Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Генетическая регуляция иммунного статуса как механизма связи HLA с заболеваниями

РГ6 од - 1 ЯНВ 1996

На правах рукописи

ЯЗДОВСКИЙ Виктор Владимирович

ГЕНЕТИЧЕСКАЯ РЕГУЛЯЦИЯ ИММУННОГО СТАТУСА КАК МЕХАНИЗМ СВЯЗИ НЬЛ С ЗАБОЛЕВАНИЯМИ

14.00.36 - Аллергология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

МОСКВА - 1995 г.

Работа выполнена в Институте иммунологии Минздравмедпрома РФ

Научный консультант доктор медицинских наук, профессор Л.П.Алексеев

Официальные оппоненты

доктор медицинских наук, профессор А.А.Польнер,' доктор медицинских наук, профессор ЕЛ.Насонов, доктор медицинских наук, профессор М.Ш.Вербицкий

Ведущая организация - Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова РАМН

Защита состоится 24 января 1996 года в 14 часов на заседании диссертационного совета Д 074.09.01 при Институте иммунологии Минздраомедпрома РФ по адресу: 115478 г.Москва, Каширское шоссе, д.24, корп.2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института иммунологии Минздраомедпрома РФ

Автореферат разослан "_"_1995 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук

Л.С.Сеславнна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Наибольшие успехи в изучении генетических основ предрасположенности к ряду заболеваний, главным образом аутоиммунной природы, принесло исследование их связи с антигенами системы HLA. Полученные данные, приобрели при некоторых заболеваниях практическое значение в плане диагностики, прогноза течения, дали представление об их неоднородности и способах наследования.

Важной проблемой современной иммунологии и медицины является раскрытие механизмов, объясняют! . связь заболеваний с системой HLA. Установление этих механизмов будет не только способствовать выяснению причин возникновения патологий, но иметь прикладное значение для целенаправленной профилактики и патогенетической' терапии болезней CBodmer W.F.,1989; McDevltt Н.,1991]. В последнее десятилетие доминирующим направлением в исследовании механизмов связи HLA с заболеваниям! является поиск генов специфического иммунного ответа (1г-генов) на патогенетически значимый антиген путем более тонкой идентификации HLA-аллелей класса II, ассоциированных с заболеванием, методами ДНК-типирования и анализом рестрикции иммунного ответа. В основе этого направления лежит представление, что определенный HLA-аллель, детерминирующий ответ на юэнкретный антигенный пептид, и является геном восприимчивости к болезни tNIshlmura Y.et al.,1992].'. Селективная природа пеп^ид-свявывахсей Функции HLA-молекул гарантирует, что молекулярные продукты только определенных аллелей способны презентировать конкретный патогенный пептид [George А.et al.,1995].

Основанный на представлении о фундаментальной роли системы HLA в генетическом контроле, специфического иммунного ответа, этот подход, однако, не объясняет вачшые особенности ассоциаций HLA с заболеваниями и вовлеченные в них механизмы [Bach J.,1995; Bodmer W.F., 1992; George A.et al.,1995]. Так, концепцией Ir-генов в качестве генов восприимчивости к заболеваниям трудно объяснить связь одного и того же заболевания с разными аллелями в разных популяциях; ассоциации многих аутоиммунных болезней с одними и теми же аллелями, входящими в гаплотип B8-DR3 у европеоидов или его эквиваленты в других популяциях. В то же время абсолютное ' большинство HLA-маркеров заболеваний с иммунными нарушениями входят в HLA-гаплотипы, характерные для конкретной популяции, сложившиеся как приспособительная черта в результате естественной селекции.

Основываясь на наличии связи с HLA-гаплотипом • B8-DR3 нес-

- г -

кольких аутоиммунных заболеваний,' в патогенезе которых участвуют аутоантитела разной органной специфичности, J.Dausset и Ь.СопЬу в 1980 высказали предположение о "существовании, помимо специфического Iг-генного контроля, неспецифкческого контроля повышенной иммунореактивности,. сделанного с НЬА-гаплотипом В8-Ш?3", что дает основу для формирования специфического иммунного ответа.

Эта гипотеза получила -поддержку данными, .указывающими на связь ША- антигена 01?3 с повышенной спонтанной продукцией иммуноглобулинов, сниженной функцией Т-супрессоров [АтМпс1ег Л. еЬ а1., 1982], сниженной скоростью деградации антигена макрофагами у здоровых лиц СЬеггалс! Ь.еЬ а1. ,1982]. Эти ранние работы, а также более поздние (указывающие на связь в основном антигенов В8/Ш?3 с некоторыми иммунологическими параметрами) проведены в популяциях только европеоидов, носят характер отдельных находок разных авт^. -ров, иногда противоречивых, и не содержат систематизированного иммуногенетического анализа.

Собственный анализ данных по проблеме "НЬА и болезни" позволил сделать более общее предположение о возможном наличии НЬА-сцепленного генетического контроля (регуляции) иммунного статуса человека, определяющего связь заболеваний с системой НЬА. ато предположение легло в основу представленного в данной работе направления исследований механизма связи ША с заболеваниями.

Б ш данное предположение верно, то.мы должны наблюдать следующее:

1) Сам факт наличия связи НЬА с иммунологическими параметрами в разных популяциях.

2) Межпопуляционные различия в этих связях, обусловленные различиями НЬА-генетического профиля популяций.

3) Антиген-неспецифичность маркируемого НЬА-аллелями признака, выявляемого при анализе свяви НЬА с болезнями.

4) Сходство маркеров болезни и маркеров патогенетически важных особенностей иммунного статуса.

Исследование генетического контроля иммунного статуса, а также его роли в качестве 'механизма связи НЬА с заболеваниями имеет принципиальное значение. Перспективность денного направления определяется тем, что его разработка поможет исследовать НО7 вый уровень генетической регуляции функций иммунитета, углубить наши представления о биологической роли НЬА, принесет новые данные о генетических механизмах предрасположенности и патогенеза заболеваний с иммунными нарушениями, откроет новые возможнисти

для более точного индивидуального прогноза предрасположенности к заОолеаАниям или донозологической диагностики [Петров Р.В. и др. 1994, 1995] , профилактики и терапевтического воздействия.

Вышесказанное определило цель и задачи исследования.

Цель работы: изучение генетического контроля иммунного статуса и его роли в качестве механизма связи НЬА с заболеваниями.

Задачи исследования:

1. Изучить НЬА-генетический проф.ль популяций, заведомо различающихся по своим зтногенетическим признакам и проживающих в разных климато-географических условиях, - русской, г^уЛшской, узбекской,.корейской и бурятской. Исследовать в указанных популяциях параметры иммунного статуса, их свявь с ША-антигенами.

2. Провести исследование связи НЬА-антигенов с аллергическими заболеваниями: поллинозом, атопической бронхиальной астмой и аллергическим контактным дерматозом от воздействия антибиотиков. Детализировать маркируемые НЬА особенности заболеваний. Исследовать иммунологические параметры (ИП) у больных с атопией и их связь с НЬА-фенотипом.

3. Провести исследование и детальный анализ связи НЬА-маркеров поллиноза с широким спектром иммунологических параметров у здоровых лиц и больных поллинозом в разные фазы болезни.

Научная новизна заключается в создании нового перспективного научного направления в иммунологии - доказательство существования и характеристика НЬА- цепленного генетического контроля (регуляции) иммунного статуса человека, выступающего в качестве механизма связи НЬА с заболеваниями.

Установлена и охарактеризована связь широкого спектра ИП с НЬА-фенотипом здоровых представителей русской, узбекской, корейской и бурятской'национальностей.

Выявлены межпопуляционные различия в связях НЬА с ИП, обус-I ловленные различиями НЬА-генетического профиля популяций, центральными из которых являются свойственные им Ю-гаплотипы с выраженным позитивным неравновесным сцеплением между аллелями. В абсолютном большинстве случаев НЬА-маркерами ИП служат ни-алле-ли, входящие в эти гаплотипы, что является отражением эволюционно . сложившихся популяционных особенностей генетического контроля функций иммунитета.

Впервые установлено на примере аллергических заболеваний общее свойство связи Н1...А с заболеваниями - антиген (аллерген)-неспецифичность маркируемого. НЬА-аллелями признака - предрасположен-

ность к поливалентной сенсибиливации. Выявлены HLA-маркеры предрасположенности к полисенсибилизации пыльцевыми аллергенами при поллиноае у взрослых и детей в русской популяцииЧВ7 и DR2) и у детей в грузинской популяции (В7), а также - к широкому спектру экзоаллергенов неинфекцг.онного происхождения у. детей в русской (В12) и грузинской популяциях (В12 и DR5). Характерные для популяций HLA-маркеры атопических заболеваний одновременно служат маркерами патогенетически важных параметров иммунного статуса больных.

Показано, что с HLA не связаны клинические формы атопических заболеваний. В сцеплении с HLA наследуется предрасположенность к развитию гиперчувствительности к разнообразным аллергенам, которая может иметь различную клиническую манифэстацию.

Выявлены HLA-маркеры высокой степени предрасположенности (DR4 и В13) и устойчивости (DQ1 и В12) к возникновению аллергических контактных дерматозов от воздействия антибиотиков при их производстве.

Впервые выявлен ряд патогенетически важных особенностей иммунного статуса, . свойственных больным поллинозом в ремиссии и в обострении. В их числе: особенности экспрессии HLA-антигенов I и II классов и CD-антигенов на иммунокомпетентных клетках, продукции цитокинов, содержание регуляторных и эффекторных субпопуляц11Й Лф,' особенности ответа Лф на митогенные стимулы при разных условиях культивирования.

Впервые выявлена связь HLA-маркеров поллиноза В7 и DR2 с рядом патогенетически важных параметров иммунного статуса у здоровых н больных поллинозом в разных фазах болезни, свидетельствующая об участии в патогенезе ваболевашя HLA-сцеленного генетического контроля иммунного статуса, обуславливающего ассоциации данных маркеров с заболеванием.

Научно-практическое значение. Установлено наличие принципиально нового вида генетической регуляции функций иммунной системы - HLA-сцепленного генетического контроля иммунного статуса, измеряемого по параметрам, неспецифичным в отношении какого-либо антигена. .

Установлена роль HLA-сцепленного генетического контроля иммунного статуса в качестве механизма связи HLA с заболеваниями, выступающего в качестве фактора предрасположенности у здоровых лиц, а также фактора, управляющего ее реализацией в патогенезе заболеваний. Подученные данные углубляют представление о биологи-

- Б -

ческом значении системы НШ, подчеркивая ее роль в качестве центрального генетического аппарата функционирования иммунной системы [Петров Р.В., 1987],

Показано, что НЬ'-антигены могут служить маркерами особенностей иммунного статуса, количественного или функционального дисбаланса иммунной системы, способствующих или препятствующих развитию ответа на специфическое антигенное воздействие; маркерами, позволяющими прогнозировать индивидуальные черты иммунореак-тивности человека, возможные пути ее нарушений, приводящих к патологии. Установлены конкретные НЬА-маркеры ИП, свойств :шые обследованным- популяциям.

Детально исследованный НЬА-генетический профиль русской,- узбекской, корейской, бурятской и грузинских популяций может служить основой для изучения характерных для них связей НЬА с заболеваниями, а также использоваться в популяционно-генетических исследованиях для иэучения их происхождения и эволюции.

Выявленные НЬА-маркеры предрасположенности к атопическим заболеваниям: поллннозу, атопической бронхиальной азтые у взрослых и детей, могут использоваться в популяционном и индивидуальном прогнозах заболеваний, особенно в условиях высокого экологического риска, указывая на круг лиц, подверженных заболеванию, на склонность к более раннему и тяжелому течению болевней, расширению спектра аллергенов у больных, помогая в решении вопросов профилактики и выбора тактики лечения.

НЬА-маркеры высокой предрасположенности и- устойчивости к возникновению профессиональной патологии - аллергических контактных дерматозов от воздействия антибиотиков, у лиц, занятых в их производстве, могут служить одним критериев профессионального отбора.

Впервые проведенное исследование ряда ИП у больных доллино-зом в ф-'зах ремиссии и обострения заболевания вносит новые сведения об иммунологических звеньях патогенеза заболевания.

Установление сцепленных с НЬА-маркерами поллиноэа особенностей иммунного статуса у здоровых лиц и больных дает более тонкий инструмент для индивидуального прогноза предрасположенности и характера течения заболевания.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Сцепленный с системой НЬА генетический контроль иммунного статуса выступает в качестве механизма связи НЬА с заболеваниями.

2. Маркерами особенностей иммунного статуса являются НЬА-ал-

дели, входящие в гаплотипы, характерные для конкретной популяции, что свидетельствует об эволюционно сложившихся чертах генетического контроля функции иммунитета в популяции.

• 3. Каждая популяция имеет свой 'никальный набор НЬА-маркеров, характеризующих уровни одних и тех же параметров иммунного статуса.

4. На примере поллинова доказано, что сцепленный с НЬА-марке-рами заболевания генетический контроль особенностей иммунного статуса играет существенную роль не только как фактор предрасположенности у здоровых лиц, но и как фактор управляющий ее реализацией в патогенезе заболевания.

Апробация работы. Результаты исследований были представлены на Всесоюзной конференции "Современные методы иммунотерапии" (Ташкент, 1984), Всесоюзном симпозиуме с международным участием "Иммучодефициты и аллергия" (Москва, 1986), Всесоюзной конференции "Методология, организация и итоги массовых иммунологических обследований" (Ангарск, 1987), V Съезде Всесоюзного общества генетиков и селекционеров им. Н.И.Вавилова (Москва, 1987), I Всесоюзном симпозиуме "Иммуногенетические аспекты аутоиммунных заболеваний и вторичных иммунодефицитов человека" (Новосибирск, 1989), Конференции с международным участием "НЬА и иммунное распознавание" (Ташкент, 1989), I Всесоюзном иммунологическом съезде (Сочи, 1989), 7 Международном конгрессе по иммунологии (Западный Берлин, 1989), 10-й Конференции Европейской федерации иммунологических обществ (Эдинбург, 1990), Международном симпозиуме по аллергологии и клинической иммунологии "Регуляция и клиническое значение 1дЕ" (Москва, 1990), Международном симпозиуме "НЬА и аутоиммунные заболевания" (Страсбург, 1991), Всемирном конгрессе патофизиологов (Москва, 1991), XIV Международном конгрессе по-аллер--гологии и клинической иммунологии (Кийото, 1991), 11-м Международном Воркшопе и конференции по гистосовместимости (Йокогаыа, 1991), I Съезде иммунологов России (Новосибирск, 1992), 8-м Международном конгрессе по иммунологии (Будапешт, 1992), заседании Московского научно-практического общества аллергологов и клинических иммунологов (москва, 1993), Всероссийском семинаре "Оценка иммунного статуса, иммунологический мониторинг - современные проблемы клинической иммунологии и аллергологии" (Москва, 1994)

Апробация диссертации проведена на межлабораторной научной конференции Института иммунологии МЗ и МП РФ (23 октября 1995г.).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 58 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на íM страницах машинописи, состоит иэ введения, обзора литературы, 15 глав собствегшх исследований, обсуждения и выводов. Содержит 91 таблицу и 10 рисунков. Список литературы включает 501 работу отечественных и зарубежных авторов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТА

Материалы и методы исследований. Проведены популяционные и семейные иммуногенетические и иммунологические исследования у представителей различных популяций России и стран СНГ. Всего обследовано 2902 человека.

Для изучения иммуногенетическоЯ характеристики популяций обследованы 1807 здоровых лиц различных национальностей: русские в г.Москве (150), ■ узбеки в Самаркандской области Узбекистана (128), корейцы в Ташкентской области Узбекистана (210), буряты в Тункинской долине (с.Кырен) на вападе Бурятии (72), грузины в различных регионах Грузии (1247), в том числе картлийцы (117), кахетинцы (8Q), имеретины (162), мегрелы (100), аджарцы (92), ра-чинцы (94) и представители общей грузинской популяции при сплошной выборке (602).

Связь HLA-антигенов с заболеваниями и с параметрами иммунного статуса исследована у 1095 человек. В русской популяции обследовано 416 взрослых б льных поллинозом (и аллергией к домашней пыли - 32) и их здоровых родственников, вошедших в семейные исследования (33 семьи). Контрольная группа 267 человек. Дополнительную группу составили больные поллинозом (64), обследованные в ремиссии и в обострении заболевания, у которых более детально изучены параметры иммунного статуса и их связь с HLA-маркерами заболевания. В русской популяции также обследованы дети с атопи-ческими заболеваниями (108), больные с аллергическими контактными дерматозами от воздействия антибиотиков (58) и резистентные к данному заболеванию (60). Обследованные больные являлись пациентами отделения общей аллергии Института иммунологии МЗМП РФ, ал-ле'ргологических отделений 52-й городской клинической больницы. г.Москвы и НИИ педиатрии АМН РФ или состояли на учете в Краснодарском краевом аллергоцентре и в кожнс венерологическом диспансере Красногвардейского района г.Москвы.

• В грузинской популяции обследованы взрослые больные системной красной волчанкой (38), находящиеся под диспансерным наблюде-

нием в Республиканском ревматологическом центре г.Тбилиси, и дети, больные атопической бронхиальной астмой (84), пациенты аллер-гологического отделения НИИ педиатрии МЗ Грузии г.Тбилиси.

• Отбор больных проводился на осчовании тщательного клинического, лабораторного, и ал, эргологического обследования.

HLA-типирование проводили в стандартном микролимфоцитотокси-ческом тесте (DR и DQ-типирование - в удлиненном тесте). Иммунный статус оценивали по широкому спектру ИП. Всего в работе исследовано 108 базовых параметров.

Комплекс стандартных тестов 1-го уровня исследовали в соответствии с рекомендациями, разработанными ь Институте иммунологии МЗМП РФ. Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) определяли методом осаждения в ЗХ и 4£ полиэтиленгликоле (ЛЭГЗ и ПЭГ4) с молекулярной массой 6000 Д. Для измерения уровня IgE в сыворотке и -пользовали стандартные наборы Phadebas IgE PRIST ("Pharmacia Diagnostica AB", Швеция). Для определения функциональной активности КонА-индуцированных Т-супрессоров (Т-супр) использовали модифицированный метод L.Shou и соавт.[1976]. Функциональную активность естественных киллеров (NK-клеток) оценивали по их мембранотокси-ческому действию на клетки-мишени К-562, меченые 3Н-урадином.

Методом хемилюминисценции (ХЛ) изучали активность кислородного метаболиэма в нейтрофилах крови: спонтанного, индуцированного при адгезии клеток на стекло (ХЛадг) и при фагоцитоае опсони-зированного аимозана (ХЛфаг).. Исследовали хемотаксис (ХТ) нейтро-филов: спонтанную* миграцию и хемотаксическую активность нейтрофи-лов под действием хемоаттрактанта методом миграции под агарозой.

Постановку реакции Оластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ) выполняли в 2-х вариантах: с использованием культур выделенных на градиенте плотн зти фиколла-верографина мононуклеарных' -клеток (МК) периферической крови и культур цельной крови (ЦК). Для стимуляции использовали лектины: фитогемагглютинкн (ФГА), кокканава-лин А (КонА), митоген лаконоса (PWM) в разных дозах: низкой (н). субоптимальной (суб), оптимальной (опт), высокой (в) и монокло-нальные антитела (МКАТ) анти-СОЗ (ОКТЗ. "Ortho Pharmaceutical Corp.") .в растворимой форме (анти-СйЗр) и в Фиксированной на пластике культуральных планшет (анти-СПпл).

Продукцию интерлейкина (ИЛ)-1, ИЛ-2 и фактора некроза опухолей альфа (ФНО-а) исследовали в системе ex vivo, т.е. в суперна-таь ах культур. ЦК. Продукцию гамма-интерферона (ílvH-r) в системе in vitro, в супернатантах культур МК. Для стимуляции проду.адаи

ИЛ-1 и ФНО-а (24 часа) испольвовали липополисахарид (ЛПС) E.coli 011:В4 ("Sigma"), для стимуляции продукции Ш-2 (48 часов) и г-ИФН (72 часа) - ФГА-S ("Serva"). Содержание ИЛ-i в супернатан-тах определяли в традиционном комитогенном биотесте, содержание ИЛ-2 - в тесте пролиферации линии CTLL-2. Результаты оценивали методом пробит-анализа. Концентрацию ФНО-а в суиернатантах культур измеряли с помощью высокочувствительной тест-системы твердофазного иммуноферментного анализа (НИИ гематологии и переливания крови МЗ Белоруссии), содержание "-ИФН - в радиоиммуноло,гическом тесте ("Centocor", США).

Для измерения продукции IgE in vitro (7 суток культивирования МК в присутствии или без анти-ОТЗр МКАТ) использовали высокочувствительную иммуноферментную тест-систем (НПО "Биотехнология"). Содержание IgE в клетках определяли после их разрушения методом кислотного гидролиза, при рН 2,5.

Содержание популяций иммунокомпетентных клеток и экспрессию тканевых антигенов, включая молекулы HLA, определяли с помощью МКАТ методами прямой и непрямой, одноцветной и двухцветной имму-нофлюоресценкии. Помимо МКАТ, использовали биотинилированный лек-тин Vicia Villosa (W). Измерения проводили на лазерных проточных цитометрах EPICS-C ("Coultronics", Франция) и FACScan ("Вес-ton-Dickinson", США). Для количественной оценки субпопуляций лимфоцитов (Лф) с- помощью МКАТ в экспедиционных условиях использовали также микролимфоцитотоксический тест.

Методы генетического и статистического анализа. Частоты ге-пов, гаплотипов (Н) и величины неравновесного сцепления (D) вычисляли по формулам, предложенным P.Mattiuz и соавтЛ1970]. Достоверность величины D определяли по точному двустороннему тесту Фишера для четырехпольных таблиц. Статистическую оценку ассоциации HLA-антигенов с заболеваниями проводили по показателям относительного (RR) и атрибутивного (5) рисков. Величину RR вычисляли по формулам B.Woolf и J.Haldane. Достоверность ассоциации (Р) определяли по критерию х2 для альтернативных признаков поправкой на непрерывность выборки и по точному двустороннему тесту Фишера для четырехпольных таблиц. Коррекцию Р (Рс) проводили путем умножения величины Р на число исследованных HLA-антигенов. Силу ассоциации или атрибутивный риск вычисляли по формуле B.Bengtsson, G.Thomson [1981].

Для выявления HI А-генотипов и HLA-гаплотипоп при семейном анализе использовали метод дедукции на основании данных типирова-

ния всех членов семей. Для изучения сцепления генов предрасположенности к поллиноэу с HLA-гаплотипами использовали метод R.De Vries и соавт.[1976]. Для определения способа наследования HLA-ассоциированного гена предраспс :оженности к заболеванию применяли метод Q.Thomson, W.Bodmer [1977].

В остальном статистическая обработка полученных данных 'Включала традиционные методы. Достоверность различия количественных показателей определяли с помощью критерия t Сгыодента.

Расчеты проводили на персональном компьютере с.использованием пакетов программ "Statgraph". "BMDP" и собственных программ генетического и статистического анализа, созданных в отделе имму-ногенетики Института иммунологии МЗМП РФ.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Иммуногенетическая характеристика различных популяций

Результаты исследований, проведенных в русской популяции, позволили выявить основные черты ее иммуногенетического профиля. По характеру распределения HLA-антигенов, генов, гаплотипов, особенностям неравновесного сцепления между аллелями, составляющими гаплотипы обследованная популяция сходна с другими популяциями, относящимися к европеоидной (кавказоидной) расе по среднемировым данным. В результате исследования уровней широкого ряда параметров иммунного статуса в зависимости от HLA-фенотипа обследованных лиц обнаружена взаимосвязь между ИП и антигенами системы HLA (табл 1). Такая взаимосвязь свидетельствует о наличии HLA-генетической регуляции иммунного статуса, регуляции как количественного состава иммунокомпетентных клеток, так и их функциональных особенностей.

С антигенами системы HLA в русской популяции связано большинство (76Z) исследованных параметров: количество NK-клеток (CD57+), В-Лф, 7-Лф и субпопуляций последних, функциональная активность КонА-индуцированных Т-супрессоров, NK-клеток, Т-Лф н нейтрофилов, продукция ИЛ-2 мононуклеарачи крови, содержание в сыворотке IgM и иммунных комплексов. Поскольку повышенные или сниженные уровни исследованных параметров связаны с наличием конкретных HLA-антигенов в фенотипе здоровых лиц, данные HLA-ан-тигены могут служить маркерами особенностей иммунного статуса, количественного или функционального дисбаланса иммунной системы, способствующих или препятствующих развитию иммунного отвеаа на

Связь HLA-антигенов с параметрами иммунного статуса в русской популяции

HLA-антиген Параметры и их уровни, связанные с HLA-антигенами

А9 РБТЛ-КонА J

В5 IgM t; РБТЛ-КонА h XT |

В7 ИЛ-2 t

B7.DR2 ' РБТЛ-сп J; РБТЛ-КонА J

В8 CD2 f; РБТЛ-ФГА h J; РБТЛ-ФГА опт f; РБТЛ-КонА t;

NK t; XT t

В12 РБТЛ-КонА 1; Т-супр J; ХЛадг ХЛфаг J

В18 CD20 i

В27 E-POK t; Е-РОК-ТФрез J; Фаг J; NK j

В35 CD4/8 XT J

DR2 ЦИК t; РБТЛ-ФГА суб t '

DR3 CD8 |

DR4 ИЛ-k; J

DR5 РБТЛ-ФГА н \

DR7 CD20 |

DQ1 CD4 I

DQ2 CD57 f. CD20 РБТЛ-ФГА опт t

DQ3 ИЛ-2 }

J - сниженный или t - повышенный уровень параметра; ХЛ - хемилюминисценция, XT- хемотаксический индекс;

антигенное воздействие, маркерами, позволяющими прогнозировать индивидуальные черты иммунореактивности человека, возможные пути ее нарушений, приводящих к патологии.

Многообразие выявленных связей HLA-антигенов с ИП (всего 35), а также цель работы, состоящая в выявлении общих закономерностей. указывающих на наличие HLA-сцепленного генетического контроля иммунного статуса, не позволяют подробно останавливаться

на обсуждении конкретных случаев обнаруженных взаимосвязей. Этой цели посвящен отдельный раздел работы на конкретном примере ИП, связанных с HLA-B7 и DR2. Однако и здесь можно упомянуть, что представление об HLA-антигенах В8 и DR3 как маркерах устойчивости против бактерийных и вирусных инфекций поддерживается выявленными связями антигенов В8 с повышенной активностью NK-клеток и повышенной хемотаксической активностью нейтрофилов крови, а антигена DR3 со сниженным содержанием супрессорных клеток (СБ8+Лф). Патогенетически вначимыми для развития анкилозирующего спондилита, в котором участвуют инфекционные антигены, чоеавычайно сильно ассоциированного с НLA-маркером В27, являются взаимосвязи фенотипа В27 у здоровых лиц со сниженной функцией фагоцитов и сниженной мембранотоксической активностью натуральных киллеров.

С определенными уровнями исследованных параметров связаны не все тестированные HLA-антигены, а только меньшая часть из них (24Х). Частота встречаемости в популяции конкретного HLA-антигена не является определяющей для обнаружения самого факта связи с ИП, т.к. не выявлено корреляции между частотой встречаемости в русской популяции HLA-антигенов и количеством ИП, связанных с каждым

И8 НИЕ

Имеется 2 особенности HLA-антигенов, связанных с ИП. Во-первых, именно с этими антигенами в русской и других европеоидных популяциях установлены ассоциации заболеваний, в основе которых лежат иммунные нарушения. Во-вторых, почти все они относятся к HLA-гаплотипам, характерным для обследованной популяции. HLA-антигены, относящиеся к данным гаплотипам, участвуют в Q7Z случаев (34 из 35) выявленных связей с ИП.

В подавляющем большинстве случаев (23 из 35, или 66%) среди зарегистрированных связей HLA-антигенов с ИП, в них участвуют HLA-антигены, входящие в 4 супратипа, характерные для русской (и для других европеоидных) популяций: B7-DR2-DQ1; B8-DR3-DQ2; B12-DR4-DQ3; B1P-DR7-DQ2. Самое большое число связей параметров иммунного статуса (16 из 23, или 70Z) установлено с HLA-антигенами, входящими в два первых, "классических" европеоидных гаплоти-па. Эти же HLA-антигены ассоциированы с наибольшим числом заболеваний иммунологической природы.

Указанное обстоятельство свидетельствует в пользу существования эволюционно сложившихся генетических взаимосвязей HLA-поли-морризма и особенностей иммунного статуса, свойственных данной популяции. Характерные для русской популяции HLA-контролируемые

особенности иммунного статуса, по-видимому, могут обеспечивать предрасположенность или вызывать устойчивость к возникновению заболеваний, в эснове которых лежат иммунные нарушения. В таком случае механизмом, объясняющим связь антигенов НЬА с заболеваниями, мажет служить сцепленный с системой НЬА генетический контроль иммунного статуса, выявляемый через отдельные ДО как норме, так и п^и патологии.

Установленная в русской популяции особенность связи Щ с ни, а именно, свявь с теми НЬА-антигенами, которые входят в состав НЬА-гашютипов, наиболее индивидуально характеризующих НЬА-генетическую структуру популяции, дает основание ожидать, что каждая этническая популяция, имеющая характерные для нее черты НЬА-генетического профиля, будет иметь свойственные ей особенности взаимосвязей НЬА-антигенов с ИП. Иммуногенетические исследования в узбекской, корейской и бурятской популяциях полностью подтвердили наши ожидания. Проведенные исследования показали не только высофгсо степень индивидуальности для каждой популяции взаимосвязей НЬА и ЮТ, но наличие тех же наиболее общих закономерностей, обнаруженных в русской популяции. Исследования, проведенные в узбекской, корейской и бурятской популяциях, выявили основные черты их иммуногенетического профиля.

НЬА-генетический профиль узбекской популяции имеет общие черты как с европеоидами, так и с монголоидами, с преобладанием европеоидного компонента. " Корейская популяция сходна с другими популяциями, относящимися к монголоидной расе. НЬА-генетический профиль бурятской популяции свидетельствует не только о преобладающем сходстве с другими монголоидными популяциями, но и о наличии в нем европеоидных черт. Важно подчеркнуть, что каждая из обследованных популяций имеет выраженные индивидуальные особенности, наиболее отчетливо проявляющиеся в характерных для них НЬА-гаплотипах с позитивным неравновесным сцеплением между аллелями, сложившихся как приспособительная черта в результате ее-тественной селекции.

Исследование параметров иммунного статуса у здоровых представителей популяций, проживающих в различных климато-географических условиях, выявило существенные особенности в сравнении со здоровыми русскими донорами, обследованными в Москве. Выявленные особенности ИП отражают норму функционирования отдельных компонентов иммунной системы, сложившуюся в результате адаптации к условиям существования. Так, у представителей узбекской популяции

- u -

Свявь HLA-антигенов с параметрами иммунного статуса в узбекской популяции

HLA-антиген Параметры и их уровни, связанные с Ни-антигенами

А1 РБТЛ-ФГА опт РБТЛ-КонА опт 1; Ж 1

А2 РБТЛ-ФГА опт РБТЛ-КонА опт 1

AQ РБТЛ-ФГА опт РБТЛ-КонА ор1* {

А10 РБТЛ-сп |

АН РБТЛ-КонА опт 1 ,

Вб 1гА ;

В7 РБТЛ-сп Т-супр |

В8 РБТЛ-сп 1; РБТЛ-ФГА опт РБТЛ-КонА опт ЫК |

В13 РБТЛ-ФГА опт I; 1дА |

В35 РБТЛ-ФГА суб И РБТЛ-КонА выс М 1дМ 1

В40 РБТЛ-сп |

\ - сниженный или f - повышенный уровень параметра.

Таблица 3

■Связь HLA-антигенов с параметра™ иммунного статуса в корейской популяции

HLA-антиген Параметры и их уровни, связанные с HLA-антигенами

А2 IgM t

А10 CD4/CD8 f

Вб CD2 J; CD4/CD8 {

В12 IgA- |

В15 CD2 f; CD4 Фаг |

В35 Фаг J

Cw3 Фаг J

| - сниженный или t - повышенный уровень.

Связь Н1А-антигенов с параметрами иммунного статуса в бурятской популяции

HLA-антиген Параметры и их уровни, связанные с HLA-антигенам..

А1 IBM t

А2 IgG \

А10 РБТЛ-ФГА опт J "

В5 Е-РОК-ТФ рез t; М-РОК |

В7 IgG 1

В12 Е-РОК Фаг 1

В15 Е-РОК Е-РОК-ТФ рез 1; IgM \

В16 РБТЛ-сп ИЛ-2 J

В40 Е-РОК t; Фаг t; IgM РБТЛ-сп \

Cwl Е-РОК-ТФ рез f. IgM t

Cw2 Е-РОК-ТФ рез | -

Cw3 Е-РОК t; IgM 1 •

DR1 РБТЛ-ФГА суб t

DR2 М-РОК РБТЛ-ФГА суб 1; РБТЛ-ФГА опт J

DR7 Фаг ИЛ-2 f

I - сниженный или f повышенный уровень параметра.

Самаркандской области и у представителей корейской популяции Ташкентской области обнаружены сходные наиболее общие черты иммунного статуса, проявляющиеся сниженными показателями клеточного и повышенными показателями гуморального звеньев иммунитета. По-видимому, указанное сходство общих черт иммунного статуса в популяциях, генетически различающихся, но проживающих в одинаковых кли-мато-географических условиях аридной воны, определяется внешнес-редовыми факторами. У бурят, проживающих в условиях резко-континентального климата, повышены показателе гуморального звена иммунитета.

Во всех обследованных популяциях обнаружена взаимосвязь ^ НЬА-антигенов с ИП (табл.2, 3, 4), свидетельствующая о наличии

Характеристика взаимосвязей ША-антигенов с иммунологическими параметрами (ИП) в разных популяциях

Характеристика Русские Узбеки Корейцы Буряты

1. Количество ИП, связанных с Н1-А-антигенами, среди всех исследованных ИП. 76% 77% ■ 60% 91%

2. Количество ША-антигенов, связанных с ИП, среди всех тестированных НЬА-антигенов. 24% 46% 17% 25%

3. Доля связей НЬА-антигенов с ИП,приходящаяся на антигены, относящиеся к свойственным популяции НЬА-гаплотипам. 977. 02% 100% 96%

4. Коэффициент корреляции между частотой НЬА-антигена в популяции и количеством ИП, связанным с ним. -0,37 р>0,05 0,01 р>0,05 -0,24 р>0,05 0,23 р>0,05

НЬА-г нетической регуляции иммунного статуса здосхэвых лиц узбекской, корейской и бурятской национальностей. С антигенами системы НЬА связано большинство ИП, исследованных в каждой из популяций (табл.б). С определенными уровнями параметров связаны не все тестированные Щ-А-антигены, а меньшая часть из них. Частота встречаемости конкретных НЬА-антигенов в каждой иа популяций не является определяющей для обнаружения факта наличия такой свяаи с данными антигенами. В абсолютном большинстве случаев в этих связях участвуют НЬА-антигены, входящие & галлотипы, наиболее характерные для обследованных популяций, что является отражением эволюционно сложившихся популяционных особенностей генетического контроля функций иммунитета. НЬА-сцепленный генетический контроль проявляется на фоне тех особенностей иммунного статуса популяций, которые сформировались в результате адаптации к условиям существования под действием внешнесредовых факторов.

Каждая популяция имеет свой уникальный, отливающийся друг от друга, набор НЬА-маркеров, характеризуют« уровни одних и тех же параметров иммунного статуса, вызывая аналогию о известным фактом существования разных НЬА-маркеров одинаковых болезней в разных популяциях.

Характерные для популяций ни-контролируемые особенность им-

ООО 600 490 300 200 100

О -100

Al - В8 АЗ - В7

ПШ111 Цкеретяш Е2Э Петрелы Ш-J Адхафци ПЗ Р»чжнци ЕШШ Квртлхйцы I I Кдхвгжшхи Гртшпш Еароотехды

Рис.1. Неравновесное сцепление аллелей в HLA-гаплотипах А1-В8 и АЗ-В7 в грузинских популяциях.

мунного статуса могут обеспечивать предрасположенность или устойчивость к возникновению болезней, в основе которых лежат иммунные нарушения. Следсрием реализации таких возможностей для конкретного заболевания можно ожидать накопление у больных или уменьшение частоты встречаемости у резистентных к заболеванию тех HLA-антигенов, которые маркируют патогенетически важные параметры иммунного статуса, и могут быть обнаружены как маркеры предрасположенности или устойчивости к данному заболеванию, свойственные популяции.

Повторяемость, сходство общих характеристик связи HLA с ИП в разных популяциях свидетельствуют, что взаимосвязь иммунного статуса с HLA-генотипом имеет всеобщее значение, т.е. свойства закономерности.

Грузинская популяция также, как и русская, относится к европеоидной расе, но грузины принадлежат южной ветви европеоидов. Установлены особенности HLA-генетического профиля общей грузинской популяции и отдельных этнографически групп Грузии. Грузинская популяция имеет как сходство, так и отличительные особенности в сравнении со среднеевропейскими данными. Характер распределения HLA-антигенов в популяции сопоставим с чертами, свойственными по-

D х 10000

пуляцииям юга Европы: греческой, итальянской, испанской, болгарской, румынской и др. Наиболее существенными особенностями грузинской популяции являются сниженные частоты НЬА-гаплотипов и величины неравновесного сцепления аллелей, входящих в самые характерные для европеоидов Н^-супратипы А1-В8-0!?3 и АЗ-В7-01?2. Причем для пар аллелей В8-0ИЗ и В7-0!?2 неравновесное оцепление •отсутствует, а для пар А1-,В8 и АЗ-В7 - резко снижено в сравнении со среднеевропейскими данными. Наряду с представленными общими чертами НЬА-генетического профиля, каждая из этнографических групп имеет индивидуальные свойства (рис. 1).

Особенности НЬА-генетического профиля грузинской популяции указывают на возможность выявления иных, чем для северных и среднеевропейских групп европеоидов, НЬА-маркеров для НЬА-ассоцииро-ванных заболеваний или отсутствия привычных ассоциаций. Это предположение подтвердилось результатами исследования ассоциации НЬА-антигенов I класса с системной красной волчанкой (СКВ). Полученные данные свидетельствуют об отсутствии связи НЬА-антигенов с СКВ у лиц грузинской национальности, в отличие от других европеоидных популяций,, где маркерами болезни выступают антигены, входящие в НЬА-гаплотип А1-В8-0[?3.

Одной из причин отсутствия ассоциации могут являться свойственные данной популяции и отличающиеся от других европеоидов особенности генетической регуляции иммунного статуса, наличие других НЬА-маркеров или их сочетаний, характеризующих эволюцион-но' сложившиеся черты генетического контроля функций иммунитета, существенных для патогенеза СКВ в грузинской популяции.

НЬА и аллергические заболевания Характерными свойствами большинства заболеваний, аейоцииро-' ванных с НЬА-антигенами, являются иммунологическая основа патогенеза и наследственная предрасположенность. В основном, это заболевания аутоиммунной природы. Менее изученные в иммуногекетичес-ком плане, аллергические заболевания обладают этими же свойствами. Поллиноз, как классическое атопическое заболевание, является наиболее.привлекательным объектом для подобных исследований, ввиду возможности точной диагностики самого заболевания, аллергенов, вызвавших сенсибилизацию, а также возможности четкого разделения фазы стойкой ремиссии и выраженного обострения, существенной для изучения иммуногенетических механизмов патогенеза заболевания. Проведены популяционные и семейные исследования связи НЬА с

4 3.5 3 2.5 2 1.5 1

0.5 0

/О?

■ ¿71

ш

£71

моно(111) поли(02)

вся группа(193)

ИВ7

0В8

□ DR2

□ DR3

*p<0.Ci "р<0.001 ***р<0.0001

Рис.2. HLA-ассоцивции при поллинозе с моно- и полисенсибилизацией к пыльце различных растений

заболеваемостью поллинозом у взрослых больных русской национальности, проживающих в г.Москве и в Краснодарском крае.

Популяционнне исследования в г.Москве показали, что на'сам факт обнаружения ассо^ации НЬА-антигенов с поллинозом оказывает влияние характер сенсибилизации больных: моносенсибилизация (сенсибилизация к одному или нескольким пыльцевым аллергенам, обладающим перекрестной реактивностью) или полисенсибилизация (сочетан-ная сенсибилизация к пыльце с разной антигенной специфичностью). Выявлена положительная ассоциация с заболеванием НЬА-антигенов В7 (И? - 3,58; р<0,0001) и ВК2 (И? » 3,81; р<0,00026) только в группе Оольнух с полисенсибилизацией. При моносенсибилизации связи не найдено (рис. 2).

Полученные данные свидетельствуют о существовании генетических факторов, ассоциированных с НЬА-аллелями В7 и 0Г?2, которые контролируют антиген-неспецифическую предрасположенность к заболеванию, т.е. предрасположенность к развитию поллиноза с сенсибилизацией к широкому спектру аллергенов Пыльцы неродственных растений.

При сравнительном . изучении особенностей распределения НЬА-антигенов у больных с аллергией к домашней пыли, установлено,

что при первичной сенсибилизации'к домашней пыли в ассоциацию вовлечен HLA-антиген В12 (RR - 2,61; р<0,05), при вторичной, на фоне поллиноза - те же HLA-антигены В7 (RR - 3,0; р<0,05) и DR2 (RR - 2,45; р<0,02), что и при сочагганной сенсибилизации при пол-линове. Таким образом, с HLA-аллелями В7 и DR2 ассоциированы' генетические факторы,. контролирующие предрасположенность к сенсибилизации и разнообразными пыльцевыми аллергенами, и аллергенами домашней пыли с развитием клинических проявлений атопии. С практической точки зрения HLA-маркеры могут указывать на склонность к расширению спектра аллергенов у больных поллинозом, помогая выбрать тактику лечения.

Сходство в распределении HLA-антигенов при равных клинических формах поллиноза: риноконъюнктивальном синдроме и пыльцевой астме, характеризующееся достоверным повышением частот HLA-анти-генор В7 и DR2 при полисенсибилизации и отсутствием отклонения от контроля при моносенсибилизации, свидетельствует, что о HLA не связаны клинические формы заболевания. Ассоциированные с HLA-B7 и DR2 гены контролируют предрасположенность к сенсибилизации пыльцевыми аллергенами, которая может иметь различную клиническую манифестацию.

Выявлены различия в связях HLA-антигенов в зависимости от возраста начала болезни по анамнезу. Поллиноз, возникший в детском возрасте (до 13 лет), ассоциирован с HLA-антигенами В7, В12 и DR2; поллиноз, начавшийся в возрасте после 30 лет, - с HLA-антигенами В7, DR2, а также - с HLA-антигенами В8, DR3, характерными маркерами IgG-опосредованных реакций. Антиген HLA-B7 сохраняет свое значение маркера полисенсибиливации во всех возрастных группах.

Важную роль НЬА-В7-ассоциированные генетические факторы приобретают в эпидемиологически неблагоприятном регионе, в условиях высокого экологического риска развития заболевания. Популяционные исследования в Краснодарском крае, характерной краевой патологией для которого является поллиноз, вызванный пыльцой амброзии полын-нолистной, сильнейшим аллергеном, превосходящим по своим аллергенным свойствам все известные пыльцевые аллергег выявили очень сильную связь заболевания с HLA-B?. Ь условиях Краснодарского края при наличии в HLA-фенотипе антигена В7 риск заболеть в 22 раза Еыше, чем при его отсутствии (RR - 22,З1; р<0,0005); амбро-аийный поллиноз возникает раньше и чаще сопровождается пыльцевой астмой.

Генетический анализ показал доминантное наследование HLA-В7-ассоциированного гена предрасположенности к амброзийному поллинозу.

Полученные данные могут иметь практическое значение для индивидуального и популяционного прогнозов. HLA-типирование может выявить группу лиц с повышенным риском развития амброзийного пол-линоза в этом регионе, а также диад, склонных к более тяжелым проявлениям заболевания в виде пыльцевой астмы.

Семейные исследования в г.Москве и в Краснодарском крае показали, что предрасположенность к поллинозу наследуется4- 5 сцеплении" с HLA-гаплотипом; для каждой се)л>и характерен свой HLA-гапло-тга, сцепленный с заболеванием. При наличии такого гаплотипа сенсибилизация у каждого больного члена семьи может наступать к разным аллергенам.

Результаты семейных.исследований не только прямо доказали существование HLA-сцепленного контроля предрасположенности к поллинозу, но и подтвердили данные популяционных исследований. При поллинозе влиянием HLA-сцепленных генетических факторов предрасположенности могут объясняться наблюдения многих авторов, что наследуется не само аллергическое заболевание, а скорее общая предрасположенность к развитию гиперчувствительности к разнообразным ингаляционным аллергенам.

Предположиа в качестве механизма реализации HLA-ассоциированной, антигек-неспъцифической предрасположенности к поллинозу наличие HLA-контролируемых особенностей иммунного статуса, нами п{юведено исследование связи HLA-маркеров заболевания с ИП у больных в фазе ремиссии. Необходимо отметить, что у больных пол-линозом выявлены отличия ряда Ш в сравнении со здоровыми донорами. Так, у них резко снижена супрессорная функция Т-Лф и часто замещена активирующей (еще в большей степени супрессорная функция угнетена в группе больных с аллергией к домашней пыли), снижено содержание CD2+, CD3+, CD4+ Лф, а также иммунорегуляторного индекса CD4/CD8. В свою очередь, повышены уровни иммуноглобулинов всех изотипов A, M, G и Е. На фоне имеющихся особенностей иммунного статуса у больных поллинозом уровни ряда ИП связаны с наличием или отсутствием в их фенотипе HLA-маркеров заболевания (табл. 6). Так, HLA-антиген В7 маркирует сниженное содержание в периферической крови Т-супрессоров (CD8+ Лф) и NK-клеток (CD16+ и CD57+ Лф), антиген DR2 - сниженный уровень активности Кон А-индуцированных Т-супрессоров и содержание CD8+ Т-Лф. В свою очередь

Связь НЬА-маркеров с параметрами иммунного статуса у больных поллинозом и аллергией к домашней пыли (астмой)

Поллиноз Аллергия к домашней пыли'

HLA-маркер Параметр и его • уровень HLA-маркер Параметр и его уровень

Дебют до 13 лет Дебют после 30 лет Общий

В7 В? В7 CD8J; CD16|; CL.57J В7 Т-супр. |

В8 Т-супр t -

В12 - В12 Т-супр j

DR2 DR2 DR2 Т-супр COS 4 DR2 Т-супр J

DR3 Т-супр t -

B8/DR3 CD16 f ' -'

| - сниженный или | - повышенный уровень параметра; - (прочерк) -связи НЬА-антигена с параметрами не выявлено; . Т-супр - функциональная активность КонА-индуцированных Т-супрессоров.

HLA-антигены В8 и/или DR3 (характерные маркеры аутоиммунных заболеваний, у нас - маркеры позднего начала поллиноза), связаны о более сохранной функцией супрессорных Т-Лф и повышенным содержанием NK-клеток (CD16+ Лф). . При аллергии к домашней пыли (пылевой астме) HLA-маркеры В7, В12 и DR2 достоверно указывают на более угнетенную функцию КонА-индуцированных супрессорных Т-Лф.

Полученные данные свидетельствуют, что HLA-сцепленные гены предрасположение ги к поллинозу и аллергии к домашней пыли могут проявлять свое действие на уровне контроля функции Т-супрессоров, а также содержания в периферической крови (при поллинозе) супрессорных Т-Лф (CD8+) и NK-клеток (CD16+ и CD57+ Лф). HLA-маркеры предрасположенности к поллинозу и аллергии к домашней пыли одновременно являются маркерами патогенетически важных параметров им-, мунного статуса боль..ых.

Если HLA-сцепленный контроль иымукиого статуса является важным механизмом развития аллергических заболеваний, то связь HLA-антигенов именно с аллерген-неспецифическими признаками заболеваний должна быть общим правилом. Акцент на полкаллергию сделан нами при проведении иммуногенетических исследований у детей,

Зольных атопической бронхиальной астмой, поллинозом и другими проявлениями атопии, а также у взрослых больных аллергическими контактными дерматозами, возникшими вследствие профессионального контакта с широким спектром антибиотиков в процессе их производства.

В детском возрасте генетические факторы предрасположенности к атопии проявляются наиболее редьефно. Причем, для детей с ато-пическими заболеваниями часто свойственно сочетание гиперчувствительности сразу к нескольким видам аллергенов.

Обследованы больные дети русской национальности с различными клиническими формами атопии, наиболее частыми из которых являлись аллергические проявления со стороны респираторного тракта. Выявлены также сочетающиеся с респираторной аллергией атопический дерматит, крапивница и отеки Квинке. Ведущим признаком являлась поливалентная сенсибилизация к разнообразным экзоаллергенам: пищевым, бытовым, пыльцевым, эпидермальным и лекарственным. Внутри общей группы больных детей выделена группа с клиникой поллиноза.

В результате иммуногенетических исследований при атопических заболеваниях у детей выявлен HLA-маркер предрасположенности к поливалентной сенсибилизации разнообразными неинфекционными экзоал-лергенами (бытовыми, пищевыми, пыльцевыми и др.) - антиген В12. Дети, в HLA-фенотипе которых представлен антиген В12, имеют в_2,5 раза больший риск развития атопического заболевания, чем дети без этого HLA-антигена. Клинические проявления атопии у них наступают в более раннем возрасте (на 2-2,5 года раньше), чем у детей с другим фенотипом. Выявлены HLA-маркеры предрасположенности к полисенсибилизации пыльцевыми аллергенами при поллинозе - антигены В7 (RR - 4,2; р<0,0005) и DR2 (RR - 4,5; р<0,025). HLA-антигены В12, В7 и DR2 y детей являются только маркерами предрасположенности к сенсибилизации, а не маркерами форм ее клинической манифестации

Учитывая особые черты HLA-генетического профиля грузинской популяции в сравнении с русской, проведены иммуногенетические исследования предрасположенности к атопической бронхиальной астме у детей грузинской национальности. Особенности HLA-генетического ■ профиля сказались на свойственных грузинской популяции НLA-маркерах предрасположенности к атопической асгме у детей. HLA-антиген В7 является маркером предрасположенности к пыльцевой полисенсибилизации, а антигены BIS и DR5 - маркерами атопии с сенсибилизацией к широкому кругу экзоаллергенов неинфекционного происхождения.

Следует отметить, что наличие HLA-антигена В7 указывает на особенно высокий риск развития пыльцевой полиаллергии (RR - 8,9; р<0,0001) у детей грузинской национальности.

■ В группе больных детей с атонической астмой обнаружено снижение в сравнении с. контролем содержания CD3+, CD4+, CD8+ и CÜ57+ Лф, свидетельствующее о вовлечении в патологический процесс рбгу-ляторных субпопуляций Лф, включая NK-кдетки, на фоне дефицита Т-Лф. В результате анализа взаимосвязи исследованных ИП с HLA-фе-нотипом установлено, что у больных атопической астмой детей, имеющих в HLA-фенотипе характерные для грузинской популяции HLA-мар-керы заболевания - антигены В7, В12, и DR5, количество CD57+ Лф и CD8+ Лф достоверно ниже, чем у больных без этих HLA-антигенов.

Таким образом, характерные для грузинской популяции HLA-маркеры антиген-неспецифической предрасположенности к сенсибилизации неинфекционными экзоаллергенами, проявляющейся в форме атопической астмы у детей, одновременно служат маркерами патогенетически важных параметров иммунного статуса. Полученные данные свидетельствуют, что механизмом, объясняющим связь HLA-антигенов с заболеванием, может явиться HLA-сцеплешшй контроль иммунного статуса, лежащий в основе HLA-ассоциированной генетической предрасположенности к атопической астме у детей грузинской национальности.

В отличие от рассмотренных выше атопических заболеваний с реагинорым типом гиперчувствительности (I тип аллергических реакций по Р.Gell, R.Coombs), аллергические контактные дерматозы яв-лякзтся проявлением аллергических реакций замедленного типа (IV тип).

В русской популяции обследованы больные аллергическими контактными дерматозами, • возникшими в результате профессионального контакта с антибиотиками разных групп (пенициллина, аминогликози-дов, тетрациклинов и др.) в процессе их производства, а также здоровые лица, длительно (более Б лет) работающие в тех же условиях, бев каких-либо проявлений болезни (группа резистентных к заболеванию, использованная в качестве контроля). Выявлена сильная свявь заболевания с HLA-антигенами, как положительная, так и отрицательная.

HLA-маркеры DR4 (RR - 46,3; СЬ - 0,0003) и В13 (RR - 9,23; Рс - 0,032) указывают на чрезвычайно высокую степень предрасположенности к заболеванию. Риск развития болезни при наличии в фенотипа HLA-антигена DR4 в 46 раз выше, чем при его отсутствии. Для HLA-маркера В13 это соотношение равно 9. В свою очередь, отрица-

тельная ассоциация с заболеванием Н1А-антигенов 031 (ИР - 0,09; 1/И? - 11,1; Рс - 0,0026) и В12 (1Ж - 0,18; 1/И? - 5,56; Рс -0,022) дает основание считать их маркерами резистентности к болезни. Лица с фенотипом Ю-ИЛ в 11 раз более устойчивы к заболеванию, чем лица без этого НЬА-антигейз. Это соотношение для НЬА-маркера В12 равно 5.

Особенность проведенных исследований состоит в том, что изу-• чена связь НЬА-антигаюв с развитием аллергических контактных дерматозов, возникших вследствие поливалентной сенсибилизации к антибиотикам многих групп, а в качестве контроля использовала группа лиц, резистетных к заболеванию, несмотря на длительный срок контакта с множественными сенсибилизирующими агентами. Установленные НЬА-маркеры могут использоваться как один иэ критериев профессионального прогноза и отбора.

Таким образом, результаты исследований связи НЬА-антигенов с атопическими заболеваниями у взрослых и детей, а также с аллергическими контактными дерматозами, позволили установить в качестве общего свойства Антиген-неспецифичность маркируемого Н1_А-аллелями признака - предрасположенность к поливалентной сенсибилизации. На примере поллиноза и аллергии к домашней пыли показано, что НЬА-маркеры заболевания одновременно служат маркерами патогенетически важных параметров иммунного статуса больных. Эти же свойства подтвердились и в грузинской популяции с присущими ей Н1-А-маркерами атопической бронхиальной астмы у. детей. Полученные данные свидетельствуют об участии в патогенезе болезней НЬА-сцеп-ленного генетического контроля иммунного статуса, выступающего в качестве механизма связи НЬА с заболеваниями.

Можно выделить следующие общие свойства в связях НЬА-антигенов с болезнями и с ИП:

1. Разные популяции - разные НЬА-маркеры заболеваний и ИП.

2. гМаркерами заболеваний и ИП выступает меньшая часть выявляемых в популяции НЬА-антигеноь.

. 3. Маркерами заболеваний и ИП служат НЬА-антигены, входящие а гаплотипы, свойственные конкретной популяции.

' 4. Маркерами ИП л заболевании с иммунологической основой патогенеза являются1 одни и те же НЬА-антигены.

5. Антиген-неспецифичность маркируемого призы :са.

- 26 -

Исследование связи HLA-маркеров поллиноза В7 и DR2 с параметрами иммунного статуса у здоровых лиц и больных

поллинозом в фазах ремиссии и обострения Учитывая, что HLA-антигены В7 и DR2 являются основными маркерами поллиноза при любом возрасте начала болезни, нами проведено более подробное исследование связи данных маркеров с широким спектром ИП у здоровых лиц и у больных поллинозом в фазах стойкой ремиссии и обострения. Цель исследования - детализация особенностей и уровней генетической регуляции иммунного статуса, участвующих в реализации предрасположенности к заболеванию, ассоциированной с HLA-маркерами В7 и DR2.

У больных поллинозом в фазах стойкой ремиссии и клинически выраженного обострения выявлены отличия ряда ИП в сравнении со здоровыми донорами (табл.7). Содержание IgE в спонтанных 7-дневны v культурах МК у больных поллинозом в ремиссии выше, чем в здоровом контроле, причем, синтез IgE de novo отмечен глазным образом у больных. (45Х. случаев против 6Х в контроле, р<0,01). Стимуляция культур анти-СПГЗр МКАТ, близко моделирующая реальный путь активации TCR/CD3 комплекса аллергеном, но "обходящая" как антиген-специфичность стимула, так и HLA-рестрикцию ответа, вызвала достоверное увеличение числа случаев выявления синтеза IgE de novo у здоровых и больных поллинозом. В последней группе этот показатель, а также общее содержание IgE .в культурах после стимуляции ьыше, чем в контроле.

Для больных поллинозом в ремиссии характерны более высокий i ответ и ускоренная его динамика в РБТЛ на низкую дозу ФГА в культурах МК и на субоптимальную - в культурах ЦК, чем у здоровых доноров. В этой группе больных, однако, снижен ответ на высокую до-ву «ГГА, субоптимальную - PWM, и анти-СОЗпл МКАТ в культурах МК. В то же время в культурах ЦК, ответ Лф в РБТЛ на высокую дозу ФГА не отличается от соответствующего ответа Лф здоровых доноров ни по амплитуде, ни по динамике, указывая на высокий потенциал Лф больных поллинозом в ремиссии к пролиферации в ответ на адекватную стимуляцию и на наличие регулирующего влияния дополнительных сигналов, имеющихся в культурах ЦК. Сходное регулирующее влияние выявлено в культурах ЦК, стимулированных анти-СОЗпл МКАТ и PWM. В отличие от больных в ремиссии, у больных в обострении поллиноза выявлена депрессия ответа на все дозы птогенов в культурах МК и ЦК, ва.исключение ответа на анти-СЭЗр МКАТ и спонтанной пролифе-' рации в культурах ЦК. ....." '

Параметры иммунного статуса у больных поллинозом в ремиссии (1) и в обострении (2), имеющие достоверные отклонения от контроля

1— — | Параметр I 1 i---------- 1 2 ------------------------------ Параметр — 1 i 2 1

1 1 Продукция I(?E in vitro. I в сыворотке t t 1

|- спонташш 1 t |н.и. 1дЕ в сыворотке t t 1

|- на анти-СОЗр МКАТ | t |н.и. С02+ Лф 1 1 1

|Ts-активность I 1 |н.и. С03+ Лф 1 1 1

|NK-активность I - 1 J С04+ Лф t 1 *l

1РБТЛ (МК): 1 Индекс СМ/СМ 1 1 1

|- спонтанная I - 1 I * С020+ Лф -

|- ФГА низ I t 1 I * С04+С029+ Лф t J 1

|- ФГА суб I - 1 1 С04+С045(?А+ Лф - t 1

|- ФГА опт I J 1 1 * С08+С0451?А+ Лф - t 1

|- КонА . | - 1 t С08+УУ+ Лф - t 1

I- PWM I i |н.и. С020+С05+ Лф - t 1

|- анти-СОЗр МКАТ | - 1 i 0Р+С03+ Лф - t 1

|- анти-СШпл МКАТ | 1 1 J 0<4+ Мон - t 1

1РБТЛ (ЦК): I 0Р+ МОН t t *l

|- спонтанная I - 1 t * Экспрессия молекул:

|- ФГА суб | t I I СС2 на Лф ■ - t 1

|- ФГА опт j - 1 1 СОЗ на Лф ■ 1

|- анти-СОЗпл МКАТ | - 1 1 С08 на Лф I t 1

I Продукция цито^синов: 1 С029 на СБ4+ Лф - 1 1

1Ш1-1 (на ЛПС) | t 1 I С029 на С138+ Лф - 1 1

1Ш1-2 (на ФГА) | t 1 1 * Рецептор для УУ на

|г-ИФН (на ФГА) | - 1 1 * СБ8+ Лф t t *l

IЭкспрессия молекул на Лф, | НЬА-класс I на Лф - t 1

1стимулированных (72 часа)| НЬА-класс I на Мон - t *l

|ФГА суб'- CD25 1 J ¡н.и. ОД на Лф - t 1

Iанти-СОЗр-МКАТ: I ОР на Лф - t 1

|- Ш1-2Р (CD25) 1 1 |н.и. ОР на С03+ Лф - t 1

CD29 на CD4+ Лф | I |н. и. 0С1 на С020+ Лф - t 1

|- CD29 на CD8+ Лф | 1 |н.и. ОР на С020+ Лф - t 1

| IgM в сыворотке ; | t 1 I ОД на Мон - t 1

1 Ig-A в сыворотке | 1 ......... 1 t 1 ОР на Мон | 1 i t 1 i

| - сниженный или | - повышенный уровень параметра; - (прочерк) -отклонений от контроля нет; * - в сравнении с больными в ремиссии; н.и. - не исследовали

У больных поллиноэом в ремиссии продукция ИЛ-2 в ответ на субоптимальную дозу ФГА выше, чем у здоровых лиц и больных в обострении. В последней группе продукция ИЛ-2, при имеющейся тенденции к снижению, не отличается достоверно от группы здоровых доноров.

Обнаружено несоответствие между уровнями пролиферативного ответа на ФГА, а также продукции ЙЛ-2 и плотностью рецептора для ИЛ-2 (альфа-цепи, выявляемой анти-(Л325 МКАТ) на Лф больных в, ремиссии поллиноза. Повышенные ответ на ФГА С1 мкг/мл) и продукция ИЛ-2 в культурах ЦК сочетаются со сниженным уровнем экспрессии ИЛ-2Р на Лф, стимулированных ФГА, в сравнении со вдоровымй донорами (в 1,8 раза ниже - в линейной шкале). В ответ на анти-СШр МКАТ Лф этих больных в культурах МК имеют плотность ИЛ-2Р в 1,4 раза ниже, чем Лф здоровых доноров. Процентное содержание СЛ25+ Лф стимулированных 72 часа ФГА в суб- и оптимальной дозах и ан-ти-С03р МКАТ, не различаются у здоровых и больных в ремиссии. Не различаются и уровни экспрессии ИЛ-2Р на Лф, стимулированных ФГА в высокой дозе.

ЛК-активность снижена только в фазе обострения заболевания.

В ремиссии заболевания выявлена повышенная продукция ИЛ-1 в ответ на ЛПС-стимуляцию. В то же время при обострении, его продукция резко снижена как в сравнении со здоровыми донорами, так и с больными в ремиссии. При обострении поллиноза снижена, в сравнении с группой больных в ремиссии, продукция г-ИФН. Указанные особенности, видимо, являются следствием механизмов обратной регуляции ИЛ-1 и г-ИФН при обострении болезни в результате накопления ингибиторов их продукции:' ИЛ-4, ИЛ-13 и ИЛ-10. Уровни спонтанной продукции ИЛ-1 и ЛПС-стимулированной продукции ФНО-а не различаются в трех обследованных группах.

Исследование субпопуляций Лф, уровней иммуноглобулинов и экспрессии тканевых антигенов позволило выявить ряд особенностей, свойственных больным поллинозом в ремиссии заболевания (повышенное содержание иммуноглобулинов всех изотипов, снижение количества С02+, СБЗ+, С04+ Лф, иммунорегуляторного индекса С04/С08, повышенное содержание СЮ4+С029+ Лф, снижение экспрессии молекул СБЗ и С08 на поверхности Лф и повышение экспрессии рецепторов для УУ на поверхности СОЗ4" Лф), а также в обострении поллиноза (сниженная концентрация в сыворотке 1вМ и поведенная - 1&Е и сниженное количество СЕ)2+, С03+, СБ4+, СВ20+, СБ4+С029+ Лф И ИМмуно-регуляторного индекса С1М/С08, повышенное содержание С04+С04БКА+,

- 29 - •

CD8+CD45RA+ -Лф, контрасупрессорных клеток CD8+VV't' и активированных В-Лф CD5+CD20+, повышенная экспрессия молекул CDS и CD8, а также резкое повышение экспрессии рецепторов для V» на CD8+ Лф и снижение экспрессии молекул CD29 на CD4+ и CD8+ Лф). Не обнаружено различий в трех обследованных группах Следующих ИП: содержания CD8+, CD16+, CD57+, CD25+, DR+, CD3^DR+, CD8+CD29+, CD8+CDllb+, CD8+CDilb~ Лф, а также экспрессии молекул CD4 на Лф и CD45RA на поверхности CD4+ и CD8+ Лф.

Выявленный нами дисбаланс реципроктных субпопуляций Лф CD4+CD29"t" (индукторы хелперов или CD4+ клетки памяти) и CD4*CD45RA+ (индукторы супрессоров или С04+ наивные клетки) при обострении поллиноза в сторону снижения первой и повышения последней, по-видимо),{у, является характерным для атопии. Сходные данные получены при атопическом дерматите [Jung К. et al., 1993] и атопической астме [Schauer U. et al., 1991]. Возможным объяснением этого дисбаланса является повышенный отток CD4+tD29+ Лф в места аллергического воспаления, связанный с особенностями рециркуляции этих клеток, и соответствующее снижение их в периферической крови при одновременном увеличении количества CD4+CD45RA+ Лф. Подтверждением такого предположения служат данные о доминирующем содержании CD4+CD29+ Лф в кожных инфильтратах при атопическом дерматите [Watanabe К. et al., 1994] и в слизистой бронхов при атопической астме [Robinson D. et al., 1993)..

КонА-активированные супрессорные Т-клетки принадлежат субпопуляции CD4+CD45RA+ Лф, которые индуцируют супрессию череэ CD8+CD45RA* Лф. Повышенное содержание при обострении ' поллннова индукторов супрессоров CD4+CD45RA+ Лф и супрессоров эффекторов vD8+CD45RA+ Лф противоречат на первый взгляд налим данным о снижении функции КонА-индуцированных Т-супрессоров при поллинозе и аллергии к домашней пыли.

Могшо предположить, что субпопуляция.CD4+CD45RA+ Лф при поллинозе и других атогоп'еских заболеваниях имеет функциональный дефект. В пользу этого говорят данные о том, что CD4+CD45RA+ Лф здоровых доноров имеют способность максимально пролиферировать в аутологичной смешанной культуре Лф, в отличие от CD4+CD29+ Лф. Однако у больных ; атопическими заболеваниями наблюдается очень слабый пролиферативный ответ Т-Лф на аутологичные ле-Т-Лф [Leung D. et al., 1983]. Кроме того, субпопуляция CD4+CD45RA+ Лф, в отличие от CD4+CD29+ Лф, имеет свойство максимально пролиферировать на оптимальные довы ФГА. Нами же показано, что у больных в обост-

рении поллиноза резко снижен ответ на все дозы митогена. Функциональный дефект CD4+CD45RA+ Лф может обусловить сниженную способность этих клеток дифференцироваться в CD4't'CD29't" Лф, также объясняя повышенное количество CD4+CD45RA+ Лф у больных в обострении поллиноза.

Необходимо отметить., что дефицит продукции или рецепции ЙЛ-2 может в корне менять функциональные свойства CD8+CDllb+ Лф (суп-рессорные эффекторные клетки, обладающие морфологией и активностью NK-клеток, прямо супремирующие продукцию иммуноглобулинов В-Лф) и CD8+CD45RA+ Лф, превращая их в клетки, стимулирующие Ig-продукцию, а также CD8+CDllb~ Лф, превращая их из Т-киллерных клеток в амплифайеры для IgE - продукции CSohen S. et al., 1990; Takahashl Т. et al., 1991]. Полученные нами данные о сниженной в обострении поллиноза, в сравнении с ремиссией заболевания, про-дунщи ИЛ-2 и сниженной экспрессии у больных ИЛ-2Р на Лф, стимулированных анти-СОЗр МКАТ, указывают на такую возможность.

Альтернативным объяснением снижения и даже отсутствия суп-рессорного эффекта при нормальном или повышенном,содержании Лф с фенотипом супрессорных клеток может -служить механизм контрасуп-рессорной иммунорегуляции. Повышенное содержание в период обострения поллиноза контрасупрессорных клеток (CD8+VV+) может отменять действие на Т-хелперы даже активно функционирующих Т-супрес-соров. Увеличенная экспрессия гликопротеинов, служащих рецепторами для VV, на поверхности контрасупрессорных клеток является молекулярной основой повышенного триггеринга их регуляторной функции [Braun-Elwert L., James S.P., 1991] у больных поллинозом. Так, плотность рецепторов для VV на CD8+ Лф в ремиссии поллиноза в 1,7 раза выше, чем в контроле, а в обострении болезни в 5,5 рало выше, чем в ремиссии, и в 9,4 раза выше, чем в контроле.

Снижение экспрессии молекул CD29 на поверхности CD4+ Лф у больных в обострении поллиноза, а также при стимуляции Лф больных анти-СОЗр МКАТ, служит еще одним свидетельством уменьшения суп-рессорных влияний на IgE-продукцию со сторокы CD8+ Лф. Молекула С029 является общей субъединицей (бета-1) семейства бета-1-интег-ринов. Одной из функций этих молекул, действующих как рецептор, контролирующий пролиферацию CD4+ Лф, является передача негативного сигнала в клетку, вызывающего повышение уровня цАМФ ITlcchioni М. et al., 1993). Молекулы CD29 служат ?*шенью для супрессивного эффекта CD8+ Лф на CD4+ Лф. В опытах In vitro МКАТ к CD29 ¿локировали специфическую супрессию IgE-ответа на аллерген из пыльцы

японского кедра, опосредованную CD8+ Лф, у больных поллиновом [Matsushita S. et al., 1988]. Уровень плотности молекул CD29 на CD4+ Лф является решающим условием, определяющим их восприимчивость, чувствительность к контролирующему действию со стороны супрессорных CD8+ Лф [Groux Н. et al. 19Í3].

В результате исследования экспрессии HLA-молекул классов I и И на популяциях иммунокомпетентных клеток у больных поллиновом в • сравнении со эдоровыми донорами основные изменения обнаружены в фазе обострения болезни. При обострении поллиноза повышена экспрессия HLA-молекул класса I на Лф и моноцитах (в сравнении с больными в ремиссии), а также молекул класса II DQ и DP на Лф и моноцитах. Увеличено и процентное содержание моноцитов, экспрес-сирующих эти молекулы, причем повышенное содержание DP+ моноцитов, отмечено и в фазе ремиссии заболевания. В фаэе обострения поллиноза резко увеличена плотность молекул DQ и DP на В-Лф, а также молекул DP на поверхности Т-Лф. Повышено и процентное содержание DP+ Т-Лф. В то же время у больных поллинозом не выявлено отклонений от контроля ни в содержании иммунокомпетентных клеток, экспрессирующих молекулы DR, ни в уровне их поверхностной экспрессии. Не выявлено различий в трех обследованных группах также количества DQ+, DP4", CD3+DQ+ Лф и плотности DQ-молекул на CD3+ Лф.

Повышенный уровень экспрессии молекул DQ я DP на профессиональных -антиген- презентирующих клетках (АПК) - моноцитах и В-Лф, в сезон массированной атага. пыльцевыми аллергенами, вызывающими у больных клинически выраженный иммунный ответ, свидетельствует о вовлечении в патогенез заболевания данных HLA-молекул. HLA-моле-кулы DQ и DP, возможно, играют основную роль в презентации аллергена Т-Лф при поллинозе. Вместе с тем, эти же молекулы могут играть важнейшую роль в качестве регуляторных молекул, выполняющих сигнальную функцию. Повышенная экспрессия DP-молекул на Т-Лф так-I же может быть связана с антигенпрезентируюдей и регулирующей функцией этих молекул в период обострения заболевания.

Молекулы HLA-DP являются ранним активационным маркером Т-Лф. Увеличенное содержали DP+CD3+ Лф у больных в обострении поллино-8а свидетельствует ; о повышенном количестве Т-Лф, находящихся в ранней, G1A фазе активации. Традиционно принятые для изучения статуса активации Т-Лф маркеры CD25 и HLA-DR, не выяви«? признаков активации Лф in vivo при обострении заболевания.

Повышенная экспрессия HLA-молекул Í класса на Лф и моноци-

B7.DR2

' р<0.05

р<0.01

I HLA-антиген + □ HLA-антиген

70

60

о

с 40

и •о

Я 30

а го

и

* 10

о

-10

B7.DR2 DR2

Рис.3. Связь силтеза IgE in vitro (aHra-(TD3 NiKAT) с H LA-фенотипом B7 и DR2 у здоровых доноров и больных П0ЛЛИН030М

тах, молекул DQ и DP на В-Лф и моноцитах и увеличенное процентное содержание DQ+ и DP+ моноцитов также свидетельствуют об активации этих популяций иммунокомпетентных клеток при обост^нии заболевания.

Таким образом,- детальный анализ fffl йЪаволил выявить ряд патогенетически важных особенностей иммунного статуса, свойственных больных поллинозом в ремиссии и в обострении заболевания.

Для интерпретации результатов исследования роли генетического контроля иммунного статуса в предрасположенности к поллинозу важно отметить некоторые существенные черты патогенеза атопии.

Атопическая аллергия характеризуется генетически контролируемой способностью отвечать на минимальные довы аллергена повышенной продукцией IgE-антител. Сенсибилизация при поллино8е, например, наступает при естественной экспозиции к крайне малым дозам пыльцевых аллергенов - менее 1 мкг в год [Marsh D. et al., 1080].

Основным признаком, определяющим различия между статусом ги-перчувствительнссти к окружающим аллергенам у больных атопией и неатопическим статусом здоровых лиц, является вид субтипов СП4+ хелперных Т-Лф, доминирующих при развитии иммунного ответа [Ricci M. et al., 1994]. Атопическая аллергия -, заболевание, при котором CD4+Th2-клетки и продуцируемые ими цитокины играют центральную роль. Активация Th2-клеток объясняет совместное вовлечение в патогенез заболевания IgE-продуцирующих В-Лф, тучных клеток, базо-филов и эозинофилов [Romagnani S., 19941.

Наиболее важным доказательством участия в патогенезе полли-ноза HLA-сцешгнного генетического контроля иммунного статуса является связь HLA-маркеров заболевания В7 и DR2 с повышенным синтезом IgE in vitro (рис. 3). Маркеры поллиноза указывают не только на способность к повышенному спонтанному и стимулированному анти-СОЗр МКАТ синтезу IgE у больных поллинозом, но и на повышенную способность к индукции этого синтеза у- здоровых лиц. Повышенный синтез IgE в культурах МК здоровых лиц с HLA-фенотипом В7 и DR2 в ответ на стимуляцию анти-СОЗр МКАТ, моделирующую стимуляцию реальным аллергеном, создает патогенетическую основу предрасположенности к поллинозу, объясняющую ассоциацию заболевания с указанными HLA-антигенами. HUV-контролируемый синтез IgE является как бы завершающим эвеном в цепи событий, приводящих к дифферен-цировке В-Лф в IgE-секретирующие клетки. Важные иммунологические звенья в этой цепи также генетически контролируются (табл. 8).

Свойственная больным поллинозом гиперчувствительность Лф к

Уровни ЯП, марюгоуемые HLA-антигенами В7 и/или DR2, у здоровых лиц и больных поллиновом

Параметр Здоровые доноры Ремиссия поллиноэа Обострение поллиноэа

Продукция ItrE in vitro:

- спонтанная - . t н.и.

- на анти-СОЗр МКАТ . t t н.и.

Ts-активность - \ н.и.

NK-активность - - t

PBTJI:

- спонтанная (МК) \ - -

- ФГА суб (МК) t J -

- ФГА суб (ЦК) - *

- ФГА опт (ЦК) - - i

- КонА (МК) 1 \ -

- анти-СОЗр МКАТ (ЦК) t - -

- аняи-СВЗпл МКАТ (ЦК) - t -

Продукция цитокинов:

ИЛ-1 спонтанная - t -

ИЛ-1 (на ЛПС) - t

ИЛ-2 (на ФГА) t \ -

ИФН-г (на ФГА) 1 - -

g?H0-a (на ЛПС) 1 * ' -

Экспрессия ИЛ-2Р (CD25) на Лф, стимулированных анти-СОЗр МКАТ t н.и.

CD2+ Лф - -

CD8+ Лф J 1

CD16+ Лф 1 1 t

CD57+ Лф 1 - ■ •

см. окончание табл.8

Окончание табл. 8

Параметр Здоровые Ремиссия Обострение

доноры поллиноэа поллиноза

С025+ Лф 1 — (• -

С04+С029+ Лф \ -

СМ+С029~ Лф * 1 -

СШ+С029+ Лф - -

СШ+С029" Лф - - \

СЕ>3+С011Ь+ Лф

СШ+С0ИЬ~ Лф 1

С08+УУ+ Лф \ -

СЛ20+С05+ Лф - - \

0К+ Лф -

лф - -

и?+ Лф - - ■ 1

И?+СШ* Лф - < -

0Р+С03+ Лф - -

Экспрессия молекул: •

СБ2 на Лф * -

СйЗ на Лф - -

СЕН на Лф - -

СШ на Лф - ■. - 1

ОН на Лф 1 -

134 нк Лф \ - 1

ОР на Лф - -

И? на Мои - -

Ю класс I на Мои \ - -

| - сниженный или | - повышенный уровень; - (прочерк) -связи не выявлено; н.и. - не исследовали.

- 35 -

низкодозовой стимуляции характерна и для гдоровых лиц с фенотипом В7 и DR2. У них повышены: содержание CD25+ Лф, ответ в РВТЛ на суооптимальную дозу ФГА и анти-СОЗр МКАТ, продукция ИЛ-2 и плотность ИЛ-2Р на Лф, стимулированных анти-СйЗр МКАТ. Увеличенная плотность молекул И32 и TCR/CD3 на поверхности Лф, также указывает на большую способность к ответу на малую догу антигенов или митогенов.

Повышенная чувствительность Лф здоровых лиц с HLA-фенотипом В7 и/или DR2 к низкодозовой стимуляции может быть связана с увеличенным содержанием клеток памяти или индукторов хелперов, CD4+CD29+ Лф, Повышенная экспрессия на них адгезивных, сигнальных и хоминговых молекул облегчает взаимодействие с АПК, обеспечивает большую способность клеток памяти к активации минимальными догами антигена и селективной миграции. В свою очередь низкий ответ в рртл на КонА, может объясняться меньшим содержанием индукторов супрессоров или наивных клеток, CD4+CD29" Лф ( субпопу .гчции, аналогичной CD4+CD45RA+ Лф), преимущественно отвечающих nia КонА.

При антигенной стимуляции CD4+ клетки памяти в первую очередь дифференцируются в ThO, а аатем в Thl или Th2. Клональная экспансия преимущественно Thl- или Th2-клеток определяется видом АПК и видом цитокинов, присутствующих на начальных этапах активации. Thl-клетки оптимально пролиферируют при взаимодействии с макрофагами и дендритными клетками в качестве АПК, Th2-клетки -при взаимодействие с В-Лф. В-Лф являются основными АПК при низкой концентрации антигена tMamula M. et al., 1993; Pfeiffer С. et al., 19913, которая наблюдается при поллинозе.

На конститутивную способность преимущественно В-Лф выступать в качестве АПК при воздействии аллергенов у здоровых лиц с HLA-фенотипом В7 и DR2 указывает повышенная экспрессия на Лф (за счет В-Лф) HLA-молекул класса II DR, DQ и DP. Активация В-Лф при контакте с активированными in vivo CD4+CD29+ Т-Лф, при связывании антигена иммуноглобулиновыми рецепторами, а также при перекрестном связывании HLA-молекул класса II, вызывает быструю экспрессию на них молекул В7-2 (CD86), значительно опережающую по времени экспрессию молекул В7-1 (CD80) CFreèman G. et al., 19951. Кости-муляторный сигнал по пути CD86(B?-2)-CD28 параллельно с сигналом через TCR на Т-Лф вызывает повышенную селективную продукцию ИЛ-4 [June С. et al., 19941.

В то же время у здоровых лиц с HLA-B7 и DR2 снижена опособ-кость Лф к продукции г-ИФН, а также количество КК-клеток (CD16+ и

CD574" Лф) - источников г-ИФН. Снижена продукция ФНО-а в ответ на стимуляцию ЛПС (главным образом за счет моноцитов). Сниженная способность к продугащи г-ИФН, ФНО-а, индуцирующих дифференциров-ку ThO в Thl-клетки, а также повышенная готовность В-Лф выступать в качестве АПК, могут свидетельствовать' о сцепленной с HLA-B7 и DR2 у здоровых лиц способности поляризовать ответ на низкодозо-вую, повторяющуюся стимуляцию пыльцевыми аллергенами по Т1т2-типу.

Уменьшенное содержание супрессорных эффекторных клеток, обладающих морфологией и активностью NK-клеток, прямо супрессирую-щих продукцию иммуноглобулинов В-Лф (CD8+CDllb+ Лф), а также повышенное количество контрасупрессорных клеток (CD8+VV+) у здоровых лиц с HLA-маркерами поллиноэа, указывают на уменьшение суп-рессорных влияний, сдерживающих развитие ответа на антигенное воздействие.

Результаты проведенных исследований показали, что особенности иммунного статуса здоровых лиц с HLA-фенотипом В7 и DR2 могут предрасполагать к возникновению сенсибилизации пыльцевыми аллергенами с развитием клинической картины поллиноза.

■ Наличие связи HLA-маркеров заболевания с ИП у больных полли-Н080М также свидетельствует об участии в патогенезе заболевания HLA-сцепленной генетической регуляции иммунного статуса. Генетический контроль проявляется на фоне тех изменений ИП, которые обнаружены у больных в ремиссии и, оссСенно, --в обострении поллиноза.

У больных в ремиссии ; ыявлен ряд взаимосвязей HLA-маркеров с ИП, отличающихся от здоровых доноров. Так, у больных с HLA маркерами поллиноза снижены: содержание супрессорных Т-Лф (CD8+), функциональной активности КонА-индуцированных Т-супрессоров, содержание DR+ и CD3+DR+ Лф. В свою очередь, у них повышена экспрессия молекул CD4 на поверхности Лф, указывающая на более высо-. кий потенциал активности Т-хелперов (CD4+ Лф) CJaneway С.А., 1962]. Повышена спонтанная и ЛПС-стимулированная продукция ИЛ-1, который необходим для пролиферации Th2-клеток (в отличие от Thl) [Romagnanl S., 1994]. Увеличенный ответ в РБТЛ на анти-СОЗ МКАТ, иммобилизованные на пластике, может объясняться повышенным проли-феративным ответом Th2-клеток при большей продукции ИЛ-1 [Abbas A. et al., 19913. Сниженные величины ответа Лф в РБГЛ на субоптимальную дозу ФГА и продукции ИЛ-2, по-видимому, связаны с повышенным содержанием аллерген-специфичных Т-клонов у больных с " HLA-B7 и DR2, которые слабо отвечают на эту дозу ФГА (она может

быть слишком высока), или же большей функциональной блокадой сигнала черев молекулы CD2 и TCR/CD3-комплекс [Romano М., et al., 1993].

Подобная интерпретация применима и для объяснения сниженного ответа на ФГА в тоЛ же или более высокой дозах у больных в фазе обострения, имеющих HLA-маркеры заболевания. У этих же больных увеличено содержание активированных Т-Лф (CD3+DP+), а также DQ+ и DP+ Лф, снижено количество CD2+ Лф, супрессорных клеток фенотипа CD8+ и CD8+CD29~ (популяция, аналогичная супоессорным эффекторным клеткам CD8+CD45RA +), снижена экспрессия молекул CD8, указывающая на уменьшенный потенциал активности Т-супрессоров (CD8+ Лф) [Lustgarten J.et al., 1991].

У больных в обострении, имеющих HLA-маркеры поллиноза, повышено содержание контрасупрессорных клеток (0D8+VV+) и активированных В-Лф (CD20+CD5+). Для них свойственно повышенное содержа ние Т-клеток-киллеров (CD8+CD29+), NK-клеток (CD16+) и цитотокси-ческой актив"ости последних. Необходимо отметить, что CD8+CD29+. Лф при дефиците продукции и рецепции М-2, свойственных больным поллинозом, как указывалось выше, могут выполнять функцию хелпе-ров для антителопродукции В-Лф. Такую функцию могут выполнять и CD16+ Лф [Simonelli С. et al., 1992]. Одним из предположений, объясняющих повышенное содержание и активность NK-клеток у данной группы больных, может служить более высокий синтез ИЛ-4, который усиливает пролиферацию и дифференцировку определенных типов незрелых NK-клеток [Hayakawa К. et al., 1991]. Кроме того, повышенное содер-иание Т-киллеров и NK-клеток у данной группы больных с наиболее активным процессом антителопродукции может служить механизмом обратной регуляции in vivo за счет киллинга АПК [SimoneIii С. et al., 1992].

Разнонаправленные уровни экспрессии HLA-молекул DR и DQ на Лф ( за счет В-Лф) свидетельствуют о наличии локус-специфической регуляции экспрессии генов, их кодирующих. Снижение экспрессии DR-молекул на моноцитах может быть связано г повышенной продукцией ИЛ-10 Th2-клетками у больных с маркерами поллиноза, понижающего экспрессию HLA-молекул класса И на моноцитах.

Сцепленный с HLA-маркерами поллиноза повиленный уровень экспрессии на В-Лф DQ-молекул, участвующих в патогенезе заболевания, благодаря их высокой плотности на В-Лф у всех больных в фазе обострения (см. табл.7), свидетельствует о ватагой роли данных молекул в антигенпрезентирующей и сигнальной функции. Последняя, в

свою очередь, регулирует уровень экспрессии данных молекул, повыпал эффективность презентации, уменьшая количество антигена, необходимого для активации Т-Лф [Scholl P.R., GehaR.S., 1994], способствуя их дифференцировке в ThZ-клетки.

Между повышенной экспрессией DQ-' 'олеР.ул на В-Лф, повышенным содержанием CD5+ В-Лф и контрасупрессорных клеток (CD8+VV+) у больных в обострении поллиноза с HLA-фенотипом В7 и DR2, по-видимому, шеется функциональная связь. В экспериментальных моделях показано,' что для индукции контрасупрессорных клеток необходимы CD5+ В-Лф, презентируклцие антиген посредством 1-А+ молекул (аналог DQ-молекул у человека) контрасупрессорным клеткам [Bra-ley-Mullen Н., 1990]. CD8+VV+ клетки являются хорошими продуцентами ИЛ-5 (но плохие - ИЛ-2) [Braun-Elwert L., et al., 1991]. Продуцирующие ИЛ-б CD8+ Лф относятся к Т2 типу CD8+ Лф, которые блокируют развитие Thl CD4+ клеток, благоприятствуя активации и экспансии Th2 CD4+ клеток [Кешепу D. et al., 1994].

Таким образом, в результате исследований выявлена связь HLA-маркероа поллиноза - антигенов В7 и DR2, с патогенетически важными параметрами иммунного статуса у здоровых лиц и больных поллинозом в стадиях ремиссии и обострения заболевания, свидетельствующая об участии в патогенезе поллиноза HLA-сцепленного генетического контроля иммунного статуса. Генетическая регуляция проявляется не только на уровне интегральных параметров, но и на более тонких уровнях: экспрессии HLA-антигенов I и II классов и CD-антигенов на иммунокомнетентных клетках,. продукции цитокинов, содержания регуляторных и эффекторных субпопуляций Лф, продукции IgE in vitro, ответа Лф на митогенные стимулы при разных условиях культивирования и др.

В ряде случаев обнаружена изолированная от другого HLA-антигена связь В7 (в 237. случаев всех связей) или DR2 (в 177.) с ИП, свидетельствующая об участии в генетическом контроле не всего ансамбля генов, входящих в гаплотип B7-DR2-DQ1, а отдельных, сцепленных с В7 и DR2 генах. Вероятно и прямое участие генов В7 и DR2 и их продуктов в контроле иммунного статуса, о чем свидетельствуют доминантный тип наследования В7-ассоциированного гена предрасположенности к амброзийному поллинозу и ассоциация только HLA-B7 с поллинозом в грузинской популяции.

Пример поллиноза показал,что HLA-сцепленный генетический контроль иммунного статуса играет существенную роль не только как фактор предрасположенности у здоровых лиц', но и как фактор, уп-

равняющий ее реализацией в патогенезе заболевания. Генетически контролируемые особенности иммунного статуса, сцепленные с Ю- маркерами поллиноза, способствуют накоплению в популяции больных данных НЬА-антигенов, выступая в качестве механизма, объясняющего связь НЬ* с болезгъю.

ВЫВОДЫ

1. Генетический контроль иммунного статуса человека сцеплен с системой НЬА.

2. НЬА-сцепленный контроль иммунного статуса является существенным механизмом, объясняющим связь НЬА с заболеваниями.

3. Охарактеризован НЬА-генетический профиль русской, узбекской. корейской, бурятской и грузинской популяций.

4. Большинство исследованных иммунологических параметров связано с НЬА-фенотипом здоровых лиц во всех обследованных популяциях .

5. Межпопуляционные различия в связях НЬА-датигенов с параметрами иммунного статуса обусловленны различиями НЬА-генетического профиля популяции.

6. НЬА-маркерами особенностей имму'-ного статуса являются НЬА-антигены, входящие в гаплотипы, свойственные конкретной популяции. Каждая из обследованных популяций имеет свой уникальный набор ЬЬА-маркеров, характеризующих уровни одних и тех ке параметров иммунного статуса.

7. Общим свойством выявленных ассоциаций НЬА-аллелей с пол-линозом, атонической бронхиальной астмой и аллергическим контактным дерматозом от воздействия антибиотиков является антиген-нес-пецлфичность маркируемого НЬА-аллелями признака - предрасположенность к поливалентной сенсибилизации.

8. НЬА-маркеры поллиноза и аллергии к домашней пыли (пылевой астмы) одновременно служат маркерами патогенетически важных особенностей иммунного статуса больных. Это же свойство обнаружено и в грузинской популяции, с присущими ей ША-маркерами атопической бронхиальной астмы у детей.

9. Ряд впервые выявленных особенностей иммунного статуса у больным полдинозом в фазах ремиссии и обострения вносит новые сведения об иммунологических звеньях патогенеза заболевания.

10. На примере поллиноза доказано, что сцепленный с Н^-маркерами заболевания генетический контроль особенностей иммунного

статуса играет существенную роль не только как фактор предрасположенности у здоровых лиц, но и как фактор, управляющий ее реализацией в патогенезе заболевания.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТГМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Ведерников A.A., Яздовский В.В., Далакишвили С/М..Алексеев . Л.П., Микадзе Н.Г. Антигены HLA у имеретинской популяции // Актуальные вопросы геронтологии и гериатрии. Матер. 2-й Респ.конф.-Тбилиси, 1982.- С.331-332.

2. Алексеев Л.П., Полянская И.С., Яздовский В.В.. Бачурин П.С., Остроумов А.И., Бунатян К.А. Подходы к выявлению ~знов иммунного ответа человека при анализе ассоциаций HLA и болеэней // Актуальные вопросы иммунологии, аллергологии и молекулярной биологии. Тез,докл. 7-й Северо-Кавказской конф,- Краснодар, 1983.-С.123-124.

3. Яздовский В.В., Алексеев Л.П., Остроумов А.И., Ведерников A.A., Зыков Ю.ЕР. Анализ HLA-ассоциаций у больных с амброэийным поллинозом // Актуальные проблемы аллергологии и иммунологии. Тез.докл. 4-й конф. аллергологов и иммунологов респ. Ср.Аэии и Казахстана.- Душанбе, 1983.- С.381-382.

4. Алексеев Л.П., Яздовский В.В. Изучение распределения HLA-антигенов при аллергии к домашней пылч // Там-же.- С.131-132.

5. Яздовский В.В., Алексеев Л.П., Остроумов А.И., Ведерников A.A., Зыков Ю.В., Гигенгагили Т.Г. HLA и амброзийный поллиноз // Иммунология.- "<984.- N 4.- С.25-29.

6. Яздовский.В.В., Алексеев Л.П., Порошина Ю.А., Серова Л.Д;, Тередкова E.B. HLA-ассоциации при поллинозе // Рук.деп. ред. "Сов. Мёд." во ВНИИМИ МЗ СССР, N 7861-84, МРЖ, раздел XXI.-1984.- N 10.- N публ.1685. (И С.)

7. Земсков В.М., Барсуков A.A., Алексеев Л.П..Яздовский В.В.. Бевносенко С.А., Могиоева Й.В. Функциональная активность нейтро-филов здоровых доноров и ее свяэь с системой HLA // Современные методы иммунотерапии. Тез.докл.науч.конф.- Ташкент, 1984.- С. 3435. '

8. Яздовский В.В., Алексеев Л.П., Ульянова Л.И., Порошина Ю.А., Резник И. Б., Нурдолотова Ш.К. HLA-фенотип и ..екоторые показатели иммунного статуса при атопии // Там же.- С.111-112.

9. Дмитриева Н.Г., Яздовский В.В., Бачурин П.С., Понякина И.Д., Пол,нин А.И., Алексеев Л.П. Генетический контроль активное-

ти естественных клеток-киллеров у человека // Там же.- С.265-266.

10. Петров Р.В., Алексеев Л.П., Яэдовский В.В., и др. Комплексные параметры иммунной, гормональной и ферментативной систем организма у здоровых людей 18-28 лет: Методические рекомендации КЗ РСФСР.- М., 198'

11. Яэдовский В.В., Алексеев Л.П., Порошина Ю.А., Серова Л.Д. Особенности распределения НЬА-антигенов при поллинозе и у больных с аллергией к домашней пыли // Клиническое значение лейкоцитарных антигенов.- Л., 1984.- С.86-93.

12. Яэдовский В.В., Алексеев Л.П., Ульянова Л.И., Порошина Ю.А. Сцепленная с системой НЬА предрасположенность к развитию поллиноза и аллергии к домашней пыли и активность неспецифических Т-клеток-супрессоров // Препараты и методы для лечения и диагностики аллергии.- М., 1985.- С.41-49.

13. Махатадзе Н.И., Меунаргия В.В., Микадзе Н.Г., Далакишвили С.М., Яэдовский в.В., Полянская И.С. Распределение Н1А-антигенов среди имеретинцев и аджарцев // Сообщения АН ГССР.- 1985.- Т.117, N 1.- С.121-124.

14. БогушП.Г., Бачурин П.С., Яэдовский В.В., Шахтмейстер И.Я., Алексеев Л.П. НЬА и аллергические контактные дерматозы у лиц, занятых в производстве антибиотиков // Вёстн.дерматол. и- ве-нерол.- 1985,- N 11.-. С. 54-56.

15. Соколова Т.е., Нурдолотова Ш.К., Резник И.Б., Яэдовский В.В. Маркеры атопии при поллинозах у детей и их значение для превентивной терапии // Тез. докл.12 съезда педиатров Эстонской ССР.. - Таллин, 1985.- Т.2.- С.48-49.

16. Махатадзе Н.И., Яэдовский В.В. НЬА-маркеры клеток в норме и при системной красной волчанке в грузинской популяции // IV Всео. межуниверс.конф. по "Биологии клетки". Труды.- Тбилиси, 1985.- Часть 2.- С.442-444.

1.. Махатадзе Н.И., МеунаргияВ.В., Яэдовский В.В., Чагиашвили Ц.Н. Частота НЬА-генов и гаплотипов среди грувин // Известия АН ГССР (серия биологическая).- 1986.- Т.12, N С.135-139.

18. Соколова Т.С., Михайлова З.М., Резник И.Б., Нурдолотова 111.К., Яэдовский В.В., Бачурин П.С. Клинико-иммунологическая характеристика поллинозов у детей // Вопр. охр.лы материнства и детства.- 1986.- N 3.- С.11-14.

19. Алексеев Л.П., Хаитова Н.М., Яэдовский В.В., Полунин А.И., Дмитриева Н.Г. НЬА-ассоциированный генетический Контроль активности естественных киллеров в двух расах // Макромолекулы и

функционирование клетки. Тев.докл.Респ.конф.- Ереван, 1986.- С.6.

20. Махатадзе Н.И., Яздовский В.В., Каландадзе Н.Г. Ю маркеры системной красной волчанки среди грузин // Респ. слет молодых медиков. Тез. докл.- Тбилиси, 1986.- С.397.

21. Алексеев Л.П., Махатадзе Н.И , ЯЭдовский В.В., Меунаргия

B.В. Лопуляционное исследование частот НЬА-генов и гаплотилов у лиц грузинской национальности // Иммунология.- 1986.- Мб.- С. 1517.

22. Алексеев Л.П., Хаитова Н.М., Яздовский В.В., Дмитриева Н.Г., Полунин А.И., Ярцев М.Н. НЬА и сниженные показатели иммунного статуса у европеоидов и ориентов // Иммунодефициты и аллергия. Тез.докл. Всес. симп. с межд. участием.- М., 1986.- С.7-8.

23. Яздовский В.В., Алексеев Л.П., Серова Л.Д. Н1Л-сцепленный генетический контроль предрасположенности к поллинозу (семейные исследования) // Иммунологические методы диагностики и терапии различных патологических состояний.- Л., 1986,- С.52-59.

24. Алексеев Л.П., Яздовский В.В., Полянская И.С., Хаитова Н.М. Взаимосвязь' Н!_А-антигенов с иммунным статусом у жителей различных регионов СССР // Методология, организация и итоги массовых иммунологических обследований. Тез.докл. Всес. конф.- М.-Ангарск, 1987.- С.37.

25. Хаитова Н.М., Яэдовский В.В. Особенности распределения НЬА-антигенов среди лиц узбекской национальности // Тез. докл. V Съезда Всес. общ. генет. и селекц. им. Н.И.Вавилова.- М., 1987.-Т.2.- С.119-120.

26. Махатадзе Н.И., Яэдовский В.В., Меунаргия В.В., Каландадзе Н.Г. НЦ\ у больных системной красной волчанкой грузинской на-.зональности // Известия АН ССР (серия биологическая).- 1987.-Т.13, N 6.- С.416-418.

27. Яздовский В.В., Резник И.В., Бачурин П.С., Алексеев Л.П. Система ЛЬА и предрасположенность к поливалентной сенсибилизации при атопических заболеваниях у детей // Педиатрия.- 1988.- N 2.-

C. 110-111."

28. ГунияМ.Г., Полянская И.С., Яздовский В.В. Исследование распределения ни-ОЙ-антигенов в грузинской популяции // Сабчота медицина.- Тбилиси,-'1988.- Т.1.- С.62.

29. Хаитова Н.М., Алексеев Л.П., Яздовский В.В., Полунин А.И., Дмитриева Н.Г., Кадырова Р.Т. НШ и некоторые показатели иммунореактивности у здоровых лиц узбекской национальности // Иммунология.- 1988.- N 2.- С.63-67.

30. Алексеев Л.П., Хаитова Н.М.,. Яздовский В.В. Ассоциированная с HLA предрасположенность к заболеваниям и некоторые механизмы ее реализации //Вестник АМН СССР.- 1088.- N б.- С.30-38.

31. Исхаков А.Т., Яздовский В.В., Алексеев Л.П., Крехнов В.В. Взаимосвяаь антигенов HLA с токазателями иммунного статуса здоровых // Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях. Tea. докл. IX межинст. науч. конф.- Челябинск, 1988.- С.53.

32. Карселадве Р.Л., Яздовский В.В., Гермесашвили Д.Д., Бери-ашвили Н.Д., Масхарашвшш Т. Взаимосвязь между антигенами системы HLA и иммунологическими показателями при бронхиальной астме у детей // Матер. VI съезда детских врачей Грузии.- Тбилиси, 1987.-Т.2.- С.97-99.

33. Исхаков А.Т., Алексеев Л.П., Бачурин П.С., Яздовский В.В. Коиплементаависишй микролимфоцитолиз для количественного анализа субпопуляций лимфоцитов // Иммунология.- 1988.- N 6.- С.75-76.

34. Карсеиадве Р.Л., Яздовский В.В., Чурадзе Т.А. Жоржолиани Л.Д.Иммуногенетические маркеры и показатели иммунного статуса у детей с бронхиальной астмой // Кммуногенеткческие аспекты аутоиммунных заболеваний и вторичных шмунодефицитов человека. Тез.докл. I Всес. симп.- Новосибирск, 1989.- С.30-31.

35. Алексеев Л.П., Яздовский В.В., Полянская И.С., Хаитова Н.М, Механизмы HLA-ассоциированной предрасположенности к заболеваниям // I Всес.1ымунол. Съезд. Тез.докл.- М., 1989.- Т.2.- С.9.

36. Чурадзе Т.А., Карселадве Р.Л., Яздовский В.В., Бедешадэе М.А., Жоржолиани Л.Д. HLA-фенотип и некоторые показатели иммунного статуса при атопичёской бронхиальной астме у детей грузинской национальности // Там же,- С.373.

37. Полянская И.С., Яздовский В.В., ГунияМ.Г., Киласония Л.О. HLA-DR антигены в грузинской популяции // Извести;. АН ГССР (серия биологическая).- 1989.- Т.15, N 5.- С.340-344.

38. Alexeev L.P., Yazdovsky V.V., Polyanskaya I.S., Khaltova N.M. Mechanisms of HLA-associated predispc~itlon to diseases // Abstr. of 7-th Internat. Congress of Inmunology.- Berlin (West), 1989.- P.85.

39. Хаитов D.M., Алексеев Л.П., Яадовскм В.В. Молекулярные механизмы функционирования генов HLA и предрасположенность к ва-болеваниям // Тез.докл. I Всес. конф. "Молекулярные механизмы развития инфекционных заболеваний".- Звенигород, 1990,- С.142.

40. Болдырева М.Н., Алексеев Л.П., Вылегханина Т.Г., Яздовс-

icnft В. В. Сравнительный анализ пролиферативного ответа мононукяеа-ров крови на митогены // Лаб. дело.- 1990.- N 8.- С.54-58.

41. Alexeev L.P., Yazdovsky Y.V. HLA-assoclated genetic control of some lmmunoreactlve indices in normal and pathologic state // European federation of immunological societies 10-th meeting.

- Edinburg, 1990,- Abstr.19-1.

•12. Хаитов P.M., Алексеев Л.П., Хаитова H.M., Яздовский В.В. Ихбиогенетический профиль узбекской популящш // Иммунология. -

1990.-N 5-.- С.12-14.

43. Болдырева М.Н., Алексеев Л.П., Вылегяанина Т.Г., Яздовский В.В., Крехнов Б.В. Динамика пролиферативного ответа мононук-леаров периферической крови на митогены // Иммунология,- 1990.-N 5.- С.59-61.

44. Хаитов P.M., Алексеев Л.П., Яздовский В.В., Бачурин П.С., Богуш П.Г. Иммуногенетические маркеры профессионального риска развития аллергических контактных дерматозов при воздействии антибиотиков // Иммунология.- 1990.- II 6.- С.45-47.

45. Alexeev L.P., Yazdovsky V.V. Genetic predisposition of allergic diseases // Intern. Symp. of Allergy and Clin. Immunol.-"Regulation aid clinical significance of IgE".- Moscow, 1990.

- P. 19..

46. Prozorovsky U.S., Kremlov S.G., Gushchin I.S., Yazdovsky V.V. Effect of monoclonal antibodies against T-cell surface antigens on IgE synthesis by mononuclear cell from.allergic patients // Ibid.- P.56.

47. Alexeev L.P., Yazdovsky V.V. HLA-associated mechanisms of immunoresponse genetic regulation in normal and pathological state // Abstr. of Constituent Congress International society for pathophysiology.- Moscow, 1991.- P.207-208.

I 48. Яздовский В.В. Система HLA // Гематол. и трачсфуэиол.-

1991.- Ц 7.- С.30-35.

49. Сидельцева Е.В., Алексеев Л.П., Яздовский В.В. Иммуногенетические исследования западной бурятской популяции по антигенам I класса HLA-системы //Проблемы экологии человека в Сибири. Тез.докл.регион.конф. Новокузнецк, 1990.- Т.4.- С.30-31.

50. Хаитов P.M.i Алексеев Л.П., Яздовский В.В. Ассоциированный с HLA генетический контроль некоторых показателей иммунореак-гнвностц в норме и патологии // Методологические аспекты современной иммунологии.- Новосибирск, 1991.- С.117-129.

" 51. Прозоровский Н.С., Кремлев С.Г.,' Гущин И.С., Яздовский

B.В. Модулирующее влияние моноклональных антител к некоторым поверхностным антигенам Т-клеток на синтев IgE in vitro мононукле-арными клетками Сольных аллергией // Иммунология.- 1991.- N 5,-

C.54-56.

52. Khaitov R.M., Alexefi* L.P., Yazdovsky V.V. HLA and polli-nosls in Russian and Georgian populations // XIV Intern. Congress of Allergology and Clin. Immunol.- Kyoto, 1991,- P.304.

53. Khaitov R., Alexeev L., Serova L., Polyanskaya I., Yazdovsky V. HLA-antigen freguencles associated with peculiarities of immune status in 5 ethnic groups of USSA // 11-th Intern. Histocompatibility Workshop and Conference. - Yokohama, 1991. - P.54.

54. Алексеев Л.П., Яздовский В.В., Сидельцева Е.В. Распределение HLA-антигенов в бурятской популяции // Тез. докл. I Съезда иммунологов России.- Новосибирск,1992.- С.11.

55. Алексеев Л.П., Яздовский В.В., Рузыбакиев P.M., Щербухиь В.В. HLA-антигены в корейской популяции // Там же.- С.11-12.

56. Side'tseva E.V., Sideltsev V.V., Alexeev L.P., Yazdovsky V.V., Zarlpov F.K., Uralev B.B. HLA-antigen distribution in aboriginal population in the Eastern Siberia // 8-th Intern. Congress of Immunology.- Budapest, 1922.- P.305.

57. Яздовский B.B., Дмитриева Н.Г., Алексеев Л.П., Динамика пролиферативного ответа лимфоцитов на митогенные лектины и ан-ти-CD3-антитела в культурах цельной крови и выделенных клеток у здоровых людей // Иммунология.- 1994.- N 5.- С.21-24.

58. Яздовский В.В. HLA и аллергические заболевания // Пульмонология.- 1S94.- N 4.- С.6-19.

Участок множительной техники ОНЦ РАМН

Поди, к печати \Ъ.\2.<)5 Заказ 188 Тираж 100 эк