Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Влияние иммунизации суягных овцематок на становление иммунобиологического потенциала у их потомства

Р Г Б ОД

о б '

ПОСТНИКОВ ЕВГЕНИЙ ИВАНОВИЧ

ВЛИЯНИЕ ИММУНИЗАЦИИ СУЯГНЫХ ОВЦЕМАТОК НА СТАНОВЛЕНИЕ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА У ИХ ПОТОМСТВА.

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

На правах рукописи—

С

Ставрополь 1997

Работа выполнена в Ставропольской государственной сельскохозяйственной академии

Научный руководитель : заслуженный деятель науки Р.Ф.,

доктор биологических наук, профессор А.Ф. Дмитриев

Официальные оппоненты : член корреспондент ААО,

доктор биологических наук, профессор Ф.А. Мещеряков кандидат биологических наук, старший научный сотрудник Л.Н. Чижова

Ведущая организация: Донской государственный аграрный

университет

Защита состоится « 16. » января 1998 г. в 10 часов на заседании специализированного совета К120.53.01. в Ставропольской государственной сельскохозяйственной академии. 355014 г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 12.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ставропольской государственной сельскохозяйственной академии.

Автореферат разослан << » 1997 г.

Ученый секретарь специализированного совета

к.вл.

доцент А.П. Боголюбова

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Важнейшей задачей животноводства является получение полноценного приплода и выращивание здорового молодняка. Одним го резервов для решения этой задачи является своевременное и научно-обоснованное проведение ветеринарных мероприятий, направленных на борьбу с инфекционными болезнями новорожденных. По мнению Г.С. Прохорова (1989), Г.Ч, Бондаренко (1993) падеж ягнят в первые недели после рождения достигает 50% от общего числа смертности молодняка за первый год жизни. Поэтому, остается еще недостаточно решенной проблема изыскания эффективных и технологичных по своему применению средств профилактики и лечения заболеваний молодняка. Важным способом профилактики инфекционных заболеваний является иммунизация животных путем введения соответствующих антигенов.

Известно, что у новорожденных ягнят в неонатальный период основная роль в противоинфекционной защите организма принадлежит молозиву. Колостральный иммунитет, приобретенный ягнятами от естественно переболевших или вакцинированных овцематок является одним из важных механизмов, выработанных в процессе эволюции животных и надежным средством специфической защиты молодняка в первые дни жизни от ряда инфекций (Ю.Н. Федоров, 1988; В.А. Седов, A.A. Бойко, 1991 и др.).

Напряженность колострального иммунитета у ягнят зависит от иммунологического состояния матери, показателем которого является уровень сывороточных и молозивных антител (Я.Р. Коваленко, Ю.Н.Федоров и др., 1975; Ю.Н. Федоров, 1981). Поэтому многие исследователи рекомендуют вакцинировать овцематок в поздней стадии суягности с целью накопления высокого уровня антител в молозиве. Однако сложившаяся за многие годы практика проведения противо-эпизоотических мероприятий нацеливала ветеринарных специалистов прежде всего на выполнение плана без учете физиологического состояния организма. Традиционная схема иммунопрофилактики инфекционных болезней складывалась годами, в зависимости от появления новых эпизоотий, новых вакцин и других лечебно-профилактических средств. В определенных условиях позитивный результат от иммуни-

зации животных трансформируется в негативный и вместо стойкого напряженного иммунитета получается извращенный иммунный ответ (В.А. Апалькин, 1995).

Учитывая вышеизложенное, представленная научная работа направлена на решение, актуальных задач, имеющих важное теоретическое и практическое значение.

Цель и задачи исследования. Провести научное обоснование мультииммунизащш овцематок во время беременности и ее влияние на становление иммунобиологического статуса у их потомства.

Для разрешения были поставлены следующие задачи:

1. Изучить влияние многократной вакцинации на показатели морфологического и биохимического состава крови, а также на факторы неспецифической реактивности у суягных овцематок.

2. Изучить иммунобиологический статус новорожденных ягнят в зависимости от состояния материнского организма.

3. Выяснить влияние интенсивности иммунгизации беременных маток на процессы роста, развития и сохранности ягнят в постнаталь-ном онтогенезе.

Научная новизна. Нами впервые установлена связь между интенсивностью антигенного воздействия в период беременности овцематок и становлением иммунобиологического статуса у их потомства. Впервые исследовано становление имммунобиологического статуса у овец северокавказской породы. Определены периоды иммунодефицита у ягйяг при различной интенсивности иммунизации их матерей в период беременности.

Практическая ценность работы. На основании данных, полученных при изучении становления иммунобиологического потенциала у новорожденных ягнят в зависимости от иммунологического статуса их матерей в процессе беременности, даны предложения по совершенствованию проведения профилактических мероприятий против болезней новорожденных ягнят.

Основные положения и практические предложения, вытекающие из выполненных исследований, вошли в рекомендации "Система про-

тивоэпизоотических мероприятий в овцеводческих хозяйствах Ставропольского края" (рассмотрены и одобрены на заседании НТС управления сельского хозяйства, 16.12.1996 года, протокол №3).

Положения, выносимые на защиту:

- интенсивное антигенное воздействие, оказанное на суягных маток, негативно влияет на становление иммунобиологического потенциала у их потомства.

- рост, развитие и сохранность ягнят находятся в зависимости от интенсивности иммунизации их матерей в период суягности;

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены, обсуждены и одобрены на:

- научных конференциях Ставропольской государственной сельскохозяйственной академии (Ставрополь, 1993-1996);

- Н-й Всероссийской конференции морфологов , физиологов, экологов, врачей разных специальностей (Саратов, 1993);

Всероссийской научно-производственной конференции "Гигиена, ветсанитария и экология животноводства" (Чебоксары, 1994);

Международной научно-практической конференции "Актуальные проблемы ветеринарносанитарного контроля сельскохозяйственной продукции" (Москва, 1995);

Публикация. По теме диссертации опубликовано 8 научных работ, в которых изложены основные материалы выполненной работы.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 151 странице текста машинописного формата и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы и приложений. Текст иллюстрирован 32 таблицами, 18 рисунками. Список использованной литературы содержит 305 источника, в том числе 135 зарубежных авторов.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Материалы и методы исследований

Работа по теме диссертации выполнялась в течение 1992-1997 г.г. на кафедре эпизоотологии и микробиологии (СГСХА) и в учебно-опытном хозяйстве.

Методика исследования определялась необходимостью получения данных, объективно характеризующих изменение показателей иммунобиологического потенциала постнатального развития ягнят при различных схемах вакцинации их матерей во время суягности.

Объектами исследования были: суягные овцематки и полученные от них ягнята.

В группы отбирали животных- аналогов по возрасту, породе, живой массе, клиническим показателям. В соответствии с поставленными задачами исследования проведены с применением зоогигиени-ческих, клинических, гематологических и иммунологических методов.

Для проведения исследований овцематки по принципу подобия и аналогов были разделены на три равные группы (по 20 голов в каждой). Первая группа была контрольной и животных не иммунизировали. Суягных овцематок второй группы иммунизировали инактивиро-ванной эмульсинвакциной против хламидиозного аборта овец однократно, и двукратно с интервалом в 25 дней поливалентным анатоксином против ююстридиозов овец. Третью группу суягных овцематок иммунизировали такими же биопрепаратми как « вторую группу и дополнительно сухой живой вакциной против листериоза сельскохозяйственных животных га штамма - "АУФ" двукратно, и однократно живой сухой вакциной против сальмонеллеза овец. Все вакцинации и их сроки проводили согласно наставлению и инструкции прилагаемой к каждой вакцине. Овцематок иммунизировали по следующей схеме.

Табгица 1. Схема иммунизации овцематок

ФУППЫ ВремЯ—~^>Ф1вотных (месяц, неделя, дни) Схема иммунизации овец

2 группа 3 группа

НОШРЬ 1

II

III

IV 27.11 Сальмонеллез

ДЕКАБРЬ I

II 10.12 Клостридиоз Клостридиоз

III

IV

ЯНВАРЬ I 02.01 Клостридиоз Клостридиоз

II

III 16.01 Хпамидиоэ Хламидиоз

IV 30.01 Листериоз

ФЕВРАЛЬ I

II 09.02 Листериоз

III

IV

Примечание:

Первая группа животных иммунизации не подвергалась. Иммунизацию животных второй и третьей группы проводили против:

сальмонеллеза - осуществляли сухой живой вакциной против сальмонеллеза овец.;

брадзота, энтеротоксемш, анаэробной дгаентсрии- осуществляли поливалентным анатоксином против клостридиозов овец.;

хламидиоза - осуществляли инактивированной эмульсин-вакциной против хламидиозного аборта овец.;

листериоза - сухой живой вакциной против листериоза с/х животных из шт. - "АУФ".

Таблица 2.

Схема проведения исследования на овцематках

Время п] роведения исследований

№ п/п Наименование исследований после осеменения за 1,5 месяца ДО окота за 7-14 дней ДО окота через 5-7 дней после ягнения

1. Определение морфологического состава и белковой картины крови: эритроцитов, гемоглобина, СОЭ, лейкоцитов, общего белка, альбуминов, а,р,у- глобулинов. + + +

2. Определение показателей неспецифической реактивности: лизоцим-ной,бактерицидной и фагоцитарной активности. + + +

3. Определение показателей клеточного и гуморального иммунитета

3.1. Содержание Т- и В- лим-'фоцитов + +

3.2. Определение концентрации иммуноглобулинов классов О и М. + + +

У овцематок определяли содержание в крови: эритроцитов, общего белка, альбуминов, а,р,у- глобулинов, а также лизоцимную, бактерицидную и фагоцитарную активность. Эти исследования проводили перед иммунизациями, затем за 7-14 дней и через 7 дней после ягнения. Количество Т- и В- лимфоцитов определяли за 7-14 дней до и

сразу после окота. Концентрацию иммуноглобулинов классов в и М определяли за 1,5 месяца, 7-14 дней до ягнения и сразу после окота.

■ От опытных и контрольных групп овцематок были получены яг-нота, го числа которых были сформированы подопытные и контрольная группы. Номер группы матерей соответствовал таковому у их потомков.

Таблица 3.

Схема проведения исследований на ягнятах

№ п/п Наименование исследований Сроки проведения исследований возраст (суток)

1. Изучение функционального развития Измерение температуры тела, частоты пульса и количества дыхательных движений за 1 мин. 1,30

2. Изучение показателей морфологического состава и белковой картины крови. Определение количества: эритроцитов, гемоглобина, СОЭ, лейкоцитов, общего белка, альбуминов, а,р,у- глобулинов. 1,30,120

3. Изучение показателей неспецифической реактивности. Бактерицидная, фагоцитарная и лизоцим-ная активность. 1,30,120

4. Изучение динамики содержание Т- й В- лимфоцитов 2,7,14,30,60,90,120

5. Изучение динамики содержания иммуноглобулинов классов й и М. 1,7,14,30,45,65,90

1. Зоогигиенические исследования'

а) определение физических свойств воздуха: температуры и влажности (аспирационный психрометр Ассмана, термографы, гигрографы), скорости движения (кататермометр);

б) определение химического состава воздуха: содержание аммиака (универсальный газоанализатор УГ-2).

Зоогигиеническую оценку воздушной среды проводили по общепринятым методам исследования микроклимата триады в сутки, три дняподряд, через каждые 10 дней.

2. Клинические исследования:

- температуру тела (ртутный термометр), частоту пульса и его ритмичность определяли по челюстной и хвостовой артериям, частоту дыхания по движению брюшных мышц; массу тела сразу после рождения

3. Биохимические исследования:

- определение общего белка колориметрическим методом и белковых фракций сыворотки крови методом электрофореза (В.Я. Антонов, 1976).

4. Гематологическое исследование:

- определение в крови количества эритроцитов и лейкоцитов под- ■ считывали в счетной камере Горяева, скорость оседания эритроцитов в аппарате Т.Н.Панченкова, концентрацию гемоглобина по Сали.

5. Иммунологические исследования:

- бактерицидная активность фотонефеломегрическим методом по О.В._Смирновой и Т. А. Кузьминой (1966);

- лизоцимная активность по Каграмановой (1972);

- опсоно-фагоцитарная реакция по B.C. Гостеву (1950);

- определение количества Т- и В- лимфоцитов методом Е-Рок в модификации М.П. Неустроева (1980);

- определение количества иммуноглобулинов классов G и М методом радиальной иммунодиффузии по Манчини (1965) в модификации Ю.Н. Федорова (1985);

- реакция агглютинации по Райту;

- реакция связывания комплемента по общепринятой методике с использованием стандартного набора для исследования сыворотки крови овец на хламндиозный аборт.

У ягнят в суточном возрасте и к отбивке определяли живую массу, температуру тела, пульс и количество дыхательных движений за 1 мин. Показатели морфологического состава и белковой картины крови определят на 1,30,60,120 день после рождения. Показатели факторов неспецифической реактивности определяли на 1 и 120 день после рождения.

Для изучения колострального иммунитета у ягнят пробы крови брали для определения Т- и В- лимфоцитов на 2, 7, 14, 30, 60, 90, 120 день после рождения и на 1, 7, 14, 30, 45, 65, 90 день после рождения для изучения динамики содержания иммуноглобулинов классов G и М.

Исследования проведены с повторяемостью 2 раза, использованы 156 овцематок и 206 ягнят.

Результаты экспериментальных исследований обработаны статистическим методом с вычислением средних арифметических величин и их статистических ошибок (М±т), а также определена достоверность сравниваемых показателей по критерию Сгьюдента (A.C. Каминский, 1964).

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2.1. Микроклимат в помещении для подопытных овец

В период исследований воздушная среда в зоне нахождения всех опытных животных характеризовалась следующими показателями.

В овчарне, где содержались опытные и контрольная группы овцематок, средняя температура воздуха была соответственно: в декабре + 10° С;.в январе + 7° С; в феврале + 7° С; в марте + 12° С.

В родильном отделении, где содержались ягнята вместе с овцематками: в декабре + 14° С; в январе + 12° С; в феврале + 13° С; в марте+15° С.

Температура воздуха снаружи была зимой -7° С; весной +11,2°С.

Относительная влажность воздуха в овчарне: в декабре 76%; в январе 75%; в феврале 77%; в марте 72%. В родильном отделении: в декабре 71; в январе 72%; в феврале 74%; в марте 70%.

Скорость движения воздуха в овчарне в декабре, январе, феврале и марте была соответственно: 0,3 м/с; 0,34 м/с; 0,48 м/с; 0,46 м/с. В родильном отделении: 0,3 м/с; 0,32 м/с; 0,42 м/с; 0,41 м/с.

Содержание аммиака в воздухе овчарне и родильного отделения было в пределах 20-24 мг/м3 и 10-13 мг/м3.

2.2.2. Оценка иммунобиологического состояния овцематок.

Как показали исследования, после проведения комплексной иммунизации согласно ранее описанных схем, за 7-14 дней до окота у маток третьей группы лейкоцитов содержалось на 35,8% больше, чем у животных контрольной группы (р<0,01). Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) у овцематок третьей опытной группы составляла 12,7+0,7 мм за 24 часа, что на 25% выше, чем у животных первой группы (р<0,001). Однако, в это же время (за 7-14 дней до окота), у животных третьей группы содержалось значительно меньше гемоглобина, чем во второй и первой группах, различия составили соответственно 12,1 и 13,7% (р<0,001).

При сопоставлении показателей количества лимфоцитов у овцематок за 7-14 дней до окота отмечены не существенные различия. При этом количество лимфоцитов у маток третьей группы было выше по сравнению с матками второй группы на 6,1% и на 15,5% по сравнению с животными контрольной группы.

В это же время относительное количество Т-лимфоцигов у овцематок третьей группы составляло 4,62±0,44 тыс/мкл, а абсолютное 72,2+2,1%, у животных из второй и первой групп эти показатели были соответственно 4,10±0,32 тыс/'мкп, 73,4±2,5% и 3,82±0,26 тыс/мкл, 70,7±1,9%. Относительное и абсолютное количество В-лимфоцитов у овцематок третьей группы было выше, чем у животных второй и первой групп, и составляло 1,49±0,16 тыс/мкл и 23,3±1,8%, в то время как у овцематок второй группы 1,33±0,12 тыс/мкл и 22,4±1,2%, а в контрольной груше 1,09+0,09 тыс/мкл и 20,2±1,6%.

1 группа 2 группа 3 группа

Р1- иммуноглобулины класса М Р2- Иммуноглобулины класса Э

1.5.9- 30-45 дней до окота, г/л

2.6.10- 7-14 днейдо окота, г/л

3.7.11- после окота, г/п

Рисунок 1. Содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови овцематок (п=21)

1 группа 2 группа 3 группа

Р1- Эритроциты, 1012/л Р2- СОЭ, мм за 24 часа рЗ- Лейкоциты, 109 /Л Р4- в- глобулины, г/л Р5- г- глобулины, г/л Р6- Общий белок, г/л Р7- Гемоглобин, г/л 1\5,9- После осеменения

2.6.10- За 7-14 дней до ягнения

3.7.11- Через 7 дней после окота

Рисунок 2. Динамика показателей морфологического состава и белковой картины крови у овцематок

Анализируя показатели гуморального иммунитета (рис.1) у суягных овцематок за период 1,5 месяца до окота и сразу после окота видно, что концентрация иммуноглобулинов класса в в сыворотке крови у овцематок контрольной группы возросла на 14,5% и составила 28,28+0,85 г/л, в то время как у животных второй группы на 22,8% и составила 31,82±1,64 г/л, а у овцематок третьей группы на 24,3% и составила 32,14± 1,82 г/л.

Таким образом, вакцинация овцематок во время суягности двумя живыми и двумя инакгивированными вакцинами обусловливает большее содержание лейкоцитов, лимфоцитов и их субпопуляций, как в относительных, так и в абсолютных единицах, а также иммуноглобулинов классов О и М, и увеличение скорости оседания эритроцитов. Однако, количество эритроцитов и содержание гемоглобина, у них было ниже, чем у животных, которых иммунизировали двумя инак-тивированными вакцинами или не иммунизировали вовсе.

2.2.3. Морфологическая и функциональная зрелость ягнят, рожденных овцематками с различным иммунологическим состоянием

У ягнят опытных групп в однодневном возрасте температура те-. ла была39,4±0,41°С в третьей и 39,7±0,34°С во второй группах, тогда как в контрольной 39,9±0,22°С. Пульс соответственно составлял у ягнят третьей группы 198±17,8 за 1 мин., во второй 19,1±18,2 за 1 мин., а в контрольной 188±16,8 за 1 мин., различия между группами по этим показателям мало существенны.

Живая масса у одинцовых ягнят, рожденных не вакцинированными овцематками, была на 14% выше, чем у их сверстников из третьей и на 8% из второй групп (р<0,01).

Различия наблюдаются у ягнят обоего пола. Различия по живой массе в контрольной и третьей группе достоверны (р<0,05) и состав' ляют соответственно 0,34 кг среди баранчиков и 0,36 кг среди ярочек (р<0,05). В отличии от одинцов, у ягнят-двоен существенных различий в зависимости от иммунологического состояния матерей не установлено, живая масса ягнят-двоен несколько ниже, чем у ягняг-одинцов, так различия в контрольной группе составляют 0,74 кг, во второй и третьей группах соответственно 0,5 кг и 0,36 кг (р<0,01).

гдняя Живая масса по всем ягнятам в контрольной группе составила 3,33 кг, а в третьей группе 3,03 кг (р<0,02).

Следовательно, количество иммунизации овцематок в период суягности оказывает влияние на функциональное развитие и живую массу их потомства.

2.2.4. Проявление клеточных и гуморальных факторов естественной резистентности у новорожденных ягнят

Установлено, что у новорожденных ягнят контрольной группы эритроцитов содержалось на 24,8% больше, чем у их сверстников из третьей группы (р <0,001) и на 18,5% больше, чем у ягнят второй груп-ч!л (р<0,01). Отмечалась разница и в содержании гемоглобина. В частности, у ягнят контрольной группы гемоглобина содержалось больше, чем у их сверстников из второй и третьей групп соответственно на 15,7% (р<0,001) и на 6% (р<0,01). Скорость оседания эритроцитов же, наоборот, была выше у ягнят третьей группы. Различия между третьей и контрольной группами составили 34,5% (р<0,001), а между третьей и второй группами 25,8% (р<0,001).

Таким образом, разница в содержании эритроцитов, СОЭ и концентрации гемоглобина у новорожденных ягнят указывает на то, что иммунологическое состояние материнского организма оказывает влияние на систему крови у их потомства.

Ягнята, рожденные овцематками, которых в период беременности вакцинировали по второй схеме (табл.1), в сыворотке крови содержали на 4,5% больше общего белка и на 16,5% у- глобулинов, чем их сверстники из контрольной группы. По бактерицидной и лизоцим-ной активности сыворотки крови группы ягнят между собой существенно не отличались.

На 2-е сутки после рождения у жняг первой группы абсолютное количество Т- лимфоцитов (рис.3) составило 1,64+0,21 тыс/мкл или 84,1% от общего числа лимфоцитов.

Через неделю после рождения как абсолютное, так и относительное содержание Т- клеток увеличилось до 1,96+0,25 тыс/мкл (85,4%), в 14 дневном возрасте составило 2,67±0,22 тыс/мкл (86%), в 30 дневном - 3,96+0,31 тыс/мкл (83,2%), в 60 дневном - 4,12+0,28 тыс/мкл (82,5%), в 90 дневном - 3,86±0,24 тыс/мкл (82,1%), в 120 днев-

1 2 3 * 5 6 7 ВОЗРАСТ

1- 2 дня, 2-7 дней, 3-14 дней, 4-30 дней, 5-60 дней, 6-90 дней, 7-120 дней

Рисунок 3. Динамика содержания Т-лимфоцитов у ягнят первой группы,(тыс/мкл)

12 3*56

ВОЗРАСТ

1- 2 дня, 2-7 дней, 3-14 дней, 4-30 дней, 5-60 дней, 6-90 дней, 7-120 дней

Рисунок 4 . Динамика содержания Т-лимфоцитов у ягнят второй группы,(тыс/мкл)

1 2 3 4 5 8 7 ВОЗРАСТ

1- 2 дня.. 2-7 дней, 3-14 дней, 4-30 дней, 5-60 дней, 6-90 дней, 7-120 дней

Рисунок 5 Динамика содержания Т-лимфоцитов у ягнят третьей группы,(тыс/мкл)

ном - 3,77+0,28 тыс/мкл (78,5%). У ягнят второй группы (рис.4) в двухдневном возрасте абсолютное и относительное содержание Т-лимфоцитов было в пределах 1,88+0,32 тыс/мкл (83,8%). Через неделю после рождения абсолютное содержание Т- клеток составляло 1,86+0,41 тыс/мкл, а относительное 85,2%, в 14 дневном возрасте 2,56+0,29 тыс/мкл (87,5%), в 30 дневном - 4,09±0,44 тыс/мкл (85,1%), в 60 дневном 3,71+0,32 тыс/мкл (84,2%), в 90 дневном 3,79+0,48 тыс/мкл (83,5%), в 120 дневном 3,72±0,61 тыс/мкл (80,1%). У ягнят третьей группы (рис.5) этот показатель соответственно составлял 2,09±0,42 тыс/мкл (81,1%), 1,91±0,36 тыс/мкл (83,7%), 2,51±0,55 тыс/мкл (85,41%), 3,89+0,61 тыс/мкл (86,1%), 3,7±0,72 тыс/мкл (83,1%), 3,68±0,42 тыс/мкл (82,2%), 3,62±0,88 тыс/мкл (79,1%).

При анализе выше приведенных данных видно, что абсолютное содержание Т- лимфоцитов у ягнят в третьей опытной группе на второй день после рождения было выше на 10,1%, чем во второй группе и на 21,6% выше, чем в контрольной (р<0,05). Различия в 7-ми дневном возрасте составили 6,7% и 2,6%, в 14-ти дневном возрасте абсолютное содержание Т- лимфоцитов было больше у ягнят в контрольной группе, различия составили 4,2% по сравнению со второй и 6% по сравнению с третьей группами, в 2-х месячном возрасте эти различия уже составляли 10,2% (р<0,05). В 3-х месячном возрасте у ягнят второй-группы Т- клеток содержалось на 2% меньше, чем в контрольной и на 3% больше, чем в третьей группе, тогда как в 4-х месячном возрасте различия составили соответственно 1,2% и 2,7%.

, Анализируя исследования по определению количества В- лимфоцитов у ягнят (рис.6,7,8), необходимо отметить, что у животных третьей группы в возрасте двух суток абсолютное количество лимфоцитов было больше на 39%, чем во второй и на 28%, чем в контрольной группах (р<0,05) и составляло соответственно 0,36+0,06 тыс/мкл (14,9%), 0,22+0,09 тыс/мкл (14,1%), 0,26 тыс/мкл (13,4%). Через 5 суток их количество уменьшилось до 0,32±0,09 тыс/мкл (13,9%) в третьей группе, а в других группах наоборот отмечалось увеличение абсолютного количества В- клеток до 0,39+0,11гыс/мкл (13,2%) и до 0,31+0,05 тыс/мкл (12,9%) соответственно во второй и контрольной группах. В 14-ти дневном возрасте абсолютное и относительное содержание В- клеток в третьей, во второй и контрольной группах соот-

ВОЗРАСТ

1- 2 дня, 2-7 дней, 3-14 дней, 4-30 дней, 5-60 дней, 6-90 дней, 7-120 дней

Рисунок 6. Динамика содержания В-лимфоцитов у ягнят первой группы, (ты с/мкл )

1 2 3 * ■ 5 6 7

ВОЗРАСТ

1- 2 дня, 2-7 дней, 3-14 дней, 4-30 дней, 5-60 дней, 6-90 дней, 7-120 дней

Рисунок 7. Динамика содержания В-лимфоцитов у ягнят второй группы (ты с/мкл )

1 2 3 * 5 6 7

ВОЗРАСТ

1- 2 дня, 2-7 дней, 3-14 дней, 4-30 дней, 5-60 дней, 6-90 дней, 7-120 дней

Рисунок 8. Динамика содержания В-лимфоцитов у ягнят третьей группыдтыс/мкл'

ветственно равнялось 0,29+0,11 тыс/мкл (10,3%), 0,49±0,12 тыс/мкл (12,2%), 0,55±0,12 тыс/мкл (13,5%); в 30 дневном возрасте 0,57±0,21 тыс/мкл (12,8%), 0,69+0,16 тыс/мкл (14,4%), 0,67+0,09 тыс/мкл (14,2%); в 2-х месячном возрасте - 0,61+0,22 тыс/мкл (13,6%), 0,54±0,11 тыс/мкл (12,3%), 0,79+0,11 тыс/мкл (15,9%); в 3-х месячном возрасте 0,64+0,18 тыс/мкл (14,4%), 0,7+0,14 тыс/мкл (15,6%), 0,7±0,13 тыс/мкл (16,4%); в 4-х месячном возрасте - 0,61±0,44 тыс/мкл (13,5%), 0,68+0,16 тые/мкл, 0,81±0,17 тыс/мкл (16,9%).

Таким образом, у ягнят третьей группы абсолютное содержание В- клеток в недельном возрасте было ниже на 18%, чем во второй и на 1% выше, чем в контрольной группах (р>0,05). В 14 дневном возрасте различия составили 41% и 48% (р<0,01), на 30 день - 17,4% и 15% (р<0,05), на 90 день - 8,6% и 16,9% (р>0,05), на 120 день - 11% и 25°/о (р<0,05) по сравнению с животными второй и контрольной групп.

Результаты исследований показали, что в сыворотке крови ягнят, полученных от вакцинированных во время беременности овцематок, отмечен более высокий уровень иммуноглобулннов класса в на 1-й и 7-й дни жизни, а в последующие возрастные периоды наблюдали снижение их количества.

Так у ягнят третьей группы иммуноглобулинов класса О в первый день составили 32,23+0,6 г/л, на 7-й день - 26,47+0,88 г/л, на 14-й-день - 19,27±1,44 г/л, на 30-й день - 14,44±0,96 г/л, на 45-й день -12,82±0,78 г/л, на 65-й день - 12,75+0,7 г/л,на 90-й день16,86±0,88 г/л. Количество иммуноглобулинов М в эти сроки исследования было 3,1410,12 г/л, 2,12±0,16 г/л, 0,91+0,18 г/л, 0,63+0,09 г/л, 0,72+0,14 г/л, 1,04+0,12 г/л, 1,43±0,11 г/л. Тогда как у ягнят второй опытной группы количество иммуноглобулинов класса О составило соответственно 32,41±0,46 г/л, 28,6210,84 г/л, 22,42±1,22 г/л, 15,81±1,01 г/л, 14,12±0,62 г/л, 14,75+0,47 г/л, 18,66+0,51 г/л. Иммуноглобулины М в эти сроки: 3,12±0,18 г/л, 2,22±0,12 г/л, 1,0^+0,12 г/л, 0,72+0,24 г/л, 0,81+0,11 г/л, 1,41+0,19 г/л, 1,74+0,18 г/л. У ягнят же контрольной группы количество иммуноглобулинов класса в составило соответственно 30,84±0,58 г/л, 26,32+0,44 г/л, 21,44+0,82 г/л, 15,24+0,76 г/л, 14,93+0,48 г/л, 16,85+0,37 г/л, 20,41±0,39 г/л. Количество иммуноглобулинов класса М в эти сроки было: 3,33+0,21 г/л, 2,52+0,28 г/л, 1,11±0,22 г/л, 0,66+0,18 г/л, 1,4210,26 г/л, 1,6410,44 г/л, 1,92+0,18 г/л.

Р1- Эритроциты, 10 /л; Р2-^глобулины, г/л; РЗ- СОЭ, мм за 24 часа Рисунок 9. Характеристика гематологических показателей у новорожденных ягнят первой группы

Р1- Эритроциты, 10 /л; Р2-"у- глобулины, г/л; РЗ- СОЭ, мм за 24 часа

Рисунок 10. Характеристика гематологических показателей у новорожденных ягнят второй группы

Р1- Эритроциты, 10 /л; Р2-"^глобулины, г/л; РЗ- СОЭ, мм за 24 часа

Рисунок 11. Характеристика гематологических показателей у новорожденных ягнят третьей группы

Р1- Эритроциты, ю'г/л; Р2-Х- глобулины, г/л; РЗ- СОЭ, мм за 24 часа

Рисунок 12. Характеристика гематологических показателей у ягнят первой группы в месячном возрасте

Р1- Эритроциты, 101г/л; Р2-£- глобулины, г/л; РЗ- СОЭ, мм за 24 часа

Рисунок 13. Характеристика гематологических показателей у ягнят второй группы в месячном возрасте.

Р1- Эритроциты, 10 /л; Р2-~£- глобулины, г/л; РЗ- СОЭ, мм за 24 часа

Рисунок 14. Характеристика гематологических показателей у япчят третьей группы в месячном возрасте.

Выявлены определенные изменения уровня отдельных классов иммуноглобулинов. У ягнят третьей опытной группы, полученных от маток, которых в период суягности иммунизировали четырьмя вакцинам]!, в первый день после рождения иммуноглобулинов класса О было на 4,3% выше, чем у ягнят контрольной группы; на 1% ниже чем у ягнят второй группы (р>0,05), на 7-й день различия соответственно составили 1% и 7,6% (р<0,05). Начиная с двухнедельного возраста иммуноглобулинов класса О у ягнят третьей группы содержалось меньше, чем у их сверстников из других групп, так различия составили 14% со второй группой и 11,2% с контрольной (р<0,05). В 45 дневном возрасте различия более существенны и составляют соответственно 10% и 14% (р<0,05), в 65 дневном возрасте 13,6% и 24,4% (р<0,05), в 90 дневном возрасте 10% и 17,4% (р<0,05).

Отмечалась разница и в содержании иммуноглобулинов класса М. В частности, особенно четко это видно в следующие периоды: 45 дней - различия между второй и третьей, первой и третьей группами составили соответственно 12% и 49,3 (р<0,05), 65 дней - 26,3% и 46,6% (р<0,05), 90 дней -18% и 25,5% (р<0,05).

Исследования морфологического состава крови в месячном возрасте у ягнят показали, что у ягнят контрольной группы эритрощгтов и гемоглобина было больше, чем у их сверстников из опытных групп, а лейкоцитов меньше. У ягнят, полученных от не вакцинированных во время беременности овцематок эритроцитов содержалось на 10% и 18% больше, чем соответственно во второй и третьей группах (р<0,05). Различия в содержании гемоглобина составили соответственно 10% и 16,3% (р<0,05).

Таким образом, сопоставляя результаты исследований по показателям, характеризующим морфологический состав крови, (рис.9-14) состояние естественной резистентности у ягнят в динамике с момента рояодения, полученных от овцематок с различным иммунологическим состоянием, можно сделать заключение о том, что иммунизация во время беременности, а точнее ее интенсивность, оказывает существенное влияние на процессы роста и развития ягнят в фетальный период и проявление клеточных и гуморальных защитных реакций в период новорожденное™

2.2.5. Жизнеспособность потомства, полученного от овцематок с разным иммунологическим состоянием

Проведенные исследования показывают, что заболеваемость и падеж среди двоен выше, чем у одинцов. Так у ягнят одинцов в целом падеж составил 13%, то у двоен 28,3% (р<0,05).

Заболеваемость у одинцов составила 24%, а падеж 13%, у-однополых двоен соответственно 28% и 18%. У разнополых двоен эти показатели были значительно выше, заболеваемость 46,4%, а падеж 37,5%. Различия между этими группами животных статистически достоверны (р<0,01). Сравнивая показатели жизнеспособности у ягнят двоен, необходимо подчеркнуть, что среди разнополых ягнят заболеваемость была в 1,6 раза, а падеж в 2,1 раза выше, чем среди однополых (р<0,01). При анализе сопряженности между полом ягнят близнецов и их жизнеспособностью установлено, что падеж среди ярочек составил 35,2%, а среди баранчиков 21,2% (р<0,05). Имеют место различия мевду однополыми и разнополыми ярочками и баранчиками. У разнополых баранчиков падеж составил 28,6%, а у однополых 12,5%. У разнополых ярочек падеж составил 46,4%, в то время как у однополых 23,1%.

Заболеваемость и летальность ягнят, рожденных овцематками,-которых во время суяпюсти иммунизировали вакцинами, были в 1,38 и 1,83 раза выше, чем у потомства не иммунизированных овцематок.

Иммунизация- овцематок в период беременности оказывает большее влияние на женский, чем на мужской пол. Так, если разница по сохранности ярочек, рожденных иммунизированными й не иммунизированными овцематками, составила между первой и второй группами 15,7%, а между первой и третьей 24,6%, то между баранчиками эти показатели соответственно составляли 7% и 19,3%.

Таким образом, как видно из приведенных данных, интенсивность иммунизации матерей во время беременности существенным образом влияет на заболеваемость и сохранность их потомства.

ВЫВОДЫ

1. Иммунизацга матерей во время беременности против кло-стридиозов овец, сальмонеллеза, листериоза и хламидиоза негативно влияет на становление иммунобиологического потенциала и влияет на заболеваемость и сохранность их потомства.

2. Интенсивная иммунизация во время беременности сказывается на показателях морфологического и биохимического состава крови. Так перед ягнецием у,овцематок, которых иммунизировали двумя живыми и двумя инактивированными вакцинами (II схема), в крови содержалось больше на 35,8 % лейкоцитов и на 25% эритроцитов, чем у не вакцинированных овцематок.

3. Живая масса новорожденных ягнят зависит от количества вакцинаций их матерей во время беременности. Одинцы, рожденные •не иммунизированными овцематками, веси-д 3,76 кг, это на 14 и на 8% выше, чем их сверстники,1 соответственно полученные от иммунизированных овцематок по I и II схемам.

4. Морфологические показатели крови у новорожденных ягнят зависят от. иммунобиологического состояния их матерей. У потомства, полученного от не вакцинированных овцематок, в крови содержалось 9,76±0,38х1012 /л эритроцитов и 102±2,0 г/л гемоглобина. Это на 18,5 и на 6% выше, чей у их сверстников, полученных от матерей иммунизированных по I (схеме, и на 24,8 и 15,7% выше, чем у ягнят, полученных от овцематок иммунизированных по II схеме. Однако скорость оседания эритроцитов была на 34,5% выше у ягнят, полученных от матерей иммунизированных во время беременности четырьмя вакцинами (II схема), чем от не иммунизированных овцематок.

5. В крови ягнят, полученных от не иммунизированных маток, в месячном возрасте количество эритроцитов составило 9,98±0,32х1012/л, а гемоглобина 117±2,5 г/л. У их сверстников, полученных от матерей иммунизированных во время беременности по II схеме, эритроцитов было на 11%, а гемоглобина на 18% меньше.

6. У новорожденных ягнят северокавказской породы в крови циркулирует 3,88+0,41x109 /л лейкоцитов, среди них 50,3% лимфоцитов. Т- клетки составляют 84,2±1,3% или 1,64±0,21х109/л, а Р- клетки 13,4±1,5% или 0,07х109/л. В.двухдневном возрасте в крови ягнят, по-

лученных от контрольных овцематок абсолютное количество Т- лимфоцитов было на 21,6%, а В- лимфоцитов на 28% ниже, чем у их сверстников, полученных от овцематок иммунизированных по II схеме.

7. Изучение иммунного статуса у потомства не вакцинированных овцематок с момента рождения и до 3 месячного возраста по срзвнению с их сверстниками, полученными от маток иммунизированных во время беременности пропев сальмонеллеза, клостридйозов, хламидиоза и листериоза, показало, что первые ягнята имели выше уровень показателей естественной резистентности. В- лимфоцитов на 14 день после рождения - 0,55 тыс/мкл и 0,29 тыс/мкл, на 30 день -0,67 тыс/мкл и 0,57 тыс/мкл, а на 60 день - 0,79 тыс/мкл и 0,61 тыс/мкл\

Т- лимфоцитов в эти дни 2,67 тыс/мкл и 2,51 тыс/мкл; 3,96 тыс/мкл и 3,89 тыс/мкл; 4,12 тыс/мкл и 3,7 тыс/мкл; иммуноглобулинов классз С на 14 день было 21,44 г/л и 19,27 г/л, на 30 день после рождения 15,24 г/л и 14,44 г/л, на 65 день - 16,85 г/л и 12,75 г/л; иммуноглобулинов класса М на 14 день после рождения 1,11 г/л и 0,91 г/л, на'30 день -0,66 г/л и 0,63 г/л, на 65 день - 1,64 г/л и 1,04 г/л.

8. Заболеваемость и летальность ягнят, полученных от вакцинированных во время беременности овцематок против сальмонеллеза, хламидиоза, листериоза и клостридиозов, были на 13,2 и 13,1 % (в 1,38 и 18,3 раза) выше, чем у потомства не иммунизированных овцематок.

9. Наибольшие различия в сохранности ягнят наблюдаются среди разнополых двоен. Различия между контрольной группой ягнят и ягнят, полученных от овцематок, иммунизированных по I схеме, составили 15%, а со сверстниками, полученными от маток иммунизированных по Н схеме 21,2%.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Предложены оптимальные схемы проведения профилактических мероприятий при инфекционных болезнях овец, которые включены в рекомендации 'Система противоэпизоотических мероприятий в овцеводческих хозяйствах Ставропольского края'.

2. Результаты исследований рекомендуется использовать в учебном процессе при изучении процессов становления иммунобиологического потенциала у новорожденных ягнят.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

1. Дмитриев А.Ф., Постников Е.И. Способ и средство определения неспецифической реактивности овец// Диагностика, лечение, профилактика инвазионных и инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных: Сб. научн.тр./ Ставроп. СХИ. - Ставрополь, 1993. - с.47-53.

2. Дмитриев А.Ф., Постников Е.И. Реакция системы мать-плод-новорожденный на антигенное воздействие// 2-я Всероссийская конференция морфологов, физиологов, экологов, врачей разных специальностей. Саратов, 1993. Часть 3, с.56.

3. Постников Е.И., Дмитриев А.Ф. Влияние иммунизации суягных овцематок на показатели морфологического состава и белковой картины крови у их потомства// Диагностика, лечение и профилактика заболеваний с.-х. животных: Сб. науч.тр./ Ставроп. ГСХА. - Ставрополь, 1994. - с.29-33.

4. Постников Е.И., Исабаева Д.А., Дмитриев А.Ф. Неспецифическая реактивность овцематок и новорожденных ягнят// Всероссийская научно-производственная конференция. Чебоксары, 1994. - с.349-350.

5. Постников Е.И. Влияние иммунизации суягных овцематок-на факторы неспецифической реактивности// Диагностика, лечение и профилактика заболеваний сельскохозяйственных животных: Сб. науч.тр./ Ставроп. ГСХА. - Ставрополь, 1994. - с.3б-39.

6. Постников Е.И., Дмитриев А.Ф. Влияние иммунизации суягных овцематок на становление иммунобиологического потенциала у