Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Эпизоотология и совершенствование мер борьбы с лептоспирозом свиней и крупного рогатого скота в Республике Беларусь

Г Б ОД БЕЛОРУССКИЙ НАУЧНО-КССЛЕДОВАТЕЛЬСгаЙ ИНСТИТУТ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ВЕТЕРИНАРИИ им.С.Н.ВЫШЕЛЕССКОГО

3 МАЙ

УДК 619:616.98:579,834.115:636.2/4

КИИШЧЕНОК Владимир Александрович

ЭПИЗООТОЛОГИЯ И СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕР БОРЬБЫ С ЛЕПТОСПИРОЗШ СВИНЕЙ И КРУПНОГО РОГАТОГО .:' СКОТА В РЕСПУБЛИКЕ БЕЛАРУСЬ

15.00.03. - ветеринарная микробиология,вирусология, : эпизоотология, микология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук •

Минск - 1999

Работа

выполнена в Витебокой государственной ветеринарной медицины.

академии

Научный консультант - доктор ветеринарных наук, профессор,

академик Академии аграрных наук Республики Беларусь Ковалев H.A.

Официальные алпоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор Солонеко A.A.

доктор ветеринарных наук, стрший научный сотрудник Лысенко А.П.-

доктор медицинских -наук, профессор Титоз Л. П.

Оппонирующая организация - Московская государственная академия

ветеринарной медицины и биотехнологии им.К.И.Скрябина

199Б готгя в / '

Защита состоится 1996 года в' '_ часов

на заседании совета по защите диссертаций Д 05.16.01 в Белорусском научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии им.С.Н.Вышелесского по адресу. 223020, г.Минск, п/о Кунцевщена, БедНИИЭВ им.С.Н.Вышелесского

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Белорусского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии им.С.Н.Вьйселесского

Автореферат разослан Ч Ы " £--< / уа У 4996 года

Ученый секретарь совета по еавдгге

диссертаций, доктор ветеринарных : t

наук, профессор ......' ' <'£~>В.Л.Линник

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ ,

Актуальное!» теми. Увеличение производства продуктов животноводства при одновременном снижении их себестоимости - одна из главных эадач стоящих перед Республикой Беларусь. В ее реализации видное место принадлежит ветеринарным мероприятиям, направленным на профилактику и ликвидацию болезней животных, обеспечивание выпуска доброкачественных в санитарном отношении продуктов животноводства, на охрану людей от болезней, общих для человека и животных, а также на ветеринарно-санитарные проблемы защиты окружающей среды. В настоящее время известно около 300 нозологических единиц инфекционных болезней животных,ряд которых представляет серьезную угрозу для народного хозяйства.

Особое место занимает среди Г¿них заболевании лептоспироз, который широко распространен во многих странах мира, в-том числе регистрируется повсеместно в стран ах СНГ.. По данным Всемирной организации здравоохранения по эпидемиологической значимости и экономическому ущербу лей<оспйроэ стоит в одном ряду с туберкулезом и бруцеллезом (В.Н.Гущия, 1983).

На XVI Всемирной Конгрессе по крупному рогатому скоту Е.Mayer (1990) сообщил, что в мире ежегодный ущерб от лептоспироза крупного рогатого скота составляет 4,5 млрд. долларов, что выше, чем от респираторных инфекций, неонатальной диареи, блутонга и др. {Е.С.Воронин, 1991).'

По числу известных сероваров род лептоспир уступает только энтеробактериям. Патогенные лептоспиры включают 202 серовара, которые по степени антигенного родства объединена а 23 серологические группы (К.Kmety, D.Dukken, 1983).

Лептоспироз, несмотря на многочисленные исследования, ¿се еще остается не только экономической».; но и социальной, проблемой. Его по праву относят к числу наиболее широко распространенных природ-но-очагавых зоаантропонозов. Для лептоспироза сельскохозяйственных животных и восприимчивых видов диких животных характерен активный эпизоотический процесс, обеспечивающий циркуляцию возбудителя как в природных стациях, так и среди сельскохозяйственных'животных.

Считается, что эпизоотологическое значение у сельскохозяйственных животных в странах СНГ имеют патогенные лептоспиры серог-

рупп: Pomona, Tarassovi,Srippptyphosa, Hebdomadis,. Seyroe, Ictero-haemorrhagiae и canicola (О.А.Малахов, К.Л.Соболев, 1993). Источниками и резервуарами возбудителей инфекции являются клинически больные сельскохозяйственные, домашние и дикие животные, а также животные- лептоспироносители. Поголовье делтоспироноситедей на неблагополучных по лептоспирогу фермах среди 1фупного рогатого скота составляет 2-5X, в отдельных случаях до 10-20Х и более, свиней - 30-80Х и более. Срок лептоспироносительства после переболе-вания или скрытого", инфицирования составляет у крупного рогатого скота 1,5-6 мес., свиней- до 2-х лет и более (А.А.Гдупков, Л.И.Та-расенко, 1992; Ю.А.Малахов, 1992).

В последние годы по мере: концентрации животных на крупных фермах случаи клинического проявления дептоспироза стали резко возрастать (В.П.Урбан, Т.М.Киндрас, 1983).

За годы, прошедшие с-момента описания болезни Васильева-Вей-ля, иктерогемоглобинурии крупного рогатого скота и открытия леп-тоспир, достигнуты значительные успехи в изучении свойств возбудителя, эпизоотологии и эпидемиологии болезни, диагностики, организации профилактики и мер борьбы.

Неоценимый вклад в изучение дептоспироза животных и человека внесли ученые ближнего и дальнего зарубежья (Н.В.Васильев,1988; С. Н.Никольский и соавт., 1935; В.И.Тарских,1940; В.С.Киктенко,1983; В.П.Урбан и соавт.,1983; В.М.Усольцев,1986; З.Э.Япаров, 1987; М.М.Ахметов,1988; В.И.Белоусов, H.H.Мороз,1988; И.А.Болоцкий и соавт., 1988; А.А.Гдушков, ; Л.Н.Череватенко,1988; В.П.Гущин,1988; Г.И.Ежов,1988; Х.К.Комардинов и соавт.,1988; О.В.Ананьина, 0.Г.Чернуха, 1989; Б.П.Бернасовская,1989; Л.М.Перова и соавт.,1990; . М.М.Ахмедов,1991; Б.А.Щекотуров и соавт.,1992; Ю.А.Малахов,1992; В.П.Бойко, 1993; H.A.Рыбакова, 1994; I.Lwerrchowski, 19в4;- A.Thier-man,1985; V.Eliis;1989; А.Crukas,1987; O.Turner,1988; Геодуль Кун-де и соавт.,1991; F.Trerae, E.Nesnalova,1993 и др.).

Значительный экономический ущерб наносит лептоспироа и животноводству Республики Беларусь (А.П.Красильников,1957;АЛ.Кофейников, 1965; П.И.Уласович/ Н.А.Ковалев, В.П.Бойко,1979; М.М.Чирка', 1979; В.А.Андросов, П.И.Уласович, В.П.Бойко,1982г В.Ц.Вон-•ко,1993). '."

Множественность сероваров ледтосцир я их хозяев в природе, вариабельность симптомов болезни у животных (от иктерогемоглобинурии •

до бессимптомного.лептоспироносительства), сложность лабораторной и дифференциальной диагностики лептоспироза, разноречивые рекомендации по организации мер борьбы обуславливают трудности в познании проблемы, оздоровлении хозяйств и профилактики заражения человека.

Многие вопросы борьбы с лептоспирозом остаются открытыми. Особенно остро стоит проблема изучения региональных особенностей возникновения и распространения лептоспироаа, разработки эффективных методов диагностики, лечения и совершенствования вакцинопрофилакти-ки и мер борьбы с лептоспирозом.

Связь работы с крупными научными программами, темами.Исследования выполнены в рамках отраслевой, республиканской научно-технической подпрограммы "Ветеринария", и являются составной частью научно-исследовательской работы кафедры эпизоотологии Витебской государственной академии ветеринарной медицины (номер Госрегистрации - 01.9.10 028261). •

Цель и задачи исследования. Целью исследований явилась разработка ноеых методов диагностики, лечения, профилактики и совершенствования мер борьбы с лептоспирозом крупного рогатого скота и свиней в Республике Беларусь. Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

I. Изучить - распространенность, заболеваемость и этиологическую структуру лептоспироза крупного рогатого окота и свиней и выявить влияние природно-географических факторов на эпизоотический процесс.

2. Установить источники возбудителя инфекции, пути распрост? ранения, изучить течение и симптоматику лептоспироза у крупного рогатого скота и свиней.

3. Изучить - влияние В-активива на иммуноморфогенез при вакцинации и лечении против лептоспироза у поросят и телят.

' 4. Выявить терапевтическую и лептоспироцидную эффективность азидина при. лептоспироза крупного рогатого скота к свиней.

5. Усовершенствовать специфическую профилактику лептоспироза свиней и крупного рогатого скота..

6. Разработать новые методы аллергической и серологической диагностики лептоспироза свиней и крупного рогатого скота;

Научная новизна полученных результатов. Получены новые данные отражающие закономерности эпизоотического процесса при дептоспирозе у крупного рогатого скота и свиней вреспублике Беларусь.

Впервые определена в динамике этиологическая структура лептоспир, сишггомокомгшеке и патологические изменения, при лептоспирозе крупного рогатого скота и свиней.

На основе изучения in vitro и in vivo лептоспироцвдной активности 12 хиыиотералевтических'препаратов разработан новый способ лечения лептоспироносителей и больных лептоспирозом животных.

Получены новые данные о стимулирующем действии В-актвдща на иммунобиологическую реактивность, крупного рогатого скота и свиней при вакцинации и лечении их против лептоспироза.

Установлено, что В-активин при применении в смеси с лептоспп-розной вакциной является стимулятором и повышает иммунный ответ у поросят и телят, а в сочетании с гипериммунной противолептоспироз-ной сывороткой и стрептомицином повышает эффективность способа лечения телят и поросят.

Усовершенствована схема- специфической профилактики лептоспироза свиней, позволяющая профилактировать аборты у супоростных свиноматок и заболеваемость поросят.

Получены новые данные о длительности и напряженности иммунитета у поросят и телят и определены сроки их ревакцинации против, лептоспироза.

Впервые сконструирован аллерген для диагностики лептоспироза у крупного рогатого скота и свиней и разработан серологический способ диагностики на основе микроточечного иммуноферментного анализа (дот-блоттинг).

На основании полученных данных усовершенствована инструкция о мероприятиях до профилактике и ликвидации лептоспироза животных.

Практическая значимость полученных результатов. Впервые в динамике изучена эпизоотическая ситуация по лептоспирозу крупного рогатого скота и свиней в. Республике Беларусь, выявлена этиологическая структура лептоспир, уточнены резервуары лептоспир. Предложены новые способы диагностики, лечения, профилактики и организации мер борьбы с лептоспирозом крупного рогатого скота и свиней.

Для /внедрения в производство предложены следующие разработки:

"Наставление по применению В-активина при болезнях молодняка", утверждено ГУВ при Госкомиссии Совмина СССР по продовольствию и закупкам 5-октября 1989 года.

"Наставление по применению вакцины поливалентной "БГНКЙ" против лептоспироза животных", -утвержденного ГУБ ИСК РСФСР 20 апреля

.1992 года.

"Способ изготовления аллергена ЕВИ для диагностики лептоспи-розз свиней", авторское свидетельство на изобретение М 1795190 с приоритетом от 17.12.1990г., выданное 8.10.1992г. Госкомизобрете-ннй СССР.

"Способ лечения лептоспироза крупного рогатого скота" -патент на изобретение N 2017485 с приоритетом от 1.06.1991г., выданный 15.08.1994г. Роспатентом. •

"Временная инструкция по изготовлению, контролю и применению аллергена для диагностики лептоспироза у крупного рогатого скота и свиней" -утверждена ГУВ Минсельхозпрода РБ 28.04.94г.

"Способ 'иммунизации крупного-рогатого-скота и свиней против лептоспироза". Положительное решение Роспатента от 28.07.1994 года о выдаче патента на изобретение по заявке 5020135/13 (077142).

"Способ диагностики лептоспироза свиней".- Положительное решение Роспатента от 26.10.1994 года о выдаче патента на изобретение по заявке 5039588/13 (009253). •

"Инструкция о мероприятиях по профилактике и оздоровлению животных от лептоспироза", утверждена Минсельхозпродом РБ 30 января 1996 года.

Экономическая значимость полученных результатов. Использование Е-активина в комплексной терапии при лептоспирозе у крупного рогатого скота и свиней сокращает сроки 'их лечения .на 4-5 дней и летальность на 20-30^. Экономическая эффективность комплексной терапии с применением В-активина при лептоспирозе у крупного рогатого скота и. свиней составляет - соответственно 11,06 и .10,63 руб. на рубль затрат. '

Азидин при лечении животных, больных- лептоспирозом, и лептос-пироносителей предупреждает летальный исход, сшфащает сроки лечения и освобождения организма от дептоспир, Экономическая эффективность применения азидина составляет .83,7 руб. на рубль затрат.

Рззработанный нами' иммунофермэнтный анализ "на основе дот-блоттинга при диагностике лептоспироза.свиней повышает производительность труда, исключав* использование живых культур лептос- . пир и тем самым устраняет угрозу заражения лептоспирами работников лабораторий.

'■ .. Сконструированный нами аллерген для диагностики лептоспироза у крупного рогатого скота и свиней является высокоэффективным пре-

паратом, который значительно повышает производительность труда к является безопасным для ветеринарных специалистов. Экономическая эффективность применения аллергена для диагностики лептоспироза составляет у крупного рогатого скота 20,26 руб. и свиней 16,94 руб. на рубль затрат. .

Двукратная иммунизация свиноматок против лептоспироза первый раз перед осеменением и второй - за 25-40 дней перед опоросом про-филактирует аборты, создает более напряженный колостральный иммунитет поросят. Экономическая эффективность предлагаемого способа иммунизации свиноматок против лептоспироза составляет 11,66 руб. на рубль затрат (в ценах 1991 года).

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- Закономерности эпизоотического процесса при лептоспирозе крупного рогатого скота и свиней в Республике Беларусь;

- Аллергическая и серологическая диагностика лептоспироза у крупного рогатого скота и'свиней;

- Коррекция иммунного ответа у крупного рогатого скота и свиней при вакцинации против лептоспироза;

- Терапевтическая и лептоспироцидная эффективность, азидина и В-ак-тивина при лептоспирозе крупного рогатого скота.и свиней;

- Усовершенствованная система профилактики и оздоровительных мероприятий при лептоспирозе крупного рогатого скота и свиней.

Личннй вклад соискателя. Материалы по изучению эпизоотической ситуации по лептоспирозу крупного рогатого скота и свиней в Республике, Беларусь, влияние В-активина на иммуногенез у животных при вакцинации против.лептоспироза,.. определению терапевтической и жеа-тоспироцидкой эффективности В-активина и азидина при указанной болезни, разработке аллергического метода диагностики лептоспироза у животных, созданию" усовершенствованной системы специфической профилактики лептоспироза у крупного рогатого скота и свиней получены лично автором.

Ишуноморфодогйческие изменения в лимфатических узлах, селезенке, тимусе.и костном мозге, вакцинированных поросят и телят изучались совместно с' доцентами кафедры патанатомии и гистологии ВГАВМ И. А. Анисишм, В.В.Вантеевда и зав.лабораторией лейкоза Бел-НИИЭВ ш.С.Н.Выпелесского А.Г.Драгуном. .

Разработка метода мшфоточечного иммуноферментного анализа на основе. дот-Одоттинга для диагностики .лептоспироза! у свиней прово-

дялась совместно с М.С.Яаковым, В.М.Жаковым, Ю.С.Сергеевым, С.Ю.Пчелшщевда и С.В.Юровым.

"Инструкция о мероприятиях по профилактике и оздоровлению животных от лептоспироза" подготовлена.в соавторстве с.Н.Шпилевским, Н.В.Савицким и В.П.Бойко.

Апробация результатов диссертации. Результаты исследований доложены и обсуждены нз Международном семинаре (1992, Санкт-Петербург), Всесоюзных конференциях (1988, Львов; 1989, Каменюки; 1989,1990, Кишенев; 1990, Свердловск; 1991, Новосибирск; 1992, Бишкек; 1992, Москва; 1992, Смоленск; 1993, Кайшядорис), Республиканских (1990, Витебск; 1991,1992, Минск; 1993, Гродно; 1993, Витебск), Областных (1990, Витебск), на итоговых научных конференциях профессорско-преподавательского состава Витебской государственной академии ветеринарной медицины (1987-1995).

Опубликованное»» результатов. Основные положения диссертации опубликованы в 40, научных работах.

Структура н обьеа йгосертзцки. Диссертация изложена на 360 страницах машинописного текста и включает введение,: общую характеристику работы, основную часть, выводы,:список использованной ли-терзтуры и приложения. ■/

Работа' шаострирована 68 таблицами* 8 рисунками и 27 страницами приложения.

Список использованной литературы включает .634. источника, из них 209 иностранных авторов. /■•■.'

ОБЩАЯ МЕТОДИКА И ОСНОВНЫЕ МЕТОДЫ ИСШЕДОВАНИЯ

Основная .часть экспериментальной работы выполнена в 1983-19Qß годах на кафедрах эпизоотологии и патологический анатомии и гистологии болезней сельскохозяйственных животных. Витебской государственной академии ветеринарной медицины:и в ряде хозяйств Республики Беларусь.

Экспериментальные, исследования проведены на 626 свиньях^ 546 головах крупного рогатого скота разных возрастных групп, .'83 кроликах, 5 морских свинках, 580 золотистых хомячках и 146 белых мышах. В производственных опытах использовали более чем 232000 'свиней и крупного рогатого скота.

Материалом для изучения эпизоотической ситуации служили данные ветеринарной отчетности Главного управления ветеринарии Минсельхозпрода РБ и результаты обследования неблагополучных по леп-тоспирозу хозяйств.

Эпизоотологическое исследование и математические расчеты показателей эпизоотического процесса при лептоспирозе проводили по методическим рекомендациям А.А.Глушкова и А.А.Конопаткина (1981).

Этиологическую структуру лептоспир у жиеотных определяли по результатам серологических и бактериологических исследований, идентификацию выделенных штаммов проводили в перекрестной BfA (Ю.А.Малахов, А.Н.Шуплико, В.С.Соловьева, 1977) с лептоспирами 23 серологических групп и в реакции иммуноадсорбцгш по методике (W.Kmety, 1963; ¡0.Г.Чернуха, 1967).

Для выделения культур лепгосгоф использовали разные питатель-ные среды; сывороточную на- фосфатном буфере, Карггофа, твин-альбу-миновузо сывороточную Эллиса и твин (полисарбит)-альбуминовую Эл-лингаузена.

Вирулентность штаымов-изолятов иаучади нз крольчатах 1-4 не- ' дельного возраста и золотистых хомячках..

Сроки наступления и напряженности иммунитета у подопытных животных оценивали по. титру противолептоспирозных иммуноглобулинов и превентивной активности сыворотки крови (Ю.А.Малахов, Р.М.Алехин, 1976). Для определения лептоспироноситедьства и иммунологических показателей у диких свободноживущих животных в эпизоотических очагах лептоспироза проанализированы собственные и результаты бактериологических и серологических исследований, полученные республиканским Центром гигиены и эпидемиологии.

Для изыскания эффективных 'иммуностимуляторов,, проведена серия опытов.

В первом опыте изучали влияние В- Т-активина и интерферона лейкоцитарного свинного с кнактивированным индуктором нз иммуногенез у кроликов при вакцинации против лептоспироза. Опыт проведен на 70 серонегативных к возбудителю лептоспироза кроликах. Иммунитет у кроликов определяли по титру противолептоспирозных агглютининов через 7, 14, 21 и 30 дней после прививки.

Во втором опыте проведены исследования по изучению елияния В-активина на иммунореактивность свиней и крупного рогатого скота при вакцинации против • лептоспироза.Опыт поставлен на 40 поросятах

крупной белой породы в возрасте 3-3,5 месяцев, разделенных на 4 равные группы. Поросятам 1-й группы вводили вакцину против лептос-пироэа в смеси о В-активином; 2-й группе - вакцину; 3-й группе -В-активин; 4-ой группе - 0,852 раствор натрия хлорида (контроль).

По аналогичной схеме поставлен опыт на 40 телятах черно-пестрой породы 3-3,5 месячного возраста.

Вакцину вводили внутримышечно, в дозах: поросятам - б см3, телятам - 4 см?, В-активин применяли в дозе 1,0 мкг/кг живой массы. Формирование противолептоспирозного иммунитета оценивали по титру противолептоспирозных иммуноглобулинов -и показателям превентивной активности сыворотки крови животных. Исследования сывороток крови проводили перед опытом и через 7, 14, 21 и 30 дней после вакцинации.

В третьем опыте изучали длительность и напряженность иммунитета у свиноматок и колостральный иммунитет у поросят при разных сроках вакцинации против лептоспироза. Исследования выполнены на 40 свиноматках, серонегативных к возбудителю лептоспироза, разделенных на 4 группы. Свиноматок 1-й группы иммунизировали вакциной против лептоспироза двукратно: первый раз- перед осеменением, второй раз- за 35-40 дней до опороса;. свиноматок 2-ой группы прививали вакциной однократно перед осеменением, свиноматок 3-й группы-вакцинировади однократно за 35-40 дней до опороса;: свиноматки 4-й группы служили контролем (невакцинированные). Формирование иммунитета оценивали по титру противолептоспирозных агглютининов и показателям превентивной активности сыворотки крови у свиноматок и новорожденных поросят.

В четвертом опыте изучали оптимальные сроки первой ревакцинации свиней и крупного рогатого скота. Исследования проводили на 120 поросятах и 115 телятах в возрасте 1>5-2,5 мес. В первом случае поросят 1-й группы (п = 50) иммунизировали против лептоспироза двукратно е интервалом в 14 дней и ревакцинировали через 6 месяцев; поросят 2-й группы (п - 50) прививали также двукратно и ревакцинировали через З месяца; поросята 3-й группы (п =■ 20) служили контролем (невакцинированные).■ По такой же схеме поставлен опыт и на телятах. У - подопытных животных агглютинирующую, превентивную активность сыворотки крови и уровень Ig G и М определяли перед вакцинацией и через 30, 60, 90, 100, 150, 180, 190, 270 и 360 дней после иммунизации против, лептоспироза. •

Пятый опыт по изучению иммуноморфологии проведен на 48 поросятах и 48 телятах в возрасте 3-3,5 месяцев по следующей схеме. Поросят 1-й группы (п = 15) прививали вакциной против лептоспироза в ' смеси с В-активином; поросят 2-й группы (п « 15) иммунизировали, только вакциной против лептоспироза; поросятам 3-й группы (п = 15) вводили только В-активин; поросята 4-й группы (п = 3) служили контролем. ,По аналогичной схеме проводшш опыт и на телятах. Исследования проводили через 7,14 и 21 день после вакцинации. В указанные сроки из каждой группы подопытных животных убивали по 4 животных для иммуноморфологических исследований.

Шестой опыт по испытанию с лечебной целью В-активина при лептоспирозе проведены на 80 поросятах-сосунах и 80 телятах в возрасте 1-1,5 мес. разделенных на 8 равных групп. Животным 1-й группы вводили сыворотку против лептоспироза, В-активин и стрептомицин; 2-й группы- сыворотку протиЕ лептоспироза и стрептомицин; 3-й группы- сыворотку против лептоспироза и В-активин; 4-й группы-В-активин и стрептомицин; 5-й группы -В-активин; 6-й группы- сыворотку против " лептоспироза; 7-й группы- стрептоклцин; 8-й группы-0,85Х-ный раствор натрия хлорида. . .

В-активин вводили подкожно в дозе 0,5 мкг/кг живой массы в сутки в течение 5-7 дней, поливалентную гипериммунную сыворотку против лептоспироза вводили 2 раза с интервалом 48 часов подкожно в дозе 1 аР/кг живой массы и стрептомицин по 1DDDD ЕД/кг живой массы 2 раза в день в течение 5-7 дней подряд.

Чувствительностьлелтоспир к химиотерапевтическим препаратамам; пицшшшу, гентамицину, канамицину, клафорану, морфоциклину, нео-мицину, пшшмиксину, рифампицину, стрептомицину, азидину, диаме- . дину и трихополу изучили in vitro и in vivo.

Аллергены для диагностики лептоспироза у крупного рогатого скота и свиней готовили из лелтоспир серогрупп: Pomona, Tarassovi, Icterohaemorrhagiae, Canicola,;Grippotyphosa, Hebdomdis, Seyroe и Saxkoebing. Для разрушения лептоспир использовали ультрозвуковой диспергатор (УЗДП-1), концентрирование лептоспир проводили на установке полых волоки ЛШ-6 ' (ультрофилътрационная колонка), для удаления примесных белков, . культуры лептоспир подвергали диафиль-трации против 4-х объемов фосфатно-буферного раствора. После озвучивания лептосшфозньш дезинтеграт автоклаЕировали, : фильтровали и подвергали контролю. • ...".'

В опытах применяли поливалентную вакцину ВГНКИ против лептос-пироза животных, двух вариантов, изготовленных Армавирской и Витебской биофабрикой; В- и Т-активин, изготовленный Покровским заводом биопрепаратов; интерферон- изготовленный институтом Иммунологии Минмедбиопрома Российской Федерации; Культуры возбудителя лептоспироза (штамм ВГНКИ-6) серогруппы - Pomona, ЬД5д 22 микробные клетки и ГДР - 20, серогруппы - Pomona, ЬД^- 62 микробные клетки для золотистых хомячков.

Морфологические исследования крови и фагоцитарную активность лейкоцитов определяли по общепринятым методам (А.А.Кудрявцев, 1052; В.М.Еерман, С.М.Славская, 1958; А.И.Иванова, Б.А.Чухловина, 1967). Завершенный фагоцитоз учитывали по методу О.Г.Алексеевой и А.Г.Волковой (1966). В качестве тест-микроба использовали культуру E.coli и L.pomona. Содержание РНК в лимфоцитах выявили по методу Браще в модификации М.С.Жакова и И.М.Карпутя (1967).

Для изучения аутоиммунных реакций в крови определяли число бляшкообразных.клеток (БОК), используя:метод Йерне в модификации Н.Н.Клемпарской,'Р.Н.Ходановой (1970).'

Количество Т- и В-лимфоцитов в периферической крови и их.функциональную оценку определяли по методу A.M.Цымбала и соавт., (1983), А.Я.Пустовара и соавт., (1988).

Содержание общего белка в сыворотке крови определяли рефрактометрически, а его фракций -методом диск-электрофареза в полиакри-ламидном геле (В.М.Ходод, Р.Ф.Ермолаева, 1988). Содержание иммуноглобулинов класса S и М определяли методом радикальной иммуно-диффузии в геле по V.Mancini (1965), а также использовали "Набор препаратов для экЕпесс-индикащш иммуноглобулинов в реакции латекс-агглютинации и оценки иммунного статуса, крупного рогатого скота и свиней", полученные из лаборатории иммунологии и биотехнологии ВИЭВ' им. Я. Р.Коваленко. Естественную резистентность организма изучали по состоянию бактерицидной"активности сыворотки крови по Монселю и Треффенсу в модификации О.В.Смирновой и Т.Д.Кузьминой (1960). В качестве тест-микроба использовали суточную культуру E.coli. Лиэоцимную. активность . сыворотки крови исследовали с тест-культурой Micrococcus Lysodeicticus по В.Г.Дорофейчику (1968). Активность комплемента сыворотки крови определяли с использованием гемолитической системы по Ю.М.Маркову (1973).

При подсчете клеток костного мозга придерживались унитарной теории кроветворения, дополненной Л.И.Чертковым и А.И.Воробьевым (1973), М.Г.Абрамовым (1978).

Материал, (лимфатические узлы, селезенка, тимус и костный мозг) предназначенный для иммуноморфологических исследований, фиксировали в жидкости Карнуа, подвергали уплотнению путем заливки в парафин по общепринятой методике (Г.А.Меркулов, 1969), а также замораживали и готовили срезы.

Для изучения общих структурных изменений срезы окрашивали ге-мотоксидин-эозином, для дифференцировки иммунокомпетентных клеток в органах иммунной системы - по методу Браше. Подсчет клеточных элементов производили в .50 полях зрения микроскопа (объектив 100, окуляр 5, бшокуляр 1,25) с использованием сетки Стефанова.

Расчет экономической эффективности результатов исследования проводили по методике, утвержденной МСХ СССР в 1982 году.

Статистическую обработку цифрового материала осуществляли на ' ЭВМ'- 1ВМ РС АТ-3680Х -по методике В.П.Ашарина и А.А.Воробьева (1867), а также Е.В. Монцевичуте-Зрингенс (1964) с использованием таблиц А.Б.Стрелкова (1966).

Рисунки выполнены на ЭВМ - 1Ш РС АТ-3860Х по программе Гарвардского университета "Оагуогс! БгарМсз V. 3.0".

РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Эпизоотический процесс при лептоспирозе крупного рогатого скота и свиней в Республике Беларусь

Лептоспироз животных.имеет значительное распространение в Республике Беларусь. По республике с 1965 по 1995 тг зарегистрировано, неблагополучных пунктов по лептоспирозу среди крупного рогатого скота и свиней соответственно 378 и 1389, заболеваемость (на 100 тыс. поголовья) составила - 4,76 и 63,1 голов и коэффициент летальности -0,150 и 0,207. Наиболее неблагополучными областями по лептоспирозу крупного рогатого скота и свиней являются Витебская, Гомельская и Брестская области. За последние 5 лет в Республике количество неблагополучных пунктов по лептоспирозу крупного рогатого скота по сравнению с периодом (1971-1975гг) уменьшилось в 2,3

рагз, а заболеваемость в 9,7 раза, в тоже время коэффициент летальности увеличился в 2,7.раза. Наиболее высокие показатели по распространению л ' заболеваемости свиней лептоспирозом в целом по республике приходились на 1978-1933 годы. В этот период зарегистрировано 356 неблагополучных пунктов, заболеваемость составила 89,41 свиней на 100 тыс. поголовья при индексе летальности 0,23. В последние гады наблюдается тенденция к сокращению распространения лептоспироза среди свиней. Так, в 1991-1995гг по сравнению с 1976-1980 годами количество неблагополучных пунктов по лептоспиро-зу свиней сократилось в 4,2 раза, заболеваемость в 3,5, коэффициент легальности в 1,8 раза.

Приваяентность среди крупного рогатого скота в эпизоотических очагах составила 23,87%, в неблагополучных пунктах- 10,14% среди свиней- соответственно 24,64 и 9,72%. .

Анализ заболеваемости крупного рогатого скота показывает, что ивкь-сентябрь приходится 79,9% заболевших животных, при этом коэффициент сезонности составляет 85,6%, а индекс сезонности- 6. Леп-тоспироз свиней протекал без выраженной сезонности. Это объясняется тем, что водный путь в распространении лептоспироза среди свиней имеет меньшее значение, чем для крупного рогатого скота.

С увеличением количества животных, вакцинированных против лептоспироза, уменьшается число заболевших этой болезнью (коэффициент парной корреляции -53). Так, количество вакцинированного против лептоспироза крупного рогатого скота увеличилось с 2,24% (1981) до 3,83% (1990), и Заболеваемость уменьшилась с 1,26 до-0,59 - в 2,1 раза. Количество иммунизированных свиноматок в эти сроки увеличилось с 42,2% до 58,24%, и заболеваемость уменьшилась с 30,38 до 14,23% - в 2,2 раза. .

Установлено, что к лептоспирозу более восприимчив молодняк. Болезнь проявляется острым, подострым и хроническим течением. У крупного рогатого скота болезнь сопровождается угнетением, желтуш-ностью слизистых оболочек, гемоглобинурией, абортами, маститами, уменьшением в крови количества эритроцитов и гемоглобина, и увеличением лейкоцитов. .

У супоростных свиноматок заболевание.сопровождается абортами, рождением мертвых или нежизнеспособных .поросят, иногда анемичностью слизистых оболочек, некрозами ушных раковин, хвоста, у поросят растройством желудочно-кишечного тракта. При эксперименталъ-

ном. заражении'Поросят-сосунов,'Подсвинков и телят установлено, что между возрастом животных и остротой проявления инфекционного процесса существует обратная зависимость, т.е.. чем моложе животное, тем острее протекает инфекционный процесс.

Наибольшую частоту проявления лептоспироза у крупного рогатого скота отмечали в 1877-1378 к в 1982-1983 годах. Интенсивность проявления эпизоотического процесса.лептоспироза у крупного рогатого скота в указанные годы, на наш.взгляд, связана с увеличением количества выпавших осадков. По данным гидрометцентра республики в эти сроки количество осадков выпало на 117 мм больше по сравнению со среднегодовым показателем за последние 30 лет.

Между географическим распространением лептоспироза крупного рогатого скота и кислотностью почв пастбищ и сенокосных угодий существует обратная корреляционная зависимость, с .увеличением-площади угодий с кислыми почвами количество неблагополучных пунктов и число заболевших животных на этих территориях уменьшается, а в районах, где площадь угодий с кислыми почвами, составляет более 75%, отмечают единичные случаи заболевания.

Результаты серологических исследований сыворотки крови крупного рогатого скота и свиней за 1985-1990гг показывают, что га указанный период было подвергнуто исследованию 1099800 голов крупного рогатого скота и 535100 свиней, что составляет соответственно 4,11 и 3,30% от общего поголовья. Положительные результаты РМА получены у 119800 проб сыворотки крови крупного рогатого скота и 73300 свиней, что составляет соответственно 10,9 и 13,7%. Наиболее высокий процент серопозитивных животных среди крупного рогатого скота установлен в Гомельской области- 12»0% и низкий в Гродненской области- 9, IX. Среди свиней наибольшее число серопозитивных животных выявлено в Витебской области 15,2% и низкое i Гродненской - 10,2%. В отдельных хозяйствах показатель серопозитивных1 на лептоспироз животных среди крупного рогатого скота и свиней колебался от 25,4 до 38,36*.

Из числа животных, подвергнутых серологическому исследованию на наличие специфических антител к возбудителю лептоспироза в ГШ титр антител в разведении 1:800 и выше выявлен у 51,3%, а в разведении 1:10,- 1:400 у 49,7%. Установлено, что у крупного рогатого скота и свиней в сыЕоротке крови обнаружены антитела к 14 серог-руппам, из которых у 1фупного рогатого скота преобладают лептоспи-

ры серогруппы Grippotyphosa (30,ИХ), Seyroe (29,62%), Hebdomadis (13,21%), у свиней- Pomona (40,38%), Icterohaemorrhagiae (14,6%), Tarassovi (10,28%) и Grippothyphosa (6,12%). У крупного рогатого скота иногда выявляли одновременно антитела к лептоспирам Hebdoma-dis и Seyroe, у свиней к Pomona и Tarassovi.

Результаты исследований показывают, что в последние годы в республике несколько снизился процент крупного рогатого скота, реагирующего с лептоспирами серогрупп - Hebdomadis, Tarassovi, Grippothyphosa и отмечена тенденция к возрастанию к серогрушам Seyroe. У свиней установлено увеличение реагирующих животных к возбудителям лептоспир серогрупп Icterohaemorragiae,- Grippothyphosa и снижению к серогруппе - Сзп1со1а. В то'же время отмечено, что в республике незначительное количество животных стали реагировать с лептоспирами Ballmi, Pyrogenes и Cynopteri, ранее не встречающихся в регионе.

Результаты идентификации иголятов лептоспир показывает, что в республике, в этиологии заболевания животных лептоспирозом играет роль 9 серологических вариантов лептоспир, относящихся к 8 серог-руппам. Доминирующее значение при этом имеют лептоспиры серогрупп Pomona (38,1%), Tarassovi (28,5%), Srippothyphosa (14,3%) и в меньшей степени Hebdomadis (9,5%), Seyroe (9,5%), leterohaemorrhagiae (9,0%).

Анализ заболеваемости, результаты лабораторных исследований подтверждают,. что основным .источником возбудителя лептоспироза в республике являются животные и лептослироносители, а резервуаром инфекции- мышевидные грызуны. На основе анализа республиканского Центра гигиены и эпидемиологии и собственных данных установлено, что. в различных природно-климатических районах республики инфицирование лептоспирами выявлено у 15 из 22 видов мелких млекопитающих-, обитающих в естественных биотопах.. Наиболее часто инфициро-ванность лептоспирами регистрировалось у популяций полевой мыши .(16,3%)., полевки-экономки (13,8%), серой крысы (13,1%), обыкновенной полевки; (11,2%), чёрной крысьг (11,6%), подземной полевки (11,1%), обыкновенной бурозубки (9,4%), мышь-малютка (9,3%), водяной крысы (8,4%), у остальных шести видов показатели инфицирования отмечались значительно реже. В сыворотке крови мышевидных грызунов установлены антитела к лептоспирам серогрупп Grippotyphosa, Icte-,.. rohaemorrhagiae, Pomona, Javanica, Hebdomadis, Seyroe, Balluin, Au-

tumnalis, Australis, Bataviae и Tarassovi, a также от них выделены культуры лептоспир Brippothyphosa, Icterohaemorrhagia, Hebdomadis и Seyroe. Установлено, чем выше ивфицированность млекопитающих лептоспирами, тем выше заболеваемость и инфицированном» сельскохозяйственных животных, обитающих в данном регионе.

Коррекция иммунного ответа организма у крупного рогатого скота и свиней при вакцинации их против лептоспироза

При испытании препарата В-активина, Т-активина и интерферона лейкоцитарного с нёинактивированным индуктором на 70 кроликах установлено, что В-активйн обладает наиболее выраженными иммуностимулирующими свойствами и способствует повышению эффективности иммунизации кроликов против лептоспироза. • . •

Результаты исследований, полученные в опыте на кроликах послужили основанием для дальнейшего изучения влияния В-активина на им-муноморфогенез у телят и поросят при вакцинации против лептоспироза.

Установлено, что- В-активин при совместном введении-о вакциной против лептоспироза .не вызывает усиление реактогенности действия вакцины и сдерживает развитие аутоиммунных реакций. В периферической крови телят и поросят, иммунизированных вакциной против лептоспироза в- смеси с В-актиЕином, отмечено более выраженное увели- ■ чение лейкоцитов, процент лимфоцитов в дейкограмме изменялся незначительно, а у животных, обработанных одним В-активином увеличивается . Количество сегментоядерных вейтрофилов, наоборот, возрасдо у телят и поросят, вакцинированных без В-активина и уменьшилось у обработанных одним В-активином. У иммунизированных телят и поросят ■ вакциной в смеси с В-активином количество этих клеток сохранилось на уровне контроля,. У телят и поросят 1-й группы в поствакцинальный период более активно происходят цитохимические изменения в крови, выражающиеся увеличением в лимфоцитах содержания РНК. У животных, иммунизированных, против лептоспироза вакциной в сочетании о В-активином, уровень В- и Т-лимфоцитов был значительно выше по

сравнению с животными привитых только одной вакциной, повышалась их функциональная активность. У этих же животных повышалась фагоцитарная активность нейтрофилов, лизоцимная, бактериальная, комп-лементирующая и превентивная активность сыворотки крови, значительно увеличивалось количество общего белка и гамма-глобулиновой фракции, иммуноглобулинов М и G в сыворотке крови, а также достоверно повышался титр агглютининов к возбудителю лептоспироза.

В регионарных месту введения вакцины лимфатических узлах телят и поросят обнаружилось большое количество вторичных лимфоидных фолликулов, в реактивных центрах которых содержалось много блас-тов, клеток в состоянии митоза. В пэрокортикальной зоне возрасло количество клеток в состоянии митоза. В мозговых тяжах усилилась бдасттрансформация. лимфоцитов, увеличение числа плазматических клеток, за счет юных и зрелых плазмоцитов. Митотическая активность клеток в мозговых тяжах сохранялась на высоком уровне. В костном мозге установлено повышение содержания клеток миелобластического ряда за счет пролиферации нейтрофилов.

В-активин в смеси с вакциной против' лептоспироза у иммунизированных телят и поросят вызывает более выраженное развитие иммунной перестройки организма, по сравнению с животными, не подвергающимися обработке В-активина.

Совершенствование методов диагностики

лептоспироза . • ■'• .

При лептоспирозе сельскохозяйственных животных аллергическая диагностика до настоящего времени изучена и рззработана недостаточно.

Нами сконструировано два аллергена для диагностики лептоспироза животных.

При приготовлении аллергена для диагностики лептоспироза свиней лептоспиры серогрупп rarassovi,. Pomona, Icterohaemorrhagiae, Camcola, Saxkoebing: и Qrlppotyphosa выращивали на питательных средах, смешивали и полученную бактериальную взвесь подвергали воздействия ультрозвунового диспергатора УЗДП-1 при частоте 20 кГц, мощности 100 Вт/см*ультрозвуковых волн в течение 20 мин после озвучивания дезиятеграт автокяавировали при 1 атм в течение.20 минут, отделяли аллерген с помощью центрифугирования при 85000 g в

течение .30 минут, надосадочную часть фильтровали и автоклавирова-ли.Содержание белка доводили до 10 мкг/см и расфасовывали.

При конструировании •. аллергена для диагностики лептоспироза у крупного рогатого ската и евшей использовали культуры лептоспир Pomona, Tarassovi, Canicola, Hebdomadis, Seyroe, Grippotyphosa и Icterohaemorrhagtae. Культуры лептоспир выращивали на водно-сывороточной и твин-альбуминовой питательной среде. Концентрирование лептоспир проводили на установке полых волн (УПВ-6) до 900-1200 микробных клеток в поле зрения микроскопа. Для удаления примесных белков-лептосшрозные'культуры подвергали-диафильтрации' против 4 объемов фосфатно-буферного раствора. Полученную бактерицидную суспензию подвергали воздействию ультрозвуковых волн. После озвучивания лептоспироэный дезинтеграт автоклавировали, фильтровали и расфасовывали. Аллергены проверяли на стерильность, безвредность, активность и специфичность. У. сенсебшшзированных животных при внут-рикожном введении аллергена в дозе 0,2 см*положительная реакция у крупного рогатого скота проявляется через 72 часа и сопровождается утолщением кожной складки на 3 мм и более, у свиней- через 24 часа и характеризуется развитием очагового или разлитого серозного вос-поления кожи в месте введения аллергена.

С целью совершенствования методов диагностки наш разработан способ микроточечного анализа (дот-блоттикг) для определения леп-тоспирозных антител в сьшоротке крови свиней. Впервые сконструирован лептоспирозный.диагностикум для скринингового экспресс-анализа.

При изготовлении диагностикума (антигена) на питательных средах выращивали лептоспиры оерогрупп Pomona, Tarassovi, Srippotyp-hosa, Icterohaemorrhagiae, canicola, Hebdomadis и Seyroe, смесь культур центрифугировали-при 45000 g в течение 15 мин, надосадочную жидкость удаляли, полученный осадок подвергали дезинтеграции при частоте 20 'кГц, мощности 100 Вт в течение 2 минут, экстракцию антигена проводшш' 50%-ым этиловым спиртом в течение 24 часов при температуре минус 20 С и 90%-ым' этиловым спиртам при температуре минус 20 С в течение б суток, •: отделение антигена осуществляли центрифугированием при 80000 g в течение 30 минут, надосадочную жидкость удаш^ли и доводили концентрацию белка до 20 мкг/см .

Набор для ■ проведения иммуноферментного анализа для выявления дептослирозных-антител в сыворотке.крови.свиней.включает- в себя:' комплемент нитроцеллюлозам фильтров • (блоков), сенсибилизирован-

ных лептоспирогными антителами серогрупп Pomona,Canteóla, Tarassovi, Icterohaemorrh3giae, Grippotyphosa, Hebdomadís, Seyroe, конъюгат А с пероксидагой хрена, концентрат буфера, бычий сывороточный альбумин, хромоген, растворитель для хромогена, гидроперит.

При наличии в исследуемом образце лептоспирозных антител на нитроцеллюлозном блоке появляется окрашенная .в синий цвет точка. Интенсивность окраски пропорциональна титру лептоспирозных антител в образце.

Установлено, что дот-блоттинг по своей чувствительности и специфичности не отличается от ИФА на планшетах со спектрофотометри-ческим детектированием результатов при определении лептоспирозных антител и превосходит в 2-3 раза В4А. Исследованиями показана возможность использования дот-блоттинта для выявления лептоспирозных антител в сыворотках крови свиней.

Совершенствование методов лечения и специфической профилактики лептоспироза животных

Для лечения больных и санации животных-лепгоспироносителей г нашей республике и за рубежом наиболее широко применяются.стрептомицин и дегидрострептомицин. Однако, при этом не исключена возможность появления стрептомицкноустойчивых расс лептоспир и у крупного рогатого скота, особенно у быков, он может вызывать аллергическую реакцию немедленного типа. В связи с этим наши исследования были направлены на изыскание новых химиотералевтических препара- у тов, обладающей еысокой лептоспироцидной активностью. . Чувствительность лептоспир серогрупп Grippothiphosa, Parana, Icterohaemorrha-giae, Hebdomadis, Seyroe, Tarassovi и Canicola определена in vitro к 12 химиотерапевтическим препарата,«: ампициллину,- гентамицину.ка-намицину, клафорану.морфоциклину, неомицину, полимиксину, рифампи- ' цин'у, стрептомицину, ааидину, дйамедину и трихополу. Установлено, что ампициллин, канамицга и стрептомицин в концентрации 6,5 и 4,0 мкг/см вызывает полную гибель лептоспир. Из химиотерапевтических препаратов наиболее выраженной лептоспироцвдной активностью обладали азидин и диамедин в концентрации 1,2 и 4,5 мкг/см3.- Трихопол . даже в концентрации 1000 мкг/см не проявлял бактерицидного дейс- , твия к дептоспирам. ■ . . 4 - ,.

Отмечено, что наилучшей терапевтическое эффективностью in vivo

-гона золотистых хомячках обладают такие препараты как азидин, диаме-дин, канамицин и стрептомицин.

Испытание азидина проведенное в неблагополучных по лептоспиро-ау хозяйствах на крупном рогатом скоте и свиньях, больных лептос-пироаом, и санации животных-лептосшфоносителей показало, что при введении азидина подкожно в первый и третий день лечения в дозе 4,0 мг на 1 кг живой массы в форме 7%-го водного раствора клиническое выздоровление наступало к 15-21 дню, а освобождение от леп-тоспироносительства происходило к 5-7-му дню после лечения.

В более малых дозах эффективность азидина была значительно ни-,же, а в более высоких - азидин показал'высокую терапевтическую и лептоспироцидную эффективность, но вызывал через 0,5-1,0 ч у отдельных животных осложнения в виде беспокойства, подергивания головы, тремор ши шеи, головы, проходящие без оказания лечебной помоци.

Данные экспериментального и производственного испытаний позволили рекомендовать азидин при лечении больных и санации живот-" кых-лептосшранроитедей.

При изучении влияния "В-активина на терапевтическую эффективность некоторых препаратов, применяемых при лечении животных, больных дептоспирозоы, наш: установлено, что В-активин при введении подкожно в.дозе О,"5 мг на 1 кг живой массы один раз в сутки в течение 5-7 дней.в сочетании с гипериммунной 'противолептоспироэной сывороткой и. стрептомицином на 7-10-й день после применения действует так, что. отмечается . улучшение общего состояния организма, прекращение лихорадки, происходила нормализация функциональной деятельности желудочно-кишечного тракта, у телят заметно снижалась желтуинооть -видимых слизистых оболочек и гемоглобинурия. В эти сроки показатели гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитоз и фагоцитарной активности нейтрофилов крови были значительно выше по сравнении с грушими животных, которые В- активин не применяли.

Установлено, что В-активин оказывает на больной организм при дептоспирозе фармакологическое воздействие. В группах подопытных животных,- которым применяли гипериммунную сыворотку против деп-тоспироза, стрептомицин в сочетании с В-активином, наступало 1007.-е выздоровление животных и/было выше на 20-40!!; по сравнению с другими группами, которым В-активкн не применяли.

Следовательно, комплексная терапия поросят и телят, вольных

лептоспирозом, гипериммунной сывороткой против дептоспироэа, стрептомицином и В-активиноы приводит к более быстрой нормализации клинико-иммунологического статуса организма, при этом терапевтй-ческий эффект под воздействием В-активина усиливается за счет повышения уровня естественной' резистентности организма больных животных. .

При изучении противолептоспирозного колострального иммунитета у поросят, полученных от 40 свиноматок, вакцинированных против лептоспироза в разные сроки супоростности, нами установлено, что антитела к лептоспирам всех серологических групп, входящих в ооо-тав вакцины, в сыворотке крови свиноматок 1-й группы иммунизированных двукратно: первый раз- перед осеменением и второй раз- за 35-40 дней до опороса, появились на 3-5-й день после вакцинации в титре 4,3 ± 0,3 log- , на 15-й день - 5 + 0,3 log , к 30-му дню достигал максимального уровня- 6.+ 0,4 log , к ?9-му дню он снижался до. 4,7 + 0,2 logg после повторной вакцинации (через 79 дней после первичной иммунизации) титр антител нарастал и достигал наибольшего знзчения на 110-й день супоростности - 9,8 + 0,4 logg.

В сыворотках крови свиноматок 2-й группы, иммунизированных од-. нократно перед осеменением, титр антител на 3-й день после вакцинации составлял 4,2 +0,3 log2 и достигал наибольшего значения на 30-й день -6,7 ± 0,2 log2, в дальнейшем он снижался я к 110-иу дню составил 3,7 + 0,9 log2. У свиноматок 3-й группы, иммунизированных однократно за 35-40 дней до опороса, ' на 3-й день после вакцинации титр антител составлял 4,0'+ 0,2 log2, 15-й день - 5,1 + 0,3 log2 и 30-й день - 6,2 + 0,4 log . У животных 4-й группы агглютинирующие антитела к возбудителю Лептоспироза не выявлены.

Превентивная активность сыворотки крови свиноматок выявлялась через 20-25 дней после вакцинации их против лептоспироза и на 30-й день этот показатель достигал максимума. Превентивная активность сыворотки крови была наиболее выражена у свиноматок 1-й Группы после второй вакцинации через 30 дней, на 110-й день супоростности она защищала от гибели 80% золотистых хомячков,, зараженных вирулентной культурой L.pomona в дозе 10 Ш50 Защитные свойства сыворотки крови свиноматок 2-й и 3-й групп в эти сроки были ниже, чем у свиней 1-й группы и предохраняли от гибели соответственно 20 и 40% золотистых хомячков. Сыворотка крови свиноматок 4-й группы не обладала превентивными свойствами. : .,:

; Превентивная активность сыворотки крови поросят была установ- ' лена после первого сосания' молозива. У поросят от свиноматок 1-й группы сыворотка крови на 3-й день жизни защищала от гибели 60% золотистых хомячков, поросят от свиноматок 2-й группы- 10%, поро- ■ сят от свиноматок 3-й группы.-307. золотистых хомячков. .Через 35 дней после приема молозива превентивная активность сыворотки крови поросят от свиноматок 1-й группы защищала 20% золотистых хомячков, а от поросят, полученных от свиноматок 2-й, 3-й и 4-й групп не обладала превентивной активностью.

На основании'подученных результатов в неблагополучных по леп-тоспирозу хозяйствах с целью повышения невосприимчивости, профилактики абортов у свиноматок и создания более напряженного колост-рального иммунитета у поросят, свиноматок рекомендуем вакцинировать два раза: ■ 1-й раз после отъема поросят перед .осеменением и ■ 2-й раз -за 35-40 дней до опороса.

В основе профилактики лептоспироза лежит активная иммунизация ■животных. Учитывая; случаи прорыва иммунитета у молодняка через 5-6. ыес. после вакцинации его против лептоспироза в 1-2,5 месячном возрасте, перед, нами стояла задача - установить оптимальные сроки первой ревакцинации свиней и крупного рогатого скота. Опыты были проведены на 120,поросятах и 115 телятах 1,5-2,5-месячного возраста" и 430 золотистых,, хомячках.

Исследованиями установлено, что антитела к дептоспирам всех се-' рологических групп, входящих в состав вакщш, появлялись в сыворотке крови поросят и телят первых групп на 3-5-й день после прививки, их титр составлял соответственно 2,4 + 0,1 и 3,4 + 0,3 ; к . 25-30-му дио достигая ыаскимального уровня - 6,7 + 0,4 и 8,0 +. 0,3 log .через 3 месяца он снизился до 4,9 +0,2 и 6,9 + 0>3 спустя 6 месяцев был низким - .1,0 +'0,2 и 1,9 + 0,3 log^ ( у поросят только к L.icterhaemorrhagiae, а телят к L.seyroe ).

Титр агглютинирующих антител в сыворотке крови в FMA после ревакцинации (через '6 месяцев после иммунизации) нарастал и достиг наибольшего значения у поросят и телят на 5-10-й день - 9,7 + 0,4 и • 10,2 ± 0,4 log2соответственно, в дальнейшем он снижался и спустя 3 мес. составлял 7,9 + 0,3 и 8,5 + 0,4 loga а через 6 мес.. 4,5 + 0,4 И 6,0 + 0,4 log 2(Р< 0,05) . f

Динамика образования, агглютинирующих антител к возбудителю лептоспироза в сыворотке. 1фови молодняка вторых групп была такой же,

как и у животных первых групп. Однако нами отмечено, что после ревакцинации (проведенной через 3 мес. после иммунизации) установлено нарастание титра антител в сыворотке крови поросят и телят на Ю-й день - 10,0 + 0,4 и 10,9 + 0,3 log^соответственно, затем наблюдали их постепенное снижение и через З мее, он составлял 8,9 + 0,1 и 9,6 + 0,2 log соответственно, а через 6 мес. - 4,6 + 0,5 и 6,1 + 0,5 log (Р< 0,Ъб). . ~ ' ,

^У животных третьих групп агглютинирующих антител к возбудителю лептоспироза в FMA не установлено.

Превентивная активность сыворотки крови поросят и телят выявлена через 20-25 дней после вакцинации их против лептоспироза, максимума этот показатель достигал на 30-й день.; В этот период сыворотка крови поросят и телят защищала от гибели . соответственно : 80-, 90% золотистых хомячков, зараженных вирулентной культурой L.pomona в дозе 10 Щ . Через 3 мес. после вакцинации превентивная активность сыворотки крови подопытных животных снижалась и защища- / ла от гибели соответственно 20 и 30% золотистых хомячков, а через •-6 мес.- только 10%. '_ .

Эксперименталъ ными исследованиями установлено, что сыворотка крови свиней и телят, ревакцинированных через 3 мес. после прививки, спустя 3 и 6 мес. предохраняла от гибели соответственно 80, 90 и 60% золотистых хомячков (Р<0,5).

Сыворотка крови поросят и телят третьих групп не обладала превентивными свойствами. .

В. сыворотке крови поросят и телят первьк двух групп на 7-14-й день после вакцинации против лептоспироза отмечено увеличение количества lg M до 4,75 и 5,15 г/л (против 2,72 и 3,58 г/л), через 3 недели уровень Ig M снизился соответственно до,3,1 и 3,4 г/л. Увеличение Ig G в сыворотке крови поросят и телят до 11,34 и 17,58 г/л (против 7,74 и 13,53 г/л) установлено к 25-30-му дню после вакцина- ' ции. Спустя 3 месяца уровень Ig G значительно снизился (Р<0,05). После ревакцинации подопытных животных достоверное увеличение количества I g G наблюдалось через 15-25. дней, и его высокий . уровень сохранялся на протяжении 6 мес.

Такое несовпадение двух иммунологических реакций по времени обусловлено различием классов иммуноглобулинов. Установлено, что у свиней и крупного рогатого скота вначале (через, 2-5 дней после-вакцинации) образуются иммуноглобулины класса M (Ig M)» выявленные PMA.

Их титр нарастает и быстро снижается. Через несколько недель они могут исчезнуть. Иммуноглобулины класса в в) - нейтрализующие к .ответственные га превентивные■ свойства сыворотки антитела - выявляются позднее (через 15-25 дней после вакцинации), накапливаются медленно и сохраняются несколько месяцев после вакцинации. Устойчивость животного к лептоспирозу прямо пропорционально концентрации 1Б 0 и зависит от превентивной активности сыворотки крови. Установлено, что свиньи и крупный рогатый скот невосприимчивы к лептоспирозу до тех пор, пока сыворотка крови их в дозе О,5Эсм защищает от гибели соответственно не менее 30 и 40% золотистых хомячков, зара-ленных 10 ЦЗ вирулентного штамма лептоспйр.

Нами установлено, что у поросят и телят, вакцинированных против дептоспироза в возрасте 1,5-2,5 мео., иммунитет, способный защитить животных от болезни, продолжается до 3-х мес.

Для создания более напряженного и длительного иммунитета у по-' росяти телят, иммунизированных в возрасте 1,5-2,5 мес. против дептоспироза, первую ревакцинацию необходимо проводить через 3 мео. после прививки, а в последующем в сроки, предусмотренные наставлением по применению вакцины против.лептоспироза ВГНКИ.

ВЫВОДЫ

1. Лептосшроэ крупного рогатого скота и свиней имеет широкое - распространением хозяйствах Республики Беларусь. Самыми неблагополучными по лептоспирозу крупного рогатого скота за последние 30 лет были Витебская, Гомельская и Бреотская (24, 22 и 21%); свиней-Брестская, Гомельская и Витебская область (21, 20 и 19%) к общему числу неблагополучных пунктов до республике в целом, а наиболее благополучными в дти годы были Гродненская и Минская области (9,10 и 8,17%).

Заболеваемость лептосгшрозом на 100 тыс. поголовья крупного рогатого скота".и свиней ооотавдает от 2,37 до 7,13 и от 31,09 до 89,44 годов, распространенность - от 9 до 24% и от 8 до 21%; инфи-"одрованность - от 9,1 до 12% и от 12,2 до 15,2%; коэффициент оча-

говости - от 1,7 до 2,6 и от 3,0 до 9,77..

2. В республике лептоспироз крупного рогатого скота чаще вызывается лептоспирами групп Grippotyphosa (30,ИХ), Seyroe (29,62%), Hebdomad is (18,217.),- Pomona (5,34%), Tarassovi (4,83%), у евшей -Pomona (40,38%), Icterohaemorrhagiae (14,6X), Tarassovi (10,28%), Grippotyphosa (6,12%). Впервые в регионе у крупного рогатого скота выявлены антитела к лептоспирам Australls, Autumnalls, Ballum, Pyroxenes, Cynopteri, Javanica, у свиней - Eallum, Pyroxenes, и Cy-nopteri.

3. У телят и поросят В-активин в смеси с-вакциной'стимулирует , развитие иммунологических реакций, свидетельствующих о.формирова- • нии иммунитета против лептоспироза, которые проявляются увеличением количества вторичных лимфоидных фолликулов в лимфатических узлах и селезенке, повышением' митотической активности клеток, интенсивной плазмоцитарной реакцией, вызывает повышение титра противо-'лептоспирозных агглютининов в сыворотке крови, усиливает ее превентивную активность Т- и В-лимфоцитов, повышает фагоцитарную активность нейтрофилов, бактерицидную, лиэоцимную.и комплементарную активность, сыворотки крови, увеличивает количество.лейкоцитов, со- , держание общего белка сыворотки крови и. иммуноглобулинов класса м

и G, РНК в лимфоцитах крови, и в значительной степени препятствует развитию аутоиммунных реакций.

4. В-актиЕин и азидин обладают высокой терапевтической активностью и лептоспироцидной активностью. В-активин в дозе 0,5 иг/кг живой массы при парентеральном введении один раз в сутки в течение 5-7 дней в сочетании с гипериммунной противолептоспирозной сыво-.. роткой и стрептомицином повышает уровень : естественной резистентности организма больных животных ,и эффективность способа лечения- '. телят и поросят при лептоспирозе. .Азидин при подкожном введении, крупному рогатому скоту в.первый и третий день лечения в дозе 4,0 мг/кг живой массы в форме 7%-го. водного, раствора обеспечивает • са-нащво организма лептоспироносителей и выздоровление. клинически бальных'лептоепкрезом животных. -• .

5. Сконструированный аллерген из лептоспир групп Grippotyphosa, Icterohaemorrhagla, Canicola, Tarassovi, Pomma,, Hebddna&s и Seyroe обладает активностью и специфичностью, ' в дозе 0,2 см при внутрикожном введении выявляет аллергию, обусловленную лептоспираг ми вида interrogans'. У-сенсибилизированных лептоспирами животных

положительная реакция у крупного, рогатого скота проявляется через 72 часа и сопровождается утолщением кожной складки на 3 мм и бо-' лее, у свиней - через 24 часа и характеризуется развитием очагового или разлитого серозного воспаления кожи в месте введения аллергена. •

6. Микроточечный иммуноферментный анализ на основе дот-блот-тинга с использованием антигена, приготовленного из лептоспир се-рогрупп Pomona, Tarassovi| Grippotyphosa, Icterohaemorrhagia, Ca-nicola, Hebdomadis и Seyroe путем дезинтеграции, экстракции и центрифугирования, является эффективным способом диагностики лептоспироза свиней, определяющим.наличке иммуноглобулинов (антител) к возбудителям лептоспироза в сыворотке кроЕи, не отличается от ИФА на планшетах со спектрофотометрическим детектированием и превосходит РМА -в 2-3 раза. ■■.."■

7. Двукратная иммунизация свиноматок против лептоспироза первый раз перед осеменением и второй -за 35-40 дней до опороса про-филактируег аборты и создает более напряженный колостральный иммунитет у новорожденных поросят в сравнении с однократной иммунизацией. ■■''''■:'. '

8. При имыунизаци против лептоспироза телят и поросят в возрасте 1,5-2,5 мес..,' иммунитет, способный защитить животных от Со-'леени, продолжается 2,5-3 мес., для создания более напряженного и длительного иммунитета первую ревакцинацию необходимо проводить через 3 мес. после прививки, .а в последующем в сроки, предусмотренные наставлением по применению вакцины. .

. • . ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ

I*. ^'Наставление по применению В-активина при болезнях молодняка", утверждено ГУЗ при Госкомиссии Совмина СССР по продовольствию и закупкам 5 октября 1989 года.

2. "Наставление по применению вакцины поливалентной "ВГНКИ" против лептоспироза животных", утверждено ГУВ МСХ РСФСР 20 апреля 1992 года (взамен Наставления по применению поливалентной вакцины' "ВГНКИ" против лептоспироза .животных, утвержденного ГУВ Государственного агропромышленного комитета СССР 30.12.1986г.). ': ' 3. "Способ изготовления аллергена ВВИ для диагностики лептос- '

пироза свиней", автсрсгае свидетельство на изобретение N 1796190 с приоритетом от 17.12.1990г., выданное 8.10.1992г. Госкомизобрете-ний СССР.

4. "Способ лечения лептоспироза крупного рогатого■скота" - патент на изобретение N 2017485 с приоритетом от 1.08.1991г., выданный 15.08,1994г. Роспатентом.

5. "Временная инструкция по изготовлению, контролю и применению аллергена для диагностики лептоспироза у крупного рогатого скота и свиней" - утверждена ГУВ Минсельхозпрода РБ 28.04.94г.

6. "Способ иммунизации крупного рогатого скота и свиней против лептоспироза". Принято решение Роспатента от 28.07.1994 года выдать патент на изобретение по заявке 5020135/13 (077142).

7. "Способ ■ диагностики лептоспироза'свиней". Прйнято решение Роспатента от 26.10.1994 года выдать патент на изобретение по заявке 5038588/13 (009253).

8. "Инструкция о мероприятиях по профилактике, и оздоровлению животных от лептоспироза", утверждена Минсельхозпродом РБ 30 янва-

. ря 1996 года. ' .

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ .

ДИССЕРТАЦИИ

1. Кирпиченок В.А. Стимуляция иммунореактивности свиней при вакцинации против лептоспироза .// Эпизоотология, эпидемиология,' средства диагностики, терапии и специфической профилактики инфекционных болезней, общих длй человека и животных: Матер.Всес.конф. -Львов, 1988. -С. 174-175.

2. Кирпиченок В. А. Коррекция -иммунного ответа у свиней при вакцинации против лептоспироза // Проблемы научного обследования животноводства Молдавии: Теэ.док.конф. -Кишенев, 1990, -С.124-125.

3. Кирпиченок В.А. Лечебная эффективность В-активина при леп-тоспирозе свиней // Проблемы научного обследования животных Молдавии: Тез.докл. кокф. -Кишенев, 1990,-0.127-128.,

. 4. Кирпиченок В.А. Эпизоотическая ситуация по лептоспирозу сельскохозяйственных животных, в Белоруссии // Новое в профилактике и лечении .'сельскохозяйственных животных: ■ Рекомендации, на-уч>практ.конф., 14-15 марта 1990г. -Витебск, 1990, -С.3-4. .

5. Кирпиченок В.А. Роль В-активина при лечении поросят, больных 'лептоспироэом // Новое в профилактике и лечении сельскохозяйс- ' твенных животных1 Рекомендации науч.-практ. конф.,- 14-15 марта 1980г. -Витебск, 1990, -С.4-5.

6. Кирпиченок В.А. Усовершенствованная схема вакцинации свиней против лептоспироза У/ Профилактика и меры борьбы с болезнями молодняка сельскохозяйственных животных: Тез.докл. Всео.конф., -Витебск, 1990, -С.ЗЗЗ-334.

7. Кирпиченок В.А. Колострадьный иммунитет у поросят против лептоспироза// Профилактика, и меры борьбы с болезнями молодняка сельскохозяйственных, животных: Тез.докл.' Всес. конф. -Витебск,

1990, -С.334-335.

8. Кирпиченок В.А. Формирование природного очага по лептоспи-розу в зоне животноводческих комплексов // Матер, науч.-практ. конф.; посвященной 50-летию регулярных исследований в Беловежской пуще 19-21 декабря 1989г., Каменюки, -Минск, 1990, -С.207-208.

9. Кирпиченок В.А. Вакцинагщя свиноматок против лептоспироза // XXXIII научная конференция, посвященная 50-детию института (28-30 ноября 1990г.)s Тез.докл. науч.конф. -Свердловск, 1990, -с.85-87. ■-.'.■'. 10. Кирпиченок. В. А. ,Сергеев Ю.О. Коррекция иммунного ответа у свиней при вакцинации • против лептоспироза // Тез.докл. III ■ "Всес. конф. по эпизоотологии (24-26 сентября 1991г.) . -Новосибирск, .

1991, -С.303-305.

11. Кирпиченок В.А. :,Эпивоотологичесгаш мониторинг за лептоспи-розом животных в Белоруссии:// Тез.докл. III Всес.конф. по эпизоотологии (24-26 сентября 1991г. ) -Новосибирск, 1991, -С.323-333.

.12. Кирпиченок В.А.. Влияние В-зктивика-на кммунореактивность организма свиней при вакцинации против лептоспироза и колибактёри-оза // Ветеринарная наука - производству: Межвёд. наука/БелНКИЭВ -МИНСК, 1991, ВЫП. 29, -С. 40-45.13. Юфпиченок В.А. Лептоспироз сельскохозяйственных животных в Республике Беларусь // Пути интенсификации производства молока и мяса, профилактики болезней сельскохозяйственных животных в современных условиях. -Смоленск, 1992, -С.159-161.

'•-..■ 14. Кирпиченок В.А. Испытание препарата "А" при лептоспирозе крупного рогатого скота и i евшей // Вопросы теории и практики ветеринарии и зоотехнии: Сб.научн.тр./ Витебский вет. ин-т, -Минск,

1992, -Т. 29, -С.35-37. .

15. Кирпиченок'В. А. Иммунокорркция у крупного рогатого скота при вакцинации против дептоспироза // Проблемы моделирования патологических процессов у человека и животных и испытание биологичес-' ки активных препаратов. Международный, семинар- Санкт-Петербург, 1992, -С. 12-13.

16. Кирпиченок В. А. Вакцинацда свиней против дептоспироза // Использование физических и биологических факторов в ветеринарии и животноводстве: Мат.Всес.конф. (г.Витебск, 11-12 сентября 1991г.). -)•!.: 1992, -С.49-50. ■

17. Кирпиченок В.А. Препарат "А" при лептоспирозе крупного рогатого скота и евшей // Использование физических и биологических факторов в ветеринарии 'и животноводстве: Мат.Всес.конф.(г.Витебск, 11-12 сентября 1991г.)- -М.: 1992, -С.50-51.

18.'Кирпиченок В.А. Испытание нового препарата при лептоспирозе крупного рогатого скота и свиней //' Проблемы научного обеспечения повышения эффективности сельскохозяйственного производства: Тез.докл. III Международной науч.-практ,конф. молодых ученых и специалистов, посвященной 60-летио образования Кыргызского сельскохозяйственного института. и.). К.И.Скрябина. -Бишкек, 1992, -С.102-103.

19. Кирпиченок В.А. Вакцинация свиней против дептоспироза // Ветеринарная наука-производству: Межвед. сб. /БелНИИЭВ. -Минск,

1992, -Выл. 30, -С.47-48.

.20. Кирпиченок В.А. Скрининг лептоспироеа сельскохозяйственных животных в Республике Беларусь // Проблемы интенсификации сельскохозяйственного производства: Тез. докл.научн.-практ.конф. -Гродно,

1993, -С.166-167.

21. Кирпиченок В. А. Эпизоотология и этиология: дептоспироза . сельскохозяйственных животных в Республике Беларусь // Проблемы ветеринарной медицины: Матер.научн.-практ. конф. -Кайшядерис, 1993, -С.87-89.

22. Кирпиченок Б.А. Влияние В-активина на динамику Т- и В-лим-фоцитов у крупного рогатого скота и свиней при. вакцинации.против лептоспироза л< Вести ААН Белоруссии. -Минск, 1993, N 1, -С.93-99.

2S. Кирпиченок Б.А. Сроки ревакцинации крупного рогатого скота и свиней против лептоспироза // Ветеринарная наука - производству: Межвед. сб. /БадКИИЭБ. -Минск, 1993, -Вып.31, -0.105-112.

24. Кирпиченок.Е.А. Лептоспироэ // Выращивание и болезни со-

бак: Учеб.пособие /Н.Ф.Карасев, .С.С.Абрамов, А.И.Ятусевич и др. -М.: Ураджай, 1993, -С.243-247.

'.. 25. Кирпиченок В.А. .Кирпиченок A.B. Ревакцинация свиней и крупного рогатого скота против лептоспироза // Технология получе-. ния и выращивания здорового молодняка сельскохозяйственных живот- • ных и рыбопосадочного материала: Тез.докл. Респ.науч.-практ. конф. -Минск, 1993, -С.102-103.

26. Кирпиченок В.А. Скрининг лептоспироза грызунов // Технология получения и выращивания здорового Молодняка сельскохозяйственных животных и рыбопосадочного материала: Тез.докл. Респ.науч. конф. -Минск, 1993, -С.135-137.

27. A.C. 1796190 СССР: А 61 К Способ изготовления аллергена ВБИ для диагностики лептоспироза свиней /В.А.Кирпиченок (СССР), -N 4917634/13; Заявлено 17.12.90; Опуб. 23.02.93. Вол. N 7. -2с.

28. Кирпиченок В.А. Сроки ревакцинации свиней и крупного рогатого скота против; лептоспироза // Ветеринария. -1993. -N 4,.. -С.29-31. . .

29. Кирпиченок В. А. Влияние некоторых иммуномодуляторов на иммуногенез у ; крупного рогатого скота при вакцинации против лептоспироза // Ученые записки Витебского ветинститута. -Минск, 1993, -Т.30, -С.72-74.

. 30. Кирпиченок В.'А. Способ. изготовления аллергенз для диагностики лептоспироза у свиней // Ученые записки Витебского ветинститута. -Минск, 1993, -Т.30, -С.74-76.

31. Кирпиченок В.А. Эпизоотология и совершенствование мер борьбы с лептоспирозами крупного рогатого скота и свиней в Республике Беларусь.//Материалы. Республиканской науч.-практ.конф. по животноводству и ветеринарной медицине»; -Витебск, -1994, -С.68-69. •

32. Кирпиченок В.А, Лептослироэ // Справочник по болезням кроликов; нутрий и ондатр /Н.Ф.Карасев, В.Ф.Литвинов, С.С.Абрамов и др. тМн.: Ураджаи, 1994,-0.18-23.

' . 33. Пат. 2017485 РФ, А 61 К Способ лечения лептоспироза крупного рогатого скота /В.А.Кирпиченок. - N 4924002/15. Заявл. 1.04.91t Опубл. 15.08.94: Бюл. N15, -2с.

.34. Положительное решение ВНШ1ГПЭ от 28.07.94 по заявке N 5020135/13 на патент изобретения .-"Способ иммунизации крупного рогатого скота и свиней против лептоспироза" (Кирпиченок В. А.)

35. Положительное решение ВНИИГПЭ от 26.10.94 по заявке N

5038538/13 нз патент изобретения "Способ диагностики лептоспироза свиней" (Кирпиченок В.А., Жаков М.С., Жаков В.М., Сергеев Ю.П., Пчелинцев С.Ю., Юров C.B.). '

36. Кирпиченок В.А. Лепгоспироз // Ветеринарная энциклопедия. Изд-во БелЭН, -М. : 1995, -С.237-238.

37. Кирпиченок В.А., Кирпиченок A.B. Влияние природно-геогра- • фических факторов на эпизоотический процесс при лептоспирозе крупного рогатого скота и свиней в Республике Беларусь // Вести'ААН Беларуси. Минск, 1995, N 3, -С.109-112. '

38. Кирпиченок В.А. йммуноферментньш анализ на основе дот-блоттинга при диагностике лептоспироэа свиней // Ученые записки Витебской государственно!! академии ветеринарной медицины. -Витебск, 1995, -Т.32, -С. 111-112. ■ . '

39. "Инструкция о мероприятиях по профилактике и оздоровлению ' животных от лептоспироза", /Шпилевский С.Н., Савицкий Н.В., Кирпиченок В.А., Бойко В.П. Утв. Минсельхозпродом РБ 30.01.1996г.' - Минск, -11с.

40. Кирпиченок В. А., АнисимИ. А., Вантеев В.В.', Драгун А.Г. Влияние В-активина на иммуноморфогенез у поросят и телят при вак- . цинации их против лептоспироза // Вести ААН Беларуси. Минск, 1996,

N 1, -С.17-21.

Р 3 3 ЮМЕ

К1рп1чонак Улздзхьир Аляксандрав1ч

Эп1зааталог1я i удасканаленне мер барзцьбы з лептастроэам св!ней i буйнай рагатай жывелы у Респубд1ца Беларусь.

Клзочавые словы: лептасп1роз, узбуджадьнж, хвароба, дыягназ, алерген, дот-блотьгаг, . В-актыв1н, aaifliK, 1мун1тэт, вакыуна, леп-таапраурыя, рэвакцынацыя, пра$илактыка, настауленш, хнструкцыя,

Аб"ектам даследавання з"яуляюцца буйная рагатая жывела i CBiHHi, здаровьи i хворыя нз лептасгироз, а мэтай- распрацоука новых метадау дыягностыта, лячення, праф!лактык1 i удасканалення мер барацьбы з лептасШроэам у Рэспубл1цы Беларусь. Рэал1ззцыя пастау-ленай мэты ажыццяулялася шляхами экспериментальных даследаванняу. на 626 свшнях, 546 галов&х буйнай рагатай жывелы рознага узросту, 83 трусах, 5 марск1х св!нках, 580 залзцЮтых хамячках i 146 белых мышах. Вытворчыя выпрабаванн! праведзены брльш чым на 232000 галовах буйнай рагатай жывелы 1 св1ней.

Даследаванне праводэШ'шляхам пастаноук!'спецьильных. досле-дау на св1ннях, буйнай рагатай жывеле i лабараторных жьгаелах, вы-вучэння даных ветзрынарнай статыстыкх Галоунага упраулення ветэры-Hapiäi МСХ i харчавання РБ, рэспубД1канскага Цзнтра г!г1ены i sni-дзы1адог11, а таксаыа абследавання небяспечных па лептасп1розу гаспадарак.

Навуковая навхзна даследавзнняу заключавцца у тым, што упер-•шыню1 вывучана залежнасць эШзаатычнага працэсу пры лептасп1розе у буйнай рагатай жывелы i св!ней'у Рэспубл1цьг Беларусь. Атрымзны но-выя данныя аб стымулюючым дзеяшй: В-актьтна на Хмунзмарфагенез у буйнай рагатай жывелы i св1ней пры вакцынацьа i лячэши ix супраць лептасирозу.

На аснове вынхкау даследаванняу упфаынв распрацаваны, наву-кова абгрунтаваны i рэкамендаваны да прымянення: азадын для сана-ца! арган!эма лептасп1раносьб!тау i лячэння хворых. лептасп1розаь жывел; н!кракропкавы Хмунаферментный метад дыягностьт лептасп1ро-за CBiHeä на аснове дот-блотынга; спосаб прыгатавання аллергене для диагностика дептасШроза у буйней рагатай жывелы i св!ней супраць лептасп1розу; хнетрукцыя аб мералрыемствах па праф1лакхыцы : аэдарауленню жывел ад лвптаогрову.

РЕЗЙМЕ

Кирпиченок Владимир Александрович

Эпизоотология и совершенствование мер борьбы с лептоспирозом свиней и крупного рогатого скота в Республике Беларусь.

Ключевые слова: лептсюпироз, возбудитель, болезнь, диагноз, аллерген, дот-блоттинг, В-активин, азидин, иммунитет, вакцина, лептоспироурия, ревакцинация, профилактика, наставления, инструкция.

Объектом исследования являются крупный рогатый скот и свиньи, здоровые и больные, лептоспирозом, а целью- разработка новых методов диагностики, лечения, профилактики й совершенствования мер борьбы с лептоспирозом в Республике Беларусь. Реализация поставленной цели осуществлялась путем экспериментальных исследований на 626 свиньях, 546 головах крупного рогатого скота разных возрастов, 83 кроликах, 5 морских свинках, 580 золотистых хомячках я 146 белых мышах. Производственные испытания проведены . более чем на 232000 головах крупного рогатого скота и свиней.

Исследования проводили путем постановки специальных опытов на' свиньях, крупном рогатом скоте, и лабораторных животных,: изучение данных ветеринарной статистики Главного управления ветеринарии МСХ, и продовольствия РБ, республиканского Центра гигиены и эпидемиологии, а также обследования неблагополучных по лептоопирозу хозяйств.

Научная новизна исследований заключается в том, что впервые изучены закономерности эпизоотического процесса при лептоспирозе у крупного рогатого скота и свиней в Республике Беларусь. Получены новые данные о .стимулирующем- действии В-активина на иммуноморфоге-нез у крупного рогатого скота и свиней при вакцинации и лечении их против лейтоспироза.

На основании результатов собственных исследований впервые разработаны, научно' обоснованы, и рекомендованы к применению: / аэи- _ дин для санации организма лептоспироносйтелей и леченет больных лептоспирозом животных; микроточечный иммуноферментный метод диагностики лептоспироза свиней на основе дот*блоттинга; споооб изготовления аллергена для диагностики лептоспироз'а у крупного рогатого скота и свиней; метод иммунизации крупного рогатого скота и свиней против лептоспироза; инструкция о мероприяттак по профилактике и оздоровлению животных от лептоспироза. ,

S U M M A R Y

' . ■ , Kirpichonok Vladimir Alexandrovich

Episootiology and Improvement of Anti- leptospiral Measures "in Pigs and Sattle in the Republic of Belarus.

Key words.' leptospirosis,agent, disease, diagnosis, allergen, dot-blotting,B-activin, azydin,immunity, vaccine, leptospirouria, revaccination, prophylaxis, directions, instruction.

Cattle and pigs both disease-free and affected by leptospirosis were taken as.a subject of our investigation. Our aim is to develop new diagnostic,prophylactic and treatment measures as well as to' impove measures controlling.leptospirosis in the Republic of Belarus. Realisation of the goal was achieved by performing experimental on 626 pigs, 546. cattle heads of different age, 83 rabbits, 5 guinea pigs, 580 gold hamsters, 146 white mice. Industrial trials involved more than 232 000 animals of cattle and pigs.

Our investigation was carried out by means of performing special trials on pigs, cattle and laboratory animals by careful analysis of statistic data supplied by General Veterinary Department of the Ministry of. Agriculture and Food, by the Republic Centre of Hygiene and Epidemiology as well as by inspecting farms prone to leptospirosis.

Scientific Novation is% contained in the fact th3t regularities of enzootic processes of ..leptospirosis in cattle and pigs have been , studied for the first time in Belarus. New data-have been obtained on B-activin stimulating effect in immunomorphogeny of cattle and pigs vaccinated and treated against leptospirosis.

Basing on the results of our own investigations we have for the first time developed, scientifically grounded and recommended for use: szydin, for leptospiro-carriers organism to be sanated and leptosplrally affected animals to be treated; microdotimmuno-ferment method diagnosing leptospirosis in pigs based on dot-blotting; method of allergen production for leptospirosis diagnosis ir cattle and pigs; the method of cattle and pigs immunisation tc prevent leptospirosis; instruction-on Prophylactic and sanitarv measures applied to animals with anti-leptospiral purposes.