Автореферат и диссертация по медицине (14.00.29) на тему:Диагностика нарушений конечного этапа свертывания крови при ДВС синдромах, микротромбоваскулитах и некоторых геморрагических диатезах

6 01 Я*

лИШСТЕРСТВО ЗДРАВ00ХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФВДЕРЛЦШ Алтайский медицинский институт

На правах рукописи

ПЕРЕГУДОВА Ирина Геннадьевна

ДИАГНОСТИКА НАР№ЕШЙ КОНЕЧНОГО ЭТАПА СВЕРТКБАНИЯ КРОВИ ПРИ ДБС СИНДРОМАХ, ШРОТРОМЕОВАСКУШАХ И НЕКОТОРЫХ ГЕМОРРАГИЧЕСКИХ ДИАТЕЗАХ

14.00.29 - Гематология и переливание крови

А а го реферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Барнаул - 1992

РаЗотц ьылолньнк в Алтайском государственном медицинском институте

Ьедуцлш учреждение: /ыши^р&дскип ордена Красного Знамени научно-исследовательский институт гематологии и парзлиаания крови.

Защита диссертации состоится "_ "_в час.

на заседании специялиэироыииюгэ совета К. 064.25,01 при Алтайском государственном медицинском институте по адресу: 656009, г, Барнаул, проспект Ленина, 40.

С диссертацией с можно ознакомиться ь библиотеке Алтайского госу даррльениого медицинского институт. Адрес библиотеки: 656017, г. Барнаул, ул. Папанинпеа, 144.

Автореферат разослан "_" _1592 г.

Учен"!* секретарь слеоиепиаи* ровкнноро совета, кандидат медипинпких наук, доцент

Е.И.Буевич

.'.'''"Ч'^Ы;?!'! о

*'" ' Актуальность проблемы . В точение длительного времени е ге-.....

^ тд^тодиолопш тщательно изучались нарушения всех атялов процесса 1ссерт.гц*й ]

г 11 ¿Вйр'ГИаания крови, кроме конечного - процесса обрвзовакил и полимеризации фибр!Ш-мономеров(К!).Похалчтслмп, что б мо!:о гранях и руководствах по патологии систекн гемостаза (3.С.Варкогам, 1980, 1968; О.К.Гаорилов, 19В1; Д.Д.ЗерЗию, 19о9) наруы<?пил в этом ззене списываются лишь в связи с осгеземием дисфиЗриногено-ми Л и действием антикоагулянтов, тогда как ьогмояы? нарушения процесса самосборки я влияния плазиы Сольных на этот процесс оствютсл неизученном.

Научная база для восполнения этого пробела эелокона в последи)!!"; годы в фундаментальных роботах школ В.А.Белнцера, Б.Л.Куд-рягава, А.Ш.Бьпяевского, Д. М.Зубаироза. Ими разработана методика исследования полимеризации Ш (А.И.эдгэвскиЯ и др., 19до. 1987), обнаружены антиполжеркзациокньге свойства фибриногена и продуктов его деградации (В.А.Белииер и др., 1975), а текло гепарина и его комплексов с рядом веществ (Б.А.Кудрятав к др., 1£7С-19Ь2), впервые в сыворотке и дефибрилироваиной плазма обнарукзм пептидный ингибитор полимеризации ЙМ/ (А.Ш.Бипевский, Е.А.Чирятьев, 1983, 1965), рйссифрсвены его структура и механизм действия, отмечена малая его изменчивость в плазме при значительных гемокоа-гуляционнкх сдвигах (М.К.Умутбаева, 1985; Е.А,Чирятьеа, 1987), выявлен активатор самосборки в диализате плазки (С.К.Тажудиюва, 1987) к т.д.

в..клинике оти процессы практически не изучались. В частности, совсем нз исследовалось влиякиз плазмы больных с различиями видами патологии ге ко стала на полимеризаций нормальных $¡1. Не определено чаухв, о какой степени эти сдвиги соотносятся с общими нарушениями процесса свэртывакия крови и его коночного отала,

оцонииаемого кал тромбиноьым временем, так и тестами с дружный киагулаяимп, особенно малочувствительными к действию гепарина -на омс-.ших я.цоа и др. (З.С.Баркаган и др., 1961-1991; Л.П.Цызки-нп и др., НОТ-14(91; -'.сок.-г, кул ). Изучение действий огих ко~ ы'ула.ч представляет особый интерес, так как они образуют парциаль-киц С'.'!, ни стабилизируемые фактором ХЬ. Параллельные исследования с иокодмо тромбина, цельна. ядоь и их коагулаз, а такте полимеризации ¿.и в одних « тех ко образцах плазмы при ряде кироко рас-щлегршк'кних видах патология гемостаза (ДВС синдромах, острих троаооэах, гсюррагтлюских диеплазнях к др.) ранее но проводились, не срашшвалпсь при аткх а идах патологии процессы ауто- и гетеро-нолтлриэацки С-.4.

Цолью няь.лй рп^оти являлось изучение состояния конечного 1>тьт]а сне;дчл!йни>1 крови на основе изучения его с помощью разных конгулю и раздельно» оценки ауто- и гетерогплимеризации при ДЬС синдромах, тромбозах, ми^ротрокбопаскулитах И некоторых геморрагических диатезах.

Задачи ир.с ледо ракия :

!.. Срашить информативность тестов с цельным ядом щитоморд-||1№. и ого гимэкоигулирумей фракцией - анцистроном-М дли шктле-нил мэруи/лшй коне' юго отапа свертывали« кропи.

2. Разработать и апробировать метод определения.. влияния плазмы солыик на полимеризацию донорских фибрин-мономеров (тсст гетерэполиморизои.яи).

3. Провести сравнительное изучение методов исследования действия плазмы больных на полимеризацию ОН и мет<"Лй оценки аутополи-ы.зризшшк по А.Ш.Ецшзвскому и соавт. (1965) при разных видах п&то.. логии гоне стаз а (дБС синдромах, трокйозех» геморрагических диате^ эах).

Л. Определить связь нарушения конечного этапа свертывания крови со сдвигами с других звеньях системы гемостаза и с феноменом паракоагуляции.

5. Определить диагностическое значение тестов ауто- и готе-рополимеризации при разных видах патологии системы гчноствяа.

Научная новизна. Разработана (совместно с Г.Л.СухонсвоП) методика определения влияния плазмы здорошдс и больно на полимеризацию нормальных ОМ (тест гетерополимеризации), впервые приедено сравнение его показаьиЯ с результатами теста аутополимеризации у больных с различными нарушениями и системе гемостаза.

Установлено, что в процессе развитие острого и подо строго ДВС синдрома происходит нарушение неферментативной фаэм конечного этапа сиертивания крови, показана способность плазмы больных тормозить самосборку донорских СМ. Выявлена сглзь этого •■'.сна с Положительной паракоагуляциеЯ (наличием РйЖ и ранних ПДЬ в плазме). Впервые покапано тормозящее действие на гетерополиморизаци» !•'•< антнкоагулянта "волчаночиого" типа.

У больных с острыми трэкбоз&ми выявлено ускоряющее влияние плазга на полимеризации йМ.

Устаиоглен факт частого нарушения процесса полимеризации & при геморрагических мезенхимальньа дисплаз^ях (Г.>$) и крайне редкого - при тро1Йоии?опа?иях без диспласгического синдрома.

Описан феномен тормокения гро^бинового времени свертывания преинкубацией к лазки с раствором яда гюрзы, что дополняет методологию исследовышя конечного этапа процесса свертквелия крови.

Практическое значение работы Показано, что при анализе коя-гулограм.гы необходимо учитывать возможное влияние на все ее параметры замедления процесса самосборки.

Разработан метод исследования влияния плазмы Оольных на по-

лиморизацшо донорских ОМ (скорость полимеризации донорских фиб-рин-мономсроо - СВД1м'.) и определено диагностическое значение этого тес'/а при ДБС синдромах, тромбозах магистральных сосудов, геморрагических мезенхимальных дисплаэиях (положительное решение по заявке на изобретение "Способ дифференциальной диагностики нарушений полимеризации фнбрин-конриера" 4750699 (14) /123000/,

Ьшшлено самостоятельное диагностическое значение тестов с раствором цельного ядь щитомордника обыкновенного и с ого гемокоагулирующей фракцией и распознавании нарушений ко"ечного отапа процесса свертывания крови, обоснована необходимость 1« сочетаиного применения. Установлены показания к применению этих тестов в диагностической практике.

Найдено достоьерноо удлинение средних показателей ауто- и гетеронолимеризации ОМ и нарушений конечнохх) отапа свертывания крови в адовых тестах у больных с ГМД в отдичие от больных с тромбоцита иатияии без диспластического синдрома.

Ьнедг^нив и практику . Результаты исследования внедрены в практику работы Алтайского гематологического и зонального гемофи-лического цон'фь, подразделении ВГ11Ц (г. Москва), лабораторий Алтайской краоьой клинической больницы, краевого гематологического отделения п клинической больнице "Трансмаы" (г. Баршул).

Получено положительное решение по заявке на изобретение "Способ дифференциальной диагностики нарушений полимеризации фибрин-моиомора" № 4750849/14/126000, от 04.06.50 г.

Положения, внносимие на защиту:

1. Установлена способность плазмы крови о'о. ¿ных с ДБС синдромом замедлять, а при острых тромбозах магистральных сосудов ускорять полимеризацию вводимых извне (донорских) фибрин-мономеров.

2, Предложен метод дифференциальной диагностики нарушений

полимеризации <М при дисфибрииогенешшх и при наличии и плазма ингибитора этого процесса на основе сравнительного изучения ауто- и гетэрополимеризации.

3. Показана високая частота наруиений конечного этапа сверти-валил крови у больных с внутрпсэсудисюК гсмоко^гуляцие!! и с ГЛД, что должно бить учтено при интерпретации ко ary.no граыи и использовано в диагностике указанных видоь патологии.

4. Определена самостоятельная диагностическая значимость изучения конечного этапа свертквапня г, тестах с целый« ядом читонорд-кика и его Гемс коагулирующей фракцией.

5. Предложено использование феномена торможения тромбинового преузки свертызония преинкубацией плазмы с лдо.ч гюрзы , как дополнительного теста, помогавшего еклзлять нарушения конечного этапа свертывания кроЕИ.

Публикации. По тепе диссертации опубликовано 15 работ, в том числе 12 - в центральной печати.

Апробация работ». Основныз положения работы доложена и обсуждены на П Всесоюзной конференции "Поражения Сосудистой стенки и гемостаз", (Минск, 1933); на Всесоюзной конференции "йизиология и патология гемостазаг (Полтава, 1991); на Всесоюзном съезде гематологов и траисфузиологов (Киров, 1291); на IУ, У, УН Всесоюзных: герпетологических конференциях а Асхабзде (1981), Ташкенте (1965), Киеве (1989); на 9-м Европейском симпозиуме по изучению токсинов животных, растений и микробов (Эстония, 1990), на I Всесоюзной токсикологической конференции (Ашхабад, 1991).

Объем работы 'Диссертация изложена на 124 страницах машинописи, и иллюстрирована 54 таблицам и 7 рисунками. Состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования,

4 глав с изложением результатов собственных исследований, заключения и выводов. Содержит список литературы из 101 отечественного и Й2 зарубекнмх источников.

СОДЕРЖАНИЕ РАБО'Ш

Материал'; к методы исследования. Развернутое исследование системы гемостаза с детализированной оценкой конечного этапа процесса свертывания выполнено у 21? больных, из та у 63 с разными видели чЬС синдрома, 42 - с острыми тромбозами различной локализации, 64-е иммунокомплексной патологией, 27-е ГЭД, 30-е тромбоцитопатиями. Контрольные исследования проведены у 73 здоровых. л'одей в возрасте от 1Ь да лет.

Использованные метода исследования системы гемостаза: 1)тром-боцитаринй гемостаз: подсчет количества тромбоцитов в крови (фазово-контрастний метод), определение спонтанной агрегации по 11.»¡.Тарасовой (IW9), фактора Ьиллебранда в плазме по О.А.Цигулевой и со-авт. (Ii'tiO), исследование агрегацнонной функции тромбоцитов с ви-числеиием суммирующего индекса агрегации no ¡lowui-a at ьл. с дополнениями ii, Г. Диче в а (197Ь).

2) коагуляционный гемостаз: силиконовое время плазмы, активированное парциальное •гром"опласти.човоо время (АГЛ'В), тромбиновое время, концентрация фибриногена в плазме, шггитромбин-Ш, гепарин-кофакторная активность плазмы по серийному тромбин-гепариновому тесту (К.^.Бишевский);

3) фибринолиэ: XTla-зависишй эуглобулшюьый лизис по Г.О.Еремину и А.Г'.Архипаву (1982), лизис плазменных сгустков эуглобулино-вой фракции при стимуляции стрептокиназой по Cordon at а1.(1978)

в модификации В.Г.Лычева и А.Е.Дорохова (IS8I).

4) методы определения РСЫ>К и ранних ПД5: отаноловый тест по oonai et в1. (1971j,протаминсульфатний тест по Latallo at al. .

(1971), тест склеивания стафилококков поНаиХеог е1 »1, (1970) с использованием отечественного диагностикума (З.С.Баркчгвн и со-авт., 1988).

5) коагулягиионные тесты с ядом щитомордника обмкновенного

( Agkiвtrodon Па1уо ) по Л.П.Цывккной и сопчт. {1ЧП7) и его

гемокоагулирующей фракции.

6) методы оценки аутополимеризацки 'М (Л.Ш.Бышевский и сопвт., 1985) и влияния на скорость самосборки донорских ФМ плазмы больных по разработанной нами методике.

7) изучение фибринолитического действия цельного яда и его гемокоагулирующей фракции на фибркновкх пластинах и влияние гепарина на свертывающую активность яда, анцистрона-й и тромбина.

Сравнительное изучение тестов с цельна ядом щитомордника

и его гемокоагулкруюей фракцией (аш;истрсном-Н)

Как цельный яд, так и его геио коагулирующая фракция вызывают свертывание плазмы и фибриногена без ретракции кровяного сгустка. Сгустки подвергайтся быстрому полное лизису в Ь;» мочеьине, то есть не стабилизируются фактором ХЬ. Вместе с тем, между ядом и анцистроном-Н нами выявлен ряд отличий:

а) сгустки, образованные под влиянием алцистрона-Н, не подвергаются спонтанному лизису (фракция лишена фибринолитических компонентов); б) при изучении действия на фибрин установлено,что яд образует значительные зоны лизиса, тогда как батроксобин (коа-гулаза яда ВокИгор» аи-ох ) дает существенно меньшую зону лизиса, а анцистрон-Н вообие не оказывает лидирующего действия.

Вопреки имеющимся литературным данным, нами установлено,что в очень высоких (нефизиологических) концентрациях гепарин тормозит свертывание как яда, так и его коагулаэы (табл. I).

Таблица 1

Влияние гепарина на коагулирующую активность цельного яда щитомордника и анцистрона-Н

Коагули рууиций агент

Коагуляциош1ая:иремя свертывания 1с; при доОавле-активнссть.с :нии к плазме гепарина и концентрациях:_

_: 0.1 (I) : 1,0 (2) :Ю.О (3)

)1д щитомордника

обыкновенного 29,2+1,2 31,4+0,1 32,1+0,3 34,6+0,2

Рк <0,1 <0,05 >-0,01

Анцистрон-Н 26,1+1,1 29,7+0,3 ( 4 ) 30,5+г\3(5) 31,2+0,2(6)

Рк ~ 0,001 -.0,001 -0,001

Р между группами Р^ <0,06; Р2_з <0,001; Р^ с 0,02;

Р^ <0,02

йто действие гепарина оказалось сильнее виракеннци в системе с очищенный фибриногеном, чем с плазмой, что дало основание предположить действие ядоьцх коагулаз па полимеризацию <5М. В опытах по изучению действия анцистрэна-Н на полимеризацию й,.!, полученных из нормальной плазмы ( Г)0 МС ТОДУ ^ • • Радзешгч, Е.Г.Ходоровой, 1569). Это предположение было нами подтверждено (рис. I).

При сравнении ядовых тестов у различных групп больных установлено, что они не всегда дают совпадающие результаты: так, выявлено, возрастание коагуляциопной активности в щитоыордникоьои • тесте при ДОС синдромах (Рк с 0,001) при отсутствии изменений алцист-рюнового и, напротив, достоверное снижение коагуляциошюй активности в шщистроновом-Н тесте при острых тромбозах и и ммуно комплексных заболеваниях при отсутствии изменений щитомордниково го теста (Рк < 0,05 и Рк < 0,001).

Продукты паракоагуляции вызывают ускорение свертывания в щи-томордниковоы тесте (133,2+6,4% активности).

Ускорение свершвания в щитоыордниковом тесте било достовер-

сек

Время полимеризация фибрин-мономеров

60 SO

40 --ЗО 20 10 О .

бел А-Н

а ода с янцнетроком-н

Piic.I Влияние янцистроип-// на чре.мл поппморюяцпи донорских ф1хбр»5:;-Д10150МС|>0П. Услоиныс обозначения: I - смесь ФМ с буфером; 2 - cftíccb ФМ с All ico;iry./!iunonnoH активность» 27,1 с; 3-е ЛИ icoaryjimsnomioii активностью 35.6 с; -1-е АН коагуляционной a kts sun остью 65,7 с; 5-е АН коагуля-шюнпои актипностью 150,2 с-

ним как при гиперфпбриногенемии (Рк \ 0,001), так и при повышении содержания и ранних ПД5 (Рк ч 0,01), тогда как ангчетроношй тест Сил менее чувствителен к отим влияниям.

При сравнительном анализе показаний тестов с цельным ядом и ею коагулизой у больных с ДВС синдромом выявлено, что коагуляци-огиш! ышшнзеть шнтомордникового теста оставалась достоверно повышенной при гипо коагуляции в АПТВ, тогда как коагуляционная активность ьнциетроноього теста при этом снижалась. При гипоковгу-ляцми по тронбиновому тесту коагуляционная активность снижалась (Рк \0,02) лишь в шшистроновом гесте. Иго показывает, что мек-ду показаниями вдтомордникового и анцистроноього тестон нет полного соответствия, что говорит о самостоятельном значении этих диагностических методик.

Сравнительное изучение влияния плазмы больных с различными'

видами ьнутрисогудистого сьертывшшя крови на скорость полимеризации фпбрин-мономсров

Проводилось параллельное исследование аутиполимеризации по А. и. Быи;с ьс кому и др. (15дЬ) и оценка влияния исследуемой плазш больных на скорость полимеризации донорских фибрин-мономеров,по-лучаемих г.о методике И.М.^адэевнч, Е.П.Ходоровой (1969). Этими методами нами била исследована плазма 43 больных с острыми тромбозами сосудов различной локализации, 31 больного с острым и под-острым ДВС синдромом и 53 дольних с иицунокомплексной патологией. Предварительно на 20 больных с различными видами пнутрисосудисто-го свертывания крови и 20 здоровых людях было проведено сопоставление результантов ауто- и. геторополиморизации СМ (30,2+3,6 с - у больных, при 16,140,1 с - в контроле), так и введенных извне в плазму больных &М здоровых людей (29,4+4,9 с при 15,3+0,1 с - в

контроле). Тем не менее, у отдельно взятых больных показатели ау~ то- и гетерошшшернзацни не всегда совпадали, что говорит о самостоятельном значении зтих определении.

13 дальнейшее исследованиях проводилось изучение влияния плазмы больных на полимеризацию донорских 'З* (гетерополимеризация ФМ или скорость полимеризации донорских Ф--1—СПДФ>.1).

Таблица 2.

Влияние плазмы больных с внутрисосудистцм свертыванием на СВДФМ

Нозологические группы: Число ¡Влияние плазмы больных на: Рк :ноблю- ¡полимеризацию донорских : : донн» :4>М (у,;п)

Острые тромбозы II 9,9+0,9 Ч 0,001

ДОС синдромы 14 24,3+2,4 ч 0,01

I (фаза

2 фаза 16 . 38,6+9,3 <0,02

Иммунные болезни:

а) микротромбоваскулиты Ю 12,0+2,8 N0,1

ШенлеКн-Геноха

б) СКВ 10 27,3+1,9 чО.СЛ

в) ревматоидный артрит 10 15,8+2,2

г) другие фрьм 7 30,5+14,2 <0,5

Контроль 20 15,3+0,1

Ускоряющее влияние на.гетерополимэризацию оказывает плазш больных с острыми тромбозами. При иммунных микротромбоваскулитах нарушений но било, кроме больных с СКВ (замедление).

Обнаружена связь нарушений гетерополимеризации со сдвигами конечного этапа процесса сеертисшпш крови по глобальным показателям - удлинении трэмбннового времени, результатами анцистроно-вого и щнтомордникового тестов.

У £0 из 37 больных с иммунокомплексной патологией в плазме

был обнаружен онгифосфолипидный антикоагулянт "волчаночного" типа (ВА).

Таблица 3

Зависимость показателей СПДФМ от наличия в плазме "волчаночного ант и коагулянта"

Группа больных с : Число наблюдений иммунной патоло- : гией • :

СП®, с

Х+га

I. Без ВА

2. С ВА

Рк

Рк

17 20

15,6+0,7 <0,1

22,1+2,5 <0,05

\0,02

Как видно из таблицы 3, плазма больных с ВА существенно замедляет гетерополимеризацию, тогда как без него показатели близки к норме.

Этот, ранее не отмеченный в литературе факт, представляется нам чрезвычайно ражным, так как он выявляет еще один "механизм нарушения полимеризации й'<1 в пласме и указывает на то, что к <*осфо-липидннм матрицам, на которых происходит вз&имодеЯстьке плазменных факторов свертывания крови, могут влиять на процесс самосборки ФМ.

Гетерополимеризация зависит и.от содерчсания в плазме продуктов паракоагуляции: при отрицательных тестах паракоагуляции она составила. 15,7+1,4 с, при положительных - 25,4+2,0 с (Рк <. 0,001). Гетеро полимеризация ОМ тормозится также гепариноте-рапией пропорционально ее антикоагулянтному эффекту (рис. 2).

Рис.2 Динамика, удлиненна СПД'*> прп разной степепн renapsiiioDoi'i гппокоагуляцпи.

Состояние конечно го этапа свертывания крови и СПДФМ при тромкоцитопатиях и геморрагических мезенхимдльных дисплазиях (ГОД)

При исследовании 23 больных с ГОД и 16 больных с тромбоцито-патиями без диспластического синдрома нами впервые выявлено, что в плазме многих больных с ГОД нарушена аутополимеризация ФМ и »к плазма тормозит вводимые извне '5г<1 здоровых людей. В отличие от этого при тромбоцитопатиях без ГОД эти показателя в подавляющем большинстве случаев остаются в пределах нормы. Средине показатели у больных с ГОД по ауто полимеризации составили 27,2+2,3 с (Рк <; 0,01),. по данным гетерополнмеризации - 28,4+3,5 с (Р<ч 0,02). В отличие от этого, при тромбоцитопатиях без ГОД этих сдвигов не было. При ГОД были замечены и другие нарушения конечного этапа ' свертывания: снижение коагуляционной активности в тесте с ядом щитомордника в 47,6% случаев, коагуляционной активности теста с ан-цистроиом - в Iудлинение тромбинового времени - в 19%, Была уст{товлена возможность отличия дчефибриногенемии у больных с ГОД от нарушений полимеризации, вызванных наличием ингибитора самосборки ФМ путем сравнительного изучения ауто- и гетерополимери-эации Ш.

В целом примененные тесты позволяют оптимизировать исследование конечного этапа процесса свертывания крови, которые довольно часто, как показывают наш наблюдения, выявляются при различных видах патологии системы гемостаза, но в прошлом но идентифицировались.

Феномен торможения свертывания плазмы преинкубацией ее с ядом порзы

В ходе исследований мы встретились с феноменом, не описанным ранее в отечественной и зарубежной литературе , - с феноменом торможения коагуляции плазмы в результате преинкубации ее с образ-

цами яди гирзи. В опытах с нитратной нормальной плазмой было установлено, что преинкубация ее с ядом гюрзы до рекальцификации дает удлинение времени свертывания в разньтх системах. Это торможение нарастает с увеличением сроков контакта яда с плазмой (табл.З).

Таблица 3.

Зависимость времени свертывания бедной тромбоцитами плазмы от преинкубации ее с ядом гюрзы

Тест-системы

Исходные ¡Средние показатели времени свер-покаэатели :тцвания Сс) при преинкубации без яда, с ¡плазмы с ядсы в течение следуйте го времени:_

_: О минут: 5 минут : SO минут

1. Плазма+лд (инкубация) + CaCJL)

Рк

2. Г1лаэма+лд (инкубация) - мозговой тромбопластин +

CaCIo

Рк

3. Плазма+яд (инкубация) + яд о фи

Рк

4. Плаэмр+яд (инкубация; + яд щитомордника

60,4+9,3

15,6+0,3 25,0+1,1

Рк

12,8+1.1 160,2+12,5 560,4+20,1 <0,001 <0,001 <0,001

15,2+0,7 22,3+0,5 45,1+0,9

\0,5

<0,001

25,0+1,3 25,8+0,9 v 0,5 v0,5

<0,001

26,4+0,7 <и.5

27,9+3,1 30,0+2,2 120,3+9,7 180,4+1,2

<0,5

<0,001

;0,001

При сравнении действия преинкубации яда гюрзы с плазмой и очищенным фибриногеном выяснилось, что тромбиковое время значительно больше удлинялось в опытах с плазмой. Это говорит о тон, что яд при преинкубации воздействует не только на фибриноген, но и на другие компоненты плазмы, а результате чего образуются продукты протеолиза, тормозящие свертывание. При коррекции ото го процесса плазмой, адсорбированной сернокислым барием (содержит факторы У, 1TI, XI, XII свертывания и фибриноген), наблюдалось полное устране-

низ феномена торможения, а при добавлении "нормальной" старой сыворотки (источник факторов IX, X, XI, ХП) тормозящее влвдшв яда ослабевало в 2,5 раза по сравнению с показателями в тестах без добавления.сыворотки. Из представленных данных следует, что добавление нормальных компонентов плазмы и сыворотки существенно ослабляет феномен торможения свертывания ядом. В дальнейшем отот феномен исследовался на 40 здоровых людях (контроль) и группах пациентов с разлитыми нарушениями системы гемостаза. Расчет показателей проводился по разнице громбшгового времени п контроле, а после иреинкубации- плазмы с ядом. Выяснилось, что достовергое усиление торможения у больных с ДЗС синдромом, геморрагическими ме-зенхиыальнкми дисплазиями и тромбоцптопатиям;;, тогда как пр»; острых тромбозах и ¡ш^унных микротромбоваскулитах разницы с контролем не было.

Отмечено также усиление феномена торможения свертывания пре-кнкубацкей плазмы с ядом во П фазе ДВС синдрома (Р < 0,05).

в и в о л и

1. Комплекс методов изучения конечного этапа процесса свертывания крови, включающий в себя тесты с тромбином, цельным ядом цитомордника обыкновенного и его ге мо ко агул и рута>,еП фракцией (ан-цистроном-Н), а также методы определения ауто- ц гетереполимеризации позволяют диагностировать нарушения конечного этапа процесса свертывания крови и разграничивать торможение ферментного

и неферментного звеньев этого процесса,

2. При ряде форм патологии системы гемостаза тесты с цельным я до и щитомордника и его коагулазо» выявляют неоднородные нарушения, что делает целесообразным комплексное использование обеих методик.

3. Разработанная нами методика определения влияния плазм; больных па скорость самосборки ОМ г» совокупности с тестом полимеризации ФМ позволяет выявлять ускоряющие и тормозящие аффекты плазмы больных на этот процесс,

-1. Повышенное содержание Р1'иЯ{/ралних ПДФ, значительное коли-честно гепарина, антикоагулят' "волчоночного" типа оказывают замедляющее действие на гетародалимериэацню СМ.

5. Плазма больных ЛВС синдромом тормозит полимеризацию вводимых извне 2'М, тогда как при острых тромбозах чаще наблюдается ускорение этого процесса.

6. Нарушение гетерополиыеризации Ф1Л наблюдается более, чем у 70% больных с ГОД, тогда как при тромбоцигопатиях без ГОД этот феномен выявляется крайне редко.

7. Установлен феномен торможения тромбинопого времени свертывания преинкубацией плазмы с ядом гвраы. При ДВС синдромах отот феномен значительно более выражен, чем у здоровых людей.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛЖЖАНШХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Использование некоторых новых критериев трэмбогекности для оценки активности атеросклероткческого процесса. // Поражение сосудистой стенки и гемостаз:Теэ. докл. I Всесоюзной конференции. - Полтава, 19Ы. - С. 22. (Соавт. З.С.Баркаган, Л.П.Цывкина, О.А.Цигулева, Н.И.Тарасова).

2. Сравнительное изучение ретракция плазменных сгустков, образованных ботропклотазой к адом обыкновенного щитомордника.

// Вопросы герпетологии: автореф. докл. У Всесоюзной герпетологической конференции. - Л.:Наука, 1981. - С. 103. (Соавт. - нот).

3. Информативность лабораторных тестов, осноебнных на применении ядов змей фауны СССР в диагностике нарушений гемостаза". // Поражение сосудистсЧ стенки и гемостаз: Тез. докл. П Всесоюзной конференции. -М., 1983. - С. 443-44*1. (Соавт. З.С.Баркаган, Л.П.Цывкина,). .

4. Ядовые диагностические тесты и возможности их использования в ге/гасгазю логической службе поликлиники и стационара. // Актуальные вопросы профилактики неинфекционньк заболеваний.

1У Республиканская конференция научного общества терапевтов: тез. докл. - Вильнюс, 1964. - С. 75-77. (Со^вт. З.С.Баркаган, Л.П.Цывкина, К.М.Бшь'звский, И.В.Тамаркн).

5. Феномен торможения свертывания преинкубацией с ядом гнр-пы. // Вопросы герпетологии: автореф. докл. У1 Всесоюзной герпетологической конференции. - Л.: Наука, 1965. - С. 160-161.

6. Сочетание второго типа ТАР-синдрома с дефицитом фактора X, иммунной недостаточностью и пролабированием митрального клапана. // Терапевт, архив. - 1986. - № 9. - С. 137-141. (Соавт. З.С.Баркаган, И.В.Тамарин, Г.Б.Кондакова, А.Ю.Алексгадрова и др.).

7. Методика исследования активности фактора ХШ в плазме и сыворотке с помощью анцистрона-Н - коагулирующей фракции обыкновенного щитомордника: Гемостаз и ангиология: методические разработки для врачей и студентов. - Барнаул, 1988. - С. 31-32. (бо-авт. Л.В."едведь, Т.П.Угарова). .

8. Анализ влияния цельного яда среднеазиатского щитомордника и его гемокоагулнрующсй фракции "Анцисгрона-Н" на конечный этап свертывания кропи. // /механизмы регуляции гемостаза на уровне молекулярных взаимодействий. - Свердловск. - 19ЬЙ. - С. 102100 (Соппт. 3. С.Вар.'мгшг, Л. И Л {цв кипа, Л. Л. .Медведь).

9. Сравнительное исследование влияния цельного яда щитомордника а его гемокоагулирующей фракции - анцистрона-11 на конечный этап свертывания кропи у больных с микроциркуляторным типом кровоточивости. // Диагностика, лечение, реабилитация, профилактика терапевтических заболеваний в первичном звене здравоохранения. Новые методы диагностики и лечении; Тел. докл. 6 съезда терапевтов Алтайского края. - Барнаул, 1969. - С. 89. (Соачт. Г.А.Суханова, С.В.Замятина, Т.П.Угарова).

10. Лнцис-роновый ч-оот ь диагностике нарушений конечного этапа .сиертцвалпгс кроен и процесса самосборки фибрина. // Вопросы герпетологии: аьтореф. докл. УП ¡.юееоюзной герпетологической конференции. - Киев. 1989. - С. .190. (Соаьт. Г.А.Суханова, Т.д. Соломина).

11. Сравнительный анализ использования в лабораторной практике коагуллциоиных тест<~чз с цельным лдсм щитомордника и его ге~ мокоагулирующей фракцией. - анцнстроном-Н. // Физиология и патология гемостаза: тез. Всесоюзной конференции. - Полтава, N91. -С. 235. (Соавт. Л.П.Цывкина).

12. Показания ядовых коагуляционных тестов у больных с го-

моррагическими мезенхимальными дисплазилми. // Проблемы теорети-ческсЛ и прикладной токсикологии: теэ. докл. I Всесоюзной токсикологической квнференции. - Ашхабад, 1991. - С. 28-29. (Соавт. Г.А.Суханова, Т.Л.Соломина, О.С.Чердынцеви, С.Д.Воронов).

13. Сравнительная оценка фибриколитической активности тром-биноподобных змеиных ядов. // Лроблеш теоретической и прикладной то«синологии: теэ. докл. I Всесоюзной токсикологической конференции: - Ашхабад, IS9I. - С. 15. (Соавт. С.Д.Воронов).

14. Влияние плазмы больных с острыми флеботромбозами на скорость полимеризации фибрин-мономера. // Ш Всесоюзный съезд гематологов и трансфузиологов: теэ. докл. - М., 1991. - Т. Ш. -С. 604-605. (Соавт. Г.А.Суханова, А.П.¡чают, Т.А.Соломина).

15. Action on tne rlao.ncataHis s.vsten and diu¿:noetic application of veno,".о of sane inidci le-afiiau -впякео. // 9-th Eui'opeari uympOBiun o'i aiiin.nl, plant .and .Microbial toxina. - Abstracta

Eos tonia, 1990. -- P. 2B. (Z.S.Barka^an, L.PTayvkina).

Подписано в печать 23,0192. Формат 65x90/16 Бумрга писчая . Печать офсетная Усл.печ.л. 1,5 изд.л. 1,0 Тираж ЮОокз. Заказ 236-92 Бесплатно

Лаборь.гория множительной техники ЛГУ: Бф Барнаул