Автореферат и диссертация по медицине (14.00.09) на тему:Апластические анемии и миелодиспластический синдром у детей Республики Беларусь (эпидемиология, этнология, молекулярно-мембранные механизмы патогенеза)

РГ 3 О"

На правах рукописи

К03АРЕ30ВА ТАТЬЯНА ИВАНОВНА

А ПЛАСТИЧЕСКИЕ АНЕМИЙ Н МШОДИСПЛАСТИЧЕСКИЙ СИНДРОМ У ДЕТЕЙ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ <ЗПИЛЕ!!И0Л0ГИЯ, ЭТИОЛОГИЯ. МОЛЕКУЛЯРНО-МЕМ5РАНКЫЕ МЕХАНИЗМЫ ПАТОГЕНЕЗА)

14.00.09 - Педиатрия

14.00.29 - Гематология и переливание крови

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой сютени доктора медицинских наук

Москва - 1995

Работа вклолнена в Белорусском государственном институте усовершенствования врачей.

Эпидемиологические исслелогания лроэодились совместно с сотрудниками лаборатория эпидемиологии гемопагий НИИ гематологии и перелнсачня крсзи ?.!3 Республик Беларусь.

Научный консультант: доктор биологических наук, лауреат Государственной премии Республики Беларусь Е. СЛОЕСЯАКИНА.

Официальные оппоненты: " члсн-корреспондснт РАШ. профессор К. С. КИСЛЯК; доктор медицинских наук, профессор Н.А.ТОРУЕАРОЗА; доктор нйдйцинскик наук, профессор С. А.ЙАЯКСВА.

Ведущая организация: ШИ детской гематологии МЗ и МП России.

Защита диссертации состоится " " 1535 г.

в ЦЦ. часов, на заседании дкссертационнсго Созета Л 084.14.02 при Российской государственной мсди'лннсноа университете (И786Э. Йэскаа. ул. Островитянова, д. 1).

С диссертацией! шзно ознакомиться в библиотеке РГМУ.

А

Автореферат разослан"" ^" 19Э5 г.-

Ученый секретарь специализированного Сонета,- доктор «ёлииинских наук,

профессор М.А.ФАЛЕЕВА

ОБЦАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Одни« из вахнеквих направлений клинической гематологии является изучение апластичсских анемий (АА) и миелодиспласгических синдромов (МДС) у детей. Это обусловлено тенденцией к нарастанию этих патологических состояний, сложностями диагностики первичных МДС. трудностями в лечении, быстрым прогрессирсваниом заболевания и высокой летальностью (Марш Дк.К.:.. 1993; Prindull G.. 1994; Nissen-Dreuy К., 1994; Torubarova N et al. 1994).

Вопросы заболеваемости, этиологических факторов, патогенеза и лечения цитоккнами АА и ВДС у детей изучены недостаточно. Это связано с трудоемкостью проведения эпидемиологических исследований, требующих использования унифицированных диагностических критериев и методологических подходов (Ссечинский И. В. с соавт.. 1991; Caaitta В.М. et al, 1982; Hasle Н., Kern-drup G., 1994). В последние годы появились единичные работы, свидетельствующие об изменениях липидного состава зритроцитар-кых мембран, активности антиоксидантной системы в клетках крови. и об участии свободнорадикальных соединений, в той числе и активных форм кислорода (АФЮ, в патогенезе АА и МДС у детей (Румянцев А.Г. с соавт., 1989, Карав В.Н. с соавт., 1994.; Gu-issasolova-Zulneta et al, 1991 и др.). Однако до сих пор оста-отся нерешенными вопросы эпидемиологии, этиологии, роли нару-аений структурно-функционального состояния и антиоксидантной зистеш защиты зритрока в патогенезе анемического синдрома при \А и МВС. Практически отсутствуют сведения о генерации АФК им-дукокоипетентныии клеткаий костного мозга и их участии в ишу-■¡ологических механизмах патогенеза, а также о лечении рекомби-¿антным зрктролозтином при данных панмиелопатиях (ПМШ .

Авария на Чернобыльской АЭС создала новую экологическую :ктуацию в Республике Беларусь,(РБ), когда экологическое неблагополучие з результате . химического загрязнения окружающей :редь: усугубилось действием радиационного фактора. На сегод-яоний день наиболее распространенными экзотоксикактами ь РБ еляются радионуклиды цезия, свинец, и нитраты (Кенигсберг ¡.С., БугловаЕ.Е., 1995). Воздействие неблагоприятных эколо-'ичэских факторов на нормальные клетки осуществляется как че-■ез гэноп. вызывая кутает или превращая нормальную клетку в •пухопевую (Чертков К, Л., 1993; Ллойд Д. К., Эсварс А. А . 1993

и др.), так и через повреждение цитоплазматкческих мембран, что приводит либо к гибели клетки, либо сё структурно-функциональному нарушению (Yoncy Sh. et al, 1379; Purohit S.C.. 1980). В связи с этим проблема АА и М£С в современных экологических условиях РБ, а частности, изучение заболеваемости, этиологических факторов, структурно-функционального состояния зритрона на молекулярном (клеточном) и мембранном уровне, приобретает ецб большую значимость и актуальность.

Ц?Яь_и з^ачи_ис&зещвания._ Цельн работы явилось выявление заболеваемости АА и М£С у детей ?5. выяснение особенностей этиологических факторов и механизмов патогенеза, а также разработка истодов профилактики и патогенетической коррекции nporpa.4i.Koi! терапии этих патологических состояний.

Поставленную цель предполагалось достигнуть в холе решения следующих задач:

1. Провести эпидемиологические исследования заболеваемости АА и МДС у детей в возрасте от 0 до 15 лет, псдзергаихся Боздейстзет экологически неблагоприятных факторов в целом по F5, отдельна:,) еб регионам з период 1979-1992 годы и выяснить, существует ли взаимосвязь между урознем заболеваемости и уровнем радиоактивного загрязнения территорий цезием-137.

2. Определить содсрйанис -экологически неблагоприятных веществ в организме обследованных детей (свинец. " ртуть, це-зий-137, стабильный йод) и изучить их влияние на состояние зритрона.

3. Изучить структурно-функциональное состояние зритрона у детей, больных АА и S£C. влияние на него гормонов.

i. Исследовать физико-химические свойства мембран зригро-цитсв у детей с АА, МДС и ЕДА. подвергшихся действию экологи-чеекк неблагоприятных фактсрез.

5. Выяснить особенности активности ферментативной и неферментативной антиокси.пантнсй системы (АСС) защиты и уровн; вторичных продуктов псрекисного скисления липидоз ШОЛ) г эритроцитах .и плазме крези у больных АА, МДС и ЯДА в зазиси-мости от уровня токсикантов в организме.

6. Исследсзать способность иммунокомлетентных клото; костного мозга (к.м.) генерировать A'íK «етсдсм лоилнолзазиси-мой хемияяминесцонцпи (ЛЗХЛ) у детей, больных приобретенной А. (ПАЛ) и МДС.

7. Изучить сочетанкое влияние физико-химических неблагоприятных факторов на эритропоэз в модельных системах (в эксперименте на животных).

В. Разработать методы профилактики, патогенетической коррекции программой терапии и дийеренимрованные схсгш диспансерного наблюдения и реабилитации при АА. МДС. ЖДА у детей.

' Основные положения, выносише на защиту:

1. Увеличения уровня заболеваемости АА у детей в целом по Беларуси и отдельна.! её региона:.) после катастрофы на ЧАЭС (1936-1992 гг.) не выявлено. Однако, установлена тенденция к росту данной патологии как по Беларуси, так и в большинстве её регионов с разным ежегодный темпом прироста. МДС у детей диагностируется с 1986 года. Показана тенденция к нарастанию уровня заболеваемости МДС (1Э86-1?92гг.) как в целом по Беларуси, так и отдельным её региона;.! с разним темпом ежегодного прироста. Зависимости между частотой АА и МДС у детей, прожизавних в зеках радиационного контроля (Брестской, Гомельской и Моги-лезской областях) и урознеы радиоактивного загрязнения территорий цезием-137 от 37 до 555 кБк/м2 не обнаружено.

2. Эритроциты и эритроцитарные мембраны весьма чувствительны к воздействию неблагоприятных экологических факторов и реагирует на них изменением физико-химических свойств, что является одним из основных патогенетических механизмов развития анемического синдрома и подтверждается экспериментальными исследованиями на животных.

3. В патогенезе АА и ВДС у детей прослеживается сочетан-ное влияние неблагоприятных экологических факторов (свинец, ртуть, малые дозы радиации), где основная роль принадлежит тя-аельш металлам, приводящим к актизации свободнорадикальных процессов и снижению активности антиоксидантной системы защиты в клетках (эритроцитах) и плазме крови, наруиению структурно-функционального состояния эритрона. Предложена патогенетическая концепция влияния МДР и токсикантов на состояние эритрона при АА и МДС у детей.

Научная новизна. Впервые проведены эпидемиологические исследования заболеваемости АА и МДС у детей Беларуси в воз-

расте от 0 до 15 лет (1979-1992 годы), включающие многсфактор-нкй анализ: динам'ику частоты этих нозологических форм как в целом по РБ. так и отдельна ее регионам де-и поело катастрефь на ЧАЗС, в зависимости от пола, возраста, места проживания, г также уровня радиационного загрязнения территорий цезием-137. На оснсоании этого построены прегностическио (трендовые) модели. создан Государственный Регистр АА и МДС (1979-1992 годы), являющийся уникальным не только для здравоохранения, но, и г мелем. для государства.

Впервые путем применения комплекса современных методе: исследовании: рад йот лунная, гематологических и биофизически; показано сочетанное дейстзиз неблагоприятных экологически; факторов в генезе АА и МДС, где основная рель принадлежит химическому загрязнен;® окружающей среды.

Впераые проведено комплексное исследование структурно-функционального состояния зрихрона у детей при АА., МДС I ЯДА: ферро- и зритрскинетики, биофизических харачтеристи! мембран эритроцитов (Ег). активности ферментативной, нефермен татиЕной АО защитной системы, а также уровня ПОЛ а Ег и плазм; кроои. микрозлементного состава крови и показана сопрязснност: функционирования зритрсна и ц. а. Результаты исследований поз волиля преддоаить патогеяетичеекув концепцию кембинировачног воздействия неблагоприятных 'экологических факторов (МДР, позы ионный уровень свинца и ртути в крови.) на состояние зритрсна детей при АА. ВДС с позиций молекулярно-мембранных механизмов гиперпродукция свободнорадикальных соединений в Ег и плазм крови, снижение АОС заняты зритрсна. нарушение структур ко-функциснального состояния Ег и мембранных компонентов Подтверждением предлоаенней концепции является результат исс ледований сочетачкогс воздействия физико-химических неблагеп риятных Факторов внешней среды на структурно-функционально состояние зритрсна нивотных.

Впервые прсэеденс изучение генерации АФК клетками к. ¡.' при ПАА и МДС у детей и выявлено участие их з патогенезе; су щестЕеннъй вклад з процесс образования АФК зкссят лимфоцит к. м. з которых происходят качестаекныэ нарушения редокс-систе плазматических мембран. .Метод оценки кислородзктиэирукд? функции к.м. с использованием ЛЗХЛ является информативным д;

/точнения и расширения ит/нологических механизмов патогенеза.

Новый также являются обобщающие данные, позволявшие глубже понять механизмы гормональной регуляции зритропоэза (ЭП) при АА и МДС у детей.

Впервые в отечественной детской гематологии применен ре-<омбинантный эрктропоэтин Сг-ЕРО) для лечения ПАА у детей. Доказана целесообразность использования метода кинетики Ег для оценки эффективности указанной терапии. Впервые в РБ проведено яедико-экологическое обследование детей, проживающих в условиях крупного промышленного центра после аварии на ЧАЭС, что позволило устанозкть генез анемического синдрома при ЖДА (дефицит йода, цинка, меди, витаминов А и Е, нарушение функционального состояния щ.ж., комбинированное действие неблагоприятных экологических факторов) и обсснозать необходимость программной корригирующей терапии и повьаения резистентности организма к этим условиям.

Практическая значимость работы. Полученное данные о заболеваемости АА и МДС у детей РБ (1979-1992 гг.) позволили создать Государственный Регистр, который используется для дальнейших углубленных исследований и поиска взаимосвязи заболеваемости с различными факторами окружающей среды. Результаты исследований позволили установить этиологические факторы, механизмы патогенеза АА, МДС и КДА на молекулярно-мембранном уровне, что диктует необходимость проведения разностороннего обследования больных с включением в обаую программу определения содержания s-EPO, уровня свинца и ртути в крови и биофизических характеристик эритрона. Уровень токсикантов в крови служит основанием для корригирующей терапии, направленной на выведение ксенобиотиков и повьшение резистентности организма. Выявление нарушения структурно-функционального состояния эритрона (снижение АО защитной системы, содержания меди и цинка в клетках и плазме крови, изменение микровязкости липидного бис-лоя мембран Ег) при АА и МДС позволили обосновать необходимость и целесообразность назначения витаминов А и Е. Доказана целесообразность включения г-ЕРО в современные программы лечения больных ПАА, особенно, с низким исходным уровнем s-EPO, оценка эффективности которого должна производиться и с учетом показателей эритрокинетики (ЭК). Разработаны и обоснованы диф-

феронцирсеанные схемы диспансерного наблюдения .и реабилитации больных АА и НДС. Результата проведенного комплексного исслз-довакия состояния эритсоцитарнсй системы (ЗС) у детей, прожигавших в условиях экологического воздействия крупного проявленного центра (г.Минска), дают представление о высокой частоте железодефицитных состояний (НДС). В результате разработана программа "гемоглобиновего" оздоровления детей Беларуси, обеспечивающая более эффективную профилактику, выявление, диспансерное наблюдение и реабилитация детей, детям с тиресприз-ного характера и с АА и УДС с нарушенной функцией ¡ц. ж. рекомендуется диспансерное наблюдение у эндокринолога с периодической проверкой у них показателей тиресидных гормонов, а также для коррекции анемического синдрома включение з комплексную терапия гормонсв.

Работа выполнена в рамках комплексной программы Р5 "Охрана материнства и детства в условиях последствий катастрофы нз ЧАЗС", М госрсгистрацки 01.9.10.025.289, и межреспубликанской програ^ы "Изучение физико-химических характеристик форменных элементов крови при дейеггии зкзо-зндегеннего ианизируюцегс излучения", N госрегистрации 02.03.124.046. 476.

Апробация работа.. Основные положения работы доложена нг ¿¡ездукародных, всесоюзных и республиканских конференциях у симпозиумах: П-й и Ш-й Мездународных научне-практически> конференциях "Чернобыльская катастрофа: прогноз, профилактика, лечение, диагностика и ысдико-пс;иологическая реабилитации пострадавших" (Миясн, 1993, 1994). Н-м Международном конгрессе "Научно-медицинские проблемы Чернобыля" (Минск. 1994); Международном симпозиуме' "Панмиелспатии у детей. «Фокус на пие-лодиспласт'пческий синдром" (Москва, 1994); 2-й Международно! конференции "Радиобиологические последствия аварий на атомны: электростанциях" (Кзсква. 1994); Белорусско-немецком симпозиу ыо по проблемам детскей енкогематологии (Минск,1991); I Есесо жзнсм симпозиуме "Молекулярно-клеточные механизмы хрсничоскег (внешнего и внутреннего) действия ионизирующих излучений н биологические системы (Пулнно, 1990); Радиобиологическом лез де (Киоз, 1393);' 1-Ш-й Республиканских научно-практически конференциях по радиобиологии и радиоэкологии (Минск, 1983 1989,1990; Гомель,1992); обществе детских врачей Беларус

йинск, 1990); III-м Всесоюзном съезде гематологов и трансфу-иологов (Киров, 1991); YI-м съезде детских врачей Республики зларусь (Минск, 1993); IY Республиканской конференции "Науч-з-практические аспекты сохранения здоровья людей, подвергиих-н радиационному воздействию в результате аварии ка ЧАЗС" (Мо-нлев, 1Э94); П-м Белорусском съезде детских онкогематологсв Минск, 1994); Российской конференции по детской гематологии Эт науки к практике" (Санкт-Петербург, 1995).

Внедрение результатов в практику. Материалы диссертации аяли отражение в методических рекомендациях "Диспансерное аблодение и реабилитация детей с гематологическим заболевании" (Минск, 1994, 31с.) и "У.елезодефицитнке состояния у леей и подростков Республики Беларусь" (Минск,1995, 20с.), ут-ержденных КЗ FB. Разработанная программа "Гемоглобиновое" оз-оровление детей Беларуси представлена на практической кснфе-енции по медицинской реабилитации детей РБ (Минск, 1994) и рименяется в лечебно-профилактических учреждениях республики, о заказу МЗ РБ разработана и внедрена в практическую работу азличных категорий стационаров РБ программа "Стандартизация ечебно-диагностических мероприятий при анемиях и панмиелопа-иях". Биофизические методы исследований мембран Ег, определено содержания s-EPO, свинца и ртути в крови, применение г-ЕРО вита!.:инов А и Б, цинка, меди получили внедрение в лрактичес-ую работу отделений Республиканского детского онкогематологи-еского центра (РДОГЦ) г.Минск. Теоретические положения и рактические рекомендации используются при подготовке слушате-ей Белорусского института усовершенствования врачей и студенев медицинских ЗУЗов РБ.

Публикации. Результаты опубликованы в 45 работах и 2 ме-одических рекомендациях.

Объем и структура диссертации.

Диссертация содержит введение, 6 глав собственных иссле-ований, заключение, выводы, практические рекомендации, прило-ения и список цитируемой литературы, включающего 16В отечест-енных и 183 иностранных источников литературы. Материал ¡ггло-ен на 272 страницах машинописного текста, содержит 58 таблиц 48 рисунков (2 Приложения содержат 19 рисунков).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ.

Материалу и Эпидемиологические исс-

ледования (1975-1992 годы) включали 167 случаез АА и МДС у детей (30 - МДС и 137 -АА). Под назим наблюдением б период ( 1983 по мг.рт 1935 года находилось 80 (46 М и 31 Д) детей, больных АА и МДС з возрасте от 1 до 15 лот: 65?. больных с ПАА, 20л - с врожденными формами АА и 15.? - с МДС. Медианы зозрас тез составили 8.9 лет, 7.0 лет и 6,3 лет. соответственно, длительностью досдкагнсстического периода менеее 1 месяца 1.3 месяца преобладай дети с ПАА -79.5л и сОл соответствен но. для МДС - (55.5А детей) отот период составил 4-6 месяцев 3 57.8/. случаях наблюдались идиоматические форма АА и МДС Среди везиояккх этиологических факторов были вирусные инфекцн (18,62), острая бактериальная инфекция (9.3/). воздействие ле карствснных препаратов (7,8,?), вакцинации (6.4?). У 71.2 больных АА и МДС обнаружена очаги хронической инфекции. 78.2 детей по данным вирусологического исследования крови, моч; слюны, лимфоцитов к.м. имели маркеры к вирусам простого герпг са, цитсмегал;:и. гепатитов В, С. Д. У 76,9,? больных наблюдалс нормальный кариотип, а у 23,1? - обнаружены структурные изм; нения хромосом. При ишунофеноп'лирозакки л1^.:фоцитоа к. м. п; ПАА и МДС (!Ш обнарунено сниаение количества Т-лимфоцит< хеллороз (СО;*) и увеличение Т-лгафэцигов супрессороз !С0;' при сши&кхи глиунорегуляторкого индекса до 1,0. У 33,7? дот с ПАА и МДС выявлено повышение урезня фетального Ко и С-?еа тивного бежа, у 29,2','-. - снижение количества церулоллазмин гаптоглобина. Среди 52 больккх с ПАА у 23I детей выделе сверхтяжелая форма, у 55,81 - тяжелая и у 21.2' - нетяхел (ферма АА. МДС представлен различными вариантами: у 53,31 рефрактерная анемия СКА), у 3,32 - ЯА с кольцевидны:.'.',', сидсрс ластами (ЕАКБ). 16.1%. - ЯА с избыточным числом бластных юта (ЛАЕ В) и 16,7?. - йАЕЗ с трансформацией з лейкоз (РАЕВ-Ь). X/ ника различных вариантов МДС зкяачала сочетание синдромов: 307 осльных - анемического, у 83,3л - геморрагического [ 33,37- - инфекционного наблюдалась лимфаденопатия, сплзногег токеггл!«. Лзтальность при ПАА составила 57,7Л, при врожден: формах АА -77,17. и МДС -41,11. Трансформация в острый миела

ный лейкоз произошла у 7,5?. больных ПАА и у 257,- ЫДС. Наиболее частой причиной смерти были генерализованный геморрагический синдром и инфекционные ослокения. На основании радиацион-но-зкологического паспорта больных АА и МДС установлено, что все дети проживали в услозиях действия МДР, 41,6% имели повышенный уровень РЬ, 29.1% - ртути и 18,7?. - двух токсикантов в организме. Скрининговое обследование проведено у 816 детей, проживающих в условиях крупного проявленного центра г. Минска. На основании гемограмм, феррскинетики у 124 - оо.-.аруке:-:г ЕДА. По данным радиационно-экологическсго паспорта выявлено, что дети с ЖДА имели легкую степень йодной недостаточности, 33,1% - повышенный уровень РЬ в организме, значения средних индивидуальных доз внутреннего облучения в;, ж. составили 4.9 :ГР, а активность ргдисцезия в организме была 0,31-0,50 -(Бк/организм.

Для оценки эпидемиологических исследований использована 'скрининг"-програ'.*:.!а РАИН, а также программа отдела эпидемио-югии международного агексгва по исследовании рака (г. Лион, ерзкция, д-р М. Паркин). Основным методологическим подходом яв-тялся проспективный метод с ретроспективно составленной когортой (Colbeгg Л.ег а!., 1972; Ве1г V., "ЛазМг^гоп 0., 1990). биографическая структура детского населения изучалась на ос-ювании документов Госкомстата РЕ.

Экологический мониторинг в районе проживания обследуемых ¡етей включат оценку радиационной обстановки< Каталог доз обучения жителей населенных пунктов РБ, 1992); техногенное радиоактивное загрязнение и загрязнен,;-з атмосферного воздуха '.Минска (Медико-экологический мониторинг, г.Минск, 1994); асчет дозы внеснего облучения (Метод, указания по определению едовых суммарных эффективных доз облучения жителей населенных унктоз Р5, 19Э4). Эндогенное содержание радионуклидов (ценя- 137) в организме определяли с помощью счетчика излучения еловека (СИЧ); дозиметрическое обследование щ.к. проводили едиометрсм СРП268-01; концентрацию тяжелых металлов в сыво-отке и цельной крови - энергсдисперсионным рентгенофлу; ес-ентным методом (спектрометр "Спектрейс-5000". фирма "Трак-ор-Икс-рей". Нидерланды).

Оценка состояния эригрона. Содержание сывороточного железа (СЮ и обцую аелезссвязываоцую способность сыворотки (ОНСС) - определяли спектрометрически (Solea В.Е. et al. 198S). Уровень сывороточного ферритина (СФ) - с помощью радиоиммунеметрического метода, используя стандартные диагностические наборы "R-l-grostFerritin" ("Bchrlngcr\ Германия). Концентрации s-EPQ - радиоиммунным методом с помоцьз наборов "Eritrcpoie-tin" ("Акесп". CEA). Уровень трансферрина (ТФ) и содеряаачие гаптоглобина в сыворотне крози - турбодиметрически по реакции преципитации комплексов антиген-антитело на автоматическом приборе фирмы "Behrlnger", Германия (Instruction Manual, 193Э). Уровень зссенциалькых микроэлементов '(ЗМЭ) - знергодиспсрсион-ны1.1 методом на установке "Спек.трейс-5С0". Исследование кинетики Ег проводились по методу Е. Н.Мосягиной (1962).

Физико-хшические характеристики рритроцитарных_момбоан.

Осмотическую устойчивость Ег оценивали no величине сптическо* платности гемоглобина (А'540 ни), вызед^его из гемолизирсван-ных клеток в гипотонических растворах ÍJaCl после 20-минутно; инкубации клеток при комнатной температуре. Устойчивость Ег i тепловому воздействию оценивали по кинетике гемолиза клеток i изотоническом растворе fíaCl при t=6G-62"C (Черницкий Z.A., Ямайкина И. 8., 1958), а резистентность Ег к действию окислителей - по кинетике гемолиза клеток, инкубированных в присутствии lid! аскорбиновой кислоты. Зритрецитзрные мембраны (тек Ег) выделяли по метода;.! Dodge et al. (1963). Активность мембра носвязгннсй ацетилхолинестеразы (АХЭ) исследовали по метод Бliman G. Z. et al.(1S¿1).' концентрация белка в мембранах Ег модифицированным методом Лоури (Markwell et al., 1978). Дл тестирования липидной фазы мембран использовали липо;нльны зонд пирен - измеряли коэффициент эксимеризации пирена (Кокс) включенного з тени Ег (Черницкий Е.А., Слобожанина Е.И. 1989).

Оценка антиоксидачтнсй защиты эритроцитов. Активность с> пероксиддисмутазы (СОД) определяли по степени ингибирозам реакции -супероксид-зависимого окисления квортицина ( Kostijt V. A., Potopovich A. J. ,1989); кгталазы - по методу, оснсванно: на регистрации убыли перекиси водорода в реакционно;": сре, (Aebí Н.. 1984); глигатио.чпсрсксидазы (ГШ- по методу Гаврил: ва А. П., Хмара Н.Ф., (1987); глютатионредуктазы (ГР) - по t.r

тоду Wendel P.J.(196В). Содержание восстановленного глютатиона (ГВ) определяли спектрофотометрически (D.Bentier et al., 1963). Количество витаминов А, Е и С в сыворотке крови измеряли флуориметрическии методом ТБК-активные продукты ПОЛ определяли по Dahle Z.K. et al. (1962).

Регистрацию интенсивности ЛЗХЛ клеток к.м. проводили методом Ветохина С. С. с соавт. (1987).

'Оценка гормонального статуса. Уровни тиреотропного гормона (ТТГ). трийодтиронина (Ть), тироксина (Т4). свободного тироксина (Т.,сб.). кортизола, соматотропного гормона (СТГ) в сыворотке крови определяли кмлунолюминесцентным и радиоиммункым методами с использованием наборов фирм "Амеркам"(Великобритания) и фирмы "Behringer" (Германия).

Экспериментальные исследования на животных проводились на 32 половозрелых крысах-содах беспородной линии массой 170-220 "рамы. 8 крыс получили 25 сеансов только R-облучения по 2 \/сутки или 0.5 ыКл/нг сеанс; 8 крыс - 25 сеансов сочетанного зоздействия: общего R-облучения по 2 R/сутки или 0,5 мКл/кг :еанс и нагревание при t 37е С 4 часа/сутки. Из 16 крыс, отса-кеных для контроля В являлись - "чистым" контролем и 8 крыс голучили только нагревание при t 37°С 4 часа/сутки - 25 сеан-;ов. Через 6 месяцев после окончания сеансов животных забивали.

Статистическая обработка материала по эпидемиологическим ¡сследованиям АА и МЦС проводилась с помощью программного па-;ета Quattro PRO. Рассчитывались ежегодные показатели заболе-;аемости в абсолютных цифрах и они стандартизованы на 100 ООО ;етского населения. Все результаты исследований обрабатывали татистически на персональной ЭВМ типа РСЛТ-2В6 и IBM-3S6 с :спользовачием единой информационной среды "CARD", разработан-ой в НИИ радиационной медицины ИЗ PS, а также методом индиви-уального (биологического) анализа (М.Б.Славин, 1989).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

Эпидемиологические исследования АА и МДС у детей

Эпидемиологические исследования заболеваемости АА и МДС роводились у детей Беларуси в возрасте от 0 до 15 лет в 6 об-астях (Брестской, Витебской, Гомельской, МогилеЕСкой. Грод-

ненской, Минской) и в г.Минске, как крупном промышленном центре. Сопоставление результатов среднегодовых показателей заболеваемости АА и МДС осуцествлилось за два равнозначных временных периода (по 7 лет) с 1979 по 1985 и с 1986 по 1S92 годы. Отпразной точкой определения временных периодов Сапа авария на ЧАЭС. В результате проведенного многефакторного анализа установлено, что среднегодовой уровень заболеваемости АА у детей (1979-1992 годы) в РБ составил 0,42+0,04 на 100.ООО детского населения и не превышает тачевой в странах Европы и США (Eot-tiger L.E., Westerhof 8., 1972; Szkla .4. et al, 1985; Clausen N., 19Й6). Среднегодовой показатель заболеваемости АА у детей до- и после катастрофы на ЧАЭС не претерпел существенных изменений (табл.1). Это указывает, что рааиокуклеидный компонент не оказывает существенного влияния на заболеваемость АА в период 1986-1992гг. Представленные прогностические (трендовые) модели свидетельствуют о тенденции к росту среднегодового урезня заболеваемости АА у детей б целом по Беларуси как до-так и после катастрофы на ЧАЭС с ежегодным темпом прироста в среднем на 2.36?.оса и 2.54?iJC5, соответственно (рис.1).

В РБ среднегодовой уровень заболеваемости (1579-1992 годы) был более высоким у мальчиков, чем у девочек за счет периода после аварии на ЧАЗС. Приведенные данные о различиях заболеваемости АА у лиц разного пола указывают не на случайный, а закономерный характер отмеченного явления, обусловленного ача-томо-физиологическими особенностями мальчиков (Clausen N., 19S6; Eden O.B.. 19В6). Среднегодовой показатель частоты АА у детей в трех возрастных группах (0-1. 5-10 и 10-15 лет) достоверно не различался в целом по РБ с до - и послеаварийный период после катастрофы на ЧАЭС. Преобладание среднегодовой: уровня заболеваемости АА (1936-1992 годы) отмечено в возрастной группе от 1 до 5 лет по сравнению с 1979-1985 года.» (0,49±0,045?iOO и 0.33+0,072оо5. соответственно. р<0.05). Нал; данные подтверкдают существующую точку зрения о наибольш встречаемости АА в этом возрастном интервале (Shianon К. И. 1990). Эта возрастная группа детей монет составлять групп' формирования 'повышенного риска" неопластической трансформаци: и требует пристального внимания со стороны клиницистов. Сред негодовой уровень заболеваемости АА по РБ был различны.: у де

ЗаОолспаемость ( оПг. и тшмнслошппями

детеП от 0 до 15 лот по отдельным регионам и рсетПлико Полирует, и 1970-19(35 годах !1 11 1!)1И5-190г годах.

Позолот— Период нгследопинпн УрОШП!

чсская 1979- -ЮНГ) 1Т. 19И5-|!)!Г> П'. ЛШЧИ-

Регион форма II-.» них чаболо.'к II) них тКолсло мости

Ресго дог. Лбе. р+ярС-'«. Исего лот. ЛПг. Г|Н*р(7_Г Р

населения число населения ЧИСЛО

брестская ЛЛ мдс 2352751 12 0 0.51 ±0.17 0.0(1*0.00 2-100(101) 11 ■1 о.:12±о.п 0.1010.011 мм - 1

Ннтебекая ЛЛ 2007900 0 0.29±0.12 2135505 л 0.1910.07* >0.1

МДС - 0 0.00±0.00 Л О.ЮАО.Ю —

ЛЛ 10 0.37+0.011 15 0.5Г)1(1.М* .0,1

Гомельская 2705(59 2700530

мдс 0 0.00Ю.00 Г) 11.1(110.09 —

АЛ 0 0.2(1+0.12 (1 0.13+0.15 >0.1

Гродненская мдс 173130(1 0 0.0010.00 101115(1 1 0.УН0.11 - 1

ЛЛ и 0.11±0.1 1 И ОЛОЮ.М >0.1

Могалевская I! >70225 202II00

мдс 0 (Ш1±0.00 ■1 0.2010 07 —

Минская АЛ 2492(399 ш (1.й2±и.1-1 251(1120 И о. 13±о.1:1 >0.1

мдс 0 0.(10+0.00 1 0.0110.01

ЛЛ 11 0.411+0.0(1 К) 0.0(1+0.1(1* >0.1

г. Минск 221(1091 20502П0 (

мдс 1 0.<15±(Ш> 7 0.27 ±0.10 — -

Республика ЛА 15029519 05 'Ш±0.07 1 (¡3(107(10 72 0.11+0.0(1 >0.1

Беларусь мдс 1 0.01 ¿0.01 29 олню.о 1 <0.01

I

I

Р* - отношение эаболепаемости АЛ детеП РитебскоП области к Гомелы-коП области (' 0 (11) и I'. Мннску (-0.01) после авнрш! пп ЧАЭС

ГОД

Iи —<— тгкнд лл — мдс -— П'кн.1 млс |

Рис.1. Динамика заболеваемости АА и МДС детей от О до 15 лет РЕ

тей, пронизакщих а городе и селе как до -(0,51^0.07Л;;с и О,26*0,0Т7..ц.. соответственно, р<0,С5). так и после, катастроф на ЧАЭС (0.64+0.и 0.22±0,07К.СС. соответственно, р<0,05). Это свидетельствует о более высокой заболеваемости е городе, что связано с более высоким химическим загрязнение!, внешней среды (Иванов Е.ГТ., 1994).

Полученные результаты по отдельным региона-.; РБ псзеолил! установить за 14-летний период увеличение среднегодового уровня заболеваемости АА у детей г. Минска в 2, 4 раза по сравнени; с Витебской областью, где оснозной вклад внес псслеаварпйны] период (табл.1)'. Объяснением может служить более сильное заг рязнение окружающей среды этогс крупного промышленного центр, различиями химическими веществами, особенно, после катастроф на ЧАЗС, где имеет место комбинированное радпационно-хи-мическое загрязнение (Соколов С. М., Филонов В.П.. 1993). Пока

чо, что частота АА была выпе у детей Гомельской области, чем Витебской в период после катастрофы на ЧАЭС (табл.1), Анали-эуя в динамике уровень заболеваемости у детей Гомельской об-;ти (1936-1992 годы) обращает на себя внимание два подъема ;тоты АА в 1986 и 1991 годах (рис.1). Можно предположить, з отмеченные явления служат одной из закономерностей дина'ли-жого развития АА и это связано с присоединение).! радиацион-'0'фактора. В частности, установлено, что из 6 случаев забо-)ших АА в 1986 году в Гомельской области 5 - прошивают в зо-: яееткого радиационного контроля (ЗКРК) от 37 до 555 кБк/м^ цезию-137. Эти данные косвенно свидетельствуют, что радиа-жный фактор не оставил костный мозг индифферентны!.'.. Однако, ¡ьнейние эпидемиологические исследования показали, что сред-■одовой уровень заболеваемости АА в до-и послеаварийный пе-ды у детей, прокизакщих в 31РК по цезив от 37 до 555 Ум2, не претерпел существенных изменений. Это указывает на что взаимосвязи между уровнем заболеваемости АА у детей ¡ельской области и уровнем радиоактивного загрязнения терри-ий цезием-137 пека не существует (табл.2). Подтверждением му служит и отсутствие достоверной взаимосвязи частоты АА у ей Брестской и Могилевской областей, проживающих в ЗЖРК от до 555 кБк/м" до-и после катастрофы на ЧАЭС (табл. 2). Выяв-о. что заболеваемость не зависит только от радиационного тора, а существуют и другие экологически неблагоприятные торы, которые в сочетании с МДР оказывают влияние на разви-заболевания. Полученные данные свидетельствуют о том, что ологическим фактором в настоящее время является сочетанное ствие радиационно-химического загрязнения, где основная ь в генезе АА пока отводится химическому загрязнению окру-вей среды. На это указывают и полученные нами прогностичес-(трендовые) модели по отдельным регионам РБ, а также ради-онно-экологический паспорт каблвдавзихся больных. Обнаруже-генденция к медленному росту частоты АА у детей после звана ЧАЭС в большинстве областей РБ (Брестской, Гомельской, цненской, Могилевской) и г. Минске с различным темпом еь^--юго прироста от 0,04%осо до О, О6%?00. В то же время по.ча-з, что в Витебской и Минской областях уровень заболеваемос-^А у детей имеет в дальнейшем тенденцию к снижения ежегодно эеднем на 0,02%о 0 0 и 0,05%о00,соответственно. Объяснением

'lurtiuua ti

Ч.Лолгцтлик'П. ( i«ß»\ il "'•••) ЛЛ t! МДС ,'lt'jríi or 0 ди 1 Г» ,игг |м»П1Щои Í^KH-nnort. ÍомолыкоЛ tf Muni.1i4«'Kürt

1фиЖШШНШ1\. Hit piUM'iUiiiiiiiio- «ну* ИК'ИИЫХ i^ppirropiiuv (t>r 'Xi Ли Г«Г)Г) кГ»кД| ) II I iIVII - ПИ1Г* годих И и HJÍKÍ - ИКС П»д».\

Ilu-ULlo- ил» - 1!>МГ,п. líKlli r.íl'.'ir. V|,iiniiil I'.lV.t- HKI'.'M

l'cilioit lll'iriKllW • t.O|»M.» ЛЯ.-, чи.ли |,ы> ЛГ«'. Ч1ИЛЧ Vt-I> 'ШНЧНЧ'*" m ll'l ЧШЛ"

}!.»• .M.'ШП- «ИНГ! ti'.lir.D lui- leur;

r<jH4' ri ыт АЛ rk инци.да ;i II.IMill.ai •0 M и UlUl.l!'i'_>

ч> .. II шхышо ■i _ ■> Il lililí 11

IllUl- II".МП* :h',«K I.-JI1' :::r.4u:>ri an

Го\цмм к.ы Ai (i а.чзд.и il ШКЦ1Ш .11115 u-:i 11Н1ЛIi in

il,«' i) итцопо i о iHtiio:i _ 1 0 ir>tIIIIII

И......l.-ltlii' :||.-JUHI ГМ '.r.ll

Moi'H-T'»» Ьля ЛЛ 1 iWíilim (1.1 l+afc (№Г> Л II..",|HKIU

• i ; » - il шяЦшт « 'iMintm _ Ii :нЮ1<и*|

n.lre.U'IlHt' :titr, и i.vj :ir.1iu¡ мимо:,

Míelo: Л Л 11 ouiuii.io III I) III 1(1.1 1 'IIÄJ ;i;i п. i;i«m)n

м;?' ... и II (Klin Cl) » Il IHiOIWI - « l4l',liOH|

llpiiMfMriuur:

I'nfnmi.i, ычо/ышш* и данную **j>viiii.y:

I. liju rn Kí»H ifum-ui: lliiiH Kun, (Чолиигкил. ЛушшнинпЛ.

Ii. Г</\|г;и-| koí) иГ>ш "in: Гпмглм кип, Лмикоиичгкпа, Жл.^.ти кнй. Ка.шнкоьпчгкш*!. J/.-u.'muMírt. ЛосЖ'КпЛ, Ato iMpcKilft, l'.MojiJjir., 1(<'1{>кк<т»клЛ, lV«umhirrt. Ctifi.joi ojii'KinV г.Гтнчи. t'iV - 1НГ» i\ I i к / m I;

Гфишш'ыш, Иулл-КопкмсисмШ. Нпмин'КИЛ. Д»Гц»уип клП. КлыкиП, KojiM^ut'Miil. 1Ч)га«ими кпП. ЧочсргкиП. ХоПшткпЛ ~~ «*>Г»Г* hÜk/m ). И. Muí и.ичи ын*1 «rfVianu: Г.ыхот-кнЛ. Кт'т.коипчскШЧ. KpUrliOlhUUKIlrt, Гдлш про'мкмЛ, ЧнуггкиП, Чгрнксш-кшЧ (!Г/ - ИГ« кКк/м ), Г»Ы\«>Н» К1!П. km 1ЮК(Ш11Ч( Mill, Кр.ичнпьиь' ктП,

кпГ», ЧауссКИГ). ЧорНКОШ'КНП (1ИГ» - ГЛГ» кНк/м ),

гому может служить то. что Витебская и больиинство территорий йеной областей относятся к "чистым" районам по радиационному грязнению (Матюхин В.А... 1990).

В структуре заболеваний детских ГШ в Беларуси (1979-1992) 1С составили 17.9%. Уровень заболеваемости МДС у детей за -летний период составил в год 0,09*0.02 на 100.000 детского ¡селения. В частности, до аварии на ЧАЭС он был 1.01+0,01%.00), а после - 0.18+0.04%000, что указывает на су-¡ственное увеличение этой патологии (табл. 1). Отмеченный" рез-:й рост заболеваемости МДС в РБ в послечернобыльский период, «но объяснить, как улучшением диагностики с 1986 года по РБ к и влиянием неблагоприятных экологических факторов знесней еды, на что указывает радиационно-зкологический паспорт наедавшихся больных. На наш взгляд гозорить об истинном увели-нии не представляется возможным, поскольку в этой ситуации авнение результатов исследований до-и после катастрофы на ЭС некорректна. Это обусловлено несколькими причинами, -первых, МДС у детей до 1986 года в РБ практически не диаг-стировался, хотя, возмокно, это патологическое состояние бы-зам'аскировано под другими нозологиями. Во-вторых, сопостав-ние уровня заболеваемости МДС необходимо проводить не столь-с периодом до аварии на ЧАЭС, сколько в динамике после ка-сгрофы на ЧАЭС. В связи с этим, обращает на себя внимание 986-1992 годы) то, что максимальный годовой показатель забо-заемости МДС у детей по РБ был отмечен в 1987 и 1992 годах. :т частоты на втором году после аварии на ЧАЭС связать толь-с действием ВДР представляется маловероятным, поскольку в следующие годы исследований этого не было отмечено. Очеред-4 подъем заболеваемости МДС наблюдался через 5 лет (рис.1). )оятно, это отмеченное явление составляет одну из закономерней формирования динамики данной патологии. Достоверных зличий после аварии на ЧАЭС в уровнях заболеваемости НДС у гей между отдельными регионами РБ не выявлено.

В настоящий момент можно с уверенностью говорить только о эденции к росту МДС в целом по РБ ежегодно в среднем на )2%000 (рис.1). Выявленная (19В6-1992 гг.) тенденция к уве-¡ению среднегодового показателя частоты МДС у мальчиков по шнению с девочками (0,22+0,05%0(,0 и 0.14+0.16 55000, соот-'свенно, р<0.02), в целом по РБ согласуется с данными лите-

патуры (Erandalise S., Lopes L., 1994, Hasle H., Kerndrup G 1994 и др.). Особое внимание в плане неопластическсй трансфс мации следует обратить на возрастнуи группу от 5 до 10 ле где отиочен более высокий среднегодовой уровень заболеваемос МДС после аварии на ЧАЭС по сравнении с другими возрасткы группами. По-нааепу мнении, этот возраст необходимо включить группу "повышенного риска" по формирования предлейкемическс состояния. Частота МДС у детей, пролизавших в ЗВРК по цезия 37 до 555 кБк/м" в Брестской. Могилевской и Гомельской облг тях не претерпела суцестзенных изменений по отношению к таь вой для территорий, но входящих □ ЗЗРК. что свидетельствует отсутствии связи заболеваемости с уровнем загрязнения по1 радиецезисм-137 (табл.2). Мояно считать, что в генезе МДС детей РБ, также как при АА, имеет место влияние ссчетанных f гативных факторов внешней среды, где основную роль играет ; мическое загрязнение скруаасцей среды. Доказательством дачк; полсаения служат полученные прогностические модели, указав; щие на тенденции к увеличен!» уровня заболеваемости МДС у , той по отдельным регионам FB. По данным сравнительного анап: среднегодовой уровень заболеваемости МДС после аварии на Ч у детей, проживающих в городе и селе, как в целом по (0. 23±0,052. и 0,14+0,057-5;, соответственно) так и ме различными регионами, не тлел достоверных различий. Сопост ление региональных среднегодовых показателей заболезаемо МДС у детей (1926-1992гг.) в зависимости от возрастных гру пола также не выявило достоверных различий.

Таким образом, существенного увеличения уровня заболев мости АА у детей в целом по РВ после аварии на ЧАЭС не ус новлено. По данным прогностических моделей выявлена тендеь к медленному росту заболеваемости АА как по FE, так и з бс шпнетве регионов республики. Частота АА у пальчиков и дет прояивакших в городе еьес, , чем у девочек и сельских де: МДС. диагностируемый с 1986 года b'F5 имеет тенденцию к t лсннсму нарастания уровня заболеваемости как в целом по так и отдельны;.! ее областям после катастрофы на ЧАЗС. Не чествует пака связи менду частотой АА и МДС у детей и ypoi радиоактивного загрязнения территорий цезием-137';от 37 до кЕк/м:. Этиологическим фактором в генезе АА и МДС служит о таннсе действие неблагоприятных факторов внешней среды: . М, химическое загрязнение скрулаоцей среды.

Состояние ээитрона у детей, больных АА и МДС

Для выяснения молекулярных механизмов патогенеза АА и МДС юучено состояние АОС защиты и процессов ПОЛ в Ег и плазме :рови. Согласно нашим данным при ПАА, врожденных АА и МДС выявлены нарушения ферментативной АО защитной системы эритрона !рис.2). Усиление свободнорадикальных процессов у больных осу-;естзлялось не только за счет уменьшения защитных свойств СОД рис.2А), но и высокого содержания СФ, вследствие которого до-юлнительно возникает избыток гидроксильных радикалов, обладающих повреждающим действием на эритрон. Для выяснения рол;', тяглых металлов в патогенезе ПМП проведено сопоставление пока-¡ателей активности СОД, количества НЬ, Ег и концентрации езин-[а и ртути. Выявлено более выраженное снижение активности |ритроцитарной СОД у больных с псвызенньш уровне!.', свинца и 1тути в сыворотке крови. • Установлены взаимосвязи между выразимостью анемического синдрома и активностью СОД г=-682,р<0,01), СОД и уровнем токсикантов в организме г=-0, 612, р<0,01). Наряду с эти;-! наблюдалось достоверное уси-!ение СГ и уменьшение ПЖЭ. Полученные результаты указывают, :то "окислительный стресс" является следствием сочетанного лияния неблагоприятных факторов (МДР и токсические вецеотва) служит одним из молекулярных механизмов патогенеза АА и МДС. ыявлено разнонаправленное изменение активности эритроцитарной аталазы при различных нозологических формах ГОД! (рис. 2Б). Од-овременно с этим обнаружено повьяенкэ активности ГП в Ег ольных ПАА и МДС, по отнопению к кок.рольной группе и врож-енным АА (рис.2А). Следует отметить, что у больных с повышен-ым уровнем одного (свинец) или двух (свинец, ртуть) токсикан-ов в организме обнаружена тенденция к усилению активности ка-алазы и ГП. Это можно расценить как компенсаторный механизм ащиты эритрона к изменившимся условия!.', внешней среды. Судя по ровню ГБК-продуктов в плазме крови при ПАА, МДС и врожденных А, процессы ПОЛ достоверно увеличены по сравнению с контроль-ой группой, что свидетельствует об усилении свободнорадикг..".ь-ых реакций (рис.ЗВ). Наиболее выраженная активация ТБК-про-уктов наблюдалась у больных с повышенным уровнем токсикантов РЬ или РЬ и Нй) на фоне {/ДР. Подтверждением этому служит кор-еляционная зависимость между величиной ТБК-продуктов и деп-

Рис. 2А. Активность СОД и ГП в эритроцитах детей, больных АА и МДС

! 01

03",

Рис.25. Активность катал; б эритроцитах Д! больных АА и МДС

Рис.2В. Содержание ГВ эритроцитах и ТЕ продуктов в плаз крови детей, бел кых АА и МДС '

ессией эритропоэза (г=0, 641. р<0.01) и уровнем токсикантов в ргачизме (г-0.604. р<0,01). Полученные данные свидетельствуют защитно-адаптационном механизме эритрона на отрицательное оздействие факторов знегней среды. Однако усиление процессов ОЛ. наиболее выраженное у больных ГШ. на фоне позгаекного ровня одного или двух токсикантов в сыворотке крови и МЛ?, оизод.ящее к гиперпродукции высокоактивных радикальных соеди-зний, ингибированию активности СОЛ и осуществляет высокую гелень повреждения клеток, в частности Ег. что усугубляет тя-зсть анемического синдрома. Следовательно, в патогенезе Разиных нозологических форм ПМП у детей, проживающих в условиях щигционно-химического воздействия, огромная роль принадлежит сгивации свободнсрадикальных процессов.

Известно, что инициаторами процессов' ПОЛ могут служить юбоднорадикальные соединения, активирующиеся как при изоли->занном действии КДР, -тяжелых металлов, так и сочетанием : действии, участвуют з железскатализируем-ых реакциях в ре-льтате комплексирозания с ионами ЗМЭ переменной зависимости '.еркина Л.Г. .■. Зеличковский Б.Т..1ЭЕ8; Halliwell. Gutteridge С. . 1984; Slater Т. F. .1935). Для выяснения роли-'ЗКЭ з генезе И у детей проведено изучение содержания ЭМЭ в сыворотке кро-. Установлено, что концентрация Fe при ПАА, врожденных АА и С не имела достоверных различий как по отношению к допусти-й норме, так и между группами. Показано достоверное снижение держания меди, цинка по сравнению с■контрольными значениями, нашему мнению, уменьшение содержания"меди и цинка в оргазме больных ПМП обусловлено несколькими причинами. Во-пер-х, конкурентным действием свинца по отношению к ЭМЭ. на что азывает наличие высокого соотношения между указанными пара-грами и слабой корреляционной связи между уровнем токсикан-з СРЬ и Hg) .и содержанием ЭМЭ (г= -0,348, рС0.05). определите тяжесть анемического синдрома. Во-зторых, с нарушением анспорта меди церулоплазмином (ЦП) в Ег за счет снижения его чичества, изменения его способности к связыванию меди или гивности в плазме крови (Антоненко С. Г. с соавт.. 199С:. 1отвительно, уменьшение количества ЦП отмечено у 1/3 наблю-зпшхея больных. Усиление процессов образования свободноради-зьных соединений при ПМП у детей протекает на фоне достоверно снижения в Ег количества низкомолекулярного антиоксиданта

- ГВ (рис. 2В). Как видно, более выраженное снижение количества ГБ выявлено у детей с позыаенным уровнем токсикантов в организме на фоке хронического действия КНР. Обнаружена корреляционная зависимость между содержанием токсических веществ и концентрацией ГВ (г=-0.421, р<0,05), показателями анемическогс синдрома (КЬ -г; =0,584, р<0.01; Ег: гг= 0,602, р<0,01). Кинетика Ег при отом изменяется: усиливается СГ и уменыается ПЖЭ. Полученные результаты свидетельствуют о снижении АОС зацить оритрсна, усугубляющиеся токсическим действием свинца и ртути, от свободнорадикальных соединений у детей с ПМП. активирующие з результате действия сочетанных неблагоприятных факторов I приводящих к структурно-функциональным нарушениям зритрона I являющихся 1 одни:,! из патогенетических механизмов на молекуляр но-клеточном уровне.

Структурно-функциональное состояние зпктроцитаоных мембран Известно, что продукты ПОЛ являются универсальным ыодификато рами физико-химических свойств мембранных структур клеток, цельв выяснения роли в патогенезе ПУЛ у детей физнко-химичес ких свойств мембран Ег изучен ряд биофизических параметров кз интактных Ег. так и изолированных эритроцитарных мембран. Ус тановлено, что Ег детей обладают повышенной осмоустсйчизость по сравнения с Ег взрослых доноров. Осморозистентность Е больных ПАА и МЛС не отличалась. Инкубация отмытых Ег взросл, донороз в плазме крови детей, больных ПАА. приводила к позьее ник устойчивости Ег к гипотоническому лизису. Это сзидетсльс вует о стабилизирующем.влиянии на мембраны Ег плазменных фа; торов, возмовно, глобулинов (рис.3).

Изучение кинетических параметров термогемолиза Ег детей ПАА и МДС позволило выявить некоторые отличия мегду ними. Та отношение К;/К; достоверно отличалось у детей с ПАА по относ нию к контрольному значению и не изменялся при МЛС. По другим параметрам - 5-, 3; и С;, характеризующим гетероге ность Ег по их устойчивости к высокой температуре, достсверн различия наблюдались у больных ПАА (5,80±0,34, 33.5±1, 1.70-0,07) и МДС (18, 8±1. 4, 32,511,6, 1.8110.08) по сразив с контрольными величинами (16.9+0.7, 30.5+0,5,1,40+0,06, сос ветстзекно), что указывало на снижение термоустойчивости Е Уменьшение тернорезистентнссти мембран Ег связано, скорее вс го. с изменением состояния НЬ, взаимодействующего с мембрш

д

Рис.3. Кривые осмотической устойчивости эритроцитов '

1-эритроциты больного с ПАА, 2-эритроциты взрослого донора. 3-эритроци-гы взрослого донора, проинкубированные с плазмой крови сольного ребенка с ПАА. 2 часа при 37°С и затем дважды отмытые з

<о ч

1

3

* *>-3

г

ао« пса па а.«

изотоническом растворе Г!аС1

С,М, Хе&

клетки. Установлено, что при ПАА и МДС средний уровень МШЬ в £г увеличен по сравнению с контрольной группой на 5-10%. Ос-мо-и терморезистентность Ег характеризуют механическую прочность их мембран. Силы, определявшие механическую стойкость эритроцитарных мембран, формируются в результате белок-липид-ных ' и липид-липидных взаимодействий (Агак! К., ИШпа 1.'/., 1937), в основе которых леяат диполь-дипольные, заряд-диполь-ные и Ван-дер-ваальсовы взаимодействия. Можно предположить, что обнаруженное нами изменение терморезистентности Ег больных ПМП, связано не только с увеличением концентрации МШЬ, но и. возможно, вследствие нарушения в мембранах указанных взаимодействий.

Известно, что одним из маркеров структурного состояния поверхностных компонент мембран Ег является мембраносвязанная АХЗ (А1сп1 В, Шпе А, 1974). Показано, что кинетические пара- • метры активности мембраносвязаннсй АХЭ зритроцитсз •(Км и '/!.'.акс) достоверно не различаюсь у больных МДС по отношению к контрольным значения!,!. Однако, у детей ПАА зарегистрировано снижение Км (0.63+0,07*10"4М/л, р<0,05) по сравнении с контрольными величинами (0,85+0,03*10'4 М/л). Полученные данные свидетельствуют о том. что при МДС не происходит значительных изменений структурного состояния -поверхностных компонент мембран Ег. Так кач при ПАА отмечено снижение Км АХЭ, а АХЗ относится к липид-зависишм ферментам, то изменение этого параметра может быть сзязачо.с модификацией структуры липидной фазы

меморан.

Для изучения структуры липидного бислоя биологических мембран широко используются флуоресцентные зонды. Преимущество в применении флуоресцентных зондов состоит в т>м, что они свя-зысаится только с определенными для каждого зонда участка:.« мембран. Одним из флуоресцентных зондов, применяемым для оценки микрозязкости мембраны, является пирен. Установлено, что флуоресценция пирена, связанного с зритроцитарной мембраной, при возбуждении / =330нм, характеризуется двумя основными максимумами: максимум флуоресценции мономера находится в области 390 нм, эксимера - при 470 нм. ПОказано, что Кэкс. (отношении величины интенсивности флуоресценции эксимеров к таковой мономеров лирэна) в тенях эритроцитов не имел достоверных отличий у больных КОС, по отношению к1 контролю. Однако, обнаружено достоверное снижение Кэкс. пирона, включенного в тени Ег больных П.АА, по сравнению,со.значением ВДС и контрольной группе (0,64-0,07, р<0,05). Полученные данные указывают на изменения физико-химического состояния липидного бислоя' мембран Ег у детей с ГШ. Уыеньпение величины Кэкс. пирена/ включенного в теки Ег, свидетельствует об увеличении■микровязкости липидов в мембранах. Возможны различные механизмы изменения микровязкости липидного бислоя.мембран Ег,' проявляемые по показателям флуоресцентного липидного зонда. Во-первых,' причиной изменения микровязкости может быть модификация липид-белковых или белок-белковых взаимодействий в мембране. Последняя, возможно, является вторичной по отношению к дефектам в структуре каркасных белков Ег. и. прежде всего, спектрина,' актина и ачкирина.. В литературе имеются данные, указывающие на такую возможность (Haest et al, 1980; Liu, Palek, 1930; Tsuji/Ohnishi, 1986). Во-вторых,. окисление липидов может привести к изменению микровязкости бислоя, как сообщалось, для липидных дисперсий и других типов мембран (Cooper et al, 1975). '/В-третьих, повышение микровязкости мембранных липидов Ег детей может быть связано с изменением концентрации холестерина по отношению к фосфолипи-дам. либо, изменением соотношения фосфатидилхолин/сфингомиелин (Guisasolowa-Zulneta et al, 1991).

Таким образом. Ег и эритроцитарные мембраны являются чувствительными индикаторами и участвуют в патогенезе при приобретенных ПМП у детей. Это проявляется в снижении терморезистентности Ег, а у больных с ПАА - в.изменении Км мембраносвя-

занной АХЭ и микровязкости липидной фазы мембран, изученной с помоцью флуоресцентного зонда пирена. Результаты исследования указывает на необходимость включения корригирующих •(мембсанос-табилизируюцих) препаратов в современные схемы лечения больных с ПАА и МЯС.

Гормональная регуляция эритролоэза при АА. ИДО у детей и лечение ПАА оекомбинатным эритропоэтином. Известно, что основным регулятором оритропоэза (ЗП) является SP0. Зритрогюз-тинчувствительные клетки имеют на мембранах рецепторы нз только "специфические" для ЕРО, но и для гормонов щ. :ж., гипофиза, надпочечников "неспецифические" (Павлов А.Л., 1991; Kitanura Т. et al., 1989). С целью выяснения взаимосвязей между показателями з-ЕРО и гормонального статуса и их роли з регуляции ЗП у детей с ПМП, проведено исследование гсрмснатьного статуса и s-EPO, а та-зе применение г-ЕРО в комплексном лечении бальных с ПАА. Установлен достоверно высокий уровень s-EFQ при ПАА, врожденных АА и . МДС по отношению к контрольной группе, что согласуется с данными литературы (Mizcqucni Н. et al., 1987; Ycsh'ida et al.. 1993; Nand S. ,1994). Показано, что такое различие в биосинтезе s-EFO у больных обусловлено зараженностью анемии (КЬ; г=-3.563. р<0,01; Ег: г=-0.508, р<0,01. г=0,524, р<0.001). Результаты исследований обших фракций тиреоидных гормонов больных ПАА, МДС и врожденной АА, показали, что средние значения содержания Т3> Т, и ТТГ достоверно не различались как по отнесению к контрольным величинам, гак и между группами. Однако, при индивидуальном анализе снинение концентрации Т.з, Г4 и повышение ТТГ наблюдалось у 1/3 больных с различными нозологическими формами ПМП. Обнаружено достоверное снижение уровня Т4 сз. у больных при ПАА и МДС по стнсиению к кентрель-ным величинам (14,8+0,3 нмоль/л, 14,2+0,2 нмель/л и 16,23+0,37 нмоль/л, соответственно; р<0,05). Полученные результаты согласуются с данными литературы (Сафоноза Е.Ю. с соавг. ,1991; Гс-рохсвская Г.Н. с ссазт., 1991). Дачные исследования тиреоидных гормонов указкзаот на то, что у 1/3 обследованных детей, больных ПУЛ имеется скрытый гипотиреоз. Клинических признаков его не отмечено. Достоверных различий средних значений кертизола при различных нозологических фермах ГШ нач по сравнении с контрольной группой, так и между группами не установлено. Индивидуальный анализ показал снике-

ние его .уровня у половины обследованных больных. Выявлено повышение содержания СТГ в сыворотке крови у детей с АА и МДС по отношению к контролю (р<0,05).

Для выявления реципрокных взаимоотношений менду s-EPO и содержанием тиреоидных гормонов,. СТГ, кортизола проведен корреляционный анализ. Оказалось, "что корреляция проявляется только с Т4 св., ТТГ и кортизолом (rj =0,534, р;<0,01; гг =0,382, рг<0,05; г=0,371, р<0,05 ). Эти данные позволили предположить участие данных гормонов в регуляции эритропоэза при ПМП. Это предположение подтверждается и другими авторами Саго J., Erblev A.J.,1938). Полученные результаты свидетельствуют, что Т4 св.,ТТГ, кортизол принимают участие в регуляции эритропоэза. Высокая концентрация s-EPO обусловлена повышенной продукцией гормона почкой на выраженную гипоксию, связанную не только с депрессией ЭП, но и с нарушением функционального состояния щ.к.", надпочечников. Эти данные открывают возможность коррекции анемического' синдрома гормонотерапией. Несмотря на высокий уровень s-EPO у больных ПМП, по-прежнему отмечается анемический синдром разной степени выраженности, что свидетельствует о недостаточном влиянии его на клетки-предиестзен-ницы ЗП и связано как с дефектом в структуре EFO (Jones et al.,1990; Li J.P. et al., 1990), так и с нарушением внутриклеточной передачи сигнала, на самых ранних стадиях эритропоэза (Wen D. et al.,1993; Yonssouyan H. ey al., 1993). Для восстановления нормального ЗП шести детям, больным ПАА, в комплексную терапию был включен г-ЕРО (Recombinant humas erytrohoietin -"Германия"). Суточная доза r-ЕРО, равная 150 Ед/на 1 кг м.т., вводилась подкожно, ежедневно, в течение 18 дней. Оценкой эффективности г-ЕРО слукили. показатели ПК: количество Нв, Ег и Rt. Установлено;., что у 5 из 6 больных с ПАА после комллексного лечения с включением г-ЕРО, не отмечалось существенного увеличения количества Ег, НЬ и Rt в ПК. Только у одного больного, с самым низким исходным уровнем s-EPO (728 мЕД/мл) наблюдалось существенное повышение БЬ, Ег и P.t и получена независимость от гемотрансфузий в течение 1.5 месяцев. На низкую эффективность г-ЕРО указывают и другие исследователи (Cairo М. S.. 1990; Nie-

гаеуег et al..l991; Dunbar С. et al., 1991; Kojima s., Matsuya-ша Т., 1994). Полученные результаты лечения указывают на высокую эффективность r-ЕРО, только у одного больного с низким исходным уровнем s-EPO, что, вероятно, связано с сохранившимися эритропозтинрегулируемыми клетками-предшественниками ЗП (By Brcudy У.С. et al., 19S0). Однако, для окончательного рассмотрения вопроса о гематологической эффективности г-ЕРО нами использован метод определения кинетики Ег. Показано, что у детей с ПАА до лечения г-ЕРО „ СЭ, СГ были достоверно

выше по сравнению с контролем, причем СГ превышал СЭ. При этом ПЖЗ достоверно уменьшена по отношению к контрольным значениям. После комплексного лечения с включением г-ЕРО выявлено (р<0,1) увеличение СЗ, ПЯЭ и уменьшение СГ по отношению к указанным показателям до включения г-ЕРО в комплексную терапию. Полученные данные свидетельствуют, что оценкой эффективности г-ЕРО могут служить показатели ЭК. На основании полученных данных о структурно-функциональном сотоянии зритрсна можно предложить следующую концепцию сочетанного воздействия ВДР, токсикантов при'ПМП у детей на молекулярно-мембранном уровне:

Ионизирующая радиация и токсиканты (МДР и повышенный уровень РЬ и Н^ в организме) ~~ 1

гиперпродукция свободнорадикальных соединений в клетках и плазме крови (усиление процессов ПОЛ, снижение актизности СОД, увеличение уровня СФ)

-к--

сникение антиоксидантной системы защиты эритроцитов (уменьшение количества ГВ)

нарушения структурно-функционального состояния эритроцитов и мембранных компонентов (изменение ¿¡икроеязкости липидсв, снижение теомсрс-зисгентности, усиление СГ, уменьшение ПЖЗ).

ь_I_----------—---—--

Генерация активных Форм кислорода (АФК) иммукокомпетент-ны;а<_клетка:1И_. костного мозга и их роль в патогенезе ПАА и МДС у детей. Для уточнения и расширения представлений о патоимму-нологических механизмах ПАА и МДС с помощью ЛЗХЛ изучена спо-

собность иымунокомлетентных клеток к.м. генерировать АФК. На рис.4 изображены типичные кинетические зависимости ЛЗХЛ, индуцированной контактом клеток с поверхностью стекла и действием Кон А. Установлено достоверное снижение уровня интенсивности ЛЗХЛ, обусловленной контактом клеток с поверхностью стекла и снижение или практически отсутствие ее при действии Кон А при ПАА и МДС у детей.

Рис. 4А. Кинетические зависимости интенсивности ЛЗХЛ клеток к. м.. индуцированной контактом клеток с поверхностью стекла у детей, больных ПАА (0,ЩС12).

• ло '

Рис.4Е. Кинетические зависимости интенсивности ЛЗХЛ - клеток к.м., индуцированной

■ Т , Кон А у детей, больных ПАА (О и МДС(2).

-А* , .

Для выяснения : возможных источников АФК в к.м. у больных проведана оценка морфологического состава клеток к.м. по отношению к контрольной группе. При. индивидуальном анализе клеток к.м. обнаружено, что основными клеточными компонентами являются лимфоциты, относительное содержание которых достоверно увеличено в 2-3 раза, снижено общее число нейтрофилов, в частности, зрелых форм по сравнению с контрольными значениями, содержание моноцитов не отличалось.

Известно,, что среди' иммунокомпетентных клеток наибольшей способностью генерировать АФК обладают нейтрофилы, а е наименьшей - лимфоциты, причем, незрелые нейтрофилы характеризуются низкой функциональной активностью и способность» генерировать АФК, (Семенкова Т.Н.. 1989; Ппагг^Адго А, е1 а1.

1989). Нами установлено трехкратное снижение фагоцитарного индекса, определяемого по захвату частиц латекса, нейтрофилов (32%) при ПАА и МДС по сравнению с контрольной группой (90%). Можно считать, что в интенсивность ЛЗХЛ клеток к. м. детей контрольной группы существенный вклад вносят кейтрсфилы. Для ответа на вопрос, какие клетки к. м. генерируют А<1К у больных ПАА и МДС проведено сопоставление показателей интенсивности ЛЗХЛ и содержания лимфоцитов. Обнаружено, что при высоком содержании лимфоцитов имеет место высокая интенсивность ЛЗХЛ, при контакте клеток с поверхностью стекла, что подтверждается корреляционной зависимостью (г=0,785, р<0,01). Следовательно, ответственность за интенсивность ЛЗХЛ несут, в основном, лимфоциты. Показано, что стимуляция Кон А не привела к индуцирования АФК, а, следовательно, величина лролиферативного ответа отсутствовала или была низкой при ПМП у детей (рис.4Б). ,что связано с функциональным дефектом лимфоцитов (Семикина Е.-Л.. 1992; Павлова И. Е.. Абдулкадыров К. М.. 1993) и изменением структурного состояния их плазматических мембран. Подтвераде-ние;] этому служат результаты иммунофенотипировачия лимфоцитоз к.и. больных: снижение соотношения основных субпопуляций Т-лимфсцитов за счет поЕыиения числа. СД^и снижения СД,?

Полученные данные свидетельствуют, что снижение генерации АФК обусловлено качественными нарушениями редокс-систем плазматических мембран лимфоцитов.. Метод оценки кислород-активизи-рукцен функции клеток к.м. с использованием ЛЗХЛ является информативным для уточнения иммунологических механизмов^патогенеза и ¡.газет быть использован в выборе-,ишлуносупрессив. ной терапии в лечении ПАА и МДС.

Состояние зритроыиггрной "системы детей-с 1ДА, проживающих в экологических условиях 'крупного•промышленного центра В условиях экологического неблагополучия г. Минска заинтересованность систеш кроветворения, как-одной из систем экологического риска выразилась в достоверном'увеличении среднегодового показателя заболеваемости¡МА: у г детей; г. Минска в возрасте от 0 до 15 лет ЧДЭ?9-19.92'годы) подданным .ретроспективного анализа годовых ста^ист'-'-ичёских' отчетов детских поликлиник. Причем, если в период-до.: катастрофы на ЧАЭС (1979-1985 годы) среднегодовой • уровень", '.:забогаваемо'сти ■ -ДДА составил

77,79+1,86%000, то после аварии на ЧАЗС (1986-1992 годы) он достоверно увеличился до Ю2,33±1.96Я000 . Прогностическая модель частоты ЖДА (1979-1985гг.) свидетельствует о тенденции к росту ежегодно в среднем на 1,96%000, а в.период с 1986-1992г. - на 3,24йооо; Для выяснения влияния РЬ на состояние эритроци-тарной системы ОС) проведено сопоставление показателей морфологического состава ПК, ферро-и эритрокинетики при ЖДА у детей в зависимости от уровня токсиканта в крови. Для этого выделены 2 группы: I группа - ЖДА на фоне повышенного уровня РЬ в крови (0,125±0,007 мг/л) и II группа - на фоне допустимого его уровня (0,076+0,006 мг/л). Выявлено достоверное снижение количества Ег и НЬ, тенденция к снижению диаметра Ег, у 42,1% детей снижение среднего содержания и концентрации НЬ в одном Ег и у 37?. - степени зрелости РЛ,. а также установлена тенденция к снижению содержания СК, ТФ, СФ и НТФ железом по сравнению с показателями II группы. Наряду с этим обнаружено достоверное увеличение СГ и снижение П1Э, тенденция к снижению СЭ при ЖДА на фоне повышенного уровня РЬ в крови по отношению к группе детей на Фоне допустимого его уровня в организме. Причем, распад Ег превышал СЭ при отсутствии клинических признаков гемолиза. Можно считать, что нарастающая гипохромия Ег создала условия для образования быстро разрушающей популяции, что привело к уменьшению ПКЗ, а также реципрокным взаимоотношениям между количеством образующихся Ег и увеличением популяции клеток с низким содержанием в них НЬ (г=0,571, р<0,01).

Полученные данные указывают, что на фоне повышенного уровня РЬ в организме проявляется более выраженная модификация показателей ЭС. В генезе ЖДА у детей существенная роль принадлежит свинцу. У 17,1% обследованных выявлен ЛДК, а железодефи-цитное состояние (1ДС)- у 45,71 детей.

Структурно-функциональное состояние эритроцитарнкх мембран.

В связи с тем, что при КДА у детей на фоне повышенного уровня РЬ в крови, показатели ЭК значительно отличались от группы детей с ЕДА на фоне его допустимого содержания и контрольной группы, было изучено физико-химическое состояние бел-коеых и лилидных компонентов мембран Ег. Для его решения были изучены параметры собственной (белковой) флуоресценции теней Ег и флуоресценции липсфильнсго флуоресцентного зонда пирена, включенного в мембраны. Из параметров, характеризующих состоя-

ние белкоз, были измерены положения максимумов спектров и квантовый выход белковой флуоресценции теней Ег. Показано, что среднее значение относительных квантовых выходов флуоресценции белкоз теней Ег достоверно не различались во всех обследованных группах детей : ЯДА. без анемии, ЖДА на фоне повышенного и допустимого уровня свинцца в крови по отношению к контролю.

Положение максимума спектра флуоресценции зритроцитарных мембран у детей с ЯДА также было идентично таковому показателю, характерному для детей без анемии и 1ДА на фоне повышенного и допустимого уровня сзинца в крови - максимум флуоресценции теней Ег находился в области 340-345 юл. Эти данные указывают на то, что при ЖДА в мембранах Ег детей не происходит изменений структурного состояния белковых компонентов. Установлено, что величина Кокс пирена. включенного в тени Ег, достоверно не различалась у детей с ЖДА, без анемии и ЖДА на фоне допустимого уровня РЬ в крови по отношению к контрольной группе. Однако, значение Кэкс было достоверно выше в группе детей с ЖДА на фоне повышенного уровня свинца в кооеи по сравнению с контрольными величинами и ЖДА на фоне его допустимой концентрации. Повышение величины Кзкс. пирена свидетельствует о снижении микровязкести лкпидного бислоя мембран Ег у детей с ЖДА на фоне повышенного уровня свинца в крови. Это может быть связано с несколькими причинами. Во-первых, с избытком полинасы-ченных жирных кислот и повышенной концентрацией продуктов ПОЛ, обнаруженных не только в Ег. но и плазме крови при ЖДА (Соболева М.К. с соавт., 1994), во-вторых, с увеличением общего содержания липидоз и фосфолипидов и уменьшением эфирсв холесте-зика и лизсфосфолипидов в мембранах Ег (Кириленко Н.П., Пара-.юнозаИ. В., 1992).

Известно, что спектрально-люминесцентный анализ плазмы срови является чувствительным для обнаружения в организме патологических процессов. Гак, люминесцентный параметр К, опре-1еляемьгй как отношение величины интенсивности ультрафиолетовой !белковой) флуоресценции плазмы крови в ее максимуме (А +340-¡50 ни) к величине, определяющей интенсивность флуоресценции юсстансвленных форм никстинашдных кофермонтов (Л=470-480 нм) ¡остаточно информативен для выявления некоторых заболеванийй :истемы крови (Черницкий Е. А., Слобожанина Е.И., 1989).

Измерение флуоресцентного показателя К (К=135П/14?п)

205£-ной. плазмы крови детей с ЖДА (как на фоне допустимого уровня свинца, так и при повыпенной его концентрации в крови) позволило установить, что среднее значение этого показателя для всех групп обследованных детей является одинаковым и не отличалось от' контрольной группы. Так как было выявлено, что у 50% детей из группы обследованных с ЖДА концентрация нитратов в моче, свинца и ртути в крови на 15-20% превышала допустимая урозень, то ыы проанализировали спектры флуоресценции плазмы кропи детей с ЖДА, У которых наряду с повышенным уровнем свинца был увеличен уровень ртути в крови и нитратоз в моче. Оказалось, что значение флуоресцентного показателя плазмы К возрастает в случае, когда в организме наблюдается превышение допустимого уровня содержания одновременно трех неблагоприятных факторов: свинец, ртуть и нитраты (рис.5).

Рис.5. Спектры флуоресценции 20%-й плазмы крови ребенка без анемими (1) \ с ЕДА на фоне повышенногс уровня свинца, ртути в к; ви и нитратов в моче (2),

» ЗВЭ Мо час «<» /во Ля есо . ^ ^^

Таким образом, результаты исследования физико-хиыическоп состояния мембран Ег свидетельствуют о том, что структурно состояние белковыхкоыпонент мембран Ег не претерпевает измене ний. при КДА, но микровязкость липидного'бислоя эритроцитарны мембран у детей с КДА на фоне повышенного уровня РЬ в кров снижается.

Антиоксидантная заздтная~система в эритроцитах и плазм крови. Показано достоверное снижение активности СОД, увеличе ние активности каталазы и ГП в Ег детей с КДА по отношению контрольной группе и такие тенденция к уменьшению активное! СОД к группе, детей без анемии. Для выяснения роли действия Е на состояние ферментативной АОС и участие в его в генезе ачс ши. проведено сопоставление показателей СОД в группах ЖДА 5 фоне допустимого и повышенного уровня РЬ в крови. Установле! достоверное снижение активности СОД в группе с ЕДА на фоне т

вышенного уровня РЬ е крови по отношению к группе НА на фоне допустимого его уровня. Можно считать, что у детей с ЖДА, и, особенно на фоне повышенного уровня РЬ в крови,■ происходит усиление процессов свсбоднорадикальнзго окисления. Достоверных различий активности каталазы и ГП в Ег между группами ЕДА не выявлено. Сравнительный анализ активности СОД, каталазы и ГП в эритроцитах двух групп детей без анемии на фене повышенного и допустимого уровня РЬ в крови не обнаружил достоверных различий как между группами, так и контрольными значениями. Можно думать, что незначительное повыпение концентрации РЬ в крови (0,103+0,005 мг/л) не сбладает выраженным действием на состояние актизности АОС. Полученные данные свидетельствуют, что в группе детей с ЖДА и, особенно, ЖДА на фоне повышенного уровня РЬ (0,125+0,007 мг/л) в крови идут более вкраяенные нарушения, проявляющиеся снижением активности СОД и активацией каталаз-но-г.ерсксидазного пути в эритроцитах. Это может быть расценено как адаптационно-компенсаторный механизм на действие высокой концентрации РЬ в крови, которая, возможно, и является тем самым 'пороговым уровнем, способным оказывать свсе токсическое действие, и слуаигь одним из'этиологических фактороз в генезе анемического синдрома.

При изучении показателей нефериентативной АОС эритроцитов установлено достоверное снижение количества ГВ, витамина А и Е в группе детей с ЖДА, по отношения к контрольным величинам и группе без анемии. Сопоставление данных между группами детей с ЕДА на фоне повышенного и допустимого уровня РЬ в крови позволило выявить достоверное снижение концентрации ГВ в группе с повышенным уровнем свинца в крови. Полученные данные указывают -на более выраяенное снижение АОС на фоне повышенного уревня РЬ в креви у детей с ЖДА. Таким образом, "выявленные изменения свидетельствует, что адаптационно-компенсаторные сдвиги у детей с ЖДА. особенно на фоне повышенного уровня РЬ в крови, недостаточны для поддержания требуемого уровня АОС, что приводит -с структурно-функциональным нарушениям Er и эритроцитарных лембран и обосновывает целесообразность включения ыембраноста-Зилизирующих препаратов в комплексное лечение 5КДА и для элиминации ксенобиотиков.

Сопряженность функционирования эритроцитарной системы и ;сстояния щитовидной железы. Для выяснения возможных взаи-

мосвязей между показателями ЭС и функционированием щ. к. у детей проведено исследование функции щ.ж. Показано, что достоверных различий средних значений содержания Т4св и ТТГ не выявлено в группе детей с ЖДА и без анемии по отношении к контролю. Однако, при индивидуальном анализе наблюдалось увеличение числа детей с дефицитом уровня Т4св в сыворотке крови и дефицитом йода по отношению к норме. При проведении корреляционного анализа между уровнем Т4св и показателями Ег и НЬ у детей ЕДА установлена связь, свидетельствующая о взаимном влиянии этих параметров (НЬ г=504, р<0,01; Ег - г=0,496, р<0,01). Известно, что тиреоидине гормоны относятся к одним из наиболее активных регуляторов окислительных процессов в клетках (Владимиров Ю. А., 1991; РгапсПп <1.А., 1988). Для выяснения участия líca в свобсднорадикалькых процессах проведено сопоставление показателей Т4св и СОД. Выявлено усиление свободкорадикальных процессов в группе детей с ЖДА на фоне повышенного уровня РЬ в крови, что связано не только с действием РЬ, но и усугубляется дефицитом гормона Т4св.(г=0, 569, р<0,01). Мокно считать, что в генезе анемического синдрома у детей с ЖДА прослеживается влияние дефицита йода, тироксина, усугубляющих гипоксию и приводящих к активации свободных радикальных процессов. Это указывает на необходимость коррекции, связанной обогащением рациона питания продуктами стабильного йода, дифференцированной схемы диспансерного наблюдения и реабилитации. Вероятной причиной функциональных и морфологических изменений Ег могут быть и нарушения состава ЭМЭ. Показано достоверное снижение содержания Ре, Си и 2п в группе детей с ЖДА по отношению к группе без анемии, При индивидуальном анализе изучаемых показателей детей с ЖДА установлен у 45,4% -сочетанный дефицит двух или трех 23. 8?. ЗМЗ, что расценено как микрозлементоз, обусловленный, по-видимому, как алиментарной' недостаточностью (Зайцев с со-авт., 1995), так и конкурентным действием свинца. Полученные данные свидетельствуют, что в генезе анемического синдрома пр> ЕДА у детей дефицит ЭМЭ является важный фактором, усугубляющийся токсическим действием РЬ. Это диктует необходимость при менения комплекса коррегирующих средств, расширения рацион, питания продуктами, богатыми микроэлементами и обеспечивающи элиминацию ксенобиотиков из организма.

Состояние зритрепоэза и структурно-функциональная характеристика мембран эритроцитов в отдаленный период после воздействия физико-химических факторов.

Для понимания отдаленных эффектов МДР как самостоятельно, так и в сочетании с другими неблагоприятными экологическими факторами, а также с целью выяснения того, могут ли такие воздействия приводить к появлению морфо-функционапьных нарушений зритрсна в пострадиационный период, нами изучен морфологический состав клеток эритроидного ростка в общей популяции клеток к.м. и физико-химические характеристикиЕг у животных через б месяцев после воздействия МДР и сочетанного действия радиации и тепла.

Установлено достоверное увеличение общей клеточности к.м. з пострадиационный период з группе животных, подвергшихся R-облучснию (II группа) по отношения к контрольной (I) группе (486,2+20,2'10"'/л и 371,0+20, Г 10^/л, соответственно), при отсутствии достоверных различий между группами животных, получивших сочетанное R-облучение и тепло (IY гр.) и контрольной (III) группой,подвергайся только физическому фактору - повы-пенной t". Общее число эритроидных клеток к.м. у опытных животных II и IY групп не имело достоверных различий с контрольными значениями. Среди общей популяции клеток эритроидного ряда установлено достоверное увеличение количества эритроблас-тов, проэритробластов и базефильных нормоцитов у животных II и IV групп (11,6+1,52 и 10,3+1,22, соответственно) по отношению к данным показателям в контролях (7,25+0,9% и 7,8+1,0%, соответственно). Число ядрссодержащих клеток эритроидного ряда по-лихрематофильных и сксифильных нормоцитов достоверно не отличалось как во II и IY группах по отноиению к контрольным величина;.:, так и между опытными группами. Можно считать, что увеличение количества молодых клеток связано с усилением пролифе-ративной их ачтизности в пострадиационном периоде и расценено как кс!;пенсатсрная реакция организма (Oppenheioi J. et al., 1936; Carlson E., Frydz H.,1988). По накему мнению, увеличение общего количества клеток в к.м. .обусловлено повышением пролп-феративной активности эритроидных клеток-предщестЕенников и лх ближайших потомков в ответ на действие экологических факторов. Полученные данные свидетельствуют о спонтанном пострадиационно',! количественном восстановлении клеток эритроидного ряда че-

рез 6 месяцев после действия как МДР, так и сочетанных физико-химических факторов. Доказательством существующего повреждающего действия неблагоприятных факторов на состояние зритро-на являются обнаруженные нами качественные структурные нарушения эритроидных клеток к. м.: гиперсегментация базофильных нср-моцитов, проэритробластов, анизо-пойкилоцитоз. гипохромия по-лихроматофильных и оксифильных нормоцитов. Таким образом, несмотря на высокую способность к регенерации'эритроидных клеток, по-прежнему остаются качественные изменения этик клеток у животных в отдаленный период после й-облученкя и сочетачнсго дейстзия МДР и температуры. Далее с помоцью биофизических методов были изучены физико-химические свойства эритрсцитрных мембран экспериментальных животных. Важными характеристиками плазматических мембран Ег является их устойчивость к гипото-нич,кости среды и к окислителям. Обнаружено, что в отдаленный период после действия ИДР и сочетачнсго действия МНР и тепла не происходит заметных нарушений осморезистентности Ег. Тач как гипотонический лизис клеток зависит, прежде всего, от структурного состояния белков спектринового комплекса (коб1ог ег а!., 1930), то мокно думать, что в отдаленный пострадиационный период в Ег крыс повреждения каркасных белков не происходит. При исследовании показателей окислительного гемолкзг установлено, что устойчивость Ег крыс к действию 1 мМ аскорбиновой кислоты б пострадиационный период повышена по сравнений с контролем. Максимальный уровень гемолиза Ег крыс в присутствии 1 мМ аскорбиновой кислоты для контрольной группы животны: составлял примерно €0г, для Ег других групп животных 80?.. Однако, время, за которое происходит лизис половины находящихс: в суспензии Ег контрольной группы было на 25-4.0% ниже, чем ; группах животных, ранее подвергнутых действию радиации и тепл (рис. Ш.

Это свидетельствует о повышении устойчивости Ег крыс пострадиационный период к действию окислителя. Известно, что протекании окислительного гемолиза Ег большое значение имее состояние гемоглобина. Показано, что в Ег контрольной групп животных исходный средний уровень МШз составлял 27,3+87-, в т зремя как в других группах он был значителоно ниже (5-10Й) Кроме того, скорость образования МЬНЬ в Ег контрольной групг животных в зависимости от времени инкубации их с аскорбиновс кислотой была зыке по сравнению с другими группами (рис.бБ)

Рис.бЛ. Кинетика гемолиза эритроцитов крыс при 25"" С а среде, содержащей 1 мМ аскорбиновой кислоты -контрольная группа животных (1), группа животных через 6 месяцев после 25 сеансов облучения по 2 Р/ день (2), группа .тавотных -через 6 месяцев после со-четаннсго действия (25 сеансов) облучения по 2 ?! день и нагревания 37йС, ммя 4 час/день (3)

Таким образом, повышенный уровень ,Ч*КЬ в клетках предшествует окислительному лизису Ег. По-видимсму, различие в образовании МШЬ связано с повышением активности метгемогло-син-редуктаз у животных, перенесших воздействие радиации, что может быть расценено как компенсаторная раакшя организма.

Рис.6Б. Кинетика образования МЪНй в эритроцитах изучаемых групп животных -контрольная группа животных (1), группа животных через 6 месяцев после 25 сеансов облучения по 2 Р/ день (2), группа животных ■ через 6 месяцев после со-четанного действия (25 сеансов) облучения по 2 Р/ день и тепла - 37°С, 4 час/день, 25 сеансов (3) Для ответа на вопрос, не связано ли повышение устойчивости Ег к действию окислителя с накоплением продуктов ЛОЛ в Ег, мы измеряли уровень ТБК-.продуктсв з Ег подопытных животных. Установлено, что уровни ТБК-продуктов во всех группах животных достоверно не различались. ПОЛ следует считать физиологическим процессом, а перекиси - продуктами обмена нормальных метаболи-

зирующих клеток (Бурлакова, Храпова. 1985). Низкий уровень перекиси липидов, свойственный нормальным тканям, совсем не означает, что в них не происходит перекисього окисления, а объясняется тем, что в тканях хорошо сбалансированы процессы образования и расходования перекисей и окисления липидов протекает на определенном стационарном уровне (Храпова, 1981). Можно считать, что стационарность процесса окисления липидов является основой поддержания определенного состава, структуры и функции мембран Ег животных в отдаленные сроки после МДР воздействия.

С помощью флуоресцентного зондирования мембран выязлено, что Кэкс липофильного зонда пирена, включенного в белке тени Ег крыс изучаемых групп достоверно не различались. Установлено лишь достоверное повышение Кэкс в группе животных, получивших сочетанноэ действие МДР и Т° по сравнению с контролем (0.83+0,09 и 0,66+0,08, р<0,1). Полученные результаты указывают на снижение микровязкости мембранных липидов, происходящее в отдааенный пострадиационный период в Ег животных, подвергшихся комбинированному воздействию физико-химических факторов.

Таким образом, некоторые параметры эритроцитарных мембран животных отражают как шстдействие МДР и в большей степени со-четанкых физико-химических факторов (МДР и повышенной 1°). Это проявляется в повышении устойчивости Ег, к действию окислителя, связанной с изменением количества МШЬ в клетках и, возможно, повыаением активности метгемоглобин-редуктаз, а также в снижении микровязкости липидов мембран Ег крыс в период после комбинированного воздействия МДР и повышенной температуры. Обнаруженные изменения эритрона в эксперименте могут быть ыоделыс патологических сдвигов в состоянии эритрона, наблюдаемых у детей, проживающих в неблагоприятных экологических условиях.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

1. В обцую программу лабораторного обследования больны; АА и МДС необходимо дополнительно включать определение уровм токсикантов (свинец, ртуть), содержания эндогенного ЕРО, СФ, что позволит полнее оценить степень тяжести состояния и определить дальнейшую корригирирущую лечебную тактику.

2. В комплексные современные программы лечения детей, больных ПАА. необходимо включать рекомбинантный ЕРО, оценка дефективности которого, помимо общепринятых критериев должна учитывать и показатели кинетики эритроцитов.

3. Биофизические методы исследования, характеризующие структурно-функциональное состояние эритсоцитаркых мембран (зсндсоая флуоресценция, измерение устойчивости мембран к окислителю), рекомендуется использовать для раннего выявления патологических состояний и для решения вопроса о целесообразности применения мембсансстабилизирующих препаратов'в комплексной терапии при АА, МДС и ЖДА у детей, особенно с повышенны:.! уровнем токсикантов в крови.

4. Метод лшинолзависиыой хемилжминесцениии рекомендуется использовать - для оценки кислородактивирующзй функции клеток костного мозга, дополнительного уточнения иммунологических механизмов патогенеза и также выбора иммуносупрессиЕНсй терапии в комплексном лечении ПАА и МДС у детей.

5. Яетям с АА и УДС с нарушенной функцией щ. ж. и ЖДА ти-сеопривного характера необходимо диспансерное наблюдение у эндокринолога с периодической проверкой показателей тиреоидных гормонов.

6. Детям с АА. МДС и ¡ЕДА рекомендуется обогащать рацион титачия продуктами стабильного йода, жирорастворимыми витами-та.и. микроэлементами (медь, цинк), а также включать продукты, збеспечива'ощиг выведение ксенобиотиков из организма.

ВЫВОДЫ

1. Среднегодовой уровень заболеваемости АА у детей' Ёела->уси в возрасте от 0 до 1-5 лет з период до азаоии на ЧАЭС : 1979-1935 гг.) составил 0,41+0,07. а после аварии (1986-1992 т.) - 0,44+0,06 на 100 000 детского населения, то есть, чувственного увеличения заболеваемости после катастрофы на ЧАЭС ie отмечено. Однако, прогностические модели указывают на тен-:енциа к -нарастании частоты данной патологии после аварии на [АЭС"ежегодно на 2.54' Причем, тенденция к росту АА зыяз-;ена в Брестской, Гомельской, Гродненской, Могилезской облас-ях и г. Минске с разным темпом ежегодного прироста, а в 2и-ебской и Минской областях - ежегодно к снижению.

2. Среднегодовой уровень заболеваемости МДС у детей Беларуси в возрасте от 0 до 15 лет, диагностируемый с 1986 года, в после аварии на ЧАЭС (1986-1992 гг.) составил 0,18+0,04 на 100 ООО детского населения и имеет тенденцию к росту ежегодно, в целом по РБ в среднем, на 0,2%ссс, так и отдельным её региона;.! с разным темпом ежегодного прироста.

3. Взаимосвязи между уровнем заболеваемости АА и МДС у детей, проживающих в зонах радиационного загрязнения территорий цезием-137 от37 до 555 кВк/ы~ не установлено. Существенным этиологическим фактором в генэзе АА и МДС является сочетанное действие химического загрязнения окружающей среды, в частности. свинца и ртути и малых доз радиации.

4. Мембраны эритроцитов у детей, больных ПАА и НДС, обладают измененной резистентностью к высокой температуре, что связано с увеличением концентрации метгемоглобина в эрироци-тах. По данным флуоресцентного зондирования эритроцитарных мембран, у детей с ПАА выявлено изменение физического состояния мембранных липидов, что ыожат являться результатом как изменений липидного состава мембран, так и процессов ПОЛ в эритроцитарных мембранах и плазме крови.

5. Показано, что в патогенезе анемического синдрома пр! АА и МДС у детей существенную роль играет гиперпродукция сво-бодкорадикальных соединений, обусловленная сочетанным действием неблагоприятных экологических факторов " (МДР, свинец, ртуть), и обладающих позрекдающим действием на эритрон.

6. У детей, больных ПАА и МДС, существенный вклад в про цесс образования активных форм кислорода вносят лимфоцит костного мозга. Снижение генерации АФК обусловлено качествен ныш нарушениями редокс-систем этих клеток. Б патогенезе эти заболеваний существуют нарушения иммунологических механизмов связанные не только с ингибирующим влиянием Т-сулрессоров н процессы пролиферации и дифференцировки гемопсэгических клетс -предшественников, но и с изменением кислородактивирующих сис тем плазматических мембран лимфоцитов.

7. Выявлен высокий уровень эндогенного ЕРО при АА и МДС детей, связанный с выраженностью депрессии эркропоэза, а в р! де случаез - и с дефицитом тиреоидных гормонов щитовидной ли лезы. Применение рекомбинантного ЕРО в комплексной терал1 больных с ПАа является особенно эффективным при низком исхо.

кем эндогенно:.; его уровне. Оценкой эффективности лечения, помимо общепринятых критериев, могут служить и показатели кинетики эритроцитов.

8. ЕДА у детей, проживает;« в условиях крупного промышленного центра (г. Минск), сочетается с дефицитом содержания цинка и меди, жирорастворимых витаминов А и Е. Показано, что снижение адаптациснно-ксшенсаторных механизмов зашиты зритро-на обусловлено уменьшением активности антиоксидантной система зашиты и снижением микрсаязкости липидов зритроцитарных мембран при сохранении структурного состояния их белковых' компонент на фоне активации свободнорацнкальных процессов, связанного с сочетанием дейстзием МНР и свинца. ■

9. 8 эксперименте на животных, подвергшихся как действию МДР, так и сочетанному действию радиации и повышенной температуры. через б месяцез установлено, что происходят количественные и качественные нарушения зритропозза в костном мозге с модификацией структурно-функционального состояния мембран эритроцитов. Обнаруженные изменения могут служить моделью патологических едзигов в состоянии эритрона. наблюдаемых у детей, трезизагсих в неблагоприятной экологической обстановке.

СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ- ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

Состояние эритрона у детей из контролируемых районов 'смельской области// В кн.: .Медицинские проблемы радиационной ¡ациты. Киев- 1987, с. 86-91.

2. Содержание кортизола у детей, подвергшихся ионизирую-;ей радиации// I Республиканская конференция "Научно-практи- • геские аспекты сохранения здоровья людей, подвергшихся радиационному воздействию в результате аварии"на ЧАЗС". Гез. докл. 'инея- 1988- с. 89.

3. Метаболическая характеристика эритроцитов детей из онтролируемых районов Гомельской области// I Республиканская енференцил "Научно-практические аспекты сохранения здоровья :сдей, подвергшихся радиационному воздействию в результате варии на ЧАЗС". Тез. дскл. Минск- 1988- с.90-91.

4. Структурно-функциональные нарушения эритроцитарней истемы детей, подвергшихся действию малых доз радиации// Рес-убликгнекая научно-практическая конференция по радиобиологии

-и-радиоэкологш.—ТЕз—докл.—Минск—1990^с.-145-(соаБТ;—Слобожанина Е. И. , Козлова H. М., Черницкий Е. А. ).

5. Изменение эритроцитов у детей, подвергшихся радиационному облучению// I Всесоюзный симпозиум "Молекулярные механизмы действия малых доз ионизирующего излучения". Тез. докл. Пу-щино- 1990- с. ИЗ (соавт.Слобожанина Е. И.. Козлова H.М.. ймай-кина И. В., Черницкий Е. А. ).

6. Изменения углеводно-электролитного метаболизма и кинетики эритроиитоз у детей, подвергиихся действию радиационного Фактора// Республиканская научно-практическая конференция по радиобиологии и радиоэкологии. Тез. докл. Минск-1990- с. 149 (соавт.Солодовникова Ф. Н. ).

7. Лкминолзависимая хемилюменисценция плеток костного мозга детей, подвергшихся воздействию низких доз радиации// Республиканская научно-практическая конференция по радиобиологии и радиоэкологии. Тез.докл. Минск- 1990- с. Ш (соавт. Се-менкова Г.Н., Черенкевич С.Н. ).

S. Изменение свойств эритроцитов людей, подвергиихся радиационному облучению// Вести АН БССР, Минск- 1991- серия фи-зико-энергетичных наук- N4- с. 105-109 (соавт. Слобожанин; Е.И., Черницкий Е.А., Козлова H. М., Савостьянов В. 3. ).

9. Состояние эритрона при миэлодиспластическом синдроме детей/ЛП Всесоюзный съезд гематологрв и трачсфузкологов Тез. докл., Киров- 1991- т. 1- с. 249-250 (соавт. Морозоза С. К.)

10. Показатели феррокинетики детей с миелодиспластически синдромом, подвергиихся действию малых доз радиационного обл; чения// III Республиканская конференция "Научно-практичесм-аспекты сохранения здоровья людей, подвергиихся радиационное воздействию в результате аварии на ЧАЭС". Тез. докл. Гс мель-1992- ч.1- с.140 (соавт.Ходосок Л.К.).

И. Изменение показателей эритроцитарной системы у дете1 из зон жесткого радиационного контроля в зависимости от сост< яния лентовидной хелезы// III Республиканская конференция "Н учно-практические аспекты сохранения здоровья людей, подвер иихся радиационному воздействию в результате аварии на ЧАЭС Тез. докл. Гомель- 1992- ч.2 - с. 84 (соавт. РадюкК. А. ).

12. К вопросу о миелодиспластическом синдроме у г тей//Сб. матерЛ съезда детских онкогематологов Республики Е ларусь. Минск- 1993- с.40.

13. Анемический синдром у детей из эндемических по зобу ¡айонсв Республики Беларусь после аварии на ЧАЭС// Радиобиологический съезд. Киев- 1993- ч. II. с. 469 (соавт. Радюк К. А.).

14. Предленкемическис состояния у детей Республики Бела-1усь// Сб.матер.конференции Чернобыльская катастрофа: Диагнос-:ика и медико-психологическая реабилитация пострадавших", !инск-1993- с. 103-104 (соавт. Смирнова Л. А.).

15. Клинические и лабораторные параметры анемического :индрсма у детей из зон жесткого радиационного контроля// 16.матер.YI съезда педиатрсз Республики Беларусь. Минск- 1993:. 74-75 (соавт. Смирнова Л. А., Кожачоза 3.4.).

16. Некоторые аспекты диагностики апластической анемии у ;етей// Сб. матер. I съезда детских сккогематслогсв Республики ;еларусь. Минск-1993- с. 41.

17. Количественно-функциональная, метаболическая и физи-:о-химичеекаяя характеристика эритрока у детей, подвергшихся :ействин экзе- я эндогенного иенкзирукчето излучения в услсви-х Беларуси// Педиатрия- 1993- PI4- с. 74-77 (соавт.Слссожаачина ;. И.', Козлова Н. М., Черницкий Е. А.).

13. К вопросу о профилактике и диспансеризации детского аселения на современном уровне// Педиатрия- 1993- N1, .107-109 (ссавт.Станкевич 3. А., Сукало А.В.).

19. Механизмы анемического синдрома у детей, проживающих экологически неблагоприятных условиях Республики Беларусь//

б.матер. "Охрана материнства и детства в условиях воздействия оследствий катастрофы на ЧАЗС". Минск- 1993- с.91-95.

20. Отчет КИР (заключительный) ШС1Э1002528Э "Оценка дина-ики заболеваемости гемобластозами и другими болезнями крови ■ етей в связи с аварией на ЧАЗС. Определение рациональных схем иагксстики и терапии МДС у детей", Минск-1993- раздел 2-il2c.

21. Морфологические, функциональные и физико-химические араитеристики еритрона у детей из рздиационно-кентролируеыых айснов Беларуси// Sveikatos apsauga, 1S93- М5-с.24-27 (со-зт. Слоссжанина Е. И.. Козлова Н. М., Черницкий S. А.).

22. Нарушения гемсглобиисобразования при анемическом индромэ у детией в современных экологических условиях// IY еспубликачская конференция "Научно-практические аспекты сох-анения здоровья людей, подвергшихся радиационному воздействию

результате аварии на ЧАЭС". Тез. донл. Могилев- 1994- ч. 1. 138-13Э(соавт. Смирнова Л. А.).

23. Изменение эритрона крыс в отдаленный период поело со четанного действия радиации и тепла// I съезд Белорусского об щества фотобиологов и биофизиков. Тез. докл. - Минск- 1994 с. 162 (соавт. Слобожанина Е. И., Мурзенок П. П., Козлова H.H.)

24. Болезни крови в Республике Беларусь до- и после ка тастрофы на ЧАЭС (1979-1935 и 1936-1992 гг.)// IY Республи канская кернференция "Научно-практические аспекты сохранени здоровья людей, подвергшихся радиационному воздействию в ре зультате аварии на ЧАЗС", Могилев- 1994- ч.3- с.8-15 (соавт Иванов Е. П., Толочко Г. В., Шуваева Л. П. и др.).

25. Некоторые особенности иммунного статуса у детей с си дероленичесюш синдромом, подвергшихся радиационному воздейс твию//Сб. матер.конференции "Чернобыльская катастрофа: прог ноз, профилактика, лечение и медикопсихологическая реабилитг ция, пострадавших", Минск- 1994- с. 116-117 (соавт. Смирное Л. А.).

26. Опыт применения рекомбинантногс эритропоэтина в лечЕ нии приобретенных апластических анемий у детей// Сб. матер. ] съезда детских онкологов-гематологов Республики Белг русь. Минск- 1994- с. 7.

27. Изменения эритроцитарной системы детей, проживающих радиационно-контролируешх районах Беларуси// Сб. матер, ко! ферекшии "Чернобыльская катастрофа: прогноз, профилактика, л( чение и медикопсихологическая реабилитация пострадавших Минск- 1994- с.132-133 (соавт. Слобожанина Е. И., Козлова Н. М Новицкая Г.П., Черницкий Е.А.).

2ß. Сывороточный ферритин при панмиелопатиях// Сб.мате II съезда детских онкологов-гематологов Республики Беларус Минск- 1994- с.В (соавт. Смирнова Л.А., Марцев С.П., Кравч З.И.).

29. Люминесцентное исследование плазмы крови детей с ан мкческш,; синдроиок//Сб. матер. II съезда детских онкслогов-г матологов Республики Беларусь. Минск- 1994- с.26 (соавт. Сл божанина Е. И., Гресь H.A.. Хреновская H.H.).

30. Проблема анемического синдрома у детей б неблагопр ятных экологических условия/. Республики Беларусь// Сб. мате II Мекдународного конгресса "Научно-медицинские проблемы Че нобылк", Мкнск-J £95-с. 2 8-2С(соавт.Кувшинчиков В.А., Гресь Н. /

31. заболеваемость ЖДА, депрессиями кроветворения, лейке-;ми детей 0-14 лет г. ■ МИнска. Состояние системы эритропоэза. В кн. "Экология и состояние здорозья детей г. МИнска после •астрофы на' ЧАЗС". Медико-окологинеский мониторинг - Мн. -14 - с. 118-122 и 133-137. -г

32. Сопряженность показателей красной крови и тиреоидной ¡Кции щитовидной железы у детей-Гомельской области// IY Мезс-!ародная конференция "Чернобыльская катастрофа: диагностика ¡едико-психологическая реабилитация пострадавших". Тез.докл. :ск- 1995- с.43-49 (соавт.Панасюк Г.Д., Радюк К.А.').'

■ 33-. проблема депрессий кроветворения у детей Республики арусь// Сб.матер. "Актуальные проблемы.биологии и медицины"-ск- 1395- с.406-407 (соавт. КуЕШННпков В.А.).

34. Современный подход в лечения острой приобретенной ап-тической аномии у детей// Педиатрия- 1995- N4- с.36-38 (со. Алейникова 0.В., Алексейчик А.В., Дунаев И.А. и др.). ' 35. Стандартизация лечебно-диагностических мероприятий анемиях и паныислопатиях// Здрав. Беларуси- 1995- N5-

4-36 (соавт. Иванов Б. П., Смирнова Л. А., Хреновская H.H.). ^36. Депрессии гсмояооза у детей в современныых условиях

публики Беларусью// Сб. матер. IÍ международного конгресса учно-модицинские проблемы", Минск- 1995- с.16-18 (со-.Кусзинников В.А., Слобожанина £.И.).

37. Структура анемического синдрома детского населения публики Ееларуусь в современных экологических условиях// матер. "Актуальные проблемы биологии и медицины" '¡инск-

5- с. 400-402 (соазт. Кувгинникоз В. А., Хреновская H.H.).

38. Состояние системы антисксидантной защиты при панмие-атия/. у детей, проживающих в неблагоприятных условиях Еела-■л // Гез.дскл. Международного симпозиума "Витамины и здо-ье населения Беларуси и смежных регионов". Гродно - 1995 12Э-133 (соавт. Ксстюк В.А.)

39. Витаминная обеспеченность детей г. Минска с железоде-итньпш анемиями, подзергаихся радиаиионно-химическому эаг-жнив // Тез. докл. Международного симпозиума "Витамины и ровье населения■Беларуси и сме&ных регионов". Гродно - 1395 . 130-131-(соавт.- Зайцев В. А., ГРесь H.A.)

40. Некоторые биофизические параметры мембран эритроцитов панмиелопатиях у детей //, Сб.матер. Российской конференции

по детской гематологии "От науки к практике" Санкт-Петерб. 1395 - с.£Ясоавт. Слобожанина Е.И. .Козлова Н. М.. Новицкая Г.!

41. Генерация активных' форм-кислорода-клетками Костн< мозга детей npHjrami^^—^Россвдской'ком

—ренцик~~по детской гематологии "От науки к практике" Санкт-1 терб. - 1995 - с. 66 (соавт. Семенкова Г.Н.)

42. Combined effect of radiation and hiqh temperature the physicochemical properties of -rat erythrocytes// 2 nd ternatiohal Conference "Radiobiological consequences of nuc ar accidents"Moscow, Abstr.- 1994, part 2- p. 254 (Slobozhan E.J., Murzeriok P.P., Koslova N. M. et al).

43. The pecuiarities ol the state ol erythrocytic sys in iron deficiency anemia (JDA) on the background of combi effect of unfavourable antropogenic factors in the repub belarus// 2nd International'Conference "Radiobiological с sequences of nuclear accidents", Moscow- Abstr.-1994- part p. 123 (Slobozhahina E.'J., Kuvshinnikov V.A., Gres N. A. et a

" 44. Epidemiological investigations-of the panmyeiopatl in children of the Respublic Byelarus in:the pre-and poster ncbyl accident' period// _ International symposium. "Curr problems of childhodd panmyelopathies:,focus on myeloaysplai syndrome. Moskov,,-Abstr-19S4- p.-.49-50 (Ivanov E.P., Toloc G V.;. _

45. The prevalence oi myelodysplastic syndrome . (MDS) cniidren under the unfavourable condition in the Republic iarus// 2 nd International-Conference "Radiobiological' со! quences of nuclear*'-accidents", Moscou'-.Abstr. r!994- par p. 122 (Tvanov E.P-. ,-■ Tolochko G.V.., Shuvaeva 'L.P.. KuvsMnr,.

Поди.к ns4.24.I0.S5 Формат- 60XB4/I6 Объём Э'п.л.Зак 53 1

V. А.}

Отпечатако es ротопрвнте ВГИУЗ Маках, ул.П.Бровкв д.З