Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.04) на тему:Фармакологический свойства иммуностимулятора изамбена (в опытах на цыплятах кросса "Беларусь-9")

ВИТЕБСКАЯ ОРДЕНА "ЗНАК ПОЧЕТА" ГОСУДАРСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ

УДК 619:615.37:636.5

г" ~ с- 1

СОСНОВС1САЯ ТАТЬЯНА АНАТОЛЬЕВНА

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ИММУНОСТИМУЛЯТОРА ИЗАМБЕНА (в опытах на цыплятах кросса "Беларусь -9")

16.00.04 - Ветеринарная фармгкология с токсикологией

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кавдвдата петерииарщлх наук

Витебск - 2000

Работа выполнена в Витебской ордена "Знак Почета" государственной академии ветеринарной медицины

Научный руководитель - доктор ветеринарных наук, профессор Арестов И.Г.

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор Соколов В.Д.

доктор ветеринарных наук, профессор Карпугь ИМ

Оппонирующая организация - Белорускнй научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н.Вышеяесского

Защита состоится ООО г. в часов на заседа-

шш совета по защите дисежртадай К 05.33,01 в Витебской ордена "Знак Почета" государственной академии ветеринарной медицины по адресу: 210602,г. Витебск, ул. 1-я Доватора, 7/11» Витебскаяордена "Знак-Почета" государственная академия ветеркиарио2ывди1У'.чы>тел.37-06-&3.

С диссертацией: можно ознакомиться в библиотеке Витебской ордена "Знак Почета" государственной академии ветеринарной медицины.

Автореферат разослан

Ученый секретарь совета , по защите диссертаций

/■'.'/ Н.Г.Толкач

/7Ь V £ -

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы диссертации

Увеличение производства яиц и мяса птицы - одна из главных задач современной отрасли птицеводства. Однако, решение этой задачи сдерживается недостаточно интенсивным ростом цыплят и иольшим отходом среда та, особенно в первые дни их самостоятельной жизни, что обусловлено как ие-благоприятными факторами внешней среды, так и физиологическими и иммунобиологическими особенностями молодого организма.

Одним из важнейших механизмов адаптации организма к действию веществ антигенной природы и проявлением гсмеостаза являются иммунные реакции. Однако, вследствие действия на организм птицы многочисленных факторов внешней среды (физических,'химических, технологических, биологически и др.) ¡пленяется иммунный статус организма (Н.5.5х0е1, МЛ.(гои1<1, 1982; А.М.Нспкеп, 1933;Н.5.51еде1,1985). Вследствие изменения иммунного . ответа, значительно снижается эффективность применения вакцин, увеличивается восприимчивость организма птицы к действию мвдсроС ов, вирусов и других агаггоз (КЛУ.КеПеу, 1933), Этим объясняется необходимость- усиле-1пгя иммуппых процессоз.

Для современного пттаеаодсгза нифекцшнлие заболевания пред. газ-лягат серьезную опасность. Одной ¡о наиболее опасных, массовых, трудно подгающ5КСЛ хонтрояю нпфехщюнних болезней птиц является болезнь Ньюкасла. С 1970 года з период наивысшего развития пппдаодства эта болезнь припялз угрожающие размеры во многих странах мира. Интенсивная работа по повышению продуктивности яртшелз к сяижегопо естестветюй ргзистеэтпосш гггици, которая; стала реагировал» на малейшие изменения услознй содержания и кормления (Н-АЛагульш н созвт., 1989).

В практачесхггх условиях часто приходотся сталкиваться с выраженным нммунодгфицнтшм соотолж'.ем зкивотнах. Подобные сгггуздгат приводят к искажению динамики вакцинного процесса, в результате чего значительная часть йзюопшх цч приобретает соответствующего иммунного статуса. Кроме того, генетически обусловлеггаая неспособность к пммунногиу ответу, а также дефицит гшмунохомпетентнкх клеток являются фактором, предрасполагающим к ьозиикновеагао целого ряда заболеваний (С.И.Плйцекко и соавт., 1979).

Управление шшунологкческнм'состоянием л-разработка методов иммунизации на основе использования векесгв, обладающих иммуностимулирующей активностью - одяа из перзосепегпгых задач науки и практики, ре-

г

шение которой открывает новые пути к более эффективной профилактике многих заболеваний (Ю.И.Зимин, 1981; Г.Ф.Коромысдов, П.Е.Игнатов, 1983).

В последние годы уделяется большое внимание проблеме создания и применения в ^животноводческой практике препаратов, направленно воздействующих на гошунную систему. Но пока количество этих средств, применяемых в ветергаирш, невелико. .

Данных о влиянии изамбена, как средства стимулирующего естественную резистентность н иммунную реактивность цыплят пород яичного направленна нет, 410 подтверждает актуальность изучения лег .твня препарата в данном направлении.

Связь работы с крупишш тучными программами, темами

Работа проводилась в соответствии с одним из трех направлений исследований Витебской государственной академии ветеринарной медицины на . 1996 - 2000 г.: "На основе изучения иммунной реактивности, этиологии н механизмов развития различных видов патологии усовершенствовать существующие н разработать новые средства и способы диагностики, профилактики и лечения незар;шшх и заразных болезней животных, а также определить условия получения продукшщ животноводства высокого санитарного качества". Данная работа является раздетом программы научней исследований кафедры фармакологии и токсикологии? "Изучение фармакологии я разработка лекарственных форм^И госрегистрации 19981780.

Цель и задачи исслсдосапия

Целью настоящей работы явилось выяснение возможности использования изамбена, как фармакологического фактора, повышающего резистентность , активизирующего иммунный ответ на вакцину против болезни Ньюкасла, стимулирующего рост и развитие цыплят пород яичного направления.

В соответствии с этим на решение были поставлены следующие задачи:

- определить токсичность препарата для цыплят при его оральном введении;

- отработать эффективные дозы изамбена и режим его применения, обеспечивающий рост и развитие цыплят; - изучить состояние реактивности организма цыплят при действии препарата в эффективных дозах;

- определить эффективность вакцинации цыплят против болезни Ньюкасла при применении изамбена;

- сравнить в производственном опыте иммуностимулирующее действие изамбена и тимогена, экономический эффект их применения в птицеводстве;

- разработать и внедрить в практику птицеводства наставление по применению изамбена.

Объект а предмет исследования

Основным предметом исследования явился препарат изамбеи (ИС-100) - физиологически активное вещество', синтезированное в Киевском НИИ фармакологии и токсикологии.

Изамбеи обладает целой гаммой позит мних фармахологаческнх эффектов, в частности: противовоспалительным, акальгетичесвдм и жаропонижающим действием. Не случайно препарат и разрабатывали как ненаркоти-ческлй анальгетик.

Дальнейшие исследования показали, что там бен проваляет антаоксп-дзншег, иммуностимулирующее и ггормал'пугоэдее процессы пищеварения действие. Указанные фармакологические свойства и послулгли основанием для изучения излмбгна в качестве потенциального ида1уиостл.чулирующего и рсстюстпяушфующего средства.

СЗьвкгам ессог:сзаиия служили цыплята кросса "Беларусь-9".

ЗЯннгйзаевгя а мешбы ttpossdsamio пссяедоеаття

' J

Для решения постгяяекшх задач Ёшзл ксяояь?огш£И гематологические, иммунологические, ссроясппгекие, фгрмахо-тпнсикологпческие методы пссяедозаииЯ. •

Опыты по гаученйю влгдагю шакбенз на орггхапм цыгоюг пород яичного направления с цеяно погышеь*ал резисткгтг-госга организма я стимуляции их роста проведены в три зтапа На плреом этапе исследования определили величину ?ффгкп:?но:Ч- дозы иодбена, омывающую ростостимули-ругащес действий. Ка втором зтзяз кзучгши острую и хроническую tjkchh-аость npsnrpara при era оральном .примезеяяя. На третьем этапе вдосвияя иммуностимулирующее действкз газмбгна при вакцинации птшш протез болезни Ньюкасла.

Научная пвеазиа к значимость ваяучвииарезультатов

HoBiraia работа определяется рядом положен!'*:

- по,- -учеты новые даяшз по фзрмеколопги н токсикологии иззмбека'в опытах на цыплятах пород яичного кзпрггяешш;

- впервые изучено состояши реакпшности рргаикзма цыплят пород яичного направления при дейсташ препарата в аффективных дозах;

- установлгка созмежкесть примеккюя птмбгяа в качестве средства, повышающего эффективность рокщаьищн цздтяэт против баяезнп Ньюкасла.

Практическая значимость полученныхрезультатов

На основании проведенных токсикологических, фармакологических, иммунологических исследований отработаны эффективнее дозы препарата щамбека, режим стимуяхцни препаратом иммунного ответа организма птицы на бакцаау против болгзнн Ньюкасла. Проведены производственные испытания пр^пграта к установлен его рсстсстнмулнруюший эффект. Разработано н утверждено наставление по использованию иммуностимулятора изаыбеиа б птицеводстве с целью повышения естественной резистентности, иммунологической ргазспшюстн в энергии роста цыплят пород яичного направления.

Зтявмяческвм значимость тлучатшх ргзулъяиппсз

Иамутстнмулхлчэр изамбен кстиаизируст рост, увеличивает сохранность г.п:цы. Так, среднесуточный прирост живей массы иа одного цыпленка в ко»продьаой группе составил 55,4 г, у подопытных цыплет - 65,95 г. Со-храгаюсть поголовья в «сострола была 85,7%, против 93,5% в опыте. Экономический эффект от применения препарата «оставил в расчете иа 1000 цыплят 300355 рублей в ценах 1993 года. Препарат пользуется спросом на птицефабриках, »по поззоляет использовать его в качестве коммерческого продукта.

Оашаше положения диссертации, сииоаимьи иа защиту

1. Токсйкологкчеекая характеристика изамбен а.

2. Уровень показателей, характеризующих состояние естественной ра-зястенпгосп! и иммунной реактивности организма цыплет, формирующийся в результате действия препарата.

3. Иммунный ответ на вакцину против болезни Ньюкасла при прнмеие-шш препарата.

4. Влияние препарата на прирост живой массы цыплят б динамике.

5. Сравнительное стимулирующее действие и экономический эффект применения изамбена и тимогеиа.

Личный склад соискателя

Диссертация является законченной научно-исследовательской работой по изучению влияния изамбена на естественную резистентность н иммунологическую реактивность эргаиизма цыплят, а также на их рост и развитие.

Экспериментальные и теоретические исследования по теме диссертации проведены лично соискателем под руководством доктора ветеринарных наук, профессора Ивана Георгиевича Лрестова. Соавторы опубликованных работ оказывали научно-методическую помощь при организации и проведении опытов.

Апробация результатов диссертация

Результаты исследований доложены и обсуждены на Республиканской научно-практической конференции "Профилактика н меры борьбы с болезнями молодняка сельскохозяйственных животных" (Витебск, 12-13 сентября ' 990 г.), па Международных конференциях "Новые фармакологические средства з ветеринарии" (Санкт - Петербург, 1990,1991,1993}, на Всероссийской научной конференции "Экологические проблемы животноводства я совер-гаенсгвозаиие подготовки аэтериигряых врачеГГ(Тро:щк, 1-3 июня 1992 г.), на Республиканской кзуч;ю-пр~стпческой конференции по животноводству и взтеряшркой медшашз (Витебск, 21-22 сентября 1994 г.), на итоговых научных конференциях язхфзятов « 'доплат пргподаеэтелей Витебской госу-дйрстееяиой шгадгг»га Еетзг-йигг.игй ¡¿гдгапны (Оятебсх, 1995, 1993, 1999), иг. двух заседггшх Вгтбл^гр?-:^»"^^? (1995, 1997), из Мкхдупааашшх научно - пряхгечегжх яяг.у-ряггят (Взггебс", 23-25 сетгггбря 1997 г., Витебск , 4-5 ноября 1959 г, Скоди;сх 23-24 ноефл 1999 г). '

Оярбярхэегаюетя реэцття&хях . Осчсзяае псл?;>хкпя кз;с:|яздзо»из>й piifcrrri тпдз^г-'* я 15 гтг-ш-

ш psöotsx, osyfesjssnt^k 3 уkva-vi

ВГАВМ, TSMSRFiscKa:; сгззлг?. ж-гсугтсз.'яря^грся-

шы, меткдународнкп сдашогя^моа, » том пзгя® рзгдкгЗэкаш ТУ sa гронз^ Еодстаа иззмбгна примсизтеяьпо к усвсзкэд Рссаусжжа Беларусь, утверждено пастззление ГУВ МСХ н П ГБ по прямекениго' прсвсрата в ятнцевоя-стае. . . .

Скгрукщура и рабсхш ■

Диссертация изложена на ИВ страницах машинописного тскйта! Состоит из введения, общей характеристики работы, основной части, включающей три главы (обзор литературы, материал п мегоды исследований, результаты исследований), 321 ючекия, выводоэ, практических предложений, списка источников литературы и приложений. Работа иллюстрирована 11 таблицами и 11 рисунками. Список литературы содержит 338 источников, из них 272 отечественных и 66 зарубежных авторов.

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ

Обзор лпшратура по теме и выбор направления исследований

В главе освещаются вопросы, дающие представление об иммунологических аспектах организма птиц, его перестройке при иммунизации. Приводится характеристика фармакологичеких препаратов, позволяющих корректировать песпецифическую резистентность и иммунную реактивность птиць:, стимулировать ее рост и развитие. Приводятся известные данные об испытуемом препарате изамбене.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Клшшко-экспериментальная часть работы по изучению влияния изам-бена на организм цыплят пород яичного направления с целью повышения ре-зистеншсстп, активизация иммунного ответа на вакцину, введенную против болезни Ньюкасла, стимуляции роста и развития их проведена.в течение 1990 - 1996 г.г. в кланнке кафедры эпизоотологии, лабораториях кафедр внутренних незаразных болезней животных, фармакологии н токсикология Витебской государственной академии ветеринарной медицины.

Дня проведения оаытоз использовали цыплят кросса "Беларусь-9", начиная с суточного возраста, подобранных по принципу аналогов в подопыт-ые и контрольные группы. Цыатята находились в одинаковых услов1ШХ (клеточное содержанке, обогрев инфракрасными, лампами, кормление - комбикорм марки 2Б, поение'из поиодк). За ни плетем и всех экспериментальных групп в период оаытоз проводили кяшшческое наблюдение, контроль за ростом и развитием, а также учитывали сохранность поголовья. Клиинко-лабораторному исследованию цыплят подвергали в разные срс;:;;, которые определяли условиями опыта. Отбор пуб крова проводил а от пяти цыплят каждой группы.

В первой серии опытов определяли величину эффективной дозы изам-бена, оказывающую выр.вкенное ро'^огггнлфшпрующее действие (по методике ЕЛ.Щедрина и М.В.Невзгодйнон ,1980). .

Во второй серии опытов изучали острую и хроническую токсичность нзамбена для цыплят при его оральном применении. Для проведения данных исследований использовали методику А.И.Тишкова и соавторов (1987).

В опытах на 140 одно - 42-сугочных цыплятах, разделенных на 7 групп но 20 в каждой проводили оценку иммунного ответа их организма на вакцину, против болезни Ньюкасла. Упитывали уровень показателей, характеризующих естественную резистентность и иммунологическую реактивность организма птицы. Действие препарата испытывали в зависимости от возраста цыплят. дозы и кратности применения. Цыплятам первой и второй групп препарат в форме 0,5% раствора на 0,85% растворе натрия хлорида задавали инди-

видуалько внутрь однократно з суточном возрасте в дозах соответственно 20 и 40 мг/кг живой массы, цыплятам третьей и четвертой групп - первый раз в суточном возрасте, повторно - непосредственно перед вакцинацией (в 21-дневном возрасте) в тех же дозах. Цыплятам пятой и шестой групп препарат задавали однократно - непосредственно перед вакцинацией в аналогичных дозах. Цыплята седьмой группы служили контролем и препарат не получали.

Птица всех групп была вакцииир -ана на 22 день жизни (шгтраназально, вирус-вакциной против болезни Ньюкасла, штамм "БОР-74 ВГНКИ"). За цыплятами наблюдали в течение всего опыта, учитывали рост, развитие, сохранность.

Для проведения гематологических и иммунологических исследований убивали по пять цыплят из каждой группы в день вакцинации, а также на седьмой, четырнадцатый и двадцать первый дня пссле иммуаизкции.

Крозь от цыплят получали после нх дгкапнтзшш, собирая ее в две стерильные пробирки. В одной кз них крсзь стабилизировали гепарином (2,0 -2,5 ЕД/мл), другую нспользозхш для получения сыворотки.

В периферической'крови.определяли содержание гемоглобина фого-эдектроктсркшетр'иесетм методом по Г.В.Дервазу н Л.И.Воробъеву (1959), подсчитывали количество эритро?дито», лейкоцитов, трсмбоц"тов в счетной камере Горяевз по ИЛ-Болоппкозу, Ю.Ю.Соловьеву (1980).

Л$5!шфЗ«му рмаоякяи иг сспсвпшш подсчета 200 клеток в мазках; ок-ргтаенгая пэ РемаяогСйему-Гятз по А.А.Кудрязцеау ЛАКудряюиевоЗ (1974);, ИА1Кя?п>тго <!936); Б.Ф.Е5гсз«20«у и ссявт. (1988).

Гоагокргтфта. вг.гкчш:у определяя;« хапшияршм методом при помощи гжфоцсшрафуга.

Дкффереяшфокаяи Т- ,ч В-лтазфгиятм, уйгшзая размер клеток, ваяя-тону ядра, пдтопшзип к их гягхпекп'вгть окгзчя* по И.М.1С«-ряутя> и сегзт., 1979; N.Vujanovic etaf., Í572. *

Фягоц;г1срную swrrrerroctb пквдоэозирофялоз изучали согласно мето-дйэтгекзи укзззияям ¡то oncegesesrao* естестактоЯ резцстгектнссти я пунгх ее шзшшшя у молоднака сельасскоз^ствгчяш дазотнмх, подготовленных С.С. Абрамовым и др. (1989).

Бгктерэдщдиуто cmsnoen» екгеротгле кревп кзучалп по методу О.В.С.мкрповсй п Т.А.Кузишкей в модификации Ю.ММарксва и созат. (1968) с использованием еутсчноЗ мккребиой культуры E.Coli.

Лвзоцнмнуга окпкзнссгь сыгоротаа крогз оир-челяяи фотоэлектроко-лориметрипаск5гм методом с использованием суточной культуры MLisodecticus по В.Г.Дорофгйпуку (1968); И.М.Карпутю и соавт. (1992).

Содержание белка в сьшсротке крсз:г енясшии рефрактометрически по И.М.Бетлкову (1975), фракции балка - кетоком пластинчатого электрофореза в полкакрнламидком геле ко С.Ф.Алешго, Г.А.Сзгеиок (1975); В.М.Хатоду (1983); И.М.Кгрпупа (1992).

До мчала опыта, а -r.rjíí vz седьмой, четырнадцатый и двадцать первый дни npt.ic вакцинащга в сыворотке крези цыплят капсдоП группы опредё-

ляля титры антигемагглютининов при помощи РТГА. Титры антигемагглю-тшишов для облегчения статистической обработки логарифмировали.

Производственный опыт провели в условиях птицефабрики совхоза "Гвардия" Борисозского района Минской области на 9000 суточных цыплят кросса "Беларусь-9". Целью его было изучить сравнительное действие на организм цыплят изамбеиа и известного иммуностимулятора тнмогеиа.

Экспериментальные цыплята в начале опыта были разделены на три группы по 3000 голов в ютадой. Цыплята первой группы служили контролем, препаратов не получали. Цыплятам второй группы применяли тимоген аэро-зольно из расчета 200 мкг/м3 с экспозицией в 30 минут. В третьей группе цыплятам скармливали изамоен с кормом в дозе 20 мг/кг живой массы. На 20 день опыта цыплят всех групп вакцинировали г.ротиь болезни Ньюкасла сухой вирус-вакциной из штамма "БОР-74 ВГНКИ" согласно наставления.

Контроль постваздинального иммунитета у цыплят проводили согласно метод: гческим указаниям по серологическому контролю напряженности иммунитета при болезни Ньюкасла птиц с помощью РТГА, утвержденным ГУВ МСХ СССР 18,05.7$ года.

Расчет экоиомнчесхой эффективности изамбела и тимсгена при вакцинации цыплят против бокзэки Ньюкасла осуществляли согласно "Методики определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий", утвержденной ГУВ МСХ СССР б J9B2 гиду, 8 также дополнений к методике МА.Антюкова и В.М.Жакоьа (1989).

Весь полученный цлфрезой материи! статнсткчгскн обработан на персональном компьютера с использованием программ "Status" и "Stadia", табличного процессора "Excel".

результаты ПССЛЕДООАШШ Otspsdsjtesais эффективней {¡юн иммбеиа

В пермй ссрли опытов, нацеленной кг отработку дезы изйл'бень, изучили его рзетостпиуяирующес действие, являющееся, по данным В.Д.Соколопа и Н .Л .Андреевой (1990), основным свойством любых стимуляторов, по которому уже мокло судить о том, что препарат будет обладать и целым рядом других позитивных фармакологических качеств.

Проведенный опыт показал, что действие изамбена проявляется, начиная с дозы 15 мг/кг. Влияние препарата на организм цыплят сопровождается приростом кх живой массы. Это действие носит дозозазисимый xapascrep и нарастает с увеличением дозы до 20 т/кг. При дальнейшем повышении величины дозы (30 мг/кг, 40 мг/кг) препарат не вызывает достоверного изменения прироста живой массы

Контрольный опыт подтвердил, что изамбен в дозе 20 мг/кг при однократном применении цыплятам достоверно повышает прирост жйвой массы птицы на 19%.

Изучение безвредности (токсичности) изамбена Острая токсичность Для внедрения в практику любого лекарствешюго препарата, кроме информации о его эффективности, необходимы данные о возможных токсических эффектах, т.е. о безвредности для организма.

Выяснению этого вопроса посвящены последующе эксперименты. Учитывая, что по сообщению ряда авторов {М.Э.Онуфриенко н соавт., 1991; Т.С.Джигова, 1993; В.В.Бурдейный, В.Ф.Даииленко, Г.А.Бухтиарова, 1993) изамбен обладает низкой токсичностью (ЛД» при пероральном введении крысам составляет 2230 мг/кг, для цыплэт-бройлероз - 1120 мг/кг) и относится г; классу химических соединений с малой токсичностью, мы ограничились изучением влияния изамбена в повышенных дозах на организм цыплят, учитывая тот фг.кт, что в практике возможны случаи передозировки препарата. При этом мы выяснили ал««ше препарата з повышенных дозах на темп роста, уровень юмеисши! гематологических, гатоморфйлогических показателей организма цыплят, т.е, показателей, которые регламентированы соответствующими дохумг;1ТОля крп :. Ьеткз созмохгяых негативных (токсических) эффектов лехзрстЬекяых срадста.

Нами была изучена острая я ярсничемиа -тсгагевс&ть изгмбена при его оральном введения па цыплятах д«$тядксгзого возрзега. '

Острую токсичность пргпгфма изучали' ::з ч-ггарех группах цыплят по и. хть в каждой (три подоттшя я одиа когпрзяытя). Цитата» подопыт-вых групп изамбен задагжга одаокрзтпо а форме 3% раствора на изотопическом раетйоре натрия кяорнпз а дозет: 1- группа - 200 мг/кг, 2 группа - 400 мг/кг а 3 группа - 600 мг/кг, что соотпстогзс;п:о выгкз эффехпгскс?! дозы и 10,20 и 30 ргз. Перед шпаком опыта цжтяях кзесяяй, определила клинический статус, .взяли крепь дая кякшЕсо-мсрфатспггескзго. йнашш. Наблюдает» за цыплятами подопытных групп проп.одюш в течение десяти дней.

Изамбен при перерлльном введении цыплятам ¡зшыгзл достоверные изменения уровня тромбошггоз, гемогяобина; ко не сызивед таковых в уровне эритроцитов, лейшятгов, общего белка крови у подопытных цыплят. Величина этих показателей была у гпйцы в пределах физиологической нормы. Живая мас^а цыплят как в подопытных так п в контрольной группах по мере продолжения эксперимента постепенно увеличивалась. Причем, цыплята в подопытных фуппах давали достоверно больший прирост живой массы, чем в контрольной. За весь г >иод наблюдений цыплята увеличили свою массу в среднем по контрольной группе на 75 граммов, в первой подопытной - на 80 граммов, во второй подопытной - на 78 граммов, в третьей подопытной - на 76 граммов, т.е. препарат вызвал повышение прироста живой массы у подопытных цыплят по сравнению с контрольными на 1 - 3 %. Изамбен не вызы-

вал видимых клинических признаков интоксикации. Общее состояние птицы было удовлетворительным.

Хроническая токсичность

Хроническую токсичность препарата изучали согласно методике Тишко-ва А.И. и соавторов на шести десятидневных цыплятах, которым изамбен задавали ежедневно однократно в течение десяти дней внутрь в дозе 200 мг/кг и форме 5% раствора на изотоническом растворе натрия хлорида. Наблюдение за ними вели 30 дней. В течение эксперимента у птищ отклонений от нормы в уровне гематологических показателей, общем состоянии, поведении, аппетите не зарегистрировали. о

Спустя 30 дней после окончания - 10-дневного курса применения препарата в указанной дозе у бати по 50% цыплят каждой группы и подвергли их органы Пэтологоанатодшческому н гистологическим исследованиям. На вскрытии при пэтологоащтомическом исследовании органов цыплят (легкие, сердце, печень, желудок, кишечник, ночки) каких-либо видимых изменений выявить не удалось. При микроскопическом исследовании этого %сг материала структурных и сосудастых шмененнй не обнаружено.

Мёстнсршдрзасатщгг действие ma/aSem

Местное действие .изамбснй из слизистую , оболочку желудочно-кишечного тракта иселедовагш на цышотех 10-дневкога возраста весом 95 -100г. ; ,'•'•' •-,. '•;.

Утреннее кормление предааротел'ьно было отменено, воду давали в неограниченном количестве. Препарат вводили псрорально в постепенно нарастающей дозе (коицатрадин) в ОД ил цат. Чергз трл часа цыплят убивала, вскрывали, а затем исслгдозали слизнсг'ю ротосоЛ полости, зоба, пищевода. Полученные результате сищэтеяьстеугот, что изамбеи припсрорельном введении в ;.озах 400 - 2000 иг/кг (5 - 20% ;;cum¡íípna;;n растворов) не приводит к возншсксвеняю вкзу&чьно сбааругчзасмых измеизшй, а'таюкз признаков раздражения слизистой ротокой полости, пнщеыущ и зоба. Пря микроскопическом исследовании срезов слизистой, полученной из указанных органоа, изменений не установили.

Проведенные исследования свидетельствуют, что изамбен, введенный внутрь в 5 - 20% концентрациях не обладает раздражающим действием.

Влияние из&мбепа па уровень показателей естественной резистентности и иммунологической реактивности цытпт

Для оценки иммунного ответа организма птицы на вакцину против болели» Ньюкасла, уровня показателей, характеризующих ее естественную ре-

зистснтность л иммунологическую реактивность, провели исследования на 140 цыплятах кросса "Беларусь - 9" 1 - 41-дневного возраста.

При изучении гематологического и иммунологического статуса и уровня показателей, характеризующих естественную резистентность цыплят, установили, что в первый день жизни содержание гемоглобина, эритроцитов, тромбоцитов, гематокрптная величина, уровень лейкоцитов, показатели лейхо-грзммы, количество Т- и B-лимфоцитов, фагоцитарная активность псевдоэо-зинофилов, содержание иммуноглобулинов, лгооцимиая и бактерицидная активность сыворотки крови, титр антител к вирусу болезни Ньюкасла были во всех группах примерно одинаковыми.

После применения препарата и проведения вакцинации цыплят против болезни Ньюкасла, по мере развития иммунитета, происходит отчетливое кз-менгние уровня иммунобиологических показателен их организма. Причем, более выражены эти изменения у птицы, получающей препарат.

Изамбек npnr.'.surjiu в разные сроки а дезах 20 к 4Q мг/кг шгаой массы цыплят для отработки режима и схемы его применения з практике птицеводства. Оказалось, что нзамбен а определенной степени влияет на уровень морфологически показателей крови ¡шплят. Та;:, уэке на 21-ый день исследования уровень основных гсмэтологкч^ских показателей у цыплят всех пед-олыгютх групп был пчем в ксг.трсяг. Например, у цыплят 1-ой группы количество эритроцитов бгтлэ у ггг.яда контрольной группы на

24%, гемоглобина- на 17%. Колтгтао ягГламйЯоз в кроем ишлят подояыт-иых групп било выше па 12 -24% з ззаксимсст от группы. Зя.ттт«шга ао> рас гало количество тромбокмтев.

Подобную тепдетппо «ибяхиаш па прогжгеазс» г-оого периода опита. Уй?л;гч?кке чиста лямфошшз происходил» s-ccriowc« за бчзт Т-клстек. Ргэняиа с кштрояъпыьш одкзкяелшя достагяяа 50 -100?-,

Садакзше общего бгякз в сынератке «розя индол* уйеяетгк.гтось па протяжения stcro периода опыта п в боакайястзе подопытных груш бняо зыке, чем в контроле. Очезкдго, '-по квтгболптн гатевизировалк

язотастый обмен, следсгекеи которого ггзяся к«: более быстрый прирост дивой массы цыплят, так я бета в сызоротке гфопп, что ямкэтея пластическим ресурсом и при синтезе аатгиея. В отношении бглковых франций целесообразно отметать следующее. Повышение урозиа белка' сыворотки крови происходите преимущественно зл'счет альбумикез и иммуноглобулинов.

Данные источников литературы и наши собственные наблюдения дазот основание полагать, что альбумин!.!, являясь вт'соходнспгрснмми белками, ¡орикимают активное участке в обмене веществ. Поэтому наблюдается прямая зависимость между скорением роста цыплятт и кояичестеом альбуминов в крови.

Вакцинация птицы вызвала закономерное увеличение в крови уровня иммуноглобулинов, относящихся к классу А в ответ на введение антигена.

увеличение уровня Ig М, способных образовывать прочные комплексы с его молекулой.

Повышение содержания аг макроглобулинов, способных обратимо связывать излишек плазмина и тромбина, расценивается как ответная реакция на увеличение уровня тромбоцитов. ; . .

Содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови цыплят подопытных групп было выше, чем у птицы контрольной группы во все периоды наблюдения. Причем, повышение содержания иммуноглобулинов классов А и G регистрировали на протяжении всего опыта. Уровень нммуно. .обулинов М у цыплят подопытных групп резко возрос к 27. дню жизни. К 34 дню наблюдали спад в их содержании. У ццппят контрольной группы повышение содержания иммуноглобулинов М происходило до 34.дня жнзни. К 41 дню показатели по Ig М во всех группах, достигли данных 21 дня жизни.

Нами установлено, что в суточном возрасте титр антител к вирусу болезни Ньюкасла составил 4,0±0,4471о&>. К 2} дню он резко снизился и составил, в зависимости от группы, 0,6+0,245 - 1,4+0,510 log2. В дальнейшем происходило его шстепешюепоЕьшаешзо вплоть до последнего дня исследования у цыплят подопытных групп, у цыплят ко}ггролы:ой группы - до 34 дня жизни. Причем, разница по докноЕлу показателю в подопытных и кошроль-ной группах была весьма существЬюгой: / . :

Таким образом, изаыбеи повысил напряженность поствахциналыюго иммунитета к вирусу болезпя Ныйм^^-ч'.',.'1. '.->'• 4

Усиление иммунного отьета срганизиа цшшст при использовании данного препарата подгвер-дщзлссь теккс у^глачггглем колетгства плазмотиче-ск!гх клеток в 1,5 -2,8 раза..Г - ■ - V;'' •'"';.* - > .

Как известно, сахз:еГ;авм. похазателсм естйствеиной резистентности ор- . ганизма считается базстерицндш активность сыворотки крови. Многие авторы рассматривают ее как один из накбо^гё чувстйгггелыгах иеспецпфических факторе проттгооинфекщошба запеты оргаишма. -'■■/. • " . • •

Некоторое снижение бактерицидной активности сыворотки крови отмг-чали на 27 день жизни цыплят. Что можно объяснить тем, что в данном воз- ' расте наблюдается один из критических иммунологических периодов в зкизш: птицы. К 34 и 41 дням жизни произошли постепенные очередные повышения ; уровня этого показателя. Бактерицидная активность сыворотки крови цыплят подопытных групп была выше показателей по контрольной группе на 8 -13%.

Характерным показателем неспецифической резистентности цыплят яз- . ляется и лизоцимная активность сыворотки крови. Ее уровень под действием изамбена увеличивался на 15 -35%.

В настоящее время фагоцитоз привлекает внимание оольшого количества исследователей, особенно при изучении иммунного ответа организма.

Фагоцитарная активность псевдоэозинофнлов имела тенденцию к повы-¡иеннм во всех группах цыплят на всем протяжении эксперимента.

Разница в уровне показателей по подопытным и контрольной группам составила 5 -7%. Аналогичные изменения были характерны и для таких тестов как фагоцитарный индекс и фагоцитарное число.

Данные о влиянии препарата на динамику живой массы цыплят отражены на графике (рис. 1).

ЕЗГруЛпа 1 ЕзГруапаг сэГрупьа 3 рГруппа4

□ Группа 5 рдГруппаб ¡^Группа 7

РявА .Дмисиика живей м«в«ы цы «ляг.

Таким образом, существенных различай в действ;;:« препарата в зависимости от крзтнссто, врекшк прзмеисиня а дозы не установила.

Чтобы пошш> мехгата» дейсгрня шамбенз на имяушше процессы, следует проводить исслеяогзкяя т метмгугкрком, кдгто«£к»{ и сргашом уровнях. Можно предоедаиш*, что ш.»муйсспшуя1*ру!©гц5е действие иззмСена достигается за счет иепс^здивенкого вяиянкз на ■ тошупокомпетентные клетки, т. е. спмшфичвски. Возможен и лщтоЗ путь . Усиление отдельных этеяов иммуногенеза (например, шзрзцпв Т- и В- лимфоцитов) может быть опосредованно через регулирующее воздействие препарата на активность центрально"! нервной снстгми, нз хзшеф^здредвхортшльную с?;стему. Возможно, что эту пути взаимосвязаны.

Производственное исчыяжО&ит яю.

Производствепное'испытание нзгмбена проведено кз базе птицефао- ри-ки совхоза 'Твардия" Борисовского района Мянской области в соответствии с методикой проведения производственного испытания на 10000 цыплят.

Оно было нацелено на изучение сравнительного влияния стимуляторов изамбсиа и тгс.гсгсна. В результате был -ыязлен более выраженный стимулирующий эффект от применения мзомбена.

Срявнипхлышй экономический эффект применения тимогена и изамбена

Оценку сравнительного экономического эффекта применения тимогена и изамбена мы осуществили, на основании материала, полученного в результате прозедгния производственного опыта.

При оценке экономического эффекта, полученого в результате проведения ветерпизрных мероприятий, анализу подвергнуты падеж цыплят, выход продукции. Были учтены закупочная цена на продукцию, стоимость использованных препаратов. Определил;: экономический эффект в результате при-мскешитаыогена и изамбена.

Экономический эффект, полученный в результаге проведения ветеринарных мероприятий (За), рассчитывали по формуле:

Э,= ПУ +Л-3».

Экономический эффект, исдучепныв в рззультате применения тимогена, в ргсчггс па 1000 циплгг в цепах 1993 года, составил 99617 рублей, в результате Ер.иедения из:л(бсна - 300356 рублей.

ижоды

1. Изаибга при пгрор^яыюм прйвшкаши к дозах от 5 да 600 мг/кг (однозраяяо) к 200 мг/вг ( од:г.г раз в сутки, 10-диешшы курсом) не вазыьгег у цыплят побочного Д2й<л&кг„ в 5 - 20% х:снцг;працйях не оказывает местного раздракешгцгш дгйжш-наслшяэтую ротсвоН погости, икщз&ода к зоба. Препарат ш,:еет бояыку» тершзезтпческую широту (б).

2. Прсшрат б дозе 20 мг/:<г живой массы, заданный псрсрадьно сугоч» 1шм ццдлкггк, саособетнует погишеншо уроеил показателей песпецифтг-ской резистентности и иммунной реактивности: гемоглобина, эритроцитов, фагоцитарной шгп;гйссп> пеевдозозинофпло», бактерицидной и лизодшаой акпшности сыворотки крош, количества Т- и В-л$;глфоцетов, иммуноглобулинов, альбуминос; повышает сохранность цыплят ка 7,8% и стимулирует прирост живой массы птицы на 20% (2,3,4,5,10,11,12).

3. При вакцинации цыплят против болезни Ньюкасла, нзаглбги, в ¿-ачсст-ве им:.'!уностк.мулятара, обеспечивает формирование у иммунизированной птицы более напряженного иммунитета, что выражается в повышении в крови титров ноствакциналшых ают.тел к вирусу болезни Ньюкасла в 1,3 - 1,9 раза, увеличении количества плазматических ¡слеток в 1,5-2,8 раза (7,8,12).

4. Изамбен по сравнению с тимогеном увеличивает в крови содержите гемоглобина на 7%, лейкоцитов на 29%, бактерицидная и лизоцимная активность сыворотки крови возрастают соответственно на 23 и 20%, титр по-ствавди.чальных антител к вирусу болезни Ньюкасла повышается на 60%, что обеспечивает большую сохранность цыплят ка 3,5% (9).

5. Экономический эффект от применения изамбена составляет в расчете на 1000 цыплят 300356 рублей в ценах 1993 года (14).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для повышения естественной резистентности, иммунной реактивности организма цыплят, ускорения их роста, развития и повышения сохранности поголовья рекомендуем хозяйствам, специализирующимся на выращивании птицы пород яичного направления, применять нзамбен однократно в суточном возрасте пероралыю в дозе 20 мг/кг живой массы (Наставление по применению изамбена, утвержденное ГУВ Минсельхозпрода Республики Беларусь 01.09.1993 года). .

2. Представленные в диссертации материалы по фармакологии иммуностимулятора изамбена используются при написании учебников, диссертаций, научных статей, а также при чтении лекционных курсоз и проведении лабораторно - практических занятий по фармакологии н внутренним незаразны,vï болезням животных.

список опубликованных работ по теме диссертации

1. Временное наставление по применению нзамбгна: Утверэдено ГУВ Минсельхозпрода РБ 08.11.95 г. /Минсельхозпрод РБ.-Мннск,1995 г.

2. Наставление по применеипгп ¡пзмбепа: Утверждено ГУВ Минсельхозпрода РБ 01.09.1998 г. /Мгтсельхсз-'роя Р5,- Минск, 1998г.

3. Соснодская Т.А., Арйстоп ИГ., Толкзч Н.Г. Уровень показателей естественной резистентности орггтмя цыплят лГщсаосккх пород под злпяни-ем препарата ИС -100 И Профилакт-пгз н меры' борьбы с.болезнями молодая-хя с.-х. животных: Тез. дота, псспубл. игуч.-прекзг кспф., Витебск, 12 -13 сект. 1990 г. /БелНИИЭВ, ВВИ,- Минск, 1990,- С. 155.

4. Соскосски Т.А., Арестов И.Г., Толкач Н.Г. Роэтосг.глулврутошее влияние препарата КС -1С0 на организм цыплят яНцепогяю «ород кур Н Новые фармакологические средства а гетерингрии: Тез. дечея. ко 2-ой меж-зуз. 1:эуч.-практ. коиф.-Л., 1990,- С, 41.

5. Сосновсхая Т.А., Арестов И.Г., Толкач Н.Г. Влияние пзк.'.беаз на резистентность цыплят ятгшых пород // Новые фармакологические средства я ветеринария: Тез. докл. к З-ей межвуз. »геуч.-ггргхт. конф,- СПб., 1991,- С. 34. ...

6. Сосновская Т.А., Арестов И.Г., Толкач Н.Г. Фврмакотоксикологаче-ская характеристика изамбена (ИС -100) // Экологические проблемы животноводства и совершенствование подготовки ветеринарных врачей; Материалы Всероссийской научной кон.. Троиц, 1 -3 moi ' 1992 г. / УГУ ТВ.- Челябинск, 1992,-С. 63-64.

7. Сосновская Т.А. динамика титра антител в крови цыплят яйценоских пород кур, вакцинирован. мх против ньюкаслской болезни при дейстзии препарата ИС -100 // Новые фармакологические средства в ветеринарии: Тез. докл. к 5-ой межгос. межвуз. науч.-практ. коиф.-СПб., 1993 - С. 50.

8. Сосиозсхая ТА., Арестов И.Г., Толкач Н.Г. Стимуляция препаратом ИС -100 иммунного ответа у цыплят, вакцинированных против болезни Ньюкасла: Материалы республ. науч.-лракт. конф. по животноводству и ветеринарной медицине , Витебск, 21-22 сект. 1994 г. /ААН, Вит. гос. акад. дет. мед.-Витебск,-1994.-С. 77.

9. Соеновская Т.А., Арестов И.Г., Толкач Н.Г. Сравнительное влияние иммуностимуляторов изамбена и тнмогена на резистентность организма цыплят яйценоских пород // Ученые записки/ ВГАВМ.- Витебск, 1995,- Т. 32.-С. 47-48. ■ ,

10. Соеновская. Т.А., Арестов И.Г.,Толкач Н.Г. Иммуностимулирующие свойства излубена // Ветеринзрные и зооинженерные проблемы в животноводстве и нэуч.-методич. обеспечение учебного процесса:; Материалы 2 Ме-медународной науч.-практ. коиф., Витебск, 23-25 сет. 1997 г. /ВГАВМ. -Минск, 1997,- С. 142-144.

11. Соеновская Т.А. Урозгцп« белка и белковых 'фракций сыворотки крови цыпялт кросса ."Беларусь-^", вакцинированных против ¡¡ыокаслской болезни под действием препарата НС -100 // Ученые зшшскн / ВГАВМ,- Витебск.; 1998,-Т.-34.-С. 79-81;

12. Соеновская Т.Л. йзамбси - птицеводству// Известия Академии аг-' рарннхыаук Республики Беларусь.-Ш&.-КаЗ,-С. В2-85.

13. .СОскоаская ТА.'Динамика прироста гшаэй массы цыплят под дзй-. станем препарата ИС -100 (азамбгиа) // Учгико запаски / ВГАВМ.-Ветебск,

1 "99,-Т.-35.-С. 224-226.

14. Соеновская ТА.;-Арестов ИГ. Сржапетт эшюыпческая эффективность приметши .тимогсаа в шамбгна па цыплятах ¡фосса "Беларусь-9" //Проблемы с/х провзлодегеа в изменяощнхея экономических и экологических условиях: Мазеригзы Международной иауч.-пргэт. конф., посвященной 25-яешо Скотского с/х 4шск«ута, Сколеис;:, 23-24 ноября 1999 г. /Смоленск, 1999,-чйсть' IV - Оон'ол биойогия а ветеринарной ?.:едя-' шше.-С. 134-135. .

15. Технические условия са препгрзг йзгабеж Утверждены ГУН Мин-

РЕЗЮМЕ

Сосиовскал Татьяна Анатольевна

Фармакологические свойства иммуностимулятора шамбеиа (в опытах на цыплятах кроссз "Беларусь-!)"}

Ключевые слога-, нзамбен, доза, токсичность, вакцинация, болезнь Ньюкасла, резистентность, реактивность, цыплята, рост* развитие.

Объект исследования: цыплята кросса "Беягрусь-9" от одного- до 42-днеаного возраста.

Цель работы', выяснить возможность использования изамбеиа, как фармакологического фгетора, повышающего резистентность, активизирующего иммунный ответ иа вакцину против болезни Ньюкасла, стимулирующего рост я раззитиз цыплят пород яичного направления.

Научная пазизпа иссяедаюянЯ определяется радом положений:

- получены новые данные по фармакологии а токсикологии изгмбена в опытах на цыплятах пород кггадого тлргчленця;

- впервые изучено состояние реактивности организма цыплят при дёйст-еш1 препарата в зффетшпых дозах;

- установлена возмсга:ость применения изгмбена в качестве средства, повышающего эффекгошееть взхщшают цыплят против болезни Ньюкасла.

Область ярамеивтаг производству предложено Наставление по применению пззмбепз, пояучйгагас результата ксспздования используются в учебном процессе.

РЭЗЮМЭ

Cucmytaaa Тгццша Аизтольеуна

Фаряшяиштчиьга удасцшзсц: «мунзстымулатара ¡замЗэна (у досде-дах ш куравлзд кросу "Беларусь -9")

■ Югттзт слома ¿замбзн, доза, ташчнасць, вакцинация, хвароба Н'юхасла, рянстзпткасць, рэактыунасць, курашгш, рост, размцце.

АЗ'аап èsatedsaaaiur. кураняты кросу "Беларусь -9" ад аднаго- да 42-дамшагаузрссту.

Мзш ираци: вилЫць магчыы&сць шкариставия «замбзка, як фармака-лалчхщго фаитеру, юто пазышас рззйггктгааа, акшшзуе шукны адказ па вагцыку супраць хсаробы Ы'юкасла, сшмулгог рост i разаццЗ куражт яечна-га нашрукку.

Hssymûm ¡istslxis дзгйадаагдаяу вызначаецазрдзам о&лаяэнияу:

- ¡крылакы K021I2 давня .на фарЕшалогй i "шаийлопг самбзна у вопы-тсх иа курапятйк народ «таага наирукку;

- уперйшшо Еизучаш ста;» рзаг-тшунасвз щгЕгзша Еураыяг при дзесши прзааратау у зфскгыунзх ддаах;

- устзиоулена одэтшшсць у>шзш«ш «аибэку у якгсцз сродку, як! ра-вышаг зфг.тшуцасць сакцшгцш куранят супраць гааробп Н'юг:асла.

Faims яршшаяип штасрчасц! дрзмяоша Настаулеше па убыванию Ьамбзаа, stpmnssas. шюш дасяедаяшазу сыкаристоуваоцца у наву-чальным працзсс.

summary Sosnovskaya Tatiann AnrtoHcvna

Pharmacological Properties of lite Iraznuriostisnulator Isambca (in Trials Involving Chicken Cross «Belarns-9»)

Key words: izamben, dose, toxicity, vaccination, Newc&ab Disease, resistence, reactivity, chickens, growth, development.

Subject under investigation: Chickens of "Belarus - 9" cross Pjjed 1 - 42

days.

Objective: to clarify the possibility fcr izamben to be used as a phaxmdogical factor incresing resistence, activating the immune response to vaccine against the Newcastle Disease, stimulating growth and development in chickcns of egg type. The scientific inmvatic-ns are dstenrsined by Use numbers of positions: the new data on pharmacology and toxicology of izaniben were received in trials with egg type chickens;

for the first time Use state of rcfislryjiy of diickea crganfsa lias bees studied, the preparation acting in the effective cores;

the possibility of izaraben to be used incresing the efficiency of

vaccination chickens against the Newcastle disessa has been rtated.

Field of application: The Msaual isss been suggested for tha industry concerning the application of izsmben. The obtained results of inves ligation are used in the academic process.