Автореферат и диссертация по медицине (14.01.23) на тему:Клиническое значение полиморфизма гена 5 -редуктазы и гена андрогенорецепторов при раке предстательной железы

2956

ТУЗОВ Дшшил Юрьевич

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА 5а-РЕДУКТАЗЫ И ГЕНА АИДРОГЕНОРЕЦЕПТОРОВ ПРИ РАКЕ ПРПДСТАТЕЛЫ-ЮЙ ЖЕЛЕЗЫ

М.01.23. - урология

Лпторсс|)срат диссертации иа соискание учеиоИ степени кандидата медицинских наук

П

Москпа- 2010

Работа выполнена в ГОУ ДПО «Российская медицинская академия последипломного образования Роездрава».

Научный руководитель: член-коррсспондснт РАМН,

доктор медицинских наук, профессор Лоран Олег Борнсоиич Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Дуто» Налернй Пиктороиич доктор медицинских наук, профессор Нинирон Андрей Знпопьсннч

Ведущая организация

ГОУ ВПО «Российский госудярсгоеинмП медицинский ушшерептег Роездрана»

Защита состоится « »__________2010 года в__________________часоп

на заседании Диссертационного соишаД 208.049.01 при ГУ МОНИКИ

им. М.Ф. Владимирского но адресу:

г. Москва, ул. Щспкшт, 61/2 кори. 15, коиферешкшл

С диссертацией можно ознакомиться и научно-медицинской библиотеке ГУ МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского.

Автореферат разослан « » ___________2010

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук,

профессор Астахов Г1.13.

РОССИЙСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ

БИБЛИОТЕКА _2Q1 О_

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблем

Рак предстательной железы - одно из самых распространенных заболеваний в мире. В структуре онкологических заболеваний в ряде стран рак предстательной железы выходит на 2-3 место после рака легких и желудка, а в США - на первое место. Ежегодно в мире выявляется до 400 тыс. случаев рака предстательной железы. Летальность в первый год жизни после верификации диагноза составляет около 30%, что говорит, о низкой выявляемое™ заболевания на начальных его стадиях и поздней обращаемости пациента [Кушлннский I I.E., Соловьев Ю.Н., Трапезникова М.Ф., 2003].

На основании современных данных об эпидемиологии рака простаты предполагалось, что в 2003 г. в США будет диагностировано 223 000 новых случаев рака предстательной железы, а 28 590 больных погибнут вследствие данного заболевания. В действительности же диагноз «рак простаты» был установлен у 230 110 пациентов, а н 29 900 случаях был констатирован летальный исход [ACS. Statistics. - 2004.]. В настоящее время заболеваемость РПЖ неуклонно растет, в России на 2005 год она составила 17,8 на 100 тыс. мужского населении [Сивков A.B. 2006]. В основе канцерогенеза большинства опухолей человека лежат специфические соматические мутации и рак предстательной железы не является исключением. Однако несмотря на то, что рак предстательной железы является, пожалуй, наиболее изучаемым злокачественным новообразованием мочеполовой системы, на сегодняшний день не выявлены гены, отвечающие за генетическую предрасположенность к этому зпболеванию,

Выявление болезни на ранних стадиях является первоочередной задачей клиницистов. Широкое внедрение в повседневную практику определения простатического специфического антигена (ПСА) в сочетании с транеректплыюй мультифокалыгой биопсией предстательной железы под ультразвуковым папедснием позволило выявлять большее количество заболеваний на ранних стадиях, когда применимо радикальное лечение

[Лоран О.Б., 2000]. Однако уровень простатического специфического антигена может увеличиваться в силу ряда причин, тем самым в некоторых случаях приводя к гипердиагностике. Таким образом, важно не только своевременное выявление заболевания, но и возможность прогнозировать дальнейшее его течение, выявление потенциально агрессивных его форм.

Поиск генетических маркеров часто основывается иа свойствах гена и путях метаболизма его белковой продукции. Таким образом, гены, вовлеченные в каскад биосинтеза и метаболизма андрогенов, можно выделить как вероятные маркеры рака простаты. Основными являются ген андрогенового рецептора (AR), кодирующий рецепторы к андрогенам, а также ген 5 а-редуктазы (SRD5A2), кодирующий фермент 5-а редуктазу, который преобразует тестостерон в гораздо более активный внутриклеточный дегндротестостерои. По данным ряда исследователей, мутации полиморфизмов выше перечисленных генов могут оказывать влияние на канцерогенез [Cynthia Л., 2004, Hsinu AW., 2000, Lynn N.. 2007, Tong M., 2005|, однако результаты проведенных исследований весьма противоречивы.

Непосредственными участниками в клеточной регуляции роста п развития предстательной железы, а так же канцерогенеза являются впдрогепы. Гены и их полиморфизмы, участвующих в каскаде метаболизма и биосинтеза андрогенов, могут быть выделены как вероятные факторы прогноза развития рака простатг,I.

Полиморфными принято называть гены, которые представлены в популяции несколькими разновидностями - аллелями, что обусловливает разнообразие признаков внутри вида. Ген считают полиморфным, если его самый распространенный аллель встречается менее чем у 90% людей. Это определение отражает только распространенность разных аллелей, и не их функциональные различия. Различия между аллелями одного и того же гена, как правило, заключаются в незначительных вариациях его "генетического" кода. Большинство изпестпых полиморфизмов выражаются либо в заменах одного иуклеотида, либо в изменении числа повторяющихся фрагментов ДНК. Полиморфизмы нуклеотнднмх последовательностей обнаружены во всех

э

структурных элементах генома: экзонах, ннтронах, регуляторных участках и т.д. Тем не менее вариации, затрагивающие кодирующие фрагменты генов и отражающиеся на аминокислотной последовательности их продуктов, встречаются относительно редко и в существенной степени зависит от того, насколько вариабельны собственные функции белка, кодируемого различными аллелями, что справедливо и в отношении ферментов образования и метаболизма стероидных гормонов. Аллели имеют идентичную локализацию в гомологичных хромосомах.

В ходе эволюции разные аллели произошли в результате мутаций от единого аллсля-прсдшестнсиника, чаще всего они отличаются друг от друга заменой одного нуклеотида (миссснс-мутацни). Мутации изменяют продукт гена, как следствие этого функции продукта гена оказываются неполноценными. Это приводит к изменению фенотипа. Наибольший интерес представляют внутрпгеиные изменения. Обычно белки, кодируемые разными аллелями одного гена, обладают одинаковыми функциональными свойствами, то есть замена аминокислоты нейтральна или почти нейтральна с точки зрения естественного о тбора.

О наличии чех или иных аллелей часто судят на основании анализа аминокислотной последовательности соответствующих белков. Судить о наличии и популяции полиморфизма можно но различию в фенотипах, соответствующих разным аллелям, либо по характеру рестрикции ДНК, несущей разные аллели. Понятие полиморфизма расширилось с открытием необычайной изменчивости последовательностей ДНК. В геномах разных людей различается I из 100-200 пар нуклеотндов; это согласуется с гетерозиготиостыо но 1 из 250-500 пар нуклеотндов. Современные методы позволяют выявить замены отдельных нуклеотндов в кодирующих областях, которые могут быть несмысловымн или вызывай, изменение аминокислотной последовательности. Полиморфизм Д1ИС еще более выражен в некодирующих областях генома, влияние которых на экспрессию генов невелико или его нет вообще.

Помимо замены отдельных нуклеотндов в основе полиморфизма ДНК лежат вставки, делении и изменение числа тандемные повторы. Различают варьирующие по числу (длинные) тандемные повторы (мннисателитпая ДНК) и короткие (тстра-, три-, дн- или мононуклсотидные) тандемные повторы (микросателитная ДНК).

Исходя из вышесказанного, очевидно, что изучение роли аллельных полиморфизмов принимающих участие в патогенезе РПЖ имеет большой научный и практический интерес, так как, неблагоприятные аллели, по-видимому, участвуют в патогенезе подавляющего большинства случаев РПЖ. В настоящей работе приведены результаты распределения полиморфизмов гена 5а-рсдуктазы и гена андрогенового рецептора у пациентов страдающих раком предстательной железы в зависимости от стадии заболевания и оценка прогностической значимости.

Цель работы:

Определить клиническое и прогностическое значение полиморфизмов генов Н1Ю5А2 и АН при раке предстательной железы.

Зидичи исследовании:

1. Проанализировать распределение полиморфизма А-19Т гена ,ЧЛ1)5Л2 при раке предстательной железы и зависимости от стадии заболевания.

2. Определил, особенности аллельного распределения полиморфизма ¡'£¡91. гена Я1Ю5А2 при раке предстательной железы, п так же в завнсимосш от сзпдии заболевания.

3. Изучить влияние аллельного распределения полиморфизмов гена АЛ при раке предстательной железы в зависимости от стадии заболевания, оценить риск развития рака предстательной железы.

4. Оценить распространенность носительстна сочетания полиморфизмов генов $1Ю5А2 и АЛ, у пациентов РПЖ в запнснмости от стадии заболевания. Оценить риск развития РПЖ у пациентов с данным сочетанием.

А

Научная новизна.

В клинических условиях, на кафедре урологии Российской Медицинской Академии Последипломного Образования на базе ГКБ им. С.П. Боткина совместно с отделением наследственных эндокринопатпй и лабораторией молекулярной диагностики Эндокринологического научного центра Росмсдгехнологий, проведена оценка распределения полиморфизмов A4 ОТ и V89L гена 5-а редуктазы при раке предстательной железы. Выявлены различия изучаемых факторов при локализованном и метастатическом раке предстательной железы. Проведен анализ распределения полиморфизмов гена андрогенового рецептора при раке предстательной железы, а так же в зависимости от стадии заболевания.

Выявлена закономерность распределения полиморфизма CAG<20 гена AR у пациентов страдающих РПЖ и группы контроля.

Определена частота посительетна сочетания гомозиготной оплели VV, renn 5-а редуктазы и полиморфизма CAG<20 гена андрогенового рецептора у пациен тов страдающих раком предстательной железы.

ripiticni'iecKiHi ценность.

В клинических условиях на кафедре урологии Российской Медицинской Академии Последипломного Образования па базе ГКБ им. С.П. Боткина совместно с отделением наследственных эндокринопатпй и лабораторией молекулярной диагностики Эндокринологического научного центра Росмедтехиологий, впервые оценена практическая значимость распределения полиморфизмом гена 5-а редуктазы и гена андрогенового рецептора,

Полученные данные о носнтельстве полиморфизма V89L гена SRD5A2 н полиморфизма СА(!<20 гена оидрогенового рецептора, а так же их сочетания, позволяют использовать их при ранней диагностике РПЖ и планировании тактики лечения пациентов/

Основные положения выносимые на защиту.

1. При РПЖ гомозиготный УУ вариант гена Ь'1Ю5А2 встречается чаще чем в группе контроля (РПЖ-63% уб Контроль-43%). У пациентов носителей генотипа УУ риск развития метастатического рака предстательной железы в 1,7 раза выше.

2. Иоситсльство полиморфизма СЛС<20 гена АН выявляется во всех группах пациентов РПЖ н повышает риск развития метастатического рака простаты в 3 раза.

3. Сочетание носительства полиморфизмов УУ+СА(/^20 генов Л'Л7)5/(2 и АН встречается у пациентов страдающих РПЖ чаще чем в группе контроля и характерно для пациентов с генерализованной формой РПЖ. Иоситсльство сочетания УУ+С,А(г^20 является прогностически значимым неблагоприятным фактором риска развития метастатического рака предстательной железы.

Апробации диссертации.

Апробация работы состоялась 01 декабря 7.000 г. на заседании кафедры урологии и хирургической аидрошгии ГО У ДПО «РМАПО 1'осшрана». Результат!,I диссертационного исследования доложены в докладах:

на конкурсе молодых ученых Московского общества урологов, 23 декабря 2008 г., г. Москва

совместной научной конференции урологического отделения и кафедры урологии ФУВ ГУ МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского от 10.01.2010.

Внедрение н практику.

Результаты исследования внедрены в практику 20, 21, 41 урологических отделений ГКБ им. С.П. Боткина.

Публикации.

По теме диссертации опубликованы 3 научных работы, одна из которых в центральной печати.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 103 страницах машинописного текста, состоит из 3 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы, включающего 6 отечественных и 133 зарубежных источников. Работа содержит 18 таблиц и 15 рисунков.

Материалы и методы исследования.

Кафедрой урологии Российской Медицинской Академии Последипломного Образования иа базе ГКБ им. С.П. Боткина, совместно с отделением наследственных эндокрнпопатий и лабораторией молекулярной диагностики Эндокринологического научного центра Росмедтсхнологпй, в период с октября 2005 г. по январь 2008 г., проводилось научное исследование, но изучению влииинм генетических факторов па течение ракп предстательной железы. Материалы диссертации объединили результаты клинических, лабораторных и морфологических исследований у 180 человек, из которых 90 составили больные, находившиеся иа лечении в стационаре и поликлиническом отделении клиники урологии Российской Медицинской Академии Последипломного Образования на базе ГКБ им. С.Г1. Боткина, п 90 человек представляли собой здоровых добровольцев, которые сформировали группу контроля.

Группу контроля составили молодые добровольцы в возрасте от 18 до 32 лет (26,5 + 3,7) у которых при клинико-лабораторном и инструментальном обследовании (ПСА, ПРИ. УЗИ) данных за РПЖ получено не было.

П зависимости от результатов клинического обследования все больные РПЖ были разделены иа 3 группы. В первую группу вошли 30 больных с локализованным раком предстательной железы T1-2N0M0. Вторую группу составили 30 пациентов с местиораспространенпым процессом T3-4N+M0. Больные с метастатическим РПЖ T3-4N+M) вошли в третью группу. Диагноз рака предстательной железы (РПЖ) был установлен на основе комплексного обследовоппя (общий клинический осмотр, лабораторная диагностика,

определение ПСА, ПРИ, ТРУЗИ с мультифокальной транеректальной биопсией простаты) и последующего гистологического исследования с определением степени дифференцировки опухоли по шкапе Глисона.

Для определения клинической стадии болезни выполнялись компьютерная томография (КТ) или мапштно-рсзонасная томография (МРТ) малого таза, обзорная рентгенография грудной клетки, УЗИ органов брюшной полости, ецнитиграфня костей скелета. 41 больному была выполнена радикальная позадилонная простатэктомия (РПЭ). Из них .10 больных составили первую исследуемую группу, а остальные 11 человек, перенесших РПЭ, вошли в состав второй группы, из которых у 6 больных - T3bN0M0, у 5 -T3aN0M0. У 17 больных выполнена билатеральная ор.члктомня, у 2-х пациентов произведена медикаментозная кастрация (МАБ).

В третьей группе 21-му больному выполнена билатеральная орхжтомнн с последующим назначением антиандрогенов, 4-м двусторонняя орхжгомия с последующей лучевой терапией, 5-ти пациентам проводилась медикаментозная кастрация.

В исследуем!,IX группах наблюдались больные PIDIC в возрасте ел 53 до 79 лет (67,5 ± 5,7 года) (таблица 1).

Таблица 1.

Распределение пациентов но возрасту

Стадии РИЖ Группа 1 локализованный РПЖ Группа 2 Mi'ciiiopacii-ростриишпый РИЖ Группа Л МСГИТСГИП1ЧСС кий 1'ПЖ

mill 53 " 56 " " 58

Возраст, max ____ 76 78 70

годы 1 М±8 65,1 ± 5,6 68,2 А 5,8 68,4 ± 5,5

Из представленных в таблице данных следует, что больные 1,2 и 3 группы статистически не отличались по возрасту (р = 0,05).

При обследовании всем больным определялся уровень общего ПСА, который составлял от 4,5 до 1001 иг/мл. Сравнения значений общего ПСА в

исследуемых группах представлены в таблице 2.

Таблица 2.

Показатели общего ПСА у обследованных больных

Показатели Группа 1 Группа 2 Группа 3

1п1)1 4,50 шах 21,5 ПСА |у| ± 5 9,74 ± 4,8 (нг/мл) 4,40 18,0 100,0 1001,0 29,89 ±24,9 128,71 ±180,4 р~0,0001 (1,3) р^0,0001 (1,2)

У больных 3 группы уровень общего ПСА был достоверно выше ПСА у больных 1 и 2 групп (128,7 иг/мл против 29,9 нг/мл и 9,7 иг/мл, соответственно, р "0,0001). Учитывая клиническую стадию, уровень ПСА крови и степень диффереицировкн опухоли по Глисопу, исследуемые больные были разделены на группы риска в соответствии с критериями, предложенными 8сап1шо Р.Т. и сопит, па третьей международной консультации по раку предстательной железы, состоявшейся в 11арижс в 2002 г. (таблица 3).

Таблица 3.

Распределение больных но группам риска

Группы риска Больные РПЖ

в %

Низкий риск 7 8

Средний риск 23 26

Высокий риск 22 24

Очень высокий риск 38 42

ВСЕГО 90 100

Всем больным была выполнена траисректальпая мультифокальная биопсия предстательной железы. В таблице 4 показаны различные

9

морфологические варианты РПЖ по градации Глисона у различных групп больных.

Таблица 4.

Характеристика больных по градации Глисона

Степень злокачественности по Глнсону группа 1 группа 2 группа 3

% п % п % п

микрофокусы 10 3 0 0 0 0

<4 10 3 0 0 3 1

5-7 77 23 87 26 53,5 16

>7 3 1 13 4 43,5 13

ВСЕГО 100% 30 100% 30 100% 30

Как следует из представленных данных, в группе больных с локализованным РПЖ низкоднфференцированиые формы (более 7 по шкале Глисона) встречались в 3% случаев, в то время как в группах местнораспростаненного и метастатического РПЖ ннзкодифференцированные формы рака определялись в 13% н 43,5 %, соответственно.

Диагноз рак предстательной железы был установлен на основании комплексного обследования. Основное внимание при сборе жалоб и анамнеза обращалось на семейный анамнез заболеваемости РПЖ. Также немаловажную роль играло наличие жалоб, характерных для местного и общего распространения рака предстательной железы (гсмаюспсрмия, гематурия, боли в костях).

Оценка выраженности симптоматики производилась с использованием Международной системы суммарной оценки заболеваний простаты в баллах (I-РББ) с определением индекса качества жизни (Оо1,). У всех пациентов собирались сведения о сопутствующих заболеваниях.

При физикалмюм обследовании помимо данных об общем сосзояппп больного, особое внимание уделялось проведению пальцевого ректального исследования. В процессе исследования осуществлялись оценка размеров, формы, консистенции, четкости контуров простаты, особое внимание

уделялось наличию очаговых или тотальных уплотнений ее ткани, выраженности срединной борозды, наличию болезненных при пальпации участков, наличию спаянности простаты с окружающими тканями, уплотнений в зоне семенных пузырьков.

Трансректальное ультразвуковое исследование выполнялось на аппарате «BrucIKjaer 1846» с использованием сканера и 7,0 MHz-преобразователя в В -режиме и с применением цветного допплеровского сканирования. Измерялись линейные размеры, объем предстательной железы, оценивалась ее зхогснность, кровоснабжение, состояние перипростатических тканей. Выявленные гипоэхогенные зоны расценивались как подозрительные на РПЖ и подвергались обязательной пункции при трансректальной мультифокальной биопсии.

Кроме того, оценивались состояние верхних мочевых путей, мочевого пузыря п объем остаточной мочи, проводилось исследование печени с целью исключения метастатического поражения с использованием абдоминального датчика аппарата «LOGIQ 400» фирмы «General Electric».

Всем iiamicirraM, у которых ПСА превышал 20 нг\мл, с целью исключения метастатического поражения скелета выполнялось радпонуклпдпое сканирование костей скелета. Для исследования использовалась гамма-камера «Siemens ZLS-7500» с активностью 370 МБк, Тс-99-технсфор, лучевая нагрузка по скелету - 3 мЗв.

Всем пациентам определялся уровень простазмшецифического антигена (ПСА). Чтобы исключить возможность ложноположительиых результатов, забор крови па исследование производился либо до, либо не ранее, чем через 7 дней после таких манипуляций, как ПРИ, ТРУЗИ, а также любые другие механические воздействия на предстательную железу.

Забор крови для молекулярио-геистнчсских исследований осуществлялся в пробирки, содержащие ЭД'ГА. Выделение ДНК из цельной крови проводилось с использованием коммерческих наборов Wizard Genomic DNA Purification Kit (Промега, США).

Определение полиморфных аллсльных вариантов А49Т и V89L в гене 5а-редуктазы II типа (SRD5A2) проводилось методом аллель-специфической ПЦР с использованием следующего протокола.амплификации геномной ДНК в 2 этапа:

При проведении I этапа ПЦР использовался следующий состав реакционной смеси: дсионизированная вода, 1х ПЦР-буфер с 17,5 шМ хлорида магния, смесь дезоксинуклеотидтрнфосфатов (200 рМ каждый), олигонуклсотнды (0,2 цМ каждый), Taq-ДНК-полимераза 1 ед, геномная ДНК 100 нг. Общий объем реакции 25 мкл.

При проведении II этапа ПЦР использовался следующий состав реакционной смеси: дсионизированная вода, 1х ПЦР-буфер с 17,5 шМ хлорида магния, смесь дезоксинуклеотидтрнфосфатов (200 цМ каждый), олигонуклсотнды (0,2 |iM каждый), Taq-ДНК-полимераза 1 ед, продукт I этапа ПЦР в разведении 1:500, 1 мкл. Общий объем реакции 25 мкл.

ПЦР проводилась па ДНК-амплификаторе Pcrkin Elmer 2400.

Визуализация продуктов ПЦР проводилась методом электрофореза в 2% агарозном геле. При амплификации с использованием обратных праймеров А49 или Т49 длина аплнкона составляла 153 н.п., при амплификации с использованием обратных праймеров V89 или L89 длина амшшкона составляла 273 н.п.

Определение числа CAG-повторов в экзонс 1 гена рецептора аидрогепов (AR) проводилось методом прямого секненнрования.

Качество апликоиа оценивалось при проведении электрофореза в 1% агарозном геле. При удовлетворительном качестве ПЦР-продуктов проводилась их очистка с использованием наборов PCR Purification Kit (Promega). Концентрация очищенных, ПЦР-продуктов оценивалась с помощью спектрофотометра Biophotometr (Eppendorf). -10 нг очищенного ПЦР-продукта использовались в последующем для секвеинровання.

Статистический анализ проводился па персональном компьютере с использованием пакета статистических программ SPSS для Windows 95, версии 13. Для сравнения средних двух независимых выборок использовались t-

критерий Стыодснта, непараметрический критерий Манна-Уитни и родственный ему парный критерий Уилкоксона. Достоверность между частотными показателями оценивалась при помощи критерия х2- Достоверными считали различия при р<0,05. Корреляционный анализ проводили методом Spearman.

Расчет относительного риска (RR) производили по формуле RR=(a/(a+b))/(c/(c+d».

Для вычисления вероятности развития заболевания при наличии нескольких параметров, дихотомических переменных и независимых переменных, использовался метод бинарной логистической регрессии.

Вероятность наступления события для некоторого случая рассчитывается по формуле 1

Р = \-=7

1 + е '

где и= Ь(*Х| + Ь2хХ2+ ...+ Ь„хХ„+ а,

XI — значения независимых переменных, Ы — коэффициенты, расчёт которых является задачей бинарной логистической регрессии, а некоторая константа. Если для р значение меньшее 0,5, го можно предположить, что событие не наступит; в противном случае предполагается наступление события.

Результаты н обсуждение.

Первым этапом анализа результатов проведенного исследования была оценка распределения полиморфизма А49Т гена S11D5A в группе больных РПЖ и группе контроля. В группе пациентов РПЖ генотип АА определялся в 09 %, в группе контроля 96,7 %, р-0,06, генотип ЛТ в I % и в 3.3 % соответственно, р"0,07, генотип 7Т не определялся как у больных страдающих РПЖ, гак и у здоровых добровольцев.

Анализ наблюдаемых и ожидаемых частот показал, что среди пациентов РПЖ частота встречаемости аллелей полиморфизма А49Т гена 8ЯП5А2 статистически не отличалась от показателей контрольной группы.

Далее мы проанализировали взаимосвязь между полиморфизмом А49Т гена Я[{05Л2 у больных раком предстательной железы и стадией заболевания.

Таким образом, при анализе распределения частот полиморфизма А49Т гена 5/?£>5Л2 у больных, страдающих раком предстательной железы, и в группе контроля, не получено статистически достоверных данных, свидетельствующих о взаимосвязи исследуемого полиморфизма и развития РПЖ. Так же можно сказать, что носительство генотипа А49Т не изменяется в зависимости от стадии заболевания.

Полученные данные приведены в таблице 5.

Таблица 5.

Аллсльиое распределение полиморфизма А49Т геня 811П5Л2 при РПЖ и п

группе контроля

Л49Т Больные РПЖ Здоровые добровольцы

% п % и

АА 99 89 96,7 87

АТ 1 1 3,3 3

тг - - -

ВСЕГО 100 90 100 90

Вторым этапом мы так же проанализировали аллсльиое распределение полиморфизма У891 гена К1Ю5Л2 у пациентов РПЖ и в группе контроля.

Генотип УУ полиморфизма УН91. гена Х1Ю5Л2 определялся у 55 больных РПЖ, что составило 61 %, и у 40 здоровых добровольцев, что составило 44%.

Генотип УЬ встречался у 30 пациентов, что составило 33% в группе больных и у 41 человека (46%) в контрольной группе. Генотип ЬЬ выявлен у 5 больных в группе РПЖ, что составило 6% и у 9 человек в группе контроля, что составило 10%. Таким образом, при анализе распределения генотипа УУ полиморфизма У89Ь гена 31№5Л2 у больных РПЖ и здоровых добровольцев мы получили достоверное различие в частоте встречаемости данного гомозиготного полиморфизма (р=0,04). Распределение в частоте носительства генотипов УЬ и Ы статистически не отличалось от контрольной группы р=0,1 и р=0,4 соответственно. Расчет относительного риска (Ш* - 1,95, ДИ 1,08-3,52) показал, что носитсльство гомозиготного варианта УУ связано с развитием рака предстательной железы по сравнению с носнтсльством УЬ и Ы аллелей.

Полученные данные приведены в таблице 6.

Таблица 6.

Аллсльнос распределение полиморфизма У89Ь гена 5ЯД5Л2 при раке предстательной железы и в группе контроля

У89Ь Больные РПЖ Здороиые добровольцы

% 11 %

У\ 61 55 44 40

УЪ 33 30 46 41 0

Ы, 6 5 10

«СЕГО 100 90 100

Для изучения частоты встречаемости полиморфизма У891, был проведен анализ в зависимости от стадии заболевания п исследуемых группах.

При анализе распределения частот носительства генотипов УУ, У1 н ¿А в первой группе не получено статистически значимой разницы но сравнению с контрольной группой (р-0,08).

Расчет относительного риска (Ш*) в группе пациентов с локализованной формой РПЖ с УУ, УЬ и ЬЬ генотипом по сравнению с контрольной группой показал, что наличие полиморфизма У89Ь у такой группы больных не связано с развитием рака предстательной железы. Для генотипа УУ- Ю1=1, ДИ 0,69-1,57, для генотипа УЬ- 11Я=0,95, для генотипа ЬЬ -1111=0,85.

Во второй группе при анализе распределения частот носительства гетерозиготного генотипа УЬ не получено статистической разницы по сравнению с контрольной группой (р=0,09).

Расчет относительного риска показал, что гомозиготные аллели УУ и ЬЬ и гетерозиготная аллель УЬ не связаны с развитием местнораспространенной формы РПЖ, для генотипа УУ-Ш1=0,9, ЬЬ генотип - Ш1=1, УЬ -1111=1,0.

При анализе распределения частот носительства генотипов УУ в третьей группе получена статистически значимая разница по сравнению с контрольной группой (р=0,004).

Таблица 7.

Аллелыюе распределение полиморфизма V89JL геня SRI)SA2 при РПЖ в зависимости от стадии заболевания.

Больные РПЖ (%) Здоровые добровольцы

Группа 1 Группа 2 Группа 3

VV 46,7 (п=14) 53,4 (n= 16) 83,4 (и=25) р=0,004 44 (п=40)

VL 46,7(11=14) 40,0 (п=12) 13,3 (п=4) р=0,03 46(n=4t)

LL 6,6 (п»2) | 6,6 (11=2) 1 3,3 (м--* 1) 10(п=9)

В то же время при расчете относительного риска (RR), мы пришли к выводу, что у пациентов носителей аллели УУ гена SHD5A2 риск развития метастатического рака предстательной железы в 1,7 раза выше, чем у пациентов с гетерозиготной формой VI. (ДИ 1,3-2), и в 1,5 раза выше чем у пациентов с гомозиготной формой ЬЬ (ДИ 1,2-2,1).

Вследствие того, что длина полиморфного трннуклеатндного СЛй полиморфизма обратно пропорциональна трансакшвационной активности андрогенового рецептора, было сделано предположение, что пациенты с короткими повторами могут иметь повышенный риск развития рака простаты.

Среди наблюдаемых больных полиморфизмы САС< 17 и СЛС<20 наиболее часто встречаются у пациентов в группе РПЖ по сравнению с группой контроля. Нами было проанализировано распределение САй тринуклеатидных полиморфизмов при РПЖ и в группе контроля, данные представлены в таблице 8.

Таблица 8.

Распределение С/1(/трннуклеотндных полиморфизмон при раке

предстательной железы и в группе контроля

Показатели Больные РПЖ (п = 90) Здоровые добровольцы (п = 90)

% 11 % 11

САС<17 7 6 0 0

СЛв<20 18 1Г, 7 Г.

р = 0,04

При анализе результатов выявлено, что полиморфизм ОЮ</7 в группе с РПЖ встречаются у б пациентов, что составило 7%, в группе контроля носителей с таким трипуклеатндным полиморфизмом выявлено не было.

При оценке результатов у больных, страдающих РПЖ, и здоровых добровольцев, трннуклеатидпый полиморфизм САС<20 встречался у 16 больных страдающих раком простаты (18%), в то время как в группе контроля 6 человек были носителями трииуклеатпдного полиморфизма САО<20, что составило 7%.

При анализе распределения частот, иоснтсльства генотипа САО<2() получена статистически значимая разница в сравнении с контрольной группой, р-"0,04.

Таким образом, можно констатировать, что наличие тринуклеатидных полиморфизмов САС<17 и САС<20. связано с развитием рака предстательной железы. Анализ относительного риска показал, что при наличии тринуклеатидного полиморпфизма САС<20 риск развития рака предстательной железы в 1,7 раза выше (ДИ 1,12-3,2).

Мы так же проанализировали распределение тринуклеатидных полиморфизма САй<20 в группах пациентов РПЖ и в группе контроля (таблица 9).

Таблица 9.

Распределение тринуклеатидных полиморфизмов СЛй<20 в зависимости от стадии заболевания при раке предстательной железы и в группе

контроля.

Показатели Группа 1 (п = 30) Группа 2 (п = 30) Группа 3 (п = 30) Здоровые добровольцы (п = 90)

% 11 % и % п % ■1

СЛв<20 3 1 10 3 40 12 7 6

Ш. 1 ДИ 0,46-3,1 0,48 ДИ 0,11-4,0 3,3 ДИ 2,6-4,14 р=0,03

В группе с локализованным РПЖ у 1 пациентов выявлен полиморфизм САС<20, что составило 3%. В группе контроля у б человек определяется данный полиморфизм - 7%. В группе с днссемниировапной формой РПЖ полиморфизм АК САС<20 был выявлен у 3 больного, что составило 10%.

При анализе распределения частот, посительетва генотипа С АС <20 в первой и второй группах но сравнению с контрольной статистически значимой разницы не получено, р О,Я. В группе с метастатической формой РПЖ отмечалось увеличение количества пациентов с посительством полиморфизма САС><2(1 гена АН по сравнению с первой и второй группами: данный

полиморфизм был выявлен у 12 больных, что составило 40%. При анализе распределения частот носительства генотипа САС<20 в третьей группе получена статистически значимая разница по сравнению с контрольной группой (р=0,03). Расчет относительного риска (ЯК) показал, что, носительство полиморфизма СЛС?<20 гена ЛЯ в первой (1111=1, ДИ 0,46-3,1) и второй (1*11=0,48, ДИ 0,11-4,1) группах не связано с риском развития РПЖ. В третьей группе риск развития метастатической формы рака предстательной железы втрое выше, 1111=3,3, ДИ 2,6-4,14.

Учитывая то обстоятельство, что мы не получили статистически достоверных данных свидетельствующих о влиянии полиморфизма А49Т гена Б1Ю5А2 на развитие РПЖ, мы проанализировали частоту распределения данного сочетания полиморфизма У89Ь и полиморфизмов гена андрогенового рецептора САС<17 и САС<20 в зависимости от стадии заболевания. В таблице 10 показаны сочетание носительства генотипа У89Ь и тринуклеатидного полиморфизма САй<20 у больных РПЖ и группе контроля.

Таблица 10.

Сочетание ноентельстпа генотипа У89Ь н трннуклептндного полиморфизма СЛ(7<20 п зависимости от стадии заболевании при раке предстательной железы и в группе контроля.

Носнтельспю УУлСЛв<20 Группа 1 (п = 30) Группа 2 (п = 30) Группа 3 (п = 30) Здоровые добровольцы (11 = 9 (И

% II % н % II % и

7 2 3 1 33 р=0,02 10 3 3

У1ЛСАС;<21) 3 1 3 1 3 1 2 2

илсла<20 0 0 0 0 0 0 1 1

(Ш 4,7 ДИ 2-8,2

11ри анализе распределения носительства генотипа получены следующие данные. 13 группе с локализованным раком предстательной железы генотип

VV+CAG<20 встречался у 2 пациентов, что составило 7%. Генотип VL+CAG<20 выявлен у 1 пациента, что составило 3%. Генотип LL+CAG<20 в первой группе не определялся.

Вторая группа представлена 1 больным с генотипом VV+CAG<20, и 1 пациентом с носительством VL+CAG<20, что составило 3%. В группе с метастатической формой РПЖ у 10 пациентов встречался генотип VV+CAG<20, что составило 33%. Генотип VL+CAG<20 выявлен у одного больного, что составило 3%.

В группе контроля у 3 человек определялось сочетание полиморфизмов W+CAG<20, что составило 3%, два человека имели носительство VL+CAG<20 - 3%, у одного человека выявлен генотип LL+CAG<20, что составило 1%. При анализе распределения частот носительства генотипа VV+CAG<20 в третьей группе получена статистически значимая разница по сравнению с контрольной группой, р=0,02. Расчет относительного риска (RR) показал, что во всех группах пациентов, страдающих РПЖ, при носнтельствс генотипа VL+CAG<20, рнск развития той или иной формы заболевания отсутствует (I группа RR~0,18, 2 и 3 группа RR=0,62 соответственно). При наличии сочетания генотипа LL+CAG<20 рнск развития метастатической формы РПЖ так же отсутствует. Однако при наличии генотипа VV+CAG<20, риск развития метастатической формы рака предстательной железы возрастает более чем в 4,7 раза ДИ 2-8,2. Одним из доказанных параметров, характеризующих злокачественность опухоли, является степень дифферешшровки опухоли, определяемая при РПЖ как сумма Глисона. Мы проанализировали распределение VV полиморфизмов гена SRD5A2 и CAG<20 renn AK в зависимости от суммы Глисона а также связь носительства сочетания генотипов генов SRDSA2 и AR и уровнем ПСА. Полученные результаты представлены на рисунке I.

.У 10 ¿зги 1С

У о \ III IV

^» VI 2 1 2

УУ+СА6<20_У^САв<20

1 - II-

III 7-10 IV -ПСА 0-10

V -ПСА 10-20 VI - ПСА >20

Рис. 1. Зависимость яллельиого распределение сочетания гена УУ+САй<20 от степени дифференцнровкн опухоли.

При анализе распределения сочетания полиморфнзмои УУ+САС<20 в группе пациентов с суммой Глнсона до 4, один пациент имеет данное сочетание - 6%, у 2 больных с исследуемым генотипом уровень ПСА от 0-10, что составило 12%.

В группе пациентов с Пшсопом от 5-6 у 3 больных отмечено данное сочетание, что составило 19%, у 1 больного с ПСА от 10-20 нг\мл определялось сочетание УУ\САС<20, что составило 6%.

В группе пациентов с иизкоднфференцировапным РПЖ у 10 больных определялся генотип УУ*САО<2() ~ 63%, и такое же количества пациентов с генотипом УУ > С/№<20 входит в группу с ПСА >20.

При оценке распределения сочетания генотипа VII САС<20 у двух пациентов определяется умереиподифферсицнрованпая форма РПЖ, что составило 13%. При этом уровень ПСА от 0-10 нг/мл выявлен у одного больного - 6%, ПСА от 10-20 нг/мл у двух пациентов, что составило 13%.

Таким образом, прн анализе распространения частот носительстпо генотипа W+CAG<20 ассоциируется с низкодифференцированными формами РПЖ и высоким уровнем ПСА, р=0,02.

В нашем исследовании мы проанализировали, возможно, ли развитие заболевания при наличии нескольких параметров. При расчете бинарной логистической регрессии мы получили следующие результаты. В группе пациентов с генерализованной формой рака предстательной железы при сочетании гомозиготного генотипа VV retía SRD5A2 и полиморфизма CAG<20 гена AR: const.B0=l ,225485, VV=0,767907, VL=0,415490, LL= 1,962573, p=0,79.

Таким образом, полученное значение р=0,79 больше, чем 0,5 и, следовательно, с большей долей вероятности можно утверждать, что носительство сочетания генотипов W+CAG<20 может привести к развитию метастатического рака предстательной железы.

Проведенное нами исследование показало, что полиморфизмы генов участвующие в метаболизме тестостерона причастны к развитию агрессивных форм РПЖ. Полученные данные свидетельствуют о том, что полиморфизм А49Т гена SRD5A2, не оказывает влияния иа риск развития рака предстательной железы. В свою очередь наличие гомозиготной аллели VV гена SRD5A2 увеличивает риск развития РПЖ. Преобладание коротких тринуклеатндных полиморфизмов CAG, усиливает транскрнпцнональную активность, гена AR приводя, к повышенной чувствительности к андрогенам, хронической андрогенпой стимуляции и тем самым повышая риск развития РПЖ. Сочетание VV аллели гена SRD5A2 и полиморфизма CAG<20 может влиять на развитие агрессивных форм РПЖ.

7.2

Выводы.

1. Распределение полиморфизма А49Т гена 5ЯИ5А2 не отличаются при раке простаты и в группе контроля. Носительство данного полиморфизма не влияет на риск развития РПЖ.

2. При РПЖ гомозиготный УУ вариант гена 57Ш5Л2 встречается чаще чем в группе контроля (РПЖ-83% уб Контроль-44%). У пациентов носителей генотипа УУ риск развития метастатического рака предстательной железы в 1,7 раза выше, [ДИ 1,3-2], чем у носителей аллели УЬ.

3. Носительство полиморфизма САС<20 гена АЯ выявляется во всех группах пациентов РПЖ н повышает риск развития метастатического рака простаты в 3 раза.

4. Сочетание иосительства полиморфизмов УУ+САС<20 генов 31Ю5А2 и АЯ встречается у пациентов страдающих РПЖ чаще чем в группе контроля (РПЖ-33% уя Контроль-3%) и характерно для пациентов с генерализованной формой РПЖ. При данном сочетании риск развития метастатической формы рака предстательной железы возрастает в 4,7 раза |ДИ 2-10].

Пра1сгические рекомендации

1. При обследовании больных с симптомами нижних мочевых путей наряду с определением уровня простат специфического антигена, целесообразно выявлять носительство гомозиготного полиморфизма У89Ь гена БЯП5А2, который является врожденным предиктором в развитии генерализованной формы рака прсдстателы юй железы.

2. Пицнентам с верифицированным раком предстательной железы необходимо определение полиморфизма САСг<20 гена АЯ, частота которого увеличивается в зависимости от спиши заболевания и служит прогностическим фактором в диагностике агрессивных форм рака простаты.

3. При подозрении на генерализацию процесса у пациентов страдающих раком нредегателыюй железы наряду с общепринятыми методами исследования целесообразно определять сочетание гомозиготного полиморфизма У891. гена ХА105/1,? и полиморфизма САО<2() гена ЛЯ, указывающие па развитие метастатической формы раки предстательной железы.

Список опубликованных работ

1. Клиническое значение полиморфизмов Л49Т и V89L гсиа 5 альфа-редуктазы 2 типа при раке простаты // Материалы пленума правления Российского общества урологов. - Москва. - 2007. - С.470-471.(Лоран О.Б., Тюльпаков А.Н., Тузов Д.Ю., Серёгин А.А.)

2. Клиническое значение полиморфизмов генов 5а-редуктазы и андрогенорсцопторов при раке предстательной железы // Онкоурология. -2009. - №1. - С.48-53. (Лоран О.Б., Лукьянов И.В., Тузов Д.Ю., Тюльпаков А.Н)

3. Влияние полиморфизмов генов 5а-редуктазы и андрогенорсцопторов на риск развития рака предстательной железы // Тезисы в материалах Российской научной конференции «Фундаментальные исследования в уронефрлопш». - Саратов. - 2009. - С.424-425. (Лоран О.Б., Тузов ДЛО, Серегин А.А)

Список сокращений

AR - ген андрогенового рецептора

CAG - полиморфизм гена андрогенового рецептора

SRD5A2 - ген 5а-редуктазы

А49Т - полиморфизм гена 5а-рсдуктазы

V89L - полиморфизм гена 5а-редуктазы

КТ - компьютерная томография

МАБ - максимальная андрогенная болквда

МРТ - магнитно-резонансная томография

ПРИ- пальцевое ректальное исследование

ПСА- простатический специфический антиген

РПЖ - рак предстательной железы

РГЮ - радикальная простапктомия

ТРУЗИ- траиерект;шыюс ультразвуковое исследование

24

Изд. ЛИЦ. № 05322 от 09.07.2001 Сдано а набор 17.03.10. Формат 60x90 /1 б Бумага офсезнан № 1. Гарнитура «Times». Объем 1,2 печ. л. Тираж 100 экз. Заказ № 172

Отпечатано » издательстве «Готика» Тел.: (495) 268-53-73 c-mail:(.'.otika@rambler.ru

10-15698

2009061283

2009061283

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ

Рак предстательной железы - одно из самых распространенных заболеваний в мире. В структуре онкологических заболеваний в ряде стран рак предстательной железы выходит на 2-3 место после рака легких и желудка, а в США - на первое место. Ежегодно в мире выявляется до 400 тыс. случаев рака предстательной железы. Летальность в первый год жизни после верификации диагноза составляет около 30%, что говорит, о низкой выявляемости заболевания на начальных его стадиях и поздней обращаемости пациента [3].

На основании современных данных об эпидемиологии рака простаты предполагалось, что в 2003 г. в США будет диагностировано 223 000 новых случаев рака предстательной железы, а 28 590 больных погибнут вследствие данного заболевания. В действительности же диагноз «рак простаты» был установлен у 230 110 пациентов, а в 29 900 случаях был констатирован летальный исход [7].

В настоящее время заболеваемость РПЖ неуклонно растет, в России на 2005 год она составила 17,8 на 100 тыс. мужского населения [5].

Выявление болезни на ранних стадиях является первоочередной задачей клиницистов. Широкое внедрение в повседневную практику определения простатического специфического антигена (ПСА) в сочетании с трансректальной мультифокальной биопсией предстательной железы под ультразвуковым наведением позволило выявлять большее количество заболеваний на ранних стадиях, когда применимо радикальное лечение [4].

Однако уровень простатического специфического антигена, может увеличиваться в силу ряда причин, тем самым в некоторых случаях приводя к диагностике клинически не значимых форм рака предстательной железы.

Таким образом, важны не только своевременное выявление заболевания, но и возможность, прогнозировать дальнейшее его течение, выявление потенциально агрессивных его форм.

Быстрые темпы роста заболевания заставляют более углубленно изучать молекулярно-генетические аспекты рака предстательной железы. Молекулярной онкологии отведена важная роль в понимании механизмов, лежащих в основе развития и прогрессирования рака предстательной железы.

Развитие доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ) и злокачественный рост рака предстательной железы неразрывно связаны с влиянием андрогенов на внутриклеточные процессы клеток предстательной железы.

Поиск генетических маркеров часто основывается на свойствах гена и путях метаболизма его белковой продукции. Таким образом, гены, вовлеченные в каскад биосинтеза и метаболизма андрогенов, можно выделить как вероятные факторы прогноза рака простаты. Основными являются ген андрогенового рецептора (АК), кодирующий рецепторы к андрогенам, а также ген 5а-редуктазы (81Ю5А2\ кодирующий фермент 5-а редуктазу, который преобразует тестостерон в гораздо более активный внутриклеточный дегидротестостерон. По данным ряда исследователей, полиморфизмы выше перечисленных генов могут оказывать влияние на канцерогенез [30,113,55,79], однако результаты проведенных исследований весьма противоречивы.

Одновременное существование в популяции нескольких аллельных вариантов какого-либо гена называется полиморфизмом. Судить о наличии в популяции полиморфизма можно по различию в фенотипах, соответствующих разным аллелям, либо по характеру ДНК, несущей разные аллели.

Полиморфизм на уровне фенотипа объясняется одновременным существованием в одной популяции как аллеля дикого типа, так и серии мутантных аллелей. Мутации изменяют продукт гена, как следствие этого функции продукта гена оказываются измененными. Это может приводить к изменению фенотипа. Наибольший интерес представляют внутригенные изменения.

Учитывая вышеизложенное, проведение дальнейших исследований по изучению молекулярно-биологических факторов прогноза течения и прогрессии рака предстательной железы представляется нам актуальным. В настоящей работе приведены результаты анализа распределения полиморфизмов А49Т и У89Ь гена 8Я05А2, а так же полиморфизм С АО гена андрогенового рецептора у пациентов, страдающих РПЖ, и оценка их прогностической значимости.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Определить клиническое и прогностическое значение полиморфизмов генов 8Я05А2 и АЯ при раке предстательной железы.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Проанализировать распределение полиморфизма А49Т гена 8ВЛ5А2 при раке предстательной железы в зависимости от стадии заболевания.

2. Определить особенности аллельного распределения полиморфизма У89Ь гена 8ЯВ5А2 при раке предстательной железы, а так же в зависимости от стадии заболевания.

3. Изучить влияние аллельного распределения полиморфизмов гена АЯ при раке предстательной железы в зависимости от стадии заболевания, оценить риск развития рака предстательной железы.

4. Оценить распространенность носительства сочетания полиморфизмов генов 81Ю5А2 и АЯ, у пациентов РПЖ в зависимости от стадии заболевания. Оценить риск развития РПЖ у пациентов с данным сочетанием.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

В клинических условиях, на кафедре урологии Российской Медицинской Академии Последипломного Образования на базе ГКБ им. С.П. Боткина совместно с отделением наследственных эндокринопатий и лабораторией молекулярной диагностики Эндокринологического научного центра Росмедтехнологий, проведена оценка распределения полиморфизмов А49Т и У891 гена 5-а редуктазы при раке предстательной железы. Выявлены различия изучаемых факторов при локализованном и метастатическом раке предстательной железы. Проведен анализ распределения полиморфизмов гена андрогенового рецептора при раке предстательной железы, а так же в зависимости от стадии заболевания.

Выявлена закономерность распределения полимофизма САО<20 гена АЯ у пациентов страдающих РПЖ и группы контроля.

Определена частота носительства сочетания гомозиготной аллели У¥, гена 5-а редуктазы и полиморфизма САО<20 гена андрогенового рецептора у пациентов страдающих раком предстательной железы.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ

В клинических условиях на кафедре урологии Российской Медицинской Академии Последипломного Образования на базе ГКБ им. С.П. Боткина совместно с отделением наследственных эндокринопатий и лабораторией молекулярной диагностики Эндокринологического научного центра Росмедтехнологий, впервые оценена практическая значимость распределения полиморфизмов гена 5-а редуктазы и гена андрогенового рецептора.

Полученные данные о носительстве полиморфизма У89Ь гена 81Ю5А2 и полиморфизма САО<20 гена андрогенового рецептора, а так же их сочетания, позволяют использовать их при ранней диагностике РПЖ и планировании тактики лечения пациентов.

АПРОБАЦИЯ ДИССЕРТАЦИИ

Апробация работы состоялась 24 октября 2008 г. на заседании кафедры урологии и хирургической андрологии ГОУ ДПО «РМАПО Росздрава».

Результаты диссертационного исследования доложены в докладах:

- на конкурсе молодых ученых Московского общества урологов, где работа была признана победителем (23 декабря 2008г.), г. Москва

- совместной научной конференции урологической клиники и кафедры урологии ФУВ МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского от 15.07.2009.

ПУБЛИКАЦИИ

По теме диссертации опубликованы 3 научных работы, одна из которых в центральной печати.

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТРАЦИИ

выводы

1. Распределение полиморфизма А49Т гена 81Ю5А2 не отличаются при раке простаты и в группе контроля. Носительство данного полиморфизма не ассоциируется с риском развития РПЖ.

2. При РПЖ гомозиготный вариант УУ гена БЯ05А2 встречается чаще чем в группе контроля (РПЖ-83% уб Контроль-44%). У пациентов носителей генотипа УУ риск развития метастатического рака предстательной железы в 1,7 раза выше, ДИ [1,3-2], чем у носителей аллели УЬ.

3. Носительство полиморфизма САО<20 гена АК выявляется во всех группах пациентов с РПЖ и повышает риск развития метастатического рака простаты в 3 раза.

4. Сочетание носительства полиморфизмов УУ+САС<20 генов 81Ю5А2 и АЯ встречаются у пациентов страдающих РПЖ чаще, чем в группе контроля (РПЖ-33% Контроль-3%) и характерно для пациентов с генерализованной формой РПЖ. При данном сочетании риск развития метастатической формы рака предстательной железы возрастает в 4,7 раза [ДИ 2-8,2].

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. При обследовании больных с симптомами нижних мочевых путей наряду с определением уровня простат специфического антигена, целесообразно выявлять носительство гомозиготного полиморфизма ¥89Ь гена 8ЯВ5А2, который является врожденным предиктором в выявлении генерализованной формы рака предстательной железы.

2, Пациентам с верифицированным раком предстательной железы необходимо определение полиморфизма САО<20 гена ЛЯ, частота которого увеличивается в зависимости от стадии заболевания и служит прогностическим фактором в диагностике агрессивных форм рака простаты.

3. При подозрении на генерализацию процесса у пациентов страдающих раком предстательной железы наряду с общепринятыми методами исследования целесообразно определять сочетание гомозиготного полиморфизма ¥89Ь гена 8ЯВ5А2 и полиморфизма САО<20 гена А Я, указывающие на развитие метастатической формы рака предстательной железы.