Автореферат и диссертация по медицине (14.01.14) на тему:Обоснование применения хитозансодержащей композиции для лечения пародонтита при экспериментальном сахарном диабете 1 типа
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.01.14
Автореферат диссертации по медицине на тему Обоснование применения хитозансодержащей композиции для лечения пародонтита при экспериментальном сахарном диабете 1 типа
На правах рукописи
ТУМШЕВИЦ ВЕРА ОЛЕГОВНА
Обоснование применения хитозансодержащей композиции для лечения пародонтита при экспериментальном сахарном диабете I типа
ооЛ
14.04тН= Стоматология
АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
>1 4 ЯНВ 23:0
Красноярск - 2010
003490544
Работа выполнена на кафедрах стоматологии детского возраста и стоматологии ИПО ГОУ ВПО «Красноярский государственный медицнский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации Научный руководитель:
Доктор медицинских наук, профессор Алямовский Василий Викторович Научный консультант:
Доктор медицинских наук, профессор Большаков Игорь Николаевич Официальные оппоненты:
Доктор медицинских наук Старосветский Сергей Иванович Кандидат медицинских наук Михайлова Ольга Викторовна Ведущая организация:
ГОУ ВПО «Омская государственная медицинская академия Росздрава»
Защита состоится «29» января 2010 года в 10 часов на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 208.037.03 при ГОУ ВПО «Красноярский государственный медицнский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (660022, г. Красноярск, ул. Партизана Железняка, д. I)
С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации»
Автореферат разослан ^¿'/¿■С^А^—_2009 г.
Ученый секретарь совета по защите '' докторских и кандидатских диссертаций к.м.н., доцент
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы:
■ В соответствии с приказом Минздравсоцразвития России от 07.04.05 № 262 «Об утверждении стандарта медицинской помощи больным сахарным диабетом»: рост числа людей страдающих сахарным диабетом (СД) требует пересмотра, оптимизации и повышения качества медицинской помощи таким больным, равно как и повышения качества их жизни. Однако существующие стандарты оказания стоматологической помощи больным СД не учитывают особенностей возникновения и течения хронического генерализованного пародонтита (ХГП) связанных с общесоматическими изменениями в организме больных СД I типа.
При СД I типа возникает нарушение общего и местного иммунитета полости рта, понижается сопротивляемость к инфекции и грибковым поражениям, прогрессирует ангиопатия сосудов микроциркуляторного русла пародонта, что и провоцирует развитие пародонтита у таких больных независимо от исходного уровня гигиены полости рта (Кузьмина Э.М., 2001, Тумшевиц О.Н., 2002).
По данным Э.С. Оганян (2001), традиционное местное лечение пародонтита протекающего на фоне СД I типа эффективно в 42,9% случаев при компенсированном течении основного заболевания, малоэффективно при субкомпенсированном и неэффективно при декомпенсации уровня глюкозы крови.
Общепринятые методики профилактики и лечения пародонтита оказываются малоэффективны у больных СД I типа, так как не влияют на основное звено патогенеза - патологически измененные сосуды. Стоматологическая реабилитация больных СД I типа сложна и требует применения инновационных материалов и технологий для лечения заболеваний органов и тканей полости рта (Дроздова Е.А., 2007, Еловикова Г.М., 1989, Звигинцев М.А., 2003).
Необходима разработка новых изделий медицинского назначения обладающих комплексным действием на мягкие и твердые ткани пародонта, снижающих неблагоприятное влияние ангиопатии сосудов микроциркуляторного русла, устраняющих воспалительные явления, стимулирующих коллагено- и остеогенез, что позволит приостановить развитие патологического процесса на ранних этапах заболевания. Новые изделия должны иметь удобную для применения форму, не требующую дополнительного удерживающего покрытия и частого нанесения. Так же требуется разработка новых методик профилактики и лечения заболеваний пародонта у больных СДI типа, с применением инновационных препаратов.
Цель исследования:
Повышение эффективности лечения и профилактики заболеваний пародонта при сахарном диабете I типа в стадии компенсации, путем разработки и применения в эксперименте биополимерной композиции, на основе хитозан-альгинат-гидроксиапатитного (ХАГ) комплекса.
Задачи исследования:
1. Разработать биополимерную композицию на основе хитозана, альгината и гидроксиапатита для применения в пародонтологии.
2. Провести санитарно-химические и токсикологические испытания изделия медицинского назначения «ХАГ-БОЛ».
3. Исследовать воздействие хитозан-альгинат-гидроксиапатитного и хитозан-альгинатного комплексов на состояние, тканей пародонта экспериментальных животных с моделью аллоксанового сахарного диабета при компенсированном течении, путем анализа динамики показателей пародонтальных индексов.
4. Произвести сравнительную оценку влияния хитозансодержащих композиций на состояние микроциркуляторного русла пародонта при помощи лазерной допплеровской флоуметрии в эксперименте.
5. Изучить эффективность применения хитозан-альгинат-гидроксиапатитного и хитозан-альгинатного комплексов, путем сравнительного
4
анализа результатов морфологического исследования тканей пародонта экспериментальных животных.
6. Разработать рекомендации по применению изделия медицинского назначения «ХАГ-БОЛ», для лечения и профилактики пародонтита на фоне инсулинозависимого сахарного диабета.
Научная новизна исследования
Впервые получен хитозан-альгинат-гидроксиапатитный комплекс содержащий сульфатированные и несульфатированные гликозаминогликаны, проведена экспериментальная оценка эффективности применения данного изделия при пародонтите на фоне компенсированного течения сахарного диабета I типа. Доказана высокая эффективность изделия медицинского назначения «ХАГ-БОЛ»: способность нивелировать неблагоприятное влияние микроангиопатии на ткани пародонта, обеспечить адекватную микроциркуляцию за счет активного новообразования сосудов капиллярного типа, приостановить воспалительные и деструктивные процессы в тканях пародонта.
Практическая значимость работы
Получено новое изделие медицинского назначения, экспериментально обосновано его применение для профилактики и лечения пародонтита на фоне компенсированного сахарного диабета I типа. Подготовлена база для клинической апробации патогенетически обоснованной методики лечения пародонтита на фоне сахарного диабета I типа учитывающей особенности развития пародонтопатии на фоне имеющихся общесоматических изменений характерных для данной патологии.
Положения выносимые на защиту
1. Применение соединений хитозана: хитозан-альгинатного и хитозан-альгинат-гидроксиапатитного комплексов для местного лечения пародонита на фоне компенсированного течения инсулинозависимого сахарного диабета способствует нормализации микроциркуляции, снижению воспаления и профилактике деструктивных процессов в тканях пародонта.
5
2. Применение хитозан-альгинат-гидроксиапатитного комплекса «ХАГ-БОЛ» для местного лечения экспериментального пародонита на фоне компенсированного течения инсулинозависимого сахарного диабета является наиболее эффективным среди предложенной группы полимерных изделий.
Апробация работы
Материалы диссертации доложены и обсуждены на Всероссийских научно-практических конференциях «Сибирский стоматологический форум» (Красноярск, 2008, 2009), заседании проблемной комиссии по стоматологии «Красноярского государственного медицинского университета имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого» МЗ и CP РФ (2009).
Публикации
По теме диссертации опубликовано 7 печатных работ, из них 2 в реферируемых изданиях рекомендованных ВАК, получен патент РФ на изобретение.
Внедрение в практику результатов исследования
Результаты диссертационной работы изложенные в методических рекомендациях легли в основу клинических исследований по эффективности применения хитозан-альгинат-гидроксиапатитного комплекса при пародонтите на фоне сахарного диабета I типа. На материалах методических рекомендаций базировалась разработка изделия медицинского назначения «ХАГ-БОЛ» и создание способа лечения пародонтита у больных сахарным диабетом I типа препаратом «ХАГ-БОЛ» (Патент РФ № 2309748 от 10.11.2007).
Проведенные исследования изложенные в методических рекомендациях положены в основу медицинских испытаний изделия «ХАГ-БОЛ» в формате GCP для России с целью включения разработанного и исследуемого биополимера в реестр изделий медицинского назначения Росздравнадзора.
Объем и структура диссертации
Диссертация изложена на 103 страницах машинописного текста, состоит из введения, четырех глав, выводов, практических рекомендаций и списка литературы включающего 173 источника, в том числе 105 на русском
6
языке и 68 на иностранных языках. Текст иллюстрирован 37 рисунками и 7 таблицами.
Личное участие автора
Автор принимала участие в создании нового изделия медицинского назначения «ХАГ-БОЛ», организации проведения токсикологических испытаний этого изделия.
Автором проведено экспериментальное исследование эффективности изделия медицинского назначения: лично воспроизводила модель аллоксанового сахарного диабета, оценивала состояние пародонта экспериментальных животных с применением Йодного числа Свракова и индекса кровоточивости РВ1, производила функциональное исследование состояния микроциркуляции в пародонте экспериментальных животных методом лазерной допплеровской флоуметрии. При непосредственном участии автора организованны и проведены лабораторные и патоморфологические исследования.
Автором подробно проанализированы результаты проведенного экспериментального исследования, проведена статистическая обработка и обобщение полученных результатов.
Автором разработаны рекомендации по применению изделия «ХАГ-БОЛ» в клинических исследованиях. При участии автора разработана и запатентована методика лечения пародонтита на фоне сахарного диабета I типа.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Получение и доклинические испытания изделия медицинского назначения на основе хитозан-альгинат-гидроксиапатитного комплекса
Для приготовления полимерного композиции на основе хитозан-альгинат-гидроксиапатитного комплекса использовали: сухой хитозан (молекулярная масса 300-700 Ша, степень дезацетилирования свыше 95%), аскорбиновую кислоту, хондроитинсерную кислоту, гиалуроновую (О-глюкуроновую) кислоту, сывороточный фактор роста крупного рогатого скота
7
(гликопротеид с ММ около 20000 Da, сахаридная часть- 25%, белковая часть -класс S-белков), гепарин, натриевую соль альгиновой кислоты, гидроксиапатит высокодисперсный.
Санитарно-химические и токсикологические испытания изделия медицинского назначения «ХАГ-БОЛ» проведены в соответствии со стандартами серии ГОСТ Р ИСО 10993 «Оценка биологического действия медицинских изделий»; «Сборник руководящих методических материалов по токсикологическим исследованиям полимерных материалов и изделий на их основе медицинского назначения» МЗ СССР, 1987; ГОСТ Р 51148-98 «Изделия медицинские. Требования к образцам и документации, представляемым на токсикологические, санитарно-химические испытания, испытания на стерильность и пирогенность»; ГН 2.3.3.972-00 «ПДК химических веществ выделяющихся из материалов, контактирующих с пищевыми продуктами».
Материалы и методы экспериментального исследования
Экспериментальное исследование проведено на 55 крысах-самцах линии Wistar, в возрасте 5-6 месяцев, массой 200-220 г. Модель инсулинозависимого сахарного диабета воспроизводилась по методике Н.А. Пальчиковой с соавт. (2006), развитие сахарного диабета регистрировали путем определения содержания глюкозы в цельной крови и в сыворотке крови экспериментальных животных натощак. Уровень глюкозы в цельной крови определялся при помощи тест-полосок и глюкометра One touch II. Уровень глюкозы в сыворотке крови определялся при помощи биохимического анализатора Stat Fax 1904 Plus.
После формирования экспериментальной модели сахарного диабета, животным начата инсулинотерапия. Контроль эффективности инсулинотерапии производился еженедельно до момента завершения эксперимента путем измерения глюкозы цельной крови натощак и после нагрузочного теста.
Через 4 недели от начала эксперимента, была начата местная терапия тканей пародонта.
Экспериментальные животные были разделены на 5 групп:
1 группа - крысы с моделью инсулинозависимого сахарного диабета, адекватной инсулинотерапией и местным применением в области тканей пародонтахитозан-альгинат-гидроксиапатитного (ХАГ) комплекса (15 особей);
2 группа - крысы с моделью инсулинозависимого сахарного диабета, адекватной инсулинотерапией и местным применением в области тканей пародонта хитозан-альгинатного (ХА) комплекса (15 особей);
3 группа - крысы с моделью инсулинозависимого сахарного диабета, адекватной инсулинотерапией и местным применением в области тканей пародонта гидроксиапатита (ГА) (15 особей).
4 группа - крысы с моделью инсулинозависимого сахарного диабета и адекватной инсулинотерапией, не получавшие местной терапии в области тканей пародонта (5 особей);
5 группа - интактные крысы (5 особей);
1 раз в 3 дня препараты (ХАГ, ХА, ГА) в форме геля, при помощи инсулинового шприца с затупленной иглой и стоматологической гладилки наносились на десну и в пародонтальные карманы в области жевательных зубов экспериментальных животных. Гелевую массу получали путем разведения сухого вещества в дистиллированной воде в соотношении 1:1. Во время проведения процедур животные находились под легким эфирным наркозом.
Методы определения состояния пародонта
Перед началом проведения местных терапевтических мероприятий и по окончании курса терапии, состояние пародонта крыс было оценено при помощи индекса кровоточивости сосочков (РВ1) по вахег и МиЫетапп и йодного числа Свракова.
Функциональный метод оценки состояния микроциркуляторногорусла
По завершении 4-х недельного курса аппликационной терапии, через 8 недель от начала эксперимента, была произведена оценка состояния микроциркуляторного русла пародонта крыс всех 5 групп методом лазерной
допплеровской флоуметрии (ЛДФ), при помощи лазерного анализатора капиллярного кровотока ЛАКК-2.
Морфологический метод анализа состояния тканей пародонта
Исследованию подвергались верхнечелюстные и нижнечелюстные ткани экспериментальных животных. Полученные микропрепараты изучены под микроскопом Austria при увеличении 160 и 400. При микроскопическом исследовании оценивали состояние эпителия, связочного аппарата, губчатой костной ткани, микрососудов во всех отделах пародонта с измерением толщины их стенок. Иллюстрации гистологических препаратов выполнены с помощью видиокамеры Sanyo Color CCD и компьютера Genuineintel Х86 Family 15 Model 3Stepping3.
Методы статистической обработки результатов исследования
Для оценки достоверности различий числовых значений в выборках применяли непараметрический критерий серий Вальда Вольфовича и параметрический метод дисперсионного анализа. Для оценки качественных признаков использовали критерий у\ Расчет статистических показателей производился при помощи приложения Microsoft Office Excel 2007 for Windows.
Результаты исследований
Получение полимерного комплекса, результаты санитарно-хичического и токсикологического исследования.
Получен полимерный комплекс представляющий собой сублимированную массу светло-кремового цвета, содержащую 2% аскорбат-хитозана, хондроитинсерную и гиалуроновую кислоты, гепарин, сывороточный фактор роста крупного рогатого скота, 4% альгинат-натрия и 50% аморфный гидроксиапатит, в соотношении аскорбат-хитозана и альгинат-натрия 1:1.
По результатам проведенных санитарно-химических и токсикологческих испытании вынесено следующее заключение: изученные образцы отвечают требованиям, предъявляемым к изделиям медицинского назначения, имеющим контакт с тканями организма, в условиях эксперимента материалы изделий
10
проявили достаточную химическую стабильность, вытяжки из них не оказали неблагоприятного воздействия на биологические объекты.
Покрытие раневое «ХАГ-БОЛ», стерильное, соответствует нормативной документации, рекомендуется к применению по показателю токсичности.
Результаты формирования экспериментальной модели инсулинозависимого сахарного диабета
Формирование экспериментальной модели аллоксанового сахарного диабета было зарегистрировано через 2 недели после введения аллоксан гидрата: наблюдалось стойкое повышение уровня глюкозы цельной крови и сыворотки крови в 3 и более раза в сравнении с соответствующими показателями интактных крыс, от 1,8-3,3 ммоль/л до 8,4-12,5 ммоль/л (р<0,001).
С третьей недели (15 дня) от начала эксперимента была начата общая инсулинотерапия, в результате которой достигнута компенсация течения экспериментального сахарного диабета: показатели уровня глюкозы цельной крови натощак и после нагрузочного теста у крыс с моделью аллоксанового сахарного диабета не имеют достоверных отличий (р>0,005) от принятых значений для компенсированного течения СД I типа (таб. 1). Статистический расчет проводился при помощи критерия серий Вальда-Вольфовича.
Таблица 1
Значения уровня глюкозы крови при адекватном контроле сахарного диабета
Уровень глюкозы натощак (ммоль/л) Уровень глюкозы через 2 часа после нагрузки (ммоль/л)
Показатель адекватного контроля СД* Показатели экспериментальных животных Показатель адекватного контроля СД* Показатели экспериментальных животных
3,3-4,8 2,8-4,1 5,8-7,3 5,2-7,1
р>0,05 р>0,05
*- значения приведены с учетом более низких показателей нормы глюкозы крови крыс в сравнении с человеком
И
Результаты оценки состояния тканей пародонта Наличие клинических признаков поражения пародонта: воспаление и кровоточивость оценивалось при помощи Йодного числа Свракова и индекса PBI. Показатели пародонтологических индексов интактных крыс соответствовали данным здорового пародонта. Статистический расчет проводился при помощи критерия серий Вальда-Вольфовича.
Через 4 недели после моделирования компенсированного аллоксанового сахарного диабета отмечалось ухудшение состояния тканей пародонта экспериментальных животных: легкая степень воспаления десен и кровоточивости (рис. 1,2).
По окончании курса аппликационной терапии произведен повторный расчет индекса PBI и йодного числа Свракова, при изучении динамики патологических изменений в пародонте крыс с моделью компенсированного сахарного диабета I типа отмечается увеличение степени воспаления десен и кровоточивости, что свидетельствует о прогрессировании патологии пародонта (рис. 1,2).
^■ÉflHHStal...
■ 2 степень я 1 степень я 1 степень в 2 степень
СД 8 недель-н ГА СД 8 недель+ХАГ СД8недель+ХА
Рис. 1. Показатели уровня воспаления мягких тканей пародонта в группах экспериментальных животных (1 степень - легкое воспаление, 2 степень -средне-тяжелое воспаление)
* 1 степей, СД 4 недели
«¡2 степень зз степень СД 8 недель без лечения
СД 8 недель+ ГА СД 8 недель+ ХАГ СД 8 недель+ ХА
Рис. 2. Показатели степени кровоточивости в группах экспериментальных
животных
Соотношение показателей индекса кровоточивости РВ1, а так же показателей йодного числа Свракова в группах крыс получавших в качестве лечения ГА и не получавших местного лечения не имеет отличий, что указывает на отсутствие противовоспалительного воздействия ГА на пародонт (рис. 1,2).
Значения Йодного числа Свракова и индекса РВ1 в группе крыс получавших местную терапию с применением ХАГ комплекса не имеют достоверных отличий от показателей пародонтальных индексов полученных до начала местной терапии и достоверно ниже показателей группы крыс без местного лечения, что доказывает противовоспалительную эффективность ХАГ комплекса при пародонтите на фоне компенсированного сахарного диабета I типа (рис. 1,2).
В группе получавшей в качестве местного лечения ХА композицию значения индекса кровоточивости и уровень воспаления в десне достоверно ниже чем в группе не получавшей местного лечения, что свидетельствует о наличии положительного влиянии ХА комплекса на пародонт. Однако
показатели йодного числа Свракова и значения индекса PBI в этой группе остаются достоверно выше чем показатели полученные в группе получавшей ХАГ комплекс и в сравнении с данными пародонтологических индексов зарегистированных до начала местной терапии, что подтверждает более выраженное воздействие ХАГ комплекса на мягкие ткани пародонта в сравнении с ХА (рис. 1,2).
Результаты лазерной допплеровской флоуметрии микроциркуляторного русла пародонта
После окончания курса местной терапии проведено функциональное исследование состояния микроциркуляторного русла в группах экспериментальных животных, по результатам исследования получены ЛДФ-граммы, для анализа отобраны данные уровня микроциркуляции (М) и коэффициента вариации (Kv). Статистический расчет проводился при помощи критерия серий Вальда-Вольфовича.
Показатели всех групп достоверно отличаются (р<0,001) от значений уровня микроциркуляции здорового пародонта, что объясняется наличием ангиопатии при сахарном диабете (табл. 2).
В группе крыс с моделью инсулинозависимого сахарного диабета не получавших местного терапевтического лечения показатель микроциркуляции (М) значительно выше, чем в группе интактных крыс (р<0,001), что объясняется выраженными застойными явлениями в венозной части микроциркуляторного русла при сахарном диабете.
Показатели М в группе 3 (получавшей ГА) и группе 4 (без местного лечения) не имеют достоверных отличий (р>0,05), что указывает на отсутствие влияния ГА на микрососудистое русло пародонта.
Показатели групп 1 и 2 (получавшей ХАГ и ХА соответственно) достоверно ниже чем в группе 4 (р<0,001), что свидетельствует об улучшении микроциркуляции в пародонте под воздействием препаратов хитозана. Так же уровень микроцируляции (М) 1 группы достоверно ниже (р<0,001)
аналогичного показателя 2 группы и максимально приближается к значениям М в здоровом пародонте.
Таблица 2
Показатели уровня микроциркуляции (М) в группах (пф.ед.)
1 гр: 2 гр: 3 гр: 4 гр: 5 гр:
СД+ХАГ СД+ХА СД+ГА СД Норма
23,77 37,27 47,59 48,39 19,82
23,77 37,52 47,85 49,25 20,75
24,27 37,74 47,85 50,5 21,19
24,27 38,53 48,39 50,84 22,45
25,44 38,57 48,39 51,3 22,91
26,8 38,93 48,87
26,8 38,93 49,25
27,71 39,17 49,25
28,83 40,33 50,5
28,83 40,82 50,84
29,17 41,16 50,84
29,8 41,27 51,3
29,8 41,72 51,3
30,05 42,24 51,3
30,63 43,99 51,3
Р1- р7<0,001; р8>0,05*.
*- р! - группы 1 и 5, р2 -группы 2 и 5, рз - группы 3 и 5, р4 - группы 4 и 5, р5 - группы 1 и 2, рб - группы 1 и 4, р7 - группы 2 и 4, р8 - группы 3 и 4.
О состоянии механизмов активной регуляции кровотока позволяет судить показатель Ку. По результатам проведенной ЛДФ, коэффициент вариации Ку в группе сахарного диабета достоверно ниже (р<0,001) значении интактных крыс, что говорит об ухудшении механизмов регуляции кровотока при прогрессирующей ангиопатии (табл. 3).
Не обнаруживается достоверных различий между показателями Ку в группах 3 и 4 (р>0,05) что указывает на отсутствие влияния ГА на регуляцию тканевого кровотока (табл. 3).
Таблица 3
Показатели (Ку) коэффициента вариации (%)
1 гр: 2 гр: 3 гр: 4 гр: 5 гр:
СД+ХАГ СД+ХА СД+ГА сд Норма
11,71 4,81 5,64 5,64 10,35
14,21 6,65 5,64 6,03 14,29
14,21 10,29 5,64 6,68 17,71
16,12 10,36 5,64 8,41 18,03
16,12 12,11 6,03 8,41 23,72
16,55 12,37 6,03
16,55 13,64 6,48
18,08 13,64 6,68
19,6 13,82 6,68
19,6 14,67 7,79
21,29 15,49 8,41
25,2 15,84 8,41
25,2 16,46 8,41
27,32 17,8 10,2
34,12 17,97 10,2
Рг р7<0,001; рв>0,05
*- р! - группы 1 и 5, р2-группы 2 и 5, рз - группы 3 и 5, р4 - группы 4 и 5, р5 - группы 1 и 2, р6 - группы 1 и 4, р7 - группы 2 и 4, р8 - группы 3 и 4.
Отмечается достоверный (р<0,001) рост показателя Ку в 1 и 2 группе в сравнении с данными группы сахарного диабета. Это является свидетельством стимулирующего действия хитозан содержащих комплексов на миогенный и другие виды регуляции кровотока. Кроме того показатель Ку в 1 группе превышает (р<0,05) значения коэффициента вариации во 2 группе, влияние ХАГ комплекса на регуляцию тканевого кровотока более значимо, по-видимому за счет усиления сократимости гладкомышечных клеток во вновь образованных не измененных сосудах под воздействием ионов кальция из гидроксиапатита.
Результаты морфологического исследования
После выведения животных из эксперимента, выделения и подготовки гистологического материала, произведена оценка морфологических изменений тканей пародонта в исследуемых группах.
Группа 5: интактные крысы.
Пародонт представлен: многослойным плоским эпителием, собственной пластинкой слизистой оболочки, связочным аппаратом зуба (круговая связка зуба, периодонтальные связки), компактной пластинкой и губчатым веществом альвеолярной кости.
В многослойном плоском эпителии различают: тонкий ороговевающий слой, зернистый, шиповатый и базальный слои. Ороговевающий слой -представлен несколькими рядами ороговевших, лишенных ядер клеток. Зернистый слой уплощенный, цитоплазма этих клеток содержит кератогеалин. Зернистый и шиповатый слои тесно связаны между собой. Базальный слой состоит из одного ряда цилиндрических клеток. Собственная пластинка слизистой оболочки - это соединительнотканное образование представленное двумя слоями: поверхностным сосочковым и более глубоким сетчатым.
Круговая связка зуба образована коллагеновыми, эластическими и аргирофильными волокнами с сосудами и нервами. Периодонтальная связка представлена большим количеством собранных в пучки коллагеновых волокон, между которыми располагается рыхлая соединительная ткань с клеточными элементами, сосудами и нервными окончаниями.
В десне преобладают капилляры и мелкие артерии с толщиной стенки в среднем 4,04 мкм.
Для альвеолярной кости характерно наличие узких костно-мозговых каналов с сосудами и остеоцитами.
Группа 4: Крысы с моделью аллоксанового сахарного диабета (компенсированное течение) не получавшие местного лечения пародонта.
Многослойный плоский эпителий с повышенным ороговением, утолщен, выраженные явления акантоза. Круговая связка истончена и
17
инфильтрирована клетками воспалительного ряда. Сосудистые стенки утолщены в среднем 9,89 мкм, вплоть до облитерации просвета отдельных из них (явления склероза и гиалиноза), очагово видны вновь образованные сосуды. Периодонтальная связка истончена с полнокровными сосудами у места соединения с компактной костной тканью. В губчатой кости костно-мозговые пространства расширены, стенки сосудов с явлениями гиалиноза, Толщина стенки возростает до 60,1 мкм. В значительном количестве определяются остеокласты.
Морфологическая картина характеризует типичную диабетическую ангиопатию с прогрессирующей деструкцией тканей пародонта.
Группа 1: Крысы с моделью аллоксанового сахарного диабета (компенсированное течение) получавшие в качестве местного лечения пародонта ХАТ комплекс.
Многослойный плоский эпителий утолщен, но без явлений акантоза. В круговой связке видны в большом количестве вновь образованные сосуды капиллярного типа. Сосуды полнокровные, толщина их стенки в среднем составляет 4,91 мкм. В периодонтальнои связке так же видны вновь образованные сосуды. В губчатой кости единичные умеренно расширенные костно-мозговые каналы с полнокровными сосудами и единичными остеокластами.
Таким образом, в этой группе экспериментальных животных умеренная реакция многослойного плоского эпителия. Значительная пролиферация сосудов капиллярного типа и исчезновение сосудов с явлениями гиалиноза и склероза. Губчатая кость морфологически соответствует норме.
Группа 2: Крысы с моделью аллоксанового сахарного диабета (компенсированное течение) получавшие в качестве местного лечения пародонта ХА комплекс.
Многослойный плоский эпителий пародонта утолщен, с умеренно выраженным акантозом. В круговой связке - вновь образованные сосуды
капиллярного типа, встречаются единичные сосуды с утолщенными стенками, среднее значение толщины сосудистой стенки 7,03 мкм.
В губчатой костной ткани умеренное количество расширенных костномозговых каналов, в которых определяются полнокровные утолщенные сосуды, вновь образованные сосуды и остеокласты.
Таким образом, можно заключить, что альгинат-хитозан положительно влияет на все ткани пародонта, однако эффект менее выражен в сравнении с ХАГ комплексом.
Группа 3: Крысы с моделью аллоксанового сахарного диабета (компенсированное течение) получавшие в качестве местного лечения пародонта ГА.
Многослойный плоский эпителий пародонта утолщен с явлениями акантоза, местами истончен. В круговой связке - толстостенные сосуды, толщина стенки в среднем 9,37 мкм, с явлениями гиалиноза, лимфостаза, сосуды полнокровные, с очагами лимфо-лейкоцитарной инфильтрации и небольшим количеством вновь образованных сосудов. Периодонт - с полнокровными толстостенными сосудами, истончен и на границе с губчатой костью определяются остеокласты. В костной ткани расширенные костномозговые пространства с остеокластами и полнокровными, толстостенными сосудами.
Морфологическая картина соответствует пародонтиту легкой степени с прогрессирующей деструкцией тканей пародонта, характерная диабетическая ангиопатия, это свидетельствует об отсутствии положительного воздействия ГА на пародонт при сахарном диабете.
Статистический расчет проводился при помощи критерия %2. В группах 4 и 5, 3 и 5 отмечаются достоверные различия по всем 10 признакам (р<0,001). В группах 3 и 5 ни по одному из критериев достоверных различий не обнаруживается (р>0,05) (табл. 4).
Группы 1 и 4 имеют достоверные различия (р<0,001) по 2-м признакам из 10, группы 2 и 4 по 6 (р<0,001) признакам из 10. Группы 2 и 3 (р<0,001) по 4 -м признакам из 10 (табл. 4).
Таблица 4
Признаки патологических изменений пародонта в группах
Группа/признак 1 гр: СД+ХАГ 2 гр: СД+ХА 3 гр: СД+ГА 4гр: сд 5 гр: норма
Гиперкератоз + +
Акантоз + + +
Утолщение эпителия + + + +
Воспалительный ' инфильтрат + +
Истончение связок + + + +
Утолщение сосудистой стенки + + +
Склероз и гиалиноз + +
НЕ измененные сосуды + + +
Расширение костномозговых каналов + + +
Остеокласты _ + + +
Из чего можно заключить, что при сахарном диабете развиваются патологические изменения в пародонте по типу пародонтита, терапия ГА в условиях диабетической ангиопатии оказывается не эффективной, применение хитозан содержащих комплексов оказывает положительное влияние на состояние тканей пародонта, более выраженный эффект достигается применением для местной терапии ХАГ комплекса.
мкм
интактные СД СД+ХАГ СД+ХА СД+ГА
Рис. 3. Средние значения толщины стенок микрососудов пародонта в группах экспериментальных животных
При сравнении толщины сосудистых стенок в группах выявляются следующие результаты: толщина стенок сосудов не имеет статистически значимых отличий (а=0,01) в группах 3 и 4 (лечение ГА и без лечения соответственно), 1 и 5 (лечение ХАГ-комплексом и интактные соответственно), что подтверждает отсутствие влияния ГА на микрососуды пародонта (группы 3 и 4) и способность ХАТ нормализовать состояние микроциркуляции в пародонте при СД (группы 5 и 1).
При сравнении групп 1 и 2, толщина сосудистой стенки достоверно ниже (а=0,05) в группе 1 получавшей лечение ХАТ комплексом, ХА комплекс оказывает положительное влияние на состояние микрососудов в пародонте, однако действие ХАГ более выражено. Статистический расчет производился при помощи метода дисперсионного анализа.
ВЫВОДЫ
1. Получен и апробирован хитозан-альгинат-гидроксиапатитный комплекс «ХАГ-БОЛ» для лечения и профилактики хронического генерализованного пародонтита при экспериментальном инсулинозависимом сахарном диабете в стадии компенсации.
2. По результатам санитарно-химических и токсикологических испытаний покрытие раневое «ХАГ-БОЛ», стерильно, соответствует нормативной документации и рекомендуется к применению по показателю токсичности.
3. Хитозан-альгинат-гвдроксиапатитный комплекс позволяет максимально снизить клинические проявления патологии пародонта (воспаление и кровоточивость) у крыс с моделью компенсированного аллоксанового сахарного диабета: показатели Йодного числа Свракова и индекса кровоточивости РВ1 в этой группе достоверно ниже в сравнении с другими (р<0,01 - для ХА, р<0,001 для ГА и СД без местного лечения).
4. Анализ ЛДФ-грамм показал улучшение функционального состояния гемоциркуляции в пародонте под воздействием препаратов хитозана, при этом максимальное приближение показателей микроциркуляции к значениям нормы и усиление механизмов регуляции кровотока обнаружено в группе крыс получавших местное лечение ХАГ комплексом: показатели М достоверно ниже (р<0,001), а показатели Ку достоверно выше (р<0,001) чем в группах ХА, ГА и СД без местного лечения.
5. По результатам проведенного морфологического исследования, можно заключить, что максимальное положительное действие на состояние тканей пародонта крыс с моделью аллоксанового сахарного диабета оказывает ХАГ комплекс, эффективно устраняя воспаление, нивелируя ангиопатические изменения и приостанавливая деструктивный процесс в пародонте. При анализе критериев патологии пародонта в группе ХАГ обнаруживается наименьшее число различий с группой интактных крыс: достоверные различия (р<0,001) по двум признакам из десяти.
РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ДАЛЬНЕЙШЕГО ИЗУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ В КЛИНИКЕ 1. Для лечения и профилактики хронического генерализованного пародонтита на фоне компенсированного инсулинозависимого сахарного диабета рекомендовано ранее и активное использование хитозан-альгинат-
22
гидроксиапатитного комплекса, содержащего в своем составе аскорбиновую, хондроитинсерную и гиалуроновую кислоты, гепарин и сывороточный фактор роста крупного рогатого скота «адгелон».
2. В комплексной терапии пародонтита при сахарном диабете с компенсированным течением следует применять гелевую форму хитозан-альгинат-гидроксиапатитного комплекса, внося изделие медицинского назначения в пародонтальные карманы и на десну в области воспаления.
СПИСОК РАБОТ ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Тумшевиц, В.О. Экспериментальное обоснование лечения заболеваний пародонта при инсулинозависимом сахарном диабете хитозан-альгинат-гидроксиапатитными композициями / В.О. Тумшевиц // Материалы 70-й открытой студенческой конференции.- Красноярск, 2006 - С. 541-543.
2. Экспериментальное исследование влияния хитозщансодержащих композиций на ткани пародонта крыс /О.Н. Тумшевиц, И.Н. Большаков, Л.Д. Зыкова, В.О. Тумшевиц, Ю.Б. Белоусова// Сиб. мед. обозрение. - 2006. - №4. - С.60-62.
3. Тумшевиц, О.Н. Исследование влияния хитозансодержащ их композиций на ткани пародонта крыс с моделью сахарного диабета / О.Н. Тумшевиц, В.О.Тумшевиц, Ю.Б. Белоусова // Стоматология детского возраста и профилактика. - 2007. - №4. - С. 39-141.
4. Пат. 2309748, Российская Федерация МПК А61К 31/722, 31/726. Способ лечения пародонтита при инсулинозависимом сахарном диабете препаратом «Хаг-Бол» / Тумшевиц О.Н., Большаков И.Н., Зыкова Л.Д., Белоусова Ю.Б., Тумшевиц В.О.; Краснояр. гос. мед. акад. № 2006100643/14; опубл, 10.11.2007, Бюл.№ 31.-2с.
5. Тумшевиц О.Н. Сравнительная оценка воздействия хитозансодержащих комплексов на микрососудистое русло пародонта крыс с моделью сахарного диабета /О.Н. Тумшевиц, В.О. Тумшевиц, Ю.Б. Белоусова // Сибирский
стоматологический форум: сб. тр. Всерос. науч.-практ. конф. - Красноярск, 2008.-С. 278-281.
6. Тушевиц О.Н. Использование «ХАГ-БОЛ» изделия медицинского назначения в лечении пародонтита у больных инсулинозависимым сахарным диабетом / О.Н. Тумшевиц, В.О.Тумшевиц, И.Н.Большаков // Сибирский стоматологический форум: сб. тр. Всерос. науч.-практ. конф. - Красноярск,
2008.-С. 284-286.
7. Тумшевиц О.Н. Оценка влияния хитозан содержащих комплексов на состояние микроциркуляторного русла при инсулинозависимом сахарном диабете/ О.Н. Тумшевиц, В.В. Алямовский, В.О. Тумшевиц // Сибирский стоматологический форум: сб. тр. Всерос. науч.-практ. конф. - Красноярск,
2009. - С. 295-297.
8. Тумшевиц В.О. Состояние тканей пародонта у детей и подростков Красноярского края больных инсулинозависимым сахарным диабетом. // Сибирский стоматологический форум: сб. тр. Всерос. науч.-практ. конф. -Красноярск, 2009. - С. 300-302.
Заказ № А.2^Тираж /СО экз.
Отпечатано ООО «Новые компьютерные технологии» 660049 г. Красноярск, ул. К. Маркса, 62; офис 120; тел.: (391)226-31-31,226-31-11.
Оглавление диссертации Тумшевиц, Вера Олеговна :: 2010 :: Красноярск
Введение.
Глава 1. Обзор литературы.
1.1. Ангиопатия и патологические изменения в пародонте при сахарном диабете I типа.
1.2. Возможности диагностики расстройств микроциркуляции в пародонте методом лазерной допплеровской флоуметрии.
1.3. Терапия пародонта при сахарном диабете.
1.4. Хитозан - происхождение, свойства, возможности применения в медицине и стоматологии.
Глава 2. Материалы и методы исследования.
2.1. Получение и доклинические испытания изделия медицинского назначения на основе хитозан-альгинат-гидроксиапатитного комплекса.
2.2. Экспериментальный и лабораторный методы анализа.
2.3. Методы определения состояния пародонта.
2.4. Функциональный метод оценки состояния микро-циркуляторного русла.
2.5. Морфологический метод анализа состояния тканей пародонта.
2.6. Методы статистической обработки результатов исследования
Глава 3. Результаты исследования.
3.1. Получение полимерного комплекса на основе хитозан-альгинат-гидроксиапатита, результаты санитарно-хими-ческого и токсикологического исследования изделия медицинского назначения «ХАГ-БОЛ».
3.2. Результаты формирования экспериментальной модели инсулинозависимого сахарного диабета.
3.3. Результаты оценки состояния тканей пародонта экспериментальных животных.
3.4. Результаты лазерной допплеровской флоуметрии микроциркуляторного русла пародонта.
3.5. Результаты морфологического исследования.
Введение диссертации по теме "Стоматология", Тумшевиц, Вера Олеговна, автореферат
Актуальность исследования
В соответствии с приказом Минздравсоцразвития России от 07.04.05 № 262 «Об утверждении стандарта медицинской помощи больным сахарным диабетом»: рост числа людей страдающих сахарным диабетом (СД) требует пересмотра, оптимизации и повышения качества медицинской помощи таким больным, равно как и повышения качества их жизни [80]. Однако существующие стандарты оказания стоматологической помощи больным СД не учитывают особенностей возникновения и течения хронического генерализованного пародонтита (ХГП) связанных с общесоматическими изменениями в организме больных СД I типа.
При СД I типа возникает нарушение общего и местного иммунитета полости рта, понижается сопротивляемость к инфекции и грибковым поражениям, прогрессирует ангиопатия сосудов микроциркуляторного русла пародонта, что и провоцирует развитие пародонтита у таких больных независимо от исходного уровня гигиены полости рта [50,94].
По данным Э.С. Оганян, традиционное местное лечение пародонтита протекающего на фоне СД I типа эффективно в 42,9% случаев при компенсированном течении основного заболевания, малоэффективно при субкомпенсированном и неэффективно при декомпенсации уровня глюкозы крови [67]. V
Общепринятые методики профилактики и лечения пародонтита оказываются малоэффективны у больных СД I типа, так как не влияют на основное звено патогенеза — патологически измененные сосуды. Стоматологическая реабилитация больных СД I типа сложна и требует применения инновационных материалов и технологий для лечения заболеваний органов и тканей полости рта [35,37,83]. !
Необходима разработка новых изделий медицинского назначения обладающих комплексным действием на мягкие и твердые ткани пародонта, снижающих неблагоприятное влияние ангиопатии сосудов микроциркуляторного русла, устраняющих воспалительные явления, стимулирующих коллагено- и остеогенез, что позволит приостановить развитие патологического процесса на ранних этапах заболевания. Новые изделия должны иметь удобную для применения форму, не требующую дополнительного удерживающего покрытия и частого нанесения. Так же требуется разработка новых методик профилактики и лечения заболеваний пародонта у больных СД I типа, с применением инновационных препаратов.
Цель работы
Повышение эффективности лечения и профилактики заболеваний пародонта при сахарном диабете I типа в стадии компенсации, путем разработки и применения в эксперименте биополимерной композиции, на основе хитозан-альгинат-гидроксиапатитного (ХАГ) комплекса.
Задачи:
1. Разработать биополимерную композицию на основе хитозана, альгината и гидроксиапатита для применения в пародонтологии.
2. Провести санитарно-химические и токсикологические испытания изделия медицинского назначения «ХАГ-БОЛ».
3. Исследовать воздействие хитозан-альгинат-гидроксиапатитного и хитозан-альгинатного комплексов на состояние тканей пародонта экспериментальных животных с моделью аллоксанового сахарного диабета при компенсированном течении, путем анализа динамики показателей пародонтальных индексов.
4. Произвести сравнительную оценку влияния хитозансодержащих композиций на состояние микроциркуляторного русла пародонта при помощи лазерной допплеровской флоуметрии в эксперименте.
5. Изучить эффективность применения хитозан-альгинат-гидроксиапатитного и хитозан-альгинатного комплексов, путем сравнительного анализа результатов морфологического исследования тканей пародонта экспериментальных животных.
6. Разработать практические рекомендации по применению изделия медицинского назначения «ХАГ-БОЛ», для лечения и профилактики пародонтита на фоне инсулинозависимого сахарного диабета.
Научная новизна
Впервые получен хитозан-альгинат-гидроксиапатитный комплекс содержащий сульфатированные и несульфатированные гликозаминогликаны, проведена экспериментальная оценка эффективности применения данного изделия при пародонтите на фоне компенсированного течения сахарного диабета I типа. Доказана высокая эффективность изделия медицинского назначения «ХАГ-БОЛ»: способность нивелировать неблагоприятное влияние микроангиопатии на ткани пародонта, обеспечить адекватную микроциркуляцию за счет активного новообразования сосудов капиллярного типа, приостановить воспалительные и деструктивные процессы в тканях пародонта.
Практическая значимость
Получено новое изделие медицинского назначения, экспериментально обосновано его применение для профилактики и лечения пародонтита на фоне компенсированного сахарного диабета I типа. Подготовлена база для клинической апробации патогенетически обоснованной методики лечения пародонтита на фоне сахарного диабета I типа учитывающей особенности развития пародонтопатии на фоне имеющихся общесоматических изменений характерных для данной патологии.
Реализация результатов исследования
Результаты диссертационной работы легли в основу клинических исследований по эффективности применения хитозан-альгинат-гидроксиапатитного комплекса при пародонтите на фоне сахарного диабета I типа. На результатах данного диссертационного исследования базировалась разработка изделия медицинского назначения «ХАГ-БОЛ» и создание способа лечения пародонтита у больных сахарным диабетом I типа препаратом «ХАГ-БОЛ» (Патент РФ №2309748 от 10.11.2007).
Проведенные исследования положены в основу медицинских испытаний изделия «ХАГ-БОЛ» в формате GCP для России с целью включения разработанного и исследуемого биополимера в реестр изделий медицинского назначения Росздравнадзора.
Личное участие автора:
Автор принимала участие в создании нового изделия медицинского назначения «ХАГ-БОЛ», организации проведения токсикологических испытаний этого изделия.
Автором проведено экспериментальное исследование эффективности изделия медицинского назначения: лично воспроизводила модель аллоксанового сахарного диабета, оценивала состояние пародонта экспериментальных животных с применением Йодного числа Свракова и индекса кровоточивости PBI, производила функциональное исследование состояния микроциркуляции в пародонте экспериментальных животных методом лазерной допплеровской флоуметрии. При непосредственном участии автора организованны и проведены лабораторные и патоморфологические исследования.
Автором подробно проанализированы результаты проведенного экспериментального исследования, проведена статистическая обработка и обобщение полученных результатов.
Автором разработаны рекомендации по применению изделия «ХАГ-БОЛ» в клинических исследованиях. При участии автора разработана и запатентована методика лечения пародонтита на фоне сахарного диабета I типа.
Апробация работы
Материалы диссертации доложены и обсуждены на Всероссийских научно-практических конференциях «Сибирский стоматологический форум» (Красноярск, 2008, 2009), заседании проблемной комиссии по стоматологии «Красноярского государственного медицинского университета имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого» МЗ и CP РФ (2009).
Положения выносимые на защиту
1. Применение соединений хитозана: хитозан-альгинатного и хитозан-альгинат-гидроксиапатитного комплексов для местного лечения пародонтита на фоне компенсированного течения сахарного диабета I типа способствует нормализации микроциркуляции, снижению воспаления и профилактике деструктивных процессов в тканях пародонта.
2. Применение хитозан-альгинат-гидроксиапатитного комплекса «ХАГ-БОЛ» для местного лечения экспериментального пародонтита на фоне компенсированного течения сахарного диабета I типа является наиболее эффективным среди предложенных полимерных изделий на основе хитозана.
Публикации ,
По теме диссертации опубликовано 7 печатных работ, из них 2 в реферируемых изданиях рекомендованных ВАК, получен патент РФ на изобретение.
Объем и структура диссертации
Диссертация изложена на 103 страницах машинописного текста, состоит из введения, четырех глав, выводов, практических рекомендаций и списка литературы включающего 173 источника, в том числе 105 на русском языке и 68 на иностранных языках. Текст иллюстрирован 37 рисунками и 7 таблицами.
Заключение диссертационного исследования на тему "Обоснование применения хитозансодержащей композиции для лечения пародонтита при экспериментальном сахарном диабете 1 типа"
ВЫВОДЫ
1. Разработано и апробировано изделие медицинского назначения «ХАГ-БОЛ» для лечения и профилактики хронического генерализованного пародонтита при экспериментальном инсулинозависимом сахарном диабете в стадии компенсации.
2. Хитозан-альгинат-гидроксиапатитный комплекс позволил максимально снизить клинические проявления патологии пародонта (воспаление и кровоточивость) у крыс с моделью компенсированного аллоксанового сахарного диабета: показатели йодного числа Свракова и индекса кровоточивости PBI в этой группе достоверно ниже в сравнении с другими (р<0,01 - для ХА, р<0,001 для ГА и СД без местного лечения).
3. Анализ ЛДФ-грамм показал улучшение функционального состояния гемоциркуляции в пародонте под воздействием препаратов хитозана, при этом максимальное приближение показателей микроциркуляции (М) к значениям нормы и усиление механизмов регуляции кровотока (Kv) обнаружено в группе крыс получавших местное лечение ХАТ комплексом: показатели М достоверно ниже (р<0,001), а показатели Kv достоверно выше (р<0,001) чем в группах ХА, ГА и СД без местного лечения.
4. Морфологическое исследование выявило, что максимальное положительное действие на состояние тканей пародонта крыс с моделью аллоксанового сахарного диабета оказывает хитозан-альгинат-гидроксиапатитный комплекс, эффективно устраняя воспаление, нивелируя ангиопатические изменения и приостанавливая деструктивный процесс в пародонте. При анализе критериев патологии пародонта в группе ХАГ обнаруживается наименьшее число различий с группой интактных крыс: отсутствие достоверных различий (р>0,05) по 8 признакам из 10.
5. По результатам санитарно-химических и токсикологических испытаний покрытие раневое «ХАГ-БОЛ», стерильно, соответствует нормативной документации и рекомендуется к применению по показателю токсичности.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1.Для лечения и профилактики хронического генерализованного пародонтита на фоне компенсированного сахарного диабета I типа рекомендовано ранее и активное использование хитозан-альгинат-гидроксиапатитного комплекса, содержащего в своем составе аскорбиновую, хондроитинсерную и гиалуроновую кислоты, гепарин и сывороточный фактор роста крупного рогатого скота «адгелон».
2. В комплексной терапии пародонтита при сахарном диабете с компенсированным течением следует применять гелевую форму хитозан-ал ьгинат- гидро кс и а и атитного комплекса, внося изделие медицинского назначения в пародонтальные карманы и на десну в области воспаления. Процедуру достаточно проводить 1 раз в 3 дня, в течение не менее 4-х недель.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Тумшевиц, Вера Олеговна
1. Алексеева, О.А. Роль коррекции общего и местного иммунного статуса и биохимических показателей ротовой жидкости в комплексной терапии пародонтита при сахарном диабете: автореф. дис. . канд. мед. наук. / О.А. Алексеева. М., 2001 .-26 с.
2. Альтернативный способ местного лечения бактериального вагиноза у беременных / И.Н. Большаков, В.Б. Цхай, Р.Т. Полянская, Н.В. Коше-утова // Современные наукоемкие технологии. 2004.- №3.- С. 40-41.
3. Апраксин, М.А. Состояние микроциркуляции крови в слизистой оболочке ротоглотки больных хроническим тонзиллитом: автореф. дис. . канд. мед. наук/ М.А. Апраксин. М., 2009. - 28 с.
4. Бакерникова, Т.М. Сравнительная оценка различных методик протезирования детей с дефектами зубных рядов: автореф. дис. . канд. мед. наук / Т.М. Бакерникова. Тверь, 2008. - 22 с.
5. Балаболкин, М.И. Патогенез ангиопатий при сахарном диабете / М.И. Балаболкин, Е.М. Клебанова, В.М. Креминская // Сахар, диабет. -1999.-№1.- С. 2-8.
6. Балаболкин, М.И. Эндокринология / М. И. Балаболкин. М.: Универсум паблишинг, 1998. — 582 с.
7. Безрукова, И.В. Нарушения функциональной активности полиморф-ноядерных лейкоцитов при атипичных формах воспалительных заболеваний пародонта/ И.В. Безрукова// Пародонтология. 2000. - №4. - С. 12-14.
8. Беляков, Ю.А. Зубочелюстная система при эндокринных заболеваниях / Ю. А. Беляков. М.: Медицина, 1983. - 207 с.
9. Битюкова, Е.В. Состояние и регуляция кислотно-основного равновесия в полости рта у больных сахарным диабетом 2 типа: автореф. дис. . канд. мед. наук / Е.В. Битюкова. Тверь, 2008. - 25 с.
10. Большаков, И.Н. Хитозановая энтеросорбция при воспалительном инфильтрате в брюшной полости /И.Н. Большаков// Современные наукоемкие технологии. 2004.- №3.- С. 50-52.
11. Большаков, И.Н. Хитозановая энтеросорбция при остром уремическом синдроме /И.Н. Большаков// Современные наукоемкие технологии. -2004.-№3.- С. 41-46.
12. Большаков, И.Н. Хитозановый энтеродиализ при деструктивной форме панкреатита /И.Н. Большаков, Е.А. Приходько// Современные наукоемкие технологии. 2004.- №3.- С. 46-49.
13. Быкова, В.М. Сырьевые источники и способы получения хитина и хитозана / В.М. Быкова, С.В. Немцев // Хитин и хитозан: получение, свойства и применение. М., 2002. - С. 7—23.
14. Ванадий содержащие соединения новый класс терапевтических средств для лечения сахарного диабета/ Н.Ф. Беляева, В.К. Городецкий, А.И. Точилкин и д.р. // Вопр. мед. химии. - 2000.- № 4.- С. 16-17.
15. Васильева, JT.B. Динамика морфологических изменений при лечении заболеваний пародонта различными методами /J1.B. Васильева, В.П. Румакин, А.К. Иорданишвили // Институт стоматологии. 2005.-№3.-С.25-28.
16. Взаимодействие гидроксиапатита с никелидом титана и титаном / Н.А. Шевченко, В.И. Итин, А.А. Тухфатуллин и д.р. // Журн. техн. физики.-1998.-№24. С. 41-44.
17. Винник, Ю.С. Аскорбат хитозана в мембранном диализе гнойных ран/ Ю.С. Винник, И.Н. Большаков, Г.Э. Карапетян // Современные перспективы в исследованиях хитина и хитозана: матер. VII междунар. конф. М., 2003. - С. 157-161.
18. Виноградова, Т.Ф. Заболевания краевого пародонта у детей / Т.Ф. Виноградова. -М.: Медицина, 1978. 65 с.
19. Владимирова, И.Ю. Повышение эффективности лечения кариеса зубов у больных сахарным диабетом с применением сверхэластичных материалов: автореф. дис. . канд. мед. наук / И. Ю. Владимирова. Новосибирск, 1999.-22 с.
20. Возможности динамической магнитотерапии при нарушении микроциркуляции у детей и подростков с сахарным диабетом 1-го типа / Н.В. Болотова, Н.В. Николаева, Т.В. Головачева и д.р. // Педиатрия. 2008.-№1.- С.79-83.
21. Воложин, А.И. Патологическая физиология/ под ред. А.И. Воложина, Г.В. Порядина. М.: МЕДпресс, 2000. - Т.2 - 528 с.
22. Гаврилова, Н.А. Функциональное состояние эндотелия сосудистой стенки при диабетической ретинопатии/ Н.А. Гаврилова, Н.И. Ланев-ская // Гемореология в макро- и микроциркуляции: матер, междунар. конф. Ярославль, 2005. - С.71.
23. Гамадзе, А.И. Антибактериальная активность хитозанов / А.И. Гамадзе, С.М. Насибов, О.В. Лукин // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана: матер. VIII междунар. конф. М., 2006. — С. 183— 186.
24. Гланц, С. Медико-биологическая статистика/ С.Гланц. М.: Практика, 1999.- 460 с.
25. Грудянов, А.И. Идиопатические поражения пародонта с прогрессирующим лизисом кости / А.И. Грудянов, И.В. Безрукова// Пародонто-логия. 2000. - № 4. - С. 19-22.
26. Гуч, А.А. Патогенетические аспекты нарушений микроциркуляции при облитерирующем атеросклерозе артерии нижних конечностей/ А.А.Гуч // Укр. мед. часопис. 2002.- №5.- С. 111-116.
27. Двинин, Ю.Ф. Технохимическая характеристика некоторых беспозвоночных Баренцева моря как хитинсодержащего сырья / Ю.Ф. Двинин, Т.К. Лебская, А.Л. Иванов // Производство и применение хитина и хитозана: тез. IV всерос. конф. М., 1995.- С. 8-10.
28. Джемилева, Т. Заболевания на пародонта. София: Ацер, 1999. — 370 с.
29. Диабет // Информ. бюл. ВОЗ. 2009, Нояб. - С. 1-2.
30. Достовалова, А.И. Опыт лечения ожогов лица гелем хитозана / А.И. Достовалова, О.В. Симонова // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана: матер. VIII междунар. конф. М., 2006. - С. 186-188.
31. Дроздова, Е.А. Эпидемиология сахарного диабета и основные направления совершенствования диабетологической помощи населению на региональном уровне (на примере Амурской области): автореф. дис. . канд. мед. наук/ Е.А. Дроздова. — Хабаровск, 2007.-24 с.
32. Еловикова, Г.М. Изменение пародонта у больных инсулинозависимым сахарным диабетом / Г. М. Еловикова // Стоматологический форум: сб. тр. науч. практ. конф-Пермь, 1989. С. 20-25.
33. Е-селектин (CD 62) у больных с диабетической микроангиопатией -показатель активации эндотелия? / Т.В. Кочемасова, М.В. Шестакова,
34. B.А. Горелышева и д.р. // Рос. биотерапевт, журн. 2002.- №1.-С. 9-13.
35. Жартыбаев, Р.Н. Клинико-цитологические исследования применения перфторана для лечения заболеваний пародонта у больных сахарным диабетом / Р.Н. Жартыбаев, М.Р. Рыс-Улы// Биомед. журн.- 2004.- Т.5.1. C. 208-209.
36. Звигинцев, М.А. Стоматологическая реабилитация больных сахарным диабетом: автореф. дис. . д-ра мед.наук / М. А. Звигинцев. — Омск, 1998.-47 с.
37. Использование хитозана и его продуктов при воспалительных заболеваниях желудочно-кишечного тракта / И.Н. Большаков, С.М. Насибов, Е.Ю. Куклин, А.А. Приходько // Хитин и хитозан: получение, свойства и применение -М., 2002. С. 280-301.
38. Канканян, А.П. Болезни пародонта: Новые подходы в этиологии, патогенезе, диагностике, профилактике и лечении / А. П. Канканян, В. К. Леонтьев. Ереван: Тигран Мец.,1998 - 360 с.
39. Касаткина, Э.П. Профилактика поздних осложнений сахарного диабета у детей и подростков. Пути оптимизации диспансерной службы/ Э.П. Касаткина, И.Г. Сичинава// Сахар, диабет. 1999 . - №1. - С. 14-16.
40. Келенджеридзе, Е.М. Сравнительная оценка процесса адаптации опорных тканей при ортопедическом лечении с использованием импланта-тов по данным микроциркуляторных показателей: автореф. дис. . канд. мед. наук / Е.М. Келенджеридзе. -М., 2006.-26 с.
41. Клинико-физиологическое исследование функционального состояния микроциркуляторного ложа человека при лимфедеме нижних конечностей / О. В. Фионик, Н. П. Ерофеев, Н. А. Бубнова, Д. Б. Вчерашний // Вестн. С.-Петерб. ун-та. 2007.- Вып. 4.- С. 102-109.
42. Козлова, М.В. Особенности нарушений микроциркуляции у женщин постменопаузального периода с артериальной гипертонией: автореф. дис. . канд. мед. наук / М.В. Козлова.- Иваново, 2008. -20 с.
43. Кочемасова, Т.В. Состояние эндотелия и адгезия лейкоцитов при сахарном диабете / Т.В. Кочемасова // Сахар, диабет.- 2000.- №3.- С. 5962.
44. Крупаткин, А.И. Лазерная допплеровская флоуметрия микроциркуляции крови / А.И. Крупаткин, В.В. Сидоров. М.: Медицина, 2005. - 91 с.
45. Кузьмина, Э.М. Профилактика стоматологических заболеваний / Э.М. Кузьмина. -М.: Поли Медиа Пресс, 2001.- 216 с.
46. Куликов, А.В. Трансплантологический способ компенсации экспериментального диабета / А.В. Куликов // Вестн. РАМН.- 1994.- №2.-С.122-125.
47. Лебская, Т.К. Источники хитозансодержащего сырья из некоторых беспозвоночных Баренцева моря / Т.К. Лебская, М.Ю. Двинин // Новые перспективы в использовании хитина и хитозана: матер. V Всерос. конф. М. - Щёлково, 1999. - С. 42-44.
48. Логинова, Н.К. Лазерная допплеровская флоуметрия пульпы зуба (обзор лит.). 4.1 /Н.К.Логинова, Т.В.Троицкая// Институт стоматологии. -2007.-№1.- С. 110.
49. Логинова, Н.К. Лазерная допплеровская флоуметрия пульпы зуба (обзор лит.). Ч. 2 /Н.К.Логинова, Т.В.Троицкая// Институт стоматологии. -2007.-№2.- С. 72-73.
50. Лушникова, Е.Л. Заболевания пародонта/ Е.Л. Лушникова. М.: Медицина, 1981.-312 с.
51. Лысенко, И.Г. Научное обоснование путей улучшения медико-социальной помощи детям, больным сахарным диабетом 1 типа (на примере г. Красноярска): автореф. дис. . канд. мед. наук / И.Г. Лысенко. — Красноярск, 2008. 24 с.
52. Мембранный диализ гнойных ран с использованием аскорбата хитозана / Г.Э. Карапетян, Ю.С. Винник, С.В. Якимов и д.р. // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана: матер. VIII междунар., конф. М., 2006. - С. 206-209.
53. Михайлова, О.В. Клинико-морфологическое обоснование применения 2% геля аскорбата хитозана в лечении глубокого кариеса зубов: автореф. дис. . канд. мед. наук / О.В. Михайлова. -Красноярск, 2004. 22 с.
54. Молодкина, О. А. Функциональное состояние микроциркуляторного русла при системных васкулитах и системных заболеваниях соединительной ткани: автореф. дис. . канд. мед. наук /О.А. Молодкина.-Ярославль, 2005.-24 с.
55. Мусаева, Р.С. Клинико-лабораторное обоснование выбора средств гигиены полости рта при заболеваниях пародонта у больных сахарным диабетом: автореф. дис. . канд. мед. наук/ Р.С. Мусаева. — СПб., 2009.-16 с.
56. Нарушения микроциркуляции пародонта при экспериментальных па-родонтитах легкой степени и их коррекция перфтораном/ К.М. Расулов,
57. Хамад, М.Г. Гаджиев, М.А. Магомедов// Рос. биомед. журн,- 2004.-Т.5.- С.229-230.
58. Нарыкова, С.А. Алгоритм распознавания состояния микроциркуляции в пародонте на основе данных метода ЛДФ / С.А. Нарыкова// Гемореология в макро- и микроциркуляции: матер, междунар. конф. -Ярославль, 2005.-С. 173.
59. Нарыкова, С.А. Диагностика ранних стадий заболеваний пародонта методом ЛДФ: автореф. дис. . канд. мед. наук/ С.А. Нарыкова.- Красноярск, 2005.-24 с.
60. Никитин, Ю.П. «Институту терапии Сибирского отделения Российской Академии наук 25 лет» /Ю.П. Никитин// Бюл. СО РАМН,- 2006.- №4.-с. 6-10.
61. Николаева, М.Я. Цитотоксичность аллоксана: новый аспект проблемы/ М.Я. Николаева, P.M. Пархимович, А.В. Зарайский // Пробл. эндокринологии." 1986. -№ 3.- С. 75-79.
62. Новые экспериментально-клинические подходы к эндохирургическому лечению кровоточащей гастродуоденальной язве/ С.В. Капралов, Ю.Г. Шапкин, С.Н. Потахин и д.р. // Фундаментальные исслед.-2007.-№4,-С.24-30.
63. Оганян, Э.С. Состояние пародонта у больных инсулинозависимым сахарным диабетом: автореф. дис. . канд. мед. наук/ Э.С. Оганян -СПб., 2001.- 18 с.
64. Орехова, Л.Ю. Динамика иммунологических показателей ротовой полости при лечении воспалительных заболеваний пародонта у больных инсулинозависимым сахарным диабетом /Л.Ю. Орехова, М.Я. Левин, Э.С. Оганян// Стоматология. -2001. № 1. - С.42-46.
65. Орехова, Л.Ю. Исследование микроциркуляторных нарушений при заболеваниях пародонта методом ультразвуковой допплеровской фло-уметрии /Л.Ю. Орехова// Труды V съезда Стоматологической Ассоциации России.- М., 1999. С.158 -160.
66. Орешкин, И.В. Клинико-морфологическое обоснование лечения деструктивных форм периодонтита с применением хитозана: автореф. дис. . канд. мед. наук /И.В. Орешкин. Красноярск, 2003. - 24 с.
67. Орешкин, И.В. Сорбционная терапия препаратом хитозана при обострении хронического периодонтита / И.В. Орешкин, О.С. Корякина, JI.C. Башкирова// Стоматология сегодня: сб. науч. ст. Красноярск, 2003.- Ч. И.- С. 30-31.
68. Пальчикова, Н.А. Влияние перфторана на чувствительность животных к диабетогенному действию аллоксана и течение экспериментального диабета/ Н.А. Пальчикова, О.И. Кузьминова, В.Г. Селятицкая// Бюл. СО РАМН.- 2006.- №3.- С. 113-116.
69. Пат. 2275917 Российская Федерация, МПК А 61 К 31/722. Способ профилактики прогрессирования близорукости / В. В. .Кузовников, И. Н. Большаков, В. И. Лазаренко; Краснояр. гос. мед. акад. №2005108099/14; опубл. 20.09.2006, Бюл. № 13 (ч.Ш).-2 с.
70. Пат. 2301675, Российская Федерация, МПК А61 КЗ 1/722,27/02. Способ лечения диабетической ретинопатии препаратом «БОЛ-ХИТ» / В.В. Кузовников, В.И. Лазаренко, И.Н. Большаков; Краснояр. гос. мед. акад. №2006106578/14; опубл. 27. 06. 2007, Бюл. №18.-2 с.
71. Пат. 2311181, Российская Федерация МПК А61В17. Способ восстановления костной ткани челюстей после операции цистэктомии / А.А. Ле-венец, И.Н. Большаков, А.А. Чучунов, Н.Н. Барахтенко; Краснояр. гос. мед. акад. Опубл. 27.11.2007, Бюл. № 33. -2 с.
72. Пестов, А. Стоматологические материалы из хитозана и карбоксиэтил-хитозана /А. Пестов, Ю. Бондарь, Т. Мирсаев // Современные перепективы в исследовании хитина и хитозана. Матер. VIII междунар. конф. — М., 2006. -С.233-236.
73. Приказ Минздравмедпром России от 14.03.95 № 59 «О разрешении к медицинскому применению лекарственных средств» // Здравоохранение.- 1995.-№7.- С. 40-41.
74. Приказ Минздравсоцразвития России от 07.04.05 № 262 «Об утверждении стандарта медицинской помощи больным сахарным диабетом» // Здравоохранение.- 2005.- № 9.- С. 90-96.
75. Применение хитозана в лечении воспалительных заболеваний ротовой полости / А.А. Майгуров, А.С. Солнцев, И.Н. Большаков, И.В. Ореш-кин // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана: матер. VIII междунар. конф. М., 2006. - С. 224-227.
76. Проблемы стоматологии при сахарном диабете/ М.А. Звигинцев, В.Э. Гюнтер, С.И. Старосветский и д.р,- Томск: STT, 2003. 412 с.
77. Распространенность инсулинзависимого сахарного диабета и частота сосудистых осложнений среди детей и подростков Москвы /И.Г. Сичи-нава, Э.П. Касаткина, Е.А. Одуд, A.M. Лобанова // Рос. вестн. перина-тологии и педиатрии. -1998. № 2.- С.35-38.
78. Рединова, Т.JI. Частота кандидоза слизистой оболочки полости рта и эффективность его лечения у больных сахарным диабетом / Т.Л. Рединова, О.А. Злобина // Стоматология. 2001. - № 3.- С.20-22.
79. Рунион, Р. Справочник по непараметрической статистике/ Р. Рунион -М.: Финансы и статистика, 1982. 241 с.
80. Саркисов, К.Г. Лазерная допплеровская флоуметрия как метод оценки состояния кровотока в микрососудах/ К.Г.Саркисов, Г.В.Дужак// Методология флоуметрии.- М., 1999.- С.9-14.
81. Серов, А.Б. Метод профилактики развития хронических локализованных пародонтитов при протезировании несъемными протезами: автореф. дис. . канд. мед. наук / А.Б. Серов.- Н. Новгород, 2009.-24 с.
82. Сосин, Д.В. Лазерная допплеровская флоуметрия в оценке различных воздействий на микроциркуляторное русло/ Д.В. Сосин, С.В. Ефремен-ко// Гемореология в макро- и микроциркуляции: матер, междунар. конф.- Ярославль, 2005. С. 180.
83. Состояние пульпы при применении хитозансодержащей прокладки для лечения глубокого кариеса / О.В. Михайлова, А.С. Солнцев, А.Э. Али-Риза, И.Н. Большаков // Современные наукоемкие технологии.-2004.-№3.-С.113.
84. Сравнительный анализ эффективности лечения хронического катарального гингивита гелевыми композициями содержащими Метрони-дазол /И.Н. Большаков, А.С. Солнцев, А.А. Майгуров, Т.Д. Старостен-ко// Современные наукоемкие технологии.-2004.- №3.-С.41-42.
85. Сунцов, Ю.И. Значение государственного регистра больных сахарным диабетом в развитии диабетологической службы /Ю.И. Сунцов, С.В. Кудрякова, Л.Л. Болотская // Сахар, диабет.- 2002.-№ 1. С. 28-31.
86. Татжикова, К.А. Полимагнитотерапия в комплексном консервативном лечении диабетической ангиопатии нижних конечностей: автореф. дис. . канд. мед. наук /К.А. Татжикова. Астрахань, 2008.-24 с.
87. Тумшевиц, О.Н. Обоснование профилактики патологии зубочелюстной системы при неблагоприятном антенатальном и постнатальном периоде развития: автореф. дис. . д-ра мед. наук / О. Н. Тумшевиц. — Омск, 2002. 49 с.
88. Фисталь, Н.Н. Лазерная допплеровская флоуметрия при лечении ожогов/ Н.Н. Фисталь, В.В. Солошенко// Хирургия.- 2008,- №11.- С.53-57.
89. Фурцев, Т.В. Особенности выбора оптимальных стоматологических материалов, имплантационных систем и ортопедических конструкций для реабилитации больных сахарным диабетом: автореф. дис. . д-ра мед. наук/ Т.В. Фурцев.- Казань, 2009.-40 с.
90. Хитозан: структура и свойства. Использование в медицине /Ю.А. Петрович, Л.А. Григорьянц, А.Н. Гурин, Н.А. Гурин // Стоматология. -2008. № 4. - С.72—77.
91. Цыган, В.Н. Хитозан как парафармацевтик / В. Н. Цыган, К. Д. Жого-лев, В. Ю. Никитин// Рынок БАД.- 2002.- №2 .- С. 17-18.
92. Шомина, С.А. Применение хитозана в лечении острых воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области: автореф. дис. канд. мед.наук / С.А. Шомина. Тверь, 2002. - 21 с.
93. Экспериментальное изучение эффективности препаратов хитозана при различных видах патологии / К.Д. Жоголев, В.Н. Цыган, В.Ю. Никитин и д.р. // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана: матер VII междунар. конф. -М., 2003. С. 172-173.
94. Экспериментальный сахарный диабет. Роль в клинической диабетоло-гии / В.Г. Баранов, И.М. Соколоверова, Э.Р Гаспарян и др. — Л.: Наука, 1983. —240 с.
95. Эндогенная интоксикация при пародонтите на фоне сахарного диабета /И.Г. Данилова, И.Ф. Гетте, Л.П. Кисельникова и д.р. // Институт стоматологии.- 2008.- №1.- С. 106-107.
96. Юшков, П.В. Морфогенез микроангиопатий при сахарном диабете/П.В. Юшков, К.В. Опаленов// Сахар, диабет.- 2001.- №1.- С. 12-13.
97. Allan, G.G. A critical evalution of the potential sources of chitin and chito-san / G.G. Allan, J.R. Fox, N.A. Kong // First international conference on Chitin/Chitosan. Boston, 1977. - P. 15-16.
98. Amiji, M.M. Surface modification of chitosan membranes by complexatio-ninterpenetration of anionic polysaccharides for improved blood compatibility in hemodialysis / M.M. Amiji // J. Biomater. Sci. Polim. -1996. Vol. 8, № 4.-P.281-298.
99. Animal experimentation with tooth derived calcium hydroxyapatite based on composities as bone-graft substitute biomaterials / A. K. Pal, Т.К. Pal, K. Mukherjee, S. Pal //Biomed. Sci. Instrum. -1997. -Vol. 33. -P.561-566.
100. Antimicrobal properties of N-carboxybutyl chitosan / R.A. A.Muzzarelli, R.Tarsi, O. Filippini et al. // Antimicrob. Agents Chemother. -1990. -№10. -P.2019-2023.
101. Arai, K. Toxicity of chitosan / K. Arai, T. Kirumaki // Tokaiku Suisan Ken-kyuKokoku. 1968. - Vol. 56, №3. - P. 8994.
102. Barbosa, S.V. Calcium hydroxide solution with low superficial tension -aneffective antiseptic / S.V. Barbosa, L.S. Spangberg, D. Almeda // Int. Endodon. J. 1994. - Vol. 27. - P.6-10.
103. Bell, G.W. Oral health care in diabetes mellitus / G.W. Bell, D.M. Large, S.C. Barclay // Dent. Update. 1999. - Vol.26, № 8. - P.322-330.
104. Biocompatibility of thermosensitive chitosan-based hydrogels: an in vivo experimental approach to injectable biomaterials / G. Molinaro, J.-C. Leroux, J. Damas, A.Adam // Biomaterials. 2002. - №23. - P. 2717-2722.
105. Biomaterials containing chitosan and fibroin/ G. Strobin, M. Kuharska, D. Ciechanska et al.// Polish chitin Society: Monograph №11.- Lodz, 2006.-P. 61-68.
106. Chatelet, C. Influence of degree of acetylation on some biological properties of chitosan films / C. Chatelet, O. Damour, A. Domard // Biomaterials. -2001.-№22.-P. 261-268.
107. Chitin assay to estimate the growth of Candida albicans in organs of infected mice / A. Rementeria, P. Ezkurra, F. Hernando et al. // J.Med.Vet.Mycol. -1991.-№1.-P.15-23.
108. Chitosan and sodium alginate based bioadhesive tablets for intraoral drug delivery / S. Miyasaki, A. Nakayama, M. Oda et al. // Biol. Pharm. Bull. -1994.-Vol. 17, №5.-745-747.
109. Chitosan: a new hemostatic / W.G. Malette, H.I. Ruiley, R.D. Gaines et al. //Ann. Thorac. Surg. 1983. - Vol.36. - P. 55-58.
110. Chitosan-chondroitin sulfate and chitosan-hyaluronate polyelectrolyte complexes: biological properties / A. Denuziere, D. Ferrier, O. Damour, A. Domard // Biomaterials. 1998. - №19. - P. 1275-1285.
111. Combination of scaffold and adenoviras vector expressing bone regeneration at dental implant defects / Y.Zhang, J.Song, B.Shi et al. //Biomaterials. -2007.- Vol. 28, №31. P. 4635-4642.
112. Dedic, A. Diabetes mellitus and periodontal diseases // Med. Arch. -1998. -Vol.52, №4.-P. 189-192.
113. Effect of chitosan on experimental abscess with Staphilococcus aureus in dogs / Y. Okamoto, K. Shibazaki, S. Minami et al. // J. Vet. Med. Sci. -1995. -Vol. 57.-P.765-768.
114. Effect of low-molecular-weight- chitosans on the adhesive streptococci / R. Tarsi, B. Corbin, C. Pruzzo, R.A. Muzzarelli // Oral Microbiol. Immunol.-1998.-Vol. 13, №4.-P. 217-224.
115. Effects of chitin and its derivatives on the proration and cytokine production of fibroblasts in vitro / T. Mori, M. Okumura, M. Matsuura et al. //Biomaterials. 1997. -№13. -P.947-951.
116. Effects of chitin/chitosan and their oligomers/monomers on migrations of fibroblasts and vascular endothelium / Y. Okamoto, M. Watanabe, K. Miyatake et al. //Biomaterials. 2002. - №23. - P. 1975-1979.
117. Evaluation of chitin and chitosan on open would healing in dogs/Y. Okamoto, K. Shibazaki, S. Minami et al.// J. Vet. Med. Sci.- 1995.- Vol. 57.- № 5.-P.851-854.
118. Fabrication of novel porous PGA-chitosan hybrid matrix for tissue engineerin / Y.-C. Wang, M.-C. Lin, D.-M. Wang, H.-J. Hsieh // Biomaterials. 2003. - №24. - P. 1047-1057.
119. Fasching, P. Elevated concentrations of circulating adhesion molecules and their association with microvascular complications in IDDM/P. Fasching, M. Veilt, M. Roach//J. Clin. Endocrinol, and Metabol.- 1996.- Vol.81.-№12.-P.4313-4317/
120. Furchgott, R.F. The obligatory role of endothelial cells in relaxation of arterial smoth muscle by acetylcholine / R.F. Furchgott, J.V. Zawadski // Nature.- 1980.- Vol. 288.- P. 373-376.
121. Global prevalence of diabetes estimates for the year 2000 and projections for 2030 /S.Wild, G. Roglic, A. Green et al.// Diabetes care.- 2004.-Vol. 27. № 5.-P. 1047-1053/
122. Grossi, S.G. Periodontal disease and diabetes mellitus: a two-way relationship / S.G. Grossi, R.J. Genco //Ann. Periodontol. 1998. - Vol. 3, № 1. -P.51-61.
123. Guggenheimer, J. Insulin-dependent diabetes mellitus and oral soft tissue pathologies: II. Prevalence and characteristics of Candida and Candidallesions / J.Guggenheimer , P.A.Moore, K. Rossie // Oral Med. — 2000. -Vol.89, № 5.-P.570-576.
124. Henrich, W.L. Southwestern Internal Medicine Conference : The endothelium a key regulator of vascular tone // Am. J. Med. Sci. - 1991.- Vol. 302.- P. 319-328.
125. Herzo, R.O. Depolymerization oder Dispergierung der Cellulose /R.O. Her-zo, D. Kruger// Naturwissenschaften.- 1925.-№ 13.-S. 1040-1042.
126. Hirano, S. Chitin and chitosan use a novel biomedical material / S. Hirano, J. Noishiki, J. Kinugawa // Adv. Biomed. Polimer. 1987. - Vol. 35. - P. 285297.
127. Hydroxyapatite-chitin materials as protential tissue engineered bone substitutes/ Z. Ge, S. Daguenard, L.Y. Lim et al.// Biomaterials. 2004. - №25. -P. 1049-1058.
128. Hydroxyl carbonateapatite hybrid bone composites using carbohydrate polymer/ R. Murugan, T. S. S. Kumar, F. Yang, S. Ramakrishna// J. Сотр. Mater.- 2005.-Vol. 39.- P. 1159-1167.
129. Immunoadjuvant effect of chitin and chitosan / S. Suzuki, Y. Okawa, Y.Okura et al. // Procedings of the second international conference on chitin and chitosan. Sapporo, 1982.-P.210-212.
130. Immunological activity of chitin and its derivatives / K. Nishimura, S. Ni-shimura, N. Nisei et al. // Vaccine. 1984. - Vol. 2, №4. - P.93-99.
131. Inhibition of streptococcus mutans adsorption of hydroxyapatise by low-molecular-weight chitosans / R. Tarsi, R.A. Muzzarelli, C.A. Guzman, C. Pruzzo // Dent. Res. 1997. - Vol. 76, №2. - P. 665-672.
132. Insulin-dependent diabetes mellitus and oral soft tissue pathologies. I. Prevalence and characteristics of non-candidal lesions / J. Guggenheimer, P.A. Moore, K. Rossie et al. // Oral Med.- 2000. Vol.89, № 5. - P.563-569.
133. Inui, H. Low molecular weight chitosan stimulation of mitogenig response to platelet-derived growth factor in vascular smooth muscle cells / H. Inui // Biosci. Biotechn. Biochem. -1995. -№11. P.2111-2114.
134. Ito, M. In vitro properties of a chitosan-bonded hydroxyapatite bone-fillingpaste /М. Ito//Biomaterials. -1991.-Vol. 12, №1.- P. 41-45.
135. Kawakami, T. Experimental study on osteoconductive properties of a chitosan-bonded hydroxyapatite self-hardening paste / T. Kawakami, M. An-toh, H. Hasegawa//Biomaterials. 1992. -№ 13. - P.759-763.
136. Kimura, Y. Lasers in endodontics: a review / Y. Kimura, P. Wilder-Smith, K. Matsumoto // Int. Endod. J. 2000. - Vol. 33, № 3. - P. 173-258.
137. Kochanska, B. Hemostatic properties of chitosan and its application in stomatology / B. Kochanska, E. Witek, J. Sramkiewicz // Chitin World.-Bremerhaven, 1994. -№4. P.520-529.
138. Localized aggressive periodontitis in a patient with type 1 diabetes mellitus: a case report / G. Emingil, S. Darcan, A. Keskinoglu et al. //J. Periodontol. -2001. Vol.72, № 9. - P. 1265-1270.
139. Madihally, S.V. Porous chitosan scaffolds for tissue engineering / S.V. Madihally, H.W.T. Matthew // Biomaterials. 1999. - №20. - P. 1133-1142.
140. Murugan, R. Bioresorbable composite bone paste using polysaccharide based nanohydroxyapatite / R. Murugan, R. Ramakrishna // Biomaterials. -2004.-№25.-P. 3829-3835.
141. Murugan, R. Coupling of therapeutic molecules onto surface modified hydroxyapatite. / R. Murugan , S. Ramakrishna// Biomaterials.- 2004.- №20.-P. 3073-3080.
142. Muzzarelli, R.A.A. Chitin / R.A.A. Muzzarelli. Oxford: Pergamon Press, 1977.-305 p.
143. Muzzarelli, R.A.A. Natural chelating polimers. Alginic acid, Chitin and chi-tosan / R.A.A. Muzzarelli. Oxford: Pergamon Press, 1973.-226 p.
144. Muzzarelli, R.A.A. Osteoconductive properties of methylpyrrolidone chito-san in an animal model / R.A.A. Muzzarelli, С Zucchini, P. Ilari // Biomate-rials.- 1993.-№ 12.-P.925-929.
145. Muzzarelli, R.A.A. Reconstruction of paradontal tissue with chitosan / R.A.A. Muzzarelli, G. Biagini// Biomaterials. 1989. - Vol. 10, №11. - P. 598-603.
146. Muzzarelli, R.A.A. Role and fate of exogenous chitosans in human wound tissues / R.A.A. Muzzarelli, G. Biagini // Ed. Muzzarelli. Chitin Enzymolo-gy.- Grottammare: Atec, 1993. -Vol. l.-P. 187-196.
147. Nanopowder production based on technology of solid raw substances evaporation by electron beam accelerator / S. P. Bardakhanov, A. I. Korchagin, N. K. Kuksanov et al.// Materials science and Engineering.- 2006. -P. 204-208.
148. New chitosan structures in the form of the thermosensitive gels/ R. Zarzycki, Z. Modrzejewska, P. Owczarz, A. Wojtasz-Pajak // Process on chemistry and application of chitin.- 2008.-Vol. 8.-P. 35-41.
149. Novel chitisan/collagen schaffold containing transforming growth factor-pi DNA for periodontal tissue engineering/ Y. Zang, X. Cheng, J. Wang et al.// Biochem. Biophys. Res. Commun.- 2006.-№344.-P.362-369.
150. Olsen, R. Biomedical applications of chitin and its derivatives / R. Olsen, D. Schwartzmiller, W. Weppner // Chitin and chitosan. Sources, chemistry,physical properties and applications. London; New - York, 1990. -P.813-828.
151. Osteogenesis enhanced by chitosan (poli-N- acetyl glucosaminoglycan) in vitro / P.R. Klokkevold, L. Vandemark, E.A. Kenney, G.W. Bernard // J. Periodontal. 1996. -Vol. 67, №11. -P. 1170-1175.
152. Pinducciu, G. Periodontal disease, oral microbial flora and salivary antibacterial factors in diabetes mellitus type 1 patients / G.Pinducciu, L.Micheletti, V.Piras // Eur. J. Epidemiol. 1996. - Vol.12, №6. - P. 631-636.
153. Platelet derived growth factor releasing chitosan sponge for periodontal bone regeneration / Y.J. Park, Y.M. Lee, S.N. Park et al. // Biomaterials. -2000. -№21. -P. 153-159.
154. Properties and biocompatibility of chitosan films modified by blending with PEG / M. Zhang, X.H. Gong, N.M. Zhao, X.F. Zhang // Biomaterials. 2002. - №23. - P. 2641-2648.
155. Rees, T.D. The diabetic dental patient/T. D. Rees //Dent. Clin. North Am. -1994. Vol. 38, №3. -P.447-463.
156. Sapelli, P.L. The use of chitosan in dentistry / P. L. Sapelli, V. Baldas-sarre, R. A. A. Muzzarelli // Chitin in Nature and Medicine New- York: Plenum Press, 1986. - P.507-512.
157. Senel, S. Application of chitosan in dental drug delivery and therapy / S. Senel, H.S. Kas, S.A. Squirer // Chitosan per os: from dietary supplement to drug carrier / Ed. R.A.A. Muzzarelli.- Grottammare: Atec, 2000. P. 241254.
158. Studies on antibacterial and antifungal activity of chitosan / Z. Staroniewicz, A. Ramisz, A. Wojtasz-Pajak, M.M. Brzeski // Eds. Z.S. Karmcki, M.M. Brzeski, P.G. Bykowski, A. Wojtasz-Pajak. // Chitin World. -Bremerhaven, 1994.-P. 374-377.
159. Study of a chitin-based gel as injectable material in periodontal surgery / P. Gerentes, L. Vachoud, J. Doury, A. Domard // Biomaterials. -2002. -№23. P. 1295-1302.
160. Tenland, T. On laser doppler flowmetry. Methods and microvascular application.- Gafiska: Vimmerby, 1982.- 211 p.103
161. Wet spun chitosan-collagen fibers, their chemical N-modifications, and blood compatibility/S. Hirano, M. Zhang, M. Nakagawa, T. Miyata // Biomaterials.- 2000.- №21.- P. 997-1003.
162. Yamaguchi, I. The chitosan prepared from crab tendon I: the characterization and the mechanical properties/ I. Yamaguchi, I. Soichiro, M. Suzuki// Biomaterials.- 2003.- №24.-P. 2031-2036.