Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.04) на тему:Влияние Т-2 токсина на некоторые показатели белкового обмена у животных в динамике интоксикации и разработке средств профилактики

рV б оа

I \ ЙЕН Я5В

На прявах руко1тг< и

Мятюшко Денис Борисович

ВЛИЯНИЕ Т-2 ТОКСИНА НА НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ БЕЛКОВОГО ОБМЕНА У ЖИВОТНЫХ В ДИНАМИКЕ ИНТОКСШСЩШ! И РАЗРАБОТКЕ СРЕДСТВ ПРОФИЛАКТИКИ

16.00.04 - Еетершггркая фармакология: с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации из соискание ученой степени кандидата биологических наук

Казань 1998

Работа выполнена в лаборатории природных экотоксккантов Всеросаш ского научно-исследовательского ветеринарного института (г. Казань)

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Тремасов МЛ.

Официальные опполепгы: 1. доктор биологических наук,

ведущий научный сотрудник Новиков НА 2. заслуженный декель наукп Республики Татарстан!, доктор ветеринарных наук, профессог» Папупндя К.Х.

Ведущая организация: Всероссийский паучпо-исследовательский ш-сгат ветеринарной санитарии, питаны и эхологап (ВНШХВСТЗ)

Защита состоится " ¿¡¿^-^—^-Д- 1998 года в / £> часов на заседании диссертационного совета Д-120.15.01 при Всероссийском научно-исследовательском Еетерниариоы гогсппухе (420075, г. Казань, Научжын горо-док-2, БШШИ).

С диссертацией ыошю озшко«пггься в библиотеке идсшгута

Автореферат разослан "Д^" ]рс8 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

В.И Степанов

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

.Актуальность темы. Для успешного развили животноводства большое значение хшеет соз&анне качественной кормовой базы. Однако решение зюЛ задачи' ослозжктся тем, что несоблюдение агротехнических мероприятий, правил при уборке,' транспортировке л хранении зерна и продуктов его переработки, а также других корнов приводит к их поражению аякроскспнчешши грибами, многие га которых могут вырабатывать дакотошшы - яды грибною происхождения. Копгамизтрсван-wjïi корм, попадая в организм животных, может вызван, заболевания -ыишгоесякозы. Мпкотокспаы отличаются высокой токсичностью, а мноше ю пия также мутагенными, тератогенными, кащерошншып и пжх}гносупресс7тнш,ш свойствами (Хыелевский Б.Н. и соавг., 1985; Петровы! СБ, 1991)

Большую опасность предстзвлшот мгасотоксгага да челог-ека. Продуцент шкотоксгаюв могут иЬражать ишцевие проделом на любом этапе их производства, храиеапя п в домашних условиях. Ош: г.октгаш-ипрутог пз только продукт расхкташгого, но и ззшшгого лролсхохде-ин - прт лх хранения или в процессе, приготовления. Михотоксгаэд могут попадать в организм человека с молоком и ткаяамп зтаотнш, погреб-гзвшпх 'зигразиенпкй кпхотоксшшз! корм (Тугелъяп З.А.,- Кравченко Л.В., 1935) ■

Экономический ущерб, наносимый народному хозяйству ынкоток-спнами. определяется как прямыми потерями продуктов гапагоы и щаюв и резкий уиешаеинем пх пищевой и 'кормовой ценности, так п гибелью, сшсйеняем привесов п воспроизводства-сеяг-скачоззйсхзешшх язшогяш; возрастанием' пх чувствительности к инфекционным заболе-вешшг, затратами,- необходимыми на оргашиацшо системы контроля п пргаедешш детошкадаш загрязнениях пролетов п кормов.

Особую опасность в слязя. с широким распространением з природе лредшшшот трпхотецаюмж шготошти, продуцепгаш которых являются шкро-сколячсскпе хрнбн ш родаРозгшиа. '•

КойЕЕШггащ зерна трнхотецепозшаш . шкстокашмн явилась щлтшюй тззгедах' алнгаеюкфлнх.тоштеозоа у людей п селыжохозяи-стшмнх згпзотвда з различие года в СССР, США, Канаде, Японии, Ееяшш, Венгрия (Sdicental R. 1980).

Б 1971 году были опубликованы первые обзоры, Е которые приведены формулы 22 производных трнхотецепов, а и настоящее время известно более 100 вешест трнхотеценовой природы (Дшприева И.Д 1991).

Из всех выделенных п нзучашых к настоящему Бремени трихотеце-" xtoBiix ышсотоксшгог. в качестве природных загрязнителей пищевых продуктов и кормов определены только чешре: Т-2 токсин, шшаленол, де-зоксгапгваленол и днацетокспсккриенол (Scott P.M., 1990; Rheecler J.P. et al.. 1995). '

Среди ппх особенно высокой токсичностью н частотой обнаружения выделяется Т-2 токслк." Т-2 токсикоз широко распространен во всем лире, часто выявляется он к в Россия, в частности в Поволжье (Pier A.C. et al., 1979; Lee T.W. et al., 1995; Захарова Ф.В. с соавт., 1995; Тремасов МЛ. н соаьт., 1995).

К настоящему времени установлена химическая структура Т-2 токсина, его флзшсо-хншгаешге свойств, разработаны исхода анализа Значительно ыеныйе информации имеется об особенностях бногедезз, метаболизма и механизма действия микотоютша. Ведутся поиски в иа-прарчешш подбора эффективных преларзтов дая профилактики и лечения микотохснкоза.

Несмотря на то, что, как известно, в основе токсического действия Т-2 токсина легнт его способность иппюироЕать биосинтез белка е организме, аспект этого воздействия га белковый обмен, особенно в динамике лкгохсикащш, еще недостаточно изучены. Малоизученными. остаются такте вопросы, касающиеся профилактики токсикоза.

Наша работа явилась частью комплексного задания НИР 05.03 "Разработка и освоение ирошводства эффекшншх средств и способов диагностики, профилактики и лечения мнкотокешеоров жпв01Ных"(Лз гос. релгстрацнп 01970002418).

Основной целыо исследопзпнй было изучение елняния Т-2 токсина на белковый обмен у животных, изыскание и разработка эффективных средств нрофшшепюи отравлений им саискохозяйсгвеиных жи-вотпых. В связи с этим перед нами были поставлены следушцне копкрет-иые зада'01:

1. Изучнгь влияние Т-2 токсина на обмен белка у животных в динамике шпокепкацпн, в частности на содержание аминокислот, белко.-бых фргкцгш и нуклеиновых кислот.

2, Зкспсряыаггздько обосновать пглразленпе пзксезши профилактических средств и дать оценку its эффектгшшзсш прл Т-2 токсикозе.

Иаургея нозпзяз рпботы заключается в гсм, что впервые проведены компяекасые исследованияпо язукшпо метабсшсма белка при Т-2 гокснЕозг. Установлено, что нарушила белкового обмена сопровождаются йзйеяешиии содержания гшпошягот, белковых фржщш п пук-яешювнк тают, шгвявал особенности этк пзишсялй з заппстиосот от формы течедш: токсгасоза (острее, подострое).

Впервые проведет исследования по гоучегаво токсикологических параметров я эффективности пешшдозанпн цеояпгсодерггащего сырья Татзрско-Шатргшапското несторозгденкж в качестве ярофплактпчеспого средства прп Т-2 хокептязе.

Определено, что добавляли цеошгга в кори, контамгсотровзнпый Т-2 тояеппом, сяиааег тяжесть течения токсгасоза л благоприятно вяияег па кяппичеекпе п ряд бнолапиеских показателей у гготрес.'къспк его

01ТЩХ

ГХзу<£ека адсорбидошш способность препарата, выявлена особенности адсорбция гот Т-2 токсина в рг'-щряамх у слог.: их in vitro п in vi\ro.

Исследованы показатели острой п субхроштчгской токсичност цеолтгтеодергащей породы "Шаграшагагта", шжаззно отсутствие купулг-тшшш, атаерпппрухощнх п раздражающих свойств npenspaia.

Впервне изучена способность радпонов с высоюш содерагапнеи протеши компенсировать нарушения белкового обмена у животных прп Т-2 токсикозе. •

Практическая ц&цность работы. Вшвлетпше нарушения белкового обмена при Т-2 токсикозе имеют диапгастпчгское значение п могут слугтъ обоснованней- для разработал профилактических н лечебных средств. .

РеЗуяьтахн пссяедованйй вотшш в "Методические реконендгляя по профплзплке нпхотойеккозов нпготных в Республике Такрстзл", кото-рае рекомендованы для внедрения в производство Главным управлением Еетершгзрш кабинета шшкстрозРТ.

Апробация работы. Основные материалы диссертационной работы доложены па V Всеросснйшзй конференция по паучныы основам гех-лологап промышленного производства ветеринарных бшлопгчеекпх препаратов, ." Щелково, 1995; на Респуб^осапской • иаучко-проговодствяотой конференции по актуальным вопросам ветеринарии и

й

шеоткоподстбэ, Казань, 1996, 1997 ; III Республиканской научно-техннческон конференции молодых ученых и спещгалкстов, Казань, 1997; Международном координационном советцашт по экологическим проблемам патологии, фармакологии и терапии животных, Воронеж, 1997, Научно-практической конференции по актуальным вопросам ветеринарной ыедшпзпл п экологии, Каштшпрад, 1998; Международной научной конференции, посвященной 125-летшо Казанской Государственной академии ветеринарной ыедацшш, Казань, 1998; IV Республиканской научно-технической конференции молодых ученых и специалистов, Казань, 1993.

По материалам диссертация опубликовано 10 работ. Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на 140 листах машинописною текста и включают: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полеченных результатов, 'выводы, практические рекомендации, список литературы. Список литературы состоит га 219 литературных источников, е том числе 151 та иностранных языках. Работа содержит 2S таблиц, 15 рисунков. Научные положении, пмаоснмые па защиту: • изучение механизма токсического действии Т-2 токсина па обмен белка у животных;

»определение эффективности цеолита Taiapcfo-IIIaipaHiancKoro месторождения п белковых добавок в качестве средств профилактики мпкотошкоза.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материал и методы исследований. Работа выполнена в течение 1995-1998 е лаборатории природных экотокснкашов Всероссийскою научно-исследовательского ветеринарного института.

Экспериментальные исследования. проведены на лабораторных (белые крысы, шшш, кролики) и сеяьскохозжавешшх (овцы) ¡кнвот-1шх. В опытах использовано 572 жнвотых, из них 12 овец породы прекос обоего пола в возрасте 12-24 месяца, живой массой 20-35 кг, 500 беспородных белых крыс обоего пола в возрасте 4,6 -мес., живой массой 180250 г, 50 беспородных белых мышей обоего пола в возрасте 5 6 ыес., жи-

вой шсссй 18-20 г, 10 бели кроликов порода белый Ееликзп обоего пола в возрасте 12 мгс., живой массой 2.5-3 кг.

До начала эксперимента жизохиые проходили 15 дпевпухо обсервацию в условиях вивария. Кормление проводил согласно пршшъш в зоогехлгш лорыаи. В зависимости ох условий эксперимента в ргцпол добавляли шрот соевый отечественного производства и премикс производства Голландии.

Для зкснкргиепталшой контаминации гатотппх использовали кристаллический Т-2 токсин, спптезпровяшгай в лаборатории природпмх экогоксшзнхов ВИШИ сл.с. Сергемевым А.И., яе отличающийся по. физико-химическим параметрам и токсическим свойствам ог существующих стандартов. . В качестве продудит использовали гриб Р. 5ро-гс'1пс1ие1а1ст. 2т-15, предоставленный А.Н. Котиком.

При моделировании острой п нодострой фермы ыжотскспкоза оптпне н контрольные группы жпвотакк формировались по принципу аназегов. Р течет« всего опыта животные находились в одпнакових условиях содержания и коршепка.

Острою интоксикацию подопытных зтаотаых Т-2 тоесипом производили в виде 5% водпо-еппртового раствора путем опального введения токсина в дозе ЛД53: белым крысам - 3.7, овцам - 3.1 мг/кг.

Подострое, ыпогокрашое, в течите 30 диен влияние Т-2 токсина шдещгавааипостртле1темшкот<йотна (1/5 ЛДя)с кормом.

Б качестве профплакпгхеского средства при микотокешеозе использовали: цеодптсодержащую породу Татарско - НГатрашанского месторождении пз среднего слоя залегагаи. Животным задавала цеолит с коыбп-коршы б количестве 3% от рациона. Адсорбционную способность цео-яптовего сырья по опгошеянго к Т-2 токслпу изучат ¿1 уйго л зп иуо. Острую оральную токсичность цеолита определяли па белых мышах л белых крысах. Средпесмертельпую дозу (ЛД53) ргссчншваян методом Кер-берх

Изучеплг кумуягтпЕных свойств проводили методом, предложенным 1лт Я (1951). Оценку местао-раздраиающего действия цеолита осуществляла методом коиной пробы п вес дети в копмоктвггшшй мешок. Кожную резорбции цеолита определяли истодом хвостовой ггопт-кзпдя. Аязершчесше свойства препарата изучали согласно "Методических рекомендаций по постановке ксследозання по .гпгиеи.ле-скому яоршрозаняю промышленных аллергенов в воздухе рабочей зо-

кы", ущрядешшх зал. глав. гос. врачей СССР 23.01.85 N 2121-85, дая определения раздражающего действия нспоаззоваяя "Методические указания к постановке исследований но изучешяо раздражающих ве-щеыв и обоснование ПДК избирательно действующих радражзющшс веществ в воздухе рабочей зшш", утвержденные Минздравом СССР 11.08.80.

Определение количества яукшшовых кислот в крови проводили спекгрофотометрнчесгаш методой по ыгтодкке, oimcaiatOH Г.АЛСрнтсюш и С.В.АлехсаидроЕЫы (1973). Определение суммарного количества аминокислот е сыпорогке крови ссзщестЕлялн сиекгрофого-ыетркчеспш методом по методике, олесзлной О.Ф. Вепкгаковой и Ю.В. Галаевыи (1981). Содержание белковых фракций в сыворотке крови определят деуия методами: методом электрофореза на пленках из ацетата целшолозы и методом горизонтального электрофореза в полкакрплаыид-noii теле (НААГ).

Изучение слпяшш Т-2 токсина па белковый обмен у животных

В первой части своей работы мы провели изучение ряда биохимических показателей при Т-2 токсикозе. Kaie показали исследования, прл Т-2 токсикозе наблюдались изменения содержания свободных ашшоклс-лот в сыворотке крови, причем их реакция несколько отличалась у ш-вопшх при остром и иодостром течепии интоксикации.

При введении крысам Т-2 токсина в дозе ЛД5о через б и 15 ч. после начала опыта общее кошиестео аминокислот увеличилось на 24 н 25% ■ соответственно (р < 0.02). К 24 ч. величина исследуемого показателя была па 66% выше исходных данных (р < 0.01) (ряс. 1).

Прл осгроы Т-2 токсикозе (ЛД50) у овец через 12 и 24 ч. опыта ре-гастрнроватось увеличение общего количества аминокислот на 33 и 40% (р<0.01) К 48 ч. уровень аминокислот в сыворотке крови нормализоЕалсг (рис. 2)

5 °'18

5 °.13 | 0.«

/

0

3

с

15

24

период исследования, ч.

Рис 1. Изменение содержания общего количества змгашкяслот в кровя у крыс при остром Т-2 токсикозе (ЛД50)

Рис. 2. Изменение содержания общего количества ашпокнслот в крови у овец при остром Т-2 токсикозе (ЛД53)

При введении крысам Т-2 токсина в дозе 1/5 ЛДя вместе с кормом в течение 30 сух наблюдалось спняетте общего количества гапшокпслот через 10 сут. опита на 22, через 20 - ла 24 и через 30 - на 26% (р<0.01)

(рис. 3).

О 3 в 9 12 24 43

период исследования, ч.

0,1 T

j

i О.ОЭ ■•

i 0 R o,ca •■

S 9 0,07 ■

X

1 o,ce +

О 10 20 30

период исследования, сут.

пнс. 3. Изменение содержания общего количества аминокислот е крови у крыс при подостром Т-2 токсикозе (1/5 ЛД50)

При подостром течении токсикоза, когда 1/5 ЛД50 Т-2 токегша вводили в течение 12 суток, достоверных тиснений данного показателя на веек протяжении исследования не регистрировалось. Однако, наблюдалась тенденция к сшшешпо содержания общего количества аминокислот в сыворотке кровн на 15-20% начиная с 10 суток опыта.

Кгк показал анализ доступных литературных данных по влиянию Т-2 токсина на уровень белковых фракций в сыворотке кровн животных, не выявлено единой схемы иротеинограмм при данном тошшозе.

Поэтому нами было проведено исследование методом элекгрофо-резэ сыворотки сыворотки кровн крыс и овец при контаминации юс Т-2 токсином в различных дозах.

При остром Т-2 токсикозе у крыс через 15 ч. после введения токсина отмечалось увеличение уровня а-глобулинов на 13% (,p'ü.o:i), изменений с остзяькых фракциях не наблюдалось.

Через 24 ч после начала исследования количество а-глобулинов со С1ашшю 9% выше нормы, а содержание альбуминов снизилось на 14% (р<002)

При моделировании подострой формы токсикоза (1.5 ЛДм) у опытных крыс, согласно протеинограымам, полученным в ПААГе, было достоверно пониженным содержание иреальбушшовой фракции на 35, альбуминовой - на 31, Tf-G-глобулюювон - на 58 и у- А-глобулиновон - на 37% (р<0.02).

Количество постальбумнковон (а-глобулкновош фракции составляло на 15% выше исходных показателен (р<0 02)

Наряду с изменениями уровня беиковых фр.илдш: общее ксоича!

u

во белка у опышых крыс было пониженным па 27% (р<0.02).

У овец при острой форме Т-2 токсикоза к 24 п 48 ч. ошечатось снижение количества альбумина па 18 и 27% соответственно (р<0.02).

В эти же сроет наблюдалось увеличение содержания a-глобулина, величина которого через 24 ч. была па 22, через 48 ч - иа 12% выше исходных данных (р<0.02).

Через 4S ч. регистрировалось уменьшение на ITS-ó концептрзцяи фракции ß- и у-тлобултсов (р<0.02).

Кроме изменения белковых фракций, выявлялось такие снижение содержания общего белка через 24 ч,- на 7% (р<0.05), через 48 ч,- па 17% (р<0 02)

При многократном введении овцам Т-2 1окспнав дозе 1/5 ЛДм через б суг. после начала опыта регистрировалось снижение содеркгяяа общего белка на 14, фракции альбумина - па 26, фрзкцпи ß- н у-глобулгаюв - па 18*3-0 и повышеипе количества а-глобулиновоп фраштт на 34% (рс0.05).

К 9 сут. отмечалось дальнейшее cinraerate концентрации белка на 15, фракции альбумина - на 29, фракции р- п у-глобулпноз - яа 20 и увеличение фраилш а-глобулпнов па 35% (р<0.02).

На 12 суг. опыта происходила некоторая стабилизуй всех изучаемых показателей. Содержание общего белка в этот период было в пределах физиологической нормы. Уровень альбуминов составят 12%, ß- и глобулинов - 9% ниже контроля (р<0.02). Количество а-гаобртшгоБсп фракции было выше исходных данных иа 22% (р<0.02).

По сообщешпо ряда ученых, Т-2 токсин, пграду с подавление*? биосинтеза белка, вызывает и измените сшпеза" гзукшшовых кислот (Тзтельяи В. А., Кравченко JI.B., 1985). Однако эти данные етшотся неполными и противоречивыми. В связи с этим мы рашшп шясингь уровень нуклеиновых кислот в крови у крыс п овгц при згспершетпазьпог! Т-2 токсикозе в динамике интоксикации.

При однократном введет л крыеш Т-2 токотгз з дотг ЛДи через б и 15 ч. опыта отмечалось увеличение общего количества пуетегаювш кислот па 20 н 25% соответственно (р<0.01) (рис. 4).

период исследования, и

Рис. 4. Изменений содержания общего количества нуклеиновых кислоI в кровп у крыс при остром Т-2 токсикозе (ЛД50)

К 24 ч. содержание иуклегаовых кпслот несколько снизилось, однако остзвззось на 19% выше исходных данных (р<0.01).

У овец при острой форме токсикоза через 3 часа после введения Т-2 токсина-количество нуклеиновых кислот увеличилось на 58%, через 6 часов - па 50% (р<0.02) (рис. 5). В дальнейшем содержание их в крови вначале несколько стабилизировалось, а затем снизилось, однако к 9-му часу опыта уровень нуклеиновых кислот был еще на 18% выше исходных показателей (р<0.02).

период исследования, ч.

Рис. 5. Изменение содержания общего количества нуклеиновых гасло I в крови у овец при остром Т-2 токсикозе (ЛДИ)

У выживших животных через 24 часа после введения ынкоюксина содержание нуклеиновых кислот было на 15% шгже доопыпплх значений (р<0.05), а через 48 часов полностью нормализовалось

При лодоаром Т-2 токсикозе у крыс иашподачось снижение копи честна нулениовых шслог через 20 сут опыта иа 51, через 30 сут - на 55% ('р-0.0!) (рис. 6)

10 20 период исследования, сут.

Рис. б Изменение содержания общего количества пукленновых кислот в кровн у крыс при подостром Т-2 токсикозе (1/5 ЛД5а)

У овец при иодос1рой форме токсикоза через б и 9 суг. после введения Т-2 токсина регистрировалось снижение уровня пуклегаювыл кислот на 17 н 29% соответственно (р<0.01) (рис. 7) К 12 сут. общее количество нуклеиновых кислот составило 12% пнже исходных данных

(р<0.01).

0 3 6 9

период исследования, сут.

12

Рис 7 Изменение содержания общею количества пукленновых кисло г г. крог.н у оЕед при подостром Т-2 токсикозе (1/5 ЛД!С)

Крог.и' показателя содержали! нуклетювьгх кислот, мы проводили омредглсиие 1.о »ффшшеша примеси осшо'шою белка в щт.лешюьмх

слотах характеризующего их синтезирующую способноиъ и «лмсдшго- которого алрсдсллет качсаьетагпо сторону изменении в ял г .лгшгогмх кислотах при токсикозе.

Наши огалы показали, что при Т-2 токсикозе существует прямая закнсимость ыенду двуш этими показателями.

Увеличение количества нуклеиновых кислот при остром токсикозе сопровождается увеличением содержания остагсшого белка (рис 8), а снижение при подостром токсикозе - уменьшением количества прямее и (рис. 9), однако зги изменения менее выражены.

пгриод исследования, ч

Рис. 8. Изменение коэффициента примеси остаточного белка в нуклеиновых кислотах у овец при остром Т-2 токсикозе (ЛД50)

период ксслвдевзния, сут.

Рнс. 9.Изменение коэффициента примеси остаточного бежа е нуклеиновых кислотах у крыс при подостром Т-2 токсикозе (15 ЛДк)

Обобщая выше приведенные результат исследований, можно сделать заключение о значительных изменениях рада показателей белкового

ооыена у ишоиш при воздейсшш Т-2 токсшга, причем релюуг« •».-юрых из них отличается в зависимости от формы течения гоксшсо;*

Изучение влияния рационов с высоким содержанием протеида гэ течение Т-2 токсикоза у животных

Таз; как патогенез Т-2 токсикоза тесно связан с белковым обменом, го большой интерес представляет проблема елияння белкового компонента корма на активность токсина

Нами были проведены опыта по изучению влияния рационов с высоким содержашкм протеши на патогенез подострого Т-2 токсикоза у крыс. В корм животных, предварительно коитагдашрозашшл токсином (1/5 ЛД;о) в качестве белковой добавки вносили соевые шроты отечест-вегаюго производства (сод. сырого протеина 50%) п премгасс производства Голландии (сод. сырого протеина 45%) в количестве 10% от суг. рациона. Контролем служила группа крыс, получавшая токсичный комбикорм без белковых добавок!

Перед началом опыта, крысы в течение 2 недель получая» чилый комбикорм, без токсина, со игротамп и премшссом.

Ошп проводился в течение 30 суток. В качестве параметров контроля развития тошосоза служили клинические нрнзнают, общее количество амшгокнслот, нуклеиновых кпслот и содержание белковых фракции в кровп •

Результаты исследования показали, что средняя масса тела группы крыс, в корм которых были добавлены соевые шроты, составляла через 10 суг опыта 9, через 15-7, через 20 - 18, через 25 - 17 и через 30 - 21% выше показателей контрольной группы еквотпых (р<0.02).

У другой группы, которая получала премшсс, средняя масса тела была выше контроля через 15, 20, 25 и 30 сут. на б, 20, 19 я 25% соответственно ([Х0 02)

Клинические признаки мшсотокснкоза у контрольной группы крыс появились раньше и били выражены более интенсивно по сравнешпо с оиы1нымк ¡кив01ными.

Уровень общего количества свободагых амппокпслог был выше на 19 и 1% соо1Ее1С1вешю (р<0 01)

У трутш крыс, получавших шроты и премихс, было повышенным, но сравнению с контрольной группой, содержание в сыворотке крови

альбуминов на 20- 24, у-Оглобудшов - на 18 21%. у-А-глобушшов - на 16% (р<0.02). Уровень а-глобушшовон фраьл.ин составлял 12 н 9%, соответственно ниже контроля (р<0.02). Колтгчепво отчего белка у обеих гр}тш бшо повышенным на 10-14% (р<0 01).

Содержание нуклеиновых кнелот в крови у групп крыс, получав пшх шроты к премгосс,' была выше контроля на 35 и 44% соответственно (р<0.01).

Приведенные выше результат позволяют предположить, что корма с высоким содерзкашем протеина способны в определенной степени облегчать течение Т-2 токсикоза у животных. Это связано, очевидно, с тем, что нрл Т-2 токсикозе развивается дефицит белка в организме, приводящий к угнетению детокенкацпонных механизмов организма, н в частности, синтеза в печени 8Н-глутатиоиа 1ЯЖ-шокуроновой кислоты я других глюкурогшдов, играющих важную роль в реакция конъюгации с гоксяжш.

Введение в рацион протеиновых добавок позволяет восполнить дефицит беякав организме, образовавшийся в результате мнкотоксикоза

Наши данные согласуются с результатами 'исследований А.В. Кравченко с соавт.. (1984), которые установили, что дефицит белка в рационе приводят к резкому снижению концентрации БН-глутапюна и активности глутатиоягралеферазы в леченн и вызывающими, в сбою очередь, усиление токсического действия Т-2 токсина

Шучеипо профилактического действия цеолита Тотарско -Шатраюапского месторождения при Т-2 токсикозе животных

Опасность, которую представляет для /здоровья сельскохозяйственных животных Т-2 токсикоз, указывает на актуальность поисков эффективных средств его профилактики.

Одним из перспективных направлений решения данного вопроса по нашему мнению, является использование сорбентов н в частности, цеолитов.

Поэтому следующей Частью нашей работы было гонение эффективности цеолнтсодержащего сырья Татарско - Шатрашанското место рождения нз среднего слоя залегания в качестве профилактического средства при Т-2 токсикозе. Состав данной неолтеодержащел породы был установлен Л.В. Якимовым и соавт; (1996).

Тошпсологаческзя оценка цеоята лоютала, что он не обладает кумуяяпштши, зллергешшшт свойствами и раздразатоздим действием па кожу н слизистую оболочку.

Цеолит задзвата с кормом з количестве 3% от рациона, так как данная концентрация не оказывает отрицательного влияния на животных.

Вначале изучали адсорбционную способность цеолита по отношению к Т-2 токсину in vitro. Маян опыты показали, что наиболее активно адсорбция Т-2 токсина цеолитом идет в условиях, ирибяшшткх к условиям яелудочно-ктяечкого тракта животных.

Установлено, что в водной среде, в качестве которой использовали физ. расгаор, при t 20 С п персмеппгаашт в течении 2 ч. цеоязп в кол. 200-300 мг связывал 12, a 400-600 иг - 30% Т-2 токсина. При t '10 С цеолит в кол. 200 мг связывал 13%, 300 - 23%, 400 - 50%, 500 - 64%, 600 -70% Т-2 токсина. Далее па&ш была проведена искусственная копташша-щш токсганш комбпкорыа с последующим впесепиеы цеолтпа Две одинаковые пробы корма были помещены в аппарат дай встряхивания на 2 ч при 140 н 20 С. При 40 С цеолит связывая 66%, а прн 20 - 30% Т-2 токсина.

Но из полученных данных не следовало, что in vivo токсше будет ипактгашроваться такзе эффективно, как и in vitro, что обусловлено более сяозньш составом содершшого аепудочио-кишгчпого тракта и ззагато действием цеолита как с шпеотокстшом, та; л другяьш веществами.

Поэтому, чтобы изучить эффективность использования цеолита при Т-2 токсикозе, нами были проведены опыты на крысах. Согласно результатам исследования, у животных, получавших с корыон цеолит, клннпческие и биохимические признаки токсикоза были менее выражены.

Масса тела у животных этой группы была через 15, 20, 25 п 30 qt. после начала опыта на 9,21, 23 и 27% соответственно лише, чем у не тро-филактнроЕаннон группы крыс (р<0.01).

Количество эритроцитов' составляло па 10, 20 и 30 сут. 27, 14 п 21% соответственно выше по ергвиелшо с данными по группе животных, е корм когорых не добавляли цеолит (р<0.02).

Показатель содеряаиия гемоглобина бил выше через 10, 20 и 30 сут. на 11, 23 и 39% соответственно (р<0.02).

Количество лейкоцитов было повышенным на 10, 20 л 30 суч оньпа но сравнению с непрофшгакгнрозапной группой, на 15. 5 и 6% соотегсхвегаю (р<0.05).

Далее обнаружено, что содержание общего количества свободны:-: аминокислот в сыворотке крови у крыс данной группы через 10 сут. после начала исследования было на 6 (р<0.02), через 20 - на И (р<0.01) 1! через 30 - на 20% (р<0.01) выше чем у животных, получавших юлько токсин.

Б сыворотке крови от группы крыс, которым задавали -токешг и це-оли1, к 30 сут. опша общее количество белка составило 11, фракцш альбуминов - 20, фракции у-глобулкпов - 28% выше и фракции «глобулинов - 4% ниже показателей пепрофллакптрованной труппы

(р<о'о2).

Уровень нуклеиновых кпсло1 в лейкощнарной массе крови на 10 сут. эксперимента был пониженным па 13%. однако к 20 и 30 сут. увеличился на 53 и 31% по сравнению с группой, которым не задавал! цео-от« (р<0.01).

Количество связанного с нукпенновнмн кислотами белка составляло через 20 сут. - па 9 (р<0.02), через 30 - на 12% выше показателей не-ирофплактированной труппы (р<0.01). ■

Полученные нами данные позволяют заключить, что добавленное в корм животных цеошгговое сырье "Шатрашаннт" в количестве 3% 01 'рациона обладает профилактическими свойствами по отношению к Т-2 токсикозу. Эти результаты подтверждены в эксперимент на овцах, которым вводили цеолит в рацион, предварительно кон1амшшровашый Т-2 токсином (1/5 ЛДм).

ВЫВОДЫ

1. Острое течение Т-2 токсикоза сопровождается следующими, общими для различных ендов животных, иарушегатш белкового обмена:

а) увеличением содержаты общего количества свободных аминокислот в сыворотке крови (на 24-66%)

б) изменением процентного соотношения белковых фракций: в увеличением а-глобулиновой фракции (на 13-22%)

в снижением альбуминовой фракции (на 14-27? о)

в) увеличением общего количества нуклеиновых кислот (на 19-58%>

i) увеличением примеси белков пухяятовнхкгодохах (на 9-13%)

2. Подострое течение Т-2 токсикоза у раатячных видов животных сопро • Еождается следующими сбщкмя пзрушенлзми обмеда белка;

а) снижением общего количества свободных аминокислот в сыворотке крови (на 15-26%) ó) уменьшением общего белка сыворотки крови (па 14-27%)

в) гоиенегатем процентного соотношения белковых фракций:

а сшшениеы альбуминовой фракции (па 12-29%) а увеличением а-гяобулкгагавол фракции (на 22-35%) з спп&етшем у-глобулгшовой фракции (на 18-58%)

г) снижением общего количества нуклеиновых кислот (яа 17-55%)

д) снижением прпмесн белка в нуклеиновых кислотах (па 11-17%)

3. Введение в рацион злпютгшх кормов с высоким содержанием протеина (до 50%) способствует коррекция клинических и бпохныическпх показателей (содержание аминокислот, белковых фракций, нуклеиновых кислот) в динамике интоксикации Т-2 токсином, 'повышгет устойчивость

ЖИВОТНЫХ К МЦКОТСКОШу.

4. Цеолпг Тагзрско-Шагришжского ыесторождешхз в колпчеяйе 3-5% от рациона не обладает куиуляпшЕш, аллергенным свокспзнзал п рзз-дралгакшцгм действием па кону и слизистую оболочку знвспплх

5. Установлены pesicsai адсорбция цеолитом Т-2 токсина в условна* in vitro и т vivo. Наиболее активнее- связывание сорбентом Т-2 токсшга происходит в условиях, приближенных к нелудочго-илигчиому тракту

ж130шых

6. Введение в рацион цеолита "Шатрзшанита" в количестве 3% от рациона предотвращает табель животных при по дострой Т-2 токсикозе

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ И РЕКОМЕНДАЦИИ

1 Результаты исследования белкового обмена у з-швотпых при Т-2 токсикозе могут быть использованы в диагностике болезни п прогнозпровашот ее исхода, для научно-обоснованного выбора средств яечепия н профилактики токсикоза.

2 Цеошгтсодержащее сырье Тагарско-Шатрашзпского месторождения может бить использовано для профилактики Т-2 токсикоза у животных нукм добавления е корм в количестве 3-5% от рациона

3 М.т-рнзлы псслсдоваипй вшчеш 'te " Методические рекомендации по профилактике шшотоксгасозов животных в РТ ", которые рекомендованы дтц внедрения в производство Глзеным управлением ветеринарии Кабпле-!'•> Мшшаров РТ

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Тремасов МЛ., Сметов ПК., Сергекчгв А.И., Мапошко Д.Б., Сметов Д.П. Изучение токсичности трихотеценовых кикотоксгагов и ФОШ/ Маг. ресиуб. науч.-ироязз. конф. но актуальным проблемам ветеринария п зоотехнии -Казань, 1996.-С. 118 7. Тремасов МЛ., Сметоз П.К., Титова В.Ю., Сергеячсг, А.И., Халпетва К.Ф., Сыетоз Д.П., Мапошхо Д.Б. Профглактжа мпкотоксикозоз.// Мат. респуб. пауч.-пронзв. конф. по актуальным проблема,! ветеринарии пзоотехшт.-Казапь,1996.-С.119 3. Тремасов МЛ., Сыетов П.К., Сертеичег А.И., Тпгоаа В.Ю., Мапошко Д.Б. Научные осясзы разработки фармакологических средств профилактики н лечения ¡шшитаснхозов живоишх.// Тез. докл. 5 Всерос. конф. по научным основан технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов.-Щелково,1996.-С.329 1. Мапошко ДБ. Изучение содержанка пункинозшх кислот при трпхоте-цепопоы микотоксикозе.// Международное координационное совещание по экологическим проблемам паголопш, фармакология и терапии швоишх: Тез. докн.-Воронек,1997.-С.104

5. Мапошко Д.Б., Сергенчев АЛ., Абдузшш А.Г., Титова В.Ю. Использование цеолитов дея профишхшси шшзтошщвов животных.// Мах. респуб. науч.-произв. Конф. по актуальным проблемам ветеринарии п жнвотаоводства-Казаиь, 1997.-С. 134

6. Мапошко Д.Б. Изменение количества аминокислот в сыворотке крови при трихотеценовом микотоксикозе // 3 респуб. науч.-тех. конф. молодых ученых и специалистов: Тез. докл.-Казань,1997.-С.50

7. Мапошко Д.Б., Сергенчев АН. К ирофилаиике микотокснкозов животных.// 3 респуб. науч.-тех. конф. молодых ученых и специалистов: Тез. докя.-Казань,1997.-С.51

8. Мапошко Д.Б., Садртдшюв P.A., Алимов Л.М. Изменение содержали нуклеиновых кислот у зтшотпых при трпхотецеповоы микотокснко зе // Мат. наут.-ггракпр!. конф. по шсгузлытым вопросам ветеринарной медицины и экйлопгя-Кашпяшград. 1993 (в печат)

9. Мапошко ДБ. Изучение влияния трнхотеценовато мнкотоксина на белковый обмен у зкпвопшх// Мат. науч.-нрактпч. конф. по актуальным вопросам ветершариой медицины и згсолотп. -1С глшипп рад, 1Р98 (в печати)

10. Мапошко Д Б, Применение белковых добавок для профилактики ын-котоксшсозов.// Мат. международной науч. копф., посвящегашй 125-летгао академтг.-КаззньЛ998.~С.бЗ

Заказ № 46. Подписано в печать 11.11.98 т. Формат 60x84 1/16, 1 п л., Тира,г 100 экз Офсетный участок ВНИВИ (г. Казань)