Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.01) на тему:Разработка неинъекционных лекарственных форм препарата тимодепрессин

На правах рукописи

ГУДКОВ ТИМОФЕЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ

РАЗРАБОТКА НЕИНЪЕКЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ ПРЕПАРАТА ТИМОДЕПРЕССИН

15 00 01 - Технология лекарств и организация фармацевтического дела

АВ ТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

□□3169345

Москва - 2008

003169345

Работа выполнена в ГОУ ВПО Московская медицинская академия имени И. М Сеченова

Научный руководитель:

доктор фармацевтических наук, профессор

Краснюк Иван Иванович

Официальные оппоненты:

доктор фармацевтических наук, профессор

Истранов Леонид Прокофьевич

кандидат фармацевтических наук

Каширин Дмитрий Михайлович

Ведущая организация: Г У Российский Онкологический Научный Центр имени Н Н Блохина РАМН

Защита состоится «(£» ¿¿AVftO- 2008 г в 14-00 часов на заседании Диссертационного совета Д 208 040 09 при ГОУ ВПО Московская медицинская академия имени И М Сеченова (119019, Москва, Никитский бульвар, 13)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московской медицинской академии имени И М Сеченова (117998, г Москва, Нахимовский пр д 49)

Автореферат разослан «_ ^ » ^.¿¿$.0.' 2008 г

Ученый секретарь

Диссертационного Совета Д.208.040 09, доктор фармацевтических наук,

профессор

Наталья Петровна Садчикова

Актуальность темы.

На сегодняшний день известен целый ряд лекарственных средств, относящихся к препаратам пептидной природы Подавляющее число этих препаратов - это органопрепараты, источниками которых являются железы убойного скота (гонадотропин, инсулин, кортикогропин, тималин и пр)

Однако, в последнее десятилетние на мировой фармацевтический рынок в массовом порядке выходят лекарственные средства, содержащие в качестве активных субстанций продукты биотехнологии и пептидного синтеза Широкое использование большинства подобных препаратов ограничивается не точько их высокой стоимостью, но и отсутствием для многих из них удобных для длительного применения вне стационара лекарственных форм На отечественном фармацевтическом рынке находят отражение общемировые тенденции

Предложенный в работе комплексный подход к решению задачи создания неинъекционных лекарственных форм оригинального иммуносупрессора тимодепрессина - ответ на потребность рынка в удобных лекарственных формах для данного препарата Разработка спрея с тимодепрессином - частное решение задачи создания неинъекционной формы препарата, пригодной для использования как при стационарном, так и при амбулаторном лечении.

Впервые синтезированный в 1995 году, тимодепрессин (гамма-В-глутамил-В-триптофан) обладает выраженным иммуносупрессорным действием при минимальном для препаратов, подавляющих иммунный ответ, наборе противопоказаний и практически полном отсутствии побочных эффектов в терапевтическом интервале доз В настоящее время тимодепрессин выпускается в ампулах по 1 мл 0,1% раствора для внутримышечного введения и во флаконах по 5 мл 0,1% раствора для интраназального введения Показания к применению тимодепрессина включают в себя системные заболевания, имеющие хроническое течение (псориаз и др) Длительное использование инъекционных препаратов связано не только с явлениями дискомфорта, но и

сопряжено с потенциальной опасностью инфицирования пациента в процессе инъекции Для иммуносупрессоров риск инфицирования пациента критичен, т к применение препаратов данной группы само по себе повышает опасность развития инфекционных процессов у пациентов Неинъекционные лекарственные формы тимодепрессина разрабатывались с учетом набора показаний к его применению и наличия схем, подразумевающих значительные колебания доз препарата в процессе лечения. Кроме того, в некоторых случаях, появляется возможность замены инъекций на энтеральные формы на ранних стадиях лечения

Все вышеизложенное определило цель и задачи настоящего исследования Цель исследования.

Целью данного исследования являлась разработка научно-обоснованных составов и технологии получения эффективных и стабильных неинъекционных лекарственных форм тимодепрессина с последующим созданием нормативных документов, регламентирующих их качество

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи.

Задачи исследования.

1 Разработка составов и технологии новых, неинъекционных лекарственных форм препарата тимодепрессина

2 Проведение комплексного изучения и определения физико-химических и структурно-механических свойств разработанных лекарственных форм

3 Проведение биофармацевтических исследований с целью выбора оптимальной композиции

4 Изучение стабильности исследуемых лекарственных форм тимодепрессина, с целью определения условий и сроков хранения

5 Разработка и апробация методик анализа подлинности и количественного содержания тимодепрессина в различных лекарственных формах.

6 Разработка методик анализа подлинности и количественного содержания вспомогательных веществ, используемых при изготовлении исследуемых форм

7 Внедрение полученных результатов в виде отдельных методик анализа, нормативных документов (регламентов, проектов ФСП) на исследуемые лекарственные формы

Научная новизна.

1 Впервые предложены энтеральные неинъекционные лекарственные формы таблетки и суппозитории, содержащие лабильное лекарственное средство пептидной природы тимодепрессин

2 Изучены технологические аспекты получения указанных лекарственных форм, их стабильность при хранении Сформулированы требования к показателям качества

3. Разработан состав спрея, содержащего тимодепрессин

4 Предложена технология его получения, получены данные по биологической активности и стабильности, разработан проект НД

Практическая значимость.

Полученные результаты легли в основу фармакопейной статьи (ФС) на раствор для интраназального применения в форме спрея

Осуществлен комплексный методологический подход, к созданию и изучению современных неинъекционных лекарственных форм, созданы удобные в применении и стабильные лекарственные формы, разработаны и унифицированы методики анализа при контроле их качества

Внедрение в практику.

Разработанная ФСП на тимодепрессин спрей назальный дозированный утверждена ФГУ "Научный Центр Экспертизы средств медицинского применения". Препарат вводится в медицинскую практику

Апробация работы.

Результаты исследований доложены на научно-практической конференции кафедры технологии лекарственных форм фармацевтического факультета ММА им ИМ Сеченова (1 июня 2006 года), на конкурсе совместных научно-исследовательских работ преподавателей и обучаемых в ММА в номинации "Фармация" в рамках российского медицинского форума 2007

Публикации по работе.

По результатам проведенных исследований опубликовано 8 печатных работ

Структура и объем диссертации.

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, четырех глав экспериментальных исследований, общих выводов, списка использованной литературы и приложений Содержит 127 страниц машинописного текста, 26 таблиц, 21 рисунок и 5 фотографических снимков Библиографический указатель включает 130 источников литературы, из которых 23 на иностранных языках Приложение содержит проект ФСП на тимодепрессин спрей назальный дозированный, пояснительную записку и отчет об исследованиях стабильности препарата в процессе хранения

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук Диссертационная работа выполнена в соответствии с комплексной научной темой ГОУ ВПО Московская медицинская академия имени И М Сеченова Росздрава "Разработка современных технологий подготовки специалистов с высшим медицинским и фармацевтическим образованием на основе достижений медико-биологических исследований" (номер Государственной регистрации 01 2 00606352)

Положения, выносимые на защиту.

1 Результаты комплексных исследований по разработке составов и

технологий для спрея назального дозированного, таблеток и суппозиториев препарата тимодепрессин и их научному обоснованию

2 Разработанные показатели качества и методики контроля предложенных лекарственных форм

3 Результаты изучения стабильности при хранении спрея назального дозированного, таблеток и суппозиториев тимодепрессина.

Содержание работы.

Объекты и методы исследования.

Для исследований были использованы серии субстанций тимодепрессина (01022003, 01112003, Ш)604-015А, И0601006, и А008-209) по показателям качества соответствующие ФСП 42-0011-07

Для разработки составов неинъекционных лекарственных форм с тимодепрессином и изучения их свойств были использованы вспомогательные вещества, разрешенные к медицинскому применению и отвечающие требованиям действующих нормативных документов Вспомогательные вещества, использованные при разработке составов спреев нипагин (ФС 421460-89), нипазол (ТУ 18-16-387-75), бензалкония хлорид раствор 50% (ШРМР, РЬ ,Еиг, ВР), натрия ацетат (ВР, РЬ, Еиг), кислота борная (ФС 423683-98), спирт поливиниловый (ГОСТ 10779-79), ЫаКМЦ (ТУ 2231-06650664923-2005). Вспомогательные вещества, использованные при разработке составов таблеток лактоза (и8Р/№, ВР), рЬаппаЮзе® БСЬ 11, 14, 15, 21, 22 (ШРЛЧР, РЬ ,Еиг ,Л>), крахмал (ГОСТ Р 51985-2002), киЬргевз® (ШР/№, РЬ ,Еиг), колликут МАЕ 100Р (ШР/№\ РЬ ,Еиг) Вспомогательные вещества, использованные при разработке составов суппозиториев ПЭО 1500 и 400 (ТУ 2483-166-05757587-2000 с изм 1), масло какао (ГФ X), твердый жир типа (ФС 42-3466-97), ДМСО (ФС 42-2980-98), тайн 80 (РЬ Еиг, ФС 42-2540-88)

Для достижения поставленной цели и решения задач использовали различные физические, физико-химические методы анализа Определение

посторонних примесей и количественного содержания тимодепрессина проводили методом обращенно-фазовой ВЭЖХ В качестве хроматографической использовалась система "System Gold" Beckman Instruments Inc US с УФ детектором "Kratos Spectroflow 783", настроенным на длину волны 220 нм Обработка данных - System Gold 5 (Beckman) Разделение проводилось на колонке с обращенной фазой Supelco LC-18 250x4 б Фиксированный объем петлевого устройства ввода составлял 20 мкл Содержание посторонних примесей в препарате, в процентах, оценивается по методу внутренней нормализации площадей как среднее из полученных хроматограмм испытуемого раствора Методика количественного определения основана на использовании стандартных образцов

Количественное и качественное определение тимодепрессина и консервантов (нипагина, нипазола или бензалкония хлорида) в назальном спрее, проводили методом ВЖХ Методики определения тимодепрессина и бензалкония хлорида в составе спрея включены в проект ФСП

Испытание на микробиологическую чистоту растворов спреев проводилось по ГФ XI, вып 2, с 193 изменение № 3

При определении показателей качества таблеток, таких как растворение, распадаемость и прочность на истирание, были использованы методики ГФ XI Оценку качества суппозиториев по показателям- однородность массы, температуру плавления и время растворения для суппозиториев были использованы соответствующие методики ГФ XI

Оценку стабильности разработанных лекарственных форм проводили согласно временной инструкции по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств на основе метода «ускоренного старения» при повышенной температуре (И-42-2-82)

Статистическую обработку результатов исследования и корреляционного анализа проводили с помощью пакета прикладных программ для персонального компьютера Statistica 6 и программ пакета Microsoft Office ХР - Excel согласно

ФС «Статистическая обработка результатов химического эксперимента и биологических испытаний» (ГФ XI)

Разработка спрея с тимоденрессином.

Актуальность выпуска спрея тимодепрессина продиктована необходимостью применения поддерживающей терапии при лечении хронических аутоиммунных процессов

В результате предварительно проведенных работ было получено несколько композиций, пригодных для использования в качестве спрея Концентрация тимодепрессина в спрее (0,25%) была рассчитана с учетом объема дозы, выходящей из насоса-дозатора при однократном нажатии (100 мкл) и режима дозирования при поддерживающей терапии

Для поддержания необходимой микробиологической чистоты в процессе хранения и дальнейшего использования после первого вскрытия, были предложены следующие консерванты бензалкония хлорид, смесь нипазола и нипагина (составы 1,2,3)

Состав 1. Состав 2

Тимодепрессин 2,5 г Тимодепрессин 2,5 г

Натрия хлорид 9,0 г Бензалкония хлорид 0,1 г

Вода очищенная до 1000 мл Натрия хлорид 9,0 г

Вода очищенная до 1000 мл

Состав 3. Состав 4.

Тимодепрессин 2,5г Тимодепрессин 2,5 г

Нипагин и нипазол 1,0 г Бензалкония хлорид 0,1г

Натрия хлорид 9,0 г Буферного раствора до рН 6,5

Вода очищенная до 1000 мл Натрия хлорид 9,0 г

Вода очищенная до 1000 мл

Состав 5. Состав 6.

Тимодепрессин 2,5 г Тимодепрессин 2,5 г

Нипагин и нипазол 1,0 г Бензалкония хлорид 0,1г

Буферноый раствор до рН 6,5 МаКМЦ 10,0 г

Натрия хлорид 9,0 г Натрия хлорид 9,0 г

Вода очищенная до 1000 мл Буферный раствор до рН 6,5

Вода очищенная до 1000 мл

Состав 7.

Тимодепрессин Бензалкония хлорид Поливиниловый спирта Натрия хлорид Буферный раствор Вода очищенная до

2,5 г 0,1 г 15,0 г 9,0 г

Состав буферного раствора (рН=б.51 Раствора натрия ацетата 2% 3 мл

Раствор борной кислоты 1% 7 мл

до рН 6,5 1000 мл

Поскольку для стабильности тимодепрессина существенное значение имеет показатель рН, то для стабилизации спрея было предложено использовать буферный раствор на основе натрия ацетата и борной кислоты, который готовили отдельно рН контролировали потенциометрически Специфика применения спрея при поддерживающей терапии требует пролонгации действия препарата С этой целью были применены ЫаКМЦ и поливиниловый спирт (составы 4, 5,6,7)

Образцы всех составов были проанализированы по следующим показателям подлинность, посторонние примеси, количественное определение, однородность массы дозы, процент выхода содержимого упаковки, количество доз в упаковке

В результате анализа всех образцов было установлено, что вспомогательные компоненты в составах спреев не дают побочных пиков на хроматограмме и не влияют на время удерживания тимодепрессина, которое составляет 8,0 ±0,5 мин (табл 1)

Результаты анализа образцов спрея по тесту «Однородность массы дозы» и «Процент выхода содержимого упаковки» свидетельствуют о том, что дозирующее устройство флаконов не обеспечивает требуемую однородность массы дозы, для составов, содержащих метилцеллюлозу и поливиниловый спирт Выход содержимого упаковки этих составов составляет менее 80 % Кроме того, использование ВМС в составе спреев при анализе методом ВЭЖХ, приводит к негативным воздействиям на хроматографическую систему и увеличивает износ колонки

Таблица 1

ВЭЖХ анализ спреев с тимодепрессином

№ состава серия Время выхода пика ТО Площадь пика (мкВ хсек) Содержание посторонних примесей % - Метрологические характеристики

мин Тимодепрессин Сумча всех пиков (Р=95%, п=3)

1 11904 8,17 122,9102 123,4527 0,439 X =0,41 8=0,0729 8х=0,0421 ±Ох= Зс ±0,18 е=43,84

12904 7,67 120,8758 121,4458 0,469

13904 8,11 124,2512 124,6636 0,331

2 21904 7,52 120,8035 121,1163 0,258 х =0,24 8=0,0256 8х=0,0148 ±Ох= X ±0,06 е=26,59

22904 7,93 122,6966 122,9549 0,210

23904 8,38 121,6954 121,9994 0,249

3 31904 8,48 121,9310 123,9031 1,592 X =1,64 5=0,0464 8х=0,0268 ±Лх= X ±0,12 е=7,01

32904 8,23 124,4322 126,5579 1,680

33904 7,61 120,7664 122,8066 1,661

4 41904 8,37 120,3670 122,1443 1,455 X =1,49 8=0,0331 8х=0,0191 ±0?-Р±0 08е=5,53

42904 8,43 124,5587 126,4374 1,486

43904 7,95 120,7579 122,6233 1,521

5 51904 7,88 120,4789 122,5415 1,683 X =1,77 8=0,0850 8х=0 0491 ±Ох~х ±0,2] е= 11,90

52904 7,94 123 2922 1256181 1,852

53904 7,80 123 0312 125,2714 1,788

6 61904 7 69 124,2771 127,0766 2,203 7=2,21 5=0,0216 8х=0,0125 ±Ох= X ±0,05 е=2,42

62904 8,10 123,7673 126,6015 2,239

6390-1 7,83 124,5205 127,3211 2,200

7 71904 8,38 123,2920 125,9657 2,123 ~х=2,08 8=0,0494 5х=0,0285 ±0\=Х±0,12е=5,90

72904 8,44 120,8274 123,4075 2,091

73904 7,75 121,2800 123,7875 2,026

Изучение стабильности спрея тимодепрессипа.

Стабильность исследуемых составов была изучена в процессе хранения в течение двух лет при рекомендованных условиях хранения (сухое темное место, при температуре 4±2°С) и методом ускоренного старения при температуре 24±0,5°С в течение 276 суток, что соответствует 3 годам хранения при рекомендованных условиях

Контроль показателей качества проводили через каждые 46 суток, что соответствовало 6 мес хранения при рекомендуемой температуре 4±2°С В процессе хранения образцы тимодепрессина контролировались по показателям

11

предусмотренным проектами нормативных документов подлинность, прозрачность, цветность, рН, однородность массы дозы, процент выхода содержимого упаковки, количество доз в упаковке, количественное содержание тимодепрессина и используемых консервантов, содержание посторонних примесей, а также микробиологическая чистота.

Образцы спрея тимодепрессина приобрели в процессе «естественного» и ускоренного хранения незначительное количество примесей (от 0,3% до 1,2%), показав хорошую стабильность (табл 2) Также было отмечено, незначительное снижение количественного содержания тимодепрессина (в пределах 3,2% от исходного) во всех составах при двух режимах хранения

Изменение содержания посторонних примесей в течение моделируемого срока годности препарата во всех образцах спрея укладывается в допустимые пределы (не более 3%) согласно ВФС 42-0011-0012-00 на интраназальный раствор тимодепрессина Результаты представлены в табл 2

Таблица 2

Результаты изучения стабильности спреев тимодепрессина методом ВЭЖХ при +24 °С

Состав № Содержание тимодепрессина, мг

Омес 6 мес 12 мес 18 мес 24 мес 30 мес 36 мес

1 2,582 2 575 2,564 2,560 2,549 2,528 2,511

2 2,650 2,660 2,645 2,640 2,620 2,618 2,606

2 456 2 445 2 422 2418 2 404 2 397 2,396

4 2,521 2,512 2,509 2,489 2,475 2,462 2,447

5 2,658 2,641 2,622 2,620 2,596 2,590 2,573

6 2,493 2,488 2,480 2,456 2,441 2,421 2,420

7 2,543 2,538 2,516 2,500 2,489 2,474 2,464

Посторонние примеси, %

1 0,413 0,502 0,602 0,702 0,901 1,100 1,206

2 0,239 0,300 0,405 0504 0,601 0,810 1,002

3 1,644 1,802 1,910 2,001 2,206 2,402 2,506

4 1,487 1,606 1,708 1,801 2,010 2,203 2,401

5 1,774 1,904 2,002 2,108 2,308 2,509 2,708

6 2,214 2,310 2,405 2,508 2,701 2,808 3,005

7 2,080 2,205 2,306 2,410 2,506 2,707 2,905

Коэффициент корреляция между содержанием тимодепрессина в образцах спреев при ускоренном хранении и при хранении в рекомендованных условиях составил от 0,9625 (для состава 2) до 0,9015 (для состава 7)

В ходе эксперимента было установлено, что существенного изменения содержания консервантов в препаратах не происходит, что свидетельствует о химической индифирентности их к препарату и хорошей антибактериальной активности

Следует отметить также, незначительное (не более 0,5 единиц) увеличение значения рН в процессе хранения в составах без буферного раствора, что можно объяснить гидролитическими явлениями стекла Несмотря на это, данный вид упаковки обеспечивает стабильность раствора в течение всего срока эксперимента Однако, при использовании флаконов с щелочным стеклом не исключается возможность использования буферных растворов в составах с бензалкония хлоридом

При определении микробиологической чистоты все образцы, содержащие консерванты, сохранили стерильность к концу срока ускоренного хранения В образцах спрея без консервантов наблюдался рост КОЕ бактерий и грибов -более 100

В процессе изучения и разработки технологии изготовления спрея с тимодепрессином (рис 1) было установлено, что при одинаково высокой бактериостатической активности комбинаций нипагина с нипазолом и бензалкония хлорида лучшие технологические свойства последнего определяют его предпочтительное применение в качестве консерванта для спрея тимодепрессина, возможный срок хранения которого может составлять не менее 3-х лет при комнатной температуре (24 °С)

! В Р 1 1 подготовка стерильного }вентиляционного воздуха__

В Р 1 2 Подготовка чистых производственных помещений

В Р 1 3 Подготовка технологической одежды

I В Р 1 4 Подготовка рабочего |персонажа_

Входной контроль } исходных ] компонентов_|

Натрия хлорид

Бензалкония хлорид

Тимодепрессин

В Р 2 Подготовка

стерильных флаконов и

крышек с

насосами-

дозаторами

В Р 1 Санитарная

подготовка

производства

ТП 3 Приготовление раствора натрия хлорида и бензалкония хлорида

пары этилового в атмосферу

т

ф

отработанные =$1 фильтрованные е отвал I элементы

отработанные растворы, вода

Т П 3 1 Растворение натрия хлорида в 1/4 объема воды очищенной

. Т П 3 2 Растворение бензалкония хлорида е 1/4 объема воды очищенной

Т П 3 3 Растворение Тимодепрессина в 1/4 объема воды очищенной

Механические потери 1

=£| На анализ в ОКК |

Т П 4 Приготовление раствора спрея

л

Т П 4 1 Смешивание растворов и доведение объема водой очищенной до требуемого

ЗЕ

Т П 4 2 Стерелиэующзя фильтрация

Отработанные

фильтрованные

элементы

Механические потери

На анализ а ОКК

Т П 5 Розлив во флаконы и укупорка крышками

Сливы от на стадию

фильтрации Т П 4 2

УМО 6 Упаковка и маркировка

] Бракераж

На анализ в ОКК

На склад готовой продукции

Рис 1 Технологическая схема изготовления спрея тимодепрессина с консервантом

бензалкония хлоридом (состав 2) 14

Разработка таблетироваиных лекарственных форм тнмодепрессина.

Необходимость разработки таблетироваиных лекарственных форм обусловлена их широкой распространенностью и рядом преимуществ, существенных для лекарственных веществ пептидной природы, таких как удобство использования и стабильность

В ходе исследования были изучены составы и свойства различных наполнителей, подобраны условия таблетирования Установлено, что наиболее предпочтительным для тимодепрессина является таблетирование методом прямого прессования В качестве наполнителей были использованы два типа веществ крахмал (Windmill) и несколько типов гранулированной лактозы (DMV International и BASF Aktiengesellschaft) В качестве скользящего вспомогательного вещества было предложено использовать кальция стеарат Были получены таблетки следующих составов

Состав 1 (г). Состав 2 (г).

Тиуодспрессин 0,001 Тимодепрессин

Кальция стеарат 0,0025 Кальция стеарат

Крахмал до 0,25 Лактоза до

Составы 3-7 (г). Состав 8 (г).

Тимодепрессин 0,001 Тимодепрессин

Кальция стеарат 0,0025 Кальция стеарат

Фарматоза Л>дипресс до

ОСЬ (11, 14, 15, 21,22) до 0,25

0,001 0,0025 0,25

0,001 0,0025 0,25

Для изучения свойств наполнителей и выбора оптимального состава прессуемых смесей были определены следующие показатели угол естественного откоса, пристеночный угол, насыпная плотность и текучесть

Поскольку наилучшие технологические показатели наблюдались для составов 1,3,4,5 и 8 (табл 3) именно они были выбраны для таблетирования

Полученные таблетки имели цельные края, гладкую и однородную поверхность без сколов и трещин

Таблица 3

Технологические свойства прессуемых смесей

Состав Наполнитель Угол Пристеночный Насыпная Текучесть

№ естественного угол плотность г/мин

откоса г/см3

1 Крахмал 22,35 13,02 0,634 5,728

2 Лактоза 37,12 22,41 0,675 4,132

3 П)СЬ-11 22,65 21,76 0,759 4,873

4 ОСЬ-14 19,28 25,21 0,659 4,853

5 ОСИ 5 23,511 28,25 0,625 7,643

6 ОСЬ-21 41310 53,57 0,849 нет

7 БСЬ-22 28,41 27,79 0,777 10,273

8 Лудипресс 25,24 27,45 0,793 4,647

Все образцы таблеток были проанализированы по показателям средняя масса, отклонения в массе отдельных таблеток, количественное содержание тимодепрессина в таблетке, однородность дозирования, растворение и распадаемость, прочность на истирание Результаты эксперимента представлены в таблице № 4

Таблица 4

Результаты определения показателей качества таблеток с тимодепрессином*

Серт Средняя Отклонения в Количественн Содержание Одиородн Растворение Распадаем Прочность

масса. массе ое содержание посторонних ость (%за45 ость на

г отдельных ТО в таблетке, примесей, % дозирован мин) (мин ) истирание,

таблеток мг ия %

110804 0,232 3 % 0,924 0,834 6% 94 15 97,2

120804 0,231 6% 0,930 1,277 7% У5 15 97,1

130804 0,234 6% 0,934 2,634 6% 94 16 97,1

310804 0,255 2% 1,025 1,975 3 % 98 15 99,4

320804 0,251 4% 1,004 0,711 5% 97 15 98,6

330804 0,247 4% 0,998 2,833 4% 99 14 98 8

410804 0,254 1 % 1,019 2 455 5 % 95 14 98 7

420804 0,242 2% 0,973 0,867 1% 96 13 98,5

430804 0,260 4% 1,049 2,661 6% 96 14 98 0

510804 0,244 2% 0,979 2,286 3% 97 13 97,8

520804 0,241 4% 0,964 2,330 3% 98 14 97,5

530804 0,246 5% 0,998 1,758 5 % 95 13 99,2

810804 0,259 4% 1,030 0462 4% 99 14 98 1

820804 0,250 3 % 1,001 2,198 3% 98 14 98,5

830801 0,243 4% 0,979 2,242 4% 98 13 98,8

♦Примечание Первая цифра серии образца указывает номер исследуемого состава

В результате анализа всех образцов было установлено, что

вспомогательные компоненты во всех составах не дают побочных пиков на

16

хроматограмме и не влияют на время удерживания тимодепрессина, которое составляет 8,0 ± 0,5 мин, таблетки на основе гранулированной лактозы и с наполнителем лудипресс обладают лучшими физико-химическими показателями по сравнению с таблетками на основе крахмала Таким образом, использование фарматозы ОСЫ 1,14, и 15, а также лудипресса в качестве наполнителя для прямого прессования (без увлажнения гранулята) является наиболее предпочтительным по сравнению с использованием крахмала

Изучение стабильности таблеток тимодепрессина.

Образцы таблеток составов 3,4,5 и 8 хранили в термостате при Ьэ=24 ± 0,5 °С в течение 184 сут Расчетный срок годности при этом согласно инструкции составил 2 года при 4 ± 2°С Периодичность контроля показателей качества составила 46 суток, что соответствовало 6 мес. хранения В ходе эксперимента контролировались следующие показатели качества средняя масса, отклонения в массе отдельных таблеток, количественное содержание тимодепрессина и посторонних примесей, однородность дозирования, рас1ворение, распадаемость, прочность на истирание а также микробиологическая чистота Таблетки всех составов хранили в пластиковых флаконах из полиэтилена высокого давления (Сеп^Ьеппег Во1ез1а\У1ес Б А ) Результаты эксперимента представлены на рис 2 и 3

Полученные данные свидетельствуют, что таблетки на основе наполнителей кукурузного крахмала, фарматозы ® ОСЫ 1,14, и 15, а также лудипресса выдержали испытание по ускоренному хранению, показав одинаково хорошую стабильность

Следует отметить также линейный характер накопления примесей и уменьшения содержания тимодепрессина, а также высокую корреляцию между этими процессами (для состава 3 коэффициент корреляции равен -0,9708). Как и в спрее, эти данные свидетельствуют об адекватности метода ускоренного хранения

Учитывая данные изучения показателей качества таблеток и результаты изучения стабильности наполнители Фарматозы ® БСЬП, и 15, а также Лудипресс могут быть рекомендованы для производства таблеток с тимодепрессином, возможный срок годности которых может составлять не менее 2-х лет

Суппозитории с тимодепрессином.

Целесообразность разработки ректальных лекарственных форм тимодепрессина продиктована необходимостью локализации всасывания его в прямой кишке, с целью предотвращения контакта с кишечными пептидазами, которые присутствуют в основном в двенадцатиперстной, тонкой и толстой кишке

Для изучения технологических свойств суппозиториев, а также влияния физико-механических свойств (пластичности и др ) основы на стабильность и время растворения суппозиториев с тимодепрессином, были изготовлены суппозитории на основе полиэтиленоксидов с различными молекулярными массами (состав 1)

При изготовлении суппозиториев этого состава тимодепрессин растворяли в минимальном количестве воды В ходе дальнейшего изучения составов, вода была заменена на ДМСО, в котором легко растворяется тимодепрессин Кроме этого ДМСО в суппозиториях может быть использован в качестве консерванта и фармакологически активного компонента

Суппозитории составов 1,2,3,4,6,7 были изготовлены на производственной площадке биотехнологической компании «Биокад» Розлив, фасовка суппозиториев осуществлялся на машине SARONG, Италия

Состав 1 (г).

Тимодепрессин

0,001 0,948 0,237

ПЭ01500 ПЭО 400

Общая масса суппозитория 1,186

Состав 2 (г). Тимодспрессин ДМСО ТТЭ01500

0,001 0,090 1,559

Общая масса суппозитория

Состав 4 (г).

Тимодспрессин ДМСО ПЭ01500 ПЭО 400

1,650

0,001 0,090 1,247 0.312

Состав 3 (г).

Тимодспрессин ДМСО ПЭО 1500 ПЭО 400

0,001 0,090 1,403 0.156

Общая масса суппозитория

Состав 5 (г).

Тимодспрессин

Масдо какао_

1,650

0,001 1.449

Общая масса суппозитория 1,650

Состав 6 (г).

Тимодепрессин 0,001 Твин 80 0,0015 Тв жир А_1,4475

Общая масса суппозитория

1,450

Общая масса суппозитория

Состав 7 (г).

Тимодепрессин ДМСО Твин 80

Тв жир Л_

1,450

0,001 0,090 0,0015 1.359

Общая масса суппозитория ] ,450

Для изготовления суппозиториев на гидрофобной основе, были использованы масло какао и твердый жир тип А

Поскольку явление полиморфизма масла какао исключает возможность расплавнение основы, суппозитории данного типа были изготовлены методом прессования (состав 5) Введение тимодепрессина (состав 6), предварительно растворенного в минимальном количестве воды, в твердый жир осуществлялась по типу эмульсии Для стабилизации расплава был использован твин 80

Для предотвращения контакта с водой, как и в случае с ПЭО основой было предложено использовать ДМСО, который образует эмульсию с основой Для стабилизации расплава был использован Твин 80 (состав 7) Суппозитории на основе твердого жира составов 6 и 7 изготавливались методом выливания в формы

Полученные суппозитории были проанализированы по показателям время растворении, температура плавления, количественное содержание тимодепрессина и содержание посторонних примесей

В табл 5 приведены результатов анализа полученных суппозиториев по некоторым показателям качества

Таблица 5

Оценка качества суппозиториев с тимодепрессином

№ состава Средняя масса Время растворения мин Температура плавления °С Содержание ТО мг

1 1,189 25 — 1,081

2 1,64 27 — 1,037

3 1,65 25 — 1,023

4 1,63 21 — 0,994

5 1,43 — 34 1,076

6 1,43 — 36 0,992

7 1,44 — 35 1,057

Количественное определение суппозиториев проводили методом ВЭЖХ На рис 4 представлена хроматограмма суппозитория с тимодепрессином из ПЭ01500 ПЭ0400 (4 1) ПЭО различной молекулярной массы в условиях анализа дают побочный пик на 7,5 ± 0,5 мин, площадью менее 2% от площади всех пиков На хроматограмме суппозиториев состава 2 (рис 5) ДМСО выходит со свободным объемом (5 мин)

Наличие компонентов основ в пробах суппозиториев с маслом какао не влияет на время удерживания тимодепрессина, которое составляет 8,0 ± 0,5 мин.

На хроматограмме (рис 6) суппозиториев с тимодепрессином состава 5 видны 2 побочных пика Первый выходит со свободным объемом (~5 мин), второй на 7,0 ± 0,5 мин Разрешение второго пика с пиком тимодепрессина 11=1,2 Таким образом, можно заключить, что компоненты масла какао не мешают количественному определению тимодепрессина в данных суппозиториях, а сумма площадей пиков компонентов основы не превышает 35% от суммы всех детектируемых пиков

На хроматограмме суппозиториев на основе твердого жира присутствует (рис 7) пик на 6,0±0,5 мин, площадью не более 5 % Пик, характеризующий ДМСО выходит со свободным объемом

Рис 2 Хроматограмма таблеток с ТО состава 3, до закладки на хранение

Рис 3 Хроматограмма таблеток с ТО состава 3, эквивалентная хранению 2 года при температуре 4 ± 2°С

Рис 4 Хроматограмма суппозиториев с ТО состава!

Рис 5 Хроматограмма суппозиториев с ТО состава 2

Рис 6 Хроматограмма Рис 7 Хроматограмма

суппозиториев с ТО состава 5 суппозиториев с ТО состава 7

Изучение стабильности суппозиториев тимодепрессина.

Образцы суппозиториев хранили в термостате при 1э=24 ± 0,5°С в течение 184 сут Расчетный срок годности при этом согласно инструкции составил 2 года при +2-+6°С.Периодичность контроля показателей качества составила 46 суток, что соответствовало 6 мес хранения В ходе эксперимента контролировались следующие показатели качества, средняя масса и отклонения от нее, качественный и количественный состав, время растворения и температура плавления, микробиологическая чистота и внешний вид суппозиториев Суппозитории составов 1,2,3,4,6 и 7 хранили в упаковках из

алюминиевой фольги, суппозитории состава 5 в упаковке из парафинированной бумаги (рис. 8, 9).

- §

Рис. 8. Хроматограмма суппозиториев с ТО Рис. 9. Хроматограмма суппозиториев с ТО состава 7 эквивалентная хранению 2 года состава 3 эквивалентная хранению б мес. при температуре 4 ± 2°С при при температуре 4 ± 2°С

Как следует из полученных данных, тимодепрессин в суппозиториях на основе ПЭО почти на 80 % разрушается к 70-м суткам с начала хранения. Подтверждением этого является увеличение пика, выходящего с мертвым объемом. Данное увеличение площади пика вызвано триптофаном или продуктами его деструкции, которые не удерживаются в используемой хроматографической системе. Глютаминовая кислота не дает выраженного пика, т.к. обладает незначительным поглощением по сравнению с триптофаном. Подтверждением вышесказанного является тот факт, что после 70-го дня хранения в образце суппозиториев роста площади пика, выходящего с мертвым объемом не значителен. В то же время, с увеличением длительности хранения на хроматограмме появляются множественные пики с различными (от 8,30 до 20 мин.) временами удерживания.

Суппозитории на гидрофобных основах выдержали испытание по ускоренному хранению. Содержание тимодепрессина и состав побочных продуктов практически не изменились за время эксперимента, что

свидетельствует о стабильности данной лекарственной формы

В ходе эксперимента было установлено, что жировые основы масло какао и твердый жир тип А, наиболее оптимально подходит для изготовления суппозиториев с тимодепрессином, так как обеспечивает сохранность субстанции в течение как минимум 2-х лет Однако, учитывая, что с технологической точки зрения метод прессования является более сложным, суппозитории на твердом жире изготовленные методом выливания в формы предпочтительны для промышленного производства

Общие выводы.

1 Разработаны составы и технология изготовления неинъекционных лекарственных форм тимодепрессина спрей, таблетки и суппозитории

2 Проведен скрининг вспомогательных веществ исследуемых лекарственных форм и научно обоснован выбор вспомогательных веществ наиболее оптимальных с точки зрения технологии производства и стабильности тимодепрессина в различных лекарственных формах

3 Проведено комплексное изучение и определены физико-химические и структурно-механические свойства разработанных лекарственных форм тимодепрессина Определены показатели качества спрея, таблеток и суппозиториев с тимодепрессином

4 Разработаны и апробированы методики анализа подлинности и количественного содержания тимодепрессина в различных лекарственных формах Изучены и подобраны условия хроматографического определения тимодепрессина в прессованных таблетках, спрее, суппозиториях, грануляте.

5 Разработаны и апробированы методики анализа подлинности и количественного содержания вспомогательных веществ, используемых при изготовлении исследуемых лекарственных форм

6 Изучена стабильность спрея, таблеток и суппозиториев с тимодепрессином, на основании чего предложены условия и сроки их хранения

7 Разработан проект фармакопейной статьи на спрей тимодепрессина 0,5% и 0,25% концентрации Составлены таблицы стабильности

По теме диссертации опубликованы следующие работы:

1 Гудков Т А , Краснюк И И, Полтавец Ю И, Дейгин В И Разработка новых лекарственных форм препарата тимодепрессин // Тезисы докладов XI Российского национального конгресса «Человек и лекарство» -Москва - 2004 - С 866

2 Гудков Т А, Краснюк И И , Полтавец Ю И, Дейгин В И Работка методик анализа тимодепрессина в лекарственных формах сложного состава // Тезисы докладов XI Российского национального конгресса «Человек и лекарство» - Москва - 2004 - С 866

3 Гудков Т.А, Краснюк И И, Полтавец Ю И , Дейгин В И Изучение стабильности тимодепрессина в новых интраназальных лекарственных формах // Тезисы докладов XII Российского национального конгресса «Человек и лекарство» - Москва - 2005 - С 748.

4 Гудков Т А, Краснюк И И Разработка состава суппозиториев с тимодепрессином и изучение их стабильности // Тезисы докладов Пятой международной научно-практической конференции «Здоровье и Образование в XXI веке» - Москва - 2004 -С 104

5 Гудков Т.А., Краснюк И И, Полтавец Ю И, Дейгин В И Разработка методик анализа тимодепрессина в новых лекарственных формах сложного состава// Тезисы докладов Пятой международной научно-практической конференции «Здоровье и Образование в XXI веке» -Москва - 2005 - С 144

6 Гудков Т.А, Краснюк И И, Полтавец Ю.И , Дейгин В И Разработка

новой лекарственной формы препарата тимодспрессин «Раствор для интраназального применения в форме спрея»// Разработка и исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции - Пятигорск -2005 - С 203

7 Короткий Н Г , Шарова Н М , Прокушева Т В , Гудков Т А Применение тимодепрессина при органической склеродермии у детей // Клиническая дерматология и венерология - М 2006,4 С 81

8 Гудков Т А, Красшок И И , Дейгин В И ВЭЖХ анализ лекарственных форм препарата тимодепрессин//Фармация -2007 -№2 - С 5-7

Список сокращений.

ТО - тимодепрессин

№КМЦ - натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы

ВМС - высокомолекулярное соединение

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография

ДМСО - диметилсульфоксид

ПЭО - полиэтиленоксид

Гудков Тимофей Александрович

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Подписано в печать 25 04 2008 г Формат 60x90,1/16 Объем 1,75 п л Тираж 100 экз Заказ № 585

Отпечатано в ООО "Фирма Блок" 107140, г Москва, ул Краснопрудная, вл 13 т (8-499)264-30-73 www blokOl centre narod ru Изготовление брошюр, авторефератов, печать и переплет диссертаций