Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Гистохимия углеводсодержащих биополимеров двенадцатиперстной кишки млекопитающих в пренатальном и раннем постнатальном онтогенезе

На правах рукописи

НЕВЕНЧЕНАЯ Елизавета Ильясовна

ГИСТОХИМИЯ УГЛЕВОДСОДЕРЖАЩИХ БИОПОЛИМЕРОВ ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ МЛЕКОПИТАЮЩИХ В ПРЕНАТАЛЬНОМ И РАННЕМ ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва 2004

Работа выполнена в Кубанской государственной медицинской академии

Научный руководитель:

Доктор медицинских наук, Могильная Галина

профессор Михайловна

Официальные оппоненты:

Лауреат Государственной премии, доктор биологических наук,

профессор Втюрин Борис Викторович

Доктор медицинских наук Сапрыкин Владимир Павлович

Ведущая организация: Институт проблем экологии

и эволюции им. А.Н.Северцова РАН

Защита состоится " ^■■Ь " 2004 г. в ^ на заседании дис-

сертационного совета Д220.042.02 при ФГОУ ВПО "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И.Скрябина" по адресу: 109472 Москва, ул. Ак. Скрябина, 23. Тел. 377-93-83

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И.Скрябина" (г. Москва, ул. Ак. Скрябина, 23)

Автореферат разослан " " МСЦ 2004г.

Ученый секретарь диссертационного совета

кандидат ветеринарных наук Волкова И.Г.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы

Как известно, углеводсодержащие биополимеры (УСБ), секретируемые эпителиоцитами желудочно-кишечного тракта, имеют отношение к формированию его защитного барьера (Г.М.Могильная, М.Г.Шубич, В.И.Дудецкий, 1978; М.Г.Шубич, Г.М.Могильная, 1981; Г.М.Могильная, В.Н.Яременко, 1988 и др.). В доступной литературе имеется большое количество работ, посвященных защитному барьеру желудка млекопитающих, для которого установлена зависимость между химическим составом его компонентов и филогенетически детерминированным типом питания (М.Г.Шубич, Г.М.Могильная, 1981; Г.М.Могильная, В.Н.Яременко, 1988; В.Н.Яременко, 1989 и др.). Вместе с тем, двенадцатиперстная кишка (ДПК), играющая важную роль в регуляции деятельности всей пищеварительной системы, изучена недостаточно. Именно этот отдел пищеварительной трубки привлекает к себе сейчас пристальное внимание исследователей. При этом особый интерес представляют данные по ее онтогенезу, которые в литературе немногочисленны, фрагментарны и, как следствие, противоречивы. Однако именно они могут дать ключ к пониманию особенностей физиологии ДПК в разные возрастные периоды и детализации патогенеза ее заболеваний.

Несмотря на актуальность данной темы, онтогенез ДПК млекопитающих изучен, в основном, в аспекте установления сроков структурного формирования ее слизистой оболочки (Д.Д.Сафарова, 1973; Л.В!Давлетова, 1974, 1975; ЛЛ.Тельцов, 1993; Krause, 1973; Sheahan and Jervis, 1976; Odour-Okelo, 1976 и др.), дифференцировки каемчатых энтероцитов и бокаловидных гландулоцитов (Л.В.Давлетова, 1974, 1975; Ю.Масявичюс, 1977; ЛЛ.Тельцов, 1993; WJ.Krause, 1973; D.G.Sheahan and H.RJervis; 1976, Odour-Okelo, 1976), эндокринных клеток (М.В.Соболева, 1995; M.Fujimiya et al., 1991; E.Rendondo et al., 1997) и эпителиоцитов дуоденальных желез (Д.Д.Сафарова, 1973; Л.В.Давлетова, 1974, 1975; ЛЛ.Тельцов, 1993; S.S.Spicer, 1963, WJ.Krause, 1973; Obuoforibo, 1975; D.G.Sheahan and H.RJervis, 1976; Odour-Okelo, 1976 и др.). Однако, эти данные не поддаются сопоставлению, поскольку они получены с помощью различных методов, а морфометрические показатели слизистой оболочки ДПК для многих животных в литературе отсутствуют.

У млекопитающих наиболее подробно изучен онтогенез ДПК сельскохозяйственных и лабораторных животных (Л.В.Давлетова, 1974, 1975; ЛЛ.Тельцов 1993; Д.Д.Сафарова 1972, 1973, 1974; А.Э.Эльмурадов и др., 1989; М.В.Соболева, 1995).

С помощью лектиногистохимических методов А.Н.Яцков-ский (1994) показал, что структурно-функциональные различия дуоденальных желез,

определяются типом питания животных и не зависят от их систематического положения.

Все вышеизложенное позволяет нам считать, что сведения о гистохимической дифференцировке слизистой оболочки ДПК млекопитающих, относящихся к различным таксонам с филогенетически детерминированным типом питания, в литературе недостаточны. Вместе с тем, такие сведения в приложении к онтогенезу позволили бы решить вопрос об общности и различии онтогенетической гистохимической дифференцировки каемчатых энтероцитов и бокаловидных гландулоцитов (БГ) у животных с различным типом питания, о динамике полимеров, определяющих химический состав защитного барьера ДПК, о сроках формирования дефинитивного гистохимического типа защитного барьера у млекопитающих с различным типом питания. Фрагментарны в литературе и данные по морфогенезу ДПК плотоядных и растительноядных в пренатальном и раннем постнатальном онтогенезе, что требует изучения данного вопроса и необходимо для сопоставления структурно-функциональной дифференцировки элементов слизистой оболочки ДПК у млекопитающих в зависимости от характера их питания.

Такие исследования могут иметь прикладное значение при разработке режимов кормления животных, содержащихся в условиях промышленной технологии, и профилактики у них заболеваний желудочно-кишечного тракта.

Цель исследования: выявить морфометрические и гистохимические особенности слизистой оболочки ДПК млекопитающих в пренатальном и постнатальном онтогенезе и взаимосвязь между онтогенетическими особенностями слизистой оболочки и филогенетически опосредованным типом питания животных.

Задачи исследования:

1. Изучить морфометрические параметры слизистой оболочки ДПК млекопитающих в онтогенезе и дать им сравнительную характеристику с учетом типа пищевой специализации животных.

2. Установить топические особенности УСБ в структурах слизистой оболочки в онтогенезе ДПК, а также изучить динамику биополимеров в процессе становления дефинитивного защитного барьера.

3. Сопоставить цитохимические особенности клеток секреторного аппарата дуоденальных желез в онтогенезе у представителей трех различных специализированных групп: растительноядных, плотоядных и всеядных.

4. На основе сравнительной характеристики гистохимических особенностей защитного барьера слизистой оболочки ДПК в онтогенезе представить схему преобразования химического состава секрета эпителиоцитов в процессе онтогенетической дифференцировки.

Научная новизнаработы

Впервые проведено комплексное морфометрическое изучение слизистой оболочки ДПК у млекопитающих, относящихся к различным таксонам с филогенетически детерминированным типом питания, на ранних этапах онтогенеза.

Установлено, что толщина слизистой оболочки, высота ворсинок и глубина крипт отличаются однонаправленностью изменений, связанных с увеличением возраста. Число БГ у разных животных варьирует.

Показано, что химический состав защитного барьера ДПК в онтогенезе определяется характером питания.

При этом:

а у плотоядных млекопитающих формируется наиболее резистентный по набору УСБ защитный барьер, формирующийся в пренатальном периоде онтогенеза;

□ у растительноядных животных нами выявлено два типа барьера: 1) у животных, имеющих низкий уровень рН желудочного сока (морская свинка и кролик), формируется функционально более эффективный защитный барьер, причем, его становление происходит к моменту рождения; 2) у животных, имеющих высокий уровень рН желудочного сока (мышь и хомяк), защитный барьер характеризуется снижением уровня содержания наиболее протективных УСБ - сульфогликопротеинов, и его формирование завершается лишь в постнатальном онтогенезе;

□ у всеядных млекопитающих защитный барьер ДПК формируется в ходе пренатального периода онтогенеза и связан с наличием в его составе нейтральных и кислых гликопротеинов.

Цитохимическая дифференцировка дуоденальных желез у млекопитающих происходит в разные сроки онтогенеза: у плотоядных, всеядных и некоторых видов растительноядных (морская свинка, кролик) животных - в эмбриональном периоде, у мыши и хомяка - в раннем постнатальном онтогенезе.

Положения, выносимые на защиту:

1. Морфометрические параметры слизистой оболочки ДПК у изученных животных увеличиваются пропорционально возрасту и не зависят от их пищевой специализации.

2. Характер питания регламентирует темпы синтеза биополимеров, формирующих защитный барьер ДПК.

3. У плотоядных животных, имеющих высокий уровень кислотности желудочного сока, защитный барьер ДПК содержит весь набор протективных биополимеров: нейтральные, сиало- и сульфогликопротеины, появляющиеся уже к моменту рождения животных.

4. Динамика углеводсодержащих биополимеров отражает степень резистентности защитного барьера слизистой оболочки ДПК в онтогенезе.

5. Структурно-функциональная дифференцировка эпителиоцитов дуоденальных желез протекает гетерохронно. Позже всех среди изученных млекопитающих они дифференцируются у мыши и хомяка.

Теоретическая и практическая значимость работы

На основании проведенного исследования установлены общебиологические закономерности и видовые особенности становления защитного барьера ДПК в условиях индивидуального развития млекопитающих с различным типом питания.

Полученные результаты являются базовыми для углубленного изучения процесса пищеварения при корректировании рационов для продуктивных животных; их целесообразно использовать в учебном процессе при изучении аппарата пищеварения у млекопитающих, в судебной ветеринарной экспертизе при идентификации видовой принадлежности животных.

Результаты настоящего исследования используются при поведении лабо-раторно-практических занятий на кафедрах зоологии Адыгейского государственного университета, морфологии Адыгейского филиала Кубанской государственной медицинской академии.

Апробация работы и публикации результатов исследований

Основные результаты работы доложены на: XVI и XVII научных конференциях "Физиология и патология пищеварения" (г. Краснодар, 1997, 1999 гг.); международной конференции "Структурные преобразования органов и тканей на этапах онтогенеза человека в норме и при воздействии антропогенных факторов" (г. Астрахань, 2000 г.); совместном заседании кафедры гистологии, цитологии, эмбриологии, кафедры биологии с курсом генетики Кубанской государственной медицинской академии и кафедры анатомии Кубанского государственного университета физкультуры и спорта (г. Краснодар, 2004г.).

По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы (глава 1), материала и методов исследования (глава 2), результатов работы и их обсуждения в трех частях (глава 3), заключения, выводов, списка литературы и приложения. Работа изложена на 181 странице, содержит 117 страниц машинописного текста, 21 таблицу, 54 рисунка в виде графиков и микрофотографий. Библиография включает 131 источник: 91 отечественных и 40 иностранных.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материал и методы исследования

Объектом исследования послужила слизистая оболочка ДПК 8 видов животных (всего 354 особи), относящихся к 4 отрядам и 8 семействам класса млекопитающих на различных этапах онтогенеза (табл. 1).

Материал фиксировали при температуре +40С в 10% нейтральном растворе формалина и в жидкости Гамперля. Заливали в парафин и готовили срезы толщиной 5-7 мкм. Изучение стенки ДПК и измерения основных параметров слизистой оболочки проводили на срезах, окрашенных гематоксилином и эозином.

Морфометрию выполняли на срезах, перпендикулярных поверхности слизистой оболочки. Морфометрические параметры (толщину слизистой оболочки, высоту ворсинок и глубину крипт) измеряли с помощью окуляр-микрометра. Измерения проводили на 10-20 участках слизистой оболочки ДПК.

Для гистохимического выявления УСБ применяли комплекс методов, включающий ШИК-реакцию (АЛШабадаш, 1947), окраску альциановым синим при рН-2,7 (Mowry, 1956), альциановым синим и основным коричневым при рН-1,0 (Lev, Spicer, 1964; М.Г.Шубич, 1958,1961). Идентификацию компонентов УСБ проводили по схемам (В.В.Виноградов, Б.Б.Фукс, 1961; Р.Хьюз, 1985, ХЛуппа, 1980, М.Г.Шубич и др., 1966; М.Г.Шубич, ГАШогильная, 1970). ШИК-реакцию использовали в сочетании с обработкой диастазой, мягким кислотным гидролизом и фенилгидразином. При этом гликоген чувствителен к диастазе и фенилгидразину, но резистентен к мягкому кислотному гидролизу. Нейтральные гликопротеины устойчивы к диастазе. Сиалогликопротеины определяли при окрашивании срезов альциановым синим (8GX) при рН 2,7. Альцианофилия сиалогликопротеинов избирательно блокируется мягким кислотным гидролизом. Альциановым синим и основным коричневым окрашивали сульфоглико-протеины, при этом использовали раствор с рН 1,0 в сочетании с обработкой гиалуронидазой (Э.Пирс, 1962).

Проведили количественную оценку распределения ШИК-реактивных и альцианофильных БГ в зоне ворсинок и крипт, и оценивали в баллах содержание УСБ в микроструктурах слизистой оболочки ДПК. Затем по формуле Astaldi G. и Verga L. (1957) вычисляли средний цитохимический коэффициент СЦК «ЦДО , где \NA - сумма произведения числа клеток

на их активность (интенсивность окрашивания). Для оценки секреторной активности БГ использовали муцинпродуцирующую активность (МПА), вычисленную по формуле: МПА — СЦК X .X, где X - среднее количество БГ, рассчитанное на одну ворсинку или крипту.

Количественный материал обрабатывали методом вариационной статистики по Стьюденту. Расчеты выполняли на компьютере по оригинальной программе, базирующейся на основе математических методов (Л. Закс, 1970, В.Ю. Урбах, 1963).

Таблица 1 Распределение изученных животных по отрядам, семействам и видам

Прснатальный период Ново-рожденные Постнатальный период

Класс Отряд Семейство Вид ранний поздний ласто-трофкын период смешанного питания Взрос-лые Тип питания

Хищные Carnivora Собачьи Сап Мае Собака домашняя Canis familiaris 35-40 4 50-55 4 5 3-10-14 7 28-32 6 3 Плотоядный

Кошачьи Ре1Уае Кошка домашняя Felis domestica 38-40 12 48-50 10 12 3-15-20 7 25-30 5 2 Плотоядный

Мышинные Крыса белая Rattus ratus 13-15 7 18-19-22 15 4 2-5-10-15 12 20-25-30 9 4 Всеядный

Мш^ае Мышь 11-13 15-17-20 4 2-7-10 15-20-25-30 Раститель-

W 5 Mus musculus 9 12 9 14 3 ноядный

3 S « í ^ £ в Грызуны Rodentia Подсемейство Хомяки Сгесейпае Хомяк обыкновенный Mesocui cetus auratus 7-10 14 12 5 8 2-5 7 6-10-15 9 4 Растительноядный

S g С cd о s « Морские свинки Cavidae Морская свинка Cavid porcellus 45-55 8 64 4 4 5-10-15 10 25-30 7 4 Растительноядный

И с; 2 Зайцеобразные Lagomorpha Заячьи Leporidae Кролик домашний Orustoliaris familiaris Orustoliariscuni-culus 18-20 12 25-28 10 5 5-10-20 18 25-30 8 5 Растительноядный

Парнокопытные Artiodactyla Свиньи Бийае Свинья домашняя Sus scrota domestica Sus familiaris - 105-110 10. 4 1-5 6 19-65-70 9 4 Всеядный

Итого 66 70 46 76 67 29 354

Примечание: в числителе указан возраст животного в сутках, в знаменателе - количество животных.

Результаты исследования и их обсуждение

Полученные данные показывают, что в группе плотоядных животных формирование рельефа слизистой оболочки ДПК приурочено к раннему плодному периоду с последующим увеличением толщины слизистой, высоты ворсинок и глубины крипт, однако, даже к периоду смешанного питания .(25-30 суток) перечисленные параметры не достигают показателей, характерных для взрослых животных.

Первые ворсинки в ДПК выявляются в раннем плодном периоде (35-40 суток). Причем, у кошки они почти вдвое длиннее, чем у собаки. К этому же сроку онтогенеза появляются крипты, более глубокие у собаки, чем у кошки. У обоих видов животных подслизистая оболочка ДПК содержит хорошо выраженные концевые отделы дуоденальных желез. Таким образом, становление морфологии ДПК у плотоядных животных происходит уже в раннем плодном периоде. В последующие сроки онтогенеза морфометрические параметры слизистой оболочки ДПК нарастают.

В группе всеядных млекопитающих дефинитивный рельеф слизистой оболочки ДПК формируется к позднему плодному периоду (22 сутки эмбриогенеза крысы и 105 сутки - свиньи). Постнатальный период сопровождается достоверным приростом морфометрических параметров.

Сроки формирования дуоденальных желез у изученных нами видов всеядных различны. У свиньи концевые отделы дуоденальных желез к позднему плодному периоду развиты уже хорошо. Известно, что их закладка происходит в ранний плодный (45 суток) период (Л.В.Давлетова, 1974). У крысы дуоденальные железы формируются к 22-м суткам эмбриогенеза.

У изученных нами растительноядных животных сроки формирования компонентов стенки ДПК различны. Так, у морской свинки ворсинки и крипты появляются уже в раннем плодном (45 суток) периоде. В то время как у эмбрионов кролика (20 суток) и мыши (14 суток) слизистая оболочка ДПК содержит только четко дифференцированные ворсинки, покрытые однослойным эпителием, у основания которых расположены скопления мелких делящихся клеток - источников крипт. Причем высота ворсинок у эмбрионов морской свинки вдвое превышает таковую у эмбрионов кролика и мыши. Слизистая оболочка ДПК хомяка к раннему плодному периоду (7 суток) не имеет сформированных ворсинок, однако содержит небольшие выпячивания, покрытые многорядным эпителием. Нельзя исключить, что это первичные ворсинки, крипты в это время не развиты. К позднему плодному периоду слизистая оболочка ДПК хомяка (10 суток) не имеет сформированного рельефа и содержит только ворсинки. У остальных изученных видов растительноядных рельеф слизистой оболочки к этому сроку онтогенеза соответствует дефинитивному. В постнатальном онтогенезе у всех изученных видов нами выявлено нарастание морфометрических параметров слизистой оболочки ДПК.

Сроки закладки концевых отделов дуоденальных желез у растительноядных также различны. У морской свинки и кролика они формируются в ходе пренатального онтогенеза: в раннем плодном периоде у морской свинки и в позднем - у кролика, и к моменту рождения уже структурно сформированы. У мыши и хомяка их закладка происходит лишь в постнатальном онтогенезе - в период лактотрофного питания (к 5-м суткам).

Анализ динамики морфометрических показателей слизистой оболочки ДПК у изученной группы млекопитающих в онтогенезе показал однонаправленность изменений толщины слизистой оболочки, высоты ворсинок и глубины крипт: нарастают с увеличением срока эмбрионального периода, а затем и сроков постнатальной жизни независимо от филогенетически детерминированного характера питания. Однако тип питания животных накладывает отпечаток на количественное представительство БГ, входящих в состав эпителиальной выстилки ДПК. На всех описанных этапах онтогенеза число БГ ворсинок и крипт у растительноядных животных достоверно ниже, чем у плотоядных и всеядных (см. рис. 1).

Рис. 1. Число ШИК-реактивных БГ в составе эпителия ДПК взрослых животных.

хомяк мышь кролик морская крыса свинья кошка собака

Гистохимическое изучение УСБ, входящих в состав защитного барьера ДПК, позволило выявить определешгую зависимость между онтогенетическими особенностями слизистой оболочки, характером синтезируемых УСБ, темпом их синтеза, а также типом питания. Так, защитный барьер слизистой оболочки ДПК у плотоядных животных (собака, кошка) включает в себя полный набор УСБ: нейтральные, сиалогликопротеины и сульфогликопро-теины. Однако, на разных этапах онтогенеза нами обнаружены видовые различия в составе УСБ. Так, у кошки в ранний плодный период(35-40 суток) в составе защитного барьера присутствуют как нейтральные, так и кислые гликопротеины, и такой состав УСБ сохраняется вплоть до периода дефинитивного питания. У собаки первыми в ходе онтогенеза (к 40-м суткам эмбриогенеза) появляются сиалогликопротеины. В то время как нейтральные гликопротеины выявляются в позднем плодном периоде, а следовые количества сульфогликопротеинов - лишь в период лактотрофного питания (табл. 2).

Таблица 2 Распределение УСБ в микроструктурах слизистой оболочки ДПК плотоядных животных в онтогенезе

Микроструктуры Пренаталышй период Период новорож-денности Постнатальный период Период дефинитивного питания

ранний 35-40 суток поздний 50-55 суток Лактотроф-ный период Период смешанного литания

3-4 суток 20-30 суток

Камка энте-роцитов Н-Си Си Н.Си.ГСу1 Н,Си Н. Си. ГСу1 Н,Си н,СиЛСу1 Н, Си Н. Си. Су Н, Си, [Су] Н.Си. Су Н, Си. [Су]

Секрет БГ ворсинок Н.Си.ГСу! Си Н. Си. ГСу1 Н,Си Н. Си. ГСу1 Н, Си Н. Си. ГСу1 Н, Си, [Су] Н. Си. Су Н, Си, [Су] Н. Си. Су Н, Си, [Су]

Секрет БГ крипт Н,_Си. 1Су1 Си Н. Си. ГСу! Н, Си Н.Си. ГСу1 Н.Си Н.Си. ГСу1 Н, Си, [Су] Н. Си. Су Н, Си, [Су] Н. Си, Су Н, Си, [Су]

Секрет эпите-лиоцитов дуоденальных желез Н. Си. ГСу1 Си Н.Сн.ГСу1 Н,Си Н,Си, [Су] Н,Си Н. Си. Су Н, Си, [Су] Н. Си. Су Н, Си, [Су] Н. Си. Су Н, Си. [Су]

Условные обозначения: Н - нейтральные гликопротеины, Си - сиалогликопротеины. Су - сульфогликопротеины.

В квадратных скобках указаны вещества, определяющиеся в следовых количествах.

В числителе УСБ кошки, в знаменателе - собаки.

БГ двенадцатиперстной кишки плотоядных животных характеризуются высоким уровнем синтеза нейтральных гликопротеинов, о чем свидетельствует МПА. Не исключено, что высокий темп их синтеза связан с наличием низких концентраций сульфогликопротеинов в составе защитного барьера ДПК. Так, МПА для ШИК-реактивных БГ ворсинок составляет 70,00± 1,22 усл. ед. у собаки и 55,00±0,98 - у кошки. МПА для альцианофильных БГ ворсинок составляет 57,60±1,15 и 39,60± 1,20 усл. ед. соответственно.

Таким образом, слизистая оболочка плотоядных животных, имеющих высокий уровень кислотности желудочного сока, и, следовательно, более агрессивное желудочное содержимое, формирует наиболее протективный защитный барьер, включающий как нейтральные, так и кислые гликопро-теины.

Структурно-функциональная дифференцировка секреторных клеток дуоденальных желез плотоядных животных происходит в различные сроки: у кошки в раннем плодном периоде, у собаки - к лактотрофному периоду, именно к этим срокам онтогенеза концентрации УСБ соответствуют дефинитивным. Эти данные хорошо ассоциируются с данными А.Н.Яцковского (1994), выполненными на взрослых плотоядных.

Гистохимическое изучение ДПК всеядных животных показало, что к позднему плодному периоду в составе защитного барьера слизистой оболочки присутствует полный набор протективных УСБ (табл. 3 и 4). При этом

каемка энтероцитов, секрет БГ и гландулоцитов дуоденальных желез содержат нейтральные, сиало- и сульфогликопротены, последние выявляются в следовых количествах. Такой состав УСБ не изменяется вплоть до периода дефинитивного питания.

Таблица 3 Распределение УСБ в микроструктурах слизистой оболочки ДПК

крысы в онтогенезе

Микроструктуры Пренатальный период Период новорожден-ности Постнатальный период Период дефинитивного питания

17 суток 22 суток Лакто-трофный период Период смешанного питания

5 суток 20 суток

Каемка энтероцитов Н, Си Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су]

Секрет БГ ворсинок Н, Си Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си. [Су]

Секрет БГ крипт Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си. [Су]

Секрет эпителиоцитов дуоденальных желез Н, Си. [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н. Си, [Су]

Таблица 4 Распределение УСБ в микроструктурах слизистой оболочки ДПК

свиньи в онтогенезе

Микро-структуры Пренатальный период Период новорожден-ности Постнатальный период

105 суток 1 сутки 32 суток 65 суток 72 суток Взрослые животные

Каемка энтероцитов Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су]

Секрет БГ ворсинок Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] И, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су]

Секрет БГ крипт Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] И, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су]

Секрет эпителиоцитов дуоденальных желез Н. Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су] Н, Си, [Су]

Условные обозначения: Н - нейтральные гликопротеины, Си - сиалогликопротеины.

Су - сульфогликопротеины. В квадратных скобках указаны вещества, определяющиеся в следовых количествах.

В последующие стадии онтогенеза химический состав защитного барьера слизистой оболочки ДПК всеядных животных не изменяется. С увеличением возраста происходит нарастание темпа синтеза УСБ. Так, в раннем постна-тальном периоде у изученных видов всеядных повышается уровень содержания нейтральных и сиалогликопротеинов в составе щеточной каемки эн-тероцитов. У взрослых животных в ее зоне определяются умеренные и даже высокие концентрации этих веществ, а также следовые количества сульфог-ликопротеинов.

В постнатальный период у всеядных животных постепенно увеличивается число БГ в составе эпителиальной выстилки ворсинок и крипт, а также нарастает синтез ими УСБ, о чем свидетельствует МПА (рис. 2). Главным компонентом секрета БГ являются нейтральные гликопротеины, которые выявляются в высоких концентрациях, что сопоставимо с данными Brown P.I. (1988). При этом темп их синтеза у свиньи и крысы практически совпадает (МПА БГ ворсинок составляет 58,79+9,17 и 59,80+5,55 усл. ед. соответственно). Сиалогликопротеины содержатся в указанных структурах в умеренных концентрациях и имеют видовые различия. Для свиньи характерен более высокий уровень их синтеза. Так, МПА БГ ворсинок и крипт у свиньи составляет 56,96+2,02 и 54,25+5,76 усл. ед. соответственно. У крысы эти показатели равны соответственно 42,75+2,34 и 36,67+3,54 усл. ед. Причем, и у свиньи, и у крысы более низкие темпы синтеза УСБ характерны для БГ, локализованных в зоне крипт. Это относится и к синтезу нейтральных глико-протеинов. Цитохимическая дифференцировка гландулоцитов дуоденальных желез в группе всеядных животных происходит в ходе пренатального периода онтогенеза.

Итак, защитный барьер ДПК всеядных животных включает как нейтральные, так и кислые гликопротеины и формируется к моменту рождения. Уровень синтеза нейтральных гликопротеинов не имеет видовых различий. В то же время темп синтеза сиалогликопротеинов у крысы более низкий, чем у свиньи. Во все изученные сроки онтогенеза сульфогликопротеины в составе защитного барьера ДПК всеядных животных определяются в следовых количествах.

При изучении онтогенеза ДПК растительноядных выявлены различия гистохимических свойств каемчатых энтероцитов и секреторных эпителио-цитов, что позволило нам выделить два типа защитного барьера.

Для первого типа, присущего морской свинке и кролику, характерно наличие в секрете эпителиоцитов полного набора протективных УСБ: нейтральных гликопротеинов, сиалогликопротеинов и сульфогликопротеинов. Причем, такой состав защитного барьера формируется в ходе пренатального онтогенеза (в раннем плодном периоде у морской свинки и в позднем плодном - у кролика). Таким образом, у морской свинки и кролика к моменту рождения секрет эпителиоцитов уже содержит умеренные концентрации нейтральных гликопротеинов и сиалогликопротеинов, а также следовые

количества сульфогликопротеинов. Такой набор УСБ сохраняется вплоть до периода дефинитивного питания.

Гландулоциты дуоденальных желез дифференцируются у этой группы растительноядных животных в пренатальном онтогенезе (у морской свинки - в раннем плодном, а у кролика - в позднем плодном периоде). Структурно-функциональная дифференцировка завершается у морской свинки к периоду новорожденности, у кролика - в постнатальном онтогенезе, лишь к периоду дефинитивного питания. Секрет дуоденальных желез у взрослых животных содержит высокие концентрации нейтральных гликопротеинов и сиалогли-копротеинов, и низкие - сульфогликопротеинов.

Формирование второго типа защитного барьера (у мыши и хомяка) происходит в постнатальном онтогенезе. У мыши первыми в составе каемки энтероцитов и в секрете БГ определяются нейтральные гликопротеины, которые присутствуют в низких концентрациях уже в раннем плодном периоде (14 сутки). К позднему плодному периоду (22 сутки эмбриогенеза мыши и 10 сутки эмбриогенеза хомяка) помимо нейтральных гликопротеинов выявляются и сиалогликопротеины, локализующиеся в каемке в низких концентрациях. В секрете БГ новорожденных мышат обнаружены и следовые количества сульфогликопротеинов, отсутствующие у хомяка. Такой набор УСБ сохраняется на всех последующих стадиях онтогенеза.

Рис. 2 Динамика содержания нейтральных гликопротеинов в секрете БГ ДПК млекопитающих в онтогенезе

собака

свинья

кошка

кошка

—•— поздний плодный период —а— период новорожденности -■-♦■-. лактотрофный период

период смешанного питания

- -о- - период дефинитивного питан™

Структурно-функциональная дифференцировка гландулоцитов дуоденальных желез у мыши и хомяка происходит лишь в постнатальном онтогенезе - к периоду лактотрофного питания (5 сутки). В это время в составе их секрета определяются умеренные концентрации нейтральных гликопротеи-нов и низкие - сиалогликопротеинов. Такой набор УСБ сохраняется во все последующие стадии онтогенеза.

Для растительноядных животных, относящихся к различным таксонам, выявлен разный темп синтеза УСБ бокаловидными гландулоцитами. Так, наиболее высокий уровень синтеза нейтральных гликопротеинов характерен для животных, относящихся к первой группе. МПА БГ ворсинок ДПК морской свинки составляет 40,38+8,80 усл.'ед., для БГ крипт - 46,62+3,06 усл. ед. Животные, отнесенные нами ко второй группе, имеют более низкий уровень синтеза УСБ. Так, МПА БГ ворсинок и крипт ДПК мыши составляют 30,17+2,19 и 18,52+1,60 усл. ед. (рис. 2)

Следовательно, формирование защитного барьера слизистой оболочки ДПК морской свинки и кролика, имеющих более высокий уровень кислотности желудочного сока (близкий к всеядным животным), завершается уже к моменту рождения этот барьер включает как нейтральные, так и кислые гли-копротеины, из которых наиболее резистентными являются сульфоглико-протеины. У мыши защитный барьер содержит следы сульфогликопротеи-нов (у хомяка последние отсутствуют), и формирование барьера завершается лишь в постнатальном периоде онтогенеза.

Полученные нами данные показывают, что для млекопитающих, имеющих различный филогенетически детерминированный тип питания характерны разные сроки формирования дефинитивного защитного барьера. В более ранние сроки он формируется у животных, имеющих наиболее агрессивное по отношению к слизистой оболочке ДПК желудочное содержимое, то есть у плотоядных и всеядных, а также некоторых растительноядных. Структурно-функциональная дифференцировка гландулоцитов дуоденальных желез происходит в различные сроки онтогенеза.

Выводы

1. Морфометрические показатели слизистой оболочки ДПК, характеризующие ее структурное оформление (толщина слизистой оболочки, высота ворсинок, глубина крипт), у всех изученных видов увеличивается пропорционально возрасту и не зависит от пищевой специализации. Вместе с тем, количество бокаловидных гландулоцитов у растительноядных животных во все изученные периоды онтогенеза достоверно ниже, чем у плотоядных и всеядных.

2. Характер питания регламентирует темпы синтеза биополимеров, формирующих защитный барьер ДПК. Так, у плотоядных животных, имеющих высокий уровень кислотности желудочного сока, становление дефинитивно-

го защитного барьера ДПК приурочено к пренатальному периоду. В его состав входит весь набор протективных УСБ, включающий нейтральные, сиа-ло- и сульфогликопротеины, а БГ характеризуются высокой муцинпродуци-рующей активностью (70,0 и 55,0 усл. ед.).

3. Структурное формирование дуоденальных желез в группе плотоядных животных завершается в раннем плодном периоде, а функциональная диф-ференцировка секреторных клеток - к лактотрофному периоду. К этому сроку онтогенеза распределение УСБ и темп их синтеза соответствуют взрослым особям.

4. У всеядных млекопитающих дефинитивный защитный барьер ДПК формируется к позднему плодному периоду. У крысы первыми компонентами барьера являются нейтральные и сиалогликопротеины, выявляемые уже в раннем плодном периоде, позже появляются сульфогликопротеины, они сохраняются в составе защитного барьера во все последующие сроки онтогенеза. Муцинпродуцирующая активность БГ (59,8 и 60,6 усл. ед.) приближается к таковой плотоядных животных.

5. Структурная дифференцировка дуоденальных желез всеядных происходит в ходе пренатального онтогенеза, и к позднему плодному периоду ДПК крысы и свиньи содержит в подслизистой основе хорошо развитые концевые отделы. Функциональная дифференцировка секреторных клеток желез завершается к позднему плодному периоду.

6. Динамика углеводсодержащих биополимеров слизистой оболочки отражает степень резистентности защитного барьера в онтогенезе. Так, у растительноядных животных, имеющих низкий уровень кислотности желудочного сока, выявлено два гистохимических типа защитного барьера ДПК. Первый - это резистентный защитный барьер, включающий как нейтральные, так и кислые (сиало- и сульфо-) гликопротеины. Этот тип барьера характерен для морской свинки и кролика. Второй тип, менее резистентный, он изначально формируется исключительно из нейтральных и сиалоглико-протеинов и выявляется у мыши и хомяка. У мыши после рождения в составе секрета БГ появляются следы сульфогликопротеинов. БГ характеризуются наиболее низким темпом синтеза гликопротеинов (МПА (от 16,8 усл. ед. у хомяка до 40,4 усл. ед. у морской свинки).

7. Дуоденальные железы растительноядных животных формируются в различные сроки онтогенеза. У морской свинки они выявляются уже в раннем плодном периоде, у кролика - в позднем плодном периоде, а у мыши и хомяка только в период лактотрофного питания. Цитохимическая диффе-ренцировка секреторных клеток дуоденальных желез завершается в различные сроки. Наиболее поздние сроки дифференцировки характерны для дуоденальных желез мыши и хомяка (5-е сутки постнатальной жизни).

Рекомендации по практическому использованию полученных результатов

Результаты диссертации могут быть использованы в качестве нормативных в вопросах диагностики заболеваний желудочно-кишечного тракта животных, а также в учебном процессе по анатомии, гистологии и патологической анатомии в разделе "Пищеварительная система". Результаты морфологических исследований целесообразно использовать в судебной ветеринарной экспертизе при идентификации видовой принадлежности животных.

Списокработ, опубликованных по теме диссертации

1. Могильная Г.М., Яременко В.Н., Фархатова Е.И. (Невенче-ная Е.И.) Становление муципродуцирующей активности бокаловидных гландулоцитов в онтогенезе//Материалы ХУ1(1) научной конференции "Физиология и патология пищеварения". - Краснодар, 1997. - С. 100-102.

2. Фархатова Е.И. (Невенченая Е.И.) Особенности становления защитного барьера двенадцатиперстной кишки в онтогенезе/Материалы 1 Всероссийской конференции студентов и аспирантов морфологических кафедр мед. ВУЗов и НИИ России. - Ст-П, 1998. - С. 114.

3. Фархатова Е.И. (Невенченая Е.И.) Защитный барьер слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки растительноядных в онтогене-зе//Материалы XVII всероссийской конференции "Физиология и патология пищеварения". - Краснодар, 1999. - С. 182-183.

4. Могильная Г.М., Яременко В.Н., Невенченая Е.И. Особенности онтогенеза желудочно-кишечного тракта у растительноядных //Материалы международной конференции "Структурные преобразования органов и тканей на этапах онтогенеза человека в норме и при воздействии антропогенных факторов". - Астрахань, 2000. - С. 109-110.

5. Могильная Г.М., Яременко В.Н., Невенченая Е.И. Цитохимические свойства защитного барьера двенадцатиперстной кишки растительноядных животных в онтогенезе//Медико-социальные проблемы здоровья населения Северного Кавказа. - Майкоп, 2000. - С. 138-143.

6. Могильная Г.М., Яременко В.Н., Невенченая Е.И. Компоненты защитного барьера слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки всеяд-ных//Материалы конференции "Проблемы морфологии". - Сочи, 2002. -С.49.

ФГНУ "Росинформагротех" 171-100-2004

№12 8 80

общая характеристика работы)

Актуальность темы. Как известно, углеводсодержащие биополимеры (УСБ), секретируемые эпителиоцитами желудочно-кишечного тракта, имеют отношение к формированию его защитного барьера (Г.М.Могильная, М.Г.Шубич, В.И.Дудецкий, 1978; М.Г.Шубич, Г.М.Могильная, 1981; Г.М.Могильная, В.НЛременко, 1988 и др.). В доступной литературе имеется большое количество работ, посвященных защитному барьеру желудка, млекопитающих, для которого установлена зависимость между химическим составом его компонентов и филогенетически детерминированным типом питания (М.Г.Шубич, Г.М.Могильная, 1981; Г.М.Могильная, В.НЛременко, 1988; В.НЛременко, 1989 и др.). Вместе с тем, двенадцатиперстная кишка, играющая существенную роль в регуляции деятельности всей пищеварительной системы и обладающая мощными рефлескогенными зонами, изучена недостаточно. Именно этот отдел пищеварительной трубки привлекает к себе сейчас пристальное внимание многих исследователей. При этом особый интерес представляют данные по онтогенезу ДПК, которые в литературе немногочисленны, однако, именно они могут дать ключ к пониманию особенностей физиологии этого органа в разные возрастные периоды, а также приблизить к выяснению отдельных звеньев патологических процессов, развивающихся в нем.

Несмотря на актуальность данной темы, онтогенез ДПК млекопитающих изучен, в основном, в аспекте установления сроков формирования структурно-микроскопической организации ее слизистой оболочки (Д.Д.Сафарова, 1973; Л.В.Давлетова, 1974, 1975; Л.П.Тельцов, 1993, 1996; WJ.Krause, 1973; D.G.Sheahan and H.RJervis, 1976; Odour-Okelo, 1976 и др.), а также установления сроков дифференцировки каемчатых энтероцитов и БГ (Л.В.Давлетова, 1974, 1975; Ю.Масявичюс, 1977; Л.П.Тельцов, 1993; WJ.Krause, 1973; D.G.Sheahan and H.RJervis, 1976), эндокринных клеток (М.В.Соболева, 1995; И.А.Кравцова, 1997; M.Fujimiya et al., 1991; E.Rendondo et al., 1997) и эпителиоцитов дуоденальных желез (Д.Д.Сафарова, 1973; Л.В.Давлетова, 1974, 1975; Л.П.Тельцов, 1993; W.J.Krause, 1973; Obuoforibo, 1975; D.G.Sheahan and H.RJervis, 1976 и др.). Однако, сопоставить эти данные довольно-таки трудно, поскольку они получены разными методами. Что же касается морфометрии слизистой оболочки ДПК, то для многих животных такие сведения в литературе отсутствуют.

Среди млекопитающих наиболее изучен онтогенез ДПК сельскохозяйственных животных. Эти исследования выполнены Л.В.Давлетовой (1967, 1974, 1975) и Л.П.Тельцовым (1993). Авторы подробно описали отдельные этапы морфогенеза ДПК, выявили сроки становления микроструктур слизистой оболочки, описали процесс морфологической дифференцировки эпителиоцитов дуоденальных желез. Кроме того, ими проведены морфометрические исследования слизистой оболочки ДПК. Что же касается других млекопитающих, то сведения об онтогенезе их ДПК фрагментарны. Так, в исследованиях Д.Д.Сафаровой (1972, 1973, 1974) проведено изучение ДПК крыс в позднем пренатальном (19-22 сут. эмбрионального развития) и раннем постнатальном онтогенезе. Однако, морфометрические исследования структур слизистой оболочки автором не проводились. Перечисленные авторы использовали в своих исследованиях и гистохимические методы.

Последние были использованы А.Э.Эльмурадовым и соавт. (1989) при исследовании раннего постнатального онтогенеза ДПК овцы. Авторы описали распределение кислых гликопротеинов.

М.В.Соболевой (1995) проведено изучение онтогенеза эндокринного аппарата ДПК крыс. Установлено, что первыми (на 17-е сут. эмбрионального развития) появляются ЕС- и L-клетки. На 19-е сут. эмбриогенеза уже удается дифференцировать пять типов эндокриноцитов: ЕС-, L-, S-, Dr, Р-, а за сутки до рождения выявляются и D-эндокриноциты. Rendondo Е. и соавт.

1997) на примере эмбриогенеза овцы показали, что первыми появляются ЕС-клетки, которые выявляются в слизистой оболочке ДПК на 77-е сутки пренатального развития.

Лектиногистохимические методы были использованы А.НЛцковским (1994) для изучения дуоденальных желез млекопитающих. Автор показал, что структурно-функциональные различия желез, определяются типом питания животных, но не зависят от их систематического положения. Несмотря на упомянутые работы, сведения о гистохимической характеристике слизистой оболочки ДПК млекопитающих, относящихся к различным таксонам с филогенетически детерминированным типом питания, в литературе отсутствуют.

Вместе с тем, такие сведения в приложении к онтогенезу органа позволили бы решить вопрос об общности и различии онтогенетической гистохимической дифференцировки каемчатых энтероцитов и БГ у животных с различным типом питания, о динамике полимеров, определяющих химический состав защитного барьера слизистой оболочки ДПК, о сроках формирования дефинитивного гистохимического типа защитного барьера у млекопитающих с различным типом питания. Отсутствуют в литературе и данные по морфогенезу ДПК плотоядных и растительноядных животных в пренатальном и раннем постнатальном онтогенезе, что требует изучения данного вопроса и окажется необходимым для сопоставления морфологической и гистохимической дифференцировки элементов слизистой оболочки ДПК у всех типов млекопитающих в зависимости от характера их питания.

Изучение этих вопросов будет иметь прикладное значение при разработке режимов кормления и профилактики заболеваний желудочно-кишечного тракта животных, содержащихся в условиях промышленной технологии.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы является выявление морфометрических и гистохимических особенностей слизистой оболочки ДПК млекопитающих в пренатальном и постнатальном онтогенезе и взаимосвязь между онтогенетическими особенностями слизистой оболочки и филогенетически опосредованным типом питания животных.

В связи с этим в диссертации поставлены следующие задачи:

1. Изучить морфометрические параметры слизистой оболочки ДПК млекопитающих в онтогенезе и дать им сравнительную характеристику с учетом типа пищевой специализации животных.

2. Установить топические особенности УСБ в структурах слизистой

4. оболочки в онтогенезе ДПК, а также изучить динамику биополимеров в процессе становления дефинитивного защитного барьера.

3. Сопоставить цитохимические особенности клеток секреторного аппарата дуоденальных желез в онтогенезе у представителей трех различных специализированных групп: растительноядных, плотоядных и всеядных.

4. На основе сравнительной характеристики гистохимических особенностей защитного барьера слизистой оболочки ДПК в онтогенезе представить схему преобразования химического состава секрета эпителиоцитов в процессе онтогенетической дифференцировки.

Научная новизна работы. Впервые проведено комплексное морфометрическое изучение слизистой оболочки ДПК у млекопитающих, относящихся к различным таксонам с филогенетически детерминированным типом питания, на ранних этапах онтогенеза.

Установлено, что толщина слизистой оболочки, высота ворсинок и глубина крипт отличаются однонаправленностью изменений, связанных с увеличением возраста. Число БГ у разных животных варьирует.

Показано, что химический состав защитного барьера ДПК в онтогенезе определяется характером питания.

При этом: у плотоядных млекопитающих формируется наиболее резистентный по набору УСБ защитный барьер, формирующийся в пренатальном периоде онтогенеза; у растительноядных животных нами выявлено два типа барьера:

1) у животных, имеющих низкий уровень рН желудочного сока (морская свинка и кролик), формируется функционально более эффективный защитный барьер, причем, его становление происходит к моменту рождения;

2) у животных, имеющих высокий уровень рН желудочного сока (мышь и хомяк), защитный барьер характеризуется снижением уровня содержания наиболее протективных У СБ -сульфогликопротеинов, и его формирование завершается лишь в постнатальном онтогенезе;

- у всеядных млекопитающих защитный барьер ДПК формируется в ходе пренатального периода онтогенеза и связан с наличием в его составе нейтральных и кислых гликопротеинов.

Структурно-функциональная дифференцировка дуоденальных желез у млекопитающих происходит в разные сроки онтогенеза: у плотоядных, всеядных и некоторых видов растительноядных (морская свинка, кролик) животных - в эмбриональном периоде, у мыши и хомяка - в раннем постнатальном онтогенезе.

Положения, выносимые на защиту:

1. Морфометрические параметры слизистой оболочки ДПК у изученных животных увеличиваются пропорционально возрасту и не зависят от их пищевой специализации.

2. Характер питания регламентирует темпы синтеза биополимеров, формирующих защитный барьер ДПК.

3. У плотоядных животных, имеющих высокий уровень кислотности желудочного сока, защитный барьер ДПК содержит весь набор протективных биополимеров: нейтральные, сиало- и сульфогликопротеины, появляющиеся уже к моменту рождения животных.

4. Динамика углеводсодержащих биополимеров отражает степень резистентности защитного барьера слизистой оболочки ДПК в онтогенезе.

5. Структурно-функциональная дифференцировка эпителиоцитов дуоденальных желез протекает гетерохронно. Позже всех среди изученных млекопитающих они дифференцируются у мыши и хомяка.

Научно-практическая значимость работы. На основании проведенного исследования установлены общебиологические закономерности и видовые особенности становления защитного барьера ДПК в условиях индивидуального развития млекопитающих с различным типом питания.

Данные, полученные в работе, углубляют современные представления о морфометрической динамике компонентов слизистой оболочки ДПК в онтогенезе. Получены новые сведения о химическом составе УСБ защитного барьера ДПК млекопитающих с различным типом питания. Эти результаты могут быть использованы при проведении экспериментальных исследований по анатомии гистологии и патологической анатомии, а также для выбора экспериментальной модели. В систематизированном виде результаты работы могут быть использованы в учебном процессе при обучении студентов по упомянутым дисциплинам в сельскохозяйственных, биологических и медицинских Вузах.

Кроме того, полученные результаты могут быть использованы как нормативные для диагностики заболеваний желудочно-кишечного тракта животных.

Результаты проведенных гистохимических исследований слизистой оболочки ДПК млекопитающих в онтогенезе имеют важное теоретическое значение.

ВЫВОДЫ

1. Морфометрические показатели слизистой оболочки ДПК, характеризующие ее структурное оформление (толщина слизистой оболочки, высота ворсинок, глубина крипт), у всех изученных видов увеличивается пропорционально возрасту и не зависит от пищевой специализации. Вместе с тем, количество бокаловидных гландулоцитов у растительноядных животных во все изученные периоды онтогенеза достоверно ниже, чем у плотоядных и всеядных.

2. Характер питания регламентирует темпы синтеза биополимеров, формирующих защитный барьер ДПК. Так, у плотоядных животных, имеющих высокий уровень кислотности желудочного сока, становление дефинитивного защитного барьера ДПК приурочено к пренатальному периоду. В его состав входит весь набор протективных УСБ, включающий нейтральные, сиало- и сульфогликопротеины, а БГ характеризуются высокой муцинпродуцирующей активностью (70,0 и 55,0 усл. ед.).

3. Структурное формирование дуоденальных желез в группе плотоядных животных завершается в раннем плодном периоде, а функциональная дифференцировка секреторных клеток — к лактотрофному периоду. К этому сроку онтогенеза распределение УСБ и темп их синтеза соответствуют взрослым особям.

4. У всеядных млекопитающих дефинитивный защитный барьер ДПК формируется к позднему плодному периоду. У крысы первыми компонентами барьера являются нейтральные и сиалогликопротеины, выявляемые уже в раннем плодном периоде, позже появляются сульфогликопротеины, они сохраняются в составе защитного барьера во все последующие сроки онтогенеза. Муцинпродуцирующая активность БГ (59,8 и 60,6 усл. ед.) приближается к таковой плотоядных животных.

5. Структурная дифференцировка дуоденальных желез всеядных происходит в ходе пренатального онтогенеза, и к позднему плодному периоду ДПК крысы и свиньи содержит в подслизистой основе хорошо развитые концевые отделы. Функциональная дифференцировка секреторных клеток желез завершается к позднему плодному периоду.

6. Динамика углеводсодержащих биополимеров слизистой оболочки отражает степень резистентности защитного барьера в онтогенезе. Так, у растительноядных животных, имеющих низкий уровень кислотности желудочного сока, выявлено два гистохимических типа защитного барьера ДПК. Первый - это резистентный защитный барьер, включающий как нейтральные, так и кислые (сиало- и сульфо-) гликопротеины. Этот тип барьера характерен для морской свинки и кролика. Второй тип, менее резистентный, он изначально формируется исключительно из нейтральных и сиалогликопротеинов и выявляется у мыши и хомяка. У мыши после рождения в составе секрета БГ появляются следы сульфогликопротеинов. БГ характеризуются наиболее низким темпом синтеза гликопротеинов (МПА (от 16,8 усл. ед. у хомяка до 40,4 усл. ед. у морской свинки).

7. Дуоденальные железы растительноядных животных формируются в различные сроки онтогенеза. У морской свинки они выявляются уже в раннем плодном периоде, у кролика — в позднем плодном периоде, а у мыши и хомяка только в период лактотрофного питания. Структурно-функциональная дифференцировка секреторных клеток дуоденальных желез завершается в различные сроки. Наиболее поздние сроки дифференцировки характерны для дуоденальных желез мыши и хомяка (5-е сутки постнатальной жизни).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Результаты диссертации могут быть использованы в качестве нормативных в вопросах диагностики заболеваний желудочно-кишечного тракта животных, а также для углубленного изучения процесса пищеварения при корректировании рационов для продуктивных животных. Кроме того, рекомендуем их использовать в лабораторной практике при морфологическом исследовании ДПК млекопитающих. При этом наиболее рациональным является применение комплекса морфометрических и гистохимических методов, а также учет возрастных особенностей строения пищеварительного канала. В учебном процессе по анатомии, гистологии и патологической анатомии в разделе "Пищеварительная система"; результаты морфологических исследований целесообразно использовать в судебной ветеринарной экспертизе при идентификации видовой принадлежности животных.

144