1,07

Показатель анизохромии 19,8±4,5 22,0±4,72

Примечание: * р<0,05

Выявлено повышенное количество измененных форм клеток (эхиноцитов, элиптоцититов) у беременных с нормальными показателями гемоглобина (р<0,05), у беременных с ЖДА достоверно увеличено количество кодоцитов и сфероцитов.

20

Отмечена тенденция к увеличению показателей пойкилоцитоза и анизохромии у беременных женщин с анемией.

По данным литературы [С.А. Сторожок, Г.З.Санников, Ю.М. Захаров, 1997] при физиологической беременности происходит некоторое уменьшение диаметра эритроцитов, выявляется склонность эритроцитов к сфероцитозу. Это связано с воздействием на них продуктов метаболизма, накапливающихся в организме беременной.

В группе обследованных беременных с анемией увеличение количества сфероцитов и необратимых предгемолитических форм зависят от тяжести ЖДА. Учитывая данные о функциональном и морфологическом состоянии эритроцитов как при физиологически протекающей, так и при осложненной железодефицитной анемией беременности выявлено, что более чувствительным показателем является средний объем эритроцитов.

Показатели ретикулоцитометрии обеих групп представлены в таблице №12.

Таблица №12. Количество ретикулоцитов (%) различных классов у беременных женщин (M±in).

Ретикулоциты,%о IV группа V группа

0 класс - -

I - -

II 2,75±0,39 1,8±1,30

III 5,87±1,19 8,33±1,59*

IV 5,62±1,34 10,83±1,59*

сумма 12,87±2,58 19,83±2,65*

Примечание: * р<0,05

При сравнении результатов ретикулоцитометрии двух групп женщин отмечена статистически достоверная разница по каждому классу клеток. Вьивлено достоверное увеличение количества ретикулоцитов у группы беременных женщин с ЖДА (р<0,05).

При изучении эритроцитов периферической крови у беременных женщин с ЖДА зарегистрировано уменьшение объема эритроцитов, появление пойкилоцитоза, а также патологических форм клеток. В результате изменения морфологических показателей эритроцитов происходит усиление гемолиза и уменьшении средней продолжительности жизни эритроцитов. Это в свою очередь ведет к активации эритропоэза и увеличению количества ретикулоцитов в периферической крови.

выводы.

1. Установлено достоверное повышение содержания гемоглобина, среднего содержания (МСН) и средней концентрации гемоглобина (МСНС) в эритроците и снижение среднего объема эритроцита (МСУ) у здоровых мужчин г. Беслана по сравнению с московским регионом.

2. У здоровых женщин г. Беслана при исследовании эритроцитарных индексов наблюдалось достоверное повышение среднего содержания (МСН) и средней концентрации гемоглобина (МСНС) в эритроците и снижение среднего объема эритроцита по сравнению с женщинами московского региона.

3. У здоровых мужчин и женщин г. Беслана по сравнению с жителями московского региона достоверно снижено количество эритроцитов типичной формы - дискоцитов, при увеличении числа неполноценных форм сфероцитов, эхиноцитов, кодоцитов.

4. Выявлено достоверное повышение содержания ретикулоцитов у здоровых мужчин (примерно в 1,5 раза) и здоровых женщин г. Беслана по сравнению с московским регионом, что свидетельствует о повышенной активности эритроидного ростка.

5. У здоровых беременных женщин и беременных с ЖДА увеличено количество ретикулоцитов связаное с увеличением количества предгемолитических форм эритроцитов.

6. Полученные показатели периферического звена эритрона могут быть использованы как вариант физиологической нормы для жителей данного региона.

Список опубликованных работ

1. Плиева А.Б., Джигкаева JI.K., Купеева Ж.Ч., Волкова И.А. Дифференциальная диагностика железодефицитной анемии в условиях поликлиники. В материалах X Российского национального конгресса «Человек и лекарство». Москва. - 2003. с. 744.

2. Плиева А.Б., Джигкаева Л.К., Купеева Ж.Ч., Петрик И.Ф. Изучение периферического отдела эритрона у жителей Осетии. // Материалы VII Международной научно - практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке». Москва. - 2006. - с. 394.

3. Плиева А.Б., Джигкаева Л.К., Купеева Ж.Ч., Петрик И.Ф. Изучение периферического отдела эритрона у жителей Осетии. II Материалы конференции «Актуальные вопросы интервенционной радиологии (рентгенхирургии)» г. Владикавказ. -2006. С. 17.

4. Плиева А.Б., Купеева Ж.Ч. Причины развития дефицита железа у жителей Осетии. // Журнал «Клиническая лабораторная диагностика». - 2007. - №9. с. 55.

Список условных сокращений

НОВ - гемоглобин

МСУ - средний корпускулярный объем эритроцита

11ВС - количество эритроцитов

ыж - ширина распределения эритроцитов по объему

wвc - количество лейкоцитов

ЖДА - железо дефицитная анемия

мен - среднее содержание гемоглобина в эритроците

мснс - средняя концентрация гемоглобина в эритроците

нет - гематокрит

ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота

Подписано в печать 19 февраля 2009 г.

Формат 60x90/16

Объём 1,50 п. л.

Тираж 50 экз.

Заказ № 190209191

Оттиражировано на ризографе в ООО «УниверПринт» ИНН/КПП 7728572912X772801001

Адрес: 117292, г. Москва, ул. Дмитрия Ульянова, д. 8, кор. 2.

Тел. 740-76-47, 125-22-73.

http://vvvvw.univerprint.ru

Эритроциты играют основную роль в обеспечении организма человека кислородом, представляя собой высокоспециализированную транспортную систему, переносящую кислород от легких к тканям. Установлено, что у здорового человека в периферической крови большинство эритроцитов представлено дискоцитами правильной формы. Дискоциты обладают высокой деформабильностью и эластичностью, что позволяет им продвигаться как в крупных сосудах, так и мелких капиллярах диаметром 3-5 мкм. Такая форма эритроцитов обеспечивает наиболее адекватное обеспечение тканей кислородом и во многом определяет эффективность протекания физиологических процессов. Изменение формы эритроцитов (пойкилоцитоз) может быть результатом нарушения внутриклеточного обмена или возникать вследствие внешних физико-химических и иммунологических воздействий, то есть клетки могут подвергаться различным обратимым и необратимым трансформациям [Ю.К. Новодержкина, З.Г. Шишканова, И.Г. Козинец, 2004].

Форму эритроцитов исследуют в мазках периферической крови, окрашенных по Романовскому в световом микроскопе, но данная методика является в большей степени субъективной оценкой формы клеток и имеет достаточно высокий коэффициент вариации. Разработка метода компьютерной морфометрии положила начало новому периоду в исследовании эритроцитов периферической крови. С помощью данного метода стало возможным исследование морфологических изменений в эритроцитах и получение более полной информации о состоянии эритрона по сравнению с традиционными лабораторными методами. На основании анализа контура, формы клетки, профиля оптической плотности возможно проведение автоматической классификации клеток на морфологические типы эритроцитов: дискоциты, эхиноциты, эллиптоциты, мишеневидные, каплевидные клетки и др. Анализируется такое число клеток, которое делает результат исследования статистически достоверным и резко снижает коэффициент вариации.

Работы, посвященные изучению формы эритроцитов в норме и при патологических состояниях с помощью компьютерной морфометрии в московском регионе и в Северной Осетии малочисленны. Нами изучена морфология эритроцитов здоровых людей (мужчин и женщин), проживающих в Северной Осетии и при развитии железодефицитной анемии у женщин.

Результаты исследования количественных и качественных характеристик периферической крови позволили дать оценку состоянию периферического звена эритрона у жителей Северной Осетии, что в свою очередь может быть использовано в качестве регионального диагностического критерия в лабораторной медицине.

Цель исследования:

Выявление особенностей морфологии эритроцитов у здорового населения г. Беслана (Северная Осетия) в возрасте от 18 до 45 лет, у беременных женщин, у женщин детородного возраста, страдающих железодефицитной анемией. Задачи исследования:

1. Проанализировать показатели периферической крови у жителей г. Беслана:

• здоровых мужчин;

• здоровых женщин детородного возраста;

• женщин детородного возраста с железодефицитной анемией;

• беременных женщин с нормальными показателями эритрона;

• беременных женщин с железодефицитной анемией.

2. Провести морфометрию эритроцитов периферической крови всех обследованных групп и оценить количественный и качественный состав клеток.

3. Изучить и охарактеризовать количественный и качественный состав ретикулоцитов периферической крови с использованием классификации по Гейльмейеру.

4. Сравнить полученные показатели периферического отдела эритрона здоровых жителей данного региона с показателями, полученными при обследовании здоровых людей той же возрастной группы московского региона (контрольная группа). Научная новизна работы.

Впервые исследованы периферические показатели эритрона у жителей Северной Осетии (г. Беслана) и проведена их сравнительная характеристика с аналогичными показателями жителей московского региона. С помощью метода компьютерной морфометрии выявлены особенности эритроцитов у здоровых жителей г. Беслана, беременных женщин и женщин, больных ЖДА. Дана количественная и качественная характеристика ретикулоцитов во всех обследуемых группах. Практическая значимость:

Учет выявленных особенностей количественных и качественных изменений показателей периферического звена эритрона у населения г. Беслана может быть использован как вариант физиологической нормы для жителей данного региона и в качестве критерия оценки в диагностике заболеваний крови. Положения, выносимые на защиту:

1. У здоровых мужчин г. Беслана увеличено содержание гемоглобина и некоторых эритроцитарных индексов по сравнению с мужчинами той же возрастной группы московского региона.

2. Мужчины и женщины одинаковых возрастных групп данного региона имеют изменения в количественном и качественном составе эритроцитов.

3. Количество ретикулоцитов у мужчин и женщин г. Беслана увеличено по сравнению с жителями московского региона.

4. У здоровых беременных женщин и беременных с ЖДА (жителей Беслана) увеличено количество предгемолитических форм эритроцитов.

выводы.

1. Установлено достоверное повышение содержания гемоглобина, среднего содержания (МСН) и средней концентрации гемоглобина (МСНС) в эритроците и снижение среднего объема эритроцита (MCV) у здоровых мужчин г. Беслана по сравнению с московским регионом.

2. У здоровых женщин г. Беслана при исследовании эритроцитарных индексов наблюдалось достоверное повышение среднего содержания (МСН) и средней концентрации гемоглобина (МСНС) в эритроците и снижение среднего объема эритроцита по сравнению с женщинами московского региона.

3. У здоровых мужчин и женщин г. Беслана по сравнению с жителями московского региона достоверно снижено количество эритроцитов типичной формы — дискоцитов, при увеличении числа неполноценных форм сфероцитов, эхиноцитов, кодоцитов.

4. Выявлено достоверное повышение содержания ретикулоцитов у здоровых мужчин (примерно в 1,5 раза) и здоровых женщин г. Беслана по сравнению с московским регионом, что свидетельствует о повышенной активности эритроидного ростка.

5. У здоровых беременных женщин и беременных с ЖДА увеличено количество ретикулоцитов связаное с увеличением количества предгемолитических форм эритроцитов.