Иммунологические механизмы реактивации герпетической инфекции и ее связь с аллергопатологией

Черевко, Наталья Анатольевна

Диссертации по медицине → Патологическая физиология

Автореферат и диссертация по медицине (14.03.03) на тему:Иммунологические механизмы реактивации герпетической инфекции и ее связь с аллергопатологией

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Черевко, Наталья Анатольевна Томск 2012 г.

Ученая степень: доктора медицинских наук

ВАК РФ: 14.03.03

Автореферат диссертации по медицине на тему Иммунологические механизмы реактивации герпетической инфекции и ее связь с аллергопатологией

На правах рукописи

005015047

ЧЕРЕВКО НАТАЛЬЯ АНАТОЛЬЕВНА

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ РЕАКТИВАЦИИ ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ И ЕЕ СВЯЗЬ С АЛЛЕРГОПАТОЛОГИЕЙ

14.03.03 - патологическая физиология 14.03.09 - клиническая иммунология, аллергология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

1 2 (.!.'.? ^¡2

Томск-2012

005015047

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Сибирский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации»

Научные консультанты:

доктор медицинских наук, профессор, академик РАМН, заслуженный деятель науки РФ

Новицкий Вячеслав Викторович

доктор медицинских наук, профессор

Климов Владимир Васильевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор

доктор медицинских наук

доктор медицинских наук, профессор

Уразова Ольга Ивановна Федоренко Ольга Юрьевна Долгих Татьяна Ивановна

Ведущая организация: Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Московский государственный медико-стоматологический университет Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации»

ционного совета Д 001.031.01 при Федеральном государственном бюджетном учреждении «Научно-исследовательский институт фармакологии Сибирского отделения Российской академии медицинских наук» (634028, г. Томск, пр. Ленина, 3)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Федерального государственного бюджетного учреждения «Научно-исследовательский институт фармакологии Сибирского отделения Российской академии медицинских наук»

Автореферат разослан «_»_2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

Защита диссертации состоится «_»

2012 г. в

часов на заседании диссерта-

доктор биологических наук

Амосова Е.Н.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Проблема инфекций, вызванных вирусами простого герпеса типов 1 и 2 (ВПГ1, ВПГ2), не теряет своей актуальности, несмотря на многочисленные исследования в области вирусологии в последние 10 лет. По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), смертность, обусловленная вирусами герпеса (15,8%), занимает второе место после гриппа (35,8%), перинатальная смертность составляет 10%, инфицированность новорожденных во время родов - 0,03%. Механизм латентной вирусной инфекции, а также механизмы, лежащие в основе реактивации ВПГ, неизвестны. Применяемые методы лечения рецидивирующих форм герпетических инфекций (ГИ) дают временные ремиссии, профилактика и прогнозы развития инфекции противоречивы. Это определяет не только медицинскую, но и социальную значимость проблемы.

Вследствие тесной связи герпетических инфекций, выражающейся в пожизненной вирусной персистенции, с иммунитетом хозяина, вирус может служить своеобразным маркером иммунных нарушений как у отдельно взятого человека, так и в популяции в целом. Если учесть, что в последнее время наблюдается неуклонный рост как иммунных нарушений у населения, так и распространенности ГИ, то с этих позиций становится очевидной необходимость дальнейшего изучения ГИ в качестве своеобразного показателя частоты иммунодефицитаых состояний и его влияния на популяционный иммунитет населения. С другой стороны, взаимоотношения между ГИ и иммунной системой хозяина могут представляться неким симбиозом, что требует детального изучения и понимания. Возможно, что в результате нарушения выстроенного «симбиоза» формируются клинические эпизодическое и рецидивирующее течение ГИ. В настоящее время накоплены результаты научных исследований о том, что некоторые хронические персистирую-щие вирусные инфекции вызывают поляризацию иммунного ответа по ТЬ2-пути с высоким уровнем продукции интерлейкина (IL) 4, 1L5, IL13 и иммуноглобулина (Ig) Е [Наследнико-

ва И.О. и др., 2005; Рязанцева Н.В. и др., 2006]. Возможно, это связано с адаптацией вируса к условиям, в которых ему «невыгодны» активный клеточный интерферон-опосредованный иммунный ответ и реакции естественного иммунитета, вследствие чего вирус может быть распознанным натуральными киллерами (ЫК) и цитотоксическими Т-лимфоцитами. Следовательно, инфекционные и аллергические болезни развиваются на основе «перекрывающихся» иммунологических механизмов. С иммунологической точки зрения имеются достаточные основания для объяснения связи между ГИ и аллергическими болезнями [Ма!гек, УагсЫЬакЪзЬ, 2003]. Формирование аллергической патологии непосредственно определяется повышенной активностью ци-токинов, секретируемых ТЬ2-лимфоцитами, под влиянием которых образуется ключевой субстрат аллергических реакций - 1{»Е. Для хозяина-это моделирование активного гуморального иммунного ответа на антигены с вероятным риском развития аллергической сенсибилизации. Согласно данным эпидемиологических исследований, в последние десятилетия наблюдается значительный рост частоты аллергических заболеваний [УагёапЬакЬБЬ, МайкагШ, 2004]. Вместе с тем, существующие в настоящее время сведения об иммунных механизмах моделирования риска развития аллергических болезней у лиц с хроническими вирусными инфекциями (в частности ГИ) недостаточны и требуют глубокого изучения их молекулярных основ.

Пристального внимания заслуживает факт вовлеченности одних и тех же генов в этиологию и патогенез как инфекционных, так и аллергических болезней. Характер и степень модифицирующего влияния ГИ на иммунную систему хозяина зависят от конкретных условий, в том числе генетических особенностей индивидуума. Работы, посвященные оценке роли полиморфизма генов-модификаторов продукции основных цитокинов иммунного ответа при ГИ, разнонаправлены и не учитывают латентного периода ГИ. В связи с этим анализ однонуклеотидных полиморфизмов генов-модификаторов иммунного ответа может быть высоко информативным при решении вопроса о механизмах моделирования риска аллергической заболеваемости у лиц с разными типами клинических проявлений ГИ. Исследование полиморфизма генов внутриклеточных сигнальных молекул регуляторных цитокинов представляется важным и перспективным для понимания развития и прогноза аллергической заболеваемости в условиях массовой инфицированности герпесвирусами, механизмов реактивации ГИ, новых подходов к терапии и профилактике рецидивирующего характера инфекции у населения. Используемые методы диагностики, прогноза течения и терапии ГИ, включая часто необоснованное применение комбинаций противовирусной терапии и отечественных иммуномодулирующих препаратов, не могут на современном этапе решить ни одной из перечисленных выше задач.

Цель работы: охарактеризовать иммунологические механизмы реактивации герпетической инфекции и ее связь с аллергопатологией.

Задачи исследования:

1. Оценить роль инфекции, вызванной вирусами герпеса типов 1 и 2, в развитии аллергопатологии.

2. Оценить взаимосвязь аллергической сенсибилизации и продукции IgE и IL4 с характером течения герпетической инфекции.

3. Исследовать особенности продукции IFNy, IFNa, функциональной активности NK-клеток и Т-лимфоцитов в периоды обострения и клинической ремиссии герпетической инфекции у пациентов с рецидивирующим течением герпеса и бронхиальной астмой.

4. Исследовать патогенетическую гетерогенность иммунных ответов у пациентов с разными вариантами течения герпетической инфекции и аллергической сенсибилизацией.

5. Оценить взаимосвязь аллельного полиморфизма генов ТВХ21, TLR9, 1L12B, JFNG, IL4, IL4RA с характером течения герпетической инфекции и бронхиальной астмой.

6. Проанализировать ассоциацию полиморфных вариантов генов IFNG, IL4, IL4RA с наличием аллергической сенсибилизации у лиц с рецидивирующим течением герпетической инфекции.

7. Выделить патогенетически обоснованные иммунологические критерии для оценки эффективности противовирусной терапии у пациентов с рецидивирующим течением герпетической инфекции.

8. Дать патогенетическое обоснование для назначения комбинированной аллерген-специфической терапии у пациентов с аллергическим ринитом и бронхиальной астмой, ассоциированными с герпетической инфекцией.

Научная новизна. Показано, что у пациентов с бронхиальной астмой частота инфицированное™ ВПГ1 составляет 100%, что позволяет рассматривать ГИ как один из вероятных этиологических факторов аллергопатологии. У 31% пациентов с бронхиальной астмой ГИ протекает в рецидивирующей, у 42% - в эпизодической форме. Независимо от клинического течения ГИ (включая латентное течение инфекционного процесса) выявлен высокий уровень специфического IgG к ВПГ1, -2 в крови у обследованных лиц в возрасте 46-60 лет и гетерогенные его показатели у пациентов в возрасте 18-45 лет. Установлено, что у 61% обследованных имеет место реактивация (из них у 18,5% - рецидивирующая форма) ГИ, у 39% - латентное течение инфекции.

частота встречаемости поливалентной аллергической сенсибилизации у лиц с рецидивирующим течением ГИ. Выявлена корреляция содержания IgE и IL4 в сыворотке крови с титром специфических антител к ВПГ1 в период эпизодической реактивации ГИ. Показана высокая частота манифестных форм ГИ у лиц с положительной латентной аллергической сенсибилизацией.

Установлены особенности продукции интерферонов IFNa, IFNy и цитотоксической активности NK-лимфоцитов в периоды обострения и ремиссии рецидивирующей ГИ у пациентов без аллергической сенсибилизации и с бронхиальной астмой. Впервые с помощью сравнительного анализа уровня регуляторных цитокинов TNFa, IFNy, IL4 и соотношения оценки пролиферативной активности Т-лимфоцитов у обследованных лиц выделены критерии реактивации ГИ.

Выделены дифференциальные типы индуцированного вирусным антигеном иммунного ответа, позволяющие прогнозировать течение ГИ и обосновать адресную терапию для пациентов с рецидивирующей формой инфекции. Для больных с бронхиальной астмой предложены критерии контроля реабилитации интерферонопродукции и функциональной активности NK-клеток в ранний пост- и межрецидивный период ГИ.

Впервые установлена связь полиморфизма генов цитокинов IFNG, IL4, IL12B, рецепторов TLR9, IL4RA и транскрипционного фактора TBX2I у обследованных лиц, имеющих серопозитивные титры специфических антител к ВПГ, с рецидивирующим течением ГИ. Обоснованы ассоциации полиморфизма генов IL4, 1L4RA у пациентов с ГИ с формированием аллергического статуса (аллергической сенсибилизации).

Дано патогенетическое обоснование индуцированного контроля интерферонопродукции и титра специфических антител к вирусу герпеса при проведении аллергенспецифической терапии для повышения ее эффективности у пациентов с аллергическим ринитом и бронхиальной астмой с манифестным течением ГИ.

Теоретическая и практическая значимость. Результата исследования, их анализ и выводы расширяют имеющиеся представления о патогенетических механизмах формирования, реактивации и особенностях течения ГИ, адекватности терапии. Выявлены достоверные дифференциально-диагностические критерии, позволяющие повысить качество диагностики, адекватность и эффективность проводимого патогенетически обоснованного лечения ГИ и аллергических заболеваний, сочетанных с ГИ. На основе полученных результатов разработана модифицированная схема лечения, которая может быть рекомендована для широкого применения у пациентов, имеющих сочетание аллергии с ГИ.

Теоретические и практические положения, разработанные в диссертационном исследовании, внедрены в научно-педагогическую деятельность кафедр патофизиологии и иммунологии и аллергологии ГБОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России, в практическую деятельность

врачей общей врачебной практики и узких специалистов поликлиник Медицинского объединения «Центр семейной медицины» (г. Томск), МЛПУ «Межвузовская больница» (г. Томск).

Положения, выносимые на защиту:

1. Инфицированность вирусами простого герпеса типов 1 и 2 способствует формированию аллергической сенсибилизации к неинфекционным антигенам (преимущественно к бытовым и пыльцевым аллергенам). У 61% обследованных лиц герпетическая инфекция протекает в реактивной форме, из них у 18,5% имеет рецидивирующий характер. Инфицированность ВПГ1 при бронхиальной астме составляет 100%. Рецидивирующее течение герпетической инфекции отмечается у 31% пациентов с бронхиальной астмой и в 22,9% случаев при положительной аллергосенсибилизации.

2. ВПГ1, -2 инициирует ТЬ2-зависимое воспаление за счет повышенного синтеза специфических антител к герпесвирусным антигенам, IgE, продукции IL4 как в условиях латентного течения, так и при клинической манифестации герпетической инфекции независимо от стажа заболевания.

3. Характер течения герпетической инфекции у лиц без аллергической сенсибилизации и пациентов с бронхиальной астмой ассоциирован с гетерогенными вариантами изменений количества и функциональной активности Ж-клеток и Т-лимфоцитов, содержания IFNa, IFNy, 1L4 и баланса IFNy/IL4 как в сыворотке крови, так и в индуцированных тестах in vitro с вирусным антигеном. У пациентов, страдающих бронхиальной астмой, клиническая манифестация герпетической инфекции сопровождается достоверным повышением содержания интерферонов в сыворотке крови с динамическим его понижением в ранний восстановительный период на фоне повышения продукции IL4 и снижения функциональной активности NK-лимфоцитов.

4. К рецидивам герпетической инфекции предрасполагает носительство генотипа Т/С и аллеля С гена IFNG, генотипа Т/Т и аллеля Т гена TLR9, генотипа G/A и аллеля G гена ТВХ21, генотипа Т/С и аллеля Г гена IL4. Рецидивирующее течение герпетической инфекции у больных бронхиальной астмой ассоциировано с увеличением частоты встречаемости генотипа С/С и аллеля С гена IL12B, генотипа С/С и аллеля С гена IFNG, генотипа Т/Т и аллеля Т гена IL4, генотипа 1/1 и аллеля 1 гена IL4RA по сравнению с таковой у лиц с латентным течением инфекции.

5. Риск формирования аллергической сенсибилизации у пациентов с эпизодической реактивацией и рецидивирующим течением герпетической инфекции ассоциирован с модулирующим влиянием полиморфных вариантов генов 1L4 (Т/Т) и 1L4RA (V/V) на продукцию IgE.

6. Динамика индуцированной продукции lFNy, IL4 и пролиферации Т-лимфоцитов in vitro в тестах с вирусным антигеном являются доступными клинико-лабораторными критериями эффективности и прогноза противовирусной и иммуномодулирующей терапии.

7. Критериями для назначения комбинированной аллергенспецифической иммунотерапии у пациентов с аллергическими заболеваниями (аллергический ринит, бронхиальная астма) с эпизодической реактивацией и рецидивирующим течением герпетической инфекции являются снижение содержания IFNa в мукозальном секрете и повышение титров специфических антител к ВПГ1 в крови на фоне стандартных схем получения доз лечебного (причинного) аллергена.

Апробация и реализация работы. Основные положения диссертации докладывались и обсуждались на Международной конференции «Иммунотерапия: от теории к практике» (Москва, 2005); Российской научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в Томске» (Томск, 2008); I Международной конференции «Проблемы диагностики, лечения и профилактики герпесвирусных инфекций» (Москва, 2008); Областной научно-практической конференции «Вопросы эпидемиологии, клиники, лечения и профилактики вирусных гепатитов, ВИЧ-инфекций» (Томск, 2008); Областной конференции «Новые подходы к терапии герпесвирусной инфекции» (Томск, 2009); Городской научно-практической конференции «Обоснованность длительных курсов противовирусной терапии у пациентов с рецидивирующими формами герпетической инфекции» (Томск, 2009); Всероссийской научной конференции «Молекулярно-генетические основы функционирования цитокиновой сети в норме и при патологии» (Новосибирск, 2010); Областной научно-практической конференции «Современные подходы к лечению аллергических заболеваний» (Томск, 2011).

Публикации. По теме диссертации опубликованы 23 научные работы, в том числе 14 в журналах, рекомендованных ВАК РФ. Получен патент на изобретение №2383019 09.12.2008 г. Опубликована 1 монография.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 226 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы «Материал и методы», глав собственных результатов и их обсуждения и заключения. Список литературы содержит 288 наименований, в том числе 132 - отечественные и 156 - зарубежные источники. Работа иллюстрирована 18 рисунками, включает 22 таблицы.

Личный вклад автора в проведенное исследование. Планирование и реализация исследований, набор клинического материала, курсы иммунотерапии, значительная часть представленных лабораторных исследований проведены, обработаны и интерпретированы лично автором.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В основу работы положены результаты клинико-лабораторного обследования 1843 жителей г. Томска (837 мужчин и 1006 женщин в возрасте от 18 до 60 лет) в период с 2003 по 2009 г. Все волонтеры предварительно давали письменное согласие на участие в проводимом исследовании, которое было разработано биоэтическим комитетом ГБОУ ВПО СибГМУ Минздравсоц-развития России согласно Хельсинкской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 г. и «Правилам клинической практики в Российской Федерации», утвержденным Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. №266. Обследование и анкетирование участников проводили на базе поликлиник Медицииского объединения «Центр семейной медицины» (г. Томск), отделения иммунологии и аллергологии МЛ1ТУ «Межвузовская больница».

Группу добровольцев с аллергическими заболеваниями составили 220 пациентов (132 женщины и 88 мужчин) в возрасте от 18 до 50 лет, состоящих на учете с подтвержденным диагнозом «бронхиальная астма» средней степени тяжести (п = 100), «круглогодичный аллергический ринит (КАР)» (п = 40), «сезонный аллергический ринит (САР)» (п = 42), и «сезонный аллергический ринит, сочетанный с бронхиальной астмой (БА)» (п = 38). Клиническая картина заболеваний во всех случаях характеризовалась средней степенью тяжести, управляемым течением, пациенты получали постоянно базисную терапию согласно медицинским стандартам, не имели обострений БА в течение предшествующих 4 нед до обследования. Стаж аллергического заболевания у пациентов составлял от 12 мес до 24 лет, стаж клинических проявлений герпетической инфекции - от 3 до 15 лет. У всех пациентов была подтверждена поливалентная сенсибилизация к нескольким аллергенам из разных групп. Диагностика бронхиальной астмы проведена в соответствии с программой GINA (Global Initiative for Asthma, 2005-2006), аллергического ринита - с программой ARLA (Allergic Rhinitis and Impact on Asthma, 2005-2006).

Группа пациентов, получавших комбинированную терапию имунофаном и ацикловиро.м состояла из 82 человек (49 женщин и 33 мужчины) в возрасте от 18 до 45 лет. 40 больных имели диагноз «БА с сопутствующей рецидивирующей формой ГИ», 42 пациента - диагноз «ГИ, рецидивирующее течение, назолабиальная локализация (без отягощенного аллергоанамнеза)». С первого дня очередного обострения герпетической инфекции пациентам назначался: ащшювир (1,6 г/сут, таблетки, 10 дней ежедневно) и имунофан (инъекции в/м 1,0 мл ежедневно №5, затем через день №5.). Имунофан - иммунорегулэторный пептид, представляет собой синтетическое производное гормона тимопоэтина (аргинил-а-аспартил-лизил-валил-тирозил-аргшшн). Главными мишенями являются Т-лимфоциты, влияет на пролиферацию и дифференцировку Т-кле-ток путем усиления продукции ими IL2 и его рецепции чувствительными клетками. Контроль-

ные измерения клеточных показателей и уровня интерферонов проводили в 1-2-й день клинических проявлений, повторно через 15 дней после начала лечения (клиническая ремиссия инфекционного процесса), затем через 30 дней от начала обострения.

Группа обследованных, получавших терапию трансфер-фактором, состояла из 62 человек (37 женщин и 25 мужчин) в возрасте 18-45 лет с диагнозом «ГИ, рецидивирующее течение, назолабиальная и генитальная локализация (без отягощенного аллергоанамнеза)». Трансфер-фактор («For life research», США) - известный фактор, регулирующий экспрессию HLA 1 и HLA 2 антигенпрезектирующих дендритных клеток, стимулятор активности клеток с цитотоксическим потенциалом (CD8+, CD 16") и индуктор интерферонов. Рекомендован для лечения пациентов с герпетическими инфекциями. Все пациенты получали трансфер-фактор в суточной рекомендуемой дозе курсом 14 дней в периоде клинической ремиссии ГИ. Контроль показателей после курса терапии проводили на 15-16-й день.

Группа обследованных в возрасте 22-45 лет, получавших аллерген специфическую терапию (АСИТ) состояла из 40 пациентов с КАР, 42 больных с САР, 38 пациентов с БА+САР. Из них у 52 человек была диагностирована сопутствующая ГИ, эпизодическое течение, и у 32 пациентов - ГИ, рецидивирующее течение (назолабиальная, генитальная форма).

Все волонтеры были подвергнуты клиническому осмотру врача, паразитологическому (копровоскопия) и аллергологическому обследованию (кожное аллерготестирование с бытовыми, эпидермальными, пыльцевыми и пищевыми аллергенами производства ОАО «Биомед» им. И.И. Мечникова (г. Москва)), иммунологическому обследованию, исследованию титров специфических антител к основным герпесвирусам.

Критериями исключения волонтеров из дальнейшего участия в исследовании были положительные результаты обследования на HbsAg, ПЦР положительные тесты крови на ВПГ1, -2, паразитарные инфекции, наличие позитивных результатов онкомаркеров, острых инфекционных и неинфекционных заболеваний, обострение хронических неинфекционных заболеваний, не связанных с ВПГ1,-2, аутоиммунные заболевания, прием любых лекарственных средств, за исключением базисной терапии БА (серетид / симбикорт, фликсотид) и для АР - назонекс, фликсоназе, назарел.

Материалом для исследования служила кровь, взятая натощак в одинаковых условиях процедурного кабинета, в утренние часы, а также мукозальный секрет, надосадочная культу-ральная жидкость индуцированных лимфоцитов ФГА и вирусным антигеном (АГ). Материалом для генетического исследования являлась ДНК, выделенная из ядросодержащих клеток венозной крови методом осаждения ДНК на сорбенте (набор «ДНК-сорб-АМ», ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора (г. Москва)).

Заполнение индивидуальной регистрационной / информационной карты проводилось

врачом-исследователем во время визита добровольца с учетом результатов клинического, паразитологического, аллергологического и иммунологического исследований.

Дизайн работы - ретроспективное эпидемиологическое рандомизированное клиническое сравнительное исследование в группах.

Выполнение кожных аллерготестов in vivo. Процедура проведения кожных аллергопроб соответствовала стандартам ВОЗ. Аллергопробы выполняли на коже внутренней поверхности предплечья. Были использованы диагностические аллергены пищевой, бытовой, пыльцевой и эпидермальной групп производства ОАО «Биомед» им. И.И. Мечникова. Местную реакцию на аллерген оценивали через 20 мин. В зависимости от наличия или отсутствия сенсибилизации к неинфекционным антигенам были выделены подгруппы сравнения: с отрицательными кожными аллергопробами (КАП); с положительными КАП.

Определение концентрации цитокинов IL4, lFNy, IFNa TNFa в сыворотке крови, в му-козальном секрете, в супернатанте индуцированных лимфоцитов проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА), тест-системы ЗАО «Вектор-Бест» (г.Новосибирск). Для определения содержания IFNa использовали набор реактивов ООО «Протеиновый контур» (г. Санкт-Петербург). Концентрацию цитокинов вычисляли по калибровочным кривым, а в мукозальном секрете - методом перерасчета с учетом общего белка, определяемого микробиуретовым методом.

Определение количества NK-лимфоцитов. Для определения количества натуральных киллерных клеток (СШ6+-лимфоцитов) использовали МАТ ЛНК-16 фирмы «Сорбент» (г. Москва). Результаты цитотоксического теста учитывали в препарате «раздавленная капля».

Определение функциональной активности. Метод основан на способности NK-клеток разрушать эритроциты кур без предварительной сенсибилизации при их совместном инкубировании [Гордиенко С.П., 1983]. Учет производили методом люминесцентной микроскопии, светофильтр ФС-1-1.

Определение количества лейкоцитов и лимфоцитов в периферической крови выполняли пробирочным методом [Меньшикова В.В., 1987].

Определение пролиферативной активности Т-лимфоцитов периферической крови в реакции бласттрансформации. Контроль трансформирования лимфоцитов в бласты проводили через 72-96 ч после контакта с антигеном или митогеном (ФГА). Для стимуляции секреторных способностей лимфоцитов вносили ФГА («Difco», Германия) в концентрации 0,01 мг/мл культуры, параллельно в другую часть проб 0,01 мг/мл герпетической культуральной инактивированной вакцины штаммы ВПГ 1 и 2 типов (г. Санкт-Петербург). Результат реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) выражали в процентах.

Определение количества IgE. Количественное определение IgE проводили методом ИФА набором «IgE общий - ИФА-Бест» (ЗАО «Вектор-Бест», г. Новосибирск).

Определение количества IgMu IgG к вирусу простого герпеса. Количественное опреде-

ление IgM, IgG и авидности lgG к ВПГ1 и -2 проводили методом ИФА наборами «ВектоВПГ -IgM - стрип», «ВектоВПГ - IgG-1 - стрип» и «ВектоВПГ - IgG-2 - стрип» (ЗАО «Вектор-Бест», г. Новосибирск).

Анализ полиморфных вариантов генов цитокинов. Были исследованы полиморфные варианты генов IFNG (rs 2069705), 1Ша (rs 1805010), IL4(rs 2070874), IL12RB1 (rs 11575934), 1L12B (rs 3212227), TBX21 (rs 11652969), TLR9 -1237T/C (rs 5743836). Полиморфные варианты генов выбирали с помощью базы данных (http://www.ncbi .n!m.nih.gov). Последовательность праймеров подбирали с помощью программы «Vector NT1 Advance™ Software» (Gateway™). Для генотипирования использовали рестрикционный анализ продуктов амплификации специфических участков генов с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Статистическая обработка результатов. Результаты представлены в виде М± т, где М - среднее арифметическое значение, т - ошибка среднеквадратичного отклонения, или в виде Me (Qi-Qi), где Me - медиана, (Qr-Qj) - процентили (нижний и верхний квартиль), и обработаны в программе SPSS for Windows Ver 11.5. Сравнение частот встречаемости признаков и попарное сравнение групп проводили с использованием критерия х2 Пирсона с поправкой Йетса на непрерывность и (или) точный тест Фишера. Сравнение количества IgE в группах пациентов выполняли при помощи непараметрического критерия Краскала-Уоллиса, попарное сравнение групп -критерия Манна-Уитни с поправкой Бонферрони. Различие двух сравниваемых величин считали достоверным при р< 0,05. Дополнительно обработка результатов исследования проводилась с использованием критерия отношения шансов OR с расчетом для него 95%-го доверительного интервала (CI).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Исследования инфицированности вирусами простого герпеса населения города Томска У населения г. Томска было выявлено, что частота инфицированности ВПП и ВПГ2 превышает средние значения показателей по России. Так, в 2003 г. среди 168 обследованных добровольцев у 86,3% были установлены положительные титры антител к ВПГ, в 2005 г. - у 93,0 % (из 320 человек), в 2006 г. - 93,3% (из 298 человек), в 2007 г. - 97,8% (из 318 пациентов), в 2008 г. - 97,1% (из 347 человек), в 2009 г. - у 97,1% больных (из 392 человек). При анализе встречаемости ВПГ1 и ВПГ2 выявлено, что к 2009 г. частота инфицированности ВПГ1 и ВПГ2 составила 97,08% и 38,68% соответственно (рис. 1) . У обследованных обнаружены высокие (1 ; 1600 - 1 :12800) и низкие (1 :200 - 1 : 800) значения IgG к ВПГ1, -2, включая обследованных с латентным течением ГИ или стадией динамического равновесия вирус-иммунная система хозяина. Только у 3% лиц с латентным течением ГИ получены отрицательные значения, совпадающие с отсутствием клинических проявлений герпетической инфекции. Исследование частоты клинических проявлений ГИ у населения г. Томска показало, что у

39,0% обследованных имело место бессимптомное (латентное) течение, у 42,5% - эпизодическое течение, в 18,5% случаев отмечено рецидивирующее течение ГИ. Установленные титры специфических к ВПГ1, -2 не зависели от частоты клинических проявлений инфекции. Более того, в группе латентного течения ГИ у 58% пациентов зарегистрированы высокие значения титров к ВПГ1.

ВПГ 1,2-отрицательно-3% доляВПГ2 38,68%

Рис. 1. Уровень инфицированное™ вирусом простого герпеса 1 и 2 типов среди обследованных г. Томска в 2009 г

Установленные в 64% случаев высокие специфические титры к ВПГ1 (от 1:1600 и выше) у всех обследованных являются индикаторами ответов на ГИ, «свидетелями» активности репликации вируса и одновременно отражают активность ТЪ2-типа иммунного ответа (активного гуморального ответа). Установленные в 58,1% случаев высокие титры специфических антител ДО к ВПГ1 при латентном течении ГИ отражают активность иммунного ответа и подтверждают динамическую теорию взаимоотношения вируса и иммунной системы хозяина.

Выявление латентной сенсибилизации к неинфекционным аллергенам у лиц с разным клиническим течением герпетической инфекцией

В последние десятилетия продолжается рост аллергических заболеваний (АЗ) во всех развитых странах. На этом фоне аллергологи отмечают факты скрытой или латентной сенсибилизации к неинфекционным аллергенам при наборе контроля «соматически здоровых» волонтеров в разных возрастных группах. На момент обследования эти лица не имели жалоб на аллергические проявления отягощенного наследственного анамнеза по АЗ, не обращались за помощью к врачам-аллергологам. С другой стороны, по нашему мнению, привлекательна роль инфекционных агентов и в частности медленных вирусных инфекций, способных изменять характер иммунного ответа в организме. Вместе с тем, «гигиеническая гипотеза», широко обсуждаемая в настоящее время в научной литературе, подтверждает, что воздействие инфекционных агентов в раннем возрасте формирует индивидуальный устойчивый тип ответа иммунной системы, снижая риск развития АЗ.

Для оценки аллергической сенсибилизации у населения г. Томска к неинфекционным аллергенам были проанализированы результаты КАП и значения общего НА сыворотки крови у лиц с различными вариантами течения ГИ без диагностированных ранее в анамнезе АЗ (п = 381). Группой сравнения явились пациенты, состоящие на учете с подтвержденным диагнозом «атопическая бронхиальная астма» (легкой персистирующей и средней степени тяжести клинического течения, в периоде ремиссии, п = 100). У 74% обследованных выявлена положительная сенсибилизация к неинфекционным аллергенам, у 49% из них впервые диагностированы положительные результаты в тестах с аллергенами. У этих лиц клинические симптомы аллергии отсутствовали. Среди положительных результатов КАП преобладали аллергены бытовой и пыльцевой групп, лидировала поливалентная сенсибилизация в разных сочетаниях.

Для анализа клинических особенностей течения ГИ и результатов КАП у этих пациентов проведена дополнительная стратификация: были выделены ВГИ-А - лица с отрицательными результатами КАП и ВГИ + А - лица с установленной ачлергосенсибилизацией (КАП положительные). Участники исследования, у которых получены положительные результаты КАП, демонстрировали достоверно высокое (р < 0,05) число случаев клинической манифестации и рецидивирующих форм ГИ (22,9%) по сравнению с лицами без аллергической сенсибилизации (11,5% рецидивирующих форм ГИ). У пациентов с Б А в 73% случаев отмечены проявления клинических форм ГИ (рецидивирующих форм - 31%), при этом у всех обследованных выявлены положительные титры специфических ^О к ВПГ1, высокий уровень общего ^Е и 1Ь4, поливалентная аллергическая сенсибилизация (табл. 1,2). Выраженность местной реакции сенсибилизации к неиифекционным аллергенам оценивали по 5-балльной шкале в соответствии с характером кожных прояшгений в ответ на нанесение аллергена Самая высокая степень выраженности сенсибилизации (1,42 балла) наблюдалась у лиц с рецидивирующим течением ГИ. У пациентов с латентным течением ГИ степень сенсибилизации к аллергенам составила 1,09 балла

Таким образом, оценка аллергической сенсибилизация к неинфекционным аллергенам при различных формах проявлений ГИ является актуальной для понимания типа иммунного ответа в условиях доклинической репликации вируса, а также для пациентов с клинической манифестацией герпетического процесса.

В отсутствие аллергической сенсибилизации у пациентов установлена положительная корреляция между уровнем и значениями к ВПГ1,-2 при латентном течении ГИ (г = 0,46, р = 0,001 и г = 0,44, р = 0,005, соответственно) и между уровнем и значениями ^ к ВПГ1 при эпизодическом течении ГИ (г = 0,43, р = 0,004). На основании анализа критерия отношения шансов (Ж установлено, что риск развития эпизодических форм течения ГИ связан с увеличением значений общего ^Е, уровня 11,4 в сыворотке крови.

Частота сочетания аллергической сенсибилизации у волонтеров с различным типом течения герпетической инфекции, %

Характер клинического течения ВГИ-А ВГИ + А БА

Латентное течение 51,9 39,6' 27,0*

Эпизодическое течение 36,5 37,5 42,0

Рецидивирующее течение 11,5 22,9" 31,0'

Примечание. ВГИ - лица с отрицательными (-А) и положительными (+А) кожными аллерготестами; БА -пациенты с атопической бронхиальной астмой

—р < 0,05 по сравнению с группой ВГИ - А

Таблица 2

Уровень продукции ^Е и 1Ь4 в исследуемых группах (Мефг-Оз))

Характер клинического течения ГИ Уровень ^Е, КЕ/л Уровень 1Ь4, пкг/мл

Волонтеры с отрицательными КАП Волонтеры с положительными КАП Волонтеры с отрицательными КАП Волонтеры с положительными КАП

Латентное течение 49,18 (16,60-136,40) 38,52 (14,30-177,10) 6,60 (2,10-9,90) 0

Эпизодическое течение 24,82 (11,80-77,80) 525,70 (95,50-583,7)* 5,80 (2,30-12,1) 128,80 (20,30-250,00)*

Рецидивирующе е течение 70,05 (15,80-117,00) 103,46 (40,90-584,40) 0 0

- р < 0,05 между группами

При анализе клинических особенностей течения ГИ нами обнаружено, что от латентного к манифестному рецидивирующему течению увеличивается число пациентов с аллергической сенсибилизацией к неинфекционным аллергенам. Лица с положительной аллергической сенсибилизацией имеют более высокую частоту клинических проявлений ГИ, чем лица с отрицательной аллергосенсибилизацией. Самая высокая частота проявления клинических форм ГИ зарегистрирована в группе пациентов, страдающих БА. Таким образом, длительная персистенция вируса ВПГ1 и (или) -2 даже при латентной форме инфекции может являться причиной сенсибилизации к неинфекционным аллергенам, изменяя популяционный иммунитет современного населения г.Томска. В условиях эпизодической реактивации ГИ могут формироваться клинически выраженные аллергические реакции, с дальнейшей вероятностью развития аллергического, ^-зависимого процесса. Таким образом, можно реально рассматривать участие ГИ в увеличении частоты аллергических заболеваний, в частности аллергического ринита, встречаемость которого колеблется от 25 до 60%, продолжая нарастать с учетом статистики последнего десятилетия XX в.

ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ И

АЛЛЕРГОПАТОЛОГИИ

Особенности противовирусного иммунитета при рецидивирующем течении герпетической инфекции

Установлено, что в стадию обострения рецидивирующей ГИ у обследованных лиц независимо от наличия или отсутствия аллергической сенсибилизации имеет место однотипный алгоритм снижения количества и цитотоксической активности ТЖ-лимфоцитов, без восстановления показателей в стадию клинической ремиссии ГИ до значений, зарегистрированных в группе с латентным течением ГИ (периода динамического равновесия инфекции и иммунной системы хозяина). У этих же пациентов выделены особенности интерферонового статуса: в отсутствие аллергической сенсибилизации установлено, что концентрации и №N7 в крови повышались в острую стадию проявлений ГИ с

дальнейшей динамикой снижения в стадию ремиссии до сравниваемых таковых значений при латентном течении ГИ. У лиц с аллергической сенсибилизацией после подъема значений интерферонов в период обострения (в фазу клинической ремиссии инфекции) имело место резкое снижение концентраций 1РЫу ниже референсных значений (табл. 3).

У пациентов с однотипным клиническим течением герпетической инфекции были выделены особенности функциональной активности лимфоцитов в индуцированном ответе на вирусный АГ (табл. 4). У 46% обследованных обнаружено статистически значимое увеличение количества активных Т-лимфоцитов по сравнению со спонтанным вариантом (отнесены в 1-ю группу), у 54% больных показатели РБТЛ с антигеном достоверно не отличались от значений спонтанной активности Т-лимфоцитов (2-я группа). Различная активность лимфоцитов объясняется особенностями цитокиновой продукции, измеренной в супернатантах индуцированных клеток. У лиц с положительным ответом лимфоцитов была зарегистрирована высокая продукция и 1Ь4 в тесте с АГ по сравнению с таковыми значениями при латентном течении ГИ.

При этом у лиц с отсутствием активного ответа СШ+ лимфоцитов (2-я группа) высокие уровни 1Ь4 наблюдались в тестах со специфическим АГ и с ФГА на фоне сниженной продукции 1КЫу. Таким образом, индуцированный вирусным АГ иммунный ответ у 46% пациентов с положительным ответом лимфоцитов сохраняет резервные возможности продукции несмотря на клинически рецидивирующее течение. В 54% случаев при отсутствии положительного пролиферативного ответа лимфоцитов на вирусный АГ индуцируется иной тип иммунного ответа, связанный с активным высвобождением 1Ь4 и снижением уровня 1Шу.

Показатели системы естественной цитотоксичности и концентрации интерферона в крови у лиц с рецидивирующим течением герпетической инфекции без и в сочетании с аллергическими заболеваниями (бронхиальной астмой) (М ± т)

Показатель Латентное течение Рецидивирующее течение ГИ без A3 Рецидивирующее течение ГИ с БА

Обострение Ремиссия Обострение Ремиссия

Лейкоциты, 10ч/л 5,7 ±0,2 5,9 ±0,9 5,5 ± 0,7 5,8 ± 0,7 5,6 ±1,0

Лимфоциты, 107л 1,85± 0,10 1,86 ± 0,10 1,88 ±0,10 1,85 ±0,09 1,87 ±0,09

Натуральные киллеры, 109/л 0,27 ± 0,05 0,20 ±0,02* 0,25 ± 0,02 0,20 ± 0,03* 0,20 ± 0,02 *

Индекс цитотоксичности натуральных киллеров, % 38,5 ±3,3 27,6 ±3,2* 22,9 ± 2,0*" 18,4± 1,3* 18,9 ±1,7*

Сывороточный 1ГЫа, пкг/мл 3,8 ±0,5 54,2 ±4,8* 3,4 ± 0,9* 14,3 ±2,8* 3,6 ± 0,9*

Сывороточный 1РКу, пкг/мл 15,3 ±3,6 158,0 ±22,0* 19,0 ± 1,2* 216,0 ±34,0* 7,0 ±1,5**

-р< 0,05 по сравнению с группой латентного течения ГИ; * -р < 0,05 по сравнению с группой лиц с рецидивирующим течением ГИ в стадию обострения

Таким образом, несмотря на то, что клинически течение герпетической инфекции у: обследованных лиц оценивалось как рецидивирующее однотипное, была выявлена дифференциация показателей, у 54% лиц цитокиновый профиль соответствовал ТЬ2-типу иммунного ответа.

При столь активном участии гуморального иммунного ответа на вирусный АГ у этих лиц сформирован риск развития аллергических и, возможно, аутоиммунных процессов. У пациентов с рецидивирующей ГИ в сочетании с аллергической сенсибилизацией (БА) пролифе-ративная активность Т-лимфоцитов была снижена в индуцированном тесте с ФГА и не изменялась в индуцированном тесте с АГ (табл. 4). В то же время уровень IFNy и продукция IL4 в тесте с АГ были достоверно выше, чем у лиц с латентным течением и с отсутствием аллергической сенсибилизации. При этом индуцированный АГ уровень IL4 определялся значениями десятикратно выше, чем прирост значений IFNy. Таким образом, при рецидивирующем течении ГИ в сочетании с БА в период обострения инфекции выявлено повышение значений ин-терферонопродукции в крови с дальнейшим резким их снижением в период относительной клинической ремиссии. Отмечено, что в период ремиссии в индуцированном ответе на вирусный АГ in vitro определялась низкая продукция IFNa на фоне высоких значений IFNy, но с кратным превышением значений IL4 по сравнению с таковыми значениями у лиц без аллергии и с латентным течением (табл. 4).

Спонтанная и индуцированная активность Т-лимфоцитов и продукция ^N0, №N7, НА при латентном и рецидивирующем течении

герпетической инфекции в период ремиссии (М ± т)

Показатель Латентное течение герпетической инфекции Рецидивирующее течение герпетической инфекции Рецидивирующее течение герпетической инфекции с БА

Группа 1 (46%) Группа 2 (54%)

Спонтанная активность СШ+-лимфоцитов, % 8,0 ± 2,0 9,5 ± 3,0 7,3 ±2,1 6,0 ±2,0

АГ-стимулированная активность СОЗ+-лимфоцитов, % 10,0 ± 1,0 23,5 ± 7,8* 8,9 ±2,6 16,0 ±7,4

Стимулированная ФГА активность СТО+-лимфоцитов, % 80,0 ±4,5 72,0 ±2,5 65,6 ±13,6 60,0 ± 8,5*

пг/мл Стимуляция ФГА 31,0± 11,3 86,3 ± 35,8* 88,6 ±35,4* 23,0 ± 9,3

Стимуляция специфическим АГ 81,5 ± 16,2 93,0 ±26,0 91,5 ±24,4 35,5 ±20,2*

пг/мл Стимуляция ФГА 60,0 ±5,8 79,0 ±21,0 65,9 ±21,1 54,6 ± 15,9

Стимуляция специфическим АГ 89,0 ± 4,2 86,5 ±21,0 39,0 ±23,3* 119,6 ±28,4*

1Ь4, пг/мл Стимуляция ФГА 9,8 ± 0,7 11,7 ±0,8 48,3 ± 14,7* 18,9 ±13,9*

Стимуляция специфическим АГ 12,2± 1,8 21,7 ±2,4* 52,0 ±4,8* 136,3 ±14,1*

* —р < 0,05 по сравнению с группой лиц с латентным течением ГИ

В целом, оценивая изучаемые показателей при рецидивирующей герпетической инфекции без аллергической сенсибилизации, у 54% пациентов была зафиксирована однотипность цитокиновых изменений в индуцированном ответе на вирусный антиген, соответствующая показателям, полученным у пациентов с БА, т.е. соответствующая сформированному ТЪ2-типу иммунного ответа.

Цитокиновый профиль при различных типах клинического течения герпетической инфекции

Проведено сравнительное исследование цитокинового профиля в индуцированных тестах с вирусным АГ и ФГА с учетом типа течения ГИ (латентное, эпизодическое, рецидивирующее). Пациенты были распределены в следующие группы:

- с эпизодическим течением ГИ с КАП-,

- с эпизодическим течением ГИ с КАП+,

- с рецидивирующим течением ГИ с КАП-,

- с рецидивирующим течением ГИ и с КАП+ (у пациентов с БА).

Группы для сравнения показателей представляли волонтеры с отрицательным анамнезом по проявлениям ГИ и положительными значениями титров к ВПГ, с отрицательной или положительной аллергической сенсибилизацией (табл. 5). В результате оценки динамики уровней 1Шу и И4 в клеточных супернатантах у лиц с латентным течением ГИ и положительной аллергической сенсибилизацией выявлено умеренное спонтанное повышение 1Шу, что, вероятно, связано с компенсаторным сдерживанием развития аллергических реакций. Индуцированный ответ на АГ характеризовался отсутствием динамики изменения №N7 и 1Ь4, а также статистическим значимым снижением значений Т№а. (табл. 5). У лиц с эпизодическим течением ГИ и отрицательным аллергическим фоном в индуцированном тесте с АГ отмечался выраженный (в 1,5 раза по сравнению с исходным) подъем концентрации 1Шу и Т№а. При этом наблюдалось незначительное нарастание продукции 1Ь4, что, вероятно, отражает умеренное напряжение гуморального ответа, связанное с продукцией специфических АТ (\gCj2, 1ё04, 1ф) к ВПГ1 (табл. 5). Таким образом, ответ на вирусный АГ у лиц с эпизодическими проявлениями ГИ при отсутствии аллергической сенсибилизации сопровождается цитокиновой продукцией, соответствующей ТЫ-типу клеточного ответа.

У пациентов с эпизодическим течением ГИ с положительной аллергической сенсибилизацией обнаружены значительные изменения показателей. Установлены низкие уровни спонтанной продукции лимфоцитами 1ЕИу и ТКТа (табл. 5). В индуцированных тестах с АГ отмечены тенденция к незначительному подъему уровней №N7, умеренная позитивная динамика Т№а на фоне резкого увеличения уровней ИА Вероятно, на фоне эпизодического течения ГИ с

Оценка цитокинового профиля у волонтеров с разными вариантами течения герпетической инфекции (М± т)

Латентное течение ГИ Эпизодическое течение ГИ Рецидивирующее течение ГИ

Показатель Отрицательные Положительные Отрицательные Положительные Отрицательные Положительные

КАП КАП КАП КАП КАП КАП

ГРЫу, пг/мл СП 39,50 ± 8,50 52,60 ±7,71* 37,80 ± 5,09 25,33 ± 3,25* 37,10 ±9,32 21,36 ±8,19*

ФГА 34,50 ± 4,35 25,00 ±4,91* 50,25 ± 3,79* 279,25 ± 80,63* 121,63 ±35,55* 546,0 ± 152,90*

ст 89,00 ±4,16 63,50 ± 1,32 406,50 ±51,97* 106,50 ± 25,31* 334,25 ±117,85* 119,57 ±28,40*

1Ь-4, пг/мл СП 7,65 ± 0,25 9,60 ±0,87 8,53 ± 0,38 20,64 ± 3,04* 28,43 ± 8,55* 18,49 ±2,39*

ФГА 8,10 ±0,30 8,60 ±0,72 9,78 ± 0,39 23,25 ± 4,49е 33,33 ± 10,91* 20,24 ± 2,39й

ст 12,20 ±0,79 10,40 ±0,23 105,50 ±11,И 149,76 ± 12,40# 121,75 ±24,20* 136,63 ±74,10*

ЮТа, пг/мл СП 629,00 ± 33,64 125,50 ± 42,90* 397,00 ±164,25* 356,67 ±100,59* 97,33 ±31,76* 55,00 ± 15,03*

ФГА 383,00 ±67,66 114,00 ±34,39* 297,38 ± 65,88 203,75 ± 66,71* 350,67 ± 142,79 81,75 ±22,75

ст 236,50 ± 6,99 127,50 ±48,19* 588,75 ± 84,25** 502,50 ±108,77* 565,33 ± 192,75* 256,7 ±45,59*

Коэффициент

баланса 7,29 6,10 3,85 0,71 2,74 0,87

1ГЫуЛЬ4

* - р < 0,05 по сравнению с группой латентного течения ГИ с КАП--р < 0,05 по сравнению с группой латентного течения ЛИ с КАП+

положительной аллергической сенсибилизации имеется иной, отличный от Thl-типа, ответ на вирусный АГ: наибольший прирост продукции IL4 на фоне сниженных показателей TNFa и IFNy. Как известно, за счет снижения продукции IFNy нарушается контроль за репликацией вирусов, активацией цитокинов ТЬ2-типа. Таким образом, высокие показатели IL4 в индуцированных тестах с АГ и ФГА свидетельствуют об активации гуморального звена и синтеза антител -«свидетелей» ГИ IgG и IgE [Кривицкая В.З. и др., 2004; Львова И.И., Дерюшева A.B., 2005].

У этих лиц соотношение коэффициента баланса lFNy/lL4 было статистически значимо снижено по сравнению с таковым при латентном течении ГИ (табл. 5). В нагрузочных тестах с АГ зарегистрировано достоверное увеличение уровня TNFa по сравнению с таковым при латентном течении ГИ. Это может свидетельствовать о том, что у лиц с эпизодическим течением ГИ формируются процессы усиленного несекреторного контроля за клетками, поврежденными вирусом [Babu R. et al., 2006; Симбирцев A.C., 2007].

Таким образом, полученные различные алгоритмы цитокинового профиля у пациентов с эпизодическим течением ГИ как с КАП+, так и с КАП- позволяют прогнозировать особенности развития как аллергического, так и инфекционного процесса, а также, очевидно, и особенности ответа на стандартную противовирусную терапию.

В группе лиц с рецидивирующим течением ГИ и отрицательной аллергической сенсибилизацией (КАП-) наблюдается снижение спонтанных значений TNFa и повышение IL4 по сравнению с таковыми при латентном течении ГИ. Индуцированный тест с АГ сопровождался повышением IFNy, TNFa, но в большей степени повышением продукции 1L4 относительно аналогичных показателей в группах сравнения. Коэффициент баланса IFNy/IL4 у пациентов с рецидивирующим течением ГИ без аллергического фона составил 2,74 ед., который соответствовал значениям высвобождения цитокинов клеточного Thl-типа (табл. 5). У пациентов с рецидивирующим течением ГИ и БА были получены самые низкие индуцированные показатели, включая уровень TNFa и соотношение баланса IFNy/IL4, которое снижалось до 0,87 ед. Вероятно, это свидетельствует о пороговом интерфероновом дефиците и постоянном риске развития клинических проявлений ГИ у пациентов с реализованной аллергической сенсибилизацией. Необходимо напомнить, что количество клинически манифестированных форм герпетической инфекции (до 71%) было зарегистрировано у лиц этой группы (см. табл. 2). Таким образом, выявленные особенности продукции IL4 и IFNy связаны с частотой клинических реактиваций герпетической инфекции, а особенности индуцированной продукции IFNy и TNFa - с тяжестью клинических проявлений.

Сходные результаты в группах с эпизодическим и рецидивирующим течением ГИ на фоне положительной сенсибилизации к неинфекционным аллергенам объясняют риски клинических рецидивов инфекции на фоне ТЬ2-типа иммунного ответа, который сочетается с на-

рушением продукции интерферонов. Хроническое рецидивирующее и эпизодическое течение ГИ сопровождается статистически значимым повышением уровня 1Ь4 даже в условиях отрицательных КАП, что определяет фактор риска по развитию аллергической сенсибилизации.

Как следует из полученных данных, уровень 1Ь4 положительно коррелирует с частотой манифестации герпетической инфекции. 1Шу и ЮТа принадлежит «критическая» роль контроля за иммунологическими противовирусными механизмами репликации вируса, включая процессы апоптоза инфицированных вирусом клеток. Клиническая реактивация герпетической инфекции связана с развитием алгоритма иммунного ответа ТЬ2-типа, который формирует в популяционном иммунитете повышение чувствительности к неинфекционным ксенобиотикам (аллергенам), провоцируя на первых этапах развитие клинически скрытой сенсибилизации, а в последующем - формирование аллергических заболеваний.

Особенности противовирусного иммунитета при герпетической инфекции, сочетапной с аллергическим ринитом и бронхиальной астмой

Для изучения особенностей клинического течения ГИ, отягощенной аллергическими заболеваниями, были обследованы пациенты с АЗ: круглогодичным аллергическим ринитом (КАР) (п = 40), сезонным аллергическим ринитом (САР) (п = 42) и сочетанной аллергической бронхиальной астмой (БА и КАР, п = 38). У всех пациентов была выявлена поливалентная сенсибилизация к нескольким аллергенам из разных групп. Ведущей явилась бытовая (55%) и пыльцевая (45%) сенсибилизация. У обследованных лиц титры ^О к ВПГ1 колебались в диапазоне от 1: 800 до 1 :12800. Во всех трех группах пациентов с АЗ были получены достоверно высокие значения 11А в плазме крови и назальном секрете (табл. 6).

У пациентов с эпизодическим и рецидивирующим течением ГИ были выявлены высокие значения \Ы в назальном секрете по сравнению таковыми у лиц с латентным течением ГИ. У обследованных лиц с эпизодическим течением ГИ также установлены высокие уровни в плазме крови и назальном секрете, по сравнению с таковыми значениями у пациентов с рецидивирующим течением ГИ. У лиц с рецидивирующим течением ГИ наблюдалось снижение соотношения 1Шу/1Г4, уровня 1Ша в плазме крови и назальном секрете, увеличение П\Та.(табл. 6). Полученные изменения уровней цитокинов в назальном секрете и плазме крови в зависимости от типа течения ГИ отражают активность гуморального иммунного ответа по ТЬ2-типу. Снижение продукции ЮЧу и 1Ша связано с типом течения ГИ. При этом в назальном секрете у лиц с рецидивирующим течением ГИ был выявлен самый высокий уровень Т№а, который рассматривался нами как фактор, обусловленный тяжестью клинических проявлений ГИ и аллергического воспаления с участием эозинофилов и тучных клеток. Таким образом, различные клинические проявления герпетической инфекции связаны с особенностями цитокиновой продукции.

Клиническое рецидивирование различных форм ГИ - серьезная проблема, требующая длительных курсов противовирусной терапии и иммунореабилитации. Носительство герпетических вирусов не учитывается при подборе как базисной, так и этиопатогенетической терапии у пациентов с БА. Основываясь на классических представлениях формирования иммунного ответа, между аллергией и ГИ должна существовать связь по типу единства противоположностей. В патогенезе аллергического воспаления ТЬ2-путь иммунного ответа посредством 1Ь4 контролирует пролиферативную активность клеток и переключение синтеза антител с на ^Е, подавляет продукцию ГНТЧу. Поэтому длительное течение АЗ с активацией ТЬ2 необратимо сопровождается формированием функционального дефицита ТЫ-пути иммунного ответа с последующим ослаблением противовирусной активности, в том числе за счет снижения ЮТа в плазме крови и нарастания в назальном секрете (табл. 6),

Таблица б

Показатели уровней цитокинов 1Ь4, №N7, ТОТа, №N<1 в плазме крови и назальном секрете у лиц с аллергической патологией в зависимости от клинического течения герпетической инфекции (М± т)

Характер клинического течения ГИ Исследуемый объект 1¥Ну №N0 1Ь4 Т№<х 1ПЧу/ 11А

Латентное течение Плазма 39,5 ± 18,5 81,0+11,3 241,3 ± 33,0 129,0 ±33,6 0,16

Назальный секрет 89,1 ± 14,2 191,5 + 16,2 208,4 ± 25,6 236,5 ± 67,0 0,42

Эпизодическое течение Плазма 154,5 ±22,0' 86,3 + 35,8 221,4 ±26,3 156,7 ±100,6 0,69

Назальный секрет 159,3 ±33,1" 193,5 + 56,0 497,6 ±124* 302,5 ±58,8' 0,32

Рецидивирующее течение Плазма 32,4 ± 18,2 46,6 + 25,4* 184,9 ±23,9 255,0 ±45,0* 0,17

Назальный секрет 69,0 + 39,4* 91,5 + 24,4' 566,3 ± 174* 356,7 ±67,6* 0,12

* - р < 0,05 между группами

В связи с этим требуется пересмотр базисной терапии аллергических заболеваний (ринита и бронхиальной астмы) у пациентов с сопутствующим эпизодическим и рецидивирующим течением герпетической инфекции. Таким образом, одни и те же сигнальные молекулы вовлечены в патогенез хронических ГИ и аллергических болезней, поэтому в различной степени способны определять особенности клинического течения инфекционных и (или) аллергических состояний.

Типы иммунного ответа у пациентов с рецидивирующим течением герпетической инфекции

У пациентов с упорно-рецидивирующим течением ГИ оценивалась цитокинпродуци-рующая способность лимфоцитов периферической крови в индуцированных тестах с вирусным AT in vitro. Сравнение проводилось с аналогичными показателями у лиц с латентным течением инфекции и положительными титрами специфических IgG к ВПГ1. При этом выполнялись следующие условия:

1) все пациенты имели упорно-рецидивирующее течение герпетической инфекции и получали лечение (ацикловир, индукторы интерферона, рекомбинантные интерфероны) только по данному поводу в изучаемый период;

2) повторы клинических рецидивов свидетельствовали о невысоком клиническом эффекте проводимой традиционной терапии;

3) лимфоциты периферической крови у обследованных лиц были взяты в период относительной клинической ремиссии.

Активность клеточного иммунитета является ведущей в ответе на вирусные и внутриклеточные АГ (грибковые, опухолевые). Так, по мнению ряда авторов, IFNy, как основной цитокин Thl-клеток, играет важнейшую роль в противогерпетическом ответе. Частые рецидивы ГИ наблюдаются на фоне сниженной способности периферических мононуклеаров к выработке IFNy [McKenna D.B. et al., 2001]. В результате анализа полученных данных было выделено 4 типа изменения функциональной активности лимфоцитов в индуцированном ответе с вирусным АГ (см. рис. 1).

У 46% участников исследования в супернатантах АГ-индуцированных лимфоцитов отмечено повышение уровня IL4 на фоне низких значений IFNy. По нашим представлениям, преобладание ТК2-типа иммунного ответа ассоциировано с неблагоприятным прогнозом течения вирусных инфекций, формированием аллергической сенсибилизации, проблемами низкой эффективности этиотропной противовирусной терапии.

В 19% случаев имело место повышение продукции IFNy на фоне низких значений 1L4. Адекватный иммунный ответ, спровоцированный антигенами вирусов, формировался за счет Thl-лимфоцитов, как известно, регулирующих активность NK-клеток, и CD8+ Т-клеток (ЦТЛ). Вероятно, выделенный тип ответа свидетельствует о благоприятном прогнозе течения ГИ и эффективности моноэтиотропной противовирусной терапии для пациентов с выявленным ответом.

У 11,5% обследованных отсутствовали изменения уровней IFNy и 1L4 в супернатантах активных лимфоцитов в ответ яа стимуляцию АГ, что, по нашему мнению, отражало наличие комбинированного иммунодефицита, возможно, за счет высвобождения неких супрессорных факторов в ответ на АГ. Такой алгоритм ответа соответствовал неблагоприятному прогнозу

течения ГИ и объяснял отсутствие клинического эффекта от противовирусной терапии без дополнительной иммуномодуляции.

В 23,5% случаев наблюдалось однонаправленное повышение продукции IL4 и IFNy в тестах. Вероятно, эта комбинация цитокинов отражала поляризацию иммунного ответа с активацией провоспалительного направления, определяемого IFNy, TNFa (возможно, активация по ТЫ7-пути), и требовала дальнейшего анамнестического анализа обследованных, в частности, по наследованию или клиническим признакам реализации аутоиммунных заболеваний. Данный алгоритм ответа на вирусный АГ является неблагоприятным прогнозом для клинического течения процесса и требует подбора комбинированной противовирусной и иммунотропной терапии. Наши данные согласовываются с результатами исследований М.В. Мезенцевой и соавт., которые наблюдали активацию Т-клеточного и гуморального иммунитета у больных тяжелыми формами генитального герпеса до лечения ацикловиром. Выявленные типы алгоритмов индуцированных ответов на АГ, вероятно, обусловлены недостаточностью или активацией одной из иммунорегуляторных субпопуляций Т-хелперов (Thl, Th2, Thl7, Treg), обеспечивающих неодинаковый баланс Т-клеточного и гуморального механизмов иммунного ответа.

Продукция IFN у Продукция IL-4

Рис. 2. Продукция IFNy и IL4 лимфоцитами, стимулированными причинным антигеном, у обследованных волонтеров с рецидивирующим течением герпеса

Баланс между Thl- и ТЬ2-клетками чрезвычайно важен в обеспечении цитотоксиче-ского и АТ-ответа при вирусной инфекции. В результате совокупного анализа продукции исследуемых цитокинов нами было выделено 4 основных алгоритма продукции цитокинов в индуцированном тесте с АГ in vitro:

1) комбинированный иммунодефицит;

2) поляризация ТЬ2-пути иммунного ответа;

3) поляризация Thl-пути иммунного ответа;

4) неопределенная поляризация пути иммунного ответа.

Таким образом, у пациентов с рецидивирующим течением ГИ определяются различные типы индуцированной цитокиновой продукции, что позволяет выделить особенности патогенеза инфекции и обосновывать индивидуальный адресный подход к комбинированной терапии инфекции.

Особенности полиморфизма генов цитокиное, рецепторов IL4RA и TLR9, транскрипционного фактора Tbet при различных типах герпетической инфекции

С помощью рестрикционного анализа продуктов ПЦР-амплификации специфических участков генома исследованы полиморфные участки генов IFNG (rs 2069705), lL4Ra (rs 1805010), IL4(rs2070874), IL12RB1 (rs 11575934), IL12B (rs 3212227), TBX21 (rs 11652969), TLR9 -1237T/C (rs5743836). Нами проведена оценка особенностей полиморфизма генов регуляторных цитки-нов, опредляющих как направление иммунного ответа, так и выраженность воспалительных реакций у лиц с разными типами течения ГИ. В ходе исследования установлено, что частота генотипов по исследованным полиморфным локусам соответствовала ожидаемой при равновесии Харди-Вайнберга. Первая группа («инфекционная» модель) состояла из лиц с основными критериями: положительные титры антител к ВПГ1, -2, в анамнезе наличие герпетической инфекции с разными типами течения и отсутствие фоновых заболеваний (иные инфекции, аллергии, аутоиммунные процессы и паразитозы). Вторую группу («аллергическая» модель) сформировали пациенты с установленным диагнозом «атоническая БА» согласно критериям GINA (Global Initiative for Asthma, 2005). Установлено, что полиморфизм генов цитокинов и их рецепторов (1L4, IL12B, IFNG, IL4RA), а также То11-подобного рецептора 9 (TLR9) и транскрипционного фактора T-bet (ТВХ21) ассоциированы с вариациями клинического течения ГИ.

Проведено исследование полиморфизма продукта гена ТВХ21, являющегося кофактором клеточного направления противовирусного иммунного ответа. Продукт гена ТВХ21 выступает решающим транскрипционным фактором (T-bet), который регулирует баланс Th-l/Th-2 пути и продукцию IFNy. При вирусной инфекции ген ТВХ21 стимулирует дифференцировку ThO в Thl и индуцирует продукцию lFNy. Одновременно ген ТВХ21 подавляет продукцию IL4, угнетая ТЬ2-путь, что клинически не приводит к рецидивирующему течению ГИ. Латенция вирусоносительства у пациентов без аллергической сенсибилизации определялась увеличением частоты встречаемости гомозиготного генотипа А/А гена ТВХ21. Рецидивирующее течение ГИ было связано с генотипом A/G и аллелем G гена ТВХ21 (табл. 7). Таким образом, данный гетерозиготный генотип гена ТВХ21 можно считать моделью риска развития рецидивирующих тяжелых форм ГИ.

То11-подобные рецепторы (TLR) являются центральным элементом многоуровневой системы распознавания патоген-ассоциированных молекулярных структур. При оценке полиморфизма -1237Т/С (rs5743836) гена TLR9 установлено, что рецидивирующее течение ГИ совпадает с увеличением частоты встречаемости генотипов Т/Т гена TLR9, продукт которого должен распознавать GpG мотив ВПГ1 АПК.

Распределение частот генотипов генов ТВХ21 и ПК9 у лиц с латентным, эпизодическим и рецидивирующим течением герпетической инфекции

Ген Генотип Латентное течение ГИ, % Эпизодическое течение ГИ, % Рецидивирующее течение ГИ, %

ТВХ21 а/о 41,2 53,8 38,5

в/А 38,2 38,5 61,5*

А/А 20,6 7,7 0,0*

TLR9 Т/Т 60,5 70,6 88,0*

С/Т 39,5 28,2 10,0*

С/С 0 1,2 2,0

* ~р < 0,05 между группами

Таблица 8

Распределение частот генотипов при латентном, эпизодическом и рецидивирующем типе течения герпес-инфекции

Ген Генотип Латентное течение ГИ, % Эпизодическое течение ГИ, % Рецидивирующее течение ГИ, %

Инфекционная модель Аллергическая модель Инфекционная модель Аллергическая модель Инфекционная модель Аллерги-. ческая модель

IL12B AJA 76,7 58,3* 72,7 64,9 80,0 61,5

А/С 10,0 41,7* 15,2 27,0* 13,3 26,9"

С/С 13,3 0* 12,1 8,1* 6,7 11,5*

IL4RA (150V) V/V 14,8 29,2* 15,2 18,9 20,0 18,5

1/V 59,3 50,0 48,5 45,9 53,3 44,4

1/1 25,9 20,8 36,4 35,1 26,7 37,0*

IL4 с/с 61,3 60,0 56,7 67,6 40,0 60,0

т/с 20,0 35,0 30,3 26,5 50,0й 18,0

т/т 19,7 5,0* 13,0 5,9 10,0" 22,0*te

IFNG с/с 31,0 12,5* 27,3 24,3& 0,0м- 25,9*

т/с 21,4 66,8* 36,4 56,8* 66,7" 51,9

т/т 47,6 20,8* 36,4 18,9* 33,3 22,2

* -р < 0,05 между показателями у представителей инфекционной и аллергической моделей; 4 -р < 0,05 между показателями у пациентов с латентным и эпизодическим течением герпетической инфекции; * -р < 0,05 между показателями у лип с латентным и рецидивирующим течением герептической инфекции; 1-р< 0,05 между показателями у лиц с эпизодическим и рецидивирующим течением герпетической инфекции.

Рецидивирующее течение ГИ у лиц в отсутствие аллергической сенсибилизации, также как и повышенные значения у лиц обоего пола было ассоциировано с частотой носи-тельства генотипа Т/С (66,7%, р < 0,05) гена /Л\'(7. Для латентного течения ГИ у лиц в отсутствие аллергической сенсибилизации выявлена частота носительства генотипа Т/Т 47,6% гена //•Ж?. Таким образом, адекватный клеточный иммунный ответ или период динамического равновесия между вирусом и иммунной системой хозяина (латентное течение) связан с частотой носительства генотипа Т/Т гена /МСл

Таблица 9

Уровень 1%Е у пациентов с разными генотипами полиморфных вариантов генов

Ген Генотип Уровень IgE, Ме (Q1-Q3)

Инфекционная модель Аллергическая модель

? S ? 3

1L12B А/А 26,20* (5,00-113,40) 52,45 (22,30-72,40) 122,00* (106,50-130,00) 177,95 (66,80-392,50)

А/С 70,70 (19,00-177,50) 64,10 (53,30-68,70) 92,40 (32,60-274,80) 313,25 (252,50-432,40)

С/С 11,00 (5,10-30,40) 0 126,85* (20,40-316,70) 147,85 (120,90-263,00)

IL4RA V/V 29,50* (2,60-112,20) 192,90* (40,60-421,90) 110,40* (32,60-214,80) 219,50* (137,90-345,75)

I/V 31,80* (7,00-173,10) 42,40 (32,00-63,55) 186,50* (47,20-311,00) 124,40* (5,50-297,10)

1/1 7,20 (4,50-61,55) 41,15 (22,30-60,00) 98,75* (20,90-176,60) 323,60* (236,90-650,00)

IL4 т/т 78,40* (64,30-129,20) 90,80* (50,40-145,20) 160,00* (130,00-501,00) 190,00* (155,40-610,00)

Т/С 12,40 (5,20-35,65) 22,80 (15,00-55,50) 243,10* (130,40-567,10) 280,70* (124,50-450,10)

С/С 30,88 (10,40-63,50) 40,44 (8,00-88,20) 94,80* (27,50-307,00) 160,30* (120,40-280,20)

IFNG Т/Т 31,30 (6,10-86,20) 50,20 (19,65-62,10) 75,85 (16,50-194,40) 297,10* (145,50-324,70)

ж 62,05* (6,20-245,30) 40,00* (16,60-129,90) 129,70* (33,20-307,00) 202,40* (119,4-345,80)

С/С 12,40* (3,70-37,20) 72,80 (72,40-73,20) 168,90* (106,50-243,20) 229,30* (102,90-366,00)

*—р < 0,05 между группами

Рецидивирующее течение ГИ у больных БА было ассоциировано с достоверно увеличенной частотой генотипа С/С гена 1FNG. С аллелем С связана, вероятно, низкая продукция IFNy у представителей обеих моделей, являющаяся причиной клинического рецидивирования вирусной инфекции. Можно предположить, что у пациентов с БА имеется генетически детерминированный нарушенный контроль за продукцией белка IFNy, ассоциированный с но-сительством генотипа С/С гена IFNG. Таким образом, у больных БА, ассоциированных с но-сительством полиморфизма С/С и Т/С гена 1FNG, имеет место более тяжелый прогноз течения аллергического заболевания (БА) за счет активной продукции IgE и риска манифестации рецидивирующего течения ГИ.

IgE принадлежит ведущая роль в формировании и прогрессировании аллергических реакций. Контроль активности гуморального иммунитета и, в частности, уровня IgE осуществляется регуляторным цитокином ТЬ2-пути - IL4. У пациентов в инфекционной модели самый высокий уровень IgE был ассоциирован с носительством генотипа Т/Т и аллелем Т гена IL4 (средний 78,4 КЕ/л, максимальный - 145,2 КЕ/л) (р = 0,036) и с частотой иосительства генотипа V/V гена 1L4RA (с 112,2 до 421,9 КЕ/л). Пациенты инфекционной модели с носительством генотипов Т/Т гена JL4 и V/V гена 1L4RA уже при латентном и эпизодическом течении ГИ, по нашему мнению, имели риск присоединения аллергических реакций, связанных с повышенной продукцией IgE при обострении вирусной инфекции.

В аллергической модели у пациентов с БА установлено статистически значимое повышение частоты иосительства генотипа Т/Т гена IL4 между латентным и рецидивирующем течением ГИ, при этом высокий уровень IgE был ассоциирован с частотой встречаемости генотипов Т/Т и Т/С гена 114 не зависимо от пола пациентов. Ранее нами было показано, что у 71% пациентов, страдающих, БА развивается сопутствующая эпизодическая и рецидивирующая герпетическая инфекция.

Совместное влияние у выделенных лиц с носительством генотипов G/A гена ТВХ21, Т/Т TLR9, Т/С и С/С 1FNG, Т/С 1L4, У/У IL4RA приводит к нарушению контроля клеточного иммунного ответа по Thl-типу и адекватного синтеза IgE. В условиях массовой инфицированное™ населения герпесвирусами (ГВ) такие пациенты являются группой риска развития сенсибилизации слизистых и кожи к неинфекционным антигенам, развития аллергических заболеваний в отсутствие отягощенного аллергического наследственного анамнеза. При рецидивирующем течении герпетическая инфекция, на наш взгляд, приводит к формированию аллергического характера воспаления и реализации аллергической патологии в динамике развития рецидивов инфекционного процесса. Одной из причин неэффективности стандартной противоаллергической терапии аллергических заболеваний является недооценка в патогенезе вклада инфекционного фактора.

ИММУНОТЕРАПИЯ ПРИ ГЕРЕПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ И АЛЛЕРГОПАТОЛОГИИ

Влияние курса комбинированной противовирусной и иммуномодулирующей терапии на иммунный ответу пациентов с рецидивирующим герпесом Проблема поиска новых подходов для эффективного лечения рецидивирующих форм ГИ является актуальной. Так как полноценная элиминация герпетических вирусов в принципе невозможна, то выздоровление в привычном понимании этого слова также теряет смысл. Для пациентов с рецидивирующей ГИ цель терапии состоит в переводе клинических рецидивов в латентную форму взаимодействия вируса и иммунной системы хозяина. Иммунная система должна вернуться к контролю над пролиферацией вируса. В этом процессе основная задача состоит в реабилитации врожденного иммунитета с адекватной реакции адаптивного иммунитета на хронически присутствующий антиген. Проведен курс комбинированной терапии у пациентов с рецидивирующей ГИ без аллергической сенсибилизации (40 человек) и с фоном аллергического заболевания - БА (42 человека). Пациенты с БА получали утвержденную базисную терапию основного заболевания весь период наблюдения. С первого дня очередного обострения герпетической инфекции назначались: ацикловир (1,6 г/сут, таблетки, 10 дней ежедневно) и имунофан (инъекции в/м 1,0 мл ежедневно №5> затем через день №5). Имунофан относится к группе лекарственных средств с основным влиянием на клеточный иммунитет и продукцию 1Шу. Группу сравнения составили лица с латентным течением ГИ.

Контрольные измерения клеточных показателей и уровня интерферонов проводили на 1-2-й день клинических проявлений, повторно через 15 дней после начала лечения (клиническая ремиссия инфекционного процесса), затем через 30 дней от начала обострения. На 15-й день сразу после курса комбинированной терапии у лиц с рецидивирующим течением ГИ не зависимо от наличия аллергической сенсибилизации отмечалось достоверное (р < 0,05) возрастание абсолютного количества лейкоцитов, лимфоцитов, Ж-клеток, цитотоксической активности ЫК-лимфоцитов по сравнению с показателями в стадии обострения в каждой группе. Однако эффект повышения цитотоксической активности и уровня №N7 нивелировался у лиц с БА уже к 30 дню после проведенной терапии, характеризуясь снижением активности МК-лимфоцитов и концентрации ПтКу в достоверно большей степени, чем у пациентов с ГИ в инфекционной модели. Как известно, система естественной цитотоксичности, включающая популяцию КК-лимфоцитов, обеспечивает лизис клеток-мишеней, инфицированных ВПГ и ограничивает тем самым распространение ГИ. Состояние системы естественной цитотоксичности в значительной степени определяет частоту манифестации ГИ. Клиническая распространенность и длительность клинических проявлений зависит от адаптивного иммунитета (С08+, 1Шу). Таким образом, представленные результаты показали, что у больных, имеющих

рецидивирующее течение ГИ без аллергической сенсибилизации, манифестированный дефект в системе естественной цитотоксичности выражался в снижении количества и активности NK-клеток как в стадию обострения, так и стадию ремиссии ГИ. Реабилитация показателей интерферонов до значений группы сравнения (при латентном течении ГИ) после курса комбинированной терапии ацикловиром и имунофаном сохранялась до 30 дней, за исключением индекса цитотоксичности NK-лимфоцнтов.

Принимая во внимание, что персистепция герпетического воспаления приводит к постоянному поражению эпителия слизистых, неизбежным является формирование гиперреактивности, которая способствует утяжелению аллергических проявлений. Для пациентов, страдающих БА, становится актуальным периодическое проведение контроля показателей интерферонов и активности NK-лимфоцитов, специфической диагностики ВПГ1, -2. Пациентам с БА и сопутствующей рецидивирующей ГИ требуются длительные комбинированные схемы противовирусной и иммунотропной терапии.

Влияние курса иммунотерапии трансфер-фактором на иммунный ответ у пациентов с

рецидивирующим герпесом

У пациентов с рецидивирующим течением ГИ для оценки особенностей противовирусного иммунного ответа в условиях in vitro и обоснования применения индивидуальной иммунотропной терапии была использована модель РБТЛ, стимулированных вирусным АГ (вакцинальный штамм ВПГ1,-2) в сравнении показателей РБТЛ с ФГА. В выбранной группе волонтеров (62 пациента в возрасте от 18 до 50 лет) в стадию клинической ремиссии оценивали пролиферативную активность Т-лимфоцитов, а также способность клеток в ответ на разные стимулы секретировать и высвобождать IFNa и IFNy. Трансфер-фактор («For life research», США) - известный фактор, регулирующий экспрессию HLA 1 и HLA 2 антиген презентирующих дендритных клеток, стимулятор активности клеток с цитотоксическим потенциалом (CD8+, CD16+) и индуктор интерферонов. Рекомендован для лечения пациентов с герпетическими инфекциями. Все участники исследования получали трансфер-фактор в суточной дозе курсом 14 дней в период клинической ремиссии ГИ. Контроль показателей после курса терапии проводили на 15-16-й день. Группу сравнения для оценки изучаемых показателей составили пациенты с латентным течением ГИ. Анализ показателей проведен ретроспективно после назначенного курса терапии. По результатам показателей РБТЛ со специфическим АГ все волонтеры были дополнительно дифференцированы на 2 группы: с положительным ответом и отсутствием ответа лимфоцитов на индукцию АГ. Пациенты, распределенные в 1-ю группу (22 человека), в индуцированном тесте с вирусным АГ имели высокие показатели пролиферации по сравнению с представителями группы сравнения до терапии (36,00 ± 2,78)%). После курса

терапии трансфер-фактором индуцированная вирусным АГ концентрация №N0 увеличилась с (58,74 ± 5,20) пг/мл до (110,00 ± 2,62) пг/мл (р < 0,05), продукция 1Шу - с (22,36 ±4,01) пг/мл (р < 0,05) до (57,14 ± 8,03) пг/мл, также возросла продукция индуцированного №N7 в тесте с ФГА. Таким образом, пациенты в результате полученного курса терапии увеличили свои резервные возможности инерферонопродукции в ответ на вирусный антиген и ФГА.

У пациентов 2-й группы (40 человек), не показавших прироста пролиферации лимфоцитов в тесте со специфическим АГ до терапии, по сравнению с группой сравнения ((11,33 ± 2,44) против (10,00 ± 1,00)%), имели место иные итоговые показатели. После курса терапии трансфер-фактором у 25 человек был отмечен прирост пролиферативной активности Т-лимфоцитов в тесте со специфическим АГ ((18,33 ± 6,89)%). Мы расценили данный факт как позитивный, обусловленный нормализацией экспрессии специфического ТСН в ответ на АГ, и связывали с этим прирост продукции 1КЫу. Продукция НТЧу увеличилась, хотя и менее значительно, по сравнению с таковой у представителей 1-й группы: в тестах с ФГА с (26,33 ±21,78) до (63,33 ± 6,44) пг/мл, индуцированная АГ - от 0 до (19,00 ± 9,33) пг/мл, (р < 0,05).

Проведенные исследования показали, что трансфер-фактор, модулятор экспрессии рецепторов Т-лимфоцитов и индуктор продукции интерферонов, оказывают положительный эффект у пациентов, который выражается в нормализации показателей интереферонового статуса и функциональной активности иммунокомпетентных клеток. Необходимо разрабатывать адресные схемы терапии трансфер-фактором и применять их под контролем состояния эндогенной системы интерферонов и функциональной активности Т-лимфоцитов. Для этого можно использовать модель РБТЛ со специфическим антигеном т х'йго. Полученные разноплановые изменения в интерфероновом статусе зависят от состояния иммунной системы пациентов до начала лечения, способности специфического ТСЯ лимфоцитов распознавать вирусный АГ и отвечать на него.

Таким образом, предприняты попытки лабораторно доказать, что у пациентов с рецидивирующим течением ГИ нарушена экспрессия специфических ТСИ на Т-лимфоцитах на вирусный АГ. Это позволяет объяснить слабую эффективность традиционных курсов этио-тропной (ацикловир) терапии, после отмены которой рецидивы возобновляются. Прием ацик-ловира не может исправить данную ситуацию в пользу реабилитации иммунного ответа. Более того, возможно, что многочисленные АТ к ВПГ экранируют специфические рецепторы и нарушают ответ на специфический АГ.

Выраженный дисбаланс состояния Т-клеточного, гуморального иммунитета и системы интерферонов в период ремиссии ГИ, усиливающийся при рецидиве инфекции, подтверждает обоснованность и целесообразность использования в комплексной терапии ГИ, наряду с ба-

зисной терапией противовирусными препаратами, лекарственных средств, обладающих адресной иммуномодулирующей активностью для каждого пациента.

Аллергенспецифическая иммунотерапия у больных с аллергической патологией, отягощенной герпетической инфекцией

Единственным этиопатогенетическим методом лечения аллергических заболеваний признана аллергенспецифическая иммунотерапия (АСИТ, категория доказательства lb) [Гущин И.С. 2002; Bousquet et al., 2002; Johansson, 2004; Alvarez-Cuesta et al., 2006 Горячки-на Л.А. и др., 2009;]. В настоящее время одним из ведущих механизмов АСИТ считается переключение иммунного ответа с проаллергенного Th2 наТЫ, изменение баланса IFNy, TGFß, после чего должно следовать снижение высвобождения 1L4, активация экспрессии IL4RA, изменение функциональной активности CD22+, CD23+Т-лимфоцитов и, как следствие,-нормализация синтеза реагиновых антител (IgE) [Хаитов P.M. и др., 2000]. Клиническое обострение ГИ у пациентов с A3 на любом этапе АСИТ должно нарушать механизмы формирующейся толерантности. В течение 4 лет под нашим наблюдением находились пациенты с круглогодичным аллергическим ринитом (КАР) (40 человек), сезонным аллергическим ринитом (САР) (42 человека), бронхиальной астмой и КАР (38 человек). Пациенты получали АСИТ бытовым (пыльцевым) аллергеном ускоренным методом, суммарная доза курса составила 10 тыс. PNU согласно методике подкожного введения причинно-значимого аллергена (ПЗА) [Гущин И.С., 1998; Горячкина Л.А. и др., 2009]. Оценку клинической эффективности АСИТ (отлично, хорошо, удовлетворительно, неудовлетворительно) проводили по следующим критериям:

1) уменьшение выраженности симптомов заболевания до полного их исчезновения и установления ремиссии по балльной шкале: 0 баллов - отсутствие признака в период воздействия ПЗА, 1 балл - редкое или минимальное проявление признака в присутствии ПЗА, 2 балла - ежедневное умеренное проявление признака в присутствии ПЗА, 3 балла - максимально выраженный признак при минимальном ежедневном воздействии ПЗА;

2) уменьшение объема фармакотерапии вплоть до отмены препаратов или применения прежних доз;

3) нормализация качества жизни пациента;

4) решение проблемы социальной адаптации.

Для оценки критерия иммунологической эффективности АСИТ введено соотношение регуляторных цитокинов, отражающих участие Thl/Th2 лимфоцитов - !FNy/lL4, и активность хемотаксиса эозинофилов в слизистую носа (показатель клеточного аллергического воспаления). После проведенной терапии по клиническим критериям эффективности курса АСИТ в группе с латентным течением ГИ отличных результатов зарегистрировано 66,6% (24

человека), хороших - 22,2% (8 человек), удовлетворительных - 11,2% (4 человека) (рис. 3). Отличные и хорошие клинические результаты сочетались с повышением значений IFNy, снижением IL4 и TNFa как в плазме, так и назальном секрете. Коэффициент IFNy/IL4 в этой группе после лечения был зафиксирован выше I. В цитологии мазка слизистой носа статистически значимо снизились показатели деструктивного эпителия и количества эозинофилов. Однако после курса АСИТ отмечена динамика снижения IFNa в назальном секрете.

По итогам АСИТ в группе с эпизодическим течением ГИ отличные результаты составили 38,5% (19 человек), хорошие - 32,7% (17 человек.), удовлетворительные - 30,8% (16 человек) (рис. 3) У представителей данной группы отсутствовала динамика изменений в плазме крови для всех изучаемых цитокинов. В назальном секрете зафиксировано статистически значимое снижение уровня 1L4 с нарастанием IFNy. Однако, в отличие от группы с латентным течением ГИ, зарегистрированы высокие значения TNFa в назальном секрете как до, так и после лечения.

По итогам АСИТ в группе с рецидивирующим течением ГИ отличные результаты составили 21,9% (7 человек), хорошие - 28,1% (9 человек), удовлетворительные - 37,5% (12 человек), неудовлетворительные - 12,5 (4 человек) (рис.3). В 62,5% случаев (20 человек) нагрузка ПЗА привела к повышению титра IgG к ВПГ, у 44% (14.) пациентов отмечено обострение ГИ с локализацией на слизистой носа и губ на фоне высоких доз ПЗА. Клинически течение КАР у всех пациентов данной группы характеризовалось постоянной блокадой носового дыхания и расценивалось как аллергическое воспаление с участием медиаторов поздней фазы на фоне статистически высоких значений TNFa, с назальной эозинофилией и лимфоци-тозом, низкими значениями IFNa и IFNy.

О отличные

70. ОО 60.00 50,ОО 40,00 ЗО.ОО 20.00 10,00 О.ОО

«хор аудовл а неуд.

Щя

латентное течение ГИ

12,50%

эпизодическое течение ГИ рецидизивирующее течение ГИ

Рис. 3. Эффективность АСИТ у пациентов с разным течением герпетической инфекции

Курс АСИТ приводил к достоверному снижению в назальном секрете №N0. Снижение лейкоцитарного интерферона отражает нарушение контроля врожденного иммунитета, включая вирусные антигены, и участия в иммунорегуляторном противовоспалительном кон-

троле на слизистых. У 5 (10%) пациентов в этой группе произошло клиническое обострение ГИ с локализацией на слизистой носа и губ на фоне высоких доз получения ПЗА. В 29% случаев (15 пациентов) зарегистрировано среднее повышение титров IgG к ВПГ, из них у 10 человек клинические проявления ГИ на этапах АСИТ отсутствовали.

Таким образом, при сравнительной характеристике клинических проявлений АСИТ в 3 группах пациентов достоверно худший результат был получен в группе больных, имеющих эпизодическое и рецидивирующее течение ГИ. У лиц с эпизодическим и рецидивирующим течением ГИ на фоне АСИТ в 91% случаев имело место повышение титров специфических антител к ВПГ1. Эффективность терапии АСИТ зависит от частоты рецидивов герпетической инфекции в год и количества рецидивов во время АСИТ.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведенное исследование 1843 жителей г.Томска в возрасте 18-60 лет позволило выявить высокую частоту инфицированное™ ВПГ 1 (97,08%) и ВПГ 2 (38,68%) типов, в сравнении со средними показателями по России. У 39 % обследованных имело место латентное течение ГИ или состояние «динамического равновесия вируса и иммунной системы человека». Рецидивирующее течение ГИ с разной локализацией проявлений установлено у 18,5% обследованных. Присутствие в 58% случаев высоких титров специфических антител к ВПГ'1 (1 : 1600 - 1 :12800) в период латентного присутствия инфекции отражает активность гуморального иммунного ответа.

У 74% обследованных выявлена положительная сенсибилизация к неинфекционным аллергенам в разной степени выраженности, из них у 49% латентная аллергическая сенсибилизация обнаружена впервые. Латентная аллергическая сенсибилизация зарегистрирована в сочетании с различными клиническими проявлениями герпетической инфекции (латентной, эпизодической, рецидивирующей). У лиц с положительной аллергической сенсибилизацией в 22,9% случаев установлено рецидивирующее течение ГИ. При этом у пациентов, страдающих БА, рецидивирующее течение ГИ выявлено в 31,0% случаев, т.е. у каждого третьего больного. У пациентов с отрицательной аллергической сенсибилизацией рецидивирующее течение ГИ встречалось только в 11,5% случаев. Таким образом, наибольшее количество клинически рецидивирующих форм ГИ установлено у пациентов с БА, на втором месте высокий процент случаев рецидивирующего течения ГИ зарегистрирован у пациентов, имеющих положительную аллергическую сенсибилизацию, включая скрытое течение аллергии. Анализ клинических особенностей течения ГИ показал, что от латентного к манифестному рецидивирующему течению увеличивается число пациентов с положительной сенсибилизацией к неинфекционным аллергенам. Независимо от наличия сенсибилизации к неинфекционным аллергенам, установлена положительная корреляция риска развития эпизодических форм течения ГИ с нарастанием уров-

ня IgE, IL4. У обследованных с положительной сенсибилизацией к неинфекционным аллергенам определены высокие титры специфических AT к ВПГ1, -2 и значений IgE. С другой стороны, высокие титры специфических антител IgG к ВПГ1 и 2 при положительной корреляции с повышенным уровнем IgE и IL4 отражают активность ТЬ2-типа иммунного ответа и свидетельствуют о неблагоприятном течении и прогнозе герпетической инфекции, что нам и удалось показать в выполненном исследовании. Вирус-индуцированная аллергия, сопровождающаяся активностью Th2 лимфоцитов, - есть стратегия выживания персистирующего герпесвируса. Постоянная активность ТЬ2-типа иммунного ответа способствует риску развития аллергии на окружающие антигены и влияет на популяционный иммунитет современного населения.

Таким образом, длительная персистенция ВПГ даже без клинических проявлений инфекции может являться причиной сенсибилизации к неинфекционным аллергенам у современного населения. При рецидивировании ГИ начинают формироваться клинически выраженные реакции аллергического заболевания, на первом месте из которых стоят аллергический ринит и бронхиальная астма.

Характер течения герпетической инфекции у лиц без аллергической сенсибилизации и пациентов, страдающих бронхиальной астмой, ассоциирован с гетерогенными вариантами изменений количества и функциональной активности NK-клеток и Т-лимфоцитов, содержания lFNa, IFNy, IL4 и баланса IFNy/IL4 как в сыворотке крови, так и в индуцированных тестах in vitro с вирусным антигеном.

При рецидивирующем течении ГИ установлено, что в стадию обострения у пациентов, не зависимо от аллергической сенсибилизации, имеет место однотипный алгоритм снижения количества и цитотоксической активности NK-лимфоцитов, без восстановления показателей в стадию клинической ремиссии до таковых значений, зарегистрированных в группе с латентным течением ГИ (периода динамического равновесия). Выявлены особенности продукции интерферонов: у пациентов без аллергической сенсибилизации уровни lFNa и IFNy в крови повышаются в острую стадию ГИ с дальнейшим снижением в стадию ремиссии до сравниваемых таковых значений при латентном течении ГИ. У пациентов с аллергическими заболеваниями, включая БА, в стадию обострения инфекции происходит увеличение содержания сывороточного IFNa и IFNy, с динамичным снижением уровня IFNy ниже нормативных значений, зарегистрированных при латентном течении ГИ. На фоне рецидивирующего течения ГИ и БА установлено, что в индуцированных тестах с вирусным АГ прирост продукции IL4 сопровождался сниженной продукцией IFNy и TNFa по сравнению с таковыми при эпизодическом течении ГИ. Как известно, с функцией IFNy связаны контроль противовирусного иммунного ответа, репликация вирусов, антагонизм продукции IL4. TNFa регулирует несекреторный апоптоз поврежденных вирусом клеток, но активирует цитокины аллергического воспаления.

Таким образом, при манифестном течение ГИ пациенты с БА на вирусный АГ формируют ТЬ2- ответ в отличие от обследованных лиц с манифестными формами течения ГИ в отсутствии аллергической сенсибилизации.

Рецидивирующее течение ГИ в отсутствие аллергосенсибилизации характеризуется разными типами индуцированного ответа на вирусный антиген. У 46% обследованных отмечено повышение уровня 1Ь4 на фоне низкого количества 1ТОу в супернатантах АГ-индуцированных лимфоцитов. По нашим представлениям, развитие ТЬ2-типа иммунного ответа ассоциировано с неблагоприятным прогнозом течения вирусных инфекций, формированием аллергической сенсибилизации, проблемами низкой эффективности стандартной этио-тропной противовирусной терапии.

У 19% пациентов отмечено увеличение продукции ТШу на фоне низких значений 1Г4. Вероятно, выделенный алгоритм ответа свидетельствовал о благоприятном прогнозе течения ГИ, не смотря на рецидивное течение инфекции. Требуется подбор схем этиотропной противовирусной терапии без дополнительной коррекции иммунного ответа.

В 11,5% случаев отсутствовали изменения продукции 1Ь4 и 1Шу в супернатантах лимфоцитов, стимулированных АГ, что, на наш взгляд, отражает наличие комбинированного иммунодефицита, вероятно, за счет некого супрессорного цитокинового сопровождения, возможно, за счет активности Т^-лимфоцитов в ответ на АГ. Такой алгоритм ответа соответствовал неблагоприятному прогнозу течения ГИ. Этим же можно объяснить отсутствие клинического эффекта от стандартной длительной противовирусной терапии у пациентов (стандартные приемы ацикловира до 6 мес).

У 23,5% обследованных с рецидивирующим течением ГИ наблюдались однонаправленные повышения продукции 1Ь4 и 1ГЫу в тесте с АГ. Возможно, эта комбинация цитокинов отражает поляризацию иммунного ответа с участием провоспалительных цитокинов (№Ху, ЮТа) по пути ТЫ 7 и требует дальнейшего анамнестического анализа обследованных, в частности, по выявлению наследования и клинических признаков реализации аутоиммунных расстройств. Выявленный алгоритм ответа на вирусный антиген может отражаться неблагоприятным прогнозом клинического течения процесса и требует подбора комбинированной противовирусной и иммунотропной терапии.

Рецидивирующее течение ГИ любой локализации требует длительных курсов противовирусной терапии и адресной иммунореабилитации.

Современная стандартная терапия у пациентов с аллергическими заболеваниями (бронхиальная астма, аллергический ринит, аллергический дерматит) не учитывает носитель-ство герпесвирусов при подборе как базисной, так и этиопатогенетической терапии. Если учитывать классические представления о формировании иммунного ответа, то между аллер-

гией и ГИ прослеживается связь по принципу единства противоположностей. В патогенезе аллергического воспаления ТЬ2-путь иммунного ответа посредством IL4 контролирует про-лиферативную активность клеток и переключение синтеза антител с IgM на IgE, подавляет продукцию IFNy. Отсутствие клинических проявлений ГИ в латентном течении и особенности манифестации и рецидивирование ГИ определяются генетическими факторами и активностью как врожденного, так и адаптивного иммунитета. Взаимоотношения в интерфейсе клеточного генома человека и вирусного генома имеют сложную причинно-следственную цепь влияний. Нами проведена оценка особенностей полиморфизма генов регуляторных цит-кинов, определяющих как направление иммунного ответа, так и выраженность воспалительных реакций у обследованных с разными типами течения ГИ.

Установлено, что полиморфизм генов цитокинов и их рецепторов (JL4, IL12B, IFNG, IL4RA), а также То11-подобного рецептора 9 (TLR9) и транскрипционного фактора Tbet (ТВХ21) ассоциирован с вариациями клинического течения ГИ.

Латентное течение ГИ или состояние динамического равновесия между активностью вируса и клиническими проявлениями у пациентов без аллергической сенсибилизации в условиях установленных высоких специфических титров IgG к ВПГ1, -2 типа (в результате событий состоявшегося ответа на ВПГ1, -2) связано с контролем клеточного иммунитета белковыми продуктами генотипов А/А ГВХ21, C/TTLR9, А/А IL12B, Т/Т IFNG. При этом клеточный иммунный ответ этих волонтеров остается функционально активным по отношению к АГ иного / различного происхождения. Рецидивирующее течение ГИ у обследованных без аллергической сенсибилизации (инфекционная модель) обусловлено нарушением клеточного и активацией гуморального иммунитета, дисбалансом регуляторных цитокинов и их рецепторов, связанных с частотой носительства генотипами Т/Т TLR9, G/A ТВХ21, С/С IL12B, Т/С IFNG, Т/С IL4. (рис. 4) У обследованных без аллергической сенсибилизации, а также в группе с аллергическими заболеваниями (БА) установлено, что уровень IgE связан с белковым продуктом гена IL4 (р = 0,036). Риск формирования аллергической сенсибилизации у пациентов с латентной, а также эпизодической реактивацией и рецидивирующим течением ГИ ассоциирован с модулирующим влиянием полиморфных вариантов генов IL4 (Г/Т) и IL4RA (V/V) на продукцию IgE (рис. 4). Базисная терапия рецидивирующей герпетической инфекции должна учитывать риск развития аллергической сенсибилизации.

Латентное течение у пациентов с БА (аллергическая модель) ассоциировано с высокой частотой носительства генотипов А/С гена IL 12В и Т/С гена IFNG, контролирующих клеточный иммунный ответ. Можно предположить, что клиническое «сдерживание» ГИ происходит только у пациентов, страдающих БА, у которых рецептор IL4R является продуктом гетерозиготного гена 1/VIL4RA.

Формирование аллергической сенсибилизации у пациентов с РГИ

Плазмоцитоидная дендритная клетка_

[ ген П.К9 (экзон) *]

Вирусный антиген ВПГ1 - поражение эпителиальных клеток слизистых и клеток к

Генотип Т/Т

Замена

соответствующем белке (рецепторе)

Нарушение функциональный сеоОств при взаимодействии с мотивом врО ДНК ВПГ1 и дальнейшей активации генов транскрипционных факторов, о частности ТВХ21

^ге>7гВХ21( цнтро н)|

Генотип О/А

Изменение структуры регуляторных участков , снижение продукции белка (-Ье?

Нарушение регуляции баланса ТЬО-ТЫ, гпродукции )РГ4у

Нарушение

функциональных свойств рецептора

Формирование гуморального иммунитет, благоприятные условия для размножения вируса и деструкции клеток и тканей, формирование гиперреактивности слизистых

Рис. 4. Формирование аллергической сенсибилизации у пациентов с рецидивирующей герпетической инфекцией (инфекционная модель риска развития аллергии, авторская схема).

Рецидивирующее течение ГИ у пациентов, страдающих БА, связано с нарушением продукции цитокинов и с частотой носительства генотипов С/С гена /РМ7, генотипа Т/Т гена 1Ь4, генотипа 1/1 гена И4М. Таким образом, совместное влияние полиморфизмов генов формирует нарушение противовирусного иммунитета в аллергической модели и также ассоциировано с повышенным риском осложненного течения ГИ среди больных БА и, как следствие, с усилением тяжести основного аллергического заболевания.

В условиях массовой инфицированности населения ГВ, одной из причин неэффективности стандартной противоаллергической терапии аллергических заболеваний является недооценка в патогенезе вклада инфекционного фактора с учетом особенностей генетического контроля. Кроме того, существующие виды терапии и профилактики рецидивирующих форм ГИ не дают однозначных положительных результатов в работе врачей клинических специальностей. Полученные данные позволяют приблизиться к пониманию механизмов реактивации ГИ у пациентов с разным типом течения ГИ и риском развития аллергических заболеваний даже в отсутствие отягощенного наследственного аллергоанамнеза. Возможно, генотипические данные могут быть использованы для разработки тест-системы прогнозирования риска развития рецидивирующего течения ГИ, присоединения аллергической сенсибилизации, уточнения

практических целей и индивидуальности курсов терапии ГИ, разработки противогерпетиче-ских аутовакцин.

Динамика индуцированной продукции IFNy, IL4 и пролиферации Т-лимфоцитов in vitro в тестах с вирусным антигеном являются доступными клинико-лабораторными критериями эффективности и прогноза противовирусной и иммуномодулирующей терапии. Нами было установлено, что курс комбинированной терапии противовирусным и иммунотропным препаратами ацикловиром и имунофаном приводит к увеличению активности NK- лимфоцитов у обследованных без отягощенного аллергоанамнеза и к увеличению как активности NK-клеток, так и их количества, в группе больных с аллергическими заболеваниями (БА), по сравнению с соответствующими показателями в стадию ремиссии. Данный эффект нивелируется у больных с БА уже через 2 нед после проведенной терапии, характеризуясь снижением активности NK-лимфоцитов и концентрации IFNy в достоверно большей степени, чем у обследованных без аллергической сенсибилизации. Реабилитация показателей до значений группы сравнения (латентное течения ГИ) после курса комбинированной терапии ацикловиром и имунофаном происходит на кратковременный (до 1 мес) период. Принимая во внимание тот факт, что персистенция герпетического воспаления приводит к постоянному поражению эпителия слизистых и эпидермиса кожи у этой категории пациентов, неизбежны периоды гиперреактивности слизистых и кожи, ведущие к утяжелению атлергических проявлений и недостаточности терапии БА. Для пациентов, страдающих БА, становится актуальным периодическое проведение контроля показателей интерферонов и активности NK-кдеток, специфической диагностики ВПП, -2. Пациентам с БА и сопутствующей рецидивирующей ГИ требуются длительные комбинированные схемы противовирусной и иммунотролной терапии.

Трансфер-фактор - известный фактор, регулирующий экспрессию HLA1 и HLA2 антигенпрезентирующих дендритных клеток, стимулятор активности клеток с цитотоксическим потенциалом (CD8+, CD 16*) и индуктор интерферонов. Рекомендован для лечения пациентов с герпетическими инфекциями. Проведенные исследования показали, что трансфер-фактор оказывает положительный эффект только у части пациентов, которые в условиях индукции антигеном отвечают повышением функциональной активности Т-лимфоцитов, и как следствие, увеличением продукции интерферона. Полученные разноплановые изменения в интерфероновом статусе зависят от состояния иммунной системы пациентов до начала лечения, способности специфического TCR-лимфоцитов распознавать и отвечать на вирусный АГ. Очевидно, что необходимо разрабатывать оптимальные схемы терапии трансфер-фактором и применять их с учетом и под контролем состояния эндогенной системы интерферонов и иммунологического резерва пациента в каждом конкретном случае. Более того, возможно, многочисленные AT к ВПГ «экранируют» специфические рецепторы и нарушают ответ при

встрече со специфическим АГ.

Единственным этиопатогенетическим методом для лечения аллергических заболеваний остается аллергенспецифическая иммунотерапия (АСИТ, категория доказательства Ib). В настоящее время одним из ведущих .механизмов АСИТ считается переключение иммунного ответа с проаллергенных ТЬ2-клеток на Thl-опосредованный путь ответа, изменение баланса lFNy и TGf'P, после чего должно следовать снижение высвобождения IL4, активация экспрессии IL4RA, изменение функциональной активности CD22+ CD23+-лимфоцитов и, как следствие, - уменьшение синтеза реагиновых антител (IgE). Клиническое обострение ГИ у пациентов с аллергическими болезнями на любом этапе АСИТ должно нарушать механизмы формирующейся толерантности. При сравнительной оценке эффективности проведенной АСИТ достоверно худший результат был получен в группе больных, имеющих сочетание аллергического заболевания с эпизодическим или рецидивирующим течением ГИ. Ежедневный набор с увеличением дозы причинного аллергена у этих пациентов приводил к достоверному снижению в назальном секрете уровня IFNa. С IFNa, как известно, связана иммунорегуляторная противовоспалительная и противовирусная функция врожденного иммунитета. Снижение количества и функции IFNa является причиной пролиферативной активации вируса герпеса, находящегося в эпителиальных клетках. Дополнительно у 91% пациентов зарегистрировано повышение титров специфических антител к ВПГ1. Количество полученных «отличных результатов» АСИТ снижалось у пациентов в группах с эпизодическим и рецидивирующем течении ГИ. Таким образом, клинические маркеры эффективности проведенной АСИТ зависели от частоты рецидивов ГИ в год (из анамнеза болезни пациента) и количества клинических вирусных рецидивов во время набора доз причинного аллергена, включая период поддерживающей терапии. Лабораторные критерии эффективности для этой группы пациентов были связаны с динамическим изменением уровня IFNa, титра IgG к ВПГ1, -2.

Таким образом, полученные результаты исследования, их анализ и выводы расширяют имеющиеся представления о патогенетических механизмах формирования, реактивации, особенностях течения герпетической инфекции, причинах аллергической сенсибилизации современного населения, изменении популяционного иммунитета на фоне массового носитель-ства герпетических вирусов. Выявлены достоверные дифференциально-диагностические критерии, позволяющие повысить качество диагностики, адекватность и эффективность патогенетической терапии герпетической инфекции, а также лечения герпетической инфекции у пациентов с аллергическими заболеваниями. Результаты позволяют разработать новые диагностические критерии для прогноза течения инфекционного процесса и обоснования индивидуальной иммуномодулирующей терапии, а также внедрения модифицированной схемы лечения,

которая может быть рекомендована для широкого применения пациентов, имеющих сочетание аллергии с герпетической инфекцией.

ВЫВОДЫ

1. Массовая инфицированность вирусами простого герпеса (97,08% ВПГ1,38,68% ВПГ2) изменяет популяционный иммунитет, отменяя толерантность к неинфекционным антигенам и способствуя формированию аллергической сенсибилизации. В 39% случаев отмечается латентное течение герпетической инфекции или состояние динамического равновесия «вирус -иммунная система хозяина»; у 61% обследованных герпетическая инфекция протекает в клинически явной форме, из них у 18,5% диагностируется рецидивирующее течение инфекции. Инфицированность лиц с бронхиальной астмой ВПГ1 составляет 100%.

2. У 64% обследованных пациентов обнаружены высокие титры специфических IgG к ВПГ1, 2 (1 : 1600-1 :12800), у 3% - отсутствие противогерпетических антител в крови, совпадающее с отсутствием клинических проявлений герпетической инфекции в течение жизни. Титры специфических антител к ВПГ1 не зависят от стажа клинических проявлений и типа течения герпетической инфекции, являются «антителами-свидетелями» активности гуморального иммунного ответа, начиная с периода латентного течения инфекции.

3. Положительная аллергическая сенсибилизация к неинфекционным аллергенам обнаруживается в 74% случаев, из них в 49% аллергические заболевания ранее не диагностировались. Преобладает аллергическая сенсибилизация к бытовым и пыльцевым аллергенам. Рецидивирующее течение герпетической инфекции устанавливается в 22,9% случаев при положительной аллергосенсибилизации и у 31,0% пациентов, страдающих бронхиальной астмой. В отсутствие аллергической сенсибилизации рецидивирующее течение герпетической инфекции выявлено в 11,5% случаев. В период манифестного рецидивирующего течения герпетической инфекции число лиц с положительной сенсибилизацией к неинфекционным аллергенам увеличивается до 46%. Эпизодическая реактивация герпетической инфекции связана с повышением уровней IgE, титра специфических антител к ВПГ1 в крови, IL4 как в сыворотке крови, так и в индуцированных тестах с вирусным антигеном.

4. Больные с аллергической сенсибилизацией характеризуются отрицательной динамикой уровней IFNa и IFNy в сыворотке крови в ранний восстановительный период и период реабилитации после обострения герпетической инфекции, что сочетается со снижением количества и функциональной активности NK-лимфоцитов. При положительной аллергической сенсибилизации в индуцированных тестах с вирусным антигеном снижение продукции IFNy in vitro регистрируется при всех формах герпетической инфекции, начиная с латентного ее течения.

5. Рецидивирующие формы герпетической инфекции независимо от наличия аллергической сенсибилизации характеризуются однотипными изменениями индуцированной продукции IFNy, IL4, TNFa in vitro и снижением коэффициента IFNy/IL4. Гетерогенность значений коэффициента IFNy/IL4 позволяет дифференцировать типы иммунного ответа (гуморальный, клеточный, комбинированный) у лиц с рецидивирующим течением герпетической инфекции в индуцированных тестах с вирусным антигеном и использовать их для прогноза течения инфекции и подбора индивидуальной адресной терапии.

6. У лиц с рецидивирующим течением герпетической инфекции частота носительсгва генотипа Т/С и аллеля С гена IFNG, генотипа Т/Т аллеля Т гена TLR9, генотипа G/A и аллеля G гена ТВХ21, генотипа Т/С и аллеля Т гена IL4 выше по сравнению с таковыми у лиц с латентным течением инфекции. Рецидивирующее течение герпетической инфекции у пациентов с бронхиальной астмой ассоциировано с увеличением частоты носительства генотипа С/С и аллеля С гена ILJ2B, генотипа С/С и аллеля С гена 1FNC, генотипа Т/Т и аллеля Т гена IL4, гено-типя 1/1 и аллеля I гена 1L4RA по сравнению с таковым у лиц с латентным течением инфекции.

7. Риск формирования аллергической сенсибилизации у пациентов с эпизодической реактивацией и рецидивирующим течением герпетической инфекции ассоциирован с модулирующим влиянием полиморфизма Т/Т гена IL4 и V/Vгена IL4RA на продукцию IgE.

8. Об эффективности противовирусной и иммуномодулирующей терапии, связанной с дальнейшим прогнозом инфекционного процесса, свидетельствуют повышение пролифера-тивной активности Т-лимфоцитов, снижение продукции IL4 и повышение продукции IFNy и TNFa в индуцированных тестах с вирусным антигеном in vitro.

9. Эффективность аллергенспецифической иммунотерапии у лиц с аллергическим ринитом и бронхиальной астмой, ассоциированными с герпетической инфекцией, зависит от частоты клинических манифестаций инфекции, подтверждается снижением уровня IFNa в муко-зальном секрете, повышением титров специфических антител к ВПГ1 в крови на фоне стандартной схемы получаемых доз лечебного аллергена.

Практические рекомендации

В результате проведенного исследования сформулированы практические рекомендации для повышения эффективности АСИТ причинными неинфекционными аллергенами:

1. Пациентам, имеющим сочетание аллергических заболеваний с эпизодической или рецидивирующей герпетической инфекцией, на первом этапе целесообразно проведение коррекции интерферонового статуса с помощью адресных иммуномодуляторов.

2. Набор дозы ПЗА необходимо сочетать с назначением заместительного рекомбинантного IFNa в течение всего цикла. В случае обострения герпетической инфекции по время АСИТ назначать курс противовирусной терапии ацикловиром (валтрексом) с поддерживающей схемой

до конца основного курса АСИТ и контроля динамики специфического IgG к ВПГ1, -2.

3. Пациентам, имеющим сочетание аллергии с герпетической инфекцией, требуется динамический контроль содержания IgG к ВПГ1, -2 в крови на разных этапах набора максимальной дозы причинно-значимого аллергена.

4. Терапия должна быть индивидуальной, комплексной и основываться на конкретных клинических проявлениях вирусной инфекции, па оценке индуцированной вирусным антигеном продукции IFNa, IFNy и IL4 in vitro.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Особенности формирования иммунного ответа на герпес-антиген / H.A. Черевко, Т.В. Ко-шовкина, Н.С. Кошкарова и др. // Аллергология и иммунология. - 2004. - T. S, №1 -С. 119.

2. Прогностические возможности оценки алгоритмов иммунного ответа у пациентов с герпетической инфекцией / H.A. Черевко, Т.В. Кошовкина, Н.С. Кошкарова // Международный конгресс «Иммунитет и болезни: от теории к терапии», Сб. трудов, Москва, 2005.- С. 205.

3. Опыт применения Реаферона-ЕС липинта у пациентов с аллергическими заболеваниями / H.A. Черевко, Т.В. Кошовкина, Н.С. Кошкарова и др. // Аллергология и иммунология. - 2005. - Т. 6, №2 . - С. 165.

4. Особенности профиля цитокинов назального секрета у пациентов с аллергическим ринитом / О.В. Астафурова, В.В. Климов, A.B. Староха, H.A. Черевко, A.B. Давыдов // Аллергология. 2005. №3. С. 14-18.

5. Эффективность специфической иммунотерапии у пациентов с аллергическим ринитом, осложненным герпес-инфицированием / H.A. Черевко, О.В. Астафурова, Т.В. Кошовкина, Н.С. Кошкарова // VII Конгресс «Современные проблемы аллергологии и иммунологии». Сб. трудов. Аллергология и иммунология. 2006. Т. 7. №3. С. 282.

6. Изучение распространенности аллергической патологии и описторхозной инвазии и их взаимосвязи у населения Томской области / Л.М.Огородова, М.Б.Фрейдин, А.Э.Сазонов, О.С. Фёдорова, И.Э. Гербек, H.A. Черевко, A.A. Рудко, и др. // Бюл. сиб. медицины. - 2006. Т. 5.-№4.-С.48-51.

7. A pilot screening of prevalence of atopic states and opisthorchosis and their relationship in people of Tomsk / L.M. Ogorodova, M.B.Freidin, A.E. Sazonov, O.S. Fedorova, I.E. Gerbek, N.A. Cherevko, N.Y. Lebedeva // Parasitology Research. 2007. V. 101. №4. P. 1165-1168.

8. Влияние инфекций на манифестацию аллергических заболеваний / H.A. Черевко, С. Романова, Н. Теплова и др. // Рос. аллергол. журн. - 2007. - №3. Прил. 1. - С. 272.

9. Оценка особенностей инфицированное™ и клинических проявлений герпес-инфекции у жителей г.Томска / Н.А.Черевко, Л.М. Огородова, М.Б. Фрейдин, А.Э.Сазонов, О.С. Фёдорова, В.В. Климов // Рос. иммунол. журн. - 2008. - Т. 2. №2-3. - С. 111-112.

10.Evalution of peculiarities of infectioness and clinical manifestation of the herpes virial infection among tomsk city inhabitans / L.M. Ogorodova, M.B. Freidin, N.A. Cherevko, A.E. Sazonov, O.S. Fedorova, V.V. Klimov // 5th Russian-German conference HUMAN HERPESVIRUS INFECTIONS. Moscow. Abstracts. - 2008. P. 16-17.

11. Особенности алгоритмов иммунного ответа у пациентов с герпетической инфекцией / H.A. Черевко, С.О. Романова // Рос. аллергол. журн. - 2008. - №1. - С. 333-336.

12. Характеристика эпидемиологических и молекулярных взаимоотношений аллергических и гельминтных болезней в эндемическом очаге описторхоза / Л.М. Огородова, О.С. Фёдорова, М.Б. Фрейдин, М.В. Васильева, H.A. Черевко, А.Э. Сазонов и др. // Бюл. сиб. медицины. -2008. Т. 7. №4. С. 37-43.

13. Связь полиморфизма генов цитокинов с особенностями клинического течения герпетической инфекции / Н.А.Черевко, М.Б. Фрейдин, Е.Ю. Брагина, В.В.Климов // Цитокины и воспаление. - 2009. - Т. 8. - №4. - С. 32-37.

14. Способ прогнозирования риска развития бронхиальной астмы / Огородова Л.М., Фрейдин М.Б., Черевко H.A., Васильева М.В., Брагина Е.Ю., Салтыкова И.В. // Патент на изобретение №200814685/15(063743), 2009 г.

15. Аудит знаний основных положений GINA у врачей Томской области / Л.В. Абашина, О.С. Кобякова, И.А. Деев, И.Л. Коломеец, Е.А. Старовойтова, H.A. Черевко, Ю.А. Петровская, Л.Ю. Никитина // Бюл. сиб. медицины. -2009. - Т. 8. №4(2). - С. 96-102.

16. Особенности эпидемиологических и клинико-иммунологических взаимосвязей инфекций, вызванных вирусами герпеса и описторхисами у жителей города Томска / H.A. Черевко, Л.М. Огородова, М.В. Васильева // Бюл. сиб. медицины. - 2010. - Т. 9, №5. -С. 108-112.

17. Особенности аллергенспецифической иммунотерапии у больных с аллергической патологией, отягощенной герпетической инфекцией / H.A.Черевко, С.О.Романова, Т.В. Кошовкина, Н.С. Кошкарова, В.В. Климов, О.В. Астафурова // Вестн. Уральской мед. академ. науки. - 2010. - №2/1(29). - С. 280-282.

18. Особенности изменения популяционного иммунитета населения на фоне гепрес-инфицирования / H.A. Черевко, C.B. Гусакова, И.С. Попова, В.В. Климов // Рос. аллергол. журн. - 2010. -№1, вып. 1. С. 207-208.

19. Особенности щггокинового профиля при различных типах клинического течения герпесвирусной инфекции / НЛ.Черевко, Л.М. Огородова, В.В.Климов // Врач. - 2010. -№4.-С. 45^16.

20. Особенности полиморфизма генов цитокинов IFNG, IL12B, ТВХ21 и особенности течения герпетической инфекции / НА. Черевко, Ю.А. Яковлева, И.В. Салтыкова, Е.Ю. Братина // Цитокины и воспаление. - 2010. - Т. 9, №3. - С. 58.

21. Особенности полиморфизма генов цитокинов и их рецепторов при герпетической инфекции / Черевко H.A. И Актуальные проблемы химии, биологии и медицины: монография. - Красноярск: Научно-инновационный центр. 2011. - С. 262-276.

22. Эпидемиологические и клинико-иммунологические особенности течения герпес-инфекций у жителей г. Томска // H.A. Черевко // Вестн. новых мед. технологий. - 2011,Т. XV11I, №2. - С.234-236.

23. Способ лечения хронического описторхоза у больных с хроническим аутоиммунным тиреоидитом / Соломина М.С., Иванова О.И., Черевко H.A. // Патент № 2414219. Заявка № 2010108660 приоритет от 09.03.2010 г. Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений РФ 20.03.2011 г.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

АГ - антиген

АЗ - аллергические заболевания АР - аллергический ринит АСИТ - аллерген-специфическая иммунотерапия

БА - бронхиальная астма

БГЛ - большие гранулярные лимфоциты

ГИ - герпетическая инфекция

ГВ - герпесвирусы

ИО - иммунный ответ

ИФА - иммуноферментный анализ

ИЦ - индекс цитотоксичности

КАР - круглогодичный аллергический ринит

КАП - кожные аллергопробы

ПЗА - причинно-значимый аллерген РБТЛ - реакция бластной трансформации лимфоцитов

САР - сезонный аллергический ринит

ФГА - фитагемагглютенин

Ig - иммуноглобулин

IFN - интерферон

NK - натуральные киллеры

Th - Т-лимфоциты-хелперы

Thl - Т-лимфоциты-хелперы 1-типа

Th2 — Т-лимфоциты-хелперы 2-типа

TLR - То11-подобные рецепторы (Toll-like

receptors)

TNF - фактор некроза опухолей (ФНО)

Тираж 100 экз. Заказ № 201. Отпечатано на участке оперативной полиграфии ООО «Печатная мануфактура». 634055, г. Томск, а/я 3967. Тел./факс (3822) 49-31-19, тел. (3822) 49-00-74. E-mail: pechat@tomsk.ru

Оглавление диссертации Черевко, Наталья Анатольевна :: 2012 :: Томск

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Общие сведения о герпесвирусах.

1.1.1. Эпидемиология герпетической инфекции.

1.1.2. Этиология герпетической инфекции.

1.1.3. Патогенез и основные клинические формы герпетической инфекции.

1.2. Особенности иммунного ответа на герпесвирусы.

1.2.1. Роль врожденных факторов иммунитета (NK, TLR).

1.2.2. Роль гуморального звена в противогерпетической защите организма.

1.2.3. Роль цитокинов в противогерептической защите.

1.2.4. Полиморфизмы генов IL4RA ,\L4, IL12B, 1FNG, IL12RBI и ТВХ

1.2.5. Роль апоптоза в поддержании «симбиоза» существования между герпесвирусами и иммунной системой организма хозяина.

1.3. Особенности рецидивирующего течения герпетической инфекции. Иммунный ответ при рецидивирующем герпесе.

1.3.1. Теории рецидивирования герпетической инфекции.

1.3.2. Состояние иммунной системы при хроническом часто рецидивирующем простом герпесе.

1.4. Терапия герпесвирусных заболеваний.

1.4.1. Противогерпетическая химиотерапия.

1.4.2. Иммуномодуляция.

1.4.3. Стратегия лечения герпетической инфекции человека на современном этапе.

1.5. Взаимосвязь вирусов и аллергии.

1.6. Эпидемиология и этиология аллергических заболеваний.

1.7. «Гигиеническая гипотеза» развития аллергии.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ.

2.1. Объект исследования.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Заполнение индивидуальной регистрационной карты.

2.2.2. Выполнение кожных аллерготестов ш vivo.

2.2.3. Проведение назального лаважа и оценка цитологии мазков слизистой носа.

2.2.4. Определение концентрации цитокинов с использованием иммуноферментного анализа в сыворотке крови, супернатанте индуцированных лимфоцитов и мукозальном секрете.

2.2.5. Определение количества натуральных киллерных клеток.

2.2.6. Определение функциональной активности натуральных киллерных клеток.

2.2.7. Определение количества лейкоцитов и лимфоцитов в периферической крови.

2.2.8. Определение пролиферативной активности Т-лимфоцитов периферической крови в реакции бласттрансформации.

2.2.9. Определение количества IgE.

2.2.10. Определение количества IgM, IgG к вирусу простого герпеса.

2.2.11. Анализ полиморфных вариантов генов цитокинов.

2.3. Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРИ ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ И АЛЛЕРГОПАТОЛОГИИ.

3.1. Инфицированность населения города Томска вирусами простого герпеса.

3.2. Выявление латентной сенсибилизации к неинфекционным аллергенам у лиц с герпетической инфекцией.

ГЛАВА 4. ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ И АЛЛЕРГОПАТОЛОГИИ.

4.1. Особенности противовирусного иммунитета при рецидивирующем течении герпетической инфекции.

4.2. Особенности противовирусного иммунитета у лиц с рецидивирующей герпетической инфекцией, сочетанной с аллергической сенсибилизацией.

4.3. Цитокиновый профиль при различных типах клинического течения герпетической инфекции.

4.4. Особенности противовирусного иммунитета при герпетической инфекции, сочетанной с аллергическим ринитом и бронхиальной астмой.

4.5. Типы иммунного ответа у пациентов с рецидивирующим течением герпетической инфекции.

4.6. Особенности полиморфизма генов цитокинов и рецепторов при герпетической инфекции.

ГЛАВА 5. ИММУНОТЕРАПИЯ ПРИ ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ И АЛЛЕРГОПАТОЛОГИИ.

5.1. Иммунотерапия герпетической инфекции.

5.1.1. Влияние курса комбинированной противовирусной и иммуномодулирующей терапии на иммунный ответ у пациентов с рецидивирующим герпесом.

5.1.2. Влияние курса иммунотерапии трансфер-фактором на иммунный ответ у пациентов с рецидивирующим герпесом.

5.2. Аллергенспецифическая иммунотерапия у больных с аллергической патологией, отягощенной герпетической инфекцией.

Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Черевко, Наталья Анатольевна, автореферат

АКТУАЛЬНОСТЬ. Проблема инфекций, вызванных вирусами простого герпеса типов 1 и 2 (ВПГ1, ВПГ2), не теряет своей актуальности, несмотря на многочисленные исследования в области вирусологии в последние 10 лет. По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), смертность, обусловленная вирусами герпеса (15,8%), занимает второе место после гриппа (35,8%), перинатальная смертность составляет 10%, инфицированность новорожденных во время родов - 0,03%. Механизм латентной вирусной инфекции, а также механизмы, лежащие в основе реактивации ВПГ, неизвестны. Применяемые методы лечения рецидивирующих форм герпетических инфекций (ГИ) дают временные ремиссии, профилактика и прогнозы развития инфекции противоречивы. Это определяет не только медицинскую, но и социальную значимость проблемы.

Одним из актуальных вопросов, связанных с инфекциями, обусловленными ВПГ, является его эпидемиология. К сожалению, в России (в том числе и в Сибирском регионе) не проводился массовый скрининг по оценкам носительства герпесвирусов (ГВ) и клинических форм ГИ у населения, как и анализ влияния персистирующего вирусного носительства на популяционный иммунитет жителей Сибири. Это подтверждается данными глобального клинико-эпидемиологического исследования 1HMF (International Herpes Management Forum), в котором нет информации по России, что объясняется отсутствием учета заболеваемости герпетических инфекцией и носительства вируса [115, 219]. Эпидемиологическая оценка в работах в основном имеет вводный или описательный характер для решения иных задач и основывается на данных годовых медицинских статистических отчетов, как известно, фиксирующих только показатели обращаемости по установленным нозологиям. Вследствие тесной связи герпетических инфекций, выражающейся в пожизненной вирусной персистенции, с иммунитетом хозяина, вирус может служить своеобразным маркером иммунных нарушений как у отдельно взятого человека, так и в популяции в целом. Если учесть, что в последнее время наблюдается неуклонный рост иммунных нарушений у населения и распространенности ГИ, то с этих позиций становится очевидной необходимость дальнейшего изучения ГИ в качестве своеобразного показателя частоты иммунодефицитных состояний и его влияния на популяционный иммунитет населения. С другой стороны, взаимоотношения между ГИ и иммунной системой хозяина могут представляться неким симбиозом, что требует детального изучения и понимания данной проблемы. Возможно, что в результате нарушения выстроенного симбиоза формируются клинические эпизодическое и рецидивирующее течение ГИ.

В настоящее время накоплены результаты научных исследований о том, что некоторые хронические персистирующие вирусные инфекции вызывают поляризацию иммунного ответа по ТИ2-пути с высоким уровнем продукции интерлейкина (IL) 4, IL5, IL 13 и иммуноглобулина (Ig) Е [81, 82]. Возможно, это связано с адаптацией вируса к условиям, в которых ему «невыгодны» активный клеточный интерферон-опосредованный иммунный ответ и реакции естественного иммунитета, вследствие чего вирус может быть распознанным натуральными киллерами (NK) и цитотоксическими Т-лимфоцитами. Следовательно, инфекционные и аллергические болезни развиваются на основе перекрывающихся иммунологических механизмов. С иммунологической точки зрения имеются достаточные основания для объяснения связи между ГИ и аллергическими болезнями [84, 193, 198, 199, 203]. Формирование аллергической патологии непосредственно определяется повышенной активностью цитокинов, секретируемых ТЬ2-лимфоцитами, под влиянием которых образуется ключевой субстрат аллергических реакций - IgE. Для хозяина - это моделирование активного гуморального иммунного ответа на антигены с вероятным риском развития аллергической сенсибилизации.

Согласно данным эпидемиологических исследований, в последние десятилетия наблюдается значительный рост частоты аллергических заболеваний [282]. Вместе с тем, существующие в настоящее время сведения об иммунных механизмах моделирования риска развития аллергических болезней у лиц с хроническими вирусными инфекциями (в частности ГИ) недостаточны и требуют глубокого изучения их молекулярных основ.

Пристального внимания заслуживает факт вовлеченности одних и тех же генов в этиологию и патогенез как инфекционных, так и аллергических болезней. Характер и степень модифицирующего влияния ГИ на иммунную систему хозяина зависят от конкретных условий, в том числе генетических особенностей индивидуума. Работы, посвященные оценке роли полиморфизма генов-модификаторов продукции основных цитокинов иммунного ответа при ГИ, разнонаправлены и не учитывают латентного периода ГИ. В связи с этим анализ однонуклеотидных полиморфизмов генов-модификаторов иммунного ответа может быть высокоинформативным при решении вопроса о механизмах моделирования риска аллергической заболеваемости у лиц с разными типами клинических проявлений ГИ. Исследование полиморфизма генов внутриклеточных сигнальных молекул регуляторных цитокинов представляется важным и перспективным для разработки и понимания развития и прогноза аллергической заболеваемости в условиях массовой инфицированности герпесвирусами, механизмов реактивации ГИ, новых подходов к терапии и профилактике рецидивирующего характера инфекции у населения.

Используемые методы диагностики, прогноза течения и терапии ГИ, включая часто необоснованное применение комбинаций противовирусной терапии и отечественных иммуномодулирующих препаратов, не могут на современном этапе решить ни одной из перечисленных выше задач.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: охарактеризовать иммунологические механизмы реактивации герпетической инфекции и ее связь с аллергопатологией.

ЗАДА ЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Оценить роль инфекции, вызванной вирусами герпеса типов 1 и 2, в развитии аллергопатологии.

2. Оценить взаимосвязь аллергической сенсибилизации и продукции ^Е и 1Ь4 с характером течения герпетической инфекции.

3. Исследовать особенности продукции ШЧГу, №N01, функциональной активности 1МК-клеток и Т-лимфоцитов в периоды обострения и клинической ремиссии герпетической инфекции у пациентов с рецидивирующим течением герпеса и бронхиальной астмой.

5. Оценить взаимосвязь аллельного полиморфизма генов ТВХ21, ТЬЯ9, 1Ы2В, №N0, 1Ь4, 1Ь4ЯА с характером течения герпетической инфекции и бронхиальной астмой.

6. Проанализировать ассоциацию полиморфных вариантов генов ШЫС, 1Ь4, 1Ь4ЯА с наличием аллергической сенсибилизации у лиц с рецидивирующим течением герпетической инфекции.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Показано, что у пациентов с бронхиальной астмой частота инфицированности ВПГ1 составляет 100%, что позволяет рассматривать ГИ как один из вероятных этиологических факторов аллергопатологии. У 31% пациентов, страдающих бронхиальной астмой, ГИ протекает в рецидивирующей, у 42% - в эпизодической форме. Независимо от клинического течения ГИ (включая латентное течение инфекционного процесса) выявлен высокий уровень специфического к ВПГ1, -2 в крови у обследованных лиц в возрасте 46-60 лет и гетерогенные его показатели у пациентов в возрасте 18-45 лет. Установлено, что у 61% обследованных имеет место реактивация (из них у 18,5% - рецидивирующая форма) ГИ, у 39% - латентное течение инфекции.

Впервые проведен анализ выраженности аллергической сенсибилизации к неинфекционным аллергенам в зависимости от клинического течения ГИ. Установлено, что общий показатель аллергической сенсибилизации к неинфекционным аллергенам составляет 74%, включая лиц с диагностированными аллергическими заболеваниями, из них у в 49% случаев положительная аллергическая сенсибилизация к неинфекционным аллергенам установлена впервые. Обоснована высокая частота встречаемости поливалентной аллергической сенсибилизации у лиц с рецидивирующим течением ГИ. Выявлена корреляция содержания ^Е и 1Ь4 в сыворотке крови с титром специфических антител к ВПГ1 в период эпизодической реактивации ГИ. Показана высокая частота манифестных форм ГИ у лиц с положительной латентной аллергической сенсибилизацией.

Установлены особенности продукции интерферонов №N(1, №N7 и цитотоксической активности ИК-лимфоцитов в периоды обострения и ремиссии рецидивирующей ГИ у пациентов без аллергической сенсибилизации и с бронхиальной астмой. Впервые с помощью сравнительного анализа уровня регуляторных цитокинов Т№а, №N7, 1Ь4 и соотношения 1РЫу/1Ь4, оценки пролиферативной активности Т-лимфоцитов у обследованных лиц выделены критерии реактивации ГИ.

Выделены дифференциальные типы индуцированного вирусным антигеном иммунного ответа, позволяющие прогнозировать течение ГИ и обосновывать адресную терапию для пациентов с рецидивирующей формой инфекции. Для больных бронхиальной астмой предложены критерии контроля реабилитации интерферонопродукции и функциональной активности ИК-клеток в ранний пост- и межрецидивный период ГИ.

Впервые установлена связь полиморфизма генов цитокинов /^Ж/, 1Ь4, 1Ы2В, рецепторов ТЬЯ9, 1Ь4ВА и транскрипционного фактора ТВХ21 у обследованных лиц, имеющих серопозитивные титры специфических антител к ВПГ, с рецидивирующим течением ГИ. Обоснованы ассоциации полиморфизма генов 1Ь4, 1Ъ4ВА у пациентов с ГИ с формированием аллергического статуса (аллергической сенсибилизации).

Теоретическая и практическая значимость. Результаты исследования, их анализ и выводы расширяют имеющиеся представления о патогенетических механизмах формирования, реактивации и особенностях течения ГИ, а также адекватности терапии. Выявлены достоверные дифференциально-диагностические критерии, позволяющие повысить качество диагностики, адекватность и эффективность проводимого патогенетически обоснованного лечения ГИ и аллергических заболеваний, сочетанных с ГИ. На основе полученных результатов разработана модифицированная схема лечения, которая может быть рекомендована для широкого применения у пациентов, имеющих сочетание аллергии с ГИ.

ГБОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России, практическую деятельность врачей общей врачебной практики и узких специалистов поликлиник Медицинского объединения «Центр семейной медицины» (г. Томск), МЛПУ «Межвузовская больница» (г. Томск).

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. Инфицированность вирусами простого герпеса типов 1 и 2 способствует формированию аллергической сенсибилизации к неинфекционным антигенам (преимущественно к бытовым и пыльцевым аллергенам). У 61% обследованных герпетическая инфекция протекает в реактивной форме, из них у 18,5% имеет рецидивирующий характер. Инфицированность ВПГ1 при бронхиальной астме составляет 100%. Рецидивирующее течение герпетической инфекции отмечается у 31,0% пациентов с бронхиальной астмой и в 22,9% случаев при положительной аллергосенсибилизации.

2. ВПГ1, -2 инициирует ТЬ2-зависимое воспаление за счет повышенного синтеза специфических антител к герпесвирусным антигенам, IgE, продукции IL4 как в условиях латентного течения, так и клинической манифестации герпетической инфекции независимо от стажа заболевания.

3. Характер течения герпетической инфекции у лиц без аллергической сенсибилизации и пациентов с бронхиальной астмой ассоциирован с гетерогенными вариантами изменений количества и функциональной активности NK-клеток и Т-лимфоцитов, содержания IFNa, IFNy, IL4 и баланса IFNy/IL4 как в сыворотке крови, так и в индуцированных тестах in vitro с вирусным антигеном. У пациентов, страдающих бронхиальной астмой, клиническая манифестация ГИ сопровождается достоверным повышением содержания интерферонов в сыворотке крови с динамическим его понижением в ранний восстановительный период на фоне увеличения продукции IL4 и снижения функциональной активности NK-лимфоцитов.

4. К рецидивам герпетической инфекции предрасполагает носительство генотипа Т/С и аллеля С гена IFNG, генотипа Т/Т и аллеля Т гена TLR9, генотипа G/A и аллеля G гена ТВХ21, генотипа Т/С и аллеля Т гена IL4. Рецидивирующее течение герпетической инфекции у пациентов, страдающих бронхиальной астмой, ассоциировано с увеличением частоты встречаемости генотипа С/С и аллеля С гена IL12B, генотипа С/С и аллеля С гена IFNG, генотипа Т/Т и аллеля Т гена IL4, генотипа /// и аллеля I гена IL4RA по сравнению с таковой у лиц с латентным течением инфекции.

5. Риск формирования аллергической сенсибилизации у пациентов с эпизодической реактивацией и рецидивирующим течением герпетической инфекции ассоциирован с модулирующим влиянием полиморфных вариантов генов IL4 (Т/Т) и IL4RA (V/V) на продукцию IgE.

6. Динамика индуцированной продукции IFNy, 1L4 и пролиферации Т-лимфоцитов in vitro в тестах с вирусным антигеном являются доступными клинико-лабораторными критериями эффективности и прогноза противовирусной и иммуномодулирующей терапии.

7. Критериями для назначения комбинированной аллерген-специфической иммунотерапии у пациентов с аллергическими заболеваниями (аллергический ринит, бронхиальная астма) с эпизодической реактивацией и рецидивирующим течением ГИ являются снижение содержания IFNa в мукозальном секрете и повышение титров специфических антител к ВПГ1 в крови на фоне стандартых схем получения доз лечебного (причинного) аллергена.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Основные положения диссертации докладывались и обсуждались на Между народной конференции

Иммунотерапия: от теории к практике» (Москва, 2005); Российской научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в

Томске» (Томск, 2008); I Международной конференции «Проблемы диагностики, лечения и профилактики герпесвирусных инфекций»

Москва, 2008); Областной научно-практической конференции «Вопросы эпидемиологии, клиники, лечения и профилактики вирусных гепатитов, ВИЧ-инфекций» (Томск, 2008); Областной конференции «Новые подходы к терапии герпесвирусной инфекции» (Томск, 2009); Городской научно-практической конференции «Обоснованность длительных курсов противовирусной терапии у пациентов с рецидивирующими формами герпетической инфекции» (Томск, 2009); Всероссийской научной конференции «Молекулярно-генетические основы функционирования цитокиновой сети в норме и при патологии» (Новосибирск, 2010); Областной научно-практической конференции «Современные подходы к лечению аллергических заболеваний» (Томск, 2011).

Публикации. По теме диссертации опубликованы 23 научные работы, в том числе 14 в журналах, рекомендованных ВАК РФ. Получен патент на изобретение №2383019 от 09.12.2008 г. Опубликована 1 монография.

Структура диссертации. Диссертация изложена на 226 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы «Материал и методы», главы собственных результатов и их обсуждения и заключения. Список литературы содержит 288 наименований, в том числе 132 - отечественные и 156 - зарубежные источники. Работа иллюстрирована 20 рисунками, включает 22 таблицы.

Заключение диссертационного исследования на тему "Иммунологические механизмы реактивации герпетической инфекции и ее связь с аллергопатологией"

вы воды

1. Массовая инфицированность вирусами простого герпеса (97,08% ВПГ1, 38,68% ВПГ2) изменяет популяционный иммунитет, отменяя толерантность к неинфекционным антигенам и способствуя формированию аллергической сенсибилизации. В 39% случаев отмечается латентное течение герпетической инфекции или состояние динамического равновесия «вирус - иммунная система хозяина», у 61%) обследованных герпетическая инфекция протекает в клинически явной форме, из них у 18,5%) диагностируется рецидивирующее течение инфекции. Инфицированность лиц с бронхиальной астмой ВПГ1 составляет 100%).

2. У 64% обследованных пациентов обнаружены высокие титры специфических IgG к ВПГ1, -2 (1 : 1600 - 1 : 12800), у 3% - отсутствие противогерпетических антител в крови, совпадающее с отсутствием клинических проявлений герпетической инфекции в течение жизни. Титры специфических антител к ВПГ1 не зависят от стажа клинических проявлений и типа течения герпетической инфекции, являются «антителами-свидетелями» активности гуморального иммунного ответа, начиная с периода латентного течения инфекции.

3. Положительная аллергическая сенсибилизация к неинфекционным аллергенам обнаруживается в 74% случаев, из них в 49% аллергические заболевания ранее не диагностировались. Преобладает аллергическая сенсибилизация к бытовым и пыльцевым аллергенам. Рецидивирующее течение герпетической инфекции устанавливается в 22,9% случаев при положительной аллергосенсибилизации и у 31,0% пациентов с бронхиальной астмой. В отсутствие аллергической сенсибилизации рецидивирующее течение герпетической инфекции выявлено в 11,5% случаев. В период манифестного рецидивирующего течения герпетической инфекции число лиц с положительной сенсибилизацией к неинфекционным аллергенам увеличивается до 46%. Эпизодическая реактивация герпетической инфекции связана с повышением уровней IgE, титра специфических антител к ВПГ1 в крови, IL4 как в сыворотке крови, так и в индуцированных тестах с вирусным антигеном.

5. Рецидивирующие формы герпетической инфекции независимо от наличия аллергической сенсибилизации характеризуются однотипными изменениями индуцированной продукции IFNy, IL4, TNFa in vitro и снижением коэффициента IFNy / IL4. Гетерогенность значений коэффициента IFNy / IL4 позволяет дифференцировать типы иммунного ответа (гуморальный, клеточный, комбинированный) у лиц с рецидивирующим течением герпетической инфекции в индуцированных тестах с вирусным антигеном и использовать их для прогноза течения инфекции и подбора индивидуальной адресной терапии.

6. У лиц с рецидивирующим течением герпетической инфекции частота носительства генотипа Т/С и аллеля С гена IFNG, генотипа Т/Т аллеля Т гена TLR9, генотипа G/A и аллеля G гена ТВХ21, генотипа Т/С и аллеля Т гена IL4 выше по сравнению с таковыми у лиц с латентным течением инфекции. Рецидивирующее течение герпетической инфекции у пациентов, страдающих бронхиальной астмой, ассоциировано с увеличением частоты носительства генотипа С/С и аллеля С гена IL12B, генотипа С/С и аллеля С гена IFNG, генотипа Т/Т и аллеля Т гена IL4, генотипа /// и аллеля I гена IL4RA по сравнению с таковым у лиц с латентным течением инфекции.

8. Об эффективности противовирусной и иммуномодулирующей терапии, связанной с дальнейшим прогнозом инфекционного процесса, свидетельствуют повышение пролиферативной активности Т-лимфоцитов, снижение продукции IL4 и повышение продукции IFNy и TNFa в индуцированных тестах с вирусным антигеном in vitro.

9. Эффективность аллергенспецифической иммунотерапии у лиц с аллергическим ринитом и бронхиальной астмой, ассоциированными с герептической инфекцией, зависит от частоты клинических манифестаций инфекции, подтверждается снижением уровня IFNa в мукозальном секрете, повышением титров специфических антител к ВПГ1 в крови на фоне стандартной схемы получаемых доз лечебного аллергена.

Практические рекомендации.

• Пациентам, имеющим сочетание аллергических заболеваний с эпизодической или рецидивирующей герпетической инфекцией, на первом этапе целесообразно проведение коррекции интерферонового статуса с помощью адерсных иммуномодуляторов.

• Набор дозы ПЗА необходимо сочетать с назначением заместительного рекомбинантного IFNa в течение всего цикла. В случае обострения герпетической инфекции по время АСИТ следует назначать курс противовирусной терапии ацикловиром (валтрексом) с поддерживающей схемой до конца основного курса АСИТ и контроля динамики специфического IgG к ВПГ 1,-2.

• Пациентам, имеющим сочетание аллергии с герпетической инфекцией, требуется динамический контроль содержания IgG к ВПГ1, -2 в крови на разных этапах набора максимальной дозы причинно-значимого аллергена.

• Терапия должна быть индивидуальной, комплексной и основываться на конкретных клинических проявлениях вирусной инфекции, на оценке индуцированной вирусным антигеном продукции IFNa, IFNy и IL4 in vitro.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Черевко, Наталья Анатольевна

1. Аковбян В.А. Генитальный герпес: современные проблемы и пути их решения / В.А. Аковбян, С.А. Масюкова, Е.В. Владимирова и др. // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2003.-№1(5).-С. 4-18.

2. Александровский A.B. Клинико-иммунологическая характеристика новорожденных с герпесвирусной инфекцией / A.B. Александровский // Автореф. дис. . канд. мед. наук. М.: Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова, 1996. - 22 с.

3. Алешкин В.А. Связь уровней мРНК TLR-2 и -4 с изменениями иммунноглобулинового профиля урогенитального тракта при урогенитальном хламидиозе у женщин / В.А. Алешкин // Иммунология. 2009. -№.3 - С. 165-170.

4. Баринский И.Ф. Вакцины как средство иммунокоррекции при герпетических вирусных инфекциях / И.Ф. Баринский, A.A. Каспаров, М.А. Самгин и др. / Рос. журн. кожн. и венерич. болезней. Прил. «Герпес». 2007. - №1. - С. 26-29.

5. Баринский И.Ф. Герпес: этиология, диагностика, лечение / И.Ф. Баринский, А.К. Шубладзе, A.A. Каспаров, В.Н. Гребенюк. -М.: Медицина, 1986. 272 с.

6. Баринский И.Ф. Герпес-инфекция / И.Ф. Баринский. Мн.: Наука и техника, 1986. - 327 с.

7. Баринский И.Ф. Роль герпетической инфекции в патологии человека / И.Ф. Баринский // Врач. 1995. - №4. - С. 8-15.

8. Белан Э.Б. Th-фенотип иммунного ответа как фактор риска развития бронхиальной астмы у дутей раннего возраста / Э.Б. Белан // Цитокины и воспаление. 2004. - Т. 3, №4. - С. 50-52.

9. Бикбулатов P.M. Факторы гуморального иммунитета в патогенезе рецидивов хронической герпетической инфекции / P.M. Бикбулатов, С.А. Демидова, Т.Я. Лярская // Вопросы вирусологии. 1982. - №3. - С. 323-327.

10. Боровиков В. Statistica. Искусство анализа данных на компьютере / В. Боровиков. СПб., 2001. - 360 с.

11. Бренда И. Бартлет. Схемы лечения фамцикловиром пациентов с частыми рецидивами генитального герпеса: исследование RELIEF / Российский журнал кожных и венерических болезней. 2010. - №1. -С. 31-40.

12. Брызжикова Т.С. Функциональная активность нейтрофильных гранулоцитов у больных рецидивирующим герпесом / Т.С. Брызжикова, И.М. Алешина, В.А. Исаков // Бюл. эксперим. и клин, медицины. 1995. - №9. - С. 5-8.

13. БурдинаЛ.В., КорюкинаИ.П. Взаимовлияние аллергического процесса и герпетической инфекции у дошкольников / Л.В. Бурдина, И.П. Корюкина // Иммунитет и болезни: от теории к терапии: Материалы междунар. конгресса. М, 2006. - С. 197.

14. Ванько П.Ф. Иммунный статус новорожденных детей с генерализованной формой герпетической инфекции / П.В. Ванько, Н.И. Кудашев, Ч. Шейкар и др. // Иммунология. 1996. - №2. -С. 7-12.

15. Вестморленд Д. Вирус герпеса простого / Д. Вестморленд // В кн. «Врожденные, перинатальные и неонатальные инфекции»: Пер. с англ. Под ред. А. Гриноу, Дж. Осборна, Ш. Сазерленд. М.: Медицина, 2000. - 288 с.

16. Вирус простого герпеса и его роль в патологии человека / под ред. А.Г. Коломиец, Ю.К. Малевич. Минск: Наука и техника, 1986.-262 с.

17. Вирусология / Под ред. Б. Филдса, Д. Найпа. М.: Мир, 1989. -Т. 1. -492 с.

18. Вотяков В.И. Патогенез и терапия персистентных инфекций, протекающих с синдромами иммунодефицитов / В.И. Вотяков,

19. A.Г. Коломиец // Клиническая медицина. 1991. - №5. - С. 29-37.

20. Гервазива В.Б. Роль респираторных вирусов в развитии аллергии /

21. B.Б. Гервазива, В.В. Сверановская, Ю.А. Шерншис, Б.Ф. Семенов // Цитокины и воспаление. 2003. - №2(3). - С. 3-8.

22. Герпес (этиология, диагностика, лечение) / И.Ф. Баринский, А.К. Шубладзе, A.A. Каспаров. М.: Медицина, 1986. - 272 с.

23. Герпетическая инфекция: вопросы патогенеза, методические подходы к терапии: руководство для врачей / под ред. М.Г. Романцова, С.Ю. Голубева. М., 1997. - 100 с.

24. Герпетическая инфекция человека, вызываемая ВПГ 1/2 (этиология, патогенез, клиника, диагностика, лечение, профилактика) / Н.Д. Коломиец, В.А. Матвеев, В.В. Шевцова и др. Минск: БелМАПО, 2008. - 40 с.

25. Гланц С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. Пер. с англ. - М.: Практика. - 1998. - 459 с.

26. Гмурман В.Е. Теория вероятности и математическая статистика /

27. B.Е. Гмурман. М.: Высшая школа, 2006. - 284 с.

28. Гордиенко С.П. Приемлемый для клинической практики метод оценки активности естественных и антителозависимых киллерных клеток / С.П. Гордиенко // Лаб. дело. 1983. - №9. - С. 45-47.

29. Горячкина Л.А. Локальная аллергенспецифическая иммунотерапия / Л.А. Горячкина, Н.М. Ненашева, О.С. Дробик, Е.Р. Бжегутова // Методические рекомендации. М., 2009. - 30 с.

30. Гранитов В.М. Герпесвирусная инфекция / В.М. Гранитов. -Н. Новгород: Медицинская книга, 2001. 88 с.

31. Гущин И.С. Аллергический ринит (пособие для врачей). М., 2002. -72 с.

32. Гущин И.С. Аллергическое воспаление и его фармакологический контроль / И.С. Гущин, О.М. Курбачева // Методическое пособие: М., 1998.-252 с.

33. Дмитриев Г.А. Обнаружение герпетических вирусов в гонококках / Г.А. Дмитриев // Вестн. дерматологии и венерологии. 1986. - №5.1. C. 23-24.

34. Долгих М.С. Герпесвирусные инфекции у иммунодефицитных пациентов / М.С. Долгих // Терапевтический архив. 2001. -№11.-С. 59-65.

35. Долгих Т.И., Носкова Ф.В. Оппортунистические инфекции у детей (вопросы диагностики, клиники и лечения). Омск: Изд-во ОГМА, 1999.-99 с.

36. Евдокимова Т.А. Влияние хронической описторхозной инвазии на клиническое течение и иммунный ответ при атопической бронхиальной астме у детей / Т.А. Евдокимова, J1.M. Огородова // Педиатрия. 2005. - №6. - С. 12-14.

37. Елисеева М.Ю., Мынбаев O.A., Масихи К.Н. Современные взгляды на герпетическую инфекцию // Проблемы репродукции. 2009. -Т. 15. -№1. - С. 25-35.

38. Ершов Ф.И. Лечение вирусных инфекций / Ф.И. Ершов, Н.П. Чижов // Клин, фармакология и терапия. 1995. - №4. - С. 75-78.

39. Ершов Ф.И. Противовирусные средства / Ф.И. Ершов // Клин, фармакология и терапия. 1995. - №4. - С. 72-75.

40. Ершов Ф.И. Ранние цитокиновые реакции при вирусных инфекциях / Ф.И. Ершов, А.Н. Наровлянский, М.В. Мезенцева // Цитокины и воспаление. 2004. - №1. - С. 3-6.

41. Ершов Ф.И. Современный арсенал антигерпетических лекарственных средств / Ф.И. Ершов, Т.П. Оспельникова // Инфекции и антимикробная терапия. 2001. - №4. - С. 100-104.

42. Жданов В.М. Эволюция вирусов. М.: Медицина, 1990. - 376 с.

43. Ильина Н.И. Аллергия болезнь цивилизации / Н.И. Ильина // Качество жизни. Медицина. - 2005. - №4. - С. 10-14.

44. Иммунодефицитные состояния / Под ред. B.C. Смирнова и И.С. Фрейдлина. СПб: «Фолиант», 2000. - 568 с.

45. Иммунология инфекционного процесса (руководство для врачей) / Под ред. В.И. Покровского, С.П. Гордиенко, В.И. Литвинова. М.: РАМН, 1994.-305 с.

46. Инфекционные болезни / А.Г. Рахманова, В.К. Пригожина, В.А. Неверов. СПб., 1995. - 304 с.

47. Исаков В.А. Герпес: патогенез и лабораторная диагностика / В.А. Исаков. М., 1999. - 184 с.

48. Исаков В.А., Архипова Е.И., Исаков Д.В. Герпесвирусные инфекции человека: руководство для врачей. СПб.: Спец. лит. - 2006. -302 с.

49. Исаков В.А., Сафонова М.М. Клиника и лечение генитального герпеса. СПб., 1997.- 33 с.

50. Казанцев А.П. Заболевания, вызываемые вирусом простого герпеса / А.П. Казанцев // Воен.-мед. журнал. 1984. - №3. - С. 63-66.

51. Каримова И.М. Герпесвирусная инфекция: диагностика, клиника, лечение / И.М. Каримова. М.: Медицинское информационное агентство, 2004. - 120 с.

52. Кашкин К.П. Цитокины иммунной системы: основные свойства и иммунобиологическая активность / К.П. Кашкин // Клин. лаб. диагностика. 1998. - №11. - С. 21-32.

53. Кетлинский С.А. Цитокины мононуклеарных фагоцитов в регуляции реакции воспаления и иммунитета / С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина // Иммунология. 1995. - №3. - С. 30-43.

54. Козлова В.И., Пухнер А.Ф. Вирусные, хламидийные и микоплаз-менные заболевания гениталий. М., 1997. 536 с.

55. Корюкина И.П. Анализ факторов риска в развитии аллергопатологии у детей Пермского региона / И.П. Корюкина, Л.В. Бурдина, М.С. Семухина // Здоровье и образование: Материалы II Всеросс. науч.-практ. конф. Пермь, 2004. - С. 121-124.

56. Кривицкая В.З. Иммунопатологический аллергический ТЬ2-тип противовирусного гуморального иммунного ответа у детей с респираторно-синцитиальной вирусной инфекцией / В.З. Кривицкая,

57. A.А. Соминина, В.Ф. Суховецкая и др. Цитокины и воспаление. -2004. - Т. 3, №3. - С. 34-40.

58. Кудашов Н.И. Клинико-диагностические аспекты внутриутробной герпесвирусной инфекции / Н.И. Кудашов //Вестн. акушера-гинеколога. 1993. - № 1-2. - С. 5-12.

59. Кузнецов В.А. Распознавание NK-клетками клеток-мишеней без помощи специфических NK-рецепторов. Биофизическая модель /

60. B.А. Кузнецов // Иммунология. 1992. - №3. - С. 8-12.

61. Лабораторные методы исследования в клинике: справочник / Под. ред. В.В. Меньшикова. М.: Медицина, 1987. - 395 с.

62. Лакин Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М.: Высшая школа, 1980. -309 с.

63. Лебедев В.В., Никулин Л.А., Александрова O.K., Сивак В.В., Боровикова Е.В. Герпетическая инфекция. 2000 // www.infectology.ru /RUK/herpes/index.asp.

64. Лимфоциты: выделение, фракционирование и характеристика./ Под ред. Д.Б. Натвига, П. Перлмана, X. Визгеля. М.: Медицина, 1980. - 232 с.

65. Ломакин М.С. NK-клетки как фактор иммунологического надзора / М.С. Ломакин, И.Н. Майский // Успехи современной биологии. -1985,-№2. -С. 249-261.

66. Львов Н.Д. Актуальные проблемы герпесвирусных инфекций / Н.Д. Львов, A.B. Мельниченко, A.A. Никитина // Вопросы вирусологии. 2000. - №4. - С. 7-13.

67. Львов Н.Д. Изоляция из клинического материала штаммов вируса герпеса простого, обладающих резистентностью к ацикловиру / Н.Д. Львов, В.Л. Андронова, H.A. Леонтьева, Г.А. Галегов // Вопросы вирусологии. 1999. - №6. - С. 247-249.

68. Львов Н.Д. Комбинированная терапия герпесвирусных инфекций: экспериментальные и клинические данные / Н.Д. Львов, Е.О. Самойлович, И.Ф. Баринский // Вопросы вирусологии. 1992. -№1. - С. 8-12.

69. Львова И.И. Внутриутробные инфекции в практике педиатра: Пособие для врачей / И.И. Львова, И.П. Корюкина, Г.В. Батракова и др. Пермь, 2004. - 194 с.

70. МайчукЮ.Ф. Герпесвирусные заболевания глаз / В кн.: «Неизвестная эпидемия: герпес». Смоленск, 1997. - С. 62-75.

71. Макацария А.Д., Долгушин Н.В. Герпетическая инфекция, антифос-фолипидный синдром и синдром потери плода. М.: Триада-Х, 2000. - 80 с.

72. Малиновская В.В. Интерфероновый статус при рецидивирующем генитальном герпесе / В.В. Малиновская, Е.В. Темичева, А.Ф. Пана-сюк и др. // Вопросы вирусологии. 1991. - №3. - С. 254-256.

73. Малярская М.М. Проблема генитального герпеса в гинекологии и акушерстве: автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 1997. 24 с.

74. Масалова О.В. Изменение показателей гуморального и клеточного иммунитета у пациентов с хроническим гепатитом С различной тяжести / О.В. Масалова, О.В. Абдулмеджинова, К.В. Моргунов и др. // Вопросы вирусологии. 2003. - Т. 48, №3. - С. 15-19.

75. Мачарадзе Д.Ш. Вирусы и астма: больше вопросов, чем ответов / Лечаший врач. 2010. - №10. - С. 58-62.

76. Мезенцева М.В. Особенности продукции интерферонов и цитокинов при генитальном герпесе / Мезенцева М.В., Щербенко В.Э., Наровлянский А.Н. и др. // Вопросы вирусологии. 2003. - Т. 48(6).- С. 33-37.

77. Мошкалов A.B. Клинико-эпидемиологические аспекты генитального герпеса / A.B. Мошкалов // Вестн. Дерматологии. 1992. - №8. -С. 25-32.

78. Мурзич A.B. Герпетическая инфекция / A.B. Мурзич, М.А. Голубев // Южно-Российский мед. журнал. 1998. - №3. - С. 26-30.

79. Наследникова И.О. Дизрегуляция клеточного звена иммунитета при хроническом вирусном гепатите / И.О. Наследникова, Н.В. Рязанцева, Е.В. Белобородова и др. // Бюл. СО РАМН. 2005. -№4. - С. 59-63.

80. Наследникова И.О. Хронический вирусный гепатит С: иммунорегу-ляторные цитокины и хронизация инфекции / И.О. Наследникова, Е.В. Белобородова, Н.В. Рязанцева и др. // Клиническая медицина. -2005. №9. - С. 40-44.

81. Новицкий В.А. Герпетические вакцины / В.А. Новицкий, Н.Л. Пушкаревская, И.Ф. Баринский // Вопросы вирусологии. 1987.- №3. С. 261-277.

82. Огородова Л.М. Клинико-генетический анализ изменчивости уровня интерлейкина-5 у больных бронхиальной астмой / Л.М. Огородова,203

83. О.С. Кобякова, М.Б. Фрейдин и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2001. - Прил. 1. - С. 66-68.

84. Ожегова Д.С. Функциональная вариабельность генов подверженности инфекционным заболеваниям: автореф. дис. . канд. мед. наук: Томск, 2009. 21 с.

85. Основы медицинской бактериологии, вирусов и иммунологии / под. ред. Г.М. Шуба. М.: Логос, 2001. - 264 с.

86. Петров Р.В. Интерлейкинзависимые иммунодефициты человека / Р.В. Петров, A.B. Ковальчук, A.C. Павлюк // Иммунология. 1987. -№9. - С. 20-23.

87. Пичугина Л.В. Особенности системы IFNg у пациентов с высоким рецидивированием простого герпеса / Л.В. Пичугина, Б.В. Черно-усов, Б.В. Пинегин // Цитокины и воспаление. 2005. - Т. 4. - №33-С. 28-32.

88. Покидышева Л.Н. Действие интерферонов на репродукцию вируса простого герпеса в опытах in vitro / Л.Н. Покидышева, Е.В. Темичева // Вопросы вирусологии. 1986. - № 1. - С. 81-83.

89. Потекаев Н.С. Опыт комбинированного лечения рецидивирующего герпеса ларифаном и герпетической вакциной / Н.С. Потекаев, H.H. Носик, М.А. Самгин и др. // Клин, медицина. 1992. - №1. -С. 67-70.

90. Практикум по медицинской биотехнологии: учебное пособие / под ред. В.Ю. Сереброва. Томск, 2007. - 93 с.

91. Разнатовский И.М. Генерализованные формы герпеса при хроническом лимфолейкозе / И.М. Разнатовский, Г.Н. Михеев,

92. B.В. Ястребов // Вестн. дерматологии и венерологии. 1987. - №6.1. C. 41-43.

93. Рахманова А.Г., Кирпичникова Г.И., Неверов В.А., Ремезов А.П. Этиопатогенез, лабораторная диагностика и терапия герпесвирусных инфекций. СПб., 2003. - 47 с.

94. Рязанцева Н.В. Цитокины и противовирусный иммунитет / Н.В. Рязанцева, В.В. Новицкий, В.В. Белоконь, А.П. Зима и др. // Успехи физиологических наук. 2006. - №4. - С. 1-11.

95. Саидов М.З. Оценка корреляционных взаимосвязей между CD-позитивными клетками и экспрессией TLR-рецепторов при полипозном риносинусите / М.З. Саидов, Б.Х. Давудова, С.В.Климова и др. // Иммунология. 2010. - Т. 31. - №1. -С. 28-34.

96. Саидов М.З. Экспрессия TLR-рецепторов в носовых полипах и на клетках периферической крови у больных полипозным риносинуситом / М.З. Саидов, Б.Х. Давудова, C.B. Климова и др. // Иммунология. 2009. - Т. 30. - №5. - С. 272-278.

97. Семененя И.Н. Естественные киллерные клетки (ЕКК) как звено в иммунной системе организма / И.Н. Семененя // Иммунология. -1991.-№4.-С. 4-6.

98. Семенова Т.Б. Состояние противовирусного иммунитета у больных рецидивирующим герпесом / Т.Б. Семенова, Т.А. Посевая, Л.Г. Карпович и др. // Вест, дерматологии и венерологии. 1987. - №6. -С. 43-47.

99. Сенников C.B. Экспрессия генов и продукция основных иммуно-регуляторных цитокинов при вирусном гепатите С/ C.B. Сенников, Д.Х. Курамшин, Н.П. Толоконская, В.А. Козлов // Цитокины и воспаление. 2003. - Т. 2, №4. - С. 10-13.

100. Симбирцев A.C. Цитокины в иммунопатогенезе и лечении аллергии / A.C. Симбирцев // Рос. аллергол. журн. 2007. - №1. - С. 5-19.

101. Скворцова В.А. Роль аллергии при вирусных инфекциях /

102. B.А. Скворцова // Врачебное дело. 1968. - №10. - С. 19-27.

103. Сочнев A.M. Лимфоцитотоксический тест как метод идентификации субпопуляций Т-лимфоцитов моноклональными антителами / A.M. Сочнев, И.Е. Бельченко, A.M. Бурштейн // Лаб. дело. 1989. -№3. - С. 29-31.

104. Титов, Л.П., Казак, Н.Ф., Канашкова, Т.А. и др. Вирусология (характеристика возбудителей, патогенез и диагностика вирусных инфекций). Минск: БГМУ, 2003. 76 с.

105. Трушинская Г.Н. Естественные цитотоксические лимфоциты и их роль в устойчивости к вирусным инфекциям / Г.Н. Трушинская, Л.В. Губарева // Вопросы вирусологии. 1987. - №2. - С. 142-151.

106. Фрейдин М.Б. Геномные основы подверженности атопическим заболеваниям / М.Б. Фрейдин, В.П. Пузырев // Молекулярная медицина. 2007. - №3. - С. 26-35.

107. Фрейдин М.Б. Сравнительный анализ структуры наследственной компоненты подтвержденности туберкулеза у тувинцев и русских / М.Б. Фрейдин, A.A. Рудко, О.В. Коновалова и др. // Молекулярная биология. 2006. - Т. 40, №2. - С. 252-262.

108. Фрейдлин И.С. Интерлейкин-12 ключевой цитокин иммуноре-гуляции / И.С. Фрейдлин // Иммунология. - 1999. - №4. - С. 5-9.

109. Фрейдлин И.С. Регуляторные функции провоспалительных цито-кинов и острофазных белков / И.С. Фрейдлин, П.Г. Назаров // Вестн. РАМН. 1999. - №5. - С. 28-32.

110. Хаитов P.M. Иммунология / Р.М.Хаитов, Г.А.Игнатьева, И.Г. Сидорович. М.: Медицина, 2000. - 431 с.

111. Хаитов P.M. Роль паттернраспознающих рецепторов во врожденном и адаптивном иммунитете / P.M. Хаитов, М.В. Пащенков, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2009. - Т. 30. - №1. - С. 66-76.

112. Хаитов P.M. Современные иммуномодуляторы: основные принципы их применения / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2000. - №5. - С. 114-123.

113. Халдин А.А. Дерматологический синдром герпетической болезни: классификация, терминология и терапия. Рос. журн. кожных и венерических болезней - 2010 - №1. - С. 4-7.

114. Халдин А.А. Простой герпес / А.А. Халдин // Рос. журн. кожных и венерических болезней. 2002. - №2. - С. 42-50.

115. Халдин А.А. Эпидемиологические аспекты заболеваний, вызываемых вирусом простого герпеса (обзор литературы) / А.А. Халдин, Д.В. Баскакова // Consilium medicum. Дерматология. 2007. - №1. -С. 27-30.

116. Хахалин JI.H. Ацикловир при лечении острых и хронических рецидивирующих герпесвирусных инфекций / J1.H. Хахалин, Ф.И. Абазова // Клин, фармакология и терапия. 1995. - №4. -С. 78-81.

117. Хахалин JI.H. ВВЗ- и ЦМВ-инфекции у беременных и новорожденных / JI.H. Хахалин // Неизвестная эпидемия: герпес. Смоленск, 1997. - С. 93-100.

118. Хахалин J1.H. Вирусы простого герпеса у человека / Л.Н. Хахалин // Consilium medicum. 1999. - Т. 1. №1. - С. 5-17.

119. Хахалин Л.Н. Герпесвирусные'заболевания человека / Л.Н. Хахалин, Е.В. Соловьева // Клин, фармакология и терапия. 1998. - №1. -С. 72-76.

120. Хахалин Л.Н. Коррекция иммунологической недостаточности / Л.Н. Хахалин. М., 1986. - 180 с.

121. Хахалин Л.Н. Патогенетическое обоснование и принципы профилактики и лечения герпесвирусных инфекций / Л.Н. Хахалин // Неизвестная эпидемия: герпес. Смоленск, 1997. - С. 32-57.

122. Чекнев С.Б. Активность ЕКК и показатели интерферонового статуса у больных рецидивирующим генитальным герпесом при лечении ридостином / С.Б. Чекнев, О.И. Миковская, Е.Н. Мешкова // Вопросы вирусологии. 1994. - №3. - С. 125-128.

123. Черевко Н.А. Иммунодефицитные состояния / Н.А. Черевко. -Томск, 2003. 14 с.

124. Черевко Н.А. Особенности алгоритмов иммунного ответа у пациентов с герпетической инфекцией / Н.А. Черевко, С.О. Романова // Рос. аллергол. журн. 2008. - №1. - С. 333-336.

125. Чередеев А.Н. CD-маркеры в практике клинико-диагностических лабораторий / А.Н. Чередеев, Н.К. Горлина, И.Г. Козлов // Клин. лаб. диагностика. 1999. - №6. - С. 25-32.

126. Черноусов А.Д. Лимфотропная герпетическая инфекция как фактор, определяющий развитие недостаточности иммунной системы / А.Д. Черноусов, Т.Н. Чувиров, О.В. Голубкова // Мед. иммунология. -2003.-№3-4.-С. 326.

127. Чикилева И.О. Двойственная роль TLR в регуляции противоопухолевого иммунитета / И.О. Чикилева, А.В. Караулов, Н.Ю. Анисимова, М.В. Киселевский // Иммунология. 2010. - Т. 31. - №1. - С. 52-55.

128. Шульженко А.Е. Человек и герпес настоящее и будущее /

129. A.Е. Шульженко // Физиология и патология иммунной системы. -2004.-№2. -С. 45-61.

130. Ярилин А.А. Основы иммунологии / А.А. Ярилин. М., 2010. -740 с.

131. Ярославский В.К. Герпетическая инфекция и беременность /

132. B.К. Ярославский, В.А. Исаков, А.Е. Семенов, А.А. Анчуков. СПб.: Изд-во СПб. ун-та, 1996. - 33 с.

133. Ades А.Е. Prevalence of antibodies to herpes simplex virus types 1 and 2 in pregnant women and estimated rates of infection / A.E. Ades,

134. C.S. Peckham, G.E. Dalt et al. // Journal of Epidemiology and Community Health. 1989. - Vol. 43. - P. 53 - 60.

135. Advances in immunotherapy for allergies presented at 2005 AAAAI (American Academy of Allergy Asthma & Immunology). Annual Meeting in San Antonio, 2005.

136. Aggarwal S. Interleukin-23 promotes a distinct CD4 T cell activation state characterized by the production of interleukin-17 / S. Aggarwal, N. Ghilardi, M.N. Xie et al. // J Biol Chem. 2003. - 278 (3). -P. 1910-1914.

137. Akira S. Mammalian Toll-like receptors / S. Akira // Curr. Opin. Immunol. 2003. - Vol. 15. - P. 5-11.

138. Akira S. Toll-like receptor signaling / S. Akira, K. Takeda // Nat. Rev. Immunol. 2004. - Vol. 4. - P. 499-511.

139. Akira S. Toll-like receptors and their signaling mechanisms / S. Akira, S. Sato // Scand. J. Infect. Dis. 2003. - Vol. 35. - P. 555-562.

140. Alvarez-Cuesta E. Standards for practical allergen-specific immunotherapy / E. Alvarez-Cuesta, J. Bousquet et al. // Allergy. 2006. -Vol. 61.-P. 82.

141. Alwan W.H. Distinct types of lung disease caused by functional subsets of antiviral T cells / W.H. Alwan, W.J. Kozlowska,209

142. P.J. Openshaw // J. Exp. Med. 1994. - 179(1). - P. 81-89.

143. Arvin A.M. Failure of antepartum maternal cultures to predict the infant's risk of exposure to herpes simplex virus at delivery / A.M. Arvin, P.A. Hensleigh, C.G. Prober // New England Journal of Medicine. 1986. -315.-P. 796-800.

144. Asakura H. Selective eosinophil adhesion to fibroblast via IFN-gamma-induced galectin-9 / H. Asakura, Y. Kashio, K. Nakamura et al. // J. Immunol. 2002. - №169 (10). - P. 5912-5918.

145. Babu R. Role of tumor necrosis factor alpha in asthma / R. Babu, D. Davis, S. Holgate // Immunol. Allergy Clin. North Am. 2004. -Vol. 24. - P. 583-597.

146. Baker M. The relationship between interleukin-6 and herpes simplex virus: implications for behavior and immunopathology / M. Baker, S. Noisakran, B.M. Gerhardt // Brain Behav Immunol. 1999. - Vol. 13. P. 201-211.

147. Barbier M. IL12B polymorphisms are linked but not associated with Plasmodium falciparum parasitemia: a familial study in Burkina Faso / M. Barbier, A. Atkinson, F. Fumoux and P. Rihe // Genes and Immunity. 2008. - Vol. 9. - P. 405-411.

148. Basu S. Toll-like receptors: function and roles in lung disease / S. Basu, M.J. Fenton // Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 2004. -Vol. 286. - P. L887-L892.

149. Bergstom T. Patogénesis In: Studahl M, Cinque P, Berstron T. Herps simplex virusis. Now York. Taylor a Francis; 2006. P. 99-117.

150. Binkin N.J. Preventing neonatal herpes. The value of weekly viral cultures in pregnant women with recurrent genital herpes / N.J. Binkin, J.P. Koplan, W. Gates // Journal of the American Medical Association. 1984. Vol. 251. - P. 2816-2821.

151. BousquetJ. Allergic Rhinitis and its Impact on Asthma (ARIA) /

152. J. Bousquet, Van Cauwenberge, N. Khaltaev and the Workshop Expert Panel. 11 Allergy. 2002. - Vol. 57(9). - P. 841-845.

153. Brandt B.M. Risk factors for herpes smplex-induced keratitis: a case control study / B.M. Brandt, J. Mandleblatt, P.A. Asbell // Ann Ophtalmol. 1994. - Vol. 53, №2. - P. 789-792.

154. Braquet P. The role of PAF in immunological responses: a review / P. Braquet, M. Rola-Pleszczynski // Prostaglandins. 1987. - Vol. 34(2). - P. 143-148.

155. Brown Z.A. Effects on infants of a first episode of genital herpes during pregnancy / ZA. Brown, LA. Vontver, J. Benedetti et al. // New England Journal of Medicine. 1987. - 317. - P. 1246-1251.

156. Burlington D.B. Large granular lymphocytes provide an accessory function in the in vitro development of influenza A virus-specific cytotoxic T cells / Burlington D.B., Djeu J.Y., Wells M.A. et al. // J Immunol. 1984. - Vol. 132(6). - P. 3154-3158.

157. Cao B. Association analysis of hepatitis virus B infection with haplotypes of the TBX21 gene promoter region in the Chinese population / B. Cao, H. Yang, H. Ding, S. Qi // Clin. Chem. Lab. Med. 2007. - №45(3). -P. 333-338.

158. Carney O. Screening pregnant women for genital herpes / O. Carney, A. Mindel // British Medical Journal. 1988. - Vol. 296. - P. 1643.

159. Carr D.J. Transgenic expression of interleukin-6 in the central nervous system confers protection against acute herpes simplex virus infection / D.J. Carr, I.L. Campbell // J Neurovirol. 1999. - Vol. 5. - P. 449-457.

160. Carroll W. Asthma genetics: pitfalls and triumphs / W. Carroll // Paed. Respir. Reviews. 2005. - V. 6. - P. 68-74.

161. Casanova J.L. Human genetics of infections diseases: a unified theory / J.L. Casanova, L. Abel // EMBO J. 2007. - Vol. 26. - P. 915-922.

162. Chae S.C. Association of TBX21 polymorphisms in a Korean population with rheumatoid arthritis / S.C. Chae, S.C. Shim, H.T. Chung // Exp. Mol.211

163. Med. 2009. - №41(1). - P. 33-41.

164. ChapgierA. Human complete STAT-1 deficiency is associated with defeciti type 1 and II IFN responses in vivo but immunity to some low virulence viruses in vivo / A. Chapgier, RF Wynn, E Jouanguy et al. // J. Immunol. 2006. - Vol. 176. - P. 5078-5083.

165. Chiron D. Toll-like receptors: Expression and involvement in Multiple Myeloma / D. Chiron, G. Jego, C. Pellat-Deuceunynck // Leuk Res. -2010. №34. - P. 1545-1550.

166. Cho S. Increased interliukin-4, -5 and interferon-g in airway CD4+ and CD8+ T cells in atopic astma / S. Cho, L. Stanciu, S. Holgate // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2005. - Vol. 171. - P. 224-230.

167. Clerici M. A TH1 to TH2 switch is a critical step in the etiology of HIV infection / M. Clerici, G. Shearer // Immunol. Today. 1993. - Vol. 14. -P. 107-110.

168. Committee on Fetus and Newborn, Committee on Infectious Diseases. Perinatal herpes simplex virus infections. Pediatrics. 1980. - Vol. 66. -P. 147-149.

169. Cookson W.O.C.M. A new gene for asthma: would you ADAM and Eve it? // Trends Genet. 2003. - V. 19. - P. 169-172.

170. Corey L. Infections with herpes simplex viruses: Parts 1 and 2 / L. Corey, P.G. Spear // New England Journal of Medicine. 1986. - Vol. 314. P. 749-757.

171. Corey L. Synergistic copathogens HIV-l and HSV-2 / L. Corey // N Engl J Med. - 2007. - Vol. 356. - P. 854-856.

172. Corey L. The medical importance of genital herpes simplex infection. Recommendations from the IHMF Management Strategies Workshop. France. 1997.

173. Cua D.J. Interleukin-23 rather than interleukin-12 is the critical cytokine for autoimmune inflammation of the brain / D.J. Cua, J. Sherlock, Y. Chen et al. // Nature. 2003. - Vol. 421 (6924). - P. 744-748.

174. Di Luca D. The replication of viral DHA in human herpesvirus G infected cells / D. Di Luca, D. Katsafanas, G. Schirmer et al. // Virology.- 1990. Vol. 175. - P. 199-210.

175. Dolan A. The genome sequence of herpes simplex virus type 2 / A. Dolan, F.E. Jamieson, C. Cunningham et al. // J Virol. 1998. - Vol. 72. -P. 2010-2021.

176. Fatahzadeh M. Human herpes simplex virus infections: epidemiology, pathogenesis, symptomatology, diagnosis, and management / M. Fatahzadeh, R.A.Schwartz // J Am Acad Dermatol. 2007. -Vol. 57(5). P. 737-763.

177. Fields Virology. Human Herpesvirus 6. Human Herpesvirus 7. / Eds. B.N. Fields et al. Philadelphia, 1996. - P. 2587-2622.

178. Fish D.N. Acyclovir / D.N. Fish // The AIDS Reader. 1996. - №6(1). P. 32-36.

179. Freij B.J. Herpes virus infections in pregnancy: risks to embryo, fetus and neonate / B.J. Freij, J.L. Sever // Clinics in Perinatology. 1988. -Vol. 15.-P. 203-231.

180. Frodsham A.J. Genetics of infectious diseases / A.J. Frodsham, A.V. Hill // Hum Mol Genet. 2004. - 13. Spec. No 2. - R. 187-194.

181. Gaffen S.L. Biology of recently discovered cytokines: interleukin-17-a unique inflammatory cytokine with roles in bone biology and arthritis / S.L. Gaffen // Arthritis Res Ther. 2004. - 6 (6). - P. 240-247.

182. Gateley A. Herpes simplex virus type 2 meningoencephalitis resistant to acyclovir in a patient with AIDS / A. Gateley, R. Gander, P. Johnson et al. // J Infect Dis. 1990. - Vol. 161. - P. 711-715.

183. Gebhardt B.M. Re-evaluating the role of natural killer cells in innate resistance of herpes simplex virustypl / B.M. Gebhardt // J. Viral. 2005.- Vol. 2. P. 56-62.

184. Gelb L. In «The human herpesviruses» // N.York, Raven Press, 1993. -P. 281-308.

185. Geretti A.M. Genital herpes / A.M. Geretti // Sex Transm Infect. 2006. -Vol. 82 (Suppl IV). - P. 31-34.

186. Ghiasi H. The role of interleukin (IL-2) and IL-4 in herpes simplex virus typel ocular replication and eye disease / H. Ghiasi, S. Cai, S.M. Slanina // J Infect Dis. 1999. - Vol. 179. - P. 1086-93.

187. Goodyear H.M. Immunological studies of herpes simplex virus infection in children with atopic eczema / H.M. Goodyear // Br. J. Dermatol. -1996. Vol. 134, №1. - P. 85-93.

188. Grego L. Existence of a genetic risk factor on chromosome 5q in Italian coeliac disease families / L. Grego, M.C. Babron, G.R. Corazza et al. // Ann. Hum. Genet. 2001. - Vol. 65. - P. 35-41.

189. Gupta A. Anti-apoptotic function of a microRNA encoded by the HSV-1 latency-associated transcript / A. Gupta, J.J. Gartner, P. Sethupathy et al. // Nature. 2006 - Vol. 442 - No.7098. - P. 82-85.

190. Hajjar A.M. Human Toll-like receptor 4 recognizes host-specific LPS modifications/ A.M. Hajjar, R.K. Ernst, J.H. Tsai et al. // Nat. Immun. -2002. Vol. 3. - P. 354-359.

191. Halfhide C.P. Neutrophil TLR4 expression is reduced in the airways of infants with severe bronchiolitis / C.P. Halfhide, S.P. Brearey, B.F. Flanagan et al. // J Thorax. 2009. - Vol. 64. - P. 798-805.

192. Hashido M. An Epidemiologic study of herpes simplex virus types 1 and 2 infection in Japan based on type-specific serological assays / M. Hashido, F.K. Lee, A.J. Nalimias et al. // Epidemiol, and Infect. -1998. Vol. 120. - P. 170-186.

193. He J. Kinetics of cytokine production in the cornea and trigeminal ganglion of C57B/6 mice after corneal HSV-1 infection / J. He,214

194. H. Ichimura, T. Iida, K. Kobayashi // J Interferon Cytokin Res. 1999. -Vol. 19. - P. 609-615.

195. Heiligenhaus A. CD4+ T cell type 1 and type 2 cytokines in the HSV-1 infected cornea / A. Heiligenhaus, D. Bauer, M. Zheng // Clin Exp Ophthalmol. 1999. - №237. - P. 399-406.

196. Heinzmann A. Common polymorphisms in the CTLA-4 and CD28 genes at 2q33 are not associated with asthma or atopy / A. Heinzmann, C. Plesnar, J. Kuehr et al. // Eur J Immunogenet. 2000. - V. 27. -P. 57-61.

197. Heinzmann A. Genetic variants of IL13 signalling and human asthma and atopy / A. Heinzmann, X.Q. Mao, M. Akaiwa et al. // Hum. Mol. Genet. -2000. №9. - P. 549-559.

198. Hemmi H. TLR signalling and the function of dendritic cells / H. Hemmi, S. Akira // Chem. Immunol. Allergy. 2005. - Vol. 86. -P. 120-135.

199. Herpes Simplex Virus Type 2 Enhances HIV-1 Susceptibility by Affecting Langerhans Cell Function / de Jong MA, de Witte L, Taylor M.E., Geijtenbeek T.B. // J Immunol. 2010. - 185. - P. 16331641.

200. Higgins C.R. Natural history management and complication of herpes labialis / C.R. Higgins // J. Med. Virol. 1989. - Vol. 22, №3. -P. 22-28.

201. Hobbs K. Interleukin-10 and transforming growth factor-beta promoter polymorphisms in allergies and asthma / K. Hobbs, J. Negri, M. Klinnert et al. // Am J Respir Crit Care Med. 1998. - Vol. 158(6). - P. 1958-62.

202. Howard C.R. Hepatitis C virus: clades and properties / C.R. Howard // J Gastroenterol Hepatol. 2002. - Vol. 17. - P. 468-470.

203. Huang S.H. Interleukinnl7 and the interleukin-17 family member network / S.H. Huang, S. Fry das, D. Kempuraj et al. // Allergy Asthma Proc. -2004. 25 (l).-P. 17-21.

204. Imanishi J. Expression of cytokines in bacterial and viral infections and their biochemical aspects / J. Imanishi // J Biochem. 2000. -127(4). - P. 525-530.

205. Jawahar S. Natural killer cells deficiency associated with an epitope-deficient Fc-receptor type III-A (CD 16-11) / S. Jawahar, C. Moody // Clin. Exp. Immunol. 1996. - №2. - P. 408-413.

206. Johansson S.G.O. World Allergy Organization: Guidelines of prevention allergy and allergic asthma. Allergy and Clinical Immunology / S.G.O. Johansson, T. Haahtela // Journal of the World Allergy Organization. 2004. - Vol. 16(5). - P. 176-185.

207. Karjalainen E.M. Airway inflammation and basement membrane tenascin in newly diagnosed atopic and nonatopic asthma / E.M. Karjalainen, A. Lindqvist, L.A. Laitinen et al. // Respir Med. 2003. - Vol. 97(9). -P. 1045-1051.

208. Kawai T. The roles of TLRs, RLRs and NLRs in pathogen recognition / T. Kawai, S. Akira // J International Immunology. 2009. - V. 4. -P. 317-337.

209. Khanna K.M. Immune control of Herpes simplex virus during latency / K.M. Khanna, A.J. Lepisto, V. Decman and R.L. Hendricks. // Cur. Opinion Immunol. 2004. - Vol. 16. - Issue 4. - P. 463-469.

210. Kondo M. Sharing of the interleukin-2 (IL-2) receptor gamma chain between receptors for IL-2 and IL-4 / M. Kondo, T. Takeshita, N. Ishii et al. // Science. 1993. - V. 262. - P. 1874-1877.

211. Krug A. Herpes simplex virus typel activates murine natural interferon-producing cells through toll-like receptor 9 / A. Krug, GD. Luker, W. Barchet et al. // Blood. 2004. - Vol. 103. - P. 1433-1437.

212. Kumar H. Toll-like receptors and innate immunity / H. Kumar, T. Kawai, S. Akira // J Biochemical and Biophisical Research Communications -2009. Vol. 388. - P. 621-625.

213. Le Blanc R.A. Lack of interleukin-6 enhances susceptibility to infection but does not alter latency or reactivation of herpes simplex in IL-6 knockout mice / R.A. Le Blanc, L. Pesnicak, E.S. Cabral // J Virol. -1999.-Vol. 73.-P. 8145-8151.

214. Li J. Temporal associations between interleukin-22 and the extracellular domains of IL-2R and IL-10R2 / J. Li, K.N. Tomkinson, X.Y. Tan et al. // Int Immunopharmacol. 2004. - Vol. 4 (5). - P. 693-708.

215. Liu X. Herpesvirus tegument protein activates NF-kB signaling through the TRAF6 adaptor protein / X. Liu, K. Fitzgerald, E. Kurt-Jones et al. // J PNAS. 2008. - Vol. 32. - P. 11335-11339.

216. Logsdon N.J. Comparison of interleukin-22 and interleukinnlO soluble receptor complexes / N.J. Logsdon, B.C. Jones, K. Josephson et al. // J. Interferon Cytokine Res. 2002. - 22 (11). - P. 1099-1112.

217. Maizels R.M. Immune regulation by helminth parasites: cellular and molecular mechanisms / R.M. Maizels, M. Yazdanbakhsh // Nat Rev Immunol. 2003. - №3. - P. 733-744.

218. Malkin J-E. Orofacial Herpes simplex virus Type I Infection / JE. Malkin, L. Stanberry // Recommendations from the IHMF Management Strategies Workshop. Cambridge Med Pub. 2004. -P. 15-27.

219. Masci S. Intravenous immunoglobulins supress the recurrens of genital herpes simplex virus: a clinical and immunological study / S. Masci, De C. Simone // Immunopharmacol. 1995. - Vol. 17. - P. 33-47.

220. Masihi K.N. Fighting infections using immunomodulatory agents / K.N. Masihi // Expert Opin Biol. 2001. - Vol. 1:4. - P. 641-653.

221. McCormack R.M. The IL12B untranslayed region DNA polymorphism is not associated with early-onset type 1 diabetes / R.M. McCormack, A.P. Maxwell, D.J. Carson et al. // Genes Immunity. 2002. - Vol. 3. -P. 433-435.

222. McGeoch D.J. The complete DNA sequence of the long unique region in the genome of herpes simplex virus type 1 / D.J. McGeoch, M.A. Dalrymple, A.J. Davison et al. // J Gen Virol. 1988. - Vol. 69. -P.1531-1574.

223. McKenna D.B. Herpessimplex virus-specific immune responses in subjects with frequent and infrequent orofacial recrudescences / D.B. McKenna, W.A. Neill, M. Norval // Brit. J. Dermatol. 2001. -№144. -P. 459-464.

224. Medzhitov R. Toll-like receptors and innate immunity / R. Medzhitov // Nat. Rev. Immunol. 2001. - Vol. 1. - P. 135-145.

225. Mertz G.J. Risk factors for the sexual transmission of genital herpes / G.J. Mertz, J. Benedetti, R. Ashley et al. // Ann Intern Med. 1992. -Vol. 166. - P. 107-202.

226. Milovanovic M. Interleukin-17A Promotes IgE Production in Human B Cells / M. Milovanovic, G. Drozdenko, C. Weise et al. // J Invest Dermatol. 2010. - 130(11). - P. 2621-2628.

227. Moseley T.A. Interleukin-17-family and IL17 receptors / T.A. Moseley, D.R. Haudenschild, L. Rose et al. // Cytokine Growth Factor Rev. 2003.- 14(2). P. 155-174.

228. Nash A.A. T cells and the regulation of Herpes simplex virus latency and reactivation / A.A. Nash. // J. Exp. Med. 2000 - Vol. 191 - No. 9 -P.1455-1458.

229. Obrein W.J. Effect of interferon-alpha on the steady-state levels of thymine, thymidine, guanine and guanosine metabolites in herpes simplex virus typel-infected cells / W.J. Obrein, J.L. Taylor // Intervirology. -1995. Vol. 38, №5. - P. 249-255.

230. O'Neill L.A. TLRs: Professor Mechnikov, sit on your hat / L. O'Neill // Trends Immunol. 2004. - Vol. 25. - P. 687-693.

231. O'Neill L.A. Toll-like receptor signal transduction and the tailoring of innate immunity: a role for Mai? / L. O'Neill // Trends Immunol. 2002.- Vol. 23. P. 296-300.

232. O'Rourke F. The role of CD8 in cytotoxic T lymphocyte function / F. O'Rourke, M. Mescher // Immunology Today. 1993. - Vol. 14. -P. 183-188.

233. Paludan S.R. Synergistic action of pro-inflammatory agents: cellular and molecular aspects / S.R. Paludan // J Leukoc Biol. 2000. - 67(1). -P. 18-25.

234. Parker R.K. Hand eczema herpeticum / R.K. Parker, J.D. Guin // Cutis. -1993. Vol.52, №4. - P.227-235.

235. Paz-Bailey G. Herpes simplex virus type 2: epidemiology and management options in developing countries / G. Paz-Bailey, M. Ramaswamy, S.J. Hawkes, A.M. Geretti // Sex Transm Inf. 2007. - 83. - P. 16-22.

236. Percopo S. Saturation of the 5q31-33 candidate region for coeliac disease / S. Percopo, M.C. Babron, M. Whalen et al. // Ann. Hum. Genet. 2003.- 65. P. 263-268.

237. Pemg G.C. Virus-induced neuronal apoptosis blocked by the Herpes simplex virus latency-associated transcript / G.C. Perng, C. Jones, J. Ciacci-Zanella et al. // Science. 2000. - Vol. 287 - P. 1500-1503.

238. Prober C.G. Use of routine viral cultures at delivery to identify neonates exposed to herpes simplex virus / C.G. Prober, P.A. Hensleigh,220

239. F.D. Boncher et al. // New England Journal of Medicine. 1988. - 318. -P. 887-891.

240. Qureshi S.T. Toll-like receptors and their role in experimental models of microbial infection / S.T. Qureshi, R. Medzhitov // Genes. Immun. -2003.-Vol. 4.-P. 87-94.

241. Raydchaudhuri S.P. Revisit to Kaposis varicellform eruption: role of IL-4 / S.P. Raydchaudhuri, S.K. Raydchaudhuri // Int.J.Dermatol. 1995. -Vol. 34, №12.-P. 854-860.

242. Reeves W.C. Risk of recurrence after first episodes of genital herpes. Relation to HSV type and antibody response / W.C. Reeves, L. Corey, H.G. Adams et al. // New England Journal of Medicine. 1981. - 305. P. 315-319.

243. Rhee S.H. Murine TOLL-like receptor 4 confers lipopolysaccharide responsiveness as determined by activation of NF- k B and expression of the inducible cyclooxygenase / S.H. Rhee, D. Hwang // J. Biol. Chem. -2000. Vol. 275. - P. 34035-34040.

244. Salazar-Mather TP. A chemokine-to-cytokine-to-chemokine cascade critical in antiviral defense / TP. Salazar-Mather, TA. Hamilton, CA. Biron // J Clin Invest. 2000. - 105(7). - P. 985-93.

245. Sancho-Shimizu V. Genetic susceptibility to herpes virus 1 encephalitis in mice and humans / V. Sancho-Shimizu, S.-Y. Zhang et al // Current Opinion in Allergy and Clinical Immunology. 2007. - 7. -P. 495-505.

246. Sergerie Y. Tumor necrosis factor A and interleukinl play a critical role in the resistance against lethal herpes simplex virus encephalitis / Y. Sergerie, S. Rivest, G. Boivin // J. Infect Dis. 2007. - Vol. 196. - P. 853-860.

247. Sha Q. Activation of Airway Epithelial Cells by Toll-Like Receptor Agonists/ Q. Sha, Ai Q. Truong-Tran, J. R. Plitt et al. // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2004. - Vol. 31. - P. 358-364.

248. Sheridan J.F. Stress-induced neuroendocrine modulation of viral pathogenesis and immunity / J.F. Sheridan, C. Dobbs, J. Jung et al. // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1998. - Vol. 840. - P. 803-888.

249. Shimeld C. Cytokine production in the nervous system of mice during acute and latent infection with herpes simplex virus type 1 / C. Shimeld, J.L. Whiteland, N.A. Williams // J Gen Virol. 1997. - №12. P. 33173325.

250. Shinkai K. Helper T cells regulate type-2 innate immunite in vivo / K. Shinkai, M. Mohrs, R. M. Locksley. // Nature. 2002. - №420 (6917).- P. 825-829.

251. SteckA.K. Association of non-HLA genes with type 1 diabetes autoimmunity / A.K. Steck, T.L. Bugawan, A.M. Valdes et al. // Diabetes.- 2005. Vol. 54. - P. 2482-2487.

252. Stein R.T. Resperatory syncytial virus in early life and risk of wheeze and allergy by age 13 years / R.T. Stein, D. Sherrill // Lancet. 1999. -№354.-P. 541-545.

253. Success of experimental herpes vaccine builds momentum for human clinical trials Medical News Today, 15.12.2004.

254. Svensson A. A 3'-untranslated region polymorphism in the TBX21 gene encoding T-bet is a risk factor for genital herpes simplex virus type 2222infection in humans / A. Svensson, A. Bergin // J. Gen. Virol. 2008. -№89(9). P. 2262-2268.

255. Takeda K. Toll-like receptors / K. Takeda, T. Kaisho, S. Akira // Annu. Rev. Immunol. 2003. - Vol. 21. - P. 335-376.

256. Takeda K. Toll-like receptors in innate immunity / K. Takeda, S. Akira // Int. Immunol. 2005. - Vol. 17. - P. 1-14.

257. Tang F. Plasmacytoid dendritic cells in antiviral immunity and autoimmunity / F. Tang, Q. Du, Y.J. Liu // Sci China Life Sci. 2010. -V. 53(2). - P. 172-182.

258. Teunissen M.B. Interleukin-17 and interferonngamma synergize in the enhancement of proinflammatory cytokine production by human keratinocytes / M.B. Teunissen, C.W. Koomen, R. de Waal Malefyt et al. // J. Invest. Dermatol. 1998. - 111(4). P. 645-649.

259. Uematsu S. Toll-like Receptors and Type I Interferons / S. Uematsu, S. Akira // J Biologycal Chemistry. 2007. - V. 21. - P. 15319-15324.

260. Vasselon T. Toll Receptors: a Central Element in Innate Immune Responses / T. Vasselon, P.A. Detmers // Infect. Immun. 2002. -Vol. 70, №3,-P. 1033-1041.

261. Visintin A. Lysines 128 and 132 enable LPS binding to MD-2, leading to Toll-like receptor 4 aggregation and signal transduction / A. Visintin, E. Latz, B.G. Monks et al. // J. Biol. Chem. 2003 - Vol.278. -P. 48313-48320.

262. Vogel S.N. TLRs: Differential Adapter Utilization by Toll-Like Receptors Mediates TLR-Specific Patterns of Gene Expression / S.N. Vogel, K.A. Fitzgerald, M.J. Fenton // Mol. Interventions. 2003. - Vol. 3. -p. 466^177.

263. Vontver L.A. Recurrent genital herpes simplex virus infection in pregnancy: infant outcome and frequency of asymptomatic recurrences / L.A. Vontver, D.E. Hickock, Z. Brown et al. // Am Journal of Obstetrics and Gynecology. 1982. Vol. 143. - P. 75-84.

264. Wadsworth S. Anatomy of herpes simplex virus DNA. II. Size, composition, and arrangement of inverted terminal repetitions / S. Wadsworth, R.J. Jacob, B. Roizman // J Virol. 1975. - Vol. 15. -P. 1487-1497.

265. Wang Y.Q. Induction of systemic immunity by expression of interleukin 23 in murine colon carcinoma cells / Y.Q. Wang, S. Ugai, O. Shimozato et al. // Int. J. Can cer. 2003. - 105(6). - P. 820-824.

266. West A.P. Recognition and Signaling by Toll-Like Receptors / A.P. West, A.A. Koblansky, S.Ghosh // Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 2006. -Vol. 22. - P. 409-437.

267. Whitley R.J. Herpes simplex viruses / R.J. Whitley, A.J. Nahmias, A.M. Visintine et al. // In: Fields BN (ed) Virology. Raven Press: New York. 1990. - P. 1843-1887.

268. Whitley R.J. Vidarabine versus acyclovir therapy of neonatal herpes simplex (HSV) infection / R.J. Whitley, A. Arvin, L. Corey et al. // Pediatric Research 20 (Abstract 987). 1986. - P. 323A.

269. Witowski J. Interleukin-17: a mediator of inflammatory responses / J. Witowski, K. Ksiazek, A. Jorres // Cell Mol Life Sci. 2004. -Vol. 61(5). - P. 567-579.

270. Wollenberg A. Herpetic eczema in pregnancy / A. Wollenberg, K. Degits // Dtsch. Med. Wochenschz. 1995. - Vol. 13(4). - P. 1395-1399.

271. Woolley P.D. Virological screening for herpes simplex virus during pregnancy / P.D. Woolley, C.A. Bowman, D.A. Hicks, G.R. Kingshorn // British Medical Journal (Clinical Research Edition). 1988. - Vol. 296. -P. 1642-1643.

272. Xie M.H. Interleukin (IL)-22, a novel human cytokine that signals through the interferon receptorrrelated proteins CRF2-4 and IL-22R / M.H. Xie, S. Aggarwal, W.H. Ho et al. // J. Biol. Chem. 2000. -V. 275(40). P. 31335-31339.

273. Yamamoto M. TIR domain-containing adaptors define the specificity of TLR signaling / M. Yamamoto, K. Takeda, S. Akira // Mol. Immunol. -2004. Vol. 40. - P. 861-868.

274. Yamamoto T. Immunological investigation of adult patients with primary herpes simplex virus-1 infection / T. Yamamoto, T. Osaki, K. Yoneda, E. Ueta // J Oral Pathol Med. 1993. - Vol. 22(6). - P. 263-267.

275. Yanagisawa S. Oxidative stress augments toll-like receptor 8 mediated neutrophilic responses in healthy subjects / S. Yanagisawa, A. Koarai, H. Sugiura et al. \\ J Respiratory Research. 2009. - Vol. 10. P. 50.

276. Yazdanbakhsh M. Allergy, parasites and the hygiene hypotehesis / M. Yazdanbakhsh, P. Kremsner, van Ree R. // Sience. 2002. - Vol. 296. - P. 490-494.

277. Yazdanbakhsh M. Parasites and the hygiene hypothesis: regulating the immune system? / M. Yazdanbakhsh, P. Matrikardi // Clin Rev Allergy Immunol. 2004. - Vol. 26. P. 15-24.

278. Yeager A.S. Reasons for the absence of a history of recurrent genital infections in mothers of neonates infected with herpes simplex virus / A.S. Yeager, A.M. Arvin // Pediatrics. 1984. - Vol. 73. - P. 188-193.

279. Yeager A.S. Relationship of antibody to outcome in neonatal herpes simplex virus infections / A.S. Yeager, A.M. Arvin, L.J. Urbani, J .A. Kemp // Infection and Immunity. 1980. - Vol. 29. - P. 532-538.

280. Zhang D. A toll-like receptor that prevents infection by uropathogenic bacteria / D. Zhang, G. Zhang, M.S. Hayden et al. // Science. 2004. -Vol. 303. - P. 1522-1526.

281. Zhao Li Thl7 cells: the emerging reciprocal partner of regulatory T cells in the liver / Li Zhao, De Kai Qiu, Xiong Ma. // Journal of Periodontal Research. 2010. - №11(3). P. 126-133.

282. Zhou Z.H. Visualization of tegument-capsid interactions and DNA in intact herpes simplex virus type 1 virions / Z.H. Zhou, D.H. Chen, J. Jakana et al. // J Virol. 1999. - №73. - P. 3210-3218.

283. Zhu J. The TLR9-MyD88 pathway is critical for adaptive immune responses to adenoassociated virus gene therapy vectors in mice / J. Zhu, X. Huang, Y. Yang // J. Clinical Investigations. 2009. - №8. -P. 2388-2395.

Автореферат и диссертация по медицине (14.03.03) на тему:Иммунологические механизмы реактивации герпетической инфекции и ее связь с аллергопатологией

Автореферат диссертации по медицине на тему Иммунологические механизмы реактивации герпетической инфекции и ее связь с аллергопатологией

Оглавление диссертации Черевко, Наталья Анатольевна :: 2012 :: Томск

Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Черевко, Наталья Анатольевна, автореферат

Заключение диссертационного исследования на тему "Иммунологические механизмы реактивации герпетической инфекции и ее связь с аллергопатологией"

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Черевко, Наталья Анатольевна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций