Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Морфология слюнных желез свиньи в онтогенезе и особенности их в сравнительно-видовом аспекте

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Бурятская государственная сельскохозяйственная академия

РГ о

На правах рукописи

1'/;1 га

МОМОТ НАДЕЖДА ВАСИЛЬЕВНА

МОРФОЛОГИЯ СЛЮННЫХ ЖЕЛЕЗ СВИНЬИ В ОНТОГЕНЕЗЕ И ОСОБЕННОСТИ ИХ В СРАВНИТЕЛЬНО-ВИДОВОМ АСПЕКТЕ

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных.

автореферат диссертации на соискание учёной степени доктора ветеринарных наук

Улан-Удэ, 1996

Работа выполнена на кафедрах анатомии и гистологии Приморской государственной сельскохозяйственной академик и Омского института ветеринарной медицины при Омском государственном аграрном университете

Научные консультанты: заслуженный деятель науки РФ. доктор биологических наук, профессор Ильин П.А.; АВетН, доктор Егтеринарных наук, профессор Васильев К .А

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор Ежкова М.С. ; доктор биологических наук, профессор Тельцов Л.П; доктор ветеринарных наук, Жуков В.М.

Ведущая организация - Бурятский институт биологии (Сибирское отделение Российской Академии Наук).

Защита диссертации состоится 'У /" июня 1996 г. в_часов на

заседании диссертационного совета Д 120.79.01 при Бурятской государственной сельскохозяйственной академии.

Адрес академии 670020, Улан-Уда, Пушкина, 8.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Бурятской государственной сельскохозяйственной академии.

Автореферат разослан " " Лй& 1996 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доцент

Игумноз Г.А.

X. ОЕЦАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы»"'Отличительной особенностью органов пищеварительной." системы от других систем состоит в том, что эта система находится в прямом контакте с элементами внешней средн. Поэтому многие исследователи пытаются объяснить многообразие морфологических особенностей в органах этой системы у всеядных, травоядных и плотоядных животных в зависимости от особенностей их питания. Такая связь а взаимообусловленность наиболее полно изучена в передней, средней, задней кишках и их производных (, 1904; ~ZÍ£€¿ , 1927; ~ва4л%- , 193?; Наумова Е.И.. 1981; Давлетова Л.В., 1965; Рябиков А.Я., Симикин АЛ., Романенко А.Д., 1387).

Сведения же а морфологии головной кишки я производных., ротовой пояостз, в частности- слшннх желез,; у разных жялот-" них класса млекопитающие- с. учетом особенностей питания Фрагментарны. и стрывсчнн.

Поиск более тонких морфологических различи! П- в сравниваемых органах может быть "более результативным только при раскрытии взаимосвязи между структурами и особенностями их-, функционирования.- ■ •. -

; В последнее время, физиологами раскрыта функциональная активность слизистой ободгочки пищеварительного тракта в мембранном, или пристеночном, шяеварёнии; ведутся исследования -энтериновой системы пищеварения (кшечной гормональной); повышается интерес■ к. симбионтному. пипеварению; устгчсалены особенности функций, сжзистых. желез на тот. или иной пивдвой раздражитель СУтолев A.M.., 1963, 1976;. Орлов Oí., 1966; Водников H.H., 1977;.Криницин Д.Я., 1978;.:- Стпуговец В.Г., 1980;; Наумова Е.И.,. 198Г.и др.Х.

Исследованиями В.М.Коропова (1949), Л.И.Ильиной (I97D), 1Г. А. Ильина, Л Л. Ильин ой CI97I), А.П.Левицкого (1974), А.Г. Бабаевой, Е.А.ЩубняковсЗ (1979), А.А.Симяиным (1988) Е.В. Голенковой ÍISS9) я. др. выявлен ряд возрастных.и видовых особенностей функции, слюнных желез человека я сельскохозяйственных животных,, в "ом числе на субклеточном уровне. Е.А. ЩубниковоЯ (1980) я другими ученши по- данным электронной микроскопии и цито-топохимии эндокриноцитов слшных желез была доказана не только Бнедаесе1феторная,. но и эндокринная функция слюнкожелезистого аппарата.

Нашими исследованиями (1983, 1984, 1985, 1987) была доказана выраженная видовая специфичность слюнных желез свиней, в том числе околоулной. Вместе с тем, многие вопросы морфологии и .гистохимии слюнных келез млекопитающих остаются недостаточно изученными, а структура и функция этих органов у диких представителей класса млекопитающих вообще неизученной. .Мы не располагаем'сведениями о старческой инволюции-слюнннг яелез у животных, а также о морфологии и гистохимии этих органов у домашних и диких представителей класса млекопитающих в связи с особенностями экологии, кормления, продуктивности и дри различных патологических состояниях. В этой связи выязление закономерностей в развитии больших слюнных желез дает ценный фактический материал .для более глубокого познания микроструктуры и гистохимии названных ор-ганоз в онтогеЕ-зе, необходимый при оценке их морфогенеза и функционального состояния.

Цель _и задачи исследования. Целью нашей работы является изучение видовых особенностей микроструктуры и гистохимии больших слюнных хелез у представителей разных отрядов класса млекопитающих (всеядных, травоядных и плотоядных) с учетом их экологии.

Для реализации поставленной цели были определены следующие задачи:

1. Изучить сроки, особенности закладки и структурно-функционального развития околоулной, подчелюстной к подъязычных слюнных желез домашних свиней в онтогенезе.

2. Изучить видовые микром орфологические особенности больших слюнных желез у разных представителей класса млекопитающих: всеядных, травоядных и' плотоядных кизотных.

3. Ва гистохимическом и цито-топохимическсм уровнях проследить особенности функций слюнных желез у диких и домашних млекопитаюаих в сравнЕтельно-видоэом аспекте.

4. Провести изыскание и апробацию новых морфологических методов иссл:здое-.ния.

Тема научного исследования оосуждена и утверждена на ученом совет'1 Приморской сельскохозяйственной академии (номер государственно!! регистрация 01.9.30005392).

Анатомическими, гистологическими, Еитадашческида, элгдтрон-

номикроскопическими, морфометрическими методами исследования' проведена комплексная оценка больших слюнных желез в ' видовом, сравнительно-видозом аспекте у представителей диких всеядных, травоядных и плотоядных животных, а по домашней свинье - в онтогенезе.

У каждого животного проведено исследование всех четырех застенйнх слюнных желез, что позволило выявить и сформулировать ряд новых' закономерностей структуры и функции их микроморфологии к гистохимии, в том числе о строении адинусов у разных отрядов класса млекопитающих, выводной протоксвой системе, состоянии межжелезистой соединительной ткани на основании пито- и. гистохимических показателей функции слв: ных телез.

, На основе растительного сырья ига Приморского края были лолучены новые гистологические красители и использование их в учебном процессе а научно-исследовательской работе.

Теоретическая и практическая значимость результатов исследования.

Обоснованы и сформулированы закономерности, связанные с возрастными и видозыми особенностями макро- микроморфологии и функции больших сланных -желез.

Установлена прямая корреляция, связанная с зависимостью микроморфологических (по данным цитометрий) и .функциональных показателей от обмена веществ, изучена также секреторная активность (по данным цигометрий п гистохимии) слшгчх. желез под влиянием атропина и пилокарпина.

Доказано участие эпителия выводных протоков в формировании секрета. Детально дана расшифровка различий сероцитов и мукояитов в ха'ждой слюнной железе. Показаны видовые особенности в строении сероцитов, мукоцитов и их органотипичес-кнх структур, в т.ч. эндокряноцитов у. разных представителей класса млекопитающих.

Ценность работы заключается в том, что полученные сведения об особенностях микроморфологического строения и функции болъних слшкых л®лез у травоядных, всеядных и плотоядных животных-является вкладом в развитие'теоретических основ возрастной и видовой морфологии млекопитающих и могут быть использованы в качестве исходных при выявлении причин нарушений строения и функции органов пищеварительной системы.:

На защиту выносятся следующие положения:

1. Возрастные особенности тпстотенеза околоушной, подчелюстной и подъязычных нвих желез домашних свиней в онтогенезе ,

2. Структурно-функциональные особенности больших слюнных желез у половозрелых домашних и диких всеедных, у диких представителей травоядных и плотоядных в сравнительновидовом аспекте (ло данным исследований методами классической гистологии, гистохимии, цитотопохимии, электронной микроскопии, ци~ тометрии и биометрического анализа)-

3.'Защищенные авторскими' свидетельствами-на изобретения (5) разработки, связанные с получением гистологических краен-' тел-й из фдгавоновдосодзржаших растений юга Приморското края.

Апробация работы. Материалы исследований доложены ' и одобрены на 5-й региональной конференции молодых ученых и слег :аллстов Сибари и Дальнего Востока (Новосибирск, 19ЙЗ),на региональной научно-технической конференции "Молодежь - аграрному производству" (Красноярск, 1991), на научных конференциях в Омском институте ветеринарной медицины (1982/1983),на заседании Омского отделения БШОАГЭ (Омок, 1983), на межвузовской конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора А.Е.Ефимова (Омск, 1987), на республиканской научной конференции ветеринарных морфологов, посэяженной 100-летию со дня рождения заслуженного деятеля науки РСФСР, профессора Акаевского А.И. (Олек, 1993), на 2-й Всероссийской конференции "Влияние антропогенных факторов на структурные преобразования -органов, тканей, клеток человека и животных" (Саратов, 1993), на'конференции "Арсеяъевские чтения" , Уссурийск, 1993), на научно-методических конференциях Приморской сельскохозяйственной академии (Уссурийск, 1992, 1994).

Ре'ажзадгш__резушё,татов исследования: ~

I- -Результаты работк. используются в учебном процессе при чтении лекций, и проведении лабораторно-практических занятий по цитологии, эмбриологии я гистологии, .анатомии в Омском аг-роуниверситете и-Оскш институте ветеринарной медицины, в Уссурийском -едагоютеском ипстигуте, в Бурятской и Приморской ■сельскохозяйственных академиях-.

2. "Издано три информационных листка по способам получения зфаситедя из растительного сырья и способу окраски поли-

•генных хромосом насекомых (информлистки .Л 52-89, 1988; 283-89, 1989; J6 79-92, 1992; - Владивосток, Приморский центр НПО. .

3. Получено тра удостоверения: на рационализаторские предложения:

а) "Окраска гистологических срезов красителем растительного происхождения". - Уссурийск, ПГСХА. - 1988. - № 150-54.

б) "Способ получения красителя из черемухи Маака и его использование дал гистологических целей". - Уссурийск, ПГСХА. - 1990/ - № 252-150.

в) "Способ выявления хромосом в животных клетках на ЛПЗ по биологическим дисциплинам". - Уссурийск, ПГСХА. - 1990. -JS 253-151. '

4. Получено пять авторских свидетельств на изобретения:

а) "Способ получения-красителя из растительного сытая для гистологических доследований" (Помог Н.В., Забара Г.В. Опубл. 1968.

б) A.c. 3 1597376 СССР, С 09 В 61/00. Способ получения краиитедя из растительного сырья" (Момот Н.В., Лзлшя JT-.B., Мешков H.H. Опубл. 199<Э.

в) A.c. ffi I688I60 СССР, С 09 В 61/00. Способ окраска политенных хромосом йасекомах (Момот.Н.В.,.-Лапшн Л.В., Меп-ков H.H. Опубл. 1991. -•"

г) A.c. й I78I259 СССР, С 09 В 51/00. Способ получения ■ красителя для гистологических целей (Movor Н.В., Латвия Л.В. Опубл. 1992. ■ .

д) Положителшое решение на-выдачу патента по заявке

№ 5050681/04 (032097) от 02.07.92 г. "Способ получения красителя для гистологических целей" (Мшог 0.В., Лапшин Я.В.

Публикации. По теме диссертация опубликован» S1 научных работ. •• - *

Стиукт.уцз и объем диссертации. . Дисеертацшг включает следующие раздели: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов, вывезу и список литературы, который содернит 248 работ отечественных и 69 зару- : беяннх авторов. Диссертация изяогена па 3g7 страницах машинописного текста, иллюстрирована III графиками и.микрофотск графияш, 25 таблицами.:

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материал и методика исследования

Материал от домагних всеядных для исследования получен от свиней крупной белой породы, принадлежащих свиноводческому совхозу "Лузинский", а также учебно-опытному хозяйству Приморской сельскохозяйственной академии.

Материал был взят от 200 датированных зародышей и плодов, от'40 поросят, 15 подсвинков и 12-свиней. Возраст плодов определяли по данные зоотехнического учета и по комплексу признаков обаего развития (Студенцов А.П., 1981; Обертас Э.И., 1967). Кроме того, для определения критерия морфофун-кци^чальной активности больших слюнных желез использовали атропин и пилокарпин. Исследование проведено на 15 гол. 7-месячных подсвинков, подобранных по принципу аналогов: 3 гол. контрольная груша- и 12 гол. - опытная, при этом для проверки действия каждого препарата в отдельности (через 15 минут и через I сутки.после введения) брали по 3 гол. животных. Растворы атропина (ОД^-ный) и пилокарпина (1%-ный) по 0,05 г/кг «ассы вводили подкожно. Убой проводили через 15 кинут после инъекции при видимых клинических признак®:. Материал от диких животных получен от 6 голов дикого кабяна (уссурийский подвид), от 6 голов пятнистого оленя, от 3 голов косули, от 6 голов норки американской и 3 голов выдры. Материал брался в зимний период от гивотных, достигнувшим полного развития. Возраст травоядных определяли по изменению зубов, используя классификацию И.И.Миролвбова и исследования Л.П.Ряаенко (1948), а всеядных - как по возрастным изменениям зубов, гак и по размерам и весу кабанов.(Слудский,1956; Бромлей Г.Ф., 1964).

Материал для гистологических и гистохимических исследований фиксировали в 12%-наы растворе нейтрального и кислого формалина, в тадкостя Карнуа, в сулемовой смеси Максимова, уплотняли в парафине,-часть"замораживали яа термоэлектрическом столике ТОС-2. Срезы получали на санном лшсротоме, их толаина с парафиновых белков 5-7 мкм, с замороженных - 10-12 кем. ?_зависглости от методов окраски и проведения гистохимических реакций срезы в одних случаях наклеивали на предметные стакла белков, в других - распределяли на стеклах, в третьих - окрашивали без фиксации на стекле.

Для электронно-микроскопического исследования материал фиксировали в 4^-ном растворе параформа яа ОД М фосфатном буфере (рН 7,4) с дойиксацсей в 1й-ном растворе 0обезвоживали в спиртах возраставшей крепости. С учетом рекомендаций Л.С.Гольдияа (1963) и Г.Гайера (1974) кусочки органов заливали в аралдит по стандартной методике. Контрастирование проводили по ízynoPfés,

Морфологию больших слюнных желез изучали на срезах, окрашенных гематоксилин-эозином, а тагае основными красителями, приготовленными аз.покровных чешуй луковицы лука (авт. св. СССР, Jí I4I393I, 1986), из плодов черемухи Маака. авт. св. СССР, й 15Э7376, 1988; авт. св. СССР, № I6S8IC3, 1988), из плодов воронца заостренного и лунссемянника даурского (авт. св. СССР, й 1781259, 1990), по разработанной наш методике (информационные листки № 52-89, 1989, Владивосток; J& 283-89, 1989, Владивосток; $ 79-82, 1992, Владивосток, а также рационализаторские предложения ¡i 156-54, 1988, ПШ, Уссурийск; & 252-I5D, 1990, ПСХИ, Уссурийск;

253-151, 1990, ЛСХИ, Уссурийск).

Коллагеновые волокна выявляли по Маллоря, эластические - резорцин - фуксином по Вейгерту а орсеинш по Тендеру-Унна, аргирофильные -импрегнацией нитратом серебра яо Фута. .

РНК я ДНК выявляли галлоцдеяян - хромовыми квасцам по Эйнарсону и яиронян-метиловнм зеленым по Браше, яреме того, ДНК выявляли фуксин-сернистой кислотой по Фельгену. Для каждой гистохимической реакции ставились соответствующие контроля (Пирс Э., 1962; Елисеев З.Г., 1957; Кононсяий А.Л., 1976). . . •

Для определения обшего и кислого белка использовали сулеуовш^ и водный растворы бромфенолового синего по Ели-сееву^^у^фгидрндШаеП труппы белков выявляли реакцией с 2,2-дисжси-6*6-ш!яафгилсульфицом по Баряетту и Зелигману, суммарное определение дисульфилных групп белков проводили по Пирсу (1962).

Гликоген и гликопротеиды выявляли ШИК-реакцией по Шабадашу с окислением последних до свободных альдегидных групп слабыми растворами периодата кадия и периодной кислоты. В качестве контроля для выявления гликогена аслоль--зовали препараты, предварительно обработанные'амилазой : слюны, приготовленной по методу Роскина (1951), а в реак-

то

циях на выявление гликопротепдов - препараты, подвергнутые адегилированизо и деацетилированиз по Лилли (1969).

Карбоксилированные глиноэаиияогдиканы выявляли альциа-новым синим по Стидмек7 и каллоадным железом по Хейлу, сульфатированные гликозаминогликаны - основным коричневым по Шубичу (1961). Контролем служили препараты слабого и жесткого метилирования,- а также даметилирозания.

Нейтральный жар и лшгопротеиды изучали на срезах, изготовленных с блоков на замороженном столике после кратковременной их фиксации в 12^-ном кислом формалине. Срезы окрашивали суданом-3 (Меркулов Г.А., 1951).

Для получения достоверных данных, касающихся морфо-фук::циональной дифференциации больших слюнных желез, мы проводили каряо- л цагомеграи эяителаодитов вставочных, исчерченных, междодыовых протоков и концевых отделав, а. также микрометрию проацинусов, ащшус'ов. внутридольковых и междольковых протоков. Данные микрометрии основных органо-тидическюс структур и кариометрии реток слюнных желез обрабатывали методом вариационной статистики (по Стьвдеяту) с использованием ЭВМ "Минск-32". При этом учитывались показатели не. только среднестатистической величины, данные минимальной и максимальной вариант, но и среднестатистические коэффициенты отклонений и степень достоверности изменений с учетом величины ошибок- Протоллазменно-ядерное и ядерно-дротоялазгенное отношение вхяисушя с помощью среднестатистических показателей площадей ядер и краток 1футлых, округло-овальных и многоотросча1!ых (неправильной формы) с использованием рекомендации Т.Ташэ (1930). Интенсивность гистохимических реакций определяли.с помощью,полуколичествен-ной визуальной оценки по Соколовскому В.В.

Для выявления действующих начал в разработанных иами красителях экстракты хроматографярсвали на хроматографкче-сксё бумаге й 16 в системе бунатол-уксусная кислота - вода (4:1:3). Хроматохраилы .проявляли.в хлористом алдаинии в этаноле и рассматривали в видимсм и ультрафиолетовом свете на приборе "Снекорд-М-40". Проводили тонкослойную хршатог-графию. на с: луфоле в присутствии стандарт оз. Для всех стандартов ;ф1ли. сняты ультрафиолетовые сяектрн.

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ .ОБСЩЕНИЕ

2.2.1. Развитие слюнных желез в пренатальном периоде онтогенеза

Материалы наших исследований позволили установить следующее:

- каждая из больших слюнных яелез закладывается 'самостоятельно из эктодермального эпителия и мезенхимы, при этом подчелюстные слюнные железы закладываются на 47-е сутки развития, околоушгые - на 50-е, подъязычные с одним протоком - на 51-е, а с многими протоками - на 53-и сутки раз-гития;

- просветы в проанинусах формируются в подчелюстной и околоушной слюнной яелезе на 53-и сутки развития, в подъязычной с одна- протоком - на 59-е, в подъязычной с многими протоками - на 60-е сутки;

- по данным цитологических к цито-топохимических исследований, со времени закладки каждая из желез секретирует. Наня данные подтверждают многие ученые, доказывающие ■наличие так называемого эмбрионального пищеварения (Давлетова Л.В., 1931, 1974; Арзавский И.А.,1967; Филонекко Л.С., 1966; Голенкава Б.В., 1990). Основу секрета околоушной слмнноЗ железы составляют основной и кислый белки и небольшое количество кислых гликозаминогликанов и протеогликанов, подчелюстная слюнная железа начинает секретироватъ с преимущественной выработкой гликопротеидов и кислых гликозаминогликанов, в т.ч. и судьфатированных на боне малой середин основных л кислых белков. Секрет подъязычной железы с многими протоками состоит из крайне малого содержания основных и кислых белков и к;ольх гликозашшогликанов, количество которцх вше. Секрет подъязычной слюнной железы с одним протокол соцерзк? вебольвое количество карбоксшшрован-ных и суль^агдровзцных гликозаминогликанов и гликопротеидов, основного к/.слого белка, а такте из протеогликанов;

- в ризЕлка^'лпхся сланных железах секретирует эпителий не только ''орллрукптася концевых отделов, но и развивавшихся здвэзшк протоков;

- Я22й цито- и кяриометрЕческке исследования свидетельству.-:?, что ках:дая слезная железа, развиваясь по законам

- генотипической детерминации, с качала закладки и развития отличается характерам дифференцпровки, а значит, и специфичностью секрета.

Исследованиям Е.ТИ.Герл овина (1963), П.А.Йльина (1964) , Е.А,Шубниковой, М.З.Чунаевой (1964, 1966), Л.И.Ильиной (1970), Н.Б.Голенковой (1990) доказывается, что ранние процессы закяадки всех слюнных желаз человека и плодов крупного рогатого скота происходя? однотипно, т.е. путем образования эпителиальных "почек" и последующего их разрастания в формирующейся ротовой полости в виде эпителиальных тяжей, которые являются зачатками выводных протоков к концевых отделов. Это подтверждается данными наших исследований. Сле-дорэтельнс, ранняя и однотипная закладка слшных желез у клакопяташЕх животных и человека представляет собой общую закономерность, связанную с закладкой и поетедуотшы развитием слшно-келезистых органов аппарата пищеварения.

Проведенные цито-топашшческие и цито-кариоиетрические исследования показали, что размеры формирующихся концевых отделов больших слюнных желез в ранний плодный период имеют статистически достоверные различая между, подъязычными слюнными железами в сравнении с околоушной и подчелюстной. Пр'* сопоставлении площадей проацияусов около^ишой и подчелюстной, а также подъязычной с одним протоком и подъязычной с многими протоками различия были недостоверны. Мы отмечаем внутриортчнную однородность в формировании концевых отделов в околоушной и подчелюстной железах, а также подъязычных. Однако при сравнении площадей формирушвхся концевых отделов околоушной и подчелюстной желез с подъязычными отмечаются признаки индивидуальности в развитии.

Кариометрические показатели свидетельствуют о тем, что ядра клеток концевых отделов околоушной и подчелюстной желез существенно не различается ни. по среднеарифметической величине, ни по признаку вариационных зфивых. Выявленные же достоверные различия в величине ядер эпителиоцктов фор-мирувиихся кошевых отделов, по нашему мнении, свидетельствуют о том, что начальные процессы закладки желез и дифференциация эпителиальных клеток начинаются J ранних периодов их структурно-функционального развития по законам ранней органоспепафической дифференциации я генотипической

1о

детерминации, что подтверждается та стохимическими показателями.

По данным наших морфологических, гистохимических, цито-топохимических и биометрических исследований у свиней к концу позднего плодного периода концевые отделы больших слюнных желез находятся на разных стадиях развития. На 90-е сутки эмбриогенеза в подчелюстной и подъязычных слюнных железах появляются первые серозные полулуния, а ацинусы подразделяются на слизистые, серсзные и смешанные. Это согласуется с данными исследований Е.А.Еубниковс-й и М.ЗЛунаевой (1965), И.Е.Кричевской (1972) и не совпадает с данными '/сьсо^р , ¿егзоп. (1959), (1965) ЖпШгг

I/ои£ Лилепане . . (1966), отрицаниях наличие функционирующих концевых отделов у крыс не только в эмбриональный период, но я в период новорожденностя.

В середине позднего плодного периода формируются вставочные протоки, а исчерченные становятся морфологически выявляемыми липа незадолго до рождения животного. Околоушная слюнная железа свиней в течение всего позднего плодного периода л ко времени, рождения выделяет серозно-слизистый секрет, а подчелюстная и подъязычные - преимущественно слизистый. В эпителии иеждольковнх выводных.протоков желез обнаруживаются отдельные бокаловидные клетки, участвующие в выработке слизистого секрета. С 90-х суток внутриутробного развития в железах становятся морфологически определяемыми нервные ганглии. В поздний плодный' период все большие слюнные железы активно функционируют, участвуя в процессах эм-бр"онального пищеварения.

Материалы'наших исследований показали, что в ранний плодный период процессы закладки желез-характеризуются рядом ойеих признаков, хотя закладывается и формируется каждая железа самостоятельно. Из эктоцермального эпителия образуются эпителиальные выросты, прснинаюяие в мезенхимную основу стенки носоротсвой полости. В дальнейшем они разрастаются в виде эпителиальных тяжей и почек, из которых Формируются выводные протоки и проацинуси, что согласуется.с данными Л.И.Ильиной (1970), Н.В.Голенковой (1990) и др. С ранних периодов все слюнные железы Активно функционируют - в них четко выделяется камбиальный клеточный компонент,, клет-

ки э состоянии структурно-функциональной дифференциации, а также высоко специализированные метки - наиболее функционально активные. Последние в дальнейшем отмирают, замечаясь новыми клеточными генерациями с рядом специфических черт, обусловленных возрастом животных.

Кроме того, наблюдалось, особенно на примере формирования ацинусов, что наиболее рано заложенные оказываются функционально активнее, другие находятся в состоянии или заклад- • ки, или -специализированной дифференцировки, но также функционально активны. Видимо, и в филогенезе их формирование и усложнение происходило по ряду обших закономерностей гистогенеза. Было установлено, что уже в раннем эмбриогенезе железы закладываются и:формируются по законам детерминации, асинхронна и гетерохронии, интеграции и возрастной морфо-функциональной адаптации.

В поздний плодный период, 1фоме перечисленных закономерностей, в закладке и формировании концевых отделов желез в наибольшей степени проявляются провизорность со стороны не только отдельно взятых клеточных элементов, но и целых ацинусов при сохранении долек, а также их группы в отдельных дольках, когда старые ацинусы замешаются новыми генерациями, но уже приобретающими ряд выраженных возрасти: : особенностей в строении и функции. Вторым важным моментом лри изучении развития слюнных желез является обнаруженные нами все более усиливающиеся процессы секреторной активности эпителия не только концевых отделов, но и внутридольковых выводных протоков, а также нараставшая васкуляризация желез, закладка и формирование в них большого количества нервных ганглиев, ускорение процессов дифференциации ткани с усложнением клеточного состава и возрастными изменениями клеточного вещества.

К концу эмбриогенеза в абсолютном большинстве ацинусов слюнных желез появляются клетки, по строению соответствующие высоксдифференцированныы клеткам в железах взрослых животных. Следовательно, железы ко времени рождения животного приобретают относительно высоки;, уровень дифференциации. Становление этого процесса происходило поэтапно, но в каждый период с усложнением структуры и функции желез.

2.2.2. Слюнные железы домашних свиней в достнатальном периоде онтогенеза

Анализируя цитометрические показатели концевых отделов околоушной, подчелюстной и подъязычной слюнных желез в первые дни постнатального онтогенеза п у месячных животных, мы установили наличие достоверных различий между всеми сравниваемыми величинами (Р < 0,001) за исключением размеров ацинусов подчелюстной и подъязычной железы с многими протоками, где различия были случайными в период новорожденности (? = 0,05) и вероятными в месячном возрасте (Р * 0,05). Сравнивая размеры концевых отделов во всех железах а возрасте 3 месяцев, :.:ы обнаружили статистически достоверные различия между всеми ацинусачи. Наши цитометрические данные ' свидетельствуют, что к 3 месяцам постнатального развития концевые отделы всех желез свиней приобретают выраженную органную специфичность.

Различия в средних арифметических показателях площадей исчерченных протоков, начиная со времени рождения и кончая 3 месяцами жизни животного, были достоверны (Р. * 0,001). Вставочные протоки в 3-месячном постнатальном онтогенезе имели в подъязычных железах различия, случайные, а в других железах достоверные, что свидетельствует о значительных изменениях в функциональной активности клеток вставочных и исчерчен ых выводных протоков.

Наш установлено на основе данных морфологических,гис-тохимичесюн и-цитометрических исследовании больших слшшх желез свиней, что к 3 месяцам постнатального развития -уровень структурно-функциональной дифференциация концевых отделов в окодоушой.и, подчелюстной слюнных железах остается ниже, чем в подъязычных железах, концезые отделы которых по. степени дифференцированности достигают показателей строения, взрослых жявотннх. К 3 месяцам зставочные протоки околоушной и подъязычной железы с одним протоком остаются недостаточно зрелыми в сравнении с дефинитивными, а в подчелюстной к подъязычной с многими протоками» наоборот, оформления!® по типу дефинитивних. Исчерченные протоки к 3 месяцам пост- ' натальяого развития э околоушной и подчелюстной слюнных желез из-за незавершенности специализации эпитедиоцитов оста-

ются не дифференцированными, тогда как в подъязычной железе с многими протоками и одним протокам к этому сроку по диф-ференцированности они окончательно оформлены и соответствуют дефинитивным. Эпителлоциты меадолькозых протоков околоушной, по.цчелюстной и подъязычных слюнных желез продолжают активно дифференцироваться, но дефшитивности в развитии еще не достигает.

■Секрет околоушной железы к 3 месяцам жизни животного содержат небольшое количество гликопротевдов, карбоксилиро-ванных и сульфатированных гликозаминогликанов и протеогли-канав, а такге большого количества основного л кислого белка, а в подчелюстной - с преимущественным содержанием гли-козаминогликансв, гликопротевдов и иротеогликанов.

Подъязычная слюнная железа с многими протоками к 3-му месяцу постнатального развития.выделяет секрет, содеряаяпй■ преимущественно гликопротеиды и протеотликаны, которых по тшлеству больше, чем в подчелюстной железе. В секрете подъязычной железы с одним протоком гликопротеидов, сулъфа-тированных и карбоксилированннх гликозаминогликанов и иротеогликанов меньше, чем в подъязычной с многими протоками я больше, чем в подчелюстной. Основного и кислого белка в секрете подъязычных слюнных желез содержится незначительное количество. *

■Клетки междольковой соединительной ткани представлены фибробластами, тканевыми базофилаш, оседлыми макрофагами, плазмоцитами. В меадольковой соединительной ткани всех слюнных желез имеются не только в большом количестве кровеносные .сосуды, но и большие пучки нервных еолокон, а также единичные нервные ганглии.

В паренхиме сланных желез поросят к концу рассматриваемого периода обнаруживаются "гигантские" лидоцаты.

Наши исследования показали, что у свиней к 3-му месяцу посткаталъного онтогенеза продолжается струкгурно-функцио-. нальная дифференщровка всех нами-исследованных желез по законам асинхрс 'да, гетерохронии и интеграции; углубляются расхождения признаков в.структуре и функции, продолжается специализация. По нашим данным к 3-месячному возрасту поде,"-язычные слюнные келезы свиней наиболее развиты. Однако структурно-функциональное развитие продолжается, особенно в

'околоушной и подчелюстной слюнных железах, которые достигают дефинитнвности к 7-месячному возрасту.

Данные наших исследований свидетельствуют о трех выявленных закономерностях:

1. Структурное и функциональное становление больших слюнных желез происходит по обэим законам развития, присудим для гсех млекопитающих.

2. Для-каждой из больших слюнных желез характерна ранняя функциональная специализация.

3. Слюнные железы как органные образования, в функциональном отношении нельзя рассматривать только по оценке концевых отделов,, т.к. з каждом случае это есть выражение Функции ыштелия не только ацинусов, но и системы выводных протоков.

2.2.3. Особенности морфологии и гистохимии слюнных желез домашних свиней и некоторых '-чидов диких всеядных, травоядных и плотоядных животных

В результате'.проведенных исследований нами установлено, что у домашней свиньи к периоду половозрелости все слюнные железы достигают дефинитивности, т.е. Их можно рассматривать как железы взрослых животных. '

У косули и пятнистого оленя околоушная слюнная железа - компактный орган красноватого цвета, вытянутый в дорсо-вентральном направлении навстречу подчелюстной слюнной железе. У травоядных животных подчелюстная железа округлой формы, по размерам меньше, чем околоушная и расположена в подчелюстном пространстве. Подъязычные слюнные железы лежат на дне ротовой полости и представлены двумя, видами: подъязычной железой с многими протоками и подъязычной желе г ой е одним протоком.

Норка и выдра относятся к семейству куньих. На Дальнем Востоке создан наиболее крупный очаг американской норки (Дежкия В.В., Маракав C.B., IS73; Богачев A.C., 1991). У них околоушная слюнная железа красно-бурого цвета и располагается нейтрально от наружного слухового прохода. Подчелюстная слшная железа у этих животных имеет красноватый

цвет, округлую форму. Подъязычные слшные железы плотоядных лежат на дне ротозой полости в подъязычной складке и разделяется на два вида: переднюю - многодротоковуго и ззднкю -однопротоковую.

У дикого кабана ■околоушная слюнная железа по анатомическому строению и топографии мало отличается от таковой домашней сваны». Она у них светло-серого цвета,.как правило, обильно окружена жировой тканью, располагается в пространстве между атлантом, наружным слуховым проходом и углом нижней челюсти. Подчелюстная слюнная железа четко очерчена, красноватого цвета, лежат в подчелюстном пространстве. Парные подъязычные (с многими протоками и с одним протоком) располагаются на дне ротовой полости, под языком.

Обращает внимание, что у пятнистого оленя и косули по сравнению с другими исследованными- животными соединительнотканные капсул." слюнных желез более коллаг,енизированы и со-дертат в своем составе эластические волокна.

Морфологическими, гистохимическими, био- и цятометри-ческими методами нами установлено, что у травоядных, всеядных и плотоядных животных околоушная слюнная железа -сложная, дольчато-разветвленная, альвеолярная, .

Концевые отделы околоушной слюнной железы изученных животных микроморфологически хотя и. однотипны, но ве.лчдяы их ади"усов, размеры протоплазмы д . ядер сероцитов, их различия по минимальной и максимальной вариантам имеют ряд видовых Специфических особенностей, обусловленных различиями в питании и средой обитания. .

Во внутридолъковой соединительной ткани и особенно в междольковой, имеются "гигантские" липоциты, которые нередко превышают размеры концевых отделов-околоушной слюнной железы. .

Такие же "гигантские" липоцаты в значительном количе^-стве находит Н.В.Голенкова (1989) в паренхиме слюнных желез крупного рогатого скота. У диких же представителей отряда травоядных и всзядных (косуля, пятнистый олень, дикий кабан) "гигантские" липоциты встречаются редко.

Эти и другие.особенности в построении слюнных желез докаляих и диких млекопитаюаих мы объясняем тем, что при доместикация у животных изменяется в значительной степени их экология. Голи у диких животных пищевой рацион состслт

из естественных кормсв, то животные в домашних условиях получают норма, приготовленные человеком.

К доместикационным особенностям слшных желез можно отнести плолади их концевых отделов, цитоплазмы гландулош-тов и их ядер. Более укрупненные ацинусы я плотное расположение я дер,возможно, отражают большую функциональную активность слюнных желез у диких животных, чем у домашних.

Впервые "гигантские" жировые клетки появляются в паренхиме больших слюнных яелез на 3-м месяце постнатальяого онтогенеза. Однажды появившись, они отмечаются на протяжении всего последушего тшвятия органа. Количество таких липо-цитов находится в прямой зависимости от возраста: чем старше животное, тем их больше. Зто поззоляет их рассматривать в качестве одной из основных.характеристик зозрастннх показателей органа. На электроннограммах сероцятов прослеживаются липлдные вакуоля, сливающиеся между собой и образующие крупные вакуоли с единым секреторным материала.!. 3 последующем такие крупновакуольные слияния как бы загружают всю цитоплазму, в силу чего ядро клетки смешается к периферий. .Данные наших исследований пока не позволяют судить о том, что ото: процессы лллоядизации или особо фуняциояярувияе структуры. -

У всех исследованных нами диких животных наблюдается развитая сеть кровеносных сосудов типа артериол, венул и капилляров как во внутридолвковой, так и в междольковой соединительной ткани. Особенно зто характерно для пятнистого оленя. Енутридольковое капиллярное кровоснабжение прослеживается по ходу; ацинусов, вставочных л исчерченных протоков. Еместе с тем у выдры з околоушной слюнной железе нами выявлены необычно широкие венозные сосуды, по диаметру иногда превышайте з 5-6 раз артериальные, с большим содержанием з ах просветах клеток крови, особенно лейкоцитов.

Э междольковой соединительной гканл у представителей разных отрялоз класса млекопятавзих по ходу нервных пучков отмечались нервные ганглии, но, как правило, немногочисленные. Прослойки междольковой соединительной ткани у диких илекопЕТ&догт по сравнению с домашними,, особенно у дикого кабана, тояызе, но более кодлагенизироваян. У зояапшкх свиней соедпнителъкоткэннне прослойки зирояйб, с наличием в них большого колачестаа •шдавоЗ ткани.

По данным дпто— картометрии, у домашней свиньи, начиная с поздне-плодного периода в составе концевых отделав околоушной слюнной железы имеется три группы клеток: клетки в состоянии роста и развития первых двух классов левого смещения, высокодифференцированные клетки слизисто-серлзной секреции правого смешения и клетки, определявшие в суммарной их оценке показатели мг-канной, и среднестатистической величины. Выявленную закономерность мы объясняем тем, что камбиальная часть клеток левой регистрации с учетом их графической оценки у взрослых животных оказывается как бы смешенной к показателям клеток эпителия вставочных протоков. Таким образом, эпигеляоцлты концевых отделов до наступления животным поло-возоелости показывает себя, по данным кариометрической и цитометрической оценки ацинусов, как клетки, с одной стороны, камбиальные, с другой - высокодифференцированные и функционирующие. В антенатальный период и в период половой зрелости камб :альная часть, эпителиоцитов, по метрическим показателя}.!, проявляет тенденцию к смешению во вставочные протоки.

Околоушная слюнная железа во время своего развития на примере слюнной железы домашних всеядных закладывается и формируется как железа смешанной секреции. В антенатальный период такая секреция сохраняется у диких кабанов и домашних свиней. У изученных животных других видав околоушная слюнная железа з ищется чисто серозной, что подтверждает у сельскохозяйственных животных П.А.Ильин, Л.И.Ильина (1971), Н.В.Голен-кова (1990), у человека - Ю.И.Афанасьев, Б.В.Алешин (1989) и яр. Однако эпителиоциты внутридольковых и межцольковых выводных протоков выделяет слизисто-серозный секрет, поэтому мы ее можем характеризовать как железу смешанной секреции.

Результаты проведенных исследований позволяют нам утверждать, что смешанный характер секреции околоушной слюнной железы обусловлен не только тем, что в формировании секрета участвует эпителий выводных протоков, ко и эпителиоциты наибольших по площади концевых отделов. Указанная закономерность прослеживается г-а математической оценке структурно-функциональных характеристик основных морфологических структур околоушной слюнкой железы у диких травоядных и иолуводных плодоядных. Таким- образом, при исследовании всех изученных представителей всеядных, травоядных и плотоядных вами зарегистри-

ровано, что околоушная слюнная железа не чисто серозная, а с элементами слизистой секреции. В нашей оценке секрет околоушной железы у всех изученных животных серозно-слизистый, при этом мукоицный компонент в составе секрета есть производное части мукопдазированяых клеток концевых отделов и мукоцитов эпителия выводных протоков.

Начиная с позднеплодного периода в составе концевых отделов околоушной и подчелюстной слюнных желез домапних свиней наш отмечаются единичные эндокриноциты с некоторым увеличением их количества в последующем развитии. Это согласуется с исследованиями Н.В.Голенковой (1990), изучавшей пре-г. постнатальное развитие больших слюнных желез крупного рогатого скота. В постнатальном онтогенезе у всех изученных взрослых млекопитающих эядокриноцпты нами отмечаются не только в составе ацкнусов, но я в эпителиальной выстялке исчерченных и междольковых протоков. Результаты.наших исследований согласуются с данными В.В.Яглова, Г.А.Ломоносовой (1981), В.В.Яглова (1983, 1989, 1995) о диффузной эндокринной системе (ДЭС), представленной комплексом одиночно расположенных редепторно-эндокринных клеток., -основная масса которых находится в эпителиальных тканях слизистых обог^чек органов пизеварительной, дыхательной, мочеполовой систем и кожи.

Сопоставление этих данных свидетельствуют о том, что большие слюнные железы j всех представителей изученных намг. млекопитающих не просто слюнножелезистие органы, но и эндо-1финные, функции которых требуют дальнейшего изучения. Полученные данные полностью совпадают с исследованиями ряда авторов, доказывающих эндокринную функцию слюнных желез (Шубникова 5.А., Суворова Т'.Н., Волкова Е.Ф., Петров К.А.', 1980 2 др.).

Методами классической гистологии, современной гястохи- • мни, цнто-топохимли, электронной микроскопии околоушной, подчелюстной, погтяязычной .однопротоковой и кногопротоксг -з?. желез C\'-'e:f, дикого кабана, пятнистого олэяя, норки и выдры выявлен ряд обяих и видовых особенностей в их структуре л функции.

По общешкрон1!пкроморфслогическог.-у строению и типу секреции все исследуемые железы'в основе идентичны, т.е. слот-нкг, трубчато-алъвеоляряые или альвеолярные макро- мякро?,»е-

22 I

рокриновой- секреция. В выработке слизистого и серозного секрета участвуют не только серозно-мукоцитарные эпителиальные комплексы концевых отделав желез, но и эпителий системы выводных протоков, д том числе вставотных и исчерченных. В составе эпителия концевых отделов выводных протоков имеется эндокриноцптарное представительство. Эндокринные клетки, как правило; отличаются от других крупными размерами, базальным прилежанием, центрально расположенными эухроматичными ядрами.

Основные различия в структуре и функции желез наиболее четко выявляются на морфологическом уровне - методами цито-метрии, а ка функциональном - методами гистохимии, и цитото-похимии. Так, у всеядных (у домашней свиньи и дикого касана) околоушная слюнная железа по характеру секреции клеток аци-н"*)аз слизисто-серсзпая.

Показатели ультраструктуры и цито- топсхимии основных биологически активных веаеств свидетельствуют о том, что эпителий исчерченных протоков, возмогло, обладает всасывающей функцией, что согласуется с данными Е.А.Шубниковой, М.З. Чу-наевой (1965), С.Д.Валова (1986) и др.

С усилением мукоидизации желез в последовательности околоушная, подчелюстная и подъязычные слюнные железы отмечается увеличение в мевдольковой и внутридольксвой соединительной ткаки лейкоцитов и макрофагов, при этом часть лимфоцитов мигрирует через эпителий в просветы концевых отделов и выводных протоке®, исключая вставочные. Это было замечено в свое время П.А.Ильиным (1968). Однако функциональное значение этих процессов до сах пор остается неизученным. ?."ы допускаем, что у всеядны: это, возможно,.показатели формирования дизо-цимных свойств слюны за счет лимйоцитарного компонента. Мигрирующий лимфоцит своим присутствием в эпителии может изменять функцию последнего.____:______________

По результатам нашего исследования вставочные выводные протоки Нормируются в середине позднего плодного периода, но уже к первым' трем месяцам постнатального онтогенеза у поросят в подчелюстной слюнной железе и подъязычной с многими протоками они сформированы по це&швтявнсиу типу.' По данным карио- г шгсометрий, эпитедиоцаты вставочных протоков только к 7-чесячноку возрасту свиней з околоушо^ сл-сн-яей же.'езе и з подъязычной с окнам протеком достигнут свсо-

го максимального развития. Показатель ЯПО - эпителиоцитов вставочпых протоков во всех доследованных нами железах наибольший у новорожденных поросят. Вместе с тем вызывает интерес тот факт, что величина ЯПО эпителиоцитов этих протоков яа протяжении своего развития в пренатальнсм и пост-натальном онтогенезе имеет высокие среднестатистические показатели, что особенно отличает эти клетки от других,-формирующих эпителий концевых отделов и протоковой системы.

Известно, что ядерно-плазменное отношение уменьшается по мере клеточной дифференциации (Клишов A.A., 1971; Щелкунов С.Г., 1977 и др.). Однако этот вид эпителия сохраняет свои морфологические характеристики по ЯПО не только з двухлетием возрасте у домашних свиней, но и у представителей диких млекопитающих более зрелого возраста (8-12 лот). Следовательно, по нашему мнению, этот морфологический отличительный признак является определявши при характеристике этого вида эпителия. Высокое ЯПО, как правили, тлеют каяо-дифТеренцироЕанные клетки, что прослеживается на протяжения пренатального онтогенеза на примере гландулоцитов и эпителиоцитов развивающихся внутрадольковн* знводных протоказ. Таким образом, эпнтелаоциты вставочных протоков облг-даг камбиальными свойствами на протяжении всего развития организма. В болышрс слюнных железах помимо внутриклеточно;. регенерации существуют источники другой формы регенерации -клеточной, т.е. за счет эпителиоцитов вставочных протоков.

Вставочные выводные протоки у всех изученных нами млекопитающих построены однотипно: эпителий их однослойный однорядный кубический, с двумя видами эпителиальных клеток, ядра одних - эухромные, у других - гяперхромные.

Исчерченные протоки слюнных желез у всех животных имеют многослойный многоряднцй эпителий, в составе которого у пятнистого оленя, дикого кабана и домашней свиньи имеются эндокриноциты. Местами эпителий име^т признаки деструктав-ных изменений, эггителяоидные разрастания чаяе в околоуглоЯ слюкно:!г--~'елезе. Особенно таким изменении» подвержены эта железы у домашней свиньи.

"Б слюнных телегах размеры ис^рченяих протоков находятся в пропорциональной зависимости от величины кенпеных отделов. Так, в околоушных слюнных железах, кмегаих самке мятые концевые отделы, находятся и самые малые ясчерчешша

24 - 1_

протоки. Такая зависимость у разных млекопитающих прослеживается и по всем другим железам как органотидическая закономерность.

При электронномикроскопическш изучении эпителиоцитов исчерченных протоков, помимо митохондрий и секреторных гранул, имеются на апикальной поверхности ультрамикроворсанки, формирующие щеточную каемку. Эпителий исчерченных протокоз покрыт гликокалекссм. .

Главные выводные протоки устроены однотипно. Однако имеются видовые отличия. Так, базальный слог'- эпителия слизистой оболочки у свиней более мелкий, чем у других исследованных животных. Клетка Кульчицкого более многочисленны и плотно расположены у домашних свиней. У пятнистых оленей эн-докриноцитаряое представительство в количественном отношении выражено лучше, чем у домашних свиней. В слизистой оболочке протоков у всех животных имеются небольшие подэпителиальные фолликулы. В самом эпителии /особенно у домашних свиней) наблюдаются инфильтраты лейкоцитов. Возможно, эти органы, обладая эндокринной функцией и взаимодействуя с лимфоцитами, могут считаться органами с экскреторной функцией, обладавшими Еммунокомпетентностыо.

В цитоплазме клеток концевых отделов околоушной слюнной железы домашних свиней электронномикроскопически выявлены три вида секреторных вакуолей; электронноплотные, электрон-ноггрозрачные и зернистые с наличием в последних липидов, что согласуется с данными Жыу -4. , Уа^ег

(197В).

Наиболее подробно электронномикросяопические исследования лодчелюстных слюнных желез свиней были проведены Е.А. Шубниковой (1980), показавшей различия в организации слизп-стных, серозно-мукозных клеток, а также эпителиоцитов вставочных и исчерченных выводных протоков. Наши исследования подтверждают наличие между гландулоцитами десмосом, плотных контактов и соединений типа "замка".

При "сверхтонком" изучении ядер серозных клеток установлено, что они имеют неправильные очертания и иногда образуют лопасти. Это, на наш взгляд, создает большую рабочую поверхность кариоплазмы, с цитоплазмой, что необходимо для функциональной активизации клеток. Кроме того, на неко-

торых электронгограммах околоушной, подчелюстной и подъязычных слюнных желез нами зарегистрировано, что наружная ядерная мембрана сероцитов и меток серозных полулуний имеет гранулярное строение. Гранулы рибосом последовательно одна за другой присоединяются к наружной кариолемме. Кроме этого, хорошо заметны переходы гранулярной эндоплазматической сети в элементы наружной оболочки ядра. Исходя из этого, правомерно говорить о ядерной оболочке как.специализированной части обшей мембранной системы клетки, обестсчптятаей связь мембран ядра с мембранами цитоплазмы, что доказывается работами А.А.Заварзина, А.Д.Ха;рзовой (1982).

Электронномизф'оскопически" исследованп? серозных полулуний подъязычных слюнных желез домашних свиней выявили пя-тердпгитивныа связи между сероцитами без выраженного наличия десмосом. Наиболее характерным для подъязычной слюнной железы с одним протоком является наличие полиморфной фермы нитевидных цитоплазматических выростов в апикальных участках слизистых клеток. Выявляясь в большом количестве, такие выросты как бя перекрывают просветы ацпнусов. Серозные клетки, в отличие от мукосных, таких образований не имеют. Нами установлено, что тонофпламенты в в.иде лучков распрос ранявгся в просветы вставочных выводных протоков, что согласуется с данными Е.А.Щубниковой (193С).

В цитоплазме подчрлюстной и подъязычных слюнных желез при "субмикроскопическом исследовании мукоциты в своей цитоплазме обнаруживают секреторные гранулы разной электронной, плотности, а-гиалоплазмс - незначительное число клеточных органелл обиего характера, причем рибосомы и гранулярный зндоплазматический ретикулум у них выражены слабо.

Базальные мембраны ояцевых секреторных отделов и выводных протоков аргирофильны, содержат большое количество гликопротеидов и следы сульфатироваяных и карбоксилирован-ных гликозаминогликачов, что согласуется с данными ученых 1 (Хэм А., Кормак Д., 1982; Александровская О.В. и др., 1987; Техзер»ф.Т., 1989 и др.). У всех исследованных нами млекопитающих по гистохимическим и олектрокномякроскогшческим показателям базарные мембраны однотипны. Существует прямая зависимость между толщиной базальнсй мембраны я величиной расположенного.на ней эпителия. Это объясняется функцией

26 «

последней - поставлять питательные вещества в эпителиальный пласт. .

В эмбриональный период, когда происходит "становление эпителия, базальные мембраны четко просматриваются, т.к. более аргирофильны в эмбриогенезе, чем в постзмбриональном развитии, и ПИК- положительны. В этот период толщина базаль-ных мембран значительнее, чем у эпителиальных структур слюнных желез у животных в постнатальном онтогенезе.

2,2.4. Экспериментальные данные по выявлениюморфо— функционального критерия слюнных желез

Из-за отсутствия в литературе сведений об изменениях м-кроструктуры слюнной желез под действием атропина и пилокарпина мы сочли,необходимым изучить эти процессы на околоушной, подчелюстной и подъязычных слюнных железах. Через 15 минут после введения пилокарпина в микроструктуре всех слюнных желез происходят сильные изменения: достоверно уменьшаются площади концевых отделов и выводных протоков. Мы объясняем это чрезвычайным, напряжением органов, которые вызваны стимуляцией секреции. -

Экспериментальные работы За^йШе , ¿еАхег&г (1947), Кгапёз (1947, 1951, 1954); (1948); васЛталл (1950);

Щш (1951); ЖгЫ'г X (1952) ; (1952) и др. указы-

вают на то, что изменение объема ядер является важнейшим индикатором клеточных функций: гиперфункция сопровождается увеличением, а гипоактивяость - уменьшением объема ядер. Кариометричессие исследования показали, что размеры ядер серозных клеток через 15 минут после инъекции уменьшаются, а мукоцитов, наоборот, увеличиваются по сравнению с ядрами нестимулированныт желез. Мы предполагаем, что видимое увеличение секрета осуществляется мукоцатами. Это подтверждается и гистохимическими исследованиями, выявившими в цитоплазме мукоцитов и просветах протоков карбоксилированные и сулъфатированные гликозашшогликаны, гликопротеиды и ослабленную выработку основных и кислых белков сероцитов и эпите-ляоцита&ш выводных протоков, йлесте с тем в железах не обнаружено нами даже следов гликогена. Это согласуется.с выводами И.Л."Терновой (1971), изучавшей влияние пилокарпина на

подчелюстную слюнную железу кошки, что объясняется усиленным потреблением энергия во время активной саливации.

Наши данные позволяют заключить, что через 15 минут после введения пилокарпина происходят резкие изменения плодадеЯ цитоплазмы и ядер серозных полулуний. Через I сутки после инъекции пилокарпина в концевых отделах и выводных протоках слюнных желез достоверных различий по сравнению с нормой не обнаружено.

Наши исследования показали, что под влиянием пилокарпина усиливается кровоснабжение желез, что мы считаем одной из причин, способствующей "гс слюнообразовательной и слюноотдротельной функции.

Общеизвестно, что атропин или уменьшает слюноотделение, или прекращает его. По данным морфологических и гистохимических исследований, через 15 минут после инъекции атропина достоверно уменьшаются размеры концевых отделоз и выводных протоков и снижается содержание гликозаминоглдка-нов, гликопротеидов, основных и кислых белков как в. аца- " нарных клетках, так и в эпителиоцятах выводных протоков околоушной, подчелюстной я подъязычной однопротоковой желез. Подъязычная слюнная железа с многими протоками ; лбо-лее устойчива к препарату. Это согласуется с выводами А.Г. Бабичева, Н.С.Нерстнева, И.И.Кудаско (1930). Наши карио-метрические исследования подтверждают резкое снижение, но не прекращение функциональной активности слюнных желез, кроме подъязычной с многими, протоками.

В нашх исследования-' на антропинизированных слюнных железах подтверждается полная зависимость между размерами цитоплазмы я ядра, т.е. с уменьшением плозадей ядер уменьшаются и плшади протоплазмы сероцитов и мукоцитов. В опыте на пилокарпинизированных железах также отмечается зависимость в мукозных клетках. Размеры их цитоплазмы под действием стимулирующих и блокирующих секрецию препаратов изменяются в больней степени, чем размеры ядер. Иными словами в отйег на объемные изменения ядер цитоплазма клеток реагирует в более резкой форме, значительно сокраяая свой объем.

В налей экспериментальной работе на слшных железах свиней показано, что НПО сероцитов з мукоцитса после

¿о <1

инъекции атропина, котда функция желез ослаблена, достоверно вше аормы. При инъекциях'пилокарпина, когда слюноотделительная и слшообразовательная функции наиболее активны, мы также констатируем высокие показатели НПО мукозных и серозных клеток. Иными словами, в нашей экспериментальной работе ЯПО клеток после инъекции атропина и пилокарпина равнозначны, они достоверно выше нормы и через сутки после введения препаратов практически достигают кормы. Таким образом, ЯПО не всегда является показателем функциональной акглзности клеток.

2.2.5. Красители растительного происхождения'и их использование в гистологических исследованиях

Кроме опытов с атропином и пилокарпином мы провели также, экспериментальную работу, связанную с получением гистологических красителей из растительного сырья.

Научно-технический прогресс возможен лишь при рациональном отношении к богатейшим природным ресурсам, поэтому применение растительного сырья Дальнего Востока, в частности Приморского края, которое не находит широкого применения вполне оправдано для приготовления природных гистологических Бграсигелей. Интерес к флавоноидам, составляющим основу биологической активности, многих растений, определили направление исследований как поиск наиболее перспективных видов для заготовки растительного сырья. С этой целью в природных местообитаниях юга Приморского края изучаюсь многие виды растений, среди которых перспективными оказались черемуха Маака из семейства розоцветных, воронец заостренный из семейства лютиковых, марена сердцелистная из семейства маренных, луносемянник даурский из семейства дуносемянниковых.

Изучая хилшческое строение водных и спиртовых экстрактов из растительного сырья, мы обнаружили в их составе О-гетерошклические пигменты: флавоноиды и антроханоны.

3 настоящей работе нам представилось необходимым изучить флавояоидный состав экстракта из покровных чешуй луковицу лука. Л.М.Зинченко (1959) указывает на присутствие

в экстракте дс 2% гликозядов, агликонами которых является кверцетин. Наш данные согласуются со сказанным, но мы дополняем эти сведения тем, что в экстракте из покпозных чешуй луковицы лука еие содержится незначительное количество кемпферола и миринотияа. Краситель из покровный чешуй луковицы лука, приготовленный по нашему способу, при окраске срезов до нашей методике может быть широко использован для создания качественных гистологических препаратов.

Бо данным тонкослойной хроматографии, в экстракте из плодов черемухи Маакз и воронца заостренного содержится пигмент циачидин, относящийся к ангоцианам. В качестве растительного сырья плоды этих растений могут быть использованы для получения основного гистологического красителя с целью выявления ядерных структур к хромосом как на нефиксированном материале, так и после фиксации гистоматериала в жидкостях Максимова и Буэна. Кроме того, экстракты из згих растений з ::#олоЯ среде окрашиваются в бордовый (красный) цвет, в нейтральной - в синий (голубой), в шелочной - в зеленый. Следовательно, эти рабочие растворы могут быть использованы для изготовления простейших Индикаторов, что подтверждается исследованиями А.Р.Вет-'шдаша (1951) ща. работе с антоцианами.

По данным Г.Ериттона (1986), в измельченных корнях марены. красильной содер—"гея пигмент атрахинояового типа -ализарин, который служит основой стабильных красных красок. На;.® подобный пигмент нзйаен в небольшом количестве- в плодах марены сердпелистнс . Краситель, приготовлении:; по нашей технологии из этого растения, может быть исполгзовян б качестве основного при проведении гистологических исследований.

При помогш тонкослойной хроматографии в' экстракте из плодов луносемяннпяа даурского выделены глпкозклы кзиряе-тина. Краситель, приготовленный ляоей прописи из плояоп-луносемянникз, ко^жт найти себе достойное место в гистоло- . гичесАол технике в качестве основного; т.к. окрашенные им препараты отвечай? все.".! требозанляи постоянного гистологического препарата при изучении ядерных структур тавотных г. растительных клеток.

Растительное сырье как основа для яриготозлеяшг красителей используется очень широко в пиленой премиаленяостк.

30

- I,

3 гистологической же технике, несмотря на положительный результат, отечественные красители применяются недостаточно. Нами предпринята попытка расширить базу растительного происхождения по производству красителей для гистологических целей. Водные и бпирговые. экстракты из плодов изученных нами растений могут быть использованы для применения основных гистологических красителей, которые являются альтернативны-

ми гематоксилину.

ВЫВОДЫ

1. У домашних свиней околоушная, подчелюстная и подъязычные слюнные железы в раннем эмбриогенезе закладываются каждая самостоятельно з виде эаятелиод;езггп:пл:ных "почек" слизистой оболочки первичной ротовой полости: подчелюстная - на 47-е сутки, околоушная - на 50-е, подъязычная с одним протоком - на 52-е, с многими протоками - на 53-и сутки внутриутробного развития. К концу 2-го месяца во всех слюнных железах появляются первичные концевые отделы и продолжают формироваться системы выводных протоков. Все больше слюнные железы к концу раннего плодного периода функционируют по смешанному типу. •

2. С 3-го месяца внутриутробного развития вплоть до рождения животного процесс ди;|ференцировки структурных элементов слюнных желез проходит интенсивно. Однако, формирование концевых отделе® и внутридольковых и междолькозых протоков к периоду новорожденности не завершается.

3. С в зрастом плодов все слюнные железы активно функционируют и к периоду новорожденное^! околоушная слюнная железа се^етирует преимущественно по белковому типу, остальные - по смеааняому. Во всех случаях в составе цитоплазмы специализированных гландулоцитов я в секрете протоков про-цолжают преобладать полясахарнднце соединения типа глхко-протеядов, карбоксиллрованных и сульфатярозакных глпкоза-мшюглаканов над протеогликанами, основными к кислыми белкам::. По цито- к кар'лоаетрическим показателям сероцитоз к мукоцитов концевых отделе», а также эпителиоцатов в системе внутридольковнх и меящольковых вывоцннх протоков, ^(бЯНИ-тивнооть в структурно-функциональном развитии подъязычны}:

слюнных желез у .домашних свиней отмечается на 3-м месяце постнатального онтогенеза, а 'околоушной и подчелюстной в 7-месячном возрасте.

4. Околоушная слшная железа свиней закладывается и формируется как железа смешанной-секрэции. В постнатальном . периоде онтогенеза такая секреция сохраняется у диких кабанов и у домашних свиней. У оленя и косули, норки и выдры

эта железа сэкретирует так чисто серозная. Так как в формировании секрета участвует не только серозный эпителий концевых отделов, но и эпителий исчерченных протоков (особенно мукондизированный междолвковых а главных выводных), около-ушнуэ сланную железу у травоядных и плотоядных животно, следует считать железой смешанной секреции.

5. Подчелэстная слшная железа у всех исследованных нами животных - сложная трубчато-альвеолярная. В формировании секрета у изученных наш представителей всеядных, гразеяд-янх и плотоядных участвуют гландулоцигы ацииусов-я_ эпителий выводной протоковой системы. У домашних и диких млекопитающих эти железы - смешанной секреции с некоторыми видовами особенностями содержания в их секрете белксво-углез "щых компонентов.

6. Подъязычные слюнные железы - сложные трубчато-алызео-лярнце разветвленные, г по-гистохимическому составу секретч

у всеядных — белково-слизистые, у плотоядных - преимущественно слизистые и у 'Травоядных подъязычная с многими протоками - слизистой секреции, а с одним протоком - белково-сли-застой.

7. Вставочные, внводпке протоки в железах у домашних свиней обнаруживаются на 3-м месяце внутриутробного развития. В первые три месяца постнатального онтогенеза в подчелюстной железе и. в додъязычглй с-многими протоками они по микромор-^ фологии проявляют себя как дефинитивные, а в околоушной железе и подъязычьой с одним протоком - это отмечается только

к 7 месяцам."По цито- и кариометрическл-л. показателям эпнте-лисциты вставочных выводных проз-оков, как и камбиальные клетки, имеют высокие показатели ЩО, свлдетельствугаие о их малодифференцированностд, а также о способности к дифференциации в сероцитн и мукоциты в яэнцевш отделах д в эпителиоциты - в исчерненных протоках. .

8. По данным электронной микроскопии больших слюнные ь. лез свиней, в цитоплазме сероцитов имеются секреторные гранулы разной величины и электронной плотности, что связано с процессами выработки и накопления в секрете различных по гистохимическому составу биологических .компонентов. Ядра сероцитов гидерхромны с выраженными в их кариоплазме ядрышками. В цитоплазме много рибосом а полисом, хорошо выражен гранулярный.эндоплаздатический ретикулум, пластинчатый комплекс уплотнен, митохондрии немногочисленны. В апикальной цитоплазме - макро- к микровакуоли. Межклеточные пространства сужены, у сероцитов наружная мембрана кариолемыы гранулярного строения и- выраженными ее контактами с гранулярным эндоплазма тяческим ретикулумом.

9. По данным э.-эктронномикроскодических исследований мукуцитов в ацинусах подчелюстной и подъязычных слюнннх желез свиней, секреторные вакуоли цитоплазмы крупные, с выраженными в них электронноплотными оболочками. Содержимое вакуолей в мукоцитах одного ацинуса разнохарактерное. В слизистых клетках подъязычных слюнных желез вакуолизация гиа-лоплазмы небольшая, в мукоцитах подчелюстной - она значительно меньше. В апикальной части цитоплазмы у цитолеммы имеются различной величины вакуоли, свидетельствующие об меро-криновоы типе секреции мукоцитов. Из органелл наиболее развиты агранулярный ретикулум и пластинчатый комплекс. Ядра мукоцитов базадьного прилежания, гиперхромны с невыраженными ядрышками.

10. У домашних свиней в 3-месячном возрасте во всех слюнных желегах появляются необычайно крупные гилерсудано-фкльные липоцаты, в размерах нередко превышающих величину ацинусов. В их цитоплазме белков и углеводистых соединений крайне мало. Ядра таких липоцитов крупные, эухромные, .без-ядршковые, округло-овальные, с невыраженным"' базальным прилежанием. Размеры и количество их у домашних свиней становятся максимальными к двухлетнему возрасту. У псловоз-"релого дикого кабана, пятнистого оленя, косули, норки и выдры в сравнении с домашними свиньями во всех слюнных железах таких, липоцитсв значительно меньше, при этом в паренхиме околоушной слюнной железы количество их у всех животных больше, чем в других железах. Каких-либо особенностей

з микроморфологии и цитотолохийяи липоцитов в сравнительно-видовом аспекте не обнаружено.

11. Пилокарпин (1#-ный раствор) и атропин (0,1£-яый раствор) в дозах 0,05 г/кг массы животного через 15 минут после инъекции каждого животного в отдельности вызывают достоверное уменьшение размеров концевых отделов и выводных протоков за исключением подъязычной слюнной железы с многими протоками, устойчивой к действию атропина. При пвлокаряпно-вой инъекции на фоне усиленного кровенаполнения всех видов кровеносных сосудоз вг-личина ядер мукоцитов достоверно выше нормы, а яри атропиновых инъекциях при резком уменьшении просветов кровеносных сосудов - ниже. Ядерно-плазменное отношение мукоцитов при инъекциях атропина значительно яляе,

при введении пилокарпина, но каждых из этих показателей достоверно вше нормы, поэтому величина ЯПО не всегда ггвлп-ется показателем функциональной активности клеток больших слюнных желез.

12. Через сутки после инъекции атропина я пилокарпина достоверных различий в микроморфологии околоушной, подчелюстной г. подъязычных слюнных желез у свиней в сравнена с нормой не обнаружено. Гистохимическими методами установлено, что железы спустя сутки восстанавливают свои функции по обеспечении'качественного состава секрета, кроме сульфатир.^-занных гликозаминогликанов.в аятропинизировачной подчелюстной железе.

13:. Для получения основных гистологических красителей осуществлен поиск флавоноидосодержааих растений юга Приморского края, среди которых перспективными оказались лскрсйные чешуи луковицы лука, плоди черемухи Маана, воронца заостренного, марэны сердцелистной, "амурского гогояа", или луносе-мянника даурского. Из растительного сырья готовились водой спирторастворимые экстракты, которые служили основа! тля ладученг^т гистологических красителей. Нами разработаны методические рекомендации по использованию ..овых красителей для •приго-овленвя посгоянншс гистопреш».ратоэ. Такие красители, заяшзеннкё авторскими свидетельствами на изобретения, можно использовать в учебном процессе я научно-исследовательской работы.

ПЕШЯЧЕСКИЕ ПЕЕЖОШИЯ

Результаты собственных исследований мы рекомендуем : дли использования;. j

- при написании: соответствующих разделав и справочных руководств до сравнительной эмбриологии и гистохимии сельскохозяйственных животных;

- в учебном процессе при чтении лекций и проведения лаборато^но-практяческих занятий для рассмотрения вопросов по частной эмбриологии и общей гистологии на биологических, ветеринарных я зоотехнических факультетах высших учебных заведений; -

- в лабораториях НШ, занимающихся разработкой теории органогенеза и выяснением возрастных, видовых и породных структурно-функциональных особенностей органов шгшзварите-льяой система сельскохозяйственных и диких -животных;

- на ла борат оря о-практиче скюг занятиях по цитологии, связанных с техникой приготовления постоянных гистологических препаратов, гастологип и генетике с целью выявления ядерных структур и хромосом с использованием основных гас-тшшгнчесних красителей, приготовленных из растительного сырья Приюрсвого врая и загашенных авторскими свидетельствами на язовретення (5).

Полученные сведения о ".озрастккх особенностях секреторной функции башнях слитных желез у плодов могут быть использованы при изучении процессов, способствующих становлению згбра анального пищеварения в связи со спецификой взаимосвязи плода с штеринсвим органвзш».

ШЙССК РАНЯ» СГОШЙКШШЗЫХ ПО ШЕ деСЕРВЩИ :

I- A.c. 3 I4I333I СССР» С 09 в 61/00..Способ получения 1фасателя из растительного сырья для гистологических исследований /hZcaa? Н.Б., Забара Г.В. Опубл. 1988.

2. A.c. Л 1597376 СССР, С 09 в 61/00. Способ получения красителя аз ратительного сырья Д5омот Н.В., Лапшин Л.В., Мешав H.H. Опубл. 19Э0. * • .

3. A.c. 'Л £688163 СССР, 0 .09 в 61/00. Способ окраски политенных хромосом насекомых'/Момот Н.В., Лапшин Л.В., Меагсв H.H. Опубл. 1991.

4. A.c. № I78I259 СССР, С 09 в 61/00. Способ получения красителя для гистологических целей (Момот Н.З., Лапшин Л.В. ■Опубл. 1992. ■

5. Момот Н.В. Развитие слюнных желез свиней в ранний плодный период //Макро-микроморфология сельскохозяйственных животных .и пушных зверей. - Омск: ОмСХИ, 1983. - С. 45-53.

6. Момот H.B..,. LibüH П.А. Морфология и гистохимия околоушн й и подчелюстной слюнных желез свиней в поздний плодный период //Макро- и микроморфология сельскохозяйственных животных и пушных зверей. - Омск, 1983. - С. 37-44.

7. Момот Н.В., Голенкова Н.В. Гястохямячег.кие особенности околоушных желез новорожденных поросят //Функция органов 1 метаболизм у сельскохозяйственных животных и стад в различных условиях внешней среды. - Омск. 1984. - С. 8-10.

• . 8.Момот Н.В. Функциональные особенности подчелюстной слюнной железы свиней //Функция органов и кетаболиа? у сельскохозяйственных животных и птиц в различных условиях внешней среды. - Сыск, 1984. - С. 10-13.

,9. Момот Н.В. Монофункциональное'развитие больших слюнных желез поросят в первые три месяца жизни //Научно-технический бюллетень /СО ВАСЖНИЛ. - Новосибирск, 1984. -Вып. 28. - С.'22-27. .

Ю. Момот Н.В., Ильин H.A. . Морфология и гистохимия околоушной слюнной железы свиней //Макро- и микроморфология сельскохозяйственных животных, пушных зверей и птиц. - Омск, ОмСХИ, 1984. - С. 63-67.

II. Иомот Н.В. !'орфология и гистохимия подъязычных, короткопротоково^ z длкннопротоковой слюнных желез сзш: й // "акро- г. микроморфология сельскохозяйственных животных, пушных зверей и птиц. - Омск: ОмСЯ', Т984. - С. 67-72.

\г. Момот Н.В. Морфология надъязычных слюнных желез свиней//Ветеринария. - 1935. - Л I. - С. 67.

3S -

о ' _ «• •

13. Момот H.B. . Морфблогячеекая я гистохимическая характеристика нижнечелюстной слюнной железы под действием. атропина и пилокарпина //Макро- микроморфология и гистохимия сельскохозяйственных животных в сравнительно-видовом и возрастном аспектах. - Омск: ОмСХИ, 1987. - С. 37-41. .

14. Момот Н.В., Николаева C.B. Окраска гистологических срезов красителем растительного происхождения. Рац. предл.

№ I5S-54,,'Уссурийск: ПСКА, 1988.

15. Момот*Н.В., Лапшин Я.Б. Способ получения красителя из растительного сырья. 1989. - с. (Информ. листок й 52-89 / Приморский межотраслевой территориальный центр научно-техн. информации а пропаганды).

16. Момот Н.В., Лапшин Л.В., Мешков H.H. Способ получения красителя из растительного сырья. - Владивосток, 1989. -3 л. (Кяформ. листок № 283-89) /Приморский межотраслевой тер-рит. центр научно-техн. информации и пропаганды).

17. Момот Н.В. Способ выявления хромосом в животных клетках на лаборэторно-практических занятиях до биологическим дисциплинам. Рац. предл.'№ 253-151. Уссурийск: ПСХА, 1990.

18. Момот Н.В. Способ получения красителя из черемухи Маака и его использование для-гистологических целей. Рац. преда. Л 252-150. Уссурийск: ПСХА, 1990. •

19. Момот Н.В., Ильин П.А. Особенности микроструктуры збнеровской железы косули //Тезисы /Докл. региональной научно-техн. конф. молодых ученых. - Красноярск, 1991. - С. 29.

20. Момот Н.В., Кабанова Л.И., Ильин П.А. Морфологическая характериг -?ика околоушной слюнной железы дикого кабана // Тезисы докл. региональной научно-техн. конф. молодых ученых. -Красноярск, 1991. - С. 33.

21. Момот H.Ê., Лапшин Л.В., Мешков H.H. Способ окраски политеняых хромосом насекомых. - Владивосток, 1992. - 2 с. йкформ. листок if 79-92 /Приморский ЦНТИ.

22. Момот К.В. Морфология и гистохимия подъязычной слюнной железы с многими протоками в поздний плодный период развития свиней //'Материалы Всесоюз. науч. конф. морфологов, посвяд. IOC-летаю со дня рождения прсф. А.Е.Щймова /Омский ин-т вст-эринарной медицины. - Омск, Х9Э2 « 0 » 88-91.

23. ГЛоиот Л.В. Морфологическая характеристика околоутлой слюнной железы норки /Д&териалы республ. науч. копф. вег;зринарных морфологов, посаяз. 100-летию заслуж. деят. науки FCiCP проф. А.И.Акаевсхого /Омский ин-т ветеринарной медицины. - Омск, 1993. - С. 63-64.

24. ''окот Н.В., Лапшин Л.В. Сравнительная морфология подчелюстной железы дикого кабана и домашней свиньи /Аате-рвалн республ. науч. конф. ветеринарных морфологов, посвяд. 100-летию заслуж. деят. на;,7-я проф. А.И.Акаевского /Омский ин-т ветеринарной мэяишаы. - Омск, 1ЭЗЗ. - С. 64-65.

25. МомотН.В., Ильин П.А. Структура >-функш:ияэльные особенности слюнных желез домашних и диких'животных класса млекопитающих //Материалы 2-й Бсерос. конф.: Влияние антро-

огенных факторов на структурные преобразования органов, тканей, клеток человека и животных. Ч. 4. - '"чрзтйЬУ 1553. -С. 49.

2Б. Мода» H.B., Лапнйя Z.B. Методика выявления ядерных структур гистокрасятелем из воронца заостренного // Научн. тр. /Уссурийск, пед. ин-т. "Арсеньевские чтегчя". -7сурийск, 1993. - Ч. I. - С. 135-137.

27. Лапшин Л.В., 'Ломот п.В. Способ окраска лолздеввкх хромосом насекомых //Эзучн. тр. /Уссурийск, пед. ин-т: "Арсеньевские чтения". - лосурийск, I9S3. - Ч. I. - С. 62-S5.

28. Mosa от Н.В., Лапшин Л.В. Структурно-функциональные особенности строения под' злостной слюяно" -гелезн пятнистого оленя //Физиология и патология сельскохозяйственных :-глвот-них: /Науч. тр. Пркморск. с.-х. ин-т. Уссурийск, 1993. -

С. 41-43.

29. Момот Н.В., Кабанова JT.K. '»Морфологическое ассле-: дование околоушной, подчелюстной и подъязычных слюнных желег^ деланиях и диких млекопитающих /Дкмояотая я патология сельсксхоэяЗствс..к:,х етзоткых: /Науч. тр. /Прилор. с.-х.

пн—т- - Уссурийск, 1993. - С. 43-45.

"О, йскот К.В. ,'орТолсп;ч,ег-г-ая :<арэктсркстгка окатс-узШЬ'Х СЛЕЯЕКХ «ЛОЗ Улггсаг?3г32ж //-ТП2Е0Л0ЕИЯ П П2ТОЛОГИ.Ч сын с:тохо":яйствеиккх ""встннх: Науч. тр. /Прглор. с.-х. ЭТ'-Т. - Уссур::'!ск, 1993. - С. S2-G5.

за

31.' Момох Н.Би, ЛапшШ 1.В. Способ получения крася--9ля для гистологических целей. Положительное решение на изобретение.по заявке $.5050681/04 (032097) от 02.07.92 г.