Автореферат и диссертация по медицине (14.03.06) на тему:Психотропные свойства и аспекты механизмов действия новых производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот

На правах рукописи

БАГМЕТОВА ВИКТОРИЯ ВЛАДИМИРОВНА

ПСИХОТРОПНЫЕ СВОЙСТВА И АСПЕКТЫ МЕХАНИЗМОВ ДЕЙСТВИЯ НОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ГАММА-АМИНОМАСЛЯНОЙ И ГЛУТАМИНОВОЙ КИСЛОТ

14.03.06 - фармакология, клиническая фармакология

АВТОРЕФЕРАТ 5 ДЕК 2013

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

ВОЛГОГРАД-2013

005543104

005543104

Работа выполнена на кафедре фармакологии и биофармации факультета усовершенствования врачей ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Научный консультант:

Тюренков Иван Николаевич член-корреспондент РАМН, профессор,

доктор медицинских наук

Официальные оппоненты:

Воронина Татьяна Александровна Заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор, заведующая лабораторией психофармакологии ФБГУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова» РАМН

Резников Константин Михайлович Заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой фармакологии ГБОУ ВПО «Воронежская государственная медицинская академия им. H.H. Бурденко» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Решетько Ольга Вилоровна доктор медицинских наук, профессор,

заведующая кафедрой фармакологии ГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет» им. В.И. Разумовского Министерства здравоохранения Российской Федерации

Ведущая организация: ГБОУ ВПО «Ростовский государственный ме-

дицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Защита диссертации состоится «_» декабря 2013 года в «_» часов

на заседании Диссертационного совета Д 208.008.02 при ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (400131, Россия, г. Волгоград, пл. Павших борцов, 1).

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации по адресу: 400131, Россия, г. Волгоград, пл. Павших борцов, 1

Автореферат разослан «_»__2013 г.

Ученый секретарь

Диссертационного Совета, /

доктор биологических наук Бугаева Любовь Ивановна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы

На сегодняшний день социальная, экономическая, геополитическая нестабильность, информационная перегрузка, высокий темп жизни в совокупности создают условия хронического мультифакторного стресса, снижают адаптационные возможности, что ведет к невротизации населения и росту распространенности психической патологии, успешность лечения которой во многом зависит от эффективности психофармакотерапии (Александровский Ю.А., 2010; Программа ВОЗ по заполнению пробелов в области охраны психического здоровья, 2010; Информационный бюллетень ВОЗ № 220, № 369, 2010, 2012; Заболеваемость психическими расстройствами в субъектах РФ. (кроме заболеваний, связанных с употреблением психоактивных веществ) ФГУ «ЦНИИОИЗ Минздравсоцраз-вития РФ», 2011). Мировое потребление психотропных средств за последние 20 лет увеличилось более чем в 5 раз. На Российском фармацевтическом рынке доминируют психотропные препараты зарубежных фармацевтических компаний. Отечественные производители выпускают преимущественно дженерики, обновление ассортимента идет в основном за счет появления синонимов известных средств и не вносит качественных изменений в эффективность психофармакотерапии (Уварова Ю., 2011). Многие современные психотропные средства обладают недостаточной эффективностью, большим количеством побочных эффектов, негативно влияющих на качество жизни больных (Зборовский А.Б., Тюренков И.Н., Белоусов Ю.Б., 2008; Смулевич А.Б., 2013). В связи с этим, поиск и разработка новых оригинальных отечественных психотропных средств с высокой эффективностью и лекарственной безопасностью являются актуальными задачами нейропсихофарма-кологии (Воронина Т.А., Середенин С.Б., 2007).

Перспективным путем поиска и разработки новых психотропных средств является изучение структурных аналогов естественных нейромедиаторов и метаболитов нервной системы, поскольку эффекты психотропных средств реализуются за счет влияния на системы нейромедиаторов и метаболизм мозга (Петров В.И., Онищенко Н.В., 2002: Петров В.И., 2003; Семьянов A.B., 2003; Спасов A.A., Иежица И.Н., Кравченко М.С., Харитонова М.В., 2008; Beaulieu J.M., Gainetdinov R.R., 2011). Ведущую регуляторную роль в ЦНС играют тормозный нейромедиатор гамма-аминомасляная кислота (ГАМК) и возбуждающий - глутаминовая кислота, которые поддерживают баланс возбуждения и торможения, присутствуют во всех структурах ЦНС, помимо нейромедиаторного, оказывают мульти-функциональное нейрометаболическое действие, однако в силу ряда своих биохимических и физико-химических свойств имеют низкую биодоступность и терапевтическую эффективность (Семьянов A.B., 2003; Лоскутова Л.В., Костюнина Н.В., 2009; Архипов В.И., Капралова М.В., 2011). Показано, что модификация химической структуры данных нейромедиаторов и их структурных аналогов, являющихся уже известными лекарственными средствами, путем введения различных заместителей, а также разработка на их основе солей и композиций с органическими метаболически активными кислотами приводит к получению фармакологических средств с более высокими биодоступностью, активностью, широтой терапевтического действ™, с более низкой токсичностью, чем у исходных соединений (Гречко О.Ю., 2000; Воронков A.B., 2003, 2011; Багметов М.Н., 2006; Га-рибова Т.Л., Воронина Т.А., Литвинова С.А. и др. 2007; Тюренков И.Н. и др. 2007, 2010, 2012; Бородкина Л.Е., 2009; Перфилова В.Н., 2009; Якимук П.В.,. Стовбун С.В, Литвин A.A., 2011; Самотруева М.А., 2012; Куркин Д.В., 2013). Ввиду этого, представлялось актуальным изучение психотропных свойств и аспектов механизмов действия новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты с целью возможного создания новых высокоэффективных нейропсихотропных средств.

Цель исследования - поиск и разработка на основе структурных аналогов гамма-аминомасляной и глутаминовой нейромедиаторных аминокислот новых психотропных средств с поливалентным действием, низкой токсичностью и потенциально высокой лекарственной безопасностью, анализ аспектов механизма их действия.

Задачи исследования:

1. Провести скрининговый отбор соединений с выраженной нейропсихотропной активностью в рядах производных ГАМК и глутамшювой кислоты с гетероциклическими и ароматическими заместителями в бета-положении, солей и композиций фенибута, фено-тропила и нейроглугама с органическими нейрометаболически активными кислотами, полифункционально замещенных производных фенотропила.

2. Изучить острую токсичность наиболее активных соединений на двух видах лабораторных животных с использованием двух предполагаемых путей введения и учетом тендерных различий.

3. Определить диапазон терапевтически эффективных доз новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты с наиболее выраженным нейропсихотропным действием.

4. Сравнить эффективность наиболее активных соединений и применяемых в клинике препаратов аналогичного спектра действия.

5. Изучить тендерные аспекты психотропного действия, возможность развития толерантности и синдрома отмены после длительного введения наиболее активных соединений самцам и самкам крыс в терапевтических и субтоксической дозах.

6. Провести изучение эффективности, характера и направленности действия наиболее активного соединения в зависимости от возраста.

7. Изучить механизм действия наиболее активного соединения с использованием компьютерного PASS-прогноза, а также методов нейрофармакологического анализа ¡n vivo путем определения влияния на эффекты агонистов и антагонистов основных медиа-торных систем, а также на поведение инбредных мышей с альтернативными фенотипами эмоционально-стрессовой реакции; нейрохимического анализа влияния на обмен моноаминов и нейроакгивных аминокислот в структурах мозга и радиолигандного анализа связывания с рецепторами мозга крыс: NMDA, Д2, 5НТ2, ГАМК-А, ГАМК-Б; нейрофизиологического анализа влияния на трансмембранные ионные токи и внутриклеточные потенциалы нейронов.

8. Обосновать перспективность разработки новых нейропсихотропных средств с поливалентным действием, низкой токсичностью и потенциально высокой лекарственной безопасностью на основе структурных аналогов ГАМК и глутаминовой кислоты, а также их солей и композиций с метаболически активными органическими кислотами.

Научная новизна:

Впервые проведен целенаправленный поиск веществ с нейропсихотропным действием среди 35 новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты: с гетероциклическими и ароматическими заместителями в бета-положении, солей и композиций фенибута, фенотропила и нейроглугама с органическими метаболически активными кислотами, полифункционально замещенных производных фенотропила, в результате которого выделены вещества с высокой нейропсихотропной активностью, низкой токсичностью, не вызывающие развития толерантности и синдрома отмены при длительном применении, обладающие потенциально высокой лекарственной безопасностью, перспективные для разработки на их основе нейропсихотропных средств: соединение РГПУ-147 (цитрат 4-амино-3-фенилбугановой кислоты, цитрокард), обладающее выраженным ноотропным, нейро-протекторным и анксиолитическим действием, активирующими, антиагрессивными, анальгетическими свойствами, повышающее физическую работоспособность, а также соединение РГПУ-135 (гидрохлорид бета-фенилглутаминовой кислоты, нейроглутам), проявляющее выраженную антидепрессантную и анксиолитическую активность, ноотропные, нейропротекторные, активирующие и антиагрессивные свойства, повышающее физическую работоспособность.

Впервые изучена острая токсичность соединений РГПУ-147 и РГПУ-135 на двух видах лабораторных животных (мышах и крысах) с использованием двух предполагаемых путей введения и учетом тендерных различий, установлено, что данные соединения согласно классификации И.В. Саноцкого (1970) относятся к классу малотоксичных.

Впервые изучена зависимость нейропсихотропного действия цитрокарда и нейроглутама от дозы, определен диапазон терапевтически эффективных доз. Установлено, что иоотропный и анксиолигический эффекты цитрокарда как при интраперитонеальном, так и интрагастральном введении наиболее выражены в интервале доз 1/30 - 1/100 от LD50. Нейроглугам при интрагастральном введении в широком диапазоне доз 1/60 - 1/600 от LD50 проявляет аигидепрессивное, анксиолитическое и ноотропное действие.

Впервые показано отсутствие толерантности к цигрокарду и нейроглутаму, а также отсутствие синдрома отмены после прекращения их шестимесячного введения в терапевтических дозах самцам и самкам крыс.

Впервые рассмотрены гендерные и возрастные особенности нейропсихотропного действия нейроглутама, проведено углубленное изучение его специфического ангиде-прессантного действия на модели «выученной беспомощности» в сравнении с известными антидепрессантами. Показано, что нейроглутам проявляет антидепрессивное, анксиолитическое и ноотропное действие в равной степени у самцов и самок крыс преимущественно среднего возраста (4-месячных) и менее эффективен у старых крыс (18-месячных).

Впервые изучен возможный механизм фармакологического действия нейроглутама с использованием компьютерного PASS-прогноза, а также методов нейрофармакологиче-ского, нейрохимического, нейрофизиологического анализа. Показано, что в основе нейропсихотропного действия нейроглутама лежат: стимуляция дофамин- и серотонинерги-ческой нейропередачи без прямого связывания с Д2- и 5НТ2-рецепгорами, модулирующее влияние на трансмембранные ионные токи и внутриклеточные потенциалы нейронов.

Научно-практическая значимость работы

Тема диссертации является составной частью плана научно-исследовательской работы кафедры фармакологии и биофармации факультета усовершенствования врачей (ФУВ) ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России (ВолгГМУ) и утверждена на заседании Ученого совета (Протокол №3 от 09 ноября 2011 года). Ряд экспериментальных серий проведен в ходе выполнения работ по коммерческому договору с ОАО «Щелковский витаминный завод» № 09 ОИПР/2007 от 19.01.2007 «Доклинические исследования вещества соль 4-амино-З-фенилбутановой кислоты и лекарственное средство, обладающее антиишемической, гипотензивной, противо-аритмической, ноотропной и антигипоксической активностью». Часть диссертации выполнена в рамках доклинических исследований нового психотропного средства, разрабатываемого по государственному контракту с Мшшромторгом РФ № 11411.18700.13.089 от 13.09.2011 на выполнение научно-исследовательской и опытно-конструкторской работы (НИОКР) «Доклинические исследования антидепрессантного, анксиолитического и ней-ропротекторного лекарственного средства на основе глутаминовой кислоты» Шифр «2.1 Нейро глутамин 2011», заключенному в рамках Федеральной целевой программы «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности Российской Федерации на период до 2020 года и дальнейшую перспективу» (утвержденной постановлением правительства РФ от 17.02.2011г. №91).

Теоретически и экспериментально обоснована перспективность целенаправленного поиска и разработки психотропных средств с поливалентным действием, низкой токсичностью и потенциально высокой лекарственной безопасностью на основе структурных аналогов естественных нейромедиаторов ЦНС - ГАМК и глутаминовой кислоты.

В ходе выполнения диссертационного исследования выделены активные вещества с психотропным действием, на основе которых планируется или ведется разработка оригинальных отечественных нейропсихотропных средств. На основе соединения РГПУ-87 планируется разработка средства с антидепрессивным, анксиолитическим и ноотропным действием (Берестовицкая В.М., Васильева О.С., Остроглядов Е.С. и др. патент RUS 2437659 от 12.11.2010); на основе соединения РГПУ-207 планируется разработка средства с ноотропной, антидепрессивной и анксиолитической активностью (Берестовицкая В.М., Васильева О.С., Остроглядов Е.С. и др. патент RUS 2440981 от 12.11.2010); на основе со-

единения РГПУ-147 разрабатывается средство с антиишемической, гипотензивной, про-тивоаригмической и ноотропной активностью (Берестовицкая В.М., Васильева О.С., Новиков Б.М. и др., патент RUS 2216322 от 28.02.2002), анксиолигическим, церебропротекторным действием, снижающее влечение к алкоголю (Тюренков И.Н., В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева, патент RUS № 2393855 от 29.12.2008). На основе соединения РГПУ-135 (нейроглутам) разрабатывается средство с ангидепрессантным, анксиолигическим, нейропротекторным и ноотропным действием (Петров В.И., Тюренков И.Н., Багметова В.В. и др. патент RUS 2429834 от 23.07.2010, государственный контракт с Минпромтор-гом РФ № 11411.18700.13.089 от 13.09.2011 г). По материалам настоящей работы получено 3 патента Российской Федерации на изобретения.

На основании выявленных закономерностей зависимости между структурой и активностью даны рекомендации по направленному синтезу и поиску высокоактивных и малотоксичных средств с нейропсихотропным действием в ряду структурных аналогов ГАМК и глутаминовой кислоты, которые используются химиками-синтетиками Российского государственного педагогического университета им. А.И. Герцена (г. Санкт-Петербург) и Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России.

Система методических подходов к изучению нейропсихотропной активности новых веществ, а также разработанная нами в ходе выполнения исследования, модель де-прессивноподобного состояния у крыс при хроническом комбинированном стрессе со сменой разномодальных стрессоров (шума, вибрации и пульсирующего яркого света) по стохастической схеме, приводящем к формированию «выученной беспомощности» (Тюренков И.Н., Багметова В.В., Чернышева Ю.В., Бородин Д.Д., 2013) применяются в научно-исследовательской работе кафедр фармакологии, фармакологии и биофармащш ФУВ ВолгГМУ. Результаты исследования используются также в учебном процессе кафедр фармакологии, фармакологии и биофармащш ФУВ ВолгГМУ. Акты о внедрении прилагаются.

Положения, выносимые на защиту:

1. Разработка производных естественных нейромедиаторов ЦНС - ГАМК и глутаминовой кислоты является перспективным путем поиска новых высокоэффективных и безопасных нейропсихотропных лекарственных средств, с поливалентным действием, перспективных для внедрения в клиническую практику с целью лечения нервных и психических расстройств. В результате направленного поиска веществ с нейропсихотропным действием среди новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты выделены вещества с высокой активностью, низкой токсичностью, не вызывающие развития толерантности и синдрома отмены при длительном применении, обладающие потенциально высокой лекарственной безопасностью, перспективные для разработки на их основе нейропсихотропных средств: на основе соединения РГПУ-147 (цитрат 4-амино-З-фенилбутановой кислоты, цитрокард) - средства с ноотропным, нейропротекторным и анксиолитшеским действием, на основе соединения РГПУ-135 (гидрохлорид бета-фешшглутамииовой кислоты, нейроглутам) - средства с ангидепрессантным, анксиолигическим, ноотропным и нейропротекторным действием.

2. Перспективен поиск веществ с нейропсихотропным действием в химических рядах производных алифатической ГАМК и глутаминовой кислоты с гетероциклическими и ароматическими заместителями в бета-положении, солей и композиций фенибута, фено-тропила и нейроглутама с органическими нейрометаболиески активными кислотами, полифункционально замещенных производных фенотропила.

3. Введение в структуру ГАМК и глутаминовой кислоты одинаковых ароматических и гетероциклических заместителей в бета-положении приводит к получению соединений со спектром действия, отличным от спектра действия исходных нейромедиаторных аминокислот, производные ГАМК и глутаминовой кислоты с одними и теми же заместителями проявляют различный спектр нейропсихотропных эффектов. Разработка солей и ком-

позиций структурных аналогов ГАМК и глутаминовой кислоты с органическими метаболически активными кислотами не вызывает изменений профиля фармакологических эффектов исходных соединений, но изменяет их выраженность, снижает токсичность.

4. В ряду солей и композиций структурных аналогов ГАМК и глутаминовой кислоты с органическими метаболически активными кислотами наиболее выраженным нейропси-хотропным действием обладает соединение Р1 НУ-147, которое проявляет широкий спектр эффектов - ноотропный, нейропротекторный, анксиолитический, активирующий, антиагресивный а также умеренные анальгетические и антидепрессангные свойства.

5. В ряду производных алифатической ГАМК и глутаминовой кислоты с гетероциклическими и ароматическими заместителями в бета-положении наиболее выраженным нейропсихотропым действием обладает соединение РГПУ-135, на основе которого разрабатывается средство с антидепрессивным, анксиолитическим и нейропротекторный действием (государственный контракт с Минпромторгом РФ № 11411.18700.13.089 от 13.09.2011т).

6. Нейропсихотропное действие нейроглутама связано со способностью стимулировать дофамин- и серотонинергическую нейропередачу без прямого связывания с Д2- и 5НТ2-рецепторами, модулировать трансмембранные натриевые, калиевые и, в большей степени, кальциевые ионные токи, а также внутриклеточные потенциалы нейронов.

Личный вклад автора

Автором проведен анализ литературы по теме исследования, разработан дизайн исследования, сформулированы основные положения, выносимые на защиту, выводы и научно-практические рекомендации. По результатам анализа литературы автором подобраны, освоены и адаптированы к имеющейся материальной базе кафедры фармакологии и биофармации ФУВ ВолгГМУ психофармакологические модели и методы, составляющие данное исследование; по инициативе автора проведены закупка и изготовление оборудования для выполнения поведенческих тестов. При непосредственном участии автора проведено планирование, подбор методов и разработка протоколов всех поведенческих экспериментов, входящих в настоящее исследование и выполненных на базе кафедры фармакологии и биофармацшш ФУВ ВолгГМУ, а также проведено порядка 80% экспериментов. Лично автором выполнен анализ результатов данных экспериментов, их статистическая обработка и описание. При личном участии автора, в рамках настоящей диссертационной работы, подготовлен проект, выигравший открытый конкурс на право заключения государственных контрактов с Минпромторгом России на выполнение научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ (НИОКР) по федеральной целевой программе «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности Российской Федерации на период до 2020 года и дальнейшую перспективу», утвержденной постановлением Правительства Российской Федерации от 17 февраля 2011 г. № 91 (лот №3; Уникальный номер закупки 133/13-ФМП-12.07ок.), по результатам конкурса заключен государственный контракт № 11411.18700.13.089 от 13.09.2011 г. Часть экспериментальных работ (не более 20%), посвященных изучению нейропсихотропной активности и механизмов действия наиболее активного соединения, выполнено на базах других кафедр и учреждений в рамках указанного государственного контракта. При личном участии автора по материалам диссертации подготовлены патенты РФ на изобретения и публикации.

Апробация работы

Основные результаты диссертационной работы были представлены на научно-практических конференциях: IX, X, XI, XII, XIII Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области (Волгоград, 2004 - 2008); XII, XIII, XIV, XV, XVI, XVII, XIX, XX Российский национальный конгресс «Человек и лекарство» (Москва, 2006 - 2010, 2012, 2013); Международная научно-практическая конференция «Фармация и здоровье» (Пермь, 2005); 4-я и 5-я Международные конференции «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам» (Москва, 2006, 2010); Научно-практическая конференция «Проблемы клинической фармакологии и моделирования в

фармакологии и биомедицине» (Ростов-на-Дону, 2006); III Съезд фармакологов России «Фармакология - практическому здравоохранению» (Санкт-Петербург, 2007); IV Съезд фармакологов России «Инновации в современной фармакологии» (Казань, 2012); Научная конференция «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2008); Научный симпозиум «Результаты фундаментальных и прикладных исследований для создания новых лекарственных средств» (Москва, 2008); X Международный конгресс «Здоровье и образование в XXI веке «Инновационные технологии в биологии и медицине», (Москва, 2009); II Всероссийский научно-практический семинар молодых ученых «Методологические аспекты экспериментальной и клинической фармакологии» (Волгоград, 2010); 3-й Международный конгресс Армении (Ереван, 2011); IV Всероссийский научно-практический семинар молодых ученых с международным участием «Современные проблемы медицинской химии. Направленный поиск новых лекарственных средств» (Волгоград, 2012).

Публикации: по материалам диссертации опубликовано 128 печатных работ, в том числе 27 в журналах, рекомендованных ВАК, 3 патента РФ на изобретения.

Объем и струетура диссертации:

Диссертация изложена на 420 страницах машинописного текста и включает следующие разделы: введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследования, 7 глав собственных исследований, обсуждение результатов, выводы, научно-практические рекомендации, список литературы, содержащий 377 источников, из них 128 отечественных и 249 зарубежных. Диссертация иллюстрирована 124 рисунками и содержит 67 таблиц.

МАТЕРИАЛЫ II МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование проведено на половозрелых аутбредных животных: 1530 самцах и самках крыс массой 180-220 г и 756 самцах и самках мышей массой 18-24 г; а также половозрелых инбредных животных: 60 мьппах самцах линии Balb/c и 60 мышах самцах лишга С57В1/6, полученных из Филиала "Столбовая" ГУ НЦБМТ РАМН, ФГУП «Питомника лабораторных животных «Рапполово» РАМН. Проведение экспериментов и содержание животных соответствовало правилам лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ (ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2009 и ГОСТ Р-51000.4-2011), Федеральному закону № 61-ФЗ от 12.04.2010 г. «Об обращении лекарственных средств». Приказу Мин-здравсоцразвития России от 23.08.2010 № 708Н «Об утверждении правил лабораторной практики» (GLP), ГОСТ Р-53434-2009, с учетом международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях (1997), одобрено Региональным Независимым Этическим Комитетом (ГУ Волгоградский Медицинский Научный Центр): протокол № 140-2011 от 11.06.2011 г.

В работе изучена ненропсихотропная активность 35 новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты1: производных алифатической ГАМК (п=4) и глутаминовой кислоты (п=7) с гетероциклическими и ароматическими заместителями в бета-положении, солей и композиций фенибута (п=7), фенотропила (п=5) и нейроглутама (п=4) с органическими метаболически активными кислотами, полифункционально замещенных производных фенотропила (п=8). При разработке солей и композиций структурных аналогов ГАМК и глутаминовой кислоты использовали органические кислоты: лимонную, янтарную, яблочную, никотиновую, глутаминовую, салициловую, ацетилсалициловую.

Изучение нейропсихотропных эффектов новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты проведено с использованием стандартных нейропсихофармакологических моделей и методов, изложенных в «Руководстве по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» - Фармакологический государственный комитет,

1 Выражаем искреннюю благодарность и глубокую признательность зав. кафедрой органической химии Российского государственного педагогического университета им. Л.И. Герцена (Санкт-Петербург, Россия), ЗДН, О х.к , профессору ВМ. Берестовицкой, старшему научному сотруднику, К.Х.Н., доц. О.С. Васильевой и всем сотрудникам кафедры, предоставившим соединения и композиции для исследования.

МЗ РФ, Москва, 2005», «Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств» - ч. 1, Москва, 2012: «открытое поле» (ОП), «приподнятый крестообразный лабиринт (ПКЛ), «условная реакция пассивного избегания» (УРГТИ), «тест экстраполя-циояного избавления» (ТЭИ), «подвешивание мышей за хвост» (ПМХ), «принудительное неизбегаемое плавание» по Порсолту, «потребление/предпочтение сахарозы» (П/ПС), «конфликтная ситуация по Vogel», «пролонгирование снотворного действия барбитуратов», «подвешивание на горизонтальной сетке», «принудительное неизбегаемое плавание с грузом», «раздражение лап электрическим током до вокализации», «tail immersion», модели неконкурентного и конкурентного агрессивного поведения в условиях спровоцированной внутривидовой агрессии, «максимальный электрошок» (МЭШ). При углубленном сравнительном изучении нейропсихотропного действия наиболее активных соединений и известных препаратов с близким спектром действия использовали метод изучения пространственной памяти в условиях 8-лучевого радиального лабиринта с равномерным распределением пищевого подкрепления (Островская Р.У. и др., 1995; Трофимов С.С. и др., 2000), метод парного взаимодействия (Петров В.И. и др., 1996), а также разработанную нами модель де-прессивноподобного состояния у крыс при хроническом комбинированном стрессе со сменой разномодальных стрессоров (шума, вибрации и пульсирующего яркого света) по стохастической схеме, приводящем к формированию «выученной беспомощности» (Тюренков И.Н., Багметова В.В., Чернышева Ю.В., Бородин Д.Д., 2013).

На различных этапах исследования применяли следующие вещества и препараты сравнения: в дозах, численно равных 1/10 от молекулярной массы фенибут - 18, фено-тропил, баклофен - 22, толибут - 19 мг/кг (в виде субстанций, синтезированных на кафедре органической химии Российского государственного педагогического университета им. А.Н. Герцена (Санкт-Петербург, Россия), а также в терапевтически эффективных дозах: диазепам (Simplex pharma Pvt. Ltd.) - 1 мг/кг (T.A. Воронина, 2006), амитриптилин (10 мг/кг) (р-р 10 мг/мл; ФГУП «Московский эндокринный завод», Москва, Россия); имипрамин (15 мг/кг) (Мелипрамин, р-р 25 мг/2 мл; ОАО Фармацевтический завод ЭГИС, Будапешт, Венгрия); сертралин (10 мг/кг) (Стимулотон, таб., покр. пл. об. 100 мг; ОАО Фармацевтический завод ЭГИС, Будапешт, Венгрия); пароксетин (10 мг/кг) (Паксил, таб., покр. об. 20 мг; Брашов, Румыния; GlaxoSmithKline); флуоксетин (20 мг/кг) (Флуоксетин-Канон, капе. 20 мг; ЗАО «Канонфарма продакшн», Щелково, Россия); венлафаксин (10 мг/кг) (Велаксин, таб. 75 мг; ОАО Фармацевтический завод ЭГИС, Будапешт, Венгрия). Применялись также: тиопентал натрий (лиофилизат для приготовления р-ра для в/в введения 1 г; Синтез АКО ОАО, Россия); янтарная кислота (ACS, США); яблочная кислота (AppliChem, Германия); лимонная кислота (AppliChem, Германия); салициловая кислота (Рапгеас; Barcelona, España); L-глутаминоеая кислота (Panreac; Barcelona, España); гамма-аминомасляная кислота (Sigma-Aldrich, Германия); крахмал картофельный (ГОСТ 769978, высший сорт, Беларусь).

На каждом этапе исследования формировались контрольные группы животных, которые получали дистиллированную воду либо 2%-ую крахмальную слизь.

На начальном этапе изучения возможного механизма нейропсихотропного действия нейроглутама использовали метод компьютерного прогноза спектра рецепторной активности с помощью системы PASS2 (Филимонов Д.А., Поройков В.В., 2006).

Нейрофармакологический анализ взаимодействия нейроглутама с основными ней-ромедиаторными системами ЦНС in vivo проводили в тестах по изучению влияния тестируемого соединения на эффекты агонистов и антагонистов основных нейромедиаторных систем ЦНС (Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств, 2012). Использовались: пикротоксин 2,5 мг/кг, апоморфин 1 мг/кг (Sigma, США),

2Выражаем искреннюю признательность и благодарность д.б.н., с.н.с. НИИ фармакологии ВолгГМУ, старшему преподавателю каф. фармакологии ВолгГМУ Васильеву ПМ. за конструктивную консультативную и практическую помощь, а также исчерпывающее информационное обеспечение при выполнении компьютерного прогноза рецепторной активности соединения РГПУ-135 с помощью системы PASS.

галоперидол 1 мг/кг (Lake Chemikals PVT. LTD, Индия), клофелин 0,1 мг/кг (Минмедпром объединение им. 60-летия СССР, Россия), ареколии 25 мг/кг (Aldrich, Германия), никотин 5 мг/кг (Sigma, Германия), 5-окситриптофан 300 мг/кг (Sigma, Германия).

С целью нейрофармакологического анализа специфического психостимулирующего действия нейроглутама оценивали его влияние на спонтанную локомоторную активность инбредных мышей линий Balb/c и С57В1/6 с использованием инфракрасного акти-метра фирмы Panlab (Испания) с программным обеспечением ActiTrack3.

Нейрохимический анализ влияния вещества РГПУ-135 на содержание моноаминов и их метаболитов проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с электрохимической детекцией (ВЭЖХ/ЭД) на хроматографе LC-304T (BAS, West Lafayette, США) с инжектором Rheodyne 7125 (И.И.Мирошниченко, 1988)4.

Радиолигандный анализ связывания с рецепторами компетентных структур мозга крыс выполнен с применением стандартных радиолигандов [ЗН]-МК-801, [ЗН]-кетансерина, [ЗН]-сульпирида, [3H]-SR95531 и [ЗН]-баклофена («PerkinElmer») в соответствии с рекомендациями IUPHAR ("Guide to Receptors and Channels", S.P.H.Alexander, A.Mathie and J.A.Peters, BJP, v. 147, Suppl.3,2006)5.

Нейрофизиологический анализ влияния нейроглутама на трансмембранные ионные токи внутриклеточные потенциалы нейронов моллюсков прудовика большого (Lymnaea stagnalis) и катушки роговой (Planorbarius corneus) проводили методом внутриклеточной перфузии изолированных нейронов и фиксации мембранного потенциала с помощью аналого-цифрового преобразователя фирмы «L-Card» (Россия) L-7916.

Таблица 1.

Дизайн исследования: психотропные свойства и аспекты механизмов действия новых производных

гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот

№ Наименование этапа исследования Нейропсихофармаколо-гические модели и методы Изучаемые производные ГАМК и глутаминовой кислоты, препараты сравнения

1 2 3 4

I Скрининг соединений, обладающих выраженной нейропсихогромной активностью. ОП, ПКЛ, УРПИ, ТЭИ, ПМХ, тест Порсолта, «подвешивание на горизонтальной сетке», «не-избегаемое плавание с грузом», «раздражение лап электрическим током до вокализации», «tail immersion», модели агрессивного поведения, МЭШ, «пикротоксино-вые судороги». 35 новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты: с гетероциклическими и ароматическими заместителями в бета-положении (п=11), солей и композиций фенибута (п=7), фенотропила (п=5) и нейроглутама (п=4) с органическими метаболически активными кислотами, полифункционально замещенных производных фенотропила (п=8).

Выражаем искреннюю признательность и благодарим за помощь в организации и проведении нейрохимического и нейрофармакологического исследования механизма действия нейроглутама академика РАН и РАМН, дм.н., проф., директора ФГБУсНИИ фармакологии им. В.В. Закусова» РАМН Середенина С.Б., а также сотрудников данного учреждения:

Ö.M IL, ведущего научного сотрудника лаборатории фармакогенетики Яркову МЛ. и всех сотрудников лаборатории, принимавших участие в исследовании.

4 к.м.н., зав. лабораторией нейрохимической фармакологии Кудрина B.C., а также всех сотрудников лаборатории, принимавших участие в исследовании.

1 д.м.н., проф., зав. лабораторией радиоизотопных методов исследований Ковалева Г.И., а также всех сотрудников лаборатории, принимавших участие в исследовании.

6Благодарим и выражаем глубокую признательность за помощь в организации и выполнении нейрофизиологического анализа механизма действия нейроглутама академику РАМН, д.м.н., проф., зав. кафедрой фармакологии ГБОУ ВПО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. Акад. И.П. Павлова» Минздрава России Игнатову Ю.Д., д.м.н., проф. зав. отд. нейрофармакологии НИИ фармакологии им. A.B. Вальдмана Виспобокоеу А.И.

Таблица 1. (Продолжение).

1 2 3 4

II Изучение острой токсичности наиболее активных соединений на 2 видах лабораторных животных с использованием 2 предполагаемых путей введения и учетом гендерных различий. Введение соединений в возрастающих токсических дозах с определением показателей ЬЭ50 по методу Литчфилда и Уилкоксона. Соединение РГПУ-147 (цитрат 4-аыино-З-фенилбутановон кислоты, цитрокард), соединение РГПУ-135 (гидрохлорид бета-фенилглутамнновой кислоты, нейроглутам).

III Определение диапазона терапевтически эффективных доз наиболее активных соединений. ОП, ПКЛ, конфликтная сотуация по Vogel, тест Порсолта, УРГТИ, ТЭИ, тест «неконкурентного агрессивного поведения». Соединения РГПУ-147 и РГПУ-135.

IV Сравнение эффективности наиболее активных соединений и применяемых в клинике препаратов аналогичного спектра действия. Модели: пространственного обучения - 8-лучевой лабиринт, зоо-социального взаимодействия, «выученной беспомощности» Соединения РГПУ-147 и РГПУ-135, фенибут, фенотро-пил, амитриптилин, имипра-мин, флуоксетин, сертралин, пароксетин, венпафаксин.

V Изучение гендерных аспектов психотропного действия, возможности развития толерантности и синдрома отмены при длительном введении наиболее активных соединений самцам и самкам крыс в терапевтических и субтоксической дозах. ОП, ПКЛ, тест Порсолта, УРПИ, ТЭИ Соединения РГПУ-147 и РГПУ-135.

VI Изучение эффективности, характера и направленности действия наиболее активного соединения в зависимости от возраста. ОП, ПКЛ, тест Порсолта, УРПИ, ТЭИ Соединение РГПУ-135.

VII Изучение механизма действия наиболее активного соединения Методы нейрофармако-логического, нейрохимического и нейрофизиологического анализа. Соединение РГПУ-135.

Статистическую обработку результатов проводили с использованием пакетов программ: Microsoft Office Excel 2007, (Microsoft, USA), Statistica 6,0 (StatSoft, Inc., USA), BioStat 2008 Professional 5.1.3.1. В зависимости от характера данных использовали: ранговый однофакторный дисперсионный анализ Краскела-Уоллиса в сочетании с апостериорными критериями Ньюмена-Кейлса (множественные сравнения для выборок одинакового объема) или Дана (множественные сравнения для выборок разного объема); точный критерий Фишера; непараметрический U-критерий Манна-Уитни. Для проверки распределения на нормальность использовали критерий Шапиро-Уилка. Статистически значимыми расценивались эффекты при р<0,05 (Гланц С., 1988; Зайцев В.М., Лифляндский В.Г., Маринкин В.И., 2003; Кобзарь А.И., 2003; Ивантер Э. В., Коросов А. В., 2011; Сергиенко В.И., Бондарева И.Б., Маевский Е.И., 2012).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

На этапе скрининга структурные аналоги ГАМК и глугаминовой кислоты, а также их соли использовали в дозах численно равных 1/10 от молекулярной массы (мг/кг), что позволяло вводить их животным в эквимолярных количествах и, таким образом, сравнивать их активность.

Скрининг веществ с психотропным действием в ряду производных ГАМК и глутаминовой кислоты с одинаковыми ароматическими и гетероциклическими заместителями в бета-положении показал следующее (табл. 2).

Таблица 2.

Результаты скрининга соединенна с нейроисихотропной активностью в ряду производных алифатической ГЛМК и глутаминовой кислоты с ароматическими и гетероциклическими _заместителями в бета-п&ложеиии._

Производные ГАМК Химические Производные глутаминовой кислоты

Основные эффекты нейропсихотропного действия Названия, лабораторны е шифры и дозы заместители в бета-положении Названия, лабораторны е шифры и дозы Основные эффекты нейропсихотропного действия

(') ноотропное, нейропротекторное, анксиолитическое, умеренное активирующее, анальгети-ческое, антиагрессивное, стимуляхщя физической работоспособности Фенибут 18 мг/кг -фенил РГПУ-135 26 мг/кг (+) антидепрессивное, анксиолитическое, ноотропное, нейропротекторное, антиагрессивное, умеренное активирующее, стш(уляг(ия физической работоспособности

(+) миорелаксирующее, умеренное анксиоседа-тивное Баклофен 22 мг/кг 6 РГПУ-146 29 мг/кг (+) антидепрессивное (•) снижает физическую работоспо-ть

С1 -парахлорфенил

(+) нейропротекторное, слабое ноотропное, анксиолитическое (-) седативное Толибут 19 мг/кг Ф СН3 -тол ил РГПУ-202 27 мг/кг (+) анксиолитическое (-) седативное

(+) слабое ноотропное, слабо повышает физическую работоспособность РГПУ-136 22 мг/кг РГПУ-204 30 мг/кг (-) седативное, снижает физическую работоспособность

н -Ш-индол-З-ил

(+) слабое анксиопитиче-ское ргау-160 31 мг/кг -1-бензил-1Н-индол-3-ил РГПУ-205 32 мг/кг (-) седативное, снижает физическую работоспособность

(+) ноотропное, нейропротекторное, умеренные анксиолитическое и антидепрессивное РГПУ-195 22 мг/кг 6 -лириднл РГПУ-198 22 мг/кг (+) ноотропное (-) анксиогенное

(+) слабое анксиоседа-тивное, антидепрессивное РГПУ-196 27 мг/кг й -1-метил» бегоимидазол-2-ил РГПУ-199 29 мг/кг (+) активирующее, повышает физическую работоспособность (') анксиогенное

Феннл содержащее производное глутаминовой кислоты соединение РГПУ-135 в сравнении с фенилсодержащим производным ГАМК фенибутом проявляет сопоставимое ноо-тропное, нейропротекторное и активирующее действие, превосходит фенибут по выраженности антидепрессанпюго и анксиолитического действия. В целом, фенилсодержащие аналоги ГАМК и глутаминовой кислоты проявляют близкий спектр действия. Парахлор-

фенилсодержащие аналоги ГАМК и глугаминовой кислоты отличаются по спектру действия - у аналога ГАМК бакпофена преобладает миорелаксирующее и анксиолитическое действие, тогда как у аналога глутаминовой кислоты РГПУ-146 преобладает умеренное антидепрессивное действие. Ближе по спектру активности были толюгсодержащие аналоги - толибут и РГПУ-202 - оказывали анксиолитическое и седативное действие. Индолил-и бепзшшндолилсодержащие производные проявили слабые психотропные свойства различного профиля. Существенно отличались по спектру действия пиридилсодержащис аналоги - РГПУ-195 производное ГАМК сочетало ноотропное действие с анксиолитиче-ским, а РГПУ-198 - производное глутаминовой кислоты - с анксиогенным. Метилбензи-мидазолсодержащие производные также отличались по характеру психотропного действия РГПУ-196 (аналог ГАМК) оказывало анксиоседативное действие, а РГПУ-199 (аналог глутамата) - активирующее и анксиогенное.

Для сопоставления эффектов структурных аналогов ГАМК/глутаминовой кислоты (фенибута, фенотропила, нейроглутама) и их композиций с органическими кислотами дозы композиций рассчитывались таким образом, чтобы все животные в составе композиций получали действующее вещество в терапевтически эффективной дозе, численно равной 1/10 от М, то есть в той же дозе, что и в виде чистой субстанции. Т.к. соотношение структурных аналогов ГАМК/глутаминовой кислоты и органических кислот в составе композиций составляло 1:1, композиции в виде смеси равных соотношений действующего вещества и целевой добавки вводили животным в дозах, численно равных удвоенной дозе исходного соединения. Эффекты солей и композиций сравнивали также с действием органических кислот, использованных при их разработке. Дозы органических кислот были выбраны из расчета их содержания в составе вводимых композиций и согласно литературным данным входили в диапазон эффективных экспериментальных доз данных кислот (Mutuskina Е.А., Zarzhetskii Iu.V., Trubina I.E. et al., 1996; Wang Y., Yan-Xia L., Dong-Lian Z. et al., 2002; Saleem R., Ahmad M., Naz A. et al., 2004; Cao Y., DuBois D.C. et al., 2012).

Скрининг веществ с нейропсихотрогашм действием в рядах солей и композиций структурных аналогов ГАМК - фенибута и фенотропила, а также глутаминовой кислоты -нейроглутама с органическими метаболически активными кислотами показал, что полученные соли и композиции имеют тот же профиль фармакологических эффектов, что и исходные вещества, но иной степени выраженности.

Результаты изучения психотропного действия солей и композиций фенибута представлены в таблице 3.

Таблица 3.

Результаты скрининга соединений с нейропсихотропнон активностью в ряду солей н композиций

фепибута с органическими метаболически активными кислотами.

Органические кислота Лабораторные шифры, дозы Основные эффекты нейропсихотрояного действия

(НООССН2)2С(ОН)СООН Лимонная РГПУ-147 (соль) 37 мг/кг потенцирует активирующее, анксиолитическое, ноотропное, нейропротекторное и антиагрессивное действие, аиальгетические свойства и способность повышать физическую работоспособность

НООС(СН2)2СООН Янтарная РГПУ-149 (соль) 30 мг/кг усиливает ноотропный эффект и способность повышать физическую работоспособность

НООССН(ОН)СН2СООН Яблочная РГПУ-150 (соль) 31 мг/кг снижает выраженность эффектов фенибута

C6H5N02 Никотиновая РГПУ-151 (композиция) 36 мг/кг снижает выраженность эффектов фенибута

HOOCCH(NH2XCH2)2COOH Глутаминовая РГПУ-152 (композиция) 36 мг/кг снижает выраженность эффектов фенибута

С6Н4(0Н)-СО2Н Салициловая РГПУ-189 (композиция) 36 мг/кг усиливает анксиолнтические, аиальгетические и нейропротекгорные свойства

С9Н804 А цетилсалициловая РГПУ-191 (композиция) 36 мг/кг потенцирует анксполитический эффект

Установлено, что лимонная кислота преимущественно потенцирует активирующее, ан-ксиолнтическое, ноотропное, нейропротекторное действие фенибута и способность повышать физическую выносливость, салициловая - анксиолитические, анальгегические и нейропротекторные свойства, янтарная кислота - ноотропный эффект и способность повышать физическую выносливость, а ацетилсалициловая - анксиолитический эффект. Яблочная, никотиновая и глутаминовая кислоты изменяет фармакологическую активность фенибута преимущественно, уменьшая степень выраженности эффектов. Собственно глутаминовая кислота проявляла активирующее и умеренное противосудорожное действие, тенденцию к ноогропному действию, янтарная кислота также проявляла тенденцию к активирующему и ноотропному действию, салициловая кислота проявляла седативные свойства, остальные органические кислты, использованные в составе солей и композиций не проявляли нейропсихотропного действия.

В ряду композиций фенотропила с органическими кислотами наибольшую активность проявила композиция с янтарной кислотой, которая превосходила фенотропил по выраженности ноотропного, нейропротекторного, активирующего действия и способности повышать физическую работоспособность, но уступала ему по выраженности анксиолитических свойств (табл.4).

Таблица 4.

Результаты скрининга соединений с иенропсихотроиной активностью в ряду солей и композиции

фенотропила с органическими метаболически активными кислотами.

Органические кислоты Лабораторные шифры, дозы Основные эффекты нейропсихотропного действия

(НООССН2)2С(ОН)СООН Лимонная РГПУ-154 44 мг/кг потенцирует анксиолитическое и ноотропное действие, снижает активирующее

НООС(СН2)2СООН Янтарная РГПУ-138 44 мг/кг потенцирует ноотропное, нейропротекторное, активирующее действие и способность повышать физическую выносливость

НООССН(ОН)СН2СООН Яблочная РГПУ-155 44 мг/кг снижает анксиолитическое и активирующее действие

С6Н5М02 Никотиновая РГПУ-156 44 мг/кг снижает анксиолигическое и антидепрессивное действие

НООСС Н(Ы Н2ХС Н2)2СООН Глутаминовая РГПУ-158 44 мг/кг снижает анксиолитическое и антидепрессивное действие, усиливает активирующее

В ряду композиций нейроглутама с органическими кислотами наиболее активной была композиция с янтарной кислотой РГПУ-223, которая превосходила нейроглутам по выраженности ноотропного, нейропротекторного действия, способности повышать физическую выносливость, но уступала ему по антидепрессантной и анксиолитической активности (табл. 5).

Таблица 5.

Результаты скрннннга соединений с нейропспхотроиноп активностью в ряду композиций

нейроглутама с органическими метаболически активными кислотами.

Органические кислоты Лабораторные шифры, дозы Основные эффекты нейропсихотропного действия

(НООССН2)2С(ОН)СООН Лимонная РГПУ-222 52 мг/кг потенцирует анксиолитическое и ноотропное действие, снижает антидепрессантное

НООС(СН2)2СООН Янтарная РГПУ-223 52 мг/кг потенцирует ноотропное, нейропротекторно действие, способность повышать физическую выносливость, снижает аюссполитическую и антидепрессаетную активность

НООССН(ОН)СН2СООН Яблочная РГПУ-233 52 мг/кг снижает выраженность эффектов нейроглутама

С6Н4(0Н)-С02Н Салм(шовая РГПУ-234 52 мг/кг снижает выраженность эффектов нейроглутама

Скрининговое изучение нейропсихотропных свойств полифункдаонально-замещенных производных фенотропила показало, что все соединения изучаемого ряда уступают фенотропилу по выраженности ноотропного эффекта. Наиболее активны были соединение РГПУ-87, содержащее метоксифенильный заместитель, которое превосходило

фенотропил по выраженности антидепрессивного и противосудорожного действия, а также фенилгидразидсодержащее производное - РГПУ-207, превосходившее фенотропил по анксиолитическому и антидепрессивному действию (табл. 6).

Таблица 6.

Результаты скрининга соединений с невропсихотропнов активностью в ряду полифункционально________замещенных производных фенотропила._

^Г I т й Базисная структура Фенотропил (Ы- карбамоилметил -4-фенші-2-пивоолидон)

Лабораторные шифры, дозы Химические заместители, Л Основные эффекты нейропсихотропного действия

я. Я?

РГПУ-240, 26 мг/кг -фенил н ! уступает по активности фенотропилу

РГПУ-67,23 мг/кг -толил н н уступает по активности фенотропилу

РГПУ-82, 23 мг/кг -фенил сн, н уступает по активности фенотропилу

РГПУ-87, 25 мг/кг -мето ксифе НИЛ н н превосходит фенотропил по антидепрессивному и против осуд о рожно му действию

РГПУ-95, 25 мг/кг -парахлорфенил н н уступает по активности фенотропилу

РГПУ-96, 27 мг/кг -парахлорфенил сн, н уступает по активности фенотропилу

РГПУ-134 30 мг/кг -фенил н н, уступает по активности фенотропилу

РГПУ-207, 31 мг/кг -фенилгндразид н -пиридин превосходит фенотропил по антидепрессивному и анксиолитческому действию

По результатам скрининга веществ с нейропсихотропным дейсвием были выделены перспективные для дальнейшего изучения соединения, которые обладают оригинальным спектром действия: гидрохлорид бета-фенилглутаминовой кислоты (РГПУ-135, нейроглутам) сочетает выраженные антидепрессантное и анксиолитическое действие с ноотропными, нейропротекторными свойствами, способностью повышать физическую выносливость (рис. 1 а); соль фенибута с лимонной кислотой (соединение РГПУ-147, щпрокард) обладает выраженным ноотропным, нейропротекторным и анксиолитическим действием а также активирующими свойствами, стимулирующее физическую работоспособность (рис. 1 б).

Обозначения: 0 баллов - отсутствие эффекта; 1 балл - тенденция к проявлению эффекта (различия статистически значимы не по всем показателям); 2 балла - слабый, но статистически значимый эффект; 3 балла-умеренный эффект; 4 балла - выраженный эффект; 5 баллов - высокая активность.

Острую токсичность цитрокарда и нейроглутама изучали на 2-х видах лабораторных животных (мышах и крысах) с использованием 2-х путей введения (внутрижелудоч-

ного и внутрибрюшинного) по методу Литчфидда и Уилкоксона7. Соединения растворяли в дистиллированной воде и вводили животным в возрастающих токсических дозах из расчета 2 мл/100 г массы тела.

Установлено, что субстанция цитрокарда согласно классификации Саноцкого относится к классу малотоксичных, ее токсичность ниже, чем у исходного вещества - фени-бута. ЛД50 у мышей: при внутрижелудочном введении (независимо от пола) - более 4000,0 мг/кг; при внутрибрюпшнном введении: 2324,1 (2119,4 - 2548,6) мг/кг- у самцов; 2143,0 (1967,0 - 2334,8) - у самок. ЛД50 у крыс: при внутрижелудочном введении (независимо от пола): 3500 (3250,1- 3769,1) мг/кг; при внутрибрюшинном введении: 1708,5 (1456,0 - 2004,9) мг/кг- у самцов, 1491,1 (1361,8 - 1632,6) - у самок. В картине интоксикации превалировали симптомы угнетения ЦНС. На основании результатов макроскопического обследования внутренних органов животных выделены предполагаемые «органы-мишени»: легкие, сердце, печень, почки, а также желудочно-кишечный тракт (при интра-гастральном введении). Вероятные причины гибели - дыхательная недостаточность, сердечно-легочная недостаточность.

Субстанция нейроглутама также относится к классу малотоксичных. В клинике отравления мышей и крыс преобладают прогрессирующие симптомы угнетения ЦНС, отмечались случаи отдаленной летальности преимущественно на 3-7 сутки после введения токсических доз соединения. Ь050 у мышей при внутрижелудочном введении составила: у самцов - 3837,76 (2861,33-5147,41) мг/кг, у самок - 4196,50 (3222,49-5464,92) мг/кг; при внутрибрюшинном введении у самцов - 798,29 (576,49-1105,43) мг/кг, у самок -1139,17(907,16-1430,52) мг/кг. Ь050 у крыс при внутрижелудочном введении составила: у самцов - 9433,68 (8379,49-10620,50) мг/кг, у самок - 8487,25 (7362,79-9783,44) мг/кг; при внутрибрюшинном введении у самцов - 1029,04 (892,12-1186,98) мг/кг, у самок - 950,22 (846,26-1066,95) мг/кг. Предполагаемые «органы-мишени» по результатам морфологического исследования внутренних органов: при интрагастральном введении желудочно-кишечный тракт; независимо от пути введения сердце, печень. Предполагаемые причины гибели животных: сердечная недостаточность, остановка дыхания.

При изучении зависимости нейропсихотропного действия наиболее активных новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты от дозы для цитрокарда использовали 2 предполагаемых пути введения: интрагастральный и интраперитонеальный, а также дозы равные 1/100, 1/30 и 1/10 от 1£>50 для соответствующего пути введения - 15, 50 и 150 мг/кг (для интраперитонеального); 35, 120 и 350 мг/кг (для интрагастрального). Нейроглу-там вводили крысам в дозах: экспериментально доказанная терапевтически эффективная 26 мг/кг, составляющая порядка 1/300 от ЬОго; 13 мг/кг - доза, в 2 раза меньшая, чем терапевтически эффективная, приближающаяся к 1/600 от ІЛЗ50; 52 мг/кг - доза в 2 раза большая, чем терапевтически эффективная, приближающаяся к 1/150 от 1Л)50; 78 мг/кг -доза в 3 раза большая, чем терапевтически эффективная, приближающаяся к 1/100 от 1.1)50; 130 мг/кг - доза в 5 раз большая, чем терапевтически эффективная, приближающаяся к 1/60 от 1Х>50; 650 мг/кг - приближающуюся к 1/10 от ЬО50, в 25 раз большая, чем терапевтически эффективная (субтоксическая). При интраперитонеальном введении цитро-кард вводили крысам в дистиллированной воде за 30 мин. до выполнения тестов; при интрагастральном введении цитрокард и нейроглугам вводили животным в 2%-ной крахмальной слизи за 1 ч до тестирования.

При внутрибрюшинном введении в дозе 15 мг/кг РГПУ-147 проявляет ноотропную, анксиолитическую, антидепрессантную и анальгегическую активность (рис. 2). Увеличе-

7 Выражаем искреннюю признательность и благодарность за помощь в планировании, организации, непосредственном выполнении исследования и анализе его результатов д.б.н., зав. лабораторией лекарственной безопасности, зам. директора НИИ Фармакологии ВолгГМУ Бугаевой Л.И., к.б.н., н.с. лаборатории мор-фотоксикологии НИИ Фармакологии ВолгГМУ Кузубовой Е.А., а также всем сотрудникам лабораторий лекарственной безопасности и морфотоксикологии НИИ фармакологии ВолгГМУ.

ние дозы цитрокарда до 150 мг/кг приводило к усилению седативного, анксиолитического и анапьгетического действия.

25 8 20 Ь 151 ю

Hf-

111 •

% £ 5 -

а I Ш |f I

15мг/кг 50мг/кг 150мг/кг контроль

X 5 2 I 4 . JL.

1 1 з I I 2- | S ! § 0 - fir F

- it"

15 мг/кг 50 мг/кг 150 мг/кг контроль

В)

Г)

§ 8

60 40 | 30 | 20

{Ш—Pfer

fa

15 мг/кг 50 мг/кг 150 мг/кг контроль

40

>

* 20 10 pfr pfcjj

с та I 1

•

15мг/кг 50м г/кг 150м г/кг контроль

Д)

Е)

Рис. 2. Изучение зависимости доза-эффект для цитрокарда при внутрибрюшшшом введении (п=8) А)

Изучение ноотропной активности в тесте ТЭИ (ЛП - латентный период); Б) Изучение двигательной активности в тесте ОП; В) Изучение анксиолитической активности в тесте ПКЛ (Of - открытые рукава лабиринта); Г) Изучение анксиолигической активности в конфликтной ситуации по Vogel; Д) Изучение антидепрессантной активности в тесте принудительного плавания по Porsoll; Е) Изучение анальгетической активности в тесте электроболевого раздражения лап животных. Обозначения: * - р<0,05 и ** - р<0,01 - по отношению к показателю контрольной группы животных, # - р<0.05 и ## - р<0,01 - по отношению к показателю группы животных, получавших цитрокард в дозе 150 мг?кг (ранговый однофакторный анализ Краскела-Уоллиса, критерий Нъюмена-Кейлса).

При пероральном введении ноотропная и антидепрессантная активность РГПУ-147 наиболее выражена в дозе 120 мг/кг. Повышение дозы до 350 мг/кг приводит к ослаблению ноотропного действия, но к усилению анксиолитического и анальгетического эффектов (рис. 3).

Таким образом, наиболее выраженное нейропсихотропное действие отмечается у цитрокарда при внутрибрюшшшом введении в интервале доз 15-50 мг/кг и при пероральном введении - в интервале доз 35-120 мг/кг.

35 мг/кг

120 мг/кг

350 мг/кг

контроль

35 мг/кг 120 мг/кг 350 мг/кг контроль О через 24 часа В через 7 суток В через 14 суток_■ через 30 суток

35 мг/кг

120 мг/кг 350 мг/кг

35 мг/кг

120 мг/кг

350 мг/кг контроль

В) Г)

Рве. 3. Изучение зависимости доза-эффект для соединения РГПУ-147 при пероральном введении (п=8) А) Изучение ноотропной активности в тесте ТЭИ (ЛП - латентный период)-, Б) Изучение анксиолитической активности в конфликтной ситуации по Vogel; В) Изучение антидепрес-сантной активности в тесте принудительного плавания по Porsolt; Г) Изучение анальгетической активности в тесте электроболевого раздражения лап животных. Обозначения: *- р<0,05 и " -р<0,01 - по отношению к показателю контрольной группы животных: А - р<0,05 - по отношению к показателю группы животных, получавших цитрокард в дозе 120мг/кг; Н -р<0,05 и М -р<0,01 - по отношению к показателю группы животных, получавших цитрокард в дозе 350 мг/кг (ранговый однофакторный анализ KpaCK/üta- Уоллиса, критерий Ньюмена-Кешса).

В широком диапазоне доз 13-130 мг/кг нейроглутам проявляет антидепрессивные свойства: увеличивает у животных количество прыжков и уменьшает длительность иммобилизации в тесте Порсолта (рис. 4). Данный эффект при использовании нейроглутама в дозе 26 мг/кг статистически значимо более выражен, чем в других дозах.

Рис. 4. Влияние нейроглутама в различных дозах на депрессивноподобяое поведение животных в тесте «принудительного неизбегаемого плавания» по Порсолту (п=8). Обозначения: ' -р<0,05; ** - р<0,01 - по сравнению с контрольной группой животных (ранговый однофакторный анализ Краскела-Уоллиса, критерий Ньюмена-Кешса).

В интервале терапевтических доз 13-78 мг/кг нейроглутам оказывал активирующее действие - повышал двигательную и исследовательскую активность животных в ОП, в наибольшей степени выраженное при использовании дозы 13 мг/кг (рис. 5). В субтоксической дозе 650 мг/кг нейроглутам подавлял локомоторную и исследовательскую активность у животных, что указывает на наличие у него седативных свойств в этой дозе.

б ) ориентировочно-исследовательская активность

Рис. 5. Влияние нейроглутама в различных дозах на двигательную и исследовательскую активность животных в тесте «открытое поле» (п=8). Обозначения: * - р<0,05; ** - р<0,01 - по сравнению с контрольной группой животных (ранговый однофакторный анализ Краснела-Уоллиса, критерий Ньюмена-Кейлса).

Во всех изученных дозах нейроглутам проявил анксиолитические свойства. Наиболее выраженный анксиолигический эффект отмечался у него в дозах 26-78 мг/кг, в которых он статистически значимо увеличивал у животных время пребывания в открытых рукавах ПКЛ, а также количество свешиваний с них (рис. 6 а, б); уменьшал ЛП первого наказуемого подхода к поилке и увеличивал количество таких подходов в конфликтной ситуации по Vogel (рис. 6 в, г). В дозах 26 и 52 мг/кг нейроглутам проявлял анксиолитиче-скую активность статистически значимо более выраженную, чем в других дозах.

а) суммарное время в открытых рухавах

В) количество овешиваний о открытых рукавов

Рис. 6. Влияние нейроглутама в различных дозах на поведение животных в тестах «приподнятый крестообразный лабиринт а), б) (ПКЛ) и «конфликтной ситуации по \^е1» в), г) (п=8). Обозначения: * • р<0,05; ** - р<0,01 - по сравнению с контрольной группой животных (ранговый однофакторный анализ Краскела-Уоллиса, критерий Ньюмена-Кейлса).

В широком диапазоне доз 13-130 мг/кг у нейроглутама отмечался ноотропный эффект: увеличение ЛП первого захода в темный отсек в тесте УРПИ и уменьшение ЛП подныривания в ТЭИ при воспроизведениях рефлексов преимущественно через 14 суток после выработки (табл. 7). Данный эффект был статистически значимым в дозах 26 и 52 мг/кг. Нейроглутам в субтоксической дозе вызывал нарушение выработки навыка в ТЭИ, что, вероятно является следствием седативного эффекта.

Таблица 7.

Влияние нейроглутама в различных дозах на выработку и закрепление условных рефлексов в тестах

«УРПИ»и«ТЭИ»

Группы животных (п=8) ЛП захода в темный отсек, М±т ЛП подныривания, М±т

Обучение Воспроизведе нне ч/з 24 ч Воспроизведе ние ч/з 14 сут Обучение Воспроизведе нне ч/з 24 ч Воспроизведе ние ч/з 14 сут

Контроль 45,13±5,24 162,50*17,50 98,00*31,01 49,75*3,27 32,75*2,14 25,50*1,89

Нейроглутам в различных дозах

13 мг/кг 53,00*4,65 180,00*0,00 157,75*12,08 40,75*5,45 29,63*2,76 22,38*1,60

26 мг/кг 42,75±4,45 180,00*0,00 171,28*5,68* 38,75*7,31 24,38*1,66* 17,00*1,10**

52 мг/кг 58,38*4,19 180,00*0,00 167,75*8,71* 42,50*5,97 25,88*2,31 * 19,88*1,52*

78 мг/кг 55,00±4,39 180,00*0,00 151,75*14,08 43,88*5,57 31,13*2,52 22,00*1,21

130 мг/кг 64,25±6,43 180,00*0,00 143,00*20,85 46,00*3,97 34,75*2,46 27,50*2,63

650 мг/кг 73,38±6,76» 179,38*0,63 138,13*18,02 62,50*436* 45,50*4,12* 38,88*3,77**

Обозначения: ЛП - патентный период; * - р<0,05; ** - р<0,01 - по сравнению с контрольной группой животных (ранговый однофакторный анализ Краскела-Уоллиса, критерий Иъюмена-Кейлса).

При сравнительном углубленном изучении нейропсихотропных свойств наиболее активных соединений и известных препаратов с близким спектром действия использовали дозы соединений наиболее эффективные по результатам изучения зависимости «доза-эффект».

Фенотропил, дитрокард, нейроглутам и фенибут в условиях восьмилучевого лабиринта с равномерным распределением пищевого подкрепления улучшали показатели пространственной памяти у животных (как кратко-, так и долговременной), что свидетельствует о наличии у них специфического ноотропного действия. Ноотропный эффект РГПУ-147 в данном тесте был сопоставим с эффектом фенотропила и статистически значимо превосходил эффект фенибута. Нейроглутам проявил сопоставимое с фенибутом ноотропное действие (табл. 8).

Таблица 8.

Изучение ноотропной активности цитрокарда, нейроглутама н препаратов сравнения в условиях

радиального восьмилучевого лабиринта с равномерным распределением пищевого подкрепления.

Группы (п=8) Время выработки навыка пространственной ориентации

10 день 12 ень 13 день

время в лабиринте (сек.) количество БЗ время в лабиринте (сек.) количество БЗ время в лабиринте (сек.) количество БЗ

фенотропил 249,33 ±81,79 ** 6,67*0,71 81,83* 19,23 "л 8« ІШШ

РГПУ-147 282,67 ±74,28 ** 6,5*0,72 113,5 ±27,35" 7,67 ±0,33 * іШШ

РГПУ-135 354,62 ±71,52 * 6,33 ±0,76 163,58* 31,26 * 7,33 ±0,49 ' 108,5 ±18,6 7,67*0,33 *

фенибут 397,67 ±60,57 *& 6,17*0,83 219,67 ± 34,06 * 7*0,63 129,7 ±32,71 ** 7,67 ±0,33 *

контроль 660,33 ±61,82 4,83 ±0,65 395,83 ±69,61 5,33 ±0,61 362,5 ±43,59 4,83 ±0,79

Обозначения: БЗ - безошибочные заходы, * - р<0,05 и ** - р<0,01 - различия статистически значимы по отношению к показателю контрольной группы животных: л - р<0,05 - по отношению к показателю группы животных, получавших фенибут; & - р<0,05 - по отношению к показателю группы животных, получавших мексидол (ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса, критерий Ньюмена-Кейлса).

Оценка эмоционально-мотивационной сферы поведения животных в тесте парного взаимодействия осуществлялась у крыс с исходным средним типом поведенческой активности (животных отбирали по показателю двигательной активности в «открытом поле»). Исследование проводилось в две серии экспериментов, позволяющих оценить состояние эмоционально-мотивационной сферы животных в условиях сохранения социальных и ие-

рархических связей внутри групп и в условиях социального стресса (вызванного изоляцией). В первой серии теста парного взаимодействия при сохранении социальных и иерархических связей внутри групп животных показано, что, цитрокард, нейроглутам и, в меньшей степени, флуоксетин и фенибут, изменяли спектр эмоционально-поведенческих реакций по сравнению с исходным состоянием: статистически значимо повышали число позитивных поведенческих реакций (доброжелательность, коммуникабельность, комфортное состояние) и снижали негативность (агрессивность, тревожность, конфликтное поведение при контакте с партнером) (рис. 7).

Рис» 7. Спектр эмоционально-поведенческих реакций крыс на модели зоосоциального взаимодействия. 1-я серия. (п=8).

Обозначения:

1 - агрессивность,

2 - тревожность,

3 - негативность,

4 - исследовательское поведение,

5 - самообеспечение,

6 - доброжелательность,

7 - комфорт,

8 - выраженность мотивации,

9 - неадекватность поведения,

10 - конфликтность,

11 - коммуникабельность,

12 - соматомоторные элементы поведения.

Величина показателя по каждой сессии соответствует отношению суммарного балла второй сессии экспериментов к первой.

* - р<0,05 и ** - р<0,01 - различия статистически значимы по отношению к первой сессии (Критерий Уил-коксона).

Рис. 8. Спектр эмоционально-поведенческих реакций крыс на модели зоосоциального взаимодействия. 2-я серия. (п=8). Обозначения;

1 - агрессивность,

2 - тревожность,

3 - негативность,

4 - исследовательское поведение,

5 - самообеспечение,

6 - доброжелательность,

7 - комфорт,

8 - выраженность мотивации,

9 - неадекватность поведения,

10 - конфликтность,

11 - коммуникабельность,

12 - соматомоторные элементы поведения.

Величина показателя по каждой сессии соответствует отношению суммарного балла второй сессии экспериментов к первой.

* - р<0,05 и ** - р<0,01 - различия статистически значимы по отношению к первой сессии (Критерий Уил-коксона).

А) РГПУ-147 1

Б) РГЛУ-135 1

В) ФЕНИБУТ ] **

Г) ФЛУОКСЕТИН\ •*

А) РГПУ-147 1**

Б) РГПУ-135 1

Н) ФЕНИБУТ 1 *

Г) ФЛУОКСЕТИН1

При моделировании у животных социального (изоляционного) стресса во всех экспериментальных группах на фоне 7-дневного введения веществ наблюдалось статистически значимое снижение показателей тревожного поведения и увеличение показателей комфортного состояния, а также двигательной и исследовательской активности по сравнению с первым тестированием непосредственно после стрессирования (рис. 8). РГПУ-147, РГПУ-135 и флуоксетин статистически значимо снижали агрессивность и конфликтность животных при контакте с партнером и негативность поведения. Полученные данные говорят о наличии у цитрокарда и нейроглутама противотревожного, антиагрессивного, активирующего и стресспротекторного эффектов. Соединение РГПУ-147 вызывает наиболее выраженные изменения спектра эмоционально-поведенческих реакций у стрессированных животных по сравнению с исходным состоянием.

Углубленное изучение антидепрессивной активности нейроглутама (26 мг/кг) проводили на модели «выученной беспомощности» с использованием препаратов сравнения: амитриптилин (10 мг/кг), имипрамин (15 мг/кг), флуоксетин (20 мг/кг), пароксетин (10 мг/кг), сертралин (10 мг/кг), венлафаксин (10 мг/кг), Нейроглутам при профилактическом и лечебном введении, а также все изученные препараты сравнения оказывали антидепрессивное действие: статистически значимо увеличивали ЛП иммобилизации, количество прыжков и время активного плавания, уменьшали длительность иммобилизации у животных по сравнению с группой «контроль+депрессия» (рис. 9).

В 1-кратное введение_■ 10-дневное введение

б) длительность иммобилизации

в) количество прыжков

и 1-кратное введение ■ 10-дневное введение г) суммарное время активного плавания

И 1-кратное введение

рГ

10-дневное введение

В 1-кратное введение

■ 10-дневное введение

Рис. 9. Влияние нейроглутама и препаратов сравнения на выраженность депрессивного поведения в «тесте неизбегаемого принудительного плавания» по Порсолту у животных с «выученной беспомощностью» (п=8). Обозначения: К интактный - контрольные интактные животные, К+депрессия - контрольные животные с «выученной беспомощностью», подвергшиеся стрессу; И - р<0,05; ## - р<0,01 -по сравнению показателем группы животных К интактный соответствующего дня исследования; * -р<0,05; ** - р<0,01 - по сравнению с показателем группы животных К+депрессия соответствующего дня исследования (ранговый однофакторный анализ Краскела-Уоллиса, критерий Ньюмена-Кешса).

В тесте П/ПС нейроглутам как при профилактическом, так и при лечебном введении, а также все препараты сравнения статистически значимо увеличивали потребление и процент предпочтения сахарозы у животных по сравнению с группой животных «контролы-депрессия», что подтверждает их антидепрессивную активность (рис. 10).

а) коэффициент потребления оахарозы (г/100 г массы тела)

110-дневное введение

а 1-кратное введение

б) потребление (предпочтение) оахарозы с % к общему потреблению жидкости

В 1-кратной введение_■ 10-дневное введение

Рис. 10. Влияние нейроглутама и препаратов сравнения на выраженность гедонистической мотивации в тесте потребления/предпочтения сахарозы у животных с «выученной беспомощностью»

(п=8). Обозначения: К интактный - контрольные интактные животные, К+депрессия - контрольные животные с «выученной беспомощностью», подвергшиеся стрессу; И - р<0,05; М - р<0,01 - по сравнению показателем группы животных К интактный соответствующего дня исследования; * - р<0,05; ** - р<0,01 по сравнению с показателем группы животных К+депрессия соответствующего дня исследования (ранговый однофакторный анализ Краскела-Уоллиса, критерии Ныамена-Кейлса).

По выраженности антидепрессивного эффекта нейроглутам был сопоставим с имипрамином, пароксетином, венлафаксином и превосходил амитриптилин, флуоксегин и сертралин.

Нейроглутам как при профилактическом, так и лечебном введении уменьшал выраженность гипертрофии надпочечников, инволюции тимуса и селезенки, степени язвенного поражения слизистой желудка у животных - проявлял егресспротекторные свойства (табл. 9). Препараты сравнения также уменьшали стрессиндуцированные морфосоматические нарушения у животных, но по эффективности уступали нейроглута-

МУ _ Таблица 9.

Влияние нейроглутама и препаратов сравнения на выраженность стрессиндуцированных

морфосоматнческих изменений у животных с «выученной беспомощностью».__

Экспериментальные группы (п=8)

]

Контроль интактный

Контроль +депрессия

Контроль2+депрессия

РГПУ-І35 профил

РГПУ-135 лечение

Имипрамин

Пароксетин

Флуоксетин

Сертралин

Венлафаксин

Амитриптилин

Коэффициент

массы надпочечников (мг/100 г массы),

Шт

14,5±0,8

20,6±1,8 #

26,0± ї,5 Ш*

13,1±0.7»»

15,5±0,7 »

14,8±1,2 *

19,СМИ

15,8±0,8 *

14,7±1,5 *

17,8±1,5

20,4±1,9

Степень язвенного поражения слизистой

желудкЬ, М±т

0,5±0,2

2,8±0,4 Ш

4,2±0,4 ##*

0,8±0,3 «»

1,5±0,2 '

1,3±0,3 '

1,5±0,3 *

2,5*0,2

2,2±0,3

2,2±0,4

1,3±0,4 *

Коэффициент массы тимуса (мг/100 г массы), М±ш

73,8±6,5

56,5±3,1 #

51,74:4,2 #

60,8±2,9

70,2±3,6 *

67,4±3,3 *

66,6±3,4 *

56,6±3,7

73,Ш,4 '

72,3±5,7 ♦

73,5±7,0 "

Коэффициент массы селезенки (мг/100 г массы), М±ш

444,3*39,6

322,0*13,8 #

263,6*) 7,8 <УГ

374,3*15,6 «

418,1±24,5 **

33 ¡,¿±28,7

345,7*37,8

324,7±12,6

343,3±21,7

329,1±28,6

314,4±26,6

Обозначения: # - р<0,05, М - р<0,01 - по сравнению показателем группы животных К интактный; * -р<0,05; ** - р<0,01 по сравнению с показателем группы животных К+депрессия; (ранговый однофакторный анализ Краскела-Уоллиса, критерий Ньюмена-Кейлса•).

При изучении тендерных особенностей нейропсихотропного действия, возможности развития толерантности и синдрома отмены при длительном введении наиболее активных соединений использовали терапевтические дозы (среднюю и максимальную) и субтоксическую (равную 1/10 от Ш50). Цитрокард (50, 250 700 мг/кг) и нейроглутам (26, 130, 650 мг/кг) вводили самцам и самкам крыс интрагастрально 14-дневным, 1- и 6-

месячным курсом . Полученные данные сравнивали с эффектами 1-кратного введения соединений в тех же дозах. Изучение возможного синдрома отмены после 6-месячного ин-трагастрального введения цитрокарда (50, 250 700 мг/кг) и нейроглутама (26, 130, 650 мг/кг) проводили через 1 нед., а затем через 1 мес. после отмены в тех же тестах.

В ОП соединение РГПУ-147 в терапевтической дозе 50 мг/кг вызывало повышение локомоторной и исследовательской активности (статистически значимое в интервале І-кратное-14-дневное введение) у самцов и, в і САМЦЫ

а) двигательная активность

»£ ■ 1-кратное

Об месяцев

б) ориентаровочно-исследователыжая активность

■ 1-кратное

еныпей степени у самок крыс (рис. 11). САМКИ

а) двигательная активность

б) оривнтировочмо^тсолодоватольекая активность

■ 1 -кратное

Рис. 11. Влияние цитрокарда при 1-кратном и хроническом введении самцам н самкам крыс в терапевтических и субтокснческон дозах на поведение животных в тесте «Открытое поле».

Обозначения: * - р<0,05; ** - р<0,01 - по сравнению с контрольной группой животных, получавших дистиллированную воду; # - р<0,05; ## - р<0,01 - по сравнению с интактной группой животных (ранговый однофакторный анализ Краскела-Уоллиса, критерий Ньюмена-Кейлса, критерий Дана).

Активирующее действие цитрокарда было более выраженным при 1-кратном его введении, но сохранялось и при длительном введении, что говорит в пользу отсутствия развития толерантности к нему у животных. В субтоксичесой дозе 700 мг/кг соединение РГПУ-147 способствовало статистически значимому снижению двигательной и исследовательской активности - у животных как при 1-кратном, так и, в равной степени, при длительном (14 дней- 6 месяцев) введении - проявляло седативные свойства. Седативный эффект соединения РГПУ-147 в дозе 700 мг/кг, как и активирующий в дозе 50 мг/кг был более выражен у самцов крыс, что указывает на тендерные различия в нейропсихотропном действии данного соединения.

В ПКЛ соединение РГПУ-147 во всех использованных дозах (наиболее выраженно в дозе 50 мг/кг, наименее - в дозе 700 мг/кг) проявляло анксиолитические свойства: статистически значимо увеличивало время пребывания в открытых рукавах у самцов, и, в меньшей степени, у самок крыс. Тот факт, что выраженность данного эффекта была практически равной как при 1-кратном, так и длительном введении цитрокарда, подтверждает отсутствие у него способности вызывать толерантность. Помимо этого, соединение РГПУ-147 в дозе 50 мг/кг при всех сроках введения в равной степени у самцов и самок крыс статистически значимо увеличивало количество заходов в открытые рукава лаби-

8 Исследование выполнено совместно сотрудниками кафедры фармакологии и биофармт^и ФУВ, фармакологии Волг1МУ, лаборатории лекарственной безопасности НИИ фармакологии ВолгГМУ.

ринта, а в дозе 700 мг/кг - уменьшало значение данного показателя, что подтверждает сочетание у него анксиолитического эффекта с активирующим - в средней терапевтической дозе 50 мг/кг и с седативным - в субтоксической дозе 700 мг/кг (рис 12) САМЦЫ САМКИ

Рис. 12. Влияние шггрокарда при 1-кратном и хроническом введении самцам и самкам крыс в терапевтических и субтоксической дозах на поведение животных в тесте «Приподнятый крестообразный лабиринт». Обозначения: * - р<0,05; ** - /><0,0/ - по сравнению с контрольной группой животных, получавших дистиллированную воду; # - р<0,05; ## ■ р<0,01 - по сравнению с интактной группой животных (ранговый однофакторный анализ Краскела-Уоллиса, критерий Ньюмена-КеСтса, критерий Дана). Как при однократном, так и при длительном введении (14 дней - 6 месяцев) в терапевтических дозах самцам и самкам крыс, соединение РГПУ-147 оказывало ноотропное действие, что выражалось в увеличении ЛП первого захода в темный отсек в тесте УРПИ при воспроизведении на 14 сутки и увеличении ЛП подныривания в ТЭИ через 24 часа, и, в большей степени через 14 суток после обучения (табл. 10).

Таблица 10.

Влияние шп рок-ярда при 1-кратном и хроническом введении самцам и самкам крыс в

Группы ЛП захода в темный отсек, М±т ЛП подныривания, М±ш

животных Обучени Воспроизведение Обучение Воспроизведение

ч/з 24 ч ч/з 14 сут дение ч/з 24 ч ч/з 14 сут

1 2 3 4 5 6 7 8

самцы

интакт 41,80± 164,00± 95,70±28,12 40,90±6,46 28,40±2,27 22,20±1,94

4,22 16,00

контроль 28,90± 161,60± 100,60± 51,30±2,89 30,60±3,44 22,90±1,99

7,10 15,72 26,77

РГПУ-147 42,60± 180,00± 169,8±7,26* 36,00±6,08 20,50±1,28»# 16,70±1,11*#

50 мг/кг 5,07 0,00

£ РГПУ-147 54,00± 180,00±0,00 149,80± 37,40±4,89 23,50±2,54 21,50±2,01

* 250 мг/кг 7,39 19,87

РГПУ 147 65,30± 180,00±0,00 93,70±19,83 43,90±5,72 30,90±3,11 26,00±2,51

700 мг/кг 6,60

Таблица 10. (Продолжение)

1 2 3 4 5 6 7 8

интакт 34,50± 7,83 151,80± 18,95 103,55± 25,77 35,60±4,37 25,60±3,79 18,30±3,38

контроль 39,20± 8,54 148,30± 21,19 92,10±29,30 37,90±6,11 27,40±4,02 19,90±1,47

РГПУ-147 50 мг/кг 38,30± 6,33 180,00±0,00 161,10± 16,41 30,10±5,02 17,70± 1,54*# 12,10± 0,71 **т

X л РГПУ-147 250 мг/кг 40,70± 6,97 168,50± 11,50 143,60± 19,72 31,90± 13,54 24,50±3,00 14,80±1,96

4 РГПУ 147 700 мг/кг 45,30± 6,55 160,00± 13,63 80,50±24,14 20,63±5,08 26,40±5,08 21,00±2,16

1 месяц интакт 34,50± 3,53 164,20± 15,80 118,10± 25,77 32,50±6,16 23,50±3,85 19,50±3,66

контроль 36,70± 6,46 150,80± 19,49 93,10±28,97 34,20±4,99 24,50±3,10 20,70±2,07

РГПУ-147 50 мг/кг 34,10± 5,90 180,00±0,00 174,00± 6,00» 29,30±7,34 17,90±2,11 14,10± 1,44*#

РГПУ-147 250 мг/кг 33,50± 5,70 165,30± 14,70 146,80± 22,14 33,90±5,63 25,30±2,79 19,50±2,02

РГПУ 147 700 мг/кг 41.10± 6,29 163,60± 16,40 68,70±26,12 38,80±6,59 27,00±3,53 21,80±2,14

6 месяцев интакт 41,00± 5,76 166,00± 14,00 85,50±30,18 35,50±4,13 24,70±2,78 19,10±2,65

контроль 38,40± 6,89 164,50± 15,50 97,63±31,42 34,20±5,35 25,80±2,94 19,90±2,02

РГПУ-147 50 мг/кг 49,67± 4,29 180,00±0,00 168,13± 7,98* 37,00±4,89 22,67±2,98 13,78± 1,57*#

РГПУ-147 250 мг/кг 55,50± 7,86 180,00i0,00 141,75± 20,36 38,00±6,06 26.80±4,52 18,00±2,20

РГПУ 147 700 мг/кг 68,13± 6,13 155,00± 16,76 59,38±21,41 40,63±5,90 28,00±5,02 19,88±2,95

самки

1-кратное интакт 39,60± 4,91 150,00± 20,00 113,60±27,15 39,10±7,19 25,50±2,75 19,80±2,24

контроль 42,50± 6,16 166,50± 13,50 116,70±22,59 43,80±7,68 27,50±2,67 20,50±2,06

РГПУ-147 50 мг/кг 36,60± 5,03 180,00±0,00 173,80± 6,20*# 36,20±5,66 19,30±2,43* 13,60± 1,23**1?

РГПУ-147 250 мг/кг 42,20± 6,33 167,20± 12,80 160,40±13,74 42,80±3,78 23,70±1,94 16,50±1,56

РГПУ 147 700 мг/кг 52,60± 6,19 158,00± 16,13 72,50±23,67 48,80±7,18 26,40±3,83 19,10±1,72

14-дневное интакт 39,80± 7,09 167,60± 12,40 126,40±22,37 42,7<Н6,65 27,10±3,74 21,20±2,20

контроль 40,60± 5,99 154,30± 17,58 U8,30±25,50 39,50±3,53 26,70±2,65 20,60±2,43

РГПУ-147 50 мг/кг 38,40± 5,15 180,00±0,00 165,90± 3,98*# 38,40±5,59 18,30± 2,64*# 12,30± 1,48**#

РГПУ-147 250 мг/кг 42,80± 6,63 180,00±0,00 148,90±16,70 41,50±5,44 23,80±3,08 17,70±2,35

РГПУ 147 700 мг/кг 47,50± 6,02 167,60± 12,40 58,00±23,27 47,20±6,01 25,80±2,20 21,30±1,72

1 месяц интакт 40,10± 5,01 180,00±0,00 U5,20±26,55 39,10±6,87 26,00±3,81 18,70±2,79

контроль 44,40± 6,11 165,40± 14,60 103,90±25,57 40,30±7,33 26,30±3,52 19,40±2,14

РГПУ-147 50 мг/кг 39,10± 6,71 180,00±0,00 161,10± 12,22*# 37,20±4,26 20,50±2Д9 13,10± 1,62*#

РГПУ-147 250 мг/кг 41,30± 6,77 180,00±0,00 149,40*16,16 41,40±5,41 24,40±2,91 18,10±2,16

Таблица 10. (Продолжение)

1 2 3 4 5 6 7 8

РГПУ 147 700 мг/кг 55,70± 6,14 167,60± 12,40 67,60±23,03 48,30±6,32 29,70±3,62 21,9041,79

интакт 42,50± 6,59 164,50± 15,50 108,30±27,88 40,20±6,34 22,30±3,69 16,10±2,04

контроль 45,20±9,1 9 167,60±12,40 99,00±27,10 37,80±5,18 20,00±3,17 17,10±1,65

РГПУ-147 50 мг/кг 38,70±4,5 8 180,00±0,00 165,70±11,53* # 39,80±4,56 16,90±2,49 10,90±1,72*#

8 к РГПУ-147 250 мг/кг 43,00±5,6 0 180,00±0,00 150,40±18,70 42,20±5,66 20,70±2,81 16,20±2,09

£ РГПУ 147 700 мг/кг 57,00±11, 45 180,00±0,00 48,50±20,75 54,67±10,77 34,00±4,23 22,83±2,02«#

Обозначения: * - р<0,05: ** - р<0,01 - по сравнению с контрольной группой животных, получавших дистиллированную воду; # - р<0,05; ## -р<0,01 - по сравнению с интактной группой животных (ранговый однофакторный анализ Краскела-Уоллиса, критерий Ныомена-Кейлса, критерий Дана).

Наиболее выраженное ноотропное действие отмечалось у соединения РГПУ-147 при использовании его в дозе 50 мг/кг, в которой перечисленные эффекты в тестах УРПИ и ТЭИ были статистически значимыми. Ноотропный эффект цитрокарда проявлялся в равной степени у самцов и самок крыс. При использовании в субтоксической дозе (700 мг/кг) шггрокард нарушал выработку и закрепление рефлексов пассивного избегания и, в большей мере, экстраполяционного избавления, преимущественно у самок крыс, что связано с его седативным действием в данной дозе, которое в большей степени Нейроглутам в тесте ОП в дозе 26 мг/кг как при 1-кратном, так и при длительном 14 дней - 6 месяцев введении проявлял активирующий эффект (повышал локомоторную и исследовательскую активность животных), в большей мере выраженный у самок крыс (рис 13).

терапевтических и субтоксической дозах на поведение животных в тесте ОП. Обозначения: * - р<0,05: ** - р<0,01 - по сравнению с контрольной группой животных, получавших дистиллированную воду: # -р<0,05; № - р<0,01 - по сравнению с интактной группой животных (ранговый однофакторный анализ Краскела-Уоллиса, критерий Дана).

В дозе 130 мг/кг нейроглутам статистически значимо снижал данные показатели, в большей мере у самок. В дозе 650 мг/кг нейроглутам, как при 1-кратном, так и длительном введении снижал данные показатели (более выражено у самок). Самки оказались более

чувствительны, чем самцы как к активирующему действию нейрогяутама в дозе 26 мг/кг, так и к седативному в дозе 650 мг/кг.

В тесте ПКЛ (рис. 14) в равной степени у самцов и самок крыс, получавших нейроглутам в дозе 26 мг/кг, и, в меньшей степени, в дозах 130 и 650 мг/кг как 1-кратно, так и длительно (14 дней - 6 месяцев), увеличивалось время пребывания в открытых рукавах, что говорит об анксиолитическом действии. Сохранение анксиолитической активности у нейроглутама во всех изученных дозах при длительном введении, от 14 дней до 6 месяцев, говорит об отсутствии к нему толерантности как у самцов, так и самок крыс.

терапевтических и субтоксической дозах на поведение животных в тесте ПКЛ. Обозначения: * - р<0,05: ** - р<0,01 - по сравнению с контрольной группой животных, получавших дистиллированную воду: # -р<0,05: ## - р<0,01 - по сравнению с интактнои группой животных (ранговый однофакторный анализ Краскела-Уоллиса, критерий Ньюмена-Кейлса, критерий Дана).

В тесте Порсолта (рис. 15) антидепрессивное действие нейроглутама при использовании высокой (130 мг/кг) и, в большей степени, средней (26 мг/кг) терапевтических доз отмечалось при всех сроках применения, что выражалось в статистически значимом увеличении количества прыжков и уменьшении времени иммобилизации у крыс. САМЦЫ САМКИ

Рис. 15. Влияние нейроглутама при 1-кратном н хроническом введении самцам и самкам крыс в терапевтических и субтоксической дозах на депрессивноподобное поведение животных в тесте «принудительного неиэбегаемого плавания» по Порсолту. Обозначения: * - р<0,05; ** - р<0,01 - по сравнению с контрольной группой животных, получавших дистиллированную воду: # - р<0,05; М - р<0,01 -по сравнению с интактнои группой животных (ранговый однофакторный анализ Краскела-Уоллиса, критерий Ньюмена-Кейлса, критерий Дана).

Выраженность эффектов при длительном применении нейроглутама сохранялась на том же уровне, что и при 1-кратном его введении, что указывает на отсутствие толерантности к нему у животных. При 1-кратном и хроническом введении в дозе 650 мг/кг у данного соединения сохранялась тенденция к антвдепресснвному действию, но большинство эффектов не было статистически значимо.

Как через 1 неделю, так и через 1 месяц после прекращения длительного 6-месячного интрагастрального введения цитрокарда и нейроглутама самцам и самкам крыс в терапевтических и субтоксических дозах при тестировании в ОП, ПКЛ, тесте Порсолта, УРПИ и ТЭИ не выявлено поведенческих нарушений у животных по сравнению с интактными и контрольными крысами, указывающих на развитие у них синдрома отмены.

Таким образом, результаты проведенного исследования позволили выделить два соединения с поливалентным нейропсихотропным действием, высокой активностью, низкой токсичностью, отсутствием способности вызывать толерантность и синдром отмены (последнее косвенно указывает на отсутствие у них аддиктивного потенциала) -цитрокард и нейроглутам. Приеденные данные указывают на перспективность дальнейшего изучения цитрокарда в качестве самостоятельного нейропсихотропного средства с ноотропным, нейропротекторным и анксиолитическим действием. В проведенных ранее исследованиях у данного соединения была выявлена высокая нейро- и кардиопротекторная активность, механизмы действия цитрокарда уже изучены достаточно детально (Бородкина Л.Е., 2009; Перфилова В.Н., 2009; Воронков A.B., 2011, Самотруева М.А., 2012). В связи с этим далее проводили изучение особенностей нейропсихотропной активности и аспектов механизма действия нейроглутама.

На доклиническом этапе исследований новых лекарственных средств с нейропсихотрошсым действием целесообразно рассмотрение возрастных особенностей их фармакологической активности. Известно, что на эффективность нейропсихотропных лекарственных средств значительное влияние оказывает возраст пациента, что объясняется возрастными особенностями их фармакокинетики и фармакодинамики, связанными с возрастными изменениями гормонального статуса, чувствительности рецепторов к эндо- н экзогенным лигандам, особенностями функционирования нейромедиаторных и ферментативных систем и т.д. С учетом того, что наибольшее число назначений нейро- и психотропных средств приходится на пациентов среднего фертильного и пожилого возраста (детский возраст часто является ограничением или противопоказанием к их назначению), важно было на доклиническом этапе выполнить экспериментальное сравнение эффективности разрабатываемого на основе соединения РГПУ-135 средства у животных среднего репродуктивного возраста и старых. Учитывали также, что в различные возрастные периоды половые гормоны оказывают существенное влияние на функциональную активность различных органов и систем, что, в свою очередь, сказывается на эффективности применения лекарственных средств. Поэтому изучение возрастных особенностей нейропсихотропного действия нейроглутама выполняли на самцах и самках крыс: половозрелых 4-месячных и старых 18-месячных. Нейроглутам вводили живвотным однократно внутрижелудочно в терапевтических и субтоксической дозах за 1 ч. до выполнения поведенческих тестов.

В тесте принудительного неизбегаемого плавания по Порсолту у старых контрольных животных, как самок, так и самцов, проявления депрессивнонодобного поведения были выражены в большей степени, чем у крыс среднего возраста: отмечалось сокращение ЛП иммобилизации, увеличение ее продолжительности, уменьшение количества прыжков и времени активного плавания по сравнению с показателями 4-месячных животных соответствующего пола (таблица 11). Нейроглутам в средней (26 мг/кг) и, в меньшей степени, в высокой (130 мг/кг) терапевтических дозах, а также препараты сравнения флу-оксетин (20 мг/кг) и имипрамин (15 мг/кг) оказывали антидепрессивное действие: статистически значимо увеличивали латентный период иммобилизации, количество прыжков и длительность активного плавания, уменьшали длительность иммобилизации у 4-месячных

животных - в равной степени у самок и самцов крыс. В субтоксической дозе (650 мг/кг) нейроглутам проявлял менее выраженные антидепрессивные свойства на 4-месячных самках и самцах крыс, которые проявлялись в статистически значимом уменьшении продолжительности иммобилизации. При этом изучаемое соединение в субтоксической дозе статистически значимо уменьшало количество прыжков у самок и самцов крыс среднего возраста, что может быть связано с проявлениями седативного эффекта в указанной дозе. Наиболее выраженное антидепрессивное действие, сопоставимое с действием имипрамина, соединение РГПУ-135 оказывало в дозе 26 мг/кг, менее выраженное, сопоставимое с действием флуоксетина - в дозе 130 мг/кг. Диазепам (1 мг/кг) у 4-месячных самцов и самок крыс статистически значимо увеличивал время иммобилизации и уменьшал количество прыжков, что может быть следствием угнетения локомоторной активности на фоне седативного действия данного препарата.

Таблица 11.

Возрастные различна антидепрессивного действия исйроглутама у 4-месячных п 18-месячных самок

н самцов крыс в тесте «принудительного нензбегяемого плавания но Порсолту».

возраст Значения показателей (М±т)

Группы ЖИВОТНЫХ ЛП иммобилизации М Суммарное время иммобилизации (С) Количество прыжков Суммарное время активного пла-

1 2 І 4 5 вания (с)

самки

Контроль 88,67±8,89 99,00±4,97 6,67±0,67 79,33*8,81

4> РГПУ-135 26 мг/кг 146,17±11,03" 60,17±6,89" 10,50±0,89" 130,67*11,83"

й РГПУ-135 130 мг/кг 120,00±9,04* 72,17±5,75» 9,67±0,84» 112,50*4,72*

к РГПУ-135 650 мг/кг 99,33±9,52 76,67±7,04* 3,50±0,62* 99,50±5,25

Диазепам 69,50±6,51 123,67±9,07* 4,00±0,93* 62,17±9,82

тГ Фяуоксетин 119,33±13,23* 66,17±6,37* 9,6 7± 1,43* 126,83±14,17*

Имипрамин 158,67±9,76" 57,67±4,37" 11,33+1,33" 139,17*9,67"

Контроль 66,50*7,42 114,67±5,41 4,00±0,89 60,67*8,05

О § РГПУ-135 26 мг/кг 83,33±8,22 93,00±4,46* 6,33*0,80 93,83*3,09*

РГПУ-135 130 мг/кг 72,50±8,76 108,00±В,07 3,50*0,43 84,00±5,42

к и РГПУ-135 650 мг/кг 94,00±4,01* 99,17±8,23 3,83±0,75 65,17*5,04

2 Диазепам 41,17±4,28* 134,50±5,85 3,83*0,60 63,67±9,25

00 Фиуоксетин 68,17±10,55 110,33+5,39 5,00±0,45 74,50±4,51

Имипрамин 81,67±5,54 105,17±5,99 7,67*0,71» 84,33±4,94

самцы

Контроль 82,00±5,15 98,67±4,34 6,17±0,48 76,33±8,73

и РГПУ-135 26 мг/кг 117,33±4,07" 61,ЭЗ±7,24" 10,17±0,65" 115,67*5,56"

£ РГПУ-135 130 мг/кг 102,83±5,39* 76,33±6,47* 9,50*0,85* 103,50*4,69*

« РГПУ-135 650 мг/кг 94,33*7,51 78,17±7,21* 3,33±0,61* 90,33*2,81

2 Диазепам 67,17±7,59 125,83±8,09» 3,67*0,92* 59,00±8,51

Флуоксетин 99,00±5,49* 69,67±6,75* 9,33*1,31* 109,50*5,64*

Имипрамин 125,33±7,20" 59,50±6,11" 10,83*1,30" 120,33±3,54»*

Контроль 63,00±6,54 117,17±4,35 3,67±0,56 55,83*5,95

о РГПУ-135 26 мг/кг 81,83±7,12 98,83±4,83* 6,50*0,76* 85,67*4,36*

а РГПУ-135 130 мг/кг 73,00±8,85 112,17±6,37 3,83*0,48 73,00±5,10

к о РГПУ-135 650 мг/кг 94,83±4,21» 105,17±4,39 4,00±0,63 63,17±6,32

г Диазепам 39,67±3,86* 136,83±5,55 4,00*0,52 57,17±8,19

Флуоксетин 69,00±10,89 113,33±4,70 4,83±0,48 68,33±7,05

Имипрамин 79,67±4,82 104,83±6,06 7,33*0,61* 76,67±6,42

Обозначения: • - р<0,05; " - р<0.01 - по сравнению с контрольной группой животных соответствующего возраста и пола, получавших 2%-ую крахмальную слизь, (ранговый однофакторный анализ Краскела-Уоллиса, критерий Ньюмена-Кейлса).

В экспериментах на старых 18-месячных животных самках, и, в большей степени, самцах крыс соединение РГПУ-135 в средней терапевтической дозе (26 мг/кг) также проявляло антидепрессивное действие, однако, менее выраженное, чем в экспериментах на молодых крысах: увеличивало ЛП иммобилизации, количество прыжков и время активно-

го плавания, уменьшало длительность иммобильности. Изучаемое соединение в высокой терапевтической дозе (130 мг/кг), а также флуоксетин (20 мг/кг) в экспериментах на 18-месячных самках и самцах крыс оказались неэффективными - не оказывали статистически значимого влияния на показатели поведения животных в тесте Порсолта. Диазепам (1 мг/кг) также был менее активен при введении его старым крысам - статистически значимо уменьшал лишь ЛП иммобилизации. Соединение РГПУ-135 в субтоксической дозе (650 мг/кг) и имипрамин (15 мг/кг) оказывали слабое антидепрессивное действие на 18-месячных самок и самцов крыс: нейроглутамин статистически значимо увеличивал лишь ЛП иммобилизации, а имипрамин - лишь количество прыжков.

Таким образом, ангцдепрессивное действие нейроглутама наиболее выражено в средней терапевтической дозе (26 мг/кг) и проявляется одинаково у самок и самцов крыс, в большей степени 4-месячного возраста и в меньшей - 18-месячного. Антидепрессивные свойства нейроглутама в высокой терапевтической (130 мг/кг) и субтоксической (650 мг/кг) дозах, а также препаратов сравнения флуоксетина (20 мг/кг) и имипрамина (15 мг/кг) у животных 18-месячного возраста выражены слабо, их влияние на большинство показателей теста Порсолта не было статистически значимым. В высокой терапевтической дозе (130 мг/кг) нейроглутам в тесте Порсолта проявляет антидепрессивное действие у 4-месячных самцов и самок крыс, сопоставимое с действием флуоксетина и уступающее действию имипрамина, но не оказывает статистически значимого влияния на выраженность депрессивноподобного поведения 18-месячных самцов 11 самок крыс. По выраженности антидепрессивного эффекта нейроглутам в дозе 26 мг/кг в экспериментах на 4-месячных животных сопоставим с имипрамином и превосходит флуоксетин, а в экспериментах на 18-месячных животных превосходит оба указанных препарата сравнения.

Далее был изучен механизм нейропсихотропного действия нейроглутама с использованием компьютерного прогноза рецепторной активности, методов нейрофармакологи-ческого, нейрохимического и нейрофизиологического анализа.

По результатам компьютерного прогноза в системе PASS были выделены основные биомишени, взаимодействие с которыми может лежать в основе механизма действия нейроглутама. Согласно данным прогноза наиболее вероятной в механизме рецепгорного действия РГПУ-135 является глутаматергическая активность - прежде всего в отношении метаботропных глутаматных рецепторов, затем в отношении каинагных рецепторов, затем в отношении АМРА-рецепторов; второй по значимости является ГАМК-ергическая активность; третьей по значимости является активность в отношении ферментов, субстратом которых является глицин.

Нейрофармакологический аналнз взаимодействия с основными нейромедиаторными системами in vivo показал, что в основе нейропсихотропного действия нейроглутама лежат:

1) стимуляция дофаминергнческой нейропередачи (усиливает стереотипию, вызванную агоннстом постсинаптических дофаминовых рецептров апоморфином; уменьшает выраженность каталепсии, вызванной блокатором постсинаптических дофамнновых рецепторов галоперидолом);

2) стимуляция серотонинергической нейропередачи (усиливает интенсивность гиперкинеза, вызванного предшественником серотошша 5-окситриптофаном);

3) стимуляция центральной адренергаческой нейропередачи (потенцирует гипотермический эффект агониста центральных пресинаптических а-адренорецепторов клофелина).

Установлено, что нейроглутам подобно типичным дофаминергическим психостимуляторам в дозе 26 мг/кг повышает спонтанную двигательную активность у мышей линии С57В1/6, но не у Balb/c; в диапазоне доз 13-52 мг/кг усиливает стереотипию, а также межлинейные различия двигательной активности, что говорит о наличии у него психостимулирующего действия (рис. 16).

б}гориэонтальмая двигательная активность

Рис.16. Влияние нейроглутама в различных дозах на параметры спонтанной двигательной активности инбредиых мышей линий Balb/c и С57В1/6 (п=10). Обозначения: * - р<0,05; ** -р<0,01 - по сравнению с показателем контроля соответствующей линии мышей; 8 - р<0,05; ## - р<0,01; НМН - р<0,001 - межлинейные различия (непараметрический U-критерий Манна-Уитни).

Активация спонтанной двигательной активности под влиянием соединения РГПУ-135 у мышей линии С57В1/6, но не у Balb/c характерна для психостимуляторов. Так, эффект амфетамина и сиднокарба наиболее выражен при активном ответе на стресс и в меньшей степени - при пассивно-оборонительном (М.Д. Машковский, СБ. Середенин, Р. Апьтшулер и др., 1980; Новоселов И.А., Черепов А.Б., Раевский К С., Анохин К.В., 2002; Середенин С.Б., 2003; R.C. Alexander, R. Wright, W. Freed, 1996). Усиление моторики, оживление и облегчение инициации движений - специфический признак действия психостимуляторов. Эффект может реализовываться через ряд механизмов, однако, учитывая усиление стереотипии под влиянием соединения РГПУ-135, решающую роль в этом процессе может иметь влияние на дофаминергическую систему. Подтверждением этому предположению служат выявленные при нейрофармакологическом анализе признаки стимулирующего влияния нейроглутама на дофаминергическую нейропередачу.

Методом нейрохимического анлиза in vivo выявлено влияние нейроглутама на обмен дофамина во фронтальной коре, гиппокампе и стриатуме головного мозга крыс, т.е. в структурах, задействованных в формировании эмоционального поведения (табл. 12). При этом на содержание в структурах мозга крыс нейротрансмиттерных аминокислот -аспарагиновой, ГАМК, глутаминовой, глицина и таурина - нейроглутам не влиял.

Таблица 12.

Влияние нейроглутама на содержание моноаминов и их метаболитов в структурах мозга крыс

(в % по отношению к контролю).

Моноамины и их метаболиты Изучаемые соединения Структуры головного мозга крыс

Фронтальная кора гиппокамп стриатум

1 2 3 4 5

НА РГПУ-135 94,9 + 7,6 87,5 ±7,1 79,1 + 12,1

контроль 100,0 + 7,0 100,0 + 6,3 100,0 ±14,7

ДА РГПУ-135 115,1 + 10,7 123,5 + 9,8 107,5 ±9,8

контроль 100,0 ±9,3 100,0 + 13,7 100,0 ± 8,4

ДОФУК РГПУ-135 126,3 + 7,9* 126,9 + 32,6 124,4 ± 10,9

контроль 100,0 + 6,0 100,0 ± 16,4 100,0 ± 10,6

гвк РГПУ-135 107,4 + 13,2 219,8 + 25,2* 143,9+15,8

контроль 100,0 + 19,1 100,0 + 25,0 100,0 ± 10,7

5-ОТ РГПУ-135 92,7 + 5,9 87,8 + 5.7 103,0 + 5,3

контроль 100,0 + 3,6 100,0 + 3,1 100,0 + 3,6

5-ОИУК РГПУ-135 106,6 + 4,7 93,0 + 5,6 109,8 + 5,7

контроль 100,0 + 3,8 100,0 + 5.5 100,0 + 3,3

ДОФУК/ДА РГПУ-135 110,5 + 8,5 91,9 + 23.4 117,2 + 2,1'*

контроль 100,0 + 5,6 100,0 + 16,9 100,0 + 3,0

ГВК/ДА РГПУ-135 101,4 + 15,4 179.8 + 38,0 133,3 + 9,2*

контроль 100,0 ± 13,9 100,0 + 29,1 100,0 + 7,2

5-ОИУК/5-ОТ РГПУ-135 117,1 +9,3 106,6 + 6,3 106,8 + 6,0

контроль 100,0 + 5,7 100,0 + 6,2 100,0 + 5.4

прямой конкуренции у нейроглутама в широком диапазоне концентраций за места связывания изученных лигалдов глугаматного, дофаминового, серотонинового, ГАМК-А и ГАМК-Б рецепторов мозга крыс (табл. 13).

Таблица 13,

Величины 1С« для соединения РГПУ-135. _

Рецетггоры

NMDA

5-НТ2

1>і

GABA>

GABA.

Структуры мозг»

гиппокамп

фронтальная кора

стриагум

фронтальная кора

фронтальная кора

Концентрация соединения РГПУ-135 (мкмоль/л)

> 100

>1000

> 100

>1000

Нейропсихотропное действие РГПУ-135,

> юоо

как и других психотропных средств, может реализоваться не только за счет влияния на нейромедиаторные системы ЦНС, но и за счет влияния на электрическую возбудимость нервной ткани, на активность ионных каналов мембран нейронов. Модуляция активности ионных каналов может лежать в основе влияния нейропсихотропных средств на высвобождение и обратный захват нейромедиаторов (Вислобоков А.И., Игнатов Ю.Д., Галенко-Ярошевский П.А., Шабанов П.Д., 2010; Вислобоков А.И., Борисова В.А., Прошева В.И., Шабанов П.Д., 2012). В связи с этим представлялось актуальным изучение возможного влияния нейроглутама на ионные токи нейронов, через которое могут опосредоваться его нейропсихотропные эф-фекты.Методом нейрофизиологического анализа было установлено, что нейроглутам в концентрациях 1, 10, 100 и 1000 мкМ дозозависимо и обратимо модулирует трансмембранные натриевые, калиевые и, в большей степени, кальциевые ионные токи нейронов моллюсков прудовика и катушки: в концентрациях 1-10 мкМ незначительно активирует кальциевые и калиевые токи, 100 мкМ - увеличивает амплитуду кальциевых токов на 5-10%, 1000 мкМ - подавляет натриевые и калиевые токи на 5-12%. Нейроглутам не влиял на потенциал поверхностного заряда мембраны и воротные механизмы ионных каналов, его эффекты были быстро обратимы, что указывает на относительно непрочное связывание со структурами мембраны и ионных каналов.

Нейроглутам в концентрациях 1, 10, 100 и 1000 мкМ дозозависимо и обратимо модулирует внутриклеточные потенциалы нейронов моллюска Planorbarius comeus. Возрастает потенциал покоя с максимумом при 100 мкМ - на 9,1±2,5%. Гиперполяризация клеток сопровождается активацией синаптической активности, перестройкой импульсной активности (ИА) со снижением ее частоты и межпачечных интервалов, увеличением числа импульсов в пачках и сокращением в них межимпульсных интервалов.

Выявленные эффект нейроглутама - перестройка ИА н гиперполяризация мембран, способствуют снижению возбудимости нейронов, улучшению функционального состояния, а перестройка ИА - расширению их функциональных возможностей, что может лежать в основе его нейропсихотропного действия. Важно отметить, что нейроглутам - соединение с анксиолитической активнетью, изменяет ионные токи, потенциалы и ИА подобно анксиолитику афобазолу (Вислобоков А И Игнатов Ю Д Середения С.Б., 2012).

ВЫВОДЫ

1. Проведен расширенный скрининг новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты с поливалентным нейропсихотропным действием, в результате которого выделены вещества с высокой активностью, низкой токсичностью, не вызывающие развития толерантности и синдрома отмены при длительном применении, обладающие потенциально высокой лекарственной безопасностью, перспективные для разработки на их основе ней-ропсихотропных средств: на основе соединения РГПУ-147 (цитрат 4-амино-З-фенилбутановой кислоты, цигрокард) - средства с ноотропным, нейропротекторным и ан-ксиолитическим действием, на основе соединения РГПУ-135 (гидрохлорид бета-фенилглутаминовой кислоты, нейроглутам) - средства с антидепрессантным, анксиолити-ч ее ким, ноотропным и нейропротекторным действием.

2. Согласно классификации И.В. Саноцкого (1970) субстанция цитрокарда относится к классу малотоксичных веществ. ЛД50 у мышей: при внутрижелудочном введении (независимо от пола) - более 4000,0 мг/кг; при внутрибрюшинном введении: 2324,1 (2119,4 -2548,6) мг/кг- у самцов; 2143,0 (1967,0 - 2334,8) - у самок. ЛД50 у крыс: при внутрижелудочном введении (независимо от пола): 3500 (3250,1- 3769,1) мг/кг; при внутрибрюшинном введении: 1708,5 (1456,0 - 2004,9) мг/кг-у самцов, 1491,1(1361,8- 1632,6)-у самок.

3. Субстанция нейроглутама относится к классу малотоксичных (Саноцкий И.В., 1970). Ь050 у мышей при внутрижелудочном введении: у самцов - 3837,76 (2861,335147,41) мг/кг, у самок - 4196,50 (3222,49-5464,92); при внутрибрюшинном введении у самцов - 798,29 (576,49-1105,43) мг/кг, у самок - 1139,17(907,16-1430,52). 1Х>50 у крыс при внутрижелудочном введении: У самцов - 9433,68 (8379,49-10620,50) мг/кг, у самок -8487,25 (7362,79-9783,44); при внутрибрюшинном введении у самцов - 1029,04 (892,121186,98) мг/кг, у самок - 950,22 (846,26-1066,95).

4. РГПУ-147 (цитрокард) проявляет дозозависимую психотропную активность, как при пероральном, так и при парентеральном введении животным. Наиболее эффективное действие (ноотропное, анксиолитическое, анальгетическое, стимуляцій физической работоспособности) при парентеральном введении РГПУ-147 отмечается в интервале доз 1550 мг/кг (1/100 - 1/30 от 1,050), в дозе 150 мг/кг (1/10 от 1Л)50) появляется седативный эффект. При пероральном введении РГПУ-147 в дозе 35 мг/кг (1/100 Ш50) отмечается наибольшее проявление анксиолитической активности, в дозе 120 (1/30 от ЬР50) мг/кг -ноотропного эффекта, в дозе 350 мг/кг (1/10 от ІЛ350) отмечается усиление анксиолитиче-ского и анальгегического эффектов, ослабление ноотропного действия.

5. Соединение РГПУ-135 (нейроглутам) в широком диапазоне доз 13-130 мг/кг проявляет антидепрессивное, анксиолитическое и ноотропное действие. В дозе 26 мг/кг антидепрессивный, анксиолитический, активирующий, ноотропный и антиагрессивный эффекты соединения РГПУ-135 максимально выражены. При уменьшении данной дозы (13 мг/кг) - возрастает активирующее действие нейроглутамина, снижается выраженность антидепрессивного, анксиолитического и ноотропного эффектов. С увеличением дозы: 52, 78 и 130 мг/кг, выраженность антидепрессивного, анксиолитического и ноотропного эффектов снижается, отсутствует активирующее действие, а в субтоксической дозе 650 мг/кг проявляется седативное действие.

6. 14-дневное, 1-й 6-месячное введение в терапевтических и субтоксической дозах цитрокарда (50, 250, 700 мг/кг) и нейроглутама (26, 130, 650 мг/кг) самцам и самкам крыс не сопровождается развитием толерантности. На фоне длительного введения эффекты данных соединений не только сохраняются, но и несколько усиливается степень их выраженности, явных преимуществ курсового введешм перед 1-кратным не выявлено. После прекращения 6-месячного введения цитрокарда в терапевтических, а также нейроглутама в терапевтических и субтоксической дозе как у самцов, так и самок крыс проявлений синдрома отмены не выявлено.

7. Цитрокард (15 мг/кг) и нейроглутам (26 мг/кг) на модели зоосоциального взаимодействия как в обычных условиях, так и в условиях изоляционного стресса, в большей

степени, чем флуоксетин (20 мг/кг) и фенибут (25 мг/кг) снижают негативное эмоциональное состояние животных: агрессивность, тревожность, конфликтное поведение при контакте с партнером, усиливают выраженность элементов позитивного эмоционального состояния. В условиях изоляционного стресса цигрокард более эффективен, чем нейрог-лутам. Цигрокард и нейроглутам положительно влияют на формирование кратко- и долговременной пространственной памяти у животных на модели 8-лучевого радиального лабиринта, по выраженности ноотропного эффекта на данной модели цигрокард превосходит нейроглутам и фенибут.

8. Нейроглутам (26 мг/кг) проявляет антидепрессивное действие на модели «выученной беспомощности»: уменьшает длительность иммобилизации в тесте принудительного неизбегаемого плавания на 33,74% по отношению к контролю, увеличивает потребление раствора сахарозы на 122,58%. Препараты сравнения изменяют данные показатели следующим образом: имипрамин (15 мг/кг) на 41,72% и 138,25% соответственно, пароксетин (10 мг/кг) - на 43,56% и 107,37%, венлафаксин (10 мг/кг) - на 40,49% и 145,62%, амитрип-тилин (10 мг/кг) - на 28,83% и 61,29%, флуоксетин (20 мг/кг) - на 22,09% и 130,41%, сер-тралин (10 мг/кг) - на 25,15% и 76,49%. Антидепрессивное действие нейроглутама сопоставимо по выраженности с действием имипрамин а, пароксетина, венлафаксина и превосходит амитриптилин, флуоксетин и сертралин.

9. Механизмы нейропсихотропного действия нейроглутама по результатам компьютерного прогноза в системе PASS с высокой вероятностью могут быть связаны с его глу-тамат- и ГАМК-ергической активностью; по данным нейрофармакологического анализа in vivo и нейрохимического анализа методом радиолига!с/того связывания in vitro: стимуляция дофаминергической нейропередачи без прямого взаимодействия с Д2-рецегггорами (усиливает стереотипию, вызванную агонистом постсинаптических дофаминовых рецеп-тров апоморфином; уменьшает выраженность каталепсии, вызванной блокатором постси-нашических дофаминовых рецепторов галоперидолом; стимулиует обмен дофамина в эмоциогенных структурах мозга - гиппокампе, фронтальной коре и стриатуме, что проявляется в повышении содержания его метабол1ггов - 3,4-диоксифенилуксусной кислоты и гомовалиновой кислоты); стимуляция серотонинергической нейропередачи без прямого связывания с 5НТ2-рецепторами (усиливает интенсивность гиперкинеза, вызванного предшественником серотонина 5-окс1приптофаном); стимуляция центральной адренерги-ческон нейропередачи (потенцирует пшотермический эффект агониста центральных пре-синаптических а-адренорецепгоров клофелина); отсутствие связывания с глутаматными NMDA-рецепторами, ГАМК-А и ГАМК-Б-рецепторами.

10. Методом нейрофизиологического анализа выявлено модулирующее влияние нейроглутама на трансмембранные натриевые, калиевые и, в большей степени, кальциевые ионные токи, внутриклеточные потенциалы нейронов, что может лежать в основе регуляции высвобождения многих нейромедиаторов и проведения нервного импульса и является компонентом механизмов нейропсихотропной активности данного соединения.

11. Нейроглутам подобно типичным дофаминергическим психостимуляторам в дозе 26 мг/кг повышает спонтанную двигательную активность у мышей линии С57В1/6, но не у Balb/c; в диапазоне доз 13-52 мг/кг усиливает межлинейные различия двигательной активности, что говорит о наличии у него психостимулирующего действия.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Проведенное комплексное исследование психотропных свойств новых производных алифатической ГАМК и глутаминовой кислоты с гетероциклическими и ароматическими заместителями в бета-положении, солей и композиций фенибута, фенотроиила и нейроглутама с органическими метаболически активными кислотами, полифункционально замещенных производных фенотропила позволяет рекомендовать в качестве перспективного пути целенаправленного синтеза новых веществ с заданной нейропсихотропной активностью создание структурных аналогов ГАМК и глутаминовой кислоты, а также их солей и композиций с органическими кислотами.

2. Полученные результаты исследования свидетельствуют о перспективности дальнейшей разработки на основе щггрокарда нового оригинального средства с ноотропным, нейро протекторным и анксиолитическим действием, на основе нейроглутама - с ангидепрессантным и анксиолитическим действием, а также ноотропными, нейропротекторными, активирующими, антиагрессивными свойствами. Список опубликованных работ по теме диссертации: СТАТЬИ В ЖУРНАЛАХ II ИЗДАНИЯХ, РЕКОМЕНДОВАННЫХ ВАК РФ

1. Тюренков И.Н. Сравнительная оценка нейропротекторного действия фенибута и пирацетама в условиях экспериментальной ишемии мозга у крыс /И.Н. Тюренков, М.Н. Багметов, В.В. Епишина, Л.Е. Бородкина, A.B. Воронков // Экспер. и клин, фармакол. -

2006. - Т.69, №3. - С.19-22.

2. Тюренков И.Н. Сравнительная характеристика нейропротекторного действия фенотропила и пирацетама в условиях ишемии головного мозга у лабораторных животных / И.Н.Тюренков, М.Н. Багметов, В.В. Епишина // Экспер. и клин, фармакол.. -

2007. - Т.70, №2. - С.24-29

3. Тюренков И.Н. Психофармакологические свойства новых производных ГАМК с гетероциклическим заместителем в ß-положении / И.Н. Тюренков, О.В. Меркушенкова, В.В. Епишина // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. - 2008. - №4. - С.83-86.

4. Кодониди И.П. Молекулярное конструирование и целенаправленный синтез N-замегценных производных 4-оксо-1,4-дигидропиримидина на основе тормозных нейромедиаторов / И.П. Кодониди, Э.Т. Оганесян, A.A. Глушко, И.Н. Тюренков, В.В. Багметова, Д.С. Золотых, A.B. Погребняк // Химико-фармацевтический журнал. - Т.43, № 10.-2009.-С. 32-39.

5. Тюренков И.Н. Тендерные отличия в действии фенотропила и его структурного аналога - соединения РГПУ-95 на тревожно-депрессивное поведение животных / И.Н. Тюренков, В.В. Багметова, A.B. Шишкина, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева, Е.С. Остроглядов // Экспер. и клин, фармакол. - 2010. - Т. 73, № 11. - С. 10-14.

6. Тюренков И.Н. Спектр психотропного действия некоторых солей и комбинаций фенибута с органическими кислотами / И.Н. Тюренков, В.В. Багметова, А.Н. Кривицкая,

B.М. Берестовицкая, О.С. Васильева // Экспер. и клин, фармакол. - 2011. - Т.74, №2. -

C.3-7.

7. Тюренков И.Н. Анксиоседативные свойства гетерил(арил)содержащих гексагидробензофуранонов / И.Н. Тюренков, В.В. Багметова, О.В. Иванова, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева, Е.С. Остроглядов // Экспер. и клин, фармакол.. - 2011. -Т. 74, №. 1. - С.15-18.

8. Тюренков ИЛ. Влияние гетерилсодержащих оксимов гексагидробензофуранонов на депрессивное поведение, обучаемость и память животных / И.Н. Тюренков, В.В. Багметова, О.В. Иванова, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева, Е.С. Остроглядов // Вестник новых медицинских технологий. - 2010. - T. XVII, № 4. - С. 197-198.

9. Багметова В.В. Сравнительное экспериментальное изучение ноотропных свойств аналога ГАМК фенибута и его метилового эфира / В.В. Багметова, Л.Е. Бородкина, И.Н. Тюренков, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева // Фунд. исследования. - 2011. - № 10 (3). С. 467-471.

10. Багметова В.В. Влияние фенибута и его соли с янтарной кислотой на устойчивость животных к форсированным динамическим и статическим физическим нагрузкам / В.В. Багметова, А.Н. Кривицкая, И.Н. Тюренков, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева // Фунд. исследования. - 2012. - №4 (4.2). - С. 243-246.

11. Кодониди И.П. N-производные хиназолина-4 и их ациклические предшественники: синтез и взаимосвязь структура-психотропная активность / И.П. Кодониди, Э.Т. Оганесян, Д.С. Золотых, И.Н. Тюренков, В.В. Багметова, Т.А. Лысенко, A.B. Ивченко, E.H. Жогло // Вопросы биол., мед. и фарм. химии. -2012. - №4. - С. 27-33.

12. Тюренков И.Н. Функциональные аспекты нейропротекгивного действия новых солей и композиций баклофена при судорожном синдроме, вызванном электрошоком / И.Н. Тюренков, Л.Е. Бородкина, В.В. Багметова // Бюл. экспер. биол. и мед - 2012 - Т 153 № 5. -С.667-670. ' '

13. Тюренков И.Н. Фенибут и его цитрат в предупреждении психоневрологических нарушений, вызванных хроническим стрессом - лишением парадоксальной фазы сна / И.Н. Тюренков, В.В. Багметова, Л.Е. Бородюша, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева // Экспер. и клин, фармакол. -2012. - Т.75, №6. -С. 8-13.

14. Бородкина Л.Е. Сравнительное изучение нейропротекторного и противосудорож-ного действия циклических аналогов ГАМК пирацетама, фенотропила, фепирона и его композиций с органическими кислотами / Л.Е. Бородюша, В.В. Багметова, И.Н. Тюренков // Вопросы биол., мед. и фарм. химии. - 2012. - №8. - С. 14-20.

15. Багметова В.В. Изучение нейропсихофармакологических эффектов нового производного глутаминовой кислоты соединения РГПУ-197 / В.В. Багметова, М.Н. Багметов, И.Н. Тюренков, О.С. Васильева, В.М. Берестовицкая II Обзоры по клин, фармакол и лекарственной терапии.-2012.-Т. 10, № 1.-С. 54-59.

16. Тюренков И.Н. Гидрохлорид ß-фенилглутаминовой кислоты (РГПУ-135, глутарон) в коррекции депрессивных и тревожных состояний / И.Н. Тюренков, В.В. Багметова, Ю.В.Чернышева, О.В. Меркушенкова, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета - 2012. - № 3 (43). - С. 2124.

17. Бугаева Л.И. Изучение острой токсичности гидрохлорвда ß-фенилглутаминовой кислоты при однократном внутрибрюшвдном введении / Л.И. Бугаева, И.Н. Тюренков, В.В. Багметова, Ю.В. Чернышева, Е.А. Кузубова // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета - 2012. - № 3 (43). - С. 30-33.

18. Багметова В.В. Экспериментальное сравнение ноотропных свойств аналога ГАМК фенибута и его соли с янтарной кислотой / В.В. Багметова, А.Н. Кривицкая, И.Н. Тюренков, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева // Вестник новых мед. технологий - 2012 - № 4 -С. 53-55. • - •

19. Вислобоков А.И. Изменения ионных токов нейронов моллюсков под влиянием сукцикарда / А.И. Вислобоков, Ю.Д. Игнатов, И.Н. Тюренков, В.В. Багметова // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. - 2012. - № 4. - С.27-30.

20. Бугаева Л.И. Острая токсичность субстанции гидрохлорида ß-фенилглутаминовой кислоты при однократном внутрижелудочном введении мышам и крысам / Л.И. Бугаева, И.Н. Тюренков, В.В. Багметова, Ю.В. Чернышева, Е.А. Кузубова // Весгник Волгоградского государственного медицинского университета. - 2012. - № 4 (44). - С. 34-37.

21. Игнатов Ю.Д. Новое производное глутаминовой кислоты РГПУ-135 (глутарон, нейроглутамин) модулирует ионные тоют нейронов моллюсков / Ю.Д. Игнатов, А.И. Вислобоков, И.Н. Тюренков, В.В. Багметова // Экспер. и клин, фармакол. - 2012.' - Т.75, № 12. — С. 3-6.

22. Тюренков И.Н. Сравнение психотропных свойств глутаминовой кислоты и ее нового производного - гидрохлорида бета-фенилглутаминовой кислоты (глутарона) / И.Н. Тюренков, В.В. Багметова, Ю.В. Чернышева, О.В. Меркушенкова, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева//Фунд. исследования. -2013. - № 3-1. - С. 167-172.

23. Багметова В.В. Нейропротекторные эффекты метилового эфира фенибута и его композиций с органическими кислотами при коррекции психоневрологических нарушений, вызванных судорожной патологией / В.В. Багметова, И.Н. Тюренков, Л.Е. Бородкина, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева // Фунд. исследования. - 2013. - № 3-1. - С. 22-26.

24. Багметова В.В. Сравнительная оценка антидепрессивных свойств гидрохлорида ß-фенилглутамгаговой кислоты (РГПУ-135, глутарон) /В.В. Багметова, Ю.В.Чернышева, О.В. Меркушенкова, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева, И.Н. Тюренков // Экспер и клин, фармакол.- 2013. - Т, 76, № 3. - С.7-9.

25. Бородкина Л.Е. Сравнительное изучение нейропротекторных эффектов циклических аналогов ГАМК пирацетама, фенотропила, фепирона при экспериментальной судорожной патологии / Л.Е. Бородкина, В.В. Багметова, И.Н. Тюренков, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева // Вестник Волгоградского государственного медшщнского университета. - 2013. - № 2 (46). - С. 40-44.

26. Тюренков И.Н. Депрессивное состояние у крыс при хроническом комбинированном стрессе, вызванном сочетанием разномодальных стрессоров / И.Н. Тюренков, В.В. Багметова, Ю.В. Чернышева, Д.Д. Бородин П Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. - 2013. - Т. 99, №. 9 - С. 1045-1056.

27. Багметова В.В. Сравнительное изучение влияния глутаминовой кислоты и гидрохлорида бета-фенилглутаминовой кислоты (РГПУ-135, нейроглутама) на физическую работоспособность животных / В.В. Багметова, Ю.В. Чернышева // Фундаментальные исследования. - 2013. - № 9-3. - С.319-322.

ПАТЕНТЫ

28. Петров В.И., Тюренков И.Н., Багметова В.В., Самотрусва М.А., Берестовицкая В.М., Васильева О.С., Остроглядов Е.С. Средство, обладающее антидепрессантным, анксиолитическим, нейропротекторным и иммуностимулирующим действием. // Патент РФ № 2429834, заявл. 23.07.2010, опубл. 27.09.2011. - Бюл. 27. - 2011.

29. Берестовицкая В.М., Васильева О.С., Остроглядов Е.С., Петров В.И., Тюренков И.Н., Багметова В.В. Средство, обладающее антидепрессивным, анксиолитическим и ноотропным действием // Патент РФ № 2437659, заявл. 12.11.2010, опубл. 27.12.2011. -Бюл. 36.-2011.

30. Берестовицкая В.М., Васильева О.С., Остроглядов Е.С., Петров В.И., Тюренков И.Н., Багметова В.В. Фенилгидразид (4-фенил-2-пирролидон-1-ил)-уксусной кислоты, обладающий ноотропной, антидепрессивной и анксиолитнческой активностью // Патент РФ № 2440981, заявл. 12.11.2010, опубл. 27.01.2012. - Бюл. 3.-2012.

ПУБЛИКАЦИИ В НАУЧНЫХ СБОРНИКАХ И ЖУРНАЛАХ

31. Егашшна В.В. Изучение влияния новых производных ГАМК на когнитивные функции и двигательную активность животных в условиях острого стресса / В.В. Егашшна, М.Н. Багметов, Л.Е. Бородкина, A.B. Воронков, О.В. Воловик // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: материалы 62-ой открытой итоговой конференции студентов и молодых ученых / ВолГМУ 19-23 апреля 2004 г. -Волгоград, 2004. - С. 97-98.

32. Багметов М.Н. Изучение нейропротекторного действия производных фенибута в условиях ишемии головного мозга крыс на моделях билатеральной окклюзии общих сонных артерий и гравитационной перегрузки / М.Н. Багметов, В.В. Епишина, A.B. Воронков, Л.Е. Бородкина // IX Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области: Тезисы докладов/ Под ред. В.Б. Писарева, М.Е. Стаценко / ВолГМУ - Волгоград, 2005. - С. 14-18.

33. Епишина В.В. Сравнительное изучение спектра психотропной активности ряда новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты и оценка их нейропротекторного действия. / В.В. Епишина, М.Н. Багметов, A.B. Воронков, Л.Е. Бородкина // IX Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области: Тезисы докладов/ Под ред. В.Б. Писарева, М.Е. Стаценко / ВолГМУ - Волгоград, 2005. - С. 41-46.

34. Бородкина Л.Е.Сравнительное изучение спектра психотропной активности имидазольных производных ГАМК и глутаминовой кислоты / Л.Е. Бородкина,. И.Н. Тюренков, A.B. Воронков, В.В. Епишина М.Н. Багметов // Успехи современного естествознания. - Москва: «Академия естествознания», 2004. - .№12. - С. 36 - 37.

35. Тюренков И.Н. Психотропная активность производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот / И.Н. Тюренков, В.В. Епишина, Л.Е. Бородкина, A.B. Воронков, М.Н. Багметов // Естествознание и гуманизм: сборник научных трудов. - Томск 2004. -Т.1, №1. - С.55-58.

36. Тюренков И.Н. Нейропротекторная активность производных гамма-аминомасляной кислоты и глугаминовой кислоты в условиях острого эмоционально-болевого стресса / И.Н. Тюренков, В.В. Епшпина, J1.E. Бородкина, А.В. Воронков, М.Н. Багмегов // Естествозншше и гуманизм: сборник научных трудов. - Томск 2004. - Т.1, №1. - С.58 - 61.

37. Багметов М.Н. Спектр психотропной активности сиропа мефебут / М.Н. Багмегов, В.В. Сепп, В.В. Ешпнина // Человек и лекарство: тезисы докладов 12-го Российского национального конгресса 18-22апреля 2005г. - Москва, 2005. - С.638.

38. Сепп В.В. Сравнительная оценка психотропной активности различных лекарственных форм мефебута / В.В. Сепп, Э.Ф. Степанова, В.В. Епшпина, М.Н. Багмегов // Человек и лекарство: тезисы докладов 12-го Российского национального конгресса 18-22апреля 2005г. - Москва, 2005. - С.705-706.

39. Тюренков И.Н. Экспериментальная характеристика спектра психотропной активности пиридиновых производных ГАМК и глутаминовой кислоты / И.Н. Тюренков, В.В. Епшпина, Л.Е. Бородкина, А.В. Воронков, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева, Е.С. Остроглядов // Человек и лекарство: тезисы докладов 12-го Российского национального конгресса 18-22апреля 2005г. - Москва, 2005. - С. 807-808.

40. Бородкина Л.Е. Результаты изучения психотропных свойств производных глутаминовой и гамма-аминомасланной кислот / Л.Е. Бородкина, И.Н. Тюренков, В.В. Епшпина, М.Н. Багметов, В.М. Берестовицкая, Е.С. Остоглядов // Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии: материалы научной конференции с международным участием 12-19 июня 2005г., Тунис / Фундаментальные исследования. -Москва: «Академия естествознания», 2005. - №5. - С.41.

41. Бородкина Л.Е. Сопоставление психотропных свойств фенильного и метилбензимидазольного производных гамма-аминомасляной кислоты / Л.Е. Бородкина, И.Н. Тюренков, В.В. Епшпина, О.С. Васильева, В.М. Берестовицкая // Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии: материалы научной конференции с международным участием 12-19 июня 2005г., Тунис / Фундаментальные исследования. -Москва: «Академия естествознания», 2005. - №5. - С.42.

42. Тюренков И.Н. Экспериментальное сравнение нейропротекторных свойств фенплыюго, имидазольного и пиридшювого производных гамма-аминомасляной кислоты после острого стрессорного воздействия / И.Н. Тюренков, Л.Е. Бородкина, В.В. Епшпина // Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии: материалы научной конференции с международным участием 12-19 июня 2005г., Тунис / Фундаментальные исследования. - Москва: «Академия естествознания», 2005. - №5. - С.94.

43. Епшпина В.В. Влияние имидазольных производных ГАМК и глутаминовой кислоты на стресс обусловленные изменения поведения животных, вызванные деприва-цией сна / В.В. Епшпина, И.Н. Тюренков, Л.Е. Бородкина, А.В. Воронков, М.Н. Багметов / Материалы научной конференции «Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины» 15-25 Января 2005 г. Патгая, (Таиланд) // Успехи современного естествознания. - 2005. - №12. - с. 44 - 45.

44. Тюренков И.Н. Перспектива поиска нейропротекторных средств для лечения ишемического инсульта в ряду новых производных ГАМК / И.Н. Тюренков, Л.Е. Бо-родкина, А.В. Воронков, М.Н. Багметов, В.В. Епшпина // Успехи современного естествознания. - 2005. - № 12. - с. 41.

45. Borodkina L.E. Experimental study of stress-conditioned changes in animal behavior caused by sleep deprivation after administration of gaba imidazole derivative. / L.E. Borodkina, M.N. Bagmetov, V.V. Epishina, A.V. Voronkov, I.N. Tyurenkov // European neuropsychopharmacology. - april 2005. - volume 15, supplément 2. - S.200.

46. Tyurenkov I.N. Search for neuroprotective substances among the derivatives of gaba for treating ischemic stroke. / I.N. Tyurenkov, L.E. Borodkina, M.N. Bagmetov, V.V. Epishina, Voronkov A.V // European neuropsychopharmacology. - april 2005. - volume 15, supplément 2 - S.202.

47. Voronkov A.V. Comparative study of psychotropic activity of pyridine derivatives of 7-aminobutyric and glutamic acids. / A.V. Voronkov, M.N. Bagmetov, V.V. Epishina, L.E. Borodkina, I.N. Tyurenkov // European neuropsychopharmacology volume. - april 2005. -volume 15, supplement 2. - SS.200-201.

48. Багметов М.Н.Изучение противоишемической активности фенотропила и его нового производного па низкоактивных в поведенческих тестах крысах в условиях экспериментальной ишемии головного мозга. / М.Н. Багметов, В.В. Епишина, С.А. Воскресенский, Д.В. Куркин, И.Н. Тюренков // Человек и лекарство: тезисы докладов 13-го Российского национального конгресса 03-07 апреля 2006г. - Москва, 2006. - С.774.

49. Епишина В.В. Противогипоксическая активность фенильных производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот при однократном и курсовом введении. / В.В. Епишина, М.Н. Багмегов, О.В. Яценко, Т.В. Садыкова, И.Н. Тюренков, Е.С. Остроглядов, Е.М. Бересговицкая, М.М. Зобачева, О.С. Васильева // Человек и лекарство: тезисы докладов 13-го Российского национального конгресса 03-07 апреля 2006г. - Москва, 2006. - С.524.

50. Епишина В.В. Влияние фенильных производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот на физическую работоспособность животных при повторяющихся физических нагрузках. / В.В. Епишина, М.Н. Багметов, A.A. Литвинов, Е.Р. Шурыгина, И.Н. Тюренков // Человек и лекарство: тезисы докладов 13-го Российского национального конгресса 03-07 апреля 2006г. - Москва, 2006. - С.523-524.

51. Тюренков И.Н.Противогипоксические свойства пиридинового и бензимидазольно-го производных гамма-аминомасляной кислоты в сравнительном аспекте. / И.Н. Тюренков, В.В. Епишина, М.Н. Багметов, Е.С. Остроглядов, В.М. Бересговицкая, М.М. Зобачева, О.С. Васильева // Фармация и здоровье: Материалы международной научно-практической конференции (9-12 ноября 2005 г.) /под ред. проф. В.В. Юшкова, проф. Г.И. Олешко, доц. М.Д. Решетниковой. - Пермь: ПГФА, 2005. - С.209.

52. Тюренков И.Н. Пирролидоновые производные гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот - ряд психотропных эффектов в сравнительном аспекте. / И.Н. Тюренков, В.В. Епишина, М.Н. Багметов, Е.С. Остроглядов, В.М. Бересговицкая, М.М. Зобачева, О.С. Васильева // Фармация и здоровье: Материалы международной научно-практической конференции (9-12 ноября 2005 г.) /под ред. проф. В.В. Юшкова, проф. Г.И. Олешко, доц. М.Д. Решетниковой. - Пермь: ПГФА, 2005. - С.210.

53. Куркин Д.В. Нейропротекторные свойства фенотропила и его новых производных в условиях гравитационной ишемии. / Д.В. Куркин, С.А. Воскресенский, М.Н. Багметов, В.В. Епишина // X Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области, направление «Экспериментальные аспекты медицины», 8-11 ноября 2005 г.: Тезисы докладов / Под ред. Проф. М.Е. Стаценко. / Издательство ВолГМУ: Волгоград, 2005. -С.28-29.

54. Литвинов A.A. Экспериментальное сравнение антидепрессантной активности бензимидазольного и пиридинового производных гамма-аминомасляной кислоты. / A.A. Литвинов, Е.Р. Шурыгина, A.B. Тарабанова, В.В. Епишина, М.Н. Багметов // X Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области, направление «Экспериментальные аспекты медицины», 8-11 ноября 2005 г.: Тезисы докладов / Под ред. Проф. М.Е. Стаценко. / Издательство ВолГМУ: Волгоград, 2005. - С.57-58.

55. Тивон Я.В.Сравнительная характеристика нейропротекторного действия пиридиновых производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот в условиях гравитационного стресса / Я.В. Тивон, A.A. Литвинов, М.Н. Багметов, В.В. Епишина // X Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области, направление «Экспериментальные аспекты медицины», 8-11 ноября 2005 г.: Тезисы докладов / Под ред. Проф. М.Е. Стаценко. / Издательство ВолГМУ: Волгоград, 2005. - С.67-68.

56. Шурыгина Е.Р. Сравнительное изучение влияния пиридиновых производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот на физическую работоспособность животных и

скорость ее восстановления. / Е.Р. Шурыгина, A.B. Тарабанова, A.A. Литвинов, В.В. Епишина, М.Н. Багметов // X Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области, направлеш1е «Экспериментальные аспекты медицины», 8-11 ноября 2005 г.: Тезисы докладов / Под ред. Проф. М.Е. Стаценко. / Издательство ВолГМУ: Волгоград 2005. - С.68-69. '

57. Яценко О.В.Экспериментальная характеристика ноотропного действия гетероциклических производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот. / О.В. Яценко, Т.В. Садыкова, В.В. Епишина, М.Н. Багметов // X Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области, направление «Экспериментальные аспекты медицины», 8-11 ноября 2005 г.: Тезисы докладов / Под ред. Проф. М.Е. Стаценко. / Издательство ВолГМУ: Волгоград, 2005. -С.52-53.

58. Багметов М.Н. Влияние имидазольного производного гама-аминомасляной кислоты на физическую работоспособность животных при повторяющихся физических нагрузках. / М.Н. Багметов, В.В. Епишина, A.A. Литвинов, Е.Р. Шурыгина. // I международная (X всероссийская ) Пироговская студенческая научная медицинская конференция (Москва, 2006) / Вестник РГМУ, 2006. - №2/49/. - С.340.

59. Епишина В.В. Изучение противопшоксической активности имидазольного производного гама-амшюмасляной кислоты. / В.В. Епишина, М.Н. Багметов, О.В. Яценко, Т.В. Садыкова. //1 международная (X всероссийская ) Пироговская студенческая научная медицинская конференция (Москва, 2006) / Веспгик РГМУ, 2006. - №2/49/. - С.366.

60. Яценко О.В. Изучение ноотропной активности пиридинового производного гамма-аминомасляной кислоты. / О.В. Яценко, Т.В. Садыкова, A.A. Литвинов. // I международная (X всероссшюкая ) Пироговская студенческая научная медицинская конференция (Москва, 2006) / Вестник РГМУ, 2006. - №2/49/. - С.447-448.

61. Яценко О.В. Ноотропные эффекты пиридиновых производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот в сравнительном аспекте / О.В. Яценко, В.В. Епишина, М.Н. Багметов, A.A. Литвинов, Т.В. Садыкова // 80-я Всероссшюкая студенческая научная конференция (Казань, 11-13 апреля 2006 года): материалы 80-й Всероссийской студенческой научной конференции - Казань, 2006. - С. 68-69.

62. Садыкова Т.В. Противопшоксические свойства фенильных производных гамма-амшюмасляной н глутаминовой кислот в эксперименте / Т.В. Садыкова, В.В. Епишина, М.Н. Багметов, О.В. Яценко, A.A. Литвинов // 80-Я Всероссийская студенческая научная конференция (Казань, 11-13 апреля 2006 года): материалы 80-й Всероссийской студенческой научной конференции. - Казань, 2006. - С. 67-68.

63. Литвинов A.A. Изучение антидепрессангной активности фенильных производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот на предрасположенных к развитию депрессии животных / A.A. Литвинов, В.В. Епишина, М.Н. Багметов, О.В. Яценко, Т.В. Садыкова // 80-Я Всероссийская студенческая научная конференция (Казань, 11-13 апреля 2006 года): материалы 80-й Всероссийской студенческой научной конференщш - Казань 2006.-С.72.

64. Епишина В.В. Изучение антидепрессивного действия нового производного ГАМК у животных с различным типом поведенческой активности. / В.В. Епишина, М.Н. Багметов, Т.В. Садыкова, И.Н. Тюренков, О С. Васильева. II Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам: тезисы докладов 4-й Международной конференции 13-16 марта 2006г., д/о Подмосковье. - Москва, 2006. - С.

29.65. Багметов М.Н. Нейропротекторное действие нового производного ГАМК в зависимости от типа эмоционального реагирования животных. / М.Н Багметов., В.В. Епишина, А.А Литвинов, И.Н Тюренков, В.М. Берестовицкая. // Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам: тезисы докладов 4-й Международной конференции 13-16 марта 2006г., д/о Подмосковье. - Москва, 2006. - С.

10.66. Садыкова Т.В. Изучение анальгетической активности новых гетероциклических производных гамма-аминомасляной кислоты. / Т.В. Садыкова, В.В. Епишина, М.Н. Багме-

tob, O.B. Яценко // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: материалы 64-ой открытой научно-практической конференции молодых ученых / Вол-ГМУ 25-28 апреля 2006 г. - Волпирад, 2006. - С. 147-148.

67. Шурыгина Е.Р. Изучение влияния новых гетероциклических производных гамма-аминомасляной кислоты на устойчивость животных к гипоксии и физическим нагрузкам. / Е.Р. Шурыгина, В В. Епишина, М.Н. Багметов, A.A. Литвинов, Я.В. Тивон // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: материалы 64-ой открытой научно-практической конференции молодых ученых / ВолГМУ 25-28 апреля 2006 г. -Волгоград, 2006. - С. 149-150.

68. Яценко О.В. Влияние новых гетероциклических производных гамма-амипомасляной кислоты на снотворный эффект барбитуратов. / О.В. Яценко, В.В. Епишина, М.Н. Багметов, Т.В. Садыкова, Е.Р. Шурыгина // Аюуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: материалы 64-ой открытой научно-практической конференции молодых ученых / ВолГМУ 25-28 апреля 2006 г. - Волгоград, 2006.-С. 150-151.

69. Литвинов A.A. Сравнительные аспекты действия фенотропила и фенибута при моделировании различных экстремальных состояний у лабораторных животных. / A.A. Литвинов, М.Н. Багметов, В.В. Епишина, Я.В. Тивон // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: материалы 64-ой открытой научно-практической конференции молодых ученых / ВолГМУ 25-28 апреля 2006 г. - Волгоград, 2006. - С. 146.

70. Епишина В.В. Экспериментальное изучение анальгетических эффектов нового гетероциклического производного гамма-аминомасляной кислоты. / В.В. Епишина, М.Н. Багметов, Т.В. Садыкова, О.В. Яценко, Е.Р. Шурыгина // Актуальные проблемы клинической и экспериментальной медицины: материалы межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых / ИГИУВ, 25 октября 2006 г. - Иркутск, 2006. - С. 263-264.

71. Епишина В.В. Экспериментальное изучение антидепрессантной активности нового гетероциклического производного гамма-аминомасляной кислоты на животных с различными типами поведения. / В.В. Епишина, М.Н. Багметов, Е.Р. Шурыгина, Я.В. Тивон, A.A. Литвинов // Актуальные проблемы клинической и экспериментальной медицины: материалы межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых / ИГИУВ, 25 октября 2006 г. - Иркутск, 2006. - С. 264-266.

72. Тюренков И.Н. Теоретическое обоснование применения ГАМК-ергических средств для лечения ишемии мозга / И.Н. Тюренков, М.Н. Багметов, В.В. Епишина, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева // Проблемы клинической фармакологии и моделирования в фармакологии и биомедицине: материалы научно-практической конференции 19-20 сентября 2006 г., Ростов-на-Дону / Биомедицина - 2006. - №4. - С. 117-119.

73. Багметов М.Н. Сравнительная экспериментальная оценка активности новых лекарственных форм фенибута и мефебута / М.Н. Багметов, В.В. Епишина, A.A. Литвинов, Я.В. Тивон // XI Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области, направление «Актуальные проблемы экспериментальной медицины», 8-10 ноября 2006 г.: Тезисы докладов / Волгоградский государственный медицинский университет / Под ред. проф. М.Е. Сгаценко. - Издательство ВолГМУ: Волгоград, 2006. - С.5-6

74. Епишина В.В. Экспериментальное сравнение противогипоксических свойств новых гетероциклических производных нейромедиаторных аминокислот / В.В. Епишина, М.Н. Багметов, О.В. Яценко, Т.В. Садыкова // XI Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области, направление «Актуальные проблемы экспериментальной медицины», 8-10 ноября 2006 г.: Тезисы докладов / Волгоградский государственный медицинский университет / Под ред. проф. М.Е. Стаценко. - Издательство ВолГМУ: Волгоград, 2006.-С.11-12

75. Епишина В.В. Модуляция порога болевой чувствительности животных с различным типом поведения с помощью гетероцикличесого соединения РГПУ-195 / В.В. Епишина, М.Н. Багметов, И.Н. Тюренков II Материалы IV научной конференции с междуна-

родным участием «Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины» Таиланд (Патгайа) 18-28 января 2007 г. / Успехи современного естествознания -2007. -№1. -С.62

76. Багметов М.Н. Результаты изучения противоишемических свойств нового производного ГАМК соединения РГПУ-149 и пирацетама в сравнительном аспекте / М.Н. Багметов, В.В. Епишина, И.Н. Тюренков // Материалы IV научной конференции с международным участием «Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины» Тайланд (Патгайа) 18-28 января 2007 г. / Успехи современного естествознания -2007.-Ksl.-C.49-50.

77. Садыкова Т.В. Изучение влияния гетероциклического соединения РГПУ-195 на устойчивость животных к стрессу, гипоксии и форсированным физическим нагрузкам / Т.В. Садыкова, В.В. Епишина, М.Н. Багметов, A.M. Сафронова / Материалы межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежь и наука: итоги и перспективы» (22-24 ноября 2006 г.). - Издательство СГМУ. - Саратов, 2006. - С. 108. (устный доклад)

78. Тивон Я.В. Изучение противоишемических свойств новых производных ГАМК в сравнении с пирацетамом / Я.В. Тивон, М.Н. Багметов, В.В. Епишина, A.A. Литвинов / Материалы межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежь и наука: итоги и перспективы» (22-24 ноября 2006 г.). - Издательство СГМУ. - Саратов, 2006. - С. 112-113. (устный доклад)

79. Сафронова A.M. Экспериментальная характеристика и возможные механизмы стресспротекторного действия нового гетероциклического соединения РГПУ-201 / A.M. Сафронова, В.В. Епишина, М.Н. Багметов, О.В. Яценко / Материалы межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежь и наука: итоги и перспективы» (22-24 ноября 2006 г.). - Издательство СГМУ. - Саратов, 2006. - С. 109. (устный доклад, 2-е место)

80. Епишина В.В. Изучение противогипоксических свойств новых производных ней-ромедиаторных аминокислот - соединений РГПУ-196 и РГПУ-197 в сравнении с фенибу-том / В.В. Епишина, М.Н. Багметов, И.Н. Тюренков / Материалы IV научной международной конференции «Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии» Индия (Гоа), 1-11 марта 2007 г. / Успехи современного естествознания - 2007 - №3 -С.78-79

81. Епишина В.В. Нейропротекторные эффекты фенотропила в условиях экспериментального стрессорного воздействия / В.В. Епишина, И.Н. Тюренков, М.Н. Багметов // Человек и лекарство: тезисы докладов 14-го Российского национального конгресса 16-20 апреля 2007г. - Москва, 2007. - С. 820-821.

82. Багметов М.Н. Экспериментальное изучение нейропротекторного действия нового производного фенотропила в условиях ишемии головного мозга, вызванной гравитационной перегрузкой / М.Н. Багметов, И.Н. Тюренков, В.В. Епишина // Человек и лекарство: тезисы докладов 14-го Российского национального конгресса 16-20 апреля 2007г - Москва, 2007. - С.797-798.

83. Яценко О.В. Влияние гетероциклического соединения РГПУ-195 на тремор, вызванный введением 5-окситриптофана/О.В. Яценко, В.В. Епишина, A.M. Сафронова // Материалы II международной (XI всероссийской) Пироговской студенческой научной медицинской конференции (Москва, март 2007) / Вестник РГМУ, 2007. - №2 /55/. - С. 335-336

84. Тюренков И.Н. Влияние фенотропила на параметры локального мозгового кровотока в норме и в условиях преходящей ишемии головного мозга у крыс / И.Н. Тюренков М.Н. Багметов, В.В. Епишина// Материалы 6-ой научно-практической конференции «Методы исследования регионарного кровообращения и микроциркуляции в клинике и в эксперименте», Санкт-Петербург, 25 -26 января 2007 года / Региональное кровообращение и микроциркуляция, 2007. - Т.6. - С.173-174

85. Бородкина Л.Е. Сравнительное изучение противогипоксических свойств новых производных гамма-аминомасляной кислоты на моделях гиперкапнической и гемической гипоксии / Л.Е. Бородкина, В.В. Епишина, М.Н. Багметов // Материалы II научной конференции с международным участием «Фундаментальные исследования», секция «Медико-биологические науки», Доминиканская республика, 10-20 апреля 2007 г. / Современные наукоемкие технологии. - 2007. - №5. -С.63-64

86. Бородкина Л.Е. Результаты изучения противоишемических свойств нового производного ГАМК соединения РГПУ-189 и фенибута в сравнительном аспекте / Л.Е. Бородкина, М.Н. Багметов, В.В. Епишина, И.Н. Тюренков // Материалы II научной конференции с международным участием «Фундаментальные исследования», секция «Медико-биологические науки», Доминиканская республика, 10-20 апреля 2007 г. / Современные наукоёмкие технологии. - 2007. - №5. -С.64

87. Бородкина Л.Е. Сравнительное изучение противоишемических свойств нового производного ГАМК соединения РГПУ-189 и пирацетама / Л.Е. Бородкина, М.Н. Багметов, В.В. Епишина, И.Н. Тюренков // Здоровье семьи - XXI век.: материалы XI Международной научной конференции и II Международной онкологической конференции, 26 апреля - 2 мая 2007 года, Нидерланды-Германия-Франция. - Пермь: Изд-во Перм. образоват. науч.-исслед. центра авитальной активности, 2007. - С.67

88. Бородкина Л.Е. Изучение влияния нового производного ГАМК РГПУ-189 на изменения поведения у животных, вызванные острым стрессом, в сравнении с пираце-тамом / Л.Е. Бородкина, В.В. Епишина, М.Н. Багметов, И.Н. Тюренков // Материалы II научной конференции с международным участием «Актуальные проблемы науки и образования», Варадеро (Куба), 20-30 марта 2007г. / Фундаментальные исследования. -2007. - №4. - С.68-69

89. Тюренков И.Н. Церебропротекгорное действие новых ГАМК-ергических средств при ишемии головного мозга. / И.Н. Тюренков, Л.Е. Бородкина, М.Н. Багметов, В.В. Епишина // Материалы III съезда фармакологов России «Фармакология - практическому здравоохранению». - Санкт-Петербург, 23-27 сентября 2007 года / Психофармакол. биол. наркол., 2007. - Т.7, спец. вып. (сентябрь), 4.2 (М-Я). - С.1982-1983.

90. Тюренков И.Н. Фенотрошм и пирацетам - сравнительная характеристика нейропротекторного действия в условиях экспериментальной ишемии головного мозга у лабораторных животных. / И.Н.Тюренков, М.Н. Багметов, В.В. Епишина. // Фенотропил: Экспериментально-клиническая фармакология и практическое применение. Сборник статей. - М.: МЕДпресс-информ, 2007. - 112с. - С.27-33

91. Меркушенкова О.В. Экспериментальное изучение психотропных свойств новых производных глутаминовой кислоты - соединений РГПУ-135 и РГПУ-202 / О.В. Меркушенкова, В.В. Епишина // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: материалы 65-ой юбилейной открытой научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием 25-27 апреля 2007 г / ВолГМУ. - Волгоград, 2007. - С. 150-151.

92. Епишина В.В. Сравнительное экспериментальное изучение психотропных свойств новых производных глютаминовой кислоты - соединений РГПУ-135 и РГПУ-202 / В.В. Епишина, О.В. Меркушенкова // Бюллетень Волгоградского Научного Центра РАМН и Администрации Волгоградской области. - Изд-во ВолГМУ. - Волгоград, 2007. - №2. -С.11-13

93. Меркушенкова О.В. Изучение влияния нового гетероциклического производного ГАМК на физическую работоспособность, мышечный тонус и координацию движений у животных. / О.В. Меркушенкова, В.В. Епишина, И.Н. Тюренков И Материалы научной международной конференции «Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии», 15-22 октября 2007г., Объединенные Арабские Эмираты (Дубай). - / Фундаментальные исследования. - 2007. - №12 (часть 2). - С.290-291.

94. Меркушенкова O.B. Изучение ноотропной активности нового производного глута-миновой кислоты. / О.В. Меркушенкова, В.В. Епишина.// XII Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области, направление «Актуальные проблемы экспериментальной медицины», 13-16 ноября 2007 г.: Тезисы докладов / Волгоградский государственный медицинский университет / Под общ. ред. академика РАМН, д.м.н.,, проф. В.И. Петрова. - Издательство ВолГМУ: Волгоград, 2008. - С. 26-27.

95. Меркушенкова О.В. Изучение влияния новых производных глутаминовой кислоты на сон у животных, вызванный введением тиопенгала натрия. / О.В. Меркушенкова, В.В. Епишина, И.Н. Тюренков, Е.С. Осгроглядов // Материалы научной международной конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине», 26 ноября - 4 декабря 2007 г. Китай (Пекин). - / Фундаментальные исследования. - 2007. - №12. - С 523524.

96. Тюренков И.Н. Анксиолигические свойства нового производного глутаминовой кислоты / И.Н. Тюренков, О.В. Меркушенкова, В.В. Епишина, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. трудов / под ред. М.В. Гаврилина / Пятигорская ГФА. - Пятигорск, 2008 -Вып.63. - 799с. - С.506-508.

97. Меркушенкова О.В. Изучение анксиолнгических свойств нового соединения РГПУ-206 / О.В. Меркушенкова, В.В. Епишина, И.Н. Тюренков // Человек и лекарство: тезисы докладов XV Российского национального конгресса, 14-18 апреля 2008 г - Москва, 2008. - С.666-667.

98. Харченко А.Н. Влияние нового производного фенибута РГПУ-147 на спонтанное поведение животных при различных путях введения / А.Н. Харченко, В.В. Епишина, И.Н. Тюренков // Человек и лекарство: тезисы докладов XV Российского национального конгресса, 14-18 апреля 2008 г. - Москва, 2008. - С.720

99. Меркушенкова О.В. Влияние нового производного глутаминовой кислоты на эмоциональный статус животных. / О.В. Меркушенкова, В.В. Епишина // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: материалы 66-ой открытой науч-но-пракпіческой конференцій! молодых ученых и студентов с международным участием 23-25 апреля 2008 г. - Волгоград: Изд-во ВолГМУ, 2008. - С. 159-160.

ЮО.Харченко А.Н. Изучение доза-зависимого анксиолитического действия нового производного фенибута - соединения РГПУ-147 при его внутрибрюшинном и пероральном введении. / А.Н. Харченко, В.В. Егашпша // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: материалы 66-ой открытой научно-практической конференцій! молодых ученых и студентов с международным участием 2325 апреля 2008 г. - Волгоград: Изд-во ВолГМУ, 2008. - С. 164-165.

101.Катышев A.M. Влияние нового производного фенибута на спонтанное поведение животных. / A.M. Катышев, А.Н. Харченко, В.В. Епишина // Актуальные проблемы экспериментальной и клшиїческой медицины: материалы 66-ой открытой научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием 2325 апреля 2008 г. - Волгоград: Изд-во ВолГМУ, 2008. - С. 165-166.

Ю2.Тюренков И.Н. Изучение фармакологических свойств нового вещества с антиде-прессантным и психостимулирующим действием / И.Н. Тюренков, В.В. Епишина, М.Н. Багметов, О.В. Меркушенкова, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева // Результаты фундаментальных и прикладных исследований для создания новых лекарственных средств. Материалы симпозиума. Москва, 9-11 июня 2008 г. - М.: Фирма «Слово», 2008. - С.210-211.

103. Жукова Е.А. Особенности психоэмоциональных нарушений в приподнятом крестообразном лабиринте, а также адаптационных морфологических изменений надпочечников, тимуса и селезенки у белых крыс, вызванных хроническим стрессом / Е.А. Жукова, B.JI. Загребин, О.В. Меркушенкова, В.В. Багметова // XIII Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области, Волгоград, 11-14 ноября, 2008 г.: Тез. докл. / Под общ.ред. В.И. Петрова - Волгоград: Изд-во ВолГМУ, 2008. -С.23-27.

Ю4.Меркушенкова O.B. Влияние нового производного глутаминовой кислоты на эмоциональный eraiyc животных. / О.В. Меркушенкова, В.В. Епишина // Актуальные проблемы эксперим. и клин, медицины: материалы 66-ой открытой научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием /Изд-во ВолПМУ. - Волгоград, 2008. - С. 159-160.

Ю5.Кривицкая А.Н. Экспериментальное изучение психотропных свойств нового производного фенибута. / А.Н. Кривицкая, В.В. Багметова, А.М Катышев, А.Б. Ненашев, Т.В. Курсова // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: материалы 67-ой открытой научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием 22-24 апреля 2009 г. - Волгоград: Изд-во ВолГМУ, 2009. - С. 175-176.

Юб.Шишкина А.В Изучение ноотропной активности новых производных фенотропила. / A.B. Шишкина, В.В. Багметова // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: материалы 67-ой открытой научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием 22-24 апреля 2009 г. - Волгоград: Изд-во ВолГМУ, 2009.-С. 184-185.

Ю7.Кривицкая АН. Нейропсихотропная активность нового производного гамма-аминомаслянной кислоты / А.Н. Кривицкая, В.В. Багметова, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева // Сборник материалов конгресса «Человек и Лекарство» 6-10 апреля 2009 г. -Москва,2009-С. 682.

108.Тюренков И.Н. Изучение антидепрессантных свойств нового производного глутаминовой кислоты со-единения РГПУ-197 на предрасположенных к депрессии животных / И.Н. Тюренков, В.В. Багметова, М.Н. Багметов, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева // Материалы научной международной конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине», Франция (Париж), 15-22 октября 2009г. / Успехи современного естествознания. - 2009. - №11. - С.77-78.

Ю9.Багметова В.В. Влияние нового производного глутаминовой кислоты соединения Ргпу-198 на обучаемость и память животных в тесте «условная реакция пассивного избегания» / В.В. Багметова, М.Н. Багметов, И.Н. Тюренков // Человек и лекарство: тезисы докладов XVII Российского национального конгресса, 12-16 апреля 2010 г. - Москва, 2010. -С.574.

1 Ю.Шишкина A.B. Изучение возможной антидепрессантной активности нового производного фенотопила РГПУ-96 / A.B. Шишкина, В.В. Багметова, И.Н. Тюренков, О.В. Артемом // Человек и лекарство: тезисы докладов XVII Российского национального конгресса, 12-16 апреля 2010 г. - Москва, 2010. - С.747.

Ш.Багметова В.В. Изучение антидепрессангаого действия нового производного глутаминовой кислоты на животных с различными типами эмоционально-стрессовой реакции. / В.В. Багметова, М.Н. Багметов, И.Н. Тюренков, В.М. Берестовицкая, О.С. Васильева, Е.С. Остроглядов / Биологические основы индивидуальной чувчтвительности к психотропным средствам: Материалы 5-й Международной конференции (1-4 июня 2010 года). -Москва: Издательство ФОЛИУМ, 2010. - С.23.

112.Кривицкая А.Н. Изучение антидепрессангаого эффекта нового производного фенибута / А.Н. Кривицкая, В.В. Багметова // X Международный конгресс «Здоровье и образование в XXI веке «Инновационные технологии в биологии и медицине», посвященный 50-летнему юбилею РУДН, Российский университет дружбы народов, г. Москва, 1-5 декабря 2009г. - С.875-876/

113. Кривицкая А.Н. Влияние нового производного фенибута на устойчивость животных к форсированным физическим нагрузкам и острой генерализованной гипоксии / А.Н. Кривицкая, В.В. Багметова // Материалы 68-й открытой научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием, посвященную 75-летию ВолГМУ, «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины» 9-13 сентября 2010 г. - Волгоград: Издательство ВолГМУ, 2010 - С. 179-180.

114.Иванова O.B. Влияние новых гетерилсодержащих оксимов гексагидробензофура-нонов РГПУ-210 и РПУ-211 на стрессиндущфованное депрессивное поведение животных. / О.В. Иванова, В.В. Багметова // Вестник ВолГМУ: приложение (Материалы II Всероссийского научно-практического семинара для молодых ученых «методологические аспекты экспериментальной и клинической фармакологии). - Волгоград Изд-во ВолГМУ 2010. - С. 89.

115.Кривицкая А.Н. Влияние нового производного фенибута на мотивированную и немотивированную агрессию у животных. / А.Н. Кривицкая, В.В. Багметова // Вестник ВолГМУ: приложение (Материалы II Всероссийского научно-практического семинара для молодых ученых «методологические аспекты экспериментальной и клинической фармакологии). - Волгоград: Изд-во ВолГМУ, 2010. - С. 91-92.

Пб.Шшшаша A.B. Антидепрессантные свойтсва нового производного фенотрошша -соединения РГПУ-82 / A.B. Шишкина, В.В. Багметова // Вестник ВолГМУ: приложение (Материалы II Всероссийского научно-практического семинара для молодых ученых «методологические аспекты экспериментальной и клинической фармакологии) - Волгоград' Изд-во ВолГМУ, 2010. - С. 111-112.

117,Оганесян Э.Т. Целенаправленный поиск ГАМК-ергических веществ с использованием метода молекулярного докинга/ Э.Т. Оганесян, И.П. Кодониди, И.Н. Тюренков, E.H. Жогло, Л.П. Смирнова, В.В. Багметова / Сборник трудов 3-го Международного конгресса Армении (Ереван, 7-9 июля 2011г.). - Ереван, 2011. - С.368-369.

118.Багметова В.В. Влияние нового производного глутаминовой кислоты РГПУ-197 на поведение животных с пассивным типом эмоционально-стрессовой реакщш в «открытом поле» и конфликтной ситуации по Вогелю / В.В. Багметова, Л.Е. Бородкина, М.Н. Багме-тов, И.Н. Тюренков // Человек и лекарство: тезисы докладов XIX Российского национального конгресса, 23-27 апреля 2012 г. - Москва, 2012. - С.352-353.

119.Бородк1ша Л.Е. Влияние фенибута и его метилового эфира на когнитивные функции крыс, подвергшихся генерализованному судорожному приступу / Л.Е. Бородкина,

B.В. Багметова, М.Н. Багметов, И.Н. Тюренков // Человек и лекарство: тезисы докладов XIX Российского национального конгресса, 23-27 апреля 2012 г. - Москва, 2012 - С 356357.

120.Багметова В.В. Антидепрессантные, анксиолитические и нейропротекторные свойства нового структурного аналога глутаминовой кислоты / В.В. Багметова, Ю.В. Чернышева, О.В. Меркушенкова / Материалы IV съезда фармакологов России «Инновации в современной фармакологии». - Казань, 18-21 сентября 2012 года. - Москва: Фолиум, 2012. -

C.16.

121.Бородкина Л.Е. Нейропротекторное действие новых солей и композиций баклофе-на с органическими карболовыми кислотами / Л.Е. Бородиша, В.В. Багметова / Материалы IV съезда фармакологов России «Инновации в современной фармакологии». - Казань, 18-21 сентября2012года. -Москва: Фолиум, 2012. - С.25.

122.Кривицкая А.Н. Влияние нового производного фенибута на психоневрологические и морфосоматические нарушения, вызванные депривацией парадоксальной фазы сна. /

A.Н. Кривицкая, В.В. Багметова / Материалы IV съезда фармакологов России «Инновации в современной фармакологии». - Казань, 18-21 сентября 2012 года. - Москва- Фолиум 2012. - С.100-101. '

Ш.Чернышева Ю.В. Влияние нового производного глутаминовой кислоты на поведение животных с выученной беспомощностью / Ю.В. Чернышева, Д.Д. Бородин, Ю.К. Ли,

B.В. Багметова // Вестник ВолгГМУ: приложение (Материалы IV Всероссийского научно-практического семинаре молодых ученых с международным участием «Современные проблемы медицинской химии. Направленный поиск новых лекарственных средств», 2931 октября 2012 г, Волгоград). - Волгоград: Изд-во ВолгГМУ, 2012. (244 с.) - С. 137-138.

124.Багметова В.В. Влияние нового производного глутаминовой кислоты на обучаемость и память животных / В.В. Багметова, Ю.В Чернышева, И.Н. Тюренков И Материалы

международной научной конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине». Франция (Париж) 14-21 октября 2012 / Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2012 г. - №8. - С. 110-111.

125.Бородкина JI.E. Ноотропное действие соли фенибута с янтарной кислотой в условиях амнезии, вызванной электрошоком. / JI.E. Бородкина, В.В. Багметова, И.Н. Тюренков // Материалы международной научной конференции «Фундаментальные исследования». Израиль 16-23 октября 2012 / Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2012 г. - № 12. - С.79-80.

126.Бородкина JI.E. Влияние баклофена и его соли с лимонной кислотой на когнитивные функции крыс, подвергшихся генерализованному судорожному приступу / JI.E. Бородкина, В.В. Багметова II Человек и лекарство: сборник материалов (тезисы докладов) XX Юбилейного Российского национального конгресса, 15-19 апреля 2013 г. - Москва, 2013.-С. 300.

127.Багметова В.В. Влияние глутаминовой кислоты и ее нового производного с психотропным действием на болевую чувствительность животных / В.В. Багметова, Ю.В. Чернышева, И.Н. Тюренков // Человек и лекарство: сборник материалов (тезисы докладов) XX Юбилейного Российского национального конгресса, 15-19 апреля 2013 г. - Москва, 2013.-С. 287-288.

128.Бородкина Л.Е. Влияние фенибута и его композиции с никотиновой кислотой на когнитивные функции животных, подвергшихся электрошоку / Л.Е. Бородкина, В.В. Багметова // Материалы международной научной конференции «Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины». Тайланд (Паттайя) 20 - 28 февраля 2013 / Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2012 г. - № 3. -С. 145-146.

БАГМЕТОВА ВИКТОРИЯ ВЛАДИМИРОВНА

ПСИХОТРОПНЫЕ СВОЙСТВА И АСПЕКТЫ МЕХАНИЗМОВ ДЕЙСТВИЯ НОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ГАММА-АМИНОМАСЛЯНОЙ И ГЛУТАМИНОВОЙ КИСЛОТ

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Подписано в печать 12.09.2013. Формат 60X84/16. Бумага офсетная Гарнитура Times New Roman. Печать офсетная. Уч. -изд. л. 3,0. Тираж 120. Заказ 434/6.

Отпечатано с готового оригинал-макета заказчика в типографии издательства «Перемена» 400066, г. Волгоград, пр. им. В. И. Ленина, 27