Автореферат и диссертация по медицине (14.00.34) на тему:Иммуномодулирующее действие электромагнитных полей дециметрового диапазона

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР

ЦЕНТРАЛЬНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ КУРОРТОЛОГИИ И ФИЗИОТЕРАПИИ

На правах рукописи УДК 615.849.112:576.8.077.3

/Л

ПЕРШИН СЕРГЕИ БОРИСОВИЧ

ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ ЭЛЕКТРОМАГНИТНЫХ ПОЛЕЙ ДЕЦИМЕТРОВОГО ДИАПАЗОНА

(Экспериментально-клиническое исследование)

14.00.34 — Курортология и физиотерапия 14.00.36 — Аллергология и иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

МОСКВА 1989

Работа выполнена в Центральном научно-исследовательском институте курортологии и физиотерапии Минздрав СССР.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор И. Н. ДАНИЛОВА

доктор медицинских наук, профессор А. А. ЯРИЛИН

доктор медицинских наук, профессор Л. М. КЛЯЧКИН

Ведущая организация— Пятигорский научно-исследовательский институт курортологии и физиотерапии Минздрава РСФСР.

Защита состоится «_»__1989 г. в_часов

на заседании специализированного совета Д 074.01.01 по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора наук по специальности 14.00.34 «Курортология и физиотерапия» при Центральном институте курортологии и физиотерапии Минздрава СССР (121099, Москва, проспект Калинина, 50).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан «_»_1989 г.

Ученый секретарь специализированного совета кандидат медицинских наук

Е. А. Турова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОШ Актуальность проблемы. Проблеме регуляции иммуногенеза уделяется большое внимание. В значительной степени этот интерес обусловлен прямым участием системы иммунитета в поддержании гомеоста-за, обеспечивающего генетическое постоянство организма ($.Вернет,1971; Р.В.Петров 1970; 1982). Многие патологические процессы нередко сопровождаются дефектами иммунитета. Иммунный дисбаланс утяжеляет течение заболевания, осложняет лечение и ухудшает прогноз. Широкое использование в клинической практике цитостатических и гормональных (особенно кортикостероидных) препаратов нередко сопровождается осложнениями, вызванными нарушениями системы иммунитета, а также дисбалансом нейроэндокринных взаимоотношений. С другой стороны, нарушения иммунного гомеостаза, определяемые как "состояние иммунологической недостаточности"С0,117*1/311 ВаИгит, 1976), как правило, сочетаются с расстройством нейроэндокринных соотношений, которые в свою очередь оказывают неблагоприятное действие на иммунную реактивность организма. В этой связи важное значение приобретают исследования, направленные на поиск новых подходов, способных осуществлять иммуноэндокринную коррекцию, а также на разработку новых, патогенетически обоснованных лечебных методик.

Работами ряда авторов показана возможность применения энергии электромагнитных полей дециметрового диапазона (ДМВ) при некоторых иммунодефицитных заболеваниях. ДМВ воздействия на область пораженных суставов и надпочечников у больных ревматоидным артритом (РА) сопровождались повышением синтеза стероидных гормонов, изменением диссоциации белковостероидного комплекса, подавлением синтеза иммуноглобулинов. Эффект от применения ДМВ был подобен действию кортикостероидных препаратов (И.Д.Френкель с соавт., 1973; П.Г.Царфис с соавт.,1978; В.Д.Григорьева с соавт.,1983).

Экспериментальными исследованиями убедительно доказано, что биологические эффекты от применения ДМВ во многом зависят от локализации их воздействия (В.М.Боголюбов, И.Д.Френкель,1983;1985 и другие). Иммуномодулирующее действие ДМВ обусловлено изменениями эндокринного статуса организма. Так, показана активация функции надпочечников и щитовидной железы при локальном воздействии на область этих желез, сопровождающаяся изменениями иммунной реактивности организма (И.Д.Френкель,Ю.Н.Королев,1980; В.М.Боголюбов с соавт.,1985).Учитывая тесную связь между системой иммуните—' та и нейроэндокринной системой (Е.А.Корнева с соавт.,1988;н.Веэе-

аоуз]£у,Е.Зогк1п, 1977; Н.Та1а1, 1983), высокую чувствительность центральной нервной системы (ЩС) к ДМВ облучениям (О.А.Крылов с соавт.,1981), а также тот факт, что гормоны является активными иммуномодулятораыи (В.Ф.Чеботарев,1979;Е.А.Корнева,1985 и другие), можно предположить гормональную основу имцуномодуляции при ДМВ воздействиях, что является важным и перспективным как для физиотерапии, так и для практического здравоохранения в плане совершенствования имеющихся и создания новых подходов к нелекарственной иммунокоррекщи. Медикаментозная иммунокоррекция, применяющаяся в практике, к сожалению, не всегда бывает эффективна.

До настоящего времени специальных исследований, изучавших участие различных гормонов в реализации иммуномодулирущих эффектов на различных иммунных моделях при ДМВ воздействиях на области эндокринных желез и центров нейроэндокринной регуляции, практически не проводилось. Отсутствуют сведения о действии ДМВ на способность организма формировать иммунный отевт к различным по своей природе антигенам. Не выяснена роль метаболических процессов в формировании гормональных реакций при ДМВ воздействиях, сопровождающихся иммуномодулируицими эффектами. Изучение механизма действия ДИВ нуждается в проведении экспериментов для уточнения наиболее адекватной интенсивности, продолжительности и локализации ДМВ воздействий. ДМВ воздействия могут вызывать изменения в иммунитете, имеющие скрытый характер и проявляться только в условиях нагрузочных тестов (иммунизации).

Исходя из вышеизложенного были сформулированы цель и задачи настоящей работы.

Целью исследования явились разработка и обоснование новых подходов к проблеме нелекарственной иммунокоррекции с раскрытием механизма действия электромагнитного поля дециметрового диапазона.

В связи с этим предстояло решить следущие основные задачи:

1. Изучить особенности иммунобиологических эффектов при воздействии ДМВ на области эндокринных желез у интактных животных.

2. Исследовать динамику формирования первичного иммунологического ответа на тицусзависикый и тимуснезависимый антиген у кроликов при воздействии ДМВ на области различных эндокринных желез.

3. Оценить возможность восстановления (иммунореабилитации) первичного имцунологического ответа у иммунокомпрометированных кроликов, подвергнутых воздействию ингибиторов нуклеинового синтеза и кле-

точного деления, путем облучения ДМВ области щитовидной железы.

4. Изучить возможность изменения иммунной супрессии у иымуноком-прометированных кроликов при воздействии ДМВ на область надпочечников.

5. Выявить динамику вторичного иммунологического ответа на тиыус-зависимый антиген у кроликов при воздействии ДМВ на области различных эндокринных желез и центры нейроэндокринной регуляции.

6. Провести сравнительный анализ иммунных показателей у больных ревматоидным артритом при воздействий ДМВ на область надпочечников, вилочковой железы (тимуса) и щитовидной железн; и у больных первичным гипотиреозом при ДМВ воздействиях на область щизоввдгай железы.

Научная новизна. Впервые выдвинута для самостоятельного изучения проблема ишуномодуляции дри действии ДМВ и использование ДМВ облучения в качестве фактора немедикаментозной иммунокоррекции.

Установлено, что характер влияния ДМВ на первичный иммунный ответ к тимусзависимому антигену зависит не только от локализации воздействия, но и от соотношения срока ДМВ облучения и фазы иммуногенеза. Так, ДМВ воздействия на область щитовидной железы в индуктивную н продуктивную фазы вызывает иммунодепрессию, а в период, предшествующий иммунизации,- стимуляцию иммунного ответа.

Впервые показана разнонаправленная модуляция первичного иммунного ответа на тимусзависимый антиген при ДМВ воздействиях на область щитовидной железы или надпочечников, свидетельствующая о стимуляции или депрессии популяции костномозговых лимфоцитов.

Впервые установлен неизвестный ранее феномен иммунореабилита-ции под действием ДМВ у иммунокомпрометированных животных. Так, показано, что ДМВ облучения области щитовидной железы способны купировать иммунодепрессию, вызванную актиномицином Д и колхицином, и не влияют на иммунную супрессию, индуцированную 5-фторура-цилом.

Экспериментально доказана возможность углубления иммунодепрес-сии путем сочетания ДМВ воздействий на область надпочечников с препаратами, подавляющими синтез нуклеиновых кислот и пролиферацию. Получены данные, свидетельствующие о возможности существенного снижения дозы вводимых в организм цитостатиков в комбинации с ДМВ облучениями области надпочечников, при сохранении необходимой выраженности иммунной супрессии.

Выявлены разнонаправленные метаболические изменения при ДМВ

облучениях области щитовидной железы,- усиление процессов липо-лиза; при ДМВ трансцеребральных воздействиях - ослабление интенсивности липолиза, что может создавать условия для индукции имму-номодулирующих эффектов.

Впервые показана депрессия вторичного иммунологического ответа на тимусзависимый антиген под влиянием ДМВ воздействий на область эндокринных желез. ДМВ облучения, проводимые до первичной иммунизации или через 4-13 суток после неё, способствуют подавлению процесса формирования клеток иммунологической памяти.

Выявлены основные закономерности иммунобиологических эффектов ДМВ воздействий, направленных на области эндокринных желез.

Экспериментальными исследованиями установлено, что ДАВ облуч-чения атермической интенсивности (плотность потока мощности -ППМ - 10 мВт/см^), направленные на область щитовидной железы и надпочечников, вызывают гормональные изменения, которые не сопровождаются иммуномодулирующим эффектом. Трансцеребральные воздействия ДМВ той же интенсивности изменяют гормональный статус животных и вызывают иммуносупрессию.

Изучение спонтанной иммунной активности организма в динамике курса ДМВ воздействий показало, что при облучении области щитовидной железы иммуносупрессия, наблюдаемая на ранних этапах (до 4-х ДМВ процедур), сменяется иммуностимуляцией в конце курса, а также в период последействия фактора.

В клинических исследованиях показано, что у больных ревматоидным артритом ДМВ облучения области надпочечников или тимуса, в отличие от ДМВ воздействий на область щитовидной железы, сопровождаются положительной динамикой клинических показателей активности ревматоидного процесса, повышают функциональную способность эндокринных желез, подвергнутых ДМВ воздействию, купируют иммунный дисбаланс, уменьшают интенсивность аутоиммуноагрессии,и, следовательно, являясь патогенетическим мероприятием, могут быть рекомендованы в лечении больных ревматоидным артритом как немедикаментозная иммунокоррекция.

ДМВ воздействия на область щитовидной железы у больных первичным гипотиреозом повышают функциональную активность последней, стимулируют клеточное звено иммунитета, снижают степень аутоимму-ноагрессии.^ и поэтому могут быть признаны как патогенетически обоснованный метод лечения больных данной патологией.

Проведенные исследования свидетельствуют о том, что ДМВ воздей-

5твия на область эндокринных желез способны вызывать гормональные, метаболические и шмуномодулируюцие эффекты. Последние, в зависи-' «ости от условий, могут проявляться стимуляцией или супрессией иммунитета. Экспериментально-клинические исследования позволили разработать новые принципы применения энергии электромагнитного поля дециметрового диапазона с целью иммунокоррекции на основе целенаправленного изменения эндогенной (гуморальной) эндокринной немедикаментозной регуляции иммунологической реактивности организма, что имеет существенное значение для терапии иммунодефицитных состояний. Научно-практическая значимость работы. Экспериментальные исследования, проведенные на интактных и иммунных кроликах (с использованием тимусзависимого и тимуснезависимого антигенов), а также им-мунокомпрометированных животных, свидетельствуют о том, что ДМВ воздействия на области эндокринных желез могут быть использованы в качестве фактора нелекарственной иммунокоррекции при иммунодефицитных состояниях.

Разработаны методы нелекарственной иммунокоррекции у больных с аутоиммунной патологией. Показано, что ДМВ воздействия на область надпочечников или тимуса у больных ревматоидным артритом и ДМВ облучения области щитовидной железы у больных первичным гипотиреозом сопровождаются положительной динамикой клинико-лабора-торных показателей, коррекцией иммунной недостаточности и снижением интенсивности аутоиммуноагрессии.

На основании полученных результатов в ВНЦ медицинской реабилитации и физической терапии ЫЗ СССР разрабатываются методики лечения больных с вторичными иммунными дефицитами.

Материалы диссертации внедрены в педагогическую практику кафедры физиотерапии, ЦЭЛИУВ с 1987 года, а также используются на занятиях с аспирантами и ординаторами ВНЦ медицинской реабилитации и физической терапии МЗ СССР.

Получено авторское свидетельство № 992076 "Способ лечения больных хроническими неспецифическими заболеваниями органов дыхания" заявка № 3304851 от I октября 1981 г.

Опубликованы методические рекомендации "Применение физических факторов в комплексной терапии первичного гипотиреоза", утвержденные Минздравом СССР, Москва,1986 г. Апробация работы. Материалы диссертации доложены на: - Итоговых сессиях Центрального НИИ курортологии и физиотерапии МЗ СССР (ныне ВНЦ медицинской реабилитации и физической терапии

МЗ СССР) 1981-1986гг; итоговой сессии ВНЦ МР и ФТ МЗ СССР 1989г.;

- УШ Всесоюзном съезде физиотерапевтов и курортологов, Москва,1983г

- заседании секции общей и прикладной иммунологии Московского городского общества микробиологов, эпидемиологов и инфекционистов имени И.И.Мечникова, 1984 г.;

- Всесоюзном симпозиуме, посвященном 60-лет!® Тбилисского НИИВС, Тбилиси,1984 г.;

- У Всесоюзном съезде биохимиков, Киев, 1986 г.;

- Всесоюзном симпозиуме с мездународным участием "Иммунодефицита и аллергия", Москва, 1986 г.;

- I Всесоюзном съезде иммунологов, Москва, 1989 г.;

- IX Всесоюзном съезде физиотерапевтов и курортологов,Москва,1983г. Результаты работы обсуждались на межотдельческой научной конференции и на заседаниях Ученого совета Центрального НИИ курортологии и физиотерапии МЗ СССР.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 29 научных работ. Объём и структура работы. Диссертационная работа состоит из введения, 10 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций, внедрения результатов и списка литературы, который включает 461. наименование (220 отечественных и 241 иностранных), изложена на 305 стр. машинописного текста, содержит 41 таблицу и 8 рисунков.

Автор вырадает глубокую благодарность профессору И.Д.Френкелю и чл.-корр. АМН СССР, профессору В.М.Боголюбову за консультативную помощь, оказанную при подготовке диссертационной работы.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы Экспериментальные исследования выполнены на 1048 кроликах-самцах, массой 2,5-3,5 кг. ДМВ воздействия животным осуществляли от аппаратов-генераторов ДМВ - "Волна-1" и "Волна-2" контактным керамическим излучателем диаметром 0,04 м. Параметры используемого электромагнитного поля: частота колебаний 460 МГц, длина волны 65 см, Ш1М вариировала от уровня теплового порога до выраженной тепловой интенсивности и составляла 10;120 и 240 мВт/си^. Длительность одного облучения составляла 6 минут, ежедневно, курс ДМВ воздействий состоял из 10 процедур. ДМВ облучению подвергали область щитовидной железы, или надпочечников, или вилочковой железы, или гипоталамуса и гипофиза. Контрольных кроликов подвергали "мнимому" воз-

интантные (неикмунизн-рованные) животные

йУ

шг

ЩШиГ

первичный иммунный ответ

вторичный иммунный ответ

курсовое

в03д9йств29 ЛМВ

иммунизация

забой

Рас. I Принципиальная схема изучения иммунобиологических эффектов ДМВ в эксперименте.

действию да® при отключенном генераторе.

Неиммунизированных кроликов забивали через сутки после 2х,4х, 6ти,8ми,10ти ДМВ облучений, а также через 10 суток после курса воздействий.

Каждая группа животных с индукцией первичного иммунного ответа (1Ж0) была разделена на подгруппы в зависимости от периода воздействия ДМВ по отношению к иммунизации. 1-ая подгруппа - кроликов иммунизировали после бти ДМВ воздействий; 2-ая - после 10 воздействий; 3-ья - на 10 сутки после окончания курса. У животных с индукцией вторичного иммунного ответа (ВИО) подгруппы выделяли соответственно срокам первичной иммунизации по отношению к ДМВ воздействиям. 1-ая подгруппа подвергалась первичной иммунизации после 6-го воздействия ДМВ; 2-ая - за 4 дня; 3-ья - за 20 дней до ДМВ воздействий (рис. I). Иммунизированных животных забивали на 4-е сутки после первичного или повторного введения антигена, в период максимальных значений иммунных показателей. У экспериментальных животных изучали функции эндокринных желез, иммунные потенции организма, у части животных - уровень метаболических процессов с помощью радиоиымунных, иммунологических и биохимических методов исследования.

Радиоиммунные исследования. Функциональную активность эндокринных желез определяли по содержанию в сыворотке или плазме крови гормонов с помощью стандартных наборов отечественного производства

(институт биорганической химии АН БССР) - тироксина (Т4),трийод-тиронина (Т3),тестостерона, кортизола, иммунореактивного инсулина (ИРИ), а также импортных:"Coming "(США.) - Т3,Т4,кортизола, тиреотропного гормона гипофиза (ТТГ); " IOIS"( Франция)-соматотроп-ного гормона (СТГ), тестостерона, кортизола. Учитывая роль циклических нуклеотидов (ЦН) в качестве универсальных посредников в действии многих гормонов, определяли уровень циклического адено-зинмонофосфата (цА.®) и циклического гуанозинмонофосфата (цГМЗ)-"Amersham "(Англия), а также тест-нг-борами производства ЧССР. Определение концентрации простагландинов (ПГ) осуществляли при помощи тест-наборов "DRG " (США) и производства ВНР. Радиометрии

проб проводили на автоматическом гамма-счетчике фирмы "Тгасог " х/

Europa

Функциональную активность коры надпочечников определяли по содержанию кортизола и II-оксикортикостероидов (II-0KC) в плазме крови, в ткани надпочечников, а также б ыезентериальных лкифати-тических узлах ( Р.. deMoore et al., 1963).

Иммунологические исследования проведены на неиммунизированшх животных, а также на 3-х экспериментальных моделях с использованием тимусзависимого (эритроциты барана) и тимуснез ависилю го (Ви-антиген) антигенов. Ви-антиген, полученный по методу Вебстера в модификации А.П.Аллилуева (1969) из Salmonella typhi Ту2 4445, был любезно предоставлен нам А.П.Аллилуевым. Индукция ПИО на ти-мусзависимый антиген осуществлялась иммунизацией кроликов внутривенно эритроцитами барана (2x10®), ВИО - двукратной внутривенной иммунизацией эритроцитами барана (2x10 ® X 2x10^) с 30-ти дневным интервалом между первичным и повторным введением антигена. ПИО к тимуснезависимому антигену воспроизводили внутривенным введением Ви-антигена в количестве 100 мг.

Иммунные потенции организма определяли по количеству спонтанных (фоновых) и иммунных антителообразующих клеток (АОК) в селезёнке. Для определения количества АОК использовали: метод локального __

'Исследования проводились в лаборатории радиоизотопных исследований, гемодинамики и микроциркуляции ЦНИИКиФ MB СССР (зав.д.м.н.

Ю.Т.Пономарев,) к.м.н. В.В.Дегтяренко) ст.н.с. ,к.м.н. А.С.Бобковой, к.м.н.В.Д.Тинидиевой, Е.Г.Коровкиной и Ю.В.Агибаловым.

^^Определение концентрации II-0KC проводили совместно с к.м.н.

А.И.Галенчиком.

гемолиза в агаре с модификациями по Ерне-Нор'дину - прямые гемоли-зинобразущие клетки (ПГОК) (Н.К^егпе,А.А.Кога1п, 1953), выявляющий I в М-АОК, по Дрессеру-Уортису - непряже гемолизинобразующие клетки (НГОК) (о.тс.Вгеззег.Н.Н.Яог-Ыэ, 1955), синтезирующие АОК, по А. А. Кору ко вой (1971) - ПГОК к Ви-антигену, метод0.в.гаа1-Ъегв а1., (1966), позволяющий определять количество розеткооб-разующих клеток (РОК), как спонтанных, так и иммунных, а также модификацию последней методики для выявления РОК к Ви-антигену (С.Б.Лершин 1971).

Общее количество ядросодеряащих клеток селезёнки (спленоцитов) определяли подсчетом в световом микроскопе при помощи камеры Горя-ева. Определение титров антител в сыворотках крови животных - гем-агглютинкнц (ГА), Ви-гемагглютинины - проводили традиционным методом. Концентрацию сывороточных иммуноглобулинов (I 8 М,1 ,12 А) у кроликов определяли методом радиальной иммунодиффузии в агаре ( а.Маао±п1 еЪ а!.,1965). Антикроличьи моноспецифические сыворотки были получены из МНИКВС им.И.И.Мечникова.

Биохимические исследования включали определение содержания в сыворотке крови неэстерифицированных жирных кисло? (НЭЖК), тригли-церидов и глюкозы. Определение концентрации НЭНК осуществляли калориметрическим методом с использованием полуавтоматического проточного фотоматра " У^аЪгоп "(Голландия).Триглицериды и глюкозу в сыворотке определяли на автоматическом анализаторе "СЬ.етЗ.'ЬгЗ.сз " (США) с помощью тест-наборов '\vorthington "(США) и " Ь'эгск"($рГ). Клинические исследования. Обследовано 69 больных ревматоидным артритом, лечившихся в артрологическом отделении (клинические наблюдения ст.н.с.,к.м.н. Г.С.Васильевой).

У большинства больных отмечалась суставная форма заболевания, преобладали больные с полиартритом, серопозитивной формой, медлен-нопрогрессирующим течением, со II - Ш стадией заболевания. Среди системных проявлений заболевания у больных с полиартритом следует отметить наличие ревматоидного кардита у 3-х больных (с недостаточностью кровообращения 0-1 степени), миокардитического кардиосклероза (3 больных), ревматоидными узелками (5 больных). Функциональная недостаточность суставов у большинства больных была сохранена, лишь у 18 (26%) больных отмечались тяжелые двигательные нарушения в основном при Ш-1У стадии и длительном течении заболевания.

Оценку активности ревматоидного процесса проводили в соответст-

вии с общепринятой унифицированной номенклатурой, рекомендованной институтом ревматологии АМН СССР, которая проводилась с учетом клинических проявлений и показателей лабораторных исследований. Учитывалась (по балльной системе от 0 до 3 баллов) частота приступов болей, интенсивность болей, продолжительность утренней скованности, местная гипертермия кожи, эксудативннй компонент воспаления Сила сжатия кисти определялась ручным динамометром. Активность-ревматоидного процесса оценивали также по лабораторным показателям (СОЭ, С-реактивный белок, уровень общих мукопротеинов и связанных с белком гексоз).

Оценку двигательных функций верхних и нижних конечностей проводили по балльной системе отдельно для рук и ног. У больных определяли также болевой, суставной индексы (по Ричи), индексы припухлости, количество активно воспаленных суставов (с эксудацией).

Таким образом, наш наблюдались больные достоверным РА суставной формой, со средней активностью процесса.

Обследовано также 30 больных-женщин с первичным гипотиреозом. Постоперационный гипотиреоз диагносцирован у 10 больных, спонтанный - у 20 (клинические наблюдения ст.н.с.,к.м.н. И.М.Касьяновой).

Из сопутствующих заболеваний необходимо отметить артериальную гипертонию у 2.0% больных, заболевания опорно-двигательного аппарата у 50%. Клиническая картина заболевания не зависела от его этиологии и характеризовалась гиподинамическим синдромом, сухостью кожных покровов, выпадением волос, трофическими расстройствами, увеличением массы тела, отечностью подкожножировой клетчатки, кар-диопатией, изменениями в психоэмоциональной сфере.

Все больные находились на заместительной гормональной терапии: получали от I до 3-х таблеток тиреоидина (по 0,1 г с содержанием йода от 0,17 до 0,23 мг в каждой) или тиреокомба; или тиреоидин в сочетании с трийодтиронином.

ДМВ воздействия у больных РА на область щитовидной железы и тимуса и у больных первичным гипотиреозом на область щитовидной железы проводили по контактной методике от аппарата "Ромашка", генерирующего электромагнитные колебания частотой 460 МГц, длиной волны 65 см, ППМ 120 мВт/см^. Круглый керамический излучатель, диаметром 0,04 м, располагали контактно над областью эндокринной железы. ДМВ воздействия у больных РА на область надпочечников проводили от аппарата "Волна-2"(электромагнитные колебания 460 МГц, длина волны 65 см, мощность 40-45 Вт) при помощи прямоугольного

излучателя 16x35 см, который располагали на поясничной области (ТМО-ЪЧ- Ь зазор 3-4 см. Продолжительность одной процедуры 10 минут, 6 раз в неделю, на курс лечения 10-12 воздействий. Все больные хорошо переносили ДМВ терапию.

В клинических исследованиях состояние иммунной системы оценивали по ряду тестов, дающих представление о функциональном состоянии клеточного и гуморального звеньев иммунитета. Количество Т- и В-лимфоцитов в периферической крови выявляли по методу М.;гоп<1а1 с^ а!., (1972), используя методику Е- и ЕАС-роэеткообразования. Суб-популяционнный анализ, проводившийся у больных РА по методу Ь.Моге-Ь-Ьа et а1., (1975), позволял выявить две функционально различ-

ные субпопуляции Т-лиыфоцитов:Т-супрессоры и Т-хелперы.

Концентрацию иммуноглобулинов (1е М, 1в й,1в А) определяли в радиальной иммунодиффузии по G-.Manc.ini еЬ а1., (1965) с использованием моноспецифических сывороток (Горьковский НИИ эпидемиологии и микробиологии).Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) антиген-антитело выявляли по методу М.Швеоп et а1., (1977). Ревматоидный фактор в сыворотке больных РА определяли унифицированным методом - реакцией Ваалер-Роузе.

У больных первичным гипотиреозом антитела к тиреоглобулину и микросомальной фракции (аутоантитела) выявляли при помощи реакции пассивной гемагглютинации.

У больных в сыворотке или плазме крови радиоиммунным методом исследовали уровни Т3,Т4,ТТГ,АКТГ и кортизола с использованием стандартных тест-наборов как отечественного, так и иностранного производства. Глюкокортикоидную функцию коры надпочечников оценивали по уровню П-ОКС.

Результаты исследований подвергали статистической обработке с использованием критерия Стьюдента. Количественную взаимосвязь между показателями оценивали с помощью ранговой корреляции. Различия принимались за достоверные при р ^ 0,05. Выводы основаны на статистически достоверных показателях.

РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ I.Влияние ДМВ различной интенсивности на иммунобиологические показатели при индукции ПИО на тимусзависимый антиген

Локальные ДМВ облучения атермической интенсивности (ППМ=10мВт/см^ оказывают наиболее выраженное влияние на иммунные показатели лишь при трансцеребральных воздействиях. Так, количество ПГОК/Ю® спленоцитов и РОК/Ю3 селезёночных клеток было снижено(427,5+10,5;

контроль 614,7+24,5; р^0,001 и 5,1+0,2,- контроль 8,0+0,2,-р4,001). Сходные тенденции выявлены и при пересчете АОК на весь орган. В этом случае отмечена стимуляция функциональной активности оси гипоталамус-гипофиз-кора надпочечников, что характеризовалось нарастанием глюкокортикоидной активности (11-0КС в плазме опытных животных 280,8+11,1 нмоль/л; контроль - 244,6+5,6; рчЭ,01) при снижении концентрации гормонов тиреоидного профиля (Т 2,58+0,15нмоль/л контроль 2,98+0,09; р4),05; Т4 18,2+4,5 нмоль/л; контроль 36,4+4,4; р^0,01). Подобные гормональные изменения в условиях индукции иммунного ответа проявляются в виде иммуносупрессии.

Воздействия ДМВ слабой интенсивности, направленные на область щитовидной железы, вызывали стимуляцию ткреоидной функции (Т 4,7+ +0,3 ныоль/л; контроль 2,98+0,09; рн),001) и снижение глюкокортикоидной активности коры надпочечников (П-ОКС в плазме крови 194,6 +5,6 нмоль/л;контроль 244,6+5,6; р^0,001). Однако изменения гормональных соотношений, по-видимому, были недостаточны для индукции

Ий1туК0щ0ДуЛИруВ1Ц1Ал ЭффСХСТО Б •

При облучении ДМВ области надпочечников не выявлялись ни гормональные, ни иммунные модуляции у опытных животных по сравнению с контрольными.

Изменения показателей углеводного и липидного обмена имели .различный характер, что определяется различной направленностью динамики гормональных показателей. Повышение уровня триглицеридов (1,62+0,08 ммоль/л; контроль 1,19+0,08; рн),001) при нормальном уровне глюкозы и НЗЖК в условиях действия ДМВ на область щитовидной железы, по-видимому, обусловлено уменьшением интенсивности гидролиза триглицеридов в молекуле липопротеидов. Это может быть связано со снижением глюкокортикоидной функции коры надпочечников и отсутствием повышения активности СТПр^ОД). Возрастание в этих условиях уровня тиреоидных гормонов, очевидно, недостаточно для осуществления липомобилизирующего эффекта, что подтверждается нормальным уровнем НЭЖ в крови.

При воздействии ДМВ слабой интенсивности на область надпочечников наблюдалось усиление мобилизации жира из депо, что подтверждается повышением уровня НЭЖК (0,93+0,03 ммоль/л; контроль 0,65+0,05; рн),001), и снижением концентрации триглицеридов в крови (0,95+ +0,05 мммоль/л; контроль 1,19+0,08; рА) ,025).В связи с отсутствием динамики изучаемых гормональных показателей это можно объяснить изменением периферических эффектов ряда гормонов (тестостерона, глюкокортикоидов и др.) о чем косвенно свидетельствует двукратное

снижение содержания цГМ5 ,001)осуществляющего эти эффекты, которые наблюдались при трансцеребральном действии ДМВ.Снижение при этом уровней глюкозы на 19,0% (рЧ),001) и триглицеридов на 39,5% (рЧ),001), вероятно, свидетельствует о повышении периферического эффекта инсулина и связано с понижением уровня тиреоидных гормонов и возрастанием глюкокортикоидной активности коры надпочечников, поскольку глюкокортикоиды тормозят липомобилизирующее действие СТГ и тироксина.

Воздействие ДМВ при ППМ 120 мВт/см^ на область различных эндокринных желез способны оказывать выраженный иммуномодулирующий эффект. Направленность иммуномодуляции зависит главным образом от локализации ДМВ воздействий. Облучение ДМВ области щитовидной железы сопровождалось иммуностимулирующим эффектом. Так, количество ПГОК на Юб спленоцитов возрастало до 920,8+110,3 (контроль 543,6+34,5;

,01), количество РОК на 103селезёночных клеток-до 12,9+0,8 (контроль 7,8+0,2; рЧ),001).Воздействия ДМВ на область надпочечников 'и трансцеребрально вызывали иммуносупрессию.

Показана аналогичная направленность иммуномодуляции у животных, подвергнутых воздействию ДМВ на область различных эндокринных желез, как при ППМ 120 мВт'/см^, так и при 240 мВт/см^. В этой связи необходимо отметить, что эффект иммуностимуляции был более выражен при ДМВ облучении с ППМ 120 мВт/см^ области щитовидной железы (на 69,4%) по сравнению с воздействием ДМВ вдвое большей мощности (на 27,8%). Степень иммунодепрессии, наблюдавшейся при воздействиях ДМВ на область надпочечников и трансцеребрально,практически не зависела от используемых интенсивностей ДМВ.

У многих опытных животных выявлено повреждающее действие ДМВ при ППМ 240 мВт/см^. При использовании ДМВ облучений вдвое меньшей мощности признаков повреждения тканей выявлено не было. По-видимому, резистентность организма к тепловому повреждению ДМВ зависит от вида животного, состояния кровеносной системы и системы охлаждения органов.

На основании полученных результатов мы применяли в дальнейших исследованиях для достижения иммуномодулирующего эффекта воздействия ДМВ с ППМ 120 мВт/см^ на области различных эндокринных желез. 2.Влияние кратности ДМВ воздействий на иммунные, гормональные и метаболические показатели у интактных животных

Воздействия ДМВ на область щитовидной .железы изменяют гормональные соотношения в организме уже после 2х ДМВ облучений. Эти изме-

нения характеризовались уменьшением глюкокортикоидной активности коры надпочечников после 2 - 8-ой процедуры (,189,0+8,3 - 189,0+ +11,1 нмоль/л; контроль 216,8+2,8; рч),025 -А),002) и её нормализацией в период последействия ДМВ. После предварительного снижения с 6-ой процедуры и до окончания исследования (периода последействия) наблюдалось повышение функции щитовидной железы (6,0+0,6: нмоль/л; р^мЗ,05 - после 6-ой процедуры; 6,9+0,4нмоль/л;рн),001 -в периоде последействия; контроль уровня Т - 4,8+0,2). Изменение содержания ЦН (повышение содержания цАМ£ и цГМ£ на 44,2-69,0/?%; рн),025- А),001 и на 166,0$; рн),001 соответственно) у опытных животных косвенно свидетельствует о гормональной перестройке организма.

ДМВ облучения области щитовидной железы сопровождались снижением количества спонтанных ПГОК на селезёнку (после 2х и 4х процедур) до 3981+202 (рЧ), 05) и 3087+310(р4,001);контроль 4517+190. После 10 процедур и особенно в периоде последействия на фоне повышения уровня тироксина выявился иммуностимулирующий эффект Д© (7697+' +833 ПГОК/селезёнку; р4),001).

Воздействия ДМВ в количестве'6-ти и 8-ми процедур сочетались с уменьшением концентрации ПГ (на 29-38 %%; рА),05- -К),001), что свидетельствует о подавлении функциональной активности макрофагов и макрофагоподобных А-клеток. Это обстоятельство кокет служить причиной иммуносупрессии, наблюдаемой в начале курса облучения. В период последействия ДМВ содержание ПГ повышалось до контрольных значений - иммуносупрессия сменялась иммуностиыуляцией. После 8-ми ДМВ облучений на фоне увеличения общего количества селезёночных клеток на 46,7%(рн),001) отмечено повышение уровня СТГ на 33,3$ (рЧ),002), Т4 на 55,ШрЧ),002) и понижение И-ОКС на 12,8&(рЧ),025) Подобные гормональные изменения способствуют стимуляции пролифера-тивных процессов в лимфоидной ткани (Т.А.Бакланова с соавт.,1982; H.Pabris, 1973),

Проведенный анализ выявил также достоверную прямую корреляцию между повышенным уровнем НЭЖК в сыворотке крови и содержанием Тд ( г =0,523; р4> ,05).Усиление процессов липолиза под влиянием ДМВ, при облучении области щитовидной железы подтверждается снижением уровня триглицеридов и возрастанием продукта их расщепления -- НЭЖК, что в свою очередь может обуславливать метаболическую иммунную супрессию на начальном этапе ДМВ облучений области щитовидной железы. Это доказывается наличием корреляции между повышенным

содержанием НЭЖ и снижением количества ПГОК на 10 спленоцитов в 1-ой серии опытов

( г = - 0,580; р4) ,025).После 10 ДЫВ воздействий и в периоде последействия интенсивность процессов липолиза снижается, концентрация тиреоидных гормонов возрастает, иммунная супрессия сменяется иммуностимуляцией.

ДМВ воздействия, направленные на область надпочечников, вызывают возрастание глнжокортикоидной активности коры надпочечников (II-0KC в плазме крови 294,7+16,7 нмоль/л; контроль 216,8+2,8; j/o,00I), по времени совпадающее с повышением концентрации Т^(83,9+ +8,4 нмоль/л; контроль

37,6+1,5; j/o ,001) после 4х ДМВ облучений. Выявленный в этих условиях иммунодепрессивный эффект дает основание полагать, что активация глюкокортикоидной функции как бы "перекрывает" стимуляцию тиреоидной, действуя на систему иммунитета в условиях целостного организма. Установлена корреляционная связь между повышенным vpo внем Т^ и количеством ПГОК в селезёнке -(г = + 0,677; р"-0,05), что указывает на сопряженность процессов антителогенеза с гиперфункцией щитовидной железы в условиях гипер-кортицизма, индуцированного ДМВ процедурами.

Наблюдаемый эффект стимуляции пролиферативных процессов в лиыфо-идной ткани при ДМВ облучении области надпочечников, вероятно, не захватывает популяцию спонтанных АОК и их предшественников. Подтверждением этого предположения является увеличение общего количества спленоцитов на фоне достоверной иммуносупрессии в популяции фоновых ПГОК.

В реализации гормонально-иммунных реакций под влиянием ДМВ облучений области надпочечников имеют значение определенные изменения липидного и углеводного обмена. Наблюдаемое в первой половине курса воздействий ДМВ снижение уровня липидов отражает пониженную потребность в этот период в липолизе как источнике энергообразования. После 8ой процедуры ДМВ процессы липолиза возрастают. Вместе с тем, в течение всего курса воздействий ДМВ усиливается поглощение тканями глюкозы, очевидно, в связи с повышением инсулярной функции. Это связано с динамикой биоэнергетических процессов, которые на первом этапе действия ДМВ-характеризуются активацией гликолиза, а на втором - интенсификацией окисления жирных кислот, что в целом отражает "метаболическую" адаптацию организма к действию фактора (И.Д.Френкель,С.М.Зубкова,1987).

Трансцеребральные ДМВ воздействия изменяют функциональную активность ряда звеньев эндокринной системы. Выраженная активация тирео-

идной (Т4 на 39,4%; рч),025) и тенденция к стимуляции глюкокорти-коидной (на 14,1%; р^0,1) функций организма отмечалась уже после 2х процедур ДМВ, а после 4х облучений выявлялось также увеличение концентраций тестостерона (на 163,5%;рЧ),025) и СГГ (на 34,4%;

,001). Вероятно, стимулирующий эффект на эндокринные железы обусловлен активацией функции гипоталамуса и гипофиза, которые попадают в зону воздействия ДМВ.

У опытных животных на ранних этапах (после 2х процедур курсового ДМВ облучения выявлено увеличение количества ПГОК в селезёнке (6,5+0,6 на Ю6 спленоцитов; контроль 4,7+0,1; рЧ),01; 5488+344 на всю селезёнку; контроль 4517+190;р^,025).Иммуностимуляция в данном случае может быть вызвана как активацией тиреоидной функции, так и глюкокортикоидной, когда при лизисе лимфоидных клеток создаются условия для реутилизации продуктов цитолиза. После бти трансцеребральных облучений выявлен иммунодепрессивный эффект (ПГОК на 10 спленоцитов - 3,5+0,4; контроль 4,7+0,1 ;рЧ),01; ПГОК на всю селезёнку 3631+453; контроль

4517+190;р20,1), по-видимому, обусловленный возрастанием глюкокортикоидной функции коры надпочечников на

,01) на 4/оне снижения тиреоидной функции (Т3 на 23,0%; рк),01; Т^ на 29,0%; р^0,001). Важно отметить, что иммунная супрессия была выраженной и длительной, - достоверно выявлялась у кроликов по прошествии 10 суток после окончания курсового воздействия ДМВ.

Об ослаблении медиаторного обеспечения процессов антителогене-за со стороны А-клеток у опытных животных свидетельствуют данные о снижении уровня ПГ на 34-39 %;рЧ),01, что также может расцениваться как фактор, способствующий иммунодепрессии.

Показано снижение интенсивности липолиза, подтверждаемое уменьшением концентрации НЭЖК на фоне увеличения содержания триглицери-дов. Выявлена корреляционная связь между сниженными уровнями Тд и НЭЖК у опытных животных ( г = + 0,460;рЧ),05). 3.Гормональные и иммунные эффекты при воздействии ДМВ на область различных эндокринных желез при индукции ПИР и ВИР на тимусзависимый антиген

Группы животных с индукцией ШО были разделены на подгруппы в зависимости от периода воздействия ДМВ по отношению к иммунизации (рис.1). 1ая подгруппа - кроликов иммунизировали после бти ДМВ воздёйствий; 2ая - после 10 воздействий; Зья - на Юе сутки после окончания курса; 4ая - служила контролем. Животные с ВИО были раз-

делены на подгруппы соответственно срокам первичной иммунизации по отношению к ДМВ воздействиям. 1-ая подгруппа подвергалась первичной иммунизации после б-го воздействия ДМВ; 2ая - за 4 дня; Зья - за 20 дней до ДМВ воздействий; 4ая - контрольная.

При ДМВ облучении области щитовидной железы на модели ПИО выявлена определенная закономерность изменения процессов иммуногенеза, несмотря на отсутствие полного параллелизма между динамикой различных иммунных показателей. По мере смещения сроков иммунизации, в частности, увеличения времени между окончанием курса ДМВ воздействий и введением антигена, выявлен отчетливый "переход" от депрессии к стимуляции ПИО. Наиболее наглядно эта закономерность прослеживается на примере изменения количества ПГОК (рис. 2А).

При сопоставлении динамики показателей, отражающих функцию щитовидной железы и коры надпочечников, заметно их определенное несоответствие направленности ПИО организма. При выраженной иммунодепрес-сии (1ая подгруппа) функция щитовидной железы не изменялась, а коры надпочечников - снижалась (концентрация II-0КС в надпочечниках 22,8+1,1 мкмоль/кг; контроль 36,7+1,6;рч),001).На фоне иммуностиму-ляции (Зья подгруппа) отмечалась тенденция к снижению активности щитовидной железы (Т36,5+0,6 нмоль/л;контроль 20,7+1,9 ;рЧ), 001; Т^бЗ,9+9,0 нмоль/л; контроль 74,9+5,9;р^0,1) без заметных изменений глюкокортикоидной функции надпочечников. Очевидно, гормональные изменения, способствующие стимуляции и угнетению иммунного ответа, имели место в процессе проведения эксперимента. В этой связи необходимо отметить, что иммунизация животных тимусзависимым антигеном может явиться причиной инверсии гормонально-иммунных соотношений в наших экспериментальных условиях.Доказательством, подтверждающим наше предположение, могут быть исследования иммуно-гормональных взаимоотношений под влиянием ДМВ воздействий, выполненные на неим-мунизированных животных (раздел 2).

При ВИ0 иммуностимулирующий эффект наблюдался во 2ой и Зей подгруппах, а иммунодепрессивный в 1ой. По-видимому-, гормональные изменения, вызванные ДМВ воздействиями на область щитовидной железы, обладают как выраженным супрессивным действием в индуктивный и продуктивный периоды иммуногенеза, так и способностью ингибировать процесс формирования клеток памяти (рис.ЗА).Последним, как известно, отводится главенствующая роль в развитии ВИ0 (С.Б.Першин с со-авт.,1977;Н.О.Вш?Ид,&^.ТЬогЪескв, 1971).Однако, если воздействия ДМВ на область щитовидной железы в индуктивный и продуктивный

периоды иммуногенеза имеет иммунодепрессивнуго направленность, то в период формирования клеток памяти и в условиях сформированной памяти - иммуностимулирующую.

Облучение ДМВ области надпочечников сопровождалось депрессией ПИО, которая была максимально выражена в Зей подгруппе (рис.2Б). Так, отмечено уменьшение количества ПГ0К,Р0К и сывороточных ГА у кроликов на 54,5%(р/0,001), 54,7%(р4),001) и 19,1%(р4),001) соответственно. Концентрация сывороточных иммуноглобулинов в течение ПИО при воздействии ДЖ5 на область надпочечников не изменялась по сравнению с контролем, за исключением повышения уровня Ig M в 1ой подгруппе (рЧ),01), что можно объяснить лизисом клеток лшфоидной ткани при повышении глюкокортикоидной активности коры надпочечников. Уровень последней, судя по содержанию II-0KC в надпочечниках, существенно возрастал во всех опытных подгруппах (рчЗ,025 - Д),01).

Таким образом, депрессию ПИО при 'ДМВ воздействиях на область надпочечников можно объяснить повышением глюкокортикоидной активности коры надпочечников. Правда, содержание II-0KC в лимфоидной ткани и плазме крови заметно не изменялось, однако, это может быть связано с повышенной "тканевой" потребностью в глюкокортикоидах (рис. 2Б).

□

©

последействие

II-0KC -е ПГОК

достоверные изменения

р L 0,05

последействие

Количество .¡ЩВ воздействий

1ШШН9 показатели при облучении

Рис.2 Влияние Щ2 на —---------------------- 7х,.

области щитовидной яелезы СА), надпочечников (Ь), вилоч-ковой аелезы (В)и при трансцэрабральных воздействиях (I)

на модели ПИО к тимусзависиыому антигену.

При индукции ВИО облучение ДМВ области надпочечников вызывало депрессивный эффект. Причем максимальная депрессия отмечалась во 2ой подгруппе, - количество ПГОК и НГОК снижалось до 55,8%(р4),001) и 43,7% (рЧ),001) соответственно от контрольного уровня (рис.ЗБ).

Уменьшение числа РОК было достоверным и составляло 85,1% от контроля. Содержание М увеличивалось в 1ой подгруппе на 44,0% (рчЭ,001), во 2ой подгруппе соответствовало контрольным значениям (руОД), и в Зей подгруппе снижалось на 31,8% (р^0,001). Изменения концентрации 2^0- были недостоверны, содержание 1е А уменьшалось на 26,4% (рЧ),001) в 1ой подгруппе, а во 2ой и Зей соответствовало контрольным значениям.

Концентрации изучаемых гормонов у опытных животных изменялись незначительно. Исключение составляло лишь увеличение содержания П-ОКС в лимфатических узлах в 1ой подгруппе, которое составляло 128,6% от контрольного уровня (рч),001).

Анализ полученных данных позволяет заключить, что воздействие Д.® на область надпочечников ведёт к угнетению как ПИО, так и ВИО (рис 2,ЗБ). Однако выраженность иммунодепрессии была неоднозначной в экспериментальных подгруппах и зависела от воздействия ДМВ на ор-организм по отношению к периоду иммуногенеза. Максимальное угнетение ВИО отмечалось при ДМВ воздействиях через 4-13 дней после первичной иммунизации, то есть в период наиболее интенсивного формирования популяции клеток памяти (рис. 3). Общий уровень иммуноглобулинов в меньшей степени подвержен изменениям при ДМ8 облучении надпочечников по сравнению с синтезом специфических иммуноглобулинов-антител. По-видимому, это объясняется меньшей резистентностью

□

П-ОКС

._. пгок

О---. нгок

л достоверные и изменения

z

0,05

+6-4 -4-13 -20-29 +6-4 -4-13 -20-29 дав воздействия по отношению к АГ^-

Рис.3 Влияние ДМВ на шялуноэццокршныа показатели пли обучении области щитовидной железы ТА), надпочечников ТБ), вилоч-ковой яелезы(В) и трансцаребраньных (Г) воздействиях на модели ВИО к тимусзависшлому антигену.

синтеза последних к тем изменениям, которые происходят при воздействии ДМВ на организм.

Изучение гормонального спектра у подопытных животных показало преобладание II-0KC над уровнем тироксина и ТТГ. Это даёт основание полагать, что в основе иымунодепрессивного эффекта ДМВ при облучении области надпочечников лежит активация глюкокортикоидной функции коры надпочечников.

Характер изменений гормонально-гуморальных механизмов иммуногенеза при ДМВ воздействиях на область вилочковой железы обусловлен различными сроками введения антигена по отношению к курсу ДМВ воздействий. Облучение ДМВ области вилочковой железы стимулировало тире-оидную функцию (содержание Т^ у опытных животных 2ой подгруппы было увеличено на 72,0%;р^0,05) и снижало глюкокортикоидную активность коры надпочечников на 24,1% и 24,7%; (рн),025) у кроликов 1ой и 2ой подгрупп.

Иммунные потенции у опытных животных повышались на 80,3%(рЧ),05) кратковременно (только в 1ой подгруппе) и имели, как правило, тран-зиторный характер при индукции ПИО.'

На модели ВКО выявлен статистически достоверный иммунодепрессив-ный эффект в популяции АОК. Иммунодепрессия была максимальной в 1ой подгруппе (на 71,0%;p¿0,001 и 39,0%;рЧ),05; среди ПГОК и НГОК соответственно), где кролики были подвержены действию ДМВ в индуктивный и продуктивный периоды первичной иммунной реакции (рис.3 В). Вероятно, разнонаправленность иммунных эффектов ДМВ в данном случае можно объяснить гетерогенностью популяции АОК и их различной чувствительностью к изменению гормонального профиля организма. С другой стороны, необходимо учитывать и тот факт, что в формировании ВИО основную роль играют прекоммитированные клетки памяти, экспансия которых определяет выраженность вторичной иммунной реакции. Показано, что формированию популяции АОК при ПИО и генерация клеток памяти - два разновременных процесса (C.deMacario,A.J.L.Macario, 1979).

В наших условиях облучение ДМВ области вилочковой железы индуцирует гормональные сдвиги,которые, по-видимому, являются причиной депрессии процессов формирования клеток памяти. На сформированный пул клеток памяти гормональные изменения, вызванные ДМВ, влияния не оказывают. Облучение ДМВ области вилочковой железы при индукции ВИО сопровождалось достоверной депрессией среди АОК на фоне увеличения концентрации тироксина в сыворотке (67,5+12,5 нмоль/л; контроль 33,3+4,3; рЧ),025)и снижения уровня II-0KC в плазме (183,5+ +11,1 нмоль/л;контроль 224,6+I3,9;j/0,05). и!ы полагаем, что это

"несоответствие" гормональных и иммунных сдвигов связано с закономерностями процесса формирования клеток памяти и их чувствительности к изменению гормонального профиля организма под действием ДМВ.

Результатом прямого действия ДМВ, по-видимому, может быть изменение соотношения Т-хелперы/Т-оупрессоры. При индукции ПИО под влиянием ДМВ соотношение изменяется в пользу Т-хелперов, а при анамнестической реакции - в пользу Т-супрессоров.

Облучение ДМВ области вилочковой железы приводит к-стимуляции тиреоидной функции организма. Объяснение этому явлению,вероятно, следует искать в филогенетической и функциональной общности этих желез.

Трансцеребральные ДМВ воздействия способствуют изменению гормональных соотношений в организме, что характеризовалось усилением функциональной активности оси гипоталамус-гипофиз-кора надпочечников и некоторым снижением функциональной активности оси гипоталамус-гипофиз -щи го видная железа. Динамика содержания СТГ, а также увеличение концентрации тестостерона на 183,3-983,3%(р^Ч),01 - ^0,001) при ПИО в крови опытных кроликов характеризуют изменения функции передней доли гипофиза под влиянием ДМВ трансцеребральных облучений. Изменение уровней ЦН и ПГ в процессе ДМВ трансцеребральных воздействий свидетельствует о реализации, гормональных эффектов и об изменении медиаторного обеспечения процессов клеточной кооперации при иммунном ответе (ПИО и ВИО).

Трансцеребральные ДМВ воздействия изменяют гормональный профиль, создавал тем самым условия для развития иммунодепрессии, которая проявляется резким 4-х-6-ти кратным уменьшением количества АОК при индукции ПИО и ВИО на тимусзависимый антиген (рис. 2,3 Г), снижением титров антител. Необходимо отметить, что иммунодепрессия ВИО при трансцеребральных ДМВ облучениях была более выражена в популяции НГОК. Именно этой популяции АОК, вырабатывающих 1в(3-антитела, отводится ведущая роль в развитии ВИО.

Период формирования популяции клеток иммунологической памяти наиболее чувствителен к изменению гормонального статуса организма. Этим обстоятельством объясняется наличие выраженной иммунодепрессии у животных, подверженных трансцеребральным ДМВ воздействиям до и в период формирования клеток памяти, по сравнению с периодом, когда эта популяция уже сформирована. Установленный иммунодепрессивный эффект ДМВ связан с изменениями гормонального профиля. Судя по уровню 11-ОКС в плазме крови,не отмечалось явного повышения глюкокорти-

коидной функции коры надпочечников в условиях ВИО. Однако при этом наблюдалось снижение уровня Т3 на 25,0% (рн),01) - наиболее активного гормона щитовидной железы, а также СТГ (на 47,0%,\р"-0,01). На этом фоне иммунодепрессивный эффект глюкокортикоидов, вероятно, проявился в связи с усилением их периферического действия, что и обусловило угнетение иммунных потенций организма. Косвенным доказательством этого предположения является существенное возрастание уровня ЦН (на 52,0 - 170,0%; р^0,001).которые участвуют в осуществлении гормональных влияний на периферии, в том числе и в лимфоид-ной ткани.

4.Влияние облучения ДМВ области щитовидной железы и надпочечников на иммунные и гормональные показатели у кроликов при индукции

МО на тимуснезависимый антиген При ДМВ облучении области щитовидной железы иммуностимулирующий эффект, проявляющийся в увеличении популяции РОК (на 15,0-89,0%; р40,001) и титров сывороточных антител (на 30,0-63,0%; рЧ),001) выявлен после бти процедур и наблюдался во всех опытных подгруппах (рис.1) у животных, иммунизированных тимуснезависимым антигеном (Ви-антигеном брюшнотифозных бактерий). В популяции ПГ0К иммуности-муляция была отмёчена в периоде последействия на 50,0%(рЧ),01). Показано увеличение уровня СТГ (1,60+0,09 мкг/л; контроль 1,10+0,04;

при ДМВ воздействиях на область щитовидной железы. Выявленный иммуностимулирующий эффект сопровождался снижением глюкокор-тикоидной активности коры надпочечников на 22,6-33,3%(рД),001) и отсутствием динамики тиреоидных гормонов, что в целом является причиной изменения иммунных потенций опытных животных (рис.4).

Динамика изменения концентрации ЦН может служить косвенным доказательством изменения эндокринных соотношений в организме под действием ДМВ облучений и реализации гормональных эффектов в проведенных исследованиях. **

Уменьшение содержания суммарных ПГд+£ на 30,7-44,2%(рн),001) свидетельствует о снижении функциональной активности макрофагапьных клеток. Однако ослабление функции А-звена иммунитета может не отражаться на величине ПИ0, так как индукция иммунного ответа на большинство тимуснезависимых антигенов не требует участия макрофагов ( Ы.ЗеЗ-а.Е.Могез, 1975).

Воздействия ДМВ на область надпочечников сопровождаются выраженным йммунодепрессивным эффектом,который наблюдался во всех экспериментальных подгруппах у кроликов, иммунизированных тимуснезависи-

□ п-окс

пгок

последэй-

стеи9

Рис .4

10 после____дозстеио

количвстео д1в е03д0йстелй

Влияние ДЗ на шс^уно-эндокрзннке показатели при облучении оброти пщтошдноё гэлезы (А) и надпочечников (Б) на модели ШЭД к стмуснвзаиютюму антигену.

© достоверные изменения

т/ 0,05

мым антигеном. Выявлено уменьшение количества ПГОК на 10 спленоци-тов на 45,0%; 57,0% и 53,0%;(р4>,001), а РОК на Ю3 спленоцитов на 43,0%; 53,0% и 55,0%;(рА),001) в 1ой, 2ой и Зей подгруппах соответственно по сравнению с контролем. Снижение титров Вн-гемагглюти-нинов отмечалось во 2ой и Зей подгруппах (/о ,001). Иммунная супрессия сочеталась с тенденцией к увеличению глюкокортикоидной активности коры надпочечников после Юти ДМВ облучений (рч),1), с увеличением уровня 11-ОКС в периоде последействия (р^-ч),001) и с отсут-

ствием значимой динамики тиреоидных гормонов, за исключением тран-зиторного увеличения концентрации Т3

(на 13,2%;р^Ч),01) у животных после бти ДО® воздействий (1ая подгруппа).

Повышение уровня СТГ во всех опытных подгруппах (на 18,2-27,3%; р^0,025 - А),01) свидетельствует об участии гипофиза в гормональной перестройке при ДМВ воздействие на область надпочечников.

У опытных кроликов выявлено уменьшение содержания цА1® после бти ДМВ облучений - 1ая подгруппа - на 36,2%;(рЧ),001) с последующим увеличением выше контрольных значений на 28,8% (р/ч),05) во 2ой подгруппе - после Юти воздействий. Уровень цГМ5 был преимущественно снижен на 26,4-27,9%;(рч),025- А),002), за исключением 2ой подгруппы (р-70,1). Отмечалось повышение концентрации ПГ (ПГрг, и ПГА+Е) на 20,9% (р/ч),05); и на 29,9% (р4),002) соответственно в 3 ей подгруппе и в периоде последействия фактора.

Таким образом, ДМВ воздействия на область щитовидной железы сопровождались стимуляцией 1Ш0 на тимуснезависимый антиген, а на область надпрчечников - стойкой иммунодепрессией (рис. 4). Одной из основных причин разнонаправленной динамики иммунных показателей, на наш взгляд, являются изменения соотношений глюкокортикоидной и тиреоидной функций в организме, вызванные локальными ДМВ облучениями. Решающее значение при этом имеет не абсолютный уровень тиреоид-

ных и глюкокортикоидных гормонов, а баланс между ними.

Тиыуснезависимые антигены индуцируют процессы антителогенеза, минуя Т клеточную популяцию, непосредственно на уровне костномозговых лимфоцитов (В-клеток) посредством прямого взаимодействия со специфическими рецепторами последних (Д.ВаэЪеп, <Т.й.Но1яаг<1, 1973). Поэтому, проведенные эксперименты позволяют оценить роль В-клеток в развитии иммунобиологических эффектов ДМВ воздействий. Установленное изменение гормональных соотношений организма, вызванное ДМВ, способно индуцировать разнонаправленные эффекты на костномозговые лимфоциты.

Подобные исследования могут быть базисными для разработки методов физиотерапевтической иммуномодуляции при иммунодефицитных состояниях.

5.Иммуномодулирующее действие ДМВ у иммунокомпрометированных кроликов, подвергнутых влиянию ингибиторов нуклеинового

синтеза и пролиферации В исследованиях применяли ингибиторы нуклеинового синтеза - ак-тиномицин Д (АВД), 5-фторурацил С5-ФУ) и ингибитор пролиферации -колхицин (К), которые вводили кроликам внутривенно в дозах, уменьшающих вдвое интенсивность ПИО на тимусзависимый антиген - 0,1 мг/ /кг; 10 мг/кг и I мг/кг соответственно. Каждому кролику дозу ингибитора рассчитывали индивидуально. АВД вводили животным в двух вариантах - до курса ДМВ воздействий и после него. 5-ФУ и К вводили до начала ДМВ облучений. У всех животных, включая контрольных, индуцировали ПИО: кроликов иммунизировали эритроцитами барана через 10 суток после окончания курса ДМВ воздействий, состоящего из 10 процедур- К каждой группе опытов ставили соответствующий контроль:'животные, получавшие ингибитор, и "мнимое"(ложное) ДМВ облучение -контроль^, а также животные, которых не подвергали воздействию как ДМВ, так и ингибиторов - контроль£.

Введение ингибитора синтеза РНК - АВД индуцировало иммунодефицит-ное состояние, которое проявлялось в снижении иммунных потенций организма. Так, величина ПИО на тимусзависимый антиген была уменьшена в популяции ПГОК на 43,4%(рн),001), в популяции РОК-на 34,8% (рЧ),001), уровень сывороточных ГА-на 20,8%(рЧ),01).

Облучение ДМВ области щитовидной железы вызывало выраженный им-ыунореабилитирующий эффект, проявляющийся в увеличении количества АОК (ПГОК на 1С' спленоцитов 398,3+57,0;контроль! 277,9+20,5;р4),05 контроль2 49163+25,5; РОК на Ю3 спленоцитов 9,7+0,4;

контроле 5,8±0,4; р^,001; контроль 2 8,9±0,4; р 70,1) и сыворо-

ПГОК на I0b

сшюноцитов

500 Я г.

А1ДЦ АЬЩ

од од

мг/кг иг/кг

АЩ АЦ7Г 0,05 0,05 мг/кг мг/кг

+ дав

300

100

Ргс.5 Имнунодепресснвннй эффект ДЫВ на область надпочечников у животных, подвергнутых воздействию актнномицнна Д.

точных ГА (2,9+0,2; контроль1 1,9+0,1;р4),001;контроль2 2,4+0,1; PgyO.I) в ответ на иммунизации тимусзависимым антигеном. Подобные иммунные изменения можно объяснить гормональной перестройкой в организме под действием ДМВ. Так, нами показано, что облучение ДМВ' области щитовидной железы активирует функцию последней (раздел 2), вызывает иммуностимулирующий эффект (главы 3,4).

Облучение ДМВ области надпочечников на фоне применения АВД вызывало усиление иммунодепрессии: количество АОК в селезёнке снижалось по сравнению с контролем2 - "мнимое" да облучение (ПГОК на Ю6 спленоцитов 230,3+26,3; контроль]- 277,9+20,5;р^0,1; ПГОК на всю селезёнку х Ю6 0,38+0,03; контроль1 0,56+0,05;pj4),01; РОК на Ю3 спленоцитов 3,6+0,1; контроль^- 5,8+0,4;pj2o,OOI; РОК на всю селезёнку х Юб 5,9+0,6; контроль1 11,7+0,9; pj^O.OOI). Уменьшался титр сывороточныхГА (1,6+0,1; контроль]- 1,9+0,1; рД),05).

Воздействие ДШ на область надпочечников после применения АВД сопровождалось падежом животных от воспаления легких и токсической диспепсии. Процент гибели составлял 23,5. В аналогичных условиях эксперимента при воздействии ДМВ на область щитовидной железы и в контрольной группе подобного явления не наблюдалось, что свидетельствует об усилении иммунодепрессии при облучении ДШ области надпочечников на фоне применения АВД.

Проведенные эксперименты убеждают в том, что комбинация иммуно-депрессивных воздействий (ДМВ на область надпочечников и АВД) способна вызывать более выраженную депрессию, чем каждое воздействие в отдельности (рис.6).

Нами была исследована возможность уменьшения количества вводимого АВД при сохранении той же степени (глубины) иммунодепрессии. Облу-

чения ДМВ области надпочечников проводили до введения АВД (в дозах 0,1 и 0,05 мг/кг массы животного). Каждому опыту соответствовал контрол^ - животные, получившие аналогичную дозу АВД и "мнимые" воздействия ДМВ. У всех животных индуцировали ПИО к тимусзависи-моыу антигену.

Установлено, что введение животным АВД.(0,1 и 0,05 мг/кг) сопровождалось депрессией ШО. Так, количество ПГОК на 10® спленоцитов уменьшалось на 69,2% (рЧ),001) и 55,8% (рЧ),001) в контроле^- соответственно от контроля2. Число РОК на Ю3 спленоцитов уменьшалось на 40,5%(рЧ),002) и 29,2%(рЧ),001). Сходная динамика отмечалась и при пересчете количества ПГОК и РОК на всю селезёнку.

Облучение области надпочечников сопровождалось усилением эффек-

ПГОК -на Ю6

спленоцитов

500

АВД , 0,1мг/кг

300

100

5-ФУ 10 мг/кг

Ш

N

□контроль2

ЕЫоНТрСШ^

ДМВ воздействия на область

железы

Щнадпочет» пиков

Рис.6 Имиуномодтлирущий эффект ДМВ при воздействии на области щитовидной железы и надпочечников у иммунокомпрометированных животных.

та иммунодепрессии по сравнению с "мнимооблученным" контролем. Так, у опытных кроликов при введении АВД 0,1 и 0,05 мг/кг количество ПГОК снижалось на 32,2%(рЧ),05) и 54,4%(р4),025) соответственно. По отношению к контролю^ уменьшение ПГОК в опытных группах было на 78,8%(рч),001) и 79,9%(рЧ),001). Углубление депрессии отмечалось в популяции РОК. Наблюдалось также снижение титров ГА в опытной группе (АВД 0,1 мг/кг) по сравнению с контролем-£(р^0,01).

Таким образом, полученные нами данные дают основание полагать, что в сочетании с ДМВ воздействиями, направленными на область надпочечников, использование меньших доз иммунодепрессивных препаратов снизит частоту осложнений при сохранении уровня иммуносупрессии, на котором возможно достижение необходимого терапевтического эффек-

та (рис. 5).

Иммунодепрессия от введения в организм опытных животных 5-ФУ, реализуемая на уровне ДНК, в наших экспериментах проявлялась в снижении количества АОК. При облучении ДМВ области щитовидной железы иммунодепрессивный эффект усиливался по сравнения с "мнимооблученным" контролем (ПГОК на 10 спленоцитоз 211,6+25,3; контроль]-324,4+ +20,3;р4),002; РОК на Ю3 спленоцитов 5,7+0,5; контроль1 8,8+0,5;

,001). У опытных животных отмечалось увеличение содержания П-ОКС в лимфатических узлах (1,40+0,07 мкмоль/кг; контроль]! ,20+0,05;

,05), а также увеличение уровня гормонов тиреоидного профиля (Т3 8,0+0,5 нмоль/л; контроль-^ 6,6+0,5; р^0,05; Т4 94,0+5,3 нмоль/л; контроль63,7+7,5; Р|А),01).

У кроликов, подвергнутых воздействию ДМВ на область надпочечников, иммунная супрессия была выражена как в популяции ПГОК (ПГОК на Ю6 спленоцитов 268,7+18,0; контроль]- 324,4+20,3; Р]-^0,05), так и РОК (РОК на Ю3 спленоцитов 5,7+0,4; контроль^,8+0,5; рЧ),001) и сочеталась с тенденцией к снижению уровня тироксина (48,4+3,2 нмоль/л; контроль]- 63,7+7,5; р^мЭД), уменьшением концентрации тестостерона на 61,6% (р^ ^0,05). Содержание П-ОКС не отличалось от показателей контроля^(р^О,1).

Можно полагать, что эффект иммуносупрессии ДУВ в целом связан с повышением глюкокортикоидной активности коры надпочечников, или с изменением соотношения функциональной активности глвкокортикондных, тиреоидных и других гормонов. Необходимо отметить, что воздействие ДШ на область щитовидной келезы сопровождалось некоторым увеличением общего количества спленоцитов на фоне тенденции к повышению концентрации СТГ в крови (на 26,0%;р^0,1). Обратные тенденции выявлены у животных с ДМЗ облучением области надпочечников. Противоположные по направленности сдвиги уровней ЦН (иА'й) обнаружены у опытных кроликов, подвергнутых ДМВ воздействию на область щитовидной железы и надпочечников, что свидетельствует о возможной реализации гормональных изменений на уровне рецепции гормонов.

Увеличение титров сывороточных ГА у животных с облучением ДМВ области надпочечников можно объяснить лизисом лимфоидной ткани при повышении глюкокортикоидной активности под действием фактора, о чем свидетельствует тенденция к снкженюо общего количества спленоцитов в этой экспериментальной группе (рЧ),1).

Анализируя полученные результаты, можно сделать вывод о том, что гормональные изменения, индуцированные ДМВ воздействиями на область

щитовидной железы не способны купировать иммунный дефицит, вызван-? ный введением 5-ФУ (рис. 6). Облучение области щитовидной железы и надпочечников на фоне применения колхицина выявило различные по направленности иммунные эффекты. Так, иммуностимулирующий эффект ДМВ при воздействии на область щитовидной железы имел иммуностимулирующую направленность, а на область надпочечников - иммунодепрес-сивную. Поскольку оптимальные дозы иммунодепрессантов индуцируют в условиях эксперимента иммунодефицитное состояние (вторичное), последнее может служить моделью для изучения иммуномодулирующего действия ДМВ.

В проведенных экспериментах выявлен иммунореабилитирующий эффект воздействия ДМВ в тех случаях, когда облучению подвергали область щитовидной железы. При облучении области надпочечников иммунная супрессия, вызванная колхицином, усиливалась (рис. б). Важно отметить также, что при воздействии ДМВ на область надпочечников на фоне применения колхицина наблюдалась гибель 2х опытных животных из 14 (14,3?). Цри облучении ДМВ области щитовидной железы и в контрольных группах падежа животных не было. Выявлено увеличение концентрации Н-ОКС при воздействии ДМВ как на область щитовидной железы (на 28,9% в надпочечниках;рЧ),01; на 20% в лимфатических узлах; рч),002; на 32,7% в плазме; рЧ),001), так и надпочечников (на 35,7% в надпочечниках;рч),001; на 20,0% в лимфатических узлах; рм),01; на 14,5% в плазме; р^0,025), а также повышение концентрации гормонов тиреоидного профиля при этих воздействиях (Т3 на 11,914,3%; р^0,025 - мЗ,01). Вероятно, механизм иммуномодулирующего эффекта ДМВ зависит не только от прямого увеличения концентрации в организме определенных гормонов, но и от их соотношения, гормональной рецепции в лимфоидной ткани, продукции иммунотропных медиаторов негормональной природы (лимфокинов, ПГ,ЦН). Так, например, при действии ДМВ на область щитовидной железы отмечено некоторое увеличение уровня цПй, а на область надпочечников - уменьшение.

Резюмируя в целом результаты исследований иммуномодулирующего действия ДМВ на модели иммунокомпрометированного организма, можно отметить, что они позволили получить новые данные об им.-уномодули-рующем действии ДМВ и некоторых его механизмах. Ранее установленное нами иммуностимулирующее действие ДМВ при облучении области щитовидной железы дополнено иммунореабилитирующим эффектом фактора, который возникает в условиях вызываемой АВД и К иммунодепрессии.

Указанный эффект ДМВ проявляется в отношении процессов антитело-

образования, реализуется на уровне синтеза РНК и процессов пролиферации и связан с гормональными изменениями"в организме. Среди последних определенное место занимает динамика уровней тиреоидных, соматотропного гормонов, глкжокортикоидов, тканевых гормонов, ГГ. Вероятна также роль изменения гормональной рецепции в тканях <Е.В.Гонтарь с соавт.,1986). К этому следует добавить, что воздействие ДМВ на область щитовидной железы не купирует иммунодефицитное состояние, вызванное угнетением синтеза ДНК. Возможно это обусловлено отсутствием "прямого" действия гормонов на синтез ядерной ДНК (Т.Н.Протасова,1975).

Установлено, что путем воздействия ДМВ на область надпочечников возможно усиление (углубление) иммунодепрессии, возникающей под влиянием ингибиторов нуклеинового синтеза и пролиферации. Это позволяет предположить, что комбинация указанных воздействий ДМЗ и иммунодепрессантов, в частности А1ДЦ, может способствовать развитию Еырааенного иммунодепрессиЕНОго эффекта при снижении дозы иммунодепрессантов и,следовательно, уменьшению частоты осложнений, связанных с приемом этих препаратов.

Следует подчеркнуть, что в условиях действия ингибиторов синтеза ДНК - 5-ФУ - иммунодепрессивный эффект наблюдался при разной локализации облучения и д&же при ДМВ воздействии на область щитовидной железы. Эффект повышения при этом уровня тиреоидных гормонов не проявился, возможно, в связи с "разобщением" функции тимуса и остальной иммунокомпетентной системы. 3 этой связи необходимо отметить иммунореабилитирувщий эффект от введения фракций тимозина при 5-фторурацилиндуцированной иммуносупрессии (Т.ОЬ-Ьа ей а1.,1583).

Можно полагать, что в основе иммунодепрессивного действия ДМВ лежит повышение глюяокортикоидной активности в организме.

РЕЗУЛЬТАТЫ КЛИНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 6. ДхЛВ воздействия на область различных эндокринных желез у больных с аутоиммунной патологией

6.1 Иммунокоррегирующий эффект ДМВ при воздействии на область надпочечников у больных РА.

Под наблюдением находилось 24 больных РА. Под влиянием курса ДМВ на область надпочечников у них увеличился уровень П-ОКС в крови (с 359,0+4,0 нмоль/л; до 400,0+5,0 (рА),001). Это, зероятно, сказалось на клинических проявлениях- заболевания: у 13 больных (55%) уменьшились боли в суставах по интенсивности (с 2,55+0,12 до 2,00+ +0,20 баллов; рн),01) и по частоте (с 2,85+0,06 до 2,35+0,12 бал-

лоб; рА),01). У 22 больных (90%) уменьшилась продолжительность утренней скованности с 108,0+12,9 до 51,5+8,1 мин; (рчЭ,05). На фоне уменьшения припухлости суставов уменьшился объём проксимальных меж-фаланговых суставов (ПМС) у 18 больных (75%) с 25,7+0,2 до 23,8+ +0,2 см ,05), среднее число воспаленных суставов у 20 больных • уменьшилось с 9,9+0,6 до 7,3+0,3 (рч),001), а также суставной индекс (рч),05). Сила сжатия кисти возросла у 16 больных (65%), правой (р^ОД), левой

Общий терапевтический эффект составил 75%. При этом улучшение наступило у 17 (71%) больных. У 6 больных (25%) лечебный эффект отсутствовал. Это преимущественно были больные с Ш-1У стадией заболевания, быстро прогрессирующей формой РА.

У 19 больных были исследованы показатели клеточного и гуморального иммунитета. У всех больных РА были выявлены какие-либо отклонения иммунных показателей по сравнению со здоровыми людьми. Так, количество Т-лимфоцитов было снижено у бти (32%) больных, увеличено у 5 (26%). При этом содержание Т-супрессоров было снижено у 5 (26%), повышено у 9 (47%) больных, а содержание Т-хелперов снижено у 5 (26%), повышено у 7 (37%) больных. Уровень В-лимфоцитов был увеличен у 7 (37%) больных.

У половины больных отмечалось увеличение содержания сывороточных иммуноглобулинов классов М, & и А, а также ЦИК.

• После окончания курса лечения у больных РА наблюдалась нормализация ряда показателей иммунного статуса. Так, при исходно сниженном содержании Т-лимфоцитов последние увеличивались до уровня, близкого к нормальному. У больных с повышенным содержанием Т-лимфоцитов в результате лечения наблюдалась тенденция к снижению их уровня в крови. Цри этом достоверно снижалось количество как Т-супрессоров (с 16,0+0,7 % до 11,1+1,5 %; рч),01), так и Т-хелперов (с 39,5+3,4 % до 25,8+3,7 %; рк),025). Отмечалось снижение содержа-нияЦИК до нормального уровня (с 0,15+0,01 ед.опт. плотн. до 0,12+ +0,01; рч),05). Концентрация сывороточных иммуноглобулинов в результате лечения не изменялась.

Выявленные в результате лечения изменения клинического течения заболевания и показателей иммунного статуса можно связать с усилением глюкокортикоидной функции коры надпочечников, обычно наблюдаемым при ДМВ воздействиях на область надпочечников (В.Д.Григорьева с соавт.,1983). Снижение уровня ЦИК в крови, свидетельствующее об уменьшении интенсивности аутоиммуноагрессивных процессов, вероятно,

объясняется уменьшением содержания Т-хелперов.

6.2 Иммунокоррегирующий эффект ДМВ воздействий на область тимуса у больных РА.

Под наблюдением находилось 28 больных РА. В результате ДМВ терапии у 57% и 52% больных отмечено уменьшение интенсивности (с 2,73+ +0,06 до 2,00+0,12 баллов; р^0,05;)и частоты (с 2,73+0,06 до 2,00+ +0,12 баллов; рчЭ,05) проявления болевого синдрома. У 73% больных уменьшился эксудативный компонент воспаления, в 70% случаев - объём ПМС. В связи с ослаблением болевого синдрома наблюдалась положительная динамика болевого (рД),05) и суставного (рЧ),1) индексов у 70% больных.

Воздействия ДМВ на область тимуса увеличивали содержание П-ОКС в плазме крови с 350,4+9,3 до 385,6+6,5 нмоль/л (рЧ),002).

■ Терапевтический эффект при ДМВ терапии на область тимуса достигнут у 68% больных РА, причем,у 64% наблюдалось улучшение и у 4% -незначительное улучшение. Лечебный эффект не установлен у больных с быстро прогрессирующим течением и Ш - 1У стадиями заболевания.

Иммунологическое обследование было проведено 19 больным.- Следует отметить, что практически у всех больных выявлен иммунный дисбаланс. Количество Т-лимфоцитов было снижено у 7 (38%) и повышено у 3 (16%) больных, при этом содержание Т-супрессоров было уменьшено у 4 (23%), увеличено у 7 (38%), а Т-хелперов снижено у 6 (31%), повышено у 4 (23%) больных . У II больных (58%) увеличено количество В-лимфоцитов.

Наблюдаемое у больных РА улучшение клинического состояния в результате проводимого лечения ДМВ сопровождалось нормализацией иммунных параметров. Анализ проведенных исследований показал,что у всех больных после лечения уменьшалось содержание В-лимфоцитов с 21,9+2,1 % до 16,3+0,9 % (рЧЗ, 025), а также - наблюдалось увеличение Т-супрессоров (рк),025) и уменьшение Т0 (рЧЭ,05).

Таким образом, полученные данные позволяют утверждать, что у больных РА наблюдался иммунный дисбаланс, выражающийся, как правило, в увеличении В-клеток и уменьшении Т-клеток, субпопуляционнный анализ обнаружил дефицит Т-супрессоров у некоторых больных РА. ДМВ воздействия на область тимуса способны оказывать иммуностимулирующий эффект, выявляющийся у больных с исходно сниженным иммунным статусом, или иммунодепрессивное действие у больных с исходно повышенными иммунными показателями. Иными словами, ДМВ терапия на область тимуса у больных РА сопровождалась нормализующим эффектом.

Иммуномодуляция в данном случае обусловлена увеличением эндокринной функции тимуса под влиянием ДМВ облучений, и,как следствие этого, купирование иммунного дисбаланса у больных- РА. Так, показано наличие избытка предшественников Т-супрессоров у больных РА при сниженной супрессорной активности организма. Это явление объясняется наличием блока в генерации функционально активных Т-супрессоров. Тимозин, добавленный в культуру лимфоцитов от этих больных РА способен в.некоторых случаях-повыдать численность супрессорных клеток (Е.Р.йасоЪБ еЪ а1., 1984).

6.3 ДМВ воздействия на область щитовидной железы у больных РА.

Под наблюдением находилось 17 больных РА. У больных под влиянием ДМВ терапии на область щитовидной железы выявлена тенденция к увеличению содержания П-ОКС в плазме крови с Зб0,8+]Цэ до 390,9+ +10,5 нмоль/л (рЧ),1).

Показано отсутствие положительной динамики клинических показателей, за исключением частоты болей (с 2,9+0,1 до 2,3+0,2 балла; рЧ),025).

Терапевтический эффект при ДМВ терапии на область щитовидной железы был отмечен у 53% больных РА. Ухудшения состояния после лечения, а также обострения сопутствующих заболеваний не наблюдалось. Иммунологическое обследование II больных РА до лечения.выявило достоверное снижение количества Т-лимфоцитов (31,7+1,7% при норме 45,0+4,9%; рч),025) и увеличение концентрации 1е й (17,0+1,6 г/л; при норме 12,0+1,5 г/л; р^0,025). После курса ДМВ воздействий на область щитовидной железы достоверных изменений изучаемых иммунных показателей не отмечалось.

Таким образом, ДМВ терапия на область щитовидной железы у больных РА не способна купировать иммунный дисбаланс, характерный для данной патологии.

6.4 Воздействия ДМВ на область щитовидной железы у больных

первичным гипотиреозом.

Наблюдалось 30 больных, страдающих первичным гипотиреозом. Все больные хорошо переносили процедуры ДМВ. В результате курса лечения у большинства больных улучшилось общее состояние, уменьшились или совсем исчезли такие симптомы, как сонливость, слабость, заторможенность, выпадение волос, на 2,0-2,5 кг уменьшилась масса тела.- 20 больных (66,6%) закончили лечение с улучшением.

У всех больных обнаружен выраженный иммунодефицит, проявляющийся в снижении количества Т-лимфоцитов (р^0,001), повышении коли-

честна В-лии$оцитов (рЧ),001) и увеличении концентрации 1в М (рА,05). У 7 больных обнаружены повышенные титры аутоантител к микросомальной фракции и тиреоглобулину.

После курса лечения произошла коррекция изучавшихся показателей иммунитета. Так, установлено увеличение количества Т-лим$оцитов с 20,5+2,2% до 35,0+1,8% (рД),05), уменьшение содержания В-ликфо-цитов с 43,3+1,7% до 23,1+4,0% (рч),05), снижение концентрации сывороточных иммуноглобулинов 15 М (р=0,05), 15 <1 (рЧ),05), 15 А (рн),001). Установлено уменьшение титров аутоантител к микросомаль-ной фракции и тиреоглобулину у Зх больных. Группа "плацебо", состоящая из 7 больных (постоперационнкй н спонтанный гипотиреоз), получала "мнимые" ДМВ воздействия на область щитовидной железы. Динамика клинико-лабораторных показателей у этих больных била статистически недостоверна.

Таким образом, метод ДМВ терапии на область щитовидной железы можно применять больным первичным гипотиреозом с целью повышения функциональной активности щитоеидной железы. Коррекция иммунных показателей происходит при изменении гормональных соотношений в организме, вызванных ДМВ воздействия!.«. ДМВ облучения области эндокринных желез способны вызывать гормональные, метаболические и иымуномодулирующие эффекты. Последние, в зависимости от условий, могут проявляться стимуляцией или супрессией иммунитета.

Разработаны новые принципы применения энергии электромагнитного поля дециметрового диапазона с целью иммунокоррекции на основе направленного изменения эндогенной (гуморальной) эндокринной немедикаментозной регуляции иммунологической реактивности организма. Теоретически разработан и экспериментально обоснован новый подход к решению проблемы иммуномодуляции под действием ДМВ и использования ДМВ облучений в качестве фактора немедикаментозной иммунокоррекции.

ВЫВОДЫ

I. Характер влияния ДМВ на первичный иммунный ответ к тимусзависи-мому антигену зависит как от локализации воздействия, так и от соотношения срока ДМВ облучения и фазы иммуногенеза. ДМВ воздействия на область щитовидной железы в индуктивную и продуктивную фазы вызывают иммунодепрессию, а в период, предшествующий иммунизации, - стимуляцию иммунного ответа. ДМВ облучения области вилоч-ковой железы (тимуса) сопровождаются кратковременной иммуностиыу-ляцией, стойким и длительным изменением гормонального профиля орга-

низма с преобладанием функции тиреоидных гормонов над глюкокортико-идной функцией коры надпочечников. ДМВ воздействия на область надпочечников,также как и трансцеребрально, вызывают иммундепрессию, сопровождающуюся стимуляцией глюкокортикоидной функции коры надпочечников.

2. Впервые показана разнонаправленная модуляция первичного иммунного ответа на тимуснезависишй антиген при ДМВ воздействиях на область щитовидной железы или надпочечников, свидетельствующая о стимуляции или депрессии популяции костномозговых лимфоцитов.

3. Впервые установлен неизвестный ранее феномен иммунореабилитации под действием ДМВ у иммунокомпрометированных животных. Показано, что-ДМВ облучения области щитовидной железы способны купировать иммунодепрессию, вызванную актиномицином Д и колхицином, и не влияют на иммунную супрессию, индуцированную 5-фторурацилом. Это свидетельствует о том, что изменение гормонального профиля организма при воздействии ДМВ способно стимулировать процессы транскрипции

и митотической активности лимфоидных клеток.

4. Экспериментально доказана возможность углубления иммунодепрес-сии путем сочетания ДМВ воздействий на область надпочечников с препаратами, подавляющими синтез нуклеиновых кислот и пролиферацию. Полученные данные свидетельствуют о возможности существенного снижения дозы вводимых в организм цитостатинов в комбинации с ДМВ облучениями области надпочечников при сохранении необходимой выраженности иммунной супрессии.

5. Выявлены разнонаправленные метаболические изменения при ДМВ воздействиях на область щитовидной железы - усиление процессов липо-лиза, и трансцеребрально - ослабление интенсивности липо-лиза, что может создавать условия для индукции иммуномодулирующих эффектов.

6. Впервые показана депрессия вторичного иммунологического ответа на тимусзависимый антиген под влиянием ДМВ воздействий на область эндокринных желез. ДМВ облучения, проводимые до первичной иммунизации или через 4-13 суток после неё, способствуют подавлению процесса формирования клеток иммунологической памяти. Сформированная популяция клеток памяти отличается относительной резистентностью к изменению гормонального профиля, вызванного ДМВ, за исключением трансцеребральных ДМВ воздействий.

7. ДМВ облучения атермической интенсивности (ММ 10 мВт/сь направленные на область щитовидной железы и надпочечников, индуцируют гормональные изменения и не сопровождаются иммуномодулирующим эффектом. Трансцеребральные воздействия ДМВ той же интенсивности • вызывают изменения гормонального статуса-животных и иммунную супрессию. Направленность гормональных и иммунных модуляций термических интенсивностей ДМВ облучений (ШМ 120 и 240 мВт/см^) была сходной и зависела от локализации ДМВ воздействий.

8. Исследование иммунобиологических эффектов в динамике курса ДМВ воздействий выявило изменение гормональных соотношений уже после 2-х облучений. Показало уменьшение глюкокортикоидной активности

в случае ДМВ воздействий на область щитовидной железы, синхронное возрастание глюкокортикоидной и тиреоидной функций при ДМВ облучении области надпочечников и трансцеребральных воздействиях. При ДМВ облучении области щитовидной железы иммунодепрессия, наблюдаемая в начале курса ДМВ воздействий, сменялась иымуностимуляцией в конце курса, а также в период последействия фактора. ДМВ воздействия на область надпочечников сопровождались иммунной.супрессией после 2-х ДМВ облучений. Трансцеребральные ДМВ облучения вызывали кратковременный иммуностимулирующий эффект, который к 4-ой процедуре трансформировался в иммунодепрессию.

9 • В клинических исследованиях показано, что ДМВ воздействия на область щитовидной железы у больных первичным гипотиреозом повышали функциональную активность последней, стимулировали клеточное звено иммунитета, снижали степень аутоиммуноагрессии, и поэтому могут быть использованы как патогенетически обоснованный метод лечения больных данной патологией. У больных ревматоидным артритом ДМВ облучения области надпочечников или тимуса, в отличие от ДМВ воздействий на область щитовидной железы, сопровождались положительной динамикой клинических показателей активности процесса, повышали функциональную способность эндокринных желез, подвергнутых ДМВ воздействию, купировали иммунный дисбаланс, уменьшали интенсивность аутоиммуноагрессии, и, следовательно, являясь патогенетически лечебным мероприятием, могут быть рекомендованы в лечении ревматоидного артрита как немедикаментозная иммунокоррекция.

h

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

При проведении ДМВ терапии на область расположения эндокринных желез необходимо учитывать резервные возможности того эндокринного органа, который подвергается ДМВ облучению. Так, активация глюкокортикоидной функции при ДМВ воздействиях на область надпочечников отмечается после 4-6 процедур. Длительный курс ДМВ облут чений (10 и более ДМВ воздействий) может быть причиной временного угнетения глюкокортикоидной активности. Поэтому при проведении ДМВ терапии на область эндокринных желез необходим контроль эндокринных функций в процессе лечения.

При использовании ДМВ терапии с целью стимуляции иммунных потенций организма необходимо учитывать следующие обстоятельства:

1. ДМВ воздействия на область щитовидной железы, сопровождающиеся усилением липолитических процессов, вызывают иммуностимулирующий эффект в период последействия фактора, что может быть применено с целью профилактики иммунодефицитных состояний;

2. при ДМВ облучении вилочковой железы (тимуса) выраженный иммуностимулирующий эффект отмечается уже после бти процедур; подобные воздействия могут быть рекомендованы при дефиците клеточного звена системы иммунитета.

Максимальная супрессия формирования популяции клеток иммунологической памяти отмечалась при трансцеребральных ДМВ воздействиях, при этом подавлялся как процесс формирования клеток памяти, так и осуществлялась депрессия сформированной иммунологической памяти (в системе синтеза ISM и IgG ), что имеет практическую значимость при создании поствакцинального иммунитета, индукции иммунологической толерантности.

ДМВ облучения области щитовидной железы и надпочечников индуцируют изменения гормональных соотношений организма, реализующиеся разнонаправленными эффектами на костномозговые лимфоциты, что может быть использовано для разработки методов нелекарственной иммуномодуляции при иммунодефицитных состояниях.

Иммунореабилитирующий эффект при ДМВ воздействиях на область щитовидной железы обусловлен активацией восстановительных процессов в лимфоидной ткани, что имеет практическую значимость в терапии вторичных иммунодефицитных состояний.

'Сочетание ДМВ воздействий на область надпочечников с препарата-

-ли, подавляющими синтез нуклеиновых кислот и пролиферацию способны усиливать иммунодепрессивный эффект. Использование ДМВ облучений в данном случае позволит значительно уменьшить дозу вводимых в организм цитостатиков при сохранении необходимой выраженности иммунной супрессии, что сократит частоту осложнений, наблюдаемых в клинике от применения иммунодепрессивных препаратов.

У больных ревматоидным артритом ДМВ облучения области надпочечников или вилочковой железы (тимуса), в отличие от ДМВ воздействий на область щитовидной железы, сопровождаются положительной динамикой клинических показателей активности процесса, купируют иммунной дисбаланс, уменьшают интенсивность аутоиммуноагрессии и могут быть рекомендованы в лечении больных ревматоидным артритом как немедикаментозная иммунокоррекция.

ДМВ воздействия на область щитовидной железы у больных первичным гипотиреозом вызывают позитивные изменения клинической симптоматики, стимулируют функциональную активность клеточного звена иммунитета, снижают степень аутоиммуноагрессии, и поэтому могут применяться как патогенетически обоснованный метод лечения больных данной патологией.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ

1. Иммунодепрессивное и иммуностимулирующее действие волн дециметрового диапазона при первичном иммунологическом ответе.//Вопр. курортол.,физиотерапии и ЛФКт-1982,-№2,-с.13-17. (соавт."-В.М.Боголю-5ов,И.Д.Френкель, Ю.Т.Пономарев и др.)

2. Влияние энергии ДМВ на иммунологическую реактивность организма. //Естественные и преформированные физические факторы в комплексном лечении различных заболеваний.-Труды ЦНИИКиФ.,-М.-1982,-с.25-27. (соавт. В.М.Боголюбов, И.Д.Френкель,Ю.Т.Пономарев и др.)

3. Способ лечения больных хроническими неспецифическими заболеваниями органов дыхания. Авторское свидетельство на изобретение '£992076 от I октября 1981 г. Заявка №3304851 (соавт. В.М.Боголюбов,

3.Д.Григорьева, А.Н.Шеина и др.)

4. Иммунобиологические эффекты электромагнитного поля дециметрового диапазона при его воздействии на область щитовидной железы./ЛС.микроб иол..эпидемиол. и иммунобиол. - 1983,-№4,-с.76-79 (соавт.В.М.Боголюбов,С.Н.Кузьмин,Н.Н.Козлова и др.)

5. Иммунодепрессивное действие электромагнитного поля дециметрового диапазона./Д.Микробиол.,эпидемиол. и иммунобиол.-1983,-К,-с.88-91. (соавт. И.Д.Френкель,С.Н.Кузьмин, Ю.Т.Пономарев и др.)

6. Влияние дециметровых волн на физико-химическое состояние мембран, хроматина тимоцитов и иммунологическую реактиЕность организма. //Вопр. курортол.,физиотерапии и ЛФК.-1983,-й2,-с.6-10.(соаЕТ. З.А.Соколова, С.М.Зубкова, И.Д.Френкель и др.).

7. Иммуномодулируюцее действие энергии электромагнитных волн дециметрового диапазона.//Материалы к УШ Всесоюзн. съезду физитера-певтов и курортол.,-М.,-1983,-с.123.(соавт.Ю.Т.Пономарев,С.М.Зуб -кова, З.А.Соколова и др.)

8. Нейроэндокринная (гипоталамо-гипофизарная) регуляция иммуногенеза (обзор литературы).//Иммунология.-1985.^Мс,-с.7-10. (соавт. И.Д.Френкель, В.Д.Сидоров).

9. Иммуномодулирующее действие электромагнитных полей СВЧ и УВЧ диапазонов.//Матер.Всесоюзн. сиыпоз.,посвящ.60-летию Тбилисского НИИВС.-Тбилиси.-1984.-с.399-400.(соавт. В.Д.Сидоров, А.С.Бобкова, Н.Н.Козлова и др.).

10. Гормональные и иммунные изменения в организме кроликов при воздействии микроволн на различные функционально активные зоны. //Ыатер.У Всесоюзн. съезда биохимиков АН СОТ.-М.-том 2,- Наука,-1986,-с.134.(соавт. И.Д.Френкель, А.И.Галенчик, А.С.Бобкова и др.). IX. Иммунобиологический эффект микроволн у кроликов при битеыпораль-ном воздействии.//Балл, эксперим. биол. и мед.-1986,-*8,-с1217-1219. (соавт. В.М.Боголюбов, И.Д.Френкель, В.Д.Сидоров и др.).

12. Иммуномодулирующий эффект микроволн при воздействии на комплекс "грудина-вилочковая железа"//Вопр. курортол..физиотерапии и ЛФК.-198&,-94,-С.40-43Дсоавт.И.Д.Френкель, А.И.Галенчик.А.С.Бобко-ва).

13. Иммуностимулирующий и иммунореабилитирующий эффекты микроволновых воздействий.//Тезисы докл.Всесоюзн. симпоз. с международн. участием - Иммунодефицита и аллергия - М.-1986,-с. 178-179. (соавт. И.Д.Френкель).

14. Иммунобиологический эффект микроволн при действии на зоны проекции щитовидной железы и надпочечников.//Бюлл. эксперим. биол. и мед.- 1986,-Ю,- с.636. Деп. в ВИНИТИ 02.06.86. №3905-В) (соавт. В.М.Боголюбов, И.Д.френкаль, С.М.Зубкова и др.).

15. Применение физических факторов в комплексной терапии первичного гипотиреоза. Метод, рекомендации Ш СССР, М. СССР.- М.- 198б.-9с.

16. Имцунобиологический эффект микроволн при введении животным ингибитора пролиферации - колхицина.//Патол. физиол. и экспер. те-ралия.-Д98б (Деп. в ВИНИТИ 02.10.86. №7068-В). (соавт. И.Д.Френкель,

А.И.Галенчик, А.С.Бобкова и др.).

17. Ингибиторный анализ микроволновой иммуномодуляции.//Иммунология.

1986,- (Деп. в ВИНИТИ 10.11.86.; №7660-В).(соавт. И.Д.Френкель).

18. Иммуностимулирующий эффект микроволн при воздействии на зону проекции вилочковой железы у кроликоц//Вопр. курортол.,физиотерапии и ЛФК.-1987,-М,-с.12-14. (соавт. В.М.Боголюбов, И.Д.Френкель, А.И.Галенчик и др.).

19. Гормонально-метаболическая и спонтанная иммунологическая активность организма в динамике курсового воздействия микроволн дециметрового диапазона на область проекции щитовидной железы //Вопр. курортол., физиотерапии и ЛФК. - 1987,-№2,- с.8-10. (соавт. А.И.Галенчик, И.Д.Френкель.Г.И.Проскурова и др.).

20. Общие закономерности реакции иммунной системы при действии на организм лечебных физических факторов.//Иммунологические концепции в курортологии. - Пятигорск.-1987,- с.14-16. (соавт. И.Д.Френкель).

21. Иммуномодулируюций эффект микроволн у кроликов при введении ингибиторов нуклеинового синтеза.// Фармакология и токсикология.-

1987,-с.124. (соавт. И.Д.Френкель, В.Д.Сидоров, Е.Л.Кретлова).

22. ДМВ-терапия на зону проекции щитовидной железы в комплексном лечении первичного гипотиреоза.//Актуальные вопросы физической и восстанов. терапии. Труды ЦНИИКиФ.- М,- 1988.- с.73-75.(соавт. И.М.Касьянова, Т.А.Океанова, Е.И.Сорокина).

23. Перспективы использования * энергии электромагнитных колебаний дециметрового диапазона с целью иммунокоррекции.//Актуальные вопросы физической и восстанов. терапии. Труды ЦНИИКиФ.- М. - 1988,-с.11-13. (соавт. И.Д.Френкель).

24. Иммунная супрессия при трансцеребральных воздействиях микроволнами 460 МГц,//Воцр. курортол.,физиотерапии и ЛФК.- 1988,-^5,-с.7--II. (соавт. И.Д.Френкель,А.И.Галенчик, Е.Г.Коровкина и др.).

25. Иммунобиологические эффекты микроволн дециметрового диапазона атермической интенсивности.//Вопр. курортол..физиотерапии и ЛФК.-

1988,-№6,-с.8-10.(соавт. И.Д.Френкель, А.И.Галенчик,Е.В.Гонтарь и др.)

26. Иммунные и гормональные эффекты локального воздействия микроволн различной интенсивности.//Вопр. курортол.,физиотерапии и ЛФК.-

1989,-№Г,с.16-21.(соавт. И.Д.Френкель,А.И.Галенчик,Е.Г.Коровкина и др.).

27. Влияние кратности локальных микроволновых воздействий на им-муно-гормональные показатели у интактных животных.//Вопр. курортол., физиотерапии и ЛФК. - 1989, - №2,-с.54-57 (соавт. И.Д.Френкель, З.А.Соколова, А.И.Галенчик и др.).

28. Динамика иммунобиологических эффектов при трансцеребральных микроволновых воздействиях,//Вопр. курортол..физиотерапии и ЛФК. -1989, - №3, с. (соавт. И.Д.Френкель, А.С.Бобкова, Е.В.Гонтарь и др.).

29. Иммуномодулирующее действие микроволн при индукции иммунного ответа на Ви-антиген,//К.микробиол.,эпидемиол. и иммунобиол. - 1989, №8, с. (соавт. И.Д.Френкель,А.П.Аллилуев, 3.А.Соколова и др.).

Диссертация апробирована 7 февраля 1989 года на межотдельческой научной конференции ВНЦ медицинской реабилитации и физической терапии Ш СССР.

Рецензенты: д.м.н., профессор И.Н.Данилова д.м.н., ст.н.с. В.В.Хоробрых

Зак. ^ ¿//208-89

Л-19207 от 24.04.89

Тираж 100

Отдел полиграфического производства ЦНИИТЭстроймаша 111141, Москва, 2-й проезд Перова поля, 5