Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Экспериментальное изучение гастропротекторной активности комбинированной лекарственной формы на основе масла облепихового

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ГАСТРОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТИ КОМБИНИРОВАННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ НА ОСНОВЕ МАСЛА ОБЛЕПИХОВОГО

14.00 25-ФАРМАКОЛОГИЯ, КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ

АВТОРЕФЕРАТ ДИССЕРТАЦИИ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

ВОЛГОГРАД 2008

003172195

НА ПРАВАХ РУКОПИСИ

ЗАЦЕПИНА ЕЛЕНА ЕВГЕНЬЕВНА

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ Г АСТРОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТИ КОМБИНИРОВАННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ НА ОСНОВЕ МАСЛА ОЕЛЕПИХОВОГО

14Л025- ФАРМАКОЛОГИЯ, КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ

АВТОРЕФЕРАТ ДИССЕРТАЦИИ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

ВОЛГОГРАД 2008

РАБОТА ВЫПОЛНЕНА В ГОСУДАРСТВЕННОМ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОМ УЧРЕЖДЕНИИ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "ПЯТИГОРСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ АКАДЕМИЯ ФЕДЕРАЛЬНОГО АГЕНСТВА ПО ЗДРАВООХРАНЕНИЮ И СОЦИАЛЬНОМУ РАЗВИТИЮ"

Научный руководитель Официальные оппоненты

Веду ни я организация

доктор биологических наук, профессор СЕРГИЕНКО Аэлита Валерьевна доктор медицинских наук, ЧЕРНИКОВ Максим Валентинович доктор медицинских наук,профессор БАТУРИН Владимир Александрович Ростовский государственный медицинский университет, г. Ростов-на-Дону

Защита состоится

[АЮН^ 2008 г в °° часов на заседании диссертационного совета Д 208 008 02 при Волгоградском государственном медицинском университете

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Волгоградского государственного медицинского университета Автореферат разослан "_"_2008г

Ученый секретарь диссертационного совета Доктор медицинских наук,

профессор А Р Бабаева

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ

Гастропатии - патология желудка, которая включает и язвенно-эрозивное поражение слизистой Язвенная болезнь по определению ВОЗ, (ulcus ventriculi et duodenipepticum, morbus ulcerosus) - общее хроническое рецидивирующее заболевание, склонное к прогрессиро-ванию, с полициклическим течением, характерными особенностями которого являются сезонные обострения, сопровождающиеся возникновением язвенного дефекта в слизистой оболочке желудка или двенадцатиперстной кишки, и развитие осложнений, угрожающих жизни больного Одна из причин гастропатии - нарушение баланса между состоянием факторов агрессии и защиты (ЗевингК-Фр, 1996, А В Калинин, 2001, И В Маев и др , 2003) Особенностью течения язвенной болезни является вовлечение в патологический процесс других органов пищеварительного тракта (В Т Ивашкин, 2005г) Полиэтиологический характер язвенного поражения диктует необходимость полимодальной фармакотерапии данного патологического процесса Эго могут обеспечить фармакологические средства многокомпонентного состава, содержащие в одной лекарственной форме ингредиенты из разных фармакологических групп Важными этиологическими факторами являются стрессовые нагрузки, использование биотропных высокоактивных соединений (бытовой химии, пищевых добавок, лекарственных средств), что приводит к нарушению нормального эндо-экологического баланса, поливалентной сенсибилизации организма, доминированию хронических воспалительных процессов в патологии разных органов и систем и в первую очередь, слизистой оболочки желудка Все эти интегральные причины способствуют тому, что в нашей стране язвенно-эрозивное поражение желудка и 12-перстной кишки, как в виде самостоятельного заболевания, так и сопутствующего, затрагивает все слои населения - от педиатрических пациентов

до гериатрических больных (В Т Ивашкин, Т П Лапина, 2007)

Большое значение придается повышению сопротивляемости га-стродуоденальных слизистых оболочек Сочетание сильнодействующих синтетических компонентов с ингредиентами растительного состава способно обеспечить высокую фармакотерапевтическую активность при минимизации побочных токсических эффектов, что особенно важно в случае длительного приема лекарственного препарата.

Актуальность настоящих исследований связана с необходимостью создания отечественных гастропротекторных средств, комбинированного состава сочетающие природные и синтетические компоненты с разными фармакодинамическими параметрами По результатам предпочтений клинических гастроэнтерологов, в том числе в детской практике, наиболее эффективные препараты, имеющие перспективный спрос и благоприятную конъюнктуру были включены в рациональный комплекс, который и стал объектом для экспериментальных исследований В настоящее время, в стандарт лечения входят метронидазол, де-нол, антибиотик и позже присоединение блокаторов протонной помпы (Лабенз, Адамек 1994) Несмотря на то, что в России часто встречается устойчивость к метронидазолу, в то же время метронидазол это единственный препарат, оказывающий бактерицидное действие на бактерию в желудке (В Т Ивашкин, А А Шептулин, 2006)

В Пятигорской фармацевтической академии разработаны субстанции на основе концентрата облепихового масла В состав комбинированной лекарственной формы входит концентрат облепихового масла, антисекреторный npenapai ранитидин, антимикробное средство метронидазол, резорбтивный ангацид магния оксид, цитопротектор метилметионина сульфоний Особенность и фармакодинамический диапазон комплексного состава композиций объясняется сочетанием компонентов натурального происхождения и сишстическими соединениями Состав разработан профессором Е Н Вергейчиком (кафедра

-4-

фармацевтической химии) и предназначен для профилактики и лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки

Цель работы

Изучение гастропротекторной активности комбинированной лекарственной формы на основе масла облепихового на экспериментальный ульцерогенез, секреторную и двигательную активность желудка и кишечника.

Задачи исследования

1. Провести специфическое изучение комбинированных лекарственных форм на основе масла облепихового в виде 30 вариантов композиции с ингредиентами синтетического и растительного происхождения для определения наиболее эффективного гастропротек-торного средства Определить безопасность применения (острая токсичность, раздражающее действие),

2 Изучить защитное действие наиболее эффективного гастропротек-торного средства (комбинированная лекарственная форма на основе масла облепихового) на слизистую оболочку желудка животных и 12- перстной кишки крыс на различных моделях экспериментальных язв стероидно-этаноловая, ишемическая, геморрагическая,

3 Оценить воздействие комбинированной лекарственной формы с лучшим фармакотерапевтическим эффектом на основе масла облепихового на секреторную функцию желудка,

4 Исследовать влияние изучаемой комбинированной лекарственной формы на основе масла облепихового на моторно-эвакуаторную функцию желудочно-кишечного тракта

Научная значимость и новизна работы

1 Впервые предложен состав комбинированной лекарственной

формы на основе концентрата масла облепихи, обоснована возможность комбинирования в ней компонентов из разных фармакологических групп с разным механизмом действия для оптими-

-5-

зации гасгропротекторного эффекта Из 30 вариантов математически смоделированных и экспериментально обоснованных субстанций была выбрана и отправлена на патент одна комбинация

2 Выявленное впервые противоязвенное действие комбинированной лекарственной формы на основе масла облепихового, установлено ее влияние на могорно-эвакуаторную активность ЖКТ

3 Впервые экспериментально показано, что оригинальная комбинированная лекарственная форма оказывает выраженное полимо-далыюе защитное действие на слизистую оболочку желудка уменьшает количество и общую площадь язвенных поражений, снижает отечность и воспаление слизистой оболочки желудка, вызванных различными повреждающими агентами

Положения, выносимые на защиту.

1 Комбинированная лекарственная форма на основе масла облепихового оказывает выраженное защитное действие на слизистую оболочку желудка животных на различных моделях язвенного поражения (стероидно-этаноловая, резерпиновая, аспириновая язвы, пептическая язва у крыс с перевязанным привратником)

2 Комбинированная лекарственная форма на основе масла облепихового обеспечивает полимодальный механизм гастропротек-торного действия и затрагивает все звенья патологического процесса регенеративный компонент действия, антимикробное и влияние на секреторную и двигательную активность ЖКТ

3 Комбинированная лекарственная форма на основе масла облепихового устраняет нарушение тонуса гладкой мускулатуры, снижает агрессивные свойства желудочного сока

Научно- практическое значение работы

Проведено специфическое изучение гастропротекторной активности комплексной лекарственной формы, содержащей облепихового

масла в комбинации с фармакологическими средствами разных фар-

-6-

макологичесьих групп антацид (магния оксид), антимикробное средства (метронидазол), метаболический peienepanT (метилметионина сульфоний), антисекреторный препарат (ранитидин) Доказанная эффективность сочетания синтетических компонентов с составляющими растительного происхождения позволяет рекомендовать комбинированную лекарственную форму на основе масла облепихового для терапии язвенных процессов желудочно-кишечного тракта

Внедрение результатов исследования в практику

Результаты диссертационного исследования внедрены в учебный

процесс кафедры клинической фармакологии Ставропольской государственной медицинской академии, фармакологии Пятигорской государственной фармацевтической академии, базового санатор-но-клиническо! о реабилитационного центра Виктория, г Ессентуки, клиники НИИ курортологии и физиотерапии, г Ессентуки

Апробация и публикация результатов исследования

Основные положения диссертационной работы доложены на XIV

Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство", (г Москва, 2007г), на 63, 64 ежегодной конференции по фармации, фармакологии и подготовке кадров (г Пятигорск, 2007, 2.008гг), На XI Конгрессе иммунологии и аллергологии (г Москва 2007г ) На конференции врачей Юга России (г Ессентуки) По теме диссертации опубликовано 9 научных работ

Связь диссертационного исследования с научно-исследовательскими программами

Диссертационная работа выполнена в Пятигорской государственной фармацевтической академии в соответствии с планами научно-исследовательских работ (№ госрегистрации 01 2001 12168)

Объем и структура диссертации

Работа изложена на 150 спр текста компьютерного набора, содержит 4 главы, иллюстрирована содержит 33 таблицы, 25 рисунков

Состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, общего заключения и выводов Список цитируемой литературы содержит 93 источника отечественных авторов и 57 иностранных источников

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объекты исследования беспородные белые мыши, белые крысы, морские свинки, эмбрионы белых кур породы Leggron Оценку раздражающего действия проводили тестом на хорион-аллантоисной оболочке куриного эмбриона, НЕТ - CAM test и на слизистой оболочке глаза морских свинок, после чего делали окончательное заключение Результаты раздражения конъюнктивы млекопитающих регистрировали в баллах по 5-балыюй шкале, согласно рекомендациям П Михайлова (1985 г) Контролем служил второй глаз животного Изучение острой токсичности проводили согласно "Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ" (под редакцией В П Фисенко) с определением LD50 Критериями оценки острой токсичности служили картина интоксикации и выживаемость животных в течение 48 часов Дальнейшее наблюдение проводили в течение 2* недель, причем в первые 6 часов после введения мыши находились под непрерывным наблюдением При изучении острой токсичности комбинированную лекарственную форму на основе масла облепихового вводили в разных дозах. Для определения нагрузки на организм животного максимальным объемом жидкости, проводили параллельные исследования с использованием физиологического раствора в эквивалентном объеме

Острое поражение желудка крыс стероидно-этаноловый ульце-рогенез (Зупанец И Ь, 1993г), подострое поражение желудка крыс асиириновый ульцерогенез (Лазарева НВ, 1964г, Фисенко ВП, 2000i ), резерпиновый ульцерогенез желудка мышей (Замощина Г А ,

1997г, Меньшикова В В , 1987г), лигирование привратника желудка и дуоненума крыс (Н Shay et al ,1945г) оценивали по общему количеству язв и их средней площади Измерение размеров и площади язв производили с точностью до 0,01мм, с помощью компьютерной программы Intel(R) Play(tm) QX3(tm) Computer Microscope (цифровое фотографирование) Животных рандомизировапи на экспериментальные группы опытные группы, контроль, группы сравнения

Изучался гастр о п р от е кто р н ы й эффект субстанций по сравнению с нелеченными животными (контроль, физиологических раствор/раствор Рингера-Локка) и с группами сравнения (облепиховое масло жидкое, ранитидин, метронидазол) Влияние комбинированной лекарственной формы на основе облепихового масла на секреторную функцию желудка изучали на белых беспородных крысах с литерованным привратником Исследуемую комбинированную лекарственную форму на основе масла облепихового и препараты сравнения вводили за 1 ч до операции Определяли массу желудка, обьем желудочного сока, его кислотность (на рН-метре-340), количественное содержание пепсина оценивали по протеолитической активности Состояние моторной функции желудка и кишечника изучено на беспородных белых мышах массой 20-24 г методом «меток» с использованием в качестве красителя 2% взвесь активированного угля (Лазарева НВ, 1964г, Меньшикова ВВ, 1987г) Проводили определение кислотности содержимого (по методу Тица Н У , 1986г), массы желудка, микроскопии организованного осадка Субстанции изучали в разных дозах. Экспериментальные данные обрабатывались адекватным классическим методом, принятым для парного сравнения по методу t-Student результаты считались достоверными при р<0,05 Расчеты результатов проводились в пакете компьютерной программы Microsoft Excel Ver 9,2000 (Макарова, Н В 2002)

ОСНОВНЫЕ СЕРИИ ЭКСПЕРИМЕНТОВ

Таблица 1

Цель эксперимента Методы исследования Кол-во ЖИВО ГШ IX, с ределеннй или обра цов

1 2 3

ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЗОПАСНОСТИ ПРИЛШШШЯ

Изучение общетоксического действия комбинированной лекарственной фор иа основе диофилизата облепихового масла 1 раздражающее действ композициям • ш situ ХЕТ КЛМ тест, • in vivo на коныонктт мтеконитающих 2 Изучение острой токсн ности лиофшшзаза облепихи l витамином U и М 60 куриных эмбрио! -t 3 контроль = 63 к; риных эмбриона, 12 морских свинок 180 мышей

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ЛК1ИВНОС ГИ ВЛИЯНИЯ КОМБИНИРОВАННО!! ЛЕКАРС7 ВЕПНОЙ ФОРМЫ НА ОСНОВЕ ОБЛЬПИХОВО МАСЛ А НА РЕГЕНЕРАТИВНОЕ И ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ЖКТ

Изучение ыстропротекторяой акта вн сти комбинированной лекарственной формы на основе лпофнлизата облепи хопого масла 1 Стероидно - лтаноловая язва 180 крыс +30 прспа раты сравнении + 6 контроть = 216 крыс

2,Аси)|р]!110йан нзва 60 крьк + 30 препарат ы сравнения + 6 контро ГЦ, = 96 крыс

3 Рсзерпиновля язва 4 Ишемическая язва }8 мышеи + 30 преп раты (.равнения + 6 контроль = 54 мыш 18 крыс + 30 крыс и параты сравнения т контроль = 54 крыс

Влияние на секреторную активность ЖКТ Влияние субстанции на х рактер и количество сек] шш желудка 54 крысы

Влияние на моторно-эвакуаторную лк знвиооь ЖКТ Влияние на тонус гладко мускулатуры кишечника 580 мышеи + 30 нре параты сравнения контроль - 216 мьи

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Теорстичееки обоснованный и математически смоделированный

качественный и количественный состав комбинированной лекарственной формы на основе масла облепихового способен обеспечить многостороннее воздействие на все звенья патологического процесса, проявляя потенцированный синергизм входящих компонентов из разных фармаколо1 ических групп и с разным механизмом действия Комбинированная лекарственная форма представляет собой порошок, содержащий концентрат облепихового масла, антацнд магния оксид, антимикробный компонент метронидазол, а1ггисекреторное средство ранитидин, репарант четилметионина сульфоний в 30 вариантах с разным сочетанием входящих ингредиентов

Проведенные исследования на куриных эмбрионах и конъюнктиве морских свинок показали, что комбинированная лекарственная форма на основе облепихового масла обладает слабой раздражающей активностью и безопасна в применении для слизистых оболочек млекопитающих По Hodge и Sterner и классификации К К Сидорова комбинированная лекарственная форма может бьггь отнесена к практически нетоксичным препаратам Нетоксичность комбинированной лекарственной формы на основе масла облепихового делает возможным ее длительное применение

Введение 80% этилового спирта как фактора агрессии потенцировало ульцерогенное действие преднизолона (20 мг/'кг), предотвращающего синтез простагландинов в СОЖ, что привело к изменению свойств желудочной слизи, нарушению микроциркуляции в сгенке желудка, и, кроме того, вследствие антипролиферативного действия - торможения процессов регенерации и репарации в СОЖ У животных с острой стероидно- этаноловой язвой, не получивших ле-

-11 -

чение (контроль, раствор Рингера-Локка), слизистая оболочка желудка была гиперемирована, по всей слизистой наблюдались геморрагии, четко выраженная васкуляризация, значительные эрозии и язвы, занимающие поверхность практически всего слизистого слоя (рис 1) Площадь язв и их характер свидетельствовали о выраженном угнетении защитной функции слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта При использовании многокомпонентных субстанций при язвенно-эрозивном поражении желудка картина была значительно более благоприятная Масса желудка контрольных (нелеченных) животных составила 600,4 мг и была достоверно снижена на 42,2 % по сравнению с опытными группами за счет снижения мышечной массы органа, что свидетельствует о дистрофических процессах в желудке Животные, получавшие комбинированную лекарственную форму на основе масла облепихового, показали снижение площадь язв на 97,4% по сравнению с нелеченными животными, а так же этот результат достоверно превосходил показатели отдельных препаратов, входящих в комплекс

По выраженности биологического действия исследуемую комбинированную форму можно отнести к группе средств, повышающих регенеративную активность слизистой оболочки желудка и ее резистентность к факторам агрессии У животных с аспириновой язвой, не получивших лечение (контроль, раствор Рингера-Локка), счизистая оболочка желудка была гиперемирована наблюдались геморрагии, покраснения и язвенные поражения слизистой достаточно глубокие и обширные по площади Средняя масса желудка составила 1000,0 мг Комбинированная лекарственная форма на основе масла облепихового показала 99.99% гастропротекторньш эффект Результаты, полученные в данной серии эксперимента, позволяют рекомендовать комбинированную лекарственную форму на основе масла облепихового при

-12-

НПВС - индуцированной гастропатии, что наблюдается при длительной фармакотерапии противовоспалитепъными препаратами Результаты полученные при резерпиновой гастропатии, позволили сделать следующее заключение комбинированная лекарственная форма на основе масла облепихового перспективна при длительном применении антш ипертензивных препаратов, нейролептиков, седативных и снотворных препаратов, провоцирующих ишемические процессы во внутренних органах и отдаленным отрицательным побочным эффектом которых является нарушение трофики слизистой оболочки ЖКТ Гастропротекторныи результат комбинированной лекарственной формы на основе масла облепихового площадь поражения составила 0,001 мм2 при количестве 0,33 язвы на 1 желудок (рис 3) Механическая ишемия, моделированная перевязкой привратника, имитирует патологическое состояние пшюроспазм, сдавливание опухолью, камнем, наружным неблагоприятным воздействием травма, тесная одежда, шподииамия Животные, не получившие лечение, имели эрозивное повреждение слизистой оболочки желудка, площадь которою составила 11,5 и количество повреждений равнялось 8 0 Применение комбинированной лекарственной формы на основе масла облепихового с лучшим фармакотерапсвтическим эффектом снижало механическую ишемию, практически полностью нивелируя повреждение Площадь язв 0,08 мм2, при среднем количестве 0,5 на 1 желудок

СТЕРОИДНО-ЭТАНОЛОВЫИ УЛЬЦЕРОГЕНЕЗ, площадi (крысы, 20 мг/кг преднизолона в 80% этаноле^

1,21ви-

КОНТРОЛЬ

МЕТРОНИДАЗОЛ

РАНИТИДИМ

Масштаб 1:10 см

МЕТИЛУРАЦИЛ

МАГНИЯ ОКСИД

комбинированная лекарственная форма

МАСЛО ОБЛЕПИХОВОЕ

АСПИРИНОВЫИ УЛЬЦЕРОГЕНЕЗ, площадь язв (крысы, 150 мг/кг кислоты ацетилсалициловой дважды с интервалом в четыре часа )

3,8 | 4,04мм« ЮвЧо

, 5,0

контроль

метронидазол

РАНИТИДИН

Масштаб 1:10 см

метилурацил

нагни;

2,75мй* ¡Ш

68,04% ¡яЦ

облепиховое масло

комбинированная лекарственная форма

Рисунок- 2

УЛЬЦЕРОГЕНЕЗ: резерпиновая язва (мыши, резерпин 2,5 мг/кг. )

3,2 1,21мм2 85,21%

5,5« 1,42мм-' дооой

,92мм:

КОНТРОЛЬ

МЕТРОНИДАЗОЛ

РАНИТИДИН

Масштаб 1:10 см

Шщт

МАГНИЯ ОКСИД

ОЬЛЕПИХОВОЕ МАСЛО комбинированная лекарственная форма

" -достоверно относительно данных контроля и препаратов сравнения

Рисунок 3

УЛЬЦЕРОГЕНЕЗ: МЕХАНИЧЕСКАЯ ИШЕМИЯ (крысы, лигирование привратника)

КОНТРОЛЬ

МЕТРОНИДАЗОЛ

РАНИТИДИН

Масштаб 1:10 см

3,83 1,63 мм? 1.2,4%,

МЕТИПУРАЦИЛ

МАГНИЯ ОКСИД

15 ,..05 ОБЛЕПИХОВОЕ МАСЛО комбинированная лекарственная форма

' -джтойерно относительно данных контроля и препаратов сравнения

Рисунок 4

Таблица 2

ПЛОЩАДЬ ЯЗВЕННОГО ПОРАЖЕНИЯ (СТЬРОИДНО-ЭТАНОЛОВЫЙ

УЛЬЦЕРОГЕНЕЗ) (ММ! Н.\ 1 ЖЕЛУДОК)

Серии эксперимента Абсолютные единицы ммг Р % к контролю

Клф№18 0,042 ± 0,102 0,000377 0,65

Обтеннховое масло жид 1,125±0,209 0,0015 17,65

Метронидазол 1,208+0,393 0,00628 18,75

Метилурацил 1,625±0,5645 0,00147 25,3

Ранитидин 2,20810,1881 0,00628 34,37

Магния оксид 2,666710,258 0,0120 40,63

Контроль 6,375 ± 2,957 100

Примечание результаты эксперимента считать досюверпыми при р<0,05

Таблица 3

КОЛИЧЕС1 ВО ЯЗВЕННОГО ПОРАЖЕНИЯ (СТЬРОИДНО-ЭТАНОЛОВЫЙ УЛЬЦЕРОГЕНЕЗ) ЦШ НА 1 ЖЕЛУДОК)

Серии эксперимента Абсолютные единицы Р % к контролю

Кдф №18 0,167 ±0,408 0,024 3,57

Облепиховос масло »ид 2,666+0,8165 0,271 56,52

Метронидазол 3,000±0,8165 0,356 65,21

Метнлурааи i 4,16610,7527 0,756 91,30

Ранитидин 4,50010,5477 0,923 97,82

Контроль 4,66714,131 100

Магния оксид 5,00010,6325 0,849 108,7

Примечание результаты эксперимента считать достоверными при р<0,05

Таблица 4

ПЛОЩАДЬ ЯЗВЕННОГО ПОРАЖЕНИЯ (АСПИРИНОВЫИ УЛЬЦЕРОГЕНЕЗ) (ММ1 IIA 1 ЖЕЛУДОКА)

Серии эксперимента Абсолютные единицы ии! Р % к контролю

Клф№18 0,000010,0000 0,0001 0

Ранитидин 2,1250+0,5420 0,0211 52,58

Метронидазол 2,375010,6661 0,0430 58,76

Магния оксид 2,375010,2092 0,0324 58,76

Масло облепиховос я>ид 2,750010,4183 0,0897 68,04

Мегитурацил 3,041710,6967 0,1973 75,26

Контрочь 4,041711,6311 0,0119 100

Примечание результаты эксперимента считать достоверными при р<0,05

Таблица 5

КОЛИЧЕСТВО ЯЗВЕННОГО ПОРАЖЕНИЯ АСПИРИНОВЫИ УЛЬЦЕРОГЕНЕЗ (ШТ НА 1 ЖЕЛУДОК)

Серии эксперимента Абсопотные единицы Р % к контролю

Клф №18 0,0000+0,0000 0,00000 0

Магния оксид 4,333310,5164 0,20938 113,05

Ранитидин 5,000010,8944 0,03246 130,45

Метронидазол 5,166712,3166 0,2096 134,78

Масло облепиховос жид 6,000011,6733 0 0163 156,54

Метилурацил 7,000012,5298 0,0148 182,62

Контроль 3,833310,7528 100

Примечание результаты эксперимента считать достоверными при р<0,05

Таблица 6

ПЛОЩАДЬ ЯЗВПШОГО ПОРАЖЕНИЯ РЕЗЕРПИНОВЫЙ УЛЬЦЕРОГГНЕЗ (ММ2 НА 1 ЖЕЛУДОК)

Серии эксперимента Абсо потные единицы мм! Р % к контролю

КлфХ«18 0,012510,0209 0,0000 0,88

Облепиховос масло жид 0,6542±0,1771 0,0000 46,13

Рапитидин 0,9167+0,1291 0,0001 64,65

Метронидазол 1,2083±0,2458 0,0988 85,21

Метилу раци т 1,333310,4655 0,6774 94,02

Магния оксид 1,354210,1395 0,5712 95,50

Контроль 1,418310,1395 0,6772 100

Примечание результаты эксперимента считать достоверными при р<0,05

Таблица 7

КОЛИЧЕСТВО ЯЗВЕННОЮ ПОРАЖЕНИЯ РЕЗЕРПИНОВЫЙ УЛЬЦЕРОГЕНЕЗ (IUT НА 1 ЖЕЛУДОК)

Серии эксперимента Киф Л® 18

Облепиховос масло ялэд Метилурацил Метрошцизол Рапитидин Магния оксил Контроль

Абсолютные единицы Р % к контролю

0,ЗЗЗЗЮ 5164 0,0000001 6,06

2,333310,5164 0,0004 42,42

2,666610,5164 0,0008 48,48

3,1667+0,7528 0,0045 57,57

3,3333±0,5164 0,0048 60,61

3,66711,3784 0,0122 66,54

5,50011,3784 100

Примечание' результаты эксперимента считать достоверными при р<0,05

Таблица 8

ПЛОЩ4ДЬ ЯЗВЕННО! О ПОРАЖЕНИЯ ИШЕМИЧЕСКИЙ УЛЬЦЕРОГЕНЕЗ (ММ2 НА 1 ЖЕЛУДОК) Абсолютные единицы мчг Р % к контролю

0,0816710,1265 0,0000002 0,71

1,1667±0,2041 0,0000004 10,15

1,2083+0,2458 0,0000005 10,51

1,2917±0,2458 0,0000005 11,23

1,4167±0,3028 0,0000006 12,32

I,6250±0,1369 0,0000006 14,13

II,500±2,1909 100

Серии эксперимент Клф Ж8 Метнлурацил Метронидазол Рапитидин

Облепиховос масло жид Магния оксид Контроль

Примечание результаты эксперимента считать достоверными при р<0,05

Таблица 9

КОЛИЧЕСТВО ЯЗВЕННОГО ПОРАЖЕНИЯ ИШЕМИЧЕСКИЙ УЛЬЦЕРОГЕНЕЗ

(ШТ НА 1 ЖЕЛУДОК) Серии л^сперкмента Абсолютные единицы Р % к контротго

Клф К»18 0,5000+0,8366 0,0115 6,25

Мегилурацнл 2,8333±0,7528 0,0059 35,42

Метроидазол 3,3333±0,8165 0,0839 41,63

Ранитидин 3,5000±0,5477 0,0924 43,75

Облепиховос масло жид 3,6666+0,8165 0,1050 45,83

Мягния оксид 3,8333±0,7528 0,1169 47,92

Контроль 8,000±5,8992 100

Примечание результаты эксперимента считлгь достоверными при р<0,05

По степени выраженности кинетического действия на мотор-но-эвакуаториую функцию ЖКТ исследуемая комбинированная лекарственная форма на основе масла облепихового обладает незначительным послабляющим эффектом Это может быть использовано в терапии, учитывая индивидуальные особенности состояния и работы желудочно-кишечного тракта Так же экспериментально было доказана возможность контроля секреции соляной кислоты, что немаловажно прн длительном лечении При определении кислотности содержимого, массы желудка, микроскопии организованного осадка установлено, что комбинированная лекарственная форма на основе масла облепихового количественно снижала выработку секреции желудка Результаты свидетельствуют о том, что изучаемая комбинированная лекарственная форма снижала эндогенный фактор агрессии, а именно кислотность желудка, что является при язвенной болезни благоприятным фармакотерапевтическим фактором.

Таблица 10

ВЛИЯНИЕ КЛФ НА СЕКРЕТОРНУЮ ФУНКЦИЮ ЖЕЛУДКА КРЫС

масса обье к ис лота ос ч..

оп мтЛга иослулка, >» С О Н' ряда маго, М.П с. шш ы

к.да 2225 0,65 ¡32,99% 4,67 Т1,34

КОЛ 1)Х>.П, 1141,67 0,97 3,33

мс 111 .тура «ил 21.50 0,63 .135,05% 4,83 Г» ,5

ме трон *шйяол 2133,33 0,63 435,05% 5,33 Т2,0

облспих. масло 2150 0,67 130,93% 5,17 Г 1,84

рани пвдиы 2066,67 0,53 445,36% 5,08 Т1. 75

магния «ачи 2066,67 0,62 |36,(в% 4,92 1" 1,99

м етрон ид ззол » облепиховое масло жидкое > ранишдин - -> магния оксид > метилурацил > кло» (комбинированнная лекарственная форма на основе маслаоблепиювого) » кон1роль

ВЛИЯНИЕ ИЗУЧАЕМЫХ КЛФ НА ОСНОВЕ МАСЛА ОБЛЕПИХОВОГО НА МО ГОРНО-ЭВАКУАТОРНУЮ ФУНКЦИЮ ЖКТ

Рисунок 5

Таким образом, из предложенных 30 вариантов экспериментальным путем бьша найдена одна композиция № 18 с наиболее выраженным гастропротекториым действием при отсутствии токсичности и раздражения тканей. Проводится патентная зашита композиции в качестве субстанции для лекарственной формы - капсулы и

- 19-

саше Комбинированная лекарственная форма на основе масла об-легтихового с витамином U, MgO, ранитидином и метронидазолом представляет собой наиболее удачную комбинацию средств растительного и синтетического происхождения, является комплексным противоязвенным лекарственным средством с мультикомпонентным механизмом действия Сочетаются спазмолитическое, антацидное и послабляющее действие магния, гастропротективное действие ме-тилметионина сульфония, противовоспалительное и ранозаживляю-щее действие витамина С, суммы каротиноидов, входящих в обле-пиховое масло Все это обеспечивает комплексный лечебный эффект предпочтенной комбинированной лекарственной формы на воспаленную слизистую оболочку желудка и кишечника Эффективность объясняется составом, а перспективность лекарственной формой -капсулы и саше. Таким образом, получено и исследовано отечественное лекарственное средство с гастропротектнвным, метаболическим, регенеративным компонентом действия Исследуемую композицию можно отнести к группе средств, повышающих регенеративную активность слизистой оболочки желудка и ее резистентность к факторам агрессии

ВЫВОДЫ

1 В результате специфического изучения гастропротекторной активности из 30 вариантов различных композиций на основе обле-пихового масла определена наиболее эффективная композиция №18 По классификации Hodge, Sterner и К.К Сидорова острая токсичность композиции №18 составила - LD50 > 5000, чго соответствует V классу - практически нетоксичные соединения На хорион-аллантоисной оболочке куриных эмбрионов и на ткани переднего сегмента глаза морских свинок композиция №18 не проявила раздражающую активность

2 Композиция №18 существенно понижала площадь и количество язвенно-эрозивных повреждении соответственно на 99,35% и 96,43% (стероидный ульцерогенез), на 100% и 99,98% (аспириновый ульце-рогенез), на 99,12% и 93,44% (резерпиновый ульцерогенез), на 99,29% и 93,75% (лигирование привратника), что достоверно превышало показатель отдельных компонентов (группы сравнения)

3 Комбинированная лекарственная форма на основе облепихо-вого масла с выраженным гастропротекторным действием (композиция №18) позволила сохранять контроль над секрецией соляной кислоты в желудке на 1,34 ед рН и по объему содержимого желудка на 32,9% мл по сравнению с интактной группой >л.ивотных

4 Исследовано влияние комбинированных лекарственных форм на основе масла облепихового на моторно-эвакуаторную функцию желудочно-кишечного тракта. Из 30 комбинированных форм 60% показали послабляющее действие, 26% не оказали действия на моторику ЖКТ, 14% обнаружили обстипационный эффект Определена зависимость моторики кишечника от содержания магния Комбинированная лекарственная форма с выраженным гастропротекторным действием №18 выказала послабляющий эффект на 18,6%

Основные публикации по теме работы

1 Зацепина Е Е , Сергиенко А В , Ивашев М Н Новые фармакологические противовоспалительные средства без ульцерогенного эффекта / Экология и здоровье Сборник научных трудов - Ессентуки Ассоциация мед центров ЮНЕСКО, 2004 -Вып8-С 217-226 с227(Англ)

2 Зацепина Е Е , Сергиенко А В Побочные эффекты препаратов, применяемых при различных состояниях кислотности желудка/ Экология и здоровье Сборник научных трудов - Ессентуки Ассоциация мед цен гров ЮНЕСКО, 2005 - Вып 9 - С 222-235 с236(Англ )

3 Зацепина Е Е , Сергиенко А В , Ивашев М Н Фармакологический обзор новых средств обладающих противовоспалительным и противоязвенным действием / Регион конф по фармации, фармакологии и подго-

говке кадров (60,2005, Пятиюрск) Материалы - Пятигорск ПятГФА, 2005 -С 341-342

4 Зацепина Ь Е. Фармакологическое исследование гастро 11 роте кто; ю г о средства из облепихового масла / Экология и здоровье Сборник научных трудов - Ьссентуки Ассоциация мед центров ЮНЕСКО, 2006 - Вып.10 -С 122-140 с141(Ашл)

5. Зацепина Е Ь Многокомпонентная комбинированная лекарственная форма - основа гастропротекторного средства / Экология и здоровье Сборник научных трудов - Ессентуки Ассоциация мед центров ЮНЕСКО,2007 -Вып 11 - С 158-161 ЫбЦАнгл)

6 Зацепина Е Е , Агаджанова А В , Стоялова О Н , Сергиенко А В , Ивашев М Н Противоязвенная активность реамберина, мафусола и су-пероксиддисмутазы /Тр Краснодарског о филиала ЮБ РАМН / Бюллетень экспериментальной биологии и медицины-2007 - приложение 3 - С 20-21

7 Зацепина Е Е , Галенко-Ярошевский В П , Галка В В , Cepi иенко А В , Ивашев М.Н Гастропротекторные эффекты производного имидазобен-зимидазола РУ-185, супероксиддисмутазы и их сочетания /Тр Краснодарского филиала ЮБ РАМН / Бюллетень экспериментальной биологии и медицины-2007 - приложение 3 - С. 149-150

8 Зацепина Е Е, Алиева М У , Сергиенко А В лекарственная форма с облепиховым маслом, витамином U и магния оксидом Всемир конгресс по иммунопатологии и аллергологии и Европ конгресс по астме (5, 21-24апр 2007, Москва) Аллергология и иммунология -2007 -Т 8 -С 138-139.

9. Зацепина Е Е , Сергиенко А В , Стру1 овщик IO С , Алахвердиева И А , Недолуга О С., Ивашев М Н /Поиск противовоспалительных средств без гастротоксического эффекта (обзор) Известия высших учебных заведений Северо-Кавказский регион - проблемы фармации, фармакологии и рациональной терапии - Естественные науки спецвыпуск - 2007 — С 71-73

10 Зацепина Е Е Изучение гастропротекторного действия новой комбинированной лекарственной формы на основе масла облепихового на моделях экспериментальных язв Международный конгресс по реабилитации в медицине и иммунореабилитации (13,26-29 апр 2008, Дубай, ОАЭ) Всемирный форум по астме 26-29 апр 2008г (Дубай, ОАЭ) тез докл//Аллергология и иммунология -2008 -Т 9 -№ 1 - С 97

РЕЗЮМЕ

Комбинированное гаоропротекторное средство на основе масла облепихового

Ключевые слова: композиция, облепиховое масло, эрозивно-язвенное повреждение, стероидная язва, резерпиновая язва, аспириновая язва, ишемия привратника, эксперимент

Объект исследования: комбинированная лекарственная форма на основе масла облепихового, экспериментальные животные мыши, крысы, морские свинки, куриные эмбрионы,

Предмет исследования: гастропротекторная активность комбинированной лекарственной формы на основе масла облепихового Цель работы: Поиск лекарственных средств с оптимальным воздействием на экспериментальное язвенно-эрозивное повреждение крыс Методы исследования: фармакологические, физиологические, гистологические, токсикологические, статистические Полученные результаты и их новизна: установлена безопасность применения комбинированной лекарственной формы в разных вариантах (всего 30) по степени влияния на экспериментальный ульцеро-генез Установлена закономерность между их составом и влиянием на экспериментальную гастропатию Противоязвенное действие оценивали по общему количеству язв, площади, отношению язвенного поражения к массе желудка Проводили макроморфологичсские исследования с использованием компьютерного цифрового микрофото Полученные результаты показали перспективность многокомпонентного средства для повышения резистентности слизистой оболочки желудка Выявлены наиболее эффективные комбинированные лекарственные формы по степени выраженности гастропротекторного эффекта Комбинированная лекарственная форма с выраженным гас-тропротекторным эффектом и оптимальным действием №18 Установлено влияние комбинированной лекарственной формы в 30 вариантах на моторно-эвакуаторную и секреторную активность желудочно-кишечного тракта Определена зависимость от содержания магния Комбинированная лекарственная форма с выраженным гастропротек-торным действием №18 выказала послабляющий эффект Проводится патентная защита многокомпонентной лекарственной формы с регенеративным действием на слизистую оболочку желудка

Область применения: экспериментальная фармакология, клиническая фармакология, гастроэнтерология

ЗАЦЕПИНА ЕЛЕНА ЕВГЕНЬЕВНА

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ГАСТРОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОС ГИ КОМБИНИРОВАННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ НА ОСНОВЕ МАСЛА ОКЛЕПИХОВОГО

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соисканиеученой степени кандидата биологических наук Волиоград- 2008

Подписано в печать 29Ю42008 формат60х84/16 бумага писчая Печать офсетная. Гарнитура «Times». Усл.печл. 1 Д).уч-издл.1/). Тираж 100 экз.Заказ__

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ

В'фармакотерапии гастропатий большое значение придается средствам, повышающим резистентность и регенеративную активность слизистой оболочки желудка и кишечника - гастропротекторам. Одной из разновидностью гастропатий является язвенно-эрозивное повреждение слизистой желудочно-кишечного тракта [96, 79]. Язвенная болезнь — хроническое рецидивирующее заболевание, характеризуется образованием язвы в желудке или в двенадцатиперстной кишке. Это чрезвычайно распространенная»патология в большинстве развитых стран, где она встречается у 2-3% взрослого населения [32]. При этом начало заболевания в 30% случаев приходится на молодой и юношеский возраст [33]. Достаточно высокий уровень заболеваемости отмечается и в России (6,5 на 1 тысячу), а также в Украине, Белоруссии и Молдове (7,0, 5,0, 5,4 на 1 тысячу соответственно). Существенно ниже этот показатель в государствах Средней Азии (1,8 — 2,5 на 1 тысячу населения) [38].

Смертность при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, независимо от локализации язвы, не снижается и составляет от 0,6 до 7,1 на? 100000 населения [147]. Ежегодная стоимость лечения больных язвенной болезнью в мире составляет 1,3 — 2,6 млн. долларов [115].

Все вышеперечисленное обусловливает высокую социально-экономическую значимость и актуальность поиска эффективных лекарственных средств терапии язвенной болезни [153]. Вместе с тем, до сих пор нет универсального противоязвенного средства, способного воздействовать на все звенья патологии слизистой желудка и быть эффективным во всех случаях заболевания; ни одно лекарство не может считаться препаратом выбора [78]. В этом отношении перспективными являются препараты природного происхождения; обладающие- широким спектром фармакологического действия и влияющие на различные стороны патогенеза язвенной болезни[85].

Этим требованиям отвечают многокомпонентные препараты с растительным ингредиентом поливалентного механизма действия.

Полиэтиологичность повреждения слизистой желудка диктует необходимость многогранной полимодальной фармакотерапии патологического процесса. Это могут обеспечить препараты из разных фармакологических групп с разными фармакодинамическими параметрами, но направленные на стимуляцию регенерации слизистой оболочки желудка и кишечника при нереальности нивелирования факторов агрессии [35, 63]. Условия жизни современного человека определяют повышающееся воздействие негативных обстоятельств: стрессовые нагрузки, нерегулярное и несбалансированное питание, ухудшающаяся экология, применение высокоактивных биотропных средств бытовой химии и лекарственных препаратов[35, 68, 70]. Длительная противоязвенная тройная или квадротерапия, как правило, направлена на изменение эндоэколо-гии желудочно-кишечного тракта, что приводит к атрофическим изменениям слизистой оболочки желудка, кампилобактерному гастроэнтериту, колонизации нехеликобактерных микроорганизмов, нарушениям микробиоценоза [69, 76]. Кроме того, возникают проблемы переносимости, взаимодействия, противопоказаний лекарственных препаратов.

Поражения слизистой оболочки ЖКТ сопровождаются воспалительными процессами, при которых имеет место тканевая витаминная недостаточность. Натуральные растительные биологические комплексы нивелируют этот дефицит, что способствует более быстрому восстановлению поврежденной тка-ни[10, 19]. В этой связи, назрела необходимость в создании комплексных лекарственных препаратов отечественного производства, которые затрагивали бы все звенья данного патологического процесса и при этом комфортных в применении и доступных экономически. С этой целью были разработаны субстанции на основе концентрата лиофилизированного облепихового масла в комбинации с синтетическими средствами, эффективность которых была проверена экспериментальным путем.

Особенность и фармакодинамический диапазон комплексного состава композиций объясняется сочетанием компонентов натурального происхождения и синтетическими соединениями. Состав разработан профессором Е.Н.

Вергейчиком (кафедра фармацевтической химии) и предназначен для профилактики и лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

Биологически активные вещества, растительного происхождения играют важную роль в формировании эпителиальной ткани,, снижают проницаемость слизистой пищеварительного тракта для токсических веществ. Жирные* полиненасыщенные кислоты являются ловушкой свободных радикалов; ишрепятст-вуют развитию окислительного стресса в* тканях. Флавоноиды — природные антиоксиданты, ингибируют чрезмерно выраженные процессы ПОЛ; способствуют стабилизации мембран клеток, что предохраняет ее от преждевременного разрушения. Каротиноиды, дубильные вещества способствуют регенерации клеток слизистой оболочки ЖКТ [60]. Олигоэлементы являются кофер-ментами белковых молекул, принимают участие в сопряжении процессов возбуждения; и сокращения мышечных клеток, влияет на различные ферментные системы, что позволяет принимать их как лекарственный препарат. Липофиль-ность субстанции обеспечивает оптимальное всасывание и усвоение фармакологически активных компонентов. Фармакологическое исследование композиции, содержащей указанные компоненты актуально и своевременно:

Актуальность исследований связана с необходимостью:создания отечественных лекарственных средств,.обладающих гастропротективной активностью природного происхождения комбинированного по составу с поливалентным: механизмом действия.

Цель работы

Изучение гастропротекторной активности комбинированной; лекарственной; формы на основе масла облепихового на, экспериментальный, ульцероге-нез, секреторную и двигательную активность, желудка и кишечника. В состав комбинированной лекарственной' формы .входит: масло облепиховое, ранити-дищ метронидазол, магния оксид, метилметионина сульфоний.

Задачи исследования

1. Провести специфическое изучение: комбинированных лекарственных форм на основе масла облепихового в виде.ЗО вариантов композиции с ингредиентами синтетического и растительного происхождения для определения наиболее эффективного гастропротекторного средства. Определить безопасность применения (острая токсичность, раздражающее действие);

2. Изучить защитное действие наиболее эффективного гастропротекторного средства (комбинированная лекарственная форма на основе масла облепи-хового) на слизистую оболочку желудка животных и 12- перстной кишки крыс на различных моделях экспериментальных язв: стероидно-этаноловая, ишемическая, геморрагическая;

3. Оценить воздействие комбинированной лекарственной формы с лучшим фармакотерапевтическим эффектом на основе масла облепихового на секреторную функцию желудка;

4. Исследовать влияние изучаемой комбинированной лекарственной формы на основе масла облепихового на моторно-эвакуаторную функцию желудочно-кишечного тракта.

Научная значимость и новизна работы

1. Впервые предложен состав комбинированной лекарственной формы на основе концентрата масла облепихи, обоснована возможность комбинирования в ней компонентов из разных фармакологических групп с разным механизмом действия для оптимизации гастропротекторного эффекта. Из 30 вариантов математически смоделированных и экспериментально обоснованных субстанций была выбрана и отправлена на патент одна комбинация.

2. Выявленное впервые противоязвенное действие комбинированной лекарственной формы на основе масла облепихового, установлено ее влияние на моторно-эвакуаторную активность желудочно-кишечного тракта.

3. Впервые экспериментально показано, что оригинальная комбинированная лекарственная форма на основе масла облепихового оказывает выраженное полимодальное защитное действие на слизистую оболочку желудка: уменьшает количество и общую площадь язвенных поражений, снижает отечность и воспаление слизистой оболочки желудка, вызванных различными повреждающими агентами.

Положения, выносимые на защиту:

1. Комбинированная лекарственная форма на основе масла облепихового оказывает выраженное защитное действие на слизистую оболочку желудка животных на различных моделях язвенного поражения (стероидно-этаноловая, ре-зерпиновая, аспириновая язвы, пептическая язва у крыс с перевязанным привратником).

2. Комбинированная лекарственная форма на основе масла облепихового обеспечивает полимодальный механизм гастропротекторного действия и затрагивает все звенья патологического процесса: регенеративный компонент действия, антимикробное и влияние на секреторную и двигательную активность ЖКТ.

3. Комбинированная лекарственная форма на основе масла облепихового устраняет нарушение тонуса гладкой мускулатуры, снижает агрессивные свойства желудочного сока.

Научно- практическое значение работы

Проведено специфическое изучение гастропротекторной активности комбинированной лекарственной формы, содержащей масло облепиховое в ком бинации с лекарственными препаратами разных фармакологических групп: антацидами, антимикробными, средствами метаболической коррекции. Композиции проявили в разной степени выраженное гастропротекторное действие на слизистую оболочку желудка и 12-ти перстной кишки экспериментальных животных. Выявлены субстанции с максимальным гастропротекторным действием, со средним эффектом и со слабым фармакотерапевтическим влиянием на язвенно-эрозивное повреждение слизистой оболочки желудка и кишечника. Представлены субстанции с гастропротекторным действием, превосходящим по регенеративному эффекту показатель синтетического средства - метилура-цила и средства растительного происхождения - облепихового масла жидкого. Выявленное впервые противоязвенное действие комплексов на основе лиофи-лизата облепихового масла, установлено их влияние на моторно-эвакуаторную активность желудочно-кишечного тракта. Результаты диссертационного исследования внедрены в учебный процесс кафедры клинической фармакологии Ставропольской государственной медицинской академии, фармакологии Пятигорской государственной фармацевтической академии, базового санаторно-клинического реабилитационного центра Виктория, г. Ессентуки, клиники НИИ курортологии и физиотерапии, г. Ессентуки.

Связь диссертационного исследования с научно-исследовательскими программами

Диссертационная работа выполнена в Пятигорской государственной фармацевтической академии в соответствии с планами научно-исследовательских работ. (№ госрегистрации 01.2001.12168).

Объем и структура диссертации

Работа изложена на 150 стр. текста компьютерного набора, содержит 4 главы, соответствующие поставленным задачам, иллюстрирована: включает 33 таблицы, 25 рисунков. Состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, общего заключения и выводов. Список цитируемой литературы содержит 93 источник отечественных авторов и 57 иностранных источников.

Апробация и публикация результатов исследования

Основные положения диссертационной работы доложены на XIV Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство", (г. Москва, 2007г.), на 63, 64 ежегодной конференции по фармации, фармакологии и подготовке кадров (г. Пятигорск, 2007,2008гг), На XI Конгрессе иммунологии и аллергологии (г. Москва 2007г.). На конференции врачей Юга России (г.Ессентуки). По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, 1 патент РФ. Направлена в печать 1 работа.

Постановкапроблемы

Особенности жизни современного человека диктуют необходимость разработки многокомпонентных лекарственных препаратов, комфортных и безопасных с одной стороны, и охватывающие все звенья патологического процесса с другой. Современные представления о патогенезе язвенной болезни, как следствия расстройства общих и местных механизмов нервной и гормональной регуляции основных функций гастродуоденальной системы, нарушения трофики и развития протеолиза слизистой оболочки, позволяют считать, что лечение этой патологии должно быть комплексным. Поэтому гас-тропротекторная терапия нуждается в комплексных препаратах. В этой связи перспективно обратить внимание на известные классические препараты, хорошо изученные и апробированные, «облагородив» их путем комбинирования с компонентами натурального происхождения, в данном случае - растительного - облепихового масла.

В настоящей диссертационной работе предлагается решить проблему гастропротекторной терапии с использованием комбинированной лекарственной формы, содержащей компоненты из разных фармакологических групп с разным механизмом действия. Из 30 вариантов математически смоделированных и экспериментально обоснованных субстанций на основе концентрата облепихового масла была выбрана и отправлена на патент одна комбинация с оптимальным защитным действием на слизистую оболочку желудка и дуоденума при различных повреждающих ульцерогенных факторах.

Проведена специфическая исследовательская работа по поиску наиболее активной комбинации. Данное обстоятельство позволяет более полно подойти к проблеме полноценной регенерации слизистой оболочки желудка и кишечника при эндогенном и экзогенном этиологическом факторе.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. В результате специфического изучения гастропротекторной активности из 30 вариантов различных композиций на основе облепихового масла определена наиболее эффективная композиция №18. По классификации Hodge, Sterner и К.К. Сидорова острая токсичность композиции №18 составила - LD50 > 5000, что соответствует V классу - практически нетоксичные соединения. Не регистрировали раздражающую активность изученной композиции №18 на хорион-аллантоисной оболочке куриных эмбрионов и на ткани переднего сегмента глаза морских свинок.

2. Композиция №18 существенно понижала площадь и количество яз венно-эрозивных повреждений соответственно на 99,35% и 96,43% (стероидный ульцерогенез), на 100% и 99,98% (аспириновый ульцерогенез), на 99,12% и 93,44% (резерпиновый ульцерогенез), на 99,29% и 93,75% (лигирование привратника), что достоверно превышало показатель отдельных компонентов (препаратов группы сравнения).

3. Комбинированная лекарственная форма на основе облепихового масла с выраженным гастропротекторным действием (композиция №18) позволила сохранять контроль над секрецией соляной кислоты в желудке на 1,34 ед рН и по объему содержимого желудка на 32,9% мл по сравнению с ин-тактной группой животных.

4. Исследовано влияние комбинированных лекарственных форм на основе масла облепихового на моторно-эвакуаторную функцию желудочно-кишечного тракта. Представленные результаты демонстрируют неоднозначное влияние комбинированной лекарственной формы на основе масла облепихового (композиция №18) на моторно-эвакуаторную функцию, и находилось в зависимости от содержания магния оксида. Из 30 комбинированных форм: 60% показали послабляющее действие, 26% не оказали действия на моторику ЖКТ, 14% обнаружили обстипационный эффект. Комбинированная лекарственная форма с выраженным гастропротекторным действием №18 выказала послабляющий эффект на 18,6%.

РЕЗЮМЕ

Комбинированное гастропротекторное средство на основе масла облепихового

Ключевые слова: композиция, облепиховое масло, язвенное повреждение, стероидная язва, резерпиновая язва, аспириновая язва, ишемия привратника, эксперимент.

Объект исследования: комбинированная лекарственная форма на основе масла облепихового, экспериментальные животные: мыши, крысы, морские свинки, куриные эмбрионы,

Предмет исследования: гастропротекторная активность комбинированной лекарственной формы на основе масла облепихового

Цель работы: Поиск лекарственных средств с оптимальным воздействием на экспериментальное язвенное повреждение крыс.

Методы исследования: фармакологические, физиологические, гистологические, токсикологические, статистические.

Полученные результаты и их новизна: установлена безопасность применения комбинированной лекарственной формы в разных вариантах (всего 30) по степени влияния на экспериментальный ульцерогенез. Установлена закономерность между их составом и влиянием на экспериментальную гастропатию. Противоязвенное действие оценивали по общему количеству язв, площади, отношению язвенного поражения к массе желудка. Проводили макро- и микрогистоморфологические исследования с использованием компьютерного цифрового микрофото. Полученные результаты показали перспективность многокомпонентного средства для повышения резистентности слизистой оболочки желудка. Выявлены наиболее эффективные комбинированные лекарственные формы по степени выраженности гастропротекторно-го эффекта. Установлено влияние комбинированной лекарственной формы в 30 вариантах на моторно-эвакуаторную и секреторную активность желудочно-кишечного тракта.

Область применения: экспериментальная фармакология, клиническая фармакология, гастроэнтерология,

ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Язвенная болезнь относится к наиболее распространённым заболеваниям пищеварительной системы и поражает людей в наиболее активном возрасте, вызывая осложнения, ведущие к длительной и стойкой нетрудоспособности и инвалидизации. Принято считать, что причиной язвообразования является нарушение равновесия между состоянием гастропротективных и агрессивных факторов (Зевинг К.-Фр., 1996; Калинин А.В., 2001; МаевИ.В. и др., 2003). Современная терапия язвенной болезни направлена на подавление кислотно-пептической агрессии, повышение защитных возможностей гаст-родуоденальной слизистой и эрадикацию Helicobacter pylori (Рысс Е.С., Звар-тауЭ.Э., 1998). В настоящее время микробная инвазия рассматривается как один из важнейших факторов пептической язвы (Hoick S. et al., 2003). В комплексную терапию язвенной болезни прочно вошли антигеликобактерные средства. Современная антигеликобактерная терапия уменьшает число рецидивов, способствует возникновению реальных предпосылок для полного излечения, резко сокращает процент осложнений (Gisbert J.P., Pajares J.M., 2003). Так же большое значение придаётся повышению сопротивляемости гастродуоденальных слизистых оболочек.

Увеличению гастрологических заболеваний способствует неблагоприятная экологическая обстановка, стрессовые нагрузки, использование физиологически высокоактивных соединений (бытовой химии, пищевых добавок, лекарственных средств), что приводит к поливалентной сенсибилизации организма, доминированию хронических воспалительных процессов в патологии разных органов и систем.

Возрастающие экологические проблемы, научно-техническое развитие, применение медикаментов и средств бытовой химии способствуют нарушению иммунного статуса организма. Наиболее мягкий вид коррекции иммунной дисфункции могут обеспечить препараты с поливалентным механизмом действия. Этим требованиям отвечают многокомпонентные комплексные

-129средства натурального происхождения. В фармакотерапии язвенно-эрозивного поражения слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта большое значение придается средствам, повышающим резистентность к факторам агрессии и регенеративную способность слизистой оболочки желудка и кишечника. Восстановление поврежденной ткани могут обеспечить каро-тиноиды, которые нивелируют недостаток пролиферации и эпителизации. Концентрат облепихового масла — новая форма давно и хорошо изученного растительного препарата, удобная для получения капсул. Изучали комбинированные лекарственные средства растительного происхождения на основе масла облепихового с добавлением витаминов, микроэлементов, антацидов, стимуляторов метаболизма. Проведено специфическое изучение 30 комбинированных лекарственных форм на этой основе, но с разной дозировкой действующих начал и различным комбинированием составляющих компонентов. Использовали модель стероидно - этаноловой язвы желудка у крыс путем однократного интрагастрального введения 20 мг/кг преднизолона (имму-нодепрессант), растворенного в 80% этаноле (фактор агрессии) в объеме 8 мл/кг. Через 3 часа после индукции ульцерогенеза, вводили изучаемые композиции в объеме 10 мл/кг веса. Изучался гастропротекторный эффект комбинированных лекарственных форм по сравнению с нелеченными животными (контроль, физиологических раствор) и с группой сравнения (облепиховое масло жидкое). Противоязвенное действие оценивали по общему количеству язв и их средней площади, отношение язвенного поражения к массе желудка. Проводили исследования с использованием компьютерного цифрового фото. Полученные результаты показали перспективность комбинированных лекарственных форм на основе масла облепихового для повышения резистентности слизистой оболочки желудка. Выявлены наиболее эффективные комбинированные лекарственные формы по степени выраженности гастропротек-торного эффекта.