Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.01) на тему:Совершенствование методов диагностики и разработка лечебно-профилактических мероприятий при анемии молодняка животных

На правах рукописи

МУРЗАГУЛОВ КАЙРУЛЛА КАИРОВИЧ

«Совершенствование методов диагностики и разработка лечебно-профилактических мероприятий при анемии молодняка животных»

16.00.01 - диагностика болезней и терапия животных

АВТОРЕФЕРАТ

на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

КАЗАНЬ- 2003

Работа выполнена в Казахском аграрном университете им. С. Сейфуллина и Республиканском научно-контрольном центре ветеринарных препаратов РГКП «Республиканская ветеринарная лаборатория» МСХ Республики Казахстан

Научный консультант - Заслуженный деятель науки РТ, доктор ветеринарных наук профессор Зухрабов М. Г.

Официальные оппоненты - заслуженный деятель науки РТ, доктор биологических

Ведущая организация - Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия

диссертационного совета Д- 220.034.01 при Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана (420074, г. Казань, ул. Сибирский тракт, 35).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана.

наук, профессор Тремясов М.Я.

заслуженный деятель науки РТ, доктор ветеринарных наук, профессор Набиев Ф.Г.

доктор ветеринарных наук, профессор Шкуратова И.А.

Зашита состоится

заседании

Ученый секретарь диссертационного совета, профессор

Ежкова МС.

rjsi?

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКИ РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы

Большой экономический ущерб хозяйствам наносят многие болезни незаразной этиологии (бронхопневмония, гастроэнтерит, рахит, анемия и др.), среди которых железодефицитные анемии (ЖДА) - имеют широкое распространение (Л.И. Идельсон.

серьезную проблему ветеринарии. Несмотря более чем вековой опыт изучения ЖДА. актуальность проблемы сохраняется, в связи продолжающимся распространение данного заболевания и приобретением новых особенностей, связанных с экономическими и социальными условиями (JI.H. Салпытов, В.Н. Шустов, Т.Е. Евзерова, Л.Я. Фетисова, 1996).

При железодефицитной анемии повышается абсорбция железа, что должно характеризоваться интенсивностью общего эритропоэза (Я.Д. Сахибов, 1981). Однако у больных ЖДА преобладает неэффективный эритропоэз, который служит показателем степени сидеропенических нарушений в тканях (С.И.Рябов, Г.Д. Шостка,1975, Я.Х. Хакимова, Л.Ю. Козырев, Л.Ю. Исахарова, 1985, Е.Б. Владимирская, 1990).

Одним из методов определения неэффективного эритропоэза, является микроядерный анализ (LT. MacGregor, С.М. Where, D.H. Gourd, 1980). Эритроциты с микроядрами относятся к группе регенеративных форм клеток, появление которых одними авторами объясняется как компенсаторный механизм (И.А. Кассирский, Г.А. Алексеев, 1970).

Анализ частоты нормохромных эритроцитов с микроядрами в периферической крови является методом выявления мутагенов (B.C. Журков, П. Ресснер, А. Пасторкова и др., 1986) или как свидетельство нарушения созревания клеток эритроидного ряда (H.H. Ильинских, И.Н. Ильинских, Е.Ф. Бочаров, 1986).

Таким образом, исследование в световой микроскопии морфологических особенностей эритроцитов в периферической крови может дать ценную информацию о состоянии клеток системы эритрона, для прогностической оценки, контроля эффективности проводимых лечебных мероприятий (Radiat. And Environ. Biophys., 1981, И.А. Быкова, 1991, H.H. Ильинский, B.B. Новицкий. H.H. Ванчугова и др.. 1992).

В настоящее время все большее внимание исследователей привлекают процессы свободнорадикального (перекисного) окисления липидов в организме. Это связано с признанием решающей роли в жизнедеятельности организма биомембран, в структуре

1981, Ю.Г. Митерев, П.М. Альперин, 1983, Л.И. Дворецкий, 1998) и представляет

3

РОС.

Б

которых важное место занимают липиды с высоким содержанием жирных ненасыщенных кислот (ЖНК).

Поэтому знание характера реакций перекисного окисления липидов, а также состояния антиоксидантной системы, регулирующей их течение в условиях действия на организм продуктивных животных экстремальных факторов современной технологии животноводства необходимый этап исследований, направленных на разработку научно-обоснованных методов управления процессами адаптации и комплексной терапии, профилактики и реабилитации наиболее распространенных заболеваний сельскохозяйственных животных, в том числе и анемии.

Перекисное окисление липидов непрерывно протекает в норме во всех тканях при определенной интенсивности, является одним из типов нормальных метаболических процессов (Ю.Н. Кожевников,1985; Г.Г. Жданов, В.Н. Нечаев, М.Л. Нодель, 1989). Обычно скорость перекисного окисления липидов и содержание перекисных продуктов в тканях поддерживается на постоянном уровне с помощью разнообразных механизмов, нарушение которых приводит к повреждающему действию первичным, промежуточным и конечным продуктам (перекисные радикалы, перекиси малоновый диальдегид, альдегиды, эпоксиды и т.д. ).

В доступной литературе встречаются единичные данные по динамике перекисных процессов и антиоксидантной активности при анемии у молодняка животных, в связи с чем изучение перекисного окисления липидов (ПОЛ) при данной болезни представляют особый интерес, так как с одной стороны, дефицит железа, по некоторым источникам медицинской литературы (Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. 1972) должны снижать уровень процессов перекисного окисления липидов, а с другой стороны, гипоксия, которая развивается при анемии, должна вести к ускорению этого процесса (Коган А.Х. и соавт.,1976).

Доказано, что сдвиги в реакциях, опосредуемых перекисными интермедиатами, в значительной степени определяют направленность и интенсивность всего клеточного метаболизма (Бурлакова Е.Б.,1979).

Исследования последних лет показали, что некомпенсированная активация процессов перекисного окисления липидов клеточных мембран играет важную, а иногда и ключевую роль в развитии многих патологических состояний.

Перекисное окисление липидов приводит к нарушению структурных и функциональных свойств биомембран, повреждению белков и нуклеиновых кислот, а продукты перекисного окисления липидов могут оказывать негативное влияние даже

на уровне целых систем организма. Для защиты от избыточной интенсивности перекисного окисления липидов в организме существует антиоксидантная система.

Исследование антиоксидантной активности и процессов перекисного окисления липидов приобретает в настоящее время приоритетное значение, так как практически все известные болезни той или иной связаны с нарушением антиоксидантной активности и перекисного окисления липидов.

1.2 Цель и задачи исследования

Целью настоящей работы является изучение механизмов взаимовлияния алиментарной анемии молодняка сельскохозяйственных животных на уровень свободнорадикальных процессов, на фоне болезней желудочно-кишечной, дыхательной системы, а также некоторых инвазионных болезней • молодняка сельскохозяйственных животных, что позволит разработать схему их профилактики и лечения.

Исходя из вышеизложенного для разрешения были поставлены следующие задачи:

1. Изучить клинико-гематологические показатели при анемии у молодняка животных, характерные особенности ее возникновения и течения.

2. Изучить состояние процессов перекисного окисления липидов при анемии у молодняка сельскохозяйственных животных и их взаимосвязь с нарушениями обмена железа в их организме.

3. Оценить диагностическое и прогностическое значение показателей, характеризующих перекисный метаболизм при анемии.

4. Провести клинико-лабораторные исследования по выявлению патогенеза приобретенной (вторичного происхождения) анемии у молодняка.

5. Разработать эффективные и экологически безвредные методы и средства для лечения и профилактики приобретенной (вторичной) анемии у животных и технические условия и наставления по их применению в производственных условиях.

6. Провести производственные испытания разработанных схем лечения и профилактики анемии молодняка животных.

7. Определить терапевтическую эффективность лекарственных форм топинамбура и бентонитов при анемии молодняка.

1.3 Научная новизна

Впервые нами использованы хемилюминесцентные методы, анализа перекисного окисления липидов для диагностики анемии молодняка сельскохозяйственных

животных. Для лабораторной диагностики анемии животных предлагается один из высокочувствительных методов изучения уровня свободнорадикальных процессов, которое имеет важное направление в современной биологии и медицине.

Для лечения и профилактики анемии молодняка нами впервые предложены доступные лекарственные формы топинамбура и установлено, что лекарственные формы топинамбура обладает антиоксидантным эффектом, что подтверждается торможением генерации продуктов липоперекисного каскада, повышением собственного антиоксидантного потенциала системы крови.

Разработаны механизмы взаимосвязи между развитием алиментарной анемии молодняка животных и уровнем свободнорадикальных процессов, а также дополнительные диагностические критерии выявления железодефицитной анемии молодняка животных, клинико-лабораторная оценка нарушения перекисного метаболизма при анемии, а также схемы лечения и профилактики этой болезни.

1.4 Практическое значение и «недоение

Теоретические аспекты полученного материала используются в учебном процессе на факультете ветеринарной медицины и ветеринарной санитарии Акмолинского аграрного университета, Казанской государственной академии ветеринарной медицины, Акмолинской медицинской академии при изучении вопросов болезней крови у людей и животных.

Материалы исследований позволяют диагностировать, прогнозировать и профилактировать болезнь в ранней стадии.

Результаты исследований могут использоваться в научно-исследовательских учреждениях, занимающихся проблемами различных заболеваний животных в патогенезе которых играет определенную роль процессы перекисного окисления липидов, в том числе и анемии у животных.

Практические аспекты полученного материала широко используются при диагностике болезней крови в Районной и Центральной ветеринарной лаборатории г. Астаны, а также при лечении и профилактике анемии у животных с высоким экономическим эффектом применяются в хозяйствах Акмолинской области.

Данные, полученные в результате исследования, позволяют совершенствовать методы лечения анемии у животных, как с точки зрения терапевтической и экономической эффективности, так и экологического благополучия, поскольку препарат изготовлен из экологически безвредного сырья, не требует при изготовлении сложных технологии и затрат. Препарат прост и доступен в применении. Наличие

антиоксидантного эффекта лекарственной формы топинамбура позволяет применять препарат в комплексной терапии больных другими заболеваниями животных.

1.5 Апробация работы

Основные положения диссертационной работы неоднократно докладывались и обсуждались на заседаниях ученого совета, отчетных научно-практических конференциях, кафедры терапии и клинической диагностики Акмолинского аграрного университета (1986-2002), Международных конференциях по проблемам животноводства и ветеринарии в Алматы (1993), Бишкек (1994), Республиканской научно-практической конференции «Аграрная наука на рубеже веков», Астана (1997), на научно-практической конференции Казанской государственной академии ветеринарной медицины (2001-2002), на заседаниях кафедр фармакологии и биохимии Акмолинской медицинской академии (2000-2002).

1.6 Публикации результатов исследований

По материалам диссертации опубликовано 27 работ, в том числе 1 временное наставление, 1 монография.

1.7 Структура и овьем диссертации

Диссертационная работа изложена на 273 страницах машинописного текста и состоит из следующих разделов: общая характеристика работы, обзора литературы, материал и методы исследований, результатов исследований, обсуждения полученных результатов исследований, практических предложений и список литературы, иллюстрации к тексту помещены в 38 таблицах, 19 рисунках. Список литературы включает 371 источников, в том числе 289 отечественной и 82 иностранной литературы.

1.8 Основные положения выносимые на защиту

1. Клинико-гематологические показатели у здоровых и больных анемией ягнят, телят и характерные особенности их возникновения и течения.

2. Состояние процессов перекисного окисления липидов при анемии у молодняка сельскохозяйственных животных и взаимосвязь с нарушением обмена железа в их организме.

3. Диагностическая и информативная ценность показателей, характеризующих перекисное окисление липидов в организме молодняка сельскохозяйственных животных больных первичной и вторичной анемией.

4. Клинико-лабораторные исследования по изучению особенностей патогенеза приобретенной (вторичного происхождения) анемии у молодняка.

5. Обоснование применение топинамбура и бентонитов для лечения и профилактики железодефицитной анемии у молодняка сельскохозяйственных животных.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материал и методы исследований

Работа выполнялась с 1986 по 2002 годы на кафедре терапии и клинической диагностики Акмолинского аграрного университета, в отделах биохимии и токсикологии Республиканской и Центральной ветеринарных лабораториях, кафедрах фармакологии и медицинской химии Акмолинской государственной медицинской академии, а также в хозяйствах Акмолинской области.

При подборе животных для эксперимента исключались инфекционные и инвазионные болезни.

Всего в экспериментальных и производственных опытах было использовано 859 голов коров, 1572 телят, 968 ягнят, 1536 свиней, 166 поросят и 185 лабораторных животных.

Подопытные животные содержались в животноводческих помещениях соответствующих ветчринарно-санитарным требованиям. Кормовой рацион был сбалансирован по основным питательным веществам.

По общепринятой методике соблюдая принципы аналогов были отобраны подопытные животные из хозяйств Акмолинской области, а лабораторные животные из вивариума лабораторий Центральной лабораторий МСХ РК.

Клиническое обследование подопытных животных проводили по общепринятой методике, охватывая все органы и системы организма, обращая особое внимание на видимые слизистые оболочки.

Определение концентрации гемоглобина в крови проводили по методу Сали, количество эритроцитов - в камере Горяева, гематокрита по методу Й. Тодорова (1968) и диаметр эритроцитов - микроскопированием с помощью окуляр микрометра и объект линейки. На основании этих результатов рассчитывали средний объем эритроцита.

среднюю концентрацию гемоглобина в эритроците, а также толщину отдельного эритроцита.

Биохимические исследования проводили с помощью реактивов фирмы «Лачема» (Чехословакия) Био-Ла-Тест «Железо» и Био-Ла-Тест «Общая железосвязывающая способность» и некоторых других показателей крови.

Морфологические исследования эритроцитов проводили при помощи световою микроскопа в окрашенных мазках крови общепринятой методикой (Грибова И.А.. 1979; Кудряшов Б.А. и др., 1985; Ронин B.C. и др., 1989).

Протромбиновый индекс, фибриноген, время Квика, ретракцию кровяного сгустка в плазме крови определяли по Комарову Ф.И. и др., 1976; Грибова И.А., 1979; Кудряшову Б.А. и др., 1985; Ронин B.C. и др., 1989.

Испытания топинамбура на токсичность проводили по методу Арзамасова Е.В., Любимова Б.И., 1995).

Содержание малонового диальдегида (МДА) в плазме крови в реакции с тиобарбитуровой кислотой определяли по Э.Н. Коробейниковой (1989), в эритроцитах -по М.С. Гончаренко, A.M. Липатовой (1985).

Метод основан на том, что при высокой температуре в кислой среде МДА реагирует с 2-ТБК, образуя окрашенный розовый триметиновый комплекс с максимумом поглощения при 535 нм.

Об эффективности функционирования системы антиоксидантной защиты (АОЗ) судили по активности ее ферментного звена.

В плазме крови определяли активность мембраносвязанного фермента каталазы (Кт), локализованного на внутренней поверхности эритроцитарной мембраны, в связи, с чем увеличение его активности в плазме крови является индикатором нарушения проницаемости мембран. Активность Кт определяли по методу Aebi et al. (1968).

Активность Кт в эритроцитах определяли по методу М.А.Королюк и соавт. (1988), в модификации Л.Е. Муравлевой, Б.С. Черкешовой (1991), в реакции с перекисью водорода и молибдата аммония, пробы спектрофотометрировали при длине волны 410 нм.

Окислительный индекс определяли по методу В.П. Верболович и Ю.И. Подгорного (1998). Окислительный индекс рассчитывали как оптическая плотность при 233 нм к оптической плотности при 210 нм и выражали в относительных единицах.

Микроэлементы определяли атомно-абсорбционным методом на спектрометре фирмы «Перкин-Эльмер» модели 703.

Определение солей тяжелых металлов проводили вольтамперметрическим анализатором ХАН-2, с использованием компьютерной установкой.

Пестициды в топинамбуре проводились на газовом аналитическом хроматографе «Цвет-800» с компьютерной программной установкой.

Концентрацию радионуклидов стронция - 90, цезия - 137 в топинамбуре определяли с помощью спектрометрического комплекса «Прогресс» с детекторами бета и гамма с программным управлением, установленным на компьютере.

Определение цитохимическим методом степени неэффективности эритропоэза по микроядерному тесту. Окраска мазков крови проводился по методике Паппенгейма. В наших исследованиях использовалась модификация метода, предложенного Паппенгеймом.

Подсчет микроядер проводился на 10000 эритроцитов, как у больных, так и у здоровых животных. Микроядра эритроцитов при этом красно-фиолетовые, нормохромные эритроциты - розовые, а полихроматофильные -синие.

Лечебно-профилактические мероприятия при анемии молодняка сельскохозяйственных животных проводили с применением топинамбура, бентонитов и чиктоника сначала в условиях кафедры и лаборатории, а затем в различных хозяйствах Акмолинской области.

Полученный цифровой материал был обработан методом вариационной статистики. Рассчитывали среднюю арифметическую (М). среднее квадратное отклонение (о), ошибку средней арифметической (m).

На оснований величин и числа наблюдений по таблице Стьюдента определяли вероятность различии (Р). Различия расценивали как достоверные, начиная со значений Р < 0,05, то есть когда вероятность различия была равна или превышала 95 %. Обработка данных проводилась на компьютере с использованием электронной таблицы Microsoft Excel 7,0.

2.2 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2.1 Клинико-гематологическая характеристика здоровых и бальных анемией ягнят

На данном этапе экспериментальной работы было изучено морфологический и биоэлементный состав крови у здоровых и больных анемией ягнят.

При этом установлено, что наиболее высокое содержание эритроцитов отмечалось у однодневных и пятнадцати дневных ягнят, 8,3 ±0,2 и 8,7 ±0,3 * 10|2/л

соответственно. В дальнейшем наблюдалась тенденция к уменьшению этого показателя до 6,2 ± 0,7*10|2/л, а к 30- дневному возрасту, оно вновь повышалась до 7.4 ± 0,5*10|2/л. У новорожденных ягнят концентрация гемоглобина составила 133,0 ± 4.5 г/л, которая в дальнейшем постепенно снижалась одновременно с снижением и количества эритроцитов и в возрасте восьмидесяти дней отмечен самый низкий уровень гемоглобина 86,0±1,2 г/л, которая затем вновь возрастала и к 150-дневному возрасту у ягнят она достигла уровня 105,0 ± 4,7 г/л.

Показатель гематокритной величины в первые дни жизни ягнят был наиболее высоким - 51,0 ± 1,5 об.%, в сравнении с другими возрастными периодами. К пятимесячному возрасту показатель гематокрита снизился до 41,6 ± 0,9 об.%.

Изменения диаметра эритроцитов у ягнят были обусловлены соответствующими сдвигами со стороны различных форм эритроцитов. Ягнята в однодневном возрасте обладали наибольшим диаметром эритроцитов - 5,8 ± 0,1 мкм, уже на третьи сутки происходило уменьшение диаметра эритроцитов, но к пятнадцатидневному возрасту он достигал первоначальной величины, а начиная с месячного возраста ягнят диаметр эритроцитов находился уже на уровне 5,3 ± 0,2 мкм и лишь к пятимесячному возрасту произошло снижение этого показателя до 4,8 ± 0,1 мкм.

Средняя концентрация гемоглобина в эритроците у новорожденных ягнят соответствовала 26,2 ± 1,0 %, а уже на третьи сутки этот уровень повысился до 28 ± 1,0 %. В последующие двадцать дней этот показатель понизился до 20,6 ± 1,6 %, а затем в течение последующих двух месяцев удерживался примерно на одном уровне, а к пятимесячному возрасту произошло повышение его до 25,8 ± 0,6 %.

Средний объем единичного эритроцита, и толщина отдельного эритроцита были наиболее значительными в первые дни жизни ягнят, а затем отмечались колебания в изучаемом возрастном периодах и чаще в сторону их понижения.

Наиболее высокие показатели содержания биоэлементов (меди, цинка, железа) в крови ягнят наблюдалась в двухдневном возрасте, что связано высокой концентрации их в молозиве. Начиная с двадцатидневного возраста и до 93-дневного возраста, происходило постепенное понижение концентрации меди, цинка, железа, по сравнению с показателями у ягнят 20-дневного возраста. Это мы объясняем тем, что в этот возрастной период у ягнят наступал переход от молочного типа к смешанному типу кормления.

Причиной возникновения анемии, у ягнят были алиментарные факторы, связанные с недостатком железа и других, жизненно важных для организма минеральных веществ.

В зимне-весенний период рацион овцематок в подопытной группе был сбалансирован по общей питательности, но дефицитен по содержанию минеральных веществ, что также подтверждалось понижением уровня биоэлементов в организме овцематок, молозиве, молоке, что способствовало развитию анемии у ягнят. Недостаточное поступление в организм новорожденных ягнят микроэлементов с молоком овцематок, низкие запасы биоэлементов у молодняка на фоне интенсивного прироста живой массы в период 15-30 дней жизни обусловливало в дальнейшем усиление дефицита, особенно железа, и тем самым ускорялось развития анемии.

У больных анемией ягнят снижалась концентрация гемоглобина, количество эритроцитов, показателя гематокритной величины, диаметра эритроцитов, средней концентрации гемоглобина в эритроците по сравнению со здоровыми ягнятами, особенно к сорокапятидневному возрасту. Несколько выше были показатели среднего объема единичного эритроцита и толщины отдельного эритроцита у больных анемией ягнят. У больных анемией ягнят также развивалась гипохромная анемия, с явлениями анизоцитоза и пойкилоцитоза.

Установлено также, что крови у больных анемией ягнят в двадцатидневном возрасте концентрации железа, марганца, меди, цинка была ниже по сравнению со здоровыми ягнятами этого же возрастного периода (28-34 %). Анемия, у ягнят вначале протекала субклинически, без каких либо видимых клинических признаков анемии. Нарушения со стороны морфологической картины крови и уровня биоэлементов при анемии клинически начало проявляться после сорока пятидневного возраста. В большинстве случаев это выражалось отставанием молодняка в росте, бледностью видимых слизистых оболочек и другими признаками.

В последующие возрастные периоды постнатального онтогенеза ягнят нами были установлены дальнейшие снижение некоторых показателей морфологического состава крови, которых, начиная с сорокапятидневного возраста постепенно возрастали, что видимо, связано с переходом на смешанный тип кормления. При этом они не доходили до нормативных величин.

2.2.2 Показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантной зашиты у здоровых и больных анемией животных

В доступной литературе отсутствуют данные по изучению динамики перекисныч процессов и антиоксидантной активности при анемии животных.

Изучение перекисного окисления липидов (ПОЛ) при анемии представляют особый интерес, так как с одной стороны, дефицит железа, антиоксидантные свойства

которого известны в медицине (Владимиров Ю.А.. Арчаков А.И. 1972) должен снижап, уровень процессов перекисного окисления липидов. С другой стороны, гипоксия, которая развивается при анемии, которая приведет к ускорению этого процесса (Коган А.Х. и соавт. 1979).

Доказано, что сдвиги в реакциях, опосредуемых перекисными интермедиатами. в значительной степени определяют направленность и интенсивность всего клеточного метаболизма (Бурлакова Е.Б. 1979).

Исследования последних лет показали, что некомпенсированная активация процессов перекисное окисление липидов клеточных мембран играет важную, а иногда и ключевую роль в развитии многих патологических состояний. Избыточное накопление токсических продуктов перекисного метаболизма приводит к тяжелому течению заболеваний, к повреждению органов и тканей.

Практически все патологические состояния организма в той или иной степени связаны с процессами перекисного окисления липидов.

Перекисное окисление липидов приводит к нарушению структурных и функциональных свойств биомембран, повреждению белков и нуклеиновых кислот, а продукты перекисного окисления липидов могут оказывать негативное влияние даже на уровне целых систем организма. Для защиты от избыточной интенсивности перекисного окисления липидов в организме существует антиокевдантная система.

Исследование антиоксидантной активности приобретает в настоящее время приоритетное значение. Как известно, практически все известные болезни связаны с окислительным стрессом, следовательно, и с нарушением антиоксидантной активности.

В последние годы все большое внимание исследователей привлекают проблемы окислительного метаболизма, под которым понимают сдвиг тканевого баланса антиоксидантов в сторону последних.

В настоящее время известно, что перекисное окисление липидов является сложным процессом, физиологически характерным как для животных, так и для человека и включающим в себя процессы активации и дегидратации липидных радикалов. Встраивание в липиды предварительно активированного молекулярного кислорода, деструкцию мембран липидов и самих биомембран (Ю.П. Козлов и соавт. 1972; И.В. Ганушкинаи соавт. 1986; Gardes-Albert M. Egb 761,1990).

При различных патологических состояниях, сопровождающихся некомпенсированной генерацией свободных радикалов, изменяется характер

перекисного окисления липидов, что приводит к неблагоприятным последствиям для интактной клетки.

Каталаза широко распространена в организме человека и животных, причем небольшое количество фермента обнаружены в эритроцитах, печени и почках (А. Уайт. Ф. Хендлер, Э. Смит и др. 1981; L. Goth, 1982). Функцией фермента является предотвращение накопление перекиси водорода, образующейся при дисмутации супероксидного аниона.

Анализируя приведенные выше данные, можно полагать, что при железодефицитной анемии происходят заметные изменения уровня перекисного окисления липидов. Тяжесть этой патологии, очевидно, определяется не только недостачей железа, но и состоянием системы перекисного окисления липидов. Недостаточная активность ферментов антиоксидантной системы крови всегда сопровождается активацией перекисного окисления липидов и как следствие избыточным накоплением в организме продуктов, обладающих мембранотоксическим эффектом (Brigham K.L., 1986).

Нами была поставлена задача изучения состояния показателей перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты при анемии подопытных коров и телят. Клинические и гематологические исследования были проведены на 26 голов здоровых и больных анемией коров и телят. Фоновым показателем заболевания являлись снижение концентрации гемоглобина ниже 80 г/л.

Все подопытные животные по результатам клинико-лабораторных исследований были разделены на группу здоровых и больных коров. Диагноз заболевания установили на основании клинических исследований, при котором у 70% исследуемых коров обнаруживались бледность видимых слизистых оболочек, а также снижение концентрации гемоглобина в крови от 60 до 70 г/л.

Интенсивность развития процессов перекисного окисления липидов в крови подопытных животных оценивали по уровню малонового диальдегида - продукта конечных продуктов.

Об эффективности системы антиоксидантной защиты судили по активности ее ферментного звена. В плазме крови определяли активность мембраносвязанкого фермента каталазы. По результатам лабораторных исследований были выявлены достоверные сдвиги показателей перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы у больных анемией коров по сравнению здоровыми животными.

Железодефицитная анемия в первую очередь характеризовалась снижением гемоглобина в крови подопытных животных. Для детального изучения перекисного

окисления липидов нами были использованы два разных хозяйства ПК «Родина» и РГП «Куйгенжар» Акмолинской области, где у подопытных животных определялись биохимические показатели крови: такие как каталаза, малоновый диальдегид. окислительный индекс.

Концентрация гемоглобина в крови у животных в обоих хозяйствах примерно удерживались на определенном уровне. У клинически здоровых животных уровень гемоглобина превышали на 35,3% и 32,3 % в сравнении с больными животными.

Полученные результаты исследования перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты в эритроцитах в обоих хозяйствах имели значительные колебания. Активация процессов перекисного окисления липидов у больных анемией коров сопровождались выраженным дисбалансом ключевых ферментов антиоксидантной защиты. Это проявилось угнетением активности катал азы в эритроцитах, так в ПК «Родина» произошло снижение активности каталазы с 35.9 ± 0,019 до 14,2 ± 0,018, тогда как в РГП «Куйгенжар» - соответственно это понижение составило с 35,8 ± 0,018 до 17,5 ± 0,016 мкат/л.

Показатели малонового диальдегида имели тенденцию к повышению их у больных анемией коров от 4,223 ± 0,79 - 4,311 ± 0,90 до 5,915 ± 1,40 - 7,027 ± 1,32 мкмоль/л, то есть на 2,5-2,6 раза по сравнению со здоровыми животными.

Анализ результатов, полученных при исследовании, показателей перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты у подопытных животных указывают, что у больных животных со средней тяжестью анемии (61,26 г/л) происходят выраженные изменения, сопровождающимися нарастанием концентрации малонового диальдегида и угнетением активности каталазы в эритроцитах.

От функции активности каталазы зависит сохранение целостности эритроцитов и защита от образования метгемоглобина. Ионы железа входят в состав активного центра каталазы, поэтому их недостаток может повлиять на процесс разложения перекиси водорода.

У больных анемией животных была установлена значительная активация перекисного окисления липидов, сопровождающихся значительным накоплением продуктов, образующихся на разных этапах перекисного каскада. Так, малоновый диальдегид увеличился в 2,6 раза у больных анемией животных по сравнению со здоровыми (р<0,001), что свидетельствует о накоплении продуктов перекисного окисления липидов.

Несколько иной характер мы наблюдали по окислительному индексу, где наблюдалась повышение этого показателя в 3,8 раза у здоровых животных по сравнению с больными.

Одновременно за этот период мы наблюдали изменения в крови показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты у клинический здоровых и больных анемией телят. Где также отметили незначительные колебания и изменения этих показателей липидного обмена.

Полученные результаты исследования крови у подопытных групп телят показывают, что концентрация гемоглобина в крови у больных анемией телят на 30.14 г/л ниже, чем у здоровых подопытных телят.

Аналогичная картина выглядит и с концентрации катал азы в крови, так у здоровых телят на 18,5 мкат/л выше, чем у больных анемией телят.

Несколько иной характер составляет показатель малонового диальдегида в крови у подопытных телят, так у больных телят концентрация этого показателя на 0,691 мкмоль/л выше по сравнению со здоровыми телятами.

Таким образом, можно считать достоверным, что у больных анемией коров и телят имело место нарушение окислительного метаболизма. Они определяли степень тяжести анемии и дефицита железа и усиливали метаболизм эритроцитов, способствовали нарушению функционального состояния красных кровяных телец. Кроме этого достоверно была угнетена антиоксидантная защита, о чем свидетельствовали снижение активности каталазы у больных анемией телят.

Представленные данные являются основанием для более глубокого, поэтапного исследования ингибиторов свободного окисления препаратов антиоксидантного действия.

2.2.3 Моделирование анемии и изучение свободнопадикальных процессов в организме животных

Данные литературы, непосредственно указывают на антиоксидантную активность препаратов из растительного сырья, используемых при лечении перекисного окисления липидов индуцированных заболеваний, немногочисленны. В большинстве случаев об антиоксидантной активности фитопрепаратов можно судить косвенно, через наличие у многих из них, в частности, противоспалительного эффекта.

Природные минеральные добавки включают большую группу минералов или продуктов их переработки различной структуры и химического состава. Это новая высокоэффективная природная мономинеральная добавка с большой гаммой макро и

микроэлементов. В нем представлены натрий, калий, кальций, магний, молибден, медь, железо, кобальт, кадмий, хром, ванадий, никель и другие необходимые элементы. Кроме того, бентонит обладает ростостимулирующим и бактериолог ическим действием. Бентонит разносторонне оказывает влияние на животных, ускоряет обмен веществ, способствует лучшему усвоению питательных веществ корма, повышает прирост живой массы молодняка по разным источникам от 5-8%.

Топинамбур является перспективной культурой диетического и лечебного назначения, обладающей уникальным биохимическим составом, способным активно влиять на обменные процессы в организме и предупреждать, или восстанавливать их нарушения (Решетник Л.А., Ладодо К.С., Прокопьева О.В., Кочнев Н.К.,1998).

Для получения вытяжки отбирался растительный материал (клубни), предварительно высушенный при температуре 25-28°С и влажности 40-55% в течении 35 суток (Дробьппев Д.А., Николайчук А.Е., 1995).

Использованный в эксперименте топинамбур содержит 2-4% азотистых веществ. 6% сахарозы, 11-12% полисахарид инулина, витамины С и В|. Также обнаружены -каротин, холин, бетаин, полипренолы, сесквитерпеновый лактон - гелиангин.

При этом были проведены исследования топинамбура и бентонита на содержание токсичных элементов (мышьяк, ртуть, медь) и на наличие пестицидов (4,4-ДДТ - а- и Р-изомер).

Для проведения эксперимента были отобраны три подопытные группы кроликов по принципу аналогов в количестве пятнадцать голов, по пять голов в каждой группе. Кормление кроликов были сбалансированы по основным питательным веществам и одинаковы в каждой группе.

Контрольная группа кроликов содержались на основном рационе, первая опытная группа, дополнительно к основному рациону получали лекарственную форму топинамбура в дозе Юг/кг, второй опытной группе, дополнительно к основному рациону добавляли природный минерал бентонит в дозе 1,0 г/кг. Подкормки (топинамбур, бентонит) задавали в течение 10 дней с кормом.

Для создания моделирования анемии осуществлялась кровопускание у всех животных однократно в количестве до 50 мл, а затем через 15 и 30 дней для лабораторного исследования.

Перед началом опыта, через 15 и 30 дней проведены морфологические и биохимические показатели крови у кроликов.

Кровь брали утром до кормления. Исследования крови проводились по общепринятым методикам и с использованием тестов фирмы «Лахема» (Чехословакия) «Био-Ла-Тест».

Кормление подопытных животных осуществляли в соответствии разработанных рационов и сбалансированных по основным питательным веществам.

При клиническом исследовании отмечено, что у кроликов третьей подопытной группы отмечалась вялость, малоподвижность, снижение аппетита, тогда как в других группах, особенно, в первой опытной группе кролики были более бодрые, и у них отмечалась повышение аппетита. В контрольной группе у кроликов отмечались бледность слизистых оболочек ротовой и носовой полости, а также отставание в росте и развитии.

Полученные результаты исследований крови были подвергнуты статистической обработке, согласно методам и приемам статистического анализа.

По результатам проведенных лабораторных исследований установлено, что концентрация гемоглобина в крови в контрольной группе не имела значительных изменении, тогда как в первой опытной группе уже через пятнадцать дней этот показатель повысился на 3 г/л, а через тридцать дней на 7 г/л, по сравнению с первоначальным уровнем. Во второй опытной группе наблюдалась тенденция к незначительному повышению гемоглобина соответственно через пятнадцать дней на 1 г/л, а через тридцать дней - всего лишь на 2 г/л.

Количество эритроцитов варьировала от 5,7 ± 0,35 до 7,8 ± 0,26 * 1012/л. в период пятнадцати и тридцати дней после дачи кормовых добавок.

Несколько иной характер носили показатели уровня железа в подопытных групп животных. Так в контрольной группе наблюдались незначительные изменения. В опытных группах отмечалось некоторое повышение уровня железа. В первой опытной группе через пятнадцать дней концентрация железа в сыворотке крови повысилась на 0,42 ммоль/л, а через тридцать дней после дачи кормовых добавок соответственно на 1,51 ммоль/л. Наряду с этим во второй опытной группе этот показатель через пятнадцать дней повысился лишь на 3,98 ммоль/л, тогда как через тридцать дней на 4,40 ммоль/л, по сравнению с первоначальным уровнем.

На тридцатый день после дачи добавок концентрация общего белка в опытных группах имела незначительные изменения в сторону повышения. В контрольной группе повысилась до 1г/л, а в первой и во второй опытных группах соответственно до 3 г/л и 8 г/л в сравнении с первоначальными показателями.

Содержание кальция и фосфора в опытных группах варьировала с незначительными колебаниями. В контрольной группе эти показатели удерживались примерно на одном уровне, тогда как в первой опытной группе концентрация фосфора имела тенденцию к незначительному снижению, а кальций удерживался на одном уровне. Во второй опытной группе количество кальция и фосфора незначительно повышалась.

Об уровне процессов перекисного окисления липидов судили по концентрации вторичного продукта и антиоксидантной защиты, такие как малоновый диальдегид и каталаза в опытных группах они имели различные изменения. Так в контрольной группе эти показатели удерживались примерно на одном уровне. В первой опытной группе каталаза незначительно повышалась, тогда, как уровень МДА наоборот достоверно снижалась. Во второй опытной группе уровень этих показателей постепенно повышалась.

Концентрация общих липидов и холестерина во всех подопытных группах удерживались на определенном уровне. Наряду с этим наиболее высокие показатели отмечались во второй опытной группе, а самые низкие показатели в первой опытной группе.

При исследовании биологической активности топинамбура была отмечена способность к снижению уровня холестерина в плазме крови в первой опытной группе.

Наряду с этим природный минерал бентонит не полностью предотвращал анемию по уровню малонового диальдегида у кроликов.

Кровепотери активизирует перекисное окисление липидов в эритроцитах кроликов вследствие снижения активности антиоксидантной системы (АОС), то. что недостаток железа приводит к уменьшению глутатионпероксидазной активности в эритроцитах.

Следует отметить, что наши данные согласуются с Bright K.L.,1986, при анемии происходит заметное изменение уровня перекисное окисление липидов. Тяжесть этой патологии, очевидно, определяется не только недостатком железа, но и состоянием системы антиоксидантной защиты. Недостаточная активность ферментов антиоксидантной системы крови всегда сопровождается активацией перекисного окисления липидов и, как следствие избыточным накоплением в организме продуктов, обладающих мембранотоксическим эффектом.

В свою очередь, мембраноповреждающий эффект продуктов активированного перекисного окисления липидов, на фоне функционального недостаточности активности антиоксидантной защиты, вызывает вторичное нарушение

кислородтранспортной функции крови и усугубляет гипоксические сдвиги, вызванные развитием дефицита железа.

Анализируя приведенные выше данные, очевидно, что одним из ведущих патогенетических механизмов анемии у кроликов является некомпенсированная активация реакций липопероксидации, ответственная за сокращение продолжительности жизни эритроцитов при данной патологии.

Введение в корм кроликам ежедневно в течение десяти дней лекарственной формы топинамбура в дозе 10 г/кг оказывало стимулирующий эффект на гематологические показатели, также способствовало возрастанию каталазы, приводило к повышению уровня в крови общего белка, железа и снижению уровня малонового диальдегида.

Таким образом, основываясь на проведенных результатах использования лекарственной формы топинамбура в профилактике анемии, следует отметить, что антиоксидантная фитотерапия определяет актуальной проблему создания новых лекарственных препаратов на основе растительного сырья с антиоксидантной активностью.

2.3.1 Разработка лечебно-пооЛилактических мероприятий при анемии ягнят и поросят

По данным ряда исследователей установлено, что у молодняка сельскохозяйственных животных, в том числе и у ягнят, в первый период постнатального онтогенеза наблюдаются незначительные изменения гематологических показателей, что в сочетании с неполноценным кормлением являются причиной возникновения алиментарной анемии.

В свиноводстве разработаны доступные и эффективные методы предупреждения анемии поросят, тогда как об алиментарной анемии ягнят в литературе имеются очень мало работ, и носят они весьма противоречивый характер, в связи с различными зональным аспектом данной проблемы.

В связи с чем, целью данного этапа исследований было изучение этиопатогенеза алиментарной анемии ягнят и разработка эффективных методов лечения и профилактики, с учетом особенности местности содержания животных.

Исследования проводились на овцеферме учебно-опытного хозяйства Целиноградского сельскохозяйственного института. В период опыта было использовано 30 ягнят. В период окотной компании были сформированы по принципу аналогов три группы ягнят по 10 голов в каждой. Ягнята первой группы были

контрольными, для восполнения железа ягнят второй опытной группе при анемии применяли ферроглюкин-75 в дозе 1,5 мл и третьей опытной группе ферроколан-50 в дозе 2 грамма на голову в течение 3-5 дней.

В процессе наблюдений учитывались условия содержания и кормления ягнят, а также овцематок. В начальный период роста и развития подопытные ягнята получали исключительно молочную пищу, а затем с десяти и пятнадцатидневного возраста постепенно начали приучать их к поеданию концентрированных и грубых кормов.

При клиническом исследовании установлены, что у больных анемией ягнят были выражены бледность видимых слизистых оболочек, отставание в росте и снижение аппетита.

Кровь для исследования брали в начале опыта и через 30 дней после начато применения железосодержащих препаратов.

Железосодержащие препараты оказывали существенное влияние на морфологический состав крови у подопытных ягнят. При этом установили, что концентрация гемоглобина у подопытных ягнят претерпевала значительные изменения. Так, у ягнят опытных групп происходило повышение концентрации гемоглобина в крови: во второй группе он составил 118,6 ± 0,63 г/л, в третьей - 116,6 ± 0,81 г/л, тогда как в контрольной группе ягнят наблюдалась тенденция к снижению концентрации гемоглобина в крови, этот показатель соответствовал 92,3 ± 1,25 г/л.

Наиболее выраженное влияние ферроглюкина и ферроколана установлено на показатели количества эритроцитов. Так, у ягнят контрольной группы наблюдалась значительное уменьшение количества эритроцитов - с 5,88 ± 0,38 до 4,29 ± 0.24 х 10|2/л, тогда как в опытных группах ягнят наблюдалась тенденция к резкому увеличению количества эритроцитов в периферической крови: во второй группе с 5.90 ± 0,35 до 7,44 ± 0,32 х 1012/л, в третьей соответственно с 5,63 ± 0,27 до 6,49 ± 0,54 х 10|2/л.

Таким же закономерным изменениям подвергались показатели средней концентрации гемоглобина в эритроците подопытных ягнят в период эксперимента. Самая высокая концентрация гемоглобина в эритроците наблюдалась в третьей опытной группе - с 29,8 ± 1,48 до 37,5 ± 1,92 %, во второй группе этот показатель удерживался примерно на одном уровне, тогда как в контрольной группе ягнят происходило снижение концентрации гемоглобина в эритроците с 30 ± 1,72 до 28,1± 1,06%.

Своеобразные изменения происходили в крови показателей гематокрита у подопытных групп ягнят. Так. у ягнят контрольной и второй опытных групп

гематокритная величина повышалась, тогда, как в третьей группе она удерживалась па одном уровне.

Аналогичные изменения наблюдались по показателям среднего объема эритроцитов. Самый большой объем эритроцитов был у контрольной группы ягнят, тогда как у животных во второй опьгпюй группы этот показатель удерживался на одном уровне, а у ягнят третьей группы просматривалась тенденция к резкому уменьшению данного показателя в крови.

При микроскопии мазков крови контрольной группы ягнят нами установлены изменения диаметра и величины эритроцитов: наряду с эритроцитами нормальных размеров, которые составили 45,7 %, встречались маленькие (микроциты) - 14,5 %, большие (макроциты) -11,1 % и очень крупные (мегалоциты) эритроциты составившие 28,7 %. Подобной картины в мазках крови у ягнят в других опытных группах не наблюдали.

Таким образом, недостаточное поступление в организм новорожденных ягнят микроэлементов с молоком овцематок, низкие запасы биоэлементов у молодняка, на фоне интенсивного прироста живой массы в первые двадцать дней жизни, обуславливало дальнейшее усиление дефицита биоэлементов, особенно железа, и тем самым способствовало развитию анемии.

У больных анемией ягнят происходило снижение количества эритроцитов, средней концентрации гемоглобина в эритроците. Клинически анемия начало проявляться в 30-45 дневном возрасте, в ряде случаев она выражалась значительным отставанием ягнят в росте и развитии, бледностью видимых слизистых оболочек, быстрой утомляемостью, залеживанием, малоподвижностью и снижением аппетита.

Под влиянием ферроглюкина и ферроколана у больных анемией ягнят постепенно нормализовалась концентрация гемоглобина в эритроците, количество эритроцитов и другие гематологические показатели красной крови. Наряду с этим происходило повышение живой массы ягнят и исчезновение клинических признаков анемии, что в совокупности свидетельствовало о выздоровлении ягнят от этой болезни.

При взвешивании подопытных ягнят на тридцатый день установили, что живая масса у животных контрольной, опытной групп увеличивалось по сравнению с первоначальными данными: в первой группе на 3,15 кг, во второй - на 3.62 кг, в третьей - на 4,07 кг, то есть повышение живой массы у ягнят опытных групп были достоверно выше по сравнению и с таковыми контрольных животных.

На данной серии экспериментальных исследований нами изучено влияние протамин-цинк-инсулина на морфологические показатели крови и продуктивность

поросят с целью установления оптимальной дозы, кратность введения и ра¡личные комбинации по его сочетанию с витаминами и железодектрановыми препаратми. Д,|я этого были созданы 5 подопытные группы поросят соблюдая принципы аиалотв Первая подопытная группа поросят дополнительно к основному рациону получало протамин-цинк-инсулин из расчета 0,5 ед/кг; вторая группа - протамин-цинк-инсулин в такой же дозе и тетравит- 0,5 млЛ олову; третья группа - протамин-иинк-инсулш и такой же дозе и ферроглюкин - 2,0мл/голову; четвертая группа - протамин-цинк-инсулина, тетравита и ферроглюкина вышеуказанных дозах; пятая группа -находилась на основном рационе.

Клиническими исследованиями, проведенными в начале опыта у животных какие-либо признаки патологического состояния не установили. Показатели температуры тела, количество пульсовых ударов и дыхательных движений были в пределах физиологической нормы. Результаты морфологического анализа крови подопытных животных свидетельствовали о положительном влиянии протамин-цинк-инсулина, тетравита и ферроглюкина на гемопоэз.

Анализ морфологического состава крови подопытных групп поросят показала, что в начале опьгга количество эритроцитов, уровень гемоглобина, показатели гематокритной величины, концентрация гемоглобина в эритроците крови у всех подопытных поросят были ниже допустимых нормативных величин.

Нами установлено, что у животных опытных групп за 30 дней эксперимента происходит некоторое увеличение всех гематологических показателей крови: в частности количество эритроцитов у поросят в первой опытной группы увеличились на 4,1 %, во второй - на 2,1 %, в третьей - на 3,8 %, в четвертой - на 6,2 %, а в пятой контрольной группе данный показатель имел противоположенную тенденцию и снизился на 1,3 %. Аналогично изменялся и уровень гемоглобина, который за 30 дней эксперимента в крови у животных первой опытной группы повышался на 14.2 %, второй - на 12,0 %, в третьей - на 17,2 %, в четвертой - на 16,1 %. а в пятой контрольной группе он снизился на 0,43 %.

Через 60 дней опыта концентрация гемоглобина, количество эритроцитов, показатели гематокритной величины, концентрация гемоглобина в эритроцше у подопытных поросят достоверно выше по сравнению с таковыми \ животных контрольной групп.

Результаты исследования подопытных поросят после назначения ферроглюкина в комбинации с протамин-цинк-инсулином свидетельствовали об их влиянии на общее состояние организма. Так, клиническими исследованиями, проведенными мере) 60 дней

после назначения препаратов, у животных улучшилось общее состояние, не проявлялись выраженные клинические признаки анемии. Показатели температуры тела, частоты пульса и дыхательных движений были в пределах нормы. У поросят контрольной группы все показатели имели противоположную тенденцию.

Полученные клинико-гематологические показатели подопытных групп поросят свидетельствуют о нормализации обменных процессов в организме, что указывает на благоприятное влияние биостимуляторов и ферроглюкина можно объяснить улучшением усвояемости питательных веществ, поступающих в организм животных вместе с кормом.

Об этом свидетельствовали и научно-производственные опыты по применению вышеназванных препаратов в условиях некоторых свиноводческих хозяйств Акмолинской области.

Опыты проводились на базе учебно-опытного хозяйства Целиноградского сельскохозяйственного института, совхоза «Заря» Целиноградского района и подсобного хозяйства Целиноградского керамического комбината.

Продолжительность экспериментов варьировала от 3 до 5,5 месяцев.

Подбор животных в каждой серии опытов осуществлялся по принципу аналогов с учетом породы, возраста, живой массы и т.д. В различных сериях опытов было использовано 1536 голов свиней в возрасте от 2-4 месяцев живой средней массы от 18 до 38 кг. Животные находились в одинаковых условиях кормления и содержания.

Результаты проведенных экспериментальных исследований показали, что под влиянием протамин-цинк-инсулина повышалась интенсивность роста молодняка свиней, однако степень повышения среднесуточных приростов находились в состоянии дифференциации в зависимости от величины дозы, кратности и возраста животного.

Например, при однократном внутримышечном введении протамин-цинк-инсулина в дозе 0,5 ед/кг живой массы поросятам в возрасте 2-2,5 месяцев за сто семидесятидневный период прирост живой массы был на 16 % выше, по сравнению с контрольными животными, тогда как двукратное введение препарата с интервалом сорок дней обусловило увеличение привеса в среднем на 19 %.

Весьма интересные данные были получены в экспериментах при внутримышечном введении протамин-цинк-инсулина в дозе 0,5 ед/кг в комбинации с внутримышечным введением тетравита в дозе 0,5 мл на голову (интервал 30 дней) и ферроглюкина в дозе 2 мл на голову.

Анализируя данные, становится очевидным, что при введении инсулина к комбинации с тетравитом и железодекстрановым препаратом нарастает и си.1.1 ростостимулирующего действия.

Так, за период эксперимента (170 дней) живая масса поросят была в среднем па 29,3 кг выше, чем у животных контрольной группы, а среднесуточный прирос! составил на конец опыта 342 грамм против 154,7 граммов в контрольной группе.

Для проведения производственного испытания нами были отобраны две группы подсвинок в возрасте 3-4 месяцев, живой массой 24-40 кг в количестве 1480 голов.

Животным опытной группы (1230 голов) один раз в месяц до конца откорма вводили протамин-цинк-инсулин и тетравит. Ферроглюкин вводили дважды, с интервалом тридцать дней (1-введение 2,0 мл, 2-введение 1,4 мл) с учетом дефицита в организме железа. Животные второй группы (250 голов) были контрольными.

Учет за ростом и развитием животных опытной и контрольной групп проводили путем ежемесячного взвешивания, наблюдением и по результатам гематологических и биохимических исследований крови. Также учитывали живую среднюю массу, средний прирост живой массы и состояние животных.

Так, через тридцать дней после применения препаратов живая масса животных опытной группы в среднем увеличилась с 37,0 ± 0,84 до 47,5 ± 0,71 кг, т.е. прирост одного животного за месяц составила 10,5 кг при среднесуточном приросте 350 граммов.

В контрольной группе животных, которым препараты не вводили, также отмечалось увеличение живой массы с 38,0 ± 1,14 до 42,0 ± 1,60 кг при среднесуточном приросте 134 грамм, однако показатели были ниже, чем у животных опытной групп.

Спустя шестьдесят дней от начала применения препаратов установили дальнейшее увеличение живой массы в обеих группах. Следует констатировать, что на этом этапе исследований более значительное увеличение живой массы отмечено в опытной группе.

На стопятидесятый день откорма среднесуточные приросты оставались, несомненно, более высокими у животных опытной группы. Среднесуточные приросты в опытной группе составила 333,0 ± 12,02 граммов против 187,0 ± 6.64 грамма \ контрольных животных.

Изложенные результаты экспериментальных исследований свидетельствуют о том, что протамин-цинк-инсулин в комбинации с витаминами и железодекстранами обуславливает в организме молодняка свиней изменения в обменных.

преимущественно анаболических процессах, при которых получен более интенсивный рост молодняка свиней.

В крови животных опытной группы установлено улучшение биохимических показателей.

В частности, к концу опыта повысилось содержание общего кальция с 12.6 ± 0.22 до 14,0 ± 0,18 мг%, неорганического фосфора с 4.7 ± 0,1 до 6.0 ± 0.2 мг%, резервной щелочности с 460,0 ± 8,15 до 560,0 ± 10,03 мг%. В то время у животных в контрольной группе в биохимических показателях крови достоверных изменений не обнаружено, кроме снижения резервной щелочности.

В динамике содержания общего белка была отмечена его стабильность как у животных контрольной, так и опытной групп. Некоторое повышение содержания белка, не превышающее физиологические нормы, отмечалось у животных опытной группы к концу эксперимента.

Концентрация гемоглобина в опытной группе имела тенденцию к резкому повышению и составляла 122 г/л по сравнению с 88 г/л, чем у животных контрольной группы. За период эксперимента в опытных группах заболевших поросят не было, тогда, как из числа контрольных животных восемь голов пало, и десять голов остались заморышами.

Таким образом, на основании полученных данных можно рекомендовать в качестве ростостимулирующих н профилактирующих средств при выращивании и откорме свиней применять препараты инсулина в дозе 0,5 ед/кг живой массы в комбинации с тетравитом и железодекстрановыми препаратами один раз в месяц до конца откорма.

2.3.2. Разработка лечебно-профилактических мероприятий при приобретенной (вторичной) анемии ягнят на почве бронхопневмонии

Известно, что молодняк сельскохозяйственных животных в первый период постэмбрионального существования испытывает дефицит ряда микроэлементов, в частности железа, так как в этот период основным источником питания является материнское молоко, удовлетворяющее потребность в этом элементе всего лишь на 1015%.

Всего в экспериментальных и производственных опытах было использовано более 80 голов здоровых и больных анемией ягнят до 2-Змесячного возраста, которые были подобраны по принципу аналогов. Хозяйства, в которых проведены эксперименты, были благополучны по инфекционным и инвазионным боле шям.

Подопытные животные содержались в общих 01арах, и кормление и\ осуществлялась по кормовым рационам, разработанным в хозяйстве, при этом они получали сено житняковое, солому ячменную, концентрированные корма (ячмень), соль лизунец и воду вволю.

Диагноз на бронхопневмонию ставили на основании этиологических факторов, клинических и гематологических исследованиях. При этом выявили следующие этиологические факторы, вызывающие заболевания ягнят бронхопневмонией. Причиной возникновения бронхопневмонии ягнят, в основном, явились загазованность помещений, вследствие большой скученностью животных и отсутствием вентиляции воздуха в овцефермах, сквозняки и поение холодной водой.

Переохлаждение молодого организма приводило к нарушению кровообращения, расстройству терморегуляции, появлению застойных явлений в легких, что создавало предпосылки к возникновению бронхопневмонии у животных.

Короткая трахея, узкие бронхи, богатые кровеносными сосудами слизистые оболочки, выстилающие дыхательные пути, нежность и легкая ранимость, слабость эластичной ткани стенок альвеол, насыщенность их лимфатическими сосудами благоприятствовали быстрому распространению воспалительного процесса с верхних дыхательных путей в более глубоко расположенные бронхи, бронхиолы, а также альвеолы в легких.

Большую роль в развитии болезни сыграла отсутствие моциона, вследствие чего животные недополучали достаточного количества ультрафиолетовых лучей, при этом у животных снижался аппетит, нарушались обменные процессы, снижалась общая сопротивляемость организма.

При клиническом исследовании у больных животных установили следующие признаки: общее угнетение, отказ от корма, кашель, отдышка, повышение температуры тела, животные большее время лежали и вставали неохотно. При движении у больных животных кашель усиливался, видимые слизистые оболочки и конъюнктива глаз были бледными с синюшным оттенком, кожа эластичная, шерстный покров тусклый, сердечный толчок несколько усилен, тоны сердца глухие, пульс ритмичный среднего наполнения до 100-120 ударов в минуту.

Дыхание, учащенное с преобладанием брюшного типа, из носовых отверстий выделалась экссудат серозно-катарального характера, кашель был коротким, влажным и безболезненным. При аускультации грудной клетки слева в передней верхней и средней трети поверхности груди установлены влажные мелкопузырчатые хрипы и местами прослушивалось жесткое бронхиальное дыхание. При перкуссии в области 7-8

межреберного промежутков слева обнаруживали очажки притупления и в чти\ же местах прослушивали слабые дыхательные шумы.

Для комплексного подхода лечения больных бронхопневмонией ягнят мы использовали две группы подопытных животных. Первая группа животных была контрольная, где использовалась традиционный метод лечения используемые в хозяйстве, в которые входили гентамицин, сульфадимезин, тетравит, кофеин. Вторая группа животных помимо основного лечения дополнительно применяли ферроглюкин-75 по 1 мл через день.

Антибиотики и сульфаниламидные препараты применяли после определения чувствительности микрофлоры.

Ферроглюкин-75 использовали с целью повышения концентрации гемоглобина в организме больных животных, так как гемоглобин участвует в транспорте кислорода, а миоглобин образует его резерв.

При лабораторном исследовании морфологического состава крови до лечения и через 10 и 30 дней после лечения установили, что концентрация гемоглобина у подопытных животных претерпевали значительные изменения.

Через десять дней после проведения лечения произошло повышение концентрации гемоглобина в первой группе на 12,5 г/л, а во второй на 18,4 г/л, что соответственно составили 14,04% и 20,5 %.

На тридцатый день исследования уровень гемоглобина в крови имел более наглядные повышения, так в первой группе оно составило 13,8 ± 0,58 г/л (15.50%), а во второй - 23,6 ± 0,32 г/л (26,28%). Уровень концентрации гемоглобина в крови животных во второй опытной группе почти два раза превышали таковых у ягнят первой группы.

У ягнят первой опытной группы происходит увеличение количества эритроцитов, до допустимых пределов физиологических норм, против животных второй группы где наблюдалась достоверное повышение количества эритроцитов. (7,2±0,75 х 10|2/л, против (6,2 - 7,4 х 10|2/л) в начале опыта.

Определенные изменения в крови происходили показателей гематокритной величины у опытных животных. Так, у ягнят второй опытной группы этот показатель к тридцатому дню исследования достоверно повышалась, тогда, как в первой группе она удерживалась примерно на уровне первоначальных показателей.

Таким же закономерным изменениям подвергались показатели средней концентрации гемоглобина в эритроците подопытных ягнят в период эксперимента. Самая высокая концентрация гемоглобина в эритроците наблюдалась во второй группе

с 20,9 до 26,2 %. Тогда как у животных в первой группе наблюдалась повышение данного показателя всего лишь с 21,4 до 24,6 %, но эти показатели удерживались на уровне принятых нормативов (20,6 - 25,3 %).

Необходимо отметить, что у ягнят первой опытной группы к тридцатому дню исследования отмечались признаки анемии, сопровождающиеся бледностью слизистых оболочек, тогда как у ягнят второй группы отметили полное клиническое выздоровление за этот период.

Гематологические показатели в сочетании с клиническими признаками больных животных позволили нам выбрать наиболее эффективный метод терапии в сочетании с применением железосодержащих препаратов.

Нами установлено, что во второй группе животных наблюдались наиболее высокие показатели уровня гемоглобина, что объясняется введением ферроглюкина-75. Этот препарат повышает содержание гемоглобина крови, а гемоглобин является носителем кислорода, что дает возможность снабжать в полном объеме кислородом организм больного животного, что в совокупности приводит к быстрому выздоровлению больных приобретенной анемией ягнят. Во второй группе произошло полное выздоровление, тогда как в первой группе больные животные еще нуждались дальнейшего лечения.

Таким образом, лучшую терапевтическую эффективность наблюдали от применения ферроглюкина в комплексе с основным лечением, при этом отмечалась определенная тенденция к повышению показателей красной крови у животных во второй опытной группы.

2.3.3 Результаты экспериментов по изучению врожденной (первичной) и приобретенной (вторичной) анемии у телят вследствие инвазии

Изучение возрастной динамики гематологических показателей с рождения и до 3-месячного возраста у здоровых и больных анемией телят имеет большое практическое значение в изучении патогенеза болезней, так как именно в эти возрастные периоды телята больше всего подвергаются к разчичным заболеваниям.

Для изучения возрастной гематологии мы использовали клинически здоровых и больных анемией телят в количестве 20 голов, подобранных по принципу анапоюв с учетом живой массы и состояния здоровья. Кровь для морфологического исследования брали утром до кормления в определенные возрастные периоды (1, 10, 30. 60. 90, 145 дней).

Нами установлено, что новорожденные телята имеют наиболее высокую концентрацию гемоглобина в крови - 113,0 ± 2,5 г/л, эритроцитов - 7,3 ± 0,3 х 10|2/л. гематокритную величину - 50,3 ± 1,5 об,%, диаметр эритроцитов - 5,8 -ь 0,1 мкм, концентрацию гемоглобина в эритроцитах - 22,5 ± 1,0 % и объем эритроцитов - 68,9 ± 2,9 мк3. С возрастом у клинически здоровых телят гематологические показатели снижаются, начиная с 10-дневного возраста, и к месячному возрасту, концентрация гемоглобина уменьшается на 23,0 % , количество эритроцитов - на 13,7 %, гематокритная величина - на 18,5 %, диаметр эритроцитов - на 8,6 %, концентрация гемоглобина в эритроцитах - на 5,8 % и объем эритроцитов - на 5,5 %. В другие возрастные периоды происходит значительная стабилизация гематологических показателей у клинически здоровых телят, при этом следует отметить, что наблюдается тенденция к повышению некоторых показателей крови (эритроцитов, гемоглобина, диаметра эритроцитов, концентрация гемоглобина в эритроцитах) к 145- дневному возрасту.

Несколько иной характер имели гематологические показатели у больных анемией телят. У нарождающиеся молодняка отмечались общая слабость, вялость, быстрая утомляемость, слабо выраженный сосательный рефлекс, они неустойчиво опирались на конечности. При клиническом исследовании установили учащенное сердцебиение до 130 ударов в минуту, затрудненное дыхание и бледность видимых слизистых оболочек. На фоне ослабления общего состояния у больных телят наблюдались признаки расстройства желудочно-кишечного тракта, болезненного кашля, одышки.

По морфологическим показателям крови в первые дни жизни у больных анемией телят установлена концентрация гемоглобина 74,0 ± 2,2 г/л, содержание эритроцитов -6,4 ± 0,9 х 1012/л, показателя гематокрита - 38,0 ± 2,6 об.%, концентрации гемоглобина в эритроцитах - 19,5 ± 2,9 %, диаметра эритроцитов - 5,5 ± 0,1 мкм, объема эритроцитов -59,4 ± 0,8 мк3. В последующие возрастные периоды у больных анемией телят характеризуется некоторым снижением морфологического состава крови и стабилизации этого процесса до 3-месячного возраста. К этому возрастному периоду происходило снижение количества эритроцитов на 26,5 %, концентрации гемоглобина -на 27,0 %, показателя гематокрита - 34,7 %, тогда как диаметр эритроцитов увеличился на 0,1 мкм, концентрация гемоглобина в эритроцитах повысился на 10.5 %. К 145-дневному возрасту у больных телят произошло незначительное повышение количества эритроцитов на 7,4 %, концентрации гемоглобина в эритроцита на 22.8 %. одновременно происходило уменьшение концентрации гемо!лобина на 14.1 %.

показателя гематокритной величины на 33,7 %, диаметра эритроцитов на 3,6 %. обьем эритроцитов на 38,5 %, по сравнению с 10-дневным возрастом больных анемией юлят.

При исследовании мазков крови у больных анемией теля г, особенно в 60-дневном возрасте отмечались явления анизо- и пойкилоцитоза, где наряду с нормальными эритроцитами встречались уродливые неправильной формы эритроциты.

Концентрация сывороточного железа крови у клинически здоровых телят в первые дни жизни составляют в среднем 56,9 ± 1,9 мкг%, общая железо-связывающая способность сыворотки крови находится на уровне 376,9 ± 2,9 мкг% и коэффициент насыщенности трансферринов составляет 15,09 ± 0,9 %. Начиная с 10-дневного возраста у клинически здоровых телят происходит незначительные повышение этих показателей к месячному возрасту, а затем стабилизация их в 90-дневном возрасте с небольшим повышением уровня к 145- дневному возрасту.

Снижение данных показателей с возрастом объясняется недостаточным поступлением экзогенного железа, так как основной источник питания материнское молоко, которое содержит незначительное количество железа и не удовлетворяет потребность организма молодняка в этом элементе.

Концентрация сывороточного железа у клинически здоровых телят к месячному возрасту повышается на 46,8 %, общая железосвязывающая способность уменьшается на 13,4 %, коэффициент насыщенности транферринов повышается на 53,9 % в сравнении с новорожденными телятами.

Начиная, с 10-дневного возраста у клинически здоровых телят отмечается повышение концентрации сывороточного железа на 39,1 %, коэффициент насыщенности транефферинов - на 49,3 % к 145- дневному возрасту. Общая железосвязывающая способность в этом возрастном периоде уменьшается на 16,7 % к 145-дневному возрасту.

У больных анемией телят концентрация сывороточного железа у новорожденных составляет в среднем 36,0 ± 0,8 мкг %, На 10-30 день жизни его концентрация уменьшается с 32,6 до 29,2 мкг %. В период от 60-90 - дней этот показатель с незначительными колебаниями уменьшается от 26,6 до 25,0 мкг %. Общая железосвязывающая способность сыворотки крови у больных анемией телят в первый день составил 136,0 ± 1,8 мкг %, а с возрастом происходит некоторое повышение этою показателя и на 10-день жизни больных телят он составляет 172,0 ± 1.2 мкг %. В последующие возрастные периоды происходит постепенное повышение показателя и с некоторым снижением ее к 145-дневному возрасту, он достигает уровня 203.0 ± 0,5 мк1 %.

Коэффициент насыщенности трансфферинов в первые дни жизни составляет 26.47 ± 0,2 %, а с 10-дневного возраста происходит некоторый спад этого показателя, и к 145-днсвному периоду он повысился на 15.81 %. Самый низкий уровень отмечался у 3-месячных больных телят он составил 10,50 ± 0,9 %, что объясняется нарушением соотношения между концентрацией сывороточного железа и общей железосвязывающая способность сыворотки крови у больных анемией телят.

Таким образом, анализируя показатели обмена железа, морфологического состава крови у здоровых и больных анемией телят, с рождения и до 5-месячного возраста наиболее высокие показатели наблюдаются в первые дни постнатального онтогенеза. По многим параметрам показателей крови клинически здоровые телята во все возрастные периоды намного превышали показатели больных телят сверстников.

Особую актуальность имеет ранняя диагностика нарушения обмена веществ у животных специализированных ферм, так как возникают эти болезни медленно, бессимптомно, протекают хронически и охватывают большое поголовье скота, приводя к значительному снижению его продуктивности, биологической ценности и повышению себестоимости животноводческой продукции. На этой основе ранняя профилактика и терапия нарушения обмена веществ у животных становятся основными в мероприятиях ветеринарных специалистов.

Обмен веществ и энергии - основная функция организма, с ней связаны рост, развитие, размножение, продуктивность животных и качество получаемой продукции.

Подбор животных в опытные группы осуществлялся по принципу аналогов с учетом породы, возраста, живой массы и других показателей клинического статуса. В опыте были использованы пятидесяти голов телят в возрасте 8-10- месяцев, из которых были сформированы пять подопытных групп.

Контрольная группа, которая не подвергались каким-либо обработкам. Тогда как другим опытным группам телят применяли противопаразитарные препараты. В первой опытной группе применяли 1%-ный ивермектин и кокцидиостатик. второй опытной группе - ивермектин и повторно заражали гельминтами, третей опытной группе - ивермектин, а четвертой опытной группе ивермектин, кокцидиостатик и повторно заразили гельминтами.

Подопытные животные находились в одинаковых условиях кормления и содержания.

Кровь для биохимических исследований брали три раза: в начале опыта, а затем через двенадцать и тридцать дней.

Анемию у подопытных групп телят установили на основании клинических исследований, определение морфологических показателей крови. при ном были обнаружены снижение концентрации гемоглобина, в мазках крови выявлены патологические формы эритроцитов, которая сопровождалась явлениями анизоцитоза и пойкилоцитоза.

Клиническими исследованиями у подопытных групп животных установили бледность видимых слизистых оболочек, малоподвижность и снижение аппети га.

Результаты проведенных экспериментальных исследований показали, нш концентрация гемоглобина в крови животных контрольной группы через 12 дней значительно снизилась на 14,7 г/л, а в четвертой опытной группе на 9 г/л. Во второй и третей, опытных группах наблюдалась тенденция к незначительному снижению этих показателей. В первой опытной группе отмечалось повышение концентрация гемоглобина на 1,3 г/л.

Весьма интересные данные получены через тридцать дней в первой опытной группах, где отмечалось повышение концентрации гемоглобина соответственно на 5,9

В результате проведенных исследований установлено, что содержание общего белка в сыворотке крови в начале опыта примерно находились на одном уровне во всех опытных группах. Через двенадцать дней показатели общего белка претерпевали заметные уменьшения в контрольной группе, тогда как в первой, второй, третей, четвертой опытных группах происходило повышение этого показателя соответственно на 0,74; 0,51; 0,7 и 0,74 г%.

Значительное изменение концентрации общего белка у подопытных животных нами установлено на тридцатый день исследования. Так, в контрольной группе этот показатель удерживался на прежнем уровне. Увеличение содержания общего белка отмечали в первой и третей, опытных группах животных соответственно на 1,1 и 0.99 г%, тогда как во второй и четвертой опытных группах происходило снижение этого показателя на 0,87 и 0,74 г% по сравнению с предыдущими днями исследований.

Концентрация общего кальция в сыворотке крови в начале опыта находилась во всех подопытных группах животных примерно на одном уровне с незначительными колебаниями. Показатели общего кальция на двенадцатый день исследования имели определенные различия. Так, в контрольной, во второй, третей, четверкж опытных группах этот показатель немного снизился, а в первой опытной группе имел тенденцию к незначительному повышению. Результаты исследования, полученные на грнлцатый день показали, что содержание общего кальция в контрольной, первой н и |р^т...ч

г/л.

рос. НАЦИОНАЛЬНАЯ БИБЛИОТЕКА С.Петербург ОЭ 300 мт

!

опытных группах повысились соответственно на 0,01; 0,08 и 0,07 ммоль/л, а во второй и четвертой опытных группах этот показатель снизился с 2,42 ± 0,48 до 2,01 ± 0.60 ммоль/л и с 2,35 ±0,37 до 2,08 ± 0,44 ммоль/л.

Концентрация неорганического фосфора в сыворотке крови у подопытных теля г в начале опыта находилось на определенном уровне между группами. Значительные изменения этого показателя происходили на двенадцатый день опыт. 1 ак, в первой, во второй, третей опытных группах наблюдалось повышение этого показателя соответственно на 0,06; 0,11 и 0,45 ммоль/л, а в контрольной и четвертой группах отмечалось снижение соответственно на 0,03 и 0,09 ммоль/л.

К тридцатому дню опыта концентрация неорганического фосфора в подопытных группах имела определенные различия. Так, в контрольной, в первой и третей группах этот показатель повысился с 1,12 ± 1,48 до 1,17 ± 1,24; с 1,11 ± 0,99 до 1,20 ± 1,83 и с 1,18 ± 0,80 до 1,48 ± 0,92 ммоль/л. Наряду с этим во второй и в четвертой опытных группах этот показатель значительно снизился.

Изложенные результаты исследований свидетельствуют об определенных изменениях биохимических показателей крови подопытных групп животных, наряду с этим следует отметить, что за период наблюдений содержание общего белка, общего кальция и неорганического фосфора в первой опытной группе имел тенденцию к постепенному повышению и стабилизации. Это объясняется тем, что в данной группе телятам применяли противопаразитарные препараты, которые способствовали освобождению организма от гельминтов и кокцидий.

У телят второй и в четвертой опытных группах, прошедшие значительные снижения общего белка, кальция и фосфора в крови, связано тем, что у животных данных групп было проведено экспериментальное заражение остертагиями.

В контрольной группе, которая оставалась интактной и была спонтанно инвазированной, биохимические показатели крови не претерпевала значительных изменений и сохранились на исходном уровне.

При изучении состояния липидного обмена у подопытных телят установлено, что количество холестерина через двенадцать дней претерпевала определенные изменения в крови животных, которая в контрольной, первой и третей группах незначительно повышалось, а у телят в первой и четвертой опытных групп имела тенденцию к снижению.

На тридцатый день исследования концентрация холестерина в крови подопытных групп телят имели значительные изменения, так во второй, третей и четвертой опытных группах произошли его достоверные повышение. Особенно, -но отмечено во

второй опытной группе, где уровень холестерина возрос на 1,6 ммол1>/л. И контрольной и в первой опытной группах отмечалось значительное снижение лих показателей соответственно на 0,89 и 0,81 ммоль/л. по сравнению с первоначальными показателями.

Показатели малонового диальдегида (МДА) в начале опыта примерно удерживались на одном уровне с некоторыми колебаниями. Но нашим наблюдениям установлено, что показатели малонового диальдегида через двенадца!ь дней претерпевают значительные изменения, по сравнению с первоначальными показателями. Так во всех подопытных группах наблюдалось повышение МДА. особенно это выражалась в контрольной, во второй и четвертой группах, а в первой и третей, опытных группах отмечали недостоверное повышение данного показателя.

К тридцатому дню исследования показатели малоновою диальдегида достоверно снижались во всех подопытных группах, по сравнению с первоначальными показателями. Так в первой опытной группе просматривалось снижение МДА на 6,71 нмоль/мл и этот показатель оказался наиболее низким по сравнению с другими подопытными группами. В контрольной и четвертой опытной группах также произошло снижение малонового диальдегида, против животных второй и третей, опытных групп.

Полученные результаты исследований свидетельствовали об изменениях перекисного окисления липидов, в частности по показателю малонового диальдегида в опытных группах телят, что указывает на то, чем выше концентрация гемоглобина, тем меньше показатель малоновый диальдегид и наоборот, чем ниже показатель гемоглобина тем выше уровень малонового диальдегида в крови больных анемией телят.

Применение противопаразитарных препаратов у подопытных животных приводили к незначительному торможению перекисного окисления липидов и активации мембранообразующих ферментов и повышению уровня гематоло! ических показателей крови у подопытных животных.

Таким образом, на основании полученных результатов можно сделать заключение, что показатель малонового диальдегида (МДА) является объективным показателем для оценки прогноза течения приобретенной анемии ) телят и разработки мер борьбы с ней и проведение комплексного лечения паразитарных заболеваний в сочетании с железосодержащими препаратами и ашиоксидангами.

2.3.4 Результаты применения топинамбура, феррогпюкина, чиктоника при лечении бальных анемией телят

Литературные данные касающиеся проблемы алиментарной анемии телят, разноречивы и не отвечают запросам практики, нуждающейся в эффективных средствах борьбы с болезнью. Вопросы этиологии и папнснеза. лечения и профилактики анемии у телят мало изучены.

Изучение липидного обмена при анемии представляет особый интерес, так как с одной стороны, дефицит железа, антиоксидантные свойства которого известны в медицине ( Владимиров Ю.А., Арчаков А.И., 1972) должен снижать уровень процессов перекисного окисления липидов ( ПОЛ), а с другой стороны, гипоксия, которая развивается при анемиях должна вести к ускорению этого процесса ( Коган А.Х., и соавт.,1976).

Доказано, что сдвиги в реакциях, опосредуемых перекисными интермедиатами, в значительной степени определяют направленность и интенсивность всего клеточного метаболизма ( Бурлакова Е.Б.,1979).

Исследования последних лет показали, что некомпенсированная активация процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты клеточных мембран играет важную, а иногда и ключевую роль в развитии многих патологических состояний. Избыточное накопление токсических продуктов перекисного метаболизма приводит к тяжелому течению заболеваний, к повреждению органов и тканей.

Изучение этого процесса имеет важное клинико-диагностическое и прогностическое значение, кроме того, интерес ученых к этой проблеме об) словлен возможностью изучения механизмов патогенеза на мембранном уровне, значение которых необходимо для разработки эффективных методов терапии.

При алиментарной анемии значительно снижается уровень гемоглобина, накапливается в печени и селезенке большое количество гемосидерина. а количество железа в организме повышается в несколько раз. Это явление указывает на нарушение синтеза гемоглобина, на потерю способности организма ассимилировать железо, обусловленное дефицитом меди, кобальта и марганца. Указанные микроэлементы, являясь необходимой составной частью организма животных и входя в комплексные соединения с белками, ферментами и витаминами, обеспечиваю! нормальный гемопоэз, предупреждая развитие анемии.

Наряду с железом большую роль в кроветворении шраюг такие минеральные вещества: медь, кобальт, марганец, никель, цинк, молибден, хром н лр>ше. Они

оказывают влияние на обмен железа, созревание клеток коснюго мона, на белковый состав сыворотки крови. Кроме того, микроэлементы участвуют в синтезе ферменюв. гормонов и витаминов.

Несмотря на многочисленность накопленных к настоящему времени исследований в медицине, посвященных патогенетической и прошосгической значимости процессов липопероксидации при анемии, в проблеме ос|аетея множество открытых вопросов, нуждающихся в дальнейшем изучении ею у животных. Одним и I них является активность и значение реакций перекисного окисления липидов (ПОЛ), а также защитная роль антиоксидантного состояния (ДОС) в развитии железодефицитной анемии (ЖДА).

Целью настоящего исследования явилось изучение лекарственной формы топинамбура, чиктоника, ферроглкжина на процессы перекисного окисления липидов и состояние антиоксидантной системы при анемии телят в возрасте 4-5 месяцев.

Опыты проведены на 80 телятах черно-пестрой породы, которые были разделены на 4 подопытные группы и контрольную на базе в АО «Нура» Целиноградского района.

Ферроглюкин-75 вводилась внутримышечно с учетом дефицита железа у животных в дозе 2,0 мл через день в течение шести дней.

Лекарственную форму топинамбура задавали в дозе 10 г/кг и чиктоник - в дозе I мл/л питьевой воды в течение десяти дней.

Чиктоник представляет собой жидкую форму в состав, которого входят витамины, аминокислоты и макро и микроэлементы. Выпускается в бутылях объемом один или два литра. Производится в республике Беларусь.

У подопытных групп животных брали кровь для морфологических и биохимических исследований до дачи, через двадцать и тридцать дней после дачи препаратов.

Состояние антиоксидантной системы организма и процессов перекисного окисления липидов оценивалось по уровню малонового диальде!ила. активности катал азы в сыворотке крови.

Результаты исследований показали, что при применений вышеуказанных препаратов концентрация гемоглобина в контрольной труппе понизилась ни 1.92 г/л, а первой опытной группе этот показатель повысился на 4,95 г/л, во второй - на 21.91 г/л, а в третьей - на 28,64 г/л, по сравнению с первоначальными пока ¡а гелями. Показателям концентрации гемоглобина в крови телят опытных групп на двадцатый день исследования были достоверно выше по сравнению с таковыми \ живо ни,IX контрольной группы. Соответственно, первой опытном группы на 5.85 |/л. шорой -

24,15 г/л и третей - 31,03 i/л, и к концу эксперимента то есть на тридцатый лень исследования приближался к физиоло! ическим параметрам.

Существенные изменения за период опыта произошли в показателях железа. IIa двадцатый день исследования уровень концентрации железа в сыворотке крови во всех группах животных имела тенденцию к повышению. В частности, в контрольной группе повышался уровень железа на 0.31 мкмоль/л. У животных опытных групп концентрация железа повышалась достоверно, в первой опытной группе на 0.87 мкмоль/л, а во второй и третьей - на 1.47 и 2.29 мкмоль/л соответственно. Все показатели уровня железа опытных групп телят также были достоверно выше по сравнению с таковыми у контрольных животных, к 30 дню опыта приближалась к допустимой норме.

Несколько иной характер носил показатель общего белка в сыворотке крови в опытных группах животных, который претерпевали незначительные изменения. Наиболее существенные изменения данного показателя крови наблюдались на двадцатый день исследования у животных третьей опытной группы, где происходило повышение этого показателя на 4,46 г/л, против на 2,74 и 3,44 г/л соответственно у животных второй и первой. К тридцатому дню исследования эти показатели уровня белка крови животных опытных групп находились в нижних пределах физиологической нормы, тогда как концентрация общего белка крови контрольных телят были ниже нормативных величин.

Концентрация кальция и фосфора в сыворотке крови у подопышых животных также претерпевала небольшие изменения. Наиболее значительное повышение этих показателей крови наблюдалась у животных во второй опытной группе, где концентрация кальция повысилась на 0,39, фосфора - на 0,06 ммоль/л. В первой и третей, опытных группах животных произошли незначительные повышения этих показателей, наряду с этим в контрольной группе наблюдалась снижение фосфора на 0,04 ммоль/л. Дальнейшее исследование показали, что концентрация кальция и фосфора крови животных опытных групп значительно превосходили таковых контрольных животных и приближались к уровню принятых нормативов.

Концентрация фермента каталазы в сыворотке крови на двадцати день исследования у опытных групп животных значительно повышалось по сравнению с таковыми контрольных телят. В первой опытной группе этот показатель повысился на 6,01 мкат/л. тогда как во второй - на 7,92 и в третьей - на 6.78 мкат/л. что было достоверно выше, чем у контрольных 1елят. 1'акая закономерность продолжалась до 30 дня исследования, где произошло повышение каталазы в 2, 3. 4 опытных iруинах на

6,93 мкат/л; 8,93 мкат/л и 8,06 мка1/л соответственно против пока1а I елей кошролыюн фуппы, которые удерживались на прежнем уровне.

Концентрация вторичного продукта псрекисною окисления липидои малоновою диальдегида во всех подопьггных группах животных претерпевали нс1начи1с.тьныс колебания, но наряду с этим следует отметить, что эти показатели имели тенденцию к уменьшению. Показательным в эюм отношении выглядела концешрация малоновою диальдегида во второй опытной группе, где он снизился на 0,31 мкмоль/л, а в первой -на 0,28 и в третей - на 0,25 мкмоль/л. Уровень малонового диальдегида в сыворотке крови снизился в первой опытной группе на 0,27, во второй - на 0.35 и третей - на 0.31 мкмоль/л по сравнению с контролем. Уровень малонового диальдегида на тридцатый день исследования в опытных группах постепенно снижался, а в контрольной I рупне имел тенденцию к незначительному повышению.

Количество общих липидов в сыворотке крови в опытных группах повышались, тогда как в контрольной группе, наоборот произошло незначительное снижение этого показателя. В первой опытной группе животных этот показатель повысился на 0.41 г/л. во второй - на 0,59 и третей - на 0,62 г/л на двадцатый день исследования. Дост оверное повышение уровня общего липида крови наблюдалась на тридцатый день исследования в опытных группах животных по сравнению с первоначальными данными с контролем.

Концентрация холестерина в сыворотке крови в опытных группах животных снизились, а в контрольной группе - наоборот произошло незначительное ее повышение. Умеренно снижался уровень холестерина на двадцатый день исследования выглядело оно следующим образом: в первой опытной он снизился на 0.99. во второй -на 0,75 и третей - на 1,02 мкмоль/л. Дальнейшее снижение уровня холестерина крови на тридцатый день исследования наблюдалась у животных во всех опытных групп животных, в контрольной удерживалась примерно на прежнем уровне с незначительном повышением.

Проведен анализ особенностей клинического течения анемии в зависимости с уровнем эритроцитов с микроядрами. Подсчет эритроцитов с микроядрами проводился только по мазкам периферической крови. В контрольной группе показатель уровня эритроцитов с микроядрами был достоверно выше и составил 0.030 ± 0.002%. то!да как в первой опытной группе животных микроядра в эритроцитах составили всего лишь 0,009 ± 0,005%, причем в крови других опытных групп не обнаруживали эритроциты с микроядрами. По мере усугубления анемии у животных контрольной труппы имело место нарастания эритроцитов с микроядрами (0,019-0.025-0.030 %). особенно но было выражено к тридцатом; ;шю исследования.

Нами установлено, что при нарастании тяжести анемии рсжо мадас! уровень гемоглобина и увеличивается показатели микроядерною тесга.

Таким образом, но результатам исследований усыновлено, чю но всех опытных группах происходит нормализация обменных процессов и линидного обмена, наиболее лучше этот процесс протекает во второй и третей, опытных группах животных.

Курашвили J1.B., Волков A.C. 1993 указывают на то. что в процессе нтоксикации метаболические расстройства приводят к гиперлипидемии. Ото подтверждается данными наших наблюдений. Так, уровень холестерина в сыворотке крови больных животных в контрольной группе составил 4,6010.30 мкмоль/л. что в среднем на 45,43% больше показателей опытных групп животных.

Умеренно снижали уровень малонового диальдегида препараты топинамбур и ферроглюкин соответственно на 57,06% и 35,98% по сравнению с первоначальным уровнем.

В то же время топинамбур и ферроглюкин наиболее существенно повышали активность антиперекисного фермента каталазы (соответственно на 48.78% и 40,23%). что указывает на угнетение образования липоперекисей липидов. Менее существенно восстанавливалась активность этого фермента при применении чиктоника (на 36,65%) и практически не повышалась в контрольной группе животных, даже имела тенденцию к снижению уровня (на 3,63%).

Таким образом, результаты проведенных исследований показали, чю препараты из топинамбура, содержащие полифенольные соединения, обладает выраженным антиоксидантным эффектом. В основе такого действия, по-видимому, лежит реакция непосредственно ингибирования образующихся свободных радикалов, носко 1ьку им присуща структура, сходная с природными антиоксидантами типа альфа-токоферола, характерно наличие ароматических колец со свободными i идрокенльными i ипами.

3. ВЫВОДЫ

1. Одним из патогенетических звеньев развития метаболических нарушений при анемии является значительная интенсификация липонероксидации на фоне выраженного угнетения антиоксидантной защиты.

2. Степень нарушения в системе перекисною окис.юния .нншдов и антиоксидантной защиты и выраженность мембранострукт>риых тченений в

эритроцитах больных анемией животных зависш 01 оепепи 1яжес1и болеши и длительности заболевания, от вредных воздействий окружающей срсды.

3. У больных анемией животных отмечасп-я шачиюльныс тиснения свободнорадикальных процессов. По мере нарастания степени IяжесIи о!мечас1ся активация процессов перекисного окисления липидов. чю ироявляося понижением уровня малонового диальдегида в эритроцитах (до 2,08 .ь 0.41 мкмо.п,'.!). Кроме кно. достоверна, угнетена антиоксидантная защита, о чем свидстельонуе! снижение активности каталазы (до 18,13 ± 0,57 мкат/л).

4. Состояние микроядерного теста у больных анемией животных является объективным показателем степени тяжести и прогноза течения жилеюдсфицитной анемии. При показателях микроядерного теста, составляющих до 0.02% у больных отмечается относительно легкая степень и благоприятное течение анемии, бет развития каких-либо осложнений. При показателях до 0.04% появляется риск пеблаюприягного течения, а при показателях от 0,05% и выше у всех больных животных может диагностироваться как тяжелая степень анемии.

5. При приобретенной анемии, на фоне катаральной бронхопневмонии, дополнительное назначение к основному лечению железосодержащих препаратов достоверно улучшает состояние больных и способств>ет более быстрому их выздоровлению.

6. Под влиянием железосодержащих препаратов у больных животных постепенно нормализуются концентрация эритроцитов, гемо!лобина. средней концентрации гемоглобина в эритроците, восстанавливаются липидный и основные обменные процессы и ряд других гематологических показателей, исчезают клинические признаки болезни, что в совокупности свидетельствуют о выздоровлении больных животных.

7. Выявленные нарушения окислительного метаболизма обуславливают необходимость разработки рационатьной тактики использования аппижепдангоз для комплексной терапии больных анемией животных.

8. Применение лекарственной формы топинамбура в до<е К) г/кг в ¡ечение десяти дней в условиях сбалансированного суточного рациона по основным питательным веществам вызывает достоверное снижение уровня про.'окюв перекисши о окисления липидов малонового диальдегида в сыворотке крови (01 1.91 ± 0.03 до 0.82 з= 0.37 мкмоль/л), повышение активности ферментативного звена антиоксилантной системы, что проявляется достоверным увеличением уровня фермента каюллы н сыворотке крови (от 19,86 ± 0,66 до 28.06 ± 0.82 мкат/л).

9. С целью коррекции нарушений морфофункниональных свойств эритроцитов нри анемии целесообразно применение сочетанной терапии с препаратами железа и антиоксидантами. Разработаны информативные критерии диагностики, оценки степени тяжести и эффективности проводимой терапии у больных анемией живошых.

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. На основании полученных результатов исследований нами разработано временное наставление «Топинамбур для лечения и профилактики анемии у молодняка животных», утвержденной департаментом ветеринарии МСХ Республики Казахстан 2003 г.

2. По результатам диссертационной работы издана моно! рафия "Изучение некоторых аспектов патогенеза и лечения анемии молодняка животных". 10.6 пл., Астана 2003,170 с.

3. Результаты исследований вошли в учебник по клинической диагностике для студентов ветеринарной медицины и ветеринарной санйтарни (авторы А.Е. Ермаханов. К.К. Мурзагулов и другие) Алматы, 2003-285 с.

4. Для лабораторной диагностики за состоянием обмена веществ и течение анемии у молодняка животных рекомендуем включить определение концентрации в крови малонового диальдегида и активности каталазы. Критериями риска развития анемии у животных могут служить концентрация малонового диальдегида (более 1.21 ± 0,27 мкмоль/л) и активность каталазы (менее 27,19 ± 0,57 мкат/л).

5. Предложен рациональный способ изготовления и применения лекаравенной формы топинамбура в дозе 10 г/кг живой массы, для лечения и профилактики анемии животных, как корректирующий фактор повышения активности перекисною окисления липидов.

5. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. К.К. Мурзагулов Диагностика анемии у ягнят //Реф. журнал «Ветеринария», 1984.-№6.-№ 123-84. Ден.

2. К.К. Мурзагулов. Б М. Анохин Возрастная динамика гематологических показателей у ягнят русской длинношерстой породы нижнедевицкого тина //Реф. журнал «Ветеринария», 1984.-№9.-№ 124-84. Деп.

3. K.K. Мурзагулов, B.C. Ну ¡лама Применение ферроколана для лечения аиемни ягнят//Инф. листок, ЦНТИ, 1984.-№81-84.

4. К.К. Мурзагулов Желеюсодсржашис препараты при анемии tu im // Ветеринария, 1984.-№9.-С.58-59.

5. Б.М. Анохин, К.К. Мурзагулов. Ю.Н. Кондратьев Профилактика апимешарнон анемии у ягнят//Ветеринария. 1984.- I2.-C.51-53.

6. Б.М. Анохин, К.К. Мурзагулов Морфологические и биоэлемеитные иокаштели крови у здоровых и больных анемией ягнят русской длинношерсгной породы нижнедевицкого типа. -Сб.научн. тр.//Диагностика и терапия нечарашых болешей сельскохоз. животных.-Воронеж, 1986.-С. 11-14.

7. К.К. Мурзагулов, В.А. Пашенцев. Б.С. Шахманов Опыг профилактики алиментарной анемии поросят с использованием жслезодекстрановых препаратов//Инф. листок ЦНТИ, 1988.-№127-88.

8. В.А. Пашенцев, К.К. Мурзагулов. Б.С. Шахманов Ростостимулирующее действие некоторых биологически активных веществ нри откорме молодняка hИнф. листок ЦНТИ,1988.-№113-88.

9. В.А. Пашенцев, К.К. Мурзагулов, Б.С. Шахманов Применение биологически активных веществ при откорме и выращивании поросят //Сб. межвузов. «Совершенствование технологий содержания и кормления свиней» - Краснодар. 1988-С.50-53.

10. К.К. Мурзагулов, Б.М. Анохин Влияние железосодержащих препаратов на показатели крови при анемии ягнят- Межвузов, тематич. сб.//Болезни я|няг и норосят-Целиноград, 1989.-C.33-37.

11.Б.С. Шахманов, В.А. Пашенцев. К.К. Мурзагулов. A. I. Зассишили Применение некоторых биологически активных веществ при выращивании и oi корме молодняка свиней - Межвузов, тематич. сб./' «Свшшна.>-Одесса.1989.-С.54-59.

12. В.А. Пашенцев. К.К. Мурзаг\лов. Б.С. Шахманов Ниоло!ичоеки активные вещества при откорме молодняка-//! Международн. научно-пракгич. конф. по аграрным проблемам-Алматы.1993.

13. В.А. Пашенцев, К.К. М>р1ат>лов, Б.С. Шахманов, Д. Г. 1ле)метов Продуктивность и обмен веществ у молодняка сельскохоз. животных при использовании некоторых биол. активных веществ: Сб. на\чп. гр. «Пути повышения продуктивн. животн.». - Бишкек. I99J. •- С. 135-138."

14. К.К. Мурчасулов, Л .Д. Танраев. М.К. Г-'внеева Ишсиенис биохимических показателей крови телят при оаертагиозло-эймериозной инвазии - //Вестник науки ААУ им. С. Сейфуллина-1.11.-в.7-Х.-Астана.2000.-С 199-201.

15. К.К. Мурзагулов, Л.Д. Ганраев. Е. Каз Состояние липидпою обмена и анемия у телят, пораженных посри! иозно-жмериозной инвазией - //Весшик науки ААУ им. С. Сейфуллипл-т. 11 .-».9-. 0-Лсглна.2009.-С 181-185.

16. Т.С. Сейтембетов. К.К. Мурза! улов, А.К. Керимкулов. М.К. 1 ннеева Особенности липидного обмена у гелят при анемии -//Астана медициналык журналы-№1-2001.-С. 135-138.

17. К.К. Мурзагулов. М.Г. Зухрабов. А.Б. Бикбулатова. Т.С. Сейтембетов Изучение особенностей липидною обмена у телят при анемии - //Ученые Записки Казанского гос. академии вет. медицины им. Н.Э.Баумана, т.173.-Казань 2002.- С. 198202.

18. К.К. Мурзагулов, М.Г. Зухрабов, М.К. Кунакбаева, А.Б Бикбулатова Состояние показателей перекясжпо окислеиия липидов и аптиоксидашнон защит у здоровых и больных анемией коров - //Ученые Записки Казанского гос. академии вет. медицины им. Н.Э.Баумана, т.173.-Казань 2002,- С.203-208.

19. К.К. Мурзагулов, М.Г. Зухрабов, М.К. Кунакбаева. А.Б. Бикбулатова Состояние перекисного окисления в организме при анемии животных - // Материалы Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии, ч,2. - Казань 2002.- С. 56-57.

20. К.К. Мурзагулов, М.Г. Зухрабов. А.Б. Бикбулатова. Т.С. Сейк-мРетов Показатели липидного обмена у ге ш при анемии // Ма!ериалы Всероссийской на>чно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и шоюхнии, ч.2. - Казань 2002.- С. 54-56.

21. К.К. Мурза1улов. М.Г. 3\храбов. А.Б. Бикбулатова, Т.С. Сейтембетов Изучение особенностей липидного обмена телят при анемии //'Ветеринарный врач № 2 (10) 2002.-С.54-56.

22. К.К. Мурзагулов И пченис патогенеза анемии у животных по показателям перекисного окисления липидов и ашиоксидантной защиты /'/Вестник на\ки Л Л "У им. С. Сейфуллина-т.Ш.-в.7 -Астана. 2002. - С. 300-363.

23. К.К. Мурзагулов. М.Г. Зухрабов Влияние топинамбура, феррш люкина. чиктоника на липидный обмен тсчят. больных анемией //Ученые Записки Каншского гос. академии вет. медицины им 11.') Баумана, т. 175 - Кшань 2003- С. 124-130.

24. К.К. Мурш1улон. М.]'. Чучраоов Имснепие нскоюрмх морфоло! ичеекнх и биохимических показа|елей крови юляI. Готьпых анемией при ршличных лечебно-профилактических мероприЯ1иях //Ученые Записки Ка<анско|о юс. академии вс1. медицины им. Н.Э.Баумана, т.175 - Казань 2003.- С. 130-136.

25. К.К. Мурзагулов. Т.С. Сейтембегов. М.Г. Зухрабов И ¡учение нскоюрмх аспектов патогене ¡а и лечения анемии моподняка животных /.' Мощи рафия. Лс|ана 2003.-170 с.

26. К.К. Мурзагулов. М.Г. Чухрабов Результаты применения топинамбура кроликам при анемии // Материалы юбилейной Междупаролной научно-производственной конференции по актуальным проблемам всюринлрии и юоюмши. -Казань 2003.

27. К.К. Мурзагулов, М.Г. Зухрабов Влияние бентонита на покашели крови кроликов при анемии П Материалы юбилейной Международной научно-производственной конференции по актуальным проблемам ве!ерииарии и «ннехнии. -Казань 2003.

Подписано к печати Л' ?? ° 1 ~ ■ Формат 60x84/16

Заказ '13 Тираж /¿У экз. Усл.-печ. л. ¿

Бумага офсетная Печать RISO

Центр информационных технологий КГАВМ 420074, Казань, Сибирский тракт, 35.

I

138Í6

Актуальность темы. Большой экономический ущерб хозяйствам наносят многие болезни незаразной этиологии (бронхопневмония, гастроэнтерит, рахит, анемия и др.), которые приводят падежу молодняка и к возрастающему препятствию развития отрасли животнодства.

Успешное решение данной проблемы возможно лишь при глубоком изучении! их этиологии,, патогенеза и разработки лечебно-профилактических мероприятии, а также обеспечения животных разнообразными питательными веществами, в том числе и микроэлементами, которые в организме животных играют не маловажную роль регуляторов основных физиологических процессов: размножения, роста, развития, кроветворения и других.

Железодефицитные анемии (ЖДА) - наиболее часто встречаются среди болезней молодняка сельскохозяйственных животных (Л.И. Идельсон, 1981, Ю.Г. Митерев, П.М. Альперин, 1983, Л.И: Дворецкий, 1998) и представляет серьезную проблему ветеринарии. Несмотря на более чем вековой опыт изучения ЖДА, актуальность проблемы сохраняется; в связи с распространенностью данного заболевания и приобретением новых этиопато-генетических особенностей, связанных с различными биогеохимическими условиями? (Л.Н; Салпытов, В.Н; Шустов, Т.Е. Евзерова, Л .Я; Фетисова,1996).

Анемия, снижая защитные силы организма, способствует формированию различных заболеваний; оказывает отрицательное влияние на течение сопутствующих патологий, сопровождается выраженными осложнениями, связанными с синдромами гипоксии и гипоксемии. Наличие ЖДА нарушает общее состояние организма и вызывает функциональное расстройство со стороны многих органов и систем;

При железодефицитной анемии повышается абсорбция железа, что должно характеризоваться интенсивностью общего эритропоэза (Я;Д. Сахибов, 1981). Однако у больных ЖДА преобладает неэффективный эри-тропоэз, который служит показателем степени сидеропенических нарушений в тканях (С.И.Рябов, Г.Д. Шостка,1975, Я;Х. Хакимова, Л.Ю. Козырев, Л.Ю. Исахарова, 1985, Е.Б. Владимирская, 1990).

Одним из методов неэффективного эритропоэза, является микроядерный анализ (I.T. MacGregor, С.М. Where, D.H. Gourd, 1980). Эритроциты с микроядрами относятся к группе регенеративных форм клеток, появление которых одними авторами объясняется как компенсаторный механизм (И.А. Кассирский, F.A. Алексеев; 1970).

Анализ частоты нормохромных эритроцитов с микроядрами в периферической крови мышей являлся как метод выявления мутагенов (B.C. Журков, П. Ресснер, А. Пасторкова и другие 1986) другими как свидетельство нарушения созревания клеток эритроидного ряда (H.H. Ильинских, И.Н. Ильинских, Е.Ф. Бочаров, 1986).

Таким образом, исследование в световой микроскопии морфологических особенностей эритроцитов в периферической крови может дать ценную информацию о состоянии клеток системы эритрона, для прогностической оценки, контроля эффективности проводимых лечебных мероприятий (И.А. Быкова, 1991; H.H. Ильинский, В.В: Новицкий, H.H. Ванчугова и др., 1992; Radiate. And Environ. Biophys., 1981).

Процессы свободнорадикального (перекисного) окисления липидов в организме привлекают в настоящее время все большее внимание исследователей. Это связано с признанием решающей роли в жизнедеятельности организма биомембран, в структуре которых важное место занимают ли-пиды с высоким содержанием жирных ненасыщенных кислот (ЖННК).

Метаболические реакции, в которые вовлекаются липиды в нормальных (физиологических) условиях, а также при развитии многих патологических процессов имеют огромное значение. Для функционирования биологических мембран не только как структурных элементов, определяющих внутриклеточную компартментализацию, но и как важнейших регуляторов проявления жизнедеятельности клетки: проницаемости, рецепции, ферментативного катализа и т.д.

Среди различных классов реакций липидного обмена, процессы пере-кисного окисления липидов (ПОЛ) не только играют важную роль в нормальной физиологии и биохимии клетки, но и выступают как универсальное неспецифическое звено механизмов развития различных патологических состояний. В" зависимости от интенсивности и длительности, действующих на организм факторов физической, химической-и'биологической природы изменения в регуляции реакций перекисного окисления липидов могут носить обратимый характер с последующим возвращением его к норме. Приводить к переходу на другой уровень с авторегуляции и, наконец, некоторые из воздействий, разобщая этот механизм саморегуляции, могут привести к невозможности осуществления регуляторных функций и превращаться в ведущее звено патогенеза различных заболеваний.

Именно поэтому изучение характера реакций перекисного окисления липидов, а также состояния антиоксидантной системы, регулирующей их течение в условиях действия на организм продуктивных животных экстремальных факторов современной технологии животноводства необходимый этап исследований, направленных на разработку научно-обоснованных методов управления процессами адаптации и комплексной терапии, профилактики и реабилитации наиболее распространенных заболеваний сельскохозяйственных животных.

Состояние изученности вопроса. В настоящее время при коллективном ведении животноводства особую актуальность приобретает создаV ние технологии содержания животных, отвечающей их физиологическим потребностям. Она должна предусматривать и средства борьбы с болезнями алиментарного характера, в том числе железодефицитной анемией.

При разработке научно обоснованных методов прогнозирования, своевременной и эффективной профилактики алиментарной анемии молодняка необходимо дать оценку состояния их организма: в отношении этой болезни в сельскохозяйственных предприятиях с различными системами содержания.

Изучение особенностей течения болезни при различных условиях содержания-и выращивания молодняка животных поможет определить, в каком направлении вести совершенствование технологии животноводства.

У молодняка при неблагоприятных условиях содержания и кормления развивается анемия; что замедляет рост и развитие их, а также вызывает нарушения всех основных функций у животных в связи с тем, что железо и ряд других важных микроэлементов не входят в состав ферментов, осуществляющих метаболизм их в организме. Применяемые меры борьбы с указанными нарушениями зачастую не имеют фундаментальной научной базы.

В доступной I литературе встречаются лишь показатели ряда инфекционных болезней: животных, тогда как отсутствуют данные по изучению динамики перекисных процессов и антиоксидантной активности при анемии у молодняка животных.

В медицине проблема свободных радикалов и антиоксидантная терапия при анемии у людей является одним из актуальных вопросов (Владимиров Ю.А., 1998).

Изучение перекисного окисления липидов (ПОЛ) при анемии представляют особый интерес, так как с одной стороны, дефицит железа по антиок-сидантным свойствам, которые: встречаются в медицинской литературе (Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. 1972) должны снижать уровень процессов перекисного окисления липидов. С другой стороны, гипоксия; которая развивается при анемии, должна вести к ускорению этого процесса (Коган А.Х. и соавт.,1976).

Доказано, что сдвиги в реакциях, опосредуемых перекисными интер-медиатами, в значительной степени определяют направленность и интенсивность всего клеточного метаболизма (Бурлакова Е.Б.,1979).

Исследования последних лет показали, что некомпенсированная активация процессов перекисного окисления липидов клеточных мембран играет важную, а иногда и ключевую роль в развитии многих патологических-состояний: Избыточное-накопление токсических продуктов перекисного метаболизма приводит к тяжелому течению заболеваний, к повреждению органов и тканей.

Практически все патологические состояния организма в той или иной степени связаны с процессами перекисного окисления липидов.

Перекисное окисление липидов приводит к нарушению структурных и функциональных свойств биомембран, повреждению белков и нуклеиновых кислот, а продукты перекисного окисления • липидов могут оказывать негативное влияние даже на уровне целых систем организма. Для защиты от избыточной интенсивности перекисного окисления липидов в организме существует антиоксидантная система;

Исследование антиоксидантной активности приобретает в настоящее время приоритетное значение. Как известно, практически все известные болезни связаны с окислительным стрессом, а, следовательно, и с нарушением антиоксидантной активности.

Цель исследования. Целью настоящей работы является изучение механизмов взаимовлияния алиментарной анемии ^ молодняка сельскохозяйственных животных на уровень свободнорадикальных процессов; в частности при анемиях, вызывающих последующее развитие болезней желудочно-кишечной, дыхательной и других систем организма, а полученные результаты позволят разработать схему профилактики и лечения подобных болезней у животных.

В соответствии с целью нами поставлены следующие задачи:

1. Изучить клинико-гематологические показатели при анемии у молодняка животных, характерные особенности ее возникновения и течения.

2. Изучить состояние процессов перекисного окисления-липидов при анемии у молодняка сельскохозяйственных животных и их взаимосвязь с нарушениями обмена железа в их организме.

3. Оценить диагностическое и прогностическое значение показателей, характеризующих перекисный метаболизм при анемии.

4. Провести клинико-лабораторные исследования по выявлению патогенеза приобретенной (вторичного происхождения) анемии у молодняка.

5. Разработать эффективные и экологически безвредные методы и средства для лечения и профилактики приобретенной (вторичной) анемии у животных и технические условия и наставления по их применению в производственных условиях.

6. Провести производственные испытания разработанных схем лечения и профилактики анемии молодняка животных.

7. Определить терапевтическую эффективность лекарственных форм топинамбура и бентонитов при анемии молодняка.

Научная новизна. Впервые проведены исследования с использованием хемилюминесцентных методов, изучения состояния процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты при анемиях ягнят и телят, и возможность применения данных методов для диагностики и оценки общего состояния, больных анемией ягнят и телят, а также контролировать эффективность проведенных лечебно-профилактических мероприятии.

Впервые нами для лабораторной диагностики анемии телят предлагается один из высокочувствительных методов изучения уровня свобод-норадикальных процессов и их взаимосвязь с анемией молодняка, которое имеет важное направление в современной биологии и медицине.

Впервые для лечения и профилактики анемии молодняка предложены доступные ресурсосберегающие, экологически безвредные средства (топинамбур, бентонит) установлен их антиоксидантный эффект. и

Практическая значимость работы

Впервые разработаны дополнительные диагностические критерии выявления железодефицитной анемии молодняка животных, клинико-лабораторная оценка нарушения перекисного метаболизма при анемии, а также лечебно - профилактических мероприятии данной болезни.

В настоящее время в ветеринарии и медицине все большее внимание уделяется изысканию, поиску, изготовлению и применению лекарственных веществ растительного происхождения. Это связано малой токсичностью относительной дешевизной и доступностью ее изготовления.

В ветеринарии * известно, что топинамбур применяется не только с ростостимулирующей, а также с лечебной целью.

На основании полученных экспериментальных данных департаментом ветеринарии МСХ РК утверждены:

- временное наставление по применению лекарственной формы топинамбура при анемии молодняка животных;

- технические условия по применению топинамбура в ветеринарии и в животноводстве;

- разработана лечебно-профилактическая доза бентонитов при анемии молодняка животных.

Практическая значимость и теоретические аспекты работы: Теоретические аспекты полученного материала используются в учебном процессе на факультете ветеринарной медицины и ветеринарной-санитарии Акмолинского аграрного университета, Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана; Акмолинской медицинской академии, при изучении вопросов болезней крови у людей и животных.

Практические аспекты полученного материала широко используются при диагностике болезней крови в лабораториях Районной и Республиканской ветеринарной лаборатории г. Астаны, а также при лечении и профилактике анемии у животных с высоким экономическим эффектом применяются лекарственная форма топинамбура во многих хозяйствах Акмолинской области.

Материалы диссертационной работы изданы в виде монографии «Изучение некоторых аспектов г патогенеза и лечения: анемии молодняка животных» (К.К. Мурзагулов, Т.С. Сейтембетов, М.Г. Зухрабов, Астана-2003, 10,6 п. л).

Полученные экспериментальные данные вошли в учебник-по клинической диагностике сельскохозяйственных животных для студентов 3 курса ветеринарной медицины и ветеринарной санитарии на казахском языке (авторы А. Ермаханов, К.К. Мурзагулов и другие, Алматы-2003).

Апробацияз работы. Результаты1 исследования» неоднократно докладывались и обсуждались на заседаниях ученого совета, отчетных научно-практических конференциях, кафедры терапии • и клинической диагностики Акмолинского аграрного университета (1986-2002), Международных конференциях по проблемам животноводства и ветеринарии в Алматы (1993), Бишкек (1994), Республиканской научно-практической\ конференции «Аграрная' наука на рубеже веков», Астана (1997), на научно-практической конференции Казанской государственной академии ветеринарной медицины (2001-2002), на заседаниях кафедр фармакологии и биохимии Акмолинской медицинской академии (2000-2002).

По материалам полученных исследований, по фрагментам работ были опубликованы научные статьи и выступления с докладами на научных конференциях аграрного университета, ветеринарной ? и медицинской академии и международной конференциях гг. Астаны, Казани,. Алматы и Бишкека в период с 1997 - 2002 гг.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Клинико-гематологические показатели у здоровых и больных анемией ягнят, телят и характерные особенности их возникновения и течения.

2. Состояние процессов перекисного окисления липидов при анемии у молодняка сельскохозяйственных животных и взаимосвязь с нарушением обмена железа в их организме.

3. Диагностическая и информативная ценность показателей, характеризующих перекисное окисление липидов в организме молодняка сельскохозяйственных животных больных первичной и вторичной анемией.

4. Клинико-лабораторные исследования по изучению особенностей патогенеза приобретенной (вторичного происхождения) анемии у молодняка.

5. Обоснование применение топинамбура и бентонитов для лечения и профилактики железодефицитной анемии у молодняка сельскохозяйственных животных.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1,1 Этиология; патогенез и клинические признаки железодефицитной анемии

Алиментарная-анемия—хроническое заболевание, обусловленное недостатком в кормах биоэлементов (железо, медь, кобальт и другие), стимулирующих эритропоэз. Проявляется анемия, в основном, в конце молочного периода или отъема;

В животноводстве железо известно как питательный критический фактор у питающегося цельным молоком молодняка. Из-за недостатка железа в молоке у поросят, телят и ягнят встречается железодефицитная анемия, которая» является непосредственной причиной гибели животных ш значительно снижает иммунобиологическую реактивность организма к различным заболеваниям (BugnowskiH., Wool worth Е. 1977, Б.М. Анохин, К.К. Мурзагулов, 1985; 1994 и другие).

При неполноценном кормлении г и, особенно в неблагополучных условиях содержания у телят, в период молочного кормления, наблюдается железодефицитная анемия (Mollerberg L., Ekman L., Jacobsson S.O., 1975,-Gutschow К., Rake W., Rakoczy F. et al.,1975; Г.В. Маринин,1975).

Kristansen 0.(1980) сообщает, что у 3 0% телят в: первые дни; жизни наблюдается железодефицитная анемия.

B.C. Зернов (1973, 1974) отмечает, что при сравнительно высоком содержании ; железа в растительных кормах среднесуточные балансы его в организме телят в первые два месяца жизни отрицательные, так как молодняк в этот период не способен усваивать необходимое количество железа из кормов в силу несовершенства своего пищеварительного аппарата.

Железодефицитная анемия у телят раннего возраста, по наблюдениям С.И. Вишнякова (1967), могут возникнуть при наличии у них желудочнокишечных заболеваний, сопровождающихся поносами. По данным Bremen I., Broskay I. М., Donnelly Н.Т. et al. 1976, Hellemond К.К., Van. Sprieisma F.E.I977, Bunger V., 1979, гипохромная анемия протекает в острой форме и возникает она в результате дефицита железа в рационе, а также легочных и желудочно-кишечных заболеваниях.

По мнению ученых, клиническая картина железодефицитной анемии обусловлена тканевой-сидеропенией и гипоксией, усугубленных анемией (Щерба М.М.,1977).

Clouded O.A. (1957), М.М; Грозман и соавт.(1969) указывают на снижение концентрации железа в сыворотке крови при диспепсии, что обусловило возникновение в организме истинного дефицита железа. Это явление подтверждается результатами; исследования Курбаналиевой С.К. (1981). Она указывает, что общее количество железа в организме у переболевших телят составило 1,13 г., у не болевших - 1,47 г.

В.А. Аликаев (1968), A.A. Кудрявцев, JI.A. Кудрявцева (1974), А.И. Карелин (1983) установили, что у анемичных животных понижена активность ферментов каталазы, пероксидазы, угольной ангидразы, увеличено количество восстановленного глутатиона, понижен уровень аскорбиновой кислоты.

В крови отмечаются качественные изменения эритроцитов, характеризующихся явлениями анизоцитоза и пойкилоцитоза (М.М. Фарзалиев, И.З.Эюбов, А.Г. Аскеров,1964, Б.М. Анохин, К.К. Мурзагулов, 1985; 1994).

Kristansen О.', Iermangelan (1980) сообщают, что уровень гемоглобина ниже 6 г% отмечено у 1 % больных анемией телят месячного возраста, а в пределах - 6,1-7,1 г% - у 12 % телят. Концентрация сывороточного железа у этих телят была ниже нормы.

М.Е. Татарченко, Финкель С. Б. (1973) отмечает, что у телят в результате дефицита железа ухудшается общее состояние и появляется предрасположенность к различным заболеваниям.

Медицинские клиницисты Я.И. Выговская г (1981) утверждают, что клинические проявление анемии зависят от степени анемии, времени, на протяжении которого она развивалась, адаптационных возможностей организма в зависимости от возраста, пола, общего состояния больного и наличии других заболеваний.

Изменения со стороны различных органов и систем при железодефи-цитной-анемии-являются-не столько следствием малокровия, сколько проявлением ткан евого дефицита железа. При ЖДА при содержании гемоглобина до 80 г/л пациенты чувствуют себя плохо, отмечаются резкие нарушения со стороны сердечно-сосудистой и нервной систем. По мнению многих исследователей, клиническая картина ЖДА обусловлена тканевой сидеропенией и гипоксией, усугубленных анемией (М:М. Щерба, 1977).

ЖДА беременных имеет такие гематологические показатели: гемоглобин ниже 100г/л, эритроциты - 3,6 х 10,2/л , гематокрит - 0,33, цветовой показатель ниже 0,8 (И.А. Кассирский, Г.А. Алексеев, 1970).

П. Дилов, А. Вригазов (1975) отмечают, что в случае; если у телят при рождении гематокрит ниже 24%, количество эритроцитов - 5млн. в 1 мкл крови и гемоглобин 8 г%, то животные больные анемией.

Описанием у телят занимались А. МаБ51р, М. Ашау (1976). Они утверждают, что концентрация гемоглобина в одном эритроците остается на уровне здоровых телят. НаНешешепё К., 8рпе1Бта I. (1979) отмечают, что ЖДА у телят- сосунов обычно протекает нормохромно. Эти ученые считают такое явление «проблематичным», поэтому оно остается вопросом дальнейшего изучения.

Установлено, что организм; матери! еще до рождения1 создает определенный резерв железа в печени и селезенке плода, который активно используется в первый период постнатального онтогенеза (А. Хеннинг, 1976).

Я.И. Выговская, В.Е. Логинский, A.A. Мазурок (1981) указывают, что для установления причин и факторов, обусловливающих развитие анемии, необходимы следующие исследования:

1) изучение кислотности желудочного сока. При отсутствии соляной кислоты в желудочном соке снижается образование растворимых комплексов железа и переход окисного железа в восстановленную закисную форму, что снижает всасываемость железа;

2) исследование кала на наличие паразитов, на скрытую кровь и выделение введенного внутривенного меченного железа для выявления возможной кровепотери из пищевого канала.

В селезенке кроликов при моделировании дефицита железа были найдены изменение мембран, сходные с последствиями стимуляции пере-кисного окисление липидов (Rodvien R:, Tavassoli V., Grosby W. H;, 1974).

Однако некоторые авторы считают, что роль липидной пероксидации в наблюдаемой при железодефицитной анемии сокращение продолжительности жизни эритроцитов маловероятна (Ramachandran M., Jeer G.Y.,1984). Степень пероксидации в работе оценивалась по формированию малонового диальдегида при обработке суспензий эритроцитов пациентов с железодефицитной анемии и контрольных проб Н2О2. Достоверных различий между показателями получено не было.

Ряд работ свидетельствуют о снижении у больных железодефицитной анемии различного генеза уровня плазменного селена в 1,5-2 раза (F.M. Абдуллаев,1976, Э.М. Зейналлы, 1986). Под влиянием проводимой ферро-терапии восстановления концентрации селена до уровня контроля не происходит. Селен в настоящее время признан незаменимым микроэлементом, обладающим высокой биологической активностью. Биохимические функции его сложны и многообразны. Селен способствует поддержанию оптимального состояния и функции макромолекул ряда ферментов (прежде всего ГПО) и других биологически важных белков (W.M. Allen, W.H. Parr, Р.Н. Anderson et al., 1975, Marier I.R., Taworski I.F., 1983). Он предохраняет цитомембраны от окисления, стабилизирует липидный слой, препятствует выходу лизосомальных ферментов. Сам, являясь мощным анти-оксидантом, селен, способен замещать в отдельных случаях функции витамина Е, регулирует выработку эндогенных антиоксидантов белковой и липидной природы (Chen L.H;, 1973, В.И.Таболин, М.Ф. Денекина, В.Ф. Демин и др., 1983) необходим для вовлечения глутатиона в антиоксидант-ную защиту.

Отмечено, что селен способствует увеличению количества эритроцитов периферической крови, главным образом за счет стабилизации мембранного аппарата и увеличения срока их жизни (С.А. Гулиева, Р.Н.Оруджлы, Т.М. Гусейнов, Г.И. Гасанов,1976). У крыс дефицит Se приводит к усилению гемолиза от аскорбиновой кислоты, аутогемолиза, увеличивает склонность к окислению гемоглобина (Chen L.H;,1973).

По мнению ряда авторов (Я.Д.Сахибов,1988.) углубление нарушений обмена железа приводит к снижению плазменных запасов его. Недостаточное поступление пластического материала в эритробласты приводит к нарушению синтеза гема и вторично - глобина, уменьшению активности функционально активного гемоглобина и снижению кислородтранспорт-ной функций крови. В результате развития дефицита железа всегда сопровождается нарушением кислородного гомеостаза в организме, возникновением синдромов гипоксемии и гипоксии. Изменение активности некоторых железосодержащих ферментов в лейкоцитах (каталаза, пероксидаза) обуславливают нарушение фагоцитарной и бактерицидной активности этих клеток, снижение защитных иммунологических реакции при железо-дефицитных состояниях (В.Н. Петров, E.H. Михайлова, 1972,1973.В.Б. Васильев, А.Н. Кагурин, Н.З. Сорока, 1988., Т.Э. Марченко, 1985.).

Результаты ряда исследований свидетельствуют о значительном снижении содержания холестерина в мембранах эритроцитов, коррелирующего со степенью тяжести анемии (Л.А.Шпагина, 1986.). Холестерин, как известно, играет важную роль в стабилизации мембранных структур, обеспечении микровязкости липидных компонентов, в значительной степени определяющей интенсивность и направленность в метаболизме клеток, обладает антирадикальным действием. Изменение его метаболизма может привести к нарушению осмотической стойкости и, реже, к сильному гемолизу эритроцитов (Л. А.Шпагина, 1986.). Доказано тормозящее действие холестерина в условиях индукции гперекисного окисления липидов ультрафиолетовым облучением или введением.2-х- валентного железа в качестве катализатора данного процесса (Ю.М. Лопухин, A.M. Арчаков, Ю.А. Владимиров и др., 1983.). Снижение уровня этого липида в мембранах эритроцитов; больных железодефицитной анемии может способствовать или быть следствием активации реакции свободнорадикального окисления (СРО).

Необходимо отметить немногочисленные работы, свидетельствующие об изменении уровня эндогенных антиоксидантов при развитии дефицита железа. Показано снижение концентрации токоферола плазмы крови при анемии у детей раннего возраста (А.Т. Тураев, A.A. Абраров, A.A. Шуку-ралиева и другие, 1984; 1988.).

Таким образом, анализируя приведенные выше данные, очевидно, что одним из ведущих патогенетических механизмов железодефицитной анемии является некомпенсированная; активация реакций липопероксидации, ответственная за сокращение продолжительности жизни; эритроцитов при данной патологии. Проблема эта далека от решения и: требует дополнительные исследования. В частности до сих пор не изучен вопрос об интенсивности перекисного метаболизма у животных, что и составило предмет нашего исследования.

5. ВЫВОДЫ

1. Одним из патогенетических звеньев развития метаболических нарушений при анемии является значительная интенсификация липоперокси-дации на фоне выраженного угнетения антиоксидантной защиты.

2. Степень нарушения в системе перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты и выраженность мембраноструктурных изменений в эритроцитах больных анемией животных зависит от степени тяжести болезни и длительности заболевания, от вредных воздействий окружающей среды.

3. У больных анемией животных отмечается значительные изменения свободнорадикальных процессов. По мере нарастания степени тяжести отмечается активация процессов перекисного окисления липидов, что проя в-ляется повышением уровня малонового диальдегида в эритроцитах (до 2,08 ± 0,41 мкмоль/л). Кроме того, достоверна, угнетена антиоксидантная защита, о чем свидетельствует снижение активности каталазы (до 18,13 ± 0,57 мкат/л).

4. Состояние микроядерного теста у больных анемией животных является объективным показателем степени тяжести и прогноза течения желе-зодефицитной анемии. При показателях микроядерного теста, составляющих до 0,02% у больных отмечается относительно легкая степень и благоприятное течение анемии, без развития, каких-либо осложнений. При показателях до 0,04% появляется риск неблагоприятного течения, а при показателях от 0,05% и выше у всех больных животных может диагностироваться как тяжелая степень анемии.

5. При приобретенной анемии, на фоне катаральной бронхопневмонии, дополнительное назначение к основному лечению железосодержащих препаратов достоверно улучшает состояние больных и способствует более быстрому их выздоровлению.

6. Под влиянием железосодержащих препаратов у больных животных постепенно нормализуются концентрация эритроцитов, гемоглобина, средней концентрации гемоглобина в эритроците, восстанавливаются липидный и основные обменные процессы и ряд других гематологических показателей; исчезают клинические признаки; болезни, что в совокупности свидетельствуют о выздоровлении больных животных.

7. Выявленные нарушения окислительного метаболизма обуславливают необходимость разработки рациональной тактики использования анти-оксидантов для комплексной терапии больных анемией животных.

8. Применение лекарственной формы топинамбура в дозе 10 г/кг в течение десяти дней в условиях сбалансированного суточного рациона по основным питательным веществам вызывает достоверное снижение уровня продуктов перекисного окисления липидов малонового диальдегида в сыворотке крови (от 1,91 ± 0,03 до 0,82 ± 0,37 мкмоль/л), повышение активности ферментативного звена антиоксидантной системы, что проявляется достоверным увеличением уровня фермента • каталазы в сыворотке крови (от 19,86 ± 0,66 до 28,06 ± 0,82 мкат/л).

9. С целью коррекции нарушений морфофункциональных свойств эритроцитов при анемии целесообразно применение сочетанной терапии с препаратами железа и антиоксидантами. Разработаны информативные критерии диагностики, оценки степени тяжести: и эффективности проводимой терапии у больных анемией животных.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. На основании полученных результатов исследований нами разработано временное наставление «Топинамбур для лечения и профилактики анемии у молодняка животных», утвержденной департаментом ветеринарии МСХ Республики Казахстан 2003 г.

2. По результатам диссертационной работы издана монография "Изучение некоторых аспектов патогенеза и лечения анемии молодняка животных", 10,6 пл., Астана 2003.

3. Результаты исследований вошли в учебник по клинической диагностике для студентов ветеринарной медицины и ветеринарной санитарии (авторы А.Е. Ермаханов, К.К. Мурзагулов и другие) Алматы, 2003-285 с.

4. Для лабораторной диагностики за состоянием обмена веществ и течение анемии у молодняка животных рекомендуем включить определение концентрации в крови малонового диальдегида и активности катал азы. Критериями риска развития анемии у животных могут служить концентрация малонового диальдегида (более 1,21 ± 0,27 мкмоль/л) и активность ка-талазы (менее 27,19 ± 0,57 мкат/л).

5. Предложен рациональный способ изготовления и применения лекарственной формы топинамбура в дозе 10 г/кг живой массы, для лечения и профилактики анемии животных, как корректирующий фактор повышения активности перекисного окисления липидов.