Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Аллергенные и антигенные свойства табака и его значение в этиологии аллергических заболеваний

р?

г

2-ой МОСКОВСКИЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ им.Н.И.ШРСГОВА

I

На правах рукописи УДК 576.0.097.2+616-056.3

ХАКЕЕРДЫЕЗ КАРИМ ХАКБЕРДШИЧ

«

АЛЛЕРГЕННЫЕ. И ШШШ СВОЙСТВА ТАБАКА II ЕГО ЗНАЧЕНИЕ В В ЭТИОЛОГИИ АЛШЕШПЕСККХ ЗАБОЛЕВАНИЙ.-'

(14.00.36 - аллергология и иммунология)

АВТОРЕФЕРАТ

. диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

МОСКВА - 1991

г

Работа выполнена в Ташкентском педиатрическом медицинском институте Ш УзССР.

Научный руководитель - доктор медицинских наук,

профессор ХАКБЕРДЫЕВ М.М.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,

профессор Л0ЛЕНЕР А.А.

доктор медицинских наук профессор ПОРЯДШ Г.В.

Ведущая организация: Московский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток имени И.И.Мечникова

Защита состоится "_"_______1991 г. в 14 часов на

О 1 ' 1 .

заседании слегдалкзкрованного Совета № С К.084.14.06) во 2-ои Московском ордена Ленина Государственном медицинском институте им. Н.И.Пкрогова С Ц7437 Москва,ул.Островитянова,д.:

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке 2-го МОЛШИ шл.Н.И.Пкрогова ¡¿3 РСФСР

Автореферат разослан "_"_1991 г.

УЧЕНЫЙ СЕКРЕТАРЬ СПЕЩ1/иЕИЗИРОВАННС(ГО СОВЕТА КАВДВДАТ 1ЩИВДНСШ. ШК^ОЦЕЕТ

Т.ЕЛО'ЗНЩОВА

.;! ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТУ

Актуальность темы. Одним из важнейших чужеродных веществ, о которым часто встречается человек - является табак, В связи с широким распространением табака, увеличением его производства и потребления участились случаи иихотииезш, который относится к разновидностям наркомания. В связй с зтим потребление табака имеет не только медицинское, но таете к социальное значение (Казьмин В.Д., 1387; Кузконоз 13.3,п соавт.,190-8; Тва! ас э1 ., 1980).

Активными

курильЁЩкамж являются 30$ населения мхра: мужчины ~ 60$, женщины « 20%. Кавдую секунду население земяк млсурл-вает более 300 тыс. сигарет. В СССР частота курящих муячин -- 45-64$, а кенщин - 11-26,3$. В регионе республик Средней Азии и Казахстана кроме курения распространено употребление паевая или "нос"-а. Нас заем пользуются мужчины в 5-87,1$, а жешцжн ~ ~ в 3~13,4£. Никотинизм является причиной потери миллионов рабочих дней, инвалидности, производственного травматизма, автомобильных аварий. Во всем мире по данным ВОЗ ежегодно от болезней, связанных с употреблением табака, умирает 2,5 млн. человек (Тартаковский В.И.и соавт.,1982; Хакбердыэв Ы.М.,1889; Саакадзе В.П.,1990;•лгапзоп вг в1 .,1982).

Все большее распространение получает курение среди молодежи и детей (Пявлов С.М.и соавт.,1984). Частота аллергической заболеваемости среди курящих лиц, рабочих табачных производств' и тружеников табачных плантаций значительно инпв, чем среди лиц некурящих и. не имеющих контакт с табаксм. Табак усиливает болезнетворное действие других этиологических факторов. Он существенно влияет на метаболизм жкарственных средств к продуктов питания. В результате этого процесса в организме могут образовываться ноше химические соединения, обладайте ашюргешмми свойствами ( о'Агву, ,1934).

Табак вреден ке только для организма активного курильщика, но также и для организма пассивного курильщика,который вдахает до 80$ всех веществ окружающего его дама (Зачтавпчт а1 1988). ' -

Вместе с табачным дымом в организм активного к пассивного ' курильщика поступает и другие аллергены, ксторце концентрирувт-

1-2М7

1

ся в табачном дыме, Тая.развивается полисенсибилизация.

Однако не все исследователи согласны с мнением о том, что табак является причиной аллергических болезней. Эти ученые при« водят следующие доводы об отсутствии аллергенных свойств табака: уровень аллергической заболеваемости среди курящих и имеющих контакт с табаком на табачных производствах и среди некурящих и не имеющих контакта с табаком, примерно одинаковый: отсутствуют различия в частоте положительных реакций кош на аллерген из табака у курящих и некурящих больных аллергическими болезнями; аллергенными свойствами обладают но сами компоненты табака, а его примеси: бактерии, грибки, пестицида, пыльца растений и др; аллергия к табаку возникает не в результате взаимодействия табака с антителами, а из-за того, что табак обладает гисташнвысвобож-даюцим свойством, т.е. аллергия на табак относится к категории псевдоаллергических реакций ( 1опс1агко .,1982; тиее1 в1 а1 ., 1984; У&вт1.г1г>ег} е^ а1 .,1988),

Несмотря на' противоречивые суждения относительно аллергенных свойств табака все ученые признают необходимость дальнейших исследований в этой области. Для этих целей необходим аллерген из табака. К сожалению, в отечественной литературе отсутствуют работы, посвященные технологии получения ж стандартизации аллергенов из местного сырья вообще и из листьев табака в том числе. Между тем, экономический эффект/от внедрения в практику здравоохранения разработанных новых анлеруенов исчисляется в сотни миллионов рублей в год.

Учитывая ранее изложенное, сознавая важную практическую знан чкмость этой теш для практического здравоохранения, где отсутствует аллерген из табака, мы приступили к выполнению данной диссертационной теш.

Цель работы заключалась в изучении аллергенных, антигенных свойств экстракта йэ листьев табака, определенны его специфической активности и разработке технической документации на изготовление диагностического аллергена» Задачи исследования:

I. Изучить аллергенные и антигенные свойства экстракта из листьев табака.

2.Оценить специфическую активность аллергена из листьев табака.

*

3.Разработать техническую документацию на технологию изготовления диагностического аллергена из листьев табака.

Научная новизна. Впервне приготовлен аллерген из листьев табака, изучены его физико-химические свойства, стерильность, безвредность. Доказаны аллергенные свойства, белковых компонентов листьев табака на моделях аллергических реакций немедленного типа: общий анафилактический иск, пассивная колкая анафилаксия, реакция непрямой дегрануляцки тучных клеток. Аллергические реакции строго спбцк&ичнн, Установлены антигенные свойства листьев тибака в экспериментах на кроликах, иммунизация которых приводит к появлению в сыворотке крови специфических преципитирующах антител в реакциях шмунодкффузии в геле. Обнаружены два антигенных компонента. Заявлена высокая специфическая активность аллергена из листьев табака при постановке кожных аллергических проб на ограниченном контингенте добровольцев - практически здоровых и больных аллергическими болезнями,, а также в реакциях непрямой дегранулящш тучных клеток.

Практическая ценность. Разработана и офоршена техническая документация на изготовление диагностического аллергена из листьев табака. Инструкция по изготовлению и контролю утверядена Учены?,] Советом Ташкентского НИИ вакшн и сывороток. Документация, лабораторные серии аллергена находятся ка. рассмотрении в Государственном НИИ стандартизации и контроля медицинских и биологических препаратов им. Л.А.Тарасевича ГО СССР.

Основные положения, вкносжлне на зедрот:

I.Увеличение производства табака и его широкое распространение в-мире-привели к резкому увеличению числа случаев ншсоти-низма, являющегося разновидностью наркомании. В связи с этим, различные вопросы по изучению отрицательных последствий, вызываемых табаком, в настоящее время переросли в большую медико~совальную проблему.

2.Экстрагируя листья табака в жидкости Кока можно приготовить аллерген, пригодный для изучения его различных свойств и специфической диагностики аллергических заболеваний у лиц, тлеющих к нему повышенную чувствительность.

3.Экстракт из листьев табака вызывает- сенсибилизацию, кото-' рая подтверждена общим анафилактическим шоком, пассивной кожной анафилаксией, реакцией непрямой дегранудяцкя тучных клеток.

?-.2667

3

4.Экстракт кз листьев табака обладает антигенными свойствами, подтвержденными выявлением преципкгируюадах антител в сыворот- ' ке крови иммунизированных кроликов реакцией юлчунодиффуаии в геле.

5.Аллергические и иммунные реакции, вызываемые аллергеном из листьев табака строго специфичны.

6.Кожные скарификационные пробы с аллергеном из листьев табака показывают его высокую специфическую активность.

Внедрение результатов исследований в практику:

I.Составлено и разослано в лечебно-профилактические учреждения Узбекистана информационное письмо: "Аллергия к табаку.^, региональные особенности распространения, специфическая диагностика и профилактика", утвержденное Бюро Управления науки и Ученым медицинским Советом Ш УзССР 24 июля 1990 г.

2.Основные положения и вывода, изложенные в диссертации внедрены в практику здравоохранения аллергологического кабинета Ургутской районной больницы Самаркандской области, Самаркандского областного аллергологического центра, Каракалпакского аллергологического центра, а также используются ручейном процессе кафедры патофизиологии Ташкентского педиатрического медицинского института при чтении лекций и проведении практических занятий по разделам "Реактивность", "Аллергия", «Иммунитет".

Решение поставленных задач осуществляли в период с 1985 по 1990 г. г. Диссертация является фрагментом комплексного исследования по теме: "Изучение аллергических реакций немедленного и замедленного типов и изыскание новых способов специфической и неспецифической терапии", утвержденной Всесоюзной проблемной комиссией "Аллергология и клиническая иммунология". Регистрационный номер 01.86.00049990.

Личный вклад автора. Все основные разделы диссертации довожены и обсуждены йа научных конференциях: кафедры патофизиологии ТалЯШИ (1985-1990 г.г.), г.Ташкент; молодых ученых САШИ и Ташкентского НИК вакцин и сывороток (1985-1989 г.г.); Ташкент; научно-практического общества аллергологов и иммунологов республик Средней Азии и Казахстана.(1986 г.), Алма-Ата; на 1У Всесоюзном съезде патофизиологов (1989 г.), Кишинев; научно-практической конференции проблемной комиссии медико-биологических дисциплин (протокол Ш от 10 декабря 1990 г.), Ташкент.

А

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ и одно информационное письмо доя практических врачей.

Структура ¿диссертации.Основной текст диссертации изложен на 137 страницах машинописи. Работа состоит из введения, обзора литературы, методики, объема выполненной работа ц исследований, 4 глав собственных данных, заключения, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы, включающего 198 отечественных и зарубежных источников. В конце диссертации прклояеио информационное письмо. Текст диссертации иллюстрирован 4 таблицами и 17 рисунками.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материал, методики, объем выполненной работы и исследований

Аллерген из листьев табака приготовили в соответствии с . современными требованиям! приказов по Минздраву СССР №31 от 13.01.1983 г.,*«699 от 29.07.1983 г., ЯЕ023 от 31.08.1983 г., а также методикой изготовления неикфекционных аллергенов по ШУ--42 (Адо А.Д. и Польнер А.А.,1953). Исходным материалом служили сухие листья табака, которые измельчали и растирали до порошка. -Аллерген готовили из расчета 10-20 г сырйя на 100 m экстрагирующей жидкости. Апирогенность вода проверяли в соответствии с требованиями фармакопеи СССР (ISSI). Дкя этого в ушную вену 3-х иктактянх кроликов ввели по 2 мл теплой (+37°С) экстрагирующей ЖвДкрсти, Температуру тела ливотных в прямой юшке измеряли до и после введения жидкости. Жидкобть счнтата апирогеннсй в том случае, еслй в течение двух часов после инъекции воды температура кроликов оставалась в пределах нормы. Стерильность аллергена проверяли путем посева его в шести средах: сахарных, мартеновских мясо-пептокннх бульонах, мясо-пептошшх агарах, Сабуро и Тароцци. Наблюдение проводили в термостате. Если в течение 7-14 дней в средах не наблюдали роста микроорганизмов, то аллерген считали стерильным. Содержание фенола з аллергене определяли но Волковой Р.А.и соавг (1981). По нашим данным содержание фенола в аллергене из листьев табака находилось в допустимых пределах - 0,3-0,35$. Белковый еаот в аллергене из листьев табака определяли с реактивом Несслера по методика, разработанной в лаборатории биохимии ГИСК им. Л.А,Тарасовича. Содержание белкового азота

в маточных растворах приготовленного аллергена находилось Ь пределам от 0,03 до ОД кг/мл юш 8 000-Ю ООО pnu . Безвредность приготовленного аллергена из листьев табака проверяли на 80 лабораторных животных по методике полной токсикометрии (Сачод-кик И.В. ,1970). Проведенные исследования показали, что аллерген в дозах 0,4-4,0 мг/кг (белые даш), 0,66-2,0 мг/кг (крысы), 0,01-1,6 мг/кг (морские свинки), 0,005-0,15 мг/кг (кролики) является безвредным. Общий анафилактический шок воспроизвели на 98 морских свинках (опытных -- 50, контрольных - 48). Опытных животных сенсибилизировали парентеральным введением аллергена в количестве 0,3-0,5 мг/кг: первую инъекцию подкожно в смеси с 1,0 мл АВДС-вакцины, вторую инъекцию - через 48 часов точно также, как и первую, а третью - внутрибрюкшнно через 48 часов в количестве 0,85-1,0 !.тг/кг. Разрешающую шгьекцюо* проводили внутривенно в количестве I мг/кг через 17-21 день после последней сенсибилизирующей инъекции. Оценку_ общей анафилактической реакции проводили по Weigls et ol '¡(I960). Пассивную кожную анафилаксию воспроизвели по ovary (1952). Реакцию непрямой дегрануляции тучных клеток воспроизводили по Schwerz (1965) в модификации Идшмовой Л.М. и соавт. (1971)., Антигенные свойства экстракта из листьев табака изучили путем многократной иммунизации кроликов: опытных - 10, контрольных - 5. Реакцию иммунодиффузпи ъ геле воспроизводили ао Ouchterlony (1949). Специфическую активность аллергена определили путем постановки кожных проб ш ограниченном контингенте добровольцев: практически здоровых - 61 и больных аллергическими ваболеванияш - 193. Статистическую обработку цифровых данных проводили на электронном микрокалькуляторе Rocweii international Model 44 (Япония). Вычисляли следувдие величины: 1)среднюю арифметическую, 2) среднюю геометрическую титра антител; 3)', отрицательный логарифм^среднего геометрического титра антител при основании, равном'даум; 4)величину, обратную геометрическому титру; 5)вероятность различий по таблице Стъзодента. Сведения считали достоверными, начиная с Р 0,05 (Ворошилова М.К.и соавг., 1964; Ойшш И.А.,I960).

Таким образом, эксперименты были поставлены на.196 лабораторных животных, а клинические исследования провели у 254 практически здоровых и больных аллергическими заболеваниями. Всего было проведено 5640 различных исследований (Табл.1).

о

Таблица I

Объем выполненной работы и исследований

ХАРАКТЕР РАБОТЫ

Количество

! етэогаых'^™ иссле-' ЖЭ ДАЯНИЙ

!

ки здоро-1 !бнх • i

Определение:

апирогенности воды

стерильности аллергена

содержания фенола в аллергене

белкового азота в аллергене

безвредности аллергена на хиютных

Воспсопззедеяие;

общего анафилактического шока у морских свинок

пассивной конной анафилаксии-

определение термолабильности ЩА

Постановка реакции непрямой дегра-нуляыии тучных клеток с сывороткой крови

сенсибилизированных животных

практически ьдоровых и больных аллергическими заболеваниями

Определение предштятирукзцос антител реакцией иудстюдифздуайи в "геле: -

30

98 28 22

50

—.в сывороткё крови интактнкх кроликов 15

в сыворотке крови опытных кроликов иммунизированных экстрактом из листьев Табака

10

в сыворотке крови контрольных кроликов 5

Постановка кожных (скари'йшяшстшых) проб дооровольцем:.

практически здоровым -

больным аллергическими заболеваниями —

254

61 193

12 48 20 30 240

58 312 22

200 3016

810

1620 450

-183 573'

ВСЕГО:

196

254

5640

3-2667

Для приготовления аллергена ш использовали листья табака, выращиваемого в Ургутском районе Самаркандской области. В процессе выращивания табака сорта Дюбек в регионе занято 73 ООО человек.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Вещества, обладающие аллергенными свойствами, должны быть широко распространены в конкретном регионе и встречаться в большом количестве.

Табак как раз относится к таким веществам. Из анализа данных литературы вытекает, что табак широко распространен во всем мире, Его производят в больших количествах.

Однако для того, чтобы веществу быть аллергеном этих показателей еще недостаточно. Необходим .контакт организма с этим веществом. Табак отвечает и этим требованиям. Почти 30$ жителей земли являются активными курильщиками, а количество пассивных курильщиков еще ёолыде во много раз.- Человек встречается с табаком также и в условиях своей производственной деятельности: на табачных плантациях, на предприятиях по производству табака.

Для развития аллергических реакций чуаеродные вещества должны попадать в организм преимущественно парентерально. Табак отвечает и этим требованиям. Он проникает £ организм человека в большинстве случаев парентеральна: ингашщионно, через слизистые верхних дыхательных путей и через «зсож^г. В региональных условиях республик Средней Азии и Казахстана "табак употребляют орально (под язык) в форме насвая. Следовательно, имеются все необходимые условия для'проникновения компонентов табака в организм человека.

Однако не все вещества, попадающие в организм парентерально, вызывают состояние сенсибилизации и развитие аллергии. В связи с этим, важнейшим' условием аллерРенности вещества является неоспоримое доказательство связи признаков аллергических реакций и заболеваний с данным субстратом. В зтом отношении также имеются убедительные факты, свидетельствующие о причинной связи признаков аллергии с табаком.

Констатация факта связи клинических признаков аллергической болезни с табаком нуждается в уточнении формы аллергии, которая может быть истинной или ложной. Как раз этот вопрос в литературе интенсивно обсуждается. Мнение разных ученых по этому вопросу в

неоднозначное. Одни исследователи убеждены в том, что аллергия к табаку является истинной, т.е. аллергические реакции возникают и развиваются на основе иммунной реакции аллерген-антитело. Наряду с этим, имеются ученые, утверждающие, что аллергия к табаку развивается потому, что он обладает тасгалсиетысзобоздавднм свойством, т.е.- табак и его компоненты являются.либератора\я гистамина.

Для доказательства аллергеняости вещестга, помимо клшгкчес-ких исследований, необходимо проводить 2!шунологачэсков изучение сыворотки крови больных. Лдя этих целей став.ят аллергические пробы на коже больных с аллергеном из табака или ставят ию/унс • логические реакции.

По этому вопросу такие нет единого мнения. Одни исследователи указывают на наличие положительных кохсных проб с аллергеном из табака среди курящих-в больших процентах, чем среди пекурядах, Другие ученые не находят разницы в частоте положител1.;шх кожных проб у курящих и некурящих больных аллергией. .

Аналогичная ситуация отмечается и в результатах иммунных реакций.

Существуют противоречивые суждения также й в отношении наличия 1дВ в сыворотке крови больных аллергией к табаку. Имеются сообщения, указывающие на высокое содержание 1дЕ в сыворотке крози больных, употребляющих табак или тлеющих с ним контакт. Вместе с тем, существуют ученью, которые-утверздают, что при , •аллергии к табаку содержаний 1дЕ в сыворотке крови не меняется и остается в пределах нормы-.

Для доказательства аллергенности чужеродного Евщества помимо клигасФ-зшиунологических исследований требуется проведение специальных экспериментальных исследований. Такие эксперименты,, проведенные на различных лабораторных животных, описшш в литературе. Однако результаты- их противоречивы: одни доказывают, что табак вызывает аллергию у животных, а другие с этим не соглашаются.

Кроме того, детальное изучение литературы дает нам основание сделать заключение, что построены они односторонне. Между тем, для экспериментальных исследованей необходимы комплексные изучения поставленных вопросов.

к

Учитнвая,актуальность вопроба и наличие противоречивых суждений относительно аллергенных свойств табака наш было предпринято данное исследование.

Экспериментальные исследования по выяснению аллергенных свойств табака проводили на моделях аллергических реакций немедленного типа. Необходимо было решить следующие задачи: 1)выяснить возможность воспроизведения общего анафилактического шока у морских свинок, сенсибилизированных экстрактом из листьев табака; 2)изучить развитие пассивной кожной анафилаксии у интактных морских свинок, сывороткой крови морских свинок, активно сенсибилизированных экстрактом из листьев табака; 3)изучить развитие реакция непрямой дегрануляцни тучных клеток, сенсибилизированных сывороткой крови морских сеенок, активно сенсибилизированных акстрактом из листьев табака; 4); определить специфичность анафилактических реакций и реакции непрямой дегрануляцни тучных клеток.

Проведенные-Доследования убедительно показали, что экстракт из листьев табака'обладает четко выраженными анафилактогеннывд свойствами. Анафилактический индекс находился в пределах от 2,9 до 3,3 (в среднем 3,1), Данная анафилактическая реакция является строго специфичной. Она не возникала, если морским свинкам, сенсибилизированным аллергеном из листьев табака, в качестве разрешающей дозы вводили другой,' т.е. яеопедафический аллерген. Следует подчеркнуть, что по своей анафилактогенной активности аллерген из листьев табака устулае!* аналогичной активности нор-» малъкой лошдаяой сыворотки, несколько превосходит анафилактоген-ную активность аллергена из пыльцы чинарц и приближается к ана* ; филактогенной активности аллергена из пыльцы грецкого ореха.

В механизме развития данного анафилактического шока принимают активное участие термолабильные ЩА, что было подтверждено воспроизведением па^рвной кожноД^анафилаксш. Следует подчеркнуть, что степень тяжести анафилактичеокого пока зависит от титра ЩА: при высоких содержаниях этих антител в сыворотке крови наблюдали анафилактический шок тяжелой степени выраженности и смертельный.

Результаты опытов по воспроизведению общего анафилактического шока и пассивной кожной анафилаксии подтвердились и в результатах непрямой дегрануляции тучных клеток.

Так, у морокюс свшок о содержанием титра ЩА в пределах 1_о2 = 3-6, непрямая реакции дегршгуля^ет тучных меток достигала 40,3 ± 1,7%, при титре ГЦА - i-g2 ' = 2-5 - 23,8 + 2,4%, а при титре ГЦА - Lg2 = 2-3 - 25,3..*v 2,4$., Сргшж'слышй анализ показал прямую коррелятивную связь < г - 0,98) fмежду титром ГЦА и процентом непрямой дегрануляцщ тучных клеток С Р * 0,05). .

Таким образом, результаты наших исследований подтверждают иммунный механизм развития анафилактического шока у морских свинок, сенсибилизированных аллергеном из листьев табака. Следовательно , в основе анафилактического шока находатся истинная аллергическая реакция, что согласуется с данны?.«и ученых," придерживающихся этой точки зрения (Шпирт М.Б.и соавг,,1980; Дерюгин И.Л. И соавт.,1983; Иванушюша К.А.Н соавт.,1984; Letteretron et al.t 1982; Telylor et al .,1982; Y/olrran et al .,1932)..

Для выяснения антигенных свойств экстракта из листьев табака необходимо было решить следующие задач:!: 1е)получить прецкпи-тирующие антитела путем иммунизации кроликов экстрактом из листьев табака; 2)определить антигенный состав экстракта из листьев табака; 3)определить спевдфичнооть иммунннх реакций аллергена из листьев табака, с антксывороткой илмуниэированшх кроликов.

Проведенные исследования показали, что экстракт из листьев табака обладает антигенными свойствами. Это заключение обосновано появлением прецишггнрующга: антител в сыворотке крови кроликов, шмунизированных экстрактом из листьев табака. Ужинная реакция преципитации между аллергеном из листьев табака с соответствующей антисывороткой иммунизированных кроликов, строго спещфгчна. • Чувствительность примененной нами методики позволяет выявлять до двух антигенных компонентов.

Следовательно, и в иммунных реакциях удалось доказать антигенные свойства экстракта из листьев табака. Под влиянием различных компонентов табака иммунономпетентные клетки вырабатывают специфические преципитирухшдае антитела.

' Таким образом, экспериментальные исследования подтвердили, что в основе развития аллергических реакций находится истинна! иммунная реакция аляерген-аятктело.

Определение аллергенной.активности табака в условиях эксперимента на лабораторных животных не дает основания для клинического его применения. Дело в том, что уровень чувствительности —

И

больных аллергическими болезнями "значительно превосходит аналогичную чувствительность животных, В связи с этим, наг,® была поставлена цель - изучить на ограниченном контингенте добровольцев специфическую активность аллергена из листьев табака.

Для этого использовали аллерген из листьев табака с содержанием 10 ООО ^и. .

Проведенные исследования- показали отрицательные результаты г.оя1ШХ проб на аллерген из листьев табака у практически здоровых кекуряизвс и но употребляющих насвай.

У практически здоровых курящих и употребляющих насвай положительные конные пробы соответственно, отметили у 9,5 и 15% случаев, что доказывало наличие у них сбытой сенсибилизации на аллерген из листьев табака. Хотя у этой группы лиц не было явных признаков аллергических болезней, их следует отнести к группе риска, т.к. они потенциально могут заболеть аллергическими заболевания!.®.

Постановка кожных проб у больных аллергическими заболеваниями (атоническая бронхиальная астма, аллергические риноконыонкти-виты, аллергсдерматозы) ж, по роду своей деятельности, имеющие непосредственный контакт с табаком (рабочие табачных производств и сельхозработники табачных плантаций) показали иные результаты. К здесь частота проб зависит от курения табака или употребления паевая. У больных рабочих табачных производств, не курящих и не употребляющих-каснай положительные кошше реакции на аллерген из листьев табака наблюдали в 8о% случаев, у курящих ~ в 88,4$, у -упмребляющюс насвай - в • '•

Аналогичную картину каблэдали у больных аллергическими болезнями работников табачной плантации: у некурящих и не употребляющих насвай - в 71,4/а случаев, у курящих - 31,8$, употребляющих насвай - 90$.

Следовательно, курение и употребление табака еще больше по-вдиаер степень сенсибилизации больных, имеющих постоянный контакт с табаком. • ■

При изучении кожных проб о аллергеном из листьев табака •больных некн$акциош1(ьаллёр:гачес^ш заболеваниями также- кайлю- . дата в определенной степени положительные результаты: у некурящих к не употребляших табюс - в 45$ случаев, у курящих - 52,3%, употребляющих насвай - 52,3/!. - '-••' •

Следовательно, у некоторой части больных аллсргалесюши болезнями некурящих и не употребляющих наовай отмечается скрытая . сенсибилизация к аллергену иэ табака. Аллергический фон способствует развитию полисенсибюшзездта. Очевидно, эта группа больных сенсибилизирована к аллергену из табака Щ принципу пассивного курения. На основании результатов кожных проб,проведенных на разных группах лиц (практически здоровых и больных аллергическими заболеваниями) можно сделать следующее заключение.

1.У практически здоровых некурящих и ые употребляющих насвай, не имеющих контакта с табаком, т.е. не работающих на табачных производствах и табачных плантациях, мало шансов сенсибилизации организма к аллергену из табака.

2.Практически здоровые , употребляющие насвай, работающие на табачных производствах и плалтациях, относятся к группе риска, т.к. у них имеются реашше условия для сенсибилизации организма к аллергену из табака.

3.Состояние больных аллергическими болезнями еще больше усугубляется, если они курят, употребляет насвай или имеют постоянный контакт с табаком по роду своей трудовой деятельности • (табачные производства и-плантации).

4.У практически здоровых и больных атопическими аллергическими болезнями имеется возможность развития сенсибилизации организма к табаку вследствие пассивного курения. Поэтому по данному принципу может развиваться у них шрлисексибилизация со всеми отсюда вытекающими отрицательными последствиями.

Необходимо было выяснить диагностическую ценность аллергена в реакции непрямой дегрануляции тучных клеток. Для этой цели отобрали больных, у которых наблкщались резкополояительные кожные реакции. Положительные реакции непрямой деграяулящш наблюдай; у больных некурящих и не употребляющих наовай в 66,65? случаев (степень дегрануляции тучных клеток равнялась 14,5$), у больных курящих сигареты -73,9% (степень дегрануляции тучных клеток - 17,7$), у больных, употребляющих насвай - 84,6$ (степень дегрануляции тучных клеток - 23,5$). У всех контрольных хрупп больных, практически здоровых (некурящих и но употребляющих • насвай, не имеющих контакта с табаком по роду своей деятельности) реакции дегрануляции тучных кдаток были отрицательными.

Сравнение этих двух групп тестов (кожные'пробы и реакции дегрануляции тучных клеток) показали преимущества кожных проб^ Тем не менее, эту реакцию в комплексе с другими аналогичными тестами можно использовать для специфической диагностики.

Таким образом, выяснилось, что аллерген из листьев табака вполне годится для :спё1^гаеской диагностики явной и скрытой аллергии к табаку при постановке кожных проб и тесте дегрануля-ции тучных клеток, что согласуется с данными литературы (Райкис Б.Н.и соаьт.,1987; Фрадкин Б.А.,1990).

Таким образом, на основании наших исследований можно сделать заключение. •

Табак отвечает всем требованиям, предъявляемым к аллергенам: он широко распространен во всем мире, его производят в больших количествах, широчайшая масса населения находится в тесном контакте с ним по роду своей деятельноотиСработншш табачных производств и плантаций). Табак используют в форме активного курения почти 305? населения земли. Количество пассивных курильщиков еще больше.

В региональных условиях республик Средней Азии и Казахстана табак используют в форме насвая, который закладывают под язык.

Имеется прямая связь мезду формами аллергических заболеваний с действием табака. Клинические формы аллергических заболеваний, вызываемых ^абаком разнообразны: аллергические конъюнктивиты , риниты, бронхиты, атоническая бронхиальная астма, аллер*-годермагозк. , . . -'^Й';;-'

Наши клинические исследования также свидетельствуют о том, что табак может быть причиной аллергических заболеваний у рабо~ чих табачных производств и работников табачных плантаций. При постановке кожных проб аллергеном из листьев табака, изготовленным наш, отмечаются положительные кожные реакции и реакции непрямой дегрануляции тучных клеток у больных, имеющих повышенную чувствительность к нему, что свидетельствует о наличии у . них ножносенсибшшзщ»ующкх реагинов.

Надш екопериментальные исследования также указывают на наличие аллергенных свойств у листьев табака. При сенсибилизации морских свинок аллергеном из листьев табака успешно воспроизводятся аллергические реакции немедленного' типа: общий анафилактический шок, пассивная конная анафилаксия, полозсятельная реакция дегрануляции тучных клеток. При иммунизация кроликов аллергеном

из листьев табака в крови опытнда азпзогнш. выявляются специфические преципитирующие антитела в реакциях ивдунодиффузии в геле.

По данным литературы Ta6á¿'может .повреждать клетки также и по Ш типу аллергической реагада немедленного-типа í Schmidt.; IS86), По—видимому, исключить ату возможность'"нельзя.

В связи с тем, что состав табака довольно сложный, возможну развития и аллергических реакций замедленного типа,- которые могут вызывать различные примеси, входящие в состав табака: грибки, бактерии и пестицида С ßor et al ,,1380).

Следовательно, можно сздгтать, 'тао существующее з литературе мнение о наличии аллергенных свойств табака получило нодтвержде-1ше в наших исследованиях. Однако остается еще много неясных вопросов, требующих своего разрешения.

Вопрос о том, какие именно компоненты табака ответственны за развитие аллергии остается открытым. Ео нашему мнении, аллергенной активностью могут обладать большинство компонентов табака: растительный белок, никотин, ароматические Еещества. Большинство считает, что аллерген табака представляет собой гликопротеид с молекулярной массой 18 ЦД (ПЬшрт М.Б.и соавт.,1980; Schmidt 1986).

Состав табака довольно сложный. Количество ото компонентов достигает до 1000 наименований. Естественно, что среда них могут быть вещества, вызывающие повышенную чувствительность организма, т.е. обладающие аллергенными свойствами. Наряду с этим, в состав табака могут входить фракции, подавляющие иммунную систему орх'а-низма. .

Пнльца растений содержит аллергенные компоненты. Наряду с этим появились сообщения о том, что растительные аллергены содержат также компоненты, действующие десенсибилизирующим образом ( Maiiaiah et ol .,1884). Исходя из--этого можно предположить, что в состав табака могут входить вещества, действующие итосен-сибилизирузсщим способом. Это свойство также предстоит исследовать.

Полагают, что в составе щади растений имеются и неаплзр-генные кошонентк. (Ханферян P.A.и соавт. ,1990). В связи с этим, не исключено, что и в составе табака имеются неадлергеннне компоненты, влияние которых предстоит изучить.

Аллергенные свойства табака могут подвергаться изменениям.

Описаны факторы, усиливающие аллергенные свойства табака (Сприн-чан Г.К.,1982,1987). Если имеются факторы, усиливающие аллерген-ность табака, то можно предположить, что имеются факторы, кото-4 рые ослабляют алпергешость табака, В атом направлении успешные исследования ведутся в Ставропольском НИИ вакцин к сывороток (Райкио Б.Н.Л соавт.,12Т&7). .

3 настоящее время в кашзй стране ведутся интенсивные научные исследования по созданию новых аллергенов и изучению их : свойств; пыльцевых, пищевых, эпидермальных, из насекомых и др. • (Ногаллер А.11.ж соавт.,1982; Добрица Б.П.и соавт.,1985; Сусина Н.В. ,1987; Фрадкин В.А.и соавт. ,1990; Гервазиева В.Б. ,1990; Берлсец В.Ы. ,1990).

По мнению некоторых ученых (Райкис В.Н.и соавт.,1987) в настоящее время по созданию новых методов антигенспецифической коррекции фенотипа с высоким содержанием 1дЕ сформировались три направления. , >

1.Применение аллерговдов, вызывающих активную стимуляцию синтеза "блокирующих" 1дЕ-антител с последующей супрессией ХдЕ -ответа.

2.Создание толерогенов-аллергенов, денатурированных мочевиной, конъюгировашнх с ноиммуногешшми носителями и дуализируемых фракцией аллергенов (гаптеиов).

3.Срздание анпшдиотияичесзшх антител.

Кавдый из 5>отх методов амеет свои преимущества и недостатки,

'■вывода, .-•'•' '

I,Экстракт из листьев табака обладает аллергенными свойст-ваш, подтвержденными успешной воспроизводимостью у морских свинок общего анафилактического шока, пассивной кожной анафилаксии и положительной реакцией непрямой дегрануляции тучных клеток. Все аллергические реакции строго специфичны,

2.Экстракт ез листьев табака обладает антигенными свойствами, подтвержденными обнаружением специфических прецюштируощшс антител в сыворотке крови.'жгдушзированных кроликов реакцией иммунодиффузик в геле. Г.; , , ,

• 3. В'реакциях непрямой дегрануляции тучянх клеток я кожных пробах аллерген из листьев. табака покрывает высокую специфическую активность, позволяло?» выявлять состояние явной и скрытой сенсибшшзации у лиц; тлеющих повышенную чувсгвитгугыюсть . к белковым компонентам табака. 16 / ' ■

4. Сенсибилизация к табаку реализуется истинной аллергической реакцией, основанной на взатасдейстши специфических аллергических антител с аллергеннтк- кошонецгаш табака.

5.Степень повышенной чувствительности организма к аллергену из табака зависит от ряда условий: внешним (наличия контакта

с табаком на табачных проивзодствах), внутренних (полисенсибшщ-зация).

6.В региональных условиях республик Средней Азии и Казахстана мощным сенсибилизирующим фактором является употребление табака в форме паевая. ' . .-.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ШКШЩЙ1Щ

1.Разработанную наш документацию на технологию изготовления аллергена из листьев табака рекомендуем взять за основу для организации производства диагностического аллергена из него на базе Ташкентского НИИ вакцин и сывороток НПО' "Вакцины" Мшшстерев-ва медицинской и микробиологической промшленности.

2.Аллерген из листьев табака рекомендуем использтать для выявления состояния сенсибилизации у лиц, имеющих повышенный риск развития аллергии к табаку: работники табачных производств и плантаций, курящие и употребляющие насвай.

3.Аллерген из листьев табака рекомендуем применять для выявления скрытой и явной сенсибилизации у лиц, страдающих различными аллергическими и неаллергичеакими болезнями.

СПИСОК РАБОТ, .'ОПШП'ШСШАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1.Аллергенные свойства табака //Профилактика, укифицирован-ные методы лечения и новые методы диагностики аллергические заболеваний у детей. - Тез.докл.научн.конф.»посвященной актуальным вопросам краевой аллергологии в патологии детой. - Ташкент, 1985; - C.I40-I4I /Давидьян A.A.

2.Аллергические заболевания дыхательных путей у табаководов /Д Межреспубл.конф. аллергол.-икмунол. Казахстана и республик Средней Азии. - Тез.докл. - Алма-Ата,1986. - С. 109

3.Новые препараты в борьбе с аллергией //Научно-производственные пробл. повышения качества вакциныо~сывороточных препаратов. - Ташкент,1987. - 4.2. - С.6?~68 /Захватнина С.А.,Сусина Н.В.,Бердкикова О.Г.

4.Антигенные свойства и специфическая активность аллергена из табака //Научно-произв.проблемы повышения качества вакцинно--сывороточных препаратов. Методы диагностики. ~ Ташкент,1988. « - С.103-105

5.Значение аллергена из табака в коррекции нарушенных механизмов ишушшго ответа у больных аллергическими заболеваниями //Нарушение механизмов регуляции и их коррекция.;- Тез.докл. 1.У Всееоюзк,съезда патофизиологов. - М. ,1989, - 0,360

Подп. в печ, от 23.0?.91г. Формат изд. 00x84 1/16 Обьем 1,251:.л. - ' Зак.266? . Тир. 100

ПП"Печатнкк" Мосгорпечагь. Н.Краснохолмская д.5