Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Динамика некоторых показателей симпатико-адреналовой системы при экспериментальном перитоните

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО НАРОДНОМУ ОБРАЗОВАНИЮ

ОРДЕНА ДРУЖБЫ НАРОДОВ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ имени ПАТРНСА ЛУМУМБЫ

ЯКУБОВА Равиля Ризовна

УДК 612.45:616.831-002

ДИНАМИКА НЕКОТОРЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ СИМПАТИКО-АДРЕНАЛОВОЙ СИСТЕМЫ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПЕРИТОНИТЕ

На правах рукописи

14.00.16 — патологическая физиология

Автореферат диссертации па соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва — 1990

Работа выполнена на кафедре госпитальной хирургии Ярославского государственного медицинского института.

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор,

лауреат Государстиенной премии РСФСР Ю. Н. Белокуро».

Официальные оппоненты.-

доктор медицинских наук, профессор Н. К. X и т р о в,

доктор биологических наук, профессор Т. С. Попова.

Ведущая организация — Военно-медицинская академия им. С. М. Кирова (г. Ленинград).

Защита диссертации состоится « /У> /. .7 .'.-ЙЯ 1990 г.

у/- ■/

в « <■ » часов на заседании специализированного совета Д.053.22.01 при ордена Дружбы народов Университете дружбы народов имени Патриса Лумумбы (117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, 8, медицинский факультет).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Университета дружбы народов им. П. Лумумбы по адресу: 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, 6.

Автореферат разослан « /3 > 1990 г.

Ученый секретарь

специализированного

доктор медицинских

Актуальность работа. В условиях стресса, вызванного перито-неальтш эндотоксякозом, реакция надпочечников является средством мобилизации резервов организма для покрытия его энергетических потребностей (Т.Т.Березов, Б.^.КоровкинДЭвЗ; А.и.Савин, С.Г.Григорь-ав, 1988). Поддержание гомеостаза в условиях изменившейся внутренней среда достигается путем выделения мозговым слоем надпочечников катехолашшов, метаболизм которых, в свою очередь, определяет их транспорт, чувствительность к ним тканей и их экскрецию (В.С.Савельев а др., 1982; Г.И.Белова и др.,1933; Т.мшскельсон,1963). Актуальность изучения динамики распределения катехолаглинов в тканях при патологических изменениях в организме в условиях певитонеаль-ной эндоинтоксикации обусловлена многосторонностью) влияния катех'о-ламинов на развитие и течение заболевания.

Симпатико-адрвналовая система является одной из важнейших регулирующих не¡.рог-умора лыш: систем, наиболее четко реагирующих на изменение кислородного баланса организма (Л.В.ЛолякоБа,1983). Адекватное снабжение тканей кислородом является детарминантой для развития компенсаторных реакдиЛ организма, в том числе и со стороны симпатико-адреналовой система при разлитом перитоните (Г.Д.Ра-тнер я др., 1979; Г.А.Щифрин и др.,1983). Б этой связи одним из ведущих факторов в изменении активности САС при перитоните является гипоксия Медведев, 1975; В.Д.Малышев и др., 1982; В. Л, Лукич и др.,1969).

Поскольку одним из главных антимикробных механизмов в обезвреживании патогенных микроорганизмов является использование лейкоцитами супероксиддигадутазы (СОД) и других щтермедиатов колзкулярко-го кислорода, больщув информативность и,'.ест изучение оспоншх закономерностей влияния перитонеальной эндоинтоксикации на показатели аятиоксядантшлс ферментных систем организма и деструктивные измене-иия мембран эритроцитов. Исследование этих взаимосвязей особенно актуальной с позиция инициации процессов свободно-радикального окисления {СТО) мзкбршпшх лппидов, приводящих к нарушению сгрукгурио-Зущщшжальяого состояния клеточных мембран (В.Н.Ушкалова и др., 1987; Д.К.Шакенов,1987; 1.И.Авдреева а др.,1933). Зто обуславливает необходимость изучения и особенностей изменений на макроуровнях организация систем организма ври экспериментальном перигоньте: ферментативном, мег,бранном. Изменение этих взаимосвязей также оказывает влияние на все-стороны обмена катехолашшов.

Исходя из того, что работы, посвященные изучению механизмов воспашшя при перитоните с обдебиологических позиций с учетом об-

идах закономерностей реакций организма« немногочисленны (В.С.Пау- , ков, B.ÍI. Петров, ISB5; И.П.Ерпиш,19Ш), системный подход к оценка изменений б организма днвотшх upa экспериментальном перигоыиге на различных уровнях организации - ьшбрашюы, клеточном, тканевой является актуальной задачей теоретической в практической медицины.

Цель и задачи исследования. Цель работа состояла в разработке критериев оценки степени выраженности ответной метаболической реакции оргаыааш при экспериментальном перитоните для определения направленного лечения больных а данной патологией.

Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

1. Выяснить характер и направленность нарушений этапов биосинтеза катехоламинов в эавлсшюстп от сроков перитонита.

2. Определить степень выраженности изменений содержания катохола-ыинов в тканях эффекторцых органов в зависимости от сроков перитонита.

3. Установить взаимосвязь изменений структурных свойств эритроцитов с р -адренорецепторной активностью их мемОран при экспериментальном перитоните.

4. Теоретически обосновать рациональные принципы коррекции нарушений синтеза катехоламинов, извращения f> -адрепорецеп торной активности клетокг-мишенеЁ, в частности, эритроцитов, дестабилизации их мемЗран, как одного из направлений в комплексном лечении перитонита.

Научная новизна. Впервые установлено, что снижение уровня предшественника катехоламинов - дофа в ткани мозгового слоя надпочечников на I и 3 оутки экспериментального перитонита является объективном критерием несостоятельности основной системы биосинтеза катехолашшов и ее истощения*

Выявлено разобщение процессов образования дофаыша из дофа и норадреналина из дофамина.

Установлено, что на I сутки перитонита слагается $> -адрено-рецеп торная активность мембран эрюдоцитов как проявление стрессовой регуляции спмаатико-адрелалоюй систеш в фаза напряжения. Это происходит в сочетания с повышением активности супероксиддисцутазы в каталазы в эритроцитам.

Установлено, что на 3 сутки заболевания антиоксидантше ферментные систеш, щаксамрущиа гидроперекиси липадов баологнчео-ких мембран, истощаются.

Обнаружена прямая зависимость между степень» дестабилизации мембран эритроцитов от сроков перитонита, проявляющаяся извравднаем способности мембранных рецепторов связывать адреналин

Практическая значимость. Разработана биохимические тести, которые служат критерием гялеоти проявлений гнойного перитонита, в частности, - комплексное исследование степени дестабилизации мембран эрлтроцнгоз, интенсивности процессов псракпского окисления лшшдов эритроцитарных мембран, состояния антиоксидангяой ферментной системы.

Дохсазаиа необходимость активация систем антиог.оидактной защиты организма при перитоните, особенно на поздних стадиях заболевания.

В клинических условиях при выявлении структурной дестабилизации мембран эритроцитов требуется адекватное годдерзаняе функционального состояния эритроцитов.

Предложенные в настоящей работе методики оценки степени деструктивных пзиешшШ иамбрап эритроцитов, активности супероксид-дисэдутазы, каталазной активности эритроцитов могут быть использованы в практике клинического контроля за янтенсишостьп системных изменений в организме па различных стадиях патологического процесса и рекомендуются как метода экспресс-анализа при Eiidope средств направленного воздействия интенсивной терппии острого перитонита.

Использование а практика в качестве объективного теста поляризационного способа определения состояния мембран эритроцитов позволяет в ранние сроки диагностировать степень повреждения эритроцитов, тем самым правильно ориентировать клинициста в прогнозировании развития гемизеской и тканевой гипоксии при перитоните.

Апробация работы и публикации. Материалы диссертации докладывались а обсуздалиеь на У конференции молодых ученых Ярославского государственного медицинского института (г.Ярославль, IS84), Iii Всесоюзном симпозиуме со гипербарической медицине (г.Москва, 1985), I выездной проблемной комиссии по ГБО (г.Воронеж, IS88), иежкафедральной конференция ЯП.Ш (г.Ярославль, 1988), меакафед-ральной конференции медицинского фа^лмета ЭДН им. П.Лумумбы (г.Москва, 1989), U Всесовдном съезде по ГБО (г.Ыооква, 1989).

По тепе диссертации опубликовано 8 научних работ, представлено 2 рационализаторских предложения, получена приоритетная справка по заявка к авторскому свидетельству й 4394574/14 от

8.07.19Ш Г.

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, методов исследования, трех глав собственных исследований, заключения, заводов, указателя литературы, включающего 177 отечественных и 85 иностранных работ, и приложения. Работа изложена ш У/-/ машинописных страницах и включает 32 рисунка и 7 таблиц

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ

¿.¡атерцал и методы исследования. Б качестве экспериментальных животных использованы белые иемшешше крысы массой 150-200 г. Общее количество жизоишх - 359. Модель острого перитонита создавалась внутрибршинным введением фильтрата Ъ% каловой взвеси животных из расчета 7.5 мл на I кг массы (С.С.Ременрик,1365;В.Ф.11е-ДЕедез,1975). Было проведано 3 серии опытов, в которых животные содержались в одинаковых условиях. С учетом суточных биоритмов, забор материала производился в утреннее время (с 8 до 10 часов. I. контрольная группа состояла из 136 еивотных, которым вводился внутрабршшшо йизиолопгчесшш раствор (0,85%), для сравнения с показателями в группах: 2. - "перитонит на I сутки" - 102 кивот-ншс; 3. - "перитонит на 3 сутки" - 121 животное. Забор материала осуществлялся под эфирным наркозом.

В качестве методик исследования использовались снектрофото-метрическии, флюоресцентный и поляризационный метода анализа:

- для определения тканевых катехояашнов - флюоресцентны;! метод Э.Ш,1;атлдной, Ь.В.Ыенышкова (1967);

- для оценки функциональной активности Р -адрепорецапщш - спек-тро|отометр:1чески2 способ, предложенный В.Н.Соминокш с соавторами (1360);

- для определения активности сулероксидцисодтазы - флюоршетричео-кий

метод . Сри^- / у. ^хьсСоиСсА/ (1569) в собственной модификации (рац.вр. й 710 ЯГ4К от 14.12.1888г.);

- для определения активности каталазы эритроцитов ~ иодометричео-кыи метод, предложенный Г.А.Ба0енко, Ы.Н.Гоинацким (1976) в собственной модификации (рац.пр. }'■ 485 ЯШИ от 27,05Л£В4г.);

- для определения активности пероксндазы в плазме крови - спект-рофотоматрический метод А.П.Левицкого с соавторами (1979);

- для оценки степени дестабилизации мембран эритроцитов - поляризационные метод, разработанный авторои (Р.Р.Якубова, А.В.Мурин, 1980) (приоритетная справка по заявке к АС У* 4394574/14 от 8.С7.

-'1988г.);

- для изучения изменений в липидаой фазе мембран эритроцитов -флюоресцентный метод о использованием флюоресцентного зонда-нистатина, предложенный В.И.Крнловш с соавторами (1984);

- для изучения трансформация формы эритроцитов у животных по срокам перитонита - мэтод электронной шкроскошш с увеличением в 10 ООО раз.

Полученные цифровые показатели обрабатывались методами вариационной статистаки с использованием критериев Стьидента и Фишера на ЗН.1 бэш-6.

Р533УДЫАТЫ шшдовшш

Основные закономерности изменения содержания катехоланинов' в тканях висцеральных органов животных в .различные сроки перитонита. Исхода из того, что эдаект стрессорной реакции на содержание тканевых катехолашнов обусловлен усилением их высвобождения из мест синтеза, в перцув очередь была прослежена дгшашка содержания гормонов в мозговом слое надпочечников в различные с]эоки перитонита.

На I сутки перитонита в мозговом слое надпочечников имеется тенденция к увеличении уровня адреналина по сравнении с контрольной группой на 25£ (р ^ 0.05)(рис.1). На 3 сутки эксперимента наблвдается снижение уровня адреналина на 36,4/. (р£0,05). Направленность этих изменений обусловлена взаимоотношением метаболичеог кнх процессов- в мозговом и корковом слоа надпочечников, так так иегшшровашгэ норадреналина о образованием адреналина в ¡етзговои слоа надпочечников контролируется, в основном, глюкокортахоидами, уровень шторок при перитоните значительно снижается.

Уровень: ворадреналана сшивается на обоих этапах эксперимен-. та соответственно на 35,6$ в I сутки (рл. 0,05) и на 45,5?. в 3 сутки перитонита (Р^0,05). Таким образом, наблюдается избирательное ангибиро5аниа специфических клеток мозгового слоя кадаочечка-. ков, спошалЕзированных на синтеза норадреналина в I в 3 сутки перитонита, а стимуляция адреналинсинтезирувдпх клеток в I сутки перитонита. Скорость синтеза дофамина из дофа несущественно уменьшалась в 143 раза на I сутки эксперимента по сравнения о контрольной группой я лишь на 3 сутки перитонита снизилась в 2,8 раза (¡^/0,05). Это» вероятно» овязано с лабильность» фермента дофа-декарбовсилазн, имеющему внсокую степень сродства к своему субстрату дофа на I сутки эксперимента. Ввдоинтоксикация и гипоксия, сопровэадащие перитонит, влияют на обиую скорость синтеза дофа-

мина s поздние сроки заболевавши. ' L

Наблюдаемое сштение уровне, предазственника катехоламинов -дофа на 17,9$ в I сутки (р> 0,05) а на 32? в 3 сутки перитонита связано, очевидно, о недостатком поступления субстрата в условиях усиленного выброса катехоламинов в кровоток в рашша срока лари тошна, и свидетельствует о несостоятельности в истощении основной системы биосинтеза катехоламинов в поздние срока леритонига.

Ыа оледунцеи этапе исследования било изучено соотношение катехоламинов.в органах на примере печени, сердца, легких и почек ' в различнее срока перитонита.

Анализ изменений показателей САС в печени выявил увеличение содержания адреналина к I суткам эксперимента на 36,6^, которое прогрессирует к 3 суткам заболевания и достигает 90,14^ (р/0,05).. Скорость синтеза адреналина из норадреналина соответственно возрастает в 3,08 раза на X сутки.и в 4,53 раза ка З сутки эксперимента. Наряду о этим уровень норадреналина свивается на 56$ к ï суткам (р^0,05) и далее на ЪЪ% к 3 суткам перитонита.

Скорость гидроксилирования'дофамина в норадрзналин сниаается в 2,56 раза, на I сутки перитонита, оставаясь до-презцеиу низкой к 3 суткам эксперимента, на этом этапе содержание дофамина также уменьшается на 45,4$ (р/0,05). Очевидно, икактивированн фер.:ент биосинтеза норадреналина.

Содержание дофа в ткани печени снижается при моделировании . перитонита в I сутки на 12/5 (рь.0,05) несущественно, в 3 сутки -на 22,2/3 (piv0,05), Поскольку дофа синтезируется в органе, мокно говорить о тенденции к истощениз резервных возможностей предшественника катехоламинов в печени.

Нарушение утилизации катехолашщов'печенью при перитоните' создает вероятность нарушения мтсроццркуляциа.в органе, замедления кровотока, явлениям стаза. В результате увеличивается обцее сопротивление сосудистой систеш печени и нарушается отток крови из сшисшпчвской области, что вызывает прогрессируюяу® гипоксию органа и нарушение функции гвпакщитов,

В I сутки перитонита зарегистрировано снижение в сердечной ткани воет юученних показателей катехоламинов относительно показателей контрольной группы (рис.1). Зги данные свидетельствуют об йлшинаодк катехоламинов из органа, причем в процентной отношении уровень норадреналина уменьшается значительней {на 79%) ($¿0,05), чем уровень адреналина (на 24,0) (р\0,05). Снияение уровня ка- 1 тзхолаишов в сердечной ткани по оравненшо о норлой, вероятно,

%

100. . Дофа Дофамин Норадреналин Адреналин

60

60 легкие

40 / печень >

20 П - /__печень легкие ^адпоч.

V/ 20 40 ' ^«г^. печень Х^Ьщгкие \ ^надооч. X почки сердце ^^ почки ^ надаоч. \\\надпоч, X \ сердце

60 сердца \ печень ^ почки

80 ^сердце

100 ■ почкя •

I сутки перитонита

~ овязано со структурными довреаденияш едредаргичеокой нервней системы шокарда и нарушением способности шокацдиоцитов к адсорбция катехоламинов из крови и их депонированию.

Нарастание содержания адреналина в сердце в 3 сутки перитонита относительно показателей контрольной группы на 31,2$ £рь0,05) свидетельствует об усугублении гипоксического состояния сердечной ьшшцы. Это связано с тем, что адреналин резко увеличивает потребление кислорода миокардом при снижении коэффициента его использования. Одновременно с этим кагехоламины тормозят его адекватное использование для окислительных процессов.

Поскольку ткань легких изобилует всеми ферментами для биосинтеза катехоламинов, оценка, показателей сишатако-адреналовой сио-теш в ткани легких может осуществляться не -только с позиции адсорбции катехоламинов из кровотока и их метаболизма, но й с позиции продукции гордонов. Общая картина изменений в содержании цред-шественника катехоламинов - дофа при перитоните.свидетельствует об истощении системы синтеза катехоламинов и отсутствии резервных возможностей этой системы. Это выражается в сшшенш содержания дофа в I сутки перитонита на 16,5$ (рьО,С5), прогрессирующим к 3 суткам заболевания (47,9$) (р^0,05).

Уровень норадренаяина в легких практнчеоки не изменяется в I сутки перитонита, что связано с высоким содержанием в ткакд дофамина, так как легкие обладают высокой до£а-декарбоксилазной активностью, Содержание дофамина в I сутки перитонита возрастает относительно показателей, контрольной группы на 69$ (р/0,05). С другой стороны, это может быть связано с состоянием сяналтической передачи и поступлением норадреналияа в кровоток.

Увеличение содержания норадреналина на 31!? в ткани легких в 3 сутки перитонита (рх0,05) мотет обуславливаться подавлением процессов метаболизма торг,юна и,- в частности, угнетением окислительного дезамняирования моноаминов с помощью шноаминоокспдаэн. В результате ухудшаются возможности инактивации норадреналина легки-ш, страдает юс барьерная функция. Кроме того, ыабладаеыоз увели-ченив уровня норадреналина в легочной ткани в 3 сутки перитонита является свидетзльбтвом шзокоястрзкщш легочных сосудов и отражает влияние гипоксии 'на сосудистую стенку. Результатом является повышенно сопротивления в сосудах малого тфуга кровообращения и на-дгшеш:е функции легких при перитоните.

В почках на обоих этапах моделирования перитонита истощается! зьпао катеходашшов. Так, на I сутки перитонита содераанае адрена-

"лила уменьшается на 59,7$ (£¿0,05), норадреналина - на 82,9$ (д/О.Об) относительно показателей контрольной группы. Отмечается также несущественное сншсеняэ дофамина (на 17,2.1) и дофа (на 19,5',?) (рь.0,05), которое прогрессирует в динамике развития перитонита, достигая уменьшения дофамина на 53, ЗЙ и дофа соответственно на 63,3^ (р^О.ОБ) на 3 сутки эксперимента. Очевидно, полученные закономерности определяются активностью катабслических ферментов - катехолоргометшшрансферазы и моноаминооксидазы, локализованных преит^ественно в печени и почках^ Причем при длительном действии стрессора активность ашнооксидаз, как известно, уменьшается, что объясняет некоторое возрастание содержания адреналина (на 6,4%) и норадрепалила (на 18,6%) (psx0,05) на 3 сутки перитонита относительно показателей I суток эксперимента.

Итак, наблвдаешй в целом одаонаправлашшй характер изменений показателей сишатико-адреиаловой системы ряда эфйвкторных органов свидетельствует о развитии общей неспецифической реакции организма в ответ m эндошгаокспкацва при перитоните.

Обращает внимание разнонаправленным характер изменений в скорости образования дофамина из дофа, с одной стороны, и яорад-реналина из дофашна, с другой, в динамике перитонита. Подобная зависимость обнаруяиваегся для всех изученных органов и характеризует в определенной степени влияние гипокскческого фактора на звено гадроксилировайшх дофамина в норедренадин, поскольку отот 1 . процесс является кислородзависшш.

Особенности изменения функциональной активности р -адрено-рэпепцри мембран эритроцитов при экспериментальное перитоните. Ila-рукешш горионально-рецепгорншс взаимоотношений в клетках органов-мшненей является решамцима,. определявшими характер я степень метаболических расстройств в. клетках, от которых зависит в конечном итога способность ^ганизма к адаптации. Простым и доступным объектом наследования меШраяы эритроцитов, которые отвечают ¿л- j/iito lia воздействие адреналина увеличением степени гипотонического гемолиза.

Как показало проведешое исследование, при перитоните процент н»?едолизаровашшх эритроцитов существенно уменьшается (15,65+6,24.«') по сравнении о контрольной группой (35,04+7,32$) (р^О.ОЗ). йто связано о теы, что в уолошях эндоштоксакацди и гипоксии при перитонита свободно-радикальное лерашшое окисление в баологичео-• кйх мембранах оолротавдается полимеризацией мембранных белков, 1

- ю -

увеличением вязкости мембраны, уменьшением механической устойчи- . вости эритроцитов. В таком состоянии эритроциты не могут ввдернать повышенного осмотического давления, вызванного быстрым выходом ионоз калия, и начинают гемолизироваться. Роль А -адренорецепто-ров в процес.е гемолиза состоит в их способности увеличивать ин~ тзнсивнссть потока К*.

При аппликация адреналина в инкубационную среду ¿л- мии> в контрольной группе животных степень гипотонического гешлиза эритроцитов увеличивается на 15,3* (рл0,05), процент негемолизиро-вашшх эритроцитов составляет 24.53+5,58^. В группе животных с перитонитом, напротив, наблюдается тенденция к сншсешю степени гипотонического гешлиза эрягроцйтов щад-аппликации адреналина, процент негемолизированшх эритроцитов несущественно увеличивается на 18,12 и составляет 17,42+3,92$.

В условиях экспериментального перитонита функциональная активность /> -адренорецзвдш понижается^ что является проявлением стресоовой регуляции САС в фазе напряжения (I сутки перитонита). Это сопровождается десанситизацией (уменьшением чувствительности) р -адренорецепгоров уеибран эритроцитов к адреналину и увеличением чувствительности к антагонисту (обзвдан), обладающему мелйра- , ностабилизируящим действием.

Динамика татекакдй показателей антаокоидантшй Ферментной системы и деструктивные изменения мембран эритроцитов при экспериментальном перитоните, В проведённых экспериментах в'плазма крови у контрольных гшвотных активность сувероксиддисмутазы составляет 4,176+0,686 ед. Та часть СОД, которая присутствует в плазме крови благодаря выходу из ферментных элементов крова, закцвдаег клетки от токсического действия .адреналина, блокируя его кислород-зависимое автоокислание в адренохром.-.Следовательно, усилвнный . выброс катехоламинов г. кровоток в I сутки перитонита требует пра-сутствия в плазме крови адекватного количества СОД. Однако в эксперименте получен болеэ низкий по сравнению- с контрольной группой уровень активности фермента в I сутка перитонита (1,802+0,503 ед.) (р/0,05). Такая данамака связана с повышением активности фермента в эритроцитах и является адаптационной реакцией, направленной на защиту гемоглобина от окислительной деструкции антериодпатамп од-ноэлектронного восстановления кислорода, способных шишпировать я поддерживать ПОЛ биологических мембран. Кроме того, это свадатель-стхг/ет о переходе систем регуляции в перцую очередь на путь под-

- и -

""держания структурно-функционального состояния эритроцитов, а не на путь защита »леток от токсического действия катехоламинов.

Повышение активности СОД в плазме крови в 3 сутки перитонита благодаря выходу из эритроцитов (5,049+0,806 ед.), создает предпосылки для повревдавдего действия СРО на уроню мембраны эритроцита. Благодаря миграции фермента из лейкоцитов блокируется СОД-эависимый механизм обезвреживания микроорганизмов лейкоцитами.

Компенсаторное увеличение каталазной активности эритроцитов а X суткам перитонита (0,598+0,053 кат/эр.) по сравнению с показателем контрольной группы (0,375+0,028 кат/эр.) (р/0,05) позволя- . ет поддерживать более высокий уровень р0£ в клетках, способствуя накоплению аитиоксвдштов в клетке. В 3 сутки перитонита происходит истощение компенсаторного механизма адаптации1 к гипоксии, что выражается некоторкм снижением каталазной активности зритроци-. тов на 21/» (р л 0,05)".

Увеличение в плазме крови общей пероксидазной активности к I суткам перитонита в 1,5 раза (р/0,05) отраяаат состояние активации неспецк$ического иммунитета организма, так как пероксидаза выполняет зандатную антибактериальную функции в организме. Дальнейшее увеличение пероксидазной активности плазмы крови к 3 суткам

• перитонита в II раз по сравнении с фоновими значениями (р/0,05) не связано'с активацией кшунитета, о чем свидетельствуют данные о летальности мвотнвх в экспериментальных грушах. Очевидно, это указывает на прогрессирующую дестабилизацию мембран эритроцитов, подтверждением чего являются данные об увеличении степени дестабилизации мембран эритроцитов при экспериментальном перитоште. Степень наиболее выразенной дестабилизации мембран эритроцитов наблюдается на'3-сутш перитонита (6,22+0,42 усл.ед.) по сравнению о показателем контрольной группы (2.62+0,39 усл.ед.) (р/0,05). Это свидетельствует о возрастании дезориентации диполей в мембране в результате снижения отрицательного заряда мембраны эритроцита, благодаря выходу неАраишювшс киолот, определяющих суммарный отрицательный заряд мембрану, из еэ состава в плазму крови. Так, уровень свободных сиаловыхКислот в плазме крови возрастает в экспериментальных группах о моделью перитонита по сравнении с контролем от 307,476+36,656 мг/л до 575,185+70,342 мг/л в сутки и 970,379^28,208 ыр/л в 3 сутки перитонита (р/0,05). Показана корреляционная зависимость изменения содержания опаловых кислот в плазме крови аналогично изменению показателя анизотропии мембран ' ератроцатов ( г =» 0,9543) .

В свою очередь, величина поверхностного потенциала мембраны ' тает большое значение для связывания лиганда мембраной. 5 то позволяет предположить существование зависимости адренорецепторной активности мембран эритроцитов от содержания сиаловых кислот в составе мембраны.

При аппликации адреналина йг> гИъо в суспензию мембран эритроцитов контрольных животных обнаружено изменение анизотропии мембран в сторону повышения на 14,9% в отличие от экспериментальной группы с перитонитом, где этот показатель содаается на 2,25/? (р 10,05). Ето свидетельствует об извращении способности мембран-Ш(г рсюятпроз связывать адреналин при перитоните, возможно благодаря существованию конкурентного связывания мембраной токсша и гормона.

Исследование лнпддной фазы мембран эритроцитов с лодащыо флюоресцентного зонда нистатина показало, что включение зонда в мем-6ралу эритроцита с освобождением энергии излучения протекает- наименее интенсивно в контрольной группе ( У фл.=2,33+0,67 х Ю"2 на I млн. клеток) по сравнению с экспериментальными группами с моделью перитонита: соответственно У фл.»7,21+0,96 х Ю~2 на I млн. клеток в I сутки перитонита (р^0,05) и .7,93^0,67 х Ю-2 на I млн. клеток в 3 сутки перлтонк?а (£¿0,05). Полученные данные отражают различия в структурной.организации лшвдной фазы мембран '■ эритроцитов в экспериментальных грушах. Интенсивность флюоресценции зонда возрастает за счет увеличения его связывания домбра- ' ной благодаря увеличению текучесхд лшхидаого бислоя при перитоните. Отличия интенсивности фдаоресцевдия при перитоните характеризуют также степень дестабилизации мембран, так как юс функция детерминирована структурной оргшшзацаей.

Итак, липидная фаза тираны эритроцита, поддеркиваодая не-обходалый уровень проницаемости мембраны (в. частности, для нистатинового эовда) благодаря существованию высокого уровня гомеопатического регулирования и наличию мощной аятиоксадантно!} системы, претерпевают структурно-функциональные изменения ара моделировании эксперт.®нтального перитонита.

Таким образом, проведенные исследования позволили выявить характерные особенности метаболической ответной реакции организма па стрессовую ситуацию при моделировании животным острого перитонита на различных системных уровнях организма.

вшщ

1. На I сутки экспериментального перитонита выявлено активизирование адреналинсинтезаруюдях и ингибирование .норадреналиИ|_ синтезирующих клеток мозгового слоя надпочечников, что сопровождается снижением содержания норадреналина в ткани мозгового слоя надпочечников и связано с недостатком поступления субстрата для дзкарбоксилирования дофа в дофамин.

2. На 3 сутки экспериментального перитонита в период уменьшения скорости метилирования норадреналина в адреналин существенное снижение содержания предшественника катехоламинов-доЛа в тка-г нях печени, мозгового слоя надпочечников, легких, сердца, почек свидетельствует о несостоятельности основной системы биосинтеза катехоламинов при дательном действии перигопеальной зндоинтокси-кации.

3. В динамика эксперт,ганталького перитонита обнаружен разнонаправленный характер изменений в скорости дегсарбоксилпрования дофа в дофамин, и гидроксилирования дофамина в норадреналин. Подобная зависимость обнаруживается для тканей всех изученных органов и свидетельствует о разобщения процесса синтеза катехоламинов на этапе гпдроксидирования дофа!лша в норедреналш. 1

4. На I сутки экспериментального перитонита функциональная активность р -адренорецепторов мембран эритроцитов извращается. Это выра:2ается ел уНчо в десзнситизацпл А -адренорецепторов мембран эритроцитов к адреналину и увеличением чувствительности

к антагонисту (обзидан), обладающему ыембраностабилизирущшл действием.

5. Нарушения в системе биосинтеза катехоламинов и утилизации их тканями при перитоните, приводя к дефициту в организме антиок-сидантннх ферментов, опосредованно способствуют активации процессов верекисного окисления мембранных липидов, приводящего к изменению струЕтурио-фнкционального состояния лшпщноИ фазы мембран эритроцитов.

6. Наметание степени дестабилизации мембран эритроцитов при перитоните, приводящее к извращению их р -адренорацепторша свойств, является одшш из патогенетических факторов влияния пери-тоноальной ондоинтоксикации на организм посредством изменения мембранных спалог.чикопротеидов,

?. Поляризационный метод оценки степени дестабилизации мембран эритроцитов является способом ранней диагностики довре:дания

- 14 -

.i • •

эритроцитов дри перитоните и может быть рекомендован для исподь-

зования в клинической практике.

Список работ, опубликованных по материалам диссертации

1. Некоторые показатели обмена катехсламшов у больных ревматическими заболеваниями // Ревматология : Издание ЯШ. - Ярославль, 1985. - С. 119-122 (сош. с Ц.И.Козловой).

2. Влияние ГБО на поляризационные свойства тембран эритроцитов при экспериментальном калоюм перитоните // Гипербарическая оксигенация (в хирургии и реаниматологии). - Тез. Ш Симпозиума по гипербарической оксигенации 2-3 окт. IS85 г. - Ы., 1985. - С.108-109 (совм. с С.Ю.Белокуровым).

3. Влияние гипербарической оксигенации на изменение функциональной активности -адренорецепции в условиях экспериментального калового перитонита // Анестезиология я реаниматология, 1986. - & I. - С. 50-51 (совм. с А.В.Смирновым).

4. Действие эндогенной интоксикации на нервную и симпато-адренаясшув систецу // Клиника и лечение зндоинтоксикации при острых хирургических заболеваниях - Ярославль, 1986. - С. 44-51.

5. Исследование липидаой фазы эритроцитарннх. мембран методом флюоресцентных зондов нра экспериментальном перитоните в условиях гипербарической оксигенации. - Ярославль. - ЯШ, 1986. -8 с.-Деа. в ВИНИТИ, 2X.I0.66. - Já 7329-B8S (сош. с А.В.Муриннм, В.М.Ы< ЛОДЩШШ).

6. Изменение адренороцепторной. активности мембран эритроците: при экспериментальном перитоните. Исследование ¿» misto .-Ярославль. - ЯШ, 1986. - 10 с. Деп. в В1ШТ11, 21.10.86. - ¡i 732Ü-B86 (совм. с А.В.1ЙУРЯШШ, В.М.ЬЗолодшшм).

7. Динамика показателей симпатико-адреналовой системы у боль ных перитонитом под влиянием гинсрбаричсской оксигенации // Вестник хирургия да. Й.И.Грэкова, I98S. - Т. 142. - й I. - С. 37-41 (совм. с 1L.1Í.Белокуровым, С.Ю.Бэлокуровым).

8. Исследование крови больных перитонитом методом ÍL1P в уело виях ГВО. - Тез. 1У сядтозиуш (о участие« иностранных специалистов) Тилербарическая оксигенации (Новое в практике и теории ГБО) 11-12 октября 1£В9г. - Москва, 1969г. - С. 36-37 (сош. с А.В.Муриннм, Р.Б.Сглтычем).

U