Влияние тимолизата и лиенолизата на иммунный статус животных

Гафарова, Алсу Зуфаровна

Диссертации по ветеринарии → Патология, онкология и морфология животных

Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Влияние тимолизата и лиенолизата на иммунный статус животных

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Гафарова, Алсу Зуфаровна Казань 2003 г.

Ученая степень: кандидата ветеринарных наук

ВАК РФ: 16.00.02

Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Влияние тимолизата и лиенолизата на иммунный статус животных

-33 т

На правах рукописи

Гафарова Алсу Зуфа ровна

ВЛИЯНИЕ ТИМОЛИЗАТА И ЛИЕНОЛИЗАТА НА ИММУННЫЙ СТАТУС ЖИВОТНЫХ

16.00.02. - Патология, онкология и морфология животных 16.00.03. - Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с ми кото «с и коло гией и иммунология.

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных ш"'"

Казань 2003

Работа выполнена на кафедре патологической физиологии Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана и в лаборатории иммунологического контроля и мониторинга болезней свиней

ВНИВИ

Научные руководители:

доктор ветеринарных наук, профессор Д.Ш. Шарипов доктор бнологичесхих наук Г.Х, Ильясова

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук,

профессор Р.И.Ситдиков

доктор ветеринарных наук, профессор Р.Н.Низамов

Ведущая организация - Чувашская государственная

сельскохозяйственная академия

Защита состоится « 2- » до 0,Ь>1гХХалХ 2004 г. в ^ ^ часов на заседании диссертационного совета Д - 220.034.01 при Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана (420074, г.Казань, ул. Сибирский тракт, 35, КГАВМ).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Казанской государственной академии ветеринарной медицины.

Автореферат разослан « 50»^епоіз/ца- аООЗг.

Ученый секретарь диссертационного совета, профессор

ь- М.С.Ежкова

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Модуляция иммунологических реакций представляет важную область исследований в современной медицине и ветеринарии. Развитие этого направления связано не только с изучением фундаментальных механизмов индукции и регуляции иммунного ответа, но и с применением иммунотропных средств при терапии широкого спектра заболеваний. Существует целый ряд биологически активных препаратов, оказывающих стимулирующее влияние на гуморальные и клеточные факторы иммунитета. Это полисахариды, препараты цинка, лимфокины, вакцина BCG, биопрепараты изготовленные из селезенки и тимуса, иммунорегуляторные пептиды из костного мозга и др. {.Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., 1978; Арион В.Я, 1981; Лютинский С.И. с соавт., 1988, 1998; Скрипник Э.П., 1989;.Квачев В.Г., Кассич А.Ю, 1993; Земсков A.M. с соавт., ¡993, !996, 1997; Вавика О.В., Молев А.И., Великанов В.И. и др., 1999; Хаитов P.M., Пинегин Б.В, 2000; Михайлова A.A., 2001; Бондаренко АЛ, 2001; Поваренный А-М. с соавт., 2002; Сизяки на Л .П., Чумаков Е.А., 2003; Цепелев В.П. с соавт., 2003). Однако многие рекомендованные препараты являются дефицитными или дорогостоящими.

В настоящее время благополучие по многим инфекционным болезням контролируется благодаря массовой иммунизации. Причем развитие средств иммунологической защиты идет в двух направлениях: продолжаются и расширяются усилия в области традиционного вакцинного дела и одновременно быстро развивается новый раздел иммунопатологии -фармакологическая регуляция иммунологической реактивности организма с помощью иммуномодуляторов (Петров Р.В., 1984, 1995; Земсков A.M. с соавт., 1996,1997; Хаитов P.M., Пинегин Б.В., 1996; Ильясова Г.Ф., 2000).

Большую практическую значимость имеют выяснение возможности и эффективности одновременного применения вакцин и средств с иммуностимулирующей активностью, с одной стороны, и изыскание доступных и эффективных препаратов для стимуляции иммуногенеза, с другой. Научные исследования в этом направлении единичны (Обросова-Серова Н.П. с соавт., 1984; Сафин М.А. с соавт., 1990; Ершов Ф.И., 1981, 1996; Макаев Х.Н., Равилов А.З., 1998; Петров Р-В,, Хаитов Р.М.ссоавт., 1999).

Судя по немногочисленным данным, опубликованным преимущественно в 30-е годы XX столетия {Руфимский Н.П., 1931; Руфимский Н.П., Никольский В.В., 1934; Абдуллин Х.Х., 1934; Двинянинов Л., 1935; Фазлуллин Н.С., Нем шилова H.A., 1935; Лысов 8.Ф., 1970), гнстолиэаты обладают способностью стимулировать естественную резистентность и иммуногенез у животных. Однако, при этом необходимо отметить, что исследования по изучению иммуностимулирующего действия при вакцинация ими проводились только с лиенолизатом. при введении тр ^»rirrnmarua и в больших дозах. Влияние же тимолизатЬ на иммуншздт^^и вакцинация не изучалось совсем. Между тем, положит'^ьные^^^^т^^р^^^^ваний Д.Ш.Шарипова и

соавторов (1998) и Ю.С.Зиган шиной (1998) по определению профилактического и коррегирующего действия тимолизата, введенного двухкратно в дозе 15 мг пол и пептидов на кг массы тела, при экспериментальных иммунодефицнтах дают основание на возможность применения для стимуляции иммуногенеза при вакцинации.

С учетом вышеизложенного, в качестве стимуляторов иммунной системы нами по методу М.П.Тушнова были приготовлены лизаты из селезенки и тимуса, как доступные и дешевые препараты, простые в изготовлении, проведены исследования по определению оптимальной дозы и кратности введения лиенолизата, сравнительному изучению влияния тимолизата и лиенолизата на состояние неспецифической защиты организма животных при введении их в отдельности и сочетании, выяснению возможности использования их для стимуляции иммуногенеза при вакцинации.

Цель и задачи исследования. Целью наших исследований являлось изучение влияния лизатов из тимуса и селезенки на состояние неспецифической и специфической резистентности организма и разработка способа повышения эффективности противовирусной вакцинации на основе сочетанного применения лизатов из тимуса и селезенки с инактивированной вакциной против болезни Ауески.

На разрешение были поставлены следующие задачи:

1) определить острую и хроническую токсичность изготовленных нами новых серий лизатов;

2) изучить влияние лиенолизата на естественную резистентность при одно- и двухкратном введении;

3) провести сравнительное изучение клеточных и гуморальных факторов защиты животных, характеризующих состояние специфической и неспецифической устойчивости при применении лизатов из тимуса и селезенки в отдельности и их сочетании;

4) изучить влияние лизатов на иммуногенез при вакцинации животных против болезни Ауески;

5) изучить возможность использования лизатов из тимуса и селезенки для получения гипериммунной сыворотки.

Научная новизна. Определена наиболее эффективная доза и кратность введения лиенолизата. Получены данные, свидетельствующие о целесообразности применения тимолизата и лиенолизата для стимуляции факторов естественной и специфической резистентности, роста и развития животных. Дано научное обоснование применения тимолизата и лиенолизата, вводимых в сочетании, для стимуляции формирования поствакцинального иммунитета против болезни Ауески. При изучении иммуностимулирующего действия тимолизата и лиенолизата в сравнении с другими иммунотропными препаратами показано, что они по своей активности незначительно уступают таким известным иммуномодуляторам как адьювант Фрейнда и ксимедон.

Получены данные, свидетельствующие о возможности использования тимо- и лиенолизатов при получении высокоактивных иммуноспецифических

сывороток крови животных доноров, необходимых как компоненты наборов для тест-систем РНГА, РВН и ИФА.

Впервые в опытах на вакцинированных против болезни Ауески вакциной «Гаммавак ВНИВИ» кроликах испытано, с положительными результатами, радиозащитное действие как вакцины, так и тимо- и лиенолизатов, введенных в сочетании с вакциной, при последующем гамма - облучении, более выраженное при введении лизатов.

Практическая ценность работы. Лизаты из тимуса и селезенки являются высокоэффективными иммуностимуляторами с длительным иммунотропным действием. Препараты нетоксичны, просты в применении, не оказывают побочного влияния на организм животных. Приготовление данных препаратов не требует больших технических и денежных затрат.

Рекомендуется использовать их для стимуляции роста и развития молодняка сельскохозяйственных животных, а также как средство повышения эффективности вакцины против болезни Ауески.

На основании проведенных исследований нами была разработана методическая рекомендация по применению тимо- и лиенолизатов при вакцинации животных против болезни Ауески, утвержденная ректором Казанской государственной академии ветеринарной медицины, профессором Г.Ф.Кабировым и директором Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института, академиком АНТ А.З.Равиловым. Основные положения, выносимые на защиту:

- данные оценки острой и хронической токсичности тимо- и лиенолизатов;

- результаты изучения влияния лиенолизата на рост, развитие и гемопоэз животных;

- действие лизатов из тимуса и селезенки на иммунобиологическую реактивность лабораторных и сельскохозяйственных животных;

- результаты изучения влияния лизатов на вакцинный процесс. Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на:

Всероссийской научно - производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии (Казань, 2002); международной научно -производственной конференции по актуальным проблемам Агропромышленного комплекса (Казань, 2003); международной научно -производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарной медицины (Харьков, 2003); заседании Ученого совета Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана (2002, 2003).

Реализация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 4 научные работы и 1 Методическая рекомендация. Материал диссертационной работы вошел а отчет о научно - исследовательской работе кафедры патологической физиологии (КГАВМ) за 2002, 2003 гг. и лаборатории № 10 ВНИВИ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 163 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы,

собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы, содержащего 293 источника {243 отечественных и 50 иностранных) и приложения. Иллюстрационный материал представлен 25 таблицами и 15 рисунками.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Работу выполняли в условиях кафедры патологической физиологии КГАВМ /№ гос. регистрации 01200210432/ й в лаборатории иммунологического контроля и мониторинга болезней свиней ВНИВИ /№ гос. регистрации 01200202602/.

В качестве предполагаемых стимуляторов иммунной системы нами были изготовлены тканевые препараты из тимуса и селезенки 1,5-годовалых клинически здоровых бычков путем ферментного гидролиза по М.П.Тушнову. Процесс гидролиза белка контролировали с помощью рефрактометра ИРФ - 22 и спектрофотометра СФ-46 до получения в течение трех дней постоянного результата. Содержание сухого вещества в лизатах определяли общепринятым методом (Петухова Е.А. с соавт., 1989). Определение содержания полипептидов проводили на спектрофотометре СФ — 46.

Исследования проводились на 20 белых мышах, 429 белых крысах, 48 кроликах, 32 овцах. Подопытных животных отбирали по возрасту, живой массе, полу, соблюдая принципы аналогов. Во всех сериях опытов животных взвешивали перед постановкой эксперимента, проведением гематологических исследований и контрольным убоем. В течение опытов проводили клиническое наблюдение за общим состоянием животных (упитанность, подвижность, пищевая возбудимость, характер шерстного покрова).

Дня изучения гематологических и иммунобиологических показателей у животных брали кровь, которую получали у овец из яремной вены, у кроликов из краевой ушной вены, у крыс из хвостовой вены.

Морфологические показатели (эритроциты, лейкоциты, гемоглобин, лейкоцитарную формулу) определяли общепринятыми методами.

Состояние естественной резистентности у животных изучали, оценивая следующие иммунобиологические показатели: лизоцимную и бактерицидную активность сыворотки крови, фагоцитарную активность нейтрофилов, уровень общего белка и его фракций.

При этом лизоцимную активность определяли нефелометрическим методом по В.Г.Дорофейчуку; бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК) - методом фотонефелометрии по Мюшелю и Треффенсу в модификации О.В.Смирновой и Т.А.Кузьминой (1966); фагоцитарную активность нейтрофилов (ФАН), фагоцитарное число (ФЧ) и фагоцитарную интенсивность (ФИ) по методу Кост и Стен ко (1981), содержание общегр белка (г%) с помощью рефрактометра ИРФ-22 (1981) и его фракций (альбумины, альфа-, бетта-, гамма-глобулины) в сыворотке крови по методу Олла и Маккорда в модификации С.А.Карпюка (1962).

Оценку специфического иммунного статуса проводили стандартными методами, включавшими определение относительного и абсолютного содержания Т- и B-лимфоцитов в периферической крови по методу Julius М. et al. (1973). Количество Т-лимфоцитов определяли общепринятым методом спонтанного розеткообраэования с эритроцитами барана (Е-РОК) по Jondal М. et al. (1972), а количество Т-хелперов и Т-супрессоров в реакции розеткообраэования (Е-РОК) с теофилином по методу Shore А. (1978). По разнице между общим количеством Е-РОК и количеством теофилинустойчивых Е-РОК судили о количестве теофилин чувствительных Е-РОК (Т-супрессоры не образуют розеток в присутствии теофилина).

Количество «активных» форм Т-лимфоцитов определяли методом Кегшап R. et al. (1946) в реакции спонтанного розеткообразовання (Е-РОК) без холодовой инкубации; коэффициент дифференцировки Т-лимфоцитов (Е- РОК / Е1Ч- РОК) определяли методом Keane R. et al. (1982),

Определение влияния лизатов на поствакцинальный иммунитет при вакцинации животных проводили в динамике, подвергая серологическому анализу сыворотки крови с использованием реакции вируснейтрализации (РВН), реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) и иммуноферментного анализа (ИФА).

Реакцию вируснейтрализации ставили по общепринятой методике на культурах клеток КГУК-1 при постоянной дозе вируса болезни Ауескн, равной 100 ТЦДзо в 0,1мл.

Реакцию непрямой гемагглютннации (РНГА) с «Набором препаратов для определения в РНГА специфических антител у свиней, вакцинированных против болезни Ауески (псевдобешенства), ставили согласно «Наставлению по применению,..,» утвержденного директором ВНИВИ академиком А.З.Равиловым 24.11.1998 и представленного для регистрации в ГУВ РФ 27.06.03.

Иммуноферментный анализ ставили по модифицированному прямому методу с использованием антигенного пероксидазного конъюгата в соответствии с «Методическими указаниями по применению набора препаратов для оценки в ИФА эффективности вакцинопрофилактики и фармакологической коррекции иммунитета при болезни Ауески, разработанными во ВНИВИ и КГМА, утвержденная директором А.З.Равиловым 29.06.1998 и представленная для регистрации в ГУВ РФ 27.06.03 (проф, А.П.Цибулькин, к.м.н. Г.Ф.Ильясова и др., 1998).

Для определения патоморфологическнх изменений во внутренних органах подопытных животных их подвергали убою (с помощью эфирного наркоза) с последующим вскрытием. Определяли тимусный и селезеночный индексы. Для проведения ги сто исследований брали кусочки тимуса, селезенки, печени, почек, сердца, надпочечников, лимфатические узлы, которые фиксировали в 10%-ном растворе формалина. Уплотнение материала проводили путем заливки в парафин (Меркулов М.И., 1969). Гистосрезы

толщиной 5-7 мкм окрашивали ге м ото кс ил и н -эозн ном, азур-эозином и галлоцианин — хромовыми квасцами.

Статистическую обработку цифровых данных проводили по разработанным программам в Microsoft Excel. Достоверность устанавливали по методу Стьюдента - Фишера (Плохинский Ш.А., 1970),

Статистически достоверными считали различия между сравниваемыми величинами, при которых коэффициент достоверности был выше 0,05 и 0,01.

¿.РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Определение острой и хронической токсичности ли зато в из тимуса и

селезенки

Лиэаты из тимуса и селезенки, приготовленные нами путем пепсинного гидролиза по М.П.Тушнову представляют собой прозрачные жидкости с желтоватым оттенком, с рН ~ 2,5 - 2,7, в лиофилизированном виде массу темно - коричневого цвета, в виде сухой аморфной массы, легко растворимую в воде.

Спектрофотометрическне исследования в ультрафиолетовом спектре при длине волны Аи Aîso показало наличие в лизате из тимуса 23,25 мг/мл полипептидов, а в лизате из селезенки 15,5 мг/мл.

Оценку острой и хронической токсичности тимо- и лиенолизатов проводили согласно «Правилам доклинической оценки безопасности фармакологических средств» (1991). Для изучения острой токсичности использовали по 10 белых мышей и 10 белых крыс на каждый лизат. В обоих исследованиях животных разделили на две группы по 5 голов белых мышей и белых крыс. Как лиенолизат, так и тимолизат вводили мышам и крысам 1-х групп подкожным способом, однократно, в дозе превышающую терапевтическую (15 мг/кг) в 10 раз. Крысы и мыши вторых групп служили контролем, им подкожно ввели изотонический раствор поваренной солн.

В течение 10 дней за опытными животными вели клиническое наблюдение, после чего произвели убой всех подопытных животных, от них брали кровь для гематологических и кусочки органов для гистологических исследований.

Инъекция массивной дозы тимо- и лиенолизатов не приводила к каким -либо нарушениям со стороны общего состояния животных в течение всего периода исследований. За все время опыта в живой массе, гематологической картине, макро- и микроструктуре органов заметных различий между группами не обнаружили.

Хроническую токсичность каждого лизата изучали на 10 белых крысах, которых разделили на опытную (5 голов) и контрольную (5 голов) группы. Опытным животным вводили лизат подкожно, ежедневно из расчета 15 мг/кг полипептидов в течение 10 дней. Крысам контрольной группы подкожно вводили физиологический раствор. Через 20 дней животных обеих групп подвергали убою. Многократное введение как тимолизата, так и лиенолизата не

вызывало изменений в количестве эритроцитов и лейкоцитов в крови животных. В то же время происходило достоверное увеличение содержания гемоглобина и относительного количества лимфоцитов и моноцитов. Результаты исследований токсичности тимо- и лиенолизатов показали, что они не обладают ни острой и ни хронической токсичностью,

3.2. Изучение влияния лиенолизата на естественную резистентность крыс лрн одно- н двухкратном введении

Опыты по изучению влияния лиенолизата при одио- и двухкратном введении проводили на 30 белых крысах массой 70-80 г., разделенные на 3 группы по 10 голов в каждой. Животным 1-й группы лиенолизат вводили однократно из расчета 15 мг/кг пол и пептидов, а животным П-й группы -двухкратно с интервалом в 5 дней в той же дозе. Крысята Ш-й группы служили контролем, им подкожно вводили изотонический раствор натрия хлорида.

Результаты опытов представлены в таблице ). Как видно из таблицы, наибольший прирост живой массы отмечался в группе животных, которым лиенолизат вводили двухкратно. Высокий уровень прироста живой массы отмечался и при однократном введении лиенолизата. Живая масса в этил группах к концу опыта (35 дней) равнялась 206,6 и [90 г соответственно. Это достоверно превышало контрольный показатель, который составил к этот сроку 140 г.

Таблица 1

Некоторые гематологические и иммунобиологические показатели крови белых

крыс при введении им лиенолизата

До введения препарата Через 35 дней ог начала опыт»

Показатели группы

I II III I М К!

Живая масса (г) 76,6±0,3 3 76,6±0,3 4 73,3 ±0,3 3 190±0,57 206,6±0, 5*** 140±0,57

Эритроциты (х10[3/л) 6,0±0,04 5,9±0,02 6,1 ±0,04 6,4 2 ±0,0 08 6,44±0,0 04* 6,21 ±0,0 1

Лейкоциты (х 109/л) 1S,ft±0,0 6 15,85±0, 03 15,9±0,0 8 16,S±0.0 4 ! 7,1 ±0,0 7* 16,0±0.4

Гемоглобин (г/л) 89±0,4 89±0,47 90,4±0,2 8 95,2±0,1 95,3±0,0 7 92,1 ±0,1

Лимфоциты (%) 73±0,4 73 ±0,4 73,6±0,2 8 82±0,4* 84±0,4* 72±0,4

Тимусный индекс(ед) - - - 19±0,07* 2,17±0,1 у** 1,8±0,06

Селезочный индекс (ед! - - - 4,56±0,0 6* 4,76±0,1 4,32±0,1 S

Примечание: *** - различия достоверны при р<0,05- 0,001.

Результаты гематологических исследований, проведенные через 5 дней после первичного введения лиэата, не показали каких-либо различий между группами, за исключением относительного количества лимфоцитов, которое в 1-й и П-Й опытных группах по сравнению с контролем увеличилось на 8,56 и 6,85 % (р<0,05), за счет уменьшения числа сегментоядерных нейтрофилов. На 35-е сутки опыта установили, что число лейкоцитов, эритроцитов и лимфоцитов в крови животных опытных групп было достоверно выше таковых в контроле. У животных обеих опытных групп введение лненолизата приводила к увеличению количества Т- и 8-лимфоцитов в периферической крови, содержания общего белка, ФАН, ФЧ, ФИ, ТИ и СИ, но лучшие результаты были при двухкратном введении лиенолизата.

3.3. Изучение влияния тнмо- и лненолизатов на клинический статус, гемопоэз, систему иммунитета и морфологию некоторых органов

В опыте использовали 24 белых крыс, массой 140 - 145 г, разделенные на 4 группы по 6 голов в каждой. Животным 1-й группы вводили тимолизат двухкратно с интервалом пять дней, подкожно, из расчета 15 мг/кг массы. Крысам И-й группы вводили подкожно лиенолизат двухкратно с интервалом 5 дней в той же дозе, что и тимолизат. Животным Ш-й группы в начале опыта инъецировали тимолизат, через 5 дней лиенолизат в вышеуказанных дозах. Крысы 1У-Й группы служили контролем.

При гематологическом исследовании крови, проведенном через 5 дней от начала опыта, было отмечено незначительное увеличение количества лейкоцитов и гемоглобина у крыс опытных групп, но эти изменения были недостоверны. Тогда как число лимфоцитов было достоверно выше по сравнению с контролем в 1-й, Н-й и Ш-й группе на 15,4; 14,9 и 14,3% (р<0,05) соответственно. Через 15 и 25 дней от начала опыта число лейкоцитов, гемоглобина и лимфоцитов в крови животных опытных групп по-прежнему было выше по сравнению с таковыми у животных контрольной группы (рис. 2). За весь период опыта существенных различий в содержании эритроцитов у животных всех четырех групп не обнаружили.

При исследовании, проведенном через 25 и 35 дней от начала опыта установили, что количество общего белка и гамма-глобулинов в сыворотке крови опытных грУпп животных достоверно превышало таковое у животных контрольной группы (рис. 3). Спустя 35 дней от начала опыта у животных всех трех опытных групп количество Т- и В-лимфоцитов (рис. 4), БАСК, ФАН, ФЧ и ФИ превысили таковые в контрольной группе (рис. 3), В то же время, у крыс Ш-й группы данные показатели были значительно выше, чем у животных Г-й и П-й опытных групп.

При послеубойном вскрытии крыс всех четырех групп каких-либо изменений в макрокартине органов не обнаружили, У них происходило возрастное увеличение массы тела, тимуса и селезенки (рис. 5).

16 15.63

и,3?

леикоциты

гемоглобин

98.

4 99,6

10] .4

91.8

лимфоциты

Рис. 2. Некоторые гематологические показатели в крови у белых крыс через 25 дней от начала опыта

6,7 6,73

5,58

общий белок

1,4 -і

и-1 0,8 0.6 0.4 -0,2 о

1,18 1,19 ^

0,97

*****

гамма-глобулины

5 щ

49,5

БАСК

3,95 3,9 3,85 3,8 3,75 3,7 3,63 3,6 3,55

3,06

3,89

3,7В

3,67

лизоцимная активность

62,4

:: ^ і -

ФАН

2,45

2,4 ¿35 1,3 2,25 3.1 2,15 1,1 1,05 2

1.43

2,36

2.3

2,17

ФЧ

3,95 3,9 3,85 з.е 3,75 3,7 3,65 3.6 3,55

1Л6

3,89

3,6?

ФИ

Ш Тимолизат+тимолиэат □ Л иенолиэат+лиенолизат О Тимолизатч-лиенолизат Я Контрольная группа

Рис. 3. Некоторые иммунобиологические показатели у белых крыс через 35

дней от начала опыта

ЕВ тамолизат+ тамолизат

□ лиенолизат+

лиенолизат Отимопизат+ лиенолизат Оконтроль

Рис. 4, Содержание Т- и В-лимфоцитов в крови белых крыс через 35 дней от

начала опыта.

Таблица 5

Показатели тимусного и селезеночного индексов растущих белых крыс при ________введении лизатов (М±т) _;_

Показатели Ед. Группы животных

изм. 1 И III IV

Живая масса г 211,6±1,6*+ 223,3±1,66** 270±1,15*** 187,5± 1,44

Тимусный ед 1,99±0,01 ** 1,86±0,01* 2,2±0,02*** 1,63 ±0,05

индекс

Селечсшчны ед 4,5±0,03* 4,62±0,05* 4,68±0,04* 4,23 ±0,05

и индекс

Однако величина увеличение этих показателей, а также тимусного и селезеночного индексов у крыс контрольной группы были достоверно ниже, чем у животных опытных групп. Наибольшие величины тимусного и селезеночного индексов имели место у животных, которым вводили тимолизат в сочетании с лиенолизатом.

При ги сто исследован и и в тимусе крыс всех опытных групп, независимо от вида введенных лизатов и способа их применения, наблюдали однотипные микроструктурные изменения. Дольчатое строение, границы коркового и мочювого слоев органа хорошо выражены. Корковый слой его сильно расширен. В наружном субкапсулярном слое основную массу клеток составляют лимфобласты и равномерно повсеместно разбросанные 1 и ите л иорети ку л они ты. Внутренний корковый слой органа инфильтрирован большим количеством плотно расположенными друг к другу малыми лимфоцитами. При этом необходимо отметить, что плотность расположения клеток в корковом слое тимуса в определенной степени зависела от вида лизатов и способа их применения. В частности, в единице площади коркового слои наибольшее количество клеток выявляли у животных с сочетанным введением лизатов (125±3,5| клеток). Затем по данному показателю в

68 66■ н и 60 и

56-

бб,э ««

57,8

Т-лимфоциты

15,2

В-лимфоциты

убывающем порядке расположились крысы с двухкратным введением тимолизата (121 ±2,18 клетка) и крысы с двухкратным введением лиенолиэата (117±4,35 клеток). У контрольных животных этот показатель составил 105±1,45 клеток. Мозговой слой тимуса как опытных, так и контрольной групп содержит умеренное количество больших и средних лимфоцитов. Обнаруживаемые в нем тельца Гассаля в зависимости от принадлежности животных к конкретной группе имели некоторые отличия по размеру и ги сто морфологи и составляющих их эпителиоретикулоцитов.

Гистологически в селезенке крыс опытных групп наблюдали умеренно выраженную гиперплазию лимфофоликулов и влагалищ пульпарных артерий. Инфильтрация влагалищ пульпарных артерий и красной пульпы повышенным количеством плазматических клеток.

Изменения со стороны микроструктуры надпочечников животных опытных групп характеризовались некоторым расширением пучковой зоны и увеличением в ней количества и размеров очагов, состоящих из эидокриноцитов в состоянии повышенной активности.

При окрашивании галлоцианин-хромовыми квасцами, в гепатоцитах печени животных опытных групп определялось значительно больше РНК, чем у животных контрольной группы.

Двухкратное, с интервалом 5 дней введение тимо- и л ие ноли за то в в отдельности и в их сочетании вызывает достоверное увеличение относительного количества лимфоцитов, количества Т- и В-лимфоцитов, ФАН в крови, повышает бактерицидную и лизоцимную активность сыворотки крови, способствует пролиферации лимфоидной ткани, более выраженное при сочетанном применении испытуемых лизатов,

3.4. Определение и и му но модулирующей активности тимо- и лис кол тагов

при вакццнации

Важным этапом исследований было определение влияния лизатов на эффективность вакцинации при их применении в сочетании с инактивированной вакциной.

В качестве вакцины использовали радио и н активированную вакцину «Гаммавак ВНИВИ» против болезни Ауески «Согласно наставлению по

применению.....» утвержденную ГУВ РТ 12.11.01. Подопытными животными

служили белые крысы, кролики и овцы, которых разделили на 6 групп (3 группы опытные и 3 контрольные, по видам животных). Опытным животным первых трех групп вводили тимолиэат через 5 дней лиенолизат, а животным контрольных групп лизаты не вводили. Спустя 3 дня после введения испытуемых препаратов животных всех шести групп вакцинировали инактивированной вакциной. Исследования проводили на 3, 7, 14, 21, 28 сутки после вакцинации.

Исследования показали, что динамика антител ore нез а при применении тимо- и лненолизатов в режиме сочетания с инактивированной вакциной носит

несколько иной характер по сравнению с таковой при применении указанной вакцины без предварительного введения лщатов. Как видно из рисунка 6, ВН-антитела выявлялись в титре, превышающем в 1,88 раза уже на третий день исследований у животных, которым вводили тимо- и лиенолизаты за 3 дня до иммунизации. Аналогичная закономерность наблюдалась при исследовании серии сывороток крови в РНГА и ИФА. На пике иммунологической реактивности вакцинированных животных, приходящийся на 14 день исследования, уровень антител у животных опытных групп превышал данные контроля в РНГА - на 1,43 раза, в РВН-на 1,29 раза, в ИФА - на 4,63 раза.

При этом необходимо отметить, что у контрольных животных по сравнению с опытными наблюдалось более раннее и интенсивное снижение титра прививочных антител к 21-28 дню после иммунизации, что, по-видимому, связано с быстрым затуханием пролиферации антителообразующих клеток.

-♦-опытные овцы

. -«^-контрольные овцы

з у 14 21 гв

Рис. 6. Титры специфических антител в сыворотке крови овец (РВН)

3.5. Сравнительное изучение роли некоторых иммунотропны* препаратов

при вакцинации

В опытах использовали белых крыс и овец, разделенных на группы по видам изучаемых стимуляторов иммуногенеза и две контрольные группы по видам животных. Результаты исследований приведены на рисунке 7.

Как видно из рисунка 7, специфические антитела к вирусу болезни Ауески были выявлены у овец, которым вводили лизаты в сочетании с ннактивированноЙ вакциной в титрах, превышающих контрольные данные в ИФА - на 2,7 и 4,63 раза. Через 2 недели после иммунизации титры антител у овец, иммунизированных вакцинным препаратом с ИМП, превышал таковые у контрольных животных в РВН при введении тимо- и лиенолизатов в 1,75 раза, полный адьювант Фрейнда (ПАФ) - 1,96 раза, ксимедона - 2,77 раза; в РНГА в 2,19 раза, в 2,71 раза, в 2,9 раза (соответственно); в ИФА в 3,63, в 4,02 раза, в 4.43 раза (соответственно).

Следует отметить, что лизаты из тимуса и селезенки, по иммуностимулирующим свойствам незначительно уступают известным иммуномодуляторам, таким как ПАФ и ксимедон. Кроме того, по сравнению с

этими препаратами просты в изготовлении и требуют наличия довольно дешевого исходного сырья.

РВН РИГА ИФА

1 - вакцина + тимо- и лиенолиздты

2 - вакцина + вакцинное масло

3 - вакцина + ПАФ

4 - вакцина + кснмедон

5 - вакцина беї иммуностимуляторов (ИМП) - контроль

Рис. 7, Титры специфических антител в сыворотке крови овец-доноров, иммунизированных против болезни Ауески

3.6. Эффективность инактивированной вакцины против болезни Ауески при сочетая ном введении её с различными иммуыотропными

препаратами

Ведущим показателем эффективности вакцинации служит существенная защита, экспериментальных животных от заражения их летальной дозой инфекционного агента.

Для этого крыс опытных групп, иммунизированных радиоинактивированной вакциной в сочетании с тимо- и лиенолизатом (I группа), с ксимедоном (II группа), с ПАФ (III группа), с вакцинным маслом (IV группа) и без иммуностимулятора (V группа), а также интактных крыс (VI группа) на 21 день опыта заражали парентерально вирулентным вирусом болезни Ауески штамма «Производственный» в летальной дозе (1х104 ЛДюо).

77,8 61,5 74,1 : « 59,3 100

37 40,7

22,2 "Ш 25,9

1 2 3 « 5 6

О летальность О выживаемость

Опытные группы

1 -1 группа - ИнВ с тимо- и лиенолизатами

2 - Цгруппа - ИнВ с кеимедоном

3 - Ш группа - ИнВ с ПАФ

4 - IV группа - ИнВ с вакцинным маслом

5 - V группа - ИнВ без адъюванта

6 - VI группа - интактные животные

Рис. 3, Показатели выживаемости привитых животных при последующем заражении их летальной дозой вируса болезни Ауески

Как показали наши исследования (рис,8), у животных, вакцинированных без иммуностимуляторов летальность составляла 40,7%, у вакцинированных животных, на фоне применения л тато в 22,2%, ксимедона - 18,5%, ПАФ -25.9%, при 100 % гибели не вакцинированных животных.

Таким образом, установлено выраженное иммуностимулирующее свойство лизатов из тимуса и селезенки при их применении в сочетании с и н активирован ной вакциной.

3.7. Исследование роли лизатов из тимуса и селезенки в получении гнпернммукной сыворотки

В этих исследованиях были использованы 20 голов кроликов и 6 голов овец, разделенные на опытную и контрольную группы по видам животных. Опытным животным вводили вакцину спустя 3 дня после введения лизатов (тішолизат через 5 дней лиенолнзат). Контрольных животных иммунизировали без введения лизатов. Иммунизацию проводили трехкратно с интервалом 7 дней. После перерыва в течение 35 дней опытных животных повторно иммунизировали по той же схеме. Через 21 день проводили бустерное введение вакцины и спустя 7 дней брали кровь. Результаты исследований представлены » таблице 9,

Таблица 9

Накопление антител в сыворотке крови ги пер иммунизированных _ кроликов н овец (М±т)______

Виды животных Через 7 дней после цикла гипериммунизации

РВН РНГА ИФА

кролики (опытные) 129,4±М,2 158,8±9,6 1109.6*21,7

овцы (опытные) 189,9±17,4 206,б±21,4 1430,6±24,8

кролики (контрольные) 69,4±9,1 71,4±8,4 449,7±17,4

овцы (контрольные) 88,9±б,4 98,6±8,1 548,7±2 6,9

Как видно из таблицы, специфические антитела к вирусу болезни Ауески у опытных кроликов и овец выявляются в титрах, превышающих показатели контрольной группы в РИГА в 2,22 и 2,09 раза, в ИФА - 2,46 и 2,6 раза соответственно. Через 7 дней после иммунизации в сочетании с введением тимо- и лиенолизатов титры антител у кроликов в РВН, РНГА и ИФА составили 129,4±11,2; 158,8±9,б и М09,б±2І,8. В этот же срок исследования у овец титры антител достигали в РВН, РНГА и ИФА следующих значений; 189,9±17,4; 206,6±21,4 и 1430,6±24,8 соответственно.

Таким образом, как следует из результатов исследований в ответ на сочетанное введение радиоинактивированиой вакцины «Гаммавак ВНИВИ» и иммуностимулирующего препарата тимо- и лиенолизатов происходит усиленная иммунологическая перестройка организма лабораторных, сельскохозяйственных животных и накопление специфических антител в сыворотке крови в значительном количестве. Эти результаты позволяют использовать тимо- и лиенолизаты в исследованиях по получению высокоактивных иммуноспецифических сывороток крови животных-доноров, столь необходимых как компоненты наборов для тест-систем РНГА, РВН и ИФА, разработанных во ВНИВИ,

3.9. Изучение влияния сочетай ного введения лнофнлнзированных лнзатов нз тимуса и селезенки на развитие вакцинного процесса

В опыте было использовано 18 кроликов, подобранных по принципу аналогов. Животных разделили на три группы по 7 голой в 1-й и во 11-й группе и 4 кролика в Ш-й группе. Животным 1-й группы вводили тнмолизат подкожно в дозе 15 мг/кг полипептидов, через 5 дней лиенолизат в той же дозе. Спустя три дня после введения испытуемых препаратов кроликов этой группы вакцинировали. Животных (1-й группы подвергали вакцинации без предварительной нммуностимуляции. Третью группу составляли интактные кролики. На 28-й день после вакцинации проводили реимунизацию подопытных кроликов 1-й и П-й групп и в этот же срок животных всех трех групп подвергали облучению на установке Гамма - облучатель "Пума" при поглощенной дозе 11 Грей (1100 рад). Интактные кролики были введены в опыт непосредственно перед облучением. Через 5-8 дней после облучения они пали.

Лимфоциты

Гемоглобин

Т-лимфоинты

г%

В-лимфоциты

г%

Обший бело к

гамма-глобулины

70-1 «

Л Л

20 ■ 10-

' Л ЧЬ ^ ^ БАСК

„¡в -а—

^ л ч> т>

ФАН

•1-я группа - Н-я группа

и 21 гв

живая масса

3,7,21 28 - дни после вакцинации

7,14,21,28-дни после ревакцинации и облучения

Рис. 10. Некоторые гематологические и иммунобиологические показатели у кроликов вакцинированных на фоне введения лизатов при их последующем

облучении

Вакцинация подопытных животных, несомненно, сама по себе оказала влияние на изучаемые иммунологические показатели. В частности, у вакцинированных животных первой и второй группы, до облучения, возрастали, хотя и в разной степени, содержание общего белка и гамма-глобулинов в сыворотке крови, БАСК, ФАН, количество Т- и 8-лимфоцитов. Однако, в группе животных, которым вводили испытуемые препараты, данные показатели были выше. Содержание общего белка и гамма-глобулинов в сыворотке крови животных, которым вводили лнзаты при вакцинации, в течение всего периода опыта было выше, чем у животных вакцинированных без иммуностимуляторов. Так, на пике иммунного ответа (21 день) эти показатели в первой группе кроликов были выше, чем во второй на 10,3 (р<0,05) и 47,1% (р<0,001). Наибольшее количество Т- и В-лимфоцитов в периферической крови животных отмечалось на 21 день после иммунизации. При этом количество

этих клеток было значительно больше у животных, получавших лизаты в сочетании с вакциной. Это свидетельствует о возможности потенцирования лизатами из тимуса и селезенки действия вакцин.

В исследованиях, проведенных после реимунизации и облучения, мы обнаружили ухудшение общего состояния животных, понижение массы тела, числа эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина и лимфоцитов, иммунобиологических показателей крови кроликов как опытной, так и контрольной группы. В то же время, восстановление данных показателей быстрее происходило в группе животных, которым вводили лизаты (рис. 10).

А также, ведущим показателем эффективности вакцинации при иммунострессовом воздействии служит повышение выживаемости иммунизированных животных при их последующем облучении. Исследования показали, что выживаемость подопытных кроликов, которых иммунизировали инактивированной вакциной в сочетании с тимо- и лиенолизатом, составляла 85,7%, против 57,(4% при иммунизации без применения иммуностимуляторов.

5. ВЫВОДЫ

5.1 Экспериментально обоснована целесообразность применения тимо- и лиенолизатов дня стимуляции иммуногенеза при вакцинации и получения гипериммунной сыворотки против болезни Ауески, а также для стимуляции роста и развития молодняка с.-х. животных.

5.2. Лиенолизат как при однократном, так и при двухкратном введении с интервалом 5 дней в дозе по 15 мг/кг полипептидов стимулирует рост и развитие растущих белых крыс, вызывает у них по сравнению с контрольными животными достоверное увеличение количества эритроцитов, лейкоцитов, преимущественно за счет увеличения числа лимфоцитов, повышение фагоцитарной активности нейтрофилов, количества Т- и В-лимфоцитов в крови, а также увеличение содержания общего белка и его фракций в сыворотке крови, более выраженно при двухкратном введении препарата.

5.3. Сравнительными клинико-гематологическими, иммунологическими и морфологическими исследованиями установлено, что лиенолизат и тимолизат при двухкратном с интервалом 5 дней введении в отдельности и их сочетании по схеме тимолизат в начале опыта, через 5 дней лиенолизат в дозе по 15 мг/кг пол и пептидов вызывает у крыс однотипные по характеру изменения выразившиеся в стимуляции роста, гемопоэза, увеличении тимусного и селезеночного индексов, содержания Т- и В-лимфоцитов, коэффициента дифференцировки Т-лимфоцитов, бактерицидной и лизоцимной активности, белка и его фракций в сыворотке крови.

5.4. Выявлена зависимость стимулирующего влияния тимолизата и лиенолизата на рост, развитие и иммунную систему животных от вида и схемы их применения: . ,

- при сочетанном введении гистолизатов, обнаруживалась более высокая степень прироста массы тела, увеличения количества Т- и В-лимфоцитов

в крови, БАСК, содержания белка и его фракций в сыворотке крови крыс, чем при введении их в отдельности;

- при двухкратном введении тимол изата определялись более высокие показатели ТИ и содержания Т-лнмфоцитов в крови крыс, чем при двухкратном введении им лиенолизата;

- при двухкратном введении лиенолизата СИ и содержание B-лимфоцитов в крови крыс оказались выше, чем при двухкратном введении им тнмолизата.

5.5 Сочетанное введение животным тимо- и лиенолизатов с радиоин активирован ной вакциной против болезни Ауескн приводило к значительному увеличению титров специфических антител. Титры специфических антител были выше в опытной группе кроликов в РИГА 2,2 раза, в РВН 2,15 раза и ИФА 1,84; белых крыс в 2,47; 2,34 и 2 раза; овец в 2,57; 2,02 и 4 раза соответственно по отношению к контрольным животным.

5.6 При сравнительном изучении влияния на формирование поствакцинального иммунитета тимо- и лиенолизатов, введенных в их сочетании, и других иммунотропных препаратов установлено, что по иммуностимулирующим свойствам они незначительно уступают таким известным препаратам как полный адъювант Фрейнда и ксимедон.

5.8. В предварительных опытах получены данные, свидетельствующие о .возможности использования лиено- и тимолизата при их сочетанием введении для получения высоактивных иммуноспецифических сывороток, столь необходимых как компоненты наборов для тест-систем РИГА, РВН и ИФА разработанных во В КИВИ.

5.9. Предварительное, до вакцинации, введение кроликам гистолизатов приводило к существенному повышению у них резистентности на воздействие гамма-лучами в дозе 11 Грей. Об этом свидетельствуют более высокий процент выживаемости после облучения в группе животных с предварительным до вакцинации и до облучения введением лизатов (85,7%) по сравнению с животными, вакцинированными и облученными без их введения (57,14%).

5.10. Восстановление гематологических, иммунобиологических показателей и улучшение общего состояния кроликов, оставшихся в живых после облучения, быстрее происходили в той группе животных, которым вводили лизаты.

5, ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Результаты исследований используются в научно - исследовательской и учебной работе Казанской государственной академии ветеринарной медицины им, Н.Э.Баумана.

2. Рекомендуется использование лизатов из тимуса и селезенки, как недорогих, простых в применении и приготовлении, нетоксичных и высокоэффективных биопрепаратов для повышения роста и развития животных.

3. На основании проведенных исследований нами разработана «Методическая рекомендация по применению тимо- и лиенолизатов при вакцинации животных против болезни Ауески», утвержденная ректором Казанской государственной академии ветеринарной медицины, профессором Г.Ф.Кабировым и директором Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института, академиком АНТ А.З.Равиловым.

4. Рекомендуется использовать тимо- и лненолизаты при их сочетанном введении животным-донорам при специфических вакцинациях для получения высокоактивных иммуноспецифических сывороток, необходимых для реализации программы наработки диагностических средств для тест — систем РИГА и ИФА, разработанных во ВНИВИ.

5. Данные исследования дают направление для более углубленного изучения профилактического и лечебного действия лизатов при радиационном поражении.

СПИСОК РАБОТ ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. А.З.Гафарова, М.А.Тимохин Некоторые клинико-гематологическне показатели у растущих крыс при введении лиенолизата // Материалы Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии .-Казань ,2002,-С. 13-15.

2. М.А.Тимохин, А.З.Гафарова Влияние лиенолизата на некоторые показатели естественной резистентности белых крыс // Материалы Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии н зоотехнии.-Казань, 2002.-С. 244-245.

3. А.З.Гафарова Влияние тимо- и лиенолизатов на клинико-гематологические и иммунобиологические показатели крыс // Ученые записки КГАВМ. - Казань, 2003.- Т.175,-С. 45-52.

4. А.З.Гафарова, Д.Ш.Шарипов, Г.Х.Ильясова, Е.А.Кузнецова, Ш.М.Насыров Перспектива создания напряженного иммунитета с использованием тимо- и лиенолизатов при вакцинации // Материалы международной научно — производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарной медицины.-Харьков, 2003,- С.148.

Подписано к печати : 2J. iZ.O?t, Формат 60x84/16

Заказ .<№ Тираж ^"укз. Усл.-печ. л. 1 О.

Бумага офсетная Печать RISO

Центр информационных технолог ий КГАВМ 420074, Казань, Сибирский трлгг. 35.

Оглавление диссертации Гафарова, Алсу Зуфаровна :: 2003 :: Казань

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Понятие иммунитета и основные принципы морфо-функциональной организации иммунной системы.

2.1.1. Неспецифические компоненты иммунной системы и механизмы их действия.

2.1.2. Специфические компоненты иммунной системы и механизмы их действия.

2.2. Роль иммуномодуляторов в стимуляции иммунной системы.

2.3. Эффективность одновременного применения вакцин и иммуномодуляторов.

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Материалы и методы исследований.

3.2. Результаты собственных исследований.

3.2.1. Определение острой и хронической токсичности тимолизата и лиенолизата.

3.2.2. Изучение влияния лиенолизата на естественную резистентность крыс при одно- и двухкратном введении.

3.2.3. Изучение влияния тимолизата и лиенолизата на клинический статус, гемопоэз, систему иммунитета и морфологию некоторых органов.

3.2.3.1. Результаты клинико — гематологических и иммунобиологических исследований.

3.2.3.2. Результаты исследования макро- и микроморфологии органов.

3.2.4. Изучение клинического статуса и гематологических показателей при введении лиофилизированных тимо- и лиенолизатов.

3.2.5. Определение иммуномодулирующей активности тимолизата и лиенолизата при вакцинации с применением инактивиро-ванной вакцины.

3.2.6. Сравнительное изучение роли некоторых иммунотропных препаратов при вакцинации против болезни Ауески.

3.2.7. Эффективность инактивированной вакцины против болезни Ауески при сочетанном введении её с иммунотропными препаратами

3.2.8. Исследование роли лизатов из тимуса и селезенки в получении гипериммунной сыворотки.

3.2.9. Изучение влияния тимо- и лиенолизатов на вакцинный процесс при последующем облучении животных

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

5. ВЫВОДЫ.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение диссертации по теме "Патология, онкология и морфология животных", Гафарова, Алсу Зуфаровна, автореферат

Актуальность темы. Модуляция иммунологических реакций представляет важную область исследований в современной медицине и ветеринарии. Развитие этого направления связано не только с изучением фундаментальных механизмов индукции и регуляции иммунного ответа, но и с применением иммунотропных средств при терапии широкого спектра заболеваний. Существует целый ряд биологически активных препаратов, оказывающих стимулирующее влияние на гуморальные и клеточные факторы иммунитета. Это полисахариды, препараты цинка, лимфокины, вакцина BCG, биопрепараты изготовленные из селезенки и тимуса, иммунорегуляторяые пептиды из костного мозга и др. (Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., 1978; Арион В.Я., 1981; Лютинский С.И. с соавт., 1988, 1998; Скрипник Э.П., 1989; Квачев В.Г., Кассич А.Ю., 1991; Земсков A.M. с соавт., 1993, 1996, 1997; Вавина О.В., Молев А.И., Великанов В.И. и др., 1999; Хаитов P.M., Пинегин Б.В., 2000; Михайлова А.А., 2001; Бондаренко A.J1., 2001; Поваренный A.M. с соавт., 2002; Сизякина Л.П., Чумаков Е.А., 2003; Цепелев В.П. с соавт., 2003). Однако многие рекомендованные препараты являются дефицитными или дорогостоящими.

В настоящее время благополучие по многим инфекционным болезням контролируется благодаря массовой иммунизации. Причем развитие средств иммунологической защиты идет в двух направлениях: продолжаются и расширяются усилия в области традиционного вакцинного дела и одновременно быстро развивается новый раздел иммунопатологии -фармакологическая регуляция иммунологической реактивности организма с помощью иммуномодуляторов (Петров Р.В., 1984, 1995; Земсков A.M. с соавт., 1996, 1997; Хаитов P.M., Пинегин Б.В., 1996; Ильясова Г.Ф., 2000).

Большую практическую значимость имеют выяснение возможности и эффективности одновременного применения вакцин и средств с

• иммуностимулирующей активностью, с одной стороны, и изыскание доступных и эффективных препаратов для стимуляции иммуногенеза, с другой. Научные исследования в этом направлении единичны (Обросова-Серова Н.П. с соавт., 1984; Сафин М.А. с соавт., 1990; Ершов Ф.И., 1981, 1996; Макаев Х.Н., Равилов А.З., 1998; Петров Р.В., Хаитов P.M. с соавт., 1999).

Судя по немногочисленным данным, опубликованным преимущественно в 30-е годы XX столетия (Руфимский Н.П., 1931; Руфимский Н.П., Никольский В.В., 1934; Абдуллин Х.Х., 1934; Двинянинов J1., 1935; Фазлуллин Н.С., Ф Немшилова Н.А., 1935; Лысов В.Ф., 1970), гистолизаты обладают способностью стимулировать естественную резистентность и иммуногенез у животных. Однако, при этом необходимо отметить, что исследования по изучению иммуностимулирующего действия при вакцинации ими проводились только с лиенолизатом, при введении его многократно и в больших дозах. Влияние же тимолизата на иммуногенез при вакцинации не изучалось совсем. Между тем, положительные результаты исследований Д.Ш.Шарипова (1998) и Ю.С.Зиганшиной (1998), по определению профилактического и коррегирующего действия тимолизата, введенного двухкратно в дозе 15 мг полипептидов на кг массы тела, при экспериментальных иммунодефицитах дают основание на возможность применения его для стимуляции иммуногенеза при вакцинации.

С учетом вышеизложенного, в качестве стимуляторов иммунной системы, нами по методу М.П.Тушнова были приготовлены лизаты из селезенки и тимуса, как доступные и дешевые препараты, простые в изготовлении, проведены исследования по определению оптимальной дозы и кратности введения лиенолизата, сравнительному изучению влияния тимолизата и лиенолизата на состояние неспецифической защиты организма животных при введении их в отдельности и сочетании, выяснению возможности использования их для стимуляции иммуногенеза при вакцинации. т

На разрешение были поставлены следующие задачи:

1) определить острую и хроническую токсичность изготовленных нами новых серий лизатов;

2) изучить влияние лиенолизата на естественную резистентность при одно- и двухкратном введении;

4) изучить влияние лизатов на иммуногенез при вакцинации животных против болезни Ауески;

5) изучить возможность использования лизатов из тимуса и селезенки для получения гипериммунной сыворотки.

Получены данные, свидетельствующие о возможности использования тимо- и лиенолизатов при получении высокоактивных иммуноспецифических сывороток крови животных доноров, необходимых как компоненты наборов для тест-систем РИГА, РВН и ИФА.

Впервые в опытах на вакцинированных против болезни Ауески вакциной «Гаммавак ВНИВИ» кроликах испытано с положительными результатами, радиозащитное действие как вакцины, так и тимо- и лиенолизатов, введенных в сочетании с вакциной, при последующем гамма - облучении, более выраженное при введении лизатов.

Практическая ценность работы. Лизаты из тимуса и селезенки являются высокоэффективными иммуностимуляторами с длительным иммунотропным действием. Препараты не токсичны, просты в применении, не оказывают побочного влияния на организм животных. Приготовление данных препаратов не требует больших технических и денежных затрат.

- данные оценки острой и хронической токсичности тимо- и лиенолизатов;

- результаты изучения влияния лиенолизата на рост, развитие и гемопоэз животных;

- результаты изучения влияния лизатов на вакцинный процесс.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на:

Всероссийской научно - производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии (Казань, 2002); международной научно

- производственной конференции по актуальным проблемам Агропромышленного комплекса (Казань, 2003); международной научно -производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарной медицины (Харьков, 2003); заседании Ученого совета Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана (2002, 2003).

Реализация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 4 научные работы и 1 Методическая рекомендация. Материалы диссертационной работы вошли в отчеты о научно - исследовательской работе кафедры патологической физиологии (КГАВМ) за 2002, 2003 гг. и лаборатории №10 ВНИВИ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 164 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы, содержащего 298 источника (244 отечественных и 54 иностранных) и приложения. Иллюстрационный материал представлен 25 таблицами и 15 рисунками.

Заключение диссертационного исследования на тему "Влияние тимолизата и лиенолизата на иммунный статус животных"

5. ВЫВОДЫ

5.1. Экспериментально обоснована целесообразность применения тимо- и лиенолизатов для стимуляции иммуногенеза при вакцинации и получения гипериммунной сыворотки против болезни Ауески, а также для стимуляции роста и развития молодняка с.-х. животных.

5.3. Сравнительными клинико-гематологическими, иммунологическими и морфологическими исследованиями установлено, что лиенолизат и тимолизат при двухкратном с интервалом 5 дней введении в отдельности и их сочетании по схеме тимолизат в начале опыта, через 5 дней лиенолизат в дозе по 15 мг/кг полипептидов вызывает у крыс однотипные по характеру изменения выразившиеся в стимуляции роста, гемопоэза, увеличении тимусного и селезеночного индексов, содержания Т- и В-лимфоцитов, Т-хелперов, коэффициента дифференцировки Т-лимфоцитов, бактерицидной и лизоцимной активности, белка и его фракций в сыворотке крови.

5.4. Выявлена зависимость стимулирующего влияния тимолизата и лиенолизата на рост, развитие и иммунную систему животных от вида и схемы их применения:

- при сочетанием введении гистолизатов, обнаруживалась более высокая степень прироста массы тела, увеличения количества Т- и В-лимфоцитов в крови, БАСК, содержания белка и его фракций в сыворотке крови крыс, чем при введении их в отдельности;

- при двухкратном введении тимолизата определялись более высокие показатели ТИ и содержания Т-лимфоцитов в крови крыс, чем при двухкратном введении им лиенолизата;

- при двухкратном введении лиенолизата СИ и содержание В-лимфоцитов в крови крыс оказались выше, чем при двухкратном введении им тимолизата.

5.5. Сочетанное введение животным тимо- и лиенолизатов с радиоинактивированной вакциной против болезни Ауески приводило к значительному увеличению титров специфических антител. Титры специфических антител были выше в опытной группе кроликов в РНГА 2,2 раза, в РВН 2,15 раза и ИФА 1,84; белых крыс в 2,47; 2,34 и 2 раза; овец в 2,57; 2,02 и 4 раза соответственно по отношению к контрольным животным.

5.6. При сравнительном изучении влияния на формирование поствакцинального иммунитета тимо- и лиенолизатов, введенных в их сочетании, и других иммунотропных препаратов установлено, что по иммуностимулирующим свойствам они не уступают таким известным препаратам как полный адъювант Фрейнда и ксимедон.

5.7 Предварительное, до вакцинации, введение тимо- и лиенолизатов, ксимедона, ПАФ приводило к существенному повышению выживаемости животных при контрольном заражении их летальной дозой вирулентного штамма вируса болезни Ауески. В группе животных, вакцинированных после предварительного введения гистолизатов процент выживаемости составил 77,8; ксимедона - 81,5; ПАФ - 74,1, против 59,3 в группе животных, вакцинированных без введения указанных иммуностимуляторов. 5.8. В предварительных опытах получены данные, свидетельствующие о возможности использования лиено- и тимолизата при их сочетанием введении для получения высоактивных иммуноспецифических сывороток, столь необходимых как компоненты наборов для тест-систем РНГА, РВН и ИФА разработанных во ВНИВИ.

5.9. Предварительное, до вакцинации, введение кроликам гистолизатов приводило к существенному повышению у них резистентности на воздействие гамма-лучами в дозе 11 Гр. Об этом свидетельствуют более высокий процент выживаемости после облучения в группе животных с предварительным до вакцинации и до облучения введением лизатов (85,7%) по сравнению с животными, вакцинированными и облученными без их введения (57,14%).

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Результаты исследований используются в научно - исследовательской и учебной работе Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана.

Рекомендуется использование лизатов из тимуса и селезенки, как недорогих, простых в применении и приготовлении, нетоксичных и высокоэффективных биопрепаратов для повышения роста и развития животных.

На основании проведенных исследований нами разработана «Методическая рекомендация по применению тимо- и лиенолизатов при вакцинации животных против болезни Ауески», утвержденная ректором Казанской государственной академии ветеринарной медицины, профессором Г.Ф.Кабировым и директором Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института, академиком АНТ А.З.Равиловым.

Рекомендуется использовать тимо- и лиенолизаты при их сочетанием введении животным-донорам при специфических вакцинациях для получения высокоактивных иммуноспецифических сывороток, необходимых для реализации программы наработки диагностических средств для тест - систем РНГА и ИФА, разработанных во ВНИВИ. Данные исследования дают направление для более углубленного изучения профилактического и лечебного действия лизатов при радиационном поражении.

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2003 года, Гафарова, Алсу Зуфаровна

1. Абдуллин Х.Х. Влияние тестолизата на образование преципитинов // Сб. трудов по изучению гистолизатов. Казань, 1934. - Вып.4. - С. 45-47.

2. Авербах М.М, Мороз A.M., Никоненко В.В. Иммуногенетика инфекционных заболеваний М.Медицина. - 1985. - 253 с.

3. Агеев А.К. Т- и В-лимфоциты. Распределение в организме. Функционально-морфологическая характеристика и значение // Арх. патол. 1976. - №12.- С. 3-11.

4. Адамбеков Д.А., Литвинов В.Н. Влияние иммунокоррекции Т-активином на течение экспериментального туберкулеза и противотуберкулезный иммунитет // Ж. микробиол., эпидемиол., иммунол. 1994. - №5. -С. 79-90.

5. Адо А.Д., Новицкий В.В. Патол. физиология. Томск: Изд-во Том. ун-та, 1994.- 466.

6. Алвердиев Г.Р., Клеточный и гуморальный иммунитет у телят разной степени зрелости и коррекция его пептидными биорегуляторами: Автореф. дис. канд. вет. наук. С.-П., 1992, - 17с.

7. Алехин Е.К., Лазарева Д.Н., Богданова А.Ш. и др. Сочетание иммуностимуляторов как метод коррекции вторичных иммунодефицитов // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1993. - №2. - С. 39-42.

8. Алехин Е.К., Сибиряк С.В., Халиуллин Ф.А. и др. Иммунотропная активность производных тиетанилбензимидазола // Иммунология. 1994. -№6. - С. 24-27.

9. Андреева Н.П. Ростостимулирующие свойства тимогена // Фармакология и токсикология новых лекарственных средств и кормовых добавок в ветеринарии. Сб. науч. трудов. ЛВИ. Л., 1992. - С. 71-73.

10. Артемов Б.Т., Дынин В.И. Состояние общей резистентности и специфической реактивности животных под действием суммарных экологических иммунопатогенных факторов // М-лы научно-произв. конф.: Тез. докл. Воронеж. - 1999. - С. 4-8.

11. Артемов Б.Т., Ефанова Л.И., Манжурина О.А. Влияние тимогена на общую и специфическую реактивность поросят, вакцинированных против сальмонеллеза // М-лы научно-произв. конф.: Тез. докл. Воронеж. - 1999. -С. 146-147.

12. Атауллаханов Р.И., Катлинский А.В. Усиление образования антител подКвлиянием иммуномодулятора гепона // Иммунология. 2003. - №1. — С. 9-12.

13. Баринский И.Ф., Сидорович И.Г., Лазаренко А.А. Способность полиоксидония повышать иммуногенность герпесвирусных вакцин // Иммунология. 2001. - №2. - С. 17-20.

14. Бауман. Некоторые данные по вопросу о действии миолизата на организм животных.//Сб.трудов по изучению гистолизатов / КГВИ. 1932. - Вып.2 -С. 43-51.Ф

15. Бахтемьева Т.И., Лонщаков Ю.И., Петрова И.В. Применение спленина у больных с серорезистентноетью после лечения сифилиса // Вест. Дерматологии. 1988. - №10.- С. 38-43.

16. Безвершенко И.А., Васильченко В.Н., Иванов Е.М. и др. Низкомолекулярный лимфоцитотропный фактор тимуса // Докл. АН УССР Сер.Б. 1976. - №6. - С. 531-534.

17. Беклемишев Н.Д. Иммунопатология и иммунорегуляция. М.: Медицина, 1986.-256 с.

18. Беклемшиев Н.Д. Лейкотриены // Иммунология. 1985. - №5. - С. 11-17.

19. Белокрылов Т.А.,Туровский B.C. Сравнительная характеристика иммуностимулирующей активности низкомолекулярных полипептидов из тимуса и коры головного мозга телят // Иммунология. 1984. - №3. - С. 3438.

20. Берлин Е.З. Влияние миолизата на рост и развитие телят // Сб. трудов по изучению гистолизатов / КГВИ. 1935. - Вып.5. - С. 69-73.

21. Бондаренко А.Л. Тималин в комплексной терапии больных гепатитом В // Иммунология.-2001 .-№2.-С.42.

22. Борисова A.M., Артемова О.П., Заболотникова О.Д. Некоторые данные по оценке гуморального звена иммунитета у больных хроническими неспецифическими заболеваниями легких // Иммунология. 1996. - №5. - С. 61.

23. Борисова A.M., Лемекина Ю.А., Симонова А.В. Клинико-иммунологическая оценка эффективности применения тимотропина (тимоптина) // Иммунология. 1987. - №4. - С. 85-89.

24. Бородуллин Ф., Домбе И., Ерузамшечик Л., Российский Д.М. Предварительные результаты теоретического и практического изучения гистолизатов под ред. М.П.Тушнова // Клин. мед. 1933. - №11.- С. 558-576.

25. Бочарова О.А., Фигурин К.М., Серебрякова Р.В. и др. Коррекция препаратом RHODIOLAE ROSEA адгезии клеток уротелия и иммунного статуса у больных поверхностным раком мочевого пузыря // Иммунология. -1997. №1. - С.51-55.

26. Булатова Э.М. Влияние гистолизатов на рост и яйценоскость кур // Применение стимуляторов в животноводстве: Сб. науч. трудов КГВИ. -Казань, 1966.-С. 53-58.

27. Бурцева Е.И., Слепушкин А.Н., Бешеева А.Л., Ельшикна Г.А., Власова Л.Н., Горбунов М.А., Панфилова Л.В., Иванова А.С. и др. «Гриппол» -эффективный препарат для иммунизации лиц пожилого возраста против гриппа // Иммунология. 2000. - №2. - С. 39-42.

28. Вавина О.В., Молев А.И., Великанов В.И., Ярушин А.Д., Ботникова Н.М., Саразов А.А., Пронькин Д.Е. Иммунокоррегирующее влияние ксимедона при острых кишечных заболеваниях у телят // М-лы научно-произв. конф.: Тез докл. -Воронеж. 1999. - С. 16-17.

29. Валимухаметова Д.А., Погорельцев В.И., Измайлова А.Р. Изучение фармакокинетики ксимедона у больных с недостаточностью кровообращения методом токослойной хроматографии // Сб.науч.трудов «Соврем.методы диагн. и лечения». Казань, 1993. - Ч.З. -С. 181-183.

30. Валуева Т.К., Малыжев В.А. Роль гуморальных факторов тимуса -тимозина и ЛСВ в созревании тимусзависимой популяции лимфоцитов // Эндокринология. 1976. - Вып.6. - С. 71-76.

31. Валуева Т.К., Чеботарев В.Ф. Тимозин, гормоны коры надпочечников и клеточный иммунитет // Новое о гормонах и механизме их действия. Киев: Наук.думка, 1977. - С. 313-322.

32. Валуева Т.К., Чеботарев В.Ф. Новое о гормонах тимуса // Эндокринология сегодня. Киев: Наук, думка, 1982. - С. 191-200.

33. Васильев Н.В. К характеристике общебиологических основ иммунитета // Витамины и иммунитет. Томск., 1979. - С. 7-21.

34. Васильченко В.Н. Гормональные препараты тимуса // Молекулярная биология. Киев, 1976. - Вып. 12. - С. 59-76.

35. Ганимедов JI.A. К вопросу о влиянии гепатолизата на эритропоэтическую функцию костного мозга лошади // Сб. трудов по изучению гистолизатов. -Казань., 1932., Вып.Н. С. 95-98.

36. Генес С.Г. О механизме действия лизатов. В кн.: Лизаты и лизатотерапия. Часть 2. Харьков, 1936.,-С.77-78.

37. Генес С.Г. Еще о механизме действия гистолизатов. В кн.: Лизаты и лизатотерапия. Часть 2. Харьков, 1936. - С. 59-76.

38. Генес С.Г. О многообразии «лизатов» и многозначимости этого понятия. В кн.: Лизаты и лизатотерапия. Часть 2 . Харьков, 1936. - С. 7-22.

39. Генес С.Г. О специфичности действия гистолизатов. В кн.: Лизаты и лизатотерапия. Часть 2. Харьков, 1936. - С. 23-42.

40. Генес С.Г., Натанзон Г.Е. Лизаты и рост организма. I.Действие мио-, дермато-, гипофизо- и челюстного лизатов на вес кроликов. В кн.: Лизаты и лизатотерапия. Часть 2. Харьков, 1936. - С. 77-81.

41. Генес С.Г., Натанзон Г.Е. Лизаты и рост организма.П.Влияние тесто-, оварио-, гепато-, тимо- и гипофизолизата на вес кроликов. В кн.: Лизаты и лизатотерапия. Часть 2. Харьков, 1936. - С. 81-88.

42. Генес С.Г., Шкуров Б.И. Опыт применения лизатотерапии при поли и спондилоартритах. В кн.: Лизаты и лизатотерапия. Часть 2. - Харьков, 1936. -С. 135-157.

43. Голощапов Н.М., Костюк JI.E., Лесков В.П. и др. Неспецифический стимулятор иммунного ответа // Изобретательство и рационализация в медицине. М„ 1983. - С. 156-159.

44. Гольдберг М.Л. К вопросу о механизме действия лизатов. В кн.: Теоретические основы и опыт поликлинического применения гистолизатов и гравидана. М., 1936. - С. 75-88.

45. Гольдберг М.Л. Влияние лизатов на функциональное состояние мезенхимы (по картине крови). В кн.: Теоретические основы и опыт поликлинического применения гистолизатов и гравидана. М., 1936, - С. 93-107.

46. Гонтова И.А., Абрамов В.В., Козлов В.А. Особенности сочетанного влияния асимметрии тимуса и головного мозга на гуморальный иммунный ответ // Иммунология. 2002. - №1. -С. 22-26.

47. Горизонтов П.Д. В кн.: Гомеостаз. Ред. Горизонтов П.Д.-М.:Медицина, 1981.-538 с.

48. Госманов Р.Г., Колычев Н.М. Основы противомикробного иммунитета. -Омск, 2002, С. 119.

49. Гурарий Н.И., Назаров Ш.Н., Олианова Л.Я., Емельянов А.Г. Иммунокоррекция миелопидом при заболеваниях, вызванных сальмонеллами // I Всес. иммунологический съезд (Сочи): Тез. докл. М.; 1989. - Т.1. - С. 295.

50. Гюллинг Э.В., Писанко В.Н. Влияние левамизола на развитие гиперчувствительности замедленного типа // Врачебное дело. 1981. - №4. -С. 101-103.

51. Давлетшина С.З. Действие гистолизатов на рост и развитие подсвинков // Ученые записки КГВИ. Казань., 1965. - Т.95 - С. 125-129.

52. Двинянинов Л.И. К влиянию лизатов и повышение титра преципитирующих сывороток // Сб.трудов по изучению гистолизатов. Казань, 1935.

53. Дергачева Т.И., Шурлыгина А.В. и др. Субпопуляционный состав лимфоцитов в регионарных лимфоузлах, тимусе и селезенке при экспериментальном воспалении внутренних половых органов у крыс-самок // Иммунология. 2000. - №5. - С. 17-19.

54. Долгушин И.И., Эберт Л.Я., Лифшиц Р.И. Иммунология травмы. -Свердловск, 1989, 188 с.

55. Дологорская М.П., Селиская A.M. К вопросу о приготовлении лизатов. // Ж. Советская клиника. 1933. - T.XIX. - №2 - С. 106.

56. Елисеева М.Р., Карабаева Р.А. Иммуномодулирующая эффективность комбинированного применения тактивина и преднизалона при системной склеродермии // Иммунология. 1995. - №2. - С. 45-49.

57. Ермольева Е.В., Вейсберг Г.Е. Стимуляция неспецифической резистентности организма и бактериальные полисахариды. М.-1976.-186 с.

58. Ершов Ф.Н. Малиновская В.В. Иммуномодуляторы в профилактике и терапии вирусных инфекций //Журн. микробиол. 1996. - №3. - С. 122-125.

59. Ефанова Л.И., Кудрин Л.Г. Иммунологическая реактивность в зоне загрязнения радионуклидами // М-лы научно-произв. конф.: Тез. докл. -Воронеж. 1999.

60. Жаков М.С. Иммуноморфология и иммунопатология. // Учебное пособие для студентов и врачей ветеринарной медицины. Витебск, 1996. - 37 с.

61. Железникова Г.Ф. Иммуномодулирующее действие вакцин: новые аспекты известной проблемы // Иммунология. 2000. - №4. - С. 20-24.

62. Жмуров Н.Г. Влияние адъювантов на содержание Т- и В-лимфоцитов в крови поросят при комплексной вакцинации // Сб. науч. трудов Воронеж, 1986.-С. 27-32.

63. Заика JI.A. Влияние факторов тимуса на содержание Т- и В-лимфоцитов поросят. // Биолог, журн. Армении. 1987, Т. 40, №9, с. 790-792.

64. Зайцев В.И. Влияние однократных инъекций маммолизата на увеличение количества молока и продолжительность удоя. // Сб. трудов КГВИ. 1935. -Вып.У. - С. 92-101.

65. Захарова С.А. Влияние тимолизата на некоторые клинико-гематологические показатели серебристо-черных лисят при однократном введении // 2-ая Респ. научн. конф. молодых ученых и специалистов: тезисы докладов. Казань, 1996.-С. 25.

66. Земсков A.M. Способ выбора адекватной иммунокоррегирующей терапии для устранения приобретенной иммунологической недостаточности // Иммунология. 1988. - №4. - С. 83-86.

67. Земсков A.M., Земсков В.М., Передирий В.Г. Коррекция вторичной иммунологической недостаточности с помощью дрожжевой РНК / ЖМЭИ, 1984.-№9.-С. 77-82.

68. Земсков A.M., Караулов А.В., Земсков В.М. Комбинированная иммунокоррекция. М.: Наука, 1994.-260 с.

69. Земсков A.M., Соломахин Г.Г., Рычнев В.А. и др. Итоги применения нуклеината натрия как иммунокорректора // Компоненты нуклеиновых кислот. Тез.докл. VIII Всосоюз.симпоз. по целенаправленному изысканию лекарственных веществ. Рига. - 1989. - С. 116-117.

70. Земсков В.М., Земсков A.M. Принципы дифференцированной иммунокоррекции // Иммунология. 1996. - №3. - С. 4-6.

71. Земсков В.М., Земсков A.M., Золоедов В.И. Особенности коррекции иммунологических расстройств при различных патологических состояниях // Успехи соврем, биол., 1993. - 113. - №4. - С. 433-441.

72. Зиганшина Ю.С. Иммунодефицитные состояния, их профилактика и лечение тимолизатом: Дисс.канд. вет. наук. Казань, 1998. - 180 с.

73. Златовский. Миолизат в животноводстве.// Сб.трудов по изучению гистолизатов.-Казань, 1934,- Вып.1У.-С.68-74.

74. Ивановская Т.Е., Катасонова Л.П. Структура тимуса, иммунный статус и патологический процесс. // Арх. патологии, 1986, №1, С. 3-9.

75. Игнатов П.Е. Некоторые аспекты стимуляции иммунитета.// Матер. Всесоюзной научно-производ. конф.-Н. Новгород, 1997, С. 172-173.

76. Идрисов Г.З. Иммуноморфологическая оценка новых моно- и ассоциированных вакцин при различных способах введения их в организм с.-х. животных // Автореферат дисс. докт. вет. наук. Казань, 1977. - 37 с.

77. Идрисов Г.З., Ионова О.П. Иммуноморфологические и ультраструктурные изменения сосудов у свиней при болезни Ауески и вакцинации / Актуальные вопросы патологоанатомической диагностики болезней животных. Л. 1982. - С. 241-243.

78. Ильясова Г.Ф. Влияние ксимедона на гуморальный иммунный ответ при вакцинации живой вирусвакциной // Тез. докл. научно-практической конференции молодых ученых. Казань, 1998. - С. 26-27.

79. Ильясова Г.Ф., Угрюмова B.C., Ситдиков Р.И., Сибгатуллин Р.С. Иммуноморфогенез у вакцинированных животных при псевдобешенстве на фоне применения иммуностимуляторов // Матер. Междунар. Научн. конф. поев. 125-летию академии. Казань, 1998. - Ч.Н. - С.45.

80. Ильясова Г.Ф. Ксимедон как средство повышения эффективностипротивовирусной вакцинации: Дис.канд. мед. наук. Казань, 2000. - 147с.

81. Казаков И.Н. К вопросу о механизме действия гистолизатов.// Клин. мед. -№11 С. 581-600.

82. Калимуллин Ф.Х., Баранов В.А. Тималин как иммуномодулятор при экспериментальной вакцинации // Каз. мед. журнал. 1999. - Т. XXX. - №3. - С. 226.

83. Карпюк С.А. Определение белковых фракций сыворотки крови экспериментальным методом // Лаб. дело. 1962. - №7. - С. 33.

84. Кенигсберг Я.Э. Влияние дибазола и метилурацила на иммунитет // Научн.тр. Всесоюз. Академии с.-х. наук им. В.ИЛенина. М.: Агропромиздат. - 1985. - С. 50-51.

85. Кетлинский С.А. Роль Т-хелперов типов 1 и 2 в регуляции клеточного и гуморального иммунитета // Иммунология. 2002. - №2. - С. 77-80.

86. Ким К.Ф., Климова С.В. и др. Влияние тимических пептидов на синтез и внутриклеточное содержание некоторых цитокинов // Иммунология. 2002. -№5. - С. 274-279.

87. Кирпиченок В.А. Влияние некоторых иммуномодлуляторов на иммуногенез у крупного рогатого скота при вакцинации против лептоспироза // Ученые записки Витебского ветеринарного института. 1993. - Т.ЗО. - С. 72-74.

88. Киселева Е.П., Огурцов Р.П., Попова О.Я., Фрейдлин И.С., Малинин В.В.,Хавинсон В.Х. Сравнительная характеристика двух пептидных иммуномодуляторов // Иммунология. 1999. - №2. - С. 23-26.

89. Красникова Г.А., Колоусова Н.Г. Методические рекомендации по гистоморфологической оценке иммунокомпетентных органов цыплят в норме и при иммунодефицитах. Харьков, 1989. - 20 с.

90. Ковалев И.Е. Левамизол как иммуностимулятор // Химико-формокологический журнал . - 1980. - №4. - С. 115-121.

91. Колкер И.И., Минкова Г.Л., Победина В.Г. и др. Изучение влияния препарата тимуса (тималина) на заживление ожоговых ран и иммунологическую реактивность организма // Хирургия. 1984. - №10. - С. 115-118.

92. Колли В.В., Крутецкая О.В. К вопросу о химическом составе лизатов. В кн.: Теоретические основы и опыт поликлинического применения гистолизатов и гравидана. - М., 1936. - С. 47-54.

93. Колычев Н.М., Госманов Р.Г. Ветеринарная микробиология и иммунология / Омск, 1996. С. 156-248.

94. Коляков Я.Е. Ветеринарная иммунология. М.: Агропромиздат, 1986. -271 с.

95. Корнякова Е.А., Ракова Т.Н. Сравнительное фармакологическое действие иммуномодуляторов Т-активина, ганглиина и витамедина-В // М-лы научно-произв. конф.: Тез. докл. Воронеж. - 1999. - С. 212-213.

96. Корнякова Е.А., Ракова Т.Н. Эффективность применения тимогена в чистом виде и в комплексе с витамином С при нитратной интоксикации птицы // М-лы научно-производ. конф.: Тез. докл. Воронеж. - 1999.

97. Кост Е.А., Стенко М.И. Определение фагоцитарной активности лейкоцитов // Методическое пособие к лабораторным занятиям по основам научных исследований. Саратов, 1981. - С. 98.

98. Кубанова А.А., Васильева Л.Л. Влияние диуцифона на иммунологические показатели и динамику кожного процесса у больных экземой // Вест. дерм, и венер.- 1984.-№5.-С. 13-15.

99. Кузнецов В.П. Интерфероны как средство иммуномодуляции // Иммунология. 1987. - №4. - С. 30-34.

100. Кузник Б.И., Витковский Ю.А., Хавинсон В.Х. Влияние тималина и вилона на уровень провоспалительных и противовоспалительных цитокинов при отморожениях // Иммунология. 2001. - №6. - С. 32-34.

101. Лагов С.И. О методах приготовления лизатов. В кн.: Лизаты и гравидан. -М., 1936.-С. 29-35.

102. Лагов С.И. Критическая оценка теорий «механизма» действия лизатов. В кн.: Лизаты и гравидан. М., 1936. - С. 137-147.

103. Лазарева Д.Н., Алехин Е.К. Стимуляторы иммунитета: М.: Медицина, 1985.-256 с.

104. Лазарева Д.Н., Волкова С.С., Зарудий Ф.С. и др. Иммуномодулирующие свойства новых производных пиримидинов // Иммунология. 1995. - №2. -С. 59-61.

105. Лифшиц Р.И., Кляцкин С.А., Однопозов А.К. и др. Клинико-лабораторное исследование эффективности ксимедона в лечении больных с термическими ожогами // Сб.науч.трудов ИОФХ им. А.Е.Арбузова КФАН СССР. Казань. - 1986. - С. 47-73.

106. Лопухин Ю.М. Клинический опыт коррекции иммунной системы активным фактором тимуса (Т-активином) // Итоги науки и техники: Иммунология. М.: ВИНИ ТИ; 1982. - Т. 10. - С. 30-44.

107. Лукашев М.В. Некоторые биохимические основы гистолизатов акад. М.П.Тушнова в свете современного учения о белках // Тез. докл. научно-практич. конф. Башкирской НИВС, Уфа, 1958, - С. 9-11.

108. Лысов В.Ф. Лизаты и возможности использования их для стимуляции функции лимфоидной ткани // Материалы I Всесоюзного съезда патофизиологов. Баку, 1970. - С. 721-722.

109. Лютинский С.И. Патологическая физиология с.-х. животных // Учебник под ред. В.Н. Сайтаниди. Казань, 2001. - 496 с.

110. Лютинский С.И., Иванова Т.А., Скрипник Э.П. Применение тималина при гипотрофии // Сб. науч. трудов Читинского Гос. Мед. ин-та «Цитомедины». Чита, 1988. - С. 92.

111. Лютинский С.И., Садовский Н.В., Юшков Б.Г. Патологическая физиология иммунной системы домашних животных // Учебное пособие. -Санкт-Петербург, Екатеринбург, 1998. 104 с.

112. Ляпина Т.Е. Показатели общего белка и его фрацкий под действием адъювантов при комплексной вакцинации поросят // Сб. научных трудов. -Воронеж, 1986. С. 21-27.

113. Макаревич Г.Ф. Сравнительная эффективность иммуномодуляторов В-активина, тималина и диуцифона в профилактике возрастной иммунной недостаточности // Ученые записки Витебского вет. ин-та. 1993. - Т.30. - С. 31-33.

114. Макаревич Г.Ф. В-активин в профилактике диарейных болезней телят // Ученые записки Витебского вет. ин-та. 1993. - Т.30. - С. 33-34.

115. Малыжев В.А. Восстановление иммунологической реактивности у тимэктомированных мышей при помощи тимозина и ЛСВ // Докл. АН УССР. 1976. - №11. - С. 1024-1027.

116. Малыжев В.А. Лимфоцитостимулирующее вещество тимуса (ЛСВ) и его роль в формировании иммунокомпетентных Т-лимфоцитов: Автореф. дисс. .д-ра мед. наук. Киев., 1982.-34 с.

117. Манжурина О.А., Ефанова Л.И., Артемов Б.Т. Влияние тимогена на фагоцитарную активность лейкоцитов у поросят, иммунизированных против сальмонеллеза на фоне поступления нитрита калия // М-лы науч. конф.: Тез. докл. Воронеж, 1986. - С. 56-57.

118. Маркова Н.А., Филатов А.В., Сурнакова Н.Е., Алексеева Л.П. Получение МКА против В-лимфоцитарных антигенов человека и изучение влияния на пролиферацию и дифференциацию В-клеток // Сб. трудов: МКА в медицине и биотехнологии. М, 1990. - С. 3-16.

119. Маркова Т.П. Сравнительное изучение влияния миелопида и тактивина на рецепторы В-клеток // Иммунология 1995. - №1. - С. 59-61.

120. Машковский М.Д. Лек. ср-ва: В двух частях. М.: Мед., 1993. - Ч. I. - 731 с.

121. Машковский М.Д. Лек. ср-ва: В двух частях. М.: Мед., 1993. - Ч. И. -688 с.

122. Медуницин Н.В., Авдеева Ж.И., Акользина С.Е. и др. Содержание цитокинов в иммунобиологических препаратах // Иммунология. 1997. - №2. - С. 42-45.

123. Менделенко М.М. Иммунологическая эффективность вакцинации, выполненной с учетом иммунного статуса прививаемых: Автореферат дисс. докт. мед. наук. М.,1993.

124. Меркулов Г.А. Курс патологической техники. Л.: Мед., 1969. - 423 с.

125. Методические рекомендации по количественному определению и функциональной оценке Т- и В-лимфоцитов в периферической крови крупного рогатого скота. Харьков, 1983. - 18 с.

126. Милку Шт.-М., Потоп И. Фармакодинамика вырабатываемых тимусом сходно-гормональных веществ.-Бухарест: Изд. АН СРР, 1977. 188 с.

127. Мирошниченко И.В., Шарова Н.И., Рябинина И.Д. и др. Анализ биологической активности тимогена и синтетических аналогов тимопентина // Иммунология. -1997. №2. - С. 25-29.

128. Михайлова А.А., Захарова J1.A., Сергеев Ю.О. Пептиды костного мозга и иммуномодуляция // Сб.трудов ЦНИИВ и С им. И.И.Мечникова. М.; 1987. -26 с.

129. Михайлова А.А Миелопептиды и их роль в функционировании иммунной системы // Иммунология. 2001. - №5. - С. 16-18.

130. Морозов В.Г. Фактор тимуса и его влияние на иммунологическую реактивность организма: Автореф. дисс. канд. мед. наук. JI., 1979. - 17 с.

131. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Характеристика и изучение механизма действия фактора тимуса (тимарина) //Докл. АН СССР. 1978. - Т.240. - №4. -С. 1004-1007.

132. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Выделение, очистка и идентификация иммуномодулирующего полипептида, содержащегося в тимусе телят и человека// Биохимия. 1981. - Т.46. - Вып.9. - С. 1652-1659.

133. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Иммунологическая функция тимуса // Успехи совр. биологии. 1984. - Т.97. - Вып.1. - С. 36-49.

134. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., Писарев О.А. Выделение из тимуса и изучение природы фактора, стимулирующего иммуногенез // Докл. АН СССР. 1977. - Т.233. - №3. - С. 491-494.

135. Назарова JI.C., Тараненко Т.М., Щуков И.В. Стимуляция клеточного иммунитета липополисахаридом Иерсения пестис у мышей // ЖМЭИ. 1994. - №5. - С. 85-86.

136. Недоспасов В.О. О патогенезе анемии после удаления селезенки: Автореф. дисс. канд. мед. наук. Челябинск, 1971.

137. Нестерова И.В., Шадрин С.А., Баюкина А.В. Ликопид в программе иммунореабилитации детей, больных муковисцирозом // Иммунология. -2000.-№1.-С. 42-46.

138. Никитенко A.M. Роль иммуномодуляторов в коррекции иммунобиологической реактивности и в профилактике гемобластозов животных: Дис. докт. вет. наук. Казань, 1990.-322 с.

139. Николаев Н.М. Лизатотерапия и её теоретическое обоснование. В кн.: Теоретические основы и опыт поликлинического применения гистолизатов и гравидана. М, 1936. - С. 7-25.

140. Никольский И.С., Гриневич Ю.А., Селезнева Т.Н. и др. Индукторная активность гуморальных факторов тимуса, спленина и левамизола // Иммунология. 1985. - №4. - С. 44-48.

141. Никонова М.Ф., Михна М.Г, Сорокина Н.И. и др Модификация мембранного фенотипа тимоцитов при действии гормонов тимуса и лимфокинов // Иммунология. 1987. - №5. - С. 59-62.

142. Нуриев Г.Г, Бусыгин К.Ф. Применение препаратов пиримидинового ряда для стимуляции поствакцинального иммуногенеза // Вирусные болезни с.-х. животных: Мат.1-ймежвуз. вет. вирусол. конф. М., 1970. - С. 15-16.

143. Обросова-Серова Н.П., Счастный Э.И., Куприянова Л.М., Слепушкин А.Н., Шендерович С.Ф. Иммуномодулирующее действие левамизола при его сочетанном применении с гриппозными вакцинами // Вопр. вирусол. 1984.- №4. С. 454-458.

144. Павленко С.М., Киселев B.C. К проблеме лизатов // Клинич. медицина. -1933. T.XI. - №11. - С. 545-551.

145. Павлишин В.В., Свацова З.Д., Гюллинг Э.В. Повышение эффективности противогриппозной вакцинации с помощью левамизола // Вопр. вирусол. -1984.-№2.-С.248-250.

146. Павловский Е.Н. Об использовании лизатов в животноводстве // Применение стимуляторов в животноводстве: Сб. трудов Каз. гос. вет. ин-та.- 1996. С. 34-45.

147. Панарин Е.Ф., Иванова Н.П., Белохвостова А.Т., Потапенко Л.С. Изучение иммуностимулирующих поливинилсахаридов // Иммунология. -1999.-№2.-С.26-28.

148. Пар А. Левамизол как иммуномодулятор. Будапешт. - 1980. - 38 с.

149. Першин Б.Б. Вакцинация и местный иммунитет. М., 1980. - 231 с.

150. Першин Б.Б., Пересадин Н.А., Ененко Ю.А. и др. Иммуномодулирующий эффект нуклеаната и спленина у больных вирусными и токсическими гепатитами // Иммунология. 1994. - №6. - С. 64-65.

151. Петров Р.В. Иммунология. 2-е издание. М.: Мед. - 1987. - 415 с.

152. Петров Р.В., Михайлова А.А., Захарова JI.A. и др. Миелопиды -регуляторные медиаторы, вырабатываемые клетками костного мозга // Докл. АН СССР. 1986. - Т.987. - №2. - С. 489-492.

153. Петров Р.В., Степаненко Р.Н., Михайлова А.А. В-активин и иммунокоррекция // Хирургия 1984. - №11. - С. 41-44.

154. Петров Р.В., Хаитов P.M., Манько В.М., Михайлова А.А. Контроль и регуляция иммунного ответа // JI.: Медицина, 1988 311 с.

155. Петров Р.В., Хаитов P.M., Некрасов А.В., Атауллаханов Р.И., Пучкова Н.Г., Иванова А.С. Гриппол — гриппозная вакцина нового поколения // Russian Journal of Immunology. 1999. - V.4. - Suppl.l. - P. 339.

156. Петров P.B., Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Иммунодиагностика иммунодефицитов // Иммунология . 1997. - №4. - С. 4-7.

157. Петухова Е.А., Бессарабова Р.Ф., Халенева Л.Д., Антонова О.А. Зоотехнологический анализ кормов. М., 1989. - 239 с.

158. Пинегин Б.М., Минкина Г.Н., Ачикова Л.А. и др. Использование нового иммуномодулятора ГМДП при лечении больных папиломавирусной инфекцией шейки матки // Иммунология. 1997. - №3. - С. 47-51.

159. Пинегин Б.В., Минкина Г.Н., Манухин И.Б. Влияние глюкозоминилмурацилдипептида на иммунный статус и клиническое состояние больных с поражением шейки матки вирусом папилломы человека // Иммунология. 1994. - №3. - С. 46-49.

160. Плецистый Д.Ф., Фидельман Е.С. Иммуногенез и неспецифические факторы естественной резистентности. Сообщ.З. Влияние активной иммунизации на содержание лизоцима в крови животных // Бюлл.эксперим.биологии и медицины. 1963. - №10. - С. 69-70.

161. Плецитый К.Д. Витамины в иммунном ответе // Тер. арх. 1980. - №2. -С. 131-136.

162. Поваренный A.M., Семина О.В. Тимодепрессин, ингибирующий развитие реакции трансплантат против хозяина // Иммунология. 2002. - №2. - С. 102-105.

163. Погорельцев В.И., Валимухаметова Д.А. Изучение фармакокинетики ксимедона в крови // Материалы респ. науч. конф., Нижнекамск. Казань, 1994.-С. 80-81.

164. Поздеев O.K., Шулаева М.П. Коррекция фагоцитарной активности альвеолярных макрофагов ксимедоном при экспериментальной гриппозной инфекции // Новые методы диагностики и лечения. Тез. докл. Казань, 1996.- 4.2. С. 63-64.

165. Понякина И.Д. Взаимосвязи в иммунной системе // Иммунология. 1983.- №6. С. 15-23.

166. Правила доклинической оценки безопасности фармакологических средств (JZP), РД 64 - 126 - 91 (М., 1991).

167. Румянцева А.В. Действие лизатов на организм животного // Клинич. медицина. 1933. - №11. - С. 600-612.

168. Руфимский Н.П. Гистолизаты и инфекция // Сб. трудов по изучению гистолизатов КГВИ. Казань, 1931. - Вып.1. - С. 30-53.

169. Руфимский Н.П. Влияние «тестолизата» на колебания комплемента в крови морской свинки // Сб. трудов по изучению гистолизатов КГВИ. -Казань, 1931. Вып.1. - С. 83-87.

170. Рыбаков А.И., Исаев В.Н., Иванюшко Т.П. и др. Тактивин стимулятор // Иммунология. -1996. - №6. - С. 57-59.

171. Рябенко В.В., Каидашев И.В. Роль хелатирования внутриклеточного кальция в реализации влияния пептидных комплексов тимуса (тималина) и почек на процессы апоптоза тимоцитов // Иммунология. 2002. - №4. -- С. 196-200.

172. Саратиков А.С. Золотой корень (родиола розовая). Томск, 1974. - 156 с.

173. Сафин М.А., Равилов А.З., Спиридонова Г.Н. Стимуляция специфического противотуберкулезного иммунитета // Современные проблемы иммунологии, биотехнологии, генной и клеточной инженерии в вет. медицине. М., 1990. - С. 208-210.

174. Свиржевская Е.В., Вискова Н.Ю., Сапожников A.M. Изучение иммуномодулирующих свойств экстракта мицелия высшего гриба FUZARIUM // Иммунология. 1997. - №2. - С. 29.

175. Серов В.В., Зайратьянц О.В. Успехи и перспективы изучения физиологии и патологии тимуса // Клинич. медицина. 1986. - Т. 94. - Вып. III. - С. 1826.

176. Сетдикова Н.Х., Борисова A.M., Шульженко А.С. и др. Влияние нового иммуностимулятора гликопина на состояние здоровья и некоторые показатели иммунного статуса здоровых добровольцев // Иммунология. -1995.-№2.-С. 49-52.

177. Семина О.В., Семенец Т.Н., Дейгин В.И. и др. Стимуляция тимогеном (GW) дипептидом, обладающим иммунокорригирующими свойствами восстановления кроветворения у облученных и подвергнутых действию цитостатика мышей // Иммунология. - 1997. - №1. - С. 33-35.

178. Сизякина Л.П., Чумаков Е.А. Эффекты миелопептида-1 на функциональную активность полинуклеаров больных ВИЧ-инфекцией // Иммунология. 2003. - №1. - С.4-6.

179. Скороходкина О.В., Цибулькина В.Н., Цибулькин А.П. Иммунологические механизмы терапевтического эффекта ксимедона у больных с атопическими аллергическими заболеваниями // Иммунология. — 2002. -№5. С.271-274.

180. Скрипник Э.В. Влияние некоторых цитомединов на естественную резистентность поросят разной степени физиологической зрелости // Автореферат дисс. канд. вет. наук. Ленинград, 1989. - 17с.

181. Смирнов A.M., Кондратьев B.C., Кикитина И.В. и др. Тимоспленин для повышения резистентности молодняка // Ветеринария. 1984. - №7. - С. 6566.

182. Смирнов B.C., Морозов В.Г. Применение тималина для коррекции иммунной системы у пострадавших при промышленной радиационной аварии // Иммунология. 1991. - №4. - С. 53-56.

183. Смирнов B.C., Серый С.В. Коррекция вторичных иммунодефицитов тималином // Тез. докл. науч. конф. «Роль пептидных биорегуляторов (цитомединов) в регуляции гомеостаза». JL, 1987. - С. 92.

184. Смирнова О.В. и Кузьмина Т.А. Определение бактериальной активности сыворотки крови методом фотонефелометрии // ЖМЭИ. 1966. - №4. - С. 811.

185. Соловьев М.М., Васильев А.В., Морозов В.Г. и др. Влияние физиологически активных веществ, выделенных из тимуса на течение раневого процесса после криодеструктции у крыс // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1977. - №9. - С. 355-359.

186. Софронов Б.Н., Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., Белокрылов Г.А. Полипептидный фактор тимуса — тималин в эксперименте и клинике // Физиология человека. 1984. - Т. 10. - №2. - С. 229-233.

187. Спесивцев О.Г., Гольчанская Л.Д. и др. Применение спленина в комплексном лечении больных туберкулезом легких // Пробл. туб. 1985-. -№8.-С. 28-31.

188. Спивак Н.Я., Зуева B.C., Белоцкий С.М. Интерферон и бактериальные инфекции // Антибиотики и мед. биотехнология. 1987. - №12. - С. 920-925.

189. Стручко Г.Ю., Меркулова JI.M., Сергеева В.Е., Стоменская И.С. Реакция биоаминсодержащих структур тимуса крыс на экспериментальное удаление селезенки // Иммунология. 2000. - №2. - С. 13-17.

190. Стручко Г.Ю., Меркулова JI.M., Стоменская И.С., Мохамед Захид. Иммунобиохимические и гематологические показатели крови крыс после удаления селезенки // Иммунология. 2003. - №2. - С. 92-96.

191. Тазулахова Э.Б., Паршина О.В., Ершов Ф.И. Тимозин регулирует продукцию интерферона // Иммунология. 1994.- №3. - С. 28.

192. Теляков Р.Н. Применение гистолизатов М.П.Тушнова в свиноводстве // Ветеринария. 1959. - №19. - С. 82-83.

193. Терещенко В.Ю., Измайлова Г.А., Измайлов С.Г., Габасов р.н. Ксимедон как неспецифический стимулятор процессов остеогенеза // Новые методы диагностики и лечения. Тез. докл. Казань., 1995. - С. 359-361.

194. Терещенко В.Ю., Кулаков Е.П., Малышев К.В. Использование ксимедона в сочетании с лазерной терапией в комплексном лечении хронического остеомиелита // Новые методы диагностики и лечения. Тез. докл. Казань, 1996.-4.2.-С. 77-78.

195. Тимофеева A.M. К методике получения лизатов // Вестник эндокринсл. -1936. Т.З. - №6. - С. 89-90.

196. Трутнев Е.И. Влияние гистолизатов на кору надпочечников // Ученые записки КГВИ. Казань, 1965. - Т.95. - С. 130-145.

197. Трутнев Е.И. О возможности стимуляции некоторых эндокринных функций гистолизатами и участие гормонов в механизме действия этих препаратов // Применение стимуляторов в животноводстве: Сб. трудов КГВИ. Казань, 1966. - С. 46-53.

198. Тукшаитов Р.Х., Нигматуллин Н.Р. Математическая обработка экспериментального материала на программируемых микрокалькуляторах типа «Электроника» МК-56 // Методические рекомендации. М. - 1984. — 28

199. Тушнов М.П. Натуральные клеточные яды // Сб. трудов по изучению гистолизатов. Казань, 1931. - Вып. I. - С.3-30.

200. Тушнов М.П. Лизатотерапия и её теоретическое обоснование // Сб. трудов по изучению гистолизатов. Казань, 1ё935. - Вып. V. - С. 5-16.

201. Тушнов М.П. Лечение и потенцирование организма при помощи «hystoIysat'oB» // Сб. трудов / Казанский ГИДУВ. 1933. - Вып. 3. - С. 3-9.

202. Тушнов М.П. Натуральные клеточные яды. В кн.: Проблемы сперматоксинов и лизатов. М., 1938. - С. 299-325.

203. Тушнов М.П. Применение гистолизатов в животноводстве. В кн.: Проблемы сперматоксинов и лизатов. М.,1938. - С. 326-334.

204. Тушнов М.П. Теория и механизм действия гистолизатов. В кн.: Проблемы сперматоксинов и лизатов. М., 1938. -С. 335-342.

205. Тушнов М.П. Гистолизаты и применение их в медицине и в ветеринарии. В кн.: Проблемы сперматоксинов и лизатов. М., 1938. - С. 350-357.

206. Тушнов М.П. Проблема повышения продуктивности сельскохозяйственных животных. В кн.: Проблемы сперматоксинов и лизатов.-М., 1938.-С. 358-361.

207. Фазлуллин Н.С., Немшилова Н.А. К вопросу о влиянии тестолизата на повышение титра диагностических и лечебных сывороток // Сб. трудов по изучению гистолизатов. Казань, 1935. - Вып. V. - С. 21-25.

208. Фарбер Н.А., Кетиладзе Е.С., Камилов Ф.Х. и др. Левамизол в терапии вирусного гепатита В // Тер. арх. 1983. - №9. - С. 121-125.

209. Фролов В.М., Пересадкин Н.А., Ененко Ю.А. и др. Иммуномодулирующий эффект нуклеината натрия и спленина у больныхвирусными и токсическими гепатитами // Иммунология. 1994. - №6. - С. 64-65.

210. Хавинсон В.Х., Морозов В.Г. Экспериментальное и клиническое изучение нового иммунорегулирующего препарата тималина // Воекно-медицинский ж-л. - 1982. - №5. - С. 37-39.

211. Хаитов P.M., Борисова A.M., Хорошилова Н.В. и др. Применение рибосомального препарата рибомунила для коррекции иммунной системы больных хроническим бронхитом // Иммунология. 1994. - №1. - С. 36-43.

212. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. и др. Иммунотерапия инфекционных послеоперационных осложнений с помощью нового иммуномодулятора гликопина // Иммунология. 1994. - №2. - С. 47-50.

213. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Современные иммуномодуляторы: основные принципы их применения // Иммунология. 2000. - №5. - С. 4-8.

214. Хамитов Х.С., Валимухаметова Д.А., Цибулькин А.П., Заиконникова И.В., Билич И.Л. К механизму действия ксимедона // КФАН СССР Казань, 1986.-С.9-25.

215. Хафизьянова Р.Х., Рагинов И.С., Вафин А.Ю., Челышев Ю.А. Влияние ксимедона на регенерацию периферического нерва // Фармакология и токсикология фосфорорганических и других биологически активных веществ. Казань, 1996. - Вып.З. - С. 145.

216. Хитров В.Ю., Заболотный А.И., Хамидуллина С.А. Применение ксимедона при лечении эрозивных поражений губ // Новые методы диагностики и лечения. Тез. докл. Казань, 1995. - С. 175-177.

217. Хрусталев С.А. Количественный и качественный состав крови молодых морских свинок при подкожном введении лиенолизата // Сб. трудов по изучению гистолизатов. Казань, 1932. - Вып. II. - С. 83-90.

218. Чеснокова В.М., Игнатьева Е.В., Иванова Л.Н. и др. Влияние тимозина на формирование функциональной активности надпочечников у мышей // Пробл. эндокринол. 1987. - Т. 33. - Вып. I. - С. 56-60.

219. Шанурин С.Ю., Белевская Р.Г., Фенина JI.A., Михайлова А.А. Сравнительное изучение иммунорегулирующей активности миелопептида-1 и миелопептида-2, входящих в состав препарата «миелопид» // Иммунология. 1996. - №4. - С. 21-23.

220. Шарипов Д.Ш., Зиганшина Ю.С. Морфологическая оценка эффективности тимолизата при экспериментальном иммунодефиците // М-лы научно-произв. конф.: Тез. докл. Воронеж. - 1999. - С. 231-232.

221. Шафиков И.З., Измайлов Г.А., Измайлов С.Г., Горбунов С.М., Эвранова Г.Б., Абдулыханов Г.А., Усманова С.А. Применение ксимедона в лечении обоженных // Хирургия. 1993. - №4. - С. 62-64.

222. Шерешевский Н.А. К вопросу о лизатотерапии // Клинич. медицина. -1933. Т. XI. - №11. - С. 551-558.

223. Цепелев В.П., Цепелев С.А., Зиганшин Р.Х., Цыбиков Н.Н. Изучение иммуностимулирующей активности пептидов, выделенных из бурсы Фабрициуса // Иммунология. 2003. - №2. - С. 89-92.

224. Цибулькин А.П., Ильясова Г.Ф., Угрюмова B.C. Способ повышения эффективности противовирусной вакцинации // Н-й съезд иммунологов России. -Тез. докл. Сочи, 1999. - 4. - №1. - С. 340-342.

225. Цибулькин А.П., Слабнов Ю.Д., Валимухаметова Д.А. Влияние ксимедона на лимфопоэтическую способность и дозревание лимфоцитов // Научный сборник материалов экспериментальных и клинических исследований ксимедона. 1986. - С. 30-33.

226. Юлдыбаев Х.С. Применение гистолизатов академика М.П.Тушнова в ветеринарной практике // Ветеринария. 1954. - №2. - С. 39-40.

227. Юсупов Р.Х., Ильясова Г.Х. Диагностика псевдобешенства (болезнь Ауески) с помощью лабораторных методов // Инф. Листок Татарского Межотрасл. территор. ЦНТИП. 1983 - №223 - 83.- 6 с.

228. Юсупов Р.Х., Ильясова Г.Х, Гизатуллина С.В. Оценка эффективности вакцинопрофилактики при псевдобешенстве (болезнь Ауески) с помощью препаратов для РИГА // Инф. Листок Татарского Межотрасл.территор. ЦНТИП. 1990. - №136 -90.-4 с.

229. Яриллин А.А., Беляков И.М. Тимус как орган эндокринной системы // Иммунология. 1996. - №1. - С. 4-10.

230. Allison А.С., An adjuvant formulation that elicitis antibodies of protective isotypes and cell-mediated immunity // Retrovirus. Hum. AIDS and Relat. Anim. Deseas.; Collog. Cent Gardes, Marnes-la-Coquette, Lyon, 1987. P. 172-173.

231. Asanuma Y., Goldstein A.L., White A. Reduction in the incidence of wasting disease in neanatally thymectomized CBA/W mice by the injection of thymosin // Endocrinology. 1970. - Vol.86, №3. - P. 600-610.

232. Bach J.F. A new appoach to immunostimulation thymic factors. In international congress of Pharmacology. Prostaglanding // Immunopharmacology. Oxford, 1979.- P. 145-148.

233. Bach J., Edelman R. // Thymik hormones and T-lymphocyts. London, 1980. -P. 187-193.

234. Bonovito V. Brain nucleotides and excitatory processes // Acta Neurol. 1975.- Vol.30.-№1.-P. 30-34.250. (Cantor H.) Кантор X. Т-лимфоциты // В кн. «Иммунология» / Пер. с англ. -М.: Мир, 1987.-С. 94-95.

235. Comsa J. In «Thymic Hormones.» Rd Lyskey T.D.Baltimore Univ. Park. Press.-1973.-P. 39-58.

236. Comsa J. 'Action of the purified thymus hormone in thymectomired guinea pigs // Amer. J. Med. Sci. 1965. - V.250. - №1. - P. 79-85.

237. Cuningham-Rundels S., Cuningham-Rundels C., Dupont В., Good R.A. Zinc-induced activator of humen B-lymphocytes // Clin.Immunol. and Immunopath.-1960.-Vol. 16.-P.115-122.

238. Deschaux P., Rouabhia M. The thymus: key organ between immunologic and endocrinologic systems // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1987. - V.496. - P. 49-55.

239. Drews J. A role for immune stimulation in the treatment of microbial infection. -Infection, 1980, Vol.8, P. 2-4.

240. Goldstein A.L. Correction of T-cell function by thymosin in New Zeland mice // J. Immunol. 1974. - Vol. 113.- №3. - P. 1068-1071.

241. Goldstein A.L., Guha A., Zatz M.M. et al., Purification and biological activity of thymosin, a hormone of the thymus gland. // Prog. Nat. Acad. Sci. USA 1972.- Vol. 69. №7. - P. 1800-1803.

242. Goldstein A.L., Low T.L.K., Rossio J.L. et. al. In immune Modulation and Control by Adjuvanty Therapy. Ed. M.A.Chirigos. - New York. - 1978. - P. 281291.

243. Goldstein A.L., Slater F.D., White A. Preparation, assay and partial purification of a thymic lymphocytopoietic factor (thymosin). // Prog. Nat. Acad. Sci. USA - 1966. - Vol. - 56. - №3. - P. 1010-1017.

244. Goldstein A.L., White A., Guha A. Ontogenesis of cell mediated immunity in murine thymocytes and spleen cell and its acceleration by thymosin a thymic hormone. //J. Immunol. - 1971. - Vol. 106. - №3. - P. 773-780.

245. Goldstein G., Schedi M.P., Boyse E.A., Schlesinger D.N., Van Wauwel A. Synthetic pentapeptide with biological activity characterisric of the thymic hormone thymopoeietin // Scienc. 1979. - Vol. 204. - № 4399. - P. 1309-1310.

246. Good R.A., Dalmasso A.P., Martiner G. et al. The role of the thymus in development of immunologie capasiti in rabbits and mice. // J. Exptl. Med. -1962.-Vol. 116.-№5.-P. 773-795.

247. Good R.A., Martinez C., Gabielsen A.E. In: The thymus in immunobiology. / Eds Good R.A., Gabielsen A.E. N.Y.: Hoeber- Harper 1964. - P. 3.

248. Harmon B.G., Miller E.R., Noefer J.A., Ulreu D.E., Luecke R.W. Relationschip of specific nutrient deficiencies to antibodi production in swin // II. Pantothenic acid, pyridoxine or riboflavin // J. Nutrition. 1963. - 79. - P. 269.

249. Harris T.N., Rhoads J., Stokes J. A Study of the role of the thymus and spleen in the formation of antibodies in the rabbit. // J. Immunol. 1948. - Vol. 58. - № l.-P. 27.

250. Jerzy L. Immunomodulators thymus factor X (TEX) and Levamisole in immune reactions and inflamatory processes // Arch. Immunol. Et. Ther exp. -1981. - V. 29. - №2. - P. 121-132.

251. Jones В., Janeway C.A., Jr. Cooperative interaction of B-lymphocytes with antigen-specific helper T-lymphocytes. // Nature. -1981. Vol. 292. - P. 547-549.

252. Jondal M., Holm J., Wigrell H. Surface markers of human T and В -Lymphocytes.// J. Exp. Med. - 1912. - Vol. 136. - №2. - P. 207-215.

253. Julius M.N., Simpson E., Hezzenberg L.A. // Eur. J. Immunol. 1973. - №3. -P. 645.

254. Kaufman D.B. Maturational effects of thymic hormones on human helper andsuppressors T-cells: effects of FTS («Fac.-teur Thymique Srigue») and thymosin // Clin. Exp. Immunol. 1980. - Vol. 39, №3. - P. 722-727.

255. Keane R.M., Munster A.M., Birmingham W. et al. Suppressor cell activity after major injuri: Indirect and direct functional assays. // J. Trauma: 1982. -Vol.22.-№9.-P. 770-773.

256. Kenady D.E., Choroitien P.B., Potvin C., Simon B.M. Thymosin reconstitution of T-cell deficit in vitro in cancer patient // Cancer. 1977. - Vol. 39, №2. - P.m 375-384.

257. Kerman R.N., Smith R., Stefany S.S., Ezdinly E.Z. Active T-rosetteforming cells in the peripheral blood of cancer patients // Cancer Res. 1976. - Vol. 36. -№9. - P. 3274-3278.

258. Law L.W., Goldstein A.L., White A. Influence of Thymosin on immunological competence of lymphoid cells from thymectomized mice // Nature. 1968. -Vol.219, №5161. -P.1391-1392.

259. Lederer E. // Adjuvances in Immunomodulation. 1988. - P. 9-36.

260. Lehner Т., Avery J., Jones T. The role of human antigen specific T8+ cell subset in antigen presentation fiinchion and controsupression. // Clin, and Exp. Immunol. 1985. - Vol. 61. - №1. - P. 203-211.

261. Marrak P., Kappler I.W., Kettman J.R. The frequency and acnivity single helper T-cell // J. Immunol. 1974. - Vol. 113. - №3. - P. 830-834.

262. Mc. Donald D.M. Lymphocyte receptors // Brit. J. Dermatol. Suppl. 1982. -Vol. 107.-№23.-P. 69-89.

263. Miller I. F. A. P., Osoba D. Current concepts of the thymus // Phisiol. Rev. -1972. Vol. 47. - №3. - P. 437-445.

264. Mudron P., Vrzgulona N. Vitamin E a selen pri zvysovani priro-dzenej odolnosti hospodarskych zvierat // Veterinarstvi.- 1988. 38. - №8. - P. 369-371.

265. Osoba D. The effects of thymus and other lymphoid organs enclosed inmillipore diffusion chambers on neonatally thymectomired mice // J. Exptl. Med., 1965. Vol.122. - №3. - P. 633-650.

266. Pilet С. Properties of a new immunostimulant applications in animal and human therapeutics // J.Japan Veter.Med.Assn. 1991. - 77. - №12. - P.1188-1191.

267. Radu J, Mihalanche D. Detection of solubia antigens by the revense passive haemagglutination assay // Roum.Arch.Microbiol. 1992. - 51. - №4. - P.205-211.

268. Robins R.K. Nucleosides and nucleotides: past, present, future // Annu.N.Y.Sci. 1975. - Vol.225. - P. 597-610.

269. Rhodes J., Oliver S. Retinoids as regulator of macrophage function // Immunol.- 1980. Vol. 40. - P. 467-472.

270. Role of Thymus Humoral Factor, a Thymic Hormone in the physiology of the Thymus // Trainin N., Umill Т., Klein В., Klein I. // Polipeptide Hormones / Ed. By R.F.Beers and E.G.Bassett №4: Raven Press., 1980. - P. 467-488.

271. Schiesinger D.P., Goldstein G. The aminoacid Sequence of Thymopoetin II // Cell. 1975. - Vol.5, №2. - P. 361-365.

272. Segal S., Cohen I.R., Feldman M. Thymus-derived lymphocytes. Humoral and cellular reactions distinguished by hydrocortisone // Science. 1972. - Vol.175. -№4026.-P. 1126-1128.

273. Shore A., Dosch H.M., Gelfand E.W. Induction and separation of antigendependent T helper and T supressor cell in man // Nature. 1978. -Vol.274. - №5671. - P. 586 - 587.w

274. Stewart-Tull D.E.S., Parant M. Immunopotentialors in vaccines: a dream to areality // Ann. Immunol. Hung. 1966. - Vol.26. - №1. - P. 197-223.

275. Stewart-Tull D.E.S. New vaccine presentation approaches // World Biotech. Rept., 1966. Vol.1. - P. 231-237.

276. Thymic humoral factor in the assess ment of T-lymphocytes in a patient with T-cell chronic lymphocytic leukemia / Douer D.Spohat В., Djaldetti M. e.a. // Israel. J.Med.Sci., -1978. Vol.14, №8. - P. 870-875.

277. Wara D.W., Goldstein A.L., Doyle W., Ammann A.J. Thymosin activity in-Щ patient with cellular immunodeficiency // N.Angl.J.Med. 1975. - Vol.292, №1.1. P. 70-81.