Автореферат и диссертация по медицине (14.00.07) на тему:Экспериментальное изучение влияния жирового компонента рациона на некоторые реакции и структуру иммунокомпетентных органов

АВТОРЕФЕРАТ
Экспериментальное изучение влияния жирового компонента рациона на некоторые реакции и структуру иммунокомпетентных органов - тема автореферата по медицине
Хайров, Хотамбег Сайфидинович Москва 1988 г.
Ученая степень
кандидата медицинских наук
ВАК РФ
14.00.07
 
 

Автореферат диссертации по медицине на тему Экспериментальное изучение влияния жирового компонента рациона на некоторые реакции и структуру иммунокомпетентных органов

АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК СССР ИНСТИТУТ ПИТАНИЯ

На правах рукописи УДК 613.2 : 612.017 : 576.2 : 577.1

ХАЙРОВ Хотамбег Сайфндннович

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ЖИРОВОГО КОМПОНЕНТА РАЦИОНА НА НЕКОТОРЫЕ РЕАКЦИИ И СТРУКТУРУ ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ

ОРГАНОВ

(14.00.07 — гигиена)

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва 1988

Работа выполнена в Институте питания Академии медицинских наук СССР.

Научный руководитель:

член-корреспондент АМН СССР, доктор медицинских паук, профессор М. Н. ВОЛГАРЕВ

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Б. Б. ПЕРШИН, доктор медицинских наук В. М. КРАСНОПЕВЦЕВ.

Ведущая организация: Ордена Трудового Красного Знамени Научно-исследовательский институт общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысниа.

Защита состоится «............» .............................. 1988 г. в ............час.

на заседании специализированного совета Д 001.02.01 при Институте пптаиня АМН СССР (109240, Москва, Устнпский ирсезд, 2/14).

С дисссртагпен можно ознакомиться в библиотеке Института питания АМН СССР.

Автореферат разослан «............» .................................... 1888 г.

Ученый секретарь специализированного совета

кандидат медицинских наук И. И. КНЯЗЕВ

Актуальность проблемы, Роль ишунной оистевд и иммунологической .реактивности в обеспечении устойчивости гомеостаэа и сохранении здоровья хорошо известна. Многими исследованиями последних лет вскрыты примеры конкретных воздействий питания на состояние и реакции иммунокошетентной системы. В этих исследованиях менее всего изучен характер влияния на иммунную систему той группы нутряентов, которые объединяются названием липиды ' (особенно в сравнении с изученностью влияния на имдунную систему нутряентов, входящих в группу пищевых белков). В проблеме "липвды и иммунный ответ" могут быть выделены несколько актуальных вопросов, касающихся выяснения влияния жиров на конкретные звенья и реакции ишунокомпетентной системы. Особое внимание привлекает вопрос о влиянии жирового компонента в рационе, определяемого наличием различных по количеству и химической формуле а: лийвнасыщешшх жирных кислот (1ПЖК), на характер и функциональное значение реакций иммунокомпетентной системы. Современные публикации (Johnston т.р. , a. Ch'uidra '¡.it,, 1985, Х986) под— твервдают это. Актуальность проблемы "пищевые жиры и реакции иммунной системы" в настоящее время определяется тем, что •еоли роль липидов в возникновении и патогенезе ряда распространенных заболеваний (сердечно-сосудистых, онкологических, диабете и др.) хорошо установлена, то иммунологические механизмы в связи с возможным на них влиянием пищевых жиров пока остаются неизученными.

Целью настоящей работы явилось изучение влияния различных пищевых жиров (сливочное масло; кулинарный жир, содержащий трансизомеры жирных кислот; жир сардин "Иваси"; подсолнечное масло в сочетании с лярдом), отличающихся по количеству и

соотношению в них ПНЖК омега 6 и омега 3, на некоторые функции !г- и В- систем иммунитета (реакции гиперчувствителъности замедленного типа и антителеобразугацих' клеток), а также на бактериальную резистентность кз.турЫшиг 1иа. Наряду с этим исследовалась гистологическая структура отдельных иммунокомпетентных органов-селезенки, пейеровых бляшек и брыжеечных лимфатических узлов.

Научная новизна работы определяется следующими основными ее результатами. Впервые проведено сравнительное изучение состояния иммунной системы и иммунологической реактивности (реакции гиперчувствителъности замедленного типа и антителообразукь щих клеток; бактериальной резистентности RS.Typhiiuurj.Uiii; гистологической структуры иммунокомпетентных органов) и жирнокислот-ного состава тканей лгмфовдшх органов при различных пищевых жирах в экспериментальных диетах, различных уровнях ПНЖК в этих диетах и различных пропорциях в содержании полиненасыщенных жирных кислот семейств омега 6 и омега 3.

Установлено, что даже при низком содержании жира в рационе специфические особенности жирового компонента и величина соотношения содержащихся в нем ПНЖК омега 6 и омега 3 оказывают влияние на иммунную систему организма.

Впервые выявлено, что для реакции аитителообразования существенное значение тлеет не только общее количество ПНЖК в рационе, но и определенные соотношения представителей семейств омега 6 и омега 3.

Обнаружена прямая зависимость мезду выживаемостью экспериментальных животных при их заражении ¡¿.турМ-нгаголиа и уменьшением в .¿ищевом рационе соотношения 1ШК омэга 6 к омега 3.

Между содержанием ПНЖК в рационе и морфологической пере- •. стройкой в иммунокомпетентных органах выявлена обратная зависи-

мость: погашение уровня ПНЖК сопровождалось увеличением площади фолликулов селезенки и лимфатических узлов.

Теоретическое и практическое значение работа. Результаты исследований впервые показывают, что влияние полиненасыщенных жирных кислот на иммунную систему и иммунологическую реактивность определяется не только величиной их суммарного содержания в рационе, но и в неменьшей мере размером соотношения ПНЖК семейств лннолевойаливоленовой кислот. Тем самым устанавливается причинная взаимосвязь глеаду аирами пищи, синтезом простаглавдинов (поскольку определенные жиры влияют на этот синтез) и иммунологической реактивностью.

Заданные изменения в химическом составе жирового компонента должны применяться при разработке жировых продуктов высокой пищевой ценности', специальных лечебных диет, а также могут быть использованы в качестве эффективного иммуно модулируютего воздействия.

Практическая значимость результатов работы соотоит также в получении одного из экспериментальных обоснований для диффе- ' ренцированного нормирования содержания в рационах питания ПНЖК омега 6 и омега 3. Вопрос о необходимости раздельного нормирования ШИК омега 6 и омега 3, обусловленный установлением различий их зссенциальной роли в процессах жизнедеятельности, приобретает в настоящее время актуальность в плане совершенствования рекомендаций по рациональному питанию и становится предметом научного обсуждения на.международной уровне.

Наконец, отмеченные изменения, в иммунологическом статусе могут быть использованы в качестве обоснований критериев при оценке физиологической и клинической адекватности жировой части рационов и диет.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на конференции "Актуальные вопросы стандартизации лабораторных животных для медико-биологических наследований" (г.Москва, 1987), на Всесоюзном симпозиуме по биохимии липидов (г.Алма-Ата, 1987), на научной мезинститутской конференции молодых специалистов "Актуальные проблемы науки о питании" (г.Москва, 1988). По теме диссертации опубликованы три работы.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена ка 117 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, двух глав результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов и библиографического указателя, включающего 213 источников, из которых IG8 иностранных. Работа иллюстрирована 9 таблицами и 7 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования. В работе были использованы 825 мышей линии СБА и гибриды Gg^Bl/CBA обоих полов с исходной массой 2I¿I г. 4 группы животных получали экспериментальные рационы с одинаковым количеством (из расчета на 100 г сухой смеси) казеина - 22,6 г , крахмала маисового - 63,3 г сухих пивных дрожжей - источник витаминов группы В - 5,7 г и отличались по жировой части исследованных пищевых смесей. Величина вводимого в рационы жира составляла 4,7 г на 100 г смеси, или 10% от общей калорийности рациона. В 1-й группе (контроль) жир был представлен лярдом и подсолнечным маслом в равных соотношениях, П-я группа мышей получала сливочное масло, животные Ш-ей группы содержались на кулинарном жире "Эра", 1У-я группа мышей потребляла жир сардин "Иваси". У-я группа животных содержалась

на малобелковой диете: при том же (кроме белка и углеводов) составе, что к в предыдущих четырех рационах, доля белка была значительно снижена за счет увеличения углеводов (казеин - 3,8 г, крахмал - 81,8 г, сливочное масло - 4,7 г на 100 г смеси). Во все диеты добавлялись жирорастворимые витамины в количестве: 5 мг/ЮО г вит.Е, 8 тыс. ИЕ/100 вит,А, 2,5 тыс. ИЕ/100 г вит. Д, а также необходимые минеральные добавки в виде смеси Джонса-- Фостера - 4 г/100 г смеси.

Содержание 1ШЯК семейства омега 6 и омега 3 в контрольном и опытных рационах представлено в табл. I.

Для оценки функционирования B-системы иммунитета определя*-ли количество антителообразущих клеток селезенки (АОК) по ментолу Coninjh' 1.1 л. л.. , 1965 (модифицированный метод Ерне),

Для оценки Т-системы иммунитета исследовали реакцию гипер-чувствителъности замедленного типа (ГЗТ) ( ые-.v s\v. , 1977)'.

Для изучения бактериальной резистентности мышей после 21 дня кормленая экспериментальными диетами их заражали1 внут-рибрюшшшо (Ю4 микробных клеток на мышь) S.TyphiaurjLua . Учет табеля животных проводили в течение 21 дня посла заражения. Исходя из' данных об избирательном поражении при этой инфекции лимфатического аппарата кишечника и брыжеечных лимфатических узлов, одновременно с бактериальной резистентностью нами исследовался жирокислотный состав тканей иммунокомпетентких органов. Липиды лимфоцитов, брыжеечных лимфатических узлов, селезенки, пейеровых блдаек экотрагирозалггсь смесью хлороформ -метанол (2:1) по Foicti J.,eb ei . (1957). Липвды диет извлекались по аналогичному методу. Из общих липвдных экстрактот получали метиловые эфира жирных кислот по Кейтс Т. (1975)',.

состав которых определяли методом газо-жвдкостиой хроматографии (Герасимова E.H. и др., 1986). Лимфоциты выделяли из сыворотки крови по Чередееву А.Н. (1976).

• Таблица I

Состав ПНЕК омега 6 и омега 3 в рационах (в % суммы всех .жирных кислот)

j Источники жира в рационах

Жирные ---

ииллпти*) I °месь лярда ! сливочное! кулинарный¡рыбий жир 0 ! и подсолнеч-! масло ! жир "Эра" цнир

! ного масла ! ! ¡"Иваси") _!_1_!_]_

18:2м G 35,5 11,6 24,3 13,3

I8i3u3 0,35 0,17 0,7 4,5

20:4w6 0,3 0,6 0,4 следы

20:5w3 следы 0,12 0,1 10,9 (22:6 3,4)

Суша ПНЖКмб 35,8 11,77 24,7 13,3

Суша ШШСозЗ 0,35 0,29 0,8 20,2-

Соотношение Ш5ЖК-~|- 102 40,6 30,8 0,66

31 ^ Код для обозначения «ирных кислот: первое число - количество атомов углерода в молекуле кислоты, второе число - число двойных связей. и> - принадлежность жирной кислоты к семейству.

Для изучения гистологической структуры' кммунокомпетентных органов в каждой группе у 5-6 животных на секции брали кусочки селезенки, пейеровы бляшки и брыжеечные лимфатические узлы, из которых готовили гистологические срезы толщиной 5-6 микрон. Препараты окрашивали гематоксилином-эозином. Для вявления плаз-магических клеток использовали метод Браше. Кроме того, в работе

использован морфометрический меюд исследования фолликулов селезенки, пейеровых бляшек и брыжеечных лимфатических узлов.

Результаты реакций ГЗТ и АОК обработаны статистически по критерию Манна - Уитна (Поллард Д., 1982). Данные выживаемости животных после их заражения з.ТурЬ u-.trаг!з обрабатывались

но методу углового преобразования Фишера (1ублер Е.В., 1978).

РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКС1ШШГГАЛЫШХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Злкянио жирового компонента рациона на число автитело-образтоиях клеток (АОК) селезенки шпей

Результаты исследований приведены в табл. 2.

Как видно из таблицы, имеет место достоверное увеличение числа АОК во П п Ш группах животных. Наименьшее число АОК наблюдается в 17 и У группах экспериментальных животных.

Таблица 2

Влияние жиров рациона, отличающихся по соотношению

ПНЗК омега 6 к ПНЕК омега 3, на число АОК селезенки

Группы животных ! I ! п : ! 111 1 1У ! У

ШКыЫ соотношение-! ПНЖКыЗ! 102 { 40,6 | 1 ! | 30,8 | ! ! 0,66 | 40,6

М 2" 'ГО5 2,5-Ю5 2,1'Ю5 1,8'Ю5 1,8-Ю5

т •Ю4 1,4'Ю4 1,7'Ю4 1,3-Ю4 1,2'Ю4'

Р <0,05 <0,05 > 0,05 > 0,05

п 20 20 18 19 21

При анализе особенностей состава жировой части рационов, применявшихся в наших опытах, следует обратить внимание на

содержание в них ПНЖК. Есть данные, что изменения в количестве ПНЖК в экспериментальных диетах могут оказать влияние на величину образования В-клеток - продуцентов антител. Так, оч^пв и>п (1985) и ¿гЛскзоа У.л>. (1983) показал^, что с увеличе-

нием содержания 1ШК в рационе связано подавление образования .В-лимфоцитов. вгхскЕоп V.±\ (1983) наблюдал подобное явление при добавлен™ в рацион кукурузного масла, близкого по содержанию ПНЕК к составу подсолнечного масла.

В наших опытах наименьшее количество всех 1ШК содержалось в рационе со сливочным маслом - 12Д % (П группа), в то время как в контрольном рационе уровень ПНЖК составлял 36,2 %. Данные статистической обработки числа АОК в обеих упомянутых группах (I и II) показывают четкую обратную корреляционную зависимость ( г = -0,57) между числом АОК и содержанием ПНЖК семейства омега 6 в этих рационах, характеризующуюся высокой степенью достоверности (Р < 0^01) для данного числа наблюдений (н =37). Данная зависимость сохраняется также при сравнении числа АОК и суммарного количества ПНЖК семейства омега 6 в исследованных лвмфо-дцных органах, в частности, в лимфатических узлах брыжейки и пейеровых бляшках кишечника у животных этих групп (табл. 3).

В наших опытах у животных, получавших сливочное масло как источник насыщенного жира с субнормальным уровнем ПНЖК, число АОК при снижении суммы ПНИ возрастало.

В диете Ш группы животных в качестве жирового компонента входил кулинарный жир, который по содержанию ПНЕК занимал промежуточное положение между рационами I и П групп.

Особый интерес представляют данные 17 группы. Сумма ПНЖК жировой части рациона этой группы животных составляла 33,5$ от' общего количества жирных кислот и была представлена как ПНЖК се-

Число АОК в зависимости от содержания ПНЕК семейства омега 6 в экспериментальных диетах и некоторых лимфо-идных тканях

--

ИШ Вид показателя ! ! !

Объект

!

Ввд жира в диете

лярд+под-! солнечное!сливочное масло ! масло

I. АОК селезенка 1,99.Ю5 2,55« Ю5 -0,57 ' 0,01

2. Суша ПНЖК ыб + ооЗ (#) диета 36,2 12,1 -0,57 0,01

3. Суша ПНЕК омега 6 (%) диета . 35,8 11,8 -0,57 0,01,

4. Содержание ли- брыжеечные нолевой к-ты(#) лимф.узлы 20,1 13,1 -0,57 0,01

5. Суша ПЩ омега 6 (%) 21,5 14,2 -0,57 0,01

6. Содержание арахидоновой кислоты {%) пейерова . бляшка 14,0 4,3 -0,57 0,01

7. Суша ШШК омега 6 (%) 29,6 13,9 -0,57 0,01

мейства омега 6 - линолевая кислота - 13,3$, так и ШШК семейства омега 3 - линоленовая, эйкозалентаеновая и докозагексаеновая кислоты - 20,2%. При близком с контрольной группой общим количестве ШШК в рационе (соответственно 33,5 и 36,2 % в данной' группе отмечалось уменьшение числа АОК. Это уменьшение было более выраженным при сопоставлении с данными П группы, хотя доли ПНЯК омега 6 в этих группах (т.е. группы П и 17) были близкими и составили II,В% и 13,3$ соответственно.

Таким образом, в лаптах опытах впервые установлено, что не только общее количество 11НЖК, но и соотношение представителей ПН1К семейства омега 6 и омега 3 имеет существенное значение в образовании АОК.

- 12 -

Наша исследования не дают пока ответа на вопрос о механизме влияния ПН2К на реакцию АОК. 3 литературе высказано предположение, что снижение доли ПК£К влияет на биосинтез простагланди-нов, по-видимому, ответственных за подавление В-кяеток (згхск-аоа у.Р.еЪ г 1., 1983). При этом большую роль играют, очевидно, простагландины, являющиеся производными ШШК семейства омега 6, а ПНЖК семейства омега 3, возможно,'оказывают определенное конкурентное влияние. Последнее подтверждается данными п-уга.; с.н.,еъ ,-а. (1980) к ьг.псЗз г/.у.м. (1981), изучавшими соотношение ПНЖК в организме и синтез прсстагландшов и установивши!,ш, что снижение содержания арахидоновой кислоты (20:4 и; 6), связанное как с ограничением поступления ее предшественника (лк-нолевой кислоты - 18:21«6) в рацион, так и при конкурентном влиянии линоленовой (18:ЗюЗ), эйкозапентаеновой (20:5юЗ) и доко-загексаеновой (22:6соЗ), приводит к снижению синтеза ПГ и увеличении числа антителообразующих клеток;

Обращают на себя внимание данные по влиянию на число АОК в У группе. Жировая часть рациона в этой группе такая же, как во П группе, однако белка в этом рационе значительно меньше - всего 4% (во П группе - 24$). При таком снижении уровня белка влияние жира (сливочное масло) не проявилось, хотя можно проследить определенную тенденцию к снижению АОК.

Оценивая полученные данные, можно считать, что вашими факторами, определяющими число образующихся АОК,очевидно, являются специфические особенности жира рациона и содержание в нем ШШК семейства омега 6 и омега 3. Отсутствие выраженного влияния жировой части рациона У группы мышей на реакцию АОК, по-видимому, связано с.низким содержанием в этом рационе белка, поскольку белковая недостаточность угнетает функциональные показатели ,

имэдунокомпетентных органов (Мороз А.П., 1974; Наиби М., 1970; вас1жап Я. 197?; гг.;.опа с.1. . 1980; Водгарев М.Н. и

др., 1985).

Влияние типового компонента рациона па оеакцка ГЗТ у экспериментальных жизотных .

Результаты проведенных исследований приведены в табл. 4.

Как видно из таблица, имеет место достоверное увеличение ин—

декса реакция ГЗТ в Щ группе животных по сравнению с контролем.

Таблица 4

Влияние жирового компонента рациона на реакцию ГЗТ

Группа животных по ! ! " ! ■ !

составу жиров в ! I ! П ! Ш ! 1У ! 7

рационе * ! ! ! ! f

3,69±0'5 3,52i°'4 19±0,3 3,76.0,4 Зб56±

Р > 0,05 < 0,05 > 0,05- > 0,05 h_ 21_22_21_20 19

Рацион животных этой группы в качестве жирового компонента содержал кулинарный жир "Эра", в составе которого часть-жирных кислот находился в транс-форме. По-видимому, увеличений индекса реакции ГЗТ связано с особенностями жирнокисдартного состава лим-фоидной ткани, в частности, с низким содержанием', по сравнению с контролем, доли арахвдоновой кислоты в липидах пейеровых бляшек. Включение в рацион одинарного жира создало' ситуацию, аналогичную дефициту поступления линолевой кислоты в организм, но не в результате отсутствия ее предшественника в рационе, а вследствие чр^тич-ного блока, создаваемого в результате невозможности транс-изомеров линолевой кислоты превращаться' й' арахедоновую в той же степени, что ее естественные изомеры1 в' цис-форые (Кулакова С.К., 1985)

- 14 -

У животных П и У групп существенной разницы в индексах данной реакции не отмечалось.

Полученные данные (группа Ш) Позволяют также высказать суждение, что даже при низком содержании жира в рационе (10$ от общей калорийности)-специфические особенности жирового компонента к сочетаемость в нем ПНКК омега биомегаЗ могут оказывать статистически значимое влияние на проявление реакции ГЗТ.

Влияние ,тдра рациона и сочетания в нем ШЕК омега 6 и

омега 3 на бактериальную резистентность экспериментальных аивотных к з."\ур'пц-.цг1у-,и.

В качестве экспериментальной модели был выбран инфекционный процесс, возникающий при внутрибрюшинном заражении мышей з.турьз.-

иигхшн . Наряду с выживаемостью животных в этих опытах изучали влияние исследуемых дает на жирокислотный состав тканей лимфовд-ных органов подопытных мышей. Как видно из табл. 5, во всех изученных наш липвдах тканей иммунокомпетентных органов отмечены изменения, зависимые от .жирового компонента использованного в рационе. Характер наблюдаемых изменений и степень их выраженности в различных липвдах были неодинаковы. Изменения в состава жирных кислот липадов брыжеечных лимфатических узлов касались содержания ПННК обоих семейств (омега 6 и омега 3). Уменьшение доли лшолевой кислоты (18:2ы6) в липвдах лимфоузлов животных, получавших с рационами сливочное масло и рыбий жир, зависело от низкого уровня этой кислоты в данных рационах. Включение в рацион . рыбьего жира вызывало небольшое по абсолютной величине увеличение ПНЖ семейства омега 3 в составе тканевых липадов, в. то время как относительная их доля увеличивалась в 2-3 раза по сравнению с другими группами.

В липвдах селезенки мышей, потреблявших рыбий жир, доля

ПЖНК с 20 и 22 углеродными атомами была выше, чем в липвдах лим-

Состав Ш1ЕК в лшидах иотлуноког.иетвнтккх органов и лимфоцитах крови мнаей в зависимости от особенностей жировой части рациона

(в %% суммы всех жирных кислот)

г- - Жишше ! Вид жира в рационе

Липи- ДЫ лярд и подсол нечное масло Т 1 г 1 1 г сливочное ;кулинао- | " ! масло !ный ™Р ! ! ! ! рыбий жир 1 |сливочное ;масло и низший уровень ( белка

о

У л ж

31 е; И Г)« <з! т^Ю ¡4

к к п<

(-; XX)

18:2ги 6 20,1+1,5 13,1+0,8 18,6+0,75 8,16+0,6 10,6+0,82 20:41.16 1,4+0,1 1,1+0,12 2,(¿0,14 1,75+0,1 1,85+0,13

18:3^3 следи 0,08^0,01 0,05^0,005 0,26+0,03 0,77+0,002 20:5и 3 0,09+0,01 0,03+0,001 0,02+0,001 0,43+0,02 0,01+0,001

22:6и'3 0,17+0,01 0,17+0,01 0,18+0,02 0,91+0,07 0,27+0,02

18:2со 6 12,4+0,84 6,7+0,53

' 20:4IV6 ■ 9,5+0,65 9,0+0,70

! 18:3а. 3 0,08+0,004 0,08+0,003

| 20:5(03 0,04+0,001 1,34+0,11

22:6^3 1,43+0,1 5,9+0,39

18:2ы В 15,6+1,1 9,6+0,05 19,4+1,4 1С,6+С{7 .13,9+1,1 20:4(о 6 14,0+1,0 4,3^0,51 8,2+0,55 8,0+0,65 П,3±0,9 18:3^3 следы 0,07±0,003 0,02+0,001 0,04+0,002 0,С?+0,003 20:5иЗ 0,16+0,02 0,02+0,001 0,03+0,001 1,5+0,12 0,1+0,01 22:6^3 1,9&н0,15 0,82+0,09 .1,55+0,11 5,75+0,21 2,(¿0,17

л т в р

и,х

о а «; « и ч со

31

ь

о м •в-в

а а-

18:2со 6 11,4+0,93 20:4ю6 7,2+0,48 18:3«6 0,07+0,002 20:5ыЗ следы 22:6ыЗ 1,1+0,09

4,6+0,35 2,0+0,14 0,5+0,03 0,14+0,01 0,8+0,07

Код для обозначения жирных кислот: первое число - количество атомов углерода в молекуле кислоты; второе число - число двойных связей. и>- принадлежность жирной кислоты к семейству.

фоузлов. Одновременно выявлено снижение в них дсди ШШК с 18 углеродными атомами. Выраженные изменения обнаружены в составе жирных кислот семейства омега 3, в частности, резко увеличилась доля эйкозапентаековой и докозагексаековой кислот (20:5^3 и 22:ЗсоЗ).

В составе жирных кислот пейеровых бляшек отмечена прямая зависимость содержания 18:2со6 от величины присутствия этой жирной кислоты в рационе. Доля арахидоновой кислоты (20:4^6) претерпевала существенные изменения в зависимости от характера жира в рационе: от 14$ в контрольной груше до 4,3 в группе со сливочным маслом. Обращает на себя внимание снижение, по сравнению с контролем, доли арахидоновой кислоты в лишках бляшек мышей, получавших кулинарный жир, что связано с проявлением влияния трано-изомеров у.ирных кислот, ограничивающих, как отмечалось выше, превращение лднолевой кислоты (18:2ы6) в арахидоновую (20:4^6). Наличие ПНЕК омега 3 в рационе с рыбьим жиром вызвало отчетливое повышение в липвдах бляшек доли эйкозапентаеновой (20:5^3) и докозагексаеновой кислоты (22:6соЗ)»

В липвдах лимфоцитов мышей, получавших рыбий жыр, были рез- ' ■ ко снижена доля ПНВК омега 6 - 18:2 и 20:4 по сравнению с контрольной группой. Достоверного изменения содержания ШШК омега 3 не наблюдалось»

Давая обобщенную характеристику изменениям, жирнокислотного состава лицщиз исследованных лимфоидных органов и лимфоцитов, необходимо, прежде всего, обратить внимание на различную степень влияния изменения соотношения ПШК омега 6 и омега 3 в рационе на состав ПНЖК тканей этих органов и клеток. Менее изменчивыми были липады, выделенные из лимфатических узлов брыжейки. В них

главным образом отражалось влияние количества линолевой кислоты (I8:2tj6) в рационе и в меньшей мере влияло присутствие в рационе жирных кислот омега 3, В липидах селезенки при введении в рацион рыбьего икра увеличивалось только количество 11НЖК омега 3, а в липидах лимфоцитов происходило снижение доли ПННК семейства омега 6. Наиболее глубокие изменения наблюдались в липидах пейе-., рових бляшек: снижение доли ПНЖ омега 6, сопряженное с увеличением доли ПШК семейства шега 3.

Таким образом, к моменту заражения инфекцией о.ТурМдиглиш имели место достаточно глубокие изменения жирнокислотного состава лимфоидных тканей, которые можно оценить как изменения количества и соотношения предшественников биосинтеза прсстагландинов ■ различных линий в лимфоидных органах и клетках. Помимо этого возможного влияния подобные изменения оказывают влияние и на функциональные свойства клеточных мембран. Наличие такой связи показано при сравнении изменений жирнокислотного состава сплено-цитов и мембран В- и Т-клеток ( р.к. ,ct el. . 1987).

Результаты влияния особенностей жирового компонента рациона на выживаемость мышей после заражения их сальмонеллами з.Typhi -murium приведены в табл. 6.

Как видно из табл. 6, больше всего выжило животных в группе, получавшей жир сардин "Иваси" и кулинарный жир "Эра". Рассматривая механизм такого защитного действия этих жиров, необходимо отметить, что не представляется-возможным объяснить- его снижением доли арахвдоновой кислоты, как предшественника простаглавдинов, являющихся медиаторами воспаления. Из всех лимфоидных органов и клеток "снижение доли этой кислоты при использовании рыбьего жира было достаточно выраженным лишь в липидах лимфоцитов. В Петровых бляшках отмечалось также снижение доли арахидоковой кисло-

Влияние жирового компонента рациона на выживаемость мышей, зараженных сальмонеллами

.Показатели

Вид жкпа в рационе; группа опита

ляpд+пoд-^cл^шoчf кули-¡рыбий,сливочное масло солнечное"кое " нар- ! ¡с низким уровнем масло ¡масло !шн жир > Iбелка (4$Г) (I) ! (П) !(Ш) ЩУ)! (У)

Количество зараженных животных 75 76 74 75 79

Количество павших

на 21 день опыта 46 44 33 36 49

% выживших 38,6 42,1. 55 52 38

Р ' > 0,05<0,05 < 0,05 >0,05

'ты, как предшественника простагландннов, являвшихся медиаторами воспаления. Из всех лимфоидных органов и клеток снижение доли этой кислоты при использовании рыбьего жира было достаточно выраженным лишь в липидах лимфоцитов. В пейеровых бляшках отмечалось также снижение доли арахвдоновой кислоты (20:4ы6), но оно было менее выраженным, чем при других видах жиров. Примечательно, что при самом низком уровне арахвдоновой кислоты с лимфовдных тканях мышей, получавших сливочное масло, выживаемость в этой группе была также низкой. В группе с кулинарным жиром, содержащим высокий уровень арахвдоновой кислоты, выживаемость была выше и сопоставима с выживаемостью в группе о рыбьим жиром. В то же время в контрольной группе животных, содержавших значительную долю арахвдоновой кислоты л тканях, выживаемость была самой низкой.

В то же время необходимо особо отметить, что выживаемость животных во всех группах распределилась в таком порядке, в каком убывает величина соотношения ШИК омега 6/омега 3 в рационе.

- 19 -

На основании сопоставления этих данных можно предположить, что ведущим в механизме защитного действия рыбьего жира при саль-монеллезной инфекции является повышение доли ПНЖК омега 3 в ля-пидах лимфоидных органов. Подтверждение этого суждения мы нахо--дим в наблюдениях ряда авторов на моделях некоторых патологических процессов: волчанка ( y<e.-:ch ±=.v.,eb al. , 1982), артрит , ( Lusli С. ч., ot r.X. , 1985).

Возникает вопрос, реализуется ли влияние ШШК смега 3 на этапе синтеза простагландинов { Johnston P.v. , 1985; Lands v.b.si,, 1986) или структурно-функциональной интеграции мембран (Лева-чев М.М., 1986), как и вопрос о том, какое соотношение ПНЕК омега 6 /омега 3 является в рассматриваемых процессах оптимальным.

Очевидно, что !эти важные вопросы требуют дальнейших исследований. Однако не вызывает сомнения, что направленные изменения в количестве и соотношении ПНЖ семейства линолевой и линолено-вой кислот в рационе открывают новые возможности для повышения устойчивости организма к инфекции, равно' как и возможности для эффективной модуляций иммунного ответа. Этот подход может оказаться плодотворным не только при разработке жировой части продуктов питания, но также при поиске путей совершенствования диетотерапии тех заболеваний, патогенез которых, в частности, связан с реакциями иммунокомпетентной системы.

Морфологическая перестройка органов иммуногенеза при использовании в экспериментальных диетах различных пищевых жиров

Сравкителькое морфологртеское изучение селезенки, пейеровых бляшек и регионарных-лимфатических узлов было осуществлено в опытах,.в которых животные не заражались's.Typhulurirm . Это позволило выявить определенные общие и частные особенности клеточных

реакций у различных групп экспериментальных животных, свидетельствующих о характере влияния жировых диет на структуру перечисленных органов. Так, во всех группах экспериментальных животных отмечалась различная степень выраженности реакции со стороны со--судистого русла. У животных подопытных' групп наблюдалась гиперплазия фолликулов в селезенке, наиболее ярко выраженная во П и 1У группах, жировой компонент которых включал в себя сливочное масло и рыбий жир.

В гиперплазированных фолликулах было обнаружено исчезновение характерного рисунка зародышевых центров в результате уменьшения количества бластннх форм лимфоидных клеток, уменьшение количества средних и малых лимфоцитов, что по-видимому, связано со снижением функциональной активности этих центров. В то -же время отмечалось увеличение количества плазматических клеток в суб-капсулярной зоне и по ходу трабекул. Оценивая морфологические изменения в селезенке опытных животных, необходимо ввделить наличие в этом органе выраженных макрофагальных реакций, особенно у тех, которые получали сливочное тело на фоне малобелковой диеты.

Подобные изменения наблюдались также в пейеровых бляшках и прилегающей к ним стенке кишечника. В них отмечалось набухание эпителиальной выстилки и отек подслизистого слоя в зоне бляшки. В эпителии ворсинок, прилежащих к пейеровкм бляшкам, отмечалось увеличение количества бокаловидных клеток. В отечном подслизи-стом слое преобладали нейтрофильные лейкоциты и лимфовдные клетки. Количество 'макрофагов было незначительным.

По периферии фолликулов выявились плазматические клетки, которые дифференцировались не.только по морфологическим признакам, но и по степени активности реакции на РНК.. Описанные измене-

ния били наиболее выражены у животных П и Ш групп, которые в качестве жирового компонента получали сливочное масло и кулинарный

жир.

Гистологическое изучение брыжеечных лимфатических узлов у ' контрольных и опытных животных не выявило каких-либо морфологических различий в их структуре, за исключением гиперплазии фол- ,, ликулов в брыжеечных лимфоузлах у животных П группы, что подтверждалось морфометрически в виде статистически достоверного увеличения их площади. Результаты морфометрических исследований представлены в таблице 7.

Таблица 7

Результаты морфометрических исследований органов иммуногенеза под влиянием развличных жиров в рационе

Вид жира в рационе Площадь фолликулов селезенки в микронах . ! Площадь фолли-! кулов брыжееч-! ных лимфатичес-! ккх узлов в ! микронах ¡Площадь ( ! кулов пе! <бляшек в 1 | хшш- ;еровых микронах

м £ т ! Р ! М*т ! Р | М + т ! р

Смесь лярда и подсолнечное масло (I гр.) 147417* 11088 54155* 3915 99635* 12402

Сливочное 167825* масло (П гр.) 12989 А 0,05 91271* 7092 < 0,05 150457* 14374 < 0,05

Кулинарный жир № гр.) 152344* 14431 > 0,05 6002.2*' 4929 > 0,05 153719* 19853 < 0,05

Рыбий жир Ш гр.) 157608* 12026 > 0,05 . 61935* 3184 > 0,05 225461* ' 26156 < .0,05

Сливочное масло на фоне малобелко вой диеты-(У гр.) 144792* 10179 ■> 0.05 49626* 28165 > 0,05 168611+ 14005 < 0,05

- 22 -

На основании полученных: данных ;-.тно высказать следующее мнение, что, чем меньше содержится в диетах iffiiK, те,л щра&еннее реакция со стороны селезенки и брыжеечных лимфатических узлов в виде увеличения площади кх фолликулов. лак видно из табл. ?, данные 1У группы мышей близки к данный III группы, хотя они разнят-, ся по количеству ШйК в рационах этих групп. Ио-в^дшо:.^, данное несоответствие вызвано разнородностью семейств ШЩ в рационе животных 1У группы, данные У груши согласуются о литературными данньмл (Мороз A.n., 1970; HwmgD.K,, 1^60; Friend j.v. ,1У80; De Wille j.VT., ХУ81) об угнетении шрфофункциональных показателей органов июдуногенеза при низкой уровне белка в рационе.

Анализ результатов измерений площади фолликулов в пейеровых бляшках Показал, что с увеличением количества 1ШИК в рационе' площади фолликулов увеличивались. Исключение ооотавляат данные I и У групп животных.

ВЫВОДЫ

I. Изокалорийные низкожировш рационы (10$ от общей калорийнооти), отличающиеся по составу включенных в них киров: оллвочное мао-ло, кулинарный жар, рыбий жир, подсолнечное'масло в сочетании ' с лярдом - существенно влияют на монологическую реактивность и инфекционную резистентность животных к возбудителю. Z. Число антитедообразуюидах клеток зависит как от суммарного содержания 1ШЖ в рационе, так и от абсолютного иоличеотва представителей отдельных семейств ПН&К (омега 6 и омега 3). 3. Вийвлака достоверная обратная корреляционная зависимость между суммарным содержанием Шйл оемейства омега 6 в рационе, в лим-фопдаш: тканях животных (брыжеечных, лимфоузлах и пейеровых* бдясках) а числом ангителообразующпх клеток в селезенке при иммунизации жквотши эритроцита:,ш барана.

- 23 -

4. Включение в рацион животных кулинарного- жира, содержащего транс-изомеры жирных кислот, приводит к достоверному увеличению у животных индекса реакции гшерчувствительности замедленного типа.

5. Рационы с различным составом пищевого жира вызывают морфологические изменения иммунокомпетенткых органов (селезенки, брыжеечных лимфатических узлов, пейеровых бляшек), сопровождающиеся выраженной макрофагальной реакцией в них, сочетающейся

в ряде случаев с гиперплазией фолликулов,' уменьшением в зародышевых центрах количества бластных форм, плазматических клеток, средних и малых лимфоцитов. Степень выраженности изменений зависит от органа и состава исследуемого рациона.

6. Морфометрическое изучение органов иммуногенеза при воздействии различными пищевыми жирами выявило увеличение площади фолликулов селезенки и брыжеечных лимфатических узлов при снижении в рационах уровня ПНЖК. В пейеровых бляшках четкой завишшос-ти мезду изменением площади фолликулов я содержанием ПНЖ в рационах не установлено. Однако имеет место тенденция к увеличению значения этого морфометрического показателя при повышении уровня ШИК в рационе.

7. Достоверное повышение выживаемости животных при заражении их э.тур)л1пигЗ-ши сопровождается уменьшением доли ПВ$К семейства

■ омега 6 и увеличением доли ПНЖ' семейства омега 3 в липидах " лимфодных органов животных, что зависало от уменьшения в пищевом рационе величины соотношения содержания ПНЖ семейств омега 6 к омега 3; ' •

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

1. Хайров Х.С., Кулакова С.Н., Медведев Ф.А. Сергеева К.В. Особенности включения ШШК семейства омега 6 и омега 3 в липиды лимфоидных тканей // Материалы Всесоюзного симпозиума по биохимии липидов. - Алма-Ата, 1987'. - С. 221.

2. Хайров Х.С., Винник А.Л, Влияние количественных и качественных изменений жирового состава рациона на некоторые показатели иммунитета мышей линии СВА // Материалы конференции "Актуальные вопрооы стандартизации лабораторных животных для медико-<5иологичеоких исследований". -М., 1987. - С. 71.

3. Волгарев М.Н., Хайров Х.С., Кулакова С.Н. и др. Повышение резистентности мышей (линии СБА) к инфекции, вызванной.

б , ТурЫтигхит , в зависимости от характера жира в рационе // Вопр. питания. - й 6. - 1988.