Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Коррекция тималином вторичного иммунодефицита при колибактериозе телят

омский государственный ветеринарный институт

На правах рукописи УДК 619:612.017/018:619:616.981.48:630.2

8 АВГ «И

НАГИБИНА Галина Михаиловна

КОРРЕКЦИЯ ТИМАЛИНОМ ВТОРИЧНОГО ИММУНОДЕФИЦИТА ПРИ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ ТЕЛЯТ

16.00.03 — ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

ОМСК 1994

Работа выполнена на кафедри ветеринарной микробиология, вирусологии и иммунологии Омского гпсудлрстпенного потери-нарного института в 1969-ШЗ гг.

Научние руководители -доктор ветеринарных наук, засл. деятель науки РФ академик Колычев H.H.; канд. ветеринарных наук, доцент Васильев O.A.

Официальные оппоненты:

Доктор вет. наук, профессор В.Г. Оцепков Кандидат вет. наук H.H. Овсонов

Ведущая организация - Казанский ветеринарный институт им. Н.Э. Баумана

Защита диссертации состоится АтЦ г.

в__№—<часов на заседании специализированного совета

К 120.48.01 при Оиском государственном ветеринарном институте ( 64400?, Оиск-7, ул. Октябрьская, 92). С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан

_____1994г.

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат /) _ вет. наук, . . :

- 3 -

I. Of)2till} ХАРАКТЕРИСТИКА PrtßÖTU

Актуальность. Особое место, как стимуляторы иммунитета, занимапт вырабатываемые тимусом гормональные вещества (И. Kaiserin, Н. Bjrdene, ШО; М.С. Dokhelar, Т. Tiirsz, К. Dardenn, F. Bach, 1983; N. U. Bosshard, Б. Stranzinger, 1ЯЙЗ). Тимус контролирует развитие н созревание иммунной системы посредством целого ряда полипептидных гормонов, воздействующих на тимусзависнмые лимфоциты на разных стадиях созревании (В.!!. Васильченко, 1976; В.Г. Морозов, Й.Й. Писарев, Й.Й.Хавииспн, 1377; Т.К. Валуева, В.Ф. Чебота-, реп, 1977; 11,0. Чеботарев, 1979;Й.Я. Прион, 1981; D.H. Schlesineer, E.G. Goldstein, 1375; Н. Trainin. Т. Uli), et dl,, 1900)

Используй частично очищенные экстракты тимуса и их синтетические аналоги, по многих случаях удается устранить им-иунодефицитние состоянии, аивотннх (Д.У, 'идков, 1977; Х.Р. Гизатулин и др. 1977; 11.В.Мальцева, Ii.И. Кондауров. 1979; й.И. Смирнов и др.,191)2; Л.И. Кассич. 19flfi; О.Н. Клименко, 19tili; Л.П. Заика. 19Я7; Л.!). Воброиа, 13IIB; Г.О. Макарович, 1493; R.ft, Кирпичешж, 1993). Наличие иммунодефициткпго состояние при нплибактериозе несомненно ( М.А, Оганесян, 1979; U.S. Ппндаридзе, 1990). Возникновения колибактериоза мохот предшествовать невыраженная неполноценность иммунной системы, гроядешьы или обусловленная окружающей средой ( Л. И. (''инталии. 111119). Ii пппи очередь, E.coli, как микробный антиген, обладает нктогонной активность«, и результате которой уг.угублчотси 1'П"Лстпешшй новорожденным 11 клеточный иммунодефицит (П.II. С".)!млш1,- 1999; d.M. Цнмблл и др., 1904). Однако, .н литературе «у не обнаружили сведений о применении тималина при к»либактп|)нозе телят.

1{ о л ь и з .1 д л ч и исследований.

IIojh.b исследований молилось изыскание и разработка способно коррекции нниунпдефицита при колибактериозе телат. !1 связи с чтим в задачи исследований входило; - изучение влияния тималина на ичиунчнй статус здоровых телят (оценка иолистрапыюго статуса, динамика Т- и В-лимфо-цитоо кропи, содержание общего белка и белковых фракций в смпороткч кропи);

- изучение нлияния тималииа на иммунный статус телят при иолибактериозе:

- изучение нлияния тималииа на иммунный статус телят при совместном введении с поливалентной ГОД формолтиомерсаловой вакциной против колибактериоза;

- сравнительное изучение заселенности желудочпо-кишечно-го тракта сероварами киаечной палочки у здоровых и больных колибактериоэом телят;

- изучение заселенности желудочно-кижечного тракта серо-варами кижкчиой налички у здоровых и больных колибактериоэом телят после стимуляции тималином;

Научная новизна, Впервые изучено влиянии тималииа на иммунное состояние телят при иолибактериозе и заселенность желудочно-кижечного тракта сероварами кивеч-ной палочки, а также рассмотрено влияние сооместного введения тималииа и поливалентной ГОП формолтиомерсаловой вакцины на организм телят.

Практическая и теоретическая значимость. Установлена динамика иммунного состояния у телят в норме, при иолибактериозе, антигенной стимуляции поливалентной ГОП формолтиомерсаловой пакципой протин колибактериоэа, под влиянием тималииа и его применении cod-местно с названной вакциной. Установлен состав серооаров Esherichia coli у здоропкх и больных колибактериоэом животных и влияние на него тималина.

Предложен способ стимуляции иммунитета синотннх при иолибактериозе тималином.

ß п р о б а ц и я. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на Всесоюзной конференции "Экспериментальная и клиническая иммунология на Востоке страны" (г. Красно-, ярск, 1988), на научной конференции преподавателей Омского государственного ветеринарного института (г. Омск, ПУЗ?, Результаты исследопаиий апробированы в совхоз« "Ларя" Онгко-го района Омской области, в период с 1'Ш но lü'JUrr,

Объем и структура д и г. с с р т а ц и и , Основной текст изложен па ИС страницах мапншшисногп текста. Диссертация состоит m шюденич, пСпщм лигературн, собственных исследопаний, обсуждения результатом исслсдова ний, выводов, праитнчепяи предложений, гш-нка лити'рагурм.

- s -

который мдерхит 23G истич.чиков , и тин числи 8Э иное трап нчх, прчлтпння.

Диссертации пллнггр^рпгы;: ! Hi таб тацли» и 12 рисц/шыи.

" с и a í il « ч п о л о ï ü н и il , о и » пени ц i. il tí т. л ц и т у,

- Сравнительная пцшнга нынунногэ статуса - рдорору:; а больних кчлнблкт «ритои.

- Коррекция 1игичиояс?|Щ1тшх состошшЛ телят тиаалииои Состав героьарои кисечиой палочки в зелудпчнп-кизечнои

¡pairie здорт.их и (i о льни х колибактерипзои телят при воздействии тииапинпи.

2. MKCTBEHilüli ИССЛк'ЛОВАИНЯ 2.1. 2лтг[!яаля » иетодн исследований Исс.'идснаннч шгпол'яеин л 138В-91гг. на кафедр« ветери i!df»iofl зякрвбио/отн, вирусаturRU а пинднологин 0асno¡ ¡. г ; в i : 'j д, л f ) с г и г ; и i í с i ■ : î ввтсрмюриега института, п лаборатории па попизепиз рсмистс-птянсти шнпгняпл с ч ль ско хпз зйс т в emüi х "и иотных иаз.ча::!к,'Го u:ctkt»jtï, в Очи: Л областной оетерппзрпел .¡■..•порлтории и ь со<:хо->е ""hpi" Ояг.ксй : власти.

Йссявдонашм яроасдуляп ч-« m ноплрлгдетшх телятах, ирпнадякпзих copxptj "1~)¡W Ovcsnl ой тети, чг-рпо-пегтроя породы в пмрагте от 1 до 30 «пай, i досгпй тплт 25 30 кг. ROTopa.« $osi!£:i¡mimn п грушш m причцяну аналогов при опяил ritan* угломпи <:n.not«»ajnia и !'"ряп1шма.

" цсрвпу ппытг. 1)ялп «сиияьэнв bio '18 зивотикх.Перга.! i руппа (контрольная) постояла чз 8, вторая - 10 здоровых то-котории пнугрияуявчно вводили тиаллнн я дозе 2 мг на кг и i i с с у тела в 1-й, 3 .'¡, 5-/1 дни гнзни. йоств тела г 3-й грягши иаацнизироваян поливалентной (уориолткоиерсалпяпй вакциной против колиоакторноза телят и '1-й ¡i 14-й дни гизни в дозах 1,5 ил вщпримиыечно, Пост и телятам 4-й группа за три дна до иыиуниалцнп вводили тииалнн в дозе 2 мг на i кг ыасси, шут-рииыдочни. Пятая группа состояла на вести телят с клиническими признаки колийаг.терииза; при их лечении применяли гентлыицин и ампициллин. При личонни 12 телят вестой группы с признаками колибаитериоза вместо антибиотиков применяли тнаалнн, в дозе 2 мг па I нг uar.cu юла, в 1-й, 3-й и П-й

- в -

дни кизни. У кивотных указанных rpyn с 1-й, 3-й, 7-й, 10-й, 14-й, 21-й, 30-й дни гизни производили отбор проб крови и фекалий для исследований.

Гематологические, биохимические и иммунологические исследования проб , взятых и телят, проводили по общепринятым методикам. При изучении свойств микроорганизмов вида Е. coli, выделенных из фекалий, мы руководствовались "Иетодаии по бактериологической диагностике колибактериоза еивотных", утвержденными ГНВ МСХ СССР 01.12.81г.

Во втором опыте, с цельи изучения смени сероваров Е. coli в желудочно-кивечном тракте у телят под воздействием тималина и вакцины, исследовали 42 новороздешшх теленка. Для этого были сформированы, как и в первом опыте, по принципу аналогов, 6 групп. Первая (контрольная) группа состояла из 0 здоровых новорожденных телят. Вести здоровым телятам второй группы - вводили тималин по схеме опыта N 1. Телят третьей группы (G здоровых животных) иммунизировали вакциной по схеме опыта К 1. Весть здоровых телят четвертой группы, как и в первом опыте,иммунизировали вакциной после стимуляции тималином. Телят пятой группы (G голов), с клиническими признаками колибактериоза, подвергали леченив антибиотиками - гентамицином и ампициллином, согласно результатам подтит-ровки, проведенной в облветлаборатории. Вестая группа (12 телят, больных колибактериозом) - подвергалась леченив тималином, И телят контрольной и опытных групп в 1, 3, 7, 10, 14, 21, и 30-й дни жизни отбирали пробы фекалий для бактериологического исследования иа колибактериоз и серотипизации выделенных из них культур E.coli.

В опытах использовали тималин, выпускаемый Иинмедбиопро-мом СССР, объединением "Белмедпрепараты" и поливалентиуя гидроокисьалвмипиевув формолтиомерпалопув вакцину против колибактериоза (эяерихиоза) поросят, телят и ягнит.

Результаты экспериментальных исследований подвергали статистической обработки на персональном компьютере IBK ХТ/ПТ, с применением программ "Quattrn". "St.at.", "St.at(?raf" гк'шпьптер). Обработки материалов диггер timm пг.цчягтпгчи» МП |фш раммам "Лиге»:икпя" , "QuaU.rti."

- 7 -

2.2. Результата исследования 2.2.1. Оценка колостральпого статуса здоровня и больних колиблктериопои телят Общеизвестно, что в pammíl попткатальний период p,v:n:mu! телят ыолознпо слузнт сдинствпшпш источтшкон защити для но ворогдешшх (ß.'J. Чакизев, !"оЗ; П.Я. Каблнцев, 1383: К.В. Степанов, 1390; г.о, Корпиислоз я др.. 19ЯЗ). ч назнх iíccíü дяиштх по определен;« уровня енпороточних иииуноглпйугччгч) ¡m основании результатов преципитации сульфитов натр«;.' поту чени следившие дашшс: а) у Я02 от общего числа гипзтких :i!*î"iDnft (¡гомтролслол), второй, третьей и четвартоЛ (пшшшх) групп кенцеитрйцаз яиыуппглсбулпноз составлает от S до 15 иг/ил', б) у Юл - 15 кт/ьл; n) у остальных 302 уровень ноглибулштв б сыворотке кропи низе 13 lt/ул.

Остановлено, что еппотчче с complanaos гл'чуноглопулччи", :.ааев чйя 15 цгА-л, болев чувствительны а 'глболгрлниэ яоги-ййктершша по гравчадют с телятами, иыгп-иуи более високй.1 у,"одень саиороточнцх чы^учоглобуличоп (Д.К. Ницилно. D.Ü. Причднтс. 1980). Заслунпмет вняаання тот елкт, что а часик .¡сследованиях только 302 телят пгррой - •птпертпп rpqiw

в схвиротке ::ровк дрспеп- н^-^гтглпбч'ччт, необут-т!1"")

крйдунретд;'.!::и нн'згцнн, "'".гч-гекч'.-"' д?ч'";г> :>п-"!п

;<1сскатр:шать :îik фант спигсигп гтлтуг?

¿качитея'.нлД ч i¡ та иоворавкеигат г чгтт в то "йсте*. tî"ït с .ишипческихи прпйвясниякм кчярбпктрркп-м ') и П опчг/чх групп продень и.д;;учзглобуг;::;оо глст.-.вт адя «оязз fi

ur/ал, П дальнейшей у датга*. "нпвтгч-' ч тчпирчзалч

онтепропатогеипче зясригии.

2.2,2. Дннаникл иаиукпкорпегеитнах клеток,

белков сиворотки крови у здорогшх телят Опипши HtjTcu установлено, что у ннтактних телят группы 1 относительное и абсолвтное количество Т и В-ли^оцнтоп п ировн, содерзанне обцпго белка и болкових фракций в сивирот-ке крови изиенялось с увеличение?! предоязчтелыюсти гизни . Дипакика нерочислешшх потзатстеп соответствует возрастным иорыаи, описании» в специальной литературе (В.И, Чекигев, 1983; П.S. Кассич, 13ПВ; Н.й, Корчан, 19Í16), Результаты на-яих исследованиях спгллсуиггя г ррпчпь глтави плпрп нршм'лои-

- и -

ми* исследований Н.О.Клснииой, B.C. Пят опои ыи и др. ( 1905 ), ¡.оядстияъст15ЦЕа;йх о наличии а ловоросдешшх телят иняуноде-■;:ицит1Шго состояния в период мевду 4 и 14 днями вязни.

Число К-РОК на третий С 28,Ш0.6Ш, седьмой (2G.0 4 f=.37^). десятый ( 20, 13 + 0,79%) дни достоверно ннае СР<0,05) i.ooTBtTCTBUiiiiero показателя верного дня визни (29,25 + ft,75%).На 14-ft (33,75 + О.Ш. 21-й (32,30 + 0,В%) дни оно достоиарно возрастает и и месячному возрасту составляет -29.03 i 0,08%. Динамика абсолютного количества Т-клоток совпадает с динамикой Е—РОК,

Относительное количество ЕЙС-Р0К на третий (5,25 + 0, 4SX), седьмой (0,3В + 0,26%), десятый (7,3 j, 0,527.) дик достоверно Hiise, чей с первый день еизни (В,75 ± 0,45%), с лизь на 14 - (9,88 4 0.52%), 21 -(10,75 j. 0.59%J. 30-fi -(10,5 +_ 0,42%) дни этот показатель возрастает. Изменения абсолятноги количества В-ликфоцчтоп отксчаится в эти ке сроки. У телят суточного возрагла этот показатель составляет (*10 /л) - 0,24 + 0,24 4 0,02; на третий день кизни - 0,22 ± 0,01; на 7, 10, 14, 21, 30 дни соответственно, - 0,23 4 0,01; 0,24 4 0,02; 0,41 ± 0,02; 0.5 ± 0,03; 0,55 + 0.02.

Содержание общего белка сиворотпк крови в суточной возрасти составило 54,03 ± 0,В г/л. в последуьзие дни достоверно (Р< 0,05) возрастало, что связано с возрастной динамикой. Так, на 3, 7, 10, 14, 21, 30 дни оно составило соответственно ( г/л ): 54,0 4 0,В; 57.1 ¿1,0; 53,5 + 0,9; 56Л i 0,8; 56,5 4 0,7; 59,1 4 0.0; 5В.G f 0,9,

Закономерность»! дппаыихи белковой формула крови является увеличение с 2-3-х до 30-и суточного возраста количества сывороточных альбуиинов к унеиьвение уровня грубсдиснерснк? белков (глобулинов). В суточной возрасте абсолвтнос количество альбуминов составило; 16,0 40,Вг/л; на 10-тый день -22,1? 4 0,7г/л ; г, месячному возрасту - 24,7 + 0,Вг/л . Однако. следует ответить тот факт, что у иптлктных телят группы I на всей протявении опыта содержание альбуминов было не-ткокик, что, вероятно связано с дефицитом проточна в рацио-'•н беременных коров-матерей.

Динамика пбеолптнчгч содержат'? гп^ч-! -глпбуличпо в сиво рргке кроги нпгчч <:л!'дчп1чий характер: " гчт»чнпч вочрягт"

•>1" < ««-тячиял f . Ч I П_?г 'п. II- тргти« JI" IV- • КЛЯОП.ИШП

12,'h 1,7г/л. И цедильном возрасте телят оно составило 9.3 i 0,2 г/л; к двух,-и трехнедельному возрасту, соответственно, 10,8 ( 0,4 г/л и и 12,0 + 0,3 г/л; к месячному возрасту 9,3 + 0,4 г/л. Снижение содержания отмечалось с 7 по 30 й дни жизни.

Необходимо отметить и повыиенное абсолитное содержание альфа глобулинов в сыворотке крови. В суточном возрасте телят оно поступило: 10.9 ± 1,2 г/л. Иожно предположить, что оно обусловлено тем, что в данную фракции попадает фетуин, на доли которого у новорожденных в приходится значительное количество белил (В.М. Холод, 1983). Между тем, доказано, что фетуин способен оказывать ингийирувций эффект на ликфо-цитарнув трансформации, вызванную митогенами, что расцениваете:,! как иммунодепрессорное действие (S. Uachni, 1975). Последовательно снижаясь на 3, 7, 10 дни жизни животных, на 21 день содержание альфа глобулинов составило 15,7 + 1,6г/л, на 30-й день l(i,B¿ 0,9г/л. Это может быть связано с прекращением синтеза феталышх белков, входящих в эту фракции.

Таким образом, анализ полученных нами данных показывает наличие у ингактных животных группы К опыта П выраженного В иммунодефицитногп состояния до 10-15-дневного возраста, а также факты гипопротеинемии и гипогаммаглобулинемии. Это обосновывает целесообразность иммунокоррегирувцей терапии.

2..Í.3. Количественные и качественные изменения в крови и не сыворотке у стимулированных г.шалином здоровых телят Внутримышечное введение новорожденным животным тималина значительно изменяет их иммунный статус. Под влиянием дашш-ги препарата у телят группы 2 происходило усиление геиопоэ-íü. Уже с третьего дня отмечается достоверное возрастание относительного количества Е РОК, сохранявшееся и на 7, 10, 30 й дни жизни, В суточном возрасте животных этот показатель coi гаплявт: 29,3 ¿ 0,пГ>Х; на 3, 7, 10, 14, 2), 30 дни жизни соответственно: 31,3 j. 0,52%; 31,2 i 0.3BJ!; 32,0 ± О.ВЗГ. 33,0 ¿ 0.5BZ; 32,1 i 0.4fi%; 33,7 i 0.R7Z. В этом жо возрасте отметили достоверное увеличение абсолютного^ количества Т клеток. В первые сутки оно составляло (tlO /л); 1,06 j. 0.03 , в двухнедельном возрасте 1,5 j 0,02; на 21 день -

1.01 i 0,04 , а к месячному возрасту 1.П2 0,05. Число ЕЛС-PQK и абсолятное количество В клеток на всем протяжении опыта достоверно не отличалось от спогпстстпцичих показателей у контрольных животных .

Повывение иммунобиологической реактивности новорожденных телят под влиянием введения тималина прошлялось увеличением в сыворотке крови содержания общего белка. На всем протяжении опыта после применения тималина этот показатель у телят группы 2 был пы«е, чем у животных группы I. Так, в суточном возрасте у стимулированных телят содержание общего белка составило 53,8 »_ 0,6г/л против П4.0 ]_ 0,Йг/л у интактных животных. После применения тималина, на 3 день жизни, - 60,7 + 0,Вг/л против 57,11 jt l.Olr/л у контрольных животных. IIa 10 день, соответственно, • 60,2 £ 0,7г/л и 53.5 ± O.'Jr/л. На И день - 59,1 + 0.6 и 50.5 < 0,7 г/л. Увеличение количества общего белка происходило за счет увеличения абсолотного содержания гамма-глобулинов при значительном умсньвении содержания альбуминов, ликвидируя у них состояние гипопротеинемии и гипогаммаглобулинемии. На 3, 7, 14 й дни жизни уровень гамма-глобулинов у стимулированных тималином животных достоверно превосходил аналогичный показатель контрольной группы телят и составлял (г/л), соответственно 20,1 + 0,4 против (12,7 i 1,7), 12.2 i 0.4 против (9,3 + 0,2), 11,9 ± 0.2 против (10,8 + 0.4). lia содержание бета- и альфа-глобулинов ти-малин не оказывал существенного влияния,

В опыте регистрировалось достоверное различие между абсо-лвтным содержанием альбуминов у телят опытной группы на 3, 7, 14 дни жизни и контрольной группы. Наблидалось достоверное его снижение на третий день жизни (11,9 + 0,9 г/л), по сравнении с аналогичным показателем у интактных телят. Далее, различие увеличивалось и к двухнедельному возрасту величина показателя достигала 25,1 t 0,7 г/л. На 21 и 30-й дни различия исчезали.

На основании пропеденных результатов исследований .можно предполагать о том, что внутрииыжечное введение тималина препятствует гипопротеинемии, гипогамма глобулинемии, понижает абсолютное и относительное количество Т лимфопитоп.

- II -

'¿,2.4. ÜUüHK.i иммунного состояния телят, вакцинированных поливалентной ГОЛ формолтиомерсаловой вакциной У аииипшх группы 3 наблюдали достоверное увеличение относительного количества E-РОК на 7, 10, 21, 30 дни жизни. Так, на 7 день оно составило соответствено 28,33 + 0,36/; про1ии 20,0 t 0,732 у контрольных аналогов. Максимума показатель достиг на 21 день (37,0 + 0,372, против 32,38 0.8* у интактных животных), к месячному возрасту соотновение составило - 34,33 + 0.56Z и 29,63 ¿ 0,682,

Абсолютное количество Т-лимфоцитов в крови под влиянием вакцинации и ревакцинации достоверно возросло на 7, 14, 21, 30 й дни жизни. /¡о вакцинации различий между показателями контрольной и опытной групп не наблюдали. После иммунирации, in седьмой день жизни они появлялись (0,91 + 0,03*10 /л и 1,06 + 0,04*10 /л, в контрольной и опытной группах, соответственно). На И-й день - 1,42 + 0,05*100/л и 1,72 + 0,04 tlO^/л. После ревакцинации тенденция к возрастание показателя сохранилась. Имело мести достоверное различие (Р<0,03) неаду изучаемыми показателями на 21 и 30-й дни у животных

контрольной и опытной групп. Па 21 день они составили - 1,52

Ü о

I 0,03*10 Vл и 1,8 ¿ 0,04*10 /л, соответственно, а к месячному возрасту - 1,04 t 0,04*10Р/л, 1,84 + 0,02*10Р/л.

Относительное и абсолютное количество ß-лимфоцитов на всем протяжении опита достоверно не отличалось от аналогичных показателей !( контрольных телят.

D:jmi.'i,íhiiu белкового состава сыворотки крови характеризовались достоверным увеличением содержания общего белка на 10, 14, 21, 30 й дни жизни, по сравнению с аналогичным показателем у интактных животных, '.I иммунизированных телят величина его в указанные сроки составляла (г/л) соответственно; ВО,2 f 0,52; 01,4 + 0,4; fil.4 + М: G2.B t 0,3. Й в первый день жил1и она составляла 53,8 ¿ 0,9 г/л. Кроме того, на 3, 7, 10, 14, 21, 30 й дни жизни животных, в сыворотке крови у них jificTonepiin возрастало абсолютное количество гамма-глобулином. Оно составило (г/л) соответственно; 13,0 +.0.2; 12,6 j. 0,2; 14,2 i 0,2; 14,7 ¿ 0.3; 15,1 ¿ 0,2; 15,3 ¿*0,5.

filieэлитное количество альфа глобулинов ira 21, 30 дни исследований было достоверно ниже аналогичного показателя и Контрольных Ж11Ш!ТНМ< и составило СОПТВВТПТППИНО: 1 1 ,0

0,0г/л против 15,7 ± 1,0г/л и 10,8 + 0,6г/л против 16,8 + 0,9г/л, Зто имеет важное значение, т.к. д телят в 1 и 3-й дни жизни уровень альфа-глобулинов был несколько выже, возможно, из-за присутствия в этой белковой фракции фетуина.

Абсолютное количество бета-глобулинов и альбуминов в сыворотке крови не отличалось от показателя у интактных телят.

2.2.5. Количественные и качественные изменения в крови и ее сыворотке при вакцинации телят с предварительной стимуляцией тималином

У стимулированных тималинои перед вакцинацией животных группы 4 отметили иной уровень иммунного ответа.

Имеет место изменение гемопоэза. Содержание в крови Е-РОК у этих телят достоверно выже аналогичного показателя у животных группы 1 во все дни исследований (кроме первого дня жизни). Причем, оно выже, чем у телят группы 2 на 10, 14, 21, 30 дни их визни , и выше, чей у телят группы 3 на 3, 7 дни. В 1, 3, 7, 10, 14, 21,30-й дни жизни величина этого показателя у телят группы 4 составила (в У.) соответственно: 30,33 + 0,49; 31,17 + 0,4; 30,33 + 0.33; 28,33 + 0,42; 36,33 + 0,42; 35,0 1 0,43; 35,67 + 0,42. Можно полагать, что данное различие также вызвано влиянием на организм телят группы 4 иммуностимулятора.

йбсолвтное количество Т-клеток в крови у телят в суточном возрасте достоверно не отличалось от такового у интактных телят и составляло 1,06 + О.ОЗаЮ^/л.Однако, в последующем отмечено его достоверное увеличение на 3, 7, 14, 21, 30 дни жизни животных по сравнение с показателем у контрольных телят. В эти сроки у стимулированных тималином и привитых телят показатель составил соответственно: 1,27 + 0,04; 1,2 + 0,03; 1,63 1 0,03; 1,76 + 0,05; 1,94 + 0,03 (*105/л).

Число в крови ЕОС-РОК у телят на всем протяжении опыта достоверно не отличалось от аналогичного у здоровымх живот-инмх групп 1, 2, 3. Абсолютное количество В-клеток составляло С * 10 /л) п 1, 3, 7, 10, 14. 21, 30 дни жизни соответственно: 0,34 1 0,01; 0,27 + 0,01; 0,31 + 0,02; 0,36 + 0,02; 0;44 + 0.02; 0.34 + 0,01; 0,62 ± 0,02. Оно превывало аналогичное у контрольных животных на 3, 7, 10, 30 дни и кроме того, на 3, 7. 10, 14 дни показатели у пакцинировашшх

- 13 -

без предварительной их стимуляции тималином телят.

Зарегистрировали значительные изменения в содержании общего белка в сыворотке крови. Так. в первый день жизни, рассматриваемый показатель не имел существенных различий с аналогичными показателями животных 1, 2,3 групп и составлял 53,2 I 2,5 г/л. На 7, 10, 14, 21, 30-й дни исследований он достоверно вы«е показателя у контрольных животных и составлял в эти сроки (г/л) соответственно: 61,5 + 0,8; 62,6 ^ 0,7; G0.fi +0,0; 02.0 +0.4; 62,9 +0.5. Причем, на 7, 10, 21, 30-й дни он был достоверно выве и соответствуищего показателя у животных группы 2 ; а на 3, 7. 10-й дни - достоверно выве аналогичного показателя у животных группы 3. Следовательно, предварительная стимуляция тималином животных перед вакцинацией их - привела к более значительному увеличении содержания общего белка в сыворотке крови, по сравнении с животными, только стимулированными тималином или. только привитых вакциной .

Абсолютное содержание гамма-глобулинов в сыворотке крови у телят в суточном возрасте составляло 12,6 + 0,8 г/л. Далее, на всем протяжении опыта ( 7, 10, 14, 21, 30-й дни жизни телят) отмечали его достоверное увеличение по сравнении с уровнем этого показателя у контрольных животных. 3 стимулированных тималином и привитых телят величина показателя составила (г/л) соответственно: 19,3 + 0,7; 20,9 + 1,4; 16,2 + 0.4; 16,3 + 0.3; 14,9 + 0.7. Причем, на 7. 10, 14, 21-й дни содержание гамма-глобулинов было достоверно выже уровня аналогичных показателей у телят группы 2 и группы 3.

Абсолютное содержание альфа-глобулинов в сыворотке крови у телят группы 4 в суточном возрасте составило 14,6 £ 0,6г/л; на 3-й день жизни - 15,3 + 0,3г/л; на 14-й день -10,4 + 0,5г/л; на 21 и 30-й дни - соответственно: 12,0 + 1.1 г/л и 10,9 + 1,0г/л. Оно было достоверно ниже на 3, 14, 21, 30-й дни жизни показателя у контрольных животных группы ' 1, стимулированных тамалином животных группы 2, а также на 3, 14-й дни - вакцинированных животных группы 3,

На всем протяжении исследований не отметили достоверных различий в абсолгтном содержании альбуминов сыворотки крови у животных 1 и 4 групп. На 3, 14, 21-й дни их жизни оно составляло (г/л) сответственно: 19,8 +0,7; 22,6 +0,4; 20,3

I 0,4 против аналогичных показателей интактных телят: 17,3 »_ 0,9; 22,1 + 0,5; 18,9 + 0,7, И было достоверно выже соответствующего показателя и телят группы 3 на 3, 14, 21 дни.

Таким образом, стимуляция телят тималином перед вакцина цией обеспечивает наиболее высокое содержание в крови Е РОК и общего белка в сыворотке крови, по сравнении с соответствующими показателями животных групп 1, 2, 3. Кроме того, наиболее высокий уровень содержания гамма-глобулинов в сывротке крови отметили именно и животных группы 4 на всем протяжении опита при снижении содержания альфа-глобулинов.

2,2.6. Коррекция тималином иммунодефицитного

состояния телят при колибактериозе Анализ динамики иммуникомпетентных клеток крови и белков сыворотки крови у больных колибактериозом телят группы 5 позволил выявить имыунодефицитнов состояние, проявившееся углублением В-иммунодефицита. свойственного новорожденным телятам в течение первых 5-15 дней жизни; гипопрстеинемией, гипогаммаглобулинемией.

Число Е-РОК в крови в первый день жизни у животных сосга вило 26,5 + 0,76%. На 3, 7, 10, 14, 21, 30-й дни оно вставило (в %) соответственно: 25,0 + 0,89; 24,5 + 0,43; 25,67 1 0,49 и 28,83 + 1,01; 28.5 1 0,62? 29,33 + 0,67. Причем, в 3, 14, 21 оно было достоверно ниже аналогичного показателя контрольных животных, к месячному возрасту различии отсутствовали .

Абсолютное количество тимусзависимых лимфоцитов было таким же достоверно отличающимся в 1, 3, 7, 10, 14, 21, 30-й дни жизни. В эти сроки оно составило (*10^/л) соответственно; 1,1 1 0,03; 1,29 + 0,04; 1,46 * 0,06; 1,71 ± 0,07; 1,76 + 0,11; 1,32 1 0,03; 1,5 i 0,04. Следовательно, самое высокое значение показателя зарегистрировали на 10, 14-й дни ■изни; к 30-му дни произожло его снижение.Но, но нее дни исследований, кроме первого, показатель был достоверно выже соответствующего у интактных животных.

Относительное количество ЕПС-РОК достоверно отличалось со все дни производимых определений. В суточном возрасте оно сос!авило 3,33 + 0,49%, после чего последовательно нарастало, к двухнедельному возрасти составили 7,0 !_ 0,58% а г;

месячному возрасту достигло 7,83 + 0,48%. Но о точение всего периода исследований оно было достоверно ниже аналогичного у контрольных телят. Пбсолитное количество 8-клеток в левый день жизни составляло 0,14 0,02*10э/л, в последа 1аем возрастало и на 10 и 21-й дни составляло соответственно: 0,34 0.03 (*109/л) и 0.34 I 0,01 (*109/л). и к месячному возрасту достигло 0.4 I 0.02 (*107л). Однако, на 1, 10, 21. 30-й дни жизни оно било достоверно ниже показателя интактных телят.

Содержание общего белка у животных группы 5 в 1, 3, 10, 14, 21 й дни опыта било достоверно ниже аналогичного показателя интактных животных и составляло в указанные сроки г г/л) соответственно: 52,2 4 0.0; 50.0 1 0.4; 53.1 ± 0,2; 54,0 »

0.4; 54.8 4 0,2; 57,8 у 0,0. С увеличением срока жизни оно возрастало.

Ип установлено достоверного различия в содержании альбуминов, альфа- и бета-глобулинов у больных, по сравнении с интактннми телятами.

Зарегистрировали достоверное снижение абсолвтного содержания гамма-глобулинов на 1, 3, 7, 21-й дни жизни, по сравнении с уровнем этого показателя у здоровых «ипотннх группы

1. Величина его в указанные сроки составляла (г/л) соответственно: 8,6 4 0.8: 7.9 4 0.9; 7.8 ± 0,6; 10,П 4 0.2. Следовательно, имело место состояние гипогаммаглобулинсмии.

Относительное количество Е РОК у опытных животных группы б претерпевало значительные изменения, обусловленные влиянием тималина на организм. Об этом свидетельствует достоверность различия этого показателя у больных колибактериозом телят ( группы 5 и 6) на 3, 7, 10. 14, 21-й дни жизни при неразличапцихса дачных в первый день жизни. 3 больных животных, в лечении которых использовали иммуностимулятор, происходило нарастание относительного количества Е-РОК, причем, уже на 3, 7, 14, 21-й дни жизни оно соответствовало возрастной норме, п отличии от аналогичного показателя у телят группы 5, который был достоверно ниже возрастной нормы на 3. 14, 21 й дни жизни. Па 30-й день жизни показатель у телят групп 1, 5, 8 находился на одном уровне.

Абсолютное количество Т-лимфоцитпв у телят группы 6 на 3. 7, 10. 21-й было достоверно вше, чей у животных, в лечении которых но применяли тималин. В эти сроки оно составило

(»10 /л) ответственно: 1,48 10,07; 1,23 £ 0,07; 1,42 ± 0,05; 1,43 ¿0,03. Причем, было достоверно выве уровня соответствующего показателя у интактпых животных на 3, 7, 10, 30-й дни жизни, а на 14, 21-й дни не отличалось от него.

Относительное количество ЕАС-Р0К у животных группы 6 соответствует возрастным нормам только на 21 день жизни, до этого оно понижено. В 1, 3, 7, 10, 14, 21, 3-й дни жизни составило (в 7.) сответственно: 3,42 + 0,31 ; 3,74 + 0,29; 3,92 + 0,38; 5,33 ± 0,36; 7,75 + 0,41; 9,83 + 0,'53; 10,25 + 0,45. После применения тималина, на 21 и 30 дни жизни показатель достоверно выже аналогичного у телят группы 5, не достигавшего к месячному возрасту уровня соответствующего показателя интактных животных .

Абсолютное количество В-лимфоцитов у телят до применения тималина было достоверно ниже возрастной нормы . . В первый день жизни оно составило 0,13 + 0.01*1О^/л против 0,24 + 0,02*10^/л у интактных животных, В последующем - на 3, 7-й дни произовло его возрастание до величины аналогичного показателем у животных контрольной -руппы, на 7, 21, 30-й дни был достоверно выве , чем у животных группы 5. Таким образом, можно Заключить, что у больных колибактериозом телят тималин не оказывает прямого стимулирующего влияния на выработку В-лимфоцитов в первое время после его введения. По на конечном этапе опыта (21, 30-й день), у телят , в лечении которых применяли тималин , этот показатель отвечал возрастным нормам,В то время как , животиые, для лечения которых не применяли тималин, имели низкое , не соответствующее воз растиым нормам, относительное и абсолютное количество В-лим фоцитов.

Четко прослеживалось влияние тималина на содержание общего белка в сыворотке крови у больных животных. В первый день жизни, содержание его у телят групп 5 и 6 составляло 50,2 * 0,6г/л и 51,0 I 0,3г/л, соответственно; данные показатели достоверно не отличались друг от друга. Однако, отметили достоверное (Р<0,05) их отличие от показателя животных контрольной группы (54,0 ±. 0,Вг/л), На третий день жизни у животных группы 6 уровень общего белка достоверно повывался, по сравнению с аналогичным показателем у телят группы 5 , но был достоверно ниже уровня показателя животных контрольной

группы. D послсдувцям показатель у телят группы fi соответствовал возрастным норчаи, тогл паи, у аивотннх группн П на 10, 14, 21-й дн» он бнл гиер, чей у контрольных,

Повкзение уронил гамма-глобулинов у болышх животньа группы 0 было обусловлено действие« тнналнна. П первый дань гизни содержание их у Солмшх г.ивотиух были достоверно jmse, чей у контрольных вивптннх и составляло 0,3 _+ 0,03г/л, На третий д-знь оно возрастало и становилось достоверно виге на 7, 14, 30-й дни жизни уровня показателя у телят группы П. Кроио того , на 7, 14-й дни кизни превосходило аналогичный уровень интактных животных. На 30-й день данный показатель у shbothnx групп П не отличается от аналогичного показателя контролышх животных группы 1.

Анализируя количественные и качественпне изменения в содержании н крови иикунокоыпетен<ннх клеток и белков сыворотки г.роои у телят болышх колнбактерпозои нз фоне 'Действии п.млина, цокио заключить, что этот препарат, вызывая струк-турно-функцнональнуо перестройку нынунноА системы, обладает ихмунокоррегнрущей способностью. Нолю предположить, что ткналнп, не оказывая прямого стимулирующего воздействия на клеточнуп систему иммунитета, вызывает увеличение в крови Т-хелперов, что оказывает положительное влияние на иехкле-точнуп кооперация между Т- и В-ликфоцитаыи за счет выделения ики неспецифических факторов (фактор репликации и созревания П-клеток, фактора дифференцировки Т-клеток, неспецифического медиатора к др.). В свое очередь, это вызывает вклвчение П-лккфоцитоп в антителопродуктивнув фазу.

2.2.7. Состав сероваров Eäherichia coli у здоровых и болышх колибактериозок животных и влияние на него тиналина От телят групп 5 и б выделено 252 культуры Е. coli, обладаниях характерными морфологическими, тинкториальными, куль-туралмшми и биохииическики свойствами. Из них по 0-антигену серотинировано 52 культуры. Количество типируеиых культур Е. coli, выделенных от телят группа 5, достоверно выве (Р<0.01) аналогичного показателя у зивотннх группы G (35 культур против lfi-ти, соответственно). Идентифицированы следувцие сч |пн рчпин: im. пг;. ояп. 033, 078, 0)01, 0142, 0147.

- IB -

Отметили, что культуры одинаковых серогрупп били выделе ни от телят групп 5, G в различные сроки их визни. Не установили приуроченность определеных серогрупп Е. coli к определенному возрасту хипотних в точение первого иесяца жизни.

Выявили, что к Ц1-, ь тур и, виделешше от внвотных группы О на 10, 14, 21, 30-ft дни уизни, иетипируекы по О-днтигену, Тогда как часть культур, выделенных в это se вреия от телят группы 5, тип.!-.;;лиана, среди них обнаружили резидентные се рогрупп« ; 05, 020, 033, 0142, 0147, которые встречали ь ассоциации у отдельных животных.

От телят групп 5 и 6 опита 2 били выделены птлымы Е. coll, при ссротнпизации которых установил!*, наличке серогрупп: ОС и 0101. Доля их от обг-его числа тшшровашшх культур значительна и составляет 19,0%, Это обстоптельстко заслуживает вникания, таг. как заерихии с указанными 0-cepur-руппами обладают адгезишшии свойствами (В.Г. Зароза, 1307).

Кроме того, при серотипизации культур Е. coli, выделенных от опита 2, били идентифицированы зиернхин серогрупп 033 , 0142, 0147, Данные серогруппы не входят в состав доливали г пой Г0А форыолтноиерсалосой вакцин«, прииеиаекой в хозяйстве, i¡a Сазе которого были проиедены экспериыоптк, д i л специфический яр^мактккн. Ceporpyima 0142 имеет антигенное родство с иа^цииишш О-аитигеиами, а зворнхнн 0-серсгрупп 033, 0147 не нысет антнгенного ридства с вакциннынн ссрог-рцппами (fl,ft. Гутковсклй, Г.П. Дворкин, 1909). Серогруппы 033, 0147 составили 3!,4% от числа тнпируеынх в Pfi культур Е, Culi, ьадслсшшх от юлит. Полученные давние авляатся "обоснованней необходимости обогащения вакцшш, приыеняеыой в хозяйстве, патогешшын итаыыаьш Е. coli 033, 0147 и не типт-руеиими патогенными дтаымамн.

П.А. Гутковский, Г.Л, Дворкин (1903) сообчаят, что нети-пируеыые по 0-аитигену культуры Е, coli, в 30-50% случаев являются возбудителей болезни. Среди культур, выделенных от телят групп 5 и 6, все типируеыие по 0-аитигену - обладали патогенными свойствами. Часть патинируемых культур, выделенных от данных животных, также обладала патогенными свойства кн. Из них 11 было выделено от животных группы 5, а от телят группы В - 5 культур, Причем нетипируваые, но патогенные культуры, Е, coli были выделены от отдельных телят группы 5

на 10, 14, 21. 30-й дни жизни. Тогда кап от животных группы G в эти so сроки не выделяли культур эиерихий, обладающих патогенными свойствами.

выводи

1. При интенсивном ведении животноводства у телят до месячного возраста имеет место иммунодефицитное состояние, проявлявшееся низким уровнем колостральних иаиуноглсбулинов в сыворотке крови, гипопротеинемией, диспротеиненией, гипо-альбуминеыией при повышенном содержании альфа-глобулинов , а такие, пониженным содержанием в крови Т- и В-лимфоцитов.

2. У больных колибактериозом телят выявлено выраженное нарувение иммунологического статуса, проявлявшееся усугублением В-иамунодофицита. состоянием гипопротеинемии и гипогам-иаглобулинеыии .

3. Внутримышечное введение новорожденным телятам тимали-па вызывает повняение содержания Т-лимфоцнтов в крови, общего белка и гамма-глобулинов в сыворотке крови.

4. Стимуляция новорожденных телят тималшши, перед иммунизацией поливалентной ГОА формолтиомерсаловой вакциной против колибактериоза, вызывает более высокий уровень иммунного ответа, по сравнению с их иммунизацией без предварительной стимуляции тималинои.

5. Микроорганизмы, выделенные от здоровых телят, имели типичные для Е. coli морфологические, тинкториальные, куль-туралыше и биохимические свойства, не типиропались набором диагностических агглютинируЕцих 0-колисывороток и являлись непаюгенпыии для белых беспородных княей.

8. Все типируемые по 0-антигену культуры Е. coli, выде-. ленные от телят с клиническими признаками колибактериоза, обладали патогенными для белых мыяей свойствами. Часть нети пирумих культур, выделенных от телят с клиническими призма гами колибактериоза, была патогенна для белых кыней.

7. Кпличество типируемнх культур Е. coli, пыделенных от телчт с клиническими признаками колибактериоза, подпергая-йихг.я воздействии тималином, достоверно (Р<0,01) ниже анало гичногп покат.п" ля пилотных, у кпторчх п лечении не применя ■ то ти«а»нн.

'!. Пг тслцт с клиническими признаками колибтктрритп бнги

ьиделепи эыернхки с серогрупшиш : 033, 0147, доля их ит об чего числа тнпируеуцх культур составила 31,-12. Данине серог-рушш li. culi не входят в состав вакцина и не наевг антиген ного родства с вакцишшаи штаммами.

1, С пилив профилактики г, коррекции иммунодефицита» систояш1;'1 новоризденинх телят рекомендуем применять тииаяип с 1-3-днегшого возраста ь дозе 2 иг/кг илсси в течение 3 10 дней.

2. 1) специфической профилактике колпбактериоза телят рекомендуем совместное применение ткыалипа и поливалентной ГОЛ форыолтиоыерсаловой вакцина,

СПИСОК РПБОТ. ОНУППЙКОВПШШХ ПО ТЕПЕ ДИССЕРТАЦИЙ

1. Кривоаееса II.К., Перцякова Г.В., Васильев Й.А. Динамика Т-и Н-лимфоцнтов в крови телят и микрофлора ьелудоч ио-кнмечниго тракта при ко; лбактернозе // Зксперииентальпъ;

клиническая иммунология ни Востоке страна: Тез, докллдш! Ссесовз. конф. -Т. 2. -Красноярск, 13ЙВ, -С. 140.

2. Перьякова Г.И., Васильев, П.П. Выделение факторов тимуса » ьцеика их биологической акпшписги // Экспериментальная и клиническая иммунология па Востоке ст;т1Ш: Тез. докладов Есесовз. конф.- -Т. 1. -Красноярск, 1ЯВЙ. -С. 73.

3. Нагибина Г.П. Выделение и применение биопрепарата 1и тимуса, оценка его биологической активности // Эпиэиптоио-гия, диагностика, леченье н профилактика инфекциошшх и ин сазношшх болезней иииотных: Сб. науч. тр./ ПиСКИ. Сьп-к,

Сдано в почать 4.UÜ.94. Формат 6üxü4 1/16. L-yi.i.тип. J; Печать о^сотная. Уч.-изд.л. 1,0. 'lupa* IÜU экз. Заказ iyü.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Картолптографил ОмГАУ, Омск-tí, Сибакоасш i, 4