Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Структурно-молекулярные механизмы патологии при фасциолезе жвачных

На правах рукописи

КАРИМОВ ФОАТ АХМЕТОВИЧ

СТРУКТУРНО-МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ПАТОЛОГИИ ПРИ ФАСЦИОЛЕЗЕ ЖВАЧНЫХ

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

Уфа-2005

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет»

Научный консультант -Заслуженный деятель науки Республики

Башкортостан, доктор ветеринарных наук, профессор Байматов Валерий Нурмухаметович

Официальные оппоненты -Заслуженный деятель науки Республики

Башкортостан, доктор ветеринарных наук, профессор Кадыров Урал Гаянович

-Заслуженный деятель науки Российской Федерации, доктор ветеринарных наук, профессор Мешков Виктор Михайлович

-Заслуженный деятель науки Российской Федерации, доктор биологических наук, профессор Тельцов Леонид Петрович

Ведущая организация -ФГОУ ВПО «Казанская государственная

академия ветеринарной медицины им.Н.Э Баумана»

Защита состоится « { » июля 2005 г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 220.003.02 при ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» 450001, г. Уфа, ул.50 лет Октября, 34, корпус 4

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет»

Автореферат разослан «30» мая 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, профессор

Андреева А.В.

1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Болезни животных паразитарного происхождения протекают с глубокими нарушениями обменных процессов в организме. Одним из широко распространенных паразитарных заболеваний среди жвачных является фасциолез. В связи с высокой патогенностью возбудителей, фасциолез причиняет большой экономический ущерб, который складывается за счет смертности животных (овец, коз) и потерь продуктивности. Несмотря на значительные успехи лечения и профилактики фасциолеза, до сих пор остается проблема его ликвидации и восстановления организма животных после дегельминтизации до физиологических норм (И.А. Архипов, 1991, 1995; А.М.Сазанов и др., 1989, 1991; В.В. Горохов и др.,1997; Ю.Ф. Петров, 1992, 1998; В.В. Кузьмичев, 1997; Х.Г. Нурхаметов, 1997, 1998; М.Э. Онуфриенко, 2003; Ю.Ф. Петров и др., 2003).

Вопросы нарушения обмена веществ при фасциолезе изучены довольно полно. Однако отсутствуют данные о механизме действия этого заболевания на обменные процессы в костной ткани. Костная ткань принимает участие в регуляции минерального обмена, учитывая роль макро- и микроэлементов в организме, и в общем обмене веществ. Поэтому изучение данного вопроса требует своего решения. Весьма ограничены сведения об исследованиях минерального обмена в костях при фасциолезе жвачных и не установлена взаимосвязь содержания макро- и микроэлементов в крови, печени и костной ткани. Совершенно не изучены биомеханические свойства костей при фасциолезной инвазии. Отсутствуют данные влияния данного заболевания на макро- и микроструктуру костной ткани. Для ранней диагностики нарушения минерального обмена в костной ткани больных животных важное значение имеют рентгенологические исследования, что пока не находит применения при фасциолезе.

В литературе достаточно много работ, где подробно описана патологоана-томическая картина внутренних органов при остром и хроническом фасциоле-зе. Тем не менее, слабо изучена микроструктура основных внутренних органов

при действии на них токсинов фасциол. При изучении патогенеза фасциолеза необходимо учитывать экологическую обстановку окружающей среды.

При изучении литературы выяснилось, что недостаточное внимание уделено патогенетическим механизмам при фасциолезной инвазии у жвачных животных. Именно этим проблемам посвящена данная работа, которая является самостоятельным разделом комплексной темы факультета ветеринарной медицины ФГОУ ВГЮ «Башкирский государственный аграрный университет».

Цель и задачи исследований. Целью данной работы явилось изучение морфофункциональных особенностей в организме крупного рогатого скота и овец при фасциолезной инвазии. Для реализации этой цели были поставлены следующие задачи:

- установить морфометрические показатели и биомеханические особенности пястных костей у жвачных животных при различной степени фасциолезной инвазии;

- изучить рентгенологическую характеристику и плотность пястных костей при фасциолезс крупного рогатого скота и овец;

-выявить структурно-функциональные изменения костной ткани у жвачных при спонтанном фасциолезе;

-показать взаимообусловленность патологических процессов во внутренних органах у бычков и овец при фасциолезе;

-определить изменение минерального обмена у овец и крупного рогатого скота при фасциолезе.

Научная новизна и ценность полученных результатов. Впервые раскрыты важные патогенетические механизмы, возникающие у животных при фас-циолезе, обусловленные структурно-молекулярными изменениями. Совокупность современных анатомических, гистологических, гистохимических, ультраструктурных, рентгенологических и биохимических методов исследования позволили получить новые данные о токсикозе при фасциолезе и нарушении функциональной активности органов грудной и брюшной полости. При фас-циолезе крупного рогатого скота установлены процессы деминерализации ко-

стной ткани. Впервые выявлено нарушение биомеханической характеристики опорно-двигательного аппарата. Автором модифицирована методика оценки биомеханических свойств пястных костей. В костной ткани установлены выраженные деструктивно-дегенеративные процессы с нарушением кровоснабжения, сужением просвета канальцев остеона, нарушением слоистости расположения костных пластинок и разрушением остеоцитов. Впервые показаны взаимообусловленные патологические изменения при фасциолезе бычков и овец, что является новым подходом с теоретических и практических позиций.

Теоретическая и практическая значимость работы. Фасциолез животных в ветеринарной практике является распространенной проблемой и представляет определенный интерес и для медицинской практики. Нами изучены морфофункциональные особенности почек, печени, сычуга, тонкой кишки, поджелудочной железы, легких и сердца при фасциолезной лшвазии жвачных животных. Установлено нарушение их структуры и функции со снижением уровня гликогена и увеличения гликозаминогликанов. Выявлены существенные нарушения биомеханических свойств костей и содержания в них макро- и микроэлементов, что дает новый стратегический подход для патогенетической терапии фасциолеза животных и человека. Предложен унифицированный метод оценки биомеханических свойств костей.

Реализация результатов исследования. Результаты исследований внедрены и используются в учебном процессе на кафедрах Башкирского, Оренбургского государственного аграрного университетов, в Московской академии ветеринарной медицины, Хакасском государственном университете, а также в научно-исследовательской работе институтов Российской академии сельскохозяйственных наук (протокол № 7 от 20 января 2005 г., отделение ветеринарии РАСХН «Патология, фармакология и терапия»).

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и одобрены на Международной научно- практической конференции «Актуальные вопросы зоотехнической науки и практики, как основа улучшения продуктивных качеств и здоровья сельскохозяйственных животных» (Ставрополь,2001),

научных конференциях ВИГИС «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями (зоонозы)» (Москва, 2002, 2003, 2005), Международной научной конференции «Здоровье, разведение и защита мелких животных» (Уфа, 2001), 4-; 6-; и 7- Конгрессах международной ассоциации морфологов (Москва, 1999; Уфа, 2002; Казань, 2004), Международной научно-практической конференции «Пути повышения эффективности АПК в условиях вступления России в ВТО» (Уфа, 2003), Всероссийской научно-методической конференции патологоанатомов ветеринарной медицины (Уфа, 2003), Международной конференции, посвященной 125-летию К.И. Скрябина и 60-летию основания Лаборатории гельминтологии АН СССР - Института паразитологии РАН «Основные достижения и перспективы развития паразитологии» (Москва, 2004), Третьем Российском конгрессе по патофизиологии «Дизрегуляционная патология органов и систем (экспериментальная и клиническая патофизиология)» (Москва, 2004), ежегодных научно-практических конференциях Башкирского ГАУ (Уфа, 1998-2005). у Публикация. По материалам диссертации опубликованы 26 статей, ко-

торые отражают основное содержание диссертации.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 293 страницах компьютерного текста, содержих 24 таблицы, 86 рисунков. Состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов исследований и их обсуждения, заключения, выводов, предложений производству и приложения. Библиография содержит 281 названий, в том числе 126 иностранных авторов.

Основные положения, выносимые на защиту:

-оценка морфометрических и биомеханических свойств костей унифицированным методом;

-структурно—функциональные особенности костной системы у бычков и овец при фасциолезе;

-патология органов грудной и брюшной полости у жвачных при фасциолезной инвазии;

- минеральный обмен у жвачных при спонтанном фасциолезе;

- тактические особенности патогенетической терапии при фасциолезе.

2.0. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материал и методы исследований

Исследования выполнены на кафедре анатомии, гистологии и патологии ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет», в Башкирской научно-производственной ветеринарной лаборатории, в Институте проблем сверхпластичности РАН, а также в хозяйствах, неблагополучных по фас-циолезу: СПК им. Ленина Татышлинского района, СПК «Заря» Давлекановско-го района, СПК им. Попова Бирского района, совхоз «Бакалинский» Бакалин-ского района Республики Башкортостан. Всего было обследовано 1720 голов крупного рогатого скота и 840 голов овец.

По результатам посмертного диагноза и интенсивности инвазии по фас-циолам на Уфимском МКК были отобраны 15 бычков восемнадцатимесячного возраста, принадлежащих СПК им. Ленина Татышлинского района РБ. Животные были разделены на три группы по пять голов в каждой. В первую группу отнесли животных, спонтанно инвазированных с количеством фасциол более 70 экз; во вторую -инвазированных с количеством фасциол от 10 до 70 экз., а третья группа служила контролем. Материал для исследования овец был взят от здоровых и больных фасциолезом животных, принадлежащих совхозу «Бака-линский» Бакалинского района. В первую группу выделили больных овец (п=7) а во вторую - здоровых (п=5).

Для посмертного диагноза на фасциолез использовали методику гельминтологических вскрытий, разработанную К.И. Скрябиным.

Капроскопические исследования проводили для обнаружения яиц фасци-ол, применяя при этом метод последовательных промываний фекалий (Демидов

Н.В., 1965).

Для гистологического исследования были взяты кусочки печени, почек, поджелудочной железы, тонкой кишки, легких, сердца и костной ткани. Материалы брали тотчас же после убоя животных на Уфимском мясоконсервном комбинате и фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина. Проводили их через спирты возрастающей крепости и заливали в парафин по общепринятой методике (Меркулов Г.Н., 1969). С помощью санного микротома получали срезы толщиной 5-6 мкм и после депарафинации окрашивали их гематоксилин-эозином по Романовскому-Гимзе. Гликоген выявляли по методу Шифф-йодной кислоты Мак-Мануса (Пирс Э., 1962), а кислые гликозаминог-ликаны - по методу Хейла (Пирс Э., 1962). Гликоген и кислые гликозаминогли-каны оценивали по балльной шкале.

Для приготовления гистологических препаратов костной ткани из середины диафиза и эпифиза пястной кости выпиливали кусочки величиной 1*1*0,5 см и фиксировали их в 10%-ном растворе нейтрального формалина. Материал декальцинировали в 10%-ном растворе азотной кислоты, затем промывали в проточной воде в течение суток, обезвоживали и заливали в парафин по общепринятой методике. Гистологические срезы готовили толщиной 10-12 мкм и окрашивали гематоксилин- эозином (Меркулов Г.Н., 1969).

Для растровой электронной микроскопии кусочки костной ткани фиксировали в 2,5%-ном растворе глутарового альдегида на фосфатном буфере (рН 7,2-7,4) с последующим обезвоживанием в растворах этанола возрастающей концентрации. Обезвоженные образцы напыляли платиной в напылителе JFC -1100. Препараты исследовали под электронным микроскопом JSM - 840 (Япония) при ускоряющем напряжении 10 кВ. Были проведены исследования 116 препаратов.

При оценке минерального обмена исследуемых животных использовали рентгенографию пястных костей, которую проводили с помощью рентгено-установок РУМ-20 и ДХ-90 фирмы Apelen (Франция). Условия снимка были

такими - напряжение в трубке 63 КУ при 60 mAs. Для определения плотности кости одновременно с пястными костями на ту же кассету рентгенографиро-вали костный клин - эталон, шкалу оптических плотностей. Последний на рентгенограмме создает шкалу оптических плотностей. Каждое поле его шкалы соответствует строго определенному содержанию минеральных солей.

Методом количественной рентгенограммометрии определили индекс развитости компакты (кортикальный индекс), который известен как индекс остео-пороза (Рохлин Г.Д., 1974).

О биомеханических свойствах костной ткани судили путём испытания на сжатие, растяжение и твердость. Костные образцы выпиливали из середины

диафиза пястной кости размерами: для сжатия - 0,5*0,5*1,5 см, для растяжения-

0,5*2,5 см и для испытания на твердость - 0,5*1,0*2,0 см. Испытания на сжатие

и растяжение проводили на стандартной машине У-10 с автоматической регистрацией силовой нагрузки при скорости 1 мм/мин. Данные испытания нагрузки и перемещения по разработанной методике выводили в цифровом виде в память ПК и построили диаграммы. Твердость кости устанавливали по методу Бринелля на твердомере типа ТБ-5004.

Морфометрический анализ пястных костей проводили по следующим параметрам: длина, диаметр проксимального и дистального эпифиза, диаметр диафиза во фронтальной и сагиттальной плоскостях, длина костномозгового канала, толщина компактного вещества диафиза. В качестве измерительного прибора использовали штангенциркуль. Всего выполнено 864 морфологических измерений.

Количество лейкоцитов в крови определяли в камере Горяева. Для морфологического исследования периферической крови использовали окраску препаратов по Романовскому-Гимза. Количество эритроцитов и содержание гемоглобина находили при помощи фотоэлектрического эритрогемометра.

Сыворотку крови исследовали на содержание общего белка рефрактометрическим методом Рейсса. Содержание неорганического фосфора определяли по методу Бриггса в модификации С.А. Ивановского (1965), а уровень кальция - по методу Де-Ваарда. Количество ионизированного кальция рассчитывали по формуле, предложенной Е. Цейесслером (1946). Активность щелочной фосфа-тазы устанавливали по Боданскому в модификации И.М. Белякова (1975).

Микроэлементный состав (Fe, Си, Mn, Zn, Se) и содержание натрия, калия и магния в сыворотке крови, костной ткани и печени изучали в атомно-абсорбционном спектрометре «Квант- Z. ЭТА".

Результаты измерений, полученные в процессе морфологических, биохимических исследований, обрабатывали статистически с использованием критерия Стьюдента. Учитывали четыре порога вероятности (Р<0,05; Р< 0,02; Р<0,01; Р<0,001), а различия считали достоверными при Р<0,05.

2.2 Морфометрические показатели пястной кости у крупного рогатого скота и овец, больных фасциолезом

Результаты настоящего исследования показали, что в макроморфологиче-ском отношении линейных морфометрических характеристик отмечаются определенные отличия в пястной кости крупного рогатого скота и овец, больных фасциолезом и здоровых животных. Исходя из наших данных, длина пястной кости у бычков первой группы короче на 12,1%, а второй - на 8,2% по сравнению с контролем (рис. 1).

Вместе с этим, длина костномозгового канала по отношению к длине кости составляет у животных первой группы 65,3%, второй - 64,8%, и у контрольной - 61,9%. Таким образом, длина костномозгового канала у инвазированных животных несколько длиннее, чем у здоровых.

Рис.1. Показатели длины пястной кости и ее костномозгового канала у подопытных бычков

Толщина компактного вещества диафиза пястной кости у фасциолезных животных имеет тенденцию к истончению. У животных первой группы этот показатель в латеральной и краниальной зонах составляет по 6,60+0,24 мм, в медиальной - 5,60±0,24 мм, каудальной - 5,40±0,24 мм, во второй группе соответственно - 7,20+0,37; 7,60±0,40; 6,00±0,32; 6,00±0,32. Контрольная ^у^ животных имеет следующие показатели: 8,80+0,37; 9,00±0,45; 7,00±0,32 и 6,20±0,37.

Диаметр диафиза во фронтальной плоскости у больных животных уступает показателю здоровых на 13% (1-группа) и на 9,2% (2- группа), а в сагиттальной плоскости - на 16% и 6,7% соответственно (рис.2).

Анализ данных показывает, что резорбция костной ткани происходит в основном с эпдостальной поверхности. Об этом свидетельствует увеличение ширины костномозгового канала у больных бычков.

Аналогичная динамика изменения морфометрических показателей пястной кости наблюдается и у овец, больных фасциолезом. Длина пястной кости больных фасциолезом овец уступает таковой контрольной группы на 5,65%, а диаметр диафиза в середине пястной кости во фронтальной плоскости меньше

Диаметр диафиза в сагиттальной плоскости, мм Диаме гр диафиза во фронтальной

Рис.2. Средний диаметр диафиза пястной кости в сагиттальной и фронтальной плоскостях

на 12,6% и в сагиттальной плоскости — на 8,6 %. Отмечается удлинение костномозгового канала.

2.3.Биомеханические свойства костной ткани крупного рогатого скота и овец, инвазированных фасциолами

Компактная костная ткань, как биоматериал, состоит из вязкой матрицы органического вещества в виде коллагеновых волокон, которая армирована высокомодульными и высокопрочными кристаллами из гидроксиапатита и его механические характеристики могут изменяться при нарушении режима содержания, условий кормления и, нередко, при различных заболеваниях.

Макромеханические свойства костной ткани изучали испытанием на растяжение, сжатие и твердость (рис.3).

Максимальное значение предела прочности костной ткани при сжатии у высокоинвазированных бычков (1 группа) ниже на 38%, а у второй группы - на 10,8% по сравнению с контрольной группой. Компактная костная ткань пясти по показателям твердости значительно меньше у животных, больных

Рис.3. Результаты испытания костных образцов бычков на сжагие и растяжение

Твердость, К/мм2

в 1 группа а 2 группа • контроль

Рис.4. Результаты испытания костных образцов крупного рогатого скота на твердость по Бринеллю

фасциолезом. Показатели твердости компакты диафиза пясти у животных с меньшей инвазированностью (2 группа) составляет 37,49±0,54 и с высокой ин-вазированностью (1 группа) - 32,58±0,79 НУмм2. Снижение прочности костной ткани у больных животных по показателям предела прочности на сжатие и на твердость связано со структурой минерального компонента, которая является носителем прочности компактной костной ткани.

На показатели предела прочности костной ткани на растяжение влияет белковый компонент - коллагеновые волокна. Низкий уровень сопротивляемости к растяжению отмечается у животных первой группы, где он ниже на 44,7% и во второй группе - на 21,0% по сравнению с контролем. Полученные данные дают представление о том, что при фасциолезе животных вместе с нарушением уровня минерализации костяка имеют место и структурные изменения в органической матрице.

2.4 Рентгенологические исследования костей у жвачных при фасциолезе

Рентгенологические исследования существенно дополняют и расширяют представление о структурной организации кости как органа и минеральной насыщенности костной ткани, У животных контрольной группы в эпифизах пясти костная структура ячеистая, мелкопетлистая с одинаковыми по толщине костными белками, которые ориентированы, в основном, по линиям опорно-силовой нагрузки. Кортикальный слой диафиза имеет равномерную толщину, четкие ровные наружные и внутренние контуры с повышенной рентгеноплот-ностью. Сохранены следы ростковых зон, указывающие на продолжение роста костей. Серединная пластинка между пястными костями хорошо заметна.

При изучении обзорных остеограмм пястных костей от больных фасцио-лезом животных установлено, что в эпифизах трабекулярная система губчатой субстанции представлена структурой от мелкопетлистой до крупнопетлистой. В рентгеновском изображении костные балки имеют разную толщину. Рентге-

ноплотность слабая, особенно в дистальном эпифизе. Толщина кортикального слоя диафиза неравномерная, толще в середине диафиза, чем в метафизарных отделах костной трубки. В компакте диафиза появляются участки с неравномерной контрастностью, с поперечными склеротическими полосами. Костная перегородка истончена или полностью отсутствует. Ширина и высота костномозгового канала увеличены. У сильноинвазированных животных рентгенокон-трастность костей сильно снижена. Считаем, что визуальная оценка минерализации костяка по рентгенограмме субъективна. В связи с этим рентгенофото-метрическими исследованиями выявили насыщенность костной ткани минеральными веществами. Установлено, что у здоровых овец плотность пястной кости составляет 1581 ±57 мг/см3, у больных фасциолезом, этот показатель равняется 1136+38 мг/см3. Такие же исследования у бычков показали, что у животных первой группы плотность костной ткани ниже по сравнению с контролем на 23%, и у второй группы - на 14,2%.

У овец, ннвазированных фасциолами, индекс развитости компакты равен 50,7%, а у контрольных животных - 56,6%, В исследованиях с бычками установлено, что кортикальный индекс между животными первой и второй групп не имеет достоверных различий (Р>0,05) и данный показа!ель равняется 45,2% и 45,7% соответственно, а у контрольный группы составляет 48,5%.

2.5 Гистологическое и ультраструктурное строение трубчатой костной ткани при фасциолезе

Для патологических исследований взяты кусочки костной ткани из диа-физа пясти здоровых и инвазированных фасциолами животных.

У животных контрольной группы диафиз трубчатой кости покрыт тонким слоем периоста, состоящего из фиброзного и камбиального слоев. Со стороны периоста вглубь трубчатой кости по прободающим канальцам проникают крупные артериальные кровеносные сосуды, сопровождаемые многочисленными клетками рыхлой соединительной ткани. Как наружная, так и внутренняя

генеральные пластинки, имеют слоистое строение. Они заметны в виде чередующихся плотных полосок с менее плотными линиями. Между костными пластинками в костных полостях располагаются фиброциты. Они вытянутой формы, цитоплазма окрашивается базофильно, ядро занимает центральное положение, хроматин плотный. Остеоны также характеризуются послойным расположением костных пластинок и между ними, в костных полостях, располагаются остеоциты на различных стадиях гистогенеза. Заметны единичные дегенерирующие остеоциты. Остеонные канальцы довольно широкие и формируют многочисленные разветвления. В канальцах проходят кровеносные сосуды, внутреннюю стенку выстилают эндотелиоциты сильно уплощенной формы. Кровеносные сосуды остеонной системы сопровождаются большим количеством фибробластов. Клетки, расположенные в периваскулярной зоне, сильно вытянутой формы, в основном располагаются продольно по ходу кровеносного сосуда, часть из них имеет поперечное расположение.

Костная ткань, взятая от животных, больных фасциолезом, отличается тем, что диаметр кровеносных сосудов, идущих от надкостницы и проникающих в остеонную систему через прободающие канальцы, слабо развит. В отдельных участках, отмечается некоторое утолщение фиброзного слоя надкостницы. В наружной пластинке (генеральной) чередование темных и светлых полос (костных пластинок) не определяется, тогда, как рядом расположенный участок характеризуется хорошо выраженным их чередованием. В деминерализованных участках остеоциты, расположенные в костных полостях, подвергаются структурным процессам. При этом клетки сильно уменьшены в размерах, поэтому вокруг клетки образуется свободная полость. Ядра клеток плотные, интенсивно окрашиваются, некоторые из них фрагментированы. Цитоплазма клеток выявляется очень слабо. В периферическом слое кости в остеонной системе слоистое расположение костных пластинок четко не определяется, стенка остеонов окрашивается равномерно. Вставные пластинки имеют грубоволокни-стое строение, цитоплазма остеоцитов, расположенных в костных полостях ос-теонов (гаверсовых систем), окрашивается базофильно или слабо базофильно,

хроматин ядра располагается равномерно, однако в некоторых участках довольно часто встречаются остеоциты в стадии деструкции. Их ядра подвергаются кариолизису, кариопикнозу и кариорексису. В результате уменьшения и деструкции остеоцитов, костные полости остаются свободными и на светлом фоне располагаются фрагменты остеоцитов. Особенно выраженные изменения заметны в канальцах остеонов, в их разветвлениях и расположенных в них кровеносных сосудах. При этом канальцы остеона узкие по сравнению с контрольной группой, они менее разветвлены, и сообщения между канальцами остеона также узкие. Кровеносные сосуды, расположенные в остеонной системе, характеризуются тонкостенным строением, сосуды с внутренней стороны покрыты сильно уплощенными эндотелиоцитами, расположенными на базальной мембране. Периваскулярное пространство, сопровождающее кровеносные сосуды, слабо развито. В центральных участках кости многие гаверсовые каналы расширены и заполнены нежноволокнистой соединительной тканью, края их неровные. Остеоны имеют пластинчатое строение, большинство вставочных пластинок волокнистые.

На сканоэлектронограммах еще более наглядно выступает тонкое строение компакты диафиза пясти, занятого остеонными структурами, периосталь-ными и эндостальными генеральными пластинками. У здоровых бычков и овец периферические костные пластинки, а также в пластинки гаверсовой системы имеют ориентированное расположение, они хорошо минерализованы. Гаверсо-вы канальцы достаточно широкие, в них находятся кровеносные сосуды, как мелкие артерии, так и венулы. На сканограммах, отображающих пространственную архитектонику кристаллической фазы минерального компонента костной субстанции, видны полиморфные по размерам кристаллы гидроксиапатита. Указанные морфологические признаки в костной ткани отражают активно протекающие процессы кристаллообразования.

У инвазированных животных на сканограммах отмечается сужение каналов остеона с одновременным уменьшением диаметра и истончением стенки кровеносных сосудов. Костные пластинки разной толщины, а в отдельных уча-

стках они дезорганизованы. В некоторых зонах костной ткани кристаллические структуры минеральных компонентов имеют мелкозернистый характер, а в других выявляются гигиантские формы кристаллов, что отражает неодинаковый уровень минерализации гистологических структур.

2.6 Морфофункциональные изменения внутренних органов при фасциолезе

2.6.1 Патологоанатомические изменения

У бычков, спонтанно зараженных фасциолами, живая масса при поступлении на мясокомбинат была ниже по сравнению с контролем - у первой группы на 25,3% и второй группы — на 17%. У овец, больных фасциолезом, живая масса уступала контролю на 21%. В связи с этим они оценивались как животные ниже средней упитанности. У некоторых из них отмечалась отечность в подчелюстном пространстве, подкожная клетчатка в зависимости от интенсивности инвазирования животных анемична или желтушна. У таких животных в брюшной полости обнаруживался транссудат: у крупного рогатого скота от 2 до 3 л и у овец — от 0,7 до 1,2 л. Наиболее характерные и тяжелые патоморфо-логические изменения наблюдалесь в печени. Поверхность печени бугристая, она плотной консистенции, желчный пузырь и портальные лимфатические узлы увеличены. На разрезе печени из желчных ходов выделяется мутная желчь серо-бурого цвета. У бычков некоторые крупные желчные ходы расширены и пропитаны солями извести, хотя у овец в стенках желчных ходов таких изменений мы не наблюдали. В желчных ходах у всех больных животных содержались половозрелые фасциолы - у крупного рогатого скота от 5 до 232 экз. и у овец -от 20 до 158 экз.

В легких видимых изменений не обнаружили. У одного бычка, с максимальным количеством фасциол в печени," на поверхности краниальной доли левого легкого обнаружили место локализации паразитов - один очаг диаметром 32 мм с плотной капсулой, где обнаружили свернувшиеся две фасциолы в тягучей темно-буроватой полужидкой массе.

Слизистая оболочка сычуга и двенадцатиперстной кишки несколько утолщена, покрасневшая и покрыта слизью.

2.6.2. Гистологические изменения в почках

У больных фасциолезом животных в почках наблюдаются выраженные изменения. Прежде всего, определяется очаговый гломерулонефрит с тубуло-интерстициально- сосудистым компонентом. У животных этой группы по сравнению с контролем отмечается увеличение объема почечных клубочков за счет инфильтрации эндотелиальными мезангиальными клетками. Наблюдается гипертрофия отдельных участков почечного тельца с одновременным резким расширением полости капсулы нефрона. Особенно глубокие дистрофические процессы отмечены в отдельных почечных тельцах, проявляющиеся их деструкцией и атрофией. При этом почечное тельце уменьшается в размерах, часть сети кровеносных сосудов исчезает, клеточные элементы в состоянии кариоли-зиса и кариорексиса. Одновременно с деструкцией сети кровеносных капилляров клубочка с их эндотелиоцитами, и подоцитами внутреннего слоя капсулы клубочка, полость её сильно расширена. При этом наружный листок капсулы сохраняется и состоит из однослойного плоского эпителия. Нередко видны почечные тельца, плотно окруженные скоплениями лимфоидных клеток. Вследствие этого почечное тельце атрофируется с одновременной инфильтрацией клетками макрофагальной системы. Наиболее глубокие дистрофические процессы отмечаются в проксимальном отделе нефрона. Эпителиальные клетки апикальных концов канальцев нефрона разрушены и они принимают вид однослойного плоского эпителия. Ядра эпителиоцитов смещены к базальной мембране, многие из них овальной или уплощенной формы. Ядра клеток окрашиваются интенсивно, хроматин плотный, отдельные ядра встречаются в просвете канальца нефрона. Вместе с фрагментами ядер эпителиоцитов в просвете неф-рона, и особенно в проксимальном отделе, появляются белково-углеводные гранулы различного размера и плотности. Во многих случаях эти гранулы за-

нимают довольно значительное расстояние по ходу нефрона, и они имеют пенис го-ячеистое строение. Конгломерат, образованный в результате отрыва апикальных концов эпителиальных клеток нефрона, особенно проксимальных отделов, белково-утлеводного характера, встречается и в мозговом веществе почек. Эти структуры имеют плотную консистенцию, окрашиваются равномерно оксифильно. Местами они плотно закупоривают просвет собирательных канальцев, нарушая продвижение (смещение, отток) содержимого нефрона в целом. В других участках коркового вещества почек апикальная часть эпителиальных клеток нефрона имеет пенисто-ячеистое строение. Во многих случаях фрагменты цитоплазмы эпителиальных клеток связаны узкой цитоплазматиче-ской перемычкой с сохранившейся базальной половиной эпителиальных клеток. Они тесно связаны с базальной мембраной. Однако, некоторые эпителиальные клетки полностью слущены от базальной мембранены и их фрагменты располагаются в просвете нефрона. В результате деструкции и некроза эпителиальных клеток просвет канальцев расширен. Они заполнены коллоидообраз-ными структурами. Участки коркового вещества, подвергающиеся деструктивным процессам, характеризуются инфильтрацией лимфоидными клетками. Скопления лимфоидной ткани занимают ограниченный участок. Эги небольшие скопления лимфоцитов, макрофагов, плазматических клеток располагаются между канальцами в строме почек. Они могут располагаться в виде узкой полоски вдоль нефрона. Во всех случаях они тесно контактируют с базальной мембраной эпителиоцитов. Наблюдаются участки коркового вещества почки, когда лимфоидная ткань охватывает одновременно несколько канальцев неф-рона. При этом клетки лимфоидной ткани равномерно охватывают нефроны со всех сторон, располагаясь в строме почки. Лимфоциты и макрофаги всегда плотно прилегают к базальной мембране, тогда как в отдельных участках они располагаются между эпителиальными клетками канальцев нефрона. Встречаются участки, когда скопления лимфоидной ткани занимают довольно обширные зоны, отодвигая канальцы нефрона друг от друга на значительное расстояние. Одновременно отмечается полнокровие и застой крови как в корковом ве-

ществе, так и в мозговом веществе почки. Полнокровие кровеносных капилляров и застой крови сопровождаются пристеночным расположением лейкоцитов, их адгезией к эндогелиоцитаам. Многие лейкоциты мигрируют в периваскуляр-ную зону, где наблюдаются скопления лимфоидных клеток между канальцами почек.

Таким образом, при фасциолезе жвачных в некоторых почечных тельцах происходит пролиферация эндотелиоцитов сети кровеносных капилляров, разрастание мезангиальных клеток в почечных тельцах. Возникает деструкция почечных канальцев, особенно в их апикальных концах. В связи с этим в просвете канальцев наблюдается накопление фрагментов эпителиальных клеток. В ге-мокапиллярах клубочков, особенно в капиллярных сетях между канальцами нефрона, отмечается застой крови. Вокруг почечных телец и почечных канальцев формируются крупные очаги лимфоидной инфильтрации в корковом, иногда и в мозговом веществе. Все вышеперечисленные гистологические изменения указывают на развитие гломерулонефрита, интерстициального нефрита и тубулопатию.

2.6.2 Гистологические изменения в печени

По сравнению с контрольной группой в печени инвазнрованных животных фасциолами отмечаются выраженные гистологические изменения, особенно это характерно для кровеносных сосудов. Междольковые, и центральные вены печени инфильтрованы лейкоцитами. Отмечается много лимфоидных клеток в зоне расположения триады печени. В результате плотного соприкосновения к эндотелиоцитам лейкоциты проявляют адгезию, с последующей их миграцией в периваскулярную зону Лимфоидные клетки проникают и по ходу си-нусоидных капилляров долек печени. Они формируют небольшие скопления лимфоидных клеток внутри долек печени. При этом лимфоидные клетки располагаются плотно друг к другу. В ю же время встречаются участки с диффузным расположением лимфоцитов, макрофагов и плазматических клеток среди печеночных пластинок и гепатоцитов. Здесь же среди клеток лимфоидной ткани располагаются изолированные гепатоциты с четкими контурами. Ядра окраши-

ваются интенсивно, хроматин плотный, ядерная оболочка определяется огчет-ливо. Цитоплазма окрашивается слабобазофильно, контуры клеток четкие благодаря цитолемме. В местах накопления лимфоидной ткани выявляются очаги некроза гепатоцитов. При этом гепатоциты теряют четкую границу, во многих случаях цитолемма определяется слабо, иногда граница между клетками исчезает. Цитоплазма гепатоцитов приобретает гомогешгую структуру, сохранившиеся ядра имеют плотный хроматин. Отдельные ядра подвергаются разрушению. В некоторых участках долек печени в цитоплазме гепатоцитов накапливаются мелкокапельные жировые включения. Цитоплазма гепатоциюв приобретает пенисто-ячеистое строение. В то же время отдельные доли печени не имеют выраженных гистологических изменений, что указывает на изменения в печени в виде очагов или зон.

Стенка желчных ходов утолщена. В отдельных участках эпителий стадий деструкции, а иногда гибели. Имеются отдельные желчные ходы, где наблюдается разрастание соединительной ткани

Следовательно, при фасциолезе животных определяются глубокие деструктивные процессы, отражающиеся на функциональном состоянии печени. Прежде всего, отмечается реакция макрофагической системы организма, проявляющаяся инфильтрацией паренхимы печени лимфоцитами, макрофагами и плазматическими клетками. Одновременно появляются очаги некроза гепато-цитов.

2.6.3 Гистологические исследования легких

Гистологические исследования легких неинвазированных фасциолами животных показали, что альвеолы имеют вид открытого пузырька неправильной многогранной формы. Они тесно прилегают друг к другу. Внутренняя стенка альвеол выстлана однослойным плоским эпителием. Вокруг альвеол располагается тонкая мелкоальвеолярная перегородка из элементов рыхлой соединительной ткани, по которым проходят кровеносные капилляры с умеренным полнокровием. Бронхи различного калибра сопровождаются кровеносными сосудами умеренного полнокровия. Как по ходу бронхов различного калиб-

pa, так и по ходу кровеносных сосудов, редко вокруг альвеол, в небольших размерах и диффузно, расположены скопления лимфоидных клеток.

У животных, больных фасциолезом в легких имеются гистологические изменения. Прежде всего, отмечается полнокровие крупных и мелких кровеносных сосудов. В результате застоя крови кровеносные сосуды расширены, наблюдается периваскулярный отек. Особенно это заметно в кровеносных капиллярах, окружающих альвеолы. В межальвеолярном пространстве, вокруг кровеносных капилляров увеличено количество клеток соединительной ткани, а также клеток макрофагической системы. Все это создает большую отдаленность и изолированность альвеол друг от друт, создающие затруднение газообмена. По ходу бронхов и кровеносных сосудов выявляются скопления лим-фоидной ткани. Большие лимфоидные скопления оказывают давление на стенку бронхов и сосудов, и создают затруднение как в проведении воздуха но бронхам, так и в кровообращении по сосудам. Таким образом, в результате изменения тонуса кровеносных сосудов возникает застой крови в органах дыхания, а также накопление лимфоидной ткани в результате раздражения органов лимфоидного кроветворения. Одновременно отмечается увеличение фиб-робластических клеток, лимфоцитов и макрофагов в интерсТициальной ткани легких.

2.6.4 Гистологические исследования желудка

У животных контрольной группы слизистая оболочка сычуга покрыта однослойным цилиндрическим железистым эпителием. Собственная пластинка слизистой оболочки, состоящая из рыхлой соединительной ткани, диффузно инфильтрована лимфоцитами и макрофагами, в небольшом количестве встречаются эозинофилы. Простые трубчатые железы сычуга, расположенные в собственной пластинке слизистой оболочки, состоят из главных париетальных и шеечных клеток. Все клетки характеризуются определенными тинкториальны-

ми свойствами. Цитоплазма главных клеток окрашивается базофильно, тогда как у париетальных клеток цитоплазма оксифильна.

Кровеносные капилляры проходят между железами желудка и вплотную подходят к базальной мембране однослойного цилиндрического железистого эпителия. Вподслизистой основе слизистой оболочки сычуга, в рыхлой соединительной ткани, встречаются небольшого размера скопления лимфоидных клеток, часть из них инфильтрируют в собственную пластинку. Мышечная и серозная оболочка имеют характерное для желудка строение.

При фасциолезе животных отмечается увеличение в сычуге лимфоидной ткани. Лимфоциты, макрофаги, плазматические клетки и эозинофилы плотно инфильтрируют собственную пластинку слизистой оболочки. Довольно часто на границе с мышечной пластинкой слизистой оболочки встречаются большие скопления лимфоидной ткани. Часть из них вызывает инфильтрацию в подсли-зистой основе слизистой оболочки. Лимфоидный инфильтрат доходит до ба-залыюй мембраны эпителия, покрывающего слизистую оболочку сычуга. Мышечная и серозная оболочки без видимых изменений.

2.6.5 Гистологические исследования поджелудочной железы

У контрольной группы животных экзокринная и эндокринная части поджелудочной железы имеют присущее им гистологическое строение. Эндокринные ациноциты имеют зимогенную и гомогенную зоны. Клетки зимогонных зон окрашиваются кислыми красителями, тогда как гомогенная зона красится базофильно. Панкреатические островки также интенсивно окрашены, они пронизаны сетью кровеносных капилляров. В междольковой соединительной ткани проходят выводные протоки экзокринной части поджелудочной железы, а также кровеносные сосуды.

У животных больных фасциолезом выявляются определенные гистологические изменения в поджелудочной железе. Отмечается полнокровие кровеносных сосудов, расположенных в междольковой соединительной ткани. Застой

крови сопровождается периваскулярным отеком, адгезией лейкоцитов к эндо-телиоцитам и их миграцией через щели между эндотелиоцитами за пределы кровеносных сосудов. Ациноциты экзокринной части поджелудочной железы окрашиваются неравномерно. Часть секреторных клеток имеют базофильные и оксифильные отделы. Имеются секреторные отделы с оксифильно окрашенными панкреатоцитами. Базальная половина секреторных отделов поджелудочной железы окрашена гематоксилином. Между секреторными отделами встречаются клетки овальной или треугольной формы, окрашивающиеся базофиль-но. Таким образом, у животных больных фасциолезом поджелудочная железа реагирует на интоксикацию организма и прежде всего, сосудистой реакцией и неравномерной окрашиваемостью ациноцитов, с появлением клеток с базо-фильно окрашиваемой цитоплазмой. Отмечается частичная эмиграция лейкоцитов через щели венулярной части микрососудов.

2.6.6. Гистохимические исследования

Кислые гликозаминогликаны определяли методом Хейла, играющие важную роль в обеспечении нормальных физиологических процессов и занимающие ведущее место в развитии ряда патологических процессов, а также участвующие в процессах пролеферации, роста и регенарации тканей.

Из энергетического и структурного материала тканей исследовали гликоген методом Мак-Мануса. Гистохимическую реакцию в тканях определяли по четырехбалльной системе: инактивная, слабая, умеренная и высокая реакция.

У контрольной группы животных реакция на гликоген высокая как в почечных тельцах, так и в канальцах нефрона, тогда как у больных животных фасциолезом отмечается снижение гистохимической реакции. Реакция на гликоген в гепатоцитах печени контрольной группы животных высокая, гликоген распределяется равномерно по всей цитоплазме геиатоцитов, а гликоген распределяется по всей доле. У животных больных фасциолезом гликоген в печени

выявляется неравномерно. У некоторых её долек реакция на гликоген высокая только вокруг центральной вены, в то время как, в других дольках высокую реакцию на гликоген проявляют и гепатоциты, расположенные на некотором расстоянии от центральной вены, а в остальных участках долек реакция на гликоген умеренная. Довольно часто встречаются дольки печени с низкой активностью реакции на гликоген.

У животных контрольной группы кислые гликозаминогликаны определяются во всех тканевых структурах. Наблюдается высокая реакция в почечных тельцах, тогда как в канальцах нефрона реакция умеренная. В почках'живот-ных, больных фасциолезом, в канальцах нефрона реакция на кислые гликоза-миногликаны неравномерная. Белково-углеводные комплексы, расположенные в просвете нефрона проявляют умеренную или даже высокую реакцию, тогда как эпителиальные клетки в состоянии дистрофии - со слабой реакцией. В печени отмечается аналогичная картина. В гепатоцитах животных контрольной группы на кислые гликозаминогликаны реакция умеренная, тогда как при фас-циолезе реакция на них слабая. При фасциолезе определяется снижение реакции на кислые гликозаминогликаны в бокаловидных клетках тонких кишок.

2.7 Гематологические показатели при фасциолезе у жвачных

У бычков инвазированных фасциолами количество эритроцитов в крови резко уменьшается. Особенно оно ярко выражено у бычков первой группы, где их количество снижено на 31,2% и второй группы - на 13,9% по сравнению с контролем. У больных животных отмечается снижение и уровня гемоглобина в крови - на 26,9% (первая группа) и 20,1% (вторая группа). Количество лейкоцитов в крови, наоборот, повышается - у сильноинвазированных животных на 45,5%, а у умеренно инвазированных - на 30% по сравнению со здоровыми бычками.

У овец данные показатели аналогичные. В частности, у больных овец фасциолезом количество эритроцитов меньше на 18,3%, уровень гемоглобина

ниже на 15,8%, а лейкоцитов больше на 31,1% , чем у животных контрольной группы.

Лейкограмма дает представление об относительном содержании различных видов лейкоцитов в крови у бычков (табл. 1).

Таблица 1. Лейкограмма крови бычков (М±ш), %

Группа Базофилы Эозино-филы Нейтрофилы Лимфоциты Моноциты

юные палочко ядерные сегмен-тоядер.

1 группа 1,80+ 0,37** 15,20+ 0,58** 0,80± 0,37**** 11,20+ 0,37* 34,00± 0,93 33,00± 1,05 4,20± 0,37****

2 группа 1,80± 0,37** 13,20± 0,58*** 0,60± 0,40**** 13,00± 0,71*** 30,20+ 0,58 37,80+ 1,85*** 3,20+ 0,20***

Контроль 1,20± 0,37 4,80± 0,58 0 4,20± 0,58 23,40± 1,03 64,00± 1,87 2,40± 0,24

Примечание: *-Р<0,С<5; **-Р<0,02; ***-Р<0,01; ****-Р<0,001

Установлено достоверное увеличение количества эозинофилов у больных бычков в 3,1 раза (первая группа, Р<0,02) и в 2,75 раза (вторая группа, (Р<0,01), а у больных овец в 2,07 раза (Р<0,01) по сравнению с контролем. Такая эозинофилия присуща почти всем гельминтозам, как проявление защитной аллергической реакции организма. Отмечается резкое уменьшение числа лим-фацитов в данных группах животных. Так, в первой группе бычков оно ниже в 1,93 раза, во второй - в 1,69 раза, а у овец более чем в 2 раза. У больных фас-циолезом животных появляются единичные базофилы, юные нейтрофилы. Наблюдается тенденция к повышению палочкоядерных и сегментоядерных ней-трофилов и моноцитов.

2.8 Биохимические изменения в организме жвачных при фасциолезе 2.8.1 Биохимические показатели сыворо i ки крови

Содержание общего белка в сыворотке крови у больных фасциолезом животных резко отличается от показателей контрольных животных. Так, в первой группе оно составляет 62,12±1,72 г/л (Р<0,05), во второй группе -75,34±2,32 г/л (Р<0,05), а в контрольной - 88,68±0,69 г/л. У инвазированных животных отмечено повышение активности щелочной фосфатазы. Так, у высо-коинвазированных бычков активность данного фермента превышает показатель контрольной группы в 3 раза» а у второй группы - в 1,7 раза. Концентрация ионизированного кальция в сыворотке крови у животных первой группы составила 3,67+0,19 мг% (Р<0,001), а во второй г р 4,?1±0,1А ме% (Р<У,0ф). о -вень ионизированного кальция у контрольной группы равен мг%

(рис.5 и 6).

Рис.5. Содержание общего белка и щелочной фосфатазы в сыворотке крови подопытных бычков

Ионизированный кальций, мг%

Рис.6. Среднее содержание ионизированного кальция в сыворотке крови бычков

Аналогичная картина наблюдается в составе сыворотки крови овец Содержание общего белка у больных овец фасциолезом уменьшилось на 27,1%, а активность щелочной фосфатазы увеличилась в 2,68 раза по сравнению с показателями здоровых животных. Отмечается недостоверное уменьшение содержания ионизированного кальция на 2,8% (Р>0,05).

При исследовании показателей минерального обмена у бычков, больных фасциолезом, установлены различия с таковыми у здоровых (табл.2).

Содержание макроэлементов - кальция, фосфора и магния в сыворотке крови у первой группы ниже, чем у контрольных животных на 31,1; 8,7 и 29,1% и у второй группы - на 11,7; 9,3 и 10,5% соответственно. Отмечается низкое содержание микроэлементов у больных бычков. Так, содержание меди, цинка и железа у животных первой группы ниже, чем в контроле на 19,7; 44,1 и 29,0%

соответственно. У животных второй группы эти показатели равнялись 6,2; 8,8 и 8,3% соответственно.

Таблица 2. Содержание макро- и микроэлементов в сыворотке крови бычков (Mim)_____

Показатель Группа животных

первая вторая контрольная

Кальций, ммоль/л 1,9510,07** 2,50±0,06 2,83+0,08

Фосфор, ммоль/л 1,68+0,05* 1,67±0,08*** 1,84+0,04

Магний, ммоль/л 0,6110,05**** 0,7710,03** 0,8610,04

Медь, мкмоль/л 12,84±0,37* 15,01+0,29 15,99+0,35

Цинк, мкмоль/л 21,6810,97* 34,9910,34 38,75+0,44

Железо, мкмоль/л 9,99±0,28* 12,7810,29 13,9310,36

Примечание: *-Р<0,05; **-Р<0,02; ***-Р<0,01; ****-Р<0,001

У овец несколько иной уровень показателей минерального обмена в сравнении с бычками. В таблице 3 показано содержание макро- и микроэлементов в сыворотке крови овец.

Таблица 3. Содержание макро- и микроэлементов в сыворотке крови овец ______(М±ш)__

Показатель Группа животных

больная Здоровая

Кальций, моль/л 2,0610,02 1,5010,09

Фосфор, ммоль/л 1,50+0,05** 1,7010,01

Магний, ммоль/л 0,9010,05**** 1,1410,08

Калий, ммоль/л 5,38+0,01 5,48+0,05

Натрий, ммоль/л 159,99+0,87 161,82+1,50

Железо, мкмоль/л 16,2410,02 16,6010,33

Медь, мкмоль/л 17,8410,44* 19,30+0,31

Марганец, мкмоль/л 0,92+0,03** 1,0410,04

Цинк, мкмоль/л 18,02+4,93**** 22,6811,75

Примечание: *-Р<0,05; **-Р<0,02; ***-P<0,0i; ****-Р<0,001.

Приведенные в таблице данные показывают, что у овец, хронически больных фасциолезом, в сыворотке крови на 16,7% меньше содержится кальция, на 11,77% -фосфора, на 11,06% -магния, на 11,54% -марганца, на 10,65% -

цинка по сравнению с показателями контрольной группы. Тогда как содержание натрия, калия, железа и меди изменяется в пределах 1,14-7,57%.

2.8.2 Показатели минерального обмена в печени у жвачных при фасциолезе

Микроэлементы в печени участвуют в биохимических реакциях и превращениях, усиливая активность действия ферментов, гормонов и витаминов. Поэтому они наиболее концентрированы в данном органе.

Печень сильноинвазированных фасциолами бычков (первая группа) по содержанию макроэлементов отличается от таковой животных второй и контрольной групп. Так, уровень кальция, фосфора, магния, калия и натрия в ней-ниже по сравнению с показателями здоровых животных на 12,5; 13,7; 16,0; 8,7 и 8% соответственно. Ниже содержание и микроэлементов: железа- на 11,9%, меди- на 14,7%, марганца - на 12.3% и цинка - на 12,5%. Во второй группе животных, инвазированных фасциолами менее интенсивно, наблюдалось небольшое снижение этих элементов - кальция на 6,9%, натрия - на 2,8%, марганца -на 7,4%, цинка - на 5,5%. Однако значительное снижение регистрируется по фосфору - на 12,4%, магнию - на 12,3%, калию - на 15,8%. железу - на 11,0% и меди — на 13%. Уровень селена в печени остается без значительных изменений во всех группах (рис. 7 и 8 ).

Уровень содержания макро- и микроэлементов в печени у больных овец фасциолезом имеет аналогичную картину, лишь с той разницей, что количество цинка остается на уровне показателей контрольной группы и отмечается некоторое снижение селена (на 7,33%). У больных овец в печени снизилось содержание кальция в среднем на 12%, фосфора -на 19,3%, магния - на 16%, натрия - на 19,3%, калия - на 9,3%, железа - на 11,4%, меди - на 8,7% и марганца - на 18%.

Рис.8. Средние содержание микроэлементов в печени бычков

2.8.3 Показатели минерального обмена в костной ткани у жвачных при фасциолезе

Рентгенологическими исследованиями мы визуально установили нарушение минерального обмена в костной ткани у больных фасциолезом бычков и овец. Для количественной оценки проводили исследования основных макро-и микроэлементов в пястной ткани. Содержание макро- и микроэлементов в костной ткани представлены в таблице 4.

Таблица 4 Содержание макро- и микроэлементов в костной ткани у больных

фасциолезом (М±т)

Бычки Овцы

Показатель первая . группа вторая группа контрольная группа больные здоровые

Кальций, г/ кг 297,40± 7,03 354.80± 3,44 379,00± 4,85 365,00+— 27,06***.* 414,20± 29,28

Фосфор, 133,20± 156,80± 164,60± 146,00+ 158,40±

г/ кг 5,89** 4,04 3,89 7,71 ***,-; 4,30

Магний, 6,26± 7,32± 7,90± 7,70±0,10 8,10±

г/ кг 0,30*** 0,21* 0,48 0,17

Медь, 9,40± 12,62± 13,74+ 7,90± 8,66±

мг/ кг 0,28* 0,31 0,28 1,05**** 0,77

Цинк, 137,06+ 156,90± 164,64± 72,50± 85,10±

мг/кг 2,24 2,35 2,81 4 g-j**** 4,82

Железо, 31,54± 36,86± 41,64± 26,50+ 29,20+

мг/кг 1,15* 0,98 3,12 1,95*** 2,65

Марганец, 4,56± 5,66± 5,54± 1,63± 1,78±

мг/ кг 0,25*** 0,18* 0,26 0,11 0,13

Из таблицы видно, что при фасциолезе животных наблюдается достаточно серьезные нарушения минерального обмена в костной ткани. Исследованиями установлена деминерализация костей с уменьшением содержания кальция на 21,6% у бычков с высокой инвазией (первая группа). Из других макроэлементов - фосфор снижается на 19,1%, магний - на 20,8%. Изучение основных остеотропных микроэлементов в костной ткани при фасциолезе животных показывает, что отдельные из них достаточно адекватно отражают нарушение общего обмена веществ. Особенно это ярко выражено у бычков первой группы. Содержание в костной ткани меди, цинка, железа и марганца у них ниже по сравнению со здоровыми животными на 31,6; 16,8; 24,3 и 17,7% соответственно. У слабоинфицированных животных в пястной кости также наблюдается дефицит макро- и микроэлементов, но он выражен в меньшей степени по сравнению с животными первой группы. У второй группы бычков содержание кальция меньше на 6,4%, фосфора - на 4,8%, магния - на 8,4%, меди - на 8,2%, цинка- на 4,8% и железа - на 11,5% по сравнению с контролем.

У овец нарушение минерального баланса в костной ткани при фасцио-лезе также зависит от интенсивности инвазии и четко коррелирует с показателями сыворотки крови и печени. Представленные данные в таблице 4 показывают, что наиболее активно из костной ткани выводятся кальций и фосфор. Эти показатели ниже, чем в контрольной группе на 11,88 и 7,90% (Р< 0,001). К тому же высокодостоверное низкое содержание микроэлементов - железа (на 9,3%), меди (на 8,78%) и цинка (на 14,8%) по сравнению с контрольными животными.

ВЫВОДЫ

1.Генез фасциолеза жвачных обусловлен развитием токсикоза и сложным взаимодействием структурно-функциональных изменений органов и систем.

1.1.Линейными морфометрическими исследованиями установлено замедление темпа роста и развития костей у животных, больных фасциолезом. Длина пястной кости уступает на 8,2-12,1% показателю контрольных животных. Дли-

на и ширина костномозгового канала, наоборот, больше у инвазированных бычков. У больных животных происходит одновременное истончение компактного вещества диафиза, что отражается в индексе развитости компакты в сторону снижения.

1.2.В зависимости от степени интенсивности инвазирования фасциолами, у жвачных меняется морфологическая характеристика кости. Предел прочности компактной костной ткани бычков на сжатие снижается от 10,8% (у умеренно-инвазированных) до 38% (у сильноинвазированных), на растяжение - от 21 до 44,7% и на твердость - от 23,1 до 33,2% соответственно.

1.3 .У больных фасциолезом бычков и овец в пястной кости толщина кортикального слоя диафиза неравномерная, с неравномерной контрастностью, с поперечными склеротическими полосами. Рентгенограмма показывает истончение или полное исчезновение костной перегородки в пястной кости. У больных овец плотность пястной кости равна 1136+38 мг/см3, а у контрольных -1581+57 мг/см3. У бычков данный показатель ниже контроля на 14,2% (вторая группа) и на 23% (первая группа).

2.Шмснения губчатого и компактного вещества костной ткани на свето-оптическом и ультраструктурном уровнях при фасциолезе животных проявляется в виде уменьшения диаметра кровеносных сосудов, идущих от надкостницы в остеонную систему. В отдельных участках костной ткани чередование генеральных пластинок стертое. В деминерализованных её участках остеоциты сильно уменьшены, ядра клеток плотные, некоторые из них фра! ментированы. Канальцы остеона узкие, они менее разветвлены. Кровеносные сосуды остеон-ной системы тонкостенные и покрыты сильно уплощенными эндотелиоцитами. Периваскулярное пространство, сопровождающее кровеносные сосуды, слабо развито. В сканограмме костные пластинки разной толщины, местами они дезорганизованы. Отмечается содержание крупных форм минеральных кристаллов. В губчатом веществе костей наблюдается истончение и искривление костных балок, в отдельных участках - фрагментации.

3.Интоксикация крупного рогатого скота и овец при фасциолезе приводит к структурно-функциональным изменениям органов грудной и брюшной полости: сердца, легких, сычуга, тонкого отдела кишечника, печени, поджелудочной железы, почек. В них уменьшается количество гликогена или происходит его накопление в функциональных единицах органов, одновременно снижается количество кислых гликозаминогликанов, что свидетельствует о функциональной несостоятельности органов.

4.Взаимообусловленность патологических изменений в организме жвачных связана с тропностью токсина фасциол и его способностью изменять метаболические процессы.«

5.Направленность минерального обмена отражается интегральными показателями систем организма, а закономерности нарушений у животных детерминированы фасциолезной инвазией.

5.1. Анализ минерального состава сыворотки крови указывает о нарушении минерального обмена. Содержание в сыворотке крови кальция у бычков первой группы было ниже контроля на 13,1%, фосфора - на 8,7% и магния - на 29,1%, а во второй группе соответственно - на 11,7; 9,3 и 10,5%. Инвазирован-ные животные уступают контролю и по содержанию микроэлементов — меди, цинку и железу на 19,7; 41,1; и 29,0% в первой группе и на 6,2; 8,8; и 8,3% - во второй группе. Аналогичное низкое содержание макро- и микроэлементов наблюдается и у больных овец фасциолезом.

5.2.В печени инвазированных животных фасциолами уровень макро- и микроэлементов ниже, чем у контрольных животных. У высоко- инвазирован-ных фасциолами бычков уровень кальция ниже на 12,5%, фосфора - на 13,7%, магния - на 16,0%, меди - на 14,7% и цинка - на 12,5% по сравнению с контролем. Во второй группе животных наблюдалось снижение данных показателей менее интенсивно. Больные овцы уступают контролю по содержания фосфора (на 19,3%), магния (на 16%) и железа (на 11,4%).

5.3.В костях животных, больных фасциолезом нарушается обмен остео-тропных элементов. Содержание макро- и микроэлементов в костной ткани у

инвазированных животных ниже по сравнению со здоровыми бычками: кальция - на 21,5%, фосфора - на 19,4%, магния - на 20,8% меди - на 26,8%, цинка -на 31,6%, железа - на 17,7% и марганца - на 24,3%. Минеральный дисбаланс обусловлен почечной недостаточностью и нарушением реабсорбции.

5.4.Компенсаторные реакции в организме жвачных при структурно-функциодальных нарушениях, вызванных интоксикацией токсином фасциол, могут снижаться, что требует тактического подхода по органотропной стимуляции метаболических и пластических процессов.

Практические предложения

1 .Результаты исследований внедрены в учебный процесс на кафедрах Башкирского, Оренбургского, государственного аграрного университетов, Московской академии ветеринарной медицины, Хакасском государственном университете, а также научно - исследовательской работе институтов Российской академии сельскохозяйственных наук (протокол № 7 от 20 января 2005 г., отделение ветеринарии РАСХН «Патология, фармакология и терапия»).

2.В патогенетической терапии при фасциолезе и после антгельминтных мероприятий необходимо учитывать сочетанную патологию органов грудной и брюшной полостей. Следует проводить восстановительную и стимулирующую терапию сердца, легких, печени, почек, желудка, кишечника и поджелудочной железы.

3. В неблагополучных пунктах по фасциолезу и после дегельминтизации животных для восстановления биомеханических и структурно — молекулярных свойств костной ткани в рационах кормления следует соблюдать фосфорно-кальциевое соотношение, а также применять полисоли для восполнения их потребности в недостатке меди, цинка, магния, марганца и железа.

4. Раскрытие механизма нарушения функции органов и систем при фасциолезе дает методологический подход к изучению восстановительной терапии при целом ряде других паразитарных заболеваний.

Список опубликованных работ

ЬБаймагов В.Н. Результаты диспансерного обследования животных Бай-макского района / В.Н.Байматов, Ф.А Каримов, А. М. Багаутдинов, P.M. Рафиков // Проблемы вет. медицины и пути решения в условиях Зауралья: Сб. науч. тр.- Уфа.-1998.-С. 42-43.

2.Баймагов В.Н. Морфофункциональные изменения в периферической нервной системе при воздействии физических факторов и биологически активных веществ / В.Н. Байматов, Шакирова Г.Р., Кузнецова К.И., Каримов Ф.А., Ганиева Р.Ф. // Российские морфологические ведомости. - М., 1999. - № 1-2. -С.31-32.

3.Хазиев Г.З. Рекомендации по профилактике печеночных гельминтозов животных / В.Н. Хазиев, Ф.А. Каримов, А.С. Сагитова, P.P. Сайтов., B.C. Бу-ранбаев, Л.С. Курбангалеев // Уфа. -2001.-23 с.

4.Каримов Ф.А. Организация противофасциолезных мероприятий в хозяйствах республики Башкортостан / Ф.А. Каримов // Актуальные вопросы зоотехнической науки и практики, как основа улучшения продуктивных качеств и здоровья сельскохозяйственных животных: М-лы 1- Междунар. науч.-практ. конф. (25-26 октября 2001 г.). - Ставрополь. - 2001. - С. 368-369.

5.Каримов Ф.А. Результаты испытания битионола при смешанной инвазии у овец / Ф.А. Каримов // Актуальные вопросы зоотехнической науки и практики, как основы улучшения продуктивных качеств и здоровья сельскохозяйственных животных: М-лы 1 Междунар. науч.-практ.конф. (25-26 октября 2001 г.). - Ставрополь. - 2001. - С. 369-371.

6.Каримов Ф.А. Профилактика фасциолеза в хозяйствах Татышлинского района Башкортостана / Ф.А Каримов'// Здоровье, разведение и защита мелких домашних животных: М-лы Второй междунар. конф. - Уфа, 2001. - С. 7-8.

7.Каримов Ф.А. Эпизоотологическое районирование Башкортостана применительно к фасциолезу жвачных животных / Ф.А. Каримов // Здоровье, разведение и защита мелких домашних животных: М-лы Второй междунар. конф.. -Уфа,2001.- С. 11-13.

8.Каримов Ф.А. К эпизотологии фасциолеза в Башкортостане / Ф.А. Каримов // Здоровье, разведение и защита мелких домашних животных: М-лы Второй междунар. конф. - Уфа, 2001. - С. 8-11.

9.Каримов Ф.А. Зависимость зараженности крупного рогатого скота гельминтами от технологии их содержания / Ф.А. Каримов // Здоровье, разведение и защита мелких домашних животных: М-лы Второй междунар. конф.. -Уфа, 2001. - С.13-14.

10 Каримов Ф.А. Изменение костей у крупного рогатого скота при фас-циолезе / Ф.А. Каримов // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями (зоонозы): М-лы докл. науч. конф.ВИГИС- М., 2002. - вып. 3 . - С. 156-157.

11. Каримов Ф.А. Морфофункциональные изменения в костях у бычков больных фасциолезом / ФА Каримов // Морфология. - № 2-3. - М., 2002. - С. 66.

12.Каримов Ф.А. Состояние минерального обмена у крупного рогатого скота при фасциолезе / Ф.А. Каримов // Пути повышения эффективности АПК в условиях вступления России в ВТО: М-лы междунар. науч.-практ. конф. (18-20 февраля). - Уфа, 2003. - С. 356-358.

13.Каримов Ф.А. Минеральный состав и биомеханические свойства костей у крупного рогатого скота при фасциолезе / Ф.А. Каримов // Современные проблемы патологической анатомии, патогенеза и диагностики болезней животных: М-лы Всерос. науч.-метод конф. патологоанатомов вет. медицины (1719 сентября 2003 г). - М., 2003. - С. 85-86.

Н.Каримов Ф.А. Гистологическое строение костной ткани у крупного рогатого скота при фасциолезе / Ф.А. Каримов // Современные проблемы патологической анатомии, патогенеза и диагностики болезней животных: М-лы Всерос. науч.-метод конф. патологоанатомов вет. медицины (17-19 сентября 2003 г). - М., 2003. - С. 86-87.

15.Каримов Ф.А. Гистологические изменения в печени крупного рогатого скота при фасциолезе / Ф.А. Каримов, Ф.А. Каюмов // Морфология. - 2004. - № 4. - С. 56-57.

16.Волкова Е.С. Морфофункциональные изменения при экспериментальной и спонтанной патологии печени / Е.С. Волкова, В.Н. Байматов, Ф.А. Каримов, И.Н. Нарежняя, Н.В. Байматов // Дезрегуляционная патология органов и систем: М-лы третьего Российского конгресса по патофизиологии. - М., 2004. -С. 249.

17.Каримов Ф.А. Морфофункциональные изменения почек при фасцио-лезе / Ф.А. Каримов // Достижения аграрной науки производству: М-лы 110-й науч. пракг. конф. БГАУ.- Уфа, 2004. - С. 120-124.

18. Каримов Ф.А. Клинико-морфологическая характеристика костной ткани при фасциолезе крупного рогатого скота / Ф.А. Каримов // Основные достижения и перспективы развития паразитологии: М-лы междунар. науч. конф.,посвященной 125-летию К.И. Скрябина и 60-летию основания Лаборатории гельминтологии АН СССР-Института паразитологии РАН. - М., 2004. - С. 134-135.

19.Байматов В.Н. Патогенетические пути интоксикации у животных /

B.Н. Байматов, Е.С. Волкова, Н.В. Байматов, Ф.А.Каримов, И.Н.Нарежияя // Дезрегуляционная патология органов и систем: М-лы третьего Российского конгресса по патофизиологии. - М., 2004. - С. 248.

20.Каримов Ф.А. Результаты патогистологических исследований почек при фасциолезе крупного рогатого скота / Ф.А.Каримов // Теория и практика борьбы паразитарными болезнями: М-лы науч. конф.. - М., 2005. - С. 151-153.

21.Каримов Ф.А. Современное эпизоотическое состояние в Башкортостане по фасциолезу крупного рогатого скота / Ф.А. Каримов, Г.З. Хазиев // Теория и практика борьбы паразитарными болезнями: М-лы науч. конф.. - М., 2005. -

C.153-154.

22.Исмагилова Э.Р. Влияние фасциолезной инвазии на развитие вторичной остеодистрофии у коров / Э.Р. Исмагилова, Ф.А. Каримов // Теория и прак-

тика борьбы паразитарными болезнями: М-лы науч. конф.. - М., 2005. - С. 142144.

23.Каримов Ф.А. Патогистологическая характеристика органов пищеварения при фасциолезе жвачных / ФА Каримов // Современные проблемы интенсификации производства в АПК: Сб. науч.тр. / ВГНИИ контроля, стандартизации и сертификации вет. препаратов и Башкирского ГАУ.. - М., 2005.-С. 103-105.

24.Каримов Ф.А. Состояние минерального обмена и рентгенологическая характеристика костей при фасциолезе овец / Ф.А. Каримов // Современные проблемы интенсификации производства в АПК: Сб. науч.тр. / ВГНИИ контроля, стандартизации и сертификации вет. препаратов и Башкирского ГАУ.. - М., 2005.-С. 105-106.

25. Диагностика нарушений минерального обмена у крупного рогатого скота / В.Н. Байматов, Э.Р. Исмагилова, Ф.А Каримов, Е.С. Волкова, В.М. ТТТиъ риев, М.Ш. Вахитов, В.Н. Козлов. И.Н. Бондарева, A.M. Мамцев, P.P. Фархут-динов// Методические рекомендации. - Уфа, Гилем. - 2005. -44 с.

№ 0261 от 10 апреля 1998 года Подписано в печать 23.05.2005 г. Формат 60х841/16 Бумага типографская. Гарнитура Тайме. Печать трафаретная Усл. печ.л. 2.33. Тираж 100 экз. Заказ № 372 Издательство Башкирского государственного аграрного университета Типография Башкирского государственного аграрного университету р Адрес издательства и типографии: 450001, г. Уфа, ул. 50-летая.Октября, ЗА

Актуальность темы. Болезни животных паразитарного происхождения протекают с глубокими нарушениями обменных процессов в организме. Ф Одним из широко распространенных паразитарных заболеваний среди жвачных является фасциолез. В связи с высокой патогенностью возбудителей, фасциолез причиняет большой экономический ущерб, который складывается за счет смертности животных (овец, коз) и потерь продуктивности. Несмотря на значительные успехи лечения и профилактики фасциолеза, до сих пор остается проблема его ликвидации и восстановления организма животных по-еле дегельминтизации до физиологических норм. Велика и социальная значимость этой болезни, поскольку фасциолезом болеет и человек (И.А. Архипов, 1991, 1995; А.М.Сазанов и др.,1989, 1991; В.В. Горохов и др.,1997; Ю.Ф. Петров, 1992, 1998; В.В. Кузьмичев, 1997; Х.Г. Нурхаметов, 1997, 1998; М.Э. Онуфриенко, 2003; Ю.Ф. Петров и др., 2003).

Вопросы нарушения обмена веществ при фасциолезе изучены довольно полно. Однако отсутствуют данные о механизме действия этого заболевания на обменные процессы в костной ткани. Костная ткань принимает участие в регуляции минерального обмена, учитывая роль макро- и микроэлементов в организме, и в общем обмене веществ. Поэтому изучение данного вопроса требует своего решения. Весьма ограничены сведения об исследованиях минерального обмена в костях при фасциолезе жвачных и не установлена взаимосвязь содержания макро- и микроэлементов в крови, печени и ко-ф стной ткани. Совершенно не изучены биомеханические свойства костей при фасциолезной инвазии. Отсутствуют данные влияния данного заболевания на макро- и микроструктуру костной ткани. Для ранней диагностики нарушения минерального обмена в костной ткани больных животных важное значение имеют рентгенологические исследования, что пока не находит применения при фасциолезе.

В литературе достаточно много работ, где подробно описана патолого-анатомическая картина внутренних органов при остром и хроническом фас-циолезе. Тем не менее, слабо изучена микроструктура основных внутренних органов при действии на них токсинов фасциол. При изучении патогенеза фасциолеза необходимо учитывать экологическую обстановку окружающей среды.

При изучении литературы выяснилось, что недостаточное внимание уделено патогенетическим механизмам при фасциолезной инвазии у жвачных животных. Именно этим проблемам посвящена данная работа, которая является самостоятельным разделом комплексной темы факультета ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет».

Цель и задачи исследований. Целью данной работы явилось изучение морфофункциональных особенностей в организме крупного рогатого скота и овец при фасциолезной инвазии. Для реализации этой цели были поставлены следующие задачи:

- изучить морфометрические и биомеханические особенности пястных костей у жвачных животных при различной степени фасциолезной инвазии;

- установить рентгенологические характеристики пястных костей при фасциолезной инвазии крупного рогатого скота и овец;

- выявить структурно-функциональные изменения пястных костей у жвачных;

- оказать взаимообусловленность патологических процессов во внутренних органах у бычков и овец при фасциолезе;

- определить изменение минерального обмена у крупного рогатого скота и овец, больных фасциолезом.

Научная новизна и ценность полученных результатов. Впервые раскрыты важные патогенетические механизмы, возникающие у животных при фасциолезе, обусловленные структурно-молекулярными изменениями. Совокупность современных анатомических, гистологических, гистохимических, ультраструктурных, рентгенологических и биохимических методов исследования позволили получить новые данные о токсикозе при фасциолезе и нарушении функциональной активности органов грудной и брюшной полости. Установлено, что при заболевании крупного рогатого скота фасциолезом происходят процессы деминерализации костной ткани, нарушается биомеханическая характеристика опорно-двигательного аппарата. В костной ткани наблюдаются выраженные деструктивно-дегенеративные процессы с нарушением кровоснабжения, сужением просвета канальцев остеона, нарушением слоистости расположения костных пластинок и разрушением остеоцитов. Автором модифицирована методика оценки биомеханических свойств пястных костей. Впервые показаны взаимообусловленные патологические изменения при фасциолезе овец и бычков, что является новым подходом с теоретических и практических позиций.

Теоретическая и практическая значимость работы. Фасциолез животных в ветеринарной практике является распространенной проблемой и представляет определенный интерес для медицинской практики. Нами изучены морфофункциональные особенности почек, печени, сычуга, тонкой кишки, поджелудочной железы, легких и сердца. Показано нарушение их структуры и функции со снижением уровня гликогена и увеличением глико-зоаминогликанов. Выявлены существенные нарушения биомеханических свойств костей и содержания в них макро- и микроэлементов, что дает новый стратегический подход для патогенетической терапии фасциолеза животных и человека. Предложен унифицированный метод оценки биомеханических свойств костей.

Реализация результатов исследования. Результаты исследований внедрены и используются в учебном процессе на кафедрах Башкирского, Оренбургского государственного аграрного университетов, в Московской академии ветеринарной медицины, Хакасском государственном университете, а также в научно-исследовательской работе институтов Российской академии сельскохозяйственных наук (протокол № 7 от 20 января 2005 г., отделение ветеринарии РАСХН «Патология, фармакология и терапия»).

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и одобрены на: Международной научно - практической конференции «Актуальные вопросы зоотехнической науки и практики, как основа улучшения продуктивных качеств и здоровья сельскохозяйственных животных» (Ставрополь, 2001), научных конференциях ВИГИС, общества гельминтологов им. К.И. Скрябина, РАН «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями (зоонозы)» (Москва, 2002, 2003, 2005), Международной научной конференции «Здоровье, разведение и защита мелких животных» (Уфа, 2001), 4-; 6-; и 7- Конгрессах международной ассоциации морфологов (Москва, 1999; Уфа, 2002; Казань, 2004), Международной научно-практической конференции «Пути повышения эффективности АПК в условиях вступления России в ВТО» (Уфа, 2003), Всероссийской научно-методической конференции патологоанатомов ветеринарной медицины (Уфа, 2003), Международной конференции, посвященной 125-летию К.И. Скрябина и 60-летию основания Лаборатории гельминтологии АН СССР - Института паразитологии РАН «Основные достижения и перспективы развития паразитологии» (Москва, 2004), Третьем Российском конгрессе по паразитологии «Дизрегуляционная патология органов и систем (экспериментальная и клиническая патофизиология)» (Москва, 2004), ежегодных научно-практических конференциях Башкирского ГАУ (Уфа, 1998-2005).

Публикация. По материалам диссертации опубликованы 25 статей, которые отражают основное содержание диссертации.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 202 страницах компьютерного текста, содержит 23 таблицы, 95 рисунков. Состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов исследований и их обсуждения, заключения, выводов, предложений производству и приложения. Библиография содержит 358 названий литературы, в том числе 95 иностранных авторов.