Автореферат и диссертация по медицине (14.00.10) на тему:Состояние функционально-метаболической активности лейкоцитов у больных ангиной

На правах рукописи

Нагоева Марьяна Хасанбиевна

СОСТОЯНИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНО-МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЛЕЙКОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ АНГИНОЙ

14.00.10 - инфекционные болезни

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Нальчик - 2005

Работа выполнена в Кабардино-Балкарском государственном университете им ХМ Бербекова Федерального агентства образования

Научный руководитель ■

Официальные оппоненты:

Ведущая организация:

действительный член РАЕН, доктор медицинских наук, профессор Нагоев Беслан Сафарбиевич

Заслуженный деятель науки РФ, член-корреспондент РАМН, доктор медицинских наук, профессор Пак Сергей Григорьевич

доктор медицинских наук, профессор Ахмедов Джалалутдин Расулович

Российский университет Дружбы народов Министерства образования и науки РФ

Защита состоится « ^¿¿/¿-/^ 2005 г. в / р часов на за-

седании диссертационного совета К-212.076.02 при Кабардино-Балкарском государственном университете (360004, г Нальчик, ул. Чернышевского 173).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке медицинского факультета Кабардино-Балкарского государственного университета им. X М Бербекова (г. Нальчик, ул. И. Арманд, 1).

Автореферат разослан « l\ » IUQ.U) 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор ' 1/\ Л .V М.Р. Иванова

¿¿61/

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Ангина - одно из распространенных заболеваний в мире, с наибольшей частотой поражающее людей молодого возраста (Ю.И Ляшенко, 1985, 2003). При общей заболеваемости населения ангиной, достигающей 20-40 %, на больных в возрасте 17-30 лет. приходится 70-80 %. Ангина занимает третье место после гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций, характеризуется высокими интенсивными показателями и занимает одно из ведущих мест во временной нетрудоспособности населения (В.Д Беляков с соавт ,1978, Ю И Ляшенко, 1996, 2003) Среди стрептококкозов на долю ангин стрептококковой этиологии падает 57,6 % всех больных (В.И Покровский, С Г Пак и др , 2004) Большое значение приобретает то, что перенесенная ангина способствует возникновению так называемых тонзиллярных заболеваний (ревматизм, миокардит, гломеру-лонефрит, пиелонефрит, холецистит и др )

Приведенные данные свидетельствуют, что ангина является весьма актуальной проблемой практического здравоохранения, требующей внимания многих специалистов и исследователей Представляет определенный интерес разработка вопросов, связанных с патогенетическими механизмами ангин, с особенностями клинического течения болезни, расширения лабораторных возможностей диагностики заболевания, современных методов лечения, критериев их выздоровления.

Известно, что важным показателем неспецифической резистентности организма является функциональное состояние нейтрофильных гранулоци-тов, ответственных за процесс фагоцитоза и внутриклеточное переваривание возбудителей инфекционных заболеваний (В И. Покровский с соавт., 1987, Б.С. Нагоев, 1986, 1992; А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский, 1989; И.М. Жигуно-ва, 1998; Klebanoff,1985; Alam, 1987; Piers с соавт, 1993)

Установлено, что активность микробицидной системы нейтрофильных лейкоцитов обеспечивается содержимым лизосомальных структур, уровнем катионных белков, миелопероксидазы, кислой и щелочной фосфатаз, гликогеном, липидами и др. (В.Е. Пигаревский, 1978, 1984; B.C. Нагоев, 1986. 1993; И.М. Жигунова, 1998; Е.Б. Губжокова, 2004; Bellinati-Pires с соавт, 1994; Gray, Haseman,1994; Cochrane, Aicin, 1996 и др.). Поэтому для бактериальных инфекционных заболеваний, в том числе для ангины представляется актуальным изучение состояния микробицидной системы и функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов.

Однако, систематическому изучению интралейкоцитарных компонентов нейтрофилов в динамике такого распространенного заболевания, как ангины не уделялось должного внимания. Между тем, комплексное изучение ферментативной активности лейкоцитов, содержание катионных белков, гликогена, а также показателя метаболической активности лейкоцитов - спонтанного НСТ-теста раскрыли бы многие стороны неспецифической реактивности организма при этой инфекции, что побудило к выбору темы данной диссертационной работы.

«tlA»

Цель работы Провести клинико-цитохимическую оценку неспецифической реактивности организма пугем изучения состояния важнейших компонентов микробицидной системы и функционально-метаболической активности лейкоцитов у больных ангиной в зависимости от стадии, степени тяжести патологического процесса, клинических форм, характера осложнений, сопутствующих заболеваний и лечебных мероприятий.

Задачи исследования:

1 В динамике заболевания у больных ангиной в зависимости от стадии и степени тяжести изучить состояние ферментативной активности мие-лопероксидазы, щелочной и кислой фосфатазы нейтрофильных лейкоцитов.

2 Определить уровень содержания лизосомального ка! ионного белка и гликогена в лейкоцитах.

3 Выявить состояние фагоцитарно-метаболической активности нейтрофильных гранулоцитов с помощью спонтанного НСТ-теста.

4 Установить диагностическую и прогностическую информативность цитохимических показателей функционально-метаболической активности лейкоцитов в зависимости от наличия осложнений и сопутствующих заболеваний.

5 Провести сопоставление цитохимических показателей лейкоцитов и основных параметров лабораторного исследования лейкоцитов периферической крови (количества лейкоцитов, палочкоядерного сдвига и изменения СОЭ).

6. Оценить терапевтическую эффективность противовоспалительного и иммуномоделирующего препарата «Тамерит» в лечении ангины.

7. Установить с помощью используемых цитохимических методов исследования пределы нормальных показателей у группы здоровых людей.

Работа проводилась в соответствии с комплексным планом НИР Кабардино-Балкарского государственного университета Минобразования и науки по программе «Университеты России» «Фундаментальные исследования», раздел II «Медицина» Тема «Изучение показателей микробицидной системы лейкоцитов в норме и при инфекционных заболеваниях различной этиологии», зарегистрирована во ВНТИЦентре, государственная регистрация №01.9.50003849.

Научная новизна Впервые проведено комплексное изучение состояния компонентов микробицидной системы и метаболической активности нейтрофилов в динамике заболевания при различных клинических формах ангин, которое показало, что изменения функционально-метаболической активности нейтрофильных гранулоцитов носят неспецифический и разнонаправленный характер. Установлено, что в основе изменения содержания микробицидных компонентов и метаболической активности лейкоцитов лежит угнетение лизосомального катионного белка, активности миелоперокси-дазы на фоне повышения активности кислой и щелочной фосфатаз, накопление в клетке гликогена, а также возрастание показателей спонтанного НСТ-

теста с максимальным значением в периоде разгара заболевания и с нормализацией в стадии реконвалесценции. При этом глубина и длительность сдвигов внутриклеточных компонентов зависели от клинической формы, стадии и степени тяжести патологического процесса, наличия осложнений и сопутствующих заболеваний, а также полноты выздоровления.

Обоснована высокая эффективность нового противовоспалительного и иммуномодулирующего препарат «Тамерит» в комплексной терапии больных ангиной.

Практическая значимость работы В результате проведенных исследований установлена возможность использования исследований компонентов микробицидной системы и метаболической активности лейкоцитов для оценки неспецифической резистентности организма при бактериальной ангине. Показана перспективность исследований внутриклеточных компонентов нейтрофильных гранулоцитов и показателей спонтанного НСТ теста лейкоцитов в качестве критерия для оценки степени тяжести патологического процесса, наличия осложнений и сопутствующих заболеваний, прогнозирования исходов, а также полноты выздоровления. Практическое значение имеет высокая эффективность нового противовоспалительного и иммуномодулирующего препарата «Тамерит» в комплексной терапии ангин Получены «стандарты» нормальных показателей внутриклеточных компонентов и метаболической активности лейкоцитов, которые могут быть использованы, как критерии при проведении и оценке цитохимических и цитоиммунологиче-ских исследований с помощью использованных методик

Основные положения, выносимые на защиту:

1. При различных клинических формах ангины изменение состояния важнейших компонентов микробицидной системы и метаболической активности лейкоцитов носят общий и неспецифический характер, являясь объективным показателем для оценки состояния неспецифической резистентности организма.

2. В основе изменения функционально-метаболической активности нейтрофильных гранулоцитов в динамике заболевания ангиной лежат разные степени угнетения содержания лизосомального катионного белка и активности мие-лопероксидазы на фоне повышения активности щелочной и кислой фосфатаз, содержания гликогена и показателей спонтанного НСТ - теста лейкоцитов.

3. Степень и длительность изменения активности и уровня интралейкоци-тарных компонентов нейтрофилов у больных ангиной зависят от клинической формы, стадии и степени тяжести заболевания, наличия осложнений и сопутствующих заболеваний, что имеет теоретическое и практическое значение.

4. Применение в комплексной терапии больных ангиной нового иммуномодулирующего, противовоспалительного и антиоксидантного препарата «Тамерит» приводит к более быстрому купированию клинических симптомов и лабораторных показателей по сравнению с больными, получавшими базис-терапию.

Внедрение в практику Результаты диссертационной работы доложены на многих научно-практических конференциях и широко опубликованы в печати Материалы диссертационной работы внедрены в практику работы Кабардино-Балкарского центра по борьбе и профилактике со СПИД и другими инфекционными заболеваниями МЗ КБР и используются на кафедрах инфекционных болезней, эпидемиологии, микробиологии и иммуноло! ии Кабардино-Балкарского госуниверситета при изучении тем «Стрептококковая инфекция»), «Ангина», «Инфекция и инфекционный процесс», «Неспецифическая резистентность и иммунитет».

Публикации: по материалам диссертационной работы опубликовано 20 работ.

Апробация диссертационного материала Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на ежегодных итоговых конференциях сотрудников и аспирантов Кабардино-Балкарского госуниверситета (Нальчик, 2003-2005), на заседании научного общества инфекционистов КБР (Нальчик, 2004, 2005), на VIII съезде Итало-Российского общества инфекционистов «Проблемы инфекции в практической медицине» (СПб, 2002), на Всероссийской научной конференции «Клинические перспективы в ин-фектологии» (СПб, 2001), на VI съезде врачей инфекционистов (СПб, 2003), на Международной конференции по фундаментальным исследованиям (Греция, 2003), на Всероссийской конференции молодых ученых «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (М.,2004), на V международном конгрессе молодых ученых и специалистов «Наука о человеке» (Томск, 2004), на Всероссийской конференции «Перспектива -2004» (Нальчик,2004), на V Всероссийской научной конференции «Гомеостаз и инфекционный процесс» (Сочи - Дагомыс, 2004), на Всероссийской научной конференции «Узловые вопросы борьбы с инфекцией (СПб, 2004), на X Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые -медицине» (Казань, 2005), на Международной научной конференции молодых ученых «Современные наукоемкие технологии» (Анталия, Турция,2005), на Всероссийской конференции «Гомеостаз и инфекционный процесс» (Кисловодск, 2005) и на Южно-Российской научной конференции «Актуальные вопросы инфекционной патологии Юга России» (Геленджик, 2005).

Диссертационная работа апробирована на научной конференции кафедры инфекционных болезней и Республиканского центра по борьбе со СПИД и др. инфекционными заболеваниями МЗ КБР (июль, 2005)

Структура и объем диссертации Диссертация изложена на 161 страницах машинописного текста и содержит- Введение, 6 глав, заключение, выводы и указатель литературы, включающий 227 отечественных и 84 иностранных авторов. Иллюстрации представлены 43 таблицами, 31 рисунками и 5 выписками из историй болезней.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Под наблюдением находилось 195 больных ангиной в возрасте от 16 до 62 лет, обследованных в 2002-2005 гг. в Кабардино-Балкарском республиканском центре по борьбе и профилактике со СПИД и другими инфекционными заболеваниями МЗ КБР. В их числе было 122 (62,6 %) мужчин и 73 (37,4 %) женщин. Среди больных в возрасте до 20 лет включительно было 69 (35,4 %), от 21 до 30 лет 96 (49,2 %), от 31 до 40 лет-15 (7,7 %), 41-50 лет - 10 (5,2 %) и старше 50 лет - 5 больных (2,5 %), т.е преобладали среди обследованных (табл 1) лица молодого возраста (84,6 %) Впервые 48 часов от начала заболевания поступили 145 (74,4 %) больных, на 3 день болезни - 46 (23,6 %) и на 4-й день 4 (2 %) человека Лиц поступивших позже 4 дня в разработку не включили

Таблица 1

Состав больных ангиной с учетом пола и возраста

Возраст Всех больных

Пол До 20 лет о г-1 ■ сч 31-40 41-50 1 51-60 Старше 60 лет Абс. число ё?

Мужчины 44 67 3 4 2 2 Н 122 62,6

Женщины 25 29 12 6 1 0 73 37,4

Оба пола Число больных 69 96 15 10 3 2 195

% % 35,4 49,2 7,7 5,2 1,5 1,0 100

Диагноз бактериальная ангина установлен на основании клинико-лабораторных, инструментальных исследований и был подтвержден бактериологически у 113 (57,9 %). Из подтвержденных лиц у 83 (73,4 %) больных высеяны стрептококки группы А (гемолитический стрептококк и др разновидности), у 11 больных одновременно выделили стрептококк и золотистый стафилококк У больных ангиной только золотистый стафилококк - обнаружили у 12 (10,6 %) больных, нейсерий у 7 (6,1 %) наблюдавшихся. Сходную картину микробного пейзажа при бактериальной ангине приводят В.Д. Беляков с соавт. (1978) и Ю.И. Ляшенко (1985. 2003).

У обследованных больных катаральную ангину выделяли у 9 (4,6 %) больных, фолликулярную у 56 (28,7 %), лакунарную у 117 (60 %) в том числе у 5 обследованных имели одновременно симптомы характерные для фолликулярной и лакунарной ангины и некротическую (флегмонозно-некротическую) форму у 13 (6,7 %) больных По степени тяжести у 30 больных установлена легкая форма заболевания, у 112 - среднетяжелая и у 53 - тяжелая форма болезни.

Основные осложнения у 26 обследованных больных составляли паратон-зиллит, паратонзиллярный абсцесс, отит, пиелонефрит. Паратонзиллярный абс-

uecc, паратонзиллиты и флегмонозные изменения имели сходную клиническую картину Она характеризовалась высокой лихорадкой, преобладанием односторонних болей в ротоглотке, резко усиливающаяся при глотании, повышенной саливацией и болезненностью при открывании полости рта, односторонними отеками, гиперемией мягкого неба, отеком небной дужки на стороне поражения, а также смещением к центру пораженной миндалины и ассиметрией язычка

Сопутствующие заболевания: хронические воспалительные заболевания преимущественно бактериальной этиологии обнаружены у 29 больных. Это такие заболевания, как хронический тонзиллит, хроническая пневмония, хронический холецистит, панкреатит, хронический колит, хронический пиелонефрит в фазе обострения

Больные получали антибактериальную терапию и дезинтоксикацион-ную. Антибиотики: бензилпенициллин, ампициллин по 1 млн. ЕД х 4-6 раз в сутки в зависимости от тяжести в течение 4-5 дней. Дезинтоксикационную терапию проводили в объеме 1-1,5литров в сутки в/венным капельным введением физиологического раствора, 5 % глюкозы с 5 % р-м аскорбиновой кислоты, гемодеза по 400,0 в/венно капельно через день. Жаропонижающие препараты, витамины, физиопроцедуры, полоскание полости рта риванолом, фурациллином, 2 % р-м гидрокарбоната натрия

Группе больных из 30 человек (14 - с фолликулярной и 16 с лакунарной ангиной) проведено противовоспалительное и иммуномодулирующее лечение с помощью нового иммуностимулятора «Тамерит» из группы аминофталгидрози-дов. Препарат назначался по 100 мг, разведенный в 2 мл физ.раствора в/мышечно х 1 раз в сутки в течение 5 дней и через день - 4-5 инъекции в последующие дни. Результаты лечения в основной группе (базис-терапия + тамерит) показали высокую эффективность «Тамерита», что будет показано ниже.

Выписку реконвалесцентов осуществляли на 8-14 дни после заболевания при нормальной температуре, при условии полного клинического выздоровления. Цитохимические и цитоиммунологические методы исследования Для решения поставленных в работе задач нами использован комплекс цитохимических и цитоиммунологических исследований нейтрофильных лейкоцитов Дтя цитохимического исследования активности миелоперокси-дазы использован метод Sato (1928), кислой фосфатазы - реакция азосочета-ния по Goldberg и Barka (1962) в модификации В И. Дудецкого (1970), активность щелочной фосфатазы определяли с использованием варианта метода азосочетания, предложенного М Г. Шубичем (1965). Цитохимическое определение содержания катионного белка проводилось по методу М Г. Шу-бича (1974) в прописи Б С Нагоева (1983), гликогена - по A.JI. Шабадашу (1947) с применением реактива Шиффа Для изучения функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов был использован тест спонтанного восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) по методике Stuart с соавторами (1975) в модификации Б С Нагоева (1983). Количественное определение активности ферментов, цитохимических компонен-

тов и показателей НСТ-теста в лейкоцитах крови осуществляли по методу Kaplow (1955) и выражали показатели в условных единицах

С целью объективизации оценки полученных результатов, и для определения степени достоверности диссертационной работы весь материал подвер] алея математической обработке Она проводилась на компьютере с использованием статистических функций редактора электронных таблиц Excel из пакета Microsoft Office. При этом придерживались основных законов и положений статистики (Л С. Каминский, 1964: Р Н. Бирюкова, 1965, Б.Ю Урбах, 1975).

Показатели функционально-метаболической активности нейтро-фильных лейкоцитов у здоровых людей

Для оценки изменений в ферментативной активности лейкоцитов, в содержании катионного белка, гликогена и липидов, а также показателей спонтанного НСТ-теста при патологических состояниях необходима стандартизация физиологических компонентов в лейкоцитах у здоровых людей Она сводится к нахождению с помощью используемых методик «собственной нормы», как это принято в цитохимии (М.Г. Шубич, Б С Нагоев, 1980, Б.С. Нагоев, 1986). Цитохимическое исследование функционально-метаболической активности лейкоцитов проведено у 60 практически здоровых людей в возрасте от 18 до 64 лет. Наблюдавшиеся доноры станции переливания крови прошли клинико-лаборатор-ное обследование. Лица, у которых в процессе наблюдения и исследования выявлены патологические сдвиги, исключены из разработки

Большой объем цитохимических исследований, апробированность, специфичность и воспроизводимость используемых методов позволили считать полученные результаты исходными данными при проведении клинико-цитохимических исследований и сопоставлений (табл. 2).

Таблица 2

Функционально-метаболическая активность нейтрофилов у здоровых людей (усл.ед.)

Исследуемый компонент п Xmin-Xmax X ± m ±S X ± 2S

Миелопероксидаза 60 180-215 202±1,0 7,6 187 4.217

Щелочная фосфатаза 60 16-37 26±0,7 4,7 17±35

Кислая фосфатаза 60 50-72 62±0,6 8,7_ 53±71

Катионный белок 60 98-142 123±1,3 9,9 103±143

Гликоген 60 154-194 179±1,1 8,6 162±195

Спонтанный НСТ-тест 50 6-25 13±0,6 4,2 4±20

Показатели функционально-метаболической активности лейкоцитов у больных ангиной

Цитохимическое изучение содержания важнейших компонентов мик-робицидной системы нейтрофильных лейкоцитов в динамике заболевания бактериальной ангиной выявило весьма важные закономерности изменения интралейкоцитарных компонентов Так, в периоде разгара заболевания анги-

ной отмечено значительное снижение содержания катионного белка лейкоцитов и активности миелоперкосидазы нейтрофилов с максимальным угнетением в периоде разгара заболевания В то же время т.е. на высоте проявления гнойно-воспалительного процесса при бактериальной ангине обнаружено существенное возрастание активности щелочной и кислой фосфатаз, содержание гликогена в клетке, показателей НСТ-теста (табл 3, рис 1).

Таблица 3

Состояние компонентов микробицидной системы лейкоцитов у больных бактериальной ангиной, а также у здоровых людей (усл. ед )

Исследуемый компонент Период разгара п Хшт-Хшах Х±ш ±8 Р р,

3 60 98-142 123 ±1,3 9,9

Катионный I 170 58-112 78± 0,8 10,3 <-0.001

белок II 157 68-120 84±0,8 9,9 <0,001 <0.001

III 162 96-128 115 ±0,5 6,1 <0,001 ^0,001

IV 64 116-128 122 ±0.3 2.6 >0.005 ^0.001

3 60 154-194 179±I, I 8,6

Гликоген I 173 190-259 221±1,0 13,1 <0,001

II 152 180-230 296±0,8 9,7 <0.001 <0,001

III 167 170-201 184±0,8 9,9 <0,05 <0,001

IV 65 168-186 179±0,5 3,7 >0,05 <0,001

Миелопе- 3 60 180-215 202 ±1,0 7,6

роксидаза I II 173 150 128-191 154-218 160±1,0 173±1,0 12,0 12,4 <0,001 <0,001 <0,001

III 164 168-207 196±0,6 7.5 <0,001 <0.001

IV 65 171-207 204±0,9 7,7 <0.05 <0,001

Кислая 3 60 50-72 62±0,6 8,7

фосфагаза I 173 64-164 115±1,7 22,3 <0,001

II 151 72-144 106±1,4 17,0 <0,001 <0.05

III 165 54-96 81 ±0,8 9,8 <0,001 <0,001

IV 70 54-67 62±0,3 2,7 <0,05 <0,001

Щелочная фосфатаза 3 I II 60 195 172 16-37 40-128 42-92 26±0,7 94±1,1 63±0,7 4,7 16,0 9,2 --0,001 <0,001 <0,001

III 185 20-62 38±0,4 5,9 <0,001 <0,001

IV 70 20-36 27±0,4 3,4 >0,05 <0,001

Спонтан- 3 50 6-25 13±0,6 4,2

ный НСТ- I 142 18-46 33±0,4 5,3 <0,001

тест II 133 16-40 25±0,4 5,3 <0,001 <0,001

III 137 12-36 17±0,4 4,7 <0,001 <0,001

IV 6С 12-18 14±0,2 1,3 >0,05 <0,05

Примечание 3 — здоровые, периоды болезни соответствуют I -периоду разгара, II - угасанию клинических симптомов, III - ранней реконвалесценции, IV -поздней реконвалесценции, Р - достоверность различия к здоровым лицам, Р,- достоверность различия к предыдущему периоду

202Х „ --2^1 ~ - - -V ?П4

>■ „ кГ - - ' . Л- - 1 --- А 179

-Х-160' '

^.Ж-41-5— . 106 - - * . 122

У ' Ж"* ^ ....... 81 —Ж - . __ I2

—-bW-- -• 27

Н47--— -+ 14

Здоровые I II

—■— катионный белок - - Х- - - миелопероксидаза -—•— щелочная фосфатаза

III IV

■ -к — гликоген

■ -Ж- - кислая фосфатаза —I-спонтанный НСТ-тест

Рис. 1. Состояние компонентов микробицидной системы лейкоцитов у больных ангиной

В периоде угасания клинических симптомов параллельно улучшению общего состояния, снижению лихорадки, интоксикации, уменьшению болей и отека в горле, прохождению слабости, головных болей, появлению аппетита происходят закономерные и разнонаправленные сдвиги в сторону восстановления уровня основных компонентов микробицидной системы клегок. Так, заметно повышается активность миелопероксидазы, содержание катион-ного белка в лейкоцитах В то же время уровень активности щелочной и кислой фосфатаз, содержание гликогена в клетке, показатели НСТ-теста достоверно снижаются (табл. 3).

В период ранней реконвалесценции активность ферментов, содержание внутриклеточного протеина и гликогена, показатели НСТ-теста приближается к норме, однако, активность миелопероксидазы и содержание катион-ного белка остаются существенно подавленными в этом периоде. Нормализация внутриклеточных компонентов лейкоцитов (ферментов, НСТ-теста, гликогена и внутриклеточного протеина) наступает в периоде поздней реконвалесценции, т.е через 15-30 дней после выписки из стационара (рис. 1)

При изучении изменения состояния внутриклеточных компонентов микробицидной системы и метаболической активности лейкоцитов в зависимости от клинического варианта ангин в периодах разгара, угасания клинических симптомов и ранней реконвалесценции выявлено разной степени их изменения, как по интенсивности, так и по длительности цитохимических сдвигов (табл.4)

Таблица 4

Состояние компонентов микробицидной системы лейкоцитов у больных ангиной в зависимости от клинической формы (Х±т)

Группа обследованных Период n Цитохимические показатели

разгара КБ Гликоген МП ЩФ КФ НСТ-тест

Здоровые 60 123±I,3 ]79±1, 202±1,0 26±0,7 62±0,6 13±0,6

I 9 90±2,9 195±2,3 166±2,6 64±2,6 108±2,5 20±1,9

Ангина: II 9 109±3,3 182±1,3* 190±3,4 38±2,3 92±2,8 I6±l,6

Катаральная III 9 122±1,6* 178±1,3* 200±3,8*- 27± 1,4* 61± 1,3* 14±1,6*

I 56 81±1,2 220±1,5 161±1,2 96±3,8 118±2,3 30±1.0

Фолликулярная II 46 94± 1,4 204±1,4 180±1,0 56±4,9 101±2.1 23±0,9

III 55 112±1,2 184±1,3 196±1,1 34± 1,6 70±1,1 16±0,5

IV 18 122±0,5* 179±1,5* 198±2,4* 27±0,9* 63±0,7* 14-fc0,4*

I 117 76±0,9 225±1,3 180±1,1 93=t2,0 116±1,0 34±0,6

Лакунарная II 104 86±0,9 206±0,8 184 ±0,9 61±1,0 108± 1,0 25±0,4

III 107 117±0,6 184±0,7 196±0,9 35±0,7 76±0,7 17±0,3

IV 42 121±0,5* 178±0, 4* 205±0,7* 27±0,6* 63±0,4 14±0,2*

I 13 55±1,7 235±2,4 122±3,2 216±2,2 164±1,7 40±1.5

Флегмонозно- II 12 76±2,5 218±2,5 139±2,4 162±1,9 137±1,7 32±1.4

некротическая III 12 105±2,6 201±1,6 176±3,1 42±2,4 90±2,9 34±2,0

IV 12 121±1,2* 183±2,8* 196±2,8* 27±2,3* 66± 1,4 16±1,9*

* свидетельствует об отсутствии достоверности разчичия с группой здоровых лиц

40 35 30 25 20 15 10 5 0

Здоровые I II III IV

—■—катаральная ангина

— -Л — фолликулярная ангина

— - Х- - -лакунарная ангина

— -Ж— - флегмонозно-некротическая ангина

Рис. 2. Активность НСТ-теста лейкоцитов у больных ангиной в зависимости от клинических форм

При флегмонозно-некротической, лакунарной и фолликулярной форме ангины обнаружено существенно более глубокое угнетение активности миело-пероксидазы и содержание катионного белка в цитоплазме лейкоцитов по сравнению с группой больных с катаральной ангиной. Напротив, активность щелочной и кислой фосфатаз, содержание гликогена и показатели спонтанного НСТ-теста при флегмонозно-некротической и лакунарной формах ангин в эти периоды достоверно превышали значения найденные у больных с катаральной и фолликулярной ангинами. В периоде поздней реконвалесценции в обеих группах обследованных происходила нормализация цитохимических показателей

Следует отметить, что у больных ангиной изменения активности миело-пероксидазы, кислой и щелочной фосфатазы, уровень содержания катионного белка и гликогена в лейкоцитах, показатели НСТ-теста зависели от степени тяжести патологического процесса Чем тяжелее протекало заболевание, тем сильнее и длительнее была выраженность угнетения или возрастания исследуемых внутриклеточных компонентов в динамике ангинозного процесса Так, при тяжелом течении ангины угнетение активности миелопероксидазы и содержание катионного белка на 20-30 % было более сниженным, чем при среднетяжелой и легкой форме заболевания (рис. 3). В противоположность этим данным, при тяжелом течении активность щелочной и кислой фосфатаз, содержание гликогена в клетке, показатели НСТ-теста оказались существенно повышенными, чем при остальных формах течения заболевания.

-^40- / 34

^ 32 ж--- ___ЧК, ч

/ .'XT-.."-. " • 1С25 \

// / я "чЬз. . Ч

/.у ---------*

13 wli 7f— V*

Здоровые I II III IV

□ легкая форма Шсреднетяжелая форма О тяжелая форма

Рис. 3. Активность миелопероксидазы у больных ангиной в зависимости от степени тяжести заболевания

Установлена зависимость выраженности сдвигов во внутриклеточном метаболизме нейтрофильных гранулоцитов от наличия воспалительных осложнений, таких, как абсцесс, паратонзиллит, отит, пиелонефрит и др. Так, при этих инфекционно-воспалительных осложнениях наблюдалось наиболее выраженное и длительное угнетение активности миелопероксидазы и содержание катионного белка лейкоцитов, ю) да как активность кислой и щелочной фосфатаз, уровень интралейкоцитарного гликогена, показатели НСТ-теста в этих группах обследованных были наиболее высокими. Кроме того, отмечены более существенные сдвиги в содержании интралейкоцитарных компонентов микробицидной системы лейкоцитов и активности изучаемых ферментов в группе больных, у которых бактериальная ангина протекала на фоне обострения сопутствующих хронических воспалительных заболеваний, таких, как хронический тонзиллит, гнойный отит, хронический пиелонефрит, хронический холецистит, панкреатит и др.

Выраженное угнетение содержания катионного белка и активности миелопероксидазы у больных ангиной с обострениями сопутствующих хронических заболеваний указывает на снижение неспецифической резистентности организма, а высокая степень активности фосфатаз, содержание гликогена и показателей НСТ-теста лейкоцитов при хронических заболеваниях свидетельствуют о наличии продуктов метаболизма, сопутствующих хроническому патологическому процессу при этих заболеваниях (рис. 4)

jr с сопутствующей патологией без сопутствующей патологии

I период II период III период IV период В здоровые Пбез сопутствующей патологии □ с сопутствующей патологией

Рис. 4. Активность НСТ-теста лейкоцитов у больных ангиной с сопутствующими заболеваниями и без них

Эти данные, а также высокая достоверность различий активности или уровня интралейкоцитарных компонентов в зависимости от степени тяжести патологического процесса свидетельствуют о том, что максимально выраженная степень угнетения или раздражения функциональной активности лейкоцитов являются по-видимому, одной из важнейших причин развития тяжелого патологического процесса.

Резко выраженные изменения изучаемых показателей не только в разгаре заболевания, но и на спаде клинических симптомов ангины выявлены и при наличии сопутствующих заболеваний, особенно бактериальной природы

Комплексная терапия больных ангиной с применением противовоспалительного, иммуномодулирующего и антиоксидантного препарата «Таме-рит» показала положительное влияние на клинико-лабораторные показатели Происходило более быстрое в сравнении с контрольной группой купирование общетоксического синдрома в разгаре гнойно-воспалительного процесса в миндалинах, снижение риска развития осложнений, сокращение сроков пребывания больных в стационаре (рис 5). Указанное положительное влияние «Тамерита» на больных ангиной подтверждается более быстрой динамикой и полной нормализацией компонентов микробицидной системы и метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов Применение «Тамерита» в комплексе с базис-терапией улучшило результаты лечения больных и нормализацию цитохимических показателей лейкоцитов, о чем свидетельствует более быстрое купирование симптомов заболевания и лабораторных показателей, сокращение у больных количества осложнений в 3 раза, а сроков лечения на 20 % по сравнению с традиционной терапией.

30

50

10

70

I период

II период

III период

*

И здоровые □ базис+тамерит □базис-терапия

Рис. 5. Изменение активности кислой фосфатазы лейкоцитов у больных влиянием тамерита и базис-терапии

В работе показаны закономерные изменения в динамике цитохимических сдвигов внутриклеточных компонентов и метаболической активности лейкоцитов у больных ангиной в зависимости от стадии, степени тяжести и клинических форм заболевания. Возникает вопрос: каково же диагностическое значение и этих изменений, т.е. информативность признака зависит ли от частоты, с которой он встречается при данном заболевании и сходных болезнях, подлежащих дифференциальному диагнозу Другой важной оценкой информативности может служить сопряженность интересующего нас признака с другими симптомами, обычными для данного заболевания, особенно близкими по генезу с изучаемым признаком Для внутриклеточных компонентов лейкоцитов такими близкими симптомами можно обозначить лейкоцитоз, палочкоядерный сдвиг нейтрофилов и скорость оседания эритроцитов.

Поскольку изучение этих параметров является непременной частью общего анализа крови, прежде всего, необходимо было вполне объективното решить вопрос- дают ли изменения интралейкоцитарных компонентов самостоятельную новую информацию или они дублируют гематологические показатели у больных ангиной. Для решение этого вопроса использован статистический метод, позволяющий объективно установить, существует ли сопряженность между указанными показателями (Д Сепетлиев, 1968; П.Ф Ро-кицкий, 1973; В.Ю Урбах, 1975; Ю.В. Кабатов, М.Б. Славин, 1976). С этой целью сопоставлялись четырехпольные таблицы, в которые вносили частоты двух альтернативных распределений, сравниваемых признаков- наличие или отсутствие лейкоцитоза, повышение активности миелопроксидазы, щелочной

и кислой фосфатазы, содержания гликогена, катионного белка лейкоцитов с выходом за пределы нормы или отсутствия такового и наличие или отсутствие палочкоядерного сдвша, повышения СОЭ и повышения внутриклеточных компонентов с выходом за пределы нормы и отсутствие такового и т д

Обработка табличного материала проводилась по формуле, включающей поправку Йетса с последующим определением по таблице распределение по одной степени свободы. Результаты сопоставления не позволили установить сопряженность между цитохимическими и гематологическими изменениями. Полученные результаты об отсутствии постоянной и закономерной связи между изменениями основных компонентов микробицидной системы лейкоцитов с рутинными анализами крови подтверждают данные М.Р. Ивановой (1996), A.A. Канокова (1997), И.М. Жигуновой (1998) и других об отсутствии сопряженности между уровнем изменения внутриклеточных компонентов и гематологическими показателями при других инфекционных заболеваниях.

Приведенный анализ вполне объективно показывает отсутствие закономерной и постоянной сопряженности в изменении уровня содержания или активности интралейкоцитарных компонентов в сравнении с гематологическими показателями больных ангиной. Следовательно, сравниваемые показатели не дублируют друг друга Представленный материал свидетельствуют о том, что цитохимические исследования внутриклеточных компонентов микробицидной системы лейкоцитов дают дополнительную обширную информацию о развитии патологического процесса в динамике бактериальной ангины.

Катионные белки обладают широким спектром антимикробного действия, свойствами медиатора воспаления, фактора проницаемости, стимулятора метаболических процессов, неспецифических опсонинов при фагоцитозе (В Н Кокряков, 1990; Ю.А Мазинг, 1990). Микробицидное действие ка-тионных белков связано с их способностью адсорбироваться за счет электростатических сил притяжения на отрицательно заряженных структурах (липо-полисахариды, фосфолипиды и др.) поверхности бактерий и оболочечных вирусов. Контакт антимикробного белка с поверхностью бактерий, по-видимому, создает необходимые предпосылки для его последующего проникновения во внутреннюю структуру микробов и вирусов (В.Н, Кокряков, 1990; Tedesko с соавт., 1986). Катионные белки путем электровалентного связывания анионных компонентов микроорганизмов нарушают структуру и функцию их мембран и вызывают деструкцию клеточной стенки бактерий (Klebanoff, 1985; Houde, Gray, 1986).

Имеются указания, что миелопероксидаза, как и катионные белки, может оказать антимикробное действие и подавлять рост микроорганизмов не-ферментативно (Klebanoff, 1982. 1985). Такой эффект, по-видимому, обусловлен способностью катионных полиэлектролитов связываться с отрицательно заряженными компонентами оболочки микроорганизмов и их взаимодействием, под влиянием которого изменяется проницаемость клеточных мембран (Spitznagel, 1984; Westbrook с соавт, 1984). С другой стороны, пока-

зано, что в присутствии в оптимальных концентрациях перекиси водорода и ионов галлоидов (СГ, Br\ J") бактерицидное действие миелопероксидазы значительно возрастает (Patriarca, 1984; Seger, 1984).

Ферменты лейкоцитов способны разрушать только те бактерии, которые были умерщвлены миелопероксидазной системой и неферментными ка-тионными белками до их фагоцитоза. Так, фосфатазы подвергают гидролизу бактерии и вирусы, но вступают в действие только после воздействия на антиген белка и миелопероксидазы Этим, возможно, объясняется отмеченное нами возрастание фосфатазной активности в динамике бактериальной ангины Угнетение активности миелопероксидазы и снижение уровня катионного белка в нейтрофильных гранулоцитах сказывается на завершенности фагоцитоза Кислая фосфатаза, являясь цитохимическим маркером лизосом нейтрофильных лейкоцитов, которые участвуют в процессах разрушения и удаления токсических продуктов, в расщеплении отработанных структур клеток, т е., она является показателем катаболических процессов в организме (М.Г. Шу-бич, Б.С. Нагоев, 1980). О большом значении кислой и щелочной фосфатаз в осуществлении фазы переваривания реакции фагоцитоза свидетельствуют данные о высокой корреляции между активностью фермента и завершенностью фагоцитоза (Б.С. Нагоев, 1986; Ч.Д. Асадов, J1.C. Нумерова, 1992).

Показано, что НСТ-тест отражает итоговую реакцию одной из ключевых ферментативных систем, ответственных за цитохимический потенциал лейкоцитов. Нарушение способности лейкоцитов к восстановлению НСТ совпадает с патологией кислородзависимых механизмов батерицидности (В И Покровский, Б С. Нагоев, 1983; А.Н Маянский, А.Н. Галиулин, 1994).

Полученные в наших исследованиях данные о повышении уровня гликогена на высоте воспалительного процесса с дальнейшим постепенным его снижением, по-видимому, можно объяснить его расходованием в процессе фагоцитоза. Повышение содержания гликогена у больных ангиной, возможно, связано также с физиологической активацией мембран лейкоцитов в процессе фагоцитоза, в результате чего гликолипид, содержащийся в гранулах нейтрофила, становится более доступным для связывания с ШИК-реактивом. Установлено, что при воспалении происходит накопление гликогена в лейкоцитах, причем, увеличение их в лейкоцитах больше выражено в нейтрофи-лах, сосредоточенных в воспалительном участке, чем в циркулирующих лейкоцитах (Breedweld с соавт., 1986).

Комплексное исследование микробицидной системы нейтрофильных лейкоцитов при бактериальных ангинах выявили неспецифический характер изменения их цитохимического статуса. Во всех обследованных группах выявлено значительное угнетение активности миелопероксидазы, снижение содержания катионного белка, в то время, как активность щелочной и кислой фосфатаз, так же, как и содержание гликогена, были существенно повышены. Причем, максимальные отклонения цитохимических показателей от нормы наблюдались на высоте активности воспалительного процесса. В динамике

заболевания, параллельно стиханию воспалительного процесса в зеве, в миндалинах происходит постепенное повышение активности миелоперокспдазы, увеличение содержания катионного белка, снижение активности щелочной и кислой фосфатаз, уровня гликогена и показателя НСТ-теста Степень изменения ферментативной активности лейкоцитов и содержания интралейкоцитар-ных компонентов зависели от стадии, степени тяжести заболевания и характера местных изменений Так, максимальные сдвиги в содержании всех компонентов микробицидной системы нейтрофилов отмечены при бактериальной ангине с тяжелым и среднетяжелым течением и гнойно-воспалитель1 ными осложнениями, как паратонзиллярный абсцесс, при лакунарной, фолликулярной ангине и при флегмонозно-некротической форме ангины. При ангине выявлена зависимость от наличия сопутствующих хронических воспалительных заболеваний в фазе обострения, которые усугубляют цитохимические сдвиги в цитоплазме лейкоцитов. Выше перечисленные факторы влияли как на глубину сдвигов в содержании интралейкоцитарных компонентов, так и на скорость восстановления показателей к уровню здоровых лиц.

Таким образом, комплексные исследования компонентов интралейко-цитарной микробицидной системы дают обширную дополнительную информацию о развитии патологического процесса при бактериальной ангине Снижение естественной резистентности организма, способствует развитию тяжелых и осложненных форм заболеваний Резко выраженные и стойкие изменения функционально-метаболической активности лейкоцитов в динамике инфекционного процесса являются свидетельством глубоких изменений в больном организме, прогностически неблагоприятным признаком

Выводы

1. При бактериальной ангине изменения компонентов микробицидной системы и метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов носят неспецифический характер, являясь объективным критерием состояния неспецифической резистентности организма.

2. У больных ангиной на фоне угнетения компонентов микробицидной системы лейкоцитов: активности миелопероксидазы и содержания катионного белка выявлено повышение содержания гликогена, активности щелочной и кислой фосфатазы нейтрофильных лейкоцитов с максимальным значением в периоде разгара заболевания.

3. По мере клинического выздоровления болезни отклонения функционально-метаболической активности лейкоцитов восстанавливаются за исключением лиц, с сопутствующими заболеваниями, у которых восстановление наступает в периоде поздней реконвалесценции.

4. Степень и длительность изменения внутриклеточных компонентов микробицидной системы и показатели спонтанного НСТ-теста лейкоцитов зависели от стадии, степени тяжести и клинического варианта гнойно-воспалительных изменений в зеве и на миндалинах.

5. Резко выраженные и длительные нарушения функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов свидетельствовали о тяжелом течении и возможности осложнений или сопутствующих заболеваний инфекционно-воспалительной природы

6. Сопоставление цитохимических показателей нейтрофильных грануло-цитов (катионного белка, гликогена, миелопероксидазы, щелочной и кислой фосфатаз, НСТ-теста) с гематологическими данными (лейкоцитозом, папочкоя-дерным сдвигом и СОЭ) не выявляли закономерной сопряженности между сравниваемыми величинами, следовательно, исследования внутриклеточных компонентов микробицидной системы и метаболической активности лейкоцитов дают дополнительную информацию о развитии патологического процесса

7. Применение противовоспалительного и иммуномодулирующего препарата «Тамерит» в комплексной терапии больных ангиной показало его высокую терапевтическую эффективность, о чем свидетельствует более быстрое купирование клинико-лабораторных данных и нормализацию нарушений функционально-метаболической активности лейкоцитов

Практические рекомендации

1. Цитохимические исследования внутриклеточных компонентов нейтрофильных лейкоцитов: активности миелопероксидазы, кислой и щелочной фосфатаз, содержания катионного белка и гликогена, а также активности спонтанного НСТ-теста являются весьма информативными показателями функционального состояния нейтрофильных лейкоцитов у больных ангиной, в связи с чем могут быть использованы как один из тестов для оценки состояния неспецифической резистентности, степени тяжести заболевания, наличия сопутствующих заболеваний, полноты выздоровления, а также прогнозирования осложнений.

2. Резко выраженные и длительные нарушения ферментативной активности, содержания внутриклеточных компонентов лейкоцитов и показателей спонтанного НСТ-теста нейтрофилов у больных ангиной свидетельствуют о более тяжелом течении болезни, наличии осложнений или сопутствующих заболеваний воспалительной природы, а также возможности развития деструктивных процессов на миндалинах.

3. Комплексная терапия больных ангиной с использованием противовоспалительного и иммуномодулирующего препарата «Тамерит» в дозе ШО мг внутримышечно в сутки в течение 5-7 дней приводит к более быстрой нормализации кли-нико-лабораторных показателей и к сокращению сроков лечения

4. Полученные при обследовании здоровых людей нормальные показатели активности миелопероксидазы, кислой и щелочной фосфатаз, содержания катионного белка и гликогена и показателей спонтанного НСТ-теста нейтрофилов могут быть использованы в качестве исходных критериев для оценки цитохимических и цитоиммунологических показателей в клинической практике у больных ангиной.

Список опубликованных работ по теме диссерпшни

1 Нагоев БС, Нагоева МХ Оценка функциональной активности нейтро-фильных лейкоцитов при бактериальных ангинах Материалы Российской научной конференции- «Гомеостаз и инфекционный процесс». - Сочи, 2000.-С.76.

2. Нагоев Б С., Нагоева М.Х. Активность спонтанного НСТ-теста лейкоцитов у больных бактериальной ангиной // 8 съезд Итало-Российского общества инфекционистов -СПб, 2001 -С 223-224.

3. Абидов МТ., Нагоева М X , Хараева 3 Ф Изучение ферментативной активности нейтрофильных лейкоцитов у больных бактериальной ангиной Материалы Всероссийской научной конференции «Клинические перспективы в инфектологии» - СПб, 2001. - С. 5.

4. Нагоева М.Х. Состояние НСТ-теста у больных бактериальной ангиной //Южно-Российский журнал. - 2002. - Т. 4. - № 57. - С. 25.

5. Нагоева М.Х Состояние активности лизосомальных ферментов нейтрофильных гранулоцитов при бактериальных ангинах. Междун. конференция по фундаментальным исследованиям Греция, 2003. Ж. «Успехи современного естествознания». - М., 2003. - № 10. - С. 84.

6. Нагоева М.Х. Содержание катионного белка, гликогена и липидов в лейкоцитах у больных бактериальными ангинами // 6 Российский съезд врачей инфекционистов. - СПб, 2003. - С. 267-268.

7. Нагоева М.Х. Цитохимия щелочной фосфатазы лейкоцитов у больных бактериальной ангиной. Материалы 2 научной конференции молодых ученых СОГМА «Молодые ученые - медицине». - Владикавказ, 2003 -С 34-35

8 Нагоева М.Х. Изменение основных компонентов микробицидной системы нейтрофильных гранулоцитов при бактериальных ангинах. «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины», 3 Всероссийская конференция молодых ученых -М., 2004. -С. 118-119.

9 Нагоева М X Показатели спонтанного и стимулированного НСТ-теста лейкоцитов у больных бактериальной ангиной // Пятый междунар конгресс молодых ученых и специалистов «Наука о человеке» - Томск, 2004 - С 87-88.

10. Нагоева М X. Состояние компонентов микробицидной активности ней-трофилов у больных ангиной Материалы Всероссийской конференции «Перспектива 2004» - Нальчик, 2004,- с.69-72.

11. Абидов М Т., Нагоев Б С. Нагоева М X. Эффективность иммуномодуля-тора препарата «Тамерит» в лечении бактериальной ангины // Фундаментальные науки -М., 2004.-№ 1. - С 72-73.

12 Нагоев Б.С., Нагоева М.Х. Цитохимия компонентов микробицидной системы лейкоцитов у больных бактериальной ангиной // Вопросы теоретической и клинической медицины - Нальчик, 2004. - С. 49-50.

13.Нагоева М.Х. Оценка активности миелопероксидазы и кислой фосфатазы у больных ангинами и их коррекция // Успехи современного естествознания». - М , 2004. - № 8 - С. 56.

14 Нагоева М X. Изучение функций лейкоцитов с помощью НСТ-теста у больных бактериальной ангиной // Всероссийская научная конференция «Узловые вопросы борьбы с инфекцией» -СПб, 2004 -С. 171.

15 Нагоева М.Х. Цитохимия кислой фосфатазы лейкоцитов у больных ангиной.// X Всероссийская научная конференция «Молодые ученые медицине», посвящ 1000-летию г Казани. - Казань, 2005. - С. 80.

16 Маржохова МЮ., Нагоева М X , Афашагова ММ. Состояние и оценка синдрома интоксикации при инфекционных заболеваниях Научно-методическое пособие - Нальчик, 2005. - 24 с

17 Нагоева М X. Содержание гликогена в нейтрофильных гранулоцитах при ангинах различной этиологии. Матераилы научной конференции молодых ученых Турция, май 2005 // Современные наукоемкие технологии - М, 2005,-№4.-С. 95-96.

18 Нагоев Б.С , Абидов М Т , Нагоева М.Х. Состояние лизосомального КБ и активности МП у больных ангиной различной этиологии. Всероссийская > конференция «Гомеостаз и инфекционный процесс». Кисловодск, 2005 //

Успехи современного естествознания - М , 2005 № 7 - С. 40.

19. Нагоева М.Х. Клинико-лабораторная оценка эндогенной интоксикации у больных ангиной. Сборник молодых ученых КБГУ. - Нальчик, 2005. - С. 169-172.

20. Нагоев Б.С., Абидов М Т., Нагоева М X. Фагоцитарная активность нейтрофильных гранулоцитов у больных ангиной различной природы и ее коррекция. Материалы Южнороссийской конференции «Актуальные вопросы инфекционных патологий». - Ростов-Краснодар, 2005 - С 94-96

В печать 18.07.2005. Тираж 100 экз. 1.0 п.л. Заказ №4523. Типография КБГУ 360004, г. Нальчик, ул. Чернышевского, 173

«14300

РНБ Русский фонд

2006-4 8862

Актуальность проблемы. Ангина - одно из распространенных заболеваний в мире, с наибольшей частотой поражающее людей молодого возраста (Ю.И. Ляшенко, 1985, 2003). При общей заболеваемости населения ангиной, достигающей 20-40%, на больных в возрасте 17-30 лет, приходится 70-80%. Ангина занимает третье место после гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций, характеризуется высокими интенсивными показателями и занимает одно из ведущих мест во временной нетрудоспособности населения (В.Д. Беляков с соавт.,1978; Ю.И. Ляшенко, 1996, 2003). Среди стрептоккозов на долю ангин стрептококковой этиологии падает 57,6% всех больных (В.И. Покровский, С.Г. Пак идр., 2004). Большое значение приобретает то, что перенесенная ангина способствует возникновению так называемых тонзиллярных заболеваний (ревматизм, миокардит, гломерулонефрит, пиелонефрит, холецистит и др.).

Эти данные свидетельствуют, что ангина является весьма актуальной проблемой практического здравоохранения, требующей внимания многих специалистов, исследователей. Представляет определенный интерес разработка вопросов, связанных с патогенетическими механизмами ангин, с особенностями клинического течения болезни, расширения лабораторных возможностей диагностики заболевания, современных методов лечения, критериев их выздоровления.

Известно, что важным показателем неспецифической резистентности организма является функциональное состояние нейтрофильных гранулоцитов, ответственных за процесс фагоцитоза и внутриклеточное переваривание возбудителей инфекционных заболеваний (В.И. Покровский с соавт., 1987; Б.С. Нагоев, 1986, 1992; А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский, 1989; А.А. Каноков, 1997;Klebanoff,1985; Alam, 1987; Piers с соавт., 1993).

Установлено, что активность микробицидной системы нейтрофильных лейкоцитов обеспечивается содержимым лизосомальных структур, уровнем катионных белков, миелопероксидазы, кислой и щелочной фосфатаз, гликогеном, липидами и др. (В.Е. Пигаревский, 1978, 1984; Б.С. Нагоев, 1986. 1993; И.М. Жигунова, 1998; Е.Б. Губжокова, 2004; Bellinati-Pires с соавт, 1994; Gray, Haseman,1994; Cochrane, Aicin, 1996 и др.). Поэтому для бактериальных инфекционных заболеваний, в том числе для ангины представляется актуальным изучение состояния микробицидной системы и функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов. Однако, систематическому изучению интралейкоцитарных компонентов нейтрофилов в динамике такого распространенного заболевания, как ангины не уделялось должного внимания. Между тем, комплексное изучение ферментативной активности лейкоцитов, содержание катионных белков, гликогена, а также показателя метаболической активности лейкоцитов - спонтанного НСТ - теста раскрыли бы многие стороны неспецифической реактивности организма при этой инфекции, что побудило к выбору темы данной диссертационной работы.

Цель работы. Провести клинико-цитохимическую оценку неспецифической реактивности организма путем изучения состояния важнейших компонентов микробицидной системы и функционально-метаболической активности лейкоцитов у больных ангиной в зависимости от стадии, степени тяжести патологического процесса, клинических форм, характера осложнений, сопутствующих заболеваний и лечебных мероприятий.

Задачи исследования:

1. В динамике заболевания у больных ангиной в зависимости от стадии и степени тяжести изучить состояние ферментативной активности миелопероксидазы, щелочной и кислой фосфатазы нейтрофильных лейкоцитов;

2. Определить уровень содержания лизосомального катионного белка и гликогена в лейкоцитах;

3. Выявить состояние фагоцитарно - метаболической активности нейтрофильных гранулоцитов с помощью изучения спонтанного НСТ - теста;

4. Установить диагностическую и прогностическую информативность цитохимических показателей функционально-метаболической активности лейкоцитов в зависимости от наличия осложнений и сопутствующих заболеваний;

5. Провести сопоставление цитохимических показателей лейкоцитов и основных параметров лабораторного исследования лейкоцитов периферической крови (количества лейкоцитов, палочкоядерного сдвига и изменения СОЭ);

6. Выявить терапевтическую эффективность противовоспалительного и иммуномодулирующего препарата тамерит в лечении ангины;

7. Установить с помощью используемых цитохимических методов исследования пределы нормальных показателей у группы здоровых людей.

Работа проводилась в соответствии с комплексным планом НИР Кабардино-Балкарского государственного университета Минобразования и науки по программе «Университеты России» «Фундаментальные исследования», раздел II «Медицина». Тема «Изучение показателей микробицидной системы лейкоцитов в норме и при инфекционных заболеваниях различной этиологии», зарегистрирована во ВНТИЦентре, государственная регистрация № 01.9.50003849.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное изучение состояния компонентов микробицидной системы и метаболической активности нейтрофилов в динамике заболевания при различных клинических формах ангин, которое показало, что изменения функционально-метаболической активности нейтрофильиых гранулоцитов носят неспецифический и разнонаправленный характер. Установлено, что в основе изменения содержания микробицидных компонентов и метаболической активности лейкоцитов лежит угнетение лизосомального катионного белка, активности миелопероксидазы на фоне повышения активности кислой и щелочной фосфатаз, накопление в клетке гликогена, а также возрастание показателей спонтанного НСТ-теста с максимальным значением в периоде разгара заболевания и с нормализацией в стадии реконвалесценции. При этом глубина и длительность сдвигов внутриклеточных компонентов зависели от клинической формы, стадии и степени тяжести патологического процесса, наличия осложнений и сопутствующих заболеваний, а также полноты выздоровления.

Обоснована высокая эффективность нового противовоспалительного и иммуномодулирующего препарата «Тамерит» в комплексной терапии больных ангиной.

Практическая значимость работы. В результате проведенных исследований установлена возможность использования исследований компонентов микробицидной системы и метаболической активности лейкоцитов для оценки неспецифической резистентности организма при бактериальной ангине. Показана перспективность исследований внутриклеточных компонентов нейтрофильных гранулоцитов и показателей спонтанного НСТ-теста лейкоцитов в качестве критерия для оценки степени тяжести патологического процесса, наличия осложнений и сопутствующих заболеваний, прогнозирования исходов, а также полноты выздоровления. Практическое значение имеет высокая эффективность нового противовоспалительного и иммуномодулирующего препарата тамерит в комплексной терапии ангин. Получены «стандарты» нормальных показателей внутриклеточных компонентов и метаболической активности лейкоцитов критерии при проведении и оценка цитохимических и цитоиммунологических исследований с помощью использованных методик.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. При различных клинических формах ангины изменение состояния важнейших компонентов микробицидной системы и метаболической активности лейкоцитов носят общий и неспецифический характер, являясь объективным показателем для оценки состояния неспецифической резистентности организма.

2. В основе изменения функционально-метаболической активности нейтрофильных гранулоцитов в динамике заболевания ангиной лежат разные степени угнетения содержания лизосомального катионного белка и активности миелопероксидазы на фоне повышения активности щелочной и кислой фосфатаз, содержания гликогена и показателей спонтанного НСТ-теста лейкоцитов.

3. Степень и длительность изменения активности и уровня интралейкоцитарных компонентов нейтрофилов у больных ангиной зависят от клинической формы, стадии и степени тяжести заболевания, наличия осложнений и сопутствующих заболеваний, что имеет теоретическое значение и найдет практическое использование.

4. Применение в комплексной терапии больных ангиной нового иммуномодулирующего, противовоспалительного и антиоксидантного препарата «Тамерит» приводит к более быстрому купированию клинических симптомов и лабораторных показателей по сравнению с больными, получавшими базис-терапию.

Внедрение в практику. Результаты диссертационной работы доложены на многих научно-практических конференциях и широко опубликованы в печати. Материалы диссертационной работы внедрены в практику работы Кабардино-Балкарского центра по борьбе и профилактике со СПИД и другими инфекционными заболеваниями МЗ КБР и используются на кафедрах инфекционных болезней, эпидемиологии, микробиологии и иммунологии Кабардино-Балкарского госуниверситета при изучении тем «Стрептококковая инфекция», «Ангина», «Инфекция и инфекционный процесс», «Неспецифическая резистентность и иммунитет».

Публикации: по материалам диссертационной работы опубликовано 20 работ.

Апробация диссертационного материала. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на ежегодных итоговых конференциях сотрудников и аспирантов Кабардино-Балкарского госуниверситета (Нальчик, 2003-2005), на заседании научного общества инфекционистов КБР (Нальчик, 2004, 2005), на VIII съезде Итало-Российского общества инфекционистов «Проблемы инфекции в практической медицине» (СПб, 2002), на Всероссийской научной конференции «Клинические перспективы в инфектологии» (СПб, 2001), на VI съезде врачей инфекционистов (СПб, 2003), на Международной конференции по фундаментальным исследованиям (Греция, 2003), на Всероссийской конференции молодых ученых «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (М.,2004), на V международном конгрессе молодых ученых и специалистов «Наука о человеке» (Томск, 2004), на Всероссийской конференции «Перспектива -2004» (Нальчик,2004), на V Всероссийской научной конференции «Гомеостаз и инфекционный процесс» (Сочи - Дагомыс, 2004), на Всероссийской научной конференции «Узловые вопросы борьбы с инфекцией (СПб, 2004), на X Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые -медицине» (Казань, 2005), на Международной научной конференции молодых ученых «Современные наукоемкие технологии» (Анталия, Турция,2005), на Всероссийской конференции «Гомеостаз и инфекционный процесс» (Кисловодск, 2005) и на Южно-Российской научной конференции «Актуальные вопросы инфекционной патологии Юга России» (Геленджик, 2005).

Диссертационная работа апробирована на научной конференции кафедры инфекционных болезней и Республиканского центра по борьбе со СПИД и др! инфекционными заболеваниями МЗ КБР (июль, 2005).

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 161 странице машинописного текста и содержит: введение, 6 глав, заключение, выводы и указатель литературы, включающий 227 отечественных и 84 иностранных авторов. Иллюстрации представлены 43 таблицами, 31 рисунками и 5 выписками из историй болезней.

Выводы:

1.При бактериальной ангине изменения компонентов микробицидной системы и метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов носят неспецифический характер являясь объективным критерием состояния неспецифической резистентности организма.

2.У больных ангиной на фоне угнетения компонентов микробицидной системы лейкоцитов: активности миелопероксидазы и содержания катионного белка выявлено повышение содержания гликогена, активности щелочной и кислой фосфатазы нейтрофильных лейкоцитов с максимальным значением в периоде разгара забаолевания.

3.По мере клинического выздоровления болезни отклонения функционально-метаболической активности лейкоцитов восстанавливаются за исключением лиц, с сопутстувующими заболеваниями, у которых восстановление наступает в периоде поздней реконвалесецнции.

4. Степень и длительность изменения внутриклеточных компонентов микробицидной системы и показатели спонтанного НСТ-теста лейкоцитов зависели от стадии, степени тяжести и клинического варианта гнойно-воспалительных изменений в зеве и на миндалинах.

5.Резко выраженные и длительные нарушения функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов свидетельствовали о тяжелом течении и возможности осложнений или сопутствующих заболеваний инфекционно-воспалительной природы.

6.Сопоставление цитохимических показателей нейтрофильных гранулоцитов (катионного белка, гликогена, миелопероксидазы, щелочной и кислой.фосфатаз) с гематологическими данными (лейкоцитозом, палочкоядерпым сдвигом и СОЭ) не выявляли закономерной сопряженнтси между сравниваемыми величинами, следовательно, исследования внутриклеточных компонентов микробицидной системы и метаболической активности лейкоцитов дают дополнительную информацию о развитии патологического процесса.

7.Применение противовоспалительного и иммуномодулирующего препарата «Тамерит» в комплексной терапии больных ангиной показало его высокую терапевтическую эффективность, о чем свидетельствует более быстрое купирование клинико-лабораторных данных и наромализация нарушений функционально-метаболической активности лейкоцитов.

Практические рекомендации

1 .Цитохимические исследования внутриклеточных компонентов нейтрофильных лейкоцитов: активности миелопероксидазы, кислой и щелочной фосфатаз, содержания катионного белка и гликогена, а также активности спонтанного НСТ-теста являются весьма информативными показателями функционального состояния нейтрофильных лейкоцитов у больных ангиной, в связи с чем могут быть использованы как один из тестов для оценки состояния неспецифической резистентности, степени тяжести заболевания, наличия сопутствующих заболеваний, полноты выздоровления, а также прогнозирования осложнений.

2 Резко выраженные и длительные нарушения ферментативной активности, содержания внутриклеточных компонентов лейкоцитов и показателей спонтанного IICT-теста нейтрофилов у больных ангиной свидетельствуют о более тяжелом течении болезни, наличии осложнений или сопутствующих заболеваний воспалительной природы, а также возможности развития деструктивных процессов на миандалинах.

3.Комплексная терапия больных ангиной с использованием противовоспалительного и иммуномодулирующего препарата «Тамерит» в дозе 100 мг внутримышечно 1 раз в сутки в течение 5-7 дней приводит к более быстрой нормализации клинико-лабораторных показателей и к сокращению сроков лечения.

4.Полученные при обследовании здоровых людей нормальные показатели активности миелопероксидазы, кислой и щелочной фосфатаз, содержания катионного белка, гликогена и показателей спонтанного НСТ - теста нейтрофилов могут быть использованы в качестве исходных критериев для оценки цитохимических и цитоиммунологических показателей в клинической практике у больных ангиной.