Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.06) на тему:Ветеринарно-санитарная оценка акарицидов контактного и системного действия при варроатозе пчел

ВСЕСОЮЗНАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВШНЫХ НАУК ИМЕНИ В.И. ЛЕНИНА

ВСЕСОЮЗНЫЙ ОРДЕНА ДРУЖЕН НАРОДОВ. НАУЧНО-ИССЛВДОВАТШСКИИ ИНСТИТУТ ВЕТЕРИНАРНОЙ САНИТАРИИ.ГИГИЕНЫ И ЭКОЛОГИИ

На правах рукописи

ШАТРОВА Тамара Сергеевна

УДК 619:614:638.15

ВЕТЕРШАРНО-САНИТАРНАЯ ОЦЕНКА АКАРИ1ЩДОВ КОНТАКТНОГО И СИСТЕМНОГО ДЕЙСТВИЯ ПИ! ВАРРОАТОЗЕ ПЧЕЛ

16.00.06 - ветеринарная санитария, ветеринарно-санитарная экспертиза и гигиена переработки продуктов животноводства

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степзкн кандидата биологических наук

Москва - 1991

Работа выполнена во Всесоюзном ордена Дружба Народов нау^-но-исслэдовательском институте ветеринарной санитарии,'гигиены и экологии

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, -

профессор A.M. С&ирнов

Официальные оппоненты:

1. доктор ветеринарных наук, лауреат Государственной премии СССР, профессор М.А. Симецкий /БНИИВСГЭ/ ;

2. кандидат биологических наук, с.н.с. М.М. Сычев /ВЙЭ5/

Ведущее учреждение: Харьковский зооветеринарный mczsvyr ,

Защита диссертации состоится я 14 " ЛШЛУШ^- 1S91 года в /З30часов на заседании специализированного ученого Совета Д. 020.60.01 при Всесоюзном ордена Дружбы Народов каучно-яссяв^ довательском институте ветеринарной санитара», пшшни к экологии по адресу: 123022, Москва. Звенигородское шоссе,5.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВНИИВСГЭ Автореферат разослан _"___ 1991 г..

Ученый секретарь Специализированного Совета кандидат биологических наук

Л.П. Пименова

л :работы

Аптттм^сть птюблашь. Для успешного развития пчеловодства ааюо 8начош9 имает предупреждение различных заболеваний пчел, том числе верроатоза.

В иастощээ время в ветеринарной практике испытано и пред-жено для борьбы с варроатозом более двухсот препаратов биоло-1Ч8Ского и химического происхождения. Однако при применении та-эго обширного спектра лечебных средств, остается не до конца зученным влияние используемых акариодцов или продуктов их аспада на организм медоносных пчел. Особенно интересно в этом лане проследить за изменениями, происходящими в организме пчел, а уровне биохимических реакций, которые, как известно, насту-егзт на?,шго ршшео, чем проявляются клинические признаки воз-ойствзя того шш иного препарата. Малоизученным остается во-рос о влиянии применяема средств на склок клещей варроа, раз-саенпо которого будет способствовать более целенаправленному оздоЗстешз на отделыша специфически уязвимые места паразитов.

Имеющиеся недостатки у ранее рекомендованных для борьба с арроатоэом карбоневдх кислот, связанные с не всегда стабиль-ям .игарш^дйигл действием /ыы'в , 1986, 198? ; Луганский л др., 387 ; Попов, 1987 ; Суворов, 1989 й др./ и рядом побочнкх зф-иктоз / Мэльник, 1983 ; Смирнов, 1984 ; Ь1Ы& 1986 Заигауп1ак , "3? :з«в1ег . 1987 ; Замазий, 1988 ;КиЪ11 , 1989 и др./, послу-аля причиной для изучения новых разработанных препаратов на снозе муразьяной, щавелевой и молочной кислот*.

Паль 1 задачи исследования. Целью наатоятей яиссерттаии вилось проведение научно-исследовательских работ по изысланкю ффентивных средств борьбы с варроатозом пчел, определение их яияшй на биохшшчзские показатели гемолимфы пчел, установление паяния Некоторых препаратов на самок клещей гар^оз*

В конкретные задачи входило:

1„ Определить акарицидную эффективность апвтола /"СЕбь-Гейти", Швейцария/, апистан /"Сандоз", Швейцария/ * препаратов на основе карбоновых кислот - форшщида, оксавара а лактона.

2. Определить параметры острой токсичности перечисленных препаратов для пчел и клещей варроа.

3. Исследовать влияние препаратов па общефизиологическое состояние и биохимические показатели гемолимфы пчел.

4. Изучить влияние некоторых исследуемых препаратов на самок клещей варроа.

5. Установить оптимальные условия и сроки применения препаратов с учетом биологии пчел в клещей варроа.

6„ Определить экономический эффект от применения рекомендуемых средств в пчеловодстве.

Научная новизна. В результате проведенных исследований получе ны данные, представляющие интерес в научном я практическом отношении. Эксперементально было установлено влияние апистана и препаратов на основе карбоновых кислот яа самок клещей варроа.' Определена акарицидная активность и параметры острой токсичности исследуемых препаратов. Изучено их влияние на общефизиологическое состояние я показатели углеводного и азотистого обмена веществ пчел.

Драктическая ценность. Результаты исследований по материалам диссертации включены в наставления по применению апв стана, апитола, форшцида и оксавара. Разработаны методические указания по количественному определению молочной кислоты в меде.

^.ттродягря рАЛгур». Цятпрадуц пилп.артст.д цп^пта^и.

- ва Всесоюзном семинаре "Новые средства и способы борьбы с заразными болезнями пчел", ВДНХ СССР, 1989 г.

- на Всесоюзном семинаре "Новые методы токсикологических и<> следований*. ВДН1 СССР, 1990 г.

- на Всесоюзном семинаре "Новое в борьбе с болезнями живот-ВДНХ СССР, 1990 г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 4 печат-: работы.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введе-[, обзора литературы, описания материалов и методики работы, соб-1внных исследований, обсуждения результатов исследования, выво-

предложений для практики, списка цитируемой литературы и применил. Список литературы включает 311 источников, в том числе странных авторов - 182. Работа изложена на 171 странице маши-мсного текста, иллюстрирована 30 таблицами,10 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методики. Работа выполнялась на протяжении 8-1990 годов в-лаборатории ветеринарной санитарии в пчеловоде и на опытной пасеке ВНИИВС, а также на пасеках РСФСР и Укра-кой ССР. Ряд исследований выполнен на кафедре энтомологии МГУ ни М.В.Ломоносова. Изучение исследуемых препаратов проводили согласно Методичес-рекомевдациям по изучению препаратов и способов борьбы с вар-тозом пчел и Методическим указаниям по исследованию влияния на л и клещей варроа акарицидных препаратов, утвержденным Отдел9-м ветеринарии ВАСХНИЛ соответственно 27.04.81 г. и 10.05.82 г.. оответствии с требованиями ветеринарного фармакологическою Со-а. утвержденными ГУВ МСХ СССР 18.05.73 г. При определении параметров острой токсичности препаратов пу-топикального нанесения и путем поглощения /touveaux , 1982/ ользовали изучаемые акарициды в форме растворов. Рабочие раэ-ения готовили по действующему веществу. Оценку препаратов про-или в соответствии с критериями Anderson, Atkins ( 1968jc

учетом коэффициента избирательного действия /отношение ДЦ50 пчел к дЦзд клещей/ и терапевтической шроты /отношение ЛД1б пчел к ЛД100 клещей/. Влияние изучаемых препаратов на пчел определяли по ряду показателей: продолжительности жизни насекомых ; изменению био химических показателей гемолимфы, где принимали во внимание изменения в содержании глюкозы, определенной по методу Щомоньи-Нильсо-на. пировиноградной и молочной кислот - поВег©аеуег , общего белка - по методу Лоури и отдельных белковых фракций, свободных аминокислот, а также изменения активности лактатдегидрогеназы /Ви-оЬег . 1962/ в гемолимфе и неспецифических эстераз в теле медоносных пчел.

Остаточные количества молочной кислоты в меде, полученном от пчелосемей, обработанных лактоном, определяли с помощью разработанной нами химико-аналитической методики.

Воздействие отдельных препаратов на самок клещей варроа изучали совместно с старшим научным сотрудником кафедры энтомологии ИГ7. кандидатом биологических наук А. Б. Ланге по разработанной им методике /А.Б.Ланге, 1985/.

Статистическую обработку материала производили общепринятыми методами /Н.А.Плохинский, 1980/. Достоверность различий оцэни-

I

вали используя критерий Стьюдента. Вычисляли коэффициенты корреляции некоторых показателей.

Расчет экономического эффекта от применения рекомендуемых средств производили согласно Методике определения экономической эффективности использования в ветеринарии результатов научно-ис-едедовательоких и опытно-конструкторских работ, новой техники, изобретений и рационализаторских предложений, утвержденной ГАП СССР 9.06.87 г.,путем срсвненая показателей применения рекомендуемых а базовых препаратов. .

Сравнение провожала с учетом обьема внедрения;' количества- • об-

работок, стоимости препаратов, затрат труда и средней эиргоо-п^й плати пчеловодов. обаей себестоимости обработок, предотоврале;:-ноЯ погори продуктивности семой по моду п воску.

результаты исследований

Акарицндная активность препаратов.

Алистан. Действующим веществом препарата апистан является циаяопиротроидний инсектицид фдувалинат, обладающий широким спектром действия, высокой активностью против большинства видов членистоногих. Он оказывает контактное действие, проникая в нервную систем паразитов.

Али с? ал выпускают в виде полишнялхлоридньк полос, содерга-сщх 10% активного вещества флувалпната.

При изучении острой токсичности флувалината методом топикаль-яого нанесения были установлены слэдуюаще показатели: ЛДдд для пчел - 32,2-4,1 шоУособь ; ЛДдд для клещей - 0,25-0,01 мкг/особь : коэффициент избирательного действия - 128,8 ; широта терапевтического действия - 7,9. Продолжительность жязпа обработанных пчел не игмопялась по-сравнению с контрольными, шощаеся различая сказались недостсзэршаш. Получзшшэ результаты позволили отнести ггре-■ парат к сзаботоксичнш дня пчел шеехташд&ч, что послужило осно-ЕЕнпем гля гсгнгапзя апзстана а условиях пасока.'

Испытания препарата проводили в ашусте-соптябрэ 1988 года, порпод наблюдения составил 40 дней. В опэтэ использовали полоски алпетана разбором 250 х 30 х 1 га о отверстием на одном из концов, через которое пропусяадя у - образиий крючок, позволяющий обеспечить дантратыгав расположение полосок в улочках пчелиного Съезда между двумя соторомк&ш.

•Дяк пештанпя препарат* яспользозашз 10 групп по 3 пчелосемьи о. ка-щой, 'Оеяовпш показать:-*? тфжгчшосп акешипдпего «-¿стекя

здяетаза служило Езмензяав индекса зогзчасыосга кяагш8 .варроа на пчалах через 2-3 дня после обработки с последующим наблюдением в сравнении с исходной его величиной - до боработки, а также в сравнении с контрольной /необработанной/ группой пчел. Лечебная эффективность апистана против клещей зарроа составила 99-100Я при отсутствии видимых отрицательных воздействий на пчел.

Апитол - системнодействувдий препарат, содержащий в качестве активно действующего вещества 17,5$ цимиазола. Препарат пригоден для местной аппликации и внутреннего применения с зимним кормом.

При определении острой токсичности препарата путем поглощения ДДзд для пчел составила 218.0*8,4 мкг/особь : ЛДэд для клещей -8,07±0,3 мкг/особь, что позволило отнести препарат к слаботоксичным для пчел инсектицидам. Коэффициент избирательного действия составил 27, широта терапевтического действия - 6,5.

При испытании препарата в пасечных условиях пчелиные семьи подразделяли следующим образом:

- 2 группы - А, Б по 6 семей ; • .

- 2 группы - В. Г по 12 семей;

- 4 группы - АК, БК, ВК, ГК по 3 контрольных семьи:

Семьи'обрабатывали при температуре воздуха 15°С. На протяжении всего периода наблюдений фиксировали дневную и ночную температуру воздуха.

Для групп А и В в расчете на одну семью пчел готовили 50 мл 0,5^-ного водного раствора апитола, который с помощью шприца емкостью 50 мл наносили каплями непосредственно на пчел в улочках. Аналогично поступали и с группами Б и Г, но в этом случае использовали 0,5&-ный раствор апитола, приготовленный на 20£-ном водном -растворе сахара. Контрольные семьи обрабатывали соответственно водой и 20&-НЫМ водным раствором сахара в тех же объемах.

- В группах А и Б обработку повторяли через 30 минут, а в группах В и Г - через 7 дней. Соответствующим образом параллельно об-

' • ■' ■ •. •■■■

рабатывали и контрольные семьи. На протяжении трех недель вели подсчет отпавших клещей варроа и погибших пчел. В последний контрольный день испытания определяли степень заклещеванности пчелиных семей, на основании чего судили об эффективности апитола.

Исследования показали, что эффективность апитола в используемых концентрациях составила 94.1-98,7%. таблица 1 .

Формиция. оксавар. лактон - препараты на основе карбоновых Кислот - муравьиной, щавелевой и молочной, широко применяемых для борьбы с клещами варроа в связи с достаточно высокой акари-цидной активностью и наименьшей опасностью в отношении загрязнения ими продуктов пчеловодства.

При определении острой токсичности перечисленных препаратов методом топикального нанесения были получены следующие результаты: ДДзд для пчел при обработке формицидом, оксаваром и лактоком составила соответственно 19,3±2,0 ; 35.5±1,2 ; 78,1*3,4 мкг/особь. ДЦд0 для.клещой - 0,8*0.03 ; 0,99*0.01 и 1,4-0,4 мкг/особь. Получении в дачные позволяли отнести все три препарата к маяотоксич-нкм и нетоксичным для тел инсекшщдам. Коэффициент язбиратель-ного действия и тврапеигичаская широта составила для формаци-да - 24,1 и 2,5 ; для оксавара - 35.9 и 3.9 ; для лактона - 55,8 и 12,5.

' При проведении пасечных испытаний для каздого препарата было подобрано 10 групп по 3 пчелосемьи в катдой по принципу аналогов. Для каадогс препарата был предусмотрен контроль / по 3 пчелосемьи/, обработанный соответствующей кислотой. Оксавар и лактон применяли в весенний я, летне-осенний период путем опрыскивания соторамок с находящимися ка тх пчаяат яз бзспропелленг-ного. аэрозольного баллтаизка.' Форкявсзд щтшчт а то же сроки, яспояьзуя для этого жидоядошовые пт^н,, зпполкеяшэ хлопчатобумажной штрй шга порист* .картоном,' которад пропитивали лрепа-

ПЯ'РПМ.

Таблица I .

Результаты .пасечных испытаний протиЕОварроатозной эффективности препарата апитол .

Наименование Кол-во Наименование Повторение Экстенсивность поражения Эффективность группы семей растворителя обработки до обработки после обр. обработки, %■

через

А 6 вода . 30 мин 20 + 1,2 1,3 + 0,5 ■ 94,5

В 6 вода ' 7 дней 24 + 1,8 1,4 + 0,8 •94,1

Б 12 2055 сах.сироп 30 мин 18 + 2Д 0,6 + 0,2 96,6

Г 12 2С$ сах.сироп 7 дней 22' + 0,6 0,3 + 0,1 98,7

АК 3 вода 30 мин 18 + 0,5 21 + 2,0 0

Ж 3 вода 7 дней 21 + 1.0 28 + 0,9" о :

БК 3 20% сах.сироп 30 мет 14 + 2,1 20 + ОД . 0

ГК 3 2056 сах.сироп 7 дней 16 + 0,4 21 + 1,8 0

Н«абод^в эффективным /96,&%/ и наименее токсичным для пчел ¡сазалея лактом. Эффективность применения формицида и оксавара эставила соответственно 91.4 и 95,2 %.

Таблица 11

Сравнительная эффективность изучаемых акарицидов в условиях пасеки, н. = ю

п/п

акарицид д0 ^^ после обр. ги0шюс

пчел

Эффектив-* ность 063 работки,%

Апистан 19,1-1,6 0,04^0.001 4.7^1,7 99,85

Контроль 21,2-1,3 28,3-2 Л 5.1-1.0 -

Формицид 16,4-1,5 1,5^0,42 12,4±4,8 91,4

Муравьиная к-та. 15,3^1,4 2,1±0.04 18,4±7.2 86,3

Вода 24,3±1,6 31,2-2,3 6,7^2,4 -

Оксавар 20,1—1,6 0,8^2,8 8,0*2.8 95,2

Щавелевая к-та 13,6^1,2 1,2^0,1 11,4-2,4 91,2

Вода 16,5^2,3 21,2-2,8 5,1-1,0 - .

Лактон 19.5*1,7 0,7±0,05 • 6,1±0,6 96,6

Молочная к-та 19,4^1,8 1.9 ^0,08 10,2-1,2 90,2

Вода 23,6±2.1 28,3^2,4 5,8±0,07 —

Из приведенных таблиц 1 и.1'видно, что наибольшей эффектив-зстью в борьбе с клещами варроа обладает препарат апистан, не

созывающий на жизнедеятельность пчелосемей видимого отрицательно влияния. Эффективность апитола при варроатозе пчел составп-1 94,1-98,7^, при этом наибольшая эффективность отмечались в елу-зях использования в качестве растворителя 20^-ного водного рас-юра сахара при двукратной обработке с интервалом 7 дней. Вмес-) с том в опытных семьях наблюдалась гибель пчел, особенно при шиженных /1-8°С/ температурах, которую на фоне применения дру-IX противоварроатозных средств нельзя признать незначительной. 1 трех препаратов на основе карбоновнх клелот наиболее эффектив-м оказачея лактон.

Ли

Одновременно с изучением эффективности алистана при варроат эе пчел наш била отработана технология применения данного препа рата в пчелосемьях, пораженных клещами варроа, содержащихся в ра личных типах ульев /типовых однокорпусных двенадцатирамочных уль и двадцатичетырехрамочных ульях-лежаках, а также в двукорпусных ульях и пчелопакетах/, таблица 2.

Таблица 2.

Применение апистана в различных типах ульев.

№ Тип Кол-во Сила Кол-во Место раз- Сроки об- Эффективное п/п улья сотора-п/с, полосок мещения в работки обработки, мок ул. апистана улье

1. 12-ти- 12 рамочные 11 1 между 5 и 6 соторамками август-сентябрь 99-100-

2. Лежаки* 24 23 2 между 8 и 9 и 17-18 соторамками август-сентябрь 99-100

3. Двукор- 20 пусные 19 2 между 5 и 6 август-соторамками сентябрь в каждом корпусе 99-100

4. Сотовые 4 пчелопа-кеты 3 У 2 между 2 и 3 соторамками май-июнь 100

* Лежаки - двадцатичетырехрамочные однокорпусные ульи

При использовании препарата в' многокорпусных ульях, имеющш более двух гнездовых корпусов, полоски апистана размещают анало! но их расположению в двукорпусных ульях в каждом корпусе. Испол! апистан в бвссотовых пчелопакетах половину его полоски нодвешивг ют на специальном крючке над клубом пчел.

Эффективность апистана при рекомендуемой технологии примвн< ния составляет во всех случаях 99-100$.

п.

Определение остаточных количеств молочной кислоты в меде.

Дпй обнаружения остаточных количеств молочной кислоты в меде нами была разработана химико-аналитическая методика, представляющая собой модифицированный по отношению к меду метод Гордона и Квасяя. Метод осяоьвя на том, что при окислении молочной кислоты сульфатом церия образуется ацетоальдегид, который улавливается бисульфитом и определяется йодометрически. Чувствительность метода - 2-3 гжг/кг, при соблюдении всех требований анализа выход молочной кислоты составляет 98-99«.

В лабораторных условиях нами было исследовано 48 проб меда, взятых из семей, которые не подвергались ранее обработке лакто-ном. В результате проведенных анализов было определено естественное содержание молочной кислоты в пробах, составившее в среднем 170 - 56 мг/кг меда. После обработки пчелосемей лактоном провели повторное взятие проб меда и их анализ. Полученные результаты показали, что содеряание молочной кислоты в данном продукте резко возрастало и составляло в среднем 1563 - 158 мг/кг „ что почта •в 9 раз' превышало естественное содеряание лактата в меде.

Проведенные в последующем анализы показали» что содержание молочной кислоты в.меде постепенно снижалось и через 9 недель практически достигало исходных величин, рис. 1.

При соблюдении рекомендаций по применению лактона при вар-роатозе пчел / проведение противоварроатозных обработок весной -после очистительного облета пчел и санитарной очистки ульев я летсм - после откачки товарного меда/ такое накопление молочной кислоты в меде исключено.

рис. 1

Совершение молочной киспоты 6 меде.

недели песл$ обработки

Примечание: -1 - зо Эвнь во обровотки. .

>4 - Черва день после обработки.

ы.

Вяиякио исследуемых препаратов на репродуктивную способность пчелиных маток.

Наряду с изучением влияния препаратов на рабочих пчел и их жизнедеятельность необходимо было уделить особое внимание воздействию используемых средств на пчелиных маток, которые за период своей жизнедеятельности подвергаются обработкам препаратами 2-3 сезона. В связи с этим нами было изучено влияние исследуемых препаратов на репродуктивную способность пчеломаток, таблица 3.

Таблица 3.

Репродуктивная способность пчеломаток после обработки пчелосемей препаратами в период с 15 июня по 20 июля

№ Лечебный . Возраст п/п препарат матки

Сала ц/о Количество /в ул./ кормовых запасов, кг мед перга

Среднесуточная яйценоскость маток /яиц,шт./

1. Апистан

2. Апитол

3. Формииид

4. ' Оксавар

5. Лактон

6. Контроль

1 год 1 год. 1 год 1 год 1 год 1 год

8±1 7±2 7-2 743 7^3 7^2

10^2 3^1 10±1 2-1 9±2 2±1 ;Ц±1 3±1 8±2 2-1 10*1 2,5±1

1710 ± 124 1300 201 1540 ± 204 1680. ± 119 1701 - 200 1719 * 202

^Среднесуточную яйценоскость маток определяли путем подсчета числа ячеек печатного расплода с помощью рашш-сетки со стороной квадрата 5 см / в одном квадрате - 100 ячаек сота с расплодом/.

Подсчет производили перез аеждаа 12 дней со дня применения препаратов. -

Как.видно... яз таблипн,' многократное крименешв• апистана и лш-

тона не оказывает отрицательного воздействия на репродуктивную способность маток. Среднесуточная их' яйценоскость в обработанных семьях составила соответственно 1710*124 в 1701-200 яиц /контроль -1719*202/. Наиболее неблагоприятное воздействие на маток оказывал препарат апитол, значительно снижающий их репродуктивную способность /среднесуточная яйценоскость - 1300*201 /.

Влияние препаратов на биохимические показатели гемолимфы пчел.

При проведении биохимических исследований для каждого препарата подбирали 6 групп пчел по 200-250 особей в каждой. При этом 3 группы являлись контрольными и 3 - опытными. При изучении влияния апи стана на пчел в садки с насекомыми опытной группы подвешивали небольше отрезки полоски апи стан ; в случав применения апитола пчелам опытной группы скармливала сахарные сироп, приготовленный по общепринято! методике, с 0.4< содержанием препарата, контрольны! пчелы получали чистый сахарный сироп; определяя воздействие лактона на пчел, опытные группы орошали препаратом, а контрольные - водой из беспропеллентного аэрозольного баллончика. Обработанных пчел помещали в специальные плексиглазовыв садки, обеспечивали кормом и содержали в термостате прз температуре 30-32°С я относительной влажности 75-80Я. Через предусмотренные опытом сроки пчел усыпляли парами этилового эфира уксусной кислоты и отбирали у них гемолимфу с помощью тонкого стеклянного капилляра в области четвертого тер-гита брюшка, которую использовали для анализов.

Результаты, полученные при проведении биохимических исследований гемолимфы пчел контрольной и опытной групп, представлены в таблице 4.Количественное определениедоказателей при обработке пчел тем или иным препаратом свидетельствует о том, что даже при отсутствии видимых нарушений в поведении и жизнедеятельности насекомых уже происходят изменения в их организме на биохимическом уровне.

Таблица 4.

Биохимические показатели гемолимфы контрольных и обработанных препаратами пчел.

Показатель | и единицы \ измерения ) группа Сод ер*а ни е

пчел апистад 1 1 ; апитол } лактон

Глюкоза, т% через 24 ч. К 0 1,77*0,11 1,13*0.03 1,94*0,01 1,86*0,03 , 1,88*0,03 1,38*0,05

Пировиноград-ная кислота, мкмоль/мл через 12 ч. К 0 0.2969*0,03 0.5420*0.04 0.3105*0.03 0.4317*0,03 0,4452*0,02 0,3282*0,01

Пировинограц-ная кислота, мкмоль/мл через 24 ч. к 1 0 0,8272*0.05 0,5341*0,04 0.3188*0.03 0.4620*0.04 0.3277*0,05 0,4873*0,04

Молочная кислота. к 4,6948*0.16 3.400 *0,15 2,2775*0,06

мкмоль/мл через 12 ч. 0 5.1544*0,18 4.800 *0,09 2,9946*0,09

Активность ЛДГ, мкмоль•мл к 0,1929*0.02 0,1291*0,01 0,1794*0,01

час через 12 ч. 0 0,1524*0,02 0,1834*0,05 0.1191*0,02

Общий белок,т% через 12 ч. к 0 5,77*0,3 6,80*0.6 10,6*0,4 6,69*0.1 5.19*0.1 5.92*0,6

Суммарное соцер-тг жание свободных аминокислот,мг% 0 через 12 ч. 194.93 190,85 195,14 259,56 212,27 213,30

Примечаеие: К - контрольные группы пчел : О - опытные группы пчел ;

* - изменения в содержании отдельных аминокислот

представлены в прилагаемых диаграммах.рис.2,3,4.

Анализируя табличные данные, можно предположить, что при обработке пчел апи станом происходят энергетические нарушения в их организме под воздействием цианопиретроидного инсектицида, на что указывают достоверные изменения в содержании глюкозы, ПВК и отдельных аминокислот /пролина, алянина и глутамииа/.

ас. 2. 60 г—

Содержание сбобоОнмм аминокисло» в «•молимф« пчел опмяиоа и конмрольной tрупп.

JEL

ж.

IÜL

BSQraPh'.B ■Graph ñ

ffep Ser Pro Ría Val lie Phe His Thr Glu Gly Cys Met Leu lys ftrg

Graph А - (Свмлроло.

craph в - опм»,/апистан/

гЯ0.3. Содержание свободных аминокислот б

гемолимфе пчел опытной и контрольной групп.

Й$Р . С1и Суё а №1, Ьэи РЬе 1у5 ТЬг Рго &у Ча\ Не Тдг Ягд 4 8ег.

бгарЬ А - Контроле. ОгарЬ В - Опыт./аПЯТОЛ/

Сгарй В ШСгарЬ Й

уИ 1 а

Рис.4. Содержание свободных аминокислота в

гемолимфе пчел опытной и контрольной групп.

<ЗгарЛ А - Контроле.

йгарь в - опыт/лактон/

Иодшшяя, я£я5«жсарояашшв пра применении апитола. поэволя-р говорить о неблагоприятном воздействии препарата на пчел вслед-рвие происходящих нарушений, захватывающих процессы гликолиза, го выражается в его стимуляции. Отмечены изменения в содержании 5щего белка и свободных аминокислот, позволяющие предположить арушение синтеза белка, либо его распад под воздействием препа-ата.

Активность неспецифических астераз определяли в гомогенате олов контрольных и обработанных апистаном пчел. Эксперимент про-одился в трехкратной повторности и предусматривал соответствую-ий контроль /необработанные пчелы/. Исследования по определению ктивности ферментов проводили через 48 часов после начала обработ-и пчел апистаном. В полученных результатах не было зафиксировано гнетения неспецифических эстераз, напротив,наблюдалась тенденция ; повышению их- активности по сравнению с контролем, которая соста-1ила в контроле и опыте соответственно 0,0402 и 0,0536 мккат/кг. 'аким "образом, можно говорить об индуцирующем действии флувалина-

■а в отношении неспецифических эстераз. >

' ' ' ' /

Воздействие апистана. формицада и оксавара

на самок клещей варроа в условиях лаборатории.

Имеющиеся литературные и экспериментальные'данные позволяют заключить, что при противоварроатозных обработках, про-юдимых в весенний и осенний периоды, происходит преимущественно уничтожение старых, ослабленных во всех отношениях самок в популярна клещей варроа. В связи с этим, нами было решено провести лабораторные садковые опыты, в которых было бы определено истинное воздействие изучаемых препаратов на молодых самок клещей варроа. Для >того в опыте нами были использованы самки клещей, находящиеся на гчелах ; самки, извлеченные из расплода и подсаженные на пчел, самой извлеченные из расплода и помещенные в специальные гипсовые

• <7?-

и : г. - ■ ■ ' "Ч-"*5 -г- У к "

шш стеклянные камеры. Всего в опыте било использовано около пятисот дочерних самок клещей варроа.

Наблюдение за поведением самок клещей варроа поело воздействия паров формицида проводили в гипсовых камерах и поливинил-хлоридных трубочках. В начальной стадии отмечалось крайнее возбуждение. повышалась двигательная активность, затем наступало постепенное угнетение и гибель клещей. При детальном изучении были отмечены следующие симптомы: ди«координация движений, беспорядочное перебирание ногами /атаксия/ ; беспорядочные дыхательные движения : перитрема оттопырена, видна зияющая стигма; крайняя ригидность мышц, конечности растопырены ; присоски слегка подтянуты и присушены ; щитки вентральной поверхности поджаты.

Изучая воздействие формицида и апистана на самок клещей варроа, подсаженных на пчел, в специальные шхексиглазовые садки отбирали из улья по 50 пчел для контроля и опыта, на каждую из которых подсаживали по одной самке клеща, извлеченных из вскрытых нами ячеек расплода. Опытные группы обрабатывали пропарагама и устанавливали наблюдение за ниш. Через час учитывали результаты

опытов, представленные в таблице 5. т

Таблица 5.

Воздействие формицида и апи стала па лчев а кладой

< варроа в садках

Препарат | Группа } 1 пчел | Количество в опыта 1 пчел клещей \ Количество погибших «чел . клацей

Форшщид опыт 50 50 9,5*0,4 37,5*4,3

контроль 50 50 — — ■ ■'•

¿листан. опыт 50 50 - 50

контроль 50 50 — -

Таким образом, аз таблицы видно, что при обработке формаца-догз пчзл, несущвх на себе клещей, отмечается не полное освобождо-Ш2о жозяива от паразитов. У отпавших.клещей отмечали саыптоглы.опа!

ныв выше, но в менее выраженной степени. При использовании аписга-на отмечалась 10С$-ная осыпь клещей при отсутствии видимых изменений у, пчел. После удаления полоски апистана из опытных садков на освободившихся от клещей пчел подсадили новых, взятых из расплода самок варроа. Через 20 минут все 50 паразитов лежали на дне садка. Определенная в последующем продолжительность жизни опытных пчел не отличалась от продолжительности жизни контрольных.

При детальном осмотре осыпи клещей отмечали следующую картину. Самки лежали на спине с подогнутыми ногами. Особенно характерным в этомслучае было подгибание передней /первой/ пары ног, в связи с чем клещи не в состоянии перевернуться со спины на вентральную поверхность, что, как известно, самки варроа делают, присасываясь к субстрату амбулакрачи передних ног. Отмечался тремор всех четырех пар ног, особенно лапок, а также ненормальная пульсация присосок. Наблюдался парез конечностей и ротового аппарата при обильном ис -. течении слюнного секрета. Под действием препарата отмечали ряд нарушений в работе механизма, управляющего присосками.

При изучении воздействия оксавара на клещей варроа при непо-срэдственно?л контакте с препаратом, самок клещей, извлеченных из расплода,помещали на фильтровальную бумагу, слегка увлажненную 2%-нт раствором препарата и осуществляли наблюдение за поведением паразитов. Сразу после помещения клещей на фильтровальную бумагу, они сидели неподвижно ала спокойно передвигались, признаки возбуждения отсутствовали.При попытке перевернуть их на спину, самка легко возвращались в исходное положение. Через 30 минут клещи, перевернутые на спину, но могли вернуться в вентральное положение, ноги была подогнуты, присоски подсушены, сморщены, уменьшены в размерах, то есть, наблюдался их химический ожог.

В заключении'были сделаны следующие выводы. Проводимые наш ■противоварроатозные обработки Еесной и осенью почти всегда совпадают с сезонной сменой двух морфотипов клещей варроа - зимнего и

летнего. Поэтому не совсем правильно говорить только об эффективности используемых средств не учитывая естественную смену клещей. Кроме того, используя противоварроатозные средства с низкой эффектив- ^ ностью. мы способствуем ускорению процесса замены старых клещей мо- ; лодыми, иначе говоря - омоложению популяции, то есть, повышению ин-вазионности паразитов, в связи'с чем для борьбы с клещами варроа необходимо использовать препараты, обладающие 100%-яой эффективностью.1

Экономический эффект применения формицида и оксавара в сравне- . нии с прототипом /муравьиная и щавелевая кислоты/ составил на каждые 100 семей 2807,9 и 2273.26 рублей соответственно.

Проведенная нами ветеринарно-санитарная оценка препаратов апитол, апистан.формицид.оксавар и лактон позволила установить следующее:

1. Наиболее эффективным средством в борьбе с варроатозом пчел является препарат апистан /действующее вещество - цианопиретроидный инсектицид флувалинат/. Эффективность .обработки составила 99-100Я при отсутствии видимых отрицательных воздействий на жизнедеятельность пчелосемей. Отработана технология применения апистана в пчелиных семьях, содержащихся в различных типах ульев.

2. Эффективность апитола при варроатозе пчел составила

94.1-98.7^. Однако его использование при пониженных температурах /1-8°С/ вызывало значительную гибель пчел.

3. Из предложенных для борьбы' с варроатозом средств /форми-цид. оксавар и лактон/ на основе карбоновых кислот наиболее эффективным /96,6%/ и менее токсичным для пчел оказался препарат лактон /действующее вещество - молочная кислота/. Эффективность применения формицида и оксавара составила соответственно 91,4 и 95,2%.

4. Изменения на биохимическом уровне,■зафиксированные при исследовании гемолимфы после обработки пчел апитоломлвицетельствуют о неблагоприятном воздействия препарата на насекомых вследствие

фоэсходящях Еарувдшйо захватывающих процессы гликолиза. Отмоченные изменения в содержании общего белка и свободных аминокислот позволили предположить нарушение синтеза белка, либо усиление его распада под воздействием препарата.

5. При определении биохимических показателей в гемолимфе пчел, обработанных апистаном, были зафиксированы изменения, позволяющие сделать заключение о возможных энергетических нарушениях

в организме пчел под воздействием инсектицида.

6. Активность неспецифических эстераз у пчел, обработанных апистаном, повышается, что указывает на индуцирующее воздействие флуваланата в отношении этих ферментов.

7. Контроль за содержанием в меде остаточных количеств молочной кислоты после обработка пчел лактоном можно осуществлять о помощью предложенной нами химико-аналитической методики /чувствительность Метода - 2-3 мг/кг, полнота определения в меде -98-99* /.

'8. Установлено, что многократное применение апи стана и лак-тона не оказывает отрицательного воздействия на пчелиных маток. Среднесуточная яйценоскость маток в обработанных апистаном а лак-тоном семьях составила соответственно 1710*124 и 1701*200 яиц /контроль • 1719*202/. Наиболее неблагоприятное воздействие на пчеломатохоказывая препарат апитоя.значительно снижающий их репродуктивную способность /среднесуточная яйценоскость - 1300*201/.

9. Установлено, что при использовании цротивоварроатозных средств с низкой эффективностью ускоряется процесс замены старых клещей молодыми, что приводи» к омоложению популяции паразитов и повы^е^ и адвааиончости. С целью профилактики данного процесса необходимо использовать для борьбы с клещами 'Варроа препараты, обладающие эффективностью не ниже 90*.

■ К (9 ' - .

Ш. Згонсжчсокг'-Г. н ь ере,,--

асдаи с онелог&мн /муравьиная в щавслаиая кислота/ сосгиаил на каждаа 100 семей 2807,9 и 2273,26 рублей соответственно.

ПРВДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРНТИКИ Результаты проведенных нами исследований использованы при составлении: Методических указаний по количественному ояред&шшг.) молочной кислоты в меде, утвержденных ГУВ ГАП СССР 12.04.89 г. : Наставления по применению препарата формицид при варроатозе пчел /в соавт./, утвержденного ГУВ ГАП СССР 12.04.89 г. ; Наставления , по применению препарата оксавар при варроатозе пчел /в соавт./, утвержденного ГУВ ГАП СССР 12.06.89 г. ¡ Временного наставления по прюдененйю препарата апистан при варроатозе пчел /в соавт./, утвер-аценнох'о 19.06.09 г. ; Временного' наставления по применению препарата апитол при варроатозе пчел /в соавт./, утвержденного 19.06.89 г. ГУВ ГАП СССР.

СПИСОК РАБОТ.:ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Клочко Р.Т.. Шатрова Т.С. К вопросу о кислотности меда.- Пчело-

' ьодство, 1989.- Й 12.- С. 37-38. • ' '

2. Шатрова Т.С. Апитол при варроатозе пчел,- Ветеринария, 1С30.-Я 5.- С.' 44-46. ■ ■•■../.

3. Глочко Р.Т., Лугйнсхай С.Н., Шатрова Т.С. Изучают эффвктивиоегь апнетана,- Пчелоиодстс;:>, 1990.- & 8.- С. 18.*

4. Клочко Р.Т.. ЦЗатрова Т.е., Дугалскай С.Н. Пршшноют яиретрогщоз в пчеловодстве.- Ветерлк?рия, 1990.- & 11.- С. 31-32. '

ВВИИВСГЭ, 19Э1 г., зак.Л /т/г , тар. 100.экз.